SESAME Salmonella TEST
Contents
1. CONFIRMATION Dans le cadre de la marque AFNOR VALIDATION tous les r sultats positifs doivent tre confirm s de la lune des mani re s suivante s Option 1 Mise en uvre des tests classiques d crits dans les m thodes normalis es par le CEN ou FISO en incluant l tape de purification en repartant d une fraction de culture bact rienne pr lev e en p riph rie de la zone de migration obtenue sur SESAME Salmonella D tection Pour les modalit s de confirmation se reporter la norme NF EN ISO 7218 Option 2 Mise en uvre de COMPASS Salmonella Agar Option 3 Utilisation de toute autre m thode certifi e AFNOR VALIDATION de principe diff rent Le protocole valid de la seconde m thode devra tre respect dans son ensemble c est dire que toutes les tapes ant rieures l tape interm diaire de laquelle on repart pour la confirmation doivent tre communes aux deux m thodes Les deux m thodes valid es lune utilis e en d tection et lautre en confirmation doivent donc avoir un tronc commun En cas de r sultats discordants positifs par la m thode alternative non confirm s par l une des options d crites ci dessus le laboratoire devra mettre en uvre les moyens suffisants pour s assurer de la validit du r sultat rendu 3 7 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 332. Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr R f rence BK195HA BM13808 Salmonella sp Aspect caract ristique Culture blanch tre et halo opaque centr s au point d inoculation REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES PERRY D F and QUIRING C 1997 Fundamental aspects of enzyme chromogenic substrate interactions in agar media formulations for esterase and glycosidase detection in Salmonella In Salmonella and Salmonellosis Proceedings Ploufragan France 63 70 HUMBERT F LALANDE F ROSE V et SALVAT G 1998 Evaluation d un nouveau milieu d isolement pour la mise en vidence des salmonelles dans les levages et les denr es d origine animale 5 me congr s de la Soci t Fran aise de Microbiologie 128 NF EN ISO 16140 V 08 103 Octobre 2003 Microbiologie des aliments Protocole pour la validation des m thodes alternatives XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF EN ISO 6579 V 08 013 Mars 2007 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche des Salmonella spp NF EN ISO 7218 V 08 002 Octobre 2007 Microbiologie des Aliments Exigences g n rales et recommandations LLA NM 10 I FPE Validation BKR 23 04 12 07 METHODES ALTERNATIVES D ANALYSE POUR L AGROALIMENTAIRE C
3. Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr RAPPEL 2 Apr s migration sur SESAME Salmonella D tection et isolement sur COMPASS Salmonella Agar de rares souches d Enterobacter peuvent exprimer une activit est rase et produire des colonies bleu vert entour es d une coloration magenta Certaines souches de Salmonella appartenant aux s rovars Dublin et Atento ainsi que quelques unes des sous esp ces houtenae bongori et diarizonae peuvent pr senter une pigmentation magenta faible nulle en raison de la faible activit est rasique qui les caract rise CONTR LE QUALITE SESAME Salmonella Enrichissement Milieu pr par solution ambr e limpide pouvant pr senter un tr s l ger pr cipit apr s conservation SESAME Salmonella D tection Milieu pr par g lose bleue semi solide R ponse culturale de croissance apr s 18 2 heures d incubation 37 1 C sur SESAME Salmonella Enrichissement puis 24 3 heures d incubation 41 5 1 0 C sur SESAME Salmonella D tection et enfin subculture sur COMPASS Salmonella Agar pendant 24 3 heures 37 1 C Caract ristique culturale apr s subculture sur COMPASS Salmonella Agar Croissance sur SESAME Microorganismes Salmonella D tection Salmonella Enteritidis CIP 82 97 Escherichia coli ATCC 25922 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Escherichia coli ATCC 8739 Pseudomonas
4. l abri de la lumi re Les dates de p remption sont mentionn es sur les tiquettes PRESENTATION Code Kit SESAME Salmonella TEST Coffret compos de BT00908 9 flacons de 225 mL de SESAME Salmonella Enrichissement et de 1 flacon de 200 mL de SESAME Salmonella D tection SESAME Salmonella Enrichissement Flacon de 500 g BK194HA Pack de 10 flacons de 225 mL BM13608 Carton de 3 poches souples de 3 litres BM13708 Carton de 2 poches souples de 5 litres BM14408 SESAME Salmonella D tection Flacon de 500 g BK195HA Pack de 10 flacons de 200 mL BM13808 Coffret de 20 bo tes de Petri 90 mm BM14108 Coffret de 120 bo tes de Petri 3 90 mm BM15008 5 7 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr SUPPORT PHOTO Domaine d utilisation D tection des salmonelles mobiles Enterobacteriaceae Aspect non caract ristique Si ee en SESAME Salmonella D tection Taun R f BM13808 Incubation 24 heures 41 5 C point d inoculation au centre de la g lose Aspect caract ristique formant un halo opaque centr sur le point d inoculation capacit r aliser une migration 6 7 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33
5. aeruginosa ATCC 27853 Culture blanch tre Culture blanch tre opaque gt 30 mm Colonies magenta Escherichia coli ATCC 25922 Inhib e Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhib e 4 7 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr STOCKAGE CONSERVATION SESAME Salmonella Enrichissement Milieu d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en flacons ou en tubes 6 mois 2 25 titre indicatif Milieux pr ts l emploi en flacons ou en poches 2 25 l abri de la lumi re Les dates de p remption sont mentionn es sur l tiquette SESAME Salmonella D tection Milieu d shydrat 2 25 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en bo tes 15 jours 2 8 l abri de la lumi re titre indicatif Milieu pr t a liqu fier en flacons 2 8C l abri de la lumi re La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en bo tes 15 jours 2 8 l abri de la lumi re titre indicatif Milieu pr coul en bo tes de Petri 90 mm 2 8 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Kit SESAME Salmonella TESTS Milieux pr t l emploi et pr t liqu fier en flacons 2 8
6. es 2 7 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr MODE D EMPLOI LECTURE Introduire aseptiquement 25 g de produit analyser dans SESAME Salmonella Enrichissement pr t l emploi afin de r aliser une suspension au 1 10 conform ment aux recommandations de la norme NF EN ISO 6579 Homog n iser parfaitement __Incuber 37 1 C pendant 18 2 heures _ Ensemencer trois gouttes environ 0 1 mL de la culture provenant de SESAME Salmonella Enrichissement au centre d une bo te de SESAME Salmonella D tection _Incuber 41 5 1 0 C pendant 24 3 heures sans retourner les bo tes Le d veloppement d un halo opaque blanch tre de diam tre au moins gal 30 mm centr sur le point d ensemencement indique pr somptivement la pr sence de salmonelles NOTE Dans le cadre de la marque AFNOR Validation les prises d essai sup rieures 25 g n ont pas t test es RAPPEL 1 La m thode est destin e la d tection des salmonelles mobiles et n est pas adapt e la d tection des salmonelles immobiles souches immobiles ou ayant perdu leur mobilit NOTE SESAME Salmonella D tection peut tre conserv pendant 72 h 4 C apr s ensemencement et incubation avant de r aliser les ventuelles confirmations
7. SESAME Salmonella TEST DOMAINE D UTILISATION SESAME Salmonella TEST constitue une m thode alternative de recherche des salmonelles dans les produits d alimentation humaine et animale ainsi que dans les chantillons de l environnement l exclusion des chantillons de production primaire Les analyses peuvent tre d clar es n gatives en 48 heures apr s les deux seules tapes de pr enrichissement SESAME Salmonella Enrichissement et de diff renciation SESAME Salmonella D tection La confirmation d ventuels chantillons pr somptivement positifs r alis e l aide de COMPASS Salmonella Agar n cessitera une incubation suppl mentaire de 24 heures SESAME Salmonella TEST est officiellement certifi par AFNOR Validation sous Attestation N BKR 23 04 12 07 dont le terme de validit est fix au 4 d cembre 2011 PRINCIPES L tape de pr enrichissement est r alis e par ensemencement et incubation pendant 18 2 heures de SESAME Salmonella Enrichissement milieu liquide dont l quilibre osmotique et la formule tamponn e permettent la revivification optimale des salmonelles La formule de SESAME Salmonella Enrichissement est conforme celle de leau pepton e tamponn e L tape de diff renciation est mise en uvre par ensemencement et incubation pendant 24 3 heures de SESAME Salmonella D tection Les excellentes capacit s migratoires de ce milieu semi solide associ e une s lectivit ap
8. ertifi par AFNOR Certification www afnor validation org COMPASS et SESAME Salmonella TEST sont des marques de SOLABIA S A S Les mentions port es sur les tiquettes sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 09 11 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BT009 F 2007 12 5 717 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
9. propri e permettent de s lectionner rapidement les chantillons pr somptivement positifs par simple visualisation de la migration des salmonelles sur bofte de Petri La m thode est destin e la d tection des salmonelles mobiles et n est pas adapt e la d tection des salmonelles immobiles souches immobiles ou ayant perdu leur mobilit L ventuelle tape de confirmation est r alis e par ensemencement et incubation pendant 24 3 heures de COMPASS Salmonella Agar Le principe de ce milieu solide s lectif est bas sur la r v lation sp cifique de l est rase et de la B glucosidase pr sente pour la premi re et absente pour la seconde chez une tr s large majorit de salmonelles De rares souches d Enterobacter peuvent exprimer une activit est rase et produire des colonies bleu vert entour es d une coloration magenta Certaines souches de Salmonella appartenant aux s rovars Dublin et Atento ainsi que quelques unes des sous esp ces S houtenae S bongori et S diarizonae peuvent pr senter une pigmentation magenta faible nulle en raison de la faible activit est rasique qui les caract rise 1 7 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr FORMULES TYPES ET PREPARATION DE SESAME Salmonella TEST pouvant tre ajust es de fa on ob
10. tenir des performances optimales SESAME Salmonella Enrichissement SESAME Salmonella D tection BK194 BM136 ou BM137 ou BM144 BK195 BM138 Pour 1 litre de milieu Pour 1 litre de milieu Peptone Peptone Chlorure de sodium Hydrolysat acide de cas ine Tampon phosphates Chlorure de sodium Phosphate monopotassique Agents inhibiteurs Agar agar bact riologique pH 7 0 0 2 25 C pH 5 2 0 2 25 C PREPARATION PREPARATION Mettre en solution 20 0 g de milieu Mettre en suspension 31 7 g de milieu d shydrat BK194 dans 1 litre d eau distill e d shydrat BK195 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e ou d min ralis e Agiter lentement jusqu dissolution Porter lentement le milieu bullition sous compl te agitation constante et l y maintenir durant le R partir en tubes ou en flacons temps n cessaire sa dissolution St riliser lautoclave 121 C pendant 15 Ne pas autoclaver minutes Si la pr sentation pr te liqu fier BM138 est utilis e faire fondre la g lose pendant le Les r f rences BM136 et BM137 sont pr tes minimum de temps n cessaire sa l emploi voir PRESENTATION reliqu faction totale Ne pas r p ter cette op ration plus d une fois Refroidir et maintenir le milieu 44 47 C Couler en bo tes de Petri st riles Laisser solidifier sur une surface froide Ne pas s cher les bo tes ainsi pr par
Download Pdf Manuals
Related Search