DCM038-7 FT4 CE_fr
Contents
1. l abri de la lumi re N ouvrir le sachet de R actif 3 microplaque coat e qu apr s avoir amen celui ci temp rature ambiante et refermez le tout de suite apr s avoir pr lev les bandes utiliser 4 PR CAUTIONS D USAGE e Les r actifs ouverts conserv s 2 8C sont stables pendant 60 jours e Ne pas utiliser de r actifs apr s la date de p remption e viter l exposition du r actif TMB H 0 la lumi re directe du soleil aux m taux et aux substances oxydantes e Tous les produits contenant du s rum humain se sont d montr s non r actifs l antig ne de surface de l h patite B et aux anti corps anti VIH 1 et 2 et VHC Dans l ignorance d un test offrant la garantie absolue de l absence de tout agent infectieux tous les produits d origine humaine devraient tre g r s comme potentiellement dangereux et en mesure de transmettre des agents infectieux e La concentration de thyroxine total dans le s rum d pend de plusieurs facteurs de la fonction de la thyro de et de sa r gulation de la thyroxine liant la globuline TBG et de la liaison entre thyroxine et TBG La concentration de la thyroxine totale est toutefois insuffisante elle seule pour surveiller l tat clinique Les valeurs de la thyroxine totale dans le s rum peuvent augmenter pendant la grossesse ou suite l administration de contraceptifs oraux La table des m dicaments interf rants et les conditions dans lesquelles les valeur2. Proc dure Avant de proc der la d termination mettre tous les r actifs s rums de r f rence et contr les temp rature ambiante 22 28 C talon Agiter d licatement la microplaque pendant 20 30 secondes et la couvrir Laisser incuber 1h temp rature ambiante 22 28 0 Eliminer le contenu de la microplaque par d cantation ou aspiration Pour l limination par d cantation ass cher la microplaque avec du papier absorbant Ajouter 300 uL de solution de lavage et lasser d canter ou aspirer R p ter 2 fois pour un total de 3 lavages Un laveur de plaque manuel ou automatique peut tre utilis Suivre les instructions du producteur pour un usage appropri Si une bouteille avec n bulisateur est utilis e remplir chaque puits en vitant les bulles d air Laisser d canter la solution de lavage et r p ter 2 fois encore Substrat sou toou tout Laisser incuber temp rature ambiante 22 28 C pendant 15 minutes Solution M langer d licatement pendant 15 20 secondes Lire l absorbance de chaque puits 450 nm par rapport au blanc ou utilisant une longueur d onde de r f rence 620 630 nm pour minimiser les imperfections des puits avec un lecteur de microplaque Les r sultats doivent tre lits dans les trente 30 minutes apr s l ajout de la solution d arr t 6 CONTR LE DE QUALIT Chaque laboratoire devrait tester les contr les avec des taux d hypothyro de d euthyro d
3. R action trop faible DO trop basse conjugu non appropri par ex ne provenant pas du coffret original temps d incubation trop court temp rature d incubation trop basse R action trop intense DO trop lev e conjugu non appropri par ex ne provenant pas du coffret original temps d incubation trop long temp rature d incubation trop lev e mauvaise qualit de l eau utilis e pour la solution de lavage bas degr de d ionisation lavages insuffisants conjugu non enti rement limin Valeurs inexplicablement hors plage contamination des pipettes embouts ou r cipients lavages insuffisants conjugu non enti rement limin CVS intra essai lev les r actifs et ou les bandes n ont pas atteint la temp rature ambiante avant l emploi le laveur de microplaques ne lave pas correctement suggestion nettoyer la t te du laveur CV inter essai lev conditions d incubation non constantes temps ou temp rature contr les et chantillons non distribu s en m me temps avec les m mes intervalles contr ler l ordre de distribution variabilit intrins que des op rateurs
4. DiaMletr CE pour analyses de routine D termination immunoenzymatique directe de la FT4 dans le s rum ou le plasma humain o amp LOT Voir l tiquette externe 8 C rc E 96 tests DKO038 USAGE PR VU M thode immunoenzymatique colorim trique par comp tition pour la d termination quantitative de la concentration de la FT4 dans le s rum ou le plasma humain 1 SIGNIFICATION CLINIQUE La thyroxine T4 principale hormone thyro dienne circule dans le sang pratiquement toujours li e des prot ines de transport Le transporteur principal est la thyroxin binding globuline TBG Toutefois seulement la fraction libre non li e de la thyroxine est responsable de l activit biologique De plus les concentrations de prot ines de transport sont modifi es lors de nombreuses conditions cliniques telles que la grossesse Dans la fonction thyro dienne normale lorsque les concentrations de la prot ine de transport sont modifi es le niveau total de thyroxine change afin de garder la concentration de thyroxine libre FT4 constante Donc la mesure de la concentration de la thyroxine libre correspond mieux l tat clinique que la concentration totale de thyroxine L augmentation de la thyroxine totale associ e une grossesse la prise de contraceptifs oraux et une th rapie aux estrog nes peut r sulter dans des concentrations de T4 totale plus grande que les limites normales alors que la con
5. centration de thyroxine libre demeure dans les limites normales Une fonction thyro dienne anormale peut galement tre dissimul e dans des cas d hyper et d hypothyro die par des modifications de la concentration de TBG La concentration de T4 totale peut tre augment e ou diminu e par des changements de TBG de tel sorte que des niveaux normaux sont obtenus La concentration de thyroxine libre peut ainsi contribuer la d termination du statut clinique r el d un patient 2 PRINCIPE DE LA M THODE Les r actifs n cessaires a cet essai immunoenzymatique sont des microplateaux sensibilis s avec des anticorps anti T4 un conjugu enzyme antig ne et l antig ne T4 natif Lorsque le conjugu enzyme antig ne et le s rum contenant l antig ne T4 libre natif sont mis en contact dans le puits une r action de comp tition se produit entre l antig ne T4 libre et le conjugu enzyme antig ne pour se fixer aux sites de liaison L interaction est illustr e par l quation suivante Ka Enz Ag Ag Ab ow S AgAbew 7 Ag Ab ow Ka Ab Anticorps monosp cifique immobilis quantit constante Ag Antig ne natif quantit variable Enz Ag Conjugu enzyme antig ne constante Ag Abw Complexe antig ne anticorps 7 Ag Ab cw Complexe enzyme antig ne anticorps conjugu Ka Constante d association K a constante de dissociation K ka k Constante d quilibre quantit Une fois l quilibre attei
6. cision DiaMetra S r l Siege social Via Garibaldi 18 10 1 1 Intra essai 20090 SEGRATE MI Italie La variabilit l int rieur du m me coffret a t T l 0039 02 2139184 02 26921595 d termin e en r pliquant 20x la mesure de trois Fax 0039 02 2133354 s rums de contr le diff rents La variabilit intra Fabricant Via Giustozzi 35 35a Z Paciana essai est lt 10 98 06034 FOLIGNO PG Italie 10 1 2 Inter essal T l 0039 0742 24851 La variabilit entre dosages diff rents a t Fax 0039 0742 316197 d termin e en r pliquant 10x la mesure de trois Courriel info diametra com s rums de contr le diff rents avec des coffrets appartenant des lots diff rents La variabilit inter essai est lt 10 81 10 2 Sensibilit La concentration minimale de FT4 mesurable est de 0 05 ng dL avec une limite de confiance de 95 10 3 Sp cificit La r activit crois e de l anti thyroxine avec certaines substances a t d termin e en ajoutant les solutions interf rantes une matrice de s rum diverses concentrations La r activit crois e a t calcul e en analysant le rapport entre la concentration de substances interf rantes et la concentration de triiodothyronine n cessaire pour d placer la m me quantit de conjugu crois e Monoiodo Tyrosine 100 ug mL Diiodo Tyrosine 100 pg mL Triiodothyroacetic ki oaesis 0 0001 100 ug mL 10 4 Corr lation contre r
7. e et d hyperthyroide pour surveiller les performances du coffret Ces contr les doivent tre trait s comme inconnus et les valeurs d termin es dans chaque session Les tableaux de contr le de la qualit devraient tre observ s afin de suivre les prestations des r actifs fournis Des m thodes statistiques appropri es doivent de plus tre utilis es pour v rifier la tendance Chaque laboratoire devrait choisir les limites d acceptabilt des performances du coffret Les autres param tres incluent les interceptions 80 50 et 20 de la courbe d talonnage pour la reproductibilt inter essai De plus l absorbance maximale devrait refl ter les valeurs des s ances pr c dentes Des d viations significatives par rapport aux prestations tablies peuvent indiquer une alt ration inobserv e des conditions exp rimentales ou une d gradation des r actifs du coffret Utiliser des r actifs frais pour d terminer les motifs des variations 7 LIMITATIONS DE LA PROC DURE 7 1 Prestations de l analyse Ne pas utiliser des chantillons microbiologiquement contamin s ou des chantillons fortement lip miques ou h molys s Il est important que le temps de r action de chaque puits soit le m me aux fins de la reproductibilit Le temps de distribution des puits ne doit pas tre sup rieur 10 minutes S il se prolonge au dela des 10 minutes il est recommand de suivre l ordre de distribution L ajout de substrat TMB e
8. f rence RIA Le coffret de FT4 Diametra a t compar un coffret disponible en commerce 197 chantillons de s rum ont t test s La courbe de r gression est FT4 RIA 0 952 FT4 Diametra 0 103 r 0 903 11 DISPOSITIONS RELATIVES L LIMINATION DES D CHETS Les r actifs doivent tre jet s conform ment aux lois en vigueur BIBLIOGRAPHIE e Barker S B JBC 173 175 1948 e Chopra I J et al J Clinical EndocrinoL 33 865 1971 e Young D S et al Clinical Chemistry 21 3660 1975 e Sterling L Cleveland CRC Press P 19 51 1975 O DIA METRA SRL o ih NOTICE D INFORMATION RR pregazione dei simboli xplanation of symbols xplication des symboles 1gnificado de los simbolos Verwendete Symbole Explica ao dos simbolos In vitro Diagnostikum Producto sanitario para diagn stico In vitro Dispositif medical de diagnostic 1n vitro In vitro Diagnostic Medical Device Dispositivo medico diagnostico 1n vitro Dispositivos medicos de diagnostico in vitro Bestellnummer N mero de cat logo R fer nc s du catalogue Catalogue number Numero di Catalogo N mero do cat logo Verwendbar bis Establa hasta usar antes de ltimo d a del mes Utiliser avant dernier jour du mois indiqu Use by last day of the month Utilizzare prima del ultimo giorno del mese Utilizar antes ultimo dia do m s Gebrauchsanweisung beachten Consultar las instrucciones Consulter le mode d emploi Consult instructi
9. nt le conjugu li la phase solide est s par de la fraction de conjugu libre par d cantation ou aspiration L activit du conjugu li la phase solide est inversement proportionnelle la concentration de l antig ne libre FT4 En utilisant des talons avec une concentration d antig ne connue il est possible de construire une courbe sur laquelle interpoler un chantillon avec concentration non connue de FT4 3 R ACTIFS MAT RIAUX ET INSTRUMENTS 3 1 R actifs et mat riaux fournis dans le coffret 1 Etalons FT4 6 flacons 1 mL chaque STD R F DCE002 3806 0 STDs R F DCE002 3807 0 STDc R F DCE002 3808 0 STD R F DCE002 3809 0 STD R F DCE002 3810 0 STD R F DCE002 3811 0 2 Conjugu 1 flacon 12 mL FT4 conjugu avec peroxydase de raifort HRP DCE002 3802 0 3 Microplaque coat e 1 microplaque s cable Anti FT4 adsorb e sur microplaque DCE002 3803 0 4 Substrat TMB 1 flacon 15 mL H20 TMB 0 26 g L viter le contact avec la peau DCE004 0 5 Solution d arr t 1 flacon 15 mL Acide sulfurique 0 15 mol L viter le contact avec la peau DCE005 0 6 Solution de lavage conc 50X 1 flacon 20 mL NaCl 45 g L Tween 20 55 g L DCE006 0 3 2 R actifs n cessaires non fournis dans le coffret Eau distill e 3 3 Mat riaux et instruments auxiliaires Distributeurs automatiques Lecteur pour microplaques 450 nm Remarques Conserver tous les r actifs 2 8 C
10. ntra ne une r action cin tique qui se termine par l ajout de la solution d arr t L ajout du substrat et de la solution d arr t doit advenir dans le m me ordre afin d liminer des temps de r action diff rents Les lecteurs de plaques mesurent les DO verticalement Ne pas toucher le fond des puits Une aspiration incompl te de la solution de lavage dans les puits peut entra ner des r plicats de mauvaise qualit et de faux r sultats 7 2 Interpr tation des r sultats Si un ordinateur a t utilis pour calculer les r sultats il faut imp rativement que les valeurs des calibrateurs tombent dans les 10 des concentrations assign es 8 R SULTATS 8 1 Remarques Absorbance Sa gt 1 0A 8 2 Courbe d talonnage Tracer le graphique d absorbance Em en fonction des concentrations des talons Sa Se Tracer la meilleur courbe passant par les points d talonnage par ex trac logistique quatre param tres 8 3 Calcul des r sultats our le graphique faire une interpolation des valeurs d absorbance relatives chaque chantillon et en lire la concentration correspondante en ng dL 9 VALEURS DE R F RENCE Une tude de population adulte euthyro de a t utilis e pour d terminer les valeurs pr vues pour le coffret EIA FT4 Moyenne Plage ng dL ng dL Adultes 14 14 0 6 08 20 Grossesse 15 07 08 22 10 PARAMETRES CARACT RISTIQUES Ed 02 2011 DCM038 7 10 1 Pr
11. ons for use Consultare le istruzioni per l uso Consultar instru es para uso Ausreichend f r n Tests 72 4722 Contenido suficiente para n tests 66 499 Contenu suffisant pour n tests 66 499 Contains sufficient for n tests Contenuto sufficiente per n saggi 66 499 Cont m o suficiente para n testes Temperaturbereich L mitaci n de temperatura Limites de temp rature de conservation Temperature limitation Limiti di temperatura Temperaturas limites de conserva o Hergestellt von Elaborado por Fabriqu par Manufacturer Produttore Produzido por Herstellungs datum Fecha de fabricacion Date de fabrication Date of manufacture Data di produzione Data de produ o Biogef hrdung Riesco biol gico Risque biologique Biological risk Rischio biologico Risco biol gico Chargenbezeichnung Codigo de lote Numero de lot Batch code Codice del lotto Codigo do lote Inhalt Contenido del estuche Contenu du coffret Contents of kit Contenuto del kit Conte do do kit e DIA METRA SRL 2 SUGGESTIONS POUR LA R SOLUTION DES PROBL MES D PANNAGE ERREUR CAUSES POSSIBLES SUGGESTIONS Aucune r action colorim trique de l essai non distribution du conjugu contamination du conjugu et ou du substrat erreurs dans l ex cution du dosage par ex distribution accidentelle des r actifs dans le mauvais ordre ou en provenance des mauvais flacons etc
12. s de thyroxine totale sont influenc s et ont t remplis par le Journal of the American Association of Clinical Chemisis e Ne pas utiliser aux fins du d pistage chez les nouveaux n s 5 PROC DURE 5 1 Pr paration des talons Sa Sr Les talons sont des talons de r f rence s rique humaine de FT4 avec des concentrations approximatives de S S Se Sn Se S af 0 os 085 24 36 70 Conserver 2 8C Les taux exacts sont rapport s dans les tiquettes pour chaque lot sp cifique 5 2 Pr paration de la solution de lavage Avant l usage diluer le contenu de chaque ampoule de solution de lavage concentr e et tamponn e 50x avec de l eau distill e jusqu un volume de 1000 mL Pour pr parer des volumes moindres respecter le rapport de dilution de 1 50 La solution de lavage dilu e est stable 2 8C pendant au moins 30 jours 5 3 Pr paration de l chantillon Recueillir l chantillon au moyen d une seringue de 10 mL dans des tubes de silicone Observer les pr cautions habituelles dans le recueil des chantillons S parer les cellules de globules rouges par centrifugation et utiliser le s rum pour la d termination de la FT4 Les chantillons peuvent tre r frig r s 2 8 C pendant une p riode maximale de 48 heures Le conserver jusqu 30 jours 20 C s il ne peut pas tre test dans les 48 heures Pour des tests en double 0 10 mL d chantillon sont n cessaires 5 4
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