APTIMA Trichomonas vaginalis Assay package insert
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1. concentration de 5 7 0 7 1 0 M Gants jetables talon SysCheck 301078 APTIMA penetrable caps bouchons p n trables 105668 Bouchons non p n trables de rechange 103036A Bouchons de rechange pour les trousses de 250 tests Solutions de reconstitution du r actif d amplification et du r actif sonde CL0041 100 bouchons Solution de reconstitution du r actif enzymatique 501616 100 bouchons TCR et r actif de s lection CLO0040 100 bouchons APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 11 503797FR R v A PANTHER System Bouchons de rechange pour les trousses de 100 tests Solutions de reconstitution du r actif d amplification du r actif enzymatique et du r actift sonde CL0041 100 bouchons TCR et r actif de s lection 501604 100 bouchons Mat riel en option R f rence APTIMA Trichomonas vaginalis Controls Kit trousse de t moins 302807 Activateur d eau de Javel GEN PROBE pour le nettoyage 302101 pour le nettoyage de routine des surfaces et du mat riel APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 12 503797FR R v A PANTHER System Proc dure de test pour le PANTHER System Remarque Consulter le PANTHER System Operator s Manual Manuel de l op rateur du PANTHER System pour de plus amples renseignements sur la proc dure suivre avec ce syst me A Pr paration de la zone de travail 1 Nettoyer les surfaces de travail o les r actifs et les chantillons doivent tre pr par s Ne2. 95 IC 95 Urine 52 8 0 42 2 19 2 80 0 49 0 94 3 100 91 6 100 100 71 6 100 95 5 88 3 99 4 i CVS 52 8 1 43 0 15 4 100 67 6 100 97 7 88 2 99 6 88 9 60 2 99 7 100 93 7 100 ES 53 2 42 0O 17 0 100 70 1 100 95 5 84 9 98 7 81 8 56 9 97 4 100 93 5 100 PCyt 59 11 0 48 0O 18 6 100 74 1 100 100 92 6 100 100 75 6 100 100 93 9 100 Urine 55 2 0 52 1 5 5 66 7 20 8 93 9 100 93 1 100 100 29 4 100 98 1 95 0 100 j CVS 52 3 1 48 0 5 8 100 43 9 100 98 0 89 3 99 6 75 0 28 5 99 2 100 95 8 100 ES 56 4 1 51 0 7 1 100 51 0 100 98 1 89 9 99 7 80 0 40 5 99 4 100 95 6 100 PCyt 63 5 0 5 0 7 9 100 56 6 100 100 93 8 100 100 58 3 100 100 95 7 100 Urine 13 1 1 11 0 7 7 100 20 7 100 91 7 64 6 98 5 50 0 3 0 97 5 100 91 3 100 CVS 12 2 0 10 0 16 7 100 34 2 100 100 72 2 100 100 32 1 100 100 85 6 100 5 ES 16 2 0 14 0 125 100 34 2 100 100 78 5 100 100 31 5 100 100 89 3 100 PCyt 17 2 A 14 0 11 8 100 34 2 100 93 3 70 2 98 8 66 7 19 9 98 8 100 89 5 100 Urine 43 7 1 35 0 16 3 100 64 6 100 97 2 85 8 99 5 87 5 57 2 99 6 100 92 6 100 CVS 41 7 1 33 0 171 100 64 6 100 97 1 85 1 99 5 87 5 57 3 99 6 100 92 2 100 ES 41 7 0 34 0 171 100 64 6 100 100 89 8 100 100 66 7 100 100 92 2 100 PCyt 43 7 1 35 0 16 3 100 64 6 100 97 2 85 8 99 5 87 5 57 2 99 6 100 92 6 100 Urine 136 1 0 135 0 0 7 100 20 7 100 100 97 2 100 100 6 4 100 100 99 3 100 CVS 145 1
3. APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Bo te 1 de 2 conserver entre 2 et 8 C d s la r ception Quantit Symbole Composant Trousse de Trousse de 250 tests 100 tests A APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification Reagent 1 flacon 1 flacon r actif d amplification Amorces et nucl otides d shydrat s dans une solution tamponn e contenant lt 5 de diluant E APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reagent r actif 1 flacon 1 flacon enzymatique Transcriptase inverse et ARN polym rase d shydrat es dans une solution tamponn e HEPES contenant lt 10 de r actif diluant P APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reagent r actif 1 flacon 1 flacon sonde Sondes d ADN chimiluminescentes d shydrat es dans une solution tamponn e de succinate contenant lt 5 de d tergent TCR B APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Target Capture 1xX0 56 mL 1x0 30 mL Reagent B r actif de capture de cible B Solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 9 503797FR R v A PANTHER System Bo te temp rature ambiante de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Bo te 2 de 2 conserver temp rature ambiante entre 15 et 30 C d s la r ception Quantit Symbole Composant Trousse de Trousse de 250 tests 100 tests AR APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification 1x27 7mL 1x119mL Reconstitution Solution solution de reconstitution du r actif d amplification S
4. 11 60 7 9 12 5 2 16 17 1 7 41 0 6 1 162 20 2 18 89 9 1 15 164 13 3 11 83 20 8 10 48 17 6 3 17 18 6 8 43 0 6 1 167 19 8 17 86 9 5 16 169 10 5 9 86 22 9 11 48 DR PR ES LE PERA PP ES RON CVS couvillon vaginal pr lev par un clinicien ES couvillon endocervical PCyt chantillon de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt Coefficient de pr vision positif et coefficient de pr vision n gatif pour des taux de pr valence hypoth tiques Le coefficient de pr vision positif positive predictive value PPV et le coefficient de pr vision n gatif negative predictive value NPV estim s de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay pour diff rents taux de pr valence hypoth tiques sont pr sent s pour chaque type d chantillon au Tableau 2 Ces calculs sont bas s sur la sensibilit et la sp cificit globales estim es pour chaque type d chantillon dans le cadre de l tude clinique sur le PANTHER System APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 21 503797FR R v A Valeurs attendues Tableau 2 PPV et NPV hypoth tiques de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay en fonction du type d chantillon Type d chantillon Pr valence PPV NPV 1 52 2 99 9 2 68 8 99 9 5 85 0 99 7 Urine 10 92 3 99 3 15 95 0 98 9 20 96 4 98 4 25 97 3 97 9 1 35 4 100 2 52 6 100 5 7
5. Ces r sultats montrent que la contamination de transfert est r duite au minimum sur le PANTHER System Stabilit des chantillons Les donn es l appui des conditions d exp dition et de conservation recommand es pour les chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal les chantillons d urine et les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt ont t g n r es l aide d chantillons cliniques n gatifs enrichis de T vaginalis une concentration finale de 250 TV mL Une positivit sup rieure 95 a t observ e dans toutes les matrices chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal chantillons d urine et chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt tous les moments et toutes les temp ratures d analyse ce qui confirme la validit des dur es et des temp ratures maximales de conservation d crites dans la section Pr l vement et conservation des chantillons Bibliographie 1 Weinstock H S Berman and W Cates Jr 2004 Sexually transmitted diseases among American youth incidence and prevalence estimates 2000 Perspect Sex Reprod Health 36 1 6 10 Soper D 2004 Trichomoniasis under control or undercontrolled Am J Obstet Gynecol 190 1 281 290 3 Cotch M F J G Pastorek II R P Nugent S L Hillier R S Gibbs D H Martin et al 1997 Trichomonas vaginalis associated with low birth weig
6. II n est donc pas possible d tablir une corr lation entre la magnitude d un signal de test positif et le nombre d organismes dans un chantillon L utilisation de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay avec des chantillons pr lev s par la patiente l aide d un couvillon vaginal na pas t valid e APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 19 503797FR R v A M La performance du test n a pas t valu e sur des chantillons vaginaux sur couvillon provenant de femmes enceintes La performance du test n a pas t valu e sur des chantillons d urine des chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal et des chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt provenant de femmes de moins de 14 ans La performance de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay n a pas t tablie sur des chantillons gyn cologiques collect s dans le flacon de solution PreservCyt et trait s avec le ThinPrep 2000 System ou le ThinPrep 3000 System La performance du PANTHER System n a pas t d termin e une altitude sup rieure 2 000 m 6 561 pieds Si un chantillon contient une petite quantit d organismes T vaginalis une distribution in gale de ces trichomonades peut survenir ce qui peut avoir un effet sur la capacit d tecter ARNr de T vaginalis dans l chantillon pr lev Si les r sultats n gatifs de l chantillon ne correspondent pas l impression
7. chantillons doivent tre recouverts d une nouvelle pellicule de plastique ou d aluminium propre 3 Si des chantillons test s doivent tre congel s ou exp di s retirer les bouchons p n trables et placer de nouveaux bouchons non p n trables sur les tubes de transport d chantillons Si des chantillons doivent tre exp di s pour tre test s dans un autre tablissement les temp ratures recommand es doivent tre maintenues Avant de d boucher les tubes de transport d chantillons ils doivent tre centrifug s pendant 5 minutes 420 RCF Relative Centrifugal Force force centrifuge relative pour faire descendre la totalit du liquide au fond du tube viter les claboussures et la contamination crois e Remarque Le transport des chantillons doit tre effectu conform ment la r glementation nationale et internationale applicable relative au transport APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 8 503797FR R v A PANTHER System P pim E R Les r actifs de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sont CELL indiqu s ci dessous pour le PANTHER System Les symboles d identification des r actifs sont galement indiqu s c t du nom du r actif R actifs et mat riel fournis Trousse de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay PANTHER System 250 tests 2 bo tes et 1 trousse de t moins R f rence 303537 100 tests 2 bo tes et 1 trousse de t moins R f rence 303536 Bo te r frig r e de l
8. couvillons vaginaux pr lev s par un clinicien chantillons d urine f minins et chantillons collect s dans la solution PreservCyt R sum et explication du test Trichomonas vaginalis TV est l agent responsable de la maladie transmissible sexuellement MTS curable la plus r pandue des Etats Unis on estime que 7 4 millions de nouveaux cas surviennent annuellement 1 2 Cette infection chez les femmes entra ne des vaginites des ur trites et des cervicites Des pertes vaginales et de petites l sions h morragiques peuvent tre pr sentes dans l appareil g nito urinaire Parmi les complications on note accouchement pr matur b b s ayant un poids insuffisant la naissance rupture pr matur e des membranes et infection survenant la suite d un avortement ou d une hyst rectomie On a rapport une association entre les pisodes ant rieurs de trichomonase et les infections g nitales hautes la st rilit tubaire et le cancer du col de l ut rus Les femmes symptomatiques atteintes de trichomonase se plaignent g n ralement de pertes vaginales et de douleurs et ou d irritation vulvovaginales La dysurie est galement r pandue Il a t estim cependant qu entre 10 et 50 des infections par T vaginalis chez les femmes sont asymptomatiques et que cette proportion pourrait tre encore plus lev e chez les hommes 3 4 5 La d tection de T vaginalis par les m thodes de culture classiques est techniqu
9. es sur la paroi du tube de r action par des aimants et le surnageant est aspir Les particules sont lav es afin d liminer la matrice r siduelle de l chantillon qui peut contenir des inhibiteurs d amplification Une fois les tapes de la capture de cible termin es les chantillons sont pr ts pour l amplification Les tests d amplification de la cible sont bas s sur la capacit des amorces d oligonucl otides compl mentaires s hybrider sp cifiquement et permettre l amplification enzymatique des brins d acide nucl ique cible La r action TMA de GEN PROBE amplifie une r gion sp cifique de la petite sous unit ribosomique de T vaginalis au moyen d interm diaires d ADN et d ARN et g n re des amplicons d ARN La d tection des s quences du produit d amplification d ARNr est r alis e par l hybridation de l acide nucl ique HPA Une sonde d ADN monocat naire chimiluminescente qui est compl mentaire une r gion de l amplicon cible est marqu e d une mol cule d ester d acridinium La sonde d ADN marqu e s associe l amplicon pour former des hybrides ARN ADN stables Le r actif de s lection diff rencie la sonde hybrid e de la sonde non hybrid e emp chant la production d un signal par la sonde non hybrid e Lors de l tape de d tection la lumi re mise par les hybrides ARN ADN marqu s est mesur e en signaux de photons dans un luminom tre et exprim e en unit s relatives de lumi r
10. un dispositif de pr l vement l autre Tableau 5 Caract ristiques de performance de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay dans les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt en fonction du type de dispositif de pr l vement Dispositif de VP FP VN FN de Sensibilit Sp cificit PPV NPV pr l vement pr v IC 95 IC 95 C a95 IC 95 PRE YPE 391 48 3 340 0 12 33 100 92 6 100 99 1 97 5 99 7 94 1 84 7 98 7 100 99 0 100 Spatule brosse 339 27 3 309 0 8 0 100 87 5 100 99 0 97 2 99 7 90 0 75 7 97 8 100 98 9 100 cytologique IC intervalle de confiance FN faux n gatif FP faux positif pr v pr valence VN vrai n gatif VP vrai positif Intervalle de confiance de score 2L intervalle de confiance 95 du PPV a t calcul partir de l intervalle de confiance 95 exact pour le rapport des vraisemblances positives l intervalle de confiance 95 du NPV a t calcul partir de l intervalle de confiance 95 exact pour le rapport des vraisemblances n gatives Distribution des valeurs de RLU des t moins APTIMA Trichomonas vaginalis La distribution des valeurs de RLU pour l APTIMA Trichomonas vaginalis Negative Control et pour l APTIMA Trichomonas vaginalis Positive Control de toutes les s ries valides effectu es dans le cadre de l tude de la performance clinique de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTH
11. v A Renseignements g n raux Conditions de conservation et de manipulation des r actifs A Les r actifs suivants restent stables lorsqu ils sont conserv s entre 2 et 8 C APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification Reagent r actif d amplification APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reagent r actif enzymatique APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reagent r actif sonde APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Target Capture Reagent B r actif de capture de cible B APTIMA Trichomonas vaginalis Controls t moins B Les r actifs suivants restent stables lorsqu ils sont conserv s temp rature ambiante entre 15 et 30 C APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification Reconstitution Solution solution de reconstitution du r actif d amplification APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reconstitution Solution solution de reconstitution du r actif enzymatique APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reconstitution Solution solution de reconstitution de la sonde APTIMA Trichomonas vaginalis Target Capture Reagent r actif de capture de cible APTIMA Trichomonas vaginalis Selection Reagent r actif de s lection C Apr s reconstitution le r actif d amplification le r actif enzymatique et le r actif sonde restent stables pendant 60 jours lorsqu ils sont conserv s entre 2 et 8 C D La solution de r actif de capture de cible working Target Capture Reagent WTCR reste stable pendant 60 jours lorsqu elle est conserv e entr
12. 3 63 2 100 I 7 Asymptomatique 214 Tai YM RS GOS 75 8 100 94 6 98 7 45 8 80 9 98 8 100 100 98 8 93 4 100 z l CVS Symptomatique 393 57 4 332 0 14 5 93 7 100 97 0 99 5 84 9 98 1 98 9 100 100 98 2 86 3 100 i TOUS Ber ES CMe CRE S0 CIOS 60 96 7 99 0 77 9 92 6 99 4 100 100 98 3 76 2 100 ASymptomatique 309 165 ST ER 0n Re 80 6 100 96 1 99 3 58 1 90 8 98 9 100 100 97 9 87 9 100 i ES Symptomatique 391 51 7 333 0 13 0 93 0 100 95 8 99 0 78 1 94 7 99 0 100 i 100 98 1 84 8 100 Tous A SR TU PE 94 6 100 96 7 98 9 76 3 91 5 99 4 100 100 99 7 94 7 100 Aoymptomatgug 3245 181 Ma RENE ORNE 82 4 100 98 2 99 9 76 5 99 9 98 9 100 100 98 6 91 9 100 7 7 PCyt Symptomatique 406 57 5 344 0 14 0 93 7 100 96 7 99 4 83 1 97 2 99 0 100 100 99 1 92 6 100 106 Oa io RE De RE NM T0 95 1 100 98 0 99 6 85 2 97 1 99 5 100 RE EE RE EE EE ES SE EE ES SE IC intervalle de confiance CVS chantillon pr lev par un clinicien l aide d un couvillon vaginal ES chantillon pr lev l aide d un couvillon endocervical FN faux n gatif FP faux positif PCyt chantillon de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt pr v pr valence VN vrai n gatif VP vrai positif R sultats du TAAN pour T vaginalis d une tude ant rieure nb de r sultats positifs nb d chantillons test s a 1 1 b 4 4 c 5 5 d 4
13. 7 e 3 4 f 7 11 g 1 5 h 2 7 i 3 12 j 0 1 k 3 5 I 3 6 2R sultats du TAAN pour T vaginalis d une tude ant rieure nb de r sultats n gatifs nb d chantillons test s m 1 2 n 2 2 et o 3 4 Intervalle de confiance de score 4L intervalle de confiance 95 du PPV a t calcul partir de l intervalle de confiance 95 exact pour le rapport des vraisemblances positives l intervalle de confiance 95 du NPV a t calcul partir de l intervalle de confiance 95 exact pour le rapport des vraisemblances n gatives Le Tableau 4 montre la sensibilit la sp cificit le PPV et le NPV de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTHER System ainsi que la pr valence de T vaginalis en fonction de l tat d infection dans chaque type d chantillon en fonction du centre de pr l vement Pour chaque type d chantillon la performance tait similaire d un centre de pr l vement l autre La pr valence variait d un centre de pr l vement l autre comme pr vu APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 24 503797FR R v A Performance clinique sur le PANTHER System Tableau 4 Caract ristiques de performance de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay en fonction du centre de pr l vement Type de Sensibilit Sp cificit PPV NPV Centren g ee n VP FP VN ENS IC 95 IC 95 IC
14. clinique il peut tre n cessaire d utiliser un nouvel chantillon Les clients doivent valider ind pendamment un processus de transfert vers un SIL APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 20 503797FR R v A Valeurs attendues Valeurs attendues Pr valence L estimation de la pr valence de T vaginalis dans diff rentes populations d pend de la sensibilit du test pour la d tection de l infection et des facteurs de risque des patients tels que l ge les habitudes de vie et la pr sence ou l absence de sympt mes Un r sum de la pr valence de T vaginalis en fonction du type d chantillon telle que d termin e par l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay au cours de l tude clinique sur le PANTHER System est pr sent au Tableau 1 Tableau 1 Pr valence de T vaginalis telle que d termin e par l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay en fonction du type d chantillon et du centre de pr l vement Type nb d chantillons positifs nb d chantillons test s d chan tillon Tous les hir s Centre 1 Centre2 Centre3 Centre4 Centre 5 Centre 6 Centre 7 Centre8 Centre 9 Urine 9 8 64 650 15 1 8 53 3 6 2 55 15 4 2 13 18 6 8 43 0 7 1 136 13 2 10 76 7 6 11 144 13 4 11 82 22 9 11 48 CVS 11 8 80 678 17 0 9 53 7 7 4 52 16 7 2 12 19 5 8 41 0 7 1 145 16 0 12 75 12 0 21 175 15 0 12 80 24 4 11 45 5 56 5 63 ES 11 2 80 713 20 4 11 54 8 9 PCyt 11 0 81 739 18 3
15. les tubes des t moins ont t pipet s et sont en cours de traitement pour une trousse de r actifs particuli re les chantillons de patient peuvent tre analys s avec la trousse associ e pendant une p riode maximale de 24 heures sauf si a Les r sultats des t moins sont non valides b La trousse de r actifs de test associ e est enlev e du syst me c La trousse de r actifs de test a d pass les limites de stabilit 3 Chaque tube de t moin APTIMA est pr vu pour un seul test Les tentatives de pipeter plus d une fois partir du tube peuvent entra ner des erreurs de traitement B Temp rature La temp rature ambiante est d finie comme se situant entre 15 et 30 C C Poudre de gants Comme pour tout syst me de r actif l exc s de poudre sur certains gants peut entra ner la contamination des tubes ouverts Il est recommand d utiliser des gants sans poudre D Protocole de contr le de la contamination du laboratoire pour le PANTHER System Il existe de nombreux facteurs sp cifiques au laboratoire susceptibles de contribuer la contamination notamment le volume des tests le flux des travaux la pr valence des maladies et diverses autres activit s de laboratoire Ces facteurs doivent tre pris en compte lors de l tablissement de la fr quence de contr le de la contamination Les intervalles pour le contr le de la contamination doivent tre tablis sur la base des pratiques et des proc dures de
16. mousse pendant le retournement des r actifs C Pr paration du r actif pour les r actifs pr c demment reconstitu s 1 Le r actif sonde le r actif d amplification et le r actif enzymatique pr c demment reconstitu s doivent parvenir temp rature ambiante entre 15 et 30 C avant le d but du test 2 Si le r actif sonde reconstitu contient un pr cipit qui ne se remet pas en solution temp rature ambiante chauffer le flacon bouch une temp rature n exc dant pas 62 C pendant 1 2 minutes Apr s cette tape d chauffement le r actif sonde peut tre APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 14 503797FR R v A PANTHER System utilis m me s il reste un pr cipit r siduel M langer le r actif sonde par retournement en veillant ne pas faire de mousse avant de le charger sur le syst me M langer compl tement chacun des r actifs en les retournant en douceur avant de les charger sur le syst me viter de faire de la mousse pendant le retournement des r actifs Ne pas remplir nouveau les flacons de r actif Le PANTHER System reconna t et rejette les flacons qui ont t remplis nouveau D Manipulation des chantillons 1 2 3 Laisser les t moins ainsi que les chantillons parvenir temp rature ambiante avant toute proc dure Ne pas m langer les chantillons au vortex Confirmer visuellement que chaque tube d chantillon satisfait l un des crit res suiv
17. o 14 0 0 7 100 20 7 100 100 97 4 100 100 6 4 100 100 99 3 100 ES 162 1 o 161 0 0 6 100 20 7 100 100 97 7 100 100 6 4 100 100 99 4 100 PCyt 167 1 o 166 0 0 6 100 20 7 100 100 97 7 100 100 6 4 100 100 99 4 100 Urine 70 9 1 59 4 14 3 90 0 59 6 98 2 98 3 91 1 99 7 90 0 63 8 99 6 98 3 93 1 100 CVS 67 10 2 55 0 149 100 72 2 100 96 5 88 1 99 0 83 3 59 2 98 2 100 94 8 100 ES 80 13 4 63 0O 16 3 100 77 2 100 94 0 85 6 97 7 76 5 57 1 92 2 100 95 3 100 PCyt 79 15 2 62 0 19 0 100 79 6 100 96 9 89 3 09 1 88 2 68 4 98 4 100 95 1 100 Urine 142 1 0 131 0 7 7 100 74 1 100 100 97 2 100 100 75 1 100 100 97 7 100 CVS 173 18 3 152 0 10 4 100 82 4 100 98 1 94 5 99 3 85 7 67 7 96 7 100 97 9 100 ES 161 12 3 146 0 7 5 100 75 8 100 98 0 94 2 99 3 80 0 58 3 95 4 100 97 9 100 PCyt 168 15 1 152 0 8 9 100 79 6 100 99 3 96 4 99 9 93 8 73 2 99 8 100 97 9 100 Urine 82 10 1 71 O 12 2 100 72 2 100 98 6 92 5 99 8 90 9 64 9 99 7 100 95 9 100 CVS 80 10 2 68 0 12 5 100 72 2 100 97 1 90 2 99 2 83 3 59 0 98 2 100 95 8 100 5 ES 83 9 2 72 0 10 8 100 70 1 100 97 3 90 7 99 3 81 8 56 3 97 4 100 96 1 100 PCyt 86 9 0 77 0 10 5 100 70 1 100 100 95 2 100 100 71 4 100 100 96 2 100 Urine 47 10 1 36 0 21 3 100 72 2 100 97 3 86 2 99 5 90 9 65 6 99 7 100 92 3 100 CVS 45 10 1 34 0 22 2 100 72 2 100 97 1 85 5 99 5 90 9 65 7 99 7 100 91 9 100 i ES 48 10 0 38
18. re ad quat des chantillons il est n cessaire que les cliniciens soient form s aux techniques de pr l vement d chantillons appropri es Consulter la section Pr l vement et conservation des chantillons pour des instructions Pour des renseignements d taill s consulter le mode d emploi appropri L chec ou la r ussite d un traitement ne peut tre d termin par l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay tant donn que les acides nucl iques peuvent persister apr s un traitement antimicrobien appropri Les r sultats de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay doivent tre interpr t s en association avec d autres donn es cliniques la disposition du clinicien Un r sultat n gatif n exclut pas une possible infection tant donn que les r sultats d pendent de la qualit du pr l vement de l chantillon Les r sultats des tests peuvent tre influenc s par un mauvais pr l vement des chantillons une erreur technique un m lange des chantillons ou un taux de cible inf rieur au seuil de d tection du test Un r sultat n gatif n exclut pas une possible infection tant donn que la pr sence de Trichomonas tenax o de Pentatrichomonas hominis dans un chantillon peut avoir un effet sur la capacit d tecter ARNr de T vaginalis Consulter la section R activit crois e en pr sence de microorganismes pour des d tails L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay fournit des r sultats qualitatifs
19. vers e dans le tube de transport d urine le niveau de liquide de ce tube doit se situer entre les deux lignes indicatrices noires de l tiquette du tube Dans le cas contraire l chantillon doit tre rejet L Observer des conditions de conservation ad quates pendant le transport des chantillons pour pr server leur int grit La stabilit des chantillons dans des conditions de transport autres que celles recommand es n a pas t valu e M Si le laboratoire re oit un tube de transport d chantillons sur couvillon sans couvillon avec deux couvillons un couvillon de nettoyage ou un couvillon non fourni par Gen Probe l chantillon doit tre rejet Recommandations concernant les tests N Conserver les r actifs aux temp ratures indiqu es La performance du test peut tre influenc e par l utilisation de r actifs qui ne sont pas conserv s correctement O Observer les pr cautions universelles lors de la manipulation des t moins P viter la contamination microbienne et par ribonucl ase des r actifs APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 4 503797FR R v A Renseignements g n raux Q Ne pas utiliser cette trousse apr s la date de p remption R Ne pas changer m langer ou combiner les r actifs de test provenant de trousses portant des num ros de lot diff rents Les t moins et les liquides des tests peuvent tre chang s APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 5 503797FR R
20. 0 20 8 100 72 2 100 100 90 8 100 100 74 0 100 100 92 5 100 PCyt 48 10 1 37 0 20 8 100 72 2 100 97 4 86 5 99 5 90 9 65 6 99 7 100 92 5 100 es a a a a a A a a a a a IC intervalle de confiance CVS chantillon pr lev par un clinicien l aide d un couvillon vaginal ES chantillon pr lev l aide d un couvillon endocervical FN faux n gatif FP faux positif PCyt chantillon de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt pr v pr valence VN vrai n gatif VP vrai positif Intervalle de confiance de score 2L intervalle de confiance 95 du PPV a t calcul partir de l intervalle de confiance 95 exact pour le rapport des vraisemblances positives l intervalle de confiance 95 du NPV a t calcul partir de l intervalle de confiance 95 exact pour le rapport des vraisemblances n gatives APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 503797FR R v A Performance clinique sur le PANTHER System Le Tableau 5 montre la sensibilit la sp cificit le PPV et le NPV de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTHER System ainsi que la pr valence de T vaginalis en fonction de l tat d infection dans les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt en fonction du dispositif de pr l vement cervical Pour les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt la performance tait similaire d
21. 0 503797FR R v A PANTHER System Mat riel requis mais vendu s par ment Remarque Le mat riel qu on peut se procurer aupr s de Gen Probe est indiqu par des num ros de r f rence sauf indication contraire R f rence PANTHER System 303095 APTIMA Assay Fluids Kit 303014 1 000 tests APTIMA Wash Solution solution de lavage APTIMA Buffer for Deactivation Fluid tampon pour solution de d sactivation et APTIMA Oil Reagent r actif huileux APTIMA Auto Detect Kit 303013 1 000 tests Unit s multi tube Multi tube units MTU 104772 02 Assortiment de sacs pour d chets PANTHER 902731 Couvercle du r cipient d chets PANTHER 902714 Ou trousse pour s rie PANTHER 303096 5 000 tests contient des MTU des sacs pour d chets des couvercles pour r cipient d chets des liquides de tests et des liquides d autod tection Embouts de 1 000 uL conducteurs d tecteurs de liquide 10612513 Tecan APTIMA Specimen Transfer Kit 301154C utiliser avec les chantillons dans la solution PreservCyt APTIMA Vaginal Swab Specimen Collection Kit 301162 APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit pour chantillons 301041 endocervicaux et chantillons ur traux masculins sur couvillon APTIMA Urine Specimen Collection Kit pour chantillons d urine 301040 masculins et f minins APTIMA Urine Specimen Transport Tubes pour les chantillons 105575 d urine masculins et f minins Eau de Javel solution d hypochlorite de sodium une
22. 4 1 100 CVS 10 85 8 100 15 90 6 100 20 93 1 100 25 94 8 100 1 34 8 100 2 51 8 100 5 73 5 100 ES 10 85 4 100 15 90 3 100 20 93 0 100 25 94 6 100 1 52 4 100 2 69 0 100 5 85 2 100 PCyt 10 92 4 100 15 95 1 100 20 96 5 100 25 97 3 100 CE D ES CVS couvillon vaginal pr lev par un clinicien ES couvillon endocervical PCyt chantillon de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt Le PPV et le NPV ont t calcul s pour diff rents taux de pr valence hypoth tiques en utilisant les estimations de la sensibilit et de la sp cificit de l tude des performances cliniques La sensibilit tait de 93 7 dans les chantillons d urine et de 100 dans les chantillons sur couvillon vaginal sur couvillon endocervical et de de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt La sp cificit tait de 99 1 dans les chantillons d urine de 98 2 dans les chantillons sur couvillon vaginal de 98 1 dans les chantillons sur couvillon endocervical et de 99 1 dans les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 22 503797FR R v A Performance clinique sur le PANTHER System Performance clinique sur le PANTHER System tude clinique La performance clinique de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTHER System a t valu e au moyen d chantillons r siduels pr lev s aupr s de sujets c
23. 8 1 30 3 8 7 33 1 9 5 33 1 9 5 77 0 22 1 62 9 18 1 114 0 32 8 HPos 108 100 1185 5 0 0 0 0 17 0 1 4 0 0 0 0 28 0 2 4 34 2 29 47 4 40 chantillons de la matrice d urine N g 108 100 1 0 0 2 24 6 0 0 0 0 0 3 28 3 0 0 0 0 0 7 72 3 0 8 81 4 HN g 107 100 33 1 15 9 48 1 4 9 14 8 0 0 0 0 7 1 21 6 9 3 28 0 20 3 61 5 7 MPos 108 100 621 9 27 2 4 4 335 54 37 3 6 0 1006 16 2 69 4 112 134 9 217 HPos 108 100 1208 3 28 8 2 4 0 0 0 0 0 0 0 0 140 4 11 6 41 5 3 4 149 2 12 3 RS a Concord concordance Conc concentration CV coefficient de variation HN g fortement n gatif HPos fortement positif MPos moyennement positif N g n gatif RLU unit s relatives de lumi re SD cart type Remarque La valeur de RLU rapport e par le logiciel est le nombre total de RLU mesur divis par 1 000 avec troncation des chiffres apr s la virgule d cimale La variabilit due certains facteurs tait peut tre n gative num riquement C tait le cas si la variabilit due ces facteurs tait tr s faible Dans ces cas le SD et le CV sont indiqu s comme tant 0 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 27 503797FR R v A Performance analytique sur le PANTHER System Performance analytique sur le PANTHER System Sensibilit analytique Les panels de la sensibilit contenant 0 1 TV mL dans une matrice d chantillons d urine une matrice d chantillons de de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCy
24. ER System est pr sent e au Tableau 6 Tableau 6 Distribution des valeurs de RLU de l APTIMA Trichomonas vaginalis Negative Control T moin n gatif APTIMA Trichomonas vaginalis et de l APTIMA Trichomonas vaginalis Positive Control T moin positif APTIMA Trichomonas vaginalis T moin Donn es statistiques ja D N 22 Moyenne 1 3 SD 0 99 N gatif M diane 1 0 Minimum 0 Maximum 5 CV 75 5 N 22 Moyenne 1 262 3 SD 45 89 Positif M diane 1 276 0 Minimum 1 168 Maximum 1 322 CV 3 6 RLU unit relative de lumi re Remarque L analyse est bas e sur la valeur de RLU rapport e par le logiciel La valeur de RLU rapport e est le nombre total de RLU mesur divis par 1 000 avec troncation des chiffres apr s la virgule d cimale APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 26 503797FR R v A Performance clinique sur le PANTHER System tude de la reproductibilit La reproductibilit de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay a t valu e sur le PANTHER System dans deux laboratoires externes am ricains et chez Gen Probe Les tests ont t r alis s l aide de deux lots de r actifs de test et par six op rateurs au total deux chaque centre chaque centre les tests ont t r alis s sur une p riode d au moins 6 jours Les chantillons du panel de reproductibilit ont t cr s l aide d chantillons d urine n gatifs dans du milieu de transport
25. RE O O 6 GEN PROBE APTiMA APTIMA Trichomonas vaginalis Assay PANTHER System usage diagnostique in vitro R serv l exportation am ricaine TABLE DES MATI RES Renseignements g n raux 2 Usag pr vu o Liaisons enetent hededeandhthe desde ire 2 R sum et explication du test 2 Principes de la proc dure 3 Avertissements et pr cautions 3 Conditions de conservation et de manipulation des r actifs 6 Pr l vement et conservation des chantillons 7 PANTHER System 224242244264 une nes detente dudit 9 R actifs et mat riel fournis 144444444444 die sirpa eng dar 9 Mat riel requis mais vendu s par ment 11 Mat ri len Opti n 3 2 42e rie een bebe pEi nee a aE Haute 12 Proc dure de test pour le PANTHER System 13 Remarques concernant la proc dure 16 Interpr tation du test QC R sultats patient 18 Limites sens nas omis netanacnie saunas eus auiounsan sant 19 Valeurs attendues 21 Pr valence stur uses ennui Do nn gel tes Pete Dame 21 Coefficient de pr vision positif et coefficient de pr vision n g
26. ROL TRICH servent de t moins pour les tapes de capture de cible d amplification et de d tection du test Selon les recommandations ou les exigences locales r gionales ou nationales en vigueur ou celles des organismes d accr ditation des t moins suppl mentaires pour la lyse cellulaire et la stabilisation de l ARN peuvent tre requis Le t moin positif APTIMA pour Trichomonas portant l tiquette PC CONTROL TRICH contient de ARNr de T vaginalis non infectieux Les t moins APTIMA Trichomonas vaginalis doivent produire les r sultats de tests suivants T moin RLU total x 1 000 R sultat T vaginalis NC Control TRICH 0 et lt 20 N gatif PC Control TRICH 2 500 et lt 2 400 Positif Si le nombre de RLU mesur sur le le PANTHER System est compris entre 0 et 999 un r sultat de 0 est rapport dans la colonne RLU total 000 dans le rapport de la s rie Les valeurs de RLU mesur es inf rieures 690 sont rapport es comme tant non valides Les valeurs de RLU entre 690 et 999 sont rapport es comme tant valides Chaque laboratoire devra mettre en place des proc dures de test t moin appropri es pour r pondre aux exigences de la r glementation CLIA paragraphe 493 1256 Remarque Pour toute assistance avec des t moins hors plage communiquer avec le Service technique de Gen Probe APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 18 503797FR R v A Limites A L utilisation de ce t
27. ants a La pr sence d un seul couvillon de pr l vement APTIMA bleu dans un tube de transport d chantillons sur couvillon unisexe b La pr sence d un seul couvillon de pr l vement APTIMA rose dans un tube de transport d chantillons sur couvillon vaginal c Un volume final d urine situ entre les lignes de remplissage noires d un tube de transport d chantillons d urine d L absence d un couvillon dans le tube de transport d chantillons APTIMA pour les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt Inspecter les tubes d chantillon avant de les charger dans le portoir a Si un tube d chantillon contient des bulles dans l espace situ entre le liquide et le bouchon centrifuger le tube pendant 5 minutes 420 RCF pour liminer les bulles b Si un tube d chantillon pr sente un volume inf rieur celui g n ralement observ lorsque les instructions de pr l vement ont t respect es centrifuger le tube pendant 5 minutes 420 RCF pour s assurer qu il ne reste pas de liquide dans le bouchon c Si le niveau de liquide dans un tube d chantillon d urine ne se situe pas entre les deux lignes indicatrices noires sur l tiquette l chantillon doit tre rejet Ne pas perforer un tube trop rempli d Si un tube d chantillon d urine contient un pr cipit chauffer l chantillon 37 C pendant une p riode maximale de 5 minutes Si le pr cipit n
28. atif pour des taux de pr valence hypoth tiques 21 Performance clinique sur le PANTHER System 23 tude clinique 23 Distribution des valeurs de RLU des t moins APTIMA Trichomonas vaginalis 26 tude de la reproductibilit 27 Performance analytique sur le PANTHER System 28 Sensibilit analytique 4 442 ies saene a E E a PA EOE hu E E ENE EE 28 R activit crois e en pr sence de microorganismes 28 Interf enter cadre A a E E a E r a o ins 29 Contamination de transfert 30 Stabilit des chantillons 30 Bibliographie 8008 s nad se se ir an naedu nu dtnseteus dues dant 30 1 503797FR R v A Renseignements g n raux Renseignements g n raux Usage pr vu L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay est un test qualitatif d amplification des acides nucl iques TAAN in vitro pour la d tection de l ARN ribosomique ARNr provenant de Trichomonas vaginalis destin aider au diagnostic de la trichomonase l aide du PANTHER System Ce test peut tre utilis pour tester les chantillons suivants provenant de femmes symptomatiques ou asymptomatiques couvillons endocervicaux pr lev s par un clinicien
29. chaque laboratoire Pour contr ler la contamination du laboratoire la proc dure suivante peut tre r alis e en utilisant l APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit pour chantillons endocervicaux et chantillons ur traux masculins sur couvillon 1 Inscrire les num ros correspondant aux zones tester sur des tubes de transport d couvillon 2 Enlever l couvillon de pr l vement d chantillons couvillon tige bleue avec caract res imprim s en vert de son emballage humecter l couvillon dans le milieu de transport des couvillons et passer l couvillon sur la zone d sign e en effectuant un mouvement circulaire 3 Ins rer imm diatement l couvillon dans le tube de transport 4 Casser avec pr caution la tige de l couvillon la ligne de cassure veiller viter les claboussures du contenu APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 16 503797FR R v A PANTHER System 5 Reboucher fermement le tube de transport des couvillons 6 R p ter les tapes 2 5 pour chaque zone tester 7 Tester les chantillons l aide de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTHER System 8 Des analyses compl mentaires doivent tre r alis es si un chantillon donne un r sultat positif Si les r sultats sont positifs consulter la section Interpr tation du test QC R sultats patient Pour des renseignements suppl mentaires sur le contr le de la contamination sp cifiques a
30. chomonas vaginalis Assay ont t r alis s dans 3 centres 2 laboratoires externes et Gen Probe selon les instructions de la notice Les caract ristiques de performance de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay ont t estim es par la comparaison des r sultats un algorithme de l tat d infection de la patiente Dans cet algorithme la d signation d un sujet comme tant infect ou non par T vaginalis tait bas e sur les r sultats des chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal test s par culture et ou par examen microscopique d une pr paration humide Au moins un des r sultats du test de r f rence devait tre positif pour tablir un tat de patiente infect e Les deux tests de r f rence devaient tre n gatifs pour tablir un tat de patiente non infect e Au total 651 chantillons d urine 689 chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal 737 chantillons pr lev s l aide d un couvillon endocervical et 740 chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt ont t test s l aide de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTHER System Les chantillons dont les r sultats initiaux taient non valides ont t retest s Un 1 chantillon d urine 11 chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal 24 chantillons pr lev s l aide d un couvillon endocervical et 1 chantillon de cytologie en milieu liqui
31. d chantillons d urine ou d chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt n gatifs avec milieu de transport d chantillons Les chantillons positifs du panel ont t cr s par l enrichissement de la matrice d urine ou de la matrice de solution de cytologie en milieu liquide PreservCyt de la quantit appropri e de lysat de T Vaginalis La concentration finale de T vaginalis variait de 0 002 1 trichomonade mL Le Tableau 7 pr sente pour chaque chantillon du panel les donn es de RLU en termes de moyenne d cart type standard deviation SD et de coefficient de variation CV entre les centres entre les op rateurs entre les lots entre les s ries l int rieur des s ries et globalement Total Le pourcentage de concordance avec les r sultats attendus est galement indiqu Les chantillons avec des r sultats valides ont t inclus dans les analyses Tableau 7 tude de reproductibilit de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Entre les Entre les Entre les A l int rieur Con Nombre centres op rateurs Entre lesdots s ries des s ries Total Conc N cord moyen y T cy y T deRLU sp Ce SD Ce SD Ce SD Ce SD Ce SD Ce chantillons de la matrice de solution de cytologie en milieu liquide PreservCyt N g 108 99 1 23 5 0 0 0 0 2 7 11 6 0 0 0 0 0 0 0 0 37 5 159 7 37 6 160 1 HN g 108 90 7 693 5 0 7 3 45 65 61 8 8 148 214 160 231 236 341 MPos 108 97 2 34
32. de dans la solution PreservCyt avaient des r sultats finaux non valides en raison d erreurs li es au mat riel ou au logiciel ces chantillons ont t exclus des analyses Le Tableau 3 montre la sensibilit la sp cificit le PPV et le NPV de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le PANTHER System ainsi que la pr valence de T vaginalis en fonction de l tat d infection dans chaque type d chantillon selon l tat symptomatique et globalement Le sujet tait class comme tant symptomatique s il avait signal des sympt mes Le sujet tait class comme tant asymptomatique s il n avait pas signal de sympt mes La pr valence tait plus lev e chez les femmes symptomatiques APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 23 503797FR R v A Performance clinique sur le PANTHER System Tableau 3 Caract ristiques de performance de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay en fonction de l tat symptomatique JE tat n vyp ppi yy pp de de sensibilit de sp cificit PPV NPV tilon SYMPtomatique pr v IC 95 IC 95 IC 95 IC 95 86 7 99 6 92 9 99 2 7 F ASympomadgue ARS STB ET 1283an Sa 62 1 96 3 97 9 99 9 71 6 99 8 97 8 99 9 95 8 98 7 92 0 99 4 b n k Urine Symptomatique 361 46 4 309 2 13 3 86 0 98 8 96 8 99 5 82 4 97 5 97 9 99 9 93 7 99 1 92 2 99 3 l 7 Tous J a AUS os 98 0 99 6 84 0 97 1 98 3 99 8 100 97
33. e Relative Light Units RLU Avertissements et pr cautions A usage diagnostique in vitro B Pour d autres avertissements et pr cautions sp cifiques consulter le PANTHER System Operator s Manual Manuel de l op rateur du PANTHER System Recommandations concernant les laboratoires C N utiliser que le mat riel de laboratoire jetable fourni ou recommand D Prendre les pr cautions de laboratoire habituelles Ne pas manger boire ou fumer dans les zones de travail d sign es Porter des gants jetables sans poudre des lunettes de protection et un sarrau de laboratoire pour manipuler les chantillons et les r actifs de la trousse Bien se laver les mains apr s avoir manipul les chantillons et les r actifs de la trousse APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 3 503797FR R v A Renseignements g n raux E Avertissement irritants et corrosifs viter que les solutions Auto Detect 1 et Auto Detect 2 entrent en contact avec la peau les yeux et les muqueuses En cas de contact de ces liquides avec la peau ou les yeux laver la zone touch e l eau En cas de d versement de ces liquides diluer le produit r pandu avec de l eau avant de l essuyer F Les surfaces de travail les pipettes et autre mat riel doivent tre r guli rement d contamin s l aide d une solution d hypochlorite de sodium une concentration de 2 5 3 5 0 35 0 5 M Recommandations concernant les chantillons G Le
34. e 15 et 30 C Ne pas r frig rer E Jeter tout r actif ou WTCR reconstitu non utilis au bout de 60 jours ou apr s la date de p remption du lot de r f rence selon le premier de ces deux v nements Les t moins restent stables jusqu la date indiqu e sur les flacons G Les r actifs restent stables pendant 72 heures lorsqu ils sont conserv s int gr s dans le PANTHER System H viter toute contamination crois e lors de la manipulation et de la conservation des r actifs Placer syst matiquement de nouveaux bouchons de r actifs sur tous les r actifs reconstitu s avant la conservation I Le r actif sonde et le r actif sonde reconstitu sont photosensibles Conserver ces r actifs l abri de la lumi re J Ne pas congeler les r actifs APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 6 503797FR R v A Renseignements g n raux Pr l vement et conservation des chantillons L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay est con u pour d tecter la pr sence de T vaginalis dans les chantillons pr lev s par un clinicien l aide d un couvillon endocervical ou vaginal les chantillons d urine f minins et les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt La performance du test sur des chantillons autres que ceux pr lev s l aide des trousses de pr l vement d chantillons suivants n a pas t valu e e APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit pour chantillo
35. e se remet pas en solution v rifier visuellement qu il n emp che pas la distribution de l chantillon Remarque Le non respect des tapes 4a 4c peut entra ner l coulement de liquide du bouchon du tube d chantillon Remarque I est possible de tester jusqu 3 aliquotes distinctes de chaque tube d chantillon Les tentatives de pipeter plus de 3 aliquotes du tube d chantillon peuvent entra ner des erreurs de traitement E Pr paration du syst me 1 2 Configurer le syst me selon les instructions du PANTHER System Operator s Manual Manuel de l op rateur du PANTHER System et de la section Remarques concernant la proc dure Charger les chantillons APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 15 503797FR R v A PANTHER System Remarques concernant la proc dure A T moins 1 Pour travailler correctement avec le logiciel PANTHER APTIMA Assay Software une paire de t moins est requise Le t moin positif APTIMA pour Trichomonas et le t moin n gatif APTIMA pour Trichomonas peuvent tre charg s dans n importe quelle position de portoir ou dans n importe quelle rang e du compartiment des chantillons sur le PANTHER System Le pipetage des chantillons de patient commence une fois que l une des deux conditions suivantes a t satisfaite a Une paire de t moins est en cours de traitement par le syst me b Des r sultats valides pour les t moins sont enregistr s sur le syst me 2 Une fois que
36. ecteur de niveau du PANTHER System 5 S S O Figure 1 Processus de reconstitution pour le PANTHER System 2 Pr paration de la solution de r actif de capture de cible wTCR a Associer les flacons de TCR et de TCR B appropri s b V rifier les num ros de lot des r actifs sur la fiche des codes barres du lot de r f rence pour s assurer que les r actifs appropri s de la trousse sont associ s c Ouvrir le flacon de TCR et poser le bouchon sur une surface de travail propre et couverte d Retirer le bouchon du flacon de TCR B et verser la totalit du contenu dans le flacon de TCR Il est normal qu une petite quantit de liquide reste dans le flacon de TCR B e Reboucher le flacon de TCR et faire tournoyer en douceur la solution pour m langer le contenu Eviter de faire de la mousse pendant cette tape f Inscrire les initiales de l op rateur lur ainsi que la date du jour sur l tiquette g Jeter le flacon de TCR B et son bouchon 3 Pr paration du r actif de s lection a V rifier le num ro de lot indiqu sur le flacon de r actif pour s assurer qu il correspond au num ro de lot indiqu sur la fiche des codes barres du lot de r f rence b Inscrire les initiales de l op rateur lur ainsi que la date du jour sur l tiquette Remarque M langer compl tement chacun des r actifs en les retournant en douceur avant de les charger sur le syst me Eviter de faire de la
37. elles comme des prot ines albumine de la bilirubine du glucose des c tones des globules rouges des nitrites de l urobilinog ne et des leucocytes L acide ac tique glacial a t test en l ajoutant la solution PreservCyt STM concentration finale de 10 Aucune interf rence n a t observ e avec les substances test es dans l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay l exception de la muqueuse gastrique porcine qui a pr sent un r sultat de signal inf rieur lorsqu elle est pr sente une concentration finale de 1 vol vol ou poids vol APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 29 503797FR R v A Stabilit des chantillons Contamination de transfert Pour montrer que le PANTHER System r duit au minimum le risque de r sultats faussement positifs d coulant d une contamination de transfert une tude analytique sur plusieurs jours a t men e au moyen de panels enrichis sur trois PANTHER Systems avec un lot de r actifs de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay L tude a utilis plus de 20 d chantillons de T vaginalis une concentration cible lev e contenant 10 000 TV mL qui ont t plac s parmi des chantillons n gatifs contenant du STM Au cours de l tude 698 chantillons une concentration cible lev e et 2 266 chantillons n gatifs ont t test s sur les trois PANTHER Systems On a constat 0 r sultat faussement positif pour un taux de contamination de transfert de 0
38. ement difficile et peut prendre jusqu 7 jours Il est pr f rable de proc der l inoculation imm diate dans le milieu de culture et des conditions d incubation ad quates sont requises en plus d examens microscopiques fr quents du milieu pour r ussir mettre les protozoaires en culture Il a t estim que la sensibilit de la m thode par culture varie de 38 82 comparativement aux m thodes mol culaires cause des probl mes de visualisation d un faible nombre d organismes ou de la motilit des protozoaires 6 7 On peut galement d tecter T vaginalis l aide d une pr paration humide en m langeant les s cr tions vaginales avec du s rum physiologique sur une lame et en examinant la lame au microscope Toutefois la sensibilit de la m thode humide varie entre 35 et 80 seulement comparativement la culture 7 La sensibilit de la m thode humide d pend en grande partie de l exp rience du microscopiste ainsi que de la dur e du transport des chantillons vers le laboratoire L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay est un test des acides nucl iques qui utilise les techniques de capture de cible d amplification m di e par la transcription Transcription Mediated Amplification TMA et du test de protection de l hybridation Hybridization Protection Assay HPA APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 2 503797FR R v A Renseignements g n raux Principes de la proc dure L APTIMA Trichomo
39. est est limit e au personnel ayant t form la proc dure Le non respect des instructions figurant dans cette notice peut donner lieu des r sultats erron s Les effets de l utilisation de tampons d une douche vaginale et des variables de pr l vement des chantillons sur la d tection de Trichomonas vaginalis n ont pas t valu s Les chantillons muco des positifs pour le TV peuvent pr senter une valeur de RLU r duite Afin d assurer le pr l vement d chantillons endocervicaux ad quats l exc s de mucus doit tre retir Le pr l vement des chantillons d urine des chantillons vaginaux sur couvillon et des chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt n est pas destin remplacer les examens cervicaux et les chantillons endocervicaux dans le diagnostic des infections urog nitales chez la femme Les patientes peuvent souffrir d une cervicite d une ur trite d une infection urinaire ou d une infection vaginale due d autres causes ou des infections concurrentes par d autres agents Ce test a t contr l uniquement l aide des types d chantillons indiqu s Sa performance avec d autres types d chantillons n a pas t valu e La fiabilit des r sultats d pend de la qualit du pr l vement des chantillons tant donn que le syst me de transport utilis pour ce test ne permet pas l valuation microscopique du caract
40. ht and preterm delivery The Vaginal Infections and Prematurity Study Group Sex Transm Dis 24 353 360 4 Sorvillo F J A Kovacs P Kerndt A Stek L Muderspach and L Sanchez Keeland 1998 Risk factors for trichomoniasis among women with HIV infection at a public clinic in Los Angeles County Implications for HIV prevention Am J Trop Med Hyg 58 495 500 5 Niccolai L M J J Kopicko A Kassie H Petros R A Clark and P Kissinger 2000 Incidence and predictors of reinfection with Trichomonas vaginalis in HIV infected women Sex Transm Dis 27 284 288 6 Nye M B J R Schwebke and B A Body 2009 Comparison of APTIMA Trichomonas vaginalis transcription mediated amplification to wet mount microscopy culture and polymerase chain reaction for diagnosis of trichomoniasis in men and women Am J Obstet Gynecol 200 188 e1 188 e7 7 Wendel K A E J Erbelding C A Gaydos and A M Rompalo 2002 Trichomonas vaginalis polymerase chain reaction compared with standard diagnostic and therapeutic protocols for detection and treatment of vaginal trichomoniasis Clin Infect Dis 35 5 576 580 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 30 503797FR R v A Bibliographie Gen Probe Incorporated San Diego CA 92121 USA Pour nous joindre aux tats Unis et dans d autres pays Service la client le 1 858 410 8002 customerservice gen probe com Service technique 1 858 410 8511 technicalsupport gen probe co
41. leur transfert Si une dur e de conservation sup rieure est n cessaire conserver l chantillon d urine trait lt 20 C pendant une p riode maximale de 24 mois apr s le transfert 3 chantillons collect s dans la solution PreservCyt a Conserver et transporter l chantillon dans la solution PreservCyt entre 2 et 30 C pendant une p riode maximale de 30 jours b Les chantillons collect s dans la solution PreservCyt doivent tre transf r s dans un tube de transfert d chantillons APTIMA conform ment aux instructions dans la notice de l APTIMA Specimen Transfer Kit trousse de transfert d chantillons c Apr s avoir t transf r s dans un tube de transfert d chantillons APTIMA les chantillons peuvent tre conserv s pendant 14 jours suppl mentaires entre 15 et 30 C ou pendant 30 jours entre 2 et 8 C d Si une dur e de conservation sup rieure est n cessaire l chantillon dans la solution PreservCyt ou l chantillon de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 7 503797FR R v A Renseignements g n raux dilu dans le tube de transfert d chantillons peut tre conserv lt 20 C pendant une p riode maximale de 24 mois apr s le transfert C Conservation des chantillons apr s les tests 1 Les chantillons qui ont t test s doivent tre conserv s la verticale dans un portoir 2 Les tubes de transport d
42. llet de reconstitution dans l ouverture de la fiole Figure 1 Etape 1 Ouvrir le flacon de solution de reconstitution correspondante et poser le bouchon sur une surface de travail propre et couverte Tout en tenant le flacon de solution de reconstitution au dessus de la paillasse ins rer fermement l autre extr mit du collet de reconstitution dans l ouverture du flacon Figure 1 Etape 2 Retourner lentement les flacons assembl s Laisser la solution s couler depuis le flacon vers la fiole en verre Figure 1 Etape 3 Faire tournoyer en douceur la solution dans le flacon pour la m langer viter de faire de la mousse en faisant tournoyer le flacon Figure 1 Etape 4 Attendre que le r actif lyophilis passe en solution puis retourner nouveau les flacons assembl s en les inclinant un angle de 45 pour minimiser la formation de mousse Figure 1 tape 5 Laisser la totalit du liquide retourner dans le flacon en plastique Enlever le collet de reconstitution et la fiole en verre Figure 1 tape 6 Reboucher le flacon en plastique Inscrire les initiales de l op rateur ainsi que la date de reconstitution sur l tiquette Figure 1 Etape 7 Jeter le collet de reconstitution et la fiole en verre Figure 1 tape 8 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 13 503797FR R v A PANTHER System Avertissement viter de faire de la mousse en reconstituant les r actifs La mousse interf re avec le d t
43. m Num ro sans frais partir des tats Unis et du Canada Service la client le 1 800 523 5001 Service technique 1 888 484 4747 Wwww gen probe com HOLOGIC GEN PROBE APTIMA DTS PANTHER PRESERVCYT THINPREP TIGRIS et les logos qui leur sont associ s sont des marques de commerce ou des marques d pos es de Hologic Inc et ou de ses filiales aux tats Unis et ou dans d autres pays KOVA TROL est une marque commerciale de Hycor Biomedical Inc Toutes les autres marques de commerce pouvant appara tre dans la pr sente notice appartiennent leurs propri taires respectifs 2009 2013 Gen Probe Incorporated 503797FR R v A 2013 04 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 31 503797FR R v A
44. magnus 1x108 CFU mL Dientamoeba fragilis 1x10 CFU mL Prevotella bivia 1x10 CFU mL Enterobacter cloacae 1x108 CFU mL Propionibacterium acnes 1x108 CFU mL Enterococcus faecalis 1x108 CFU mL Proteus vulgaris 1x108 CFU mL Escherichia coli 1x106 CFU mL Pseudomonas aeruginosa 1x108 CFU mL Gardnerella vaginalis 1x108 CFU mL Staphylococcus aureus 1x108 CFU mL Haemophilus ducreyi 1x106 CFU mL Staphylococcus epidermidis 1x108 CFU mL Virus de l herp s simplex 2x10 TCID5o ML Streptococcus agalactiae 1x106 CFU mL Virus de l herp s simplex II 2x105 TCIDso mL Trichomonas tenax 1x106 cellules mL VIH 1 2 5x106 copies mL Ureaplasma urealyticum 1x108 CFU mL Interf rence Les substances suivantes ont t ajout es individuellement au milieu STM et la solution PreservCyt dans du STM une concentration finale de 1 vol vol ou poids vol lubrifiants personnels d sodorisants personnels spermicides antifongiques hormones vaginales mucus gastrique porcin sperme de 25 donneurs et sang total concentration finale de 10 Les effets des m tabolites de l urine ont t test s par l ajout de KOVA Trol I High Abnormal w Urobilinogen Urinalysis Control T moin anormalement lev l analyse urinaire de l urobilinog ne KOVA Trol 1 dilu dans du milieu de transport d urine urine transport medium UTM la place de l urine Ce produit t moin pour analyse urinaire base d urine humaine contient des substances interf rentes potenti
45. nas vaginalis Assay fait appel aux techniques de capture de cible d amplification m di e par la transcription TMA et du test de protection de l hybridation HPA Les chantillons sont pr lev s et transf r s dans leurs tubes de transport d chantillon respectifs La solution de transport dans ces tubes lib re ARNr cible et l emp che de se d grader pendant la conservation Lorsque l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay est effectu au laboratoire l ARNr cible est isol des chantillons l aide d un oligom re de capture sp cifique et de microparticules magn tiques dans le cadre d une m thode appel e capture de cible L oligom re de capture contient une s quence compl mentaire une r gion sp cifique de la mol cule cible de m me qu une cha ne de r sidus de d soxyad nosine Lors de l tape d hybridation la partie de l oligom re de capture sp cifique la s quence se fixe sur une r gion sp cifique de la mol cule cible Le complexe oligom re cible de capture est ensuite captur et pr cipit hors de la solution par la baisse de la temp rature de la r action jusqu la temp rature ambiante Cette baisse de temp rature permet l hybridation de se produire entre la r gion d soxyad nosine de l oligom re de capture et les mol cules poly d soxythymidines li es par covalence aux particules magn tiques Les microparticules y compris la mol cule cible captur e qui y est fix e sont attir
46. ns endocervicaux et chantillons ur traux masculins sur couvillon e APTIMA Urine Collection Kit pour chantillons d urine masculins et f minins e APTIMA Vaginal Swab Specimen Collection Kit e APTIMA Specimen Transfer Kit utiliser avec les chantillons gyn cologiques collect s dans la solution PreservCyt A Instructions de pr l vement 1 Consulter la notice du test correspondant la trousse de pr l vement d chantillons pour des instructions de pr l vement sp cifiques B Transport et conservation des chantillons avant le test 1 chantillons sur couvillon a Apr s le pr l vement transporter et conserver l couvillon dans le tube de transport d chantillons sur couvillon entre 2 et 30 C jusqu la r alisation du test b Tester les chantillons dans les 60 jours qui suivent leur pr l vement Si une dur e de conservation sup rieure est n cessaire congeler le tube de transport d chantillons lt 20 C pendant une p riode maximale de 24 mois 2 chantillons d urine a Les chantillons d urine qui sont encore dans le r cipient de pr l vement primaire doivent tre transport s au laboratoire une temp rature entre 2 et 30 C Transf rer l chantillon d urine dans le tube de transport d chantillons d urine APTIMA dans les 24 heures qui suivent son pr l vement b Conserver les chantillons d urine trait s entre 2 et 30 C et les tester dans les 30 jours suivant
47. olution aqueuse contenant des conservateurs ER APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reconstitution 1x11 1mL 1x6 3mL Solution solution de reconstitution du r actif enzymatique Solution tamponn e HEPES contenant un surfactant et du glyc rol PR APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reconstitution 1x354mL 1x15 2mL Solution solution de reconstitution de la sonde Solution tamponn e de succinate contenant lt 5 de d tergent S APTIMA Trichomonas vaginalis Selection Reagent 1x108mL 1x43 0mL r actif de s lection Solution tamponn e de borate 600 mM contenant un surfactant TCR APTIMA Trichomonas vaginalis Target Capture Reagent 1x54 0mL 1x 26 0 mL r actif de capture de cible Solution tamponn e contenant des oligom res de capture et des particules magn tiques Collets de reconstitution 3 3 Fiche des codes barres du lot de r f rence 1 fiche 1 fiche APTIMA Trichomonas vaginalis Controls Kit trousse de t moins conserver entre 2 et 8 C d s la r ception Symbole Composant Quantit NC APTIMA Trichomonas vaginalis Negative Control t moin n gatif 5x1 7 mL Acide nucl ique non cible non infectieux dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent PC APTIMA Trichomonas vaginalis Positive Control t moin positif 5x 1 7 mL Organismes de Trichomonas vaginalis non infectieux dans une solution tamponn e contenant lt 5 de d tergent APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 1
48. onsentants dans le cadre d une tude clinique multicentrique prospective ant rieure de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sur le TIGRIS DTS System Des femmes symptomatiques et des femmes asymptomatiques provenant de 9 centres cliniques des tats Unis notamment des cliniques d obst trique et de gyn cologie de planification familiale et de traitement des MTS ont t inscrites Un chantillon de premier jet d urine 3 chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal 1 chantillon pr lev l aide d un couvillon endocervical et 1 chantillon de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt ont t collect s de chaque sujet Tous les chantillons ont t chantillons pr lev s par un clinicien l exception des chantillons d urine Les chantillons de cytologie en milieu liquide dans la solution PreservCyt ont t pr lev s l aide d un dispositif de type balai ou d une spatule et d une brosse cytologique Deux des chantillons pr lev s l aide d un couvillon vaginal ont t test s l aide d un syst me de culture commercial et par l examen microscopique d une pr paration humide pour tablir l tat d infection Les chantillons restants ont t pr par s pour le test APTIMA Trichomonas vaginalis Assay selon les instructions de la notice de la trousse de pr l vement d chantillon APTIMA appropri e Les tests sur le PANTHER System l aide de l APTIMA Tri
49. s dates de p remption figurant sur les trousses de transfert d chantillons concernent le pr l vement et le transfert des chantillons et non les tests des chantillons Les chantillons pr lev s transf r s tout moment avant ces dates de p remption sont valides pour les tests condition d avoir t transport s et conserv s conform ment la notice du test m me si la date de p remption sur le tube de transfert est d pass e H Les chantillons peuvent tre infectieux Suivre les pr cautions universelles en effectuant ce test Le responsable du laboratoire devra avoir tabli des m thodes de manipulation et d limination des d chets ad quates Seul le personnel ayant re u une formation ad quate pour manipuler des substances infectieuses devra tre autoris effectuer cette m thode diagnostique I viter toute contamination crois e lors des tapes de manipulation des chantillons Les chantillons peuvent contenir un taux tr s lev d organismes Veiller viter tout contact entre les diff rents r cipients d chantillons et ne pas passer au dessus d un r cipient ouvert en jetant le mat riel usag Changer de gants en cas de contact avec l chantillon J Si le bouchon d un tube de transfert APTIMA venait tre perfor le liquide pourrait s couler dans certaines conditions Consulter la section Proc dure de test appropri e pour de plus amples renseignements K Une fois l urine
50. t et une matrice d chantillons sur couvillon vaginal 120 r plicats par matrice ont t pr par s avec deux souches de T vaginalis une souche sensible au m tronidazole et une souche r sistante au m tronidazole Les tests ont montr une positivit de 100 dans toutes les matrices d chantillons et dans les deux souches de T vaginalis R activit crois e en pr sence de microorganismes Sp cificit La sp cificit de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay a t valu e par la r alisation de tests sur divers microorganismes notamment la flore normale de l appareil g nito urinaire des organismes opportunistes et des organismes troitement apparent s Les tests ont t r alis s dans du milieu de transport d chantillons Specimen Transport Medium STM et dans la solution PreservCyt dans du STM avec 25 r plicats de chaque isolat La liste des organismes et les concentrations test es sont fournies au Tableau 8 Aucun des organismes test s n a pr sent de r activit crois e ni d effet significatif sur la sp cificit de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Sensibilit La sensibilit de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay a t valu e par l analyse des m mes organismes Tableau 8 dans du STM ou dans la solution PreservCyt dans du STM enrichi de lysat de T vaginalis jusqu une concentration finale de 0 01 TV mL 25 r plicats de chaque isolat La sensibilit de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assa
51. ttoyer les surfaces de travail l aide d une solution d hypochlorite de sodium une concentration de 2 5 3 5 0 35 0 5 M Laisser la solution d hypochlorite de sodium agir sur les surfaces pendant au moins 1 minute puis rincer l eau Ne pas laisser s cher la solution d hypochlorite de sodium Couvrir la surface de la paillasse sur laquelle les r actifs et les chantillons seront pr par s avec des couvre paillasses absorbants propres avec envers plastifi B Reconstitution des r actifs pr paration d une nouvelle trousse Remarque La reconstitution des r actifs devra tre effectu e avant d entreprendre toute t che sur le PANTHER System 1 Afin de reconstituer le r actif sonde le r actif d amplification et le r actif enzymatique combiner les flacons de r actif lyophilis et de solution de reconstitution Si elles sont r frig r es laisser les solutions de reconstitution parvenir temp rature ambiante avant de les utiliser a Faire correspondre chaque solution de reconstitution avec son r actif lyophilis S assurer que la solution de reconstitution et le r actif ont des couleurs d tiquettes correspondantes avant de fixer le collet de reconstitution V rifier les num ros de lot sur la fiche des codes barres du lot de r f rence pour s assurer que les r actifs sont associ s correctement Ouvrir la fiole de r actif lyophilis et ins rer fermement l extr mit encoche du co
52. u PANTHER System consulter le Service technique de Gen Probe APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 17 503797FR R v A Interpr tation du test QC R sultats patient Interpr tation du test QC R sultats patient A Interpr tation du test Les r sultats des tests sont interpr t s automatiquement par le logiciel APTIMA Trichomonas Assay du PANTHER System Un r sultat de test peut tre n gatif positif ou non valide en fonction du nombre total de RLU obtenu l tape de d tection voir ci dessous Un r sultat de test peut tre non valide si la valeur de RLU se situe hors des plages normalement pr vues Si les premiers r sultats du test sont non valides le test doit tre refait Rapporter le premier r sultat valide Interpr tation du test RLU total x 1 000 N gatif 0 lt 100 Positif 100 lt 2 400 Non valide 0 ou 2 2 400 e E Si le nombre de RLU mesur sur le le PANTHER System est compris entre 0 et 999 un r sultat de O est rapport dans la colonne RLU total 000 dans le rapport de la s rie Les valeurs de RLU mesur es inf rieures 690 sont rapport es comme tant non valides Les valeurs de RLU entre 690 et 999 sont rapport es comme tant valides R sultats du contr le de qualit et acceptabilit Le t moin n gatif APTIMA pour Trichomonas portant l tiquette NC CONTROL TRICH et le t moin positif APTIMA pour Trichomonas portant l tiquette PC CONT
53. y n a pas t influenc e de mani re significative par la pr sence des microorganismes test s sauf en pr sence de Trichomonas tenax et de Pentatrichomonas hominis o des r sultats de signal inf rieurs ont t observ s Toutefois T tenax est un commensal de la cavit buccale et Pentatrichomonas hominis est un commensal du gros intestin APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 28 503797FR R v A Performance analytique sur le PANTHER System Tableau 8 Microorganismes test s l aide de l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Microorganisme Concentration Microorganisme Concentration Acinetobacter lwoffi 1x106 CFU mL HPV 16 2 5x10 copies mL Actinomyces israelii 1x106 CFU mML HPV 6 2 5x106 copies mL Atopobium vaginae 1x106 CFU mL Klebsiella pneumoniae 1x10 CFU mL Bacteroides fragilis 1x106 CFU mL Lactobacillus acidophilus 1x108 CFU mL Bifidobacterium adolescentis 1x108 CFU mL Lactobacillus crispatus 1x108 CFU mL Campylobacter jejuni 1x108 CFU mL Listeria monocytogenes 1x10 CFU mL Candida albicans 1x106 CFU mL Mobiluncus curtisii 1x108 CFU mL Chlamydia trachomatis 1x108 IFU mL Mycoplasma genitalium 2 5x106 copies mL Clostridium difficile 1x106 CFU mL Mycoplasma hominis 1x108 CFU mL Corynebacterium genitalium 1x10 CFU mL Neisseria gonorrhoeae 1x10 CFU mL Cryptococcus neoformans 1x108 CFU mL Pentatrichomonas hominis 1x106 cellules mL Cytom galovirus 2x105 TCID5o mL Peptostreptococcus
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