ParaPak® PLUS SAF ParaPak® PLUS SAF
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1. 2 Meridian Bioscience Europe ParaPak PLUS SAF REF 950205 50 LREF 950220 200 IVD In vitro diagnostic medical device INTENDED USE The integrated Para Pak PLUS System provides a standardized procedure for the routine collection transportation preservation filtration and examination of stool specimens for intestinal parasites Kit systems are designed for easy use and afford an excellent means of minimizing the adverse effects of delay in specimen transportation EXPLANATION Diagnosis of intestinal parasitic disease is confirmed by recovery and identification of helminth eggs and larvae or protozoan trophozoites and cysts in the clinical parasitology laboratory Timely collection and transportation of fresh specimens to the laboratory cannot always be insured Workload conditions and priorities in clinical laboratories frequently do not allow immediate examination of fresh specimens Procedures like incubation refrigeration or freezing of stool samples will not guarantee the recovery of all diagnostic stages of all parasites In 1972 Junod described sodium acetate acetic acid formalin SAF fixative as a multipurpose fixative preservative permitting the recovery and identification of all diagnostic stages of intestinal parasites In a study of over 900 specimens Scholten and Yang confirmed the suitability of SAF fixative for routine use in the clinical parasitology lab as an alterna2. PRINCIPES PHYSICO CHIMIQUES Le SAF constitue un fizateur conservateur polyvalent convenant de nombreuses m thodes parasitologiques Un examen direct peut tre effectu en diluant une goutte de suspension fix e au SAF dans du s rum physiologique ou de l iode Les chantillons conserv s dans du SAF permettent aussi un montage d finitif avec coloration et des proc dures de concentration pour un examen direct COMPOSANTS Fixateur SAF Formald hyde 1 6 Alcool isopropylique anhydre 7 45 Acide ac tique 2 14 Ac tate de sodium 1 53 Eau Chaque kit est constitu par un flacon contenant 13 ml de fixateur SAF et d une spatule pour la r colte des chantillons Un mode d emploi simple est galement fourni pour les malades et le personnel soignant RECOLTE DE L ECHANTILLON 1 Le patient devra tre pr venu de ne pas prendre d anti acides de baryum de bismuth de traitements antidiarrh iques ou de laxatifs huileux avant la r colte de l chantillon 2 Pour assurer l isolement des l ments parasitaires qui sont mis de mani re intermittente et en quantit variable trois chantillons espac s de quelques jours seront examin s Dans le cas de patients hospitalis s il est pr f rable de r colter tous les passages f caux sur une dur e d finie afin d viter un s jour prolong l hopital 3 L chantillon sera r colt de pr f rence dans un bassin de lit mais ne devra pas tre contamin par l urine
3. 411 6211 66 Fax 31 0 411 6248 41 Email info bnl meridianbioscience eu Key guide to symbols Guide des symboles Guida ai simboli Guia de simbolos Erlauterung der graphischen symbole Expiry date Date de p remption Scadenza Fecha de caducidad Haltbarkeitsdatum LOT Lot number Num ro de lot Numero di lotto N mero de lote Chargenbezeichnung IVD For in vitro diagnostic use Usage in vitro Per uso diagnostico in vitro Uso diagn stico in vitro In vitro Diagnosticum This product fulfills the requirements of Directive 98 79 EC on in vitro diagnostic medical devices Ce produit r pond aux exigences de la Directive 98 79 CE relative aux dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro Questo prodotto soddisfa i requisti della Direttiva 98 79 CE sui dispositivi medico diagnostici in vitro Este producto cumple con las exigencias de la Directiva 98 79 CE sobre los productos sanitarios para diagn stico in vitro Dieses Produkt entspricht den Anforderungen der Richtlinie ber In Vitro Diagnostica 98 79 EG CN CIN Catalogue number R f rence article Codice dell articolo N mero de cat logo Artikelnummer Please read pack insert Lire attentivement le mode d emploi Leggere il foglietto informativo Leer instrucciones de uso Bitte Packungsbeilage beachten Manufactured by Fabriqu par Prodotto da Fabricado por Hergestellt von Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour n tests Con
4. Il est galement possible d installer un grand sac plastique ou un film d emballage sur le si ge des toilettes et d y mettre l chantillon Bien agiter le r cipient pendant quelques secondes avant de l ouvrir Une zone appropri e des selles par ex Liquide visqueuse sanguinolente sera choisie pour pr lever l chantillon A l aide de la spatule remplir le collecteur d chantillon attach au bouchon du flacon Ajouter une dose de spatule dans chaque r cipient Cela correspondra environ 1 ml ou 1 g d chantillon Ne pas mettre plus que ce que la cavit du collecteur peut contenir Les chantillons liquides devront tre collect s l aide d une petite cuill re 6 Fermer le bouchon et agiter vigoureusement pour m langer correctement l chantillon Quand le m lange est effectu l chantillon doit pr senter un aspect homog ne 7 Etiqueter de mani re appropri e et envoyer les flacons au laboratoire HE TRAITEMENT DES ECHANTILLONS Le syst me Para Pak PLUS se pr tre une grande vari t de proc dures en usage courant La liste suivante n est pas exhaustive et d autres possibilit s peuvent tre trouv es dans la litt rature 1 Examen macroscopique noter la pr sence de sang de vers de mucus ou de proglottides 2 Examen microscopique direct de l chantillon conserv dans du SAF a Placer une lame de verre propre sur une feuille de papier journal b D poser une goutte de s
5. bario bismuto medicaci n antidiarreica o laxantes lubrificantes antes de la toma de muestra 2 Para asegurar la recuperaci n de elementos parasitarios los cuales se presentan intermitentemente y en n mero fluctuante se deben examinar tres muestras espaciadas unos pocos d as entre ellas En el caso de pacientes hospitalizados se aconseja que todas las muestras fecales sean recogidas en un per odo de tiempo designado para as evitar estancias prolongadas en el hospital 3 La muestra se recoge de modo ideal con una cu a pero no debe estar contaminada con orina De manera alternativa se puede colocar en el inodoro abierto una bolsa de pl stico grande o un pl stico envolvente y depositar as la muestra en la bolsa 4 Agitar bien el contenedor durante unos segundos antes de abrirlo 5 Se deber a seleccionar y tomar la muestra de un rea apropiada de las heces p e sanguinolenta viscosa Utilice la esp tula para llenar el recolector de muestra incorporado en el tap n del vial Se a ade una cucharada llena a cada contenedor Eso significar aproximadamente 1 ml o 1 gramo de muestra No a ada m s muestra de la que quepa en la cavidad del recolector Las muestras l quidas deber an ser recogidas utilizando una cuchara peque a 6 Apriete bien el tap n y agite el vial firmemente para asegurar que la muestra se mezcla adecuadamente La muestra deber a aparecer homog nea cuando la mezcla se ha completado 7 Etiquete
6. Il paziente deve essere avvisato di non assumere antiacidi bario bismuto farmaci antidiarroici o lassativi oleosi prima della raccolta del campione 2 Per assicurare l evidenziazione degli elementi parassitari che sono emessi in modo discontinuo ed in quantit variabili si consiglia di esaminare tre campioni di feci emessi ad alcuni giorni di distanza l uno dall altro 5 10 3 Il campione teoricamente dovrebbe essere raccolto in una padella o in altro contenitore a bocca larga ma non deve essere contaminato con le urine In alternativa si pu inserire un foglio di pellicola di materiale plastico sotto il sedile del water per consentire la raccolta del campione 4 Prima di prelevare il campione agitare vigorosamente il contenitore 5 Si raccomanda di raccogliere un campione significativo di feci ad es dalle aree che si presentano sanguinolente mucoidi o acquose utilizzando la spatola di legno fornita e di riempire una sola volta il dispositivo per il prelevamento standardizzato del campione che si trova attaccato al coperchio del contenitore in questo modo sar prelevato circa 1 ml 0 1 gr di feci Non aggiungere materiale in eccesso a quanto la cavit del dispositivo di prelievo pu contenerne Le feci liquide possono essere raccolte con un cucchiaino 6 Richiudere bene il contenitore ed agitarlo vigorosamente per ottenere un adeguata miscelazione del campione Alla fine dell operazione il campione dovrebbe avere un as
7. di campione secondo la densit della sospensione Aggiungere circa 10 ml di soluzione fisiologica e mescolare con cura Centrifugare per 10 15 minuti a 500xg Eliminare il surnatante Si dovrebbero ottenere 0 5 1 0 ml di sedimento Se necessario rimuovere il sedimento o aggiungere altro materiale filtrato e ripetere i punti 3 e 4 6 Mescolare il sedimento e preparare lo striscio per la colorazione permanente seguendo la seguente metodica a Aggiungere una goccia di albumina di Mayer inclusa nella confezione ad un vetrino pulito e rimuoverla immediatamente con un tovagliolo di carta in modo che ne rimanga soltanto un sottile velo sul vetrino NOTA se il vetrino presenta una colorazione rossastra di fondo al termine del processo di decolorazione ci significa che troppa albumina rimasta sul vetrino b Aggiungere una piccola quantit di sedimento al vetrino ricoperto di albumina c Distribuire il campione sul vetrino in modo da ottenere una pellicola di spessore variabile d Lasciar asciugare il preparato per 5 10 minuti a temperatura naa on ambiente e Immergere il vetrino in etanolo al 70 per circa 30 minuti per coagulare l albumina f Procedere con la colorazione permanente prescelta La colorazione Tricromica di Wheatley Catalogo Meridian n 400101 particolarmente indicata Trascurare i punti da 1 a 3 della metodica descritta nel relativo foglietto di istruzioni allegato B Utilizzo del rimane
8. los viales adecuadamente y m ndelos al laboratorio PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA El Sistema integrado Para Pak PLUS se presta a una gran variedad de procedimientos de uso com n La siguiente proposici n no es exhaustiva y se pueden encontrar alternativas en la literatura 1 Examen Bruto Registrar la presencia de sangre lombrices mucosidad o progl tidos Examen microsc pico directo desde la muestra conservada en SAF Coloque un portaobjetos limpio sobre la hoja de un peri dico A ada una gota de salina se puede emplear yodina si se desea al porta A ada una muestra representativa del esp cimen conservado en SAF a la gota de salina y mezcle cuidadosamente El peri dico debe ser legible a trav s del porta Coloque un cubreobjetos sobre la suspensi n y exam nela de inmediato Portas permanentes y proceso de concentraci n sedimentaci n formalina ter o acetato de etilo Sr wo A Preparaci n del porta permanente Agite la muestra fijada en SAF suavemente Saque el tap n de la punta y coloque la punta dentro de un tubo de centr fuga Exprima el vial suavemente 2 Filtre aproximadamente 2 3 ml de la muestra dependiendo de la densidad de la suspensi n A ada unos 10 ml de salina fisiol gica al tubo y ag telo suavemente Centrifugue a 500 x g durante 10 15 minutos Decante el sobrenadante Deber a quedar aproximadamente entre 0 5 y 1 0 ml de sedimento Si fuera necesario saque el sedimento o a ada
9. m s muestra filtrada y repita los pasos 3 y 4 6 Agite el sedimento y prepare la preparaci n permanente del siguiente modo a Dispense una gota peque a de alb mina de Mayer suministrada con el kit sobre un portaobjetos limpio y s quela de inmediato con la ayuda de papel de filtro de modo que quede solamente una l mina fina y uniforme sobre el porta NOTA Si el porta aparece de un tono rojizo despu s del proceso decolorante es una indicaci n de que ha quedado demasiada alb mina sobre el porta b A ada una peque a cantidad del sedimento suspendido sobre el porta tratado con alb mina c Extienda la mezcla por el porta con el fin de que aparezca una l mina de grosor variable d Deje secar el porta durante 5 10 minutos a temperatura ambiente e Sumerja el porta en etanol 70 durante 30 minutos aproximadamente para as coagular la alb mina f Proceda con el proceso de tinci n de elecci n La Tricr mica de Wheatley referencia Meridian 400101 funciona particularmente bien con este m todo Omita los pasos 1 3 de la secci n de tinci n indicados en las instrucciones de uso que van dentro del envase de la Tricr mica de Wheatley si va a utilizar este colorante cao B El sedimento restante utilicelo para el proceso de concentraci n del siguiente modo Afiada 1 gota de detergente 2 A ada 3 ml de acetato de etilo despu s tape y agite el tubo vigorosamente durante unos segundos Saque el tap n cuidadosa
10. sticas de todos los par sitos En 1972 Junod describi el fijador sodio acetato ac tico cido formalina SAF como un fijador conservante multivalente que permite la recuperaci n e identificaci n de todas las fases diagn sticas de los par sitos intestinales En un estudio con unas 900 muestras Scholten y Yang confirmaron que el fijador SAF era adecuado como una alternativa a otros fijadores para el uso en la rutina del laboratorio de parasitolog a cl nica El uso adecuado del Sistema Para Pak PLUS asegura al parasit logo que las fases diagn sticas de los par sitos intestinales ser n conservadas si est n presentes en la materia fecal PRINCIPIOS QU MICOS Y F SICOS El SAF es un fijador y conservante adecuado para una variedad de procedimientos en parasitolog a Se puede realizar un examen directo diluyendo en salina o en yodina una gota de suspensi n conservada en SAF Las muestras conservadas en SAF pueden ser te idas permanentemente y tambi n pueden ser concentradas para un examen directo COMPONENTES Fijador SAF Formaldeh do 1 6 Alcohol Isoprop lico Anhidro 7 45 cido Ac tico 2 14 Acetato S dico 1 53 y agua Cada kit consiste en un vial que contiene 13 ml de formalina 10 como conservante y una esp tula para toma de muestra Tambi n se proporcionan instrucciones simples para los pacientes y el personal sanitario TOMA DE MUESTRA 1 Los pacientes deben ser prevenidos contra el uso de anti cidos
11. ei campioni freschi di feci Le tecniche d incubazione refrigerazione o congelamento in questi casi non garantiscono la conservazione di tutte le forme diagnostiche di ogni parassita Nel 1972 Junod descrisse una soluzione di sodio acetato acido acetico formalina SAF come un fissativo versatile che consentiva l individuazione e l identificazione di tutte le forme diagnostiche dei parassiti intestinali In uno studio condotto su pi di 900 campioni Scholten e Yang hanno confermato che il SAF poteva essere considerato come una valida scelta ad altri fissativi nella routine del laboratorio di parassitologia clinica Il sistema Para Pak PLUS garantisce al laboratorista la conservazione ottimale delle forme diagnostiche dei parassiti intestinali eventualmente presenti nel materiale fecale campioni fissati in SAF possono essere esaminati direttamente oppure colorati per mezzo di colorazioni permanenti o concentrati per evidenziare uova e larve di Elminti e cisti di Protozoi COMPOSIZIONE Fissativo SAF Formaldeide 1 6 Alcool isopropilico anidro 7 45 Acido acetico 2 14 Acetato di sodio 1 53 Acqua distillata q b Il prodotto costituito da un contenitore con 13 ml di fissativo SAF e da una spatola di legno per la raccolta del campione ll sistema amp fornito con un Foglietto di istruzioni per il corretto prelevamento delle feci da parte del personale infermieristico o da parte del paziente stesso RACCOLTA DEI CAMPIONI 1
12. el st werden Danach k nnen die oberen drei Schichten verworfen werden W hrend das R hrchen nach unten gehalten wird kann man mit einem Baumwolltupfer Debris entefernen Dies ist besonders wichtig um L sungmitteltropten im Pr parat zu vermeiden und gute Ergebnisse bei der Verwendung von Ethylavetat zu erzielen 6 Das Sediment wird in einigen Tropfen physiologischer Kochsalzl sung oder 10 igem Formalin aufgenommen Die Verd nnung sollte so eingestellt werden daB Zeitungspapier unter der Auftragstelle lesbar ist Sollte dies nicht der Fall sein kann physiologische Kochsalzl sung oder Formalin zugegeben werden 7 Untersuchungsmaterial das mit Kochsalz oder Jodl sung aufgenommen wurde eignet sich am besten f r eine mikroskopische Beurteilung Achtung Falls das Sediment Punkt 6 zu viel Debris enth lt kann ein weiterer Waschschritt durchgef hrt werden Dazu wird das Sediment in 7 ml Wasser aufgenommen gesch ttelt und bei 500 x g abzentrifugiert Man verwirft den Uberstand und f hrt bei Punkt 6 weiter Gesundheits und Sicherheitsanweisungen LA Haut und Schleimhautkontakt mit der Fixierl sung sind zu vermeiden Sollte es jedoch zu einem Kontakt kommen dann die betroffene Stelle gr ndlich unter flieBendem Wasser abwaschen Bei Hautver nderungen mu ein Arzt aufgesucht werden 2 Die Fixierl sung ist giftig Falls die L sung aufgeommen wurde sofort Wasser nachtrinken und einen Arzt konsultieren 3 Der unfizierte St
13. l 2 Da die Parasiten in unterschiedlicher Menge ausgeschieden werden m ssen zur Erzielung sicherer Untersuchungsergebnisse drei Stuhlproben von verschiedenen auseinanderliegenden Tagen untersucht werden Bei Krankenhauspatienten wird eine Probenentnahme von allen St hlen ber einen bestimmten Zeitraum empfohlen um einen weiteren Krankenhausaufenthalt zu vermeiden 3 F r die Stuhlentanhme ist eine Bettpfanne am geeignetsten Der Stuhl darf jedoch nicht mit Urin in Ber hrung kommen Man kann alternativ auch eine Plastikt te oder eine Kunststoff Folie in die Toiletten ffnung legen um den Stuhl darin aufzufangen 4 Der Beh lter wird einige Sekunden vor dem Offnen gesch ttelt 5 Es sollte eine geeignete Stelle blutig schleimig w ssrig im Stuhl ausgew hlt werden Mit dem Spatel wird der Kolleltor am Beh lterdeckel gef llt Beh lter werden so gef llt da sich jeweils ca 1 Gramm 1 ml Stuhlprobe darin befindet Es sollte nicht mehr Stuhl eingef llt werden als eine Vertiefung am Kollektor fassen kann Fl ssiges Untersuchungsmaterial mit einem kleinen L ffel einf llen 6 Beh lter schlie en und kr ftig sch tteln so da die Probe homogen verteilt wird 7 Nun Beh lter beschriften und ins Labor senden Probenaufbereitung Das integrierte Para Pak Plus System erm glicht die Anwendung verschiedener Methoden zur Parasitenidentifizierung Im folgeden wird eine M glichkeit aufgezeigt weitere finden sich in der Lite
14. ly a large plastic bag or wrapping film may be placed in the toilet opening and the specimen passed into the bag 4 Shake well the container for few seconds before opening 5 An appropriate i e bloody slimy watery area of stool should be selected and sampled Use the spatula to fill the sample collector attached to the vial cap One scoopful is added to each container This will results in approximately 1 ml or 1 gram of sample Do not add more than the collector cavity can hold Liquid specimens should be collected using a small spoon 6 Tighten the cap and shake firmly to insure that the specimen is adequately mixed When mixing is completed the specimen should appear homogenous Le Label appropriately and send the vials to the laboratory SPECIMEN PROCESSING The integrated Para Pak PLUS System lends itself to a wide variety of procedures in common use The following discussion is not exhaustive and alternatives can be found in the literature 1 Gross examination Record the presence of blood worms mucus or proglottids 2 Direct microscopic examination from the SAF preserved specimen a Place a clean glass slide on a sheet of newsprint b Add one drop of saline iodine may be substituted if desired to the slide c Add a representative sample of SAF preserved specimen to the drop of saline and mix thoroughly The newsprint must be just legible through the slide Place a coverslip on the suspension and examine immedia
15. mente 3 Centrifugue a 500 x g durante 10 15 minutos 4 Aparecer n cuatro capas Capa superior acetato de etilo o ter Segunda capa restos de materia fecal Tercera capa formalina Capa inferior sedimento 5 Despu s de quitar el resto de materia fecal de los laterales del tubo con una varilla aplicadora decante cuidadosamente las tres capas superiores Manteniendo el tubo invertido saque el exceso de acetato de etilo y restos de materia fecal de los laterales del tubo con una varilla de algod n Esto es particularmente importante para obtener resultados apropiados con acetato de etilo y evitar burbujas de disolvente en la preparaci n fresca 6 A ada unas pocas gotas de salina fisiol gica o formalina 10 para resuspender el sedimento restante Si los portas resultantes son demasiado densos se deber a poder leer un papel de peri dico a trav s de ellos se puede a adir mas salina o formalina Para examen microsc pico se sugiere el montaje con yodina y salina NOTA Si el sedimento en el paso 6 contiene una gran cantidad de restos de material fecal se debe realizar un paso de lavado Resuspenda el sedimento en 7 ml de agua agite y centrifugue a 2000 rpm Decante el sobrenadante y contin e con los pasos 6 y 7 ON PRECAUCIONES 1 Evite el contacto de la soluci n fijadora con la piel y los ojos Si se diera el contacto lave la zona afectada abundantemente con agua corriente Si se desarrolla irritaci n vea a un m dic
16. nd Identifikation von allen diagnostisch relevanten Stadien intestinaler Parasiten erlaubt In einer Studie mit mehr als 900 Proben best tigten Scholten und Yong die Eignung des SAF Fixiermittels f r den routinem igen Einsatz im klinisch parasitologischen Labor als eine Alternative zu anderen Fixiermitteln Die richtige Anwendung von Para Pak Plus SAF sichert dem Parasitologen diagnostisch relevante Formen von Darmparasiten sofern sie in der Probe vorhanden sind Testprinzip SAF ist ein Fixier und Aufbewahrungsmittel das f r eine Vielzahl von parasitologischen Methoden verwendet werden kann Direkte Untersuchungen k nnen durchgef hrt werden indem man einen Tropfen einer mit SAF fixierten Suspension mit einer Kochsalz oder Jod l sung verd nnt Aus SAF fixiertem Probenmaterial kann man auch Dauerpr parate herstellen und eine Einengung vornehmen Kit Zusammensetzung SAF Fixiermittel Formaldehyd 1 6 Wasserfreier Isopropylalkohol 7 45 Essigs ure 2 14 Natriumacetat 1 53 Wasser Jeder kit besteht aus einem R hrchen mit 13 ml SAF Fixiermittel und einem Spatel f r die Probenentnahme Leicht verst ndliche Gebrauchsanweisungen f r Patient und Laborpersonal sind ebenfalls vorhanden Untersuchungsmaterial 1 Die Patienten sollten darauf hingewiesen werden vor der Stuhlentnahme folgende Medikamente nicht einzunehmen Antacida Medikamente mit Barium oder Wismuth Medikamente gegen Diarrh oder lhaltige Abf hrmitte
17. ngu pour une utilisation facile et apporte un excellent moyen de minimiser les effets ind sirables d s aux d lais de transport des chantillons EXPLICATIONS Le diagnostic de maladies parasitaires intestinales est confirm au laboratoire de parasitologie clinique par l isolement et l identification des oeufs et des larves d helminthes ou des trophozoites et des cystes de protozoaires La r colte et le transport d chantillons frais vers le laboratoire ne peut pas toujours se faire dans les temps requis Les conditions de travail et les urgences au laboratoire ne permettent pas toujours un examen direct des chantillons frais Les proc dures comme l incubation la r fig ration ou la cong lation des chantillons de selles ne permettent pas de garantir l isolement de tous les stades diagnostiques de tous les parasites En 1972 Junod d crivit le fixateur ac tate de sodium acide ac tique formol SAF comme un fixateur conservateur polyvalent permettant l isolement et l identification de tous les stades diagnostiques des parasites intestinaux Dans une tude portant sur 900 chantillons Scholten et Lang ont confirm la fiabilit du fixateur SAF en usage de routine au laboratoire de parasitologie clinique comme alternative d autres fixateurs Une utilisation convenable du syst me Para Pak PLUS garantit au parasitologiste que les stades diagnostiques des parasites intestinaux ventuellement pr sents seront pr serv s
18. nte sedimento per la tecnica di concentrazione mediante il seguente metodo 1 Aggiungere 1 goccia di surfattante Triton X o equivalente Aggiungere 3 ml di etile acetato o etere tappare ed agitare vigorosamente per alcuni secondi capovolgendo la provetta Sollevare il tappo con precauzione per eliminare un eventuale sovrapressione 3 Centrifugare a 500 x g per 10 15 minuti 4 Saranno a questo punto visibili 4 strati a Primo strato in alto etile acetato o etere b Secondo strato tappo di detriti c Terzo strato formalina d Ultimo strato sedimento 5 Dopo aver rimosso il tappo di detriti dalle pareti della provetta con un bastoncino con attenzione eliminare primi tre strati Tenendo la provetta capovolta pulire le pareti interne con un tampone asciutto Quest operazione particolarmente importante al fine di ottenere buoni risultati con l etile acetato ed evitare la presenza di bolle di solvente nei preparati microscopici a fresco 6 Aggiungere poche gocce di soluzione fisiologica o di formalina al 10 per risospendere il rimanente sedimento Se i vetrini preparati con esso dovessero risultare troppo densi i caratteri di stampa dovrebbero essere appena leggibile attraverso il preparato si pu aggiungere ancora soluzione fisiologica o formalina Li Per l esame microscopico si consiglia di usare Lugol che pu essere anche aggiunto direttamente nella provetta oppure soluzione fisiologica NOTA Se il sedimento al pu
19. nto 6 contiene un eccessiva quantit di detriti pu essere sottoposto ad un ulteriore lavaggio A tal fine si risospende il sedimento in 7 ml di acqua distillata lo si agita e si centrifuga il tutto a 2000 rpm per 2 minuti A questo punto si elimina il surnatante e si prosegue con i punti 6 e 7 PRECAUZIONI 1 Evitare il contatto del fissativo con la pelle e gli occhi Se ci si verifica lavare con acqua corrente Contattare un medico se si sviluppa irritazione 2 Le soluzioni di fissativo sono velenose Se ingerite si consiglia di bere latte o acqua e di ricorrere al pi vicino Pronto Soccorso 3 A causa della natura infettiva delle feci bisogna prestare attenzione quando si preleva e si maneggia il campione e si raccomanda di lavarsi bene le mani una volta effettuata quest operazione o di utilizzare guanti di protezione DICHIARAZIONI DI PERICOLO E PRUDENZA Fare riferimento alla Scheda di Sicurezza SDS disponibile sul sito www meridianbioscience eu per i rischi e i consigli di prudenza STABILIT 3 anni dalla data di preparazione se conservato a temperatura ambiente ParaPak PLUS SAF REF 950205 50 LREF 950220 200 IVD Pour diagnostic in vitro USAGE Le syst me Para pak PLUS fournit une proc dure de routine standardis e de r colte de transport de conservation de filtration et d examen d chantillons de selles pour la recherche de parasites intestinaux Ce kit est co
20. o 2 Las soluciones fijadoras son venenosas Si se diera ingesti n dil yala bebiendo leche o agua Despu s llame a un centro de toxicolog a o a un m dico inmediatamente 3 Debido a la naturaleza infecciosa de las heces no conservadas se debe ir con cuidado cuando la muestra es recogida y manipulada emplear guantes y lavarse las manos DECLARACIONES DE RIESGO Y PRECAUCI N Se debe referir a los SDS disponsible en www meridianbioscience eu ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO La caducidad del Sistema Para Pak PLUS es de 2 a os almacenado a temperatura ambiente Se debe evitar excesivo calor y fr o BIBLIOGRAPHY REFERENZEN BIBLIOGRAFIA REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1 Brooke M M 1974 Intestinal and Urogenital Protozoa In Manual of Clinical Microbiology American Society for Microbiology Washington D C 2nd Edition pp 582 601 2 Burrows R B 1965 Microscopic Diagnosis of the Parasites of Man Yale University Press New Haven pp 319 81 3 Junod L 1972 Technique Coprologique Novelle Essentiellement Destinee a la Concentration des Trophozoites d Amibes Bull Soc Pathol Exot 6 390 398 4 Melvin D M and M M Brooke 1975 Laboratory Procedure for the Diagnosis of Intestinal Parasites U S Department of Health Education and Welfare Publication CDC 75 82821 Atlanta GA pp 23 85 5 Scholten T H and J Yang 1974 Evaluation of unpreserved and preserved stools for the detection and identification of intestinal pa
21. od Omit steps 1 3 in the staining section of the Wheatley s Trichrome package insert B Use the remaining sediment in the concentration procedure which follows 1 Add 1 drop of detergent 2 Add 3 ml of ethyl acetate then stopper and shake the tube vigorously for few seconds Carefully remove the stopper 3 Centrifuge 500 x g for 10 15 minutes 4 Four layers will be apparent a Top layer ethyl acetate or ether b Second layer plug of debris c Third layer formalin d Bottom layer sediment 5 After ringing the plug of debris from the sides of the tube with an applicator stick carefully decant the top three layers While keeping the tube inverted a cotton swab may be used to remove debris sticking to the sides of the tube This is particularly important for obtaining suitable results with ethyl acetate and avoids solvent bubbles in the wet mount 6 Add a few drops of physiological saline or 10 formalin to resuspend the remaining sediment If the resulting slides are too dense newsprint should be legible through them more saline or formalin may be added Ta lodine and saline mounts are suggested for microscopic examination 8 NOTE If the pellet in step 6 contains a large amount of debris wash step may be performed Refloat the sediment in 7 ml water shake and centrifuge at 2000 rpm Pour off supernatant and continue with steps 6 and 7 HAZARD and PRECAUTIONARY STATEMENTS Refer to the SDS available at www meridianbio
22. petto omogeneo cio non dovrebbero essere presenti grumi di materiale fecale 7 Inviare il contenitore al laboratorio dopo aver registrato il nome del paziente sull etichetta TRATTAMENTO DEL CAMPIONE Il Sistema Para Pak PLUS consente l utilizzo di gran parte delle tecniche in uso comunemente Le istruzioni che seguono non sono assolute e il laboratorista pu trovare delle alternative nella bibliografia 1 Esame macroscopico diretto registrare l eventuale presenza di sangue vermi muco o proglottidi prima di introdurre il campione nel contenitore contenente il fissativo 2 Esame microscopico diretto dei campioni fissati in SAF a Porre su un vetrino pulito una goccia di soluzione fisiologica o di Lugol a scelta b Aggiungere una porzione rappresentativa del campione fissato in SAF alla goccia di soluzione fisiologica e mescolare bene il tutto La corretta densit del preparato sar quella che consente appena la lettura dei caratteri di stampa attraverso la goccia c Coprire il tutto con un vetrino coprioggetto ed esaminare immediatamente 3 Colorazione permanente e tecnica di concentrazione con formalina etere o etile acetato A Preparazione dei vetrini per colorazione permanente Mescolare accuratamente il campione fissato in SAF Togliere il tappo colorato e capovolgere il tutto sopra una provetta da centrifuga Premere delicatamente il contenitore di plastica per facilitare la filtrazione Filtrare circa 2 3 ml
23. rasites Am J Clin Path 62 563 567 Scholten T H 1972 An Improved Technique for the Recovery of Intestinal Protozoa J Parasitol 5 633 634 Scholten T H Personal Communication 8 Simitch T and Z Petrovich 1953 Longevit de la forme vegetativ de dysenterioe dans divers milieaux Arch Inst Pasteur d Algerie 31 375 80 9 Swartzwalder J C G W Hunter W W Frye 1966 Manual of Tropical Medicine W B Saunders Co Philadelphia 10 Yang J and T H Sholten 1977 A Fixative for Intestinal parasites Permitting the Use of Concentration and Permanent Staining Procedures Am J Clin Pathol 67 300 304 Rev 03 2015 For technical assistance and ordering contact Meridian Bioscience Europe or your Local Distributor www meridianbioscience eu Meridian Bioscience Europe S r L Via dell Industria 7 20020 Villa Cortese Milano ITALY Tel 39 0331 43 36 36 Fax 39 0331 43 36 16 Manufactured Email info meridianbioscience eu by WEB www meridianbioscience eu Meridian Bioscience Europe s a n v 2 Avenue du Japon 1420 Braine l Alleud BELGIUM Tel 32 0 67 89 59 59 Fax 32 0 67 89 59 58 Email info bnl meridianbioscience eu Meridian Bioscience Europe s a 34 rue de Ponthieu 75008 Paris FRANCE Tel 33 0 1 42 56 04 40 Fax 33 0 9 70 06 62 10 Email info fr meridianbioscience eu Meridian Bioscience Europe b v Postbus 301 5460 AH Veghel NETHERLANDS Tel 31 0
24. ratur 1 Grober berblick Erkennung von Blut W rmern Mukus oder Proglottiden 2 Direkte mikroskopische Untersuchung von SAF fixiertem Untersuchungsmaterial a Es wird ein sauberer Objekttr ger auf ein St ck Zeitungspapier gelegt b Darauf wird ein Tropfen Kochsalzl sung oder Jodl sung gegeben c Nun wird das mit SAF fixierte Probenmaterial auf den Objekttr ger gebracht und vermischt Es sollte soviel Material gew hlt werden da die Buchstaben der Zeitung gerade noch lesbar sind d Ein Deckglas auf die Suspension legen und sofort untersuchen 3 Dauerpr parat und Einengungsverfahren Formalin Alther oder Ethylacetat Sedimentation A Dauerpr parat Die SAF fixierte Probe sorgf ltig mischen Die Kappe entfernen und den Behalter umgedreht mit leichtem Druck in ein Standard Zentrifugenr hchen pressen 2 Entsprechend der Suspensionsdichte werden circa 2 3 ml der probe gefiltert 3 Ca 10 ml physiologische Kochsalzl sung zugeben und sorgf ltig mischen 4 10 15 Minute bei 500 x g zentrifugieren 5 Der Uberstand wird verworfen Man ben tigt etwa 0 5 bis 1 ml des Sediments Falls nicht ausreichend Material vorhanden ist mu nochmals gefiltertes Probenmaterial zugegeben werden und die Schritte 3 und 4 wiederholt werden Falls zu viel Sediment vorhanden ist die bersch ssige Menge verwerfen 6 Das Sediment sch tteln und das Dauerpr parat folgenderma en herstellen a Ein Tropfen Mayer s Albumin wi
25. rd mit der 25 Kitpackung mitgeliefert auf einen sauberen Objekttr ger geben und sofort verstreichen so da eine d nne Schicht auf der Oberfl che entesteht Achtung Falls die Pr parate nach dem Waschen eine r tliche F rbung aufweisen wurde zu viel Albumin verwendet b Eine kleine Menge vom suspendierten Sediment wird auf den Albumin beschichteten Objekttr ger gegeben Das Untersuchungsmaterial soll mit unterschiedlicher Schichtdicke ausgestrichen werden d Den Objekttr ger bei Raumtemperatur 5 10 Minuten trocknen lassen e 30 Minuten in 70 Athanol zum Koagulieren des Albumins stellen f Nun kann mit der F rbemethode Ihrer Wahl weitergefahren werden Wheatley s Trichrome Hiss Kat Nr 400101 eignet sich besonders gut Wenn Sie dieses Verfahren im AnschluB anwenden entfallen die Punkte 1 3 in der Arbeitsanleitung von Wheatley s Trichrom F rbung B Konzentrationsverfahren Hier f r wird das restliche Sediment verwendet 1 1 Tropfen Detergens z B Tween zuf gen 2 3 ml Ethylacetat zugeben verschlie en und das R hrchen einige Sekunden kr ftig sch tteln Danach den St psel vorsichtig abnehmen 3 10 15 Minuten 500 x g zentrifugieren 4 Es entestehen 4 Schichten a Oberste Schicht Ethylacetat oder Ather b Zweite Schicht Debris Ci Dritte Schicht Formalin d Unterste Schicht Sediment 5 Die Schicht aus Debris muB vorsichtig mit einem St bchen von der Wand des Zentrifugenr hrchens g
26. rum physiologique on peut le remplacer par de l iode si on le souhaite sur la lame c Ajouter un chantillon repr sentatif de l chantillon trait au SAF a la goutte de s rum physiologique et m langer soigneusement La papier journal doit tre juste lisible travers la lame d Recouvrir la suspension avec une lamelle et observer imm diatement Proc dure de r alisation de lames d finitives et de concentration s dimentation formol ether ou formol ac tate d thyle A Realisation de lames d finitives 1 M langer soigneusement l chantillon fix au SAF Enlever le bouchon de l extr mit et verser le jet dans un tube centrifugation Presser l g rement le flacon 2 Filtrer environ 2 3 ml d chantillon selon la densit de la suspension 3 Ajouter environ 10 ml de s rum physiologique dans le tube et m langer soigneusement 4 Centrifuger 500 x g pendant 10 15 minutes 5 D canter le surnageant Il doit rester environ 0 5 1 0 ml de s diment Si n cessaire enlever le s diment ou ajouter plus d chantillon filtr et r p ter les tapes 3 et 4 M langer le s diment et pr parer le frottis d finitif de la mani re suivante a Ajouter une petite goutte d albumine de Mayer fournie avec chaque pack de 25 kits sur une lame de verre nettoy e et essuyer imm diatement afin de ne laisser sur la lame qu une couche fine REMARQUE Si les lames ont une teinte rouge apr s la d coloration la quan
27. s pr cautions prendre se r f rer la fiche de s curit disponible sur le site web de Meridian Bioscience www meridianbioscience eu STABILITE ET STOCKAGE La dur e de stockage du syst me Para Pak PLUS est de deux ans temp rature ambiante Eviter la chaleur ou le froid excessif ParaPak PLUS SAF REF 950205 Y 50 LREF 950220 Y 200 IVD para uso diagn stico in vitro UTILIZACI N El Sistema integrado Para Pak PLUS proporciona un procedimiento estandarizado para la toma transporte conservaci n filtraci n y examen de par sitos intestinales a partir de muestras de heces Los sistemas est n dise ados para una f cil utilizaci n y proporcionan un medio excelente para minimizar los efectos adversos del retraso en el transporte de la muestra EXPLICACI N El diagn stico de una enfermedad parasitaria intestinal se confirma a trav s de la recuperaci n e identificaci n de huevos y larvas de helmintos o trofozoitos y quistes de protozoos en el laboratorio de parasitolog a cl nica La toma y transporte a tiempo al laboratorio de muestras frescas no puede asegurarse siempre Las prioridades y condiciones de trabajo en los laboratorios cl nicos frecuentemente no permiten un examen inmediato de las muestras frescas Los procedimientos como la incubaci n refrigeraci n o congelaci n de las muestras de heces no van a garantizar la recuperaci n de todas las fases diagn
28. science eu for Hazard and Precautionary Statements STABILITY AND STORAGE Shelf life of the Para Pak PLUS System is two years when stored at room temperature Excessive heat and cold should be avoided ParaPak PLUS SAF REF 950205 Y 50 LREF 950220 200 IVD In Vitro Diagnosticum Das intergriete Para Pak Plus System bietet ein standardisiertes Verfahren f r Stuhluntersuchugen auf Darmaparasiten In einem speziellen Beh lter wird das Probenmaterial gesammelt transportiert fixiert und auch gefiltert Der Para Pak Plus Kit vereinfacht f r Patient und Labor die Handhabung der Stuhlprobe und erzeugt durch die Fixierung ein einwandfreies Untersuchungsmaterial das genau wie eine frische Probe eine eindeutige Beurteilung zul t Erl uterungen Die Diagnose von parasitischen Darmerkrankungen wird im Labor durch die Identifikation von Helminthen Eiern und Larven oder Protozoen Trophozoiten und Cysten best tigt Nicht immer kann ein sofortiger Tranport von frischem Stuhl erm glicht werden oder auch die Bedingungen im Labor machen eine schnelle Untersuchung von frischem Stuhl unm glich Das Inkubieren K hlhalten und Einfrieren der Probe garantiert nicht da sich alle diagnostisch relevanten Stadien von allen Parasiten wiederfinden lassen 1972 beschrieb Junod ein Fixiermittel aus Natriumacetat Essigs ure und Formalin SAF als Fixier und Aufbewahrungsl sung des die Wiederfindung u
29. tely Permanent slides and concentration procedure formalin ether or ethyl acetate sedimentation se A Permanent slide preparation LA Mix the SAF fixed specimen thoroughly Remove the cap from the tip and place the spout into a centrifuge tube Gently squeeze the vial 2 Filter approximately 2 3 ml of specimen depending on the density of the suspension 3 Add about 10 ml of physiological saline to the tube and mix thoroughly 4 Centrifuge at 500 x g for 10 15 minutes 5 Decant the supernatant fluid Approximately 0 5 to 1 0 ml of sediment should remain If necessary remove sediment or add more filtered specimen and repeat steps 3 and 4 6 Mix the sediment and prepare the permanent smear as follows a Adda small drop of Mayer s albumin supplied with each pack of 25 kits to a cleaned glass slide and wipe immediately so that only a thin coating remains on the slide NOTE If slides have a reddish tinge after decolorization too much albumin has remained on the slide b Add a small amount of the suspended sediment to the albumin coated slide c Spread the mixture over the slide to produce a film which varies in thickness d Allow the slide to dry 5 10 minutes at room temperature until tacky e Immerse the slide in 70 ethanol for approximately 30 minutes to coagulate the albumin f Proceed with the staining regimen of choice Wheatley s Trichrome Meridian Catalog No 400101 works particularly well with this meth
30. tenuto sufficiente per n prove Contenido suficiente para lt n gt ensayos Enth lt ausreichend f r lt n gt Tests Conservare a Store at Conserver entre Conservar a Lagerung bei lt EG E
31. tit d albumine restant sur la lame tait trop importante b Ajouter une petite quantit de s diment en suspension sur la lame recouverte d albumine c R pandre le m lange sur la lame de mani re obtenir un film d paisseur variable d Laisser la lame s cher temp rature ambiante jusqu ce qu elle soit presque s che collante e Immerger la lame dans de l thanol 70 pendant environ 30 minutes pour coaguler l albumine f Effectuer la coloration de votre choix Le Trichrome de Wheatley Ref Meridian 400101 marche particuli rement bien avec cette m thode Ne pas faire les tapes 1 3 de la partie coloration de la notice technique du Trichrome de Wheatley B Utiliser le s diment restant dans la proc dure de concentration suivante 1 Ajouter une goutte de d tergent 2 Ajouter 3 ml d ac tate d thyle puis mettre le bouchon et agiter le tube vigoureusement pendant quelques secondes Enlever le bouchon avec pr caution 3 Centrifuger 500 x g pendant 10 15 minutes 4 On distingue 4 couches a Couche sup rieure ac tate d thyle ou ther b Deuxi me couche bouchon de d bris c Troisi me couche formol d Couche inf rieure s diment 5 Apr s avoir d coll le bouchon de d bris des parois du tube avec un batonnet d application d canter les trois couches sup rieures Une tige cotonn e peut tre utilis e pour enlever les d bris collant aux parois du tube en gardant le tube re
32. tive to other fixatives Proper use of the Para Pak PLUS System assures the parasitologist that diagnostic stages of intestinal parasites will be preserved if present in the fecal material CHEMICAL AND PHYSICAL PRINCIPLES SAF provides a multipurpose fixative preservative suitable for a variety of parasitological procedures A direct examination may be made by diluting a drop of SAF preserved suspension in either saline or iodine SAF preserved specimens also allow permanently stained mounts and concentration procedure for direct examination COMPONENTS SAF fixative Formaldehyde 1 6 Anhydrous Isopropyl Alcohol 7 45 Acetic Acid 2 14 Sodium Acetate 1 53 and water Each kit consists of one vial containing 13 ml of SAF fixative and a spatula for sample collection Simple directions for patients and nursing personnel are also provided SPECIMEN COLLECTION 1 The patients should be cautioned against the use of antacids barium bismuth antidiarrheal medication or oily laxatives prior to collection of the specimen 2 To assure recovery of parasitic elements that are passed intermittently and in fluctuating numbers three specimens spaced few days apart must be examined In the case of hospitalized patients it is suggested that all fecal passages be collected for a designated length of time to avoid prolonging the hospital stay 3 The specimen is ideally passed into a bedpan but must not be contaminated with urine Alternative
33. tourn Ceci est particuli rement important pour obtenir des r sultats fiables avec l ac tate d thyle et permet d viter les bulles de solvant dans le montage humide sur lame 6 Ajouter quelques gouttes de s rum physiologique ou de formol 10 pour remettre le s diment en suspension Si les lames obtenues sont trop opaques on doit pouvoir lire le papier journal travers il est possible de rajouter un peu de s rum physiologique ou de formol Le Des montages dans de l iode et dans du s rum physiologique sont conseill s pour l observation microscopique o D REMARQUE Si le pellet de l tape 6 contient un grand nombre de d bris il est possible d effectuer une tape de lavage Remettre le s diment dans 7 ml d eau agiter et centrifuger 2000 rpm Jeter le surnageant et passer aux tapes 6 et 7 PRECAUTIONS D EMPLOI 1 Eviter tout contact de la solution de fixateur avec la peau et les yeux En cas de contact rincer sous l eau courante S il se d veloppe une inflammation consulter votre m decin 2 Les solutions de fixateur sont toxiques En cas d ingestion diluer en buvant de l eau ou du lait Puis appeler imm diatement votre centre anti poisons le plus proche ou votre m decin 3 Compte tenu de la nature infectieuse des selles non trait es il faut se laver les mains et prendre des pr cautions lors de la r colte et de la manipulation des chantillons DANGER ET MISES EN GARDE Pour les dangers et le
34. uhl ist infekti s deshalb sollten bei der Probenentnahme Handschuhe getragen werden und die H nde danach gr ndlich gereinigt werden GEF HRDUNGEN UND SICHERHEITSHINWEISE F r weitere Informationen zu den Gefahren und Sicherheitshinweisen beziehen Sie sich aur die SDS die unter folgendem Link verf gbar sind www meridianbioscience eu Reagenzienhaltbarkeit und Lagerung Para Pak Plus kann 2 Jahre bei Raumtemperatur gelagert werden Es sollte extreme Hitze oder K lte vermieden weden ITALIANO ParaPak PLUS SAF REF 950205 50 LREF 950220 200 IVD per uso diagnostico in vitro FINALIT D USO Para Pak PLUS un sistema standardizzato per la raccolta il trasporto la fissazione la filtrazione e l esame dei campioni fecali per la ricerca di parassiti intestinali Il prodotto pu essere facilmente utilizzato da tutto il personale di laboratorio e risolve i problemi legati ad una non immediata consegna del campione SPIEGAZIONE La diagnosi delle malattie parassitarie intestinali confermata mediante l osservazione microscopica delle uova e delle larve degli Elminti e dei trofozoiti o delle cisti di Protozoi eventualmente presenti Non sempre per possibile assicurare il trasporto di un campione fresco di feci al laboratorio entro i 30 minuti dall emissione come raccomandato dalle procedure Inoltre altre priorit del laboratorio non sempre consentono l immediato esame d
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