LES INSTALLATIONS DE HAUT NIVEAU DE CONFINEMENT EN
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1. es Elle est install e de mani re ne pas perturber l quilibre des courants d air l int rieur de la zone de travail Elle est plac e l cart des portes fen tres grilles d arriv e et d vacuation d air et des endroits de passage fr quent Elle est contr l e et certifi e au placement apr s chaque d placement et au moins une fois par an 33 Le confinement primaire quipements de production est con u de mani re viter toute fuite 34 Les quipements de production sont dot s de ou raccord s directement un syst me d inactivation du mat riel biologique par exemple raccord s une station de d contamination 35 Les effluents gazeux provenant des quipements de production sont contr l s microbiologiquement afin d viter la diss mination de micro organismes dans l air 36 On recourt des syst mes confin s pour effectuer des inoculations ou pour transf rer du mat riel biologique d un syst me un autre 37 Un autoclave double entr e est accessible dans l installation Les portes de l autoclave doivent tre asservies pour emp cher leur ouverture simultan e 88 Le mat riel biologique est centrifug dans des centrifugeuses accessibles dans la zone confin e Celui ci est plac en tubes tanches dans des rotors ou nacelles pr sentant un syst me de fermeture herm tique safety cups contenant les a rosols en cas de bris ou de fissure de tubes 39 Si un syst me g n rateur de2. ce qui correspond la fermeture de 8 installations de niveau 3 Ainsi 79 installations de niveau de confinement 3 sont encore actuellement en activit elles sont r parties dans 33 exploitations voir Figure 2 ISP 15 CD 09 0432 13 29 be o 4 CAS PARTICULIERS RENCONTRES Plusieurs demandes d autorisation d utilisations confin es n cessitant un niveau de confinement 3 ont re u un avis d favorable Ce fut surtout le cas au d but du processus de notifications 1994 1998 o 9 avis d favorables de l expert technique des r gions ont t remis pour cause de non conformit du confinement avec les crit res de niveau 3 ou lorsqu un L3 est requis mais est absent dans l tablissement Il s agissait pour la majorit des cas de laboratoires de diagnostic pour l identification des mycobact ries En 2004 deux cas ont galement t rencontr s o des d fauts par rapport aux exigences de confinement ont t relev s Les observations les plus fr quemment rencontr es lors des visites de laboratoires sont des lacunes dans le maintien de la pression n gative de l air l int rieur de la zone L3 le manque d tanch it en cas de fumigation l absence d vier commande non manuelle des d faillances dans le traitement des d chets biologiquement contamin s ou bien encore des m thodes d inactivation des effluents inappropri es Il est important de signaler qu l exception d une animalerie de niveau 3 tous les laboratoire
3. de la cha ne alimentaire et de l Environnement
4. est d contamin e de pr f rence avant sa sortie de la zone confin e pour lavage ou limination 34 Des gants doivent tre port s 85 En dehors des manipulations les micro organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s viables sont confin s dans des syst mes tubes bo tes ferm s 36 Il faut emp cher la cr ation d claboussures et la formation d a rosols et contr ler leur diss mination via l utilisation d quipements et de pratiques appropri s 37 Toute manipulation susceptible de produire des a rosols infectieux ou comportant des risques potentiels se fait dans l enceinte de s curit microbiologique 38 L utilisation d une hotte flux laminaire horizontal est proscrite pour la manipulation des micro organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s 39 Des dispositifs de pipetage m canique sont utilis s Le pipetage la bouche est proscrit 40 Il est interdit de manger boire fumer de manipuler des lentilles de contact d utiliser des produits cosm tiques ou de stocker de la nourriture destin e la consommation humaine dans le laboratoire 41 Un registre consignant tous les organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s manipul s et stock s doit tre tenu 42 Les mesures de contr le ainsi que l quipement de contr le et de protection sont v rifi s de mani re appropri e et r guli re 43 Les exp rimentateurs se lavent les mains avant de quitter la zone confi
5. est de nature potentialiser le risque par exemple g ne codant pour un oncog ne g ne codant pour une toxine g ne codant pour un d terminant viral bact rien fongique ou parasitaire de sp cificit d h te et pour la production en grandes quantit s des suspensions virales En revanche elle n est pas exig e lorsque l insert ne code pas pour un produit dangereux Le diagnostic de la tuberculose constitue un autre exemple fr quemment rencontr le diagnostic microbiologique des maladies caus es par les mycobact ries peut tre divis en deux tapes distinctes la primo identification et l identification ult rieure la primo culture Les activit s de diagnostic comprenant les cultures primaires partir d chantillons cliniques potentiellement infect s par des bacilles du complexe Mycobacterium tuberculosis doivent tre effectu es dans un niveau de confinement L2 avec des mesures de s curit additionnelles pratiques de travail de niveau 3 Par contre toutes les autres manipulations ult rieures la primo identification impliquant l ouverture des tubes de cultures positives et les cultures secondaires doivent s effectuer dans un laboratoire de niveau de confinement 3 3 HISTORIQUE DE L EVOLUTION DES NOTIFICATIONS Depuis l entr e en vigueur des arr t s r gionaux relatifs l utilisation confin e d OGM ou pathog nes les diff rences que l on peut observer d une r gion l autre dans le nombre de notific
6. filtre HEPA est install l extraction 20 Le syst me d alimentation de l air est asservi au syst me d extraction de fa on viter une surpression en cas de panne accidentelle l vacuation 21 Les gaines d alimentation et d extraction d air sont munis de clapets 22 L air extrait du laboratoire est filtr au travers d un filtre HEPA En aucun cas cet air n est remis en circulation dans le b timent ou dans des b timents adjacents ou dispers proximit de prises d air ou de locaux communiquant vers l ext rieur moins qu un second filtre HEPA ne soit install l extraction ISP 15 CD 09 0432 21 29 be 23 Le changement des filtres HEPA se fait apr s une d contamination pr alable ou dans des conditions permettant d viter toute contamination en suivant les r gles d finies par l installateur 24 Les conduites d air sont con ues pour permettre la d contamination du local au moyen d une substance gazeuse 25 Un taux de renouvellement d air ad quat permet de ventiler la zone contr l e afin de r duire au maximum la contamination de l air Equipement de s curit 26 Le laboratoire dispose d au moins une enceinte de s curit microbiologique si des manipulations en phase ouverte sont r alis es Elle est install e de mani re ne pas perturber l quilibre des courants d air l int rieur de la zone de travail Elle est plac e l cart des portes fen tres grilles d arriv e et d
7. le d pistage des enc phalopathies spongiformes bovines par tests rapides Ces laboratoires qui ont pour activit l ex cution des tests de d tection rapide des ESB constituent une cat gorie particuli re car ils ne doivent pas r pondre l ensemble des caract ristiques techniques d un laboratoire L3 conventionnel Les agents responsables des ESB sont des prions ou agents non conventionnels de classe de risque 3 pour l homme et l animal Le d pistage par tests rapides de ces agents requiert un niveau de confinement L3 l exception de trois crit res de confinement qui ne sont pas exig es il s agit de la pression n gative de l air dans la zone confin e la filtration de l air extrait par filtre HEPA l tanch it des locaux en cas de d contamination par une substance gazeuse Une attention particuli re est exig e concernant les pratiques de travail et la gestion des d chets attendu que les prions sont particuli rement r sistants aux m thodes d inactivation classiques En Belgique 25 laboratoires qui ont pour activit la d tection rapide des ESB sont en activit Ils satisfont aux crit res pertinents du niveau de confinement L3 compl t s par des mesures ayant trait aux pratiques de travail et la gestion des d chets 11 Annexe IV point 4 1 4 de l Arr t du Gouvernement wallon du 4 juillet 2002 d terminant les conditions sectorielles relatives aux utilisations confin es d organismes g n tique
8. notifi es s l ve l heure actuelle 79 Ce nombre inclut les laboratoires L3 les installations grandes chelles pour la production LS3 et galement les animaleries A3 Certains L3 abritent parmi les pi ces qui le composent une zone animalerie Parmi les L3 on distingue essentiellement deux cat gories correspondant d une part aux laboratoires de diagnostic m dical et d autre part aux laboratoires de recherche Les L3 d di s au diagnostic sont situ s en grande majorit dans des h pitaux ou des cliniques et op rent g n ralement l identification d organismes pathog nes de classe de risque 3 transmissibles par l air par exemple Mycobacterium tuberculosis On en compte l heure actuelle 15 en activit La plupart des laboratoires affect s la recherche et d veloppement R amp D se trouvent dans les universit s les industries pharmaceutiques et les laboratoires priv s Les activit s effectu es dans les L3 des instituts scientifiques de l Etat ISP CERVA sont surtout des activit s de diagnostic mais on y effectue galement de la recherche appliqu e ISP 15 CD 09 0432 6 29 be o Parmi les laboratoires de diagnostic on retrouve les 8 laboratoires de r f rence agr s par le Minist re de la Sant Publique pour le diagnostic du SIDA Outre le fait qu ils appliquent les mesures de confinement de niveau L3 ces laboratoires doivent aussi r pondre aux crit res de s curit tr s stricts d finis
9. par l annexe de l arr t royal du 8 octobre 1996 fixant les crit res d agr ment des laboratoires de r f rence pour le syndrome d immuno d ficience acquise Ces laboratoires sont situ s dans les institutions suivantes Universit Catholique de Louvain Bruxelles Institut Scientifique de Sant Publique ex Institut Pasteur Bruxelles Katholieke Universiteit Leuven Universitair Ziekenhuis Louvain Universit Libre de Bruxelles H pital Universitaire Erasme Bruxelles Instituut voor Tropische Geneeskunde Anvers Universiteit van Gent Universitair Ziekenhuis Gand CHU de Li ge Li ge Vrije Universiteit Brussel Universitair Ziekenhuis Brussel ex AZ VUB Bruxelles 2 2 REPARTITION GEOGRAPHIQUE DES INSTALLATIONS DE HAUT NIVEAU DE CONFINEMENT La r partition g ographique des installations de niveau 3 est pr sent e dans la Figure 1 Les institutions qui poss dent une ou plusieurs installations de niveau de confinement 3 sont r parties de mani re assez homog ne sur le territoire belge l exception de la province du Luxembourg qui n en compte pas Une forte concentration est observ e en r gion de Bruxelles Capitale due la pr sence de cinq centres hospitaliers universitaires Universitair Ziekenhuis Brussel ex AZ VUB Institut Jules Bordet H pital Erasme Cliniques Universitaires Saint Luc et CHU Saint Pierre ainsi que des universit s et institutions scientifiques de l Eta
10. risque associ aux OGM et ou pathog nes compte tenu des l ments suivants i les caract ristiques de l environnement susceptible d tre expos voir par exemple si l environnement susceptible d tre expos aux OGM et ou pathog nes contient des biotes connus qui peuvent tre affect s n gativement par les organismes utilis s dans l op ration en utilisation confin e ii les caract ristiques de l utilisation confin e par exemple son chelle sa nature iii toute utilisation confin e non standardis e par exemple inoculation d OGM et ou pathog nes des animaux quipement susceptible de g n rer des a rosols La prise en compte en vue d une utilisation confin e particuli re des l ments vis s aux points i iii peut accro tre diminuer ou laisser inchang le niveau de risque associ aux OGM et ou pathog nes L analyse effectu e dans les conditions d crites ci dessus conduira finalement classer l utilisation confin e en cause dans l une des classes de risque La classification d finitive de l utilisation confin e doit tre confirm e par un r examen de l ensemble de la proc dure d valuation des risques ISP 15 CD 09 0432 20 29 be o ANNEXE 2 Mesures g n riques de confinement et autres mesures de protection Laboratoires de niveau L3 Agencement et caract ristiques techniques des laboratoires 1 Le laboratoire est physiquement s par des autres zones d activit s dans le
11. sont faciles nettoyer imperm ables l eau r sistants aux substances acides ou alcalines aux solvants organiques aux d sinfectants et aux agents de d contamination utilis s 13 Un syst me lectrique autonome en cas de panne de courant existe celui ci alimente au minimum le syst me de ventilation 14 Le laboratoire dispose d un syst me automatique de d tection et d alarme incendie 15 La zone confin e dispose d un interphone t l phone ou tout autre syst me permettant de communiquer avec l ext rieur 16 La zone de travail est maintenue en permanence une pression n gative de l air par rapport aux zones adjacentes pour viter tout transfert de contamination de l int rieur vers l ext rieur 17 La pression n gative de l air dans la zone confin e est cr e et maintenue par un syst me de ventilation m canique assurant un apport et une extraction dynamique de l air 18 La pression n gative relative de l air est contr l e par un manom tre et un syst me d alarme se d clenche en cas de d faillance du syst me de ventilation 19 Si le syst me d alimentation d air n est pas assur par un syst me ind pendant de celui des zones adjacentes syst me ind pendant recommand un filtre HEPA ou des clapets sont install s pour pr venir le refoulement d air Si le syst me d extraction d air n est pas assur par un syst me ind pendant de celui des zones adjacentes syst me ind pendant recommand un second
12. syst me lectrique autonome en cas de panne de courant existe celui ci alimente au minimum le syst me de ventilation 17 Le local dispose d un syst me automatique de d tection et d alarme incendie 18 La zone confin e dispose d un interphone t l phone ou tout autre syst me permettant de communiquer avec l ext rieur 19 La zone de travail est maintenue en permanence une pression n gative de l air par rapport aux zones adjacentes pour viter tout transfert de contamination de l int rieur vers l ext rieur 20 La pression n gative de l air dans la zone confin e est cr e et maintenue par un syst me de ventilation m canique assurant un apport et une extraction dynamique de l air 21 La pression n gative relative de l air est contr l e par un manom tre et un syst me d alarme se d clenche en cas de d faillance du syst me de ventilation 22 Si le syst me d alimentation d air n est pas assur par un syst me ind pendant de celui des zones adjacentes syst me ind pendant recommand un filtre HEPA ou des clapets sont install s pour pr venir le refoulement d air Si le syst me d extraction d air n est pas assur par un syst me ind pendant de celui des zones adjacentes syst me ind pendant recommand un second filtre HEPA est install l extraction 23 Le syst me d alimentation de l air est asservi au syst me d extraction de fa on viter une surpression en cas de panne accidentelle l vacuat
13. tre ouvertes en m me temps par exemple gr ce un syst me interlock Ce dispositif est tel qu il ne g ne pas les secours en cas d accident 5 Les fen tres sont scell es herm tiquement 6 Le local peut tre rendu tanche de mani re permettre une d contamination au moyen d une substance gazeuse 7 L animalerie est con ue afin d viter toute fuite accidentelle d animaux 8 Le local est pourvu d une fen tre d observation ou d un syst me quivalent permettant de voir les occupants depuis l ext rieur 9 La zone confin e dispose d un vier commande non manuelle pour le lavage et la d contamination des mains Cet vier est dispos dans le sas ou proximit de la sortie de la zone confin e 10 Une douche est dispos e soit dans la zone confin e soit dans le sas 11 Des vestiaires ou portemanteaux sont mis disposition du personnel pour les v tements de protection Les v tements de protection et les v tements de ville ne sont pas mis en contact 12 Les conduites d apport de fluides sont munies de dispositifs anti reflux 13 L animalerie a un local s par pour le stockage des cages propres de la nourriture et de la liti re 14 Les cages les surfaces de travail le sol les murs et le plafond sont faciles nettoyer imperm ables l eau r sistants aux d sinfectants et aux agents de d contamination utilis s 15 L animalerie est dot e d une installation de lavage des cages 16 Un
14. vide est utilis il est pourvu d un filtre HEPA Pratiques de travail et m thodes de gestion des d chets 40 L acc s l installation est r serv aux personnes autoris es par le responsable et inform es des risques potentiels et requises pour les besoins imm diats pendant la production Un syst me de contr le d acc s est mis en place 41 Sur la porte d acc s l installation figure l affichage suivant le pictogramme Danger biologique le niveau de confinement les coordonn es du responsable de l installation a nature du risque biologique la liste des personnes autoris es d acc s les crit res d acc s l installation 42 Un quipement sp cifique est r serv au laboratoire 43 L emploi d une tenue de protection est requis Cette tenue de protection est constitu e d une combinaison et de couvre chaussures ou de chaussures r serv es la zone Cette tenue de protection est sp cifique de la zone confin e et ne peut pas tre port e en dehors de celle ci Elle est d contamin e de pr f rence avant sa sortie de la zone confin e pour lavage ou limination 44 Des gants sont mis disposition du personnel de l installation et utilis s lorsque n cessaire 45 Des masques respiratoires et des lunettes de protection ou une visi re de protection faciale sont utilis s pour les proc dures risque et pour les interventions d urgence en cas d accident 46 Des Spill kits sont disponible
15. HAPPELIUK INSTITUUT WETENSCH VOLKSGEZONDHEID INSTITUT SCIENTIFIQUE DE SANTE PUBLIQUE LES INSTALLATIONS DE HAUT NIVEAU DE CONFINEMENT EN BELGIQUE Rapport P riodes1995 2008 IS WIV WETENSCHAPPELIJK INSTITUUT VOLKSGEZONDHEID INSTITUT SCIENTIFIQUE DE SANTE PUBLIQUE Rapport Les installations de haut niveau de confinement en Belgique P riode 1995 2008 Bios curit et Biotechnologie Rue Juliette Wytsman 14 1050 Bruxelles Belgique www iph fgov be ISP 15 CD 09 0432 1729 be o Bios curit et Biotechnologie Mai 2009 Bruxelles Belgique N de r f rence interne ISP 15 CD 09 0432 Nr de d p t D 2009 2505 40 Auteurs C D Do Thi B Van Vaerenbergh Dr P Herman Dr Ir K Pauwels F Coppens Dr A Leunda Casi Dr C Verheust Chef de Section Dr Ir Myriam Sneyers Le projet est financi rement soutenu par La R gion de Bruxelles Capitale Bruxelles Environnement Institut bruxellois pour la Gestion de l environnement IBGE La R gion flamande Gouvernement flamand D partement Leefmilieu Natuur en Energie LNE La R gion wallonne Service Public de Wallonie Direction G n rale Op rationnelle de l Agriculture des Ressources Naturelles et de l Environnement DGARNE Ne ISP 15 CD 09 0432 2 29 be o TABLE DES MATIERES 1 Introduction 2 Contexte g n ral pr sentation synoptique de la situation en Belgique 2 1 Installations de haut niveau de con
16. TALLATIONS DE HAUT NIVEAU DE CONFINEMENT Les laboratoires L les animaleries A et les installations de proc d s grande chelle LS sont classifi s en fonction d une chelle de risque proportionnelle la classe de risque biologique maximal de l utilisation confin e allant de 1 4 4 Arr t du Gouvernement de Bruxelles Capitale du 9 d cembre 1993 relatif aux installations effectuant des op rations mettant en uvre des micro organismes ou des organismes pathog nes ou g n tiquement modifi s Arr t du Gouvernement flamand du 1er juin 1995 fixant les dispositions g n rales et sectorielles en mati re d hygi ne de l environnement chapitre 5 51 du VLAREM II Biotechnologie Arr t du Gouvernement wallon du 13 juin 1996 modifiant le R glement g n ral pour la protection du travail en ce qui concerne l utilisation d organismes g n tiquement modifi s et ou pathog nes 5 Accord de coop ration du 25 avril 1997 entre l Etat f d ral et les R gions relatif la coordination administrative et scientifique en mati re de bios curit La d finition des classes de risque des utilisations confin es est fournie en Annexe 1 ISP 15 CD 09 0432 5 29 be o On entend par installations de haut niveau de confinement les installations de niveaux 3 et 4 Comme aucune installation de niveau 4 n est pr sente sur le territoire belge ce rapport concerne uniquement les installations de niveau 3 Les laboratoir
17. ation d une hotte flux laminaire horizontal est proscrite pour la manipulation des micro organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s et des animaux contamin s 41 Des dispositifs de pipetage m canique sont utilis s Le pipetage la bouche est proscrit 42 Il est interdit de manger boire fumer de manipuler des lentilles de contact d utiliser des produits cosm tiques ou de stocker de la nourriture destin e la consommation humaine dans le local 43 Un registre consignant toutes les op rations effectu es entr es et sorties d animaux inoculations des animaux de micro organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s etc doit tre tenu 44 Les mesures de contr le ainsi que l quipement de contr le et de protection sont v rifi s de mani re appropri e et r guli re 45 Les exp rimentateurs se lavent les mains avant de quitter la zone confin e pour une autre activit et chaque fois que cela s av re n cessaire 46 Les surfaces de travail sont d contamin es l aide d un d sinfectant appropri une fois le travail termin et chaque fois que du mat riel biologique est r pandu 47 Une notice mise disposition du personnel sp cifie le mode d emploi des d sinfectants et pr cise en fonction du but recherch la nature du d sinfectant utiliser sa concentration et le temps de contact 48 Les siphons contiennent du d sinfectant ISP 15 CD 09 0432 25 29 be o 49 Une inst
18. ations d installations de haut niveau de confinement proviennent du fait que les trois arr t s r gionaux ne sont pas entr s en vigueur au m me moment La R gion de Bruxelles Capitale a transpos la directive 90 219 CEE le 9 d cembre 1993 la R gion flamande le 1er juin 1995 et la R gion wallonne le 13 juin 1996 Dans la Figure 3 on observe que l volution des notifications d utilisations confin es refl te un tant soit peu l historique des transpositions de la directive Les notifications des installations de niveau 3 ont donc commenc en 1995 avec les premiers dossiers de la R gion de Bruxelles Capitale Si aucune demande d utilisation confin e de classe de risque 3 n a t introduite en 1996 en 1997 21 installations de niveau 3 ont t notifi es Ce fait correspond la z Biological Risk Assessment sheets Practical examples of risk Assessement and Biosafety Recommendations for the Contained Use of Genetically Modified Micro Organisms http www biosafety be CU RA Fiches Intro_and_ menu html 18 Biosafety Recommendations for the Contained Use of Mycobacterium tuberculosis Complex Isolates in Industrialized Countries http www biosafety be CU PDF Mtub_Final_DL pdf ISP 15 CD 09 0432 12 29 be premi re notification de la soci t GlaxoSmithKline Biologicals qui alors poss dait elle seule 16 installations de niveau 3 comprenant des L3 ou des suites de plusieurs L3 des LS3 et des A3 La plupart des u
19. b timent ou est situ dans un b timent s par 2 L entr e au laboratoire s effectue via un sas 3 La premi re porte du sas peut tre verrouill e et contr l e par un syst me lectronique ou quivalent 4 Les portes du sas sont pourvues d un syst me de fermeture automatique Un dispositif particulier est install pour emp cher que les portes du sas ne puissent tre ouvertes en m me temps par exemple gr ce un syst me interlock Ce dispositif est tel qu il ne g ne pas les secours en cas d accident 5 Les fen tres sont scell es herm tiquement 6 Le local peut tre rendu tanche de mani re permettre une d contamination au moyen d une substance gazeuse 7 Le mobilier est con u de mani re faciliter le nettoyage et la d contamination du local ainsi que le programme de contr le des insectes et des rongeurs 8 Le laboratoire est pourvu d une fen tre d observation ou d un syst me quivalent permettant de voir les occupants depuis l ext rieur 9 La zone confin e dispose d un vier commande non manuelle pour le lavage et la d contamination des mains Cet vier est dispos dans le sas 10 Des vestiaires ou portemanteaux sont mis disposition du personnel pour les v tements de protection Les v tements de protection et les v tements de ville ne sont pas mis en contact 11 Les conduites d apport de fluides sont munies de dispositifs anti reflux 12 Le sol et les tables de travail
20. be CU PDF Mtub_Final_DL pdf 7 REMERCIEMENTS Ce projet est financi rement soutenu par les R gions flamande wallonne et de Bruxelles Capitale Nous remercions le D partement Leefmilieu Natuur en Energie LNE du Gouvernement flamand la Direction G n rale Op rationnelle de l Agriculture des Ressources Naturelles et de l Environnement DGARNE du Service Public de Wallonie l Institut bruxellois pour la Gestion de l environnement IBGE de la R gion de Bruxelles Capitale Nous remercions Annabel Mott de la Cellule Traduction de l ISP et Fatima Bouchahrouf de la Cellule Communication de l ISP pour leur aide pr cieuse ISP 15 CD 09 0432 17 29 be Q 8 ABREVIATIONS CERVA FUNDP ISP ITG KUL SBB UCL ULB Ulg ESB ESM GMP HEPA MGM OGM Centre d Etude et de Recherches V t rinaires et Agrochimiques Fondation Universitaire Notre Dame de la Paix Namur Institut scientifique de Sant Publique Instituut voor Tropische Geneeskunde Antwerpen Katholieke Universiteit Leuven Section Bios curit et Biotechnologie de l ISP Universit Catholique de Louvain Universit Libre de Bruxelles Universit de Li ge Enc phalopathie spongiforme bovine Enceinte de s curit microbiologique Good laboratory practices High efficiency particulate air filter Micro organisme g n tiquement modifi Organisme g n tiquement modifi ISP 15 CD 09 0432 18 29 be e ANNEXE 1 Afin d viter que l utilisati
21. cro organismes g n tiquement modifi s a t adopt e en 1990 dans le chef de la directive europ enne 90 219 CEE Cette directive a t amend e en 1998 par la directive 98 81 CE En Belgique la transposition des directives europ ennes sus cit es a t op r e au niveau r gional Mais alors que la l gislation europ enne ne couvre que les micro organismes g n tiquement modifi s MGM le champ d application des l gislations r gionales belges a t tendu aux organismes g n tiquement modifi s et aux organismes pathog nes pour l homme l animal et la plante Les donn es provenant de ce rapport peuvent tre cit es ou reproduites pour autant que la source soit clairement mentionn e Council Directive 90 219 EEC of 23 April 1990 on the contained use of genetically modified micro organisms 3 Council Directive 98 81 EC of 26 October 1998 amending Directive 90 219 EEC on the contained use of genetically modified micro organisms ISP 15 CD 09 0432 4 29 be o Les gouvernements des trois R gions Wallonie Bruxelles Capitale et Flandre ont donc impl ment les l gislations europ ennes susmentionn es dans le cadre de leur l gislation environnementale qui s appliquent aux tablissements class s Dans un tel contexte g n ral la bios curit ne constitue qu un l ment parmi l ensemble des mati res couvertes par le permis d environnement Afin d harmoniser la transposition des directives europ
22. difi s et ou pathog nes MB 25 10 1996 p 27405 Arr t du Gouvernement wallon du 4 juillet 2002 d terminant les conditions sectorielles relatives aux utilisations confin es d organismes g n tiquement modifi s ou pathog nes MB 21 09 2002 p 41711 Norme NBN EN 12128 Biotechnologie Laboratoires de recherche de d veloppement et d analyse Niveaux de confinement des laboratoires de microbiologie zones risque situations et exigences physiques de s curit Norme NBN EN 1620 Biotechnologie Proc d grande chelle et production Installation industrielle selon le niveau de danger NBN EN 12738 Biotechnologie Laboratoires de recherche d veloppement et analyse Guide pour le confinement des animaux inocul s avec des microorganismes utilis s des fins exp rimentales Biological Risk Assessment sheets Practical examples of risk Assessement and Biosafety Recommendations for the Contained Use of Genetically Modified Micro Organisms http www biosafety be CU RA_ Fiches intro_and_menu html ISP 15 CD 09 0432 16 29 be o Biosafety Recommendations for the Contained Use of Mycobacterium tuberculosis Complex Isolates in Industrialized Countries Philippe Herman Maryse Fauville Dufaux Didier Breyer Bernadette Van Vaerenbergh Katia Pauwels Chuong Dai Do Thi M Sneyers Maryse Wanlin Ren Snacken amp William Moens 2006 Royal Library of Belgium Deposit Number D 2006 2505 22 http www biosafety
23. e 3 g n tiquement modifi s et production de certains vecteurs viraux recombinants alors que 41 installations servent uniquement la manipulation de micro organismes pathog nes non g n tiquement modifi s virus et bact ries pathog nes de classe de risque 3 pour l homme virus zoopathog nes de classe de risque 4 pour les animaux Dans 28 cas des utilisations confin es impliquant la fois des micro organismes pathog nes non g n tiquement modifi s et des MGM s y d roulent Le Tableau 1 ci dessous donne un aper u non exhaustif des micro organismes les plus souvent rencontr s ISP 15 CD 09 0432 10 29 be o Tableau 1 micro organismes les plus souvent rencontr s dans les installations de haut niveau de confinement Type Agent biologique Genre et esp ce ou famille d organisme Organismes Virus Dengue virus pathog nes Human Hepatitis B Virus HBV Human Hepatitis C Virus HCV Human Immunodeficiency Virus HIV Human T cell lymphotropic viruses HTLV Severe acute respiratory syndrome virus SARS Simian Immunodeficiency virus SIV Zoopathog nes Rinderpest virus peste bovine Foot and mouth disease viruses fi vre aphteuse Bluetongue virus BTV African swine fever virus peste porcine virus de la peste des petits ruminants PPRV Bact ries Esp ces du complexe Mycobacterium tuberculosis Brucella Chlamydia psitacci Bacillus anthracis Franciscella tularensis type A Yersinia pe
24. e de classe de risque 2 ou sup rieure 62 Un programme de contr le efficace des insectes et des rongeurs est mis en application 63 La circulation d animaux dans l installation est interdite 64 La gestion des d chets et ou mati res biologiques r siduelles satisfait aux conditions suivantes Les d chets et ou mati res biologiques r siduelles contamin s et le mat riel contamin usage unique sont inactiv s par un proc d appropri et valid avant vacuation par exemple par autoclavage ou incin ration L incin ration est effectu e par une installation agr e Les sacs ou les conteneurs utilis s pour la collecte des d chets infectieux sont r sistants tanches marqu s du pictogramme Danger biologique et ferm s avant de quitter l installation Avant lavage r emploi et ou destruction le mat riel contamin verrerie lames etc est inactiv par un proc d appropri et valid 65 Les effluents des viers et des douches sont de pr f rence inactiv s par un proc d appropri et valid avant l vacuation finale ISP 15 CD 09 0432 29 29 be o Dr Ir Myriam Sneyers T 32 2 642 55 12 F 32 2 642 52 92 myriam sneyers iph fgov be http www biosafety be Rue Juliette Wytsman 14 1050 Bruxelles Belgique T 32 2 642 51 11 F 32 2 642 50 01 Rue Engeland 642 1180 Bruxelles Belgium T 32 2 373 31 11 F 32 2 373 32 82 La Science au service de la Sant Publique de la S curit
25. ennes 90 219 CEE un Accord de coop ration a t sign entre l Etat f d ral et les R gions en 1997 pour la mise en place d un syst me commun d valuation scientifique de la bios curit Gr ce ce syst me tous les aspects scientifiques devant tre pris en compte dans le cadre des utilisations d OGM ou pathog nes sont valu s de mani re coordonn e et uniforme Le syst me commun d valuation scientifique est compos du Conseil consultatif de Bios curit et de la Section Bios curit et Biotechnologie SBB de l Institut Scientifique de Sant Publique ISP Ainsi toutes les activit s qui se d roulent en laboratoire animalerie serre chambre hospitali re pour les essais de th rapie g nique dans les installations de production grande chelle impliquant des organismes pathog nes ou des OGM sont sujets une autorisation crite pr alable d livr e par les autorit s r gionales comp tentes pour d livrer les permis d environnement Pendant la proc dure de demande d autorisation une valuation des risques doit tre effectu e par l utilisateur le responsable de l utilisation confin e puis soumise pour avis au SBB qui agit en tant qu expert technique pour les autorit s r gionales L avis motiv du SBB se prononce sur l ad quation entre les mesures de confinement et les risques li s l utilisation confin e 2 CONTEXTE GENERAL PRESENTATION SYNOPTIQUE DE LA SITUATION EN BELGIQUE 2 1 INS
26. es de niveau de confinement 3 L3 sont con us de mani re garantir une protection optimale de la sant humaine des animaux des plantes et de l environnement Dans ces installations des mesures ad quates sont mises en uvre pour permettre aux activit s de classe de risque 3 de s y d rouler en r duisant au maximum les risques de propagation des micro organismes au dehors du confinement Dans cette optique les principales caract ristiques qui diff rencient un L3 d un laboratoire de niveau de confinement inf rieur r sident dans l application de mesures plus contraignantes afin d emp cher toute fuite de micro organismes vers le milieu ext rieur Ces mesures sont entre autres les suivantes La pression de l air est n gative dans la les zone s confin e s par rapport aux zones avoisinantes L entr e se fait le plus souvent via un sas Le local peut tre rendu tanche pour permettre une d contamination par une substance gazeuse vapeur de formald hyde peroxyde d hydrog ne L air extrait du L3 est filtr sur filtre HEPA Les d chets biologiques solides et liquides sont inactiv s avant vacuation hors de la zone et incin r s par une soci t agr e pour l limination des d chets dangereux En Belgique depuis l impl mentation de la r glementation imposant la notification de toute utilisation confin e d OGM et ou pathog nes le nombre d installations de niveau de confinement 3 qui ont t
27. finement 2 2 R partition g ographique des installations de haut niveau de confinement 2 3 Types d installations R partition des installations de niveau 3 par type d exploitation Installations de production grande chelle de niveau 3 Animaleries de niveau de confinement A3 2 4 Nature des op rations et organismes manipul s 3 Historique de l volution des notifications 4 Cas particuliers rencontr s 5 Cas particuliers des laboratoires de d tection de l agent responsable des enc phalopathies spongiformes bovines ESB 6 R f rences L gislation 7 Remerciements 8 Abr viations Annexe 1 classement de l utilisation confin e Annexe 2 Laboratoires de niveau L3 Annexe 3 Animaleries de niveau A3 Annexe 4 Installations de proc d s grande chelle de niveau LS3 J O1 10 10 12 14 15 16 17 18 19 21 24 27 ISP 15 CD 09 0432 3729 be o Ce rapport a pour objectif de pr senter l tat de la question sur les installations de haut niveau de confinement en Belgique Il s agit des installations o se d roulent des utilisations confin es de micro organismes g n tiquement modifi s et ou pathog nes de classe de risque 3 Les donn es expos es dans ce rapport couvrent la p riode de 1995 2008 1 INTRODUCTION L utilisation d organismes g n tiquement modifi s OGM et ou pathog nes en milieu confin peut avoir un impact sur la sant du travai
28. iagnostic ou la production ou bien encore l chelle de l activit La r partition sciemment arbitraire de la Figure 2 n est pr sent e que dans le but d obtenir une vue d ensemble sur le nombre et la nature des utilisations confin es de niveau 3 en Belgique Figure 2 R partition des installations de niveau 3 par type d exploitation AZ St Elizabeth 1 1 Cirlam 1 CHR Citadelle 1 Galapagos 1 CHU Charleroi 3 GSK Gembloux 1 CHU Li ge 19 GSK Rixensart 1 CHU St Pierre 5 GSK Wavre 1 Clin Univ St Luc 2 Henogen 2 HTMp Erasme 1 Innogenetics 1 Inst Malvoz 1 Prov Verb Dierenz 1 Mont Godinne 3 Janssen Pharma 1 OLV Aalst 4 Tibotec Virco 1 UZ Brussel 1 UZ Gent 1 UZ Leuven 1 Viraa Jesseziek Inst Bordet CERVA FUNDP ISP ITG KUL UCL ULB ULg M Universit s et instituts scientifiques de l Etat M Industrie et laboratoires priv s HTMpitaux et cliniques CO BR CO BR CO BB L gende On d nombre 40 installations de niveau de confinement 3 dans l industrie pharmaceutique et les laboratoires priv s correspondant plus de la moiti des installations de niveau 3 en Belgique Vingt quatre installations de niveau 3 sont situ es dans les universit s et les institutions scientifiques de l Etat Quinze L3 se trouvent dans les h pitaux et les cliniques ISP 15 CD 09 0432 9 29 be o Installations de production grande chelle de niveau 3 Le secteur de l indust
29. ictogramme Danger biologique ferm s et d sinfect s avant de quitter la zone confin e Avant lavage r emploi et ou destruction le mat riel contamin verrerie cages etc est inactiv par un proc d appropri et valid 55 Les effluents des viers et des douches sont de pr f rence inactiv s par un proc d appropri et valid avant l vacuation finale ISP 15 CD 09 0432 26 29 be e ANNEXE 4 Mesures g n riques de confinement et autres mesures de protection Installations de proc d s grande chelle de niveau LS3 Agencement et caract ristiques techniques des laboratoires 1 L installation est physiquement s par e des autres zones d activit s dans le b timent ou est situ e dans un b timent s par 2 Le b timent renfermant l installation est suffisamment loign de toute chauss e ou dans le cas contraire est r sistant l impact ventuel de v hicules 3 L installation est quip e pour le passage de mat riel d un sas permettant la d contamination de ce mat riel par exemple par fumigation ou par immersion et pour le personnel d un sas servant de vestiaire 4 La premi re porte du sas est verrouillable et contr l e par un syst me lectronique ou quivalent 5 Les portes du sas sont pourvues d un syst me de fermeture automatique Un dispositif particulier est install pour emp cher que les portes du sas ne puissent tre ouvertes en m me temps par exemple gr ce un sy
30. ion 24 Les gaines d alimentation et d extraction d air sont munis de clapets 25 L air extrait de la zone confin e est filtr au travers d un filtre HEPA En aucun cas cet air n est remis en circulation dans le b timent ou dans des b timents adjacents ou dispers proximit de prises d air ou de locaux communicant vers l ext rieur moins qu un second filtre HEPA ne soit install l extraction ISP 15 CD 09 0432 24 29 be 26 Le changement des filtres HEPA se fait apr s une d contamination pr alable ou dans des conditions permettant d viter toute contamination en suivant les r gles d finies par l installateur 27 Les conduites d air sont con ues pour permettre la d contamination du local au moyen d une substance gazeuse 28 Un taux de renouvellement d air ad quat permet de ventiler la zone contr l e afin de r duire au maximum la contamination de l air Equipement de s curit 29 Si le local dispose d une enceinte de s curit microbiologique celle ci est install e de mani re ne pas perturber l quilibre des courants d air l int rieur de la zone de travail Elle est plac e l cart des portes fen tres grilles d arriv e et d vacuation d air et des endroits de passage fr quent Elle est contr l e et certifi e au placement apr s chaque d placement et au moins une fois par an Elle est conforme la norme europ enne EN 12469 30 Les animaux sont maintenus dans des cages
31. istantes de l organisme r cepteur ISP 15 CD 09 0432 19 29 be o Afin de prendre connaissance des informations n cessaires la mise en uvre de cette proc dure l utilisateur se r f rera en premier lieu aux annexes techniques des arr t s r gionaux Cette annexe prend en consid ration la l gislation communautaire pertinente en particulier la directive 2000 54 CE du Parlement europ en et du Conseil du 18 septembre 2000 concernant la protection des travailleurs contre les risques li s l exposition des agents biologiques au travail de r f rence suivante ainsi que les classifications internationales ou nationales par exemple celles de l OMS du NIH etc et les r visions dont elles ont fait l objet en raison des nouvelles connaissances scientifiques et des progr s techniques L annexe classifie les organismes en quatre classes de risque qui peuvent servir de guide pour r partir les op rations impliquant une utilisation confin e dans les quatre classes de risque Les classifications vis es ci dessus ne donnent qu une indication provisoire de la classe de risque de l utilisation confin e et de l ensemble des mesures de confinement et de protection qui lui sont applicables La proc dure d identification des risques doit aboutir l identification du niveau de risque associ aux OGM et ou pathog nes Le choix des mesures de confinement et autres mesures de protection doit ensuite tre op r sur la base du niveau de
32. lations de niveau 3 sont repr sent es principalement par des laboratoires de diagnostic En province de Namur on trouve un laboratoire de recherche universitaire FUNDP Namur des installations de production d une industrie pharmaceutique GlaxoSmithKline Biologicals et un laboratoire de diagnostic La r partition des installations de la Figure 1 montre que la majeure partie des installations de haut niveau de confinement sont concentr es dans un rayon de 50 kilom tres En r sum les installations sont r parties de la mani re suivante sur le territoire 43 en R gion wallonne 21 en R gion flamande 15 en R gion de Bruxelles Capitale ISP 15 CD 09 0432 8 29 be o 2 3 TYPES D INSTALLATIONS R partition des installations de niveau 3 par type d exploitation Les installations de haut niveau de confinement peuvent tre situ es dans diff rents types d exploitation Parmi les exploitations qui poss dent des installations de niveau 3 on distingue les universit s et instituts scientifiques de l Etat les entreprises et laboratoires priv s et enfin les h pitaux et cliniques Il n existe aucune diff rence dans la qualit du confinement ni dans la fonctionnalit entre les installations de niveau 3 dans les diff rents types d exploitations Les particularit s ne r sident que dans la nature des op rations comme le registre des micro organismes manipul s le but de l op ration tel que la recherche le d
33. lleur sur la sant publique et sur l environnement dans la mesure o ils ne sont pas correctement manipul s Il est donc n cessaire d valuer les risques engendr s par l utilisation de ces OGM ou pathog nes et de prendre des mesures pour les confiner Les mesures et le niveau de confinement adopt pour ces utilisations confin es sont d termin s par une valuation des risques biologiques en tenant compte galement de la nature des activit s qui s y d roulent Pour ce faire l ad quation entre les risques et les mesures prises est valu e sur base des param tres suivants les caract ristiques techniques des locaux comme l tablissement d une pression n gative de l air par rapport aux zones adjacentes la pr sence d un sas de confinement la filtration de l air sur filtre HEPA les viers de lavage et de d contamination etc les quipements de s curit comme les enceintes de s curit microbiologique ESM les centrifugeuses avec safety cups etc les pratiques de travail y compris la gestion des d chets comme l emploi d quipements de protection individuelle blouse gants masque l instruction et la formation du personnel l inactivation des d chets potentiellement infectieux etc Afin de minimiser les effets n gatifs potentiels pour la sant humaine la sant publique et l environnement li s ce type d utilisation une r glementation europ enne en mati re d utilisation confin e de mi
34. ment modifi s ou pathog nes Annexe V point 4 1 4 de l Arr t du Gouvernement de la R gion de Bruxelles Capitale du 8 novembre 2001 relatif l utilisation confin e d organismes g n tiquement modifi s et ou pathog nes et au classement des installations concern es Annexe V 5 51 4 point 4 1 1 de l Arr t du Gouvernement flamand du 6 f vrier 2004 modifiant l arr t du Gouvernement flamand du 6 f vrier 1991 fixant le r glement flamand relatif l autorisation cologique et modifiant l arr t du Gouvernement flamand du ter juin 1995 fixant les dispositions g n rales et sectorielles en mati re d hygi ne de l environnement ISP 15 CD 09 0432 15 29 be o 6 R F RENCES L GISLATION Council Directive 90 219 EEC of 23 April 1990 on the contained use of genetically modified micro organisms Council Directive 98 81 EC of 26 October 1998 amending Directive 90 219 EEC on the contained use of genetically modified micro organisms Accord de coop ration du 25 avril 1997 entre l Etat f d ral et les R gions relatif la coordination administrative et scientifique en mati re de bios curit 3 MARS 1998 Loi portant assentiment l accord de coop ration entre l Etat f d ral et les R gions relatif la coordination administrative et scientifique en mati re de bios curit MB 14 07 1998 page 22773 Arr t royal du 8 octobre 1996 portant fixation des crit res d agr ment des laboratoires de r f re
35. n e pour une autre activit et chaque fois que cela s av re n cessaire 44 Les surfaces de travail sont d contamin es l aide d un d sinfectant appropri une fois le travail termin et chaque fois que du mat riel biologique est r pandu ISP 15 CD 09 0432 22 29 be 45 Une notice mise disposition du personnel sp cifie le mode d emploi des d sinfectants et pr cise en fonction du but recherch la nature du d sinfectant utiliser sa concentration et le temps de contact 46 Une instruction du personnel sur les aspects bios curitaires est organis e ainsi qu un suivi et une mise jour r guli re Le personnel est sp cialement form pour son travail en zone de confinement 3 47 Un manuel de s curit biologique est pr par et adopt Le personnel est pr venu des risques particuliers auxquels il est expos et est tenu de lire les instructions sur les pratiques de travail La conduite tenir en cas d accident est clairement affich e dans le laboratoire 48 Le pictogramme Danger biologique est appos sur les incubateurs frigos cong lateurs et cryopr servateurs azote liquide contenant du mat riel biologique de classe de risque 2 ou sup rieure 49 Un programme de contr le efficace des insectes et des rongeurs est mis en application 50 La circulation d animaux dans le laboratoire est interdite 51 La gestion des d chets et ou mati res biologiques r siduelles satisfait aux conditions suiva
36. nce pour le syndrome d immuno d ficience acquise Arr t minist riel du 24 janvier 1997 d signant les laboratoires agr s de r f rence pour le syndrome d immunod ficience acquise MB 28 11 1996 p 29910 Arr t du Gouvernement de Bruxelles Capitale du 9 d cembre 1993 relatif aux installations effectuant des op rations mettant en oeuvre des micro organismes ou des organismes pathog nes ou g n tiquement modifi s MB 25 01 1994 p 1424 Arr t du Gouvernement de la R gion de Bruxelles Capitale du 8 novembre 2001 relatif l utilisation confin e d organismes g n tiquement modifi s et ou pathog nes et au classement des installations concern es MB 26 10 2002 p 7209 Arr t du Gouvernement flamand du 1er juin 1995 fixant les dispositions g n rales et sectorielles en mati re d hygi ne de l environnement chapitre 5 51 du VLAREM II Biotechnologie MB 31 07 1995 p 20526 Arr t du Gouvernement flamand du 6 f vrier 2004 modifiant l arr t du Gouvernement flamand du 6 f vrier 1991 fixant le r glement flamand relatif l autorisation cologique et modifiant l arr t du Gouvernement flamand du ter juin 1995 fixant les dispositions g n rales et sectorielles en mati re d hygi ne de l environnement MB 01 04 2004 p 18362 Arr t du Gouvernement wallon du 13 juin 1996 modifiant le R glement g n ral pour la protection du travail en ce qui concerne l utilisation d organismes g n tiquement mo
37. niversit s ont introduit leurs dossiers partir de 1998 avec des pics en 2000 et 2002 Durant les deux ann es 2003 et 2004 les notifications de L3 se sont stabilis es 8 nouvelles installations par ann e puis s ensuit une diminution progressive de nouvelles notifications jusqu ce jour L volution du nombre des notifications montre qu apr s un p riode de r gularisation suite la parution des l gislations belges en mati re d utilisation confin e le nombre de nouvelles demandes d cro t sensiblement Ceci laisse penser qu ce jour la quasi totalit des installations de haut niveau de confinement sont notifi es Figure 3 volution des notifications d utilisations confin es de classe de risque 3 ventilation par r gion Nombre de notifications de nouvelles installations de niveau de confinement 3 par ann e Ventilation par r gion 25 20 15 R gion flamande E R gion wallonne R gion Bruxelles Capitale sei oo 1995 oi 1997 DS 10 3 i 2 H E Ko o o o A M MN QO FN Q D D D o O e D A A A A ON A N ann e de notification Remarque Entre 1995 et 2008 87 installations de niveau de confinement 3 ont t notifi es r parties dans 35 exploitations diff rentes Depuis lors deux exploitants ont d clar arr ter leurs utilisations confin es de classe de risque 3
38. ntation d air est asservi au syst me d extraction de fa on viter une surpression en cas de panne accidentelle l vacuation 25 Les syst mes d alimentation et d extraction d air peuvent tre ferm s au moyen de clapets ISP 15 CD 09 0432 27 29 be 26 L air extrait de la zone confin e est filtr au travers d un filtre HEPA En aucun cas cet air n est remis en circulation dans le b timent ou dans des b timents adjacents ou dispers proximit de prises d air ou de locaux communicant vers l ext rieur moins qu un second filtre HEPA ne soit install l extraction 27 Le changement des filtres HEPA se fait apr s une d contamination pr alable ou dans des conditions permettant d viter toute contamination en suivant les r gles d finies par l installateur 28 Les conduites d air sont con ues pour permettre la d contamination de la zone de travail au moyen d une substance gazeuse 29 Le syst me de ventilation dispose d une alimentation lectrique de secours en cas de coupure du courant g n ral 30 Le syst me de ventilation est accessible pour l inspection et la maintenance en dehors de la zone confin e 31 Un taux de renouvellement d air ad quat permet de ventiler la zone contr l e afin de r duire au maximum la contamination de l air Equipement de s curit 32 L installation dispose d au moins une enceinte de s curit microbiologique si des manipulations en phase ouverte sont r alis
39. ntes Les d chets et ou mati res biologiques r siduelles contamin s et le mat riel contamin usage unique sont inactiv s par un proc d appropri et valid avant vacuation par exemple par autoclavage ou incin ration L incin ration est effectu e par une installation agr e Les sacs ou les conteneurs utilis s pour la collecte des d chets infectieux sont r sistants tanches marqu s du pictogramme Danger biologique ferm s et d sinfect s avant de quitter la zone confin e Avant lavage r emploi et ou destruction le mat riel contamin verrerie lames etc est inactiv par un proc d appropri et valid 52 Les effluents des viers et des douches sont de pr f rence inactiv s par un proc d appropri et valid avant l vacuation finale ISP 15 CD 09 0432 23 29 be o ANNEXE 3 Mesures g n riques de confinement et autres mesures de protection Animaleries de niveau A3 Agencement et caract ristiques techniques des laboratoires 1 L animalerie est physiquement s par e des autres zones d activit s dans le b timent ou est situ dans un b timent s par 2 L entr e l animalerie s effectue via un sas 3 La porte d entr e du sas peut tre verrouill e et contr l e par un syst me lectronique ou quivalent 4 Les portes du sas sont pourvues d un syst me de fermeture automatique Un dispositif particulier est install pour emp cher que les portes du sas ne puissent
40. og nes et ou g n tiquement modifi s manipul s et stock s doit tre tenu 55 Les mesures de contr le ainsi que l quipement de contr le et de protection sont v rifi s de mani re appropri e et r guli re 56 Les exp rimentateurs se lavent les mains avant de quitter l installation pour une autre activit et chaque fois que cela s av re n cessaire 57 Les surfaces de travail sont d contamin es l aide d un d sinfectant appropri une fois le travail termin et chaque fois que du mat riel biologique est r pandu 58 Une notice mise disposition du personnel sp cifie le mode d emploi des d sinfectants et pr ciser en fonction du but recherch la nature du d sinfectant utiliser sa concentration et le temps de contact 59 Une instruction du personnel sur les aspects bios curitaires est organis e ainsi qu un suivi et une mise jour r guli re Le personnel est sp cialement form pour son travail en zone de confinement 3 60 Un manuel de s curit biologique est pr par et adopt Le personnel autoris entrer dans l installation est pr venu des risques particuliers auxquels il est expos et est tenu de lire les instructions sur les pratiques de travail La conduite tenir en cas d accident est clairement affich e dans l installation 61 Le pictogramme Danger biologique est appos sur les incubateurs frigos cong lateurs et cryopr servateurs azote liquide contenant du mat riel biologiqu
41. on Les l ments suivants doivent tre consid r s comme des effets potentiellement nocifs les maladies pouvant affecter l homme y compris les effets allergisants ou toxiques les maladies pouvant affecter les animaux ou les v g taux les effets d l t res dus l impossibilit de soigner une maladie ou de disposer d une prophylaxie efficace les effets d l t res dus l tablissement ou la diss mination dans l environnement les effets d l t res dus au transfert naturel dans d autres organismes de mat riel g n tique ins r L valuation doit tre fond e sur les l ments suivants l identification de tout effet potentiellement nocif notamment de ceux qui sont li s i l organisme r cepteur ii au mat riel g n tique ins r provenant de l organisme donneur iii au vecteur iv l organisme donneur pour autant que l organisme donneur soit utilis au cours de l utilisation v l OGM qui en r sulte les caract ristiques de l utilisation la gravit des effets potentiellement nocifs la possibilit de voir les effets potentiellement nocifs se r aliser 3 Proc dure suivre La premi re tape de la proc dure d valuation consiste identifier les propri t s nocives de l organisme r cepteur et le cas ch ant de l organisme donneur les propri t s nocives li es au vecteur ou au mat riel ins r y compris toute modification des propri t s ex
42. on confin e d organismes g n tiquement modifi s ou pathog nes n entra ne des effets n gatifs pour la sant humaine ou l environnement l utilisateur proc de une valuation pr alable des risques de l utilisation confin e l gard de la sant humaine et de l environnement en utilisant au moins les l ments d valuation et la proc dure suivre pour effectuer l valuation 1 Classement de l utilisation confin e L valuation des risques permet de ranger les utilisations confin es dans l une des quatre classes d finies ci dessous et de fixer le niveau de confinement Classe 1 utilisations confin es pour lesquelles le risque est nul ou n gligeable c est dire les utilisations pour lesquelles le niveau 1 de confinement est indiqu pour prot ger la sant humaine et l environnement Classe 2 utilisations confin es pr sentant un risque faible c est dire les utilisations pour lesquelles le niveau 2 de confinement est indiqu pour prot ger la sant humaine et l environnement Classe 3 utilisations confin es pr sentant un risque mod r c est dire les utilisations pour lesquelles le niveau 3 de confinement est indiqu pour prot ger la sant humaine et l environnement Classe 4 utilisations confin es pr sentant un risque lev c est dire les utilisations pour lesquelles le niveau 4 de confinement est indiqu pour prot ger la sant humaine et l environnement 2 El ments d valuati
43. ou dans des installations de confinement appropri es quivalentes 31 Les animaux sont maintenus dans des isolateurs pourvus d un filtre HEPA 32 Un autoclave de pr f rence double entr e est accessible dans la zone confin e 33 Un dispositif de d contamination de l quipement sortant est mis en place dispositif de fumigation ou bain de d sinfectant Pratiques de travail et m thodes de gestion des d chets 34 L acc s l animalerie est r serv aux personnes autoris es par le responsable et inform es des risques potentiels Un syst me de contr le d acc s est mis en place 85 Sur la porte d acc s l animalerie figure l affichage suivant le pictogramme Danger biologique le niveau de confinement les coordonn es du responsable de la zone la nature du risque biologique la liste des personnes autoris es d acc s les crit res d acc s la zone confin e 36 Un quipement sp cifique est r serv l animalerie 37 L emploi d une tenue de protection est requis Cette tenue de protection est sp cifique de la zone confin e et ne peut pas tre port e en dehors de celle ci Elle est d contamin e avant sa sortie de la zone confin e pour lavage ou limination 38 Des gants doivent tre port s 39 Il faut emp cher la cr ation d claboussures et la formation d a rosols et contr ler leur diss mination via l utilisation d quipements et de pratiques appropri s 40 L utilis
44. rie pharmaceutique peut comporter diverses activit s comme la recherche et d veloppement de nouveaux produits la fabrication et la production de m dicaments et de vaccins le contr le de qualit des produits et de l environnement Il est courant que ces diff rents types d activit s soient situ s sur un m me site Il est donc logique d y retrouver des L3 des animaleries de niveau de confinement 3 A3 et des installations grande chelle de niveau de confinement 3 LS3 Ceux ci h bergent les activit s de production n cessitant la culture de gros volumes ou de fortes concentrations de virus de vecteurs viraux ou de bact ries pathog nes par exemple Animaleries de niveau de confinement A3 Parmi les 85 installations de niveau 3 pr sentes en Belgique 9 sont des animaleries Les A3 sont essentiellement constitu es de locaux d h bergement pour animaux d exp rience mais elles peuvent galement inclure des zones de stockage d aliments des vestiaires des douches des autoclaves Les animaux h berg s sont des animaux exp rimentalement infect s par des micro organismes pathog nes Les A3 se trouvent dans les institutions suivantes CERVA site Uccle GlaxoSmithKline Biologicals Janssen Pharmaceutica KUL Tibotec Virco ULg et ULB 2 4 NATURE DES OPERATIONS ET ORGANISMES MANIPULES Seulement 10 des installations de niveau de confinement 3 servent confiner la manipulation de MGM virus ou bact ries de classe de risqu
45. ruction du personnel sur les aspects bios curitaires est organis e ainsi qu un suivi et une mise jour r guli re Le personnel est sp cialement form pour son travail en zone de confinement 3 50 Un manuel de s curit biologique est pr par et adopt Le personnel est pr venu des risques particuliers auxquels il est expos et est tenu de lire les instructions sur les pratiques de travail La conduite tenir en cas d accident est clairement affich e dans le local 51 Le pictogramme Danger biologique est appos sur les incubateurs frigos cong lateurs et cryopr servateurs azote liquide contenant du mat riel biologique de classe de risque 2 ou sup rieure 52 Un programme de contr le efficace des vecteurs potentiels tels que les insectes et les rongeurs est mis en application 53 Les animaux faisant partie de l exp rience sont isol s dans un local s par 54 La gestion des d chets et ou mati res biologiques r siduelles satisfait aux conditions suivantes Les d chets et ou mati res biologiques r siduelles contamin s cadavres excr ments liti res contamin es etc et le mat riel contamin usage unique sont inactiv s par un proc d appropri et valid avant vacuation par exemple par autoclavage ou incin ration L incin ration est effectu e par une installation agr e Les sacs ou les conteneurs utilis s pour la collecte des d chets infectieux sont r sistants tanches marqu s du p
46. s concern s ont t mis en conformit apr s les visites et interventions des services d autorisation et d inspection des autorit s comp tentes et du SBB A l inverse on rencontre aussi le cas d installations de niveau 3 qui sont utilis es des fins qui ne n cessitent pas un tel niveau de confinement comme par exemple des cultures cellulaires des fins de production d anticorps ou la production de bact ries pathog nes de classe de risque 2 non transmissibles par l air Salmonella ou encore la production de vecteurs r troviraux recombinants des fins d essais cliniques L adoption de mesures de confinement plus strictes provient le plus souvent de la n cessit de combiner le respect des r gles de bios curit avec des exigences de qualit dans la production de type GMP Ces installations sont n anmoins comptabilis es dans le nombre total de L3 en Belgique puisqu elles remplissent tous les crit res n cessaires pour ce niveau de confinement Ces installations peuvent donc potentiellement h berger des micro organismes de classe de risque 3 g n tiquement modifi s ou non ISP 15 CD 09 0432 14 29 be 5 CAS PARTICULIERS DES LABORATOIRES DE DETECTION DE L AGENT RESPONSABLE DES ENCEPHALOPATHIES SPONGIFORMES BOVINES ESB Il existe des laboratoires de haut niveau de confinement qui n ont pas t inclus dans l inventaire des 79 installations pr c demment mentionn es Il s agit des laboratoires qui effectuent
47. s dans la zone confin e et utilis s pour les interventions d urgence en cas d incident ISP 15 CD 09 0432 28 29 be o 47 En dehors des manipulations les micro organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s viables sont confin s dans des syst mes tubes bo tes ferm s 48 Il faut minimiser la cr ation d claboussures et la formation d a rosols par exemple au cours du pr l vement d chantillons de l ajout de mat riel un syst me ferm ou du transfert de mat riel dans un autre syst me ferm et contr ler leur diss mination via l utilisation d quipements et de pratiques appropri s 49 Toute manipulation en phase ouverte susceptible de produire des a rosols infectieux ou comportant des risques potentiels se fait dans une enceinte de s curit microbiologique 50 L utilisation d une hotte flux laminaire horizontal est proscrite pour la manipulation des micro organismes pathog nes et ou g n tiquement modifi s 51 Pour la prise d chantillons on utilise des r cipients se fermant herm tiquement incassables et pouvant tre d sinfect s 52 Des dispositifs de pipetage m canique sont utilis s Le pipetage la bouche est proscrit 53 Il est interdit de manger boire fumer de manipuler des lentilles de contact d utiliser des produits cosm tiques ou de stocker de la nourriture destin e la consommation humaine dans l installation 54 Un registre consignant tous les organismes path
48. st me interlock Ce dispositif est tel qu il ne g ne pas les secours en cas d accident 6 L installation dispose d une sortie de secours porte une issue o syst me quivalent et proc dures 7 Les fen tres sont scell es herm tiquement 8 La zone de travail peut tre rendue tanche de mani re permettre une d contamination au moyen d une substance gazeuse 9 L installation est con ue de mani re faciliter le nettoyage et la d contamination de la zone de travail ainsi que le programme de contr le des insectes et des rongeurs 10 L installation est pourvue d une fen tre d observation ou d un syst me quivalent permettant de voir les occupants depuis l ext rieur 11 La zone confin e dispose d un vier commande non manuelle pour le lavage et la d contamination des mains Cet vier est dispos dans le sas personnel 12 Une douche de secours peut tre dispos e soit dans la zone de travail soit dans le sas 13 Les sanitaires se trouvent l ext rieur de l installation 14 Des vestiaires ou portemanteaux sont mis disposition du personnel pour les v tements de protection Les v tements de protection et les v tements de ville ne sont pas mis en contact 15 Les conduites d apport de fluides sont munies de dispositifs anti reflux 16 Le sol et les tables de travail sont faciles nettoyer imperm ables l eau r sistantes aux substances acides ou alcalines aux solvants organiques au
49. stis Agents non Prions agents des enc phalopathies spongiformes conventionnels transmissibles EST Autres Production grande chelle de bact ries de classe de risque 2 transmissibles par l air Haemophillus influenza Neisseria meningitidis Streptoccocus pneumonia MGM Vecteurs viraux Vecteur ad noviraux recombinants Vecteurs lentiviraux recombinants Virus Hantavirus recombinants Human Immunodeficiency Virus HIV R trovirus Simian Immunodeficiency Virus SIV Bact ries Brucella melitensis recombinantes Mycobacterium tuberculosis Cultures Cellules infect es cellulaires Cellules transfect es par des vecteurs viraux recombinants Remarque La manipulation des micro organismes cit s dans le tableau ne doit pas syst matiquement s effectuer dans un L3 autrement dit il n y a pas de corr lation syst matique entre la classe de risque ISP 15 CD 09 0432 11 29 be d un organisme et le niveau de confinement adopt pour le manipuler Une valuation des risque doit tre effectu e au cas par cas et le niveau de confinement requis ainsi que les pratiques de travail sont d termin s en tenant compte de diff rents facteurs comme l chelle de l activit le type de manipulation la nature des inserts clon s dans le vecteur viral Par exemple l adoption d un niveau de confinement 3 est seulement requise pour la production de vecteurs ad noviraux porteurs d un insert qui
50. t CERVA ISP et UCL Le grand nombre d installations pr sentes en province du Brabant wallon est expliqu par l implantation d une grande entreprise pharmaceutique GlaxoSmithKline Biologicals sur ce territoire En province d Anvers o sont implant es plusieurs entreprises pharmaceutiques Janssen Pharmaceutica Tibotec Virco on retrouve galement un grand nombre d installations de niveau 3 En province du Hainaut toutes les installations de haut niveau de confinement sont concentr es Charleroi o se trouve l a rop le de Gosselies ULB Henogen En province de Li ge c est sur le site du Sart Tilman que sont situ s la plupart des L3 et ce gr ce la pr sence de l ULg et du CHU de Li ge 7 Arr t royal du 8 octobre 1996 portant fixation des crit res d agr ment des laboratoires de r f rence pour le syndrome d immuno d ficience acquise 8 Arr t minist riel du 24 janvier 1997 d signant les laboratoires agr s de r f rence pour le syndrome d immunod ficience acquise ISP 15 CD 09 0432 7 29 be o Figure 1 r partition g ographique des installations de niveau de confinement 3 en Belgique L gende Les points bleus marquent l endroit o sont situ es les installations de niveau de confinement 3 La taille des points est proportionnelle au nombre d installations pr sentes dans la commune ou la ville Dans les provinces du Limbourg de Flandre orientale et de Flandre occidentale les instal
51. vacuation d air et des endroits de passage fr quent Elle est contr l e et certifi e au placement apr s chaque d placement et au moins une fois par an Elle est conforme la norme europ enne EN 12469 27 Un autoclave de pr f rence double entr e est accessible dans la zone confin e 28 Le mat riel biologique est centrifug dans des centrifugeuses accessibles dans la zone confin e Celui ci est plac en tubes tanches dans des rotors ou nacelles pr sentant un syst me de fermeture herm tique safety cups contenant les a rosols en cas de bris ou de fissure de tubes 29 Si un syst me g n rateur de vide est utilis il est pourvu d un filtre HEPA Pratiques de travail et m thodes de gestion des d chets 30 L acc s au laboratoire est r serv aux personnes autoris es par le responsable et inform es des risques potentiels Un syst me de contr le d acc s est mis en place 31 Sur la porte d acc s au laboratoire figure l affichage suivant le pictogramme Danger biologique le niveau de confinement les coordonn es du responsable de la zone la nature du risque biologique la liste des personnes autoris es d acc s les crit res d acc s la zone confin e 32 Un quipement sp cifique est r serv au laboratoire 33 L emploi d une tenue de protection est requis Cette tenue de protection est sp cifique de la zone confin e et ne peut pas tre port e en dehors de celle ci Elle
52. x d sinfectants et aux agents de d contamination utilis s 17 La zone de travail doit tre am nag e de mani re pouvoir capter le contenu du confinement primaire en cas de rupture ou de fuite importante Le volume de ce dispositif de captage sera au moins gal au volume individuel du confinement primaire le plus important 18 Un syst me lectrique autonome en cas de panne de courant existe 19 Le laboratoire dispose d un syst me automatique de d tection et d alarme incendie 20 La zone confin e dispose d un interphone t l phone ou tout autre syst me permettant de communiquer avec l ext rieur 21 La zone de travail est maintenue en permanence une pression n gative de l air par rapport aux zones adjacentes pour viter tout transfert de contamination de l int rieur vers l ext rieur 22 La pression n gative relative de l air est contr l e par un manom tre et il est recommand qu un syst me d alarme se d clenche en cas de d faillance du syst me de ventilation 23 Si le syst me d alimentation d air n est pas assur par un syst me ind pendant de celui des zones adjacentes syst me ind pendant recommand un filtre HEPA ou des clapets sont install s pour pr venir le refoulement d air Si le syst me d extraction d air n est pas assur par un syst me ind pendant de celui des zones adjacentes syst me ind pendant recommand un second filtre HEPA est install l extraction 24 Le syst me d alime
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