Gélose Columbia (base)
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1. f BKO19HA 10 de sang de mouton st rile Incubation 48 heures 37 C Caract ristiques B h molyse zones d claircissement nettes dans le sang a h molyse zones d claircissement moins nettes avec une teinte verd tre Les mentions port es sur l tiquette sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 09 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK019 F 2003 01 4 4 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr2. G lose Columbia base DOMAINE D UTILISATION La g lose Columbia est un milieu tr s nutritif permettant les culture et isolement d une grande vari t de microorganismes et plus particuli rement des germes tr s exigeants tels que streptocoques et pneumocoques partir de divers pr l vements d origine animale Par addition de sang d agents s lectifs ou d acc l rateurs de croissance il est possible de pr parer une grande diversit de milieux adapt s des utilisations sp cifiques HISTORIQUE Mise au point par Ellner en 1966 la g lose Columbia permet d obtenir des cultures luxuriantes des zones h molytiques parfaitement d finies des colonies et des pigmentations bien caract ristiques PRINCIPES Les pepiones qui entrent dans la composition du milieu favorisent l excellente croissance des colonies _ L extrait de levure est une source du complexe vitaminique B _ L amidon est un d toxifiant galement source d nergie Le sang de mouton d fibrin qui peut tre rajout au milieu favorise la d tection des r actions h molytiques et apporte le facteur X h me n cessaire la croissance de nombreuses bact ries mais ne contient pas le facteur V nicotinamide ad nine dinucl otide en raison de la pr sence d une NAD ase qui d truit le NAD Haemophilus influenzae qui requiert la fois les facteurs X et V ne pousse pas sur g lose au sang ordinaire Avec la base Columbia il est possible d
3. agar entra nera in vitablement une alt ration significative de la consistance du gel du milieu solidifi apr s st rilisation et refroidissement MODE D EMPLOI Faire fondre le milieu s il est pr par l avance __Refroidir et maintenir 44 47 C Ajouter les additifs n cessaires la culture des bact ries recherch es sang d fibrin st rile de cheval ou de mouton acc l rateurs de croissance agents s lectifs Bien homog n iser Couler en bo tes de Petri st riles Laisser solidifier sur une surface froide Faire s cher en bo tes l tuve couvercle entrouvert _ Ensemencer l inoculum Incuber 37 C de 24 48 heures dans les conditions optimales de culture des germes ensemenc s FORMULE TYPE du milieu de base pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu de base lt PolypeptONe Sc 17 0 g Peptone pancr atique de coeur nnet 3 0g Extrait autolytique de ISVUT s nantes 3 0 g sAmd n de MAIS NS nu tn 1 09 Chlorure de SOILIMss snnennnua honte 5 0 g Agar agar bact riologique sine 13 59 pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 3 0 2 2 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat poudre b
4. e pr parer les milieux suivants G lose au sang frais Par addition de 5 ou 10 de sang de mouton st rile apr s autoclavage et refroidissement le milieu convient la culture de streptocoques pneumocoques staphylocoques Listeria Erysipelothrix Il peut tre rendu s lectif par adjonction de colistine ainsi que d acide nalidixique pour viter le d veloppement des microorganismes Gram n gatif et des Bacillus G lose chocolat Par addition de 10 de sang la g lose Columbia st rile puis chauffage 80 C jusqu l obtention d une teinte chocolat on obtient un excellent milieu pour la culture des Haemophilus et des Neisseria Milieu de base sans enrichissement La g lose Columbia permet la culture de Brucella abortus Yersinia pestis Clostridium perfringens et de toutes les ent robact ries 1 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr PREPARATION Mettre en suspension 42 5 g de milieu de base d shydrat BK019 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et ly maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution R partir en tubes ou en flacons __ St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes NOTA Une liqu faction partielle de l
5. eige fluide et homog ne Milieu pr par avec 5 de sang de mouton d fibrin g lose rouge opaque R ponse culturale typique apr s 48 heures d incubation 37 C en pr sence de sang de mouton d fibrin 5 m thode qualitative d ensemencement Streptococcus pyogenes ATCC 19615 bonne score 2 Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 bonne score 2 Listeria monocytogenes ATCC 19115 bonne score 2 Staphylococcus aureus ATCC 25923 bonne score 2 Escherichia coli ATCC 25922 bonne score 2 STOCKAGE CONSERVATION Milieu de base d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu de base pr par en flacons 6 mois 2 8T titre indicatif Milieu pr par en bo tes avec sang de mouton 1 mois 2 8 titre indicatif PRESENTATION Code Milieu de base d shydrat Flacon de 500 g BKO19HA REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES NETER E 1947 The effect of yeast concentrate on the growth and survival of Haemophilus influenza in infusion broth Journal of Bacteriology 54 70 71 THAYER J D and MARTIN J E 1966 Improved medium selective for cultivation of Neisseria gonorrhoeae and Neisseria meningitidis Public Health Report 81 559 562 ELLNER P D STOESSEL C J DRAKEFORD E and VASI F 1966 A new culture medium for medical bacteriology American Journal of Clinical Pathology 45 502 504 NF V 08 405 D cembre 1986 Conserves Recherche d
6. es Clostridium thermophiles XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF U 47 108 D cembre 2004 M thodes d analyse en sant animale Isolement et identification de Taylorella equigenitalis partir de pr l vements g nitaux d quid s NF EN ISO 10272 1 V 08 026 1 Avril 2006 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche et le d nombrement des Campylobacter spp Partie 1 M thode de recherche Pharmacop e Europ enne 5 6 01 2007 20613 2 6 13 Contr le microbiologique des produits non st riles Recherche de microorganismes sp cifi s Solution et milieux de culture recommand s 4679 4682 United States Pharmacopeia 30 2007 Microbiological Tests Microbiological Examination Recommended Solutions and Culture Media 96 97 3 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr SUPPORT PHOTO R f rence produit BKO19HA Utilisation Les culture et isolement d une grande vari t de microorganismes et plus particuli rement des germes tr s exigeants par addition de sang Streptocoques du groupe D h molyse G lose Columbia base R
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