Procédure L3
Contents
1. Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Dans le L3 Changer la paire de gants sup rieure D clencher louverture de la porte Ouvrir la porte Entrer dans le SAS 2 et rester dans la ZONE 2 en de de a marque au sol Fermer la porte Dans le sas 2 ZONE 2 Oter une surchaussure la jeter dans la poubelle et passer le pied de l autre c t de la marque au sol Oter la seconde surchaussure la jeter dans la poubelle et passer l autre pied de l autre c t de la marque au sol ZONE 1 Oter la paire de lunettes et la ranger Oter la charlotte et la jeter dans la poubelle Oter le masque et le jeter dans la poubelle Oter la paire de gants sup rieure et la jeter dans la poubelle Oter la casaque Poser la casaque sur sa pat re en la repliant sur sa face ext rieure D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte Entrer dans le SAS 1 Fermer la porte Dans le sas 1 Oter la paire de gants restante et la jeter dans la poubelle D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte Sortir Refermer la porte 25 Inserm Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission Veille Technologique Dans le L3 SORTIE DE MATERIEL D UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Date de r daction 20 juin 2007 D sinfecter le mat riel r parer D2. est d j le cas un masque FFP2D ou FFP3D neuf Arr ter et d brancher le bain marie Aspirer le contenu de la cuve dans un r cipient sp cifique qui sera trait ult rieurement comme un d chet liquide En cas de contamination d une paroi externe absorber le liquide contaminant avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Mettre une nouvelle paire de gants latex NF Incliner le bain marie l horizontale sur la paroi contamin e Appliquer un d tergent Appliquer une solution de d tergent sur la zone contamin e Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d tergent avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Appliquer le d sinfectant Mettre une nouvelle paire de gants latex NF Appliquer le d sinfectant adapt la concentration efficace Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d sinfectant avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Jeter le masque FFP2D ou FFP3D dans la poubelle pour d chets solides D sinfection de l eau de la cuve du bain marie Appliquer le d sinfectant Mettre des gants latex NF Arr
3. tubes et flacons de culture L exp rimentateur Pour chaque bo te plaque tube ou flacon Ouvrir la bo te plaque tube ou flacon liminer le liquide par aspiration Recueillir ce liquide dans le flacon de collecte pr vu cet effet Ajouter dans la bo te plaque tube ou flacon un volume de la solution d sinfectante quivalent celui limin Fermer la boite plaque tube ou flacon laisser en contact comme d crit dans le mode d emploi du d sinfectant utilis R cup rer la solution d sinfectante dans le flacon de collecte pr vu cet effet Mettre la bo te tube ou flacon dans la poubelle d chets solides balis e et doubl e d un sac autoclave 20 Inserm SORTIE DES DECHETS SOLIDES Cat gorie DANS UN LABORATOIRE DE rt Institut national de la sant et de la recherche m dicale NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours AUTOCLAVAGE DES DECHETS SOLIDES ei o7 e Te Comment L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer les sacs Enlever le sac doublant la poubelle autoclave d chets solides Ligaturer le sac autoclave avec l adh sif indicateur de st rilisation Dans le L3 Autoclaver les Ouvrir la porte de l autoclave Autoclave d chets Introduire es sacs dans l autoclave Fermer la porte de l autoclave S lectionner le cycle
4. Cai gorie DANS UN LABORATOIRE DE er NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Inactivation chimique des d chets solides p 19 Autoclavage des d chets solides p 21 Inserm SORTIE DES DECHETS SOLIDES pros DANS UN LABORATOIRE DE busalion NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Institut national de la sant et de la recherche m dicale du L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours INACTIVATION CHIMIQUE DES DECHETS SOLIDES erii O eTo Comment L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer la solution Pr parer la solution d sinfectante d sinfectante la concentration finale efficace Verser dans un b cher destin au traitement des pipettes 1L de la solution pr par e extemporan ment Verser dans un second b cher destin au traitement des c nes 100ml de la solution pr par e extemporan ment Dans le L3 Installer le mat riel de Introduire les b chers de solution sous le PSM d sinfection d sinfectante Installer un sac de recueil des c nes Sur son support Introduire un flacon avec bouchon contenant de la solution d sinfectante pour recueillir les liquides contamin s Traitement des c nes et des pipettes L exp rimentateur Dans le L3 Traitement des c nes Pour chaque c ne sous
5. clencher l ouverture de la porte du sas mat riel Ouvrir la porte du SAS mat riel Placer le mat riel r parer dans le SAS Fermer la porte du SAS Mat riel Dans la laverie D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte du SAS mat riel Retirer le mat riel r parer du SAS Fermer la porte du SAS Mat riel Cat gorie Utilisation du L3 Version n3 en cours 26 Inserm Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission Veille Technologique Dans le L3 SORTIE DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES VIABLES D UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Date de r daction 20 juin 2007 Changer la paire de gants sup rieure D sinfecter l ext rieur du tube contenant l chantillon l aide d une lingette impr gn e de la solution d sinfectante adapt e Placer les chantillons dans un triple emballage r glementaire et tanche Dans le sas mat riel D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte du SAS mat riel Placer le triple emballage tanche dans le SAS Fermer la porte du SAS mat riel Mettre en route un cycle de st rilisation formolation interdite pour les prions Dans la laverie Cat gorie Utilisation du L3 Version n3 en cours Attendre la fin du cycle de st rilisation formolation interdite pour les prions D clencher l ouverture de la porte Ou
6. ne et s curit PR VENTION Manipuler les produits biologiques sous poste de s curit micro biologique PSM de type ll Porter des lunettes de protection coques lat rales des g nts adapt s et une blouse ferm e Inserm LISTE DES PERSONNES Cat gorie S RESSOURCES Utilisation Ppp la recherche m dicale d u L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours LES SECOURS Sapeurs pompiers Police ou Gendarmerie SAMU D scocoscsss PC de S curit REPRESENTANT E DES UTILISATEURS AU COMITE DE GESTION DU L3 ae ons P PREVENTION DES RISQUES Se net ose oser ng nieur s Hygi ne et S curit D A r A Te r E E A PREN nee ns EN TEA M decin s de pr vention P r AA 5 SERVICE MEDICAL INSERM 2 01 44 23 62 83 SERVICE BATIMENT sions un ait Responsable services techniques D COMITE DE GESTION DU L3 ES D AEE E E A E A E T ES A EEE EA E E Repr sentant e des utilisateurs du L3 E E E A S Ing nieur H et S H E E EEE E E EE Ing nieur H et S ZE ESRA Ae N es TE A Ing nieur H et S H E E A e iera eA M decin de pr vention f E R A E A M decin de pr vention e EA E ETR ET M decin de pr vention 2 35 Inserm FORMULAIRE D AUTORISATION Cat gorie D ACCES A UN
7. LABORATOIRE DE D NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Compl ter obligatoirement les 3 paragraphes Je soussign M s ssssssssennrsnnnrnnnnnnnnennn demandeur d acc s au L3 dans le cadre du projet certifie avoir une connaissance suffisante des proc dures de travail en L3 pour y effectuer les exp rimentations d crites dans le projet mentionn ci dessus dans le respect des r gles de s curit Je d clare avoir pris connaissance en leur entier du r glement int rieur du L3 et de ses proc dures d utilisation et m engage les respecter Fait Paris le M issues de la formation de recherche Je soussign asus ess eUr de NT membre de l quipe de la formation de recherche certifie m tre assur que cette personne a une connaissance suffisante des proc dures de travail en L3 pour y effectuer les exp rimentations d crites dans le projet mentionn ci dessus dans le respect des r gles de s curit M css ottfelt de Misiisissisnsianse membre de l quipe formation de recherche de la formation de travailler dans le L3 dans le cadre du projet Je certifie que M sssssssssissterensssese a acquis une connaissance suffisante des proc dures de travail en L3 pour y effectuer les exp rimentations d crites dans le projet me
8. chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Appliquer le d sinfectant Mettre une nouvelle paire de gants latex NF Appliquer le d sinfectant adapt la concentration efficace Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d sinfectant avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Jeter le masque FFP2D ou FFP3D dans la poubelle pour d chets solides D sinfection de la r serve d eau Appliquer le d sinfectant Arr ter l incubateur et transf rer son contenu dans un autre Attendre que l eau de la r serve refroidisse Verser le d sinfectant adapt la concentration efficace dans la r serve d eau Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit R cup rer le liquide dans un r cipient Autoclaver le r cipient et son contenu Evacuer les d chets selon la proc dure en vigueur pour les d chets liquides 14 CONDUITE A TENIR EN CAS DE Cat gorie Inserm CONTAMINATION D UN BAIN ii MARIE Risque Biologique D partement Ressources Humaines Date de r daction Version n3 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques 20 juin 2007 en cours Mission veille technologique D sinfection des parois internes ou externes du bain marie Absorber le contaminant Mettre des gants latex NF Mettre si ce n
9. daction Version n3 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques 20 juin 2007 en cours Mission veille technologique erri O Quoi Comment L exp rimentateur Dans le L3 Transporter les rotors ou Changer de gants latex D centrifugeuse nacelles sous le PSM Ouvrir le couvercle de la centrifugeuse Oter le rotor ou les nacelles herm tiques de la cuve de la centrifugeuse Les transporter sous le PSM Dans le L3 Installer le mat riel disposer deux r cipients dont un sous le PSM MESE RENE avec couvercle et rempli de solution d sinfectante la concentration efficace se munir d une pince Dans le L3 Extraire les tubes cass s Nacelles herm tiques sous le PSM ouvrir la ou les nacelles concern es Extraire les tubes cass s avec la pince Jeter les d bris dans le conteneur d chets piquants coupants Pr lever le liquide r pandu et le verser dans le r cipient muni d un couvercle et contenant le d sinfectant Apr s avoir vid la ou les nacelles verser l int rieur de celle s ci une partie de la solution d sinfectante contenue dans le r cipient sans couvercle Fermer la ou les nacelles concern es et laisser en contact 12h ou une nuit Rotor herm tique Oter le couvercle du rotor Sortir les cartouches et les ouvrir Extraire les tubes cass s avec la pince Jeter les d bris dans le conteneur d chets piquants coupants Suivre une d marche identique cel
10. national de la sant et de la recherche m dicale D clencher louverture de la porte du sas mat riel Ouvrir la porte du SAS mat riel Placer le mat riel dans le SAS Fermer la porte du SAS mat riel Mettre en route le cycle de st rilisation Formolation interdite pour les prions Dans le L3 Attendre la fin du cycle de st rilisation D clencher louverture de la porte du sas mat riel Ouvrir la porte du SAS mat riel Retirer le mat riel du SAS Fermer la porte du SAS mat riel Inserm ENTREE D ECHANTILLONS Feet mers BIOLOGIQUES DANS UN rs LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 iuin 2007 en cours de la sant et de la recherche m dicale Dans la laverie D clencher l ouverture de la porte du sas mat riel Ouvrir la porte du SAS mat riel Placer l emballage tanche contenant l chantillon biologique dans le SAS Mettre en route le cycle de st rilisation Formolation interdite pour les prions Fermer la porte du SAS mat riel Dans le L3 Attendre la fin du cycle de st rilisation D clencher l ouverture de la porte du sas mat riel Ouvrir la porte du SAS mat riel Prendre l emballage contenant l chantillon biologique dans le SAS Fermer la porte du SAS mat riel Inserm UTILISATION DES PSM DANS UN Cat gorie rs LABORATOIRE DE NIV
11. ne pas confondre avec l extrait de Javel ou du Dakin stabilis gt Consulter aussit t le m decin r f rent pour les risques VIH et ou h patites dans les 2 heures qui suivent Tel EN CAS DE PROJECTION SUR LA PEAU Laver aussit t l eau courante ou avec la douche de s curit jet diffus pendant 15 minutes au moins Consulter aussit t le m decin r f rent pour les risques VIH et ou h patites dans les 2 heures qui suivent Tel EN CAS DE PROJECTION DANS L IL Laver aussit t l eau courante pendant 15 minutes au moins en cartant bien les paupi res t te inclin e et l il atteint positionn vers le bas se faire aider par un coll gue Ne pas enlever les lentilles corn ennes gt Ne pas neutraliser Ne pas utiliser de collyre ou solutions oculaires gt Consulter aussit t le m decin r f rent pour les risques VIH et ou h patites dans les 2 heures qui suivent Tel gt Consulter un ophtalmologiste en urgence DANS LES JOURS SUIVANTS Consulter dans les 24 heures le m decin de pr vention pour valuer les risques et lui signaler tout sympt me survenant dans les jours suivant l incident ou l accident Faire une d claration d accident du travail gt Avertir le correspondant hygi ne et s curit et consigner l incident ou l accident dans le registre hygi ne et s curit gt Notifier l incident ou l accident au m decin de pr vention et l ing nieur hygi
12. solides Baliser la zone contamin e Terminer l tape technique en cours Mettre hors tension l quipement Appliquer un d tergent pour casser le biofilm Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber Appliquer le d sinfectant adapt Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber Inserm CENTRIFUGATION DANS UN Cat gorie rs LABORATOIRE DE NIVEAU DE Utilisation de la sant et de la recherche m dicale du L3 CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours But D crire les principales r gles observer pour centrifuger du mat riel potentiellement contamin par des agents biologiques pathog nes CETTE PROCEDURE NE CONCERNE QUE LES CENTRIFUGEUSES QUI PEUVENT ETRE EQUIPEES D UN ROTOR OU DE NACELLES HERMETIQUES emi O Quoi Comment L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer la centrifugation Introduire sous le PSM les nacelles ou le Sous le PSM rotor herm tiques Nacelles herm tiques Oter leur couvercle Rotor herm tique Oter le couvercle du rotor Extraire les cartouches porte tubes Ouvrir les cartouches L exp rimentateur Dans le L3 Installer les tubes fermer les tubes centrifuger l aide de Sous le PSM centrifuger leur couvercle les quilibrer Nacelles herm tiques introduire les tubes dans les nacelles ferme
13. telle qu elle rend caduque toute tentative de codification stricte au sein d un document unique et exhaustif d une bonne utilisation d un laboratoire de niveau de confinement L3 Ce guide est donc un document type qui doit imp rativement tre adapt et ou compl t pour tenir compte de la situation locale par les utilisateurs en concertation avec l ing nieur hygi ne et s curit Les textes en italique marron et gras signalent des recommandations qui aux yeux des auteurs doivent syst matiquement faire l objet d une adaptation chaque situation locale Ce document ayant une vocation technique tout ce qui a trait une situation d urgence m dicale en a t volontairement exclu et doit tre crit sous la responsabilit du m decin de pr vention Inserm DEMARCHE D UTILISATION D UN Cat gorie nn aa LABORATOIRE DE NIVEAU DE Dre dl CONFINEMENT L3 d Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 iuin 2007 en cours But D crire les tapes essentielles pour mettre en uvre un projet scientifique dans le L3 Il est consid r comme pr alablement acquis que le r glement int rieur du L3 a t lu et accept R diger un projet exp rimental Remplir le formulaire pr tabli Formulaire de projet exp rimental p 2 Conna tre les proc dures de travail applicables dans le L3 Conna tre les proc dures d u
14. ter et d brancher le bain marie Verser le d sinfectant adapt la concentration efficace dans la cuve du bain marie Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Aspirer le liquide dans un r cipient sp cifique Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Autoclaver le r cipient et son contenu Evacuer les d chets selon la proc dure en vigueur pour les d chets liquides Inserm CONDUITE A TENIR EN CAS DE Cat gorie o CONTAMINATION D UN m dm danari de racer die REFRIGERATEUR ie Biologique D partement Ressources Humaines Date de r daction Version n3 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques 20 juin 2007 en cours Mission veille technologique Absorber le contaminant Mettre des gants latex NF Mettre si ce n est d j le cas un masque FFP2D ou FFP3D neuf Arr ter d brancher et vider le r frig rateur Absorber le liquide avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Le laisser revenir temp rature ambiante Appliquer un d tergent Mettre une nouvelle paire de gants latex NF Appliquer une solution de d tergent sur la zone contamin e Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d tergent avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la pou
15. 3 Appeler une personne l ext rieur du L3 et attendre son intervention d sactiver l asservissement des portes Ouvrir la porte Sortir Une fois dans le couloir r activer l asservissement des portes INTERVENTION D UNE PERSONNE DE L EXTERIEUR D clencher l ouverture de la porte du sas 1 Ouvrir la porte Entrer dans le SAS 1 Fermer la porte Mettre des gants Avant toute action v rifier que la porte entre les deux sas est bien ferm e Sinon la fermer Si la porte entre les deux sas est ferm e ressortir dans le couloir d sactiver l asservissement des portes faire sortir le manipulateur R activer l asservissement des portes 33 Inserm CONDUITES A TENIR EN CAS Cat gorie ae D ACCIDENT EXPOSANT AU Utilisation SANG OU A DES PRODUITS ques BIOLOGIQUES DANS UN de la sant et de la recherche m dicale LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 iuin 2007 en cours Sortir du L3 et appliquer la proc dure ci dessous K Accident avec du mat riel biologique IMM DIATEMENT EN CAS DE COUPURE OU PIQ RE Laver aussit t au savon liquide neutre ou au savon de Marseille pendant 3 minutes au moins gt Rincer soigneusement gt D sinfecter pendant 15 minutes au moins avec de l alcool 70 ou de l eau de Javel dilu e au 7
16. DE awka CONFINEMENT L3 Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Dans le L3 Prendre l extincteur dans le sas 2 et intervenir sur le d part de feu Si le feu n est pas ma trisable faire vacuer le L3 Sortir du L3 en d verrouillant l asservissement des portes Ouvrir la porte Entrer dans le sas 2 Fermer la porte du sas 2 Dans le sas 2 Oter les protections individuelles casaques surchausses etc Pousser la porte Entrer dans le SAS 1 Fermer la porte Dans le sas 1 Oter la paire de gants restante et la jeter dans la poubelle Pousser la porte Sortir Fermer la porte A l ext rieur du L3 D clencher l alarme incendie Alerter les pompiers Tel en leur pr cisant qu il s agit d un laboratoire L3 et son lieu d implantation Evacuer le b timent Inserm CONDUITES A TENIR EN CAS DE Cat gorie MANIPULATEUR BLOQUE DANS Vtilisation UN DES SAS D UN LABORATOIRE 15 DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 h national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours MANIPULATEUR BLOQUE DANS UN DES SAS Bloqu dans SAS 2 V rifier avant toute action que la porte entre le sas 2 et le L3 est ferm e
17. EAU DE Utilisation de la sant et de la recherche m dicale du L3 CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours But D crire les principales r gles observer pour le travail sous PSM TOUJOURS TRAVAILLER SEUL SOUS LE PSM lerri 077 Quoi Comment L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer le mat riel Regrouper le mat riel n cessaire la manipulation Dans le L3 D poussi rer le mat riel Installer le mat riel sous le PSM Sous le PSM Mettre en marche s il ne l est pas d j le PSM Attendre le temps sp cifi sur la notice de la machine o l arr t des alarmes L exp rimentateur Dans le L3 Manipuler Introduire le mat riel biologique Sous le PSM Travailler avec des gestes pond r s Changer la paire de gants latex toutes les 15 20 minutes ou imm diatement en cas de suspicion de contamination Fixer les gants aux manches de la blouse L exp rimentateur Dans le L3 D sinfection du plan de En condition habituelle Sous le PSM travail Vaporiser le d sinfectant Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le liquide avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides En cas d pandage accidentel de liquide Absorber le liquide avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets
18. Inserm Iingtijui national de la sambi st da la rchprete mine p i D partement Ressources Humaines 3ureau de Coordination de la Pr vention des Risques Vission veille technologique GUIDEDE NO E ET CRA INING MLA Inserm Iingtijui national de la sambi gt da la rchprete mine D partement Ressources Humaines Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission veille technologique AVANT PROPOS Un nombre croissant de formations de recherche sont amen es r aliser fr quemment ou ponctuellement une ou partie de leurs exp rimentations dans un laboratoire de niveau de confinement L3 Cet quipement peut leur tre propre ou plus fr quemment partag avec plusieurs formations de recherche Ces structures de confinement sont consid rer comme des outils et non comme des pi ces de travail classiques Leur acc s est strictement r serv aux seules personnes autoris es y p n trer et form es sp cifiquement pour y travailler Ce Guide de travail dans un laboratoire de niveau de confinement L3 a pour objectif d harmoniser les pratiques d utilisation de ces structures de confinement et de leurs quipements Il fournit une r f rence technique aux personnels des formations de recherche qui travaillent ou envisagent de travailler en laboratoire de niveau de confinement L3 La vari t des configurations des laboratoires de leurs quipements et des applications scientifiques qui y sont d velopp es est
19. Si le d verrouillage de la porte entre les deux sas est impossible retourner dans le L3 Appeler une personne l ext rieur du L3 et attendre son intervention En l absence de r ponse d sactiver l asservissement des portes Ouvrir la porte Sortir Une fois dans le couloir r activer l asservissement des portes Bloqu dans le SAS 1 V rifier avant toute action que la porte entre les deux sas est ferm e d sactiver l asservissement des portes Ouvrir la porte Sortir Une fois dans le couloir r activer l asservissement des portes INTERVENTION D UNE PERSONNE DE L EXTERIEUR Manipulateur bloqu dans SAS 2 V rifier avant toute action que la porte entre le sas 2 et le L3 est ferm e d sactiver l asservissement des portes Faire sortir le manipulateur R activer l asservissement des portes Manipulateur bloqu dans SAS 1 S assurer avant toute action que le manipulateur bloqu a v rifi que la porte entre les deux sas est ferm e d sactiver l asservissement des portes Faire sortir le manipulateur R activer l asservissement des portes Inserm CONDUITES A TENIR EN CAS DE Cat gorie OT ns MANIPULATEUR BLOQUE DANS Utilisation UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours MANIPULATEUR BLOQUE DANS LE L
20. belle pour d chets solides Appliquer le d sinfectant Mettre une nouvelle paire de gants latex NF Appliquer le d sinfectant adapt la concentration efficace Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d sinfectant avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Jeter le masque FFP2D ou FFP3D dans la poubelle pour d chets solides 16 Inserm Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission Veille Technologique Qui L exp rimentateur O Dans le L3 Autoclave A l ext rieur du L3 dans la laverie UTILISATION DE L AUTOCLAVE Cat gorie DANS UN LABORATOIRE DE Utilisation NIVEAU DE CONFINEMENT L3 du L3 Date de r daction Version n3 20 juin 2007 en cours Quoi Autoclaver les d chets R cup rer les d chets Comment Ouvrir la porte de l autoclave Introduire es sacs dans l autoclave Fermer la porte de l autoclave S lectionner le cycle correspondant Lancer l autoclavage Ouvrir la porte de l autoclave Sortir les sacs V rifier l indicateur de st rilisation Si doute sur st rilisation effective pr venir le responsable technique du L3 D poser les sacs autoclav s dans les poubelles adapt es 17 SORTIE DES DECHETS SOLIDES
21. correspondant D marrer le cycle A l ext rieur L exp rimentateur du L3 R cup rer les Ouvrir la porte de l autoclave dans la d chets Sortir les sacs laverie V rifier l indicateur de st rilisation Si doute sur st rilisation effective pr venir le responsable technique du L3 D poser les sacs autoclav s dans les poubelles en poly thyl ne balis es Risque infectieux Fermer herm tiquement les poubelles pleines et les d poser sur le lieu de leur enl vement 21 Inserm SORTIE DES DECHETS LIQUIDES ne ot sta DANS UN LABORATOIRE DE nisation de la sant et de la recherche m dicale du L3 NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours INACTIVATION CHIMIQUE DES DECHETS LIQUIDES ep O Quoi Comment L exp rimentateur Dans le L3 Traitement des Pour chaque bo te plaque tube ou sous le PSM liquides de culture flacon Ouvrir la bo te plaque tube ou flacon liminer le liquide par aspiration Recueillir ce liquide dans le flacon de collecte pr vu cet effet Fermer le flacon de collecte laisser en contact comme d crit dans le mode d emploi du d sinfectant avant transvasement ult rieur Dans le L3 Collecte de l ensemble des liquides inactiv s i Ouvrir le bidon de 10 L balis Appliquer l entonnoir clapet au goulot du bidon Transvaser avec pr cautio
22. erm Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission Veille Technologique GUIDE DE TRAVAIL DANS UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 But D crire les conditions d entr e et de sortie de travail et d entretien du L3 Entr e dans le L3 Des personnes Du mat riel Des chantillons biologiques Travail dans le L3 Utilisation des PSM Centrifugation Conduite tenir en cas d incidents mat riels D sinfection de l quipement Sortie des d chets Utilisation de l autoclave D chets solides D chets liquides D chets d emballages Traitement des casaques sales Sortie du L3 Des personnes Du mat riel r parer Des chantillons biologiques viables Des chantillons biologiques non viables Entr e des personnes Entr e du mat riel Entr e des chantillons biologiques Travail sous PSM Centrifugation Conduite tenir D sinfection de l quipement Utilisation de l autoclave Sortie des d chets solides Sortie des d chets liquides Sortie des emballages Sortie des casaques Sortie des personnes Sortie du mat riel Sortie des chantillons viables Sortie des chantillons non viables Cat gorie Utilisation du L3 Date de r daction Version n3 20 juin 2007 en cours Inserm ENTREE DES PERSONNES DANS Cat gorie UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE ts CONFINEMENT L3 Institut
23. fection des quipements hors P S M en cas de panne ou de contamination ponctuelle erii O eTil Comment EN CAS DE PANNE DES EQUIPEMENTS L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer l quipement Mettre hors tension et d brancher d sinfecter l quipement Ouvrir l quipement D sinfecter Respecter la proc dure de d sinfection l quipement du L3 EN CAS D EPANDAGE DE LIQUIDE L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer l quipement Mettre hors tension et d brancher d sinfecter l quipement Ouvrir l quipement Baliser la zone contamin e D sinfecter Absorber le liquide l quipement Appliquer un surfactant Laisser agir le temps indiqu sur le mode emploi du produit Absorber Appliquer le d sinfectant adapt Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber 29 Inserm CONDUITES A TENIR EN CAS Cat gorie Lee D URGENCE Utilisation dela sam o do la recherche m dicale du L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours En cas d incendie l int rieur du L3 p 31 En cas de manipulateur bloqu dans un des sas du L3 p 32 En cas de manipulateur bloqu dans le L3 p 33 En cas d accident exposant au sang ou des produits biologiques p 34 30 Inserm CONDUITES A TENIR ENCAS Cat gorie D INCENDIE DANS UN Utilisation LABORATOIRE DE NIVEAU
24. le PSM Ejecter le c ne dans le sac de recueil Apr s chaque manipulation ligaturer le sac de recueil des c nes D poser le sac dans la poubelle d chets solides balis e et doubl e d un sac autoclave Suite de la proc dure 19 Inserm Institut national de la sant et de la recherche m dicale SORTIE DES DECHETS SOLIDES DANS UN LABORATOIRE DE Cat gorie Utilisation du L3 NIVEAU DE CONFINEMENTL3 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission Veille Technologique Date de r daction 20 juin 2007 Version n8 en cours INACTIVATION CHIMIQUE DES DECHETS SOLIDES ep L exp rimentateur en Quoi Dans le L3 Traitement des sous le PSM pipettes Comment Pour chaque pipette Remplir la pipette en aspirant de la solution d sinfectante du b cher de 1L Laisser tremper la pipette dans le b cher de 1L Laisser en contact comme d crit dans le mode d emploi du d sinfectant utilis Entrer un sac pour les pipettes usag es Sortir les pipettes du b cher Les goutter au dessus du b cher Les d poser dans le sac pipettes Fermer le sac pipettes Le d poser dans la poubelle d chets solides balis e et doubl e d un sac autoclave Traiter le contenu du b cher comme un d chet liquide Traitement des bo tes de Petri plaques tubes et des flacons de culture Dans le L3 sous le PSM Traitement des bo tes de P tri plaques
25. le d crite pour les nacelles Dans le L3 D sinfecter la pince sous le PSM Ouvrir le bac contenant la solution d sinfectante Y plonger la pince Remettre le couvercle en place sur le bac Laisser en contact le temps n cessaire Changer de paires de gants 13 CONDUITE A TENIR EN CAS DE Cat gorie Inserm CONTAMINATION D UN Ri deda nartd de racer die INCUBATEUR ie Biologique D partement Ressources Humaines Date de r daction Version n3 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques 20 juin 2007 en cours Mission veille technologique But D crire la conduite tenir en cas de contamination accidentelle d une surface ou de la r serve d eau D sinfection d une surface l int rieur de l incubateur Absorber le contaminant Mettre des gants latex NF Mettre si ce n est d j le cas un masque FFP2D ou FFP3D neuf Arr ter d brancher du secteur et vider si n cessaire l incubateur Baliser la zone contamin e Absorber le liquide avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Appliquer un d tergent Mettre une nouvelle paire de gants latex NF Appliquer une solution de d tergent sur la zone balis e Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d tergent avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d
26. n les liquides dans le bidon R cup rer le b cher dans un sac autoclave et l autoclaver Fermeture du bidon Retirer l entonnoir clapet du goulot du bidon R cup rer l entonnoir dans un sac autoclave et l autoclaver Fermer herm tiquement le bidon Changer la paire sup rieure de gants latex r guli rement ou en cas de suspicion de contamination Dans le SAS D sinfection mat riel ext rieure du bidon Ouvir la porte du SAS c t L3 Placer le bidon dans le SAS mat riel Passer une lingette impr gn e de la solution d sinfectante sur l ext rieur du bidon Fermer la porte du SAS c t L3 Laisser agir le produit durant le temps pr conis par le fabricant A l ext rieur Evacuation du bidon Ouvrir la porte du SAS c t ext rieur Sortir le bidon et le faire vacuer selon la proc dure en vigueur dans l institut 22 Inserm SORTIE DES DECHETS a D EMBALLAGE DANS UN memesi LABORATOIRE DE NIVEAU DE de la sant et de la recherche m dicale du L3 CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours eri o7 e To Comment L exp rimentateur Dans le L3 Collecter les Regrouper les emballages dans la emballages non poubelle sp cifique doubl e d un sac souill s autoclave Pr parer Ligaturer le sac autoclave avec l autoclavage l adh sif indicateur de st rilisation Au
27. national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Dans le couloir Oter sa blouse de travail L accrocher la pat re V rifier le bon fonctionnement des ventilations gt bxd l aide des indicateurs de pression D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte Entrer dans le SAS 1 Fermer la porte Dans le sas 1 Mettre un masque Attacher les cheveux longs Mettre une charlotte Mettre une paire de gants Latex NF D clencher l ouverture de la porte du sas 2 Ouvrir la porte Entrer dans le SAS 2 Fermer la porte Dans le sas 2 ZONE 1 Mettre une paire de lunettes Mettre une casaque Mettre une surchausse Passer le pied de l autre c t de la marque au sol Mettre la seconde surchausse Passer le second pied de l autre c t de la marque au sol ZONE 2 Mettre une seconde paire de gants Latex NA Solidariser les gants et les manches de la casaque D clencher l ouverture de la porte du laboratoire Ouvrir la porte Entrer dans le L3 Fermer la porte Inserm ENTREE DE MATERIEL DANS UN Cat gorie LABORATOIRE DE NIVEAU DE Pe CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Dans la laverie Institut
28. ndant 3 4h selon produit inject iours Agr ment CE Risque Risque Biologique Electrique A A Risque Risque Chimique i Risque Biologique Ex Canc rog nes Radioactif cat gorie 1 Ecran Plexiglass Travail en L3 Travail pi ce sous PSM NF sp cifique sous Sonde sorbonne Port de gants D chets latex NF Port masque gants et radioactifs lunettes de protection d croissance FA puis d chets lologiques D chets biologiques chimiques et chimiques 37 CONCLUSIONS Le plan exp rimental ainsi r dig fournit des informations compl mentaires tr s utiles dans l organisation mat rielle et dans le temps de l exp rimentation Il est possible de d terminer le type de locaux utilis leur localisation dans le laboratoire en privil giant toujours la proximit g ographique le moment et la dur e de leur utilisation quand pr parer les solutions etc La r daction des protocoles exp rimentaux permet de gt Int grer pratiquement la pr vention des risques l exp rimentation en Identifiant et localisant les risques li s l exp rimentation le plus pr cis ment possible D finissant les moyens de pr vention les mieux adapt s gt D finir les moyens principalement en locaux et en mat riels n cessaires pour r aliser l exp rimentation gt D finir les besoins en comparant les moyens n cessaires ceux existant dans le laboratoire gt D cider de la fai
29. ntionn ci dessus dans le respect des r gles de s curit de l quipe formation de Directeur de la formation de recherche Signature 36 REDACTION DU PLAN EXPERIMENTAL PLAN Le plan exp rimental pr sente sch matiquement l encha nement des principales EXPERIMENTAL tapes exp rimentales identifi es Ainsi pour une exp rimentation caract ris e par 3 tapes successives principales le plan exp rimental peut s crire sous la forme suivante A B Le passage de l tape A l tape B et de l tape B l tape C se fait par l application de proc dures techniques ANNOTATION En ce qui concerne chaque tape il est n cessaire d apporter des pr cisions DU PLAN telles que EXPERIMENTAL gt les principales obligations r glementaires gt la localisation et l identification de la nature du ou des risques pr sents gt les m thodes de pr vention adapt es ces risques locaux mat riels Equipements de Protection Individuelle EPI etc gt la nature des d chets et leurs fili res d limination ANNOTATION A ce stade les tapes du plan exp rimental peuvent faire l objet d informations DU PLAN techniques et pratiques telles que le nombre d injections effectuer un animal EXPERIMENTAL le temps et la temp rature d incubation la fr quence et le nombre de pr l vements pr vus etc A C Un pr l vement toutes Incubation 37C 1h les 2 heures pe
30. ologique D partement Ressources Humaines Date de r daction Version n3 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques 20 juin 2007 en cours Mission veille technologique Absorber le contaminant Changer de gants latex NF Mettre si ce n est d j le cas un masque FFP2D ou FFP3D neuf Baliser la zone contamin e Absorber le liquide avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides ter ts d l j poubelle pour d chets solides Appliquer un d tergent Changer de gants latex NF Appliquer une solution de d tergent sur la zone balis e Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d tergent avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Appliquer le d sinfectant Changer de gants latex Appliquer le d sinfectant adapt la concentration efficace Laisser agir le temps indiqu sur le mode d emploi du produit Absorber le d sinfectant avec du papier absorbant Jeter le papier absorbant dans la poubelle pour d chets solides Jeter les gants dans la poubelle pour d chets solides Jeter le masque FFP2D ou FFP3D dans la poubelle pour d chets solides 12 CONDUITE A TENIR EN CAS DE Cat gorie Inserm BRIS DE TUBES LORS D UNE m au niita CENTRIFUGATION Pre Biologique D partement Ressources Humaines Date de r
31. r les nacelles Rotor herm tique introduire les tubes dans les cartouches Fermer les cartouches Installer les cartouches dans le rotor fermer les rotors ne Changer de gants latex NF L exp rimentateur Dans le L3 Centrifuger Sortir les nacelles du PSM Centrifugeuse Installer les nacelles dans la centrifugeuse Lancer la centrifugation L exp rimentateur Dans le L3 R cup ration du rotor ou Sortir les nacelles ou le rotor de la Centrifugeuse des nacelles centrifugeuse Transporter les nacelles ou le rotor sous le PSM L exp rimentateur Dans le L3 R cup ration des tubes Nacelles herm tiques Sous le PSM centrifuger Ouvrir les nacelles Sortir les tubes Rotor herm tique Oter le couvercle du rotor Sortir les cartouches Ouvrir les cartouches Sortir les tubes 10 CONDUITE A TENIR EN CAS Cat gorie Inserm D INCIDENTS MATERIELS ME Risque doim sarb vt do ia recherche m dicuis Biologique D partement Ressources Humaines Date de r daction Version n8 Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques 20 juin 2007 en cours Mission veille technologique Contamination de surface p 12 Bris de tube s lors d une centrifugation p 13 Contamination d un incubateur p 14 Contamination d un bain marie p 15 Contamination d un r frig rateur p 16 CONDUITE A TENIR EN CAS DE Cat gorie Inserm CONTAMINATION DE SURFACE dede senbd ct de a recherches m dlicuis Bi
32. sabilit ou non de l exp rimentation y compris en regard de la satisfaction d obligations r glementaires sp cifiques OGM Exp rimentation animale etc REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Jacques SIMONS Modes op ratoires une tape cl de la pr vention 1991 Colloque inter organismes sur les risques biologiques en laboratoire de recherche Paris Institut Pasteur p 48 49 Chantal AUTISSIER Jacques SIMONS Conception des protocoles exp rimentaux un outil d analyse et de pr vention des risques 1997 In Exp rimentation en biologie pr vention des risques professionnels sp cifiques D U 3 cycle CNED Inserm Service D ontologie Ethique et Qualit des Recherches de l Inserm Les bonnes pratiques de laboratoire Juin 1999 Editions Inserm Collection Guide mode d emploi Fran oise ROUSSILLE Jacques SIMONS La pr vention des risques l usage des directeurs de laboratoire Septembre 1999 Editions Inserm Collection Guide mode d emploi Jacques SIMONS Fran ois HIRSCH Qualit et pr vention des risques deux d marches centr es sur l exp rimentateur et l exp rimentation D cembre 2000 Inserm Actualit s N 175 p 19 Arr t du 26 novembre 1999 relatif la bonne ex cution des analyses de biologie m dicale GBEA Journal Officiel n 287 du 11 d cembre 1999 p18441 18452 O C D E Les Bonnes Pratiques de Laboratoire Monographie n 45 38
33. tilisation du L3 Proc dures d utilisation p 3 Conna tre les conduites tenir en cas d urgence Conduites tenir en cas d urgence p 30 Conna tre les personnes ressources Liste des personnes ressources p 35 Fournir une autorisation d acc s au L3 Formulaire d autorisation d acc s p 36 D poser le dossier complet aupr s du comit de gestion lorsqu il en existe un Le dossier comprend Le projet exp rimental L autorisation d acc s au L3 Inserm FORMULAIRE DE PROJET Cat gorie institut national EXPERIMENTAL Utilisation de la sant et de la recherche m dicale du L3 Bureau de Coordination de la Pr vention Date de r daction Version n8 des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours Formation de recherche Equipe Responsable du projet BUT DU PROJET 4 f De l aide pour r diger cette partie p 37 RESUME DES PRINCIPALES ETAPES EXPERIMENTALES DU PROJET PLAN EXPERIMENTAL ANNOTE DE L IDENTIFICATION DES RISQUES O Parties renseigner obligatoirement Agents biologiques non OGM Type d agent biologique Ph notype Agents biologiques OGM Type d agent biologique Ph notype Agr ment OGM correspondant Agr ment OGM demander Oui copie joindre Non O Oui O Non O Information du public effectu e Information du public effectuer Oui accus de la mairie joindre O Non O Oui O Non O Ins
34. toclaver A l ext rieur R cup rer les D poser les sacs autoclav s dans les du L3 d chets poubelles cartons balis es Dans la laverie 23 Inserm SORTIE DES CASAQUES DANS Cat gorie UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE 00 Institut national de la sant et de la recherche m dicale CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n8 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours eri o7 Quoi Comment L exp rimentateur Dans le sas 2 Collecter les Regrouper les casaques dans un sac du L3 casaques autoclave remplacer L exp rimentateur Dans le L3 Pr parer Ligaturer le sac autoclave avec Autoclave l autoclavage l adh sif indicateur de st rilisation Autoclaver les Ouvrir la porte de l autoclave casaques introduire le sac dans l autoclave Fermer la porte de l autoclave S lectionner le cycle correspondant D marrer le cycle l autoclavage A l ext rieur R cup rer les Ouvrir la porte de l autoclave du L3 casaques Sortir le sac dans la V rifier l indicateur de st rilisation laverie Si doute sur st rilisation effective pr venir le responsable technique du L3 D poser le sac avec les autres blouses nettoyer 24 Inserm SORTIE DES PERSONNES D UN Cat gorie LABORATOIRE DE NIVEAU DE pear CONFINEMENT L3 Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Date de r daction
35. vrir la porte du SAS mat riel Reprendre le triple emballage Fermer la porte du SAS mat riel 27 Inserm Institut national de la sant et de la recherche m dicale Bureau de Coordination de la Pr vention des Risques Mission Veille Technologique Dans le L3 SORTIE DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES NON VIABLES D UN LABORATOIRE DE NIVEAU DE CONFINEMENT L3 Date de r daction 20 juin 2007 Changer la paire de gants sup rieure Placer l chantillon dans un r cipient herm tique Dans le sas mat riel D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte du SAS mat riel Placer le r cipient contenant l chantillon dans le SAS Fermer la porte du SAS mat riel Mettre en route un cycle de st rilisation formolation interdite pour les prions Dans la laverie Cat gorie Utilisation du L3 Version n3 en cours Attendre la fin du cycle de st rilisation formolation interdite pour les prions D clencher l ouverture de la porte Ouvrir la porte du SAS mat riel Reprendre le r cipient contenant l chantillon Fermer la porte du SAS mat riel 28 Inserm DESINFECTION D UN oo muy EQUIPEMENT DANS UN on LABORATOIRE DE NIVEAU DE de la sant et de la recherche m dicale du L3 CONFINEMENT L3 Bureau de Coordination de la Date de r daction Version n3 Pr vention des Risques Mission Veille Technologique 20 juin 2007 en cours But d crire les proc dures de d sin
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