Gélose MacCONKEY Sorbitol (CT
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1. nnnnrsrrrrrrnererrnnrnnnnnennnnnnnnnneeneenennnnnne 2 5 mg Agar agar baci riolOgiQue sssistenn siennes 13 59 pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 1 0 2 2 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat poudre beige ros fluide et homog ne Milieu pr par g lose rouge violac R ponse culturale typique apr s 24 heures d incubation 37 C m thode qualitative d ensemencement Microorganismes Croissance Caract ristiques Escherichia coliO157 H7 ATCC 43895 bonne score 2 colonies incolores Escherichia coli 0157 H7 ATCC 35150 bonne score 2 colonies incolores Escherichia coli ATCC 25922 partiellement colonies rouges sorbitol positif compl tement inhib e score 0 1 Enterococcus faecalis ATCC 29212 inhib e score 0 Staphylococcus aureus ATCC 25923 inhib e score 0 STOCKAGE CONSERVATION Milieu de base d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu de base pr par en flacons 6 mois 2 8T titre indicatif Milieu complet pr par en bo tes avec suppl ment 8 jours 2 8 l abri de la lumi re titre indicatif Suppl ment s lectif C fixime Tellurite pour g lose CT SMAC Stocker entre 22. l avance __Refroidir et maintenir le milieu 47 C Ajouter st rilement 1 mL de suppl ment s lectif reconstitu BS037 par flacon Homog n iser parfaitement Couler en bo tes de Petri st riles Laisser solidifier sur une surface froide Faire s cher les bo tes l tuve couvercle entrouvert Ensemencer en stries l inoculum partir d un bouillon d enrichissement utilis pour la recherche des Escherichia coli 0157 H7 la surface des bo tes afin d obtenir des colonies isol es __Incuber 37 C pendant 24 heures LECTURE Apr s 24 heures d incubation Escherichia coli 0157 H7 forme des colonies lisses incolores pouvant pr senter un halo orang d alcalinisation La sp cificit du milieu n tant pas totale les colonies suspectes doivent tre soumises un test s rologique d agglutination sur lame l aide d antis rums O157 FORMULE TYPE du milieu complet pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu YPN E SR aaan n E AAE EAEN AEAEE 17 0 g Peptone pepsique de viande 3 0 g D SOIDIIDlE annee ne eme ni 10 0 g Sels biliaires Nan dis assnsh ends rrmrnsan tannins ten tn tersteaiie pere ant 1 59 Chlorure de SO ILM 22e ana ee 5 0 g Rouge neutre Se ec ne 30 0 mg Gristal viol T SR EEEE E 1 0 mg GENINE eS eia Se a 0 05 mg Tellurite de potassium
3. G lose MacCONKEY Sorbitol CT SMAC base DOMAINE D UTILISATION La g lose MacCONKEY Sorbitol CT SMAC est un milieu s lectif utilis pour l isolement et la diff renciation du s rotype O0157 H7 d Escherichia coli partir de l eau du lait de la viande de b uf et des autres produits alimentaires HISTORIQUE Le s rotype 0157 H7 d Escherichia coli est un s rotype pathog ne identifi pour la premi re fois en 1982 comme agent responsable de colites h morragiques L alimentation d origine animale est la source principale de contamination humaine La viande de b uf de porc les volailles et certains produits laitiers non pasteuris s ont t incrimin s dans les toxi infections Escherichia coli 0157 H7 Ce microorganisme a galement t isol partir de pommes de terre de cidre et d eau du robinet En 1985 Farmer et Davis confirment les travaux de Wells et al 1983 en d montrant que le s rotype O0157 H7 se caract rise par son incapacit fermenter le sorbitol alors que 80 des souches d Escherichia coli sont sorbitol positifs En 1986 March et Ratnam soulignent l int r t de l utilisation de la g lose MacCONKEY Sorbitol pour la d tection des colonies d Escherichia coli O157 H7 En 1991 Chapman introduit l utilisation du c fixime pour inhiber les Proteus En 1993 Zadik combine l action du tellurite de potassium au c fixime L addition de ces compos s dans la g lose augmente la fr qu
4. ence de d tection des colonies d Escherichia coli 0157 H7 en liminant de mani re importante les microorganismes de la microflore secondaire PRINCIPES La polypeptone favorise la croissance des Escherichia coli 0157 H7 Les microorganismes sorbitol n gatifs notamment O157 H7 pr sentent des colonies incolores Les microorganismes capables de fermenter le sorbitol sont mis en vidence par le virage au rouge du rouge neutre La microflore secondaire est inhib e par l association entre les sels biliaires le cristal violet le c fixime et le tellurite de potassium PREPARATION Mettre en suspension 50 0 g de milieu d shydrat de base BK147 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et l y maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution R partir en flacons raison de 100 mL par flacon __ St riliser autoclave 121 C pendant 15 minutes 1 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr NOTA Une liqu faction partielle de l agar entra nera in vitablement une alt ration significative de la consistance du gel du milieu solidifi apr s st rilisation et refroidissement MODE D EMPLOI Faire fondre le milieu s il est pr par
5. et 8 C l abri de la lumi re La date de p remption est mentionn e sur l tiquette PRESENTATION Code Milieu de base d shydrat sans c fixime ni tellurite de potassium Flacon de 500 g BK147HA Suppl ment s lectif C fixime Tellurite pour g lose CT SMAC Coffret de 10 flacons qsp 500 mL BS03708 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Wells J G B R Davis I K Wachsmuth L W Riley R S Remis R Sokolow and G K Morris 1983 Laboratory investigation of hemorrhagic colitis outbreaks associated with a rare Escherichia coli serotype J Clin Microbiol 18 512 520 Farmer J J IIl and B R Davis 1985 H7 antiserum sorbitol fermentation medium a single tube screening medium for detecting Escherichia coli 0157 H7 associated with hemorrhagic colitis J Clin Microbiol 22 620 625 March S B and S Ratnam 1986 Sorbitol MacConkey medium for detection of Escherichia coli 0157 H7 associated with hemorrhagic colitis J Clin Microbiol 23 869 872 Chapman P A C A Siddons P M Zadik and L Jewes 1991 An improved selective medium for the isolation of Escherichia coli 0157 J Med Microbiol 35 107 110 Zadik P M P A Chapman and C A Siddons 1993 Use tellurite for the selection of verocytotoxigenic Escherichia coli 0157 J Med Microbiol 39 155 158 3 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex F
6. is Code document BK147 F 2003 01 4 4 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
7. rance T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr NF EN ISO 16654 V 08 032 Juillet 2001 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche des Escherichia coli 0157 XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture SUPPORT PHOTO R f rence produit BK147HA BS03708 Utilisation L isolement et la diff renciation du s rotype 0157 H7 d Escherichia coli partir de l eau du lait de la viande de b uf et des autres produits alimentaires Escherichia coli 0157 H7 G lose de MacCONKEY Sorbitol CT SMAC R f BK147HA BS03708 Incubation 24 heures 37 C Caract ristiques E coli 0157 H7 colonies lisses incolores pouvant pr senter un halo orang d alcalinisation Les colonies sont l g rement color es de fa on artificielle par l absorption des colorants pr sents dans la formulation du milieu E coli non 0157 H7 colonies rouges de taille nettement sup rieure Les mentions port es sur l tiquette sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 10 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr av
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