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GELOSE DE WILSON BLAIR MODIFIEE
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1. Les mentions port es sur les tiquettes sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK004 F 2001 04 6 Date cr ation 04 2001 Derni re mise jour 15 11 2011 Motif de la r vision Remaniement g n ral Corrections 8 r f rence WDCM des souches de contr le Fiche technique G lose de Wilson Blair modifi e Page 3 sur 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
2. S FICHE TECHNIQUE GELOSE DE WILSON BLAIR MODIFIEE 1 DOMAINE D UTILISATION La g lose de Wilson blair modifi e est un milieu s lectif utilis pour l isolement de Salmonella Typhi et des autres salmonelles dans les produits pathologiques d origine animale les eaux les produits laitiers et les autres produits alimentaires La g lose de Wilson Blair modifi e peut tre utilis e dans les m thodes normalis es pour la recherche de Salmonella comme second milieu d isolement 2 HISTORIQUE En 1926 Wilson et Blair utilis rent l association du bismuth et du sulfite de sodium dans un milieu destin l isolement des Salmonella des groupes Typhi et Paratyphi Puis en 1956 Hajna et Damon d crivirent une formule modifi e qui a t recommand e dans la Pharmacop e am ricaine 3 PRINCIPES e Les concentrations en vert brillant et sulfite de bismuth provoquent l inhibition de la flore secondaire Gram positif et de la plupart des ent robact ries l exception des Salmonella et de quelques Shigella e A partir des compos s soufr s du milieu les Salmonella d gagent du sulfure d hydrog ne qui produit en pr sence de sulfate ferreux un pr cipit m tallique conf rant aux colonies une couleur noire ou parfois verte e l est particuli rement recommand de r aliser au pr alable un enrichissement sur un milieu au t trathionate sur un bouillon au s l nite ou sur un bouillon de Rappapori Vassiliadis et d ensemencer simult
3. an ment d autres milieux moins s lectifs g lose de MacConkey g lose XLD ou g lose Hektoen e En raison de son pouvoir inhibiteur lev ce milieu permet la mise en uvre d un inoculum fortement contamin 4 PREPARATION e Mettre en suspension 47 0 g de milieu d shydrat BK004 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e A 47g L e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et ly maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution e Ne pas autoclaver XA Ebullition Fiche technique G lose de Wilson Blair modifi e Page 1 sur 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr 5 MODE D EMPLOI e Refroidir et maintenir le milieu 47 C e _ Homog n iser le milieu de fa on disperser le pr cipit XA En surface e Couler en bo tes de Petri st riles raison de 20 mL par bo te e Laisser solidifier sur une surface froide e Faire s cher les bo tes l tuve couvercle entrouvert ZA Incubation e Ensemencer en stries linoculum dans les bo tes partir des 24 et 48 h 37 C milieux d enrichissement utilis s e _Incuber 37 C pendant 24 et 48 heures NOTE Aussit t apr s sa pr paration le milieu pr sente une s lectivit optimale qui diminue graduellement au cours du temps C est
4. la raison pour laquelle il est d conseill de conserver le milieu pr t l emploi plus de 4 jours 2 8 C 6 LECTURES L aspect des colonies est le suivant e colonies noires plates s ches entour es d une zone brun noir avec reflet m tallique habituellement pr sent Salmonella Typhi e colonies vertes ou brun tres sans zones Salmonella Enteritidis Salmonella Gallinarum Salmonella Choleraesuis Salmonella Paratyphi Shigella ij Les coliformes les Proteus et les Shigella sont fortement inhib s mais peuvent parfois donner des colonies verd tres ou brun tres 7 FORMULE TYPE pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu RYPIN O ee en E E 5 00 g Peptone pepsique de viande no nnnn0nnneennnnnnenennrnenrnrnnnrnnrersnnnnne 5 00 g Extrait de viande a onononenennnennnnnnnnnnnnnrnnnnnrrnrnrnrrrrrrrnnrnrrrrrrrrerrernne 5 00 g CE E 5 00 g Phosphate disodique sn rsseenleesnesretenesersoeemicnn 4 00 g Sulfate ferreux iiiiiiiieeceereeneeeeceeceeeeeeeeee 0 30 g Citrate de bismuth ammoniacal 1 85 g Sulfite de sodium iii eerrereeeeereeeeeeeee 6 159 VOTON o a a E a 25 0 mg Agar agarDACI TIOIOQIQUE 8 eee 14 70 g pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 6 0 2 8 CONTROLE QUALITE e Milieu d shydrat poudre beige verd tre fluide et homog ne e Milieu pr par en bo tes g lose jaune ve
5. rt Fiche technique G lose de Wilson Blair modifi e Page 2 sur 3 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr e R ponse culturale typique apr s 48 heures d incubation 37 C Microorganismes Croissance Caract ristiques Salmonella Typhimurium WDCM 00031 bonne score 2 colonies noires reflets m talliques Salmonella Enteritidis WDCM 00030 bonne score 2 colonies verd tres brun tres Shigella sonnei WDCM 00127 partiellement inhib e colonies verd tres score 0 1 Enterococcus faecalis WDCM 00087 inhib e score 0 Staphylococcus aureus WDCM 00034 inhib e score 0 9 STOCKAGE CONSERVATION Milieu d shydrat 2 30 C e La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par titre indicatif 4 jours 2 8 C 10 PRESENTATION Milieu d shydrat e Flacon de 500 g BKOO4HA 11 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Wilson J W and Blair E M 1931 Further experience of the Bismuth Sulphite Media in the isolation of Bacillus typhosus and Bacillus paratyphosus B from faeces sewage and water J Hyg 31 138 Wilson J W 1938 Isolation of Bact typhosum by means Bismuth Sulphite Medium in water and milk born epidemies J Hyg 38 507 519 United States Pharmacopeia Microbial Limit Tests 12 AUTRES INFORMATIONS
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