BD Cepacia Medium • BD OFPBL Agar
Contents
1. Peptones 8 0 g Digestion pancr atique de cas ine 2 0 g Sulfate d ammonium 1 0 Chlorure de sodium 5 0 Pyruvate de sodium 5 0 Phosphate bipotassique 0 3 d hydrog ne Sulfate de magn sium 0 2 Bleu de bromothymol 0 03 Sulfate d ammonium ferreux 0 01 Lactose 10 0 Dihydrophosphate de potassium 4 35 G lose 15 0g Phosphate d hydrog ne disodique 1 42 Polymyxine B 300 000 U Rouge de ph nol 0 02 Bacitracine 200 U Sels biliaires 0 5 pH de 6 8 0 2 G lose 12 0 Ticarcilline 0 1 Polymyxine B 300 000 U Cristal violet 1 0 mg pH de 6 4 0 2 Ajust es et ou compl ment es en fonction des crit res de performances impos s PRECAUTIONS Ausage professionnel uniquement Ne pas utiliser de bo te de P tri pr sentant des signes de contamination microbienne d coloration dessiccation ou fissure ou d autres signes de d t rioration Consulter le document MODE D EMPLOI GENERAL pour plus d informations concernant les proc dures de manipulation aseptique les risques biologiques et l limination des produits usag s STOCKAGE ET DUREE DE CONSERVATION D s r ception conserver les bo tes de P tri dans l obscurit entre 2 et 8 C dans leur emballage d origine jusqu au moment de leur utilisation Ne pas les congeler ni les surchauffer Les bo tes peuvent tre ensemenc es jusqu la date de p remption indiqu e voir l tiquette de l emballage et incub es pendant les dur es re2. Agar est bas e sur un milieu O F milieu d oxydation de fermentation L indicateur de pH bleu de bromothymol vire du bleu au jaune lorsque le lactose est ferment en produits acides L ajout de phosphate permet de stabiliser le pH La bacitracine et la polymyxine B jouent le r le d inhibiteurs des bact ries pr sentes 6 Le BD Cepacia Medium sert galement isoler B cepacia Les peptones et le sulfate d ammonium fournissent au milieu l azote n cessaire Le pyruvate constitue la source de carbone Le rouge de ph nol sert d indicateur de pH Lors du m tabolisme du pyruvate les ions sodium s accumulent ce qui provoque une augmentation du pH En cons quence le rouge de ph nol vire du jaune orange au rose voire au rouge autour des colonies de B cepacia et pr sente une coloration rose plus soutenue dans les zones de forte croissance Les sels biliaires le cristal violet la ticarcilline et la polymyxine B jouent le r le d inhibiteurs pour supprimer la flore normale et les autres pathog nes L ajout de phosphates permet de maintenir un pH stable Le magn sium et le fer sont des facteurs de croissance pour de nombreux non fermentants anciennement consid r s comme faisant partie du genre Pseudomonas Les deux milieux sont recommand s pour l isolement de B cepacia partir d chantillons cliniques 17 PA 254481 02 1 REACTIFS Formules par litre d eau purifi e BD Cepacia Medium BD OFPBL Agar
3. 70 273 CONDITIONNEMENT BD Cepacia Medium N r f 256180 Milieux en bo tes de P tri pr ts l emploi 20 unit s par carton BD OFPBL Agar N r f 254481 Milieux en bo tes de P tri pr ts l emploi 20 unit s par carton INFORMATIONS COMPLEMENTAIRES Pour plus d informations contacter le repr sentant local de BD BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D 69126 Heidelberg Germany Phone 49 62 21 30 50 Fax 49 62 21 30 52 16 Reception_Germany europe bd com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11 rue Aristide Berg s 38800 Le Pont de Claix France Tel 33 476 68 3636 Fax 33 476 68 3292 http www bd com BD BD logo and Stacker are trademarks of Becton Dickinson and Company ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton Dickinson and Company PA 254481 02 4
4. AW MODE D EMPLOI RJ B D MILIEUX EN BOITES DE C PETRI PRETS A L EMPLOI PA 254481 02 Rev Juin 2003 BD Cepacia Medium e BD OFPBL Agar APPLICATION Le BD Cepacia Medium milieu Cepacia et la BD OFPBL Agar g lose OFPBL sont des milieux s lectifs diff rentiels pour l isolement des Burkholderia cepacia spp partir d chantillons cliniques PRINCIPES ET EXPLICATION DE LA METHODE M thode microbiologique Burkholderia anciennement Pseudomonas cepacia est tabli comme un agent pathog ne nosocomial qui en g n ral provoque des infections associ es l usage d quipement de d sinfectants et de m dicaments contamin s Les infections comprennent la bact ri mie les infections urinaires et des voies respiratoires et d autres De plus ce microorganisme est un pathog ne important chez les patients atteints de fibrose kystique galement connue sous le nom de mucoviscidose et chez ceux souffrant de granulomatose septique chronique La mise en vidence du microorganisme sur les milieux de routine comme la g lose au sang ou la MacConkey Agar s av re parfois difficile car d autres microorganismes tels que les Staphylococcus ou les Pseudomonas aeruginosa envahissent souvent la culture et en cachent la pr sence 2 La BD OFPBL Oxidation Fermentation Polymyxin Bacitracin Lactose sert l isolement de B cepacia et est r put e comme tant l g rement moins s lective que le BD Cepacia Medium La BD OFPBL
5. command es Des bo tes provenant d une pile ouverte de 10 bo tes sont utilisables pour une semaine lorsqu elles sont conserv es entre 2 et 8 C dans un endroit propre CONTROLE DE QUALITE PAR L UTILISATEUR Ensemencer les bo tes de P tri avec les souches mentionn es ci dessous Incuber en conditions a robie pendant 20 24 h entre 30 et 35 C ou entre 35 et 37 C Souches BD Cepacia Medium BD OFPBL Agar Burkholderia cepacia Croissance moyenne Croissance bonne ATCC 25416 importante colonies jaune importante colonies p le rose milieu rose rose rouge jaune transparentes jaunes milieu Escherichia coli ATCC 25922 Inhibition compl te Inhibition compl te Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Inhibition partielle compl te Inhibition compl te Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637 Inhibition partielle compl te Inhibition partielle compl te Staphylococcus aureus ATCC 25923 Inhibition partielle compl te Inhibition compl te Sans ensemencement Jaune orange Verte PA 254481 02 METHODE Mat riaux fournis BD Cepacia Medium ou BD OFPBL Agar tous deux fournis en boites de P tri Stacker Produits contr l s microbiologiquement Mat riaux non fournis Milieux de culture auxiliaires r actifs et mat riel de laboratoire requis Types d chantillons Ces milieux servent sont utilis s pour l isolement pa
6. es de couleur jaune CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE Le BD Cepacia Medium et la BD OFPBL Agar sont recommand s pour l isolement de Burkholderia cepacia partir d chantillons cliniques pr sum s contenir une flore normale contaminante comme les mais non limit aux chantillons de voies respiratoires et urinaires Gilligan ef al qui ont labor la Pseudomonas Cepacia Agar pour servir de milieu s lectif diff rentiel sont parvenus isoler B cepacia partir des s cr tions respiratoires de 35 patients atteints de mucoviscidose avec ce milieu alors que seuls 21 isolats ont t obtenus sur une MacConkey Agar D autres bact ries r sistantes aux agents s lectifs sont susceptibles de se d velopper dans ces milieux Burkholderia gladioli dont la pr sence dans les chantillons de voies respiratoires de patients atteints de la mucoviscidose a t montr e se d veloppe sur la OFPBL Agar et peut pr senter un aspect semblable B cepacia Des tests suppl mentaires comme une coloration de Gram et une identification biochimique compl te sont n cessaires pour confirmer la pr sence de B cepacia REFERENCES 1 Gilligan P H G Lum P A R Vandamme and S Whittier 2003 Burkholderia Stenotrophomonas Ralstonia Brevundimonas Comamonas Delftia Pandoraea and Acidovorax In Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed Manual of clinical
7. microbiology 8 ed American Society for Microbiology Washington D C 2 Gilligan P H 1991 Microbiology of airway disease in patients with cystic fibrosis Clin Microbiol Rev 4 35 51 PA 254481 02 3 3 Gilligan P H and D V Schidlow 1984 The role of Pseudomonas cepacia in pulmonary disease of cystic fibrosis patients Clin Microbiol Newsl 6 42 44 4 O Neil K M et al 1986 Pseudomonas cepacia an emerging pathogen in chronic granulomatous disease J Pediatr 108 940 942 5 Gilligan P H et al 1985 Isolation medium for the recovery of Pseudomonas cepacia from respiratory secretions of patients with cystic fibrosis J Clin Microbiol 25 5 8 6 Welch D F et al 1987 Selective and differential medium for recovery of Pseudomonas cepacia from the respiratory tracts of patients with cystic fibrosis J Clin Microbiol 25 1730 1734 7 Carson L A et al 1988 Comparative evaluation of selective media for isolation of Pseudomonas cepacia from cystic fibrosis patients and environmental sources J Clin Microbiol 26 2096 2100 8 Tablan O C et al 1987 Laboratory proficiency test results on use of selective media for isolating Pseudomonas cepacia from simulated sputum specimens of patients with cystic fibrosis J Clin Microbiol 25 485 487 9 Christenson J C et al 1989 Recovery of Pseudomonas gladioli from respiratory tract specimens of patients with cystic fibrosis J Clin Microbiol 27 2
8. rtir d chantillons cliniques tels que ceux provenant des voies respiratoires urinaires et autres Voir aussi CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE En ce qui concerne les patients atteints de mucoviscidose les chantillons admis comprennent les liquides de lavage broncho alv olaire privil gier les expectorations les aspirations rhinopharyngiennes et les couvillonnages bucco pharyngiens Mode op ratoire du test Ensemencer l un de ces milieux avec l chantillon d s son arriv e au laboratoire Strier afin de cr er l isolement Pour isoler la totalit des pathog nes impliqu s dans l infection il convient d ensemencer non seulement le BD Cepacia Medium ou la BD OFPBL Agar mais aussi une BD Columbia Agar with 5 Sheep Blood et une BD MacConkey II Agar Incuber le BD Cepacia Medium ou la BD OFPBL Agar en conditions a robie entre 30 et 35 C ou entre 35 et 37 C pendant 18 24 h ou davantage si n cessaire Certaines souches de B cepacia pr f rent la plage de temp ratures plus basse ou n cessitent une incubation de 72 h pour bien se d velopper Incuber les autres milieux comme il convient R sultats Apr s incubation les colonies typiques de B cepacia pr sentes dans le BD Cepacia Medium apparaissent jaune p le rose et sont cern es de zones de couleur rose rose rouge Sur la BD OFPBL Agar les colonies typiques de B cepacia apparaissent transparentes jaunes et sont cern es de zon
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