Gélose TSI - Groupe Solabia
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1. Addendum 2000 Contr le microbiologique des produits non st riles Recherche de microorganismes sp cifi s Solution et milieux de culture recommand s 56 61 ISO 6785 IDF 93 Mai 2001 Lait et produits laitiers Recherche de Salmonella spp United States Pharmacopeia 26 2003 Microbial Limit Tests 2006 2011 NF EN ISO 21567 V 08 411 Mars 2005 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche de Shigella spp XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF EN ISO 6579 V 08 013 Mars 2007 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche des Salmonella spp NF EN ISO 6785 V 04 031 Avril 2008 Lait et produits laitiers Recherche de Salmonella spp NF ISO 19250 T 90 435 Octobre 2010 Qualit de leau Recherche de Salmonella spp Les mentions port es sur l tiquette sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2010 10 12 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK059 F 2003 06 7 6 6 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex Fr2. des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr Les r actions typiques obtenues sont pr sent es dans le tableau suivant PENTE CULOT PSPECES Lactose Gaz Salmonella Typhi Salmonella Paratyphi A Salmonella Choleraesuis Salmonella Pullorum Salmonella Paratyphi B Salmonella Typhimurium Salmonella Enteritidis Salmonella Gallinarum Shigella dysenteriae Shigella flexneri Shigella sonnei Shigella boydii Proteus vulgaris Proteus mirabilis Proteus morganii Proteus rettgeri etet Serratia marcescens Enterobacter hafniae Enterobacter aerogenes Enterobacter cloacae Escherichia coli Citrobacter freundii Klebsiella pneumoniae Alcaligenes faecalis Pseudomonas aeruginosa Yersinia enterocolitica epeek t tl Certaines souches d Escherichia coli ne fermentent le lactose que tr s tardivement Au cas o l interpr tation peut laisser suspecter la pr sence de salmonelles il est possible d effectuer partir des cultures sur milieu TSI la recherche de la B galactosidase de l ur ase et de la lysine d carboxylase 3 6 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr FO
3. G lose TSI DOMAINE D UTILISATION La g lose TSI Triple Sugar Iron permet l identification des ent robact ries par la mise en vidence rapide de la fermentation du lactose du glucose avec ou sans production de gaz du saccharose et de la production de sulfure d hydrog ne HISTORIQUE Hajna a d velopp la formulation de cette g lose trois sucres en ajoutant du saccharose au milieu deux sucres lactose et glucose de Kligler L addition de saccharose permet d accro tre la sensibilit du milieu en permettant la d tection pr coce des coliformes qui fermentant le lactose lentement d gradent plus rapidement le saccharose Le milieu favorise galement la diff renciation de certaines souches de Proteus lactose n gatif qui fermentent le saccharose en 24 heures d incubation PRINCIPES Les fermentations sucr es se traduisent par une acidification qui fait virer au jaune le rouge de ph nol indicateur pH Pour faciliter la d tection des germes qui fermentent uniquement le glucose la concentration de ce sucre a t abaiss e au 1 10 me de celle du lactose ou du saccharose de telle fa on que la faible quantit d acide produite sur la pente pendant la fermentation s oxyde rapidement ce qui entra ne un retour rapide la coloration rouge ou bien une r alcalinisation plus prononc e Par contre la r action acide couleur jaune est maintenue en profondeur dans le culot du tube Les germes qui ferment
4. RMULE TYPE pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu TIGER e a E 14 0 g Extrait autolytique de levure 1 4 isnieebhehisesmnieennss 3 0 g Extrait de Vinde sinsin enterrer Renan EEA ren tte tente 3 0 g s GIUCOS Sahara 1 09 E A 0e e E E E E E 10 0 g SADONATOSRS nas dass esta nee 10 0 g Chlorure T CSOIDNNES neue cet 5 0 g Thiosulfate de SOLE se tie 0 3 g Citrate ferrique ammoniacal nne 0 3 g Rouge de Ph nolsss ce L lt n 24 0 mg Agar agar bact riologiQue sssssssusssatisssenaenestennsanteneunne 13 59 pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 4 0 2 CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat poudre ros e fluide et homog ne Milieu pr par g lose rouge orang R ponse culturale typique apr s 24 heures d incubation 37 C Microorganismes Croissance Culot Escherichia coli ATCC 25922 bonne score 2 Citrobacter freundi CIP 57 32T bonne score 2 Proteus vulgaris ATCC 13315 bonne score 2 Salmonella Enteritidis CIP 82 97 bonne score 2 Pseudomonas aeruginosa CIP 82 118 bonne score 2 STOCKAGE CONSERVATION Milieu d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en tubes non inclin s 6 mois 2 8 C titre indicatif Milieu pr par en tubes inclin s 8 jours 2 8 titre indicatif PRESENTATION C
5. ance T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
6. ent le lactose ou le saccharose font virer au jaune la pente du tube Les microorganismes ne fermentant aucun des trois sucres ne modifient pas la couleur du milieu La production de sulfure d hydrog ne se manifeste dans le culot par l apparition d une coloration noire de sulfure de fer qui est due la r duction du thiosulfate en pr sence de citrate ferrique La production de gaz hydrog ne dioxyde de carbone r sultant des fermentations sucr es se traduit ou bien par l apparition de bulles ou bien par la fragmentation de la g lose PREPARATION Mettre en suspension 60 1 g de milieu d shydrat BK059 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Porter lentement le milieu bullition sous agitation constante et ly maintenir durant le temps n cessaire sa dissolution R partir en tubes __ St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes __Incliner les tubes de mani re obtenir un culot de 3 cm de hauteur et une pente oblique 1 6 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr NOTA Lorsque le milieu n est pas utilis dans les 8 jours qui suivent sa pr paration il est recommand de le r g n rer au bain marie bouillant et de le solidifier nouveau en bonne position MODE D EMPLOI A partir d une colo
7. nie suspecte pr lev e sur un milieu d isolement s lectif ensemencer le culot par piq re centrale et la surface inclin e par des stries serr es Il est n cessaire d utiliser des cultures pures pr lev es au centre de colonies bien isol es sinon les r actions crois es rendent l identification impossible r aliser __Incuber 37 C pendant 24 heures capsules desserr es de mani re favoriser les changes gazeux NOTA L incubation doit tre r alis e 36 2 C pendant 24 3 h lorsque le protocole d crit dans la norme NF ISO 19250 est mis en uvre LECTURE L utilisation de l un des sucres contenus dans le milieu se traduit par une acidification virage au jaune du rouge de ph nol Une alcalinisation se r v le par une coloration rouge fonc La production de sulfure d hydrog ne partir du thiosulfate est mise en vidence par la formation d une coloration noire La g lose TSI fournit quatre renseignements principaux 1 Fermentation de glucose culot rouge glucose non ferment culot jaune glucose ferment 2 Fermentation du lactose et ou du saccharose pente inclin e rouge lactose et saccharose non ferment s pente inclin e jaune lactose et ou saccharose ferment s 3 Production de gaz apparition de gaz dans le culot 4 Formation d H S formation d une coloration noire entre le culot et la pente ou le long de la piq re 2 6 Biokar Diagnostics Rue
8. ode Milieu d shydrat Flacon de 500 g BKO59HA 4 6 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr SUPPORT PHOTO R f rence produit BKO59HA Utilisation L identification des ent robact ries y Shigella _ Pseudomonas Salmonella Enteritidis co sonnei aeruginosa Lactose Lactose Lactose Lactose saccharose saccharose saccharose saccharose glucose glucose 1 glucose glucose H2S HS HS HS Gaz pas encore visible Gaz Gaz Gaz Bact ries diverses r actions G lose TSI R f BKO59HA Incubation 24 heures 37 C Caract ristiques des r actions biochimiques diverses sont visibles Voir l gende ci dessus 5 6 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Sulkin E S and Willet J C 1940 A Triple Sugar Ferrous Sulfate Medium for use in Identification of Enteric Organisms J Lab Clin Med 25 649 653 Hajna A A 1945 Triple Sugar Iron Medium for the Identification of the Intestinal groups of Bacteria J Bact 49 516 517 Pharmacop e europ enne
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