Rapport sur les progrès – avril 2015
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1. Grappe agro ie canadienne pour l horticulture 2 Rapport sur les progr s avril 2015 Activit 16 Pomme de terre 15 Inspection et surveillance de la chip z br e et du psylle de la pomme de terre Chercheur principal Dan L Johnson Ph D Universit de Lethbridge Collaborateurs Larry Kawchuk Ph D Agriculture et Agroalimentaire Canada Scott Meers minist re de l Agriculture et du D veloppement rural de l Alberta ainsi qu un r seau de plus de 30 conseillers agricoles et des chantillons de champ Objectifs de l activit Recueillir des donn es sur la pr sence de la chip z br e des pommes de terre au Canada et examiner les tubercules pr sentant des sympt mes pour d tecter la pr sence de l agent tiologique Candidatus Liberibacter solanacearum obtenir de nouvelles donn es sur l insecte vecteur le psylle de la pomme de terre en recueillant des chantillons dans les champs en identifiant les esp ces et leurs tapes de d veloppement en cartographiant les cas relev s s il y a lieu en tablissant et en mettant en uvre un programme de surveillance en valuant les effets des conditions m t orologiques et des variations et mouvements r gionaux en d terminant la port e g ographique potentielle et en tablissant un mod le de pr vision g ographique sur le cycle biologique et le d veloppement de l insecte Progr s de la recherche ce jour 1 chantillon d insecte En 2013 et 2014 les par2. a lutte antiparasitaire En 2014 un total de 1 175 cartons collants jaunes ont t utilis s dans le cadre de l chantillonnage hebdomadaire dans les champs et les insectes sur 875 d entre eux ont t examin s en laboratoire Les donn es sont disponibles sur demande De plus un chantillonnage par balayage des pi ges eau pour insectes et un examen des feuilles ont t utilis s m thodes exploiter davantage en 2015 si des assistants peuvent tre embauch s Aucun psylle de la pomme de terre n a t d couvert durant cette importante tude bien que plus de 500 psylles connexes pas de la m me esp ce et ne pr sentant pas l agent pathog ne causant la chip z br e d apparence semblable ont t trouv s ne repr sentent pas un probl me de maladie ou d infestation Du mois d octobre 2014 au mois de janvier 2015 des cartons ont t r examin s plus en d tail au microscope les 30 cellules de chaque carton En f vrier enqu teur principal Dan Johnson s est rendu au laboratoire de l AAC Agassiz pour examiner tous les cartons d chantillonnage d insectes utilis s dans la r gion en 2014 Un grand nombre de psylles autres que de la pomme de terre ont t d couverts pour tre analys s plus en profondeur mais aucun psylle de la pomme de terre et aucun agent pathog ne causant la chip z br e n ont t trouv s La Colombie Britannique fait maintenant partie active du r seau national de surveilla
3. herches sur ce probl me En juillet 2014 D Johnson s est rendu au Kimberly Research amp Extension Center de l Universit de l Idaho Kimberly pour rencontrer Erik Wenninger et examiner ses recherches sur le psylle de la pomme de terre 5 Un nouvel tudiant aux cycles sup rieurs Quing Summer Xia effectue une recherche sur la cartographie climatologique pour pr voir les facteurs d tablissement possible 6 Des mod les exp rimentaux du d veloppement et de l apparence des ufs et des insectes aux stades immatures sont en cours d laboration pour utilisation au Canada afin de d terminer le moment d apparition probable et leur taux de survie R sultats pr liminaires s il y a lieu ou d fis Aucun carton issu d Ontario n a t retourn en 2013 et aucune information provenant d Ontario n tait disponible en 2014 mais des cartons seront fournis en 2015 et devront tre retourn s pour examen La Colombie Britannique s est jointe au r seau et a fourni un ensemble de psylles connexes Nous avons pr par l bauche d un document de r f rence pour que les ouvriers agricoles et les producteurs puissent distinguer les psylles Principaux messages Un examen minutieux de plus de 2 300 cartons provenant du Nouveau Brunswick du Manitoba du Qu bec de l Alberta et de la Colombie Britannique n a r v l aucun cas de psylle de la pomme de terre L chantillonnage et le suivi se poursuivent ainsi que
4. la pr vision des facteurs de probabilit qui devraient avoir une incidence sur l agent pathog ne et les insectes s ils p n trent au Canada Nous avons ajout des comptoirs de vente de plantes aux sites de surveillance Les insectes ont t analys s pour d couvrir l ADN de l agent pathog ne et aucun n est apparu jusqu pr sent dans nos chantillons pris dans les champs Ce projet est financ par Agriculture et Agriculture and Cultivons l avenir 2 Agroalimentaire Canada Agri Food Canada apneno S Une initiative f derale provinciale territoriale i
5. n Les m thodes d amplification en cha ne par polym rase PCR ont t utilis es pour effectuer les tests sur l ADN de l agent pathog ne La m thode d essai a correctement identifi les chantillons d talonnage dont on savait qu ils taient positifs Tous les chantillons de plantes et les psylles canadiens qui ont t soumis en 2014 ont obtenu des r sultats n gatifs l gard de la bact rie Lso Les donn es sur les 43 chantillons de plantes infect es qui ont t analys s sont disponibles sur demande Pour d tecter la pr sence de l agent tiologique de la chip z br e Candidatus Liberibacter solanacearum Lso l ADN g nomique a t extrait du tissu v g tal ou de psylles l aide de la trousse d extraction de l ADN Mericon de Qiagen Des amplifications en cha ne par polym rase PCR ont t effectu es avec 5 ul de l ADN du mod le extrait dans un m lange r actionnel total de 25 ul pour chaque chantillon en utilisant des amorces sp cifiques de la bact rie Lso Tableau 1 pour 16 S rDNA OA2 et 012c une temp rature de renaturation de 65 C et 35 cycles point d bullition de 1168 et pour la s quence codante de la membrane ext rieure du Lso avec OMB 1482F et OMB 2086R une temp rature de renaturation de 55 C et 40 cycles fragment un point d bullition de 605 Des essais PCR ont t effectu s avec des amorces sp cifiques au g ne r presseur Cls LexA LexaF et LexAR une temp
6. nce de la chip z br e et du psylle de la pomme de terre 2 Des mesures ont t prises en mati re de pr vision et de mise en correspondance avec le climat ainsi que pour l laboration d un SIG et d une base de donn es climatiques pour les r gions de culture de pommes de terre Cela permettra de noter les emplacements canadiens en fonction de la survie probable et du d veloppement de l insecte vecteur et de l agent pathog ne incluant les m thodes de mise en correspondance avec le climat et l valuation des conditions et de la superficie des cultures ainsi que la pr sence de mauvaises herbes de la famille des solanac es Des tudes statistiques et de mod lisation ont t lanc es et seront effectu es lorsque les donn es climatiques et sur les cultures auront t obtenues Des mod les exp rimentaux seront construits pour pr voir le taux de maturation l alimentation et le vol de l insecte Un tudiant aux cycles sup rieurs a commenc en mars une tude de mise en correspondance avec le climat et une autre d butera dans le courant de l ann e sur les m thodes de d tection mol culaires ou d chantillonnage 3 valuation en laboratoire pour la recherche de pathog ne pour d tecter la pr sence de l agent tiologique de la chip z br e Candidatus Liberibacter solanacearum Lso l ADN g nomique a t extrait du tissu v g tal ou de psylles l aide de la trousse d extraction de l ADN Mericon de Qiage
7. rature de fusion de 67 C et 35 cycles point d bullition 250 et au g ne Uridylate Kinase avec amorces UDKF et UDKR une temp rature de fusion de 67 C et 35 cycles point d bullition de 250 Des r sultats positifs ont seulement t obtenus pour les t moins positifs de psylle et de plante test s en 2014 avec l ensemble d amorces valu es Figure 1 Tous les psylles canadiens et les chantillons de plantes Tableau 2 qui ont t soumis en 2014 ont obtenu des r sultats n gatifs l gard de la bact rie Lso Au total 300 nouveaux psylles autres que de la pomme de terre ont t retir s des cartons d chantillonnage 2014 au laboratoire de recherche sur les insectes Dan Johnson Universit de Lethbridge et transf r s dans des fioles d alcool individuelles pour tre valu s par le laboratoire de biologie mol culaire Larry Kawchuk AAAF Centre de recherche Lethbridge Ces psylles feront l objet d essais m me s ils ne sont pas de l esp ce des psylles de la pomme de terre afin de s assurer qu ils sont exempts d agents pathog nes et d acqu rir de l exp rience en mati re de test et de confirmation des m thodes d essai Jusqu pr sent les essais indiquent que l agent pathog ne causant la chip z br e n est pr sent dans aucun chantillon canadien 4 Collaboration avec les tats Unis Nous sommes en communication avec plusieurs laboratoires importants aux tats Unis qui effectuent des rec
8. ticipants du r seau ont pr lev des chantillons dans les champs pour d pister l insecte vecteur Bactericera cockerelli ou le psylle de la pomme de terre Ils ont fait parvenir des cartons collants jaunes l Universit de Lethbridge afin qu un examen microscopique soit effectu Les cartons de pr l vement des chantillons pour l ann e 2015 ont t envoy s plus de 70 participants possibles avec des images en couleur de l insecte cibl et un mode d emploi sur la mani re de pr lever les chantillons En 2013 plus de 800 cartons collants jaunes ont t achet s et envoy s aux participants du r seau Environ 200 cartons suppl mentaires ont t plac s sur le bord des chemins dans les jardins et dans les zones infest es de mauvaises herbes en Alberta et en Colombie Britannique pour v rifier les habitudes de migration des psylles Les cartons de pr l vement des chantillons sont jaunes ce qui attire les insectes et lt lt ER Jince Depuis 1922 uaaal canadien de b j 9 Corvus Court Ottawa Ontario Canada K2E7Z4 Tel T l 613 226 4880 Fax T l c 613 226 4497 www HortCouncil ca horticulture collants Ils sont plac s dans le champ pour recueillir des chantillons pendant une semaine et sont ensuite examin s En 2013 aucun psylle de la pomme de terre n a t d couvert bien que des insectes aient t remarqu s et photographi s pour fournir un guide aux producteurs et aux professionnels de l
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