Bouillon Lactose
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1. Bouillon Lactose Sulfite LS DOMAINE D UTILISATION Le bouillon Lactose Sulfite LS est un milieu de confirmation permettant de d tecter s lectivement la pr sence de formes v g tatives ou de spores de Clostridium perfringens dans les produits alimentaires et les pr l vements biologiques d origine animale sans qu il soit n cessaire de pratiquer les tests confirmatifs habituels HISTORIQUE Utilisant les travaux ant rieurs de Put 1961 relatifs l tude de la sensibilit des Clostridium au sulfite la croissance optimale de Clostridium perfringens 46 C ainsi que sa capacit fermenter le lactose Beerens et al en 1982 ont formul et d velopp avec succ s le milieu LS Ils ont particuli rement recommand son utilisation pour la d tection des faibles quantit s de Clostridium perfringens dans les produits alimentaires fortement contamin s par d autres bact ries sulfito r ductrices PRINCIPES La sp cificit du milieu vis vis de Clostridium perfringens est due principalement la capacit de ce microorganisme r sister aux sulfites et fermenter le lactose en produisant du gaz La concentration en m tabisulfite inhibe le d veloppement de la plupart des clostridia autres que Clostridium perfringens L incubation 46 C assure la culture sp cifique de Clostridium perfringens qui r duit le m tabisulfite de sodium en sulfure provoquant avec le citrate ferrique un pr cipit noir de sulfur2. ble apr s incubation 46 C XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF EN ISO 7937 V 08 019 F vrier 2005 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour le d nombrement de Clostridium perfringens Technique par comptage des colonies Les mentions port es sur l tiquette sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 10 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK140 F 2004 01 5 5 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
3. e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu D 6 S116 1012 RER EEE 4 44 g Extrait autolytique de levure 2 22 g Chlorhydrate de cyst ine snseeeesneeeeneereserrnrrernnrersrtrrnsrrenneernnne 0 27 g OS a a a a a aN 8 89 g Chlorure de sodium 2e nn tetes 2 22 g M tabisulfite de SOdIUM 4 svssss iinnienrenannuemenneeess 0 67 g Citrate ferrique ammoniacal 0 56 g pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 1 0 2 CONTR LE QUALITE Milieu d shydrat poudre cr me fluide et homog ne Milieu pr par solution ambr e limpide R ponse culturale typique apr s 24 heures d incubation 46 C m thode qualitative Microorganismes Croissance Production Noircissement 9 turbidit de gaz Clostridium perfringens ATCC 13124 bonne score 2 positive positif Clostridium perfringens NCTC 8238 bonne score 2 positive positif Clostridium bifermentans ATCC 19299 faible score 1 n gative positif 2 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr STOCKAGE Milieu d shydrat 2 30 C La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par en tubes utiliser le jour m m
4. e de fer qui se d pose au fond du tube PREPARATION Mettre en solution 19 3 g de milieu d shydrat BK140 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Agjiter lentement jusqu dissolution compl te R partir en tubes contenant une cloche de Durham raison de 9 mL par tube __ St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes NOTE Apr s refroidissement les cloches de Durham ne doivent pas contenir d air 1 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr MODE D EMPLOI partir des colonies noires suspectes obtenues sur un milieu de d nombrement pour Clostridium perfringens g lose TSC BK031 BM039 BM077 ensemencer un bouillon au thioglycolate avec r sazurine BK017 BMO82 __Incuber les tubes en ana robiose pendant 20 heures 37 C Ensemencer 5 gouttes de culture dans un tube de bouillon LS __Incuber 46 C pendant 24 heures dans un bain d eau thermostat LECTURE La fermentation du lactose qui se traduit par l apparition de gaz dans les cloches de Durham volume au minimum gal au 1 4 du volume de la cloche en 24 heures ainsi que la pr sence simultan e d un pr cipit noir de sulfure de fer dans les tubes indiquent la pr sence de Clostridium perfringens FORMULE TYPE pouvant tre ajust
5. e de la pr paration titre indicatif PRESENTATION Code Milieu d shydrat Flacon de 500 g BK140HA 3 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr SUPPORT PHOTO Psy R f rence BK140HA Domaine d utilisation Confirmation de Clostridium perfringens dans les produits alimentaires T moin n gatif Echantillon positif Bouillon lactose sulfite LS R f BK140HA Incubation 24 heures 46 C Caract ristiques un noircissement dans les tubes positifs un pr cipit de sulfure de fer coupl avec une pr sence de gaz dans les cloches de Durham r duction du m tabisulfite de sodium et fermentation du lactose 4 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Beerens H Romond C H Lepage C and Criquelion J 1982 A Liquid Medium for the Enumeration of Clostridium perfringens in Food and Faeces Isolation and Identification Methods for Foods Poisoning Organisms Edited by Academic Press London 137 149 NF V 59 107 Mars 1984 G latine alimentaire Recherche des spores de Clostridium perfringens Technique du nombre le plus proba
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