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Anti-Human Globulin (COOMB`S) Green

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1. instrument devront tre contr l es fr quemment Des faux r sultats peuvent appara tre suite contamination du mat riel de test une mauvaise temp rature de r action des conditions inappropri es de conservation du mat riel lomission du r actif de test et certains tats pathologiques Aucun test ne peut d tecter tous les anticorps cliniquement significatifs n existe aucune garantie que les produits d riv s de sources humaines ou animales ne sont pas susceptibles de transmettre des agents infectieux II convient donc de faire particuli rement attention dans la manipulation et l limination de ce produit PR PARATION DU SP CIMEN Les sp cimens doivent tre pr lev s au moyen de techniques aseptiques avec ou sans anticoagulant Des tests directs l antiglobuline doivent toutefois tre effectu s avec des cellules fra ches pr lev es dans un anticoagulant l EDTA afin d viter toute sensibilisation in vitro avec le compl ment Le sp cimen doit tre test aussi rapidement que possible apr s le pr l vement Si le test est repouss le sp cimen doit tre conserv entre 2 et 8 C Des sp cimens sanguins pr sentant un fort degr d h molyse ou de contamination ne doivent pas tre utilis s Des sp cimens coagul s ou ceux pr lev s dans de l EDTA doivent tre soumis aux tests dans les sept jours compter de la date du pr l vement PROTOCOLES TEST INDIRECT M THOD
2. AHG a TEST L ANTIGLOBULINE HUMAINE TEST DE COOMBS R f Catalogue 1 312i 10ml vert 1 304i 10ml incolore 1 312 10 x 10ml vert 1 312c 10 x 10ml incolore 1 312 1L 1000mI vert 1 312C 1L1000m1I incolore INTRODUCTION Ce r actif polysp cifique est exclusivement pour usage professionnel diagnostique in vitro pour la d tection de l IgG et des anticorps rythrocytaires de liaison de compl ment par tests directs et indirects l antiglobuline Les anticorps immunoglobulines peuvent s attacher la surface des cellules rythrocytaires humaines in vivo ou in vitro Un rev tement in vivo peut se pr senter si l organisme produit un auto anticorps s opposant un autoantig ne situ sur les rythrocytes de l organisme m me Un rev tement in vitro peut se pr senter au cours de tests sur de d termination du groupe sanguin de tests de compatibilit avant transfusion et de tests visant d tecter et observer les anticorps atypiques CONTENU DU PRODUIT Le r actif l antiglobuline humaine de BIOTEC contient de l IgG anti humaine ovine et de l anti C3d humaine II contient galement lt 0 1 d azide de sodium comme agent de conservation Le produit fini contient ce qui suit R actif l antiglobuline humaine 10ml 1 312i amp 1 304i ou 10x10ml 1 312 amp 1 312c ou 1000mI 1 312 1L amp 1 312C 1L 1 mode d emploi MAT RIEL REQUIS MAIS NON FOURNI Solution saline physi
3. E SUR LAME 1 Pr parer une suspension 2 4 avec les rythrocytes soumettre au test dans une solution saline 0 85 NaCl pH 7 0 2 Placer ce qui suit dans un petit tube de test 2 volumes du s rum tester 1 volume de suspension rythrocytaire 2 4 1 volume d albumine bovine BIOTEC 22 ou 30 3 Bien m langer et laisser incuber 37 C pendant 30 S Des Page 1 2 R v 4 French BIOTEC Laboratories Ltd e 32 Anson Road e Martlesham Heath e Ipswich e Suffolk e IP5 3RG e Royaume Uni T l 44 0 1473 612158 e Fax 44 0 1473 611476 e Site Internet www biotec com e Email technical biotec com AHG a 4 Laver les cellules 4 fois dans de grosses quantit s de solution saline physiologique Laisser d canter compl tement au dernier lavage 5 Remettre en suspension les cellules 2 4 dans une solution saline physiologique 6 M langer ce qui suit sur une plaque ou une lame propre 1 volume de r actif BIOTEC lantiglobuline humaine 1 volume de cellules lav es en suspension 2 4 7 Laisser reposer temp rature ambiante pendant 5 minutes 8 Faire balancer doucement la plaque et chercher des signes d agglutination sur une source lumineuse TEST INDIRECT M THODE EN TUBE 1 Pr parer une suspension 2 4 avec les rythrocytes soumettre au test dans une solution saline physiologique 0 85 NaCl pH 7 0 2 Placer ce qui suit dans un petit tube de test 2 volumes
4. du s rum tester 1 volume de suspension rythrocytaire 2 4 1 volume d albumine bovine BIOTEC 22 ou 30 3 Bien m langer et laisser incuber 37 C pendant 30 minutes 4 Laver les cellules 4 fois dans de grosses quantit s de solution saline physiologique Laisser d canter compl tement au dernier lavage 5 Ajouter 2 volumes de r actif BIOTEC l antiglobuline humaine 6 Bien m langer et centrifuger 100 FCR 1000 t min pendant 1 minute 7 Agiter le tube doucement et examiner macroscopiquement pour d tecter toute trace d agglutination Les n gatifs peuvent tre examin s au microscope TEST DIRECT M THODE SUR LAME 1 Laver les cellules tester dans de grosses quantit s de solution saline physiologique Laisser d canter au dernier lavage 2 Pr parer une suspension 2 4 d rythrocytes lav s dans une solution physiologique saline 3 M langer ce qui suit sur une plaque ou une lame propre 1 volume de r actif BIOTEC l antiglobuline humaine 1 volume de suspension rythrocytaire 2 4 4 Laisser reposer temp rature ambiante pendant 5 minutes 5 Faire balancer doucement la plaque et chercher des signes d agglutination sur une source lumineuse TEST DIRECT M THODE EN TUBE 1 Laver les rythrocytes tester 4 fois dans de grosses quantit s de solution saline physiologique Laisser d canter compl tement au dernier lavage 2 Remettre en suspension les
5. ologique 0 85 NaCl pH 7 0 Albumine bovine 22 ou 30 Tubes ou lames pour essais Contr les voir Contr le de Qualit Pipettes Centrifugeuse CONSERVATION ET DUREE DE CONSERVATION Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser en cas de turbidit ou de pr sence de pr cipit ou particules Ne pas diluer Le r actif est stable jusqu la date de p remption inscrite sur l tiquette du produit AVERUSSPMENTS ET PR CAUTIONS Il est conseill aux utilisateurs de s assurer avec soin du caract re appropri du r actif avant usage dans des m thodes alternatives Un lavage insuffisant des rythrocytes peut provoquer une neutralisation du r actif l antiglobuline humaine 2008 03 19 Antiglobuline Humaine Apr s compl tion de la phase de lavage tout exc s de solution saline r siduelle pourrait diluer le r actif l antiglobuline humaine au del des taux recommand s si ajout e Notez que les conditions recommand es pour la centrifugeuse sont exprim es comme force centrifuge relative ou FCR Voir les orientations du fabricant de la centrifugeuse pour les param tres quivalents Les tests doivent tre lus conform ment au protocole tip and roll Des secousses excessives peuvent rompre une faible agglutination et produire de faux r sultats n gatifs Si des dispositifs automatiques de lavage de cellules sont utilis s les performances et la propret de l
6. rythrocytes 5 dans une solution saline physiologique 3 Placer ce qui suit dans un petit tube de test 2008 03 19 Antiglobuline Humaine 2 volumes de r actif BIOTEC l antiglobuline humaine 1 volume de suspension rythrocytaire 5 4 M langer et centrifuger 100 FCR 1000 t min pendant 1 minute 5 Agiter le tube doucement et examiner macroscopiquement pour d tecter toute trace d agglutination Les n gatifs peuvent tre examin s au microscope INTERPR TATION R sultats Agglutination Aucune agglutination r sultat positif r sultat n gatif Contr le de Qualit Pour chaque lot d essais de d pistage d anticorps entrepris par test l antiglobuline humaine un contr le positif et un autre n gatif doivent tre pr vus Le contr le positif doit tre un anti D faible 0 2 IU ml le contr le n gatif doit tre un s rum inerte soumis preuve par confrontation aux cellules de d pistage d anticorps utilis es Si le contr le positif anti D faible a t dilu pour utilisation il doit tre dilu dans du s rum ou du plasma pour servir de contr le de lavage remarque si le diluant est une solution saline albumine bovine le test de contr le pourrait tre positif m me si le lavage de cellule tait sous optimal et suffisant donner un r sultat att nu ou faussement n gatif avec un chantillon contenant des anticorps CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCE Les
7. rythrocytes positifs au test direct l antiglobuline ne doivent pas tre utilis s dans le test indirect l antiglobuline R F RENCES 1 Guidelines for the Blood Transfusion Services in the United Kingdom 3 dition 1996 2 Flynn J C Jr Essentials of Immunohaematology W B Saunders Company 1998 Page 2 2 R v 4 French BIOTEC Laboratories Ltd e 32 Anson Road e Martlesham Heath e Ipswich e Suffolk e IP5 3RG e Royaume Uni T l 44 0 1473 612158 e Fax 44 0 1473 611476 e Site Internet www biotec com e Email technical biotec com

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