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Évaluation de l`activité antioxydantedes huiles

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1. Ouzidane Feuilles Beni Snous Fleurs Beni Snous Feuilles 0 0 005 0 01 0 015 0 02 025 0 03 0 035 0 04 concentration mg ml Figure 11 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides certicillata par la m thode ABTS Nos r sultats ont donn une efficacit antioxydant valu e par la m thode ABTS nettement meilleurs ceux enregistr par Bakchiche et al 2013 en tudiant les huiles essentielles d Artemisia campestris ICso 1 013 mg ml et Juniperus phoenica ICso 2 020mg ml par contre Ozturk 2012 en tudiant les huiles essentielles de Satureja thymbra a enregistr une activit antioxydante sensiblement similaire nos huiles essentielles avec une ICs de 0 0093 mg ml 3 4 Pouvoir r ducteur L activit r ductrice d un extrait est valu e par la r action d oxydo r duction entre l extrait et les ions m talliques de transition notamment le fer Le ferricyanure de potassium K Fe CN fournit des ions Ferriques Fe qui seront r duits en Ferreux Fe par les R sultats et discussion Page 48 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V me o qm e antioxydants pr sents dans l extrait v g tal Le pouvoir r ducteur est d termin selon la m thode d crite par Oyaizu 1986 La figure 12 nous donne une id e sur l
2. P 13 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V 4 Propri t s physique des huiles essentielles P 14 5 Chimie des huiles essentielles ii isso P 15 P 18 6 Extraction des huiles essentielles ie P 18 6 1 Poncipales THCINOGES CCRT ACUI ais a o den aectntrdes 6 2 Autres m thodes d obtention des extraits volatils P 20 7 Les applications alimentaires des huiles essentielles P 22 B DUtnsauon des iles essentielles RS Re r P 25 9 Classification des huiles essentielles p 25 10 Mode d action des huiles essentielles p 25 p 27 Rg Lies cig og ai gt 6 11 E 0 102 aa OR PE RE RP 27 12 Toxicit des huiles essentielles P LE ARR AO soa E E a Da Na ae a aa SE P 27 14 Contr le de qualit des huiles essentielles P 28 Chapitre IV Mat riels et m thodes Prevenance et r colte de mat riel V R TAIE anneau da 2 Situation g ographique des stations d tude P 29 2 Extraction l huile essentielle de plante tudi P 29 P32 Le eS E A a EAA a oes Bes Prete ARAA EE a EA EOE T L EAI EON TI I E EEE ESN P32 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V EM ES OO De PR Te PT SU TE SOON CE EE TEL SU in HUIT e
3. les Rutacees citron orange et les Apiacees carvi coriandre persil Richter G 1993 Les huiles essentielles peuvent etre localisees aussi bien dans les fleurs les feuilles les fruits que dans les ecorces les graines ou les racines Elles se forment dans des cellules specialisees le plus souvent regroupees en poches ou en canaux secreteurs Bemard T et al 1988 Elles se caracterisent par leurs proprietes organoleptiques odeur couleur et gout Ce sont generalement des substances fluides de densite souvent inferieure a celle del eau a l exception des essences de cannelle de girofle et de sassafras Elles sont incolores ou faiblement colorees en jaune pale Mais il en existe des colorees cannelle orange absinthe vert et camomille bleu Elles sont solubies dans tous les solvants organiques ether alcools hexane pentane et tres legerement dans l eau Elles dissolvent les graisses l iode le soufre le phosphore et reduisent certains sels 1 Leur indice de refraction est eleve et elles possedent un pouvoir rotatoire On leur attribue differents indices chimiques indice d acide d ester de carbonyle Luque de Castro et al 1999 Etude bibliographiques SS os Page 12 1 R partition syst matique et caract res chimiques des huiles essentielles Les HE n ont pas une pr sence g n rale chez les v g taux Environ 1 des esp ces laborent des essences Cert
4. huile essentielle A ADR dia Etude bibliographiques o o pia Page 15 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxy dant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V La plupart des composants des HES sont inclus dans deux groupes les terp no des et les ph nylpropano des les deux sont synth tis s travers deux voies m taboliques s par es Les terp no des Ils repr sentent le groupe le plus diversifi des m tabolites secondaires v g taux plus de 15 000 compos s diff rents sont d crits dans la litt rature Ils d rivent d une structure de base cing carbones C5H8 commun ment appel e isoprene Figure 04 Selon le nombre r p titif de cette unit les terp noides sont class s en monoterp noides C10 sesquiterp no des C15 et diterp noides C20 Dans la composition de la plupart des huiles essentielles les monoterp noides et les sesquiterp noides forment la majeure partie Figure 05 Les ph nylpropanoides Ils sont moins fr quents par rapport aux terp noides N anmoins certaines plantes poss dent ces compos s avec des proportions significatives Les ph nylpropano des d rivent majoritairement de la ph nylalanine Khenaka 2011 Ils sont constitu s d une chaine carbon e li e un noyau aromatique six carbones Figure 05 Khenaka 2011 Figure 04 Structure de la mol cule d isoprene Calsamiglia et al
5. 2007 Etude bibliographiques 7 ie Ce Page 16 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxy dant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Figure 05 Diversit des structures de s cr tion des huiles essentielles A poil s cr teur de Mentha pulegium B trichome glandulaire de Mentha pulegium C trichome glandulaire de Lippia scaberrima et D structure de trichome glandulaire de Thymus vulgaris Combrinck et al 2007 Karray Bouraoui et al 2009 Etude bibliographiques q K Page Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V OH Curvacrol Thymol lerpinen 4 ol Zinviberenc Guaiol K Cinnamaldehy de Eugenol edit O E E q Anethole Capsaicin Figure 06 Structure de quelques compos s des huiles essentielles A monoterp noides B sesquiterp noides et C ph nylpropanoides Calsamiglia et al 2007 6 Extraction des huiles essentielles I existe plusieurs m thodes pour extraire les huiles essentielles Les principales sont bas es sur l entra nement la vapeur l expression la solubilit et la volatilit Le choix de la m thode la mieux adapt e se fait en fonction de la nature de la mati re v g tale traiter des caract ristiques physico chimiques de l essence extraire de l usa
6. La solution de ABTS t pr par e par solubilisation de ABTS dans de l eau distill e et apr s 18 h on pr pare 12 pindofs contiennent 200 ul de m thanol et marqu e sur les bouchons pindofs les dilutions par l ordre de d croissance 1 2 jusqu 1 4096 dans le premi re pindof on introduit 200 ul de l hydrolysat ou des extraits aqueux de Ammoides verticilata et on m lange bien puis l aide d une micropipette on prend de chaque dilution 200 ul et on le verse dans l autre dilution et on homog n ise et on proc de de la m me mani re suite jusqu la derni re dilution Pour chaque dilution on pr pare 3 tubes pindofs qui constituent les trois r p titions qu on met 900 ul de la solution m thanolique de l ABTS puis on ajoute 25 ul de chaque dilution de l huile essentielle ou de l hydrodistillat qu on laisse 6 minutes l obscurit et temp rature ambiante Mat riels et m thodes Page 38 Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Une mesure d absorbance d un chantillon contenant 900 ul de la solution de l ABTS a t consid r e comme t moin n gatif Les absorbances sont mesur es directement par spectrophotom tre 517 nm et apr s l avoir tar et remis z ro par du m thanol 2 4 Pouvoir r ducteur Le test sur le pouvoir r ducteur met en avant la capacit d un
7. addition de l extrait et de d soxyribose Arepr sente l absorbance de l extrait sans d soxyribose Mat riels et m thodes Chapitre V r sultats et discutions l1 Propri t s organoleptique de l huile essentielle extraite L examen organoleptique de cette huile tableau 07 consiste en un essai olfactif toutefois il est n cessaire de d crire l aspect de ces huiles essentielles et de leurs saveurs Tableau 07 Caract res organoleptiques des huiles essentielles d Ammoides verticillata Huiles essentielles Couleur Aspect Odeur D Ammoides verticillata Saveur Liquide mobile Aromatique Forte et limpide piquante 2 Rendement en huile essentielle Calcule des rendement des feuilles et fleurs Nous avons constat que les rendements de la partie fleurs de Ternny et Ouziden sont plus importants que ceux de la partie feuilles par contre le rendement de la partie fleurs de la station Beni Snous est plus important que la partie feuilles L extraction de notre chantillon effectu par hydrodistillation a fourni un rendement moyen en H E variable compris entre 1 3 7 obtenus partir des trois stations On constate que les rendements de la partie feuilles de la station de Ternny est plus importants que celui de Beni Snous et Ouziden par contre les feuilles enregistrent le taux de rendement le plus faible Figure 08 L tude phytochimique d Ammoides verticillata effectu e pa
8. national 22 Cette station est sur le bassin de Tlemcen vy Ouzidane Ouzid as FE Google earth mn lt 474 E F Photo 08 Carte g ographie de station Ouziden Google Earth 2014 Mat riels et m thodes Page 30 Rd Beldjord A 2014 tude de I effet antioxydant des h huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Station03 Beni snous Elle se trouve sur 41 Km sud ouest de la ville de Tlemcen Cette station est situ e dans les monts de Tlemcen Cette station est sur le bassin de Tlemcen ISnous Agency o ie Photo 0 Carte g ographie de station Beni snous Google Earth 2014 Mat riels et m thodes di 7 Page 31 Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen 2 1 Description des stations Les diff rentes stations sont d crites dans le tableau Tableau 03 situation g ographique et bioclimat des diff rentes stations Latitude nord Altitude Longitude Etages bio Station Localisation climatiques ouest aride Montes de Semi 1055 34 47 Far temp r doux Ternny Tlemcen Bassin de Semi aride tlemcen chaud ou 871 34 56 1 17 temp r doux Ouziden Monts de Semi arde Tlemcen 835 34 38 35 37 4l temp r doux
9. ne physiologique Pour valuer l activit antioxydante in vitro des extraits naturels diff rentes m thodes ont t d velopp es Ces m thodes impliquent le m lange d esp ces oxydantes tels que des radicaux libres ou des complexes m talliques oxyd s avec un chantillon qui contient des antioxydants capables d inhiber la g n ration de radicaux Ces antioxydants peuvent agir selon deux m canismes majeurs par transfert d atome d hydrog ne ou par transfert d lectron Prior et al 2005 A travers l tude bibliographique il appara t clairement qu une seule m thode ne suffit pas pour caract riser une pr vision compl te de l efficacit antioxydante Ainsi compte tenu des diff rents facteurs impliqu s tels que les propri t s physico chimiques des mol cules il est recommand d utiliser plusieurs tests pour confirmer une activit antioxydante Rolland 2004 Donc nous avons choisi le test d ABTS du DPPH du TBARS le pi geage du radical hydroxyl et l activit ch latante afin d valuer l activit antioxydante de nos huiles essentielles ceci nous permettra de mieux g n raliser les r sultats 3 1 Pi geage du radical DPPH L activit antioxydante est tributaire de la mobilit de l atome d hydrogene du groupement hydroxyle des compos s ph noliques de l huile essentielle En pr sence d un radical libre DPPH l atome H est transf r sur ce dernier alors transform en une
10. An P50 Conclusion et DETSNGCIIVES nes ae ue P53 R f rences bibliographiques Beldjord A 2014 tudes de l effet antuoxydant d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Introduction De par leur composition chimique les plantes aromatiques repr sentent un int r t conomique consid rable par leur appartenance aux industries de la parfumerie des cosm tiques de l agroalimentaire et de la pharmacie Bruneton 1999 En effet elles sont dou es non seulement de qualit s parfumantes et culinaires mais aussi de vertus m dicinales vari es gr ce aux diff rents principes actifs qu elles contiennent alcalo des flavono des tanins saponosides et huiles essentielles Elles constituent un r servoir in puisable de rem des populaires des plus efficaces et une source naturelle de m dicaments les plus usit s Beloued A 2001 Valnet 1 1998 De nos jours il existe de nombreuses maladies contre lesquels les antibiotiques de synth se deviennent de moins en moins efficaces Aussi l utilisation fr quente d antibiotiques entraine chez certains sujets des infections secondaires salmonellose gastroent rite etc Hostettmann et Marston 2002 Par ailleurs l emploi d additif chimique dans l industrie alimentaire conduit a la perte de la qualit et de la fiabilit des aliments Ainsi les huiles essentielles utilis es depuis l antiqui
11. Dal TAI DC O LE i coe shee lr se ES Figure 10 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides verea par inmethode LEAR eras ab seno tissus start PT Figure 11 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides verticiiata par Ia method AB TS ei atteste Pas Figure 12 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides verticillata par la methode du pouvoir r ducteur 1P49 Figure 13 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides verticillata par la methode de pi geage du radical hydroxyl P5 Liste des tableaux Tableau01 Enqu te th rapeutique d Ammo des verticillata P07 Tableau 02 Estimation de la production d huile essentielle de quelques pays en HUE GO ODA ei Mar ann et ds es tn E Tableau04 Constantes physicochimiques de quelques constituants NS LEE AR E E o ic A RD on ri ab ane RR Tableau 05 exemples de la diversit des applications P24 Tableau06 situation g ographique et bioclimat des diff rentes stations P32 Tableau 07 caract res organoleptiques des huiles essentielles d Ammoides DORE PR CORRE PR EA DR NS TL LR LR PRE Photos 01 Photos 02 Photos 03 Photos 04 Photos 05 Liste des photos gt Carte peopraphn de SION TOFRNV ar ai Da a Carte g ographie de station Ouziden Carte g o
12. Ombellales Appiac s Ammoides ou Ptychotis Verticillata 3 Enqu te th rapeutique d Ammoides verticillata Les qualit s th rapeutiques d Ammoides verticillata sont connues depuis les plus anciens dans la m decine populaire locale Cette esp ce poss de des qualit s pr cieuses et jouit d une grande faveur populaire Sijelmassi A 1991 Etude bibliographiques di a Page 6 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Par ailleurs Merad 1973 avance que l infusion d Ammoides verticillata est utilis e comme antipyr tique rafraichissante et antispasmodique surtout conseill e dans les spasmes gastro intestinaux En outre Ziyyat A et al 1997 avancent que Ammoides verticillata est une plante aromatique utilis e comme f brifuge conseill e contre la grippe et poss de des propri t s th rapeutiques contre hypertension et ou diab te Suite notre enqu te r alis e aupr s des herboristes et des gens campagne de la r gion de Tlemcen les information qu on a pu recueillir ont montr que la plante a des usages culinaires et surtout th rapeutiques et sont r sum s dans le tableau 1 Tableau 1 Enqu te th rapeutique d Ammoides verticillata Fi vre Bouillir de l eau avec la plante mettre une serviette sur la Rhumes grippe t te et inhaler les vapeurs d gag es Ensuite b
13. courts involucre nul involucelle in gale 3 s tac es 2 spatul es et arist es Fleurs blanches fruit de Imm de long environ ovoides tr s l ger comprim par le dos recouvert de poils pais Cinque cot s primaires filiformes pro minentes b la formule florale et diagramme floral La formule florale est pentam re FF 5S 5P 5E 2C Les s pales sont en g n ral tr s r duits les cinq p tales les tamines cinq alterni tales libres ins r es sur un disque plus ou moins apparent l ovaire est de deux carpelles ant ro post rieurs Figure 02 Bekhechi 2002 Etude bibliographiques Page 5 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V c syst matique du genre Ammoides ou ptychotis C est la classification des etres vivants d apr s un syst me fond sur l emploi d u den seul ou d un petit nombre de caract res g n tiques morphologique et embryologiques La compostion chimique est devenue un caract res taxonomique suppl mentaire Lawrence 1980 Ammoides ou ptychotis verticillata est class selon la cl de d termination botanique d apr s Quezel et Santa 1963 et Guinochet et Vilmorin 1975 comme suit Embranchement an _ ces meme S embranchement Angiospermes Classe Dicotyl dones s classe Dialyp tales com e le S rie Calciflores
14. et conseils d utilisation Centre de formation en aromath rapie Faye O Lo M Gaye O 1997 Connaissances et circuits th rapeutiques relatifs au paludisme en zone rurale S n galaise M decine tropicale 57 1 6 1 164 Ferhat M Kadi L et Lahouaou A 2009 Recherche de substances bioactives de l esp ce Centaurea microcarpa Coss et Dur Le Dipl me des Etudes Sup rieures en Biologie DES Universite Mohamed Boudiaf M sila Faculte des sciences et des sciences de l ingeniorat Departement de biologie Garn ro J 1991 Les huiles essentielles leur obtention leur composition leur analyse et leur normalisation Ed techn Encyclo Me Nat Paris France Phytoth rapie Aromath rapie Reference bibliographique Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammo des verticillata de la r gion de Tlemcen Garnon P 1991 3i me rencontres techniques et conomiques plantes aromatiques et m dicinales Nyons 2 3 4 D cembre pp 216 231 Gholivand M B Rahimi Nasrabadi M Batooli H Ebrahimabadi A H 2010 Chemical composition and antioxidant activities of the essential oil and methanol extracts of Psammogeton canescens Food Chem Toxicol 48 24 28 Grysole J 2005 Huiles essentielles de la plante la commercialisation Manuel pratique 140 162 Guinochet M vilmorin R 1975 Flore de France Ed C N R S Fascicule 2 Halliwell
15. l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V 8 Utilisation des huiles essentielles Ces HE agissent selon leur tropisme ce terme signifie que chaque huile exerce ses pouvoirs curatifs sur un organe ou une zone en particulier ces substances volatiles p n trent les tissus et l organisme Par exemple PHE de basilic est particuli rement actif au niveau de la digestion Celle de cypr s am liore la circulation Il est donc tr s important de se renseigner sur les effets th rapeutiques des HE car leur usage peut comporter des inconv nients Par exemple une HE de menthe des champs est indiqu e pour stimuler les personnes fatigu es elle soulage les douleurs n vralgiques mais ne doit jamais tre utilis e dans un bain sous peine d irritation s rieuse de la peau Outre ces propri t s principales elles ont toutes une vertu Blayn 1980 Maach et Jemali 1986 9 Classification des huiles essentielles Selon le pouvoir sp cifique sur les germes microbiens et gr ce l indice aromatique obtenu par des aromatogramme les huiles essentielles sont class es en groupe e Les huiles majeures e Les huiles m diums e Les huiles terrains Chakou et Bassou 2007 10 Mode d action des huiles essentielles Plusieurs th ories sont propos es pour expliquer le m canisme par lequel les HES exercent leur activit antimicrobienne La composition complexe des HES
16. latant contrairement aux feuilles et tiges qui n ont pas d montr une activit ch latante 3 6 Pi geage du radical hydroxyle Ce test consiste valuer la capacit de l extrait de plante pi ger les groupements hydroxyle OH form s par la r action de Fenton EDTA Fe H O OH OH EDTA Fe Les OH g n r s qui ne sont pas pi g s attaquent et d gradent le d soxyribose et les produits de d gradation sont r v l s par l acide thiobarbiturique L activit de pi geage des radicaux hydroxyles est tudi e en mesurant leurs capacit s pr venir la d gradation oxydative du d soxyribose selon un test d velopp par Lopes et al 1999 R sultats et discussion Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V Les huiles essentielles d Ammoides verticillata ont ex rc es une excellent activit antioxydante Figure 13 par le pi geage du radical hydroxyle en enregistrant des IC50 de l ordre de 0 01876 et 0 01761 mg ml respectivement pour les fleurs et les feuilles pour la station de Terni 0 03545 et 0 00586 mg ml respectivement pour les fleurs et les feuilles pour la station d Ouzidane et la meilleure activit a t enregistr avec la station de Beni Snous avec des IC50 de l ordre de 0 00066 et 0 00095 mg ml respectivement pour les fleurs et les feui
17. oxydante par la mesure du pouvoir de pi geage DPPH L activit anti oxydante a t valu e par la mesure du pouvoir de pi geage du radical DPPH Le test de DPPH est r alis selon la m thode d crite par Bruits et Bucar 2000 o 50ul de chacune des solutions m thanoliques des HE test es diff rentes concentrations sont m lang es avec 5ml d une solution m thanolique de DPPH 0 004 Apr s 30 min l absorbance est lue 517nm Param tres de calcul de l activit antioxydante Pourcentage d inhibition Pourcentage d inhibition du DPPH 1 est calcul de la mani re suivant 1 A blanc A chantillon x100 A blanc blanc Absorbance du blanc DPPH dans le m thanol A chantillon Absorbance du compos d essai IC50 Ce param tre est d fini comme la concentration d antioxydant requise pour diminuer la concentration initiale de 50 il est inversement li la capacit antioxydante TC50 C est le temps atteint avec une concentration d antioxydant gale IC50 Efficacit anti radicalaire EA EA 1 1050 x TC 50 harififar et al 2007 Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammo des verticillata de la r gion de Tlemcen 2 2 Inhibition de la peroxydation lipidique par la m thode des TBARS Suivant La m thode de Choi et al 2002 en utilisant une induction de la peroxydation lipidique par le couple acide ascorbique sulfat
18. phase organique on fait agir un deshydratant Mat riels et m thodes Page 35 Beldjord A 2014 tude de Veffet anuoxydant des huiles essentielles d Ammotdes verticillata de la r gion de Tlemcen Relargage et d cantation s paration Ampoule d cante ree US D tt dm 2 yt T o z mr que Photo 0 Etapes obtention des huiles essentielles Onginal Mat riels et m thodes Beldjord A 2014 tude de l effet antoxvdant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen 1 2 Calcule du rendement en huile essentielle Le rendement en huile essentielle est d fini comme tant le rapport entre la masse d huile essentielle obtenue et la masse s che du mat riel v g tale traiter Carr 1953 1n Bekhchi 2002 Le rendement exprim en pourcentage est calcul par la formule suivante R m m0 x 100 R rendement en huile essentielle exprim en pourcentage m masse en gramme de l huile essentielle mo masse en gramme de la masse v g tale traiter s che 2 Activit antioxydante Les flavono des sont des mol cules connues pour leurs propri t s antioxydantes Robak et Gryglewski 1988 Afin d valuer cette activit antioxydante des extraits naturels de notre plante des m thodes ont t adopt es qui sont DPPH ABTS TBARS pouvoir chelatant pouvoir r ducteur 2 1 Evaluation de l activit anti
19. 005 La capacit ch latrice s est d termin e selon la m thode de Le et ses collaborateurs 2007 qui est bas e sur l inhibition de la formation du complexe Fe Ferrosine apr s le traitement des chantillons avec les ions Fe Cinq cent microlitres des solutions d extraits ou du ch lateur standard EDTA diff rentes concentrations sont additionn es 100 ul de FeCl2 0 6 mM et 900 ul de m thanol Apr s 5 min d incubation cent microlitres de ferrosine 5 mM sont ajout s et le m lange est agit et laiss r agir pendant 10 min pour permettre la complexation du fer r siduel L absorbance du complexe Fe ferrosine est mesur e 562 nm L activit ch latrice est exprim e en pourcentage en utilisant l quation ci dessous Activit ch latrice Ac At Ac x100 Ac absorbance du contr le At Absorbance du test Mat riels et m thodes Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammo des verticillata de la r gion de Tlemcen Pour une caract risation meilleure de l efficacit des extraits la concentration effectrice EC 50 d finie comme la concentration de l chantillon qui produit 50 d effet ch lateur ainsi que l activit ch latrice exprim e en mg d quivalent d EDTA g d extrait sont calcul es 2 6 Pi geage du radical hydroxyle Le OH est le radical libre extr mement r actif form dans les syst mes biologiques partir d anio
20. 3 R actifs Les r actifs chimiques utilis s dans cette tude sont 2 2 diph nyle 1 picryl hydrazyl DPPH Ferrosine 3 2 Pyridyl 5 6 diphenyl 1 2 4 triazine 4 4 disulfonic acid sodium salt acide trichlorac tique TCA EDTA FeCl3 ferricyanide de potassium K3Fe CN 6 et Na2CO3 proviennent de Sigma Allemagne Chlorure ferreux FeC12 Acide linol ique et TBA 1 Tampon de phosphate sulfate de fer methanol ethanol 2 d soxyribose 4 Solutions de travail L acide gallique 200 ug ml pr par dans l eau distill e solution tampon tri Hcl PH 7 5 20mM Solution de DPPH 0 1mM pr par e dans l thanol Solution de Fecl2 0 6mM pr par e dans l eau distill e test de ch lation du fer ferreux Ferrosine 5 mM pr par e dans le m thanol 807 FeCl2 0 6mM pr par e dans l eau distill e test de ch lation du fer ferreux EDTA 100 ug ml pr par dans l eau distill e FeCl2 0 4 pr par dans de 1 HCI 3 5 test de peroxydation de l acide linol ique Beldjord A 2014 tude de effet antioxydant des huiles essentielles d Ammo des verticillata de la r gion de Tlemcen FeCI3 0 1 pr par dans l eau distill e TCA 10 pr par dans le tampon PBS 0 2M pH 6 6 Solution tampon phosphate 50 mmol pH 7 4 TBA 10 g l Il M thodes 1 Obtention des huiles essentielles 1 1 Dispositif utilis Le dispositif utilis po
21. A P V 6 LA phytoth rapie C est le traitement des maladies par les plantes transform e depuis le XIX si cle par l emploi des extraits de plantes puis par celui des substances actives isol es de celles ci Domar Bourneuf 1990 La phytoth rapie contemporaine est devenue une v ritable science L exploration de flore du globe tant loin d tre complete et de nouvelles d couvertes tant faites chaque jour sur les propri t s de certaines plantes l tuves des vertus m dicinales des plantes connues ou inconnues nous r serve encore assur ment beaucoup de surprises On peut affirmer que non seulement la m decine par les plantes est une m decine d aujourd hui mais qu elle conna t m me un regain d actualit grace aux progr s de la science M decine lente peut tre mais peu peu bienfaisante et toujours inoffensive la m decine en marge de la m decine officielle mais devrait s int grer celle ci pour le plus grand bien du malade En apportant la th rapeutique moderne sa pr cieuse et ternelle participation cette m decine des premiers ges redonne au monde un peu de cette sagesse antique dont une civilisation outranci re nous a d pouill s Debuiue 1984 7 Mode d emploi des plantes m dicinales Pour assurer l action du m dicament 1l est n cessaire de traiter la plante de la transformer pour en tirer la substance ayant une action sp cifique E
22. Atmospheres Packaging en anglais permet de multiplier par trois la sensibilit deListeria sp de m me que pour de la viande hach e emball e sous les m mes conditions une augmentation tr s significative de la sensibilit d Coli 2 5 fois et de Salmonelle 4 5 fois est constat e en pr sence d H E Aussi l H E combin e un chauffage doux 55 C pendant minute a permis d inhiber totalement Salmonelle alors qu en absence d huile un chauffage de plus d une heure tait n cessaire pour arriver au m me r sultat Cependant le seuil d efficacit des huiles les plus efficaces tant tr s bas souvent inf rieurs 0 1 leur ajout en tr s faibles quantit s n alt re pas les qualit s organoleptiques de l aliment Des investigations ont t effectu es pour valuer l efficacit de quatre H E de plantes Laurier clou de girofle cannelle et thym en tant que conservateurs normaux L effet d H E aux concentrations de 0 1 de 0 5 et de 1 a t tudi en fromage p te molle faible teneur en mati re grasse et mati re grasse naturelle contre Listeria monocytogenes et Salmonella enteritidis 4 C et 10 C respectivement sur une p riode de 14 jours Ils ont conclu que les H E des plantes choisies agissent comme inhibiteurs potentiels contre L monocytogenes et S enteritidisdans ce produit alimentaire Boubrit et Boussad 2007 Les traitements du p t tout pr par de foie de porc avec le romarin retard
23. B Gutteridge J M C Arnoma O L 1987 The deoxyribose method A simple test tube assay for the determination of rate constant for reaction of hydroxyl radical Anal Biochem 165 215 219 Hazzit M Baalioumer A Verissimo A R Faleiro M L Miguel M G 2009 Chemical composition and biological activities of Algerian Thymus oils Food chemistry 116 741 721 Huang D Ou B and Prior R L 2005 The chemistry behind antioxidant capacity assays Journal of Agriculture and Food Chemistry 53 1841 1856 JAYAPRAKASHA G K R P SINGH et al 2001 Antioxidant activity of grape seed Vitis vinifera extracts on peroxidation models in vitro Food Chemistry 73 3 285 290 Jia H L Ji Q L Xing S L Zhang P H Zhu G L Wang X H 2010 Chemical composition and antioxidant antimicrobial activities of the essential oils of Thymus marschallianus Will And Thymus proximus Serg J Food Sci 75 E59 E65 Joshi S C Verma A R Mathela C S 2010 and antibacterial activities of the leaf essential oils of Himalayan Lauraceae species J Chem Toxicol 45 37 40 Kambouche N El Abed D 2003 composition of the volatile oil from the aerial parts of Trachyspermum ammi L Sprague from Oran Algeria J of Essentiel Oil Research 15 10 11 Lawrence B M 1980 The existance of intraspecific differences in specific genera in the Labiatae family Paper presented at Ville international congress of essential
24. REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE ee a eS TA eS NI En all MINISTERE DE L ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE ado a PE PES 6 3j UNIVERSITE D ABOU BEKR BEL KA D TLEMCEN Cluses lal J ri xala ap Facult des Sciences de la Nature et de la Vie amp Sciences de la Terre et de l Univers SNV STU D partement des Sciences Agronomiques MEMOIRE EN VUE DE L OBTENTION DE DIPLOME MASTER AMELIORATION VEGETAL E valuation de l activit antioxydantdes huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Pr sent par M Beldjord Amina Soutenu publiquement le 30 Octobre 2014 devant un jury compos de Mr ELHAITOUM A M C A Pr sident M TEFIANI C M A A Encadreur Mr GHEZLAOUI B E M C A Examinateur Mr BARKA MS M C B Examinateur Ann e Universitaire 2013 2014 REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE CE V0 7 a NOT VUS LE Ut EU Er MO PEN MINISTERE DE L ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE lall Cia g ld adult 8 155 UNIVERSITE D ABOU BEKR BEL KA D TLEMCEN Ghali lal Si gal xala we Facult des Sciences de la Nature et de la Vie amp Sciences de la Terre et de l Univers SNV STU D partement des Sciences Agronomiques MEMOIRE EN VUE DE L OBTENTION DE DIPLOME MASTER AMELIORATION VEGETAL E Evaluation de l activit antioxydantedes huiles essentielles d 4mmoides Verticillata de la
25. a plante annuelle e Ammoides atlantica plante bisannuelle Son appellation dans notre pays est Noukh ou Nunkha tire son origine de la d formation du nom perse Nankhah qui provient de son utilisation en Iran comme aromate dans le pain en Nan et kha signifient respectivement pain et gout Baytopet et sitlupinar 1986 La saveur de cette plante est fortement aromatique et piquante Son odeur agr able diffusible intense et balsamique est persistant m me apr s dessiccation Les graines de cette plante sont tres utilis es dans la pr paration culinaire pain r ti l gume soupe gr ce leurs arome forts Par ailleurs elles rendent plus digest les l gumineuses les haricots secs et les lentilles Elles sont souvent m lang es d autres pices pour att nuer leur saveur am re Boulos 1983 En Algerie cette plante jouit d une grande faveur populaire en effet elle est particuli rement tr s utilis e dans la pr paration de la soupe d escargot Kambouche et al 2003 cette plante a galement un pouvoir antioxydant et est recommand e comme une source potentielle d antioxydant naturel Metha et al 1994 metha et Zayas 1995 Etude bibliographiques 225 080 e Ju 3 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Noms vernaculaires Cette plante est connue sous les noms popu
26. ade florale qui est ensuite puis e par un solvant qu on limine sous pression r duite Dans cette technique on peut distinguer l enfleurage o la saturation se fait par diffusion la temp rature ambiante des ar mes vers le corps gras et la digestion qui se pratique chaud par immersion des organes v g taux dans le corps gras Brian 1995 6 2 3 Extraction par micro ondes Le proc d d extraction par micro ondes appel e Vacuum Microwave Hydrodistillation VMHD consiste extraire l huile essentielle l aide d un rayonnement micro ondes d nergie constante et d une s quence de mise sous vide Seule l eau de constitution de la mati re v g tale trait e entre dans le processus d extraction des essences Sous l effet conjugu du chauffage s lectif des micro ondes et de la pression r duite de fa on s quentielle dans l enceinte de l extraction l eau de constitution de la mati re v g tale fra che entre brutalement en bullition Le contenu des cellules est donc plus ais ment transf r vers l ext rieur du tissu biologique et l essence est alors mise en oeuvre par la condensation le refroidissement des vapeurs et puis la d cantation des condensats Cette technique pr sente les avantages suivants rapidit conomie du temps d nergie et d eau extrait d pourvu de solvant r siduel Justin Nzeyumwami K 2004 6 2 4 Extraction par un solvant organique volatil Cette technique est la plus pratiqu e avec hyd
27. aines familles se caract risent par le grand nombre d esp ces essences qu elles groupent et en particulier les labi s Thym Menthe Lavande Origan Sauge etc les Ombellif res Anis Fenouil Ang lique Cumin Coriandre Persil etc les Myrtac es Myrthe Eucalyptus les Laurac es Camphrier Laurier sauce Cannelle Benayad 2008 Les huiles essentielles peuvent tre stock es dans divers organe fleur origan feuill s citronnelle corce cannelier bois bios de rose rhizomes acore fruits badiane ou grain carvi Boudjemaa et Ben Guegua 2010 Tableau 02 Estimation de la production d huile essentielle de quelques pays en milliers de dollars Djossou 2006 Pays Valeurs USA 145000 Chine 110000 URSS 30000 Maroc 30000 26000 On 25000 France 20000 Egypte 12000 Alg rie a 8000 Haiti 8000 i C te d Ivoire 3500 Burkina Faso _ Cuba 3 Propri t s et activit s biologique des huiles essentielles Elles ont des propri t s et des modes d utilisation particuliers et ont donne naissance a une branche nouvelle de la phytoth rapie l aromath rapie Les huiles essentielles poss dent de nombreuses activit s biologiques En phytoth rapie elles sont utilis es pour leurs propri t s antiseptiques contre les maladies infectieuses cependant elles Etude bibliographiques 7 o ae 7 a i Page 13 Beldjord A 2014 valuation de l activit anuoxydant des hui
28. arait generalement au d but du mois de Mai Son cycle de reproduction se poursuit meme en Juillet Selon Quezel et santa 1961 cette especes v g tale est spontan e annuelle souches filiformes et tiges tres ramifi es de 10 40 Cm sans rosettes aux feuilles basales les feuilles inferieures nombreeux segments multiples verticill s les superieurs p natifides segments lin ares Ombelles principale de 8 15 rayons fruits ovoides de moin de 1 mm de long On la trouve g n ralement dans les champs les pelouses les montagnes les forets les endroits rocheux et sutout les lieux arides Pour Battandier et Trabut 1902 la plante a un calice limbe obsol te des p tales avec une tache dorsale des styles r fl ris d passant peu le stylopode un fruit oerdinairement scabre papilleux ovoides renfermant six bandelettes par m ricarpe carpophore biparti involucre oligophylle folioles in gales ou nulles la plante se trouvant g n ralement sur les boulis D apres guinochet et vilmorin 1975 c est une plante annuelle de 15 35 cm glauccecente racines gr les pivotantes tige dress stri e gr le nombreux rameaux tal s feuilles adultes st riles pennatisequ es 3 4 segments tr s rapproch s trois trifides Feuilles adultes fertiles pennatisequ es en lani res capillaires paraissant verticil es Ombelles petites 6 12 rayons capillaires tr s in gaux les internes plus
29. cit antibact riennes et antifongiques des huiles essentielles obtenues par extraction de la menthe verte Mentha SpicataLisdue de la r gion de Ouargla sur quelques germes pathogenes coli Pseudomonasaeroginosa Staphylococcus aureus Bacillus subtiluis et Candida albicans M moire de DES microbiologie Universit de Kasdi Merbah Ouargla P 14 27 Chiej R 1982 Les plantes m dicinales Ed Solar Choi C W Kim S C Hwang S S Choi B K Ahn H J Lee M Z Park S H amp Kim S K 2002 Antioxidant activity and free radical scavenging capacity between Korean medicinal plant and flavonoids by assay guided comparison Plant Sci 163 1161 1168 Combrinck S Du Plooy G W Mecrindle R I Botha B M 2007 Morphology and Histochemistry of the Glandular Trichomes of Lippia scaberrima Verbenaceae Annals of botany 99 6 1111 1119 Cox S D Mann C M Markam J L 2001 Interaction between components of the essential oil of Melaleuca alternifolia Journal of Applied Microbiology 91 492 497 Dandlen S A Lima A S Mendes M D Miguel M G Faleiro M L Sousa M J Pedro L G Barroso J G Figueiredo A C 2010 Antioxidant activity of six Portuguese thyme species essential oils Flavour Fragr J 25 150 155 Debuigue G 1984 Larousse des plantes qui gu rissent Librairie Domar R Bourneuf J 1990 Naouveau Larousse m dical Englebin M 2011 Essences et huiles essentielles pr caution d emplois
30. continu semi continu ou en discontinu Le proc d consiste puiser le mat riel v g tal par un solvant bas point d bullition qui par la suite sera limin par distillation sous pression r duite L vaporation du solvant donne un m lange odorant de consistance p teuse dont l huile est extraite par l alcool L extraction par les solvants est tr s co teuse cause du prix de l quipement et de la grande consommation des solvants Un autre d savantage de cette extraction par les solvants est leur manque de s lectivit de ce fait de nombreuses substances lipophiles huiles fixes phospholipides carot no des cires coumarines etc peuvent se retrouver dans le m lange p teux et imposer une purification ult rieure Brian 1995 6 2 2 Extraction par les corps gras La m thode d extraction par les corps gras est utilis e en fleurage dans le traitement des parties fragiles de plantes telles que les fleurs qui sont tr s sensibles l action de la temp rature Elle met profit la liposolubilit des composants odorants des v g taux dans les corps gras Le principe consiste mettre les fleurs en contact d un corps gras pour le saturer en essence v g tale Le produit obtenu est Etude bibliographiques H as Ea Mb Page 20 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V une pomm
31. de l huile essentielle recueillie sont minimis es Brian 1995 Etude bibliographiques o oo Page 19 Beldjord A 2014 valuation de l activit anuoxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V 6 1 4 L hydrodiffusion Elle consiste pulser de la vapeur d eau travers la masse v g tale du haut vers le bas Ainsi le flux de vapeur traversant la biomasse v g tale est descendant contrairement aux techniques classiques de distillation dont le flux de vapeur est ascendant L avantage de cette technique est traduit par l am lioration qualitative et quantitative de l huile r colt e l conomie du temps de vapeur et d nergie Roux 2008 6 1 5 L expression froid Elle constitue le plus simple des proc d s mais ne s applique qu aux agrumes dont l encore des fruits comporte des poches s cr trices d essences Ce proc d consiste broyer l aide de presses les zestes frais pour d truire les poches afin de lib rer l essence Le produit ainsi obtenu porte le nom d essence car il n a subi aucune modification chimique Roux 2008 6 2 Autres m thodes d obtention des extraits volatils 6 2 1 Extraction par solvants La m thode de cette extraction est bas e sur le fait que les essences aromatiques sont solubles dans la plupart des solvants organiques L extraction se fait dans des extracteurs de construction vari e en
32. des huiles essentielles afin d estimer quelles conditions ou quelle p riode ces huiles essentielles pourrait avoir une activit int ressante Conclusion Page 53 Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Reference bibliographique AFNOR 1992 Recueil des normes fran aises huiles essentielles Ahmadi F Sadeghi S Modarresi M Abiri R Mikaeli A 2010 Chemical composition in vitro antimicrobial antifungal and antioxidant activities of the essential oil and methanolic extract of Hymenocrater longiflorus Benth of Iran Food Chem Toxicol 48 1137 1144 Amarti F Satrani B Ghanmi M Farah A Aafi A Aarab L El Ajjouri M Chaouch A 2010 Composition chimique et activit antimicrobienne des huiles essentielles de Thymus algeriensis Boiss amp Reut Et Thymus ciliatus Desf Benth du Maroc Biotechnol Agron Soc Environ 14 1 141 148 Bakchiche B Gherib A Aazza S Gago C Miguel M G 2013 Antioxidant activities of eight Algerian plant extracts and two essential oils Industrial Crops and Products 46 85 96 Battandier et trabut 1902 La flore analytique et synoptique de Alg rie et de la Tunisie 19 Flore Baudoux D 2008 L aromath rapie Se soigner par les huiles essentielles Ed Broch pp1 Baytopet T Sitlupinar n 1986 Characteristics of Nanahan culivated in Anato
33. e Avec l aide du tout Puissant j ai pu r aliser ce modeste travail que je d die A mes chers parents sur qui j ai pu compter et me ressourcer d affection et de b n dictions durant toute ma vie A mon fianc Benchenni Mohamed A mon fr re Mohamed A mes s urs Dalila Samira Rachida Mokhtaria et la petite Joujou Ames tr s ch res ni ces Chaimae Rahma et mon petit c ur Bouchra A mes copines Aicha Asmaa et Meriem A toutes les personnes qu on marquer leurs pr sences dans ma vie AMINA Liste des figures Figure 01 Ammoides verticillata P03 Figure 02 diagramme flaoral d Ammoides verticillata observation a la coupe ESTO NR PRADA ee EP RR PAR eh IDR OT RS ne no Tir a POS Figure 03 s chage d Ammo des verticillata PI0 Figure 04 Structure de la mol cule d isopr ne Pl6 Figure 05 Diversit des structures de s cr tion des huiles ac a IATA mro cute DR TA DO SR RUES Et i A O RD eae P17 Figure 06 Structure de quelques compos s des huiles RT LS SN oo Boe NT EP NO NP RE RR er ee PUR i T Figure 07 M canisme d action de carvacrol sur la membrane CORNE DC PT An PDU ao OR Figure 08 rendement en huiles essentielles obtenus par les differents stations CATTLE 66 i a1 11 ac nn te PS OS on nr Doo NT SP Figure 09 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides PEPINO
34. e de fer r action de Fenton a t adapt e pour cet essai A 600 pL d extraits de plantes est ajout respectivement 300 uL de solution tampon Tris HCl pH 7 5 20 mM 500 uL d acide linol ique 20 mM et 100 uL de sulfate de fer 4 mM La p roxydation d bute apr s addition de 100 uL d acide ascorbique 5 mM Le m lange r actionnel obtenu est incub au bain marie 37 C pendant 60 minutes Apr s cette tape 2 mL de TCA 10 sont ajout s dans tous les tubes Ensuite 1 mL d aliquote recueilli dans chacun des m langes r actionnels pr par s auparavant est ajout mL de TBA 1 Les m langes r actionnels obtenus sont plac s dans un bain bouillant 95 C pendant 20 minutes L acide gallique est utilis comme mol cule de r f rence Un essai blanc est r alis en rempla ant l extrait par de l eau distill e L absorbance est lue au spectrophotom tre 532 nm et le pourcentage d inhibition de l acide linol ique est d termin selon l quation suivante Inhibition 1 DO essai DO blanc x100 2 3 Evaluation de l activit anti oxydante par la methode ABTS La d termination de pi geage des radicaux ABTS a t effectu e comme indiqu par Aazza et al 2011 Les essais ont t effectu s en triple La concentration de l chantillon fournissant 50 d inhibition CIS0 a t obtenue en tra ant le pourcentage d inhibition en fonction des concentrations d huiles essentielles
35. e de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen sec rfi www ramsar org Photo 06 Montage pour l hydrodistillation laboratoire N 4 d Agronomie Original Mat riels et m thodes Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen 1 1 2 Le Principe Cette technique fait intervenir quatre tapes y Entrainement la vapeur On fait bouillir un m lange d eau et de substance naturelle contenant le compos extraire huile essentielle la vapeur entraine les huiles essentielles contenues dans le produit brut Enfin on condense ces vapeurs l aide d un r frig rant v Relargage Les huiles essentielles que l on d sire extraire sont des compos s organiques en partie solubles dans l eau Le relargage consiste les rendre moins solubles dans l eau en ajoutant du chlorure de sodium De cette fa on il sera plus ais de r cup rer ces huiles essentielles Y D cantation On la r alise dans une ampoule d canter dans laquelle le m lange pr c dent se s pare en deux phases non miscibles Une phase aqueuse en g n rale plus dense se situe dans la partie inferieure et une phase organique de densit plus faible et contenant la ou les huiles s essentielle s se situe au dessus S paration Afin d liminer le peu d eau susceptible d avoir t retenue dans la
36. e mol cule r duire un oxydant en lui c dant un lectron Jayaprakasha et al 2001 Le pouvoir r ducteur est d termin selon la m thode de Top u et ses collaborateurs 2007 avec quelques modifications Diff rentes concentrations d extraits ou de l antioxydant standard BHT sont m lang es avec 2 5 ml de tampon phosphate 0 2 M pH 6 6 et 2 5 ml de ferricyanide de potassium K3Fe CN 6 1 Le m lange est incub 50 C pendant 20 min Ensuite 2 5 ml de TCA 10 2 5 ml d eau distill e et 0 5 ml de FeC13 0 1 sont additionn s et l absorbance est lue 700 nm contre un blanc qui contient tous les r actifs sauf le FeCl3 La valeur ECSO est la concentration de l chantillon qui correspond une absorbance gale a 0 5 et est calcul e partir du graphe de l absorbance en fonction de la concentration de l chantillon 2 5 Ch lation du fer ferreux Le test sur la ch lation des ions Fe quand lui met en avant la capacit d une mol cule fixer les ions Fe2 Les ions Fe2 jouent un r le important lors de la production des radicaux libres notamment lors de la r action de Fenton qui survient chaque fois qu une mol cule d H202 est en contact d ions Fe2 et qui est l origine de la production des radicaux hydroxyl OH un des radicaux les plus r actifs Le fer joue aussi un r le dans la phase de propagation de la lipoperoxydation ainsi que dans la formation du radical O2 Huang et al 2
37. efficacit de nos huiles essentielles des diff rentes stations pour r duire les ions Ferriques Fe en Ferreux Fe Cette r duction est fortement li e aux concentrations de ces huiles essentielles 2 1 8 n 1 6 Terni Fleurs 1 4 MT 2 12 Terni Feuilles c m f 2 Ouzidane Fleurs amp 0 8 0 6 Ouzidane Feuilles 0 4 02 Beni Snous Fleurs 0 0 0 05 0 1 0 15 0 2 Beni Snous Feuilles concentration mg ml Figure 12 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides certicillata par la m thode du pouvoir r ducteur Plusieurs auteurs ont tudi le pouvoir r ducteur des huiles essentielles de pluieurs esp ces de Lauraceae d Himalaya Joshi et al 2010 Myrtus communis var italica Wannes et al 2010 Hymenocrater longiflorus Ahmadi et al 2010 Origanum onites L Ozkan et al 2010 et Psammogeton canescens Gholivand et al 2010 Dans ces cas l activit antioxydante mesur e par le pi geage du radical DPPH s est av r faible que les auteurs l attribue la faible concentration de compos s ph noliques pr sentes dans ces huiles par contre le pouvoir r ducteur s est r v l plus efficace et a donn des r sultats similaires r f rences acide ascorbique m me forte concentrations R sultats et discussion Page 49 3 5 Pouvoir ch lateur du fer Pour valuer le pouvoir ch lateur d un extrait donn le compos stab
38. emcen Prior RL Wu X Schaich K 2005 Standardized methods for the determination of antioxidant capacity and phenolics in foods and dietary supplements Journal of Agricultural and Food Chemistry 53 10 4290 4302 Quezel P Santa 1961 Nouvelle flore de l Alg rie et des r gions d sertiques m ridionales Ed C N R S Tome Il Re R Pellegrini N Proteggente A Pannala A Yang M Rice Evans C 1999 Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cationdecolorization assay Free Radical Biological Medicine 26 9 10 1231 1237 Robak J Gryglewski R J 1988 Flavonoids are scavengers of superoxide anions Biochimical pharmacology vol 37 N 5 pp 837 841 Rolland Y 2004 Antioxydants naturels v g taux OCL 11 6 P 419 424 S Aazza B Lyoussi and M G Miguel 2011 Antioxidant activity of some Morrocan hydrosols J Med Plants Res 5 6688 6696 Salle 1 L 1991 Les huiles essentielles Synthese d aromatherapie et introduction it fa sympathicotherapie Edition Frison Roche Paris 21 Sarikurkcu C Ozer M S Eskici M Tepe B Can S and Mete E 2010 Essential oil composition and antioxidant activity of Thymus longicaulis C Presl subsp ongicaulis var longicaulis Food and Chemical Toxicology 48 1801 1805 Siddhuraju P Becker K 2007 The antioxidant and free radical scavenging activities of processed cowpea Vigna unguiculata L Walp seed extracts Food C
39. en Master AP V 11 Parfumerie et cosm tologie Un grand nombre d H E 400 500 est utilis dans l laboration de la majorit des parfums et produits de toilette Ces cosm tiques gr ce leur activit antiseptique tout en leur assurant une odeur agr able Roulier 1992 De m me certains constituants chimiques isol s partir d HE peuvent faire l objet de transformations chimiques donnant naissance de nouvelles odeurs ainsi partir de l eug nol tir de l essence de girofle on aboutira l isog nol qui a une odeur d ceillet Vigne 1987 12 Toxicit des huiles essentielles Les tudes scientifiques montrent que les huiles essentielles peuvent pr senter une certaine toxicit Il faut cependant remarquer que celle ci varie selon la voie d exposition et la dose prise Degryse et al 2008 Les huiles essentielles semblent n tre toxiques par ingestion que si celle ci est faite en de grandes quantit s et en dehors du cadre classique d utilisation Les huiles ne seront toxiques par contact que si des concentrations importantes sont appliqu es Degryse et al 2008 Selon Englebin 2011 les huiles essentielles sont des substances tr s puissantes et tr s actives c est la puissance concentr e du plant aromatique il ne faux donc jamais exag rer les doses quelque soit la voie d absorption car toute substance est potentiellement toxique dose lev e ou r p t e Paracelse dit rie
40. ent la croissance de Listeria monocytogenes Aeromonas hydrophila et Listeria monocytogenes ont t inhib es sur la viande cuite poitrine de poulet par des extraits d eug nol et de piment Boubrit et Boussad 2007 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V ae Tableau 03 exemples de la diversit des applications Grysole 2005 Parfumerie cosm tiques technique Huiles alimentation essentielles M decine 4 Basilic parfum Ar me pour Antispasmodique sauces et r gulateur du syst me condiments Ar me pour Ar me pour savons boisson et citronnelle d sinfectant sucreries loigne les insectes Eucalyptus Ar me pour Anti inflammatoire boissons sucreries sucreries Cr mes a glac es G ranium Ar me pour Anti spasmodique sucreries relaxant chewing gum Vasodilatateur s datif lemongrass Menthe Saveur pour Saveur pour Antalgiq ue anesth sique dentifrice liqueurs glaces tonique stimulant du poivr e chewing gum syst me nerveux chocolat Saveur pour les sirops par boissons exemple Saveur pour sucreries cr mes glac es Etude bibliographiques Page24 Beldjord A 2014 valuation de
41. es fleurs des deux stations avec des IC50 de l ordre de 0 07852 et 0 1232mg ml La station de Beni Snous a r v l une activit antioxydante plus importante que les deux autres stations qui s est traduit par des IC50 de l ordre de 0 07647 et 0 07881 mg ml 100 BS 90 ME 80 o 70 Terni Feuilles 60 Terni Fleurs o 50 ED Ouzidane Fleurs Sa q z Ouzidane Feuilles v 30 E 20 Beni Snous Fleurs 10 Beni Snous Feuilles 0 0 0 2 0 4 0 6 0 8 1 Le 1 4 1 6 Concentration mg ml Figure 09 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides certicillata par la m thode DPPH R sultats et discussion Page 45 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V SE o e eee eme Selon Amarti et al 2010 qui ont tudi l activit antioxydante de quatre esp ces de thym du Maroc qui ont enregistr un bon effet antioxydant tell que T capitatus T ciliatus et T bleicherianus avec ICso 0 069mg ml 0 074mg ml et 0 078 mg ml respectivement Ces r sultats montrent que l huile essentielle de Thymus ciliatus poss de une bonne activit antioxydante Compar e une tude faite par Bounatiron et al 2007 sur les huiles essentielles de Thymus capitalus de Tunisie les huiles essentielles de 7 ciliatus ont donn une act
42. eur application la conservation de la viande fraa che type hachee Ing niorat d tat en biologie option contr le de la qualit et analyses Universit Mouloud Mammeri de Tizi ouzou Boudjemaa N E et Ben Guegua H 2010 L effet antibact rien de Nigella sativa M moire de fin d tudes Universit kasdi merbah ouargla D partement des Sciences de la Nature et de la Vie Faculte des sciences de la nature et de la vie et sciences de la terre et de l univers Boulos L 1983 Medicinal plantes of North Africa Reference Publication Algonac MI pp 109 75 Bounatirou S Smiti S Miguel M G Faleiro L Rejeb M N Neffati M Costa M M Figueiredo A C Barroso J G and Pedro L G 2007 Chemical composition antioxidant and antibacterial activities of the essential oils isolated from Tunisian Thymus capitatus Hoff et Link Food Chemistry 105 146 155 Brian M L 1995 The isolation of aromatic materials from plant products R J Reynolds Tobacco Company Winston Salem USA p 57 148 Bruneton J 1993 Pharmacognosie phytochimie Plantes m dicinales Tec Et Doc Lavoisier Burits M et Bucar F 2000 Antioxidant activity of Nigella sativa essential oil phytotheraphy Research 14 p 323 328 Buronzo A M 2008 Grand guide des huiles essentielles Ed Hachette pratique 254p Burt S 2004 Essentielial oils their antibacterial properties and potential applications in foods a review International Journa
43. ge de l extrait et l ar me du d part au cours de l extraction Samate Abdoul 2001 6 1 Principales m thodes d extraction Il existe plusieurs m thodes de distillation dont voici les principales Etude bibliographiques sss Page Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V 6 1 1 L entrainement la vapeur d eau Les m thodes d extraction par l entra nement la vapeur d eau sont bas es sur le fait que la plupart des compos s volatils contenus dans les v g taux sont entra nables par la vapeur d eau du fait de leur point d bullition relativement bas et de leur caract re hydrophobe Sous l action de la vapeur d eau introduite ou form e dans l extracteur l essence se lib re du tissu v g tal et entra n e par la vapeur d eau Le m lange de vapeurs est condens sur une surface froide et l huile essentielle se s pare par d cantation Bruneton 1993 En fonction de sa densit elle peut tre recueillie deux niveaux au niveau sup rieur du distillat si elle est plus l g re que l eau ce qui est fr quent au niveau inf rieur si elle est plus dense que l eau Les principales variantes de l extraction par l entra nement la vapeur d eau sont l hydrodistillation la distillation vapeur satur e et l hydrodiffusion Bruneton 1993 6 1 2 L hydrodistillation Le princ
44. graphie de station Beni snous Montage pour l hydrodistiianion 1 praia rar e Etapes obtention des huiles essentielles eck aU P31 P31 P34 P36 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V sommaire AIN Sat De L PORERNE q TETE E DA ge anand E P 01 Chapitre I La plante tudi e Ammo des verticillata DCI SONORO MARIO ae nn Sa ae ee P 03 2 Poser DUON DOTANT HO CEA DANS ne nn o a o P 04 de CHAUDE TES DO BANRAUES nc aaa ana ease b la formule florale et diagramme floral raria P 05 c syst matique du genre Ammoides ou ptychotis 0cc ce eeeeeeee P 06 3 Enqu te th rapeutique d Ammoides verticillata is P 07 Chapitre II Les plantes m dicinales PRO HORS MO MES ONE DP ees P 09 Zee NOME GE TON RELAIS E AE EEE Ar PS P 09 De LR COC IG ba CHEN spa Pr die Ge re P 09 PR C SE CHOSE ES AN a A a a ara P 10 ne CANSEI CUSTO RAM Late nn ns ent P 10 D DA ese ti DIE PR RR PAS PT UI DR rial 7 Mode d emploi des plant s Medicinali oo antenne nt P 11 Chapitre III Les huiles essentielles P Peton des NUES essnee NES nr aar AAAA 2 R partition syst matique et caract res chimiques des huiles DE voted ej Lh al comte ac 4 mr PD er ee On ner eS 3 Propri t s et activit s biologiques des huiles essentielles
45. hem 101 10 19 Sijelmassi A 1991 Les plantes m dicinales du Maroc 2 Ed Le Fennec Singh H P Kaur S Mittal S Batish D R Kohli R K 2010 n vitro screening of essential oil from young and mature leaves of Artemisia scoparia compared to its major constituents for free radical scavenging activity Food Chem Toxicol 48 1040 1044 Sokmen A Gulluce M Akpulat A H Deferera D Tepe B Polissiou M Sokmen M Sahin F 2004 The in vitro antimicrobial and antioxidant activities of the essential oil and methanol extracts of endemic Thymus spathulifolius Food control 15 627 634 Tepe B Sokmen M Akpulat H A Daferera D Polissiou M Sokmen A 2005 Antioxidative activity of the essential oils of Thymus sipyleus subsp sipyleus var sipyleus and Thymus sipyleus subsp sipyleus var rosulans Journal of Food Engineering 66 447 454 Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Top u G Ay M Bilici A Sarikurkcu C Ozturk M and Ulubelen A 2007 A new flavone from antioxidant extracts of Pistacia terebinthus Food Chemistry 103 816 822 Truffault A Mimoz A Edouard P Samii K 2000 La colonisation pat staphylococcus aureus r sistant la m ticilline est un facteur pr dictif du ph notype de r sistance d une souche infectante S aureus Annales fran aises d anesth sie et de r an
46. i re v g tale On peut extraire soit chaud c est dire temp rature proche de la temp rature d bullition du solvant soit temp rature ambiante On travaille en g n ral dans un extracteur statique afin d viter la d gradation de la matrice v g tale et la solubilisation concomitante de compos s ind sirables Mueller et al 2004 Les solutions aromatiques obtenues appel es miscella sont vapor es sous vide temp rature la plus basse possible afin d viter la d gradation des mol cules odorantes Le solvant organique extrait galement des compos s ind sirables en particulier des mati res grasses huile cires etc Celles ci sont d ailleurs responsables de la d nomination concr te qui traduit la tendance des produits se solidifier temp rature ambiante Un traitement secondaire est donc n cessaire pour s parer les fractions aromatique et grasse Il consiste entra ner l thanol les compos s aromatiques Cette op ration est pratiqu e basse temp rature environ 20 C On obtient apr s vaporation de l thanol un produit appel absolue qui comporte la majorit des compos s volatils Sokhna et al 1997 7 Les applications alimentaires des H E Les tudes qui ont t r alis es jusqu maintenant montrent que les H E peuvent tre appliqu es tous les aliments Ainsi les H E d origan de thym de cannelle ou de coriandre sont efficaces pour les viandes
47. ie a rienne fleurs feuilles 2 Situation g ographique des stations d tude Les principaux facteurs g ographiques qui influent de fa on significative sur la v g tation en Alg rie comme ailleurs sont le climat pr cipitation temp ratures vents radiation solaire etc le sol et l altitude En outre c est surtout l quilibre d licat de ces facteurs qui joue un r le primordial la fois dans le d veloppement individuel des plantes et dans leur distribution Beniston 1984 Le tapis v g tal tr s diversifi de la r gion de Tlemcen offre une s rie de peuplements herbac s arbustifs et arbor s Ces esp ces v g tales occupent de vastes tendues au niveau des plaines et des versants montagneux Ainsi il a t choisi 1 et parfois 3 stations au niveau de chaque point cardinal de la r gion de Tlemcen savoir Ternny Ouziden Beni snous Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen e a Station 02 Ternny Elle se trouve 12 Km du Sud de la ville de Tlemcen long e par la route national 7 Cette station est sur haut plateau nord des monts de Tlemcen o pe fe CK ale earth e 51 55 Am Photo 04 Carte g ographie de station Ternny Google Earth 2014 Station 03 Ouziden Elle se trouve sur 6 Km du Nord Est de la ville de Tlemcen long e par la route
48. ilisant le plus utilis est la ferrozine Zhao et al 2006 En effet la ferrozine forme avec le fer libre pr sent dans un milieu r actionnel un complexe ferrozine Fe de couleur violette intense La quantification de ce complexe par spectrophotom trie 562 nm dans un milieu de concentration connue en fer renseigne sur la quantit de fer non ch lat et donc sur la capacit des extraits ch later cet l ment Plus la coloration de la solution contenant l extrait test est claire plus le pouvoir ch lateur est important L tude de l activit ch latante des huiles essentielles d Ammoides verticillata a r v l une non activit ch latante des diff rentes huiles essentielles des diff rentes stations et parties des plantes tudi es Dans une tude faite par Bounatirou et al 2007 ils ont constat que les huiles essentielles de Thymus capitatus Hoff et Link n ont pas d montr une activit chelatante le m me constat a t fait avec Sarikurkcu et al 2010 en tudiant les huiles essentielles de Thymus longicaulis C Presl subsp ongicaulis var longicaulis Par contre Viuda Martos et al 2010 ont constat une activit ch latante avec une IC de l ordre de 17 32 mg ml en tudiant les huiles essentielles de hymus vulgaris d Espagne En tudiant l effet ch latant des huiles essentielles de Myrtus communis Wannes et al 2010 ont constat que les fleurs ont exerc un effet ch
49. imation 19 3 151 155 Valnet 1 1984 Aromatherapie traitement des maladies par les essences des plantes Ed Maloine S A nOIO Valnet 1 1998 Aromatherapie Traitement des maladies par les essences de plantes Ed Vigot Villano D Fernandez Pachon M S Moya M L Troncoso A M Garcia Parrilla M C 2007 Radical scavenging ability of polyphenolic compounds towards DPPH free radical Talanta 71 P 230 235 Viuda Martos M Navajas Y R Zapata E S Fern ndez L pez J and P rez lvarez J A 2010 Antioxidant activity of essential oils of five spice plants widely used in a Mediterranean diet Flavour Fragr J 25 13 19 Wannes W A Mhamdi B Sriti J Ben Jemia M Ouchikh O Hamdaoui G Kchouk M E Marzouk B 2010 Antioxidant activities of the essential oils and methanol extracts from myrtle Myrtus communis var italica L leaf stem and flower Food and Chemical Toxicology 48 1362 1370 Wannes W A Mhamdi B Sriti J Jenia M B Ouchikh O Hamdaoni G Kchouk M E Marzouk B 2010 Antioxidant activities of the essential o1ls and methanol extracts from myrtle Myrtus communis var italica leaf stem and flower Food Chem Toxicol 48 1362 1370 Wehmer C 1931 Die Planzehnstoffe Zweiter Band Wichtel M Anton R 1999 Plantes th rapeutique tradition pratique officinale science et th rapeutique Ed Tech Et Doc Willem J P 2002 Les h
50. ipe de I hydrodistillation est celui de la distillation des m langes binaires non miscibles Elle consiste immerger la biomasse v g tale dans un alambic rempli d eau que l on porte ensuite l bullition La vapeur d eau et l essence lib r e par le mat riel v g tal forment un m lange non miscible Les composants d un tel m lange se comportent comme si chacun tait tout seul la temp rature du m lange c est dire que la pression partielle de la vapeur d un composant est gale la pression de vapeur du corps pur Cette m thode est simple dans son principe et ne n cessite pas un appareillage co teux Cependant cause de l eau de l acidit de la temp rature du milieu il peut se produire des r actions d hydrolyse de r arrangement d oxydation d isom risation etc qui peuvent tr s sensiblement conduire une d naturation Brian 1995 6 1 3 La distillation vapeur satur e Dans cette variante la mati re v g tale n est pas en contact avec l eau La vapeur d eau est inject e au travers de la masse v g tale dispos e sur des plaques perfor es La distillation vapeur satur e est la m thode la plus utilis e l heure actuelle dans l industrie pour l obtention des huiles essentielles partir de plantes aromatiques ou m dicinales En g n ral elle est pratiqu e la pression atmosph rique ou son voisinage et 100 C temp rature d bullition d eau Son avantage est que les alt rations
51. it comme un transporteur transmembranaire des cations et des protons monovalents cet effet perturbe le gradient ionique et le fonctionnement membranaire des cellules microbiennes Figure 07 Ultee et al 2002 D autres m canismes d action sont li s la coagulation des constituants cellulaires par la d naturation des prot ines Gustafson et Bowen 1997 Les HES extraites de cannelle et de l ail peuvent inhiber l activit enzymatique des bact ries du rumen telle l esp ce nterobacter aerogenes D autres HES inhibent la croissance microbienne par l inactivation des acides nucl iques Calsamiglia et al 2007 L action des HES d pend aussi de la nature des microorganismes cibl s Les bact ries Gram positif sont plus sensibles a l action des HES par rapport aux bact ries a Gram n gatif Cela peut tre expliqu par la pr sence de la membrane externe chez les bact ries a Gram n gatif elle repr sente en effet une barri re capable de diminuer la perm abilit des compos s hydrophobes Calsamiglia et al 2007 Cependant les mol cules a faible poids mol culaire comme le thymol et le carvacrol peuvent traverser cette barri re Dorman et Deans 2000 Ultee et al 2002 membrane milieu intracellulaire cytoplasmique CH milieu extracellulaire CH Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemc
52. ivit antioxydante nettement sup rieure que celle de T capitalus et qui ont enregistr un taux d efficacit antioxydante de l ordre de 82 7 4 7 pour une concentration de l ordre de 0 5mg ml La m me concentration a t faite en comparant l efficacit antioxydante des huiles essentielles de notre tude avec celles obtenues par Tepe et al 2005 en tudiant l sipyleus et avec des ICso de l ordre de 0 22 mg ml pour Z sipyleus subsp Sipyleus var rosulans et 2 67 mg ml pour 7 sipyleus subsp Sipyleus De m me dans une tude faite sur les huiles essentielles de 7 spathulifolius Sokmen et al 2004 ont trouv une IC de l ordre de 0 243 mg ml 3 2 Inhibition de la peroxydation lipidique par la m thode des TBARS La figure 10 nous donne une id e sur importante efficacit des huiles essentielles des diff rentes stations tudi es inhiber le peroxyde lipidique d tect par la m thode TBARS avec des IC50 de l ordre de 0 0296 mg ml et 0 0225mg ml respectivement pour les fleurs et feuilles pour la station de Terni 0 0378 et 0 0551 mg ml pour la station de Ouzidane et de 0 0361 et 0 0918mg ml pour la station de Beni Snous Dans une tude r alis e par Dandlen et al 2010 l activit antioxydante valu e par la m thode TBARS a galement montr une tr s bonne capacit antioxydante tell que 7 zygis subsp sylvestris avec ICso 0 066 0 087 mg ml Ces r sultats montrent que l huile essentielle de Thymu
53. l of Food Microbiology 94 223 253 Caillet S Larcroix M 2007 les huiles essentielles leurs propri t s antimicrobiennes et leurs application potentielles en alimentaire Laboratoire de Recherche en Science Appliqu es l Alimantation RESALA INRS Institus Armand Frappier 8p Calsamiglia S Busquet M Cardozo P W Castillejos L Ferret A 2007 Invited review Essential oils as modifiers of rumen microbial fermentation Journal of Dairy Science 90 2580 2595 Campion P 1 Parra J 2006 FILE IE fiches2d fiches2d php Carr P 1953 pr cis de technologie et de chimie industrielle Tome 3 Ed Balli re J B et fils France Paris In Bekhchi C 2002 analyse d huile essentielle d Ammoides verticillata nunkha de la r gion de Tlemcen et tude de son pouvoir antimicrobien Th se de magister Universit de Tlemcen Reference bibliographique Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammotdes verticillata de la r gion de Tlemcen Carson C F Mee B J Riley T V 2002 Mechanism of action of Melaleuca alternifolia tea tree oil on Staphylococcus aureus determined by time kill lysis leakage and salt tolerance assays and electron microscopy Antimicrobial Agents Chemotherapy 46 1914 1920 Castro L Freeman B A 2001 Reactive oxygen species in human health and disease Nutrition 170 161 165 Chakou M et Bassou K 2007 Effica
54. laire Noukha Nunkha et Nanoukha Merad 1973 Sijelmassi 1991 Trabut 1935 Mais elle est surtout connue dans le monde sous le nom suivant En fran ais Ajowan wehmer 1931 AFNOR En areb Taleb El Koubs Narayana et al 1967 _ Noms scientifiques Ammoides ou Ptychotis verticillata Desf Brique Quezel et Santa 1963 Trachyspermum ammi L Sprague Syn Carum copticum L Benth et Hook Wehmer 1931 Quezel et Santa 1963 Naryana et al 1967 Grosjean 2004 Trachyspermum copticum Schirner 2004 La d nomeration usuel de plante est Ajowan et la d signation botanique usuelle en France est Crum copticum Benth Et Hook ptychotis ajowan D C ou bien Trachyspermum copticum Link AFNOR 1992 L Afrique du nord offre des possibilit s de croissance a cette plante grace a son climat et la nature de son sol Malgr cela cette plante est en voie de disparation 2 Description botanique de la plante a Caract res botaniques Ammoides verticillata est une plante gr le tige ramifi e elle peut attiendre 39 cm les feuilles inferieures possedent de nombreux segments multifides verticill s et les post rieures sont p natifides a segments lin ares L inflorescence de cette plante est ombelliforme a fleurs de couleur blanche Merad 1973 Elle appartient a la grande famille des ombellif res qui est la plus volution cycle dynamique tardif Elle app
55. le camphene a pinene and p cymene taient les compos s majoritaires de ces plantes Par contre les plantes dont les compos s majoritaires taient le thymol et la carvacrol ne poss dait pas une forte activit et que ces compos s ph noliques ne poss dent pas une habilit d terminante pi ger le radical hydroxyle Dans une autre tude faite par Singh et al 2010 ont constat que les huiles essentielles des feuilles d Ageratum scoparia Waldst amp Kit Ont exerc une forte activit de pi geage du radical hydroxyle Compar aux huiles essentielles les compos s majoritaires f myrcene et p cymene ont exerc s une faible activit Dans un autre contexte les feuilles matures ont exer une forte activit compar aux jeunes feuilles L activit des huiles essentielles pi ger le radicale hydroxyle est dose d pendante Jia et al 2010 R sultats et discussion Page 52 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Mastr A PV Conclusion Cette tude se voulait une contribution la connaissance de quelques actmit s antioxydantes des huiles essentielles de la plante Ammoides verticillata qui appartient la famille des Apiac es L obtention de l huile essentielle par hydrodistillation reste une m thode simpk et efficace et donne un rendement int ressant Le calcule de rendement moyen en mile essentiel
56. le de notre plante nous a r v l une valeur importante comprises entre 1 et 2 6 pour les feuilles et de 2 3 6 pour les fleurs L activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides verticillata a t galement tudi e par cinq tests le premier du radical libre DPPH I ABTS le TBARS le powoir r ducteur et enfin l activit ch latante D apr s les r sultats du test effectu par le DPPH nous avons constat qu la plus grande concentration utilis e qui est de 1 405 mg ml nous avons obtenu un pourcentage d inhibition de 96 45 et la plus grande concentration 0 035mg ml pour l ABTS donne un pourcentage d inhibition gale 92 058 et encore la plus grande concentration de l ordre de 0 3167mg ml pour le TBARS donne un pourcentage d inhibition gale 93 65 la plus grande efficacit de ces huiles a t remarqu sur la r duction du Fer avec des absorbances remarquables L tude de l activit ch latante des huiles essentielles d Ammoides verticillata a r v l une non efficacit ch latante Ft enfin on conclut que cette esp ce v g tale n a pas fait l objet de beaucoup d tudes pour cette raison il sera int ressant de se focaliser sur l tude de la variabilit de la composition chimique en tenant compte de l ge de la plante de la p riode et du lieu de r colte etc Ceci va permettre d observer les diff rents changements sur les plans qualitatifs et quantitatifs
57. les essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Beldjord A 2014 valuation de l acuvit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V poss dent galement des propri t s cytotoxiques qui les rapprochent donc des antiseptiques et d sinfectants entant qu agents antimicrobiens large spectre Hammoudi 2008 Ferhat et al 2009 3 1 Antibact rienne Les ph nols carvacrol thymol poss dent le coefficient antibact rien le plus lev suivi des monoterp nols g raniol menthol terpin ol ald hydes n ral g ranial etc Benayad 2008 3 2 Antivirale Les virus donnent lieu des pathologies tr s vari es dont certaines posent des probl mes non r solubles aujourd hui les HE constituent une aubaine pour traiter ces fl aux infectieux les virus sont tr s sensibles aux mol cules aromatiques Benayad 2008 3 3 Antifongique Les mycoses sont d une actualit criante car les antibiotiques prescrits de mani re abusive favorisent leur extension avec les HE on utilisera les m mes groupes que ceux cit s plus haut on ajoutera les sesquiterp niques et les lactones sesquiterp niques Par ailleurs les mycoses ne se d veloppent pas sur un terrain acide Ainsi 1l faut chercher alcaliniser le terrain Benayad 2008 3 4 Antiparasitaire Le groupe des ph nols poss de une action puissante c
58. les volailles les charcuteries et les l gumes H E de menthe pour les produits frais salades yaourts les H E base de cavarcrol ou de citral pour les poissons les H E de thym de noix de muscade ou de gingembre pour les c r ales plus particuli rement celles riches en carvacrol pour le riz et les H E base de carvacrol ou de cinnamald hyde pour les fruits Caillet et Lacroix 2007 Les H E sont aussi utilis es pour apporter de la saveur et un ar me raffin au caf au th aux vins et aux liqueurs distill es Caillet et Lacroix 2007 Les tudes de Caillet et Lacroix 2007 ont montr que l incorporation d H E dans la viande hach e du boeuf a contribu au maintien de la qualit microbiologique et la r duction de l oxydation des gras au del de sa dur e normale d entreposage Ils ont aussi d montr que l utilisation des H E pouvait augmenter la sensibilit des bact ries diff rents proc d s de conservation des aliments chauffage pasteurisation atmosph re modifi e Selon la bact rie et le proc d utilis la Etude bibliographiques Lt ae mi a Page 22 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V sensibilisation augmente de 2 10 fois Par exemple l HE m lang e a des carottes hach es emball es sous air ou sous atmosph re modifi e AM ou MAP Modified
59. lia an dits volatile oil J Fac Pharm Istanbul 22 73 76 Bemard T Perineau F Bravo P Delmas M Et Gaset A Oct 1988 Informations chimie n 298 179 Benayad N 2008 Les huiles essentielles extraites des plantes m dicinales marocaines moyen efficace de lutte contre les ravageurs des denr es alimentaires stock es Projet de recherche Universit Mohammed V Agdal Laboratoire des Substances Naturelles et Thermolyse Eclair D partement de Chimie Facult des Sciences de Rabat P 61 Benchaar C Calsamiglia S Chaves A V Fraser G R Colombatto D McAllister T A 2008 Plant derived essential oils in ruminant nutrition and production Animal Feed Science and Technology 145 209 228 Bendahou M 2007 Composition chimiques et propri t s biologiques des extraits de quelques plantes aromatiques et m dicinales de l Ouest Alg rien Th se de Doctorat d Etat option Biochimie universit Abou Bakr Belka d Bezanger Beauquesne et al 1975 Les plantes dans la th rapeutique moderne Maloine S A diteur Reference bibliographique Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Blayn J F 1980 Parfums Cosm tique Ar mes N 117 Boubrit S et Boussad N 2007 Determination in vitro du pouvoir antibacterien des huiles essentielles d eucalyptus myrte clous de girofle et sarriette et l
60. lles Terni Feuilles Ouzidane Fleurs tt Ouzidane Feuilles Ben Snous Fleurs Pourcentage d inhibition Beni Snous Feuilles A A U Figure 13 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides certicillata par la gY O CD m thode de pi geage du radical hydroxyle L habilit des huiles essentielles de Thymus marschallianus et Thymus proximus pi ger le radical hydroxyle a t valuer par Jia et al 2010 en utilisant la m thode de safranine Ces auteurs ont report que la premi re huile essentielle a t plus efficace que la deuxi me dans le pi geage du radicale hydroxyle et que ces huiles essentielles taient compos s principalement par thymol p cymene and y terpinene R sultats et discussion a Pages Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V Dans une autre tude faite par Dandlen et al 2010 sur diff rentes esp ces de Thymus collect e dans diff rentes r gions du Portugal les huiles essentielles de Thymus camphoratus Hoffmanns amp Link Thymus caespititius Brot and Thymus capitellatus Hoffmanns amp Link des diff rentes r gions poss dent une grande habilit pi ger le radical hydroxyle par rapport aux autres esp ces collect es Ces auteurs ont constat que le Borneol camphor a terpineol 1 8 cineo
61. mcen Metha R L Zayas J F 1995 Antioxidative effect of Ajowan in a model system Department of foods and nutrition Justin Hall Manhattan Miguel M G 2010 Antioxidant and Anti Inflammatory Activities of Essential Oils A Short Review Molecules 15 9252 9287 Narayana C et al 1967 Recovery of fatty oil from spent seeds of Ajowan trachyspermum ammi Linn Oil technological research Institute Anatapur Oyaizu M 1986 Studies on products of the browning reaction prepared from glucose amine Japanese Journal of Nutrition 44 6 307 315 Ozkan G Baydar H Erbas S 2010 The influence of harvest time on essential oil composition phenolic constituents and antioxidant properties of Turkish oregano Origanum onites L J Sci Food Agr 90 205 209 Ozturk M 2012 Anticholinesterase and antioxidant activities of Savoury Satureja thymbra L with identified major terpenes of the essential oil Hood Chemistry 134 48 54 P Quezel and S Santa 1963 Nouvelle flore d Alg rie et des r gions d sertiques m ridionales Tome II CNRS Ed Paris Pibiri M C 2006 Assainissement microbiologique de l air et des syst mes de ventilation au moyen d huiles essentielles Th se doctorat Ecole polytechnique f d rale de lausanne 161p Reference bibliographique Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tl
62. mettre les feuilles cuites sur une serviette et les craser pour en supprimer le suc Laisser refroidir le cataplasme puis l appliquer sur la partie atteinte Faire bouillir pendant 20 minutes dans un litre d eau des racines d Ammo des s ch es au soleil Filtrer la d coction la sucrer avec un peu de miel et la boire en trois fois au cours de la journ e Mettre dans un litre d eau bouillante des racines d Ammo des Filtrer quand l infusion est devenue ti de sucrer avec un peu de miel Consommer le tout dans la Journ e Page 8 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V CHAPITR II Les plantes m dicinales 1 Introduction Les plantes m dicinales portent la fois sur les plantes spontan es dites sauvage ou de cueillette et sur les plantes cultiv es a Les plantes spontan es Ce sont des plantes difficiles ou impossible de les cultiver Elles repr sentent encore d apr s certaines firmes importatrices 60a 70 DES DROUGES Europ en Quant la valeur m dicinale des plantes spontan es elle se montre tr s in gale puis qu elle varie suivant l origine le terrain et les conditions de croissance b Les plantes cultiv es La culture des plantes vite ces inconv nients Elle assure une mati re premi re En quantit suffisante homog ne au double point de vue aspect et composition chimi
63. mol cule stable DPPH ceci provoque une diminution de la concentration du radical libre et galement R sultats et discussion Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master P V Page 44 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V l absorbance au cours du temps de r action jusqu l puisement de la capacit d antioxydant donneur d hydrog ne Masuda et al 1999 Villano et al 2007 Le DPPH pr sente une coloration violette sombre mais lorsqu il est pi g par des substances antioxydantes sa couleur vire vers le jaune p le le virage vers cette coloration et l intensit de cette coloration d pend de la nature la concentration et la puissance de la substance anti radicalaire Rolland 2004 L utilisation du radical par le DPPH a le m me m canisme que celui des antioxydants des aliments Bounatirou et al 2007 Le radical DPPH a t fortement inhib par les huiles essentielles les diff rentes parties des plantes des diff rentes stations tudi es Figure 09 cette bonne activit s est manifest par des concentration inhibitrices de 50 des radicaux libre IC50 de l ordre de 0 1316 et 0 1541mg ml pour les feuilles des stations Terni et Ouzidane et avec une activit plus pouss pour l
64. n n est poison tout est poison tout d pend de la dose Il faut galement savoir qu une p riode trop prolong e provoque l inversion des effets et ou l apparition d effets secondaires ind sirables 13 L aromath rapie L aromath rapie qui signifie litt ralement soin par les odeurs est le terme que l on utilise pour d signer la th rapie bas e sur l utilisation des huiles essentielles Il s agit donc de la capacit et de l art de soigner avec les huiles essentielles Buronzo 2008 L aromath rapie est l utilisation des huiles essentielles des fins th rapeutique C est une biochimio th rapie naturelle sophistiqu e qui repose sur la relation existant entre les composants chimiques des huiles essentielles et les activit s th rapeutiques qui en d coulent Elle recourt une m thodologie rigoureuse qui s inspire de donn es scientifiques solides confirm es tant par la clinique que par le laboratoire C est une th rapeutique naturelle de qualit sup rieure Baudoux 2008 me mo atraem TTT 14 Contr le de qualit des huiles essentielles Selon la pharmacop e fran aise et europ enne le contr le des huiles essentielles s effectue par diff rents essais comme la miscibilit l thanol et certaines mesures physiques indice de r fraction pouvoir rotatoire et densit relative La couleur et l odeur sont aussi des param tres importants La meilleure ca
65. n superoxyde et le peroxyde d hydrog ne en pr sence des ions m talliques comme le fer et le cuivre suivant la r action de Haber Weiss Castro et Freeman 2001 Ce radical poss de un lectron libre avec un potentiel de r duction plus lev 2310 mV lui permet de r agir avec les lipides les prot ines les polypeptides et l ADN particuli rement la thiamine et la guanine Siddhuraju et Becker 2007 In vitro la capacit pi ger le radical hydroxyle par les extraits des plantes est bas e sur la r action de Fenton en mesurant la g n ration du radical OH et son effet sur l oxydation et la d gradation des mol cules biologiques tels que le d soxyribose de ADN Dans cette technique le syst me implique l auto Oxydation du complexe Fe2 EDTA dans un milieu aqueux pour former O2 qui est rapidement dismut en H202 pH 7 4 Apr s ce dernier est interagit avec Fe2 pour former les radicaux OH en pr sence de l acide ascorbique comme catalyseur r action de Fenton H202 Fe2 EDTA OH OH Fe3 EDTA La d gradation du d soxyribose par OH d gage certains produits estim s en malonald hyde MDA d un chromog ne rose lors du chauffage avec l acide thiobarbiturique et dans un milieu acide La pr sence des anti radicaux prot ge et diminue la production des MDA Halliwell et al 1987 Notant que le r le d ascorbate est la r duction du Fe3 en Fe2 et cela provoque la r action de Fenton Fe3 EDTA ascorba
66. oils Cannes pp 118 123 Le K Chiu F and Ng K 2007 Identification and quantification of antioxidants in Fructus lycii Food Chemistry 105 353 363 Leclercq R 2002 R sistance des staphylocoques aux antibiotiques Annales frangaises d anesth sie et de r animation 21 5 375 383 ea eee Reference bibliographique Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen Lopes GK Schulman HM Hermes Lima M 1999 Polyphenol tannic acid inhibits hydroxyl radical formation from Fenton reaction by complexing ferrous ions Biochimica et Biophysica Acta 1472 142 152 Luque de Castro M D Jimenez Carmona M M Et Ferandez Perez V 1999 Trends in analytical chemistry vol 18 n TL 708 et references citees M Burits amp F Bucar 2000 Antioxidant activity of Nigella sativa essential oil Phytotheraphy Research 14 323 328 Masuda T Yonemori S Oyama Y Takeda Y Tanaka T Andoh T 1999 Evaluation of the antioxidant activity of environmental plants Activity of the leaf extracts from seashore plants Journal of Agriculture and Food Chemistry 47 4 1749 1754 Merad R 1973 Contribution l tude qualitative et quantitative de l huile essentielle d Ammoides verticillata Nounkha de la r gion de Tlemcen et de son pouvoir antimicrobien M moire d Ing riorat Institut de Biologie Universit de Tle
67. oire une Maladies broncho tasse du m lange filtr avant de se coucher pulmonaires Plante enti re Fi vre typho de D coction ou infusion Antipyr tique D puratif Antispasmodique Affections r nales R gulateur dermique D coction Asthme M langer la plante lav e s ch e et broy e avec du miel Douleurs Prendre 1 cuiller e 2 par jour gastriques Parasites intestinaux C phal e Migraine D coction ou infusion avec un citron Boire une tasse le soir avant de se coucher Mettre la plante dans de l eau bouillante laisser infuser ensuite m langer avec du henn et mettre sur les endroits atteintes sinus osseux de la face Etude bibliographiques o a Page 7 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master APV rafraichissant Feuilles Condiment culinaire Irritations dermiques Abc s furoncle Racines Diarrh e Diur tique Etude bibliographiques refroidir puis mettre au r frig rateur boire comme une boisson rafraichissante Ajouter les feuilles broy es dans des soupes chorba soupe d escargot Conserve plus longtemps les aliments et emp che la formation de moisissures exemple les olives Faire bouillir dans tr s peu d eau une poign e de feuilles fra ches d Ammo des Lorsque le liquide est presque compl tement vapor
68. ontre les parasites Benayad 2008 3 5 Antiseptique Les ald hydes et les terp nes sont r put s pour leurs propri t s d sinfectantes et antiseptiques et s opposent la prolif ration des germes pathog nes Benayad 2008 4 Propri t s physique Malgr leurs diff rences de constitution les huiles essentielles poss dent un certain nombre de propri t s physiques communes Elles sont g n ralement sous forme liquides temp rature ambiante et leur grande volatilit les oppose aux huiles fixes lipides Lorsqu elles viennent d tre pr par es leurs teintes est g n ralement comprise dans une gamme allant de l incolore jaune p le Il existe toutefois quelques exceptions comme l huile essentielle de camomille romaine Anthemis nobilis qui poss de une coloration bleu clair due la pr sence du chamazul ne Faye et al 1997 Etude bibliographiques Ter Page14 Beldjord A 2014 valuation de l acuvit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verucillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Leur densit est le plus souvent inf rieure l unit Seules 3 huiles essentielles officinales ont une densit sup rieure celle de l eau 1 s agit des huiles essentielles de cannelle de girofle et de sassafras Elles poss dent un indice de r fraction souvent lev et sont dou es de pouvoir rotatoire puisque constitu es pour l essentiel de mol cules asym triques Peu soluble
69. que Elle peut tre intensifi e ou non suivant les besoins m dicinaux Naturellement la culture doit s effectuer dans les meilleures conditions possibles et tenir compte entre autres des races chimiques Bazanger Beauquesne et al 1975 2 Le moment de r colte Le choix de la p riode de cueillette d pend du rythme naturel de la vie v g tale Ce moment optimal varie videmment selon les esp ces de plante mais il d pend aussi de la partie de la plante r colter En plus il est toujours pr f rable de proc der la r colte par un temps sec et chaud les plantes mouill es de pluie ou de ros e s alt rent moisissent fermentent et perdent de toute fa on toute valeur th rapeutique Le matin est le moment le plus favorable mais on peut toutefois cueillir aussi le soir avant la fraicheur Debuigue 1984 3 La proc dure de la cueillette Les conditions de culture de r colte de s chage et de stockage ont une action d terminante sur la qualit des drogues v g tales Ainsi il vaut mieux cueillir les plantes dans un lieu peu fr quent car les plantes destin es tre s ch es ne doivent en aucun cas tre lav es Donc elles doivent tre exemptes d impuret s telles que terre poussi res souillure ainsi que d infection ou de contamination animal Elles ne pr sentent aucun signe de pourriture ou d endommagement Wichtel Anton 1999 Etude bibliographiques Page 9 Beldjord A 2014
70. r gion de Tlemcen Pr sent par M Beldjord Amina Soutenu publiquement le 30 Octobre 2014 devant un jury compos de Mr ELHAITOUM A M C A Pr sident M TEFIANI C M A A Encadreur Mr GHEZLAOUI B E M C A Examinateur Mr BARKA MS M C B Examinateur Ann e Universitaire 2013 2014 Remerciements Avant tout je remercie Dieu le tout puissant le Mis ricordieux de m avoir donne le courage la force la sant et la persistance et de m avoir permis de finaliser se travail dans de meilleurs conditions Je tiens remercier mon promoteur Mr Tefiani Chokri Maitre assistante A l universit Abou Bekr Belkaid Tlemcen pour l honneur qu elle m a fait en dirigeant ce travail pour ses aides ses conseils tout au long de l laboration de ce modeste travail A Mr El Haitoum Ahmed Maitre assistant l universit Abou Bekr Belkaid Tlemcen j adresse mes remerciements les plus sinc res pour l honneur qu il me fait en acceptant de pr sider ce jury Je tiens remercier profond ment Mr Barka M S Maitre assistant B l universit Abou Bekr Belkaid Tlemcen d avoir accept d examiner ce travail et pour Mes plus vifs remerciements s adressent Mr Ghezlaoui Bahae Maitre de conf rences l universit Abou Bekr Belkaid Tlemcen de l honneur qu il me fait en acceptant d examiner ce m moire Enfin je remercie tous ceux qui de pr s ou de loin ont contribu la r alisation de ce travail D dicac
71. r Ahmed Brahmi et Haddam 1998 leur a permis d obtenir des rendements en huiles essentielles variable allant de 1 38 3 92 D autre part les rendements en huile essentielle de cette esp ce obtenus par Chiali et Elaihar 2000 sont compris entre 2 52 et 3 29 Ces r sultats sont tr s proches de nos r sultats R sultats et discussion Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP En outre les r sultats obtenus par Katzer 1998 sont sup rieurs que les notres car il avance que le rendement en huile essentielle des graines d Ammoides verticillata varie entre 2 5 et 5 Figure 08 rendement en huiles essentielles obtenus par les diff rents stations feuilles et fleures Dans une autre tude r alis e par Bekhechi 2002 le rendement moyen en huiles essentielle des chantillons d Ammo des verticillata ont donn un taux qui varie entre 2 7 et 5 3 D apr s El Ouariachi et al 2011 l extraction de l huile essentielle par hydrodistallation de la partie a rienne de 4 verticillata r colt es partir d Ahfir Maroc donne des rendements de 2 Par ailleurs le rendement en huile essentielle des grains d Ammoides verticillata plante cul
72. r CL Re CAS SSSR E EE EE O TEE NN AR Obtention des huiles essentielles eee aes LES DOS IE IS ee et ne pe ne Mir 1 1 1 Mode de purification de l huile essentielle d Ammo des 1 1 2 Le Principe de purification 1 2 Calcule du rendement en huile essentielle EACE ADO MAING aT un Ce eaten nn sn Lecce 2 1 Evaluation de l activit anti oxydante par la mesure du pouvoir de AUTO DFP ORNE OR RE Cep and das ients 2 2 Inhibition de la sise iii par la m thode des TBARS 2 3 Evaluation de l activit anti oxydante par la methode ABTS 7 Av OVO LOCO LOLITA ne sd S a OO IT LR ae tee Di re E lee DA Ga MIRO NNE cu oo A a or RD Oe cue Cai TT o a NET 37 PS2 P 33 F33 Fon P 33 P39 P 36 For PS Poy P 38 P 39 P39 P 40 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Chapitre V R sultat et discution l Propri t s organoleptiques des huiles essentielles extraites P42 de EIGEN CTU ONES CSSCRE ES Ses a et ou P42 ad OCIS OIE ARRO EE I A E OOA AA E P44 eE D AAO E s ta D a ae a us E E A E P44 ee AG AR Ss a a a A aa Le P46 o Laminoda de Ar 1S anA re P47 Oe POUVON T L anaa a DA Je LE DOUVOIE CHCIRICUL GU ei aa A a at P50 Be De A Precio co o d Th ei e hioa aa aa Ne
73. rodistillation Elle consiste puiser la mati re premi re de ses constituants odorants au moyen d un solvant puis chasser celui ci de l extrait par vaporation sous vide Il est existe deux cas particuliers les hydrolats extraction par solvant en pr sence d eau et les alcoolats extraction avec de l thanol dilu pour lesquels on r cup re les compos s odorants conjointement avec le solvant lors de la distillation pratiqu e pour liminer l eau pr sente dans les isolats Le choix du solvant d pend de nombreux param tres techniques et conomiques notamment e la s lectivit pouvoir solvant e la temp rature d bullition stabilit thermique des constituants e la miscibilit dans l eau e la facilit de recyclage la s curit de manipulation les solvants choisis seront dans la mesure du possible non toxiques tant pour le manipulateur que pour le consommateur Mueller et al 2004 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Les solvants les plus utilis s l heure actuelle sont surtout des hydrocarbures aliphatiques hexane ther de p trole des hydrocarbures aromatiques tolu ne des alcools ou des solvants carbonyl s et moins fr quemment des hydrocarbures halog n s dichlorom thane La m thode d extraction mise en uvre d pend aussi de la nature de la mati re prem
74. rte d identit quantitative qualitative d une huile essentielle reste cependant le profil chromatographie en phase gazeuse Il permet de conna tre tr s exactement la composition chimique et de rechercher d ventuelles traces de produits ind sirables tels des pesticides ou des produits chimiques ajout s Pibiri 2006 Une huile essentielle pure et naturelle est caract ris e par sa composition strictement v g tale contrairement aux essences synth tiques ou identiques naturelles int gralement reconstitu es partir de compos s chimiques de synth se Pibiri 2006 Etude bibliographiques Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen MATERIELS ET METHODES I Mat riels 1 Pr venance et r colte de mat riel v g tale Notre plante Ammoides verticillata provient de 4 stations diff rentes de la wilaya de Tlemcen Ternny Ouziden Beni snous Apr s la cueillette diff rentes p riodes partir 18 05 2014 jusqu a 22 06 2014 nos chantillons sont nettoy s tal s et s ch s pendent 36 semaines dans des conditions bien pr cises et respecte savoir v A labri de la lumi re v A Vabn de l humidit v A une T ambiante et dans un endroit bien a r Seul la part
75. s ICso inf rieurs 0 1 mg ml par contre le stade v g tatif donne une efficacit moindre avec des ICso sup rieures a 0 25 mg ml 3 3 Pi geage du radical ABTS Le radical ABTS pr form est g n r par l oxydation de la mol cule stable d ABTS avec le persulfate de potassium Re et al 1999 La m thode d ABTS pr sente une coloration bleue turquoise lorsqu il est pi g par des substances antioxydantes La forme r duite conf re la solution une coloration jaune le virage vers cette coloration et l intensit de la coloration de la couleur de la forme libre en solution d pend de la nature la concentration et la puissance de la substance anti radicalaire Miguel 2010 e e a e Er a e em er o ge L eo a R sultats et discussion Page 47 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V Se us ___ ____ 1 Les r sultats de l activit antioxydante par le pi geage du radicale ABTS montrent que les huiles essentielles d Ammoides verticillata poss dent une importante activit avec des concentrations d IC50 comprise entre 0 00472 mg ml et 0 00395mg ml pour les stations de Tirni et Ouzidane et de moins de 0 0022 mg ml pour la station de Beni Snous Terni Fleurs Terni Feuilles Ouzidane Fleurs
76. s ciliatus ssp eu ciliatus poss de une activit antioxydante mais elle est sensiblement moins efficace Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V 100 2 E 80 Terni Fleurs 60 Terni Feuilles T EA 5 40 Ouzidane Fleurs q oe 20 Ouzidane Feuilles Beni Snous Fleurs Beni Snous Feuilles 0 05 0 05 0 15 0 25 0 35 Concentrations mg ml Figure 10 l activit antioxydante des huiles essentielles d Ammoides certicillata par la m thode TBARS Hazzit et al 2009 ont enregistr une activit antioxydante similaire la notre en tudiant les huiles essentielles de 7 a geriensis de Chr a 800m d altitude ICso 0 1067 mg ml par contre la m me esp ce de a geriensis de Chr a mais r colt une altitude de 1500 m s est r v l non active Dans la m me tude Tpallescens r colt de plusieurs r gions sont d montr des efficacit s antioxydantes moins importantes compar es T ciliatus Dans l tude de Viuda Martos et al 2010 Thymus vulgaris d montr une forte activit antioxydante test par la m thode de TBARS avec une ICs de 0 090 mg ml Bounatiron et al 2007 ont aussi enregistr une bonne efficacit antioxydante des huiles essentielles de 7 capitalus en floraison et en poste floraison avec de
77. s dans l eau elles lui communiquent cependant leurs odeurs eaux distill es aromatiques Elles sont solubles dans les alcools et dans la plupart des solvants organiques Elles sont tr s facilement alt rables et sensibles l oxydation mais ne rancissent pas Le caract re odorant des huiles essentielles est li la volatilit des mol cules qui les composent ce qui permet de les obtenir par entra nement la vapeur d eau Faye et al 1997 Tableau 03 Constantes physicochimiques de quelques constituants volatils Rivera 2006 Masse Molaire Volume molaire sis compos s ambi Densit Le dt a pinene 136 0 8580 158 51 136 0 8650 15723 limonene 136 0 8450 160 95 Ac tate de g ranyle 196 0 9174 213 65 B selin ne 204 0 9140 223 19 0 9624 230 67 Carotol 5 Chimie des huiles essentielles Les huiles essentielles repr sentent un m lange complexe de mol cules chimiques qui peuvent comporter plus de soixante composants diff rents parmi lesquels deux ou trois sont des composants majeurs constituant de 20 70 du m lange comparativement aux autres qui se trouvent le plus souvent sous forme de traces A titre d exemple le carvacrol et le thymol sont les composants majeurs de l huile d Origanum compactum le linalol pour l huile de Coriandrum sativum le menthol et le menthone pour l huile de Mentha piperita G n ralement ces composants majeurs d terminent les propri t s biologiques de
78. t d une mani re empirique comme agents th rapeutiques des plus pratiques contre diff rents maux suscitent de plus en plus L int r t des scientifiques Elles font l objet d tude active dans le monde pour leur emploi possible pour la pr servation des aliments contre l oxydation et comme rem des contre les infections La famille des Apiaceae est l une des familles les plus riches en huile essentielle Elle comprend des l gumes carotte celeri fenouil des condiments carvi coriandre cumin persil Kambouche N 2000 L Alg rie par sa situation g ographique offre une v g tation riche et diverse Un grand nombre de plantes aromatiques et m dicinales y poussent spontan ment L int r t port e a ces plantes n a pas cess de croitre au cours de ces derni res ann es Leurs propri t dues notamment la fraction d huile essentielle peuvent tre mises profite pour traiter les infections mycosiques Introduction Page 1 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V Chapitre I La plante tudi e Ammoides verticillata 1 Pr sentation de la plante L Ammoides verticillata appartient la famille des Apiac e C est une famille tr s abondante et qui comprend plus de 3000 esp ces avec 55 genres repr sent s en Alg rie Le genre Ammoides comprend deux especes e Ammoides verticillat
79. tant donn la multiplicit des composants constituant les principes actifs de chaque plante et la sp cificit d action de chaque d entre eux il a t n cessaire d laborer des m thodologies diverses qui permettent selon le but recherch leur extraction Chiej 1982 Ces manipulations sont au nombre de quatre la d coction la mac ration l infusion et extraction des sucs Etude bibliographiques Page 11 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Chapitre HI Les huiles essentielles D finition Les huiles essentielles HE ou essences vegetales sont des substances odorantes volatiles contenues dans les vegetaux superieurs Ce sont des produits huileux de nature hydrophobe extraits du materiel vegetal soit par distillation a la vapeur d eau soit par expression Valnet 1 1984 enfleurage ou incision Elles se differencient des huiles grasses par leurs proprietes physiques et leur composition du fait qu elles se volatilisent a la chaleur et que leurs taches sur le papier sont passageres Salle 1 L 1991 Campion P 1 Parra J 2006 Les huiles essentielles sont largement repandues dans le monde vegetal Elles se trouvent en quantite appr ciable chez environ 2000 especes reparties en 60 familles botaniques comme par exemple chez les Composees armoise les Myrtacees eucalyptus
80. te Fe2 EDTA ascorbate oxyd La m thode de d soxyribose adopt e dans cette tude est celle de Halliwell et al 1987 Le m lange r actionnel contient les r actifs suivants 0 4 ml de la solution tampon phosphate 50 mmol pH 7 4 0 1 ml de l extrait diff rentes concentrations 0 1 ml de l EDTA 1 04 mmol l 0 1 ml de FeC13 1 mmol l et 0 1 ml de 2 d soxyribose 60 mmol l La r action est commenc e par l addition de 0 1 ml de l acide ascorbique 2 mmol l et 0 1 ml de H202 10 mmol l Apr s l incubation 37 C pendant 1 heure ml de l acide thiobarbutirique TBA 10 g l est ajout dans le milieu r actionnel suivi par ml de l acide chlorhydrique HCI 25 Les m langes sont plac s au bain marie a 100 C pendant 15 min et puis sont refroidit avec de l eau L absorbance des solutions est mesur e 532 nm avec le spectrophotom tre contre le blanc La capacit du pi geage du radical hydroxyle est valu e avec le pourcentage d inhibition de l oxydation de Mat riels et m thodes Page 40 Beldjord A 2014 tude de l effet antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata de la r gion de Tlemcen 2 d soxyribose par les radicaux hydroxyles Le pourcentage du pi geage est calcul en basant sur la formule suivante Pourcentag due pi geage o Ap A A2 100 Ao O Ao repr sente l absorbance du contr le sans extrait A repr sente l absorbance apr s l
81. tend prouver que cette activit serait due plusieurs m canismes d action diff rents li s la nature chimique de ces compos s Skandamis et al 2001 Carson et al 2002 Burt 2004 La plupart des m canismes d action sont attribu s l interaction des composants des HES avec la membrane cellulaire Benchaar et al 2008 Les HES sont constitu es de mol cules lipophiles capables de p n trer la double couche phospholipidique leur accumulation entre les phospholipides entraine alors un changement de conformation et un mauvais fonctionnement de la membrane cellulaire perturbant ainsi le transport membranaires des substances nutritives Sikkema et al 1994 Ultee et al 1999 Les HES peuvent aussi perturber le gradient ionique de part et d autre de la membrane cytoplasmique ce qui diminue la stabilit membranaire et perturbe aussi le transport membranaire Mais certaines bact ries sont capables de contrebalancer cet effet par l utilisation de la pompe ionique dans ce cas la croissance ralentit gr ce l puisement de l nergie de la pompe Cox Etude bibliographiques ed ai os Page 25 Beldjord A 2014 valuation de l acuvit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master AP V et al 2001 Griffin et al 1999 Ultee et al 1999 Un m canisme d action propos implique le groupement hydroxyle des ph nols comme le carvacrol qui agira
82. tiv e en Inde obtenue par hydrodistillation varie entre 4 et 6 Guenther 1950 Narayanan et al 1966 Ces observations nous permettent de supposer que les diff rences des teneurs en huiles essentielles d Ammoides verticillata sont troitement li es aux conditions culturales tant climatiques dispersion g ographique altitude nature du sol Desjobert et al 1997 R sultats et discussion V Page 43 e SS O i ee avancent que l tude compl te des huiles essentielles doit passer par la prise en compte des facteurs daphiques et pour l obtention d un meilleur rendement 1l est n cessaire de 4 Choisir un tage bioclimatique semi aride temp r doux v Le sol doit tre limoneux argileux sableux texture quilibr e ou argilo siliceux 4 Faire extraction des huiles essentielles par la m thode d hydrodistillation 3 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides verticillata L activit antioxydant peut tre due diff rent m canisme dont parmi la pr vention de l initiation de l alt ration des chaines la d composition des peroxydes l abstraction continuelle d hydrog ne capacit r ductrice Bounatirou et al 2007 La capacit antioxydante de mol cules peut tre valu e soit in vivo sur des organismes vivants soit in vitro en utilisant des tests qui miment le ph nom
83. uiles essentielles M decine d Avenir Editions du Dauphin Paris Zhao H Dong J Lu J Chen J Li Y Shan L 2006 Effect of extraction solvent mixtures on antioxidant activity evaluation and their extraction capacity and selectivity for free phenolic compounds in barley Hordeum vulgare L Journal of Agricultural and Food Chemistry 54 19 7277 7286 Reference bibliographique
84. ur l extraction de l huile essentielle d Ammo des Ou Ptychotis verticillata est un extracteur semi industriel par l entra nement la vapeur d eau Ce montage est constitu d un ballon m tallique contenant 5 litres d eau plac au dessus d une source de chaleur et surmont d une enceinte galement m tallique contenant le mat riel v g tal coup en petits morceaux et plac sur une grille recouverte d une compresse Cette enceinte est elle m me reli e des r frig rants Banquour 1984 qui condensent les vapeurs d eau que l on recueille sous forme de distill t dans une fiole d canter photo 3 Apr s plusieurs essais d extraction nous avons opt pour une dur e d extraction de 3 heures 1 1 1 Mode de purification de l huile essentielle d Ammoides verticillata Le distill t r cup r va tre purifi limination de toute trace d eau Pour cela on utilise un appareil appel trompe vide constitu d un entonnoir en verre fritte d un erlenmeyer et d un aspirateur Le distill t est vers dans l entonnoir pr alablement lav avec de l ac tone contenant le Na So qui a la capacit d absorber toute trace de mol cules d eau Pour viter toute d gradation de l huile due l action de l air et de la lumi re notre chantillon est gard au nos des tubes r frig rateur 4 c dans des tubes ferm s et envelopp s de papier Mat riels et m thodes Beldjord A 2014 tud
85. valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master A P V Se Quim se da 4 Le s chage des plantes L op ration de s chage a pour but d enlever aux plantes l eau qu elles renferment pour assurer une bonne conservation afin de favoriser l inhibition de toute activit enzymatique viter la d gradation de certains constituants ainsi que la prolif ration bact rienne Wichtel Anton 1999 L id al serait de faire s cher les plantes l endroit vaste et bien ventil Dbuigue 1984 Figure 03 s chage d Ammoides verticillata originale 5 LA conservation et stockage Il est pr f rable d imposer une protection vis vis de la lumi re toutes les plantes car les feuilles fleurs la luminosit peut acc l rer de nombreux processus chimiques et entra ner une d gradation ou une modification des constituants pr sentes La temp rature constitue un autre param tre important et il est admis qu une l vation de temp rature de 10 C double la vitesse de d gradation Donc il est pr f rable de stocker les plantes dans un endroit b n ficiant d une temp rature et d une humidit relative constantes Wichtel M Anton R 1999 Etude bibliographiques Page 10 Beldjord A 2014 valuation de l activit antioxydant des huiles essentielles d Ammoides Verticillata de la r gion de Tlemcen Master

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