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1. 2 1 5 REALISATION DU TEST DE CEPHALINE AVEC ACTIVATEUR PAR LA METHODE CHRONOMETRIQUE 2 1 5 1 MATERIEL 2 1 5 2 METHODE 2 1 6 TRAITEMENT DES RESULTATS 2 1 6 1 REPETABILITE 2 1 6 1 REPRODUCTIBILITE 2 2 RESULTATS OBTENUS 2 2 1 REPETABILITE 2 2 2 REPRODUCTIBILITE 2 2 3 COMPARAISON DES RESULTATS OBTENUS PAR LES DEUX METHODES 29 2 2 3 1 VALEURS OBTENUES CHEZ LES CHIENS SAINS 29 2 2 3 2 RESULTATS POUR LE TEMPS DE QUICK 30 2 2 3 3 RESULTATS POUR LE TEMPS DE CEPHALINE ACTIV ATEUR 32 CHAPITRE ee 34 3 DISCUSSION et 34 PRECISION DE LA 34 POUR LE TEMPS DE QUICK 34 R p tabilit 34 Reproductibilit 35 POUR LE TEMPS DE CEPHALINE ACTIVATEUR 35 R p tabilit 35 Reproductibilit
2. 35 COMMENTAIRE 35 COMPARAISON DES 5 35 ASPECTS PRATIQUES 37 CONCLUSION Deed 38 ANNEXES 39 44 TABLE DES ILLUSTRATIONS TABLEAUX Tableau 1 Les facteurs de la coagulation plasmatique 3 9 10 9 Tableau 2 Modifications des tests au cours des principaux troubles de l h mostase du chien et du chat UE Qe ani dense Fere 21 Tableau 3 affections rencontr es dans l chantillon des chiens malades 23 Tableau 4 R p tabilit pour le temps de Quick au SCA 2000 27 Tableau 5 R p tabilit pour le temps de C phaline Activateur au SCA 2000 28 Tableau 6 Appr ciation de la reproductibilit par calcul des coefficients de variation nantes 28 Tableau 7 Valeurs pour les diff rents tests et par les deux types de m thodes pour les 31 Chiens Sains LR 30 Tableau 8 R partition des r sultats obtenus pour le temps de Quick pour les 68 chiens mala ES to E oma tu
3. anticoaguiants cireulants 68 affections rencontr es dans P chantillon des 23 chiens malades 2 1 2 2 CONSERVATION Le pr l vement sur citrate permet de diff rer la r alisation des tests mais on consid re que pass 2 heures apr s le pr l vement les r sultats obtenus sont alt r s Certains des tests ont t r alis s partir d chantillons de plasma congel remis temp rature avant la r alisation de ces tests ceci dans le but de grouper les manipulations Cette m thode courante d entreposage n alt re de toute fa on en rien l valuation de la fonction h mostatique 1 2 1 3 REALISATION DES TESTS AVEC LE SCA2000 2 1 3 1 MATERIEL On dispose d un automate SCA2000 et des cartouches correspondant aux tests pratiquer d nomination APTT citrat et TP citrat Ces cartouches usage unique contiennent sous forme d shydrat e les r actifs n cessaires 1 r alisation du test Ainsi la cartouche pour temps de Quick est pourvue d une chambre test contenant une pr paration d shydrat e de thromboplastine de sels de calcium et d agents stabilisants La cartouche pour temps de C phaline Activateur est elle pourvue d une pr paration d shydrat e de kaolin de phospholipides de sels de calcium et d agents stabilisants 2 1 3 2 PRINCIPE DE FONCTIONNEMENT Le m canisme de d tection du caillot est bas sur un syst me optique qui va mesurer la vit
4. N 8 Ro FO Sd Siga 29 2 S 195 105193191 E 2 3 4 5 6 22 _ 8 9 10 KH 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 6415 6414 64 15 15 61 14 63 13 13 __ 59 13 13 63 4 D dv ad 58 13 58 13 13 59 12 8 Si 12 1 58 144 61 15 4 5 15 4 4 Annexe 1 Temps obtenus pour l chantillon des chiens sains en secondes 40 CN chronom trique SCA2000 TCA chronom trique TCA SCA2000 41 Annexe 2 Temps obtenus pour l chantillon des chiens malades en secondes 42 Quand l appareil indique add sample Ins rer la cartouche ajouter une goutte de sang L instrument se met dans la capsule plac e au centre automatiquement de la cartouche en fonction Appuyer sur start Lire le r sultat Annexe 3 mode d emploi du SCA 2000 43 BIBLIOGRAPHIE 1 BATEMAN S W MATHEWS K A ABRAMS OGG A C G LUMSDEN J H JOHNSTONE I B Evaluation of the effect of storage at 70 C for six months on hemostatic function testing in dogs Can J Vet Res 1999 63 216 220 2 BROOKS M Coagulopathies and thrombosis In ETTINGER S J amp FELMAN E C Textbook of Internal Veterinary Medecine 5ed WB Saunders Company Philadelphia 1999 1829 1841 3 CLOET CHABRE 1 partie Physiologie de l h mostase primaire la coagulation pl
5. 23 TARADACH M C Exploration de la coagulation plasmatique et de la fibrinolyse avant et apr s intervention chirurgicale chez le chien tude de 50 cas Th se Ecole Nationale V t rinaire de Nantes 1992 n 30 24 TROYG C An overview of hemostasis Veterinary Clinics of North America Small Animal Practice 1988 18 1 5 19 45
6. d allumer l appareil d introduire la cartouche test et d y d poser l chantillon tester C est donc un acte de faible technicit ne n cessitant pas de formation particuli re et pouvant donc tre d l gu un auxiliaire v t rinaire par exemple e C est un appareil peu encombrant portable m me puisqu il fonctionne aussi sur batterie est donc adapt aux petites structures et peut suivre le v t rinaire lors de ses visites Le SCA 2000 est donc un appareil adapt la pratique v t rinaire que se soit dans une simple cabinet pour le diagnostic et le suivi des intoxications aux rodenticides de type anti vitamine K par exemple comme dans une structure beaucoup plus lourde vocation sp cialis e telle qu un bloc chirurgical pour la surveillance des patients probl mes ou une structure urgentiste pour l valuation rapide des fonctions h mostatiques d un patient choqu par exemple 37 CONCLUSION Lorsqu une exploration de l h mostase s av re n cessaire les temps de Quick et de C phaline Activateur sont parmi les premiers param tres demand s Le praticien v t rinaire s adresse classiquement des laboratoires d analyse car les m thodes manuelles classiques de d termination de ces temps sont peu pratiques r aliser et les m thodes automatis es font appel des appareils issus de la m decine humaine et donc co teux Le SCA 2000 est donc une alternative int ressante puisqu il p
7. Dans la mesure o ces chantillons n ont pas t trait s diff remment des autres on peut se demander si ces anomalies ne sont pas li es au pr l vement lui m me On sait par exemple que des variations de param tres h matologiques de l chantillon tels que le taux d h molyse la lip mie ou la bilirubin mie sont susceptibles d influer l g rement sur les valeurs de TQ et de TCA mesur e l aide d un coagulom tre bille d acier et de r actifs du commerce 15 On pourrait donc imaginer que la technique employ e par le SCA 2000 soit plus sensible ces variations 36 D autres auteurs voque des perturbations de ces tests li es une an mie marqu e ou un hyperviscosit sanguine 19 Un r le possible des PDF est aussi envisager pour expliquer ces perturbations des tests Dans le doute il parait donc souhaitable de renouveler le pr l vement et le test en cas de TCA SCA 2000 compris entre 92 et 100 s surtout si le contexte clinique et les autres param tres biologiques sont vocateurs d un trouble de la coagulation ASPECTS PRATIQUES La m thode employant le SCA 2000 est incontestablement plus pratique que la m thode chronom trique e Flle n cessite peu de mat riel seulement de quoi effectuer le pr l vement sur milieu citrat et une pipette pour placer l chantillon dans le puits de la cartouche test e Flle n cessite un minimum de manipulations le pr l vement effectu il suffit
8. Fibrinog ne Num ration Autres plaquettaire tests ventuels Intoxication aux anti vitamines K Insuffisance h patique D ficit en F VII D ficiten FI D ficit en F XII Anticoagulants circulants Thrombop nies sauf CIVD Mie de Von Willebrand Trouble des fonctions plaquettaires ib corrig s par apport de plasma 1 gt 1 oUm Il em Il corrig s par apport de plasma Il Temps de saignement F Willebran Temps de saignement 4 gt gt gt gt 1 Tableau 2 Modifications des tests au cours des principaux troubles de l h mostase du chien et du chat 8 11 17 21 CHAPITRE 2 2 ESSAI COMPARATIF DU SCA 2000 2 1 PROTOCOLE EXPERIMENTAL On se propose de comparer ici les temps de Quick et les temps de C phaline avec Activateur donn s par le SCA2000 avec ceux obtenus par les m thodes chronom triques classiques utilis es en routine au Laboratoire H matologie du service de M decine de l ENVT 2 1 1 LES ANIMAUX cf tableau 3 On dispose d un pool de 98 animaux pour lesquels une exploration de l h mostase a t demand e Ils sont r partis en deux chantillons L chantillon des chiens malades comprend 68 individus pr sent s pour diff rentes raisons la consultation Une trentaine d entre eux pr sente effectivement des perturbations de la coagulation plasmatique L chantill
9. 30 Tableau 9 R partition des r sultats obtenus pour le TCA pour les 68 chiens malades 32 GRAPHIQUES Graphique 1 Corr lation entre les mesures de temps de Quick effectu es par la m thode chronom trique et avec le SCA2000 pour l chantillon des chiens malades on a utilis les Log pour parpiller la distribution 31 Graphique 2 Corr lation entre les mesure de temps de C phaline Activateur r alis es par la m thode chronom trique et avec le SCA 2000 pour l chantillon des chiens malades on utilis les Log pour parpiller la distribution 33 ANNEXES Annexe 1 Temps obtenus pour l chantillon des chiens sains en secondes 40 Annexe 2 Temps obtenus pour l chantillon des chiens malades en secondes 42 Annexe 3 mode d emploi du SCA 2000 en seen e eese sena 43 INTRODUCTION L h mostase est un tat d quilibre relativement instable qui peut tre maintenu gr ce trois m canismes successifs l h mostase primaire qui aboutit la formation du clou plaquettaire la coagulation plasmatique dont r sulte la formation du caillot et la fibrinolyse qui permettra terme la solubilisation de ce caillot Une perturbation de l une de ces tapes aura pour cons quence un d placement de l quilibre dans le sens d un syndrome h morragique ou d
10. es lors d une affection h patique Les facteurs IL IX et X sont dits vitamine d pendants car leur synth se est tributaire de la pr sence de vitamine K Celle ci permet en effet la fixation d un groupement carboxyl dans la chaine polypeptidique de ces facteurs ce groupement conf rant aux facteurs en question la capacit de se lier au calcium et aux phospholipides Un d ficit en vitamine K classiquement rencontr en cas d intoxication par certains anticoagulants se traduira donc par la synth se de facteurs inactifs et donc par des troubles de la coagulation 1 1 3 MODE D ACTION Les facteurs IL IX X XL XII et XIII sont des zymog nes qui acqui rent leur fonctionnalit apr s activation par prot olyse ce sont le plus souvent des s rine prot ases Les facteurs V et VIII sont eux des cofacteurs enzymatiques v ritables catalyseurs de la coagulation plasmatique Ils n ont en effet pas d activit enzymatique propre mais participent avec le et les phospholipides la formation des complexes activateurs t nase et prothrombinase N B le facteur VIII est en r alit la combinaison de deux prot ines reli es par des liaisons non covalentes le facteur VIII coagulant VIIIc et le facteur de Von Willebrand FVW CP aevo mee active synth se vie fibrinog ne fibrine foie 2 4 Monom re prot ique se Bl nl uw E fibrine prothrombine jthrombinej foie avec 3 4 Hyarolys
11. 14 KEROACK S CADORE J L Diagnostic et traitement de la CIVD Le Point V t rinaire 1999 30 202 11 18 44 15 MORENO P GINEL P J Effects of haemolysis lipaemia and bilirubinaemia on prothrombin time activated partial thromboplastin time and thrombin time in plasma samples from healthy dogs Research in Veterinary Science 1999 67 273 276 16 GUILERMO COUTO C Disorders of hemostasis In NELSON R W amp GUILLERMO COUTO C Small Animal Internal Medecine 2ed Mosby St Louis 1998 1192 1206 17 MISCHKE R H mostasediagnostik beim hund 3 Ergebnisinterpretation und differentialdiagnose Der praktische Tierarzt 2000 81 1 25 32 18 MISCHKE R Optimization of prothrombin time measurements in canine plasma American Journal of Veterinary Research 1997 58 3 236 241 19 MONCE K A LOUGHMAN C M Evaluation of a commercially available prothrombin time assay kit for use in dogs and cats J Vet Med Assoc 1995 207 5 581 584 20 PAYRIERE M M Le temps de Quick chez le chien comparaison d une technique chronom trique manuelle et d une technique chromog nique manuelle ou semi automatis e Th se Ecole Nationale V t rinaire de Toulouse 1990 n 87 21 PECHEREAU D Affection h patiques et troubles de h mostase Prat M d Chir Anim 1987 6 503 507 22 SYNBIOTICS EUROPE Le SCA2000 le premier analyseur v t rinaire de coagulation Document d accompagnement
12. 59 On estime la r p tabilit par le coefficient de variation Coefficient de variation 90 cart type moyenne x100 2 1 6 1 REPRODUCTIBILITE L tude de la reproductibilit est bas e sur la r p tition des tests de r p tabilit En effet les 5 tests successifs sont r alis s dans les 30 minutes suivant la prise de sang puis une nouvelle s rie de 5 tests est r alis e 1h30 apr s la prise de sang Elle est estim e par la m me technique 2 2 RESULTATS OBTENUS 2 2 1 REPETABILITE Les r sultats obtenus sont pr sent s dans les tableaux suivants Pr l vements physiologiques Pr l vements pathologiques CV CV 23 30min 63 30min 20 6 1 67 3 8 8 1 23 1 30 63 1h30 2241 41 3 896 6 4 26 30 min 59 10min 25 6 1 52 3 1 6 8 3 Tableau 4 R p tabilit pour le temps de Quick au SCA 2000 27 Pr l vements pathologiques CV CV 23 30min 63 30min 89 8 5 54 3 2 6 2 23 1h30 74 642 30 63 1h30 100 4 74 3 1 47 dne 0 4 196 496 1 9 Tableau 5 R p tabilit pour le temps de C phaline Activateur au SCA 2000 On constate que pour le temps de Quick comme pour le temps de C phaline Activateur les r sultats obtenus sont assez homog nes et caract ris s par des coefficients de variation peu lev s La r p tabilit des tests pratiqu s l aide du SCA2000 semble donc satisfaisante Il faut souligner que si l on a pas test
13. la r p tabilit pour les tests pratiqu s par la m thode chronom trique c est que l on consid re que cette m thode est connue pour tre fiable et dot e d une bonne r p tabilit dans 1 mesure la personne r alisant les tests est toujours h m me ce qui est le cas ici 2 2 2 REPRODUCTIBILITE Les r sultats obtenus pour la reproductibilit sont pr sent s dans le tableau suivant CV pour TQ 06 RB 9 3 Tableau 6 Appr ciation de la reproductibilit par calcul des coefficients de variation CV 28 On constate qu en ce qui concerne le temps de Quick les r sultats sont plut t bons dans la mesure o les coefficients de variation sont relativement peu lev s et proche de ceux calcul s pour la r p tabilit Ils semblent par ailleurs tre assez homog nes entre eux En revanche les r sultats semblent un peu moins bons pour le temps de C phaline Activateur car les coefficients de variations sont relativement lev s et peu homog nes entre eux N anmoins ces r sultats m me s ils ne sont pas excellents sont acceptables 2 2 3 COMPARAISON DES RESULTATS OBTENUS PAR LES DEUX METHODES 2 2 3 1 VALEURS OBTENUES CHEZ LES CHIENS SAINS Les r sultats obtenus pour les chiens sains sont concluants dans la mesure o les valeurs sont normales pour tous les chiens par les 2 m thodes pour le comme pour le TCA On note cependant que les valeurs obtenues avec le SCA 2000 d limitent des i
14. pour les comparer et les r sultats obtenus Enfin nous valuerons l int r t de ces m thodes leurs limites et leur applicabilit en pratique courante CHAPITRE 1 1 COAGULATION PLASMATIQUE L h mostase est un tat d quilibre complexe qui d coule de trois grands m canismes Le 1 d entre eux est l h mostase primaire qui aboutit la formation d un clou plaquettaire La coagulation plasmatique intervient ensuite pour renforcer ce clou plaquettaire gr ce la synth se d un caillot de fibrine celui ci sera par la suite remani au cours de la 27 tape de l h mostase que constitue la fibrinolyse Elle fait intervenir de nombreux facteurs qui vont interagir au cours d tapes r actionnelles successives 1 1 LES FACTEURS DE LA COAGULATION 3 9 10 Cf tableau 1 1 1 1 NOMENCLATURE Ces facteurs sont pour la plupart des glycoprot ines plasmatiques Ils sont d sign s par des chiffres romains suivi ou non d un a indiquant leur tat activ ou pas Ils sont au nombre de douze LILIILIV V VIL VIILIX X XLXILXIIT auxquels il faut ajouter deux facteurs d couverts plus r cemment le kininog ne de haut poids mol culaire KHPM et la pr kallicr ine pr K 1 1 2 LIEU DE SYNTHESE 21 La plupart de ces facteurs ont une synth se h patique facteurs LILV VII VIIIc IX X XI XII ce qui explique que des troubles de la coagulation peuvent faire partie des anomalies biologiques rencontr
15. 3 FORMATION DE LA FIBRINE 11 12 4DBVENIBIDE CANLO i E 13 1 3 LES TESTS D EXPLORATION DE LA COAGULATION 15 LSd e eR N 2A 15 1 3 1 1 LE TEMPS DE CEPHALINE ACTIVATEUR 16 2 12 LE TEMPS DE OUICI 18 1 3 1 3 LE TEMPS DE THROMBINE 18 L32TES TESTS ANALY TIQUES 18 1 4 INTERET PRATIQUE DE CES TESTS 19 INTERET DIAGNOSTIC S rere a 19 1 4 2 INTERET DANS LE SUIVI THERAPEUTIQUE CHAPITRE 2 2 ESSAI COMPARATIF DU SCA 2000 2 1 PROTOCOLE EXPERIMENTAL 2 1 1 LES ANIMAUX 2 1 2 LES PRELEVEMENTS 2 1 2 1 REALISATION 2 1 2 2 CONSERVATION 2 1 3 REALISATION DES TESTS AVEC LE 5 2000 2 1 3 1 MATERIEL 2 1 3 2 PRINCIPE DE 2 1 3 3 METHODE DE REALISATION 2 1 4 REALISATION DU TEMPS DE QUICK PAR LA METHODE CHRONOMETRIQUE 2 1 4 1 MATERIEL 2 1 4 2 METHODE
16. ECOLE NATIONALE VETERINAIRE ANNEE 2002 THESE 2002 TOU 3 4058 TOULOUSE EXPLORATION DE LA COAGULATION PLASMATIQUE CHEZ LE CHIEN ESSAI DU SCA 2000 THESE pour obtenir le grade de DOCTEUR VETERINAIRE DIPLOME D ETAT pr sent e et soutenue publiquement en 2002 devant l Universit Paul Sabatier de Toulouse par Patrick Andr Alexandre PONS N le 12 avril 1976 LE MANS Sarthe Directeur de th se M le Professeur Jean Francois GUELFI JURY PRESIDENT Mme Elisabeth ARLET SUAU Professeur l Universit Paul Sabatier de TOULOUSE ASSESSEUR M Jean Francois GUELFI Professeur l Ecole Nationale V t rinaire de TOULOUSE M Didier MATHON Maitre de Conf rences l Ecole Nationale V t rinaire de TOULOUSE TABLE DES MATIERES page INTRODUCTION Ne tn 6 CHAPITRE MU EE 7 1 LA COAGULATION PLASMATIQUE 7 1 1 LES FACTEURS DE LA COAGULATION 7 LIT NOMENCLATURE AE 7 DE SENTHESE 7 LI S MODEI ACTION f 8 MODES TAPES EEE ne Le 10 1 2 1 FORMATION DE LA PROTHROMBINASE 10 1 2 1 1 VOIE EXOGENE EXTRINSEQUE 6 10 1 2 1 2 VOIE ENDOGENE 10 1 2 2 FORMATION DE LA THROMBINE 10 1 2
17. Temps de Thrombine Sch ma 3 Etapes de la coagulation explor es par les 3 principaux param tres 4 5 17 1 3 1 2 LE TEMPS DE QUICK TQ Le TQ est le temps de coagulation d un plasma pauvre en plaquettes mis en pr sence d un exc s de facteur tissulaire thromboplastine et de explore la voie et la voie commune de la coagulation c est dire les facteurs I I V VII et X Le d ficit en facteur tissulaire ne semble pas possible car il est pr sent dans tous les tissus C est le test de choix en cas de suspicion d intoxication au antivitamine K car il est le premier modifi la demi vie du facteur VII synth se vitamine d pendante tant la plus courte environ 4 heures Une hypofibrinog n mie peut aussi tre responsable d un allongement du TQ A TEN V Toulouse les valeurs de TQ consid r es comme normales chez le chien sont comprises entre 6 et 7 sec en utilisant une thromboplastine extraite d enc phale de lapin On peut exprimer cette valeur en pourcentage par rapport un t moin on parle alors de taux de prothrombine 1 3 1 3 LE TEMPS DE THROMBINE TT Il explore la fibrinoformation derni re tape de la voie commune C est le temps de coagulation d un plasma pauvre en plaquettes mis en pr sence de thrombine L allongement de ce temps r sulte soit d un d ficit quantitatif hypofibrinog n mie ou qualitatif en fibrinog ne soit de la pr sence d inhibiteu
18. asmatique et la fibrinolyse Prat M d Chir Anim Comp 1996 4 279 287 4 CLOET CHABRE B 2 partie L h mostase et la fibrinolyse leur exploration biologique Prat M d Chir Anim Comp 1996 5 375 382 5 COTARD J P L h mostase et son exploration en pratique courante Prat M d Chir Anim Comp 1983 18 31 36 6 EVANS G O FLYNN R M Activated partial thromboplastin time measurements in citrated canine plasma J Comp Path 1992 106 79 82 7 D Exploration de l h mostase Le Point V t rinaire 1985 17 91 381 386 8 FOURNEL Diagnostic diff rentiel des troubles de l h mostase Le Point V t rinaire 1985 17 91 387 393 9 GUELFI J F DIQUELOU Exploration biologique de l h mostase chez le chien Le Point V t rinaire 1995 26 164 755 759 10 GUELFI J F DIQUELOU TRUMEL C DOSSIN Hypocoagulabilit s plasmatiques acquises du chien Encyclop die V t rinaire Paris Elsevier 1996 Biologie clinique 0500 7p 11 GUELFI J F VERWAERDE P Conduite tenir devant un saignement Le Point V t rinaire 1998 29 15 19 12 GOUDEMAND J Allongement du temps de c phaline kaolin ou activ du temps de Quick du temps de saignement La revue du praticien Paris 1997 47 879 889 13 JOHNSTONE Clinical and laboratory diagnosis of bleeding disorders Veterinary Clinics of North America Small Animal Practice 1988 18 1 21 33
19. e le fibrinog ne resp F ES Il V VIL VIII X1 amp XIII thromboplastine absente tissus Active le facteur X dans le no meae o s ENSE tapes de la coagulation heures complexe prothrombinase 4 VIla et facteur tissulaire heures lactivent le X 10 16 Cofacteur du IX dans le heures complexe antih mophilique constitue avec les phospholipides le et le IXa le complexe t nase facteur anti foie h mophilique A Cellules endoth liales IX facteur anti IXa foie avec h mophilique B vitamine K X facteur Stuart Xa foie avec 6 48 Donne le Xa faisant partie vitamine K heures du complexe prothrombinase et active les facteurs VII et IX X facteur PTA l foie peu consomm 2 3 Donne le qui active le jours facteur IX en pr sence de calcium XII facteur XIla foie peu consomm 8 Syst me contact Active le Hageman heures XI Participe au syst me fibrinolytique et au syst me des kinines XIII facteur XIIla foie 7 jours Donne en pr sence d ions stabilisant de la calcium le fibrine transaminase qui transforme la firine soluble en fibrine insoluble pr kallicr ine kallicr ine Syst me contact Active le syst me des kinines la pror nine et le plaminog ne KHP kininog ne de idem Syst me contact Active la haut poids pr kallicr ine en pr sence mol culaire de XIla permettant l activation du X 24 Entre dans la composition heures du complexe t nase perme
20. ent en du plasminog ne plasmine une enzyme prot olvtique capable de lyser la fibrine et le fibrinog ne on appelle PDF les produits de cette d gradation Le r le de cette enzyme est aussi de d grader certains facteurs de la coagulation facteurs V VII XIIa et d activer certaines fractions du compl ment 13 rj lt E N D G E N E Phospholipides Collag ne contact XII D XIIa Fragments de XIIa KHPM Kallicr ine Pr kallicr ine Activation Kinines du compl ment Activateur Activateur plasmatique tissulaire pro UK t PA Plasminog ne Ant plasmines gt Streptokinase Urokinase D gradation du V du VIII Du fibrinogene et de la fibrine VOIE EXOGENE PDF Sch ma 2 La fibrinolyse 3 10 14 1 3 LES TESTS D EXPLORATION DE LA COAGULATION 7 15 Le diagnostic des affections li es des troubles de l h mostase passe par l exploration des trois temps qui la composent En pratique on explorera l h mostase primaire en r alisant deux examens de base la mesure du temps de saignement valeurs normales de 2 4 min chez le chien pour une incision gingivale au niveau de la l vre sup rieure et la num ration plaquettaire valeurs normales de 200 500 10 L Ces examens pourront ventuellement tre compl t s par une ponction de moelle pour identifier le caract re central ou p riph rique d une t
21. esse laquelle l chantillon sang r actifs circule entre des d tecteurs Au fur et mesure que le caillot se forme le flux sanguin ralenti Quand la vitesse chute sous un seuil pr d termin l analyseur consid re que la formation du caillot est achev e et affiche le temps qu il a fallu ce caillot pour se former 24 2 1 3 3 METHODE DE REALISATION 22 cf Annexe 3 La d marche suivie est celle d crite par le fabricant dans la notice de l appareil La manipulation est simple On sort la cartouche correspondant au test pratiquer du r frig rateur quelques temps avant son utilisation le fabricant recommandant d utiliser ces cartouches temp rature ambiante La cartouche est ensuite ins r e dans l appareil qui va l identifier et proc der une tape de pr chauffage visant amener les r actifs qu elle contient la temp rature id ale L op rateur d pose ensuite l aide d une seringue ou d une pipette une goutte de sang dans le puits de la cartouche sans bulle d air et lance l analyse en poussant le bouton Start L analyseur aspire ensuite pr cis ment la quantit juste de sang n cessaire l analyse soit 15UuL Le r sultat du test est lu sur l cran de l appareil il s agit d une valeur donn e en secondes 2 1 4 REALISATION DU TEMPS DE QUICK PAR LA METHODE CHRONOMETRIQUE Ce test consiste activer in vitro la prothrombine pr sente dans l chantillon par addition de th
22. hrombop nie et ou par la r alisation via un laboratoire sp cialis de tests fonctionnels valuant les capacit s d adh sion d agr gation et de lib ration de constituants au niveau plaquettaire tests toutefois peu usit s en m decine v t rinaire La fibrinolyse sera explor e par la mesure du temps de lyse des euglobulines du plasma ou de mani re plus classique aujourd hui par le dosage des PDF dans le plasma une fibrinolyse anormalement lev e entra nera une augmentation de leur concentration on consid re comme pathologique une concentration en PDF sup rieure 10 ug mL Pour ce qui est de la coagulation plasmatique on dispose principalement de trois tests permettant une approche globale ces tests sont les plus couramment r alis s en pratique mais il en existe d autres sont les mesures des temps de C phaline Activateur de Quick et de Thrombine Ces tests peuvent tre compl t s le cas ch ant par des tests analytiques bas s sur le dosage d un des facteurs de la coagulation ou de ses produits de d gradation 1 3 1 LES TESTS GLOBAUX Ces tests s effectuent partir de sang pr lev dans des tubes citrat s on pr conise un ratio gal 1 volume de citrate pour 9 volumes de sang Il est important de r aliser ces tests rapidement apr s la prise de sang d lai maximum de 3 4h Parmi toutes les m thodes les plus utilis es en pratique sont les m thodes chronom triques bas es sur
23. ier en pr sence de Ca et sur une matrice phospholipidique formant ainsi le complexe T nase Celui ci induit l activation du facteur X et donc la formation de la prothrombinase 1 2 2 FORMATION DE LA THROMBINE Elle r sulte de l action de la prothrombinase sur la prothrombine La thrombine ainsi form e poss de trois r les majeurs e Cliver le fibrinog ne en fibrine e Favoriser l agr gation plaquettaire 10 e Activer le facteur XIII en pr sence de 1 2 3 FORMATION DE FIBRINE La thrombine clive le fibrinog ne en deux fibrinopeptides et B et un monom re de fibrine Ces monom res vont se polym riser en fibrine soluble C est le facteur XIIIa qui va renforcer la coh sion entre les monom res et rendre ainsi la fibrine insoluble le caillot est form 11 VOIE ENDOGENE VOIE EXOGENE Syst me contact KHPM pr K XI complexe Facteur tissulaire complexe prothrombinase Ca Facteur 3 pl Dm Facteur anti Monom res de fibrine mzczzoo ET anti XII Facteur Facteur stabilisant de la fibrine Fibrine stable CAILLOT Sch ma 1 La coagulation plasmatique 2 3 23 24 12 1 2 4 DEVENIR DU CAILLOT Cf Sch ma 2 Pour permettre la reperm abilisation du vaisseau ce caillot sera ensuite remani au cours de la troisi me tape constitutive de fibrinolyse Elle consiste essentiellem
24. la mesure par l op rateur du temps n cessaire l obtention d un caillot apr s mise en contact avec les r actifs 15 1 3 1 4 LE TEMPS DE CEPHALINF ACTIVATEUR TCA Cf Sch ma 3 C est par d finition le temps de coagulation d un plasma pauvre en plaquettes i e centrifug 4000 tours pendant 5 10 min mis en pr sence d une suspension phospholipidique d un activateur et de calcium L activateur le plus souvent employ est le kaolin on parle alors de temps de c phaline kaolin Ce test n est pas parfaitement reproductible est donc pr f rable de comparer le plasma test un plasma de chien t moin on consid rera comme allong un TCA sup rieur 1 3 fois le du t moin Le TCA d pend de l ensemble des facteurs de la voie endog ne et de la voie commune Il explore donc les facteurs I II V VIII IX X XI et XII N anmoins la disponibilit d un facteur devant tre r duite d au moins 7096 par rapport la normale pour observer un allongement de ces temps il peut arriver que certains individus h t rozygotes h mophiles A ou B par exemple ne soient pas d tect s car l activit du facteur est encore comprise entre 40 et 60 96 de son activit normale A les valeurs de TCA consid r es comme normales chez le chien sont comprises entre 10 et 14 sec 16 Voie endog ne Voie exog ne Voie commune Temps de Temps de Activateur
25. ntervalles un peu diff rents de ceux donn s par le constructeur Cf Annexe 1 20 M thode chronom trique M thode SCA2000 Valeurs du TQ 5 46 7 sec m 6 0 44 12 15 sec m 13 8 0 99 Valeurs du TCA 11 14 sec m 12 7 0 87 51492 sec 74 1 10 53 Tableau 7 Valeurs pour les diff rents tests et par les deux types de m thodes pour les 31 chiens sains 2 2 3 2 RESULTATS POUR LE TEMPS DE QUICK Les r sultats obtenus pour le temps de Quick chez les chiens malades sont expos s en Annexe 2 1 Nombre de chiens TQ r f rence et TQ SCA2000 normaux TQ r f rence et TQ SCA2000 augment s r f rence normal et TQ SCA augment Tableau 8 R partition des r sultats obtenus pour le temps de Quick pour les 68 chiens malades Les deux m thodes d obtention du temps de Quick sont caract ris es par un tr s fort coefficient de corr lation p 0 967 30 e e N lt o D o 1 log TQ R f rence Graphique 1 Corr lation entre les mesures de temps de Quick effectu es par la m thode chronom trique et avec le SCA2000 pour l chantillon des chiens malades on a utilis les Log pour parpiller la distribution 3l 2 2 3 3 RESULTATS POUR LE TEMPS DE CEPHALINE ACTIVATEUR Les r sultats obtenus pour le temps de C phaline Activateur sont expos s en Annexe 2 Nombre de chiens TCA normal par les 2 m thodes TCA allong par les 2 m
26. obtenus avec le SCA 2000 ont la m me signification clinique et diagnostique que ceux obtenus manuellement par la m thode au crochet On notera cependant que dans quelques cas de chiens malades et pour des valeurs situ es aux limites de l intervalle des valeurs usuelles on a obtenu des discordances entre les 2 m thodes Ces anomalies concernent essentiellement la mesure du temps de C phaline Activateur en effet sur les 68 chiens malades test s on a observ une divergence chez 15 animaux Pour 6 d entre eux chiens n 7 19 20 33 58 et 67 on note un r f rence normal et un TCA SCA 2000 augment Parmi eux les chiens n 20 33 58 et 67 ont un TCA SCA 2000 tr s faiblement augment 93 94 Le chien n 7 souffrant d une intoxication aux anti vitamine trait e 48 heures auparavant avec de la vitamine probablement vu sont r f rence sous estim En effet son TQ est encore assez lev et on pourrait s attendre ce qu il en soit de m me pour son TCA On note aussi pour 9 chiens n 17 24 28 31 41 46 50 55 et 63 un TCA SCA 2000 normal et un TCA r f rence augment Cette divergence est faible pour 6 d entre eux TCA r f rence allant de 14 8 15 5 s c est dire tr s mod r ment allong Pour les 3 autres l allongement est plus marqu de 15 6 16 2 s Ces chiens pr sentaient e Une leuc mie aigu my loi de chien n 31 e Une CI V D chiens n 50 et 63
27. ogarithmique Les valeurs usuelles de fibrinog n mie chez le chien sont de 2 4 g L II est galement possible de doser l antithrombine III dont le taux diminue lors d activation de la coagulation d insuffisance h patique et de syndrome n phrotique On r alise ce dosage en ajoutant au plasma de l h parine et de la thrombine et en mesurant l activit de la thrombine r siduelle sur un substrat synth tique Les r sultats ainsi obtenus sont exprim s en pourcentage par rapport un plasma t moin on consid re comme normales des valeurs comprises entre 80 et 120 de celles obtenues avec le t moin Enfin il faut citer le dosage des PDF qui permet de d pister une activation de la coagulation suivie de thrombolyse ou bien une hyperfbrinolyse primitive Il s effectue l aide de kits sp cifiques bas s sur des techniques d agglutination de particules de latex recouvertes d anticorps anti PDF Chez le chien des valeurs de PDF sup rieures 10 ug mL sont consid r es comme anormales et des valeurs sup rieures 30 40 ug mL sont fortement vocatrices d une CIVD 14 1 4 INTERET PRATIQUE DE CES TESTS Ils jouent un r le la fois dans le diagnostic et le suivi th rapeutique 1 4 1 INTERET DIAGNOSTIC Une suspicion clinique de trouble de l h mostase est caract ris e par un syndrome d an mie le plus souvent sans h molyse associ la survenue de saignements multiples et ou r p t s qu ils soient ext riori
28. on des chiens sains est quant lui constitu de 31 animaux cliniquement sains appartenant l ENVT animaux destin s l enseignement pratique ou des tudiants ou bien vus en consultation pour des op rations de convenance st rilisation par exemple 2 1 2 LES PRELEVEMENTS 2 1 2 1 REALISATION Les tests sont effectu s partir de sang veineux Le pr l vement est obtenu par ponction jugulaire franche apr s compression manuelle On utilise un syst me de type vacutainer associant une aiguille un porte aiguille et un tube sous vide contenant un milieu de pr l vement citrat tube de 5 mL contenant 0 5 mL de citrate de soude 3 896 Le tube est rempli au trait dans le but d avoir un rapport entre la quantit de sang et l anticoagulant proche de 9 pour 1 On effectue les mesures l aide du SCA 2000 avec du sang total Celui ci est ensuite centrifug pour donner le plasma pauvre en plaquettes n cessaire la r alisation des tests par la m thode chronom trique 22 Tableau 3 6 4jovarohystereciome 8 _ 9 4 38 Bagnemets 45 46 9 jAremen paiqe 60 retard de croissance shuntportocave 635 puoi _ 84 buise DEL EE NR RN 68
29. romboplastine calcique On obtient alors de la thrombine qui hydrolyse le fibrnog ne en fibrine et permet la formation du caillot 2 1 4 1 MATERIEL On dispose d un bain marie r gl 37 C de pipettes de tubes h molyse d un crochet et d un chronom tre La source de thromboplastine calcique est une pr paration Ivophilis e base de cervelle de lapin Thromboplastine calcique bioM rieux que l on reconstitue avant usage en y ajoutant un volume donn d eau distill e 25 2 1 4 2 METHODE On travaille partir d un plasma pauvre en plaquettes obtenu en centrifugeant le sang citrat du patient 4000 tr pendant 5 8 minutes On peut travailler partir de plasma frais ou d congel La premi re tape consiste pr incuber au bain marie 0 1mL de plasma et 0 2 mL de r actif pendant quelques minutes On m lange ensuite les 2 composants et on d clenche le chronom tre Le m lange est continuellement sond l aide du crochet jusqu ce que le caillot form ait t crochet On arr te alors le chronom tre et le temps indiqu est not en secondes Cette m thode est la m thode de r f rence classiquement employ e dans les tudes concernant le temps de Quick 18 2 1 5 REALISATION DU TEST DE CEPHALINE AVEC ACTIVATEUR PAR LA METHODE CHRONOMETRIQUE Ce test consiste provoquer la coagulation d un plasma in vitro en le mettant en pr sence d une suspension phospholipidique d un activateur e
30. ropose une m thode automatis e adapt e la pratique de la m decine v t rinaire avec un co t plus accessible Nous avons donc test un chantillon de 31 chiens sains et de 68 chiens malades avec la m thode chronom trique au crochet employ e classiquement Laboratoire de M decine de l Ecole Nationale V t rinaire de Toulouse et avec la m thode automatis e propos e par le SCA 2000 Les r sultats obtenus sont assez concluants montrant une bonne corr lation entre les deux m thodes m me si on a pu pour quelques cas dans la mesure du constater des divergences Le SCA 2000 avec des intervalles de valeurs usuelles adapt s a cette m thode est donc un moyen tout fait valable d exploration de l h mostase chez le chien Il est de plus tr s int ressant car en se r f rant des valeurs chronom triques de normalit il permet d envisager de ne plus comparer l chantillon un t moin 38 ANNEXES Tableau d taill des r sultats obtenus pour les temps de Quick et de C phaline Activateur par les deux m thodes avec l chantillon des chiens sains Tableau d taill des r sultats obtenus pour les temps de Quick et de C phaline Activateur par les deux m thodes avec l chantillon des chiens malades Sch ma d utilisation du SCA 2000 22 39 chronom trique SCA2000 TCA chronom trique TCA 5 2000 2 DIR
31. rs de la thrombine h parine antithrombine IIT ou de la polym risation des monom res de fibrine PDF A TEN V Toulouse les valeurs de TT consid r es comme normales chez le chien sont comprises entre 18 et 30 sec en utilisant une thrombine d origine bovine dilu e au 1 20 1 3 2 LES TESTS ANALYTIQUES 9 Ces tests bas s eux aussi sur des m thodes chronom triques permettent de doser un facteur de la coagulation en particulier Chez le chien on recherche plus particuli rement les facteurs I II V VIIIC et X ainsi que l ensemble Le principe est relativement simple on recherche le temps de coagulation d un plasma chim re m lange du plasma tester et d un plasma sp cifique du commerce contenant tous les facteurs sauf celui recherch On effectue alors un temps de Quick s il s agit d un facteur 18 de la voie commune ou exog ne un temps de C phaline Activateur s il s agit d un facteur de la voie endog ne Les r sultats sont exprim s en pourcentage par rapport un plasma t moin on consid re comme normal un temps compris entre 70 et 120 du temps obtenu avec le plasma t moin Pour le fibrinog ne on peut acc der 1 valeur de la fibrinog n mie par ce type de m thode En effet en pr sence de concentration lev e de thrombine et de concentration faible de fibrnog ne plasma dilu on peut tablir un lien entre le temps obtenu et la fibrinog n mie via une relation bil
32. s s intra articulaires ou intracavitaires Dans certains cas cette situation n cessite de prendre des dispositions d urgence remplissage vasculaire assistance 19 respiratoire Un diagnostic rapide est alors primordial Celui ci passe en premier lieu par un bilan associant h mogramme le dosage des prot ines plasmatiques et l exploration de la coagulation plasmatique par la r alisation d un TQ d un TCA et d un TT ou d une fibrinog n mie Ce premier bilan lui permettra d carter ou de confirmer un trouble de l h mostase voire de l identifier de mani re pr cise permettant ainsi la mise en place d une th rapeutique adapt e Cf tableau 2 1 4 2 INTERET DANS LE SUIVI THERAPEUTIQUE Ces tests ont aussi pour vocation de suivre l volution du patient au cours de son traitement Ainsi un animal intoxiqu aux rodenticides anti vitamine K sera trait classiquement par l administration quotidienne de vitamine K1 5 mg Kg pendant 3 semaines On v rifiera l efficacit du traitement en effectuant un TQ 48 heures apr s l arr t du traitement si celui ci est encore allong on prescrira 10 jours de traitement suppl mentaires 16 Le TCA pourra par exemple tre utile la surveillance d un animal ayant pr sent une CIVD et trait l h parine une volution favorable se signe par une normalisation du TCA concomitante d une diminution des PDF plasmatiques 20 Troubles de Q TCA l h mostase
33. t de calcium 2 1 5 1 MATERIEL On emploie le m me mat riel que celui employ pour la mesure du temps de Quick On utilise un kit de d termination du temps de c phaline kaolin produit par les laboratoires Diagnostica Stago Il est compos de 2 flacons l un contenant de la c phaline lyophilis e l autre contenant une solution tamponn e de kaolin 5 mg mL Le r actif est pr par une demi heure avant emploi par transvasement de la solution dans le flacon contenant la c phaline lyophilis e et homog n isation On emploie un deuxi me r actif qui est une solution de CaCI2 0 025M pr te l emploi Cette m thode est la m thode de r f rence classiquement employ e dans les tudes concernant le temps de C phaline Activateur 6 2 1 5 2 METHODE On pr incube dans le bain marie 0 1 mL de plasma 0 1 mL de r actif que l on aura bien homog n is au pr alable et 0 1 mL de solution calcique On m lange tout d abord le plasma et le r actif puis on laisse incuber 3 minutes On ajoute alors la solution calcique et on d clenche le chronom tre Le caillot est alors crochet l aide du crochet et on note le temps correspondant en secondes 26 2 1 6 TRAITEMENT DES RESULTATS 2 1 6 1 REPETABILITE Les tests avec le SCA2000 ont t s r alis s 5 fois de suite sur 2 pr l vements de sang citrat avec TQ et TCA non modifi s chiens n 23 et 26 et sur 2 pr l vements avec TQ et TCA allong s chiens n 63 et
34. thodes TCA r f rence normal et TCA SCA 2000 allong 6 TCA r f rence allong et TCA SCA 2000 normal 9 Tableau 9 R partition des r sultats obtenus pour le TCA pour les 68 chiens malades La comparaison des deux m thodes par la m thode du coefficient de corr lation donne ici encore d excellents r sultats puisque on a un coefficient l aussi tr s fort p 0 977 32 e A lt o o lt o E 2 4 Log TCA R f rence Graphique 2 Corr lation entre les mesure de temps de C phaline Activateur r alis es par la m thode chronom trique et avec le SCA 2000 pour l chantillon des chiens malades on a utilis les Log pour parpiller la distribution 33 CHAPITRE 3 3 DISCUSSION Avec le SCA 2000 la possibilit s offre d utiliser une m thode rapide simple et automatis e de mesure du temps de Quick et de C phaline Activateur En permettant la mise en ouvre de 2 des tests les plus usit s en premi re intention lors de suspicion de troubles de l h mostase cet appareil r pondrait donc une vraie attente du praticien v t rinaire On a donc derch d montrer que les r sultats fournis par cet appareil s av rent aussi fiables que ceux fournis par la m thode chronom trique classique La r partition des troubles observ s sur l chantillon des 68 chiens malades t la suivante Pas de modification 31 cas C I V D 20 cas Insuffisance h patiq
35. ttant l activation du X par voie endog ne n VII proconvertine JVII et Vlla foie avec o vitamine K ui ui ui n ui n n i Tableau 1 Les facteurs de la coagulation plasmatique 3 9 10 1 2 LES ETAPES 2 3 5 9 Cf Sch ma 1 La coagulation plasmatique consiste en une cascade enzymatique qui va voir se former la prothrombinase une enzyme responsable de la transformation de la prothrombine en thrombine Celle ci une prot ase permettra le clivage de la mol cule de fibrinogene en fibrine 1 2 1 FORMATION DE LA PROTHROMBINASE C est l enzyme permettant le clivage de la prothrombine II en thrombine Elle r sulte de l association sur une matrice de phospholipides du facteur Stuart Xa de la proacc l rine Va et de calcium L association de ces facteurs peut tre d clench e par deux m canismes diff rents 1 2 1 1 VOIE EXOGENE EXTRINSEQUE C est le contact du plasma et du facteur tissulaire avec le facteur qui va entra ner l acivation du facteur X celui ci va alors former la prothrombinase en s associant au facteur pr sence de 1 2 1 2 VOIE ENDOGENE INTRINSEQUE Elle est initi e par le Syst me contact facteur XII KHPM pr kallicr ine qui est activ par l exposition du sous endoth lium au niveau d une l sion vasculaire S ensuit alors l activation en cascade des facteurs XI puis IX Les facteurs IXa et VIIIC vont alors s assoc
36. ue 6 cas Intoxication aux anti vitamine K 6 cas 4 Autres 5 cas La gamme des temps observ s pour le TQ et le TCA s tends des valeurs usuelles des r sultats extr mes incoagulable dans 4 cas Cette diversit permet donc une tude comparative int ressante PRECISION DE LA METHODE Dans l tude de la pr cision de cette technique men e pour les 2 tests nous avons observ POUR LE TEMPS DE QUICK R p tabilit Les coefficients de variation que l on a obtenu sont voisins de 6 en moyenne Un travail ant rieur men au sein du Laboratoire du Service de M decine de l Ecole Nationale V t rinaire de Toulouse sur le temps de Quick 20 donne des coefficients de variation pour la m thode chronom trique classique de l ordre de 1 896 On a donc une pr cision un peu 34 moindre par la m thode au SCA 2000 mais ces coefficients de variation restent tout fait compatibles avec une interpr tation diagnostique Reproductibilit Les valeurs de coefficients de variation obtenues sont proches de 596 ce qui sans doute moins bon que pour la m thode manuelle mais reste acceptable POUR LE TEMPS DE CEPHALINF ACTIVATEUR R p tabilit Les coefficients de variation sont peu lev s puisque proches de 4 en moyenne On ne dispose pas de donn es bibliographiques sur les valeurs concernant la m thode chronom trique mais l aussi on peut supposer que ces valeurs sont compatibles avec
37. un syndrome thrombotique Et si ces anomalies peuvent tre suspect es cliniquement leur diagnostic proprement dit passe par des examens compl mentaires plus ou moins complexes et donc plus ou moins accessibles au praticien car difficiles standardiser et interpr ter Ainsi la coagulation plasmatique n cessite pour son valuation de base Y Le temps de c phaline avec activateur T C A qui explore la voie endog ne et la voie commune de la coagulation plasmatique Y Le temps de Quick T Q qui explore la voie exog ne et la voie commune de la coagulation plasmatique Y Le temps de thrombine T T qui explore la fibrinoformation derni re tape de la coagulation plasmatique Ces examens n cessitent outre une certaine habitude de leur r alisation de comparer l chantillon test un chantillon t moin ce qui rend leur r alisation plus lourde encore Le laboratoire SYNBIOTICS propose en commercialisant le SCA2000 une m thode d obtention du T C A et du T Q qui est rapide automatis e r alisable partir d un simple chantillon de sang total et ne requerrant pas de comparaison un chantillon t moin L objet de ce travail et d appr cier en la comparant aux m thodes chronom triques classiquement employ es la fiabilit de cette m thode chez le chien Apr s un bref rappel des m canismes mis en jeu lors de la coagulation plasmatique nous d crirons les techniques employ es les m thodes utilis es
38. une interpr tation clinique Reproductibilit Les valeurs de coefficients de variation proches de 6 en moyenne sont compatibles avec une utilisation diagnostique de la m thode COMMENTAIRE Dans l ensemble l utilisation du SCA 2000 est une m thode un peu moins pr cise que la m thode chronom trique classique au crochet N anmoins les coefficients de variation observ s restent tout fait raisonnables et l on peut donc consid rer que les r sultats obtenus seront cliniquement pertinents COMPARAISON DES RESULTATS Les 2 m thodes donnent des r sultats diff rents en valeur absolue ce qui n cessite de modifier l intervalle des valeurs usuelles selon la technique que l on emploie Ainsi pour le TQ on obtient avec le SCA 2000 pour l chantillon des chiens sains des valeurs de 12 15 s les valeurs fournies par le constructeur tant de 12 17 s Or les valeurs comprises entre 15 et 17 s correspondent au laboratoire d h matologie de l ENVT des valeurs de 7 8 3 s qui sont consid r es comme mod r ment moyennement allong es et donc anormales 35 Pour le TCA les valeurs observ es sur l chantillon des chiens sains s tendent de 51 92 s Les valeurs figurant dans la notice du constructeur vont de 71 102 s Les r sultats obtenus par les 2 techniques sont fortement corr l s pour le temps de Quick comme pour le temps de C phaline Activateur On consid re donc que les r sultats

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