Legionella Latex Test [FR]
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1. observer l agglutination Ne pas d passer 1 minute et ne pas utiliser une loupe pour lire le r sultat 9 Une fois l op ration termin e liminer la carte de r action dans un d sinfectant appropri 10 Refermer les flacons et les placer de nouveau au r frig rateur 6 LECTURE ET INTERPR TATION DES R SULTATS R sultat positif Un r sultat est positif si agglutination des particules de latex bleu appara t en 1 minute et s il n y a pas d agglutination dans le cercle de contr le Une r action positive indique la pr sence des antig nes du s rogroupe de Legionella correspondant dans l chantillon R sultat n gatif Un r sultat n gatif est obtenu si aucune agglutination n appara t en 1 minute et si la suspension reste homog ne R sultat non interpr table Un test est ininterpr table si le r actif de contr le montre une agglutination Cela indique que la culture entra ne une autoagglutination R action granuleuse ou filamenteuse Des r actions granuleuses ou filamenteuses peuvent appara tre occasionnellement compte tenu de la nature particuli re du mat riel test Quand de telles r actions apparaissent elles doivent tre interpr t es selon les crit res suivants Le r sultat est positif quand il y a claircissement visible du fond bleu Le r sultat est n gatif quand il n y a pas d claircissement notable du fond bleu 7 LIMITES DU TEST Le test d agglutination au la2. contient le r actif en quantit suffisante pour 50 tests Ce coffret contient galement DR806 Latex de contr le Consiste en des particules de latex bleu sensibilis es par des anticorps de lapin non r actifs pour 50 tests DR807 Tampon PBS pH 7 3 Mode d emploi 2 PR CAUTIONS Pour usage in vitro uniquement Ne pas congeler Les r actifs contiennent 0 1 d azoture de sodium comme agent de conservation L azoture de sodium peut r agir avec la tuyauterie en plomb ou en cuivre pour former des azotures metalliques hautement explosifs Pour pr venir une accumulation d azoture dans la tuyauterie vacuer avec un grand volume d eau Pour toute information sur les composants potentiellement dangereux veuillez vous r f rer la fiche de donn es de s curit du fabricant et l tiquette du produit en R22 Nocif par ingestion 3 CONSERVATION Ce coffret doit tre conserv 2 8 C 4 RECUEIL ET PR PARATION DES CHANTILLONS Les souches provenant d chantillons de l environnement ou d chantillons cliniques peuvent tre cultiv es sur des milieux de culture Legionella non s lectifs ou s lectifs Les Legionella necessitent en isolement primaire du chlorydrate de L cyst ine Pour s assurer que la souche est une Legionella il est n cessaire de montrer qu elle ne peut pas pousser sur un milieu ne contenant pas de chlorydrate de L cyst ine Cette confirmation peut tre pratiqu
3. lanse pour recouvrir les zones de r action Flamber l anse 6 Imprimer la carte un mouvement de rotation circulaire et observer l agglutination Ne pas d passer 1 minute et ne pas utiliser une loupe pour lire le r sultat 7 Une fois l op ration termin e liminer la carte de r action dans un d sinfectant appropri 8 Refermer les flacons et les placer de nouveau au r frig rateur b M thode en tube 1 Ramener les reactifs au latex temp rature ambiante M langer vigoureusement les suspensions de latex Expulser tout le latex de la pipette compte gouttes 2 Identifier les tubes de fa on appropri e et d livrer 0 4 ml de solution saline 0 85 dans chaque tube 3 S lectionner l aide d une oese 4 10 colonies d apparence similaire et mulsionner dans la solution saline M langer l aide d un Vortex pendant 5 secondes 5 Ajouter une goutte du latex test dans l un des cercles de la carte de r action le plus proche possible de ses extr mit s R p ter cette op ration pour le latex contr le 6 Ajouter une goutte de tampon diluant dans chaque cercle S assurer que le latex et le tampon ne se m langent pas au cours de cette tape 7 A l aide d une pipette Pasteur ajouter 1 goutte de suspension de cellules sur chacun des 2 cercles et les m langer aux r actifs au latex Couvrir toute la zone de r action 8 Imprimer la carte un mouvement de rotation circulaire et
4. A Laboratory Manual for Legionella John Wiley amp Sons Ltd Chichester UK 4 Dournon E 1988 Isolation of Legionellae from Clinical Specimen p 13 30 In Harrison T G and Taylor A G eds A Laboratory Manual for Legionella John Wiley amp Sons Ltd Chichester UK 5 Cowan and Steel s Manual for the identification of Medical Bacteria 3rd Ed Barrow G I and Feltham R K A eds 1993 p 161 163 University Press London 6 Harrison T G and Taylor A G 1988 Identification of Legionellae by Serological Methods In Harrison T G and Taylor A G eds A Laboratory Manual for Legionella John Wiley amp Sons Ltd Chichester UK 7 Data on file Oxoid Ltd 8 Brenner et al Legionella pneumophila Serogroup Lansing 3 Isolated from a Patient with Fatal Pneumonia and Descriptions of L pneumonia subsp pneumophila subsp nov L pneumophila subsp fraseri subsp nov and L pneumophila subsp pascullei subsp nov Journal of Clinical Microbiology 1988 26 1695 1703 9 Helbig J H etal Pan European Study on Culture Proven Legionnaires Disease Distribution of Legionella pneumophila Serogroups and Monoclonal Subgroups European Journal of Clinical Microbiology and Infectious Disease 2002 21 710 716 10 L ck Cet al Isolation of a Legionella pneumophila Strain Serologically Distinguishable from all known Serogroups Zentralblatt fuer Bakteriologie 1995 282 35 39 11 Fry N K and
5. Harrison T G An evaluation of intergenic rRNA gene sequence length polymorphism analysis for the identification of Legionella species Molecular Identification and Epidemiology 1998 47 667 678 12 L ck P C et al DNA Polymorphisms in Strains of Legionella pneumophila Serogroups 3 and 4 Detected by Macrorestriction Analysis and Their Use for Epidemiological Investigation of Nosocomial Legionellosis Applied and Environmental Microbiology 1995 61 2000 2003 13 Helbig J H 2003 Personal Communication L gende des symboles R f rence de catalogue Dispositif m dical de diagnostic in vitro Consulter le mode d emploi Limite de temp rature Code de lot A utiliser avant Fabricant Er EF HEA CE IFU X5058C R vis Septembre 2013 OXOID Limited Wade Road Basingstoke Hampshire RG24 8PW UK Pour toute information veuillez contacter votre distributeur local e
6. Legionella Latex Test FR DRO801M DRO802M DRO803M Le Legionella Latex Test est un test d agglutination au latex pour l identification des esp ces pr dominantes de Legionella partir de colonies sur milieu g los chez des patients suspect s de Legionellose ou partir de l environnement 1 COMPOSITION DU COFFRET Ce coffret contient l un des r actifs tests suivants DR801 r actif test pour Legionella pneumophila serogroupe 1 Consiste en des particules de latex bleu sensibilis es par des anticorps de lapin sp cifiques r agissant avec l antig ne Legionella pneumophila s rogroupe 1 Chaque coffret contient le r actif en quantit suffisante pour 50 tests OU DR802 r actif test pour Legionella pneumophila s rogroupes 2 14 Constitu de particules de latex bleues sensibilis es aux anticorps de lapin sp cifiques r agissant avec les antig nes de Legionella pneumophila s rogroupes 2 14 Il est galement capable de d tecter les antig nes de Legionella pneumophila s rogroupe 15 ATCC 35251 Chaque coffret contient du r actif en quantit suffisante pour effectuer 50 tests OU DR803 r actif test Legionella spp Consiste en des particules de latex bleu sensibilis es par des anticorps de lapin sp cifiques r agissant avec les esp ces et les s rotypes suivants L longbeachae 1 et 2 L bozemanii 1 et 2 L dumoffii L gormanii L jordanis L micdadei L anisa Chaque coffret
7. e avant ou apr s le test au latex Les cultures peuvent tre test es n importe quel stade de la croissance condition que les colonies soient de taille suffisante Cependant des cultures plus anciennes peuvent produire des r actions filamenteuses qui rendent l interpr tation plus difficile 5 M THODES Deux m thodes peuvent tre utilis es Les deux m thodes directe ou en tube donnent des r sultats fiables Si une souche a une consistance filamenteuse il est recommand d utiliser la m thode en tube a Test direct 1 Ramener les r actifs au latex temp rature ambiante M langer vigoureusement les suspensions de latex Ajouter une goutte du latex test dans l un des cercles de la carte de r action le plus proche possible de ses extr mit s R p ter cette op ration pour le latex contr le 2 Ajouter une goutte de tampon diluant dans chaque cercle S assurer que le latex et le tampon ne se m langent pas au cours de cette tape 3 En utilisant une anse pr lever une colonie d au moins 1 mm utiliser 2 colonies ou plus si celles ci sont plus petites et l mulsionner avec soin dans la premi re goutte de solution tampon Pour des r sultats optimaux s assurer que la suspension est homog ne 4 R p ter cette op ration pour les m mes colonies dans la seconde goutte de tampon 5 Pour chaque r actif latex test et contr le m langer le latex avec les suspensions et r partir en utilisant
8. essous Aucune r action crois e n a t observ e Cherri birminghamensis rubrilucens maceachernii oakridgensis L erythra L feelei L fairfieldensis L brunensis L spiritensis Pseudomonas fluorescens Pseudomonas cepacia Pseudomonas aeruginosa Aeromonas hydrophila L hackeliae L israeliensis L jamestowniensis L quinlivanii L moravica Stenotrophomonas maltophilia Bacillus subtilis Citrobacter freundii Eschericia coli Serratia marcescens Le Legionella Latex Test a t valu dans un laboratoire clinique et d hygi ne Un total de 40 souches cliniques et 279 de souches issues de l environnement ont t test es couvrant les Legionella pneumophila s rogroupe 1 14 et les Legionella non pneumophila Chaque souche a t confirm e par s rologie La performance du coffret Oxoid a t aussi compar e d autres coffrets de r actif au latex Legionella disponibles dans le commerce Les r sultats des essais sont r sum s ci dessous Le s rogroupe 15 de L pneumophila n a pour l heure pas t isol des chantillons cliniques ou environnementaux en Europe et n a t isol qu une seule fois aux Etats Unis Le s rogroupe le plus r cemment d crit ne contient qu une seule souche Lansing 3 ATCC 35251 partir de l tude de l isolat du Jena 1 un 16 me s rogroupe a t propos mais des analyses compl mentaires ont montr que la souche ne cons
9. tex est un diagnostic pr somptif Confirmer les r sultats positifs en utilisant des tests biochimiques 2 Un test d agglutination latex n gatif ne signifie pas que la culture n est pas une culture de Legionella species Il indique seulement que la culture n est pas une culture de Legionella species pouvant tre d tect e par les r actifs tests utilis s 3 Une r action crois e peut se produire entre L pneumophila s rogroupe 1 et s rogroupe 9 Si une souche de Legionella agglutine avec les 2 r actifs au latex s rogroupe 1 et 2 14 cette r action crois e do t tre suspect e 4 Des r actions crois es entre le r actif test pour Legionella sp et certains s rotypes d autres legionella e g L parisiensis L sainthelensi L steigerwaltii L wadsworthii L santicrucis L tusconensis L gratiana L cincinatiensis ont t signal es 5 Le test est con u pour s parer diff rentes esp ces et les s rotypes de Legionella Il est donc n cessaire de s assurer que les colonies test es sont bien des bacilles Gram n gatif et qu elles ne se d veloppent pas sur des milieux ne contenant pas de cyst ine Pour de plus amples informations vous pouvez vous r f rer la fiche technique jointe dans le coffret Legionella Latex Test DRO800M 8 PERFORMANCES Les r actifs du Legionella Test Kit Oxoid ont t test s pour d tecter d ventuelles r actions crois es avec les micro organismes cit s ci d
10. tituait pas un s rogroupe unique mais faisait partie du s rogroupe 4 de L pneumophila groupe monoclonal Portland 1 Des donn es internes suppl mentaires ont t r colt es et d montrent qu Oxoid Legionella Latex Kit DRO800M et DRO802M est capable de d tecter le s rogroupe 15 de Legionella pneumophila ATCC 35251 ainsi que les s rogroupes 1 14 de L pneumophila et d autres souches pathog nes de Legionella autres que L pneumophila Cependant puisque seule une souche du s rogroupe 15 est disponible pour le test il n a pas t jug appropri de renommer le r actif de latex des s rogroupes 2 14 d apr s les r sultats d un isolat unique Les Oxoid Legionella kits permettent aux utilisateurs de classer les chantillons en trois groupes s rogroupe 1 de L pneumophila s rogroupes 2 15 de L pneumophila avec r actif 2 14 et d autres Legionella species gr ce une proc dure d analyse rapide et simple ns T Oxoid Serologie Nombre _ La sensibilit globale du Legionella Latex Test OXOID est de 99 La sp cificit globale du Legionella Latex Test OXOID est de 100 9 REFERENCES 1 Sedgwick A K and Tilton R C 1983 J Clin Microbiol 17 365 368 2 Ciesielski C A Blaser M J and Wang W L 1986 Infect Immun 51 397 404 3 Dennis P J L 1988 Isolation of Legionellae from Environmental Specimens p 31 44 In Harrison T G and Taylor A G eds
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