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Informations sur la mesure de volume

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1. Pour minimiser les traces de m tal on trempe les appareils de laboratoire dans de l acide chlorhydrique 1N Dans le cas d exigences extr mes on fait bouillir les appareils en verre par la suite dans de l acide nitrique 1N pendant 1 h env pour les appareils de labora toire en mati re plastique il faut travailler temp rature ambiante Le temps d immer sion maximum ne doit pas d passer 6 heures M l acide nitrique est un oxy dant fort et provoque la fra gilisation de nombreuses mati res plastiques Les appareils doivent ensuite tre soigneusement rinc s Nettoyage en machine Le nettoyage dans des ma chines laver de laboratoire m nage les appareils de laboratoire bien plus que le nettoyage selon la m thode de trempage Les appareils ne sont en contact avec la solution d tergente que lors des phases relativement courtes pendant lesquelles celle ci est pomp e par des gicleurs ou des tubes injec teurs sur la surface nettoyer M Les appareils de labora toire l gers doivent tre prot g s par des filets afin de ne pas tre projet s et ab m s par le jet de lavage W Les appareils de labora toire sont mieux prot g s des d t riorations de leur surface quand les paniers de la machine laver sont rev tus de mati re plastique avec de l eau distill e Afin de minimiser les traces orga niques les appareils de labo ratoire sont nettoy s avec des lessives ou des solvants
2. la va peur Ce n est que de cette fa on que l on peut emp cher un collage des souillures et une d t rioration des appareils pouvant tre caus e par des restes de produits chimiques Remarque Les appareils de laboratoire utilis s doivent tre d sinfec t s avant nettoyage du fait de la possibilit d accident BRAND L utilisation d appareils de volum trie propres et exempts de graisse est une condition essentielle pour obtenir l exactitude de volume indiqu e ceci ayant une grande influence sur l exactitude des r sultats d analyse Il faut choisir le proc d de nettoyage pour les appareils Liquid Handling par ex st rilisation la vapeur selon le type et l utilisation de l appareil Vous trouverez des instructions recommand es pour le nettoyage dans le mode d emploi correspondant Les informations suivantes sont valables galement pour la volum trie en verre comme en mati res plastiques Nettoyage la main et en machine M thode d essuyage Le proc d le plus connu est la m thode d essuyage On essuie ou frotte les ustensiles souill s avec un chiffon ou une ponge imbib s d une solution d tergente Les appa reils de laboratoire ne doivent jamais tre trait s avec des produits ou ponges abrasifs qui pourraient ab mer leur sur face M thode de trempage Pour le nettoyage la main selon la m thode de trempage on plonge g n ralement les appareils de laboratoir
3. tout dispositif m dical utilis dans l examen in vitro d chantillons provenant du corps humain y compris les dons du sang et de tissus ces dispositifs appartiennent des r actifs des substances ou dispositifs de calibrage des substances ou dispositifs de contr le quipements instruments appareils syst mes ou galement des r cipients pour chantillons s ils sont sp cifiquement destin s par le fabricant tre utilis s pour des chantillons m dicaux Les dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro servent principalement fournir des informations M concernant un tat physio logique ou pathologique M concernant une anomalie cong nitale ou M permettant de contr ler des mesures th rapeuti ques BRAND Qu est ce qu on entend par dispositif m dical On entend par dispositif m dical tout instrument appa reil quipement mati re ou autre article y compris le lo giciel destin s par le fabricant tre utilis s chez l homme M des fins de diagnostic de pr vention de contr le de traitement d att nuation ou de compensation d une maladie d une blessure ou d un handicap ou bien M des fins d tude de remplacement ou modification de l anatomie ou d un processus physiologique ou M des fins de ma trise de la conception Les agents pharmacologiques ou immunologiques r gle ment s par la loi sur les m dicaments
4. D s que le mode de pipetage d sir est choisi deux boutons de fonction suffisent pour manier l appareil m Aspiration pour les deux modes op ratoires Appuyer sur le bouton de pipetage sup rieur pour aspirer le liquide pipetter La vitesse d aspiration augmente continuellement mesure que l on pousse le bouton dans l appareils E Evacuation La vitesse d vacuation augmente continuellement mesure que l on pousse le bouton dans l appareil Ecoulement libre vitesse d coulement variable r glage continu id al pour les travaux analytiques Evacuation par soufflage avec support du moteur vitesse d vacuation par soufflage variable r g lage continu id al pour le pipetage dans la culture de cellules BRAND Appareils de volum trie en verre Auxiliaires de pipetage Auxiliaires de pipetage manuels pour pipettes de petits volumes jusqu 1 ml 3 8 4 par ex le micro et le micro classic de BRAND Le micro et le micro classic sont des auxiliaires de pipetage manuels particuli rement d velopp s pour les pipettes de petits volumes micro Le micro est fr quemment utilis dans le domaine m dical par ticuli rement avec des pipettes capillaires pipettes dilution de sang pipettes pour le sucre sanguin et autres pipettes jus qu 1 ml contribuant largement r duire le risque d infection Maniement Aspiration Evacuation En tournant la molette le liqui
5. Les milieux de viscosit lev e comme par ex les solutions prot iques tr s concentr es les huiles les r sines ou les graisses Les milieux haute pression de vapeur comme par ex les alcools les thers et les hydrocarbures Maniement analogue des pipettes coussin d air R glage du volume R gler sur le volume souhait en tournant le bouton de pipetage Aspiration Enfoncer le bouton de pipe tage et le piston jusqu la but e plonger le cap la pointe dans le milieu et aspirer le milieu en laissant revenir lentement le bouton de pipetage Les milieux ayant tendance mousser comme par ex les solutions tensio actives Evacuation Enfoncer nouveau le bouton de pipetage et le piston jusqu la but e pour vacuer le milieu BRAND Appareils Liquid Handling Distribution 4 5 Doser avec des distributeurs manuels Un des travaux les plus importants et les plus fr quents dans les laboratoires m dicaux phar maceutiques et biologiques est la distribution de liquides Des techniques de travail habituelles et tr s utilis es sont le dosage la distribution et le pipetage La distribution est l vacuation r p titive de quantit s de liquide identiques Cette technique poss de un grand avantage sur le pipetage elle permet une conomie consid rable de temps vu que l aspiration r p t e n est plus n cessaire tant donn e l utilisation r pandue de cette technique de tr
6. comme l alcool Ensuite on les trempe dans de l acide chlorhydrique 1N puis on les rince soigneusement avec de l eau distill e 6 Nettoyage non agressif Afin de m nager les appareils de laboratoire on devrait les nettoyer juste apr s leur emploi temp rature basse pour une courte dur e et avec un produit l g rement alcalin Les temps d immer sion prolong s au dessus de 70 C sont viter dans des milieux alcalins tout particu li rement pour les appareils de volum trie en verre Autrement ceci pourrait mo difier les volumes par d ga gement de verre ou d truire les graduations Nettoyage Attaque de lessive sur le verre DURAN en fonction de la temp rature calcu l e partir des pertes de poids Attaque de lessive sur le verre DU RAN en fonction du pH 100 C Dur e d attaque 3h Information Tandis qu une lessive caus tique IN d gage une couche de seulement env 0 14 um d une surface en DURAN verre borosilicat 3 8 en 1 heure 70 C elle en d D sinfection Les appareils de laboratoire ayant eu contact avec du mat riel infectieux doivent tre d sinfect s avant tout autre usage entre autres pour prot ger l utilisateur Les microorganismes peuvent tre d truits par nettoyage manuelle avec des d tergents d sinfectants par nettoyage en machine par des proc d s physico thermiques 10 min d attente 93 C selon le Bureau f d
7. pays d origine sur les appareils de volum trie lt tol rance marge d erreur maximum marque dans notre cas BLAUBRAND sigle d une association par ex DIN fabricant volume nominal EE num ro de lot symbole de l unit calibrage classe temp rature de r f rence Inscriptions sur une pipette jaug e BLAUBRAND A le signe pour l attestation de conformit BRAND suivant les r gulations allemandes sur l talonnage des poids et me sures et la norme DIN 12 600 Fabricant Sigle DIN de l institut allemand Marque de BRAND pour les appareils de volum trie de qualit sup rieure Temp rature de calibrage 20 C calibrage Ex coulement temps d attente 15 sec Classe A signifie la classe de qualit la plus lev e S signifie coulement rapide Volume nominal Tol rance marge d erreur maximum Pays d origine BRAND Appareils de volum trie en verre Fabrication 1 3 Appareils de volum trie et leur classification en classes d exactitude En g n ral les appareils de volum trie sont divis s en deux classes d exactitude Classe A AS La classe A AS est la classe d exactitude la plus lev e Elle est obtenue en particulier par des appareils de volum trie en verre Une exception sont les prouvettes gradu es en mati re plastique BRAND fabriqu es partir de PMP et con ues pour des exigences les plus lev es qui so
8. t consid r e lors du cali brage Font partie de ces appareils de volum trie par ex les pipettes gradu es les pipettes jaug es et les buret tes Installation de calibrage pour pipettes gradu es Donc Ne placer les appareils en verre dans les tuves de s chage ou de st rilisation que lorsque ces derni res sont froid puis les chauffer lente ment Une fois le temps de s chage ou de st rilisation r volu lais ser les appareils se refroidir lentement dans l tuve teinte Ne jamais chauffer des appa reils de volum trie sur plaques chauffantes La temp rature de r f rence temp rature laquelle l ap pareil de volum trie doit con tenir ou faire couler le volume nominal indiqu est de 20 C La temp rature laquelle s effectue le calibrage est donc d une grande impor tance pour l exactitude des appareils de mesure Si le calibrage ne s effectue pas exactement la temp rature de r f rence le volume du liquide utilis pour le calibrage eau distill e et si n ces saire le volume de l appareil de mesure doivent tre cor rig s 20 C La r alisation des impressions Apr s le calibrage on proc de l impression par s rigra phie BRAND utilise des crans de soie pour s rigraphie exten sibles pour toutes les pipet tes gradu es les burettes les prouvettes gradu es et prouvettes bouch es En tendant les crans de soie ceux ci correspondent
9. tenus partir de mesures effectu es au moment de la fabrication De par le fait que BRAND est fabricant d appareils de volu m trie attest s conformes l assurance de la qualit BRAND ainsi que la qualit de ses produits sont surveil l es par le bureau allemand de v rification des poids et mesures Le rattachement tra abilit des valeurs mesur es aux unit s nationales et aux uni t s internationales du SI comme l exigent les normes DIN EN ISO 9000 DIN EN 45000 et ISO IEC 17025 pour la surveillance des moy ens de contr le est assur par raccordement aux talons du PTB Institut F d ral de Physique et de M trologie Ainsi toutes les exigences sont satisfaites en ce qui concerne et la surveillance des moyens de contr le avec tra abilit par raccordement l talon national et la quali fication du personnel BRAND Nettoyage X Le nettoyage des appareils de laboratoire Les appareils de laboratoire en verre ou mati re plastique peuvent tre nettoy s la main dans un bain selon la m thode de trempage ou en machine laver de laboratoire On devrait nettoyer les appa reils de laboratoire juste apr s leur emploi temp rature basse pendant une courte dur e et avec un produit l g rement alcalin Les appareils de laboratoire ayant eu con tact avec des substances in fectieuses seront tout d abord nettoy s avant le cas ch ant d tre st rilis s
10. tre ouverts afin d viter toute surpression W Les appareils de labora toire r utilisables souill s doivent tre soigneuse ment nettoy s avant de proc der la st rilisation la vapeur Si l on op rait dans le sens inverse les r sidus seraient cuits et coll s pendant la st rilisa tion la vapeur Les micro organismes prot g s par ces souillures ne seraient pas tu s de fa on effica ce de plus les produits chimiques collant encore aux parois pourraient ab mer les surfaces des appareils sous l effet des temp ratures lev es M Les mati res plastiques ne r sistent pas toutes la st rilisation la vapeur Le polycarbonate par ex perd sa solidit raison pour la quelle les tubes centrifu ger de ce mat riau ne doiv ent pas tre st rilis s la vapeur R sistance la chaleur Tous les appareils de volu m trie r utilisable BLAU BRANDS et SILBERBRAND peuvent subir une temp ra ture allant jusqu 180 C sans risque que leur volume soit ensuite modifi I faut toutefois faire attention au fait que le chauffage irr gulier des appareils en ver re ou les chocs thermiques brusques provoquent des contraintes thermiques qui peuvent causer leur casse Donc M Ne placer les appareils en verre dans les tuves de s chage ou de st rili sation que lorsque ces derni res sont froid puis les chauffer M Une fois le temps de s chage ou de st rili sation
11. demandent un contr le r gulier de l exactitude des appareils de volum trie et si Evacuer le r actif Appuyer sur la touche de pipetage jusqu la deuxi me but e besion est un ajustage La Transferpette est con struite de telle mani re que l ajustage peut tre effectu Ejecter la pointe Appuyer sur le capuchon d expulsion de fa on simple et rapide dans le laboratoire m me BRAND A Appareils Liquid Handling Pipetage 4 3 2 Pipettes multicanaux Les pipettes multicanaux fonctionnent galement selon le principe du coussin d air Avec elles 8 ou bien 12 pipetages simultan s peuvent tre effectu s En travaillant selon la m thode de microtitrage on pipette dans les plaques de microtitration de 8 x 12 cupules plaques de microtitration de 96 cupules dont les distances sont normalis es Cette technique permet entre autres la d termination d infimes quantit s de prot ines de la gamme micro et ne peut tre appliqu e de fa on rationnelle qu avec des pipettes multicanaux Les pipettes multicanaux sont particuli rement appropri es pour le transfert rationnel d chantil lons et pour les dilutions en s rie tant id ales pour le lavage des plaques de microtitration Domaines d application Techniques d analyse P M Diagnostic clinique MH Immunofluorescence nue oc M Analyse agroalimentaire M Dosage radio immunologique RIA E Immunologie M Dosage immunoenzymatique E Bioc
12. et EN ISO 9001 pour les appareils de Liquid Handling et appareils de volum trie en verre et mati re plastique Le pratique logiciel peut tre manipul de fa on intuitive Apr s d termination du type de l appareil contr ler appareil Liquid Handling ou appareil de volum trie en verre ou en mati re plastique 6 3 Service de calibrage BRAND offre un service complet comprenant calibrage et si besoin est galement r paration et ajustage des moyens de mesure aux personnes pour lesquelles le calibrage est un trop grand investissement de temps BRAND Une version de d monstration du logiciel est disponible sur Internet www brand de pour tre t l charg e ou peut tre obtenue gratuitement sur CD ROM EASYCAL vous pargne les calculs et effectue automa tiquement la documentation qui en fait partie cet effet vous n avez besoin que d une balance analytique d un ordi nateur personnel d une impri mante en option et du logiciel EASYCALTM 3 0 M Contr le des appareils ind pendamment de leur fabricant M Donn es de base de nombreux appareils d j d pos es M Contr le conform ment aux normes ISO 4787 ISO 8655 et autres EASYCAL 3 0 Proccs verbal d essai AND BRAND GMBH CO KG Produktmanagement Otto Schott Strake 25 97877 Wertheim Caract ristiques de l appareil Val obtenues du contr le gravim trique Volume Val nominale M 50 5 5 Transferpet
13. et de concentration connue jusqu ce qu un virage de couleur de l indicateur indique le point final A l aide de l quation de la r action chimique on peut calculer la quantit de la substance en solution partir du volume consomm et de la con centration de la solution titrante ainsi que du volume de l chantillon pr sent l avance Principe commun du fonctionnement des burettes adaptables sur flacon Lecture du volume Les burettes adaptables sur flacon s adaptent directement sur le flacon de r actif En d pla ant le piston vers le haut le liquide est aspir du flacon de r actif dans le cylindre de l appareil En d pla ant le pis ton ensuite vers le bas le li quide est lentement vacu travers la canule de titrage dans la solution contenant lanalyte jusqu ce que le tit rage soit termin par ex vira ge de couleur de l indicateur par ex la Burette Digitale Ill de BRAND Maniement En tournant les molettes le piston de la Burette Digitale IIl se d place vers le haut le r actif titrant est aspir La soupape de dosage inverse permet l limination de bulles d air presque sans perte de milieu Ensuite le mode de Domaines d application ital i La Burette Digitale Ill peut tre utilis e dans un grand nombre de domaines pour des solutions aqueuses et non aqueuses par ex KOH alcoolique jusqu 2N te Dig B rett TOT S curit Pour r pondre aux exigen
14. haute pression de vapeur et de liquides ayant tendance mousser log e sa capacit identifi e est automatiquement affich e Le volume doser peut main tenant tre s lectionn simple ment et rapidement Le r glage de l appareil reste conserv en logeant une nouvelle pointe DD de la m me capacit Tandis que les distributeurs manuels m caniques de par leur con struction servent uniquement pour le dosage de fractions de volu me nombres entiers sans d cimaux le HandyStep electronic permet le dosage de fractions de volume telles que 1 01 ml Les diff rents modes de travail Distribution automatique L appareil calcule la valeur moyenne sur trois fractions et continue travailler automa tiquement dans ce rythme Pipetage Travailler comme avec une pipette d placement positif Un volume d fini auparavant est aspir et vacu BRAND A Exactitude V Sur l exactitude Tol rance exactitude et coefficient de variation Plusieurs termes sont accept s quant la description de l exactitude pour les appareils de volum trie en verre est utilis le terme tol rance alors que pour les appareils Liquid Handling se sont tablis les termes statistiques exactitude et coefficient de variation definitions voir page 32 Exactitude mauvaise Les impacts sont loin du centre Pr cision mauvaise Les impacts sont plut t dispers s Exactitude bon
15. ral allemand de la Sant BGA ou bien par des proc d s chimicothermi ques Si besoin est et si le mat riau est appropri les ap pareils pourront tre st ri lis s par la suite la vapeur gagera env 1 4 um 100 C soit donc le d cuple Pour cette raison viter les tem p ratures de nettoyage au dessus de 70 C et pr f rer une alcalinit r duite c NaOH 1 mol l Dur e d attaque 1h Diagrammes de la brochure Technische Gl ser de SCHOTT Glaswerke Mayence D sinfection et st rilisation St rilisation la vapeur St rilisation la vapeur sig nifie l extinction ou l inacti vation irr versible de tous les microorganismes susceptibles se multiplier DIN 58 900 1 1986 sous l action de vapeur d eau satur e d au moins 120 C DIN 58 946 1 1987 Le temps d action minimum suivant temps d extinction suppl ment de s curit est indiqu dans la norme DIN 58 946 2 pour une temp rature de st rili sation de 121 C t 20 minutes L ex cution conforme de la st rilisation et ce jusqu la s curit biologique DIN 58 946 3 fait partie de la re sponsabilit de la personne charg e du secteur d hy gi ne Recommandations M Une st rilisation efficace la vapeur n a vraiment lieu que si la vapeur est satu r e et qu elle peut attein dre tous les endroits con tamin s sans emp chement W Les r cipients doivent toujours
16. I 200 3772 donn es indiqu es pour 0 273100 E r elle 0 189 AA NOIRS 2 Prendre en consid ration CV 000 3779 CV r el 5136 r f rant au volume nominal les indications sur le E 6 vraie 0800 ais T doivent tre converties paragraphe D rangement CV vrai 0200 T Pour le volume de contr le Ba faire du mode o de 20 ll s applique d emploi CV 108156 marges de tol rance du mode d emploi 3 Ajuster l appareil suivant 3 les i l appareil est en bon tat E EEE El a EU ORR 20 pil dnom V mode d emploi Si les valeurs calcul es de dia P kaer rude E Verd Si ces mesures ne livrent pas ceticient de vario CY 3 200 ui 0 5 le r sultat souhait veuillez De Suede lee mai PIE z DE contacter le fabricant afin de ges de tol rance ou corres pouvoir clarifier le proc d pondent celles ci l appareil et est en bon tat POI BRAND A M Surveillance de moyens de contr le 6 2 Logiciel de calibrage Parfois la surveillance des moyens de contr le conform ment GLP et ISO 9000 n est pas aussi simple que cela Non seulement il arrive facilement que l on fasse des erreurs de calcul cause des formules compliqu es la documentation des r sultats aussi entra ne parfois des difficult s Afin de vous faciliter ce travail le plus souvent difficile et fastidieux quelques fabricants de mat riel de laboratoire ont d velopp des logiciels de calibrage sp ciaux
17. conformit sont d crits dans la norme DIN 12 600 Avec le signe de conformit H le fabricant sur demande galement le Eichamt le bureau allemand de v rification des poids et mesures avec signe de conformit propre atteste que l appareil correspondant r pond aux exigences des r gu lations allemandes sur l talonnage et celles des normes relatives au sujet En r gle g n rale le signe de conformit est directement im prim sur les appareils et en ce qui concerne les articles usage unique compl mentaires sur l emballage Dans ce cas une attestation de conformit par crit n est pas donn e signe de conformit de BRAND Certificats de qualit L assurance de qualit r alis e conform ment la norme DIN EN ISO 9001 constitue la base pour la d livrance d attesta tions de calibrage d usine et les certificats de qualit sont de tels certificats Ces certificats d usine sont disponibles en tant que certificat de lot ou certificat individuel Tous les r sultats de contr le sont document s et archiv s pendant 7 ans au minimum ainsi si l on conna t le num ro de lot ou bien le num ro de s rie il est possible de recourir chaque instant des r sultats individuels obtenus partir de mesures effectu es au moment de la fabrication Attestations de conformit Attestations de calibrage Certificat de lot Tous les appareils de mesure et certificats d un lot de fa bric
18. eur des yeux Appuyer la pointe de la pipette contre la paroi d un r cipient tant tenu inclin et en laissant s couler lentement Za lexc dant ajuster le m nisque au trait circu laire Remarque s immobilise dans la pointe commence le temps d attente seulement pour classe AS M Apr s le temps d attente essuyer la pointe de la pipette en la remontant contre la paroi du r cipient Ceci permet l coulement partiel du liquide restant La petite quantit de liqui de qui reste dans la pointe ne doit pas tre ajout e par ex par soufflage ou vers e dans le r cipient cette quantit a d j t prise en consid ration lors du calibrage de la pipette Remplissage Evacuation M Aspirer le volume de liquide le plus pr cis ment possible jusqu au trait souhait pour viter des erreurs de volume M Afin de vider le capillaire avec trait circulaire va cuer le liquide par souf flage l aide d un auxiliaire de pipetage et rincer 2 3 fois avec du diluant le capillaire tant M Tenir le capillaire calibr pour contenir In horizontalement et l essuyer doucement E avec un tissu de cellulose Plonger la capillaire end to end volume com pris entre les deux extr mit s dans la solution de dilution pour lavage et r aliser l extraction Dans le cas de pipettes cali br es pour coulement partiel laisser le liquide s couler jusqu environ
19. exacte ment aux traits de jauge et c est pourquoi m me les volumes interm diaires sont d une pr cision extr me En ce qui concerne les pipettes La cuisson La cuisson des inscriptions est la derni re phase du pro cessus suivre de l bauche l appareil de volum trie fini on applique sur leur extr mit sup rieure un anneau de cou leur d nomm code couleur pour une meilleure distinction des capacit s des pipettes qui sinon seraient faciles confondre Il est d fini dans la norme DIN 12 622 quelle couleur correspond quel volume nominal Appareils de volum trie en verre Fabrication Les couleurs d imprimerie BRAND utilise des couleurs d imprimerie de qualit fabri qu es sp cialement pour les appareils de volum trie M couleur maill e bleue M couleur maill e blanche M couleur diffusion brune R alisation des impressions sur les fioles jaug es la machine 0074 4 orya CLS ENT RE y a Tr 208 re a rec varaa y w 24 1 ge ES cars Ap A A 3 Aea FENTE acii ARTE ty 524 ah iri a Tr a a AL W Een z fl t l 14 l N NHA Eprouvettes gradu es avec impressions r alis es avant cuisson Pour les appareils de volum trie BLAUBRAND classe A AS on utilise la couleur maill e bleue qui est parti culi rement appropri e gr ce son bon contraste de couleur m me avec des so
20. le travail principal au laboratoire analytique mais doit tre limit e un espace de temps raisonnable Ceci demande un maniement simple et par l r alisation rapide et conomique Les instructions de contr le et le logiciel EASYCALTM sp cia lement d velopp s cette fin en combinaison avec les appareils de volum trie avec certificat individuel ou de lot sont appropri s pour attein dre une diminution consid rable du temps investi dans le contr le Le contr le est il galement n cessaire pour les appareils de volum trie attest s conformes Comme tous les moyens de contr le les appareils de volum trie attest s conformes selon la norme DIN 12 600 sont galement soumis la surveillance des moyens de contr le Il n est pas d termin clairement et sans quivoque si pour ces appareils le pre mier contr le est obligatoire ou non Il est donc de la responsabilit de l utilisateur de d cider comment proc der Toutefois par s curit il est conseill d effectuer le pre mier contr le sur un chantil lon repr sentatif choisi par un proc d al atoire Ceci documente en m me temps l tat initial pour les contr les futurs Une alternative est dans le meilleur des cas l utilisation d appareils de volum trie avec certificat du fabricant Termes techniques des moyens de contr le Calibrage On entend par calibrage la d termination du volume r el Le calibrage
21. maniement conomisant les forces est tr s importante tant donn que ces appareils sont utilis s presque exclusivement pour les dosages en s rie Particuli rement pour la r alisation de longues s ries dans la m me position l ergonomie et le dessin des appareils jouent un r le d cisif 4 5 2 Distributeurs manuels lectroniques moteur Principe de fonctionnement En appuyant sur une touche le m canisme d aspiration ou bien d vacuation se met en marche Le piston des pointes se d place l aide d un moteur l vacuation du volume et le nombre d op rations sont pilot s par un microprocesseur Distribution Mode standard Une fois le liquide aspir celui ci est distribu de fa on r p t e dans les fractions de volume ajust es par l uti lisateur Cette combinaison d ergo nomie et de dessin permet un travail d tendu Le piston essuie toujours parfaitement les parois int rieures des pointes ce qui permet d obtenir des r sultats exactement reproductibles ind pendamment des Le HandyStep electronic co nomise du temps et vite des erreurs gr ce l identification automatique de la capacit des pointes DD PLASTIBRANDS Celles ci poss dent un code de capacit incorpor dans leur piston Une fois la pointe influences d un coussin d air Les pointes d placement direct rendent possible la distribution de liquides haute densit de liquides tr s volatils ou
22. moyes de contr le Qu est ce qu on entend par moyens de contr le On entend par moyens de contr le tous les syst mes de mesure utilis s pour la v rification des caract ristiques publi es des produits Dans tout laboratoire analytique l exactitude des moyens de contr le utilis s doit tre vidente afin d obtenir des r sultats d analyse fiables Cette exigence est valable dans une large mesure pour les laboratoires qui travaillent conform ment aux directives GMP GLP qui sont accr dit s selon la norme DIN EN 45 001 ou bien ISO IEC 17026 ou certifi s selon DIN EN ISO 9000 et suivantes Ces directives exigent l existence d instructions crites qui d crivent en d tail le proc d du contr le des moyens de contr le De toute fa on il faut indiquer pour les moyens de contr le les valeurs limites pour la tol rance d erreurs ou bien l exactitude et le coefficient de variation et il faut d terminer quelles mesures sont prendre en cas de d passement de ces valeurs limites A quel moment et quelle fr quence est il n cessaire d effectuer le contr le Dans le cadre de la surveil lance des moyens de con tr le il est obligatoire de conna tre et de documenter l exactitude et l incertitude de mesure de tous les syst mes de mesure avant de les li b rer pour l utilisation De m me il est obligatoire d effectuer des contr les p riodiques selon un rythme d fini voir EN ISO 9001 disposition
23. n appartiennent pas ces dispositifs Marquage Avec l apposition du mar quage CE sur un produit le fabricant atteste que ce produit r pond aux exigences fix es dans les directives de l UE pour les produits de ce genre et que celui ci a t soumis en tant que besoin aux contr les exig s Le fabricant appose ce sigle sur le produit et tablit en plus une attestation de conformit certifiant la concordance du produit avec les directives et normes cit es BRAND fournit exclusivement des dispositifs m dicaux de la gamme des dispositifs de diagnostic in vitro DIV A ces dispositifs appartiennent par exemple pipettes dilution de sang cellules de num ration pour globules sanguins lamelles couvre objets pour h matim tre pipettes capillaires usage unique capillaires microh matocrites cire de cachet pour h matocrites pipette s dimentation de sang pipettes de Sahli d termination de glyc mie godets pour analyseur pots urine pots pour coprologie Ech ancier de la directive DIV Depuis le 7 juin 2000 la directive DIV est applicable au niveau national A partir du 1 janvier 2002 selon toute pr vision introduction de la directive DIV dans la loi sur les dispositifs m di caux Le 7 d cembre 2003 donc apr s une p riode de cinq ans se termine le r gime transitoire pour l application de la directive DIV A partir de cette date les disposi tifs m dic
24. par ex EASYCALTM le logiciel de calibrage de BRAND amp Liquid Handling Entr e des valeurs mesur es Contr leur A Date W 08 201 Num o de l appareil Murs ppucit Transterpette Val obtenues du contr le gravim trique Type Digital Volume nominat 50 Co Lie Volume un 50 25 5 Val myf43 8206 P49103 HE 4938370 24 700 4 8710 49 8450 24 9190 4 9915 438190 24 ann 4 4830 49 0250 24 100 4 9025 No de bal s poo lA 498180 24 300 A le Sartorius LA bs Le contr le a t ettectu selon ISN DIS 8655 No de thermom tre fi Type de Uranus Gok beand x COM 2 Valeur de correction 1 0036 Entrer la parssion atmasnh rique 1000 hPa Temp de contr le 22650 C 74 30 F Fermer Entr e des valeurs limites Surveillance des moyens de contr le rendue facile on inscrit dans la fen tre Entr e des valeurs mesur es les donn es n cessit es les unes apr s les autres Tous les r sultats sont enre gistr s dans une banque de donn es L historique des contr les gestionne les ap pareils d j contr l s rendant ainsi la surveillance des moy ens de contr le plus facile Les intervalles de contr le d termin s en fonction des instructions de contr le SOPs peuvent tre d finis individuellement Le logiciel de calibrage EASYCALTM 3 0 offre une simplification de la surveil lance des moyens de contr le conform ment GLP GMP
25. r gi par la loi 10 15 sec de temps d coulement 15 sec de temps d attente Classe B 10 20 sec de temps d coulement Pipettes vacuation par soufflage env 10 sec de temps d ecoulemeni BRAND HR Appareils de volum trie en verre Maniement III Travailler avec des appareils de volum trie en verre 3 1 Pipettes en g n ral Les pipettes sont des appareils de volum trie en r gle g n rale calibr s pour couler Ex permettant de mesurer des quantit s de liquide Elles sont mesur es volum triquement lors du processus de fabrication et portent un ou plusieurs traits de jauge On distingue en r gle g n rale les types de pipettes suivants pipettes jaug es et pipettes gradu es calibr es pour couler Ex ainsi que pipettes capillaires allant jusqu 200 ul calibr es pour contenir In Pipettes jaug es Pipettes gradu es E E E E i E T I I E E I i E E I E E E i E T i E E TE LA E E L i E i E a E E E E LE E S M calibr es pour couler Ex M calibr es pour couler Ex W Un ou deux traits circulaires E graduation E gr ce la graduation possibilit de lire des E d une meilleure exactitude de mesure que les pipettes IX PO TU OL TU PR 3 FOIS gt 008 9 E z gradu es volumes partiels Pipettes capillaires Pipettes capillaires par ex intraMARK end to end BLAUBRAND par ex intr
26. r volu laisser les appareils se refroidir len tement dans l tuve CClnie M Ne jamais chauffer des appareils de volum trie sur plaques chauffantes M Observer la temp rature maximum d utilisation particuli rement pour les appareils en mati re plastique BRAND Conseils concernant la s curit XI Conseils concernant la s curit Sur la manipulation de substances dangereuses La manipulation de substan ces dangereuses comme les produits chimiques les mat riels infectieux toxiques ou radioactifs demande une grande responsabilit de la part de tous pour la protec tion de l homme et de l en vironnement Les r glements correspondants doivent stric tement tre suivis par ex les Directives pour Laboratoires distribu es par les Caisses de Pr voyance et par les bu reaux charg s de la protection de l environnement de la radioprotection et de l limi nation des d chets gale ment respecter les r gles techniques g n ralement admises comme par ex les normes DIN ou ISO BRAND Conseils importants concernant la s curit M Avant d utiliser un appareil de laboratoire l utilisateur doit v rifier que celui ci est bien appropri pour son application et doit en contr ler le bon fonction nement M Avant une r utilisation contr ler si l appareil t endommag Cette mesure est particuli rement im portante pour les appareils fonctionnant sous vide ou
27. sous pression par ex dessicateurs flacons vide ou autres W Un appareil de laboratoire d fectueux repr sente un danger ne pas sous estimer coupures par ex br lures par acide ou ris que d infection Au cas o une r paration con forme aux r gles ne serait pas rentable ou serait im possible il faudra l limi ner correctement M Tout appareil retourn en vue de r paration doit tre nettoy parfaitement et ventuellement st rilis selon les prescriptions Les appareils contamin s radioactivement doivent tre d contamin s selon les prescriptions du bu reau de radioprotection Les appareils de volum trie en verre endommag s comme les fioles jaug es les prouvettes gradu es etc ne devraient pas tre r par s L action de la chaleur pourrait provoquer des contraintes dans le verre risque de casse tr s lev l ou bien modifier le volume de fa on perma nente Il est galement danger eux de simplement couper une prouvette gradu e lorsqu elle est d fectueux Ceci pour effet de rac courcir la distance entre le trait sup rieur et le bec verseur distance d finie par la norme DIN Le danger de renverser des liquides chimiques en remplissant l prouvette s en trouve augment et la s curit de travail n est plus garantie Les d chets doivent tre limin s selon les lois existantes Ceci est gale ment valable pour les ar ticles usage unique
28. substance exac tement pes e ou bien verser un concentr liquide standard M Remplir la fiole d eau distill e jusqu la moiti environ et l agiter afin de r aliser la dissolution ou bien le m lange M Ajouter de l eau distill e presque jusqu au trait de jauge M Ajuster la temp rature de la fiole et du liquide 20 C si n cessaire placer la fiole avec son contenu dans un bainmarie pour la temp rer M l aide d une pissette ou pipette apporter de l eau distill e en quantit suffisante pour ajuster le m nisque exactement au trait de jauge Important la lecture doit tre effectu e la hauteur des yeux En plus la paroi de verre au dessus du trait ne doit pas tre mouill e M Ensuite boucher la fiole et l agiter en la retournant plus ieurs fois pour r aliser le m lange 3 5 Maniement des prouvettes bouch es et gradu es Les prouvettes gradu es sont des appareils de volum trie calibr s pour contenir In qui servent en particulier pour la mesure exacte de liquides Maniement d une prouvette gradu e M Verser un liquide dans l prouvette Ajuster le m nisque au trait souhait effectuer la lecture la hauteur des yeux M La paroi de verre au dessus du trait ne doit pas tre mouill e M Le volume lu correspond la quantit de liquide con tenue Remarque Si par la suite le liquide est r pandu par coulement dans un autre r ci
29. usag s lls ne doivent pas pr senter un danger pour l homme ou l environne ment En raison de leur compo sition particuli re les verres techniques sont liminer apr s avoir t nettoy s en respectant les prescriptions en vigueur 9946 51 Printed in Germany 0502 BRAND GMBH CO KG 97861 E Mail Il 0 33 Wertheim info brand de MU 334619 378 Allemagne Internet Fabricants de Mat riel de Laboratoire Tel 49 9342 808 0 Fax www brand de Postfach 1155 49 9342 808 236 BRAND
30. 10 mm au dessus du deuxi me trait Apr s le temps d attente Aspirer Essuyer ajuster le m nisque exacte ment au trait Dans le cas de pipettes vacuation par soufflage le temps d attente est substitu par le soufilage Le temps d coulement ne Ajuster le m nisque Evacuer doit jamais tre r duit par soufflage D s que le m nis que s immobilise dans la pointe de la pipette souffler une fois bri vement avec l auxiliaire de pipetage Aspirer Essuyer Rincer 3 4 Maniement des fioles jaug es Les fioles jaug es sont des appareils de volum trie cali br s pour contenir In qui servent en particulier pour pr parer des solutions exac tes comme par ex solutions talons et standards et dis solutions Les m thodes d analyse mo dernes exigent des fioles jau g es de petits volumes Les fioles jaug es de forme standard dans cette gamme de volumes jusqu env 50 ml ont tendance se renverser cause de leur centre de gravit lev et leur base r duite Les fioles jaug es de forme trap ze offrent une stabilit nettement am lior e Leur centre de gravit se place plus bas et leur base est plus du double de celle d une fiole standard volume gal Appareils de volum trie en verre Maniement Utilisation d une fiole jaug e pour la pr paration d une solution talon M Placer dans la fiole jaug e la quantit de
31. 4 11 1 Le motif L exactitude de mesure d ap pareils de volum trie peut tre modifi e r sultant par ex de l utilisation de produits chimiques agressifs des proc d s et de la fr quence du nettoyage Etant donn que l exactitude exig e pour les mesures d pend de fa on consid rable des conditions d application l utilisateur lui m me doit d finir le rythme des contr les Des intervalles de surveillance typiques sont par ex en fonc tion du type de l appareil allant de tous les 3 mois jusqu tous les 3 ans Quel est le proc d selon lequel s effectue le contr le Le contr le des appareils de volum trie s effectue de fa on gravim trique dans le cas des appareils Liquid Handling selon la norme ISO 8655 et dans le cas des appareils de volum trie en verre selon ISO 4787 Toutefois la r alisation du contr le et les calculs ne sont pas si faciles que a BRAND met disposition pour tous les appareils de volu m trie des instructions de contr le qui d crivent un point apr s l autre le proc d du contr le permettant le calcul l aide de simples tableaux Outre cela BRAND offre un logiciel qui effectue tous les calculs n cessaires les enre gistre dans une banque de donn es et imprime les r sul tats dans un proc s verbal d essai au choix de l utilisateur Investissement de temps pour le contr le La surveillance des moyens de contr le ne doit pas devenir
32. Travailler avec des appareils de laboratoire un manuel 1 BRAND sur la mesure de volumes FIRST CLASS BRAND A Pr face La mesure de volumes est d une importance primordiale au laboratoire L utilisateur doit clarifier l exactitude n cessaire pour la r alisation d une mesure concr te partir de cette valuation il peut choisir l appareil qui convient sa mesure de volume Des mesures exactes exigent des appareils de mesure exacts et la manipulation correcte Pour une meilleure compr hension des appareils de volum trie utilis s dans le laboratoire et leur maniement une explication des termes les plus importants de classification et d utilisation est donn e dans la suite l ex emple des appareils de laboratoire BRAND La brochure informations sur la mesure de volumes a pour but de mettre disposition du lecteur une vision g n rale des appareils de volum trie Elle ne substitue en aucun cas le mode d emploi des appareils d crits De toute fa on il est indispensable que vous lisiez le mode d emploi fourni avec l appareil avant mise en service ceci pour votre propre s curit et succ s Si vous d sirez d obtenir des informations compl mentaires n h sitez pas nous contacter Comment contacter BRAND Vous pouvez nous joindre par t l phone t l copie e mail ou Internet T l phone 49 9342 808 0 T l copieur 49 9349 808 236 E Mail info brand de Interne
33. a l g ret sont les avantages les plus d cisifs des appareils de volum trie en mati re plastique BRAND fournit les appareils de volu m trie en mati re plastique avec graduations en relief ou imprim es bleues assurant un bon contraste appareils de volum trie en mati re plastique E PLASTIBRAND BRAND Appareils de volum trie en verre Mesure de volumes IL Mesure de volumes Les appareils de volum trie sont exactement calibr s et servent mesurer pr cis ment des volumes d finis Les b chers fioles Erlenmeyer ampoules d canter etc ne font pas partie des appareils de volum trie Ces appareils ne sont pas exactement calibr s la graduation ne sert que pour une orientation rapide Le m nisque comment est il form Le terme m nisque est uti lis pour d crire la courbure de la surface d un liquide Le m nisque peut prendre une forme convexe ou con cave r sultant de la tension superficielle d un liquide Si les mol cules du liquide subissent une force d attrac tion plus forte de la part de la paroi de verre force d adh sion que de la part des au tres mol cules du liquide force de coh sion le m nisque prend une forme con cave C est dire le liquide monte pr s des bords du r cipient C est le cas par ex emple des solutions aqueu ses Si le diam tre d une pipette est suffisamment petit par ex celui d une pipette ca
34. aEND BLAUBRAND M calibr es pour contenir In M calibr es pour contenir In W Un trait circulaire E sans trait M volume compris entre l extr mit et le trait circulaire M volume compris entre les deux extr mit s BRAND Appareils de volum trie en verre Maniement 3 2 Pipettes fr quemment utilis es IFRRET FEU EF r TTT 1 POS D EN ut en mn on oo MT i Bj LL In a mam Dsssane CET qq g t on a pt LEE DE D LIT j mn t 7 _ ll HULL NN mA LURU LELUEI WU x p s r CEA W ANT Pipette jaug e Pipette gradu e Pipette gradu e Pipette pour analyses Pipette gradu e 1 trait coulement total coulement partiel enzymatiques culture de tissus coulement partiel mod le court ie outil a aa amall 1i LECLCLLELCLECELCELCLCLCECCLECELCI i p kai Ped bed bad La C E EN e e oj i 7 ia ba pej dr bal pad a 1h pal C apgr Pipette seringue Pipette gradu e Pipette de Sahli Pipettes dilution Pipettes capillaires s rologie de sang usage unique grand orifice de la talonnables vue partielle pointe BRAND A Appareils de volum trie en verre Maniement 3 3 Maniement des pipettes 3 3 1 Pipettes calibr es pour coulement Ex Pipetage correct avec des pipettes jaug es et gradu es Accessoire auxiliaire auxil
35. ation portent le m me num ro de lot Le certificat indique pour ce lot la valeur moyenne l cart type et la date de d livrance Certificat individuel L appareil de mesure et le certificat portent en plus du num ro de lot un num ro de s rie individuel Le certificat indique le volume mesur l incertitude de mesure et la date de d livrance Attestation de calibrage officiel certificat Cette attestation de calibrage est d livr e par le bureau alle mand de v rification des poids et mesures et est reconnue en Allemagne et dans beaucoup d autres pays L appareil de mesure et l attestation de calibrage portent un num ro de s rie individuel pour l identification et l ann e de d livrance Service de Calibrage Allemand Le Deutscher Kalibrierdienst DKD Service de Calibrage Allemand fut fond en 1977 comme institution commune de l Etat et de l conomie laquelle repr sente le lien entre les moyens de mesure des laboratoires de l industrie de la recherche des instituts de contr le ainsi que des pouvoirs publics et les talons nationaux du Physikalisch Technische Bundesanstalt PTB Institut F d ral de Physique et de M trologie L attestation de calibrage DKD avec le signe de calibrage DKD documente en tant que certificat officiel de haut niveau le rattachement des valeurs mesur es tra abilit des talons nationaux et internationaux et avec cela des unit s du SI comme l exige
36. aux de diagnostic in vitro mis sur le march doivent porter le marquage GE Jusqu au 7 d cembre 2005 donc pendant une p riode additionnelle de deux ans il sera possible de mettre en service des dispositifs DIV tant d j le 7 d cembre 2003 sur le march ou chez l utilisateur et ne portant pas le mar quage CE 7 d cembre 2005 fin de la p riode de mise en service BRAND r pond d j en ce moment aux conditions fonda mentales pour munir des dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro du marquage CE sous sa propre responsabilit L apposition du marquage CE sur cette gamme de produits n est pas encore permise car les conditions l gales ne sont pas tablies ce jour Les prescriptions nationales pour l apposition du marquage CE sur des produits n existent que pour les dispositifs m dicaux qui cependant ne se trouvent pas dans notre gamme de produits 6 IX L assurance de qualit Assurance de qualit L assurance de qualit est indispensable et devrait dans le cas id al commencer d j avec la phase de projet d un produit et accompagner son d veloppement jusqu ce que celui ci soit pr t pour la fabri cation en s rie ainsi que la fabrication ult rieure Ceci assure l utilisateur la plus grande s curit pos sible lors du travail avec les appareils de laboratoire et la fiabilit de ses analyses Assurance de qualit chez BRAND L assurance de qualit BRAND commence d j ave
37. avail l ergonomie et le dessin des appareils jouent un r le essentiel Les travaux de distribution au laboratoire sont rarement r alis s avec des syst mes compl te ment automatiques liminant toute manipulation manuelle Pour ces travaux de routine on uti lise en r gle g n rale des distributeurs manuels On distingue deux types de distributeurs manuels WE distributeurs manuels totalement m caniques WE distributeurs manuels lectroniques moteur Principe de fonctionnement possible d ajuster des volumes interm diaires Le principal avantage de ces appareils est leur construction robuste le d savantage est souvent la fatigue due aux efforts muscu laires Le principe de fonctionnement prouv du distributeur manuel est galement le d placement positif Les milieux probl ma Dans le cas de distributeurs manuels m caniques le r glage du volume s effectue l aide d une cr maill re o s engr ne un pignon pas pas en combi naison avec les pointes d placement direct Pour cette raison ces appareils ne permet tent qu un nombre d termin d op rations de distribution clairement d finies I n est pas 4 5 1 Distributeurs manuels m caniques par ex le HandyStep de BRAND pointes DD diff rentes tiques comme par ex les so lutions haute pression de vapeur de viscosit lev e ou les milieux moussants ne repr sentent aucun probl me pour le distributeur manuel E
38. base blanche La lecture du volume de la solution titr e se fait la hauteur des yeux Etant donn e la dur e du titrage le temps d attente classe AS 30 sec s est d j coul en r gle g n rale pendant le processus de titrage Essuyer la goutte ventuellement suspendue la pointe de la burette du robinet contre la paroi int rieure du r cipient pes e pour l ajouter elle fait partie du volume de la solution titr e Avant de proc der un nouveau titrage ajuster nouveau le point z ro le processus de titrage devant toujours commencer au point z ro Afin d effectuer le titrage on a besoin part de la burette de fioles jaug es de pipettes jaug es et de fioles Erlenmeyer lt 3 1 Maniement des pycnometres Appareils de volum trie en verre Maniement Les pycnom tres servent en particulier pour d terminer la densit de liquides pas tr s visqueux C est pourquoi ils ne peuvent tre consid r s au sens propre comme faisant partie des appareils de volum trie Cependant ils sont calibr s pour contenir In ce qui est galement entre autres le cas des fioles jaug es On distingue deux types de pycnom tres Pycnom tre Pycnom tre avec bouchon thermom tre et capillaire lat ral Maniement Remarque M D terminer le poids vide Dans le cas de liquides d une du pycnom tre sec pression de vapeur lev e il est recommand d utiliser le E Remplir le pycnom tre de
39. c des auxiliaires de pipetage Comme d j d crit dans le chapitre sur les pipettes il faut utiliser un auxiliaire de pipetage en travaillant avec des pipettes Selon l alin a 8 du r glement Allemand de Pr vention des accidents Caisse de Pr voyance allemande pour le Service de Sant et l Assistance Publique et l alin a 3 de la loi allemande GSG sur la s curit des appareils il est interdit de pipetter la bouche Ceci est valable aussi bien pour l aspiration que pour l vacuation du milieu On distingue deux types d auxiliaires de pipetage Auxiliaires de pipetage manuels Auxiliaires de pipetage moteur Auxiliaires de pipetage manuels 3 8 1 La poire pour pipetage Auxiliaire de pipetage standard classique pour les pipettes jaug es et les pipettes gradu es Maniement Introduire la pipette Presser sur A et comprimer la poire vacuation de l air Presser sur S et aspirer le liquide jusque l g rement au dessus du trait souhait En pressant sur E laisser le liquide s couler jusqu au trait souhait ou bien vacuer la pipette Important Dans le cas de pipettes vacuation par soufflage blow out fermer l orifice de la soupape lat rale 3 8 2 Auxiliaires de pipetage modernes par ex le macro de BRAND Le macro est un auxiliaire de pipetage manuel Gr ce son principe moderne de construction il peut tre consid r comme le successeur id al d
40. c la phase de projet d un produit et ac compagne son d veloppement jusqu ce que celui ci soit pr t pour la fabrication en s rie Les contr les permanents du proc d de fabrication sur toute sa longueur ont pour but de produire des appareils de volum trie diff rant le moins possible de la valeur vraie exactitude et dont les valeurs individuelles coeffi cient de variation ont une plage de dispersion la plus r duite possible Pour finir le r sultat de ce Contr le sta tistique de processus SPC est contr l par un essai sur pr l vement selon la norme DIN ISO 3951 au cours du contr le final Le proc d du syst me d as surance de qualit r alis chez BRAND et certifi selon la norme DIN EN ISO 9001 est une combinaison de sur veillance de proc d s et d es sais sur pr l vement Le niveau de qualit acceptable N Q A est de 0 4 Cela sig nifie que les valeurs limites donn es sont observ es avec une certitude statistique de 99 6 Tous les moyens de contr le utilis s dans l assurance de qualit sont contr l s inter valles r guliers et raccord s aux talons nationaux du PTB Institut F d ral de Physique et de M trologie Tous les r sultats de contr le sont document s et archiv s pendant 7 ans au minimum ainsi si l on conna t le num ro de lot ou bien le num ro de s rie il est possible de recourir chaque instant des r sultats individuels ob
41. ces de s curit la Burette Digitale Ill est galement pourvue d un syst me d jection de s curit Dans le cas de burettes adap tables sur flacon le volume de la solution titr e peut tre lu directement dans l affichage de la burette des erreurs de lecture du m nisque sont ainsi vit es et il n est plus besoin de respecter des temps d at tente titrage est s lectionn et le point z ro est ajust en appu yant sur les touches de fonc tion correspondantes En tournant les molettes le pis ton se d place vers le bas et le r actif titrant est vacu travers la canule de titrage Mat riaux Les parties touchant au liquide sont en verre borosilicat PTFE FEP PFA ETFE platine iridi c ramique AIO et PP capuchon vis de la canule Surveillance des moyens de contr le Dans le cadre de la surveil lance des moyens de contr le conform ment ISO et aux directives GLP le contr le et si besoin est le recalibrage de la Burette Digitale IIl peuvent tre effectu s d une mani re facile et rapide dans le labo ratoire de l utilisateur Appareils Liquid Handling Pipetage 4 3 Pinetter avec des pipettes coussin d air Qu est ce qu on entend par pipetage Le pipetage est l aspiration et l vacuation exactes de liquides La pipette coussin d air sert pipetter des liquides dans la gamme du microlitre Elle fonctionne selon le principe du coussin d a
42. de est aspir ou bien vacu micro classic Gr ce sa forme ergonomique le micro classic est particu li rement appropri pour les travaux au microscope dans le laboratoire FIV et le laboratoire m dical L adaptateur avec tuyau d aspiration est autoclavable 121 C R duction du risque d infection Le micro est autoclavable en corps 121 C et poss de une touche particuli re pour jecter les pipettes contamin es sans contact A ration Le bouton poussoir sert pour l a ration afin que le liquide dans les pipettes calibr es pour coulement Ex puisse s couler librement Ejection La touche large sert pour jecter sans les toucher les pipettes utilis es Maniement toujours introduire le capillaire par l extr mit courte A ration Appuyer sur le bouton d a ration Selon l alin a 8 du R glement allemand de Pr vention des accidents il est interdit de pipetter la bouche ou avec un tuyau buccal cause du risque d infection lev Par cons quent utiliser un auxiliaire de pipetage BRAND Aspiration Tourner la molette de r glage vers l arri re jusqu ce que le liquide atteigne exactement le trait souhait Evacuation Dans le cas de pipettes calibr es pour contenir In tourner la molette de r glage vers l avant jusqu ce que le liquide soit vacu Rincer la pipette au moins 3 fois Dans le cas de pipette
43. doit tre effectu de fa on rapide et simple les sources d erreurs devraient tre vit es BRAND offre gratuitement des instructions de contr le d taill es pour tous les appareils de volum trie Ajustage On entend par ajustage la correction de l cart de la valeur mesur e par rapport la valeur vraie Dans les pro c d s traditionnels l ajustage s effectue en r gle g n rale en tournant de fa on ind fi nie une vis de r glage Apr s le r glage il est n cessaire de proc der un deuxi me contr le du volume Dans la plupart des cas le r glage du volume n est pas correct apr s la premi re tentative il faut renouveler les op ra tions en plusieurs tapes Dans le cas des appareils Liquid Handling de BRAND pourvus de la technique Easy Calibration par contre l ajustage peut tre effectu apr s le contr le gravim trique du volume de fa on directe et pr cise en une tape et en tr s peu de temps BRAND O Surveillance de moyens de contr le 6 1 Proc d du contr le de volume par ex Transferpette Digital 20 200 Nous recommandons un contr le de la Transferpette une fois tous les 3 12 mois comme d crit par la suite En fonction de la fr quence d utilisation de l appareil et des milieux utilis s ces contr les peuvent tre effectu s plus souvent A Pr paration 1 2 3 D terminer le type de l appareil et le volume nominal Lire le n
44. e dans une solution d tergente pen dant 20 30 minutes tem p rature ambiante Puis on les rince avec de l eau de vil le et ensuite avec de l eau distill e N augmenter le temps d immersion et la temp rature que dans le cas de souillures tenaces Bain ultrasons Les bains ultrasons peuvent tre utilis s aussi bien pour nettoyer les appareils en verre que pour ceux en mati re plastique Il faut cependant viter tout contact direct avec la membrane Appareils de laboratoire en verre Pour des appareils en verre les temps d immersion prolong s au dessus de 70 C sont viter dans des milieux alcalins Autrement ceci pourrait modifier les volumes par d gagement de verre ou d truire les graduations Appareils de laboratoire en mati re plastique Les appareils en mati re plas tique ont g n ralement des surfaces lisses et non mouil lables ce qui permet en r gle g n rale de les nettoyer facilement avec un produit l g rement alcalin Les appa reils de laboratoire en poly styr ne et polycarbonate particuli rement les tubes centrifuger ne doivent tre nettoy s qu la main et avec des d tergents neutres Un temps d immersion prolong influence la solidit m me s il s agit de d tergents l g rement alcalins La r sistance chimique des mati res plas tiques utilis es est v rifier pour chaque cas individuel Nettoyage dans les analyses de traces
45. e la poire de pipetage tradition nelle Un syst me de soupapes sensible aux changement de pression fait de l ajustage exact du m nisque un jeu d enfant Maniement Aspiration Evacuation de l air Comprimer le soufflet d aspiration D placer le levier de pipetage vers le haut BRAND Attention Garder la poire pour pipetage dans son tat original non comprim e ne pas laisser le liquide entrer dans la poire Le macro est l auxiliaire appropri pour toutes les pipettes jaug es et les pipettes gradu es de 0 1 100 ml Une membrane filtrante prot ge le syst me contre les infiltrations de liquide L appareil complet est autoclavable 121 C Ajustage du m nisque Evacuation D placer le levier de pipetage vers le bas Le m nisque de scend d s que vous rel chez le levier le m nisque s immo bilise Pour vacuer le liquide d placer le levier de pipetage compl tement vers le bas Soufflage fonction blow out Dans le cas de pipettes va cuation par soufflage apr s l coulement libre appuyer une fois bri vement sur le petit soufflet de caoutchouc 00 Appareils de volum trie en verre Auxiliaires de pipetage Auxiliaires de pipetage moteur 3 8 3 par ex l accu jet de BRAND L accu jet est un auxiliaire de pipetage moteur particuli re ment appropri pour le pipetage de longues s ries par ex dans la culture de cellules Un syst me de
46. e pipette Conditionner la pipette aspirer le liquide d essai cinq fois et l vacuer Ce proc d augmente l exactitude du contr le N OO O1 Pr rincer une fois la pointe de pipette Placer le r cipient pes e sur la balance et la remettre z ro Enlever le r cipient pes e de la balance Evacuer l chantillon dans le r cipient pes e Ce faisant vider totalement la pointe de pipette l aide de la surcourse 8 Placer le r cipient pes e sur la balance prendre note de la valeur obtenue de la pes e 9 Remettre la balance z ro 10 R p ter les n 2 9 quatre fois et inscrire les valeurs obtenues des pes es de 100 50 et 10 du volume nominal au proc s verbal d essai Valeurs du contr le gravim trique 21 5 C Z 1 0032 Plusieurs termes sont accept s quant la description de l exactitude pour les appareils de volu m trie en verre est utilis le terme tol rance alors que pour les appareils Liquid Handling se sont tablis les termes statistiques exactitude et coefficient de variation Tol rance La tol rance d finie dans les normes correspondantes in dique la d viation maximale admissible de l appareil par rapport la valeur vraie Exactitude L exactitude E est la diffe rence entre la valeur moyenne V et la valeur vraie V se r f rant la valeur vraie en pour cent Elle est une me sure de l erreur
47. f rieur Ensuite com mence le temps d attente Le temps d attente Le temps d attente commence au moment o le m nisque s immobilise dans la pointe ou bien au niveau du trait de jauge inf rieur Pendant le temps d attente des restes de liquide s coulent de la paroi de verre c est pourquoi le m nisque monte nouveau l g rement Apr s le temps d attente le m nisque sera r ajust si n cessaire exac tement au trait de jauge inf rieur et la pointe de pipette sera essuy e contre la paroi du r cipient Pour une mesure exacte de volumes avec pipet tes ou burettes il est n ces saire de respecter le temps d attente prescrit Exemple de temps d coulement et d attente se r f rant aux diff rentes classes de pipettes pipette jaug e de 25 ml Classe A attest e conforme 25 50 sec de temps d coulement Classe AS attest e conforme Cas particulier des pipettes vacuation par soufflage Dans le cas de pipettes vacuation par soufflage il n existe pas de temps d at tente D s que le m nisque s immobilise dans la pointe on souffle une fois bri ve ment au lieu d attendre Ces pipettes sont d sign es par la d nomination ausbla sen par soufflage ou blow out imprim e sur le corps de la pipette Les pipet tes vacuation par soufflage ne sont pas attest es con formes C est pourquoi elles ne peuvent pas tre utilis es dans le secteur
48. ge Remarque importante de celui ci Avant d utiliser un distributeur adaptable sur flacon l utili sateur doit v rifier obligatoirement que celui ci est appro pri pour les r actifs doser Ces donn es peuvent en r gle g n rale tre obtenues partir du mode d emploi ou des documents d information mis disposition par le fabri cant En cas de doute se renseigner directement aupr s 4 1 2 Distributeurs avec piston joint d tanch it adaptables sur flacon par ex le seripettor de BRAND Le piston est pourvu d un joint d tanch it Gr ce sa construction ce distributeur adaptable sur flacon est l appareil appropri pour entre autres les travaux de dosage dans la routine quotidienne Dans le cas des appareils fonctionnant selon ce principe l usure du joint est in vitable Si n cessaire l unit piston cylindre unit de dosage peut tre remplac e de fa on simple et rapide Les forces d actionnement pour le remplissage du seripettor sont minimis es gr ce l action de levage automatique d un ressort Domaines d application Le domaine d application est dans la routine quotidienne pour doser des milieux non probl matiques comme par ex les acides faible con centration tampons biologi ques milieux pour la culture de cellules d tergents biolo giques solvants polaires et m me les fortes lessives alca lines Le seripettor est par ticuli rement a
49. himie FAERIE A SP0 yl M Dilution de cultures cellulaires Se MB Culture de cellules Tanileipetie 13 TAAITITITIL par ex les Transferpette 8 12 de BRAND pour la gamme de volume de 0 5 pl 300 pi Em Les caract ristiques principales des Transferpette 8 12 sont pr cision ergonomie l g ret et facilit de Transferpette manipulation Maniement U hi ye aa Fi k Hii ii vz Adjust I 15 1e m iiini fini SES 2 g gt D C4 i NN w FF Aspirer le r actif Evacuer le r actif Ejecter les pointes Appuyer sur la touche de Appuyer sur la touche de Appuyer sur le capuchon pipetage jusqu la premi re pipetage jusqu la deuxi me d expulsion BR M W IR IR but e plonger les pointes but e dans le r actif et laisser la touche de pipetage revenir lentement Calibrage Les directives ISO et GLP besion est un ajustage Les effectu de fa on simple et demandent un contr le Transferpette 8 12 sont rapide dans le laboratoire r gulier de l exactitude des construites de telle mani re m me R glage du volume appareils de volum trie et si que l ajustage peut tre BRAND DE Appareils Liquid Handling Pipetage 4 4 Pinpetter avec des pipettes d placement positif L o les pipettes coussin d air touchent aux limites de leurs performances l efficacit des pipettes d placement positif se fait ressentir Elles sont particu
50. iaire de pipetage Remplissage de pipettes Evacuation de pipettes D M l aide d un auxiliaire ll M Tenir la pipette vertica de pipetage aspirer le iti lement appuyer la pointe liquide dans la pipette S de la pipette contre la pa jusqu environ 5 mm F roi d un r cipient tant au dessus du trait du a tenu inclin et laisser volume nominal g s couler le contenu ETES Vars o M Essuyer et s cher l ext W D s que le m nisque I 3 3 2 Pipettes calibr es pour contenir In par ex pipettes capillaires jusqu 200 pl Pipetage correct avec des pipettes capillaires Accessoire auxiliaire auxiliaire de pipetage Les pipettes capillaires sont des pipettes d un tr s petit diam tre int rieur L aspira tion du volume de liquide s effectue avec un auxiliaire de pipetage ou automatique ment par capillarit Apr s l vacuation la pipette capil On distingue les types sui vants de microcapillaires usage unique capillaires dont le volume est compris entre l extr mit et le trait circulaire comme par ex les capillaires intraMARK et capillaires dont le volume est compris entre laire doit tre lav e et rin c e plusieurs fois avec du diluant les deux extr mit s end to end comme par ex les capil laires intraEND rieur de la pointe de la n pipette avec un tissu de 0 cellulose M Tenir la pipette vertica lement le niveau du liquide tant la haut
51. ibrage des appareils de volum trie s effectue par des syst mes informatis s de fa on enti rement automati que avec la meilleure pr ci sion possible BRAND Les appareils de volum trie BLAUBRAND et SILBER BRAND peuvent donc subir une temp rature allant jusqu 180 C dans les tuves de s chage ou de st rilisation sans risque que leur volume soit modifi Ebauches de foiles jaug es Calibrage pour contenir In Dans le cas des appareils de volum trie calibr s pour con tenir In la quantit de liquide contenue correspond exacte ment au volume imprim sur l appareil La quantit de liqui de coul e par contre est diminu e de la quantit de liquide qui reste sur la paroi en raison du mouillage Font partie de ces appareils de volum trie par ex les prou vettes gradu es les fioles jaug es et les pipettes capil laires allant jusqu 200 pl Il faut toutefois faire attention au fait que le chauffage ir r gulier des appareils en verre ou les chocs thermi ques brusques provoquent des contraintes thermiques qui peuvent causer leur casse val M UE LI ET PUY D ii mo x Calibrage pour couler Ex Dans le cas des appareils de volum trie calibr s pour cou ler Ex la quantit de liquide coul e correspond exacte ment au volume imprim sur l appareil La quantit de liquide qui reste sur la paroi en raison du mouillage a d j
52. ir air interface tige de pipette pointe usage unique coussin d air r actif Principe commun de fonctionnement En d pla ant le piston dans la tige de pipette vers le haut et le bas il se produit un vide partiel ou bien une surpres sion dans la tige De cette Avantage Pas de mouillage de l appa reil vu que le liquide entre seulement dans la pointe qui n est utilis e qu une seule fois Ainsi est assur un tra 4 3 1 Pipettes un canal fa on le liquide est aspir dans la pointe ou bien va cu Le liquide est s par du piston et de la tige par un coussin d air vail sans r sidus ce qui est particuli rement important pour les domaines dans les quels il faut travailler de fa on st rile ou sans contamination par ex la Transferpette de BRAND pour la gamme de volume de 0 1 ul 5000 ul R glage du volume Que ce soit dans le laboratoire de routine ou dans la recherche pr cision et fonctionnalit sont les carac t ristiques qui devraient tre standard pour le pipetage avec des pipettes coussin d air Les caract r istiques principales de la Transferpette sont pr cision ergonomie l g ret et facilit de manipulation Maniement Aspirer le r actif Appuyer sur la touche de pi petage jusqu la premi re but e plonger la pointe dans le r actif et laisser la touche de pipetage revenir lentement Calibrage Les directives ISO et GLP
53. li rement appropri es pour les liquides visqueux ou peu visqueux les liquides moussants ou haute pression de vapeur capillaire en verre piston d placement positif r actif Principe de fonctionnement Contrairement aux pipettes coussin d air le piston de la pipette d placement positif est en contact direct avec le liquide pipetter Le piston bien plac essuie toujours parfaitement les parois des capillaires pointes ceci jus qu la derni re goutte dont la sortie de l orifice est bien visible Gr ce ce principe on obtient des r sultats exac tement reproductibles ind pendamment de la vitesse du pipetage Les capillaires ou bien les poin tes n ont pas besoin d tre jet s apr s chaque op ration de pipetage tant donn que le mouillage r siduel est mi nime et peut tre n glig en r gle g n rale Toutefois dans le cas o aucun entra nement de liquide n est admissible par ex avec des milieux in fectieux ou radioactifs il est recommand d utiliser une pipette coussin d air pour le travail avec des pointes usage unique par ex le Transferpettor de BRAND pour la gamme de volume de 1 pl 10 ml om M ttor a G E Domaines d application Avantage Un maximum de pr cision et un travail rapide Les pointes ou bien capillaires peuvent tre utilis s plusieurs fois La lecture du m nisque n est plus n cessaire lors du pipe tage
54. logation pour le secteur r gi par la loi selon les r gu lations allemandes sur l ta lonnage des poids et mesures disposition 12 Les d tails concernant le pro c d d attestation de con formit sont d crits dans la norme DIN 12 600 Comment reconna tre l attestation de conformit En g n ral l appareil porte m me le signe de conformit soit un H stylis ainsi que le signe de celui qui atteste la conformit Pour les produits usage unique et les appa reils de Liquid Handling le H est visible sur l emballage et ou sur les papiers d accom pagnement Remarque Exactitude bonne Tous les impacts sont pr s du centre donc pr s de la valeur vraie Pr cision bonne Tous les impacts sont pr s les uns des autres Qui atteste la conformit En imprimant le signe de con tormit H et le signe du fa bricant pour notre cas B pour BRAND le fabricant sur demande galement le bureau allemand de v rifica tion des poids et mesures atteste que l appareil correspondant r pond aux exigences des r gulations allemandes sur l talonnage et celles des normes relatives au sujet entre autres les pipettes dilution de sang les cellules de num ration pour globules sanguins les thermom tres et les pycnom tres ne sont pas attest s conformes mais peuvent toujours tre soumis un talonnage o Surveillance de moyens de contr le VI La surveillance des
55. lutions co lor es Cette couleur combine r sistance et lisibilit de fa on optimale De fa on analogue la classe A AS les appareils de volu m trie de la classe B de la s rie SILBERBRAND sont fournis avec des inscriptions de couleur maill e blanche ceux de la s rie SILBER BRAND ETERNA de couleur diffusion brune Le proc d de cuisson soig neusement contr l est une condition essentielle en plus du choix des couleurs d imprimerie de qualit sp cialement fabriqu es cet effet pour une graduation r sistante sur les appareils de volum trie Cela signifie chauffage et refroidissement contr l s des appareils de volum trie gradu s La temp rature maximale est entre 400 C et 550 C selon le type de verre BRAND Appareils de volum trie en verre Fabrication 1 2 L appareil de volum trie avec ses inscriptions Pour la d termination exacte de volumes en laboratoire il est conseill de n utiliser que des appareils de volum trie de haute qualit fabriqu s partir d un verre chimiquement r sistant conform ment aux normes DIN Il est absolument n cessaire de respecter les conditions de calibrage Les inscriptions et la graduation doivent tre facilement lisibles et r sistantes Conform ment aux prescrip En outre les indications suivantes peuvent tions de l institut allemand de figurer sur l appareil normalisation DIN les indica tions suivantes doivent figurer
56. n fonction du type d application le distributeur manuel peut tre utilis avec les pointes DD d placement direct de diff r entes capacit s Exemple des possibilit s de combinaison avec des Op rations et gammes de volume Position piston Pointe DD ml 0 5 1 25 Nombre d op rations 9 Volume de dosage ul 20 10 30 40 125 50 2 5 250 5 0 500 12 5 250 750 1250 25 0 2500 50 0 5000 Le distributeur manuel simpli fie le pipetage en s rie en vacuant en plusieurs fractions de volume un liquide pr alab lement aspir En fonction de la capacit des pointes DD utilis es qui vari ent entre 10 ul et 5 ml jus qu 49 op rations de pipeta ge peuvent tre r alis es sans remplir l appareil nouveau Ces donn es sont calcul es partir de la position ajust e du bouton coulissant 1 5 en combinaison avec le type de pointe utilis Les pointes d placement direct sont disponibles en 7 capacit s diff rentes non st riles ou st riles part les pointes DD BRAND 6 Appareils Liquid Handling Distribution Ergonomie et dessin Les travaux r p titifs de forme intense avec des appareils manuels peuvent provoquer de nombreux probl mes musculaires divers gards ils pr sentent un risque particuli rement lev pour la musculature de la nuque et des paules ainsi que celle des bras et des pouces Surtout pour les distributeurs manuels l exigence concernant un
57. ne Les impacts sont en moyen ne r partis r guli rement au tour du centre Pr cision mauvaise Pas d erreur grossi re mais les impacts sont plut t dis pers s Exactitude mauvaise Bien que les impacts soient pr s les uns des autres le but valeur vraie n est quand m me pas atteint Pr cision bonne Tous les impacts sont pr s les uns des autres Si la tol rance ou bien l exactitude et le coefficient de variation des appareils de volum trie se situent dans les marges d finies par les normes DIN et ISO ils peuvent tre attest s conformes L attestation de conformit L attestation de conformit doit garantir une qualit uni forme et constamment lev e qualit dans le sens d un r sultat de mesure exact R gulations sur l talonnage et attestation de conformit Les r gulations allemandes sur l talonnage des poids et mesu res du 12 ao t 1988 exigent une attestation de conformit au lieu d un talonnage pour les appareils de volum trie pr vus et utilis s pour des mesures dans le secteur r gi par la loi ainsi que dans le secteur m di cal et pharmaceutique fabrica tion et contr le de m dicaments Ces r gulations s appliquent galement aux accessoires im portants pour la technique de mesure par ex pointes de pi pette pour pipettes piston BRAND Que signifie conformit Conformit veut dire confor mit d un appareil avec l ho mo
58. nt galement conformes la classe A La tol rance ou bien l exactitude et le coefficient de variation se situent dans les marges d finies par les normes DIN et ISO La classe et la classe AS ont les m mes tol rances d erreur mais se distinguent par leurs temps d coulement et d attente L indication additionnelle S signifie coulement rapide En vue des exigences dues au nettoyage effectu g n ralement en machine les pipettes et burettes sont fabriqu es de nos jours presque exclusivement en classe AS Elles sont pour vues d un orifice de pointe plus grand que les appareils de la classe ce qui rend le nettoyage plus facile Les types de verre utilis s sont par ex verre de chimie com me par ex AR Glas pour la fabrication de pipettes jaug es et gradu es ou bien verre borosilicat comme par ex DURANS pour la fabrication de fioles jaug es prouvettes gradu es et burettes Ces types de verre sont adapt s aux exigences le v es du laboratoire en ce qui concerne la r sistance chimique et physique Les appareils de volum trie de la classe B sont disponibles en verre ou en mati re plastique La tol rance ou bien l exactitu de et le coefficient de variation se situent dans le double des marges de tol rance de la classe A AS d finies par les normes DIN et ISO Les types de verre utilis s sont par ex verre de chimie comme par ex AR Glas pour la fabrication de pipet tes jaug es et grad
59. nt tre visibles Remplir la burette jusque l g rement au dessus du z ro ensuite laisser le liquide s couler au maximum jusqu au volume nominal pour d sa rer le robinet de burette S il reste une petite bulle d air dans la burette pencher l appa reil et tapoter l g rement avec le doigt sur l endroit o se trouve la bulle Aspirer la solution talon sans formation de bulles d air jusqu environ 5 mm au dessus du z ro La paroi de verre au dessus du z ro ne doit pas tre mouill e Ajuster exactement au z ro en laissant s couler du liquide La lecture se fait la hauteur des yeux sans parallaxe Dans le cas de burettes z ro automatique remplir galement jusqu environ 5 mm au dessus du point z ro Celui ci s ajuste automatiquement apr s d sa ration Essuyer la goutte ventuellement suspendue la pointe de la burette Ouvrir le robinet de burette et ajouter lentement la solution talon la solution contenant la substance analyser avec indicateur Le robinet de burette ne doit pas toucher la paroi de verre Agiter l g rement le r cipient pes e contenant la solution avec la substance analyser en ajoutant goutte goutte la solution talon D s que le point de virage soit atteint et l indicateur change de couleur fermer le robinet de burette Le titrage est termin Afin de faciliter la visualisation du virage de couleur le r cipient pes e devrait tre plac sur une
60. nt entre autres les normes DIN EN ISO 9000 DIN EN 45000 et ISO IEC 17025 pour la surveillance des moyens de contr le Une diff rence d terminante entre les services de calibrage en usine et les laboratoires de calibrage accr dit s par le PIB est dans l indication fiable de l incertitude de mesure respec tive une indication qui est surveill e par le PIB et dont le la boratoire se porte garant On fait usage de l attestation de calibrage DKD l o des calibrages d un laboratoire accr dit sont exig s et o il est question de calibrages d une extr me qualit ainsi que de la mise disposition d talons de r f rence et du calibrage d appareils de r f rence Le DKD est membre de l European Cooperation for Accredi tation EA L accord multilat ral assure la reconnaissance obligatoire de l attestation de calibrage DKD dans de nom breux pays Elle est d livr e en plusieurs langues BRAND A M Directive DIV VIII La directive DIV Importance et effets Directive DIV de l UE La directive de l UE relative aux dispositifs m dicaux de diagnostic in vitro directive DIV a t publi e le 7 d cembre 1998 dans le Journal officiel des Communaut s europ ennes et avec cela est entr e en vigueur Elle est applicable depuis le 7 juin 2000 Qu est ce qu on entend par dispositif m dical de diagnostic in vitro DIV On entend par dispositif m dical de diagnostic in vitro
61. oire 38 XI Conseils concernant la s curit 40 Appareils de volum trie Vision g n rale des appareils de volum trie nn Appareils de La mesure de volumes de liquides fait partie des travaux de routine de chaque laboratoire gt Les appareils de volum trie en verre comme les fioles jaug es les pipettes jaug es et volumetrie gradu es les prouvettes gradu es et les burettes sont donc des instruments de base Grand nombre de fabricants offrent des appareils de volum trie en diff rentes qualit s Ci en verre dessous une s lection d appareils de volum trie de qualit BRAND est present Pipette Eprouvette gradu e gradu e Fioles jaug es Pipette jaug e EE Appareils de Liquid Handling Afin de r pondre aux exigences de plus en plus s v res dans la mesure de volumes r alis e au laboratoire examens en s rie s ries de tests de nouveaux appareils ont t d velopp s en permanence par exemple pour le dosage le pipetage et le titrage Les appareils des diff rents fabricants con us pour la m me application sont presque tous similaires quant au principe de fonctionne ment Toutefois il existe en partie de gran des diff rences dans la qualit de finition les d tails de construction et le dessin des appa reils des divers fabricants La s lection d appareils Liquid Handling de BRAND pr sente tueur Distributeur Burette adapt sur flacon adapt sur flacon adapt sur flacon Pipette cou
62. on adapt sur flacon adapt sur flacon d air un canal d air multicanaux Dispensette seripettor B rette Digital Transferpette Transferpette 8 19 Pipette d place Distributeur ma Distributeur ma ment positif nuel m canique nuel lectronique Transferpettor HandyStep HandyStep electronic BRAND A Appareils Liquid Handling Dosage 4 1 Doser avec des distributeurs adaptables sur flacon Qu est ce qu on entend par dosage On entend par dosage l vacuation r p titive de quantit s d finies de liquides Pour le dosage simple rapide et pr cis de r actifs on utilise fr quemment des distributeurs adaptables sur flacon qui s adaptent directement ou l aide d adaptateurs sur les flacons de r actif courants De ce fait le transvasement de produits chimiques n est plus n cessaire ce qui rend le travail nettement plus facile en particulier le dosage en s rie substitution des prouvettes gradu es Principe commun du fonctionnement des distributeurs adaptables sur flacon En d pla ant le piston vers le haut la quantit de liquide ajust e est aspir e directe ment du flacon de r actif dans le piston de l appareil En d pla ant le piston vers le bas le liquide est vacu l aide d un syst me de sou papes travers la canule de dosage Il n est plus n cessaire ni d ajuster le m nisque ni de respecter les temps d attente On distingue deux types de dist
63. pient la quantit de liquide coul e est diminu e de la quantit de liquide qui reste sur la paroi de verre en raison du mouillage Eprouvettes bouch es L prouvette bouch e est une prouvette gradu e calibr e pour contenir In col rod et avec bouchon en mati re plastique Les solutions peuvent tre pr par es directement dans l prouvette avec bouchon M Verser une quantit exactement mesur e de liquide dans l prouvette M Ajouter une quantit exactement pes e d un solide et dissoudre en agitant Remarque Le m lange de deux liquides peut entra ner une contrac tion de volume BRAND Appareils de volum trie en verre Maniement 3 6 Maniement des burettes Les burettes sont des appareils de volum trie en verre calibr s pour couler Ex qui servent pour le titrage appliqu l analyse talon Diff rents mod les de burettes Burette z ro Burette z ro automatique automatique de Pellet du Dr Schilling Burette avec robinet lat ral BRAND Maniement M Fixer la burette verticalement dans le support Adapter les burettes z ro automatique de Pellet et celles du Dr Schilling verticalement sur les flacons pour burettes Rincer les burettes avec la solution talon Tenir en compte que seules des solutions talons compl tement homog nes peuvent tre utilis es Ni des turbidit s ni des floculations ni des d p ts doive
64. pil laire la force d adh sion suffit non seulement pour faire monter le liquide pr s des bords du r cipient mais en plus pour faire monter toute la surface du liquide effet de capillarit 2 1 Mesure du volume exact ajustage du m nisque Une condition essentielle pour la mesure exacte de volumes est l ajustage exact du m nisque Si la force de coh sion entre les mol cules d un liquide est sup rieure la force d adh sion entre les mol cules du liquide et celles de la paroi de verre le m nisque prend une forme convexe C est le cas par exemple du mercure M nisque concave dans une pipette gradu e Dans le cas d un m nisque concave la lecture du volume se fait selon la norme DIN au point le plus bas de la surface du liquide Ce faisant le point le plus bas du m nis que doit toucher le bord su p rieur du trait Ajustage du m nisque m nisque BRAND aa M nisque convexe dans une pipette gradu e Dans le cas d un m nisque convexe la lecture du volume se fait selon la norme DIN au point le plus haut de la surface du liquide Ce faisant le point le plus haut du m nis que doit toucher le bord inf rieur du trait marque circulaire papier noir Ajustage du m nisque dans une prouvette gradu e Le point le plus bas du m nis que doit tre au m me niveau que le bord sup rieur du trait lecture sans parallaxe Pour des mesures tr s exactes e
65. ppropri pour le dosage de liquides ayant tendance cristalliser Le seripettor peut tre utilis dans la gamme de volume de 1 25 ml Dosage semi automatique Une fois vacu le liquide l action de levage automa tique du ressort remplit automatiquement le piston en le pressant vers le haut nouveau dosage semi automatique Mat riaux Les parties dans le seripettor qui touchent au liquide sont en polypropyl ne PP poly thyl ne PE et caoutchouc thyl ne propyl ne di ne EPDM BRAND Appareils Liquid Handling Titrage 4 2 Titrer avec des burettes adaptables sur flacon Qu est ce qu on entend par titrage Le titrage est une m thode d analyse pour la d termination quantitative d une substance dissoute Comment a fonctionne Les burettes en verre tant difficiles manier et faciles casser on a d velopp les burettes piston ou bien burettes adaptables sur fla con pour simplifier le titrage de petites et moyennes s ries d analyses Un liquide d un volume connu contenant une quantit inconnue d une substance en solution est vers dans une fiole Erlenmeyer Pour une mesure exacte du volume il est recommand d uti liser une pipette jaug e On ajoute env 3 gouttes d un indicateur et agite la fiole bri vement Ensuite en agitant la solution de fa on continue on ajoute avec une burette lentement et conti nuellement un r actif titrant appropri
66. pycnom tre avec thermom tre liquide sans formation de et capillaire lat ral avec bulles d air Le col rod bouchon doit tre rempli jusqu un tiers environ M Ajuster la temp rature du pycnom tre et du liquide dans un bain marie 20 C M Aligner le bouchon ou bien le thermom tre du pycno m tre sur le corps confor m ment la marque et l introduire soigneusement Ce faisant le tube du ca pillaire se remplira et du liquide d essai d plac d bordera M Essuyer et s cher soig neusement avec un tissu de cellulose la surface du bouchon ou bien celle du capillaire lat ral ainsi que l ext rieur du pycnom tre ATTENTION absolument viter d absor be du liquide d essai conte nue dans le capillaire Le niveau du liquide d essai doit coincider exactement avec le bord sup rieur du capillaire M D terminer le poids du pycnom tre rempli La densit est calcul e partir de la masse poids et du volume du liquide Le volume est grav sur l appareil On applique l quation suivante Densit r masse m volume V Il faut prendre en consid ration la pouss e a rostatique lors de la pes e Note Chaque pycnom tre calibr porte un num ro d appareil lequel est galement indiqu sur tous les composants Seuls des composants portant le m me num ro peuvent tre utilis s ensemble BRAND Appareils de volum trie en verre Auxiliaires de pipetage 3 8 Travailler ave
67. ributeurs adaptables sur flacon distributeurs piston flottant et distributeurs avec piston joint d tanch it 4 1 1 Distributeurs piston flottant adaptables sur flacon par ex la Dispensette de BRAND Ce syst me fonctionne sans joint de piston tant pour cela tr s robuste et d un entretien facile Le piston est incorpor dans le cylindre de dosage sans avoir contact avec celui ci Il existe un espace minime entre piston et cylindre de dosage de seulement quelques milli mes de millim tre rempli de liquide Ce film de liquide fonctionne comme un lubrificateur C est pourquoi le piston glisse avec tr s peu de frottement Domaines d application Dispensette Filii 1s La Dispensette III est l appa reil id al pour doser des r actifs tels que des acides forts comme par ex H PO H SO des lessives alcalines comme par ex NaOH KOH des solutions salines ainsi que pour doser un grand nombre de solvants organiques Ce distributeur offre un tr s large ventail d applications et peut tre utilis dans la gamme de volume de 0 1 100 ml Mat riaux Les parties touchant au liqui de sont en mat riaux de haute gamme verre borosilicat c ramique platine iridi Dis pensette Organic tantale La Dispensette Organic est l appareil id al pour doser des solvants organiques tels que des hydrocarbures chlo r s et fluorur s comme par ex le trichlorotrifluoro thane e
68. s cali br es pour coulement Ex appuyer sur le bouton d a ra tion jusqu ce que le liquide soit coul tout en respec tant le temps d attente si applicable o Appareils Liquid Handling IV Travailler avec des appareils Liquid Handling Les exigences de plus en plus s v res quant la qualit des r sultats d analyses et l augmentation des chantillons analyser dans les laboratoires exigent des appareils de mesure qui permettent de r aliser les travaux de routine dans la pr paration d chantillons le plus efficacement possible Pour r pondre ces n cessit s les fabricants de mat riel de laboratoire ont d velopp les appa reils Liquid Handling representant le perfectionnement des appareils de volum trie en verre et en mati re plastique et permettant un travail rationnel avec un maximum de pr cision et de confort de manipulation Les appareils Liquid Handling de la plupart des fabricants fonctionnent selon des principes similaires Cependant il y a des diff rences plus ou moins importantes entre les appareils des divers fabricants qui sont li es aux d tails de construction et qui sont dues entre autres aux mat riaux utilis s Pour l explication du principe de fonctionnement et de l utilisation d appareils Liquid Handling voici titre d exemple la description de quelques appareils de BRAND Distributeur Burette Distributeur Pipette coussin Pipette coussin adapt sur flac
69. soupapes sensible au changement de pression permet de travailler de fa on conti nue avec les pipettes de 0 1 100 ml La soupape antiretour incorpor e offre en combinaison avec la membrane filtrante Deux modes de pipetage L accu jet dispose de deux modes de pipetage coulement libre sans support du moteur ou vacuation par soufflage avec support du moteur une protection efficace contre les infiltrations de liquides L unit pour le logement de pipette compl te avec membrane filtrante est autoclavable 121 C Afin de prot ger l appareil contre la corrosion les vapeurs de liquide sont vacu es de l appareil par compensation de pression active Le bon mode tout moment On fait le choix entre les deux modes de pipetage selon l application Au laboratoire analytique par exemple on travaille principalement dans le mode coulement libre pour obtenir l exactitude n cessaire des volumes pipet ter Afin d obtenir l exactitude indiqu e sur la pipette l coulement libre du milieu est indispensable tout en re spectant les temps d coule ment et d attente Maniement Par contre dans le domaine de la microbiologie l exacti tude de volume est de moindre importance Dans ce cas c est la mesure uniforme et rapide de solutions de cultures etc qui est primordiale C est pourquoi on pr f re dans ce domaine d application travail ler dans le mode vacuation par soufflage
70. ssin d air un canal Pipette coussin d air multicanaux Pipette d pla Distributeur ma Distributeur ma cement positif nuel m canique nuel lectronique BRAND Appareils de volum trie en verre Fabrication I Fabrication d appareils de volum trie en verre 1 1 De la mati re premi re l appareil de volum trie de pr cision L examen des bauches Afin de pouvoir fabriquer des appareils de volum trie en verre de haute qualit exig e par les laboratoires les bau ches sont soumises un con tr le s v re suivi d un traite ment thermique on limine les contraintes dans le verre par un chauffage et refroidis sement contr l s des bau ches condition essentielle pour assurer la meilleure r sistance m canique pos sible garantissant ainsi que le volume demeure constant lors de contraintes thermiques ult rieures Le calibrage Pour le calibrage d appareils de volum trie en verre des volumes partiels d termin s sont mesur s volum trique ment c est dire qu on verse une quantit d termin e et exacte d eau dans l appareil de volum trie et on applique un trait de jauge sur l appa reil au niveau du point le plus bas du m nisque Pour les appareils de volum trie avec graduation norma lement deux traits de jauge sont appliqu s En principe on diff rencie deux fa on de calibrage calibrage pour contenir In et calibrage pour couler Ex Le cal
71. syst matique c est dire une valuation de la proximit entre la valeur moyenne et la valeur vraie vraie 100 p V hie r elle vraie BRAND Coefficient de variation Le coefficient de variation CV est d fini comme cart type en pour cent se r f rant la valeur moyenne Il est une mesure de l erreur acciden telle c est dire une valu ation de la proximit entre les diff rentes valeurs mesu r es Si par contre la dispersion des diff rents r sultats de mesure autour de la valeur moyenne V est indiqu e en unit s de volume on utilise le terme pr cision Volume contr l uI 200 0000 Valeur vraie mg 199 3620 X 200 2000 X 199 6000 X 199 4900 X 199 7000 X 199 7000 Les valeurs obtenues des pe s es lors du contr le gravi m trique ne sont que des valeurs de masse du volume pipett Pour obtenir le volu me r el il est n cessaire d effectuer une correction qui tient en compte la temp rature voir page suivante calculs manuels Des instructions de contr le SOPs d taill es sont disposition gratuitement pour tous les appareils Liquid Handling Dans le cas d une grande proximit il est possible d in diquer une tol rance pour le volume nominal V de l ap pareil de volum trie corres pondant calcul e partir des valeurs indiqu es de E et CV Tol gt 100 La tol rance ainsi calcul e repr sen
72. t une meilleure lisibilit on peut utiliser une bande noire plac e derri re l appareil l g rement au dessous du trait voir fig Ajustage du m nisque dans un appareil avec bande photopho re comme par ex une burette La bande photophore est une troite bande bleue au centre d une bande blanche de verre opale Les bandes photopho res sont imprim es sur le dos d appareils de volum trie pour une meilleure lisibilit En raison de la r fraction de la lumi re la bande bleue ap para t sous la forme de deux pointes au niveau du m nis que La lecture se fait au point de contact des deux pointes Appareils de volum trie en verre Mesure de volumes 2 2 Temps d coulement et d attente Temps d coulement et d attente se r f rant la division en classes Les appareils de volum trie sont divis s dans les classes de qualit A AS et B La classe d finit les propri t s des produits s ils sont talonnables ainsi que l exactitude et les temps d coulement et d attente et de cette mani re leur manipulation correcte Les tol rances d erreur et les temps d coulement varient en fonction du volume nominal Les temps d attente sont d finis d avance sans possibilit de changement Le temps d coulement Le temps d coulement est le temps dont le m nisque a be soin pour descendre du trait de jauge jusqu ce qu il s im mobilise dans la pointe ou bien au niveau du trait de jauge in
73. t www brand de Vision g n rale des appareil de volum trie 5 I Fabrication d appareils de volum trie en verre 6 1 1 De la mati re premi re l appareil de volum trie de pr cision 6 1 2 L appareil de volum trie avec ses inscriptions 8 1 8 Appareils de volum trie et leur classification en classes d exactitude 9 II Mesure de volume 10 2 1 Mesure du volume exact ajustage du m nisque 10 2 2 Temps d coulement et d attente 11 Il Travailler avec des appareils volum trie en verre 12 3 1 Pipettes en g n ral 12 3 2 Pipettes fr quemment utilis es 13 3 3 Maniement des pipettes 14 3 4 Maniement des fioles jaug es 15 3 5 Maniement des prouvettes bouch es et gradu es 15 3 6 Maniement des burettes 16 3 7 Maniement des pycnom tres 17 3 8 Travailler avec des auxiliaires de pipetage 18 IV Travailler avec des appareils Liquid Handling 21 4 1 Doser avec des distributeurs adaptables sur flacon 22 4 2 Titrer avec des burettes adaptables sur flacon 24 4 8 Pipetter avec des pipettes coussin d air 25 4 4 Pipetter avec des pipettes d placement positif 27 4 5 Doser avec des distributeurs manuels 28 V Sur l exactitude 30 VI La surveillance des moyens de contr le 31 6 1 Proc d du contr le de volume 32 6 2 Logiciel de calibrage 34 6 3 Service de calibrage 34 VII Les certificats et leur signification 35 VIII La directive DIV 36 IX Sur l assurance de qualit 37 X Le nettoyage des appareils de laborat
74. t le dichlorom thane ou des acides comme par ex HCI et HNO concentr s fumants ainsi que pour doser l acide trifluorac tique le tetrahydro furane et des peroxydes La Dispensette HF est un appareil sp cial pour le dosage de l acide fluorhydrique HF ETFE FEP PFA et capuchon vis de la canule en PP Dispensette HF c ramique au lieu de verre borosilicat S curit lors du dosage de milieux corrosifs Si l on veut utiliser des distri buteurs adaptables sur flacon on doit donner une importance particuli re aux dispositifs de s curit con us pour prot ger l utilisateur contre les milieux corrosifs Pour la s curit la plus grande possible tous les mod les de la Dispensette par exemple sont pourvus d un syst me d jection de s curit afin d viter entre autres les claboussures involontaires de milieu Le capuchon vis de la canule prot ge contre le contact accidentel avec des milieux Surveillance des moyens de contr le Calibrage Dans le cadre de la surveil lance des moyens de contr le conform ment ISO et aux directives GLP il est obliga toire d effectuer un contr le r gulier de l exactitude des appareils de volum trie et si besoin est un recalibrage Dans le cas de la Dispensette par exemple ces op rations peuvent tre effectu es d une mani re facile et rapide dans le laboratoire de l utilisateur Appareils Liquid Handling Dosa
75. te mg 49 8206 24 9103 4 9821 50 Hi No 10P5486 X1 49 8300 24 9200 4 9820 X2 49 8450 24 9190 4 9815 Thermom tre Goldbrand X3 49 8190 24 9000 4 9830 1 X4 49 8250 24 9180 4 9825 X5 49 8180 24 9090 4 9830 A amp DHA 38 23 50 C 74 30 F Facteur de correction z 1 0036 Pression absolue de l air hPa 1000 Commentaire Interpr tation Volume H 25 V Moyen 25 0029 0 0 0 01 E R elle CV R elle fi 0 0345 E Nom A 1 4 CV Nom R sultat E R sultat CV Ecart HI du volume naminal S50 yl 0 8 0 8 0 9 Ecart ul du voiume nominal Ecart HI du voiume nominal 25 pl SH 0 6 0 3 0 0 0 3 06 0 9 0 9 Le contr le a t effectu selon ISO 8655 LE DIN V Moyen R sultat Contr le gravim trique ok V R elle Date de contr le 20 08 2001 V Moyen ss Contr leur Michael V Moyen Signature LE DIN Proc s verbal d essai imprim Certificats VII Les certificats et leur signification On distingue trois types de certificats M attestations de conformit M certificats de qualit certificats d usine M attestations de calibrage bureau allemand de v rification des poids et mesures DKD Conformit veut dire conformit d un appareil avec l homolo gation pour le secteur r gi par la loi selon les r gulations alle mandes sur l talonnage des poids et mesures disposition 12 Les d tails concernant le proc d d attestation de
76. te une valeur maxi male qui en r gle g n rale n est pas atteinte dans la pratique EE 1 Calculer le volume moyen Le calcul de correction se r alise en multipliant la valeur moyenne des valeurs obtenues des pes es X par le facteur Z ul mgj qui tient en compte V x 7 TA RP AIR Ce RU 7 D V D V 199 738 1 0032 V 200 3772 oo a OO E OA R T O la densit de l eau la temp ra ture du contr le et la pression atmosph rique Z se monte 1 0032 ul mg se r f rant 2 Sn TOTS mbar DFA et l utilisation d eau distill e 110032 EE E E E EN E teen 4 Surveillance de moyens de contr le 2 Calculer l exactitude YV ME EE 100 o DAET 200 3772 200 A nee nie ll 200 EIo OAIER Afin de pouvoir calculer le coefficient de variation calculer d abord l cart type 100 s T0032 2 s 0032 SREIRRE SRE 4 SOUS Le coefficient de variation est alors obtenu du calcul 4 200 2 199 74 199 6 199 74 199 49 199 74 199 7 199 74 199 7 199 74 Que faire au cas o les valeurs d un appareil contr l se situent hors suivant Pour l exemple calcul le r sultat suivant est obtenu des marges de tol rance 100 Evaluation du contr le Note 1 V rifier si toutes les in CV gravim trique Dn T structions des instructions Volume contr l ul 200 0000 de volumes partiels les S a one Valeur moyenne
77. u es ou bien verre borosilicat comme par ex DURAN pour la fabrication de fioles jaug es prouvettes gradu es et burettes Ces types de verre sont adapt s aux exi gences lev es du laboratoire en ce qui concerne la r sistance chimique et physique Verre ou mati re plastique La classe A AS est recon naissable entre autres aux marques circulaires aux points principaux Marques de BRAND pour les appareils de volum trie de la classe A AS E BLAUBRAND E BLAUBRANDS ETERNA Classe A AS W d signe toujours la classe d exactitude la plus lev e M S signifie coulement ra pide pipettes et burettes M seule la classe A AS est attest e conforme M graduation marques circulaires aux points principaux La classe B est reconnais sable entre autres aux traits courts Marques de BRAND pour les appareils de volum trie en verre de la classe B E SILBERBRAND E SILBERBRAND ETERNA Classe B M en r gle g n rale le doub le des marges de tol rance de la classe A AS M graduation traits courts Marque de BRAND pour les Le mat riau universel r pon dant toutes les exigences du laboratoire n existe pas Il faut se d cider entre le verre et les mati res plastiques selon l application pr vue et la forme du produit en tenant compte des propri t s sp cifi ques du mati re en question et des aspects conomiques L excellente r sistance la casse et l
78. um ro de s rie En cas de souillures d monter si n cessaire l appareil et le nettoyer voir mode d emploi V rifier s il y a des d t riorations bo tier bout de la tige de pipette dispositif d jection piston joint et dans le cas de d t riorations se procurer des pi ces de rechange correspondantes Placer la Transferpette avec ses accessoires dans la salle d essai pendant au moins 2 heures pour les temp rer toutes les pi ces tant d ball es B Essai de fonctionnement ES Placer une nouvelle pointe de pipette Pr rincer une fois la pointe de pipette avec le liquide d essai eau d sionis e La pointe de pipette tant remplie tenir l appareil verticale ment et observer environ 10 sec s il se forme une goutte au bout de la pointe de pipette Ce faisant veiller ce que la pointe ne s chauffe pas par ex sous l effet du soleil ou d autres facteurs similaires Ensuite vacuer le liquide d essai Pour les petits volumes inf rieurs environ 50 pl la forma tion de gouttes est emp ch e ceci m me en cas de perte d tanch it tension superficielle Un petit conseil laisser en bas un petit coussin d air s il descend cela signifie perte d tanch it Un autre conseil suspendre une goutte au bout de la pointe afin d viter la tension superficielle C Contr le gravim trique 1 D terminer la temp rature du liquide d essai N Placer une nouvelle pointe d

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