Mode d`emploi ImmunoCAP ISAC Assay Kit IgE
Contents
1. Phip5 1 1 ISU microscope a balayage laser a Phi p 6 0 9 ISU nus fluorescence montrant les diff rentes intensit s sur une chelle de fausses couleurs allant du noir n gatif au blanc ph fortement positif a de En bas droite Sch ma d un compte Biochip image scan i rendu de dosage ImmunoCAP ISAC IgE Page 3 REACTIFS ImmunoCAP ISAC IgE est un l ment de l Assay kit trousse de dosage ou du Starter kit trousse de d marrage contenant les r actifs requis pour r aliser un dosage La date de p remption et la temp rature de stockage de chaque trousse sont indiqu es sur l tiquette ext rieure Cependant chaque composant est stable jusqu la date indiqu e sur son tiquette individuelle Il est recommand de ne m langer aucun des r actifs ImmunoCAP ISAC Starter Kit IgE R f 81 1001 01 pour 20 d terminations ImmunoCAP ISAC IgE 5 lames A conserver entre 2 et 8 C jusqu la comprenant 4 sites r actionnels date de p remption Attendre le retour a temp rature ambiante avant d ouvrir l emballage herm tique Une fois l emballage retir les lames peuvent tre conserv es pendant 6 semaines l abri de l humidit et de la lumi re entre 18 et 32 C Ne pas r utiliser Composant A 1 flacon A conserver entre 2 et 8 C jusqu la Component A date de p remption 20 x tampon 200 ml Anticorps de d tection d IgE 1 flacon Pr t l emploi 20 d terminations IgE2. Volumes par d termination Echantillon 20 ul Anticorps de d tection d IgE 20 ul Solution A 660 ml Le temps total pour une s rie de dosages est de 5 heures Les incubations s effectuent temp rature ambiante Mat riel de r f rence La calibration interne du kit de dosage ImmunoCAP ISAC Assay Kit IgE est r alis e par rapport une courbe d riv e d une s rie de dilutions d un s rum de r f rence interne au laboratoire Les concentrations d IgE mesur es sont exprim es en unit s arbitraires ISAC Standardized Units pour IgE ISU Le s rum de r f rence interne ImmunoCAP ISAC est standardis par rapport la m thode ImmunoCAP Specific IgE Les calibrateurs ImmunoCAP Specific IgE sont calibr s via une chaine ininterrompue d talonnage par rapport la 2 Pr paration Internationale de R f rence IRP 75 502 d Immunoglobulines E s riques de l Organisation mondiale de la Sant OMS En cons quence les r sultats d IgE ISU obtenus avec ImmunoCAP ISAC IgE sont indirectement li s FIRP 75 502 IgE de l OMS Gamme de mesure 0 3 100 ISU Contr le de la qualit Enregistrement de chaque dosage une bonne pratique de laboratoire consiste conserver les num ros de lot des composants utilis s ainsi que les dates de premi re ouverture et les volumes restants S rums de contr le une bonne pratique de laboratoire requiert l ajout de contr les de qualit dans une s rie par trousse Le s rum de
3. 34 Fax 44 1908 84 75 54 ITALIE Phadia S r l Via Libero Temolo 4 IT 201 26 MILAN Tel 39 02 64 163 411 Fax 39 02 64 163 415 JAPON Phadia K K Tokyo Opera City Tower 3 20 2 Nishi shinjuku Shinjuku ku TOKYO 163 1431 Tel 81 3 5365 8332 Fax 81 3 5365 8336 COREE Phadia Korea Co LTD 20 FI IT Mirea Tower 60 21 Gasan dong Geumcheon gu Seoul 153 801 Tel 82 2 2027 5400 Fax 82 2 2027 5404 PAYS BAS Phadia B V Postbus 696 NL 3430 AR NIEUWEGEIN Tel 31 30 602 37 00 Fax 31 30 602 37 09 NORVEGE Phadia AS Postboks 4814 Nydalen NO 0422 OSLO Tel 47 21 67 32 80 Fax 47 21 67 32 81 PORTUGAL Phadia Sociedade Unipessoal Lda Lagoas Park Edificio No 11 Piso 0 PT 2740 270 PORTO SALVO Tel 351 21 423 53 50 Fax 351 21 421 60 36 AFRIQUE DU SUD Laboratory Specialities PTY P O Box 1513 Randburg 2125 Tel 27 11 793 5337 Fax 27 11 793 1064 ESPAGNE Phadia Spain SL Ctra Rubi 72 74 Edificio Horizon ES 08173 Sant Cugat del Vall s Barcelona Tel 34 935 765 800 Fax 34 935 765 820 SUEDE Phadia AB Marknadsbolag Sverige Box 6460 SE 751 37 UPPSALA Tel 46 18 16 50 00 Fax 46 18 16 63 24 SUISSE Phadia AG Sennweidstrasse 46 CH 6312 STEINHAUSEN Tel 41 43 343 40 50 Fax 41 43 343 40 51 TAIWAN Phadia Taiwan Inc 8F 1 No 147 Sec 2 Jianguo N Rd Taipei 104 Taiwan R O C Tel 886 2 2516 0925 Fax 886 2 2509 9756 ROYAUME UNI Phadia Ltd Media House Presley Way Crownhill Milt
4. ind tectable d IgE sp cifiques circulantes de venin De tels r sultats ne pr jugent pas d une hypersensibilit clinique actuelle ou future aux piq res d insectes VALEURS ATTENDUES L association entre la pr sence d IgE sp cifiques d allergenes et la maladie allergique est bien tablie et a t largement document e dans la litt rature scientifique 1 Chaque patient sensibilis peut connaitre son profil d lgE sp cifiques grace au test ImmunoCAP ISAC IgE Lorsque des chantillons de sang pr lev s chez des donneurs non allergiques ont t test s avec ImmunoCAP ISAC IgE la r ponse pour les composants allerg niques a t largement inf rieure a 0 3 ISU Les bonnes pratiques de laboratoires recommandent que chaque laboratoire tablisse ses propres valeurs de r f rence PERFORMANCES CARACTERISTIQUES Limite de d tection Les limites de d tection ont t d termin es en accord avec les recommandations EP17 A du CLSI 13 pour les composants allerg niques repr sentatifs La limite de d tection g n rale a t estim e a 0 3 ISU Pr cision La pr cision a t d termin e en accord avec les recommandations EP5 A2 du CLSI 14 pour les composants allerg niques repr sentatifs Le CV intra s rie a t estim 15 et le CV total 25 Sp cificit analytique L anticorps de d tection des IgE ne r agit pas avec d autres immunoglobulines dans le s rum humain Les performances indiqu
5. DC DOOM a Ny JOGA PIOPPO POOP Dr DOCDDGOOOEDOSOOOOO DOOD gt D S86 COIS DA DA a ni eis ia si ora E fe fi ini te M D ea is my E SOOGOSOU 8 Gat Ge GH O Ge OCOL e o Sat ig Sy ee Figure 2a Exemple d une image scann e ImmunoCAP ISAC Tous les allerg nes sont mesur s en triples verticaux Pour visualiser la fluorescence l image est affich e en mode fausse couleur L chelle lin aire de l affichage en fausse couleur est reproduite sous l image Figure 2b Matrice du test ImmunoCAP ISAC Ce sch ma montre les positions et les noms des 103 composants allerg niques La r partition et le contenu en allerg nes peuvent tre soumis des changements Page 10 LIMITES DE LA PROCEDURE Un diagnostic clinique ne peut tre fond uniquement sur les r sultats d une seule m thode diagnostique mais doit tre tabli par le praticien apr s valuation de tous les r sultats cliniques et de laboratoire En allergie alimentaire les IgE circulantes peuvent tre ind tectables en d pit d une histoire clinique convaincante parce que ces anticorps peuvent tre dirig s vers des allerg nes r v l s ou alt r s au cours d un traitement industriel de la cuisson ou de la digestion de sorte qu ils n existent pas dans l aliment originel pour lequel le patient est test Des r sultats de classe O pour les venins indiquent labsence ou un taux
6. Detection Antibody A conserver entre 2 et 8 C jusqu la anti lgE humaine conjugu a un date de p remption A conserver a marqueur fluorescent 0 5 ml l abri de la lumi re S rum de contr le IgE 1 flacon Pr t l emploi 1 d termination IgE Control Serum Ne pas diluer le s rum de contr le s rum humain Azide de sodium lt 0 1 50 ul A conserver entre 2 et 8 C jusqu la date de p remption R cipients de lavage 2 r cipients pour Pr ts a l emploi 10 lames Barreaux magn tiques 2 Pr ts l emploi Chambre humide 1 chambre pour Pr te l emploi 26 lames Page 4 ImmunoCAP ISAC Assay Kit IgE R f 81 1000 01 pour 20 d terminations ImmunoCAP ISAC IgE 5 lames A conserver entre 2 et 8 C jusqu la date de comprenant 4 sites r actionnels p remption Attendre le retour a temp rature ambiante avant d ouvrir l emballage herm tique Une fois l emballage retir les lames peuvent tre conserv es pendant 6 semaines l abri de l humidit et de la lumi re entre 18 et 32 C Ne pas r utiliser Composant A 1 flacon A conserver entre 2 et 8 C jusqu la date de Component A p remption 20 x tampon 200 ml Anticorps de d tection d IgE 1 flacon Pr t l emploi 20 d terminations IgE Detection Antibody A conserver entre 2 et 8 C jusqu a la date de anti IgE humaine conjugu un marqueur fluorescent 0 5 ml S rum de contr
7. E detection in capillary blood samples of patients with atopy Allergy Net 2006 61 1146 52 Harwanegg C Hiller R Protein microarrays for the diagnosis of allergic diseases state of the art and future development Clin Chem Lab Med 2005 43 12 1321 6 Hantusch B Scholl Harwanegg C Krieger S Becker WM Spitzauer S Boltz Nitulescu G Jensen Jarolim E Affinity determinations of purified IgE and IgG antibodies against the major pollen allergens Phl p 5a and Bet v 1a discrepancy between IgE and IgG binding strength Immunol Lett 2005 Feb 15 97 1 81 9 Harwanegg C Hiller R Protein microarrays in diagnosing IgE mediated diseases spotting allergy at the molecular level Expert Rev Mol Diagn 2004 Jul 4 4 539 48 Deinhofer K Sevcik H Balic N Harwanegg C Hiller R Rumpold H Mueller MW Spitzauer S Microarrayed allergens for IgE profiling Methods 2004 Mar 32 3 249 54 Harwanegg C Hiller R Recombinant allergen based approaches for the diagnosis of IgE mediated type allergies Clinical Laboratory International November Issue 2004 Jahn Schmid B Harwanegg C Hiller R Bohle B Ebner C Scheiner O Mueller MW Allergen microarray comparison of microarray using recombinant allergens with conventional diagnostic methods to detect allergen specific serum immunoglobulin E Clin Exp Allergy 2003 Oct 33 10 1443 9 Harwanegg C Laffer S Hiller R Mueller MW Kraft D Spitzauer S Valenta R Microarrayed recombinant allergens for diagnosi
8. ImmuoCAP ISAC Mode d emploi ImmunoCAP ISAC Assay Kit IgE ImmunoCAP ISAC Starter Kit IgE 20 01 02 3 FR Phadia Trademarks Marques Varemerker Warenzeichen Varemaerker Marchi despositati Marchas registradas Varumarken Marcas registradas Les d signations suivantes sont des marques d pos es appartenant a Phadia AB ImmunoCAP Les d signations suivantes sont des marques d pos es appartenant a Phadia Multiplexing Diagnostics GmbH ISAC Les d signations suivantes sont des marques appartenant a CapitalBio Corporation LuxScan Bibliographie Se reporter a la page 12 Mis au point par Phadia Multiplexing Diagnostics GmbH Wien Autriche et Phadia AB Uppsala Su de Publi avril 2008 Mise a jour mai 2009 Phadia AB Uppsala Su de Page 2 BUT DU DOSAGE ImmunoCAP ISAC IgE est un test in vitro pour le dosage semi quantitatif des IgE sp cifiques dans le s rum humain ou le plasma Il est destin au diagnostic in vitro en parall le avec d autres investigations cliniques et s utilise dans les laboratoires d analyses m dicales RESUME ET EXPLICATION DU DOSAGE La r action allergique de type imm diat est induite par des anticorps appartenant la classe IgE des immunoglobulines 1 Les manifestations cliniques telles que l asthme le rhume des foins l ecz ma atopique ou les sympt mes gastro intestinaux se d veloppent lors d une exposition des allerg nes sp cifiques La d termination des profils
9. contr le IgE fourni doit tre test aux intervalles d finis pour le syst me afin de garantir la pr cision des mesures d ISU Page 8 ANALYSE DES DONNEES Proc dure de mesure Pour l analyse des ImmunoCAP ISAC IgE il est recommand d utiliser un scanner balayage laser confocal tel que le scanner de biopuce CapitalBio LuxScan 10K Sp cification du scanner Format de la lame 26 mm x 76 mm R solution de balayage 10 um Sensibilit 0 1 mol cule fluorescente um2 Plage dynamique 16 bits Aire de balayage maximale 22 x 72 mm Longueur d onde d excitation 532 nm and or 635 nm Marqueur fluorescent Alexa Fluor 532 nm Alexa Fluor 647 nm Format du fichier image 16 bits Echelle de gris TIFF Un protocole de balayage pour ImmunoCAP ISAC IgE est configur lors de l installation du syst me par un technicien D une mani re g n rale les images doivent tre acquises en configurant la puissance du laser selon les recommandations du fabricant tous les autres param tres doivent tre choisis de fa on viter la saturation des signaux sur les images Proc dure d analyse des images Pour analyser ImmunoCAP ISAC IgE il est recommand d utiliser le logiciel MIA Microarray Image Analyzer install lors de la configuration de l instrument par notre technicien Le logiciel MIA facilite l analyse automatique d ImmunoCAP ISAC IgE Les images scann es des biopuces sont analys es et leurs r sultats simultan ment enregistr
10. de sensibilisation des composants allerg niques sp cifiques et ou responsables de r action crois e contribue une valuation plus pr cise du patient allergique 2 12 PRINCIPE DE LA METHODE ImmunoCAP ISAC IgE est un immunodosage sur phase solide Les composants allerg niques immobilis s sur un substrat solide au format biopuce sont incub s avec des chantillons de s rum ou de plasma humain pour d tecter les IgE sp cifiques La liaison des IgE sp cifiques avec les composants allerg niques immobilis s est r v l e par l ajout d un anticorps anti IgE humaine sur lequel est fix un marqueur de fluorescence secondaire Cette op ration est suivie d une acquisition d image l aide d un scanner de biopuce Les Unit s ISAC Standardis es pour les IgE sp cifiques ISU sont d termin es et les r sultats du dosage sont analys s l aide du logiciel MIA Microarray Image Analysis Software Allergen Chip Layout e Figure 1 En haut gauche Sch ma eat do 3 iti IgE d organisation de la biopuce composants end ierta A Da allerg niques pps Php 1 En haut a droite Sch ma du principe de dosage Les composants allerg niques Philip Phip7 sont coupl s de fa on covalente la Phip6 phase solide Les IgE sp cifiques d allerg nes sont d tect es par les anti IgE marqu s fluorescents Grass pollen Bermude Grass nOmdi 1ISU En bas a gauche Image scann e par le Timothy Grass rPhip1 1 8 ISU
11. e manipul s avec pr caution Une fiche technique de s curit est disponible sur demande aupr s de Phadia AB Manipulation des ImmunoCAP ISAC Ne pas crire sur les ImmunoCAP ISAC avec des stylos ou des marqueurs solubles dans l eau ou des solvants organiques Des r sidus de marquage peuvent interf rer sur l analyse de fluorescence Si n cessaire utiliser un crayon Eviter tout contact direct avec la surface de ImmunoCAP ISAC toutes les tapes de la r action Saisir toujours ImmunoCAP ISAC par le bord de la lame PREPARATION DES PRELEVEMENTS DES REACTIFS ET DE L EQUIPEMENT Echantillons Il est possible d utiliser des chantillons de s rum ou de plasma provenant aussi bien de sang veineux que de sang capillaire Pr lever les chantillons sanguins selon les proc dures habituelles Ne conserver les chantillons temp rature ambiante que durant leur transport Les conserver entre 2 et 8 C pendant une semaine maximum ou 20 C pour un stockage prolong Eviter les cong lations d cong lations r p t es Solution A Pr parer 700 ml d une dilution fra che au 1 20 de Composant A dans de l eau distill e pour obtenir la Solution A ajouter 665 ml d eau distill e 35 ml de Composant A Le volume est calcul pour 3 op rations de lavage de 220 ml chacune en utilisant les r cipients de lavage fournis dans le kit de d marrage Le volume de la dilution devra tre ajust selon le r cipient utilis An
12. es sont des param tres g n raux pouvant varier selon les composants allerg niques Ces performances ont t uniquement d termin es pour des composants allerg niques repr sentatifs et ne peuvent tre appliqu es l ensemble des composants allerg niques Page 11 GARANTIE Les performances d crites ici ont t obtenues en suivant la proc dure indiqu e Toute modification de la proc dure non recommand e par Phadia AB peut affecter les r sultats Dans ce cas Phadia AB rejette toute responsabilit implicite ou pr vue par la loi et notamment toute responsabilit li e la commercialisation du produit ou a son utilisation Dans cette ventualit Phadia AB rejette toute responsabilit en cas de dommages indirects ou li s pouvant en r sulter BIBLIOGRAPHIE 1 10 11 12 13 14 Hamilton RG Assessment of human allergic diseases In Rich RR et al ed Clinical Immunology Principles and Practice 3 rd ed Mosby Elsevier 2008 1471 84 Ott H Baron JM Heise R Ocklenburg C Stanzel S Merk HF Niggemann B Beyer K Clinical usefulness of microarray based IgE detection in children with suspected food allergy Allergy 2008 Nov 63 11 1521 8 Wohrl S Vigl K Zehetmayer S Hiller R Jarisch R Prinz M Stingl G Kopp T The performance of a component based allergen microarray in clinical practice Allergy 2006 May 61 5 633 9 Ott H Schroeder CM Stanzel S Merk HF Baron JM Microarray based Ig
13. le IgE 1 flacon Pr t l emploi 1 d termination IgE Control Serum Ne pas diluer le s rum de contr le s rum humain Azide de sodium lt 0 1 50 ul p remption A conserver l abri de la lumi re A conserver entre 2 et 8 C jusqu la date de p remption Autre mat riel Mat riel n cessaire mais non fourni par Phadia AB Eprouvette de 1 000 ml e Eau distill e e Agitateur magn tique AN PRECAUTIONS Pour usage in vitro uniquement Ne pas administrer en interne ou externe chez l homme ou l animal Ne pas utiliser les r actifs au del de leur date de p remption Il est recommand de porter des gants de se prot ger les yeux et de suivre les bonnes pratiques de laboratoire au cours de la manipulation et de la pr paration des r actifs et des chantillons Cette trousse contient des r actifs fabriqu s partir de composants du sang humain Les mati res premi res concern es ont donn des r sultats n gatifs aux tests immunologiques de recherche de l antig ne de surface de l h patite B des anticorps anti VIH 1 et 2 et du virus de l h patite C Cependant toutes les pr cautions recommand es pour les manipulations des d riv s du sang doivent tre respect es Se r f rer aux r glementations nationales ou locales sur les proc dures de s curit dans les laboratoires Page 5 e Attention Les r actifs contenant de l azide de sodium comme conservateur doivent tr
14. on Keynes MK8 OES Tel 44 1908 769 110 Fax 44 1908 555 561 USA Phadia US Inc 4169 Commercial Avenue Portage Michigan 49002 Tel 1 800 346 4364 Fax 1 269 492 7541 AUTRES PAYS Phadia AB Distributor Sales P O Box 6460 SE 751 37 UPPSALA Page 13 Symbols Symboles Symbole Symboler Simboli Simbolos Symboler Simbolos Symboles Code de lot Risques biologiques Num ro de catalogue Avertissement Consulter le mode d emploi Contenu suffisant pour lt n gt tests Ne pas r utiliser Appareils m dicaux pour diagnostic n Vitro Fabricant Limite de temp rature DRE dAORE E A utiliser avant Phadia AB P O Box 6460 ual SE 751 37 Uppsala Sweden Tel 46 18 16 50 00 Fax 46 18 14 03 58 Page 14
15. s dans la base de donn es et directement transmises l utilisateur Le logiciel MIA dispose d une interface permettant d exporter les donn es de l ImmunoCAP ISAC IgE vers le gestionnaire ImmunoCAP Information Data Manager IDM R sultats ImmunoCAP ISAC IgE est une m thode semi quantitative permettant de mesurer les IgE sp cifiques de composants allerg niques en unit s arbitraires ISU ISAC Standardized Units for IgE Les r sultats sont pr sent s de fa on semi quantitative en 4 classes 0 ind tectable ou tr s faible 1 faible 2 mod r lev 3 tr s lev Le logiciel MIA fait automatiquement les calculs Scores ImmunoCAP ISAC Taux d IgE Correspondance avec les ISU O Ind tectable ou tr s faible lt 0 3 1 Faible 20 3 lt 1 2 Mod r lev 21 lt 15 3 Tr s lev 215 Page 9 0 a 65 535 D O DD 208086 OR as CE SN DO 5 N DOOM DEEE 208608 BOBOS HOG808 300006 STEERER DOG DO a flags 4 ne 10 LE CE VA N D q D POCOO LOODDDDODD g n ODTOD B LOOSE OOOO OO OOOOOD D Na HCCOCCE 2880866 D00000 DC 5 E N DD s z B OBAE SOOO 2 DO OOOOOD CH E Ner DCE A net z SE OO OOODOCOSOSDOOO D DO D CD CD OGD E DODEEE D
16. s dans la chambre humide en orientant les sites r actionnels vers le haut Jeter toutes les solutions de lavage usag es Pipeter 20 ul de Solution d anticorps de d tection d lgE sur chaque site r actionnel des ImmunoCAP ISAC S assurer que les ImmunoCAP ISAC IgE sont correctement plac s dans la chambre humide et fermer le couvercle Laisser incuber temp rature ambiante pendant 60 minutes l abri de la lumi re Retirer les ImmunoCAP ISAC de la chambre humide avec pr cautions Retirer la Solution d anticorps de d tection d IgE en tapotant le cote le plus long des ImmunoCAP ISAC IgE sur une feuille de papier absorbant propre ou rincer d licatement l eau distill e Laver les ImmunoCAP ISAC IgE dans environ 220 ml de Solution A pendant 10 minutes en utilisant le r cipient de lavage et l agitateur magn tique comme d crit ci dessus Placer le portoir de lames contenant les ImmunoCAP ISAC IgE dans un r cipient de lavage contenant environ 220 ml d eau distill e Laver pendant 5 minutes Page 7 e Jeter toutes les solutions de lavage usag es e Laisser s cher les ImmunoCAP ISAC IgE lav s l air libre et attendre le s chage complet e Les ImmunoCAP ISAC IgE sont maintenant pr ts pour la lecture Ils peuvent tre utilis s tout de suite pour l acquisition des donn es avec un scanner de biopuce appropri ou conserv s au sec en les prot geant de la lumi re pour une lecture ult rieure Param tres du test
17. s of allergy Clin Exp Allergy 2003 Jan 33 1 7 13 Hiller R Laffer S Harwanegg C et al Microarrayed allergen molecules diagnostic gatekeepers for allergy treatment FASEB J 2002 Mar 16 3 414 6 Epub 2002 Jan 14 CLSI Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation Approved Guideline CLSI document EP17 A ISBN 1 56238 551 8 2004 CLSI Protocols for Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods Approved Guideline Second Edition CLSI Document EP5 A2 ISBN 1 56238 542 9 2004 Page 12 AUTRICHE Phadia Austria GmbH Floridsdorfer HauptstraRe 1 AT 1210 VIENNA Tel 43 1 270 20 20 Fax 43 1 270 20 20 20 BELGIQUE Phadia NV SA Raketstraat 64 2nd floor BE 1130 BRUSSELS Tel 32 2 749 55 15 Fax 32 2 749 55 23 BRESIL Phadia Diagnosticos Ltda Rua Luigi Galvani 70 10 andar conj 101 Cidade Mon es S o Paulo SP Cep 04575 020 Tel 55 11 3345 5050 Fax 55 11 3345 5060 DANEMARK Phadia ApS Gydevang 33 DK 3450 ALLER D Tel 45 7023 3306 Fax 45 7023 3307 FINLANDE Phadia Oy Rajatorpantie 41 C FIN 01640 VANTAA Tel 358 9 8520 2560 Fax 358 9 8520 2565 FRANCE Phadia SAS BP 610 FR 78056 ST QUENTIN YVELINES CEDEX Tel 33 1 61 37 34 30 Fax 33 1 30 64 62 37 ALLEMAGNE Phadia GmbH Postfach 1050 DE 79010 FREIBURG Tel 49 761 47805 0 Fax 49 761 47805 338 IRLANDE Phadia Ltd Irish Branch Beaghbeg Carrigallen LEITRIM Tel 44 1908 84 70
18. ticorps de d tection d IgE La solution de d tection d Anticorps de d tection d IgE est pr te a l emploi Elle doit tre conserv e l abri de la lumi re et du gel Chambre humide Placer un papier absorbant propre au fond de la chambre humide et l imbiber d eau distill e En attendant la prochaine utilisation fermer le couvercle de la chambre humide pour viter tout risque d vaporation ImmunoCAP ISAC Mettre les ImmunoCAP ISAC dans le recipient de lavage contenant le support de lames amovible jusqu a 10 lames et approximativement 220 ml de Solution A Ajouter un barreau magn tique au fond du r cipient Le placer sur un agitateur magn tique et agiter fortement pendant 60 minutes D placer le support de lames contenant les ImmunoCAP ISAC dans un autre r cipient de lavage contenant approximativement 220 ml d eau distillee Ajouter un barreau magn tique et agiter fortement sur un agitateur magn tique pendant 5 minutes Retirer le support de lames contenant Page 6 les ImmunoCAP ISAC placer les lames sur papier absorbant et laisser s cher lair libre Attendre que les lames soient compl tement s ches Poursuivre la proc dure de test des ImmunoCAP ISAC imm diatement apr s Jeter toutes les solutions de lavage utilis es PROCEDURE DE TEST Placer les ImmunoCAP ISAC IgE pr par s dans la chambre humide en orientant les sites r actionnels vers le haut Pipeter 20 ul de chaque chantillon sur un site r ac
19. tionnel il y a 4 sites par lame Fermer la chambre humide avec pr caution pour ne pas m langer les chantillons Il est recommand d utiliser un s rum de contr le IgE par kit de dosage ImmunoCAP ISAC Assay Kit IgE Le dosage du s rum de contr le IgE est obligatoire si des changements sont apport s dans la proc dure de dosage ou de mesure Eviter le contact direct de l embout de la pipette avec la surface de l ImmunoCAP ISAC IgE pendant la distribution des chantillons Laisser incuber temp rature ambiante pendant 120 minutes Retirer les ImmunoCAP ISAC IgE de la chambre humide avec pr caution sans m langer les chantillons Eliminer les chantillons en tapotant le cot le plus long de la lame sur une feuille de papier absorbant propre Veiller liminer les chantillons dans le bon sens de la lame pour viter qu ils glissent sur les sites r actionnels voisins Laver les ImmunoCAP ISAC IgE dans environ 220 ml de Solution A pendant 10 minutes en utilisant le r cipient de lavage et l agitateur magn tique comme d crit ci dessus Placer le portoir de lames de verre contenant les ImmunoCAP ISAC IgE dans un r cipient de lavage contenant environ 220 ml d eau distill e Laver pendant 5 minutes Laisser s cher les ImmunoCAP ISAC IgE lav s l air libre jusqu s chage complet Les ImmunoCAP ISAC IgE sont maintenant pr ts pour tre incub s avec la Solution d anticorps de d tection Placer les ImmunoCAP ISAC IgE sec
Download Pdf Manuals
Related Search