BD Bordet Gengou Agar with 15% Sheep Blood • BD Bordetella
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1. galement g n rer des infections respiratoires Des tests suppl mentaires sont n cessaires pour l identification compl te de Bordetella pertussis et de B parapertussis Le test de l immunofluorescence directe pouvant galement tre utilis en parall le avec une culture pour la d tection directe des agents partir des chantillons peut aussi tre utilis pour confirmer les isolats obtenus dans ces milieux REFERENCES 1 Bordet J and D Gengou 1906 Le microbe de la coqueluche Ann Inst Pasteur 20 731 2 Kendrick P L E Eldering and W L Bradford 1970 Whooping cough In H L Bodily E L Updyke and J O Mason ed Diagnostic procedures for bacterial mycotic and parasitic infections 5th ed American Public Health Association New York NY PA 254400 02 3 3 Mishulow L L S Sharpe and L L Cohen 1953 Beef heart charcoal agar for the preparation of pertussis vaccines Am J Public Health 43 1466 4 Regan J and F Lowe 1977 Enrichment medium for the isolation of Bordetella J Clin Microbiol 6 303 309 5 MacFaddin J F 1985 Media for isolation cultivation identification maintenance of medical bacteria vol 1 p 86 92 Williams amp Wilkins Baltimore MD 6 Loeffelholz M J 2003 Bordetella In Murray P R E J Baron J H Jorgensen M A Pfaller and R H Yolken ed Manual of clinical microbiology 8 ed American Society for Microbiology Washington D C2. 7 Chievitz J and A H Meyer 1916 Recherches sur la coqueluche Ann Inst Pasteur 30 503 8 Baron E J L R Peterson and S M Finegold 1994 Bailey amp Scott s diagnostic microbiology 9th ed Mosby Year Book Inc St Louis MO 9 Isenberg H D ed 1992 Clinical microbiology procedures handbook vol 1 American Society for Microbiology Washington D C 10 Hoppe J E and R Vogl 1986 Comparison of three media for culture of Bordetella pertussis Eur J Clin Microbiol Infect Dis 5 361 363 11 Hoppe J E 1988 Methods for isolation of Bordetella pertussis from patients with whooping cough Eur J Clin Microbiol Infect Dis 7 616 620 12 Woolfrey B F and J A Moody 1991 Human infections associated with Bordetella bronchiseptica Clin Microbiol Rev 4 243 255 CONDITIONNEMENT BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood N r f 254400 Milieux en bo tes de P tri pr ts l emploi 20 unit s BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse BloodBD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood N r f 256054 Milieux en bo tes de P tri pr ts l emploi 20 unit s INFORMATIONS COMPLEMENTAIRES Pour plus d informations contacter le repr sentant local de BD eal BD Diagnostic Systems Tullastrasse 8 12 D 69126 Heidelberg Germany Phone 49 62 21 30 50 Fax 49 62 21 30 52 16 Reception_Germany europe bd com BD Diagnostic Systems Europe Becton Dickinson France SA 11
3. AW MODE D EMPLOI MILIEUX RJ BD EN BOITES DE PETRI C PRETS A L EMPLOI PA 254400 02 Rev June 2003 BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood e BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood APPLICATION La BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood g lose de Bordet Gengou avec 15 de sang de mouton et la BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood g lose Bordetella contenant du charbon de bois et 7 de sang de cheval sont des milieux s lectifs servant l isolement de Bordetella pertussis et de B parapertussis PRINCIPES ET EXPLICATION DE LA METHODE M thode microbiologique Toutes les esp ces Bordetella sont des agents pathog nes des voies respiratoires r sidant dans les cellules pith liales cili es de l appareil respiratoire B pertussis et B parapertussis sont des agents pathog nes connus uniquement chez l humain B pertussis est la principale cause de coqueluche B parapertussis est associ e une forme b nigne de cette maladie B bronchiseptica est principalement un agent zoopathog ne mais peut toutefois g n rer des bronchites des pneumonies et des infections des voies extra respiratoires chez l humain La base de g lose de Bordet Gengou est une modification du milieu d crit l origine par Bordet et Gengou pour la culture de Bordetella pertussis La BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood est pr par e selon une formule modifi e recommand e par l association de sant publique
4. am ricaine American Public Health Association Dans ce milieu une infusion base de pommes de terre procure de l azote et des vitamines De nombreux composants sont susceptibles d inhiber la croissance de B pertussis notamment les acides gras pr sents dans les s cr tions nasales ou sur le coton de l couvillon de pr l vement L amidon provenant de l infusion de pommes de terre absorbe les acides gras Le glyc rol est une source de carbone Le chlorure de sodium maintient l quilibre osmotique du milieu L ajout de 15 de sang de mouton procure les facteurs de croissance complexes essentiels La BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood est bas e sur la formule de Mishulow et al lesquels ont d couvert qu elle constituait un substitut efficace la g lose de Bordet Gengou Ce milieu ayant par la suite fait l objet d un d veloppement plus pouss est pr sent connu sous le nom de base de g lose charbon Regan Lowe Dans celui ci l extrait de b uf et la peptone de g latine fournissent les l ments nutritifs L amidon et le charbon de bois servent quant eux absorber les acides gras toxiques les radicaux et les peroxydes rempla ant ainsi l infusion de pommes de terre dans la g lose de Bordet Gengou La niacine est une vitamine favorisant la croissance Le sang de cheval fournit des facteurs de croissance complexes et diminue encore l effet toxique des peroxydes De la c falexine est ajout e la BD Bo
5. enrichie en dioxyde de carbone car le gaz risquerait d liminer le microorganisme La temp rature d incubation optimale est comprise entre 34 et 36 C Une temp rature plus lev e risquerait de r duire le d veloppement de Bordetella R sultats Apr s une dur e d incubation suffisante les colonies de B pertussis de la BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood et de la BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood sont petites blanches bomb es et tincelantes leur aspect est similaire des perles coup es en deux Dans la BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood les colonies de B pertussis et de B parapertussis peuvent pr senter une faible b ta h molyse en p riph rie CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES ET LIMITES DE LA PROCEDURE La BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood et la BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood sont des milieux s lectifs approuv s pour l isolement des esp ces Bordetella notamment B pertussis et B parapertussis Les donn es les plus r centes encouragent l utilisation du milieu bas sur le charbon de bois Ces milieux comprennent de la c falexine qui inhibe de nombreuses bact ries Gram positives et certaines bact ries Gram n gatives pr sentes dans la flore normale de la gorge Toutefois elle n inhibe pas compl tement tous les microorganismes Bordetella bronchiseptica peut se d velopper dans ces milieux II s agit d un pathog ne opportuniste pouvant
6. n conserver les bo tes de P tri dans l obscurit entre 2 et 8 C dans leur emballage d origine jusqu au moment de leur utilisation Ne pas les congeler ni les surchauffer Les bo tes peuvent tre ensemenc es jusqu leur date de p remption voir tiquette sur l emballage et incub es pendant le d lai d incubation recommand Des bo tes provenant d une pile ouverte de 10 bo tes sont utilisables pour une semaine lorsqu elles sont conserv es entre 2 et 8 C dans un endroit propre CONTROLE DE QUALITE PAR L UTILISATEUR Ensemencer les chantillons repr sentatifs avec les souches ci dessous pour plus d informations voir le document MODE D EMPLOI GENERAL Incuber en atmosph re a robie dans une chambre humide pendant 5 7 jours une temp rature comprise entre 35 et 37 C Ne pas incuber en atmosph re a robie enrichie en dioxyde de carbone BD Bordet Gengou Agar BD Bordetella Agar With 15 Sheep Blood Charcoal 7 Horse Blood ATCC 9797 importante importante ATCC 15311 importante importante ATCC 6305 ATCC 19615 Non ensemenc Rouge fonc teint de marron Noir brillant teint de rouge opaque opaque PA 254400 02 2 METHODE Mat riaux fournis BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep Blood ou BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood toutes deux fournies en bo tes de P tri Stacker de 90 mm Produit soumis contr le microbiologique Mat riaux non fournis Milieux de cul
7. rdet Gengou Agar with 15 Sheep Blood et la BD Bordetella Agar with Charcoal and 7 Horse Blood Elle sert d agent s lectif pour liminer partiellement la flore bact rienne normale des voies respiratoires PA 254400 02 1 REACTIFS Formules par litre d eau purifi e BD Bordet Gengou Agar with 15 Sheep BD Bordetella Agar with Charcoal and Blood 7 Horse Blood Pommes de terre infusion de 4 5 g Extrait de b uf 10 0 g solides Digestion pancr atique de 5 0 Digestion pancr atique de 10 0 cas ine g latine Digestion peptique de tissu 5 0 Amidon soluble 10 0 animal Chlorure de sodium 5 5 Charbon de bois activ 4 0 G lose 20 0 Chlorure de sodium 5 0 C falexine 0 04 Niacine acide nicotinique 0 01 Glyc rol 10 0 mL C falexine 0 04 Sang de mouton d fibrin 15 Sang de cheval d fibrin 7 pH 7 2 0 2 G lose 12 0 g pH 7 4 0 2 Ajust es et ou compl ment es en fonction des crit res de performances impos s PRECAUTIONS usage professionnel uniquement Ne pas utiliser les bo tes si elles pr sentent des signes de contamination microbienne d coloration ou dessiccation ou d autres signes de d t rioration Consulter le document MODE D EMPLOI GENERAL pour conna tre les proc dures de manipulation aseptique les risques biologiques ainsi que les m thodes d limination des produits utilis s STOCKAGE ET DUREE DE CONSERVATION D s r ceptio
8. rue Aristide Berg s 38800 Le Pont de Claix France Tel 33 476 68 3636 Fax 33 476 68 3292 http www bd com BD BD logo Stacker and GasPak are trademarks of Becton Dickinson and Company ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection 2003 Becton Dickinson and Company PA 254400 02 4
9. ture auxiliaires r actifs et mat riel de laboratoire requis Types d chantillons et pr l vement La m thode consistant analyser les expectorations pour diagnostiquer la coqueluche n est plus recommand e Des s cr tions obtenues par pr l vement au niveau du rhinopharynx post rieur ou bien par lavage ou couvillonnage rhino pharyngien alginate de calcium sur une poign e avec c ble doivent tre recueillies au cours de la premi re semaine de toux paroxysmale Ne jamais utiliser d couvillon en coton Il est recommand de proc der par aspiration pour pr lever ces s cr tions Ne jamais utiliser d chantillon pr lev sur la gorge Des milieux de transport sp ciaux bas s sur le charbon de bois ont t d crits M me si des milieux de transport sont utilis s les chantillons doivent imp rativement tre remis au laboratoire aussi vite que possible Les temps de transport sup rieurs 24 h r duisent consid rablement la viabilit de Bordetella Pour plus d informations consulter les documents cit s en r f rence Mode op ratoire du test Ensemencer les bo tes de P tri sans attendre d s l arriv e des chantillons au laboratoire et les diluer par striation Incuber les bo tes l air ambiant dans une chambre humide p ex dans un r cipient BD GasPak contenant de l eau dans un b cher pendant 7 10 jours et les examiner chaque jour l aide d une loupe Ne pas incuber en atmosph re a robie
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