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APTIMA COMBO 2 Assay Package Insert

1. 4 Infiziert 1 4 4 4 4 4 4 4 HH Infiziert Infiziert 4 4 4 4 Infiziert Infiziert Infiziert Nicht infiziert Nicht infiziert Nicht infiziert Nicht infiziert Nicht infiziert Nicht infiziert Nicht infiziert 2 Nicht infiziert 5 E Nicht infiziert Nicht infiziert 2 z 3 Nicht infiziert F amp Nicht infiziert 5 3 Nicht infiziert a Nicht infiziert z 3 z Nicht infiziert t 623 Nicht infiziert a NA Nicht infiziert 7 7 Nicht infiziert NA Nicht infiziert NA Nicht infiziert 7 NA NA Nicht infiziert NA Nicht infiziert Nicht infiziert NA Nicht infiziert NA NA z Nicht infiziert d Nicht infiziert NA Nicht infiziert 2 z Nicht infiziert z NA x Nicht infiziert NA z 2 Nicht infiziert z B Ww ow BR Alay oO alm oO om j NM ow ol A l m me rm ol of of me alal l o o O Om WS MI NM A OM A N a D Olan o co oO ND oO lo N N oO Aj Al Ay Al OO Alm Al Al Oo A OO NM SW NIM NM Al Mm OO
2. APTIMA COMBO 2 Raumtemperatur Schachtel Kasten 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge AR APTIMA COMBO 2 Amplifikationsrekonstitutionsl sung 1x 27 7 mL W ssrige L sung mit Konservierungsmitteln ER APTIMA COMBO 2 Enzymrekonstitutionsl sung 1x11 1 mL HEPES gepufferte L sung mit oberfl chenaktiver Substanz und Glyzerol PR APTIMA COMBO 2 Sondenrekonstitutionsl sung 1x 35 4 mL Sukzinatgepufferte L sung mit lt 5 Detergens S APTIMA COMBO 2 Selektionsreagenz 1x 108 mL 600 mM Boratpufferl sung mit oberfl chenaktiver Substanz TCR APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz 1x54 mL Gepufferte Salzl sung mit Festphase und Fanger Oligomeren Rekonstitutions verbindungsst cke 3 Hauptchargen Barcode Blatt 1 Blatt APTIMA COMBO 2 Assay 24 502183DE Rev C TIGRIS DTS System APTIMA Kontrollenkit nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge PCT NGC APTIMA Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC 5x1 7mL Nicht infekti se CT Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 1 CT IFU 5fg Test PGC NCT APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT 5x1 7mL Nicht infekti se GC Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 50 GC Zellen 250 fg Test Die rRNA Aquival
3. 5 10 Nicht infiziert 1 1 Nicht infiziert 0 1 Gesamt 750 387 MU Male Urine Urin Mann MS Male Urethral Swab m nnl urethrale Abstrichprobe NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar APTIMA COMBO 2 Assay 67 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen RLU Verteilung von APTIMA Kontrollen Die Verteilung der RLUs f r die APTIMA Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT und die APTIMA Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC aus allen L ufen mit dem APTIMA COMBO 2 Assay die w hrend der klinischen Probenstudien durchgef hrt wurden gehen aus Tabelle 13 hervor Tabelle 13 Verteilung der Gesamt RLU der APTIMA COMBO 2 Assay Kontrollen Gesamt RLUs x1000 Klinische Studie Klinische Studie mit zu Papanicolaou Endozervix sha lt gt j Kontrolle Statistik Abstrichproben Klinische Studie Abstrichen in ain i der vaginalen PreservCyt m nnlichen urethralen is 5 Abstrichproben L sung Abstrichproben und ah is PreservCyt liquid Urinproben Pap Maximum 1572 1996 1747 75 Perzentil 1160 1279 1264 Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC Median 1063 1135 1165 25 Perzentil 996 933 1024 Minimum 274 174 494 Maximum 1359 1420 1438 75 Perzentil 1202 1255 1288 Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT Median 1093 1169 1201 25 Perzentil 989 1084 1099 Minimum 167 249 166 Pr zisionsstudie Pr zisio
4. Insgesamt 154 Kulturisolate wurden mit dem APTIMA COMBO 2 Assay evaluiert Diese Isolate umfassten 86 Organismen die aus dem Urogenitaltrakt isoliert werden k nnen und 68 zus tzliche Organismen die einen phylogenetischen Querschnitt von Organismen darstellen Die getesteten Organismen umfassten Bakterien Pilze Hefe Parasiten und Viren Alle Organismen au er C psittaci C pneumoniae und den Viren wurden bei 1 0 x 10 Zellen Assay in Abstrichproben und Urintransportmedium getestet Die Chlamydia und Neisseria Organismen wurden im PreservCyt L sungsmedium getestet C psittaci und C pneumoniae wurden bei 1 0 x 10 IFU Assay getestet Die Viren wurden wie folgt getestet a Herpes simplex Viren und Il 2 5 x 10 TCIDs5 Assay b Human papillomavirus 16 2 9 x 10 DNA Kopien Assay und c Cytomegalovirus 4 8 x 10 infizierte Zellkultur Zellen Assay Nur CT und GC Proben produzierten positive Ergebnisse im APTIMA COMBO 2 Assay Die getesteten Organismen sind in Tabelle 15 aufgelistet APTIMA COMBO 2 Assay 70 502183DE Rev C Analytische Leistung der DTS Systeme Tabelle 15 Analytische Spezifit t Organismus Organismus Organismus Achromobacter xerosis Escherichia coli Neisseria mucosa 3 Acinetobacter calcoaceticus Flavobacterium meningosepticum Neisseria sicca 3 Acinetobacter Iwoffi Fusobacterium nucleatum Neisseria subflava 14 Actinomyces israelii Gardnerella vagi
5. 549 1 98 4 91 2 100 96 8 95 0 98 1 7 Abstrich gef hrter Sympt 809 111 25 669 4 96 5 91 3 99 0 96 4 94 7 97 7 Vom Arzt entnom vaginaler gt 3 Pr meer Abstrich Asympt 636 59 16 559 2 96 7 88 7 99 6 97 2 95 5 98 4 Alle 1445 170 41 1228 6 96 6 92 7 98 7 96 8 95 6 97 7 Be m8 8 B 8 Z2 2m mm nano n na vw R EB nma__ _ _ _ _ Tg ps ze yo TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ Alternative CT TMA Amplifikationsergebnisse stellen Anzahl positive Ergebnisse Anzahl getestete Proben dar a 15 18 b 17 25 c 15 16 und d 32 41 APTIMA COMBO 2 Assay 52 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 5c PreservCyt Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Svimptotiie AC2 CT ymp PreservCyt ite fa Sensitivit t 95 V I Spezifit t 95 V I status f Ergebnis Positiv 58 1 0 6 Asympt Negativ 2 1 12 1208 96 7 88 5 99 6 99 4 98 8 99 8 Gesamt 60 2 12 1214 Positiv 29 0 0 5 Sympt Negativ 1 3 4 317 96 7 82 8 99 9 98 5 96 5 99 5 Gesamt 30 3 4 322 Positiv 87 1 0 11 Alle Negativ 3 4 16 1525 96 7 90 6 99 3 99 2 98 7 99 6 Gesamt 90 5 16 1536 u I OE Te IO EE I EE IL LI AA A AA A IO II I AAT GT ANAL OES Positives Endozervix Abstrich
6. Hinweis Siehe Fehlersuche oder kontaktieren Sie den Technischen Kundendienst von Gen Probe wenn Sie Hilfe bei Kontrollen au erhalb des zul ssigen Bereichs mit den DTS Systems ben tigen 4 Ein TIGRIS DTS System Parameter erm glicht jedem Standort die Angabe einer Kontrollensegmentierungs H ufigkeit wonach zus tzliche S tze von Kontrollen an definierten Intervallen in die Arbeitsliste gesetzt werden k nnen Wenn dieser Parameter angegeben wird erfordert das TIGRIS DTS System dass ein Satz Kontrollen nach der festgelegten Zahl von Proben im Kontrollensegment gesetzt wird Das TIGRIS DTS System beurteilt automatisch jede Kontrolle in der Arbeitsliste gem den vorstehenden Kriterien und macht alle Proben im betroffenen Kontrollensegment bzw segmenten ung ltig wenn die Kontrollkriterien nicht erf llt sind Weitere Einzelheiten finden Sie in der Bedienungsanleitung des TIGRIS DTS Systems TIGRIS DTS System Operator s Manual 5 Negativkontrollen sind u U bei der berwachung von zuf lliger Verschleppung nicht effektiv Siehe Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System f r die Ergebnisse einer analytischen High Target Verschleppungsuntersuchung die durchgef hrt wurde um die Kontrolle von Verschleppung auf dem TIGRIS DTS System nachzuweisen Siehe Analytische Leistung des PANTHER Systems f r die Ergebnisse einer analytischen High Target Verschleppungsuntersuchung die durchgef hrt wurde um die Kontrolle v
7. Bedienungsanleitung f r das TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System Operator s Manual APTIMA COMBO 2 Assay 30 502183DE Rev C PANTHER System PANTHER System A I TEE Rae Sl me Rin m one pa Die Reagenzien f r den APTIMA COMBO 2 Assay f r CT aun oe und GC auf dem PANTHER System sind unten aufgef hrt Die Symbole zur Identifikation der Reagenzien sind neben dem Reagenznamen angegeben Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien APTIMA COMBO 2 Assay Kit 100 Tests 2 Schachteln und 1 Kontrollenkit Kat Nr 302923 250 Tests 2 Schachteln und 1 Kontrollenkit Kat Nr 303094 APTIMA COMBO 2 gek hlte Schachtel Schachtel 1 von 2 nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Menge Menge Symbol Bestandteil Kit f r 250 Kit f r Tests 100 Tests A APTIMA COMBO 2 Amplifikationsreagenz 1 Fl schchen 1 Fl schchen Nukleins uren getrocknet in gepufferter L sung mit lt 5 F llstoff E APTIMA COMBO 2 Enzymreagenz 1 Fl schchen 1 Fl schchen Reverse Transkriptase und RNA Polymerase getrocknet in HEPES gepufferter L sung mit lt 10 F llreagenz P APTIMA COMBO 2 Sondenreagenz 1 Fl schchen 1 Fl schchen Nicht infekti se chemilumineszie rende DNA Sonden getrocknet in Succinatpuffer l sung mit lt 5 Detergens TCR B APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz B 1x0 681mL 1x0 30 mL Nicht infekti se Nukleins uren in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens APTIMA COMBO 2 Raumtemperatur S
8. NM Oo Oo A RL A Ol BR Al OO OO Ww ojl NM oO WwW oo CO O TM oO OC 0 I0o0 oO alo ol rp a APTIMA COMBO 2 Assay 58 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 7b Von der Patientin selbst durchgef hrter vaginaler Abstrich und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe Fortsetzung NAAT 2 APTIMA APTIMA COMBO 2 Patienteninfektionsstatus NAANI COMBO 2 Assay SPORE Gesamt FS FU FS FU PVS CVS Sympt Asympt Nicht infiziert 1 0 1 Gesamt 811 640 1451 FS Female Endocervical Swab weibl Endozervix Abstrichprobe FU Female Urine Urin Frau PVS Asymptomatic Patient Collected Vaginal Swab von einer asymptomatischen Patientin selbst entnommener Vaginalabstrich CVS Clinician Collected Vaginal Swab vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar Das Gleichheitszeichen stellt eine nach Wiederholungstest unbestimmte Probe dar Tabelle 7c Ergebnisse f r Patienteninfektionsstatus f r C trachomatis in klinischer Studie mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Endozervixabstrich Symptom status Patienteninfektionsstatus Ergebnis AC2 ACT Sympt Asympt Infiziert 30 60 Nicht infiziert 4 12 Nicht infiziert 3 2 Nicht infiziert 322 1214 Gesamt 359 1288 C trachomatis Analyse auf Infektionsstatus bei mannlic
9. Tragen Sie die Initialen des Bedieners das Vorbereitungsdatum und beide Chargennummern ein Hinweis F r eine kleinere Anzahl an Reaktionen Proben und Kontrollen verwenden Sie die folgenden Angaben zur Berechnung der TCR und TCR B Volumina Volumen von TCR mL Anzahl der Reaktionen 5 extra Reaktionen x 0 1 mL Volumen von TCR B mL Volumen von TCR mL 100 APTIMA COMBO 2 Assay 15 502183DE Rev C DTS Systeme C Target Capture Der zur Target Capture und Amplifikation verwendete Wiederholungspipettenmuss zur ausschlie lichen Verwendung in diesen Schritten bereitgestellt werden Weitere Informationen siehe unter Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen St nderaufbau 1 Lassen Sie die Kontrollen und Proben vor der Bearbeitung auf Raumtemperatur kommen 2 Proben nicht mit dem Vortex Mischer mischen 3 berpr fen Sie optisch dass jedes Probenr hrchen eines der folgenden Kriterien erf llt a In Unisex Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner blauer APTIMA Entnahmetupfer b In Vagina Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner rosafarbener APTIMA Entnahmetupfer c In Urin Probentransportr hrchen liegt das End Urinvolumen zwischen den schwarzen F llstandsmarkierungen d In APTIMA Probentransportr hrchen f r Liquid Pap Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap befindet sich kein Tupfer 4 Inspizieren Sie die Probenr hrchen vor dem
10. nnlichen und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurde bei Jugendlichen unter 16 Jahren nicht beurteilt W Ein Testkit nicht nach dem Verfallsdatum verwenden X Assayreagenzien aus Kits mit verschiedenen Chargennummern nicht austauschen vermischen oder kombinieren APTIMA Kontrollen und Assay Fluids d rfen aus verschiedenen Chargen stammen Spezifisch f r DTS Systeme Y Es m ssen Spitzen mit hydrophoben St pseln verwendet werden Mindestens zwei Wiederholungspipetten m ssen zur ausschlie lichen Verwendung mit diesem Assay reserviert werden eine zur Verwendung in den Schritten Target Capture und Amplifikation und eine zur Verwendung in den DKA Schritten Zwei Mikropipetten m ssen zur ausschlie lichen Verwendung in diesem Test reserviert werden eine f r den Probentransfer und eine f r die Reagenzienvorbereitung Alle Pipetten m ssen regelm ig gereinigt werden wie in Testverfahren mit DTS Systemen Verfahrenshinweise beschrieben APTIMA COMBO 2 Assay 6 502183DE Rev C Allgemeine Informationen Z Bei Verwendung von Wiederholungspipetten zur Zugabe von Reagenzien darf das Reaktionsr hrchennicht mit der Pipettenspitze ber hrt werden um Verschleppung von einem Reaktionsr hrchen zum anderen zu vermeiden AA Ausreichendes Mischen ist erforderlich um korrekte Testergebnisse zu erhalten Vollst ndige Einzelheiten siehe Testverfahren mit DTS Systemen Ve
11. r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap berechnet indem die Ergebnisse mit einem Algorithmus f r Patienteninfektionsstatus verglichen wurden Im Algorithmus beruhte die Kennzeichnung eines Probanden als mit CT oder GC infiziert bzw nicht infiziert auf Ergebnissen f r endozervikale Abstrichproben aus zwei im Handel erh ltlichen NAATs Tabellen 7c und 11c F r CT enthielten die Referenz NAATs den APTIMA COMBO 2 Assay und den APTIMA CT Assay F r GC enthielten die Referenz NAATs den APTIMA COMBO 2 Assay und den APTIMA GC Assay Positive Ergebnisse von beiden Referenz NAATs waren zur Bestimmung eines infizierten Patienten erforderlich Ein nicht infizierter Patient ergab sich wenn die Ergebnisse aus den beiden Referenz NAATs widerspruchlich oder negativ waren Die Sensitivit t und Spezifit t fur CT bei Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die mit dem APTIMA COMBO 2 Assay getestet wurden gehen aus Tabelle 5c hervor F r CT betrug die Gesamtsensitivitat 96 7 87 90 Bei symptomatischen und asymptomatischen Probanden lagen die Sensitivit ten jeweils bei APTIMA COMBO 2 Assay 50 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen 96 7 29 30 und 96 7 58 60 Die Gesamtspezifit t f r die Papanicolaou Abstriche in CT PreservCyt L sung betrug 99 2 1545 1557 Bei symptomatischen und asymptomatischen Probanden betrug die Spezifit t jewe
12. wurden Proben hinzugef gt die das rRNA Aquivalent von ca 1 0 CT IFU 5 fg und 50 GC Zellen 250 fg enthielten Durch diese Zus tze ergab sich keine Interferenz der Amplifikation und Nachweis des CT oder GC rRNA mit dem APTIMA COMBO 2 Assay Probenstabilitatsstudien A Endozervikale Abstrichproben Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen fur endozervikale Abstrichproben wurden mit gepoolten negativen Abstrichproben erzeugt Funf gepoolte Proben wurden mit CT und GC bei Endkonzentrationen von jeweils 10 IFU und 100 CFU pro Reaktion gespikt Die gespikten Proben wurden bei 70 C 20 C 4 C und 30 C gehalten Die Proben wurden im Duplikat an den Tagen 0 20 35 60 und 90 getestet Alle Testbedingungen waren positiv fur CT und GC an allen Zeitpunkten und bei allen Temperaturen B Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Die Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen fur Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden mit gepoolten negativen Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung erzeugt Vier gepoolte Proben wurden mit CT und GC bei Endkonzentrationen von jeweils 10 IFU und 100 CFU pro Reaktion gespikt Die Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung wurden 7 Tage lang bei 30 C gehalten Danach wurde 1 0 mL der Probe zu einem APTIMA Transferr hrchen hinzugef gt Die gespikten Proben wurden bei 4 C
13. 2 Ergebnisse von Abstrichproben Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben siehe Hinweise unten a Erste Ergebnisse CT Pos Positiv f r CT rRNA CT Neg Vermutlich negativ f r CT rRNA CT Unbestimmt Die Probe sollte neu getestet werden GC Pos Positiv f r GC rRNA GC Neg Vermutlich negativ f r GC RNA GC Unbestimmt Die Probe sollte neu getestet werden Ung ltig Die Probe sollte neu getestet werden b Ergebnisse des wiederholten Tests CT Pos Positiv f r CT rRNA CT Neg Vermutlich negativ f r CT rRNA CT Unbestimmt Unbestimmt Neue Probe entnehmen GC Pos Positiv f r GC rRNA GC Neg Vermutlich negativ f r GC RNA GC Unbestimmt Unbestimmt Neue Probe entnehmen Ung ltig Unbestimmt Neue Probe entnehmen Anmerkungen e Bei der Auswertung von Ergebnissen mit dem APTIMA COMBO 2 Assay f r asymptomatische Personen oder Personen in Populationen mit niedriger Pr valenz empfiehlt sich eine sorgf ltige Betrachtung der Leistungsdaten e Das erste g ltige Ergebnis f r jeden Analyten ist das Ergebnis das berichtet werden sollte Ein negatives Ergebnis schlie t nicht das Vorliegen einer CT oder GC Infektion aus weil die Ergebnisse von der angemessenen Probenentnahme Abwesenheit von Inhibitoren und ausreichender nachzuweisender rRNA abh ngen Die Testergebnisse k nnen durch unsachgem e Probenentnahme fal
14. 36 296 5 4 16 296 7 0 0 102 11 8 12 102 0 0 102 0 0 102 9 8 10 102 0 0 102 8 0 0 48 8 3 4 48 2 1 1 48 0 0 51 7 8 4 51 2 1 51 Alle 2 4 34 1434 11 6 167 1434 3 3 48 1434 2 4 35 1457 12 1 177 1457 3 3 48 1457 APTIMA COMBO 2 Assay 45 502183DE Rev C Sollwerte mit DTS Systemen Tabelle 1c Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap PreservCyt liquid Pap Pr f Pr valenz Anz positiv Anz getestet zentrum CT GC CT GC CT GC 1 3 0 3 100 13 0 13 100 2 0 2 100 2 0 0 124 3 2 4 124 0 8 1 124 3 0 4 2 475 6 1 29 475 0 4 2 475 4 0 4 1 287 4 2 12 287 0 0 287 5 0 0 297 5 1 15 297 1 0 3 297 6 0 0 364 5 5 20 364 0 6 2 364 ALLE 0 4 6 1647 5 6 93 1647 0 6 10 1647 Die CT und GC Pr valenz wurde anhand der Ergebnisse des APTIMA COMBO 2 Assays f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap berechnet Positive und negative pr diktive Werte f r hypothetische Pr valenzraten in Nordamerika Die gesch tzten positiven und negativen pr diktiven Werte PPV und NPV f r verschiedene Pr valenzraten unter Einsatz des APTIMA COMBO 2 Assays f r CT bzw GC sind in Tabelle 2 und 3 aufgef hrt Diese Berechnungen basieren auf hypothetischen Pr valenzraten und der Gesamtsensitivit t und spezifit t die vom Patienteninfektionsstatus f r zwei multizentrische klinische Pr fun
15. 569 60 5 502 2 96 8 88 8 99 6 99 0 97 7 99 7 Alle 1391 197 13 1170 11 94 7 90 7 97 3 98 9 98 1 99 4 Sympt 1495 323 37 1117 18 94 7 91 8 96 8 96 8 95 6 97 7 Abstrich Asympt 957 131 11 810 5 96 3 91 6 98 8 98 7 97 6 99 3 Alle 2454 455 48 1928 23 95 2 92 9 96 9 97 6 96 8 98 2 Gesamt Sympt 1515 335 16 1152 12 96 5 94 0 98 2 98 6 97 8 99 2 Urin Asympt 969 137 9 818 5 96 5 92 0 98 8 98 9 97 9 99 5 Alle 2486 473 25 1971 17 96 5 94 5 98 0 98 7 98 2 99 2 TE E TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ Umfasst 1 m nnlichen Probanden f r den die Symptome nicht berichtet wurden Umfasst 1 weibliche Probandin f r die die Symptome nicht berichtet wurden Umfasst 1 m nnlichen Probanden und 1 weibliche Probandin f r die die Symptome nicht berichtet wurden Alternative CT TMA Ergebnisse stellen Anzahl positive Ergebnisse Anzahl getestete Proben dar a 11 14 b 3 5 c 14 19 d 4 8 e 0 4 f 4 12 g 18 22 h 4 6 i 22 28 j 2 8 k 1 5 I 3 13 m 29 36 n 7 11 o 36 47 p 6 16 q 1 9 und r 7 25 Tabelle 5b Vaginale Abstrichproben mit dem APTIMA COMBO2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Probe Symptom Sensitivit t Spezifit t status N TP FP TN FN 95 V I 95 V I Von der Patientin k vaginaler selbst durch Asympt 628 60 18
16. 7 93 4 99 5 62 5 100 a ALLE 1479 126 17 1335 1 86 99 2 95 7 100 98 7 98 0 99 3 88 1 99 9 den 1 196 24 2 164 6 15 3 80 0 61 4 92 3 98 8 95 7 99 9 92 3 96 5 2 8 amp 3 9 1 72 1 120 90 0 55 5 99 7 98 6 92 6 100 90 0 98 6 3 191 30 2 158 1 16 2 96 8 83 3 99 9 98 8 95 6 99 8 93 8 99 4 4 215 5 2 206 2 33 71 4 29 0 96 3 99 0 96 6 99 9 71 4 99 0 oO a o 21 100 63 1100 100 09 0100 100 100 6 282 35 2 244 1 128 97 2 85 5 99 9 99 2 97 1 99 9 94 6 99 6 7 134 5 1 183 0 37 100 47 8 100 99 2 95 8 100 83 3 100 ALLE 1484 116 10 1347 11 86 91 3 85 0 95 6 99 3 98 6 99 6 92 1 99 2 TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ Pr valenz bersch tzt aufgrund Einschr nkung der anf nglichen Probenentnahme auf Screening auf symptomatische Probanden APTIMA COMBO 2 Assay 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 10b APTIMA COMBO 2 Assay Vaginale Abstrichproben vs Patienteninfektionsstatus Pos Neg Probe zon N TP FP TN N is a as Wert Wert trum re a PPV NPV 1 7 5 1 65 0 71 100 47 8 100 98 5 91 7 100 83 3 100 2 de 7 0 39 0 15 2 100 59 0 100 100 91 0 100 100 100 3 4 amp 5 2 0 43 O 44 100 15 8 100 100 91 8 100 100 100 Nee 4 152 1 O 151 O 07 100 25 100 100 97 6 100 100
17. 73 0 229 100 84 6 100 98 6 92 7 100 95 7 100 3 249 78 2 169 0 31 3 100 95 4 100 100 95 8 99 9 97 5 100 4 51 2 0 39 0 235 100 73 5 100 98 8 91 0 100 100 100 5 162 31 2 129 0 191 100 88 8 100 98 5 94 6 99 8 93 9 100 6 353 74 1 273 5 224 99 7 85 8 97 9 99 6 98 0 100 98 7 98 2 7 27 2 0 3 0889 100 85 8 100 100 29 2 100 100 100 ALLE 1095 276 12 801 6 258 97 9 95 4 99 2 98 5 97 4 99 2 95 8 99 3 1 10 34 4 110 2 240 94 4 81 3 99 3 96 5 91 3 99 0 89 5 98 2 2 8 n 1 68 1 14 8 91 7 61 5 99 8 98 6 92 2 100 91 7 98 6 3 184 51 13 114 6 31 0 89 5 78 5 06 0 89 8 83 1 944 79 7 95 0 4 196 27 2 167 0 138 100 87 2 100 98 8 95 8 99 9 93 1 100 5 370 27 1 M 1 7 6 964 81 7 99 9 99 7 98 4 100 96 4 99 7 6 274 35 7 230 2 135 946 81 8 99 3 97 0 94 0 98 8 83 3 99 1 7 134 10 0 124 0 75 100 69 2 100 100 97 1 100 100 100 ALLE 1389 195 28 1154 12 149 94 2 90 1 97 0 97 6 96 6 98 4 874 99 0 1 150 34 4 110 2 240 94 4 81 3 99 3 96 5 91 3 99 0 89 5 98 2 2 8 12 1 68 0 148 100 73 5 100 98 6 92 2 100 92 3 100 3 185 64 3 125 3 308 94 7 85 4 98 9 97 7 93 3 99 5 947 97 7 4 196 24 2 167 3 13 8 88 9 70 8 97 6 98 8 95 8 99 9 92 3 98 2 5 369 28 2 336 1 7 9 96 6 82 2 99 9 99 4 97 9 99 9 93 3 99 7 6 276 35 1 238 2 13 4 94 6 81 8 99 3 99 6 97 7 100 97 2 99 2 7 134 10 0 124 0 7 5 100 69 2 100 100 97 1 100 100 100 ALLE 1391 197 13 1170 11 15 0 94 7 90 7 97 3 98 9
18. 9 waren CT auf den DTS Systemen Die CT Konzentraton dieser Panelprobe ist 1 log unter 5 fg rRNA Test APTIMA COMBO 2 Assay 82 502183DE Rev C Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System quivalenzstudie zur analytischen Spezifit t F r einen Nukleins ure Amplifikationsassay wird die analytische Spezifit t hinsichtlich einzelner Organismen zum Gro teil durch die Chemie des Assays z B Oligonukleodidsequenzen anstatt durch die Plattform bestimmt Weil die Reagenzien f r den APTIMA COMBO 2 Assay identisch f r das TIGRIS DTS System und die DTS Systems sind wurden die analytischen Spezifit tsversuche auf dem TIGRIS DTS System so konzipiert dass sie sich auf die Kulturisolate die die gr te Herausforderung darstellen konzentrieren Diese Organismen umfassten diejenigen die bekannterma en in anderen Amplifikationsassays eine Kreuzreaktion zeigen Vierundzwanzig 24 Kulturisolate wurden aus dem Panel der Organismen in Tabelle 15 ausgew hlt darunter 3 Organismen die am n chsten mit CT verwandt sind und 17 Organismen die am n chsten mit GC verwandt sind Alle getesteten Organismen produzierten negative Ergebnisse auf dem TIGRIS DTS System quivalenzstudie zu interferierenden Substanzen Blut das h ufig in Urogenitalproben vorgefunden wird kann in manchen Amplifikationsassays interferierend wirken Vollblut wurde verwendet um das Ausma der Blutinterferenz auf dem TIGRIS DTS System und die quivalenz zw
19. Ergebnisse von klinischen Studien Die Leistung f r den APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systemen wurde in drei multizentrischen klinischen Studien die in Nordamerika durchgef hrt wurden bestimmt Die erste multizentrische klinische Studie beurteilte vom Arzt entnommene endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche und m nnliche und weibliche Urinproben von 1363 m nnlichen und 1569 weiblichen Probanden die an sieben geographisch verschiedenen Pr fzentren aufgenommen wurden Die zweite multizentrische klinische Studie beurteilte von den Patienten selbst durchgef hrte und vom Arzt entnommene Vaginalabstriche von 1464 Probandinnen die an acht geographisch verschiedenen Pr fzentren aufgenommen wurden Die dritte multizentrische klinische Studie beurteilte Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap von 1647 Probandinnen die an sechs Pr fzentren aufgenommen wurden Bei auf dem Symptomstatus basierenden Leistungsberechnungen wurden die Probanden als symptomatisch klassifiziert wenn sie Symptome wie Ausfluss Dysurie und Unterleibsschmerzen berichteten Die Probanden wurden als asymptomatisch klassifiziert wenn sie keine Symptome berichteten Klinische Studie mit Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben und Urinproben In der multizentrischen klinischen Studie mit Endozervix Abstrichproben urethralen Abstrichproben und Urinproben wurden 2932 symptomatische und asymptomatische m n
20. GC getestet Die Endozervixabstriche und Urinproben die im APTIMA COMBO 2 Assay und den anderen im Handel erh ltlichen NAATs getestet wurden wurden als Referenz NAATs verwendet um den Infektionsstatus f r jede Probandin in der klinischen Studie mit vaginalen Abstrichproben zu bestimmen Die Proben wurden entweder am Pr fzentrum des jeweiligen Probanden oder an einem externen Testzentrum getestet Alle Leistungsberechnungen basierten auf der Gesamtanzahl der APTIMA COMBO 2 Assay Ergebnisse f r die vom Patienten selbst durchgef hrten und vom Arzt entnommenen vaginalen Abstriche im Vergleich zu einem Algorithmus f r Patienteninfektionsstatus Insgesamt 2073 CT und 2073 GC Assayergebnisse f r Vaginalabstriche wurden in der Datenanalyse verwendet Im Algorithmus wurde die Kennzeichnung einer Probandin als mit CT oder GC infiziert oder nicht infiziert auf Ergebnissen f r Endozervix Abstrichproben und Urinproben des im Handel erh ltlichen APTIMA COMBO 2 Assays und dem anderen im Handel erh ltlichen NAAT basiert Die Probanden wurden als mit CT oder GC infiziert angesehen wenn zwei der vier Endozervix Abstrichproben und Urinproben im APTIMA COMBO 2 Assay und dem anderen Referenz NAAT ein positives Ergebnis aufwiesen positives Testergebnis f r eine Probe in jedem NAAT Die Probanden wurden als nicht infiziert angesehen wenn weniger als zwei Referenz NAAT Ergebnisse positiv waren In den Tabellen 7b und 11b werden die Anzahl der Ergebnisse vo
21. L Sympt 724 304 5 412 3 99 0 97 2 99 8 98 8 97 2 99 6 Abstrich Asympt 378 15 12 351 0 100 78 2 100 96 7 94 3 98 3 Alle 1103 319 17 764 3 99 1 97 3 99 8 97 8 96 5 98 7 M nnlich Sympt 750 31 1433 5 98 4 96 3 99 5 99 8 98 7 100 Urin Asympt 383 13 2 368 0 100 75 3 100 99 5 98 1 99 9 Alle 1134 324 3 802 5 98 5 96 5 99 5 99 6 98 9 99 9 Sympt 881 94 15 772 0 100 96 2 100 98 1 96 9 98 9 Abstrich Asympt 596 31 2 562 1 96 9 83 8 99 9 99 6 98 7 100 Alle 1479 126 17 1335 1 99 2 95 7 100 98 7 98 0 99 3 Weiblich Sympt 883 87 7 782 7 92 6 85 3 97 0 99 1 98 2 99 6 Urin Asympt 599 28 3 564 4 87 5 71 0 96 5 99 5 98 5 99 9 Alle 1484 116 10 1347 11 91 3 85 0 95 6 99 3 98 6 99 6 Sympt 1605 398 20 1184 3 99 3 97 8 99 8 98 3 97 4 99 0 Abstrich Asympt 974 46 14 913 97 9 88 7 99 9 98 5 97 5 99 2 Alle 2582 445 34 2099 4 99 1 97 7 99 8 98 4 97 8 98 9 Gesamt Sympt 1633 398 8 1215 12 97 1 94 9 98 5 99 3 98 7 99 7 Urin Asympt 982 41 5a 932 4 91 1 78 8 97 5 99 5 98 8 99 8 Alle 2618 440 13 2149 16 96 5 94 4 98 0 99 4 99 0 99 7 m a a re TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ Umfasst 1 m nnlichen Probanden f r den die Symptome nicht berichtet wurden Umfasst 1 weibliche Probandin f r die die Symptome nicht berichtet wur
22. Pe as Wert Wert trum PPV NPV 1 159 56 1 101 1 35 8 98 2 90 6 100 99 0 94 7 100 98 2 99 0 2 7 13 0 84 0 134 100 75 3 100 100 95 7 100 100 100 3 264 71 6 187 0 269 100 94 9 100 96 9 93 4 98 9 92 2 100 abomen 4 2 0 8 O 377 100 832100 100 894 100 100 100 5 133 2 0 127 086 100 73 5 100 100 97 1 100 100 100 6 336 94 10 231 1 283 98 9 94 3 100 95 9 92 5 98 0 90 4 99 6 7 6 53 0 1 1 98 2 98 1 90 1 100 100 2 5 100 100 50 0 PER ALLE 1103 319 17 764 3 292 99 1 97 3 99 8 97 8 96 5 98 7 94 9 99 6 aoa 1 161 57 0 103 1 360 98 3 90 8 100 100 96 5 100 100 99 0 2 104 19 0 85 0 183 100 82 4 100 100 95 8 100 100 100 3 265 71 2 192 0 268 100 94 9 100 99 0 96 3 99 9 97 3 100 un 4 8 2 0 3 O 377 100 83 2 100 100 894 100 100 100 5 10 14 0 16 0 88 100 76 8 100 100 97 5 100 100 100 6 335 89 1 241 4 278 95 7 89 4 98 8 99 6 97 7 100 989 98 4 7 586 54 0 2 0964 100 93 4 100 100 15 8 100 100 100 ALLE 1134 324 3 802 5 290 98 5 96 5 99 5 99 6 98 9 99 9 99 1 99 4 1 196 30 2 164 O 15 3 100 88 4 100 98 8 95 7 99 9 93 8 100 2 8 9 1 72 1 12 0 90 0 55 5 99 7 98 6 92 6 100 90 0 98 6 3 191 31 2 158 0 16 2 100 88 8 100 98 8 95 6 99 8 93 9 100 apstrich 4 25 7 0 26 0 38 100 690100 100 982 100 100 100 5 382 8 1 373 0 21 100 63 1 100 99 7 98 5 100 88 9 100 6 278 36 8 234 0 129 100 90 3 100 96 7 93 6 98 6 81 8 100 7 134 5 3 126 O 37 100 47 8 100 97
23. auf Raumtemperatur kommen a Paaren Sie die entsprechende Rekonstitutionsl sung mit dem gefriergetrockneten Reagenz Die Etiketten sind farbcodiert um die korrekte Paarung zu erleichtern b ffnen Sie das Fl schchen mit dem gefriergetrockneten Reagenz und stecken Sie das gekerbte Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Fl schchen ffnung Abb 1 Schritt 1 c ffnen Sie die Flasche mit der entsprechenden Rekonstitutionsl sung und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che d Halten Sie die Flasche mit der Rekonstitutionsl sung auf dem Labortisch fest und stecken Sie das andere Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks in die Flaschen ffnung Abb 1 Schritt 2 e Drehen Sie die die zusammengebaute Einheit aus Flasche und Fl schchen langsam um Lassen Sie die L sung aus der Flasche in das Fl schchen ablaufen Abb 1 Schritt 3 f Mischen Sie die L sung im Fl schchen durch behutsames Schwenken Beim Schwenken des Fl schchens Schaumbildung vermeiden Abb 1 Schritt 4 g Warten Sie bis sich das gefriergetrocknete Reagenz aufgel st hat und drehen Sie dann die zusammengebaute Einheit aus Flasche und Fl schchen erneut um Ein Neigungswinkel von 45 erm glicht die Schaumbildung auf ein Mindestma zu beschr nken Abb 1 Schritt 5 Lassen Sie die gesamte Fl ssigkeit in die Flasche zur cklaufen h Entfernen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck von der Flasche Abb 1 S
24. der entsprechenden Rekonstitutionsl sung und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che e Halten Sie die Flasche mit der Rekonstitutionsl sung auf dem Labortisch fest und stecken Sie das andere Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Flaschen ffnung Abb 3 Schritt 2 f Drehen Sie die zusammengef gten Flaschen langsam um Lassen Sie die L sung aus der Flasche in das Glasfl schchen ablaufen Abb 3 Schritt 3 g Mischen Sie die L sung in der Flasche durch behutsames Schwenken Vermeiden Sie Schaumbildung beim Schwenken der Flasche Abb 3 Schritt 4 h Warten Sie bis sich das gefriergetrocknete Reagenz aufgel st hat und drehen Sie dann die zusammengef gten Flaschen erneut um Ein Neigungswinkel von 45 erm glicht die Schaumbildung auf ein Mindestma zu beschr nken Abb 3 Schritt 5 Lassen Sie die gesamte Fl ssigkeit in die Kunststoffflasche zur cklaufen i Entfernen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Glasflaschchen Abb 3 Schritt 6 j Verschlie en Sie die Plastikflasche wieder Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das Rekonstitutionsdatum auf dem Etikett ein Abb 3 Schritt 7 APTIMA COMBO 2 Assay 34 502183DE Rev C PANTHER System k Entsorgen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Glasfl schchen Abb 3 Schritt 8 Warnung Bei der Rekonstitution von Reagenzien Schaumbildung vermeiden Schaum beeintr chtigt die F llstandsme
25. die zu Kontamination beitragen k nnen darunter Testvolumen Arbeitsablauf Krankheitspr valenz und verschiedene andere Laboraktivit ten Diese Faktoren sind zu ber cksichtigen wenn die H ufigkeit der Kontaminations berwachung festgelegt wird Die Intervalle zur Kontaminations berwachung sollten im Hinblick auf die Praktiken und Verfahren jedes Labors festgelegt werden Zur berwachung auf Laborkontamination kann das folgende Verfahren mit dem APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben durchgef hrt werden 1 Beschriften Sie die Tupfertransportgef e mit den Zahlen die den zu testenden Bereichen entsprechen 2 Nehmen Sie den Abstrichtupfer blauer Schaft mit gr nem Aufdruck aus der Verpackung feuchten Sie den Tupfer im Tupfertransportmedium an und nehmen Sie im ausgewiesenen Bereich mit einer Kreisbewegung einen Abstrich auf 3 Setzen Sie den Tupfer sofort in das Transportgef ein 4 Den Tupferschaft an der Einkerbung vorsichtig brechen Dabei darauf achten dass der Inhalt nicht verspritzt wird 5 Verschlie en Sie das Tupfertransportgef wieder fest 6 Wiederholen Sie Schritt 2 bis 5 f r alle Abstrichbereiche Wenn die Ergebnisse CT bzw GC positiv oder unbestimmt sind lesen Sie unter Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse nach Weitere f r das TIGRIS DTS System spezifische Informationen zur Kontaminations berwachung finden sich in der
26. f r endozervikale Abstrichproben m nnliche urethrale Abstrichproben sowie weibliche und m nnliche Urinproben die auf den DTS Systems getestet wurden Die klinischen Leistungssch tzwerte f r das TIGRIS DTS System mit endozervikalen Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben sowie m nnlichen und weiblichen Urinproben w rden angesichts der bereinstimmungsergebnisse erwartungsgem hnlich sein Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Vaginale Abstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Weibliche Probanden die eine Klinik f r Geschlechtskrankheiten ffentliche Gesundheit und Frauenheilkunde Geburtshilfe aufsuchten steuerten vaginale Abstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap bei Die vaginalen Abstrichproben wurden direkt an Gen Probe zum Test transferiert Die APTIMA COMBO 2 Assay 74 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden vor dem Transfer in zwei Zytopathologielaboren bearbeitet Bei Gen Probe wurden die vaginalen Abstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap zuerst mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems gescreent Proben mit endg ltig ung ltigen oder unbestimmten Ergebnissen auf den DTS Systemen wurden nicht f r we
27. len Sie die Abfallflasche mit Wasser um etwaigen Restabfall zu entfernen h Verschlie en Sie die leere Abfallflasche und stellen Sie sie in den Plexiglasbeh lter f r die Absaugflaschen Bringen Sie die Schnellverschlussvorrichtung an der TCS Einheit an Entsorgen Sie beide Handschuhe vorsichtig 4 TCS Einheit Wischen Sie die Oberfl chen der TCS Einheit der Absaugvorrichtung und der Waschpuffer Auswerferspitzen mit Papierhandt chern ab die mit 2 5 iger bis 3 5 iger 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung angefeuchtet wurden Sp len Sie sie im Anschluss an den Bleichmittelschritt mit Wasser ab und trocknen Sie die Oberfl chen vollst ndig mit Papierhandt chern ab 5 St nder Tauchen Sie die St nder in 2 5 ige bis 3 5 ige 0 35 M bis 0 5 M Natrium hypochloritl sung Stellen Sie dabei sicher dass sie von der Natriumhypochloritl sung bedeckt sind Lassen Sie die St nder 10 Minuten eingetaucht Eine l ngere Exposition kann Besch digung der St nder zur Folge haben Sp len Sie die St nder gr ndlich mit Wasser ab und setzen Sie sie auf eine saubere saugf hige Unterlage Lassen Sie die St nder gut an der Luft trocknen Lassen Sie die St nder aufrecht nicht umgedreht trocknen um ihre Lebensdauer zu verl ngern Assaykontamination 1 Verunreinigungsmaterialien k nnen eingeschleppt werden wenn w hrend des Testprotokolls nicht mit gen gend Vorsicht vorgegangen wird 2 Die TTUs m ssen in Deaktivierungsfl ssi
28. mindestens 100 mL deionisiertes Wasser in die Einsp lwanne Aspirieren Sie das gesamte Wasser durch die Absaugvorrichtung d Werfen Sie die Spitzen in ihre Original TTC aus e Lassen Sie die Vakuumpumpe eingeschaltet bis die Schl uche der Absaugvorrichtung trocken sind um R ckfluss zu verhindern APTIMA COMBO 2 Assay 21 502183DE Rev C DTS Systeme f Dekontaminieren Sie die Oberfl chen der Absaugvorrichtung wie in TCS Einheit beschrieben 3 TCS Abfallbeh lter Entfernen Sie die Abfallflasche aus dem Target Capture System wenn die Abfallflasche 25 voll ist bzw jede Woche a Schalten Sie die Vakuumpumpe aus und lassen Sie den Vakuumdruck angleichen b Geben Sie die Schnellverschlussvorrichtungen zwischen der Abfallflasche und der berlaufflasche sowie der Abfallflasche und der Absaugvorrichtung frei Entfernen Sie die Abfallflasche vom Plexiglasbeh lter f r die Absaugflaschen Entfernen Sie den Deckel und geben Sie vorsichtig 400 mL 5 ige bis 7 ige 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung in die Flasche hinzu oder 1 L wenn eine 10 Liter Abfallflasche verwendet wird Hinweis Das kann unter einem Dunstabzug erfolgen um die Freisetzung von D mpfen in das Labor zu verhindern e Verschlie en Sie die Abfallflasche mit dem Deckel und vermischen Sie den Inhalt vollst ndig durch vorsichtiges Schwenken f Lassen Sie die Abfallflasche 15 Minuten stehen und entsorgen Sie dann den Inhalt Abfall Sp
29. nachbearbeiteten Pool der Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden mit CT 5 fg rRNA hergestellt und 60 Replikate wurden auf dem TIGRIS DTS System getestet Die prozentuale Positivitat 95 V I auf dem TIGRIS DTS System betrug 100 95 1 100 f r vaginale Abstrichproben und 100 95 1 100 f r nachbearbeitete Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap Verd nnungen von dfrei klinischen GC Isolaten wurden auf drei TIGRIS DTS Systemen und parallel dazu auf den DTS Systems getestet Die GC Isolate wurden in Tupfertransport medien und einem Pool von bearbeiteten Urinproben verd nnt Die Konzentrationen lagen im Bereich von 150 Zellen pro Test bis 5 Zellen pro Test was einen log unterhalb der beanspruchten analytischen Sensitivit t f r den Test mit 50 Zellen Test 362 Zellen Abstrichprobe 250 Zellen mL Urin ist Die prozentuale Positivit t zwischen dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems entsprach einem 95 Vertrauensbereich f r alle drei Isolate bis hinunter zum beanspruchten analytischen Spiegel Die Verd nnungen unterhalb dieses Levels zeigten ebenfalls positive Ergebnisse auf beiden Plattformen Insgesamt wurde eine vergleichbare Sensitivit t auf einer Nachweisstufe von 50 Zellen pro Assay zwischen dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems nachgewiesen Ein Sensitivit tspanel im Vaginalabstrichproben Pool und ein Sensitivit tspanel im nachbearbeitet
30. von 3 8 cm bis 5 cm 1 5 Zoll bis 2 Zoll gemessen vom Metall Auflagetablett unten am Wasserbad bis zur Wasseroberfl che gehalten werden Damit wird eine ordnungsgem e W rme bertragung sichergestellt 2 Zur Vermeidung von Kreuzkontaminationen sollten die Wasserb der jeweils ausschlie lich f r einen bestimmten Assayschritt reserviert werden H Dekontamination 1 Oberfl chen und Pipetten Arbeitsfl chen im Labor und Pipetten m ssen regelm ig mit einer 2 5 igen bis 3 5 igen 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung dekontaminiert werden Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen einwirken Sp len Sie sie anschlie end mit Wasser ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Chlorl sungen k nnen Ger te und Metall angreifen Sp len Sie die Ger te gr ndlich mit Wasser ab um Lochfra zu verhindern 2 TCS Absaugvorrichtung a Setzen Sie eine neue TTC in den TTC St nder Schalten Sie die Vakuumpumpe ein Bringen Sie die Absaugvorrichtung an den Spitzen im TTC an Aspirieren Sie die gesamte Waschl sung die noch in der Einsp lwanne der Dosierstation der Waschl sung ist Schieben Sie die Dosiervorrichtung aus dem Weg b Gie en Sie mindestens 100 mL 0 5 bis 0 7 0 07 M bis 0 1 M oder falls bevorzugt 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung in die Einsp lwanne Aspirieren Sie die gesamte L sung durch die Absaugvorrichtung c Gie en Sie
31. 0 0 0 95 5 0 100 47 8 100 100 96 2 100 100 100 Gesamt 5 0 0 95 Positiv 1 0 0 0 2 Negativ 0 0 0 123 0 8 100 2 5 100 100 97 0 100 100 100 Gesamt 1 0 0 123 Positiv 4 0 0 0 3 Negativ 1 0 0 470 1 1 80 0 28 4 99 5 100 99 2 100 100 99 8 Gesamt 5 0 0 470 Positiv 1 0 0 0 4 Negativ 0 0 3 283 0 3 100 2 5 100 100 98 7 100 100 100 Gesamt 1 0 3 283 Positiv 0 0 0 3 5 Negativ 0 0 0 294 0 0 NA 99 0 97 1 99 8 0 0 100 Gesamt 0 0 0 297 Positiv 1 0 T 0 6 Negativ 0 0 2 360 0 3 100 2 5 100 99 7 98 5 100 50 0 100 Gesamt 1 0 3 360 Positiv 12 0 1 3 Alle Negativ 1 0 5 1625 0 8 92 3 64 0 99 8 99 8 99 4 99 9 75 0 99 9 Gesamt 13 0 6 1628 ee 1 Eine Probe wies ein widerspr chliches Ergebnis auf Unbestimmtes Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay APTIMA COMBO 2 Assay 64 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Neisseria go
32. 0 fg Assay oder CT bei 25 000 IFU mL 50 000 fg Assay und GC bei 125 CFU mL 250 fg Assay oder CT bei 2 5 IFU mL 5 fg Assay und GC bei 125 CFU mL 250 fg Assay Dar ber hinaus wurden 120 CT und GC negative Urinproben entnommen Die positiven und negativen Panels wurden auf drei PANTHER Systemen und drei TIGRIS DTS Systemen getestet Die positive prozentuale Ubereinstimmung zwischen dem PANTHER System und dem TIGRIS DTS System betrug 100 mit einem unteren 95 Vertrauensintervall von 99 5 f r CT und GC Die negative prozentuale bereinstimmung zwischen dem PANTHER System und dem TIGRIS DTS System betrug 99 9 mit einem unteren 95 Vertrauensintervall von 99 5 Die Ergebnisse der Studie sind in Tabelle 25 zusammengefasst Tabelle 25 bereinstimmungsstudie mit einem gespikten klinischen Panel bereinstimmung mit erwarteten CT und GC Ergebnissen Konzentration IFU Konzentration oder CFU mL fg Assay er ee Panelelement a a a ae Replikate TIGRIS PANTHER ples PANTHER Ubereinst Ubereinst Ubereinst Ubereinst CT GC Panels Niedrig niedrig 2 5 125 5 250 90 100 100 100 100 Mittel mittel 25 1250 50 2500 90 100 100 100 100 Niedrig hoch 2 5 2 500 000 5 5 000 000 90 100 100 100 100 Hoch niedrig 25 000 125 50 000 250 90 100 100 100 100 GC Panels Neg sehr niedrig 0 12 5 0 25 117 100 100 100 100 Neg niedrig 0 125 0 250 120 100 100 100 100 Neg mittel 0 1250 0 2500 120
33. 1 0 Infiziert 1 0 Infiziert 7 1 Infiziert 2 1 Infiziert 1 0 Infiziert 3 3 Infiziert NA 6 2 Infiziert NA 1 0 Infiziert 7 3 Infiziert NA 1 0 Infiziert 2 2 Infiziert 1 0 Infiziert 1 1 Infiziert NA 1 0 Infiziert 88 44 Nicht infiziert NA 1 1 Nicht infiziert NA 2 1 Nicht infiziert 648 497 Nicht infiziert 18 4 Nicht infiziert 4 3 Nicht infiziert 4 2 Gesamt 822 570 See ee ee ee ee ee Se ee ee FU Female Urine Urin Frau FS Female Endocervical Swab weibl Endozervix Abstrichprobe NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar APTIMA COMBO 2 Assay 57 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 7b Von der Patientin selbst durchgef hrter vaginaler Abstrich und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe NAAT 2 APTIMA APTIMA COMBO 2 NAAT 1 Symptom status Patienteninfektionsstatus COMBO 2 Assay Mice Gesamt FS FU PVS CVS Sympt Asympt 79 43 122 a A a 7 c Infiziert Infiziert Infiziert Infiziert Infiziert Infiziert Infiziert 4 4 4 4 Infiziert a 3 Infiziert Infiziert Infiziert Infiziert NA Infiziert a a a tp a ays
34. 10 C und 30 C gehalten Die bei 4 C und 10 C gelagerten Proben wurden im Duplikat an den Tagen 0 6 13 26 30 und 36 getestet Die bei 30 C gelagerten Proben wurden an den Tagen 0 5 8 14 und 17 getestet Vier gespikte Pools mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung wurden den APTIMA Transferr hrchenhinzugef gt und 14 Tage bei 30 C gehalten bevor sie entweder bei 20 C oder 70 C gelagert wurden Die 20 C Proben und die 70 C Proben wurden im Duplikat nach 0 30 60 90 und 106 Lagerungstagen getestet Alle Testbedingungen waren positiv f r CT und GC zu allen Zeitpunkten und bei allen Temperaturen C Vaginale Abstrichproben Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen f r vaginale Abstrichproben wurden mit gepoolten negativen Abstrichproben erzeugt F nfzehn vaginale Abstrichproben Pools wurden mit CT und GC bei Endkonzentrationen von jeweils 1 0 IFU und 50 CFU pro Reaktion gespikt Die gespikten Proben wurden bei 70 C 20 C 4 C und 30 C gehalten Die Proben wurden unter Einsatz eines Aliquots APTIMA COMBO 2 Assay 72 502183DE Rev C Analytische Leistung der DTS Systeme an den Tagen 0 20 36 73 und 114 getestet Alle Testbedingungen waren positiv f r CT und GC an allen Zeitpunkten und bei allen Temperaturen D Urinproben Die Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen f r Urinproben wurden mit zehn weiblichen und zehn m nnlichen negativen Ur
35. 100 selbst ne 5 130 1 0 129 0 0 8 100 2 5 100 100 97 2 100 100 100 der 6 75 5 2 68 O 67 100 47 8 100 97 1 90 1 99 7 714 100 7 6 amp 8 0 0 6 amp 0 00 NA 100 94 7 100 NA 100 8 43 o0 0 43 0 00 NA 100 91 8 100 NA 100 ALLE 629 21 3 605 0 33 100 83 9 100 99 5 98 6 99 9 87 5 100 1 227 2 3 22 0 53 100 73 5 100 98 6 96 0 99 7 80 0 100 2 19 31 2 163 0 158 100 88 8 100 98 8 95 7 99 9 93 9 100 3 13 3 0 109 4 3 5 75 0 19 4 99 4 100 96 7 100 100 99 1 Vom Ari 4 262 5 2 255 0 1 9 100 47 8 100 99 2 97 2 99 9 71 4 100 entnom eet 5 18 2 0 196 0 1 0 100 15 8 100 100 98 1 100 100 100 Mener 6 296 18 4 22 2 6 8 90 0 68 3 98 8 98 6 96 3 99 6 81 8 99 3 7 102 o o 102 O 00 NA 100 96 4 100 NA 100 8 50 1 0 49 0 20 100 2 5 100 100 92 7 100 100 100 ALLE 1444 72 11 1358 3 5 2 96 0 88 8 99 2 99 2 98 6 99 6 86 7 99 8 TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ APTIMA COMBO 2 Assay 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 10c PreservCyt Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Pos Neg Prii preserve aa wk he Pr Sensitivit t Spezifit t P d Mac zentrum Ergebnis 95 V I 95 V I PPV NPV Positiv 5 0 0 0 1 Negativ
36. 100 99 2 100 100 CT Panels Sehr niedrig neg 0 25 0 0 5 0 120 100 100 100 100 Niedrig neg 2 5 0 5 0 120 100 100 100 100 Mittel neg 25 0 50 0 120 100 100 100 100 Negative Panels Neg neg 0 0 0 0 360 100 100 99 7 99 7 Eine Panelprobe wurde unsachgem hergestellt und von der Analyse ausgeschlossen CT positive prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und PANTHER System 95 VI 100 99 5 100 GC positive prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und PANTHER System 95 VI 100 99 5 100 Negative prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und PANTHER System 95 VI 99 9 99 5 100 APTIMA COMBO 2 Assay 85 502183DE Rev C Analytische Leistung des PANTHER Systems Studie zur analytischen Spezifit t Die analytische Sensitivit t des APTIMA COMBO 2 Assays wurde mithilfe von drei Matrices aus repr sentativen Proben gepr ft Dabei handelte es sich um mit Urintransportmedium UTM bearbeiteten Urin mit Tupfertransportmedium STM verd nnte PreservCyt L sung sowie STM Pools dieser drei Matrices wurden mit CT und GC rRNA bei den folgenden Konzentrationen RNA quivalenten gespikt 0 5 fg Assay 5 fg Assay und 50 fg Assay rRNA quivalent zu 0 25 IFU mL 2 5 IFU mL oder 25 IFU mL f r CT oder 25 fg Assay 250 fg Assay oder 2500 fg Assay f r GC rRNA quivalent zu 12 5 CFU mL 125 CFU mL oder 1250 CFU mL Die rRNA Aquivalente wurden
37. 1883 19 31 81 31 7 88 08 4953 49 623 6 1 0 125 96 1209 100 49 32 4 1 235 19 1 68 01 40 28 33 679 56 0 1250 96 1252 100 5301 42 4034 32 7 72 06 4023 32 782 62 2 5 125 95 2290 100 73 92 32 4088 1 8 1043 05 5612 25 1019 4 4 0 0 96 7 100 0 0 08 11 7 0 0 154 224 1 7 24 7 0 25 0 96 1113 100 92 29 83 30 08 2 7 0 0 63 57 57 116 10 4 2 5 0 96 1194 100 6254 52 2483 2 1 0 0 4701 39 82 1 69 PreservCyt 25 0 95 1222 100 65 14 53 2636 2 2 1467 12 34 97 29 798 6 5 12 5 93 994 100 33 28 3 3 3692 37 15 97 16 2615 26 584 5 9 0 125 95 1189 100 40 1 34 445 04 1087 09 21 44 1 8 47 4 0 1250 95 1239 100 37 69 3 747 0 6 1361 1 1 1804 1 5 446 3 86 2 5 125 95 2333 100 9968 43 3527 15 12 61 05 4886 21 1172 5 Hinweis Die Variabilit t von einigen Faktoren kann numerisch negativ sein Das kann auftreten wenn die durch diese Faktoren bedingte Variabilit t sehr klein ist In diesem Fall gilt SA 0 und VK 0 Gesamtzahl der Replikate f r jedes Panel 96 In ausgew hlten Durchl ufen wurden einzelne ung ltige Replikate nicht erneut getestet Analytische Spezifit t Die analytische Spezifit t wurde nicht auf dem PANTHER System gepr ft Siehe die Aquivalenzstudie zur analytischen Spezifit t im Abschnitt Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System quivalenzstudie zu interferierenden Substanzen Blut das h ufig in Urogenitalproben vorgefunden wird kann in manchen Amplifikationstests interferierend wirken Vollblut wurde verwendet um das Ausma d
38. 19 1 231 1 7 6 95 0 75 1 99 9 95 5 92 0 97 7 63 3 99 6 entnom en 5 199 13 2 4 0 6 5 100 75 3 100 98 9 96 2 99 9 86 7 100 mener 6 296 33 9 254 0 11 1 100 89 4 100 96 6 93 6 98 4 78 6 100 7 12 9 1 91 4 9 8 90 0 55 5 99 7 98 9 94 1 100 90 0 98 9 8 50 3 1 4 amp 6 0 6 0 100 29 2 100 97 9 88 7 99 9 75 0 100 ALLE 1445 170 41 1228 6 12 2 96 6 92 7 98 7 96 8 95 6 97 7 80 6 99 5 TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ APTIMA COMBO 2 Assay 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 6c PreservCyt Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Pos Neg Pr f AC2ICT Pr ae EM pr d pr d zentrum PreservCyt Sensitivit t 95 V I Spezifit t 95 V I Wert Wert Ergebnis PPV NPV Positiv 14 0 0 2 1 Negativ 0 0 1 83 14 0 100 76 8 100 97 7 91 9 99 7 87 5 100 Gesamt 14 0 1 85 Positiv 4 0 0 0 2 Negativ 0 0 2 118 3 2 100 39 8 100 100 97 0 100 100 100 Gesamt 4 0 2 118 Positiv 29 0 0 2 3 Negativ 2 0 2 440 6 5 93 5 78 6 99 2 99 5 98 4 99 9 93 5 99 5 Gesamt 31 0 2 442 Positiv 8 1 0 4 4 Negativ 0 2 1 271 2 8 100 63 1 100 98 2 95 9 99 4 61 5 100 Gesamt 8 3 1 275 Positiv 13 0 0 2 5 Negativ 1 1 4 276 4 7 92 9 6
39. 2 Infiziert 1 1 2 Infiziert 1 0 1 Infiziert 1 1 2 Infiziert 1 0 1 Infiziert 1 0 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 5 1 6 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 5 2 7 Nicht infiziert 0 1 1 Nicht infiziert 2 1 3 Nicht infiziert 2 0 2 Nicht infiziert 1 1 2 Nicht infiziert 2 2 4 Nicht infiziert 698 577 1275 Nicht infiziert NA 0 2 2 Nicht infiziert 2 0 2 Nicht infiziert NA 15 9 24 Nicht infiziert NA NA 1 0 1 Nicht infiziert NA 2 2 4 Nicht infiziert NA NA 0 1 1 Nicht infiziert 11 10 21 Nicht infiziert NA 0 1 1 Nicht infiziert 1 1 2 Nicht infiziert NA 0 1 1 Nicht infiziert NA 5 4 9 Nicht infiziert 1 1 2 Gesamt 810 640 1450 SSS ESS SSS eee LL eee FS Female Endocervical Swab weibl Endozervix Abstrichprobe FU Female Urine Urin Frau PVS Asymptomatic Patient Collected Vaginal Swab von einer asymptomatischen Patientin selbst entnommener Vaginalabstrich CVS Clinician Collected Vaginal Swab vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar Das Gleichheitszeichen stellt eine nach Wiede
40. 2 2 waren CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems und waren GC im alternativen TMA Amplifikationsassay 52 2 waren CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems und waren CT im alternativen TMA Amplifikationsassay APTIMA COMBO 2 Assay 76 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Tabelle 17 Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Ergebnisse mit weiblichen und m nnlichen Urinproben DTS Systeme TIGRIS DTS System Gesamt CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC 32 0 0 0 32 CT GC 0 100 0 42 101 CT GC 0 0 52 0 52 CT GC 0 8 1 776 785 Gesamt 32 108 53 777 970 Prozentuale bereinstimmung 100 89 1 100 92 6 85 9 96 7 98 1 89 9 100 99 9 99 3 100 nicht zutr 95 V I Prozentuale Gesamt bereinstimmung 95 V I 99 2 98 1 99 5 bezeichnet positiv bezeichnet negativ nicht zutr nicht zutreffend 1 7 8 waren CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems und waren CT im alternativen TMA Amplifikationsassay 1 8 war CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems und war CT im alternativen TMA Amplifikationsassay 2 1 1 war CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems und war GC im alternativen TMA Amplifikationsassay 3 1 1 war CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Ass
41. 2 8 50 392 14 5 57 392 8 4 33 395 12 9 51 395 13 9 55 395 2 7 0 13 186 12 9 24 186 6 5 12 186 5 3 13 245 13 9 34 245 8 6 21 245 3 104 48 462 22 9 106 462 14 3 66 462 10 3 48 465 20 9 97 465 12 7 59 465 4 3 3 9 270 12 2 33 270 7 0 19 270 3 3 9 270 11 5 31 270 6 7 18 270 5 1 9 10 533 8 4 45 533 2 3 12 533 2 1 12 567 9 4 53 567 1 8 10 567 6 6 3 43 678 12 8 87 678 16 2 110 678 5 9 40 681 10 9 74 681 13 5 92 681 7 4 4 11 252 8 7 22 252 21 8 55 252 4 1 12 295 9 2 27 295 18 0 53 295 Alle 6 2 173 2773 13 2 367 2773 11 9 331 2773 5 7 167 2918 12 6 367 2918 10 6 308 2918 Tabelle 1b Von der Patientin selbst durchgef hrter vaginaler Abstrich und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichproben Von der Patientin selbst durchgef hrter Pr f vaginaler Abstrich ur Bi entnommene Vaginalabstrichprobe zen Pr valenz Anz positiv Anz getestet e Fr valenz A getestet TU CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC 1 1 8 41220 16 4 36 220 4 1 9 220 3 7 230 15 7 36 230 3 5 8 230 2 96 19 198 18 7 37 198 6 6 13 198 95 19 199 18 1 36 199 7 14 199 3 09 1 111 9 10 111 2 7 3 111 09 14 113 9 7 11 113 1 8 2 113 4 04 1 266 9 24 266 1 9 5 266 04 1 267 11 2 30 267 2 2 6 267 5 05 1 199 75 15 199 0 5 1 199 0 5 1 199 7 14 199 0 5 1 199 6 2 8 8 290 10 29 290 5 5 16 290 2 6 296 12 2
42. 4 Pr fen Sie die Probenr hrchen vor dem Laden in den St nder a Wenn sich im Transportgef im Raum zwischen der Fl ssigkeit und dem Deckel Luftblasen befinden zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um die Luftblasen zu entfernen b Wenn ein Transportrgef ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt wenn die Sammelanleitung befolgt wurde zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet c Falls der Fl ssigkeitsstand in einem Urintransportr hrchen nicht zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien liegt muss die Probe verworfen werden Nicht in ein berf lltes Reaktionsgef stechen APTIMA COMBO 2 Assay 28 502183DE Rev C TIGRIS DTS System d Wenn eine Urinprobe ein Pr zipitat enth lt die Probe bis zu 5 Minuten auf 37 C erw rmen Wenn das Pr zipitat nicht wieder in L sung geht stellen Sie sicher dass das Pr zipitat nicht die Probenabgabe verhindert transfer nicht behindert Hinweis Bei Nichtbefolgen von Schritt 4a 4c kann aus dem Probenr hrchendeckel Fl ssigkeit auslaufen Hinweis Pro Probenr hrchen k nnen bis zu 3 getrennte Aliquote getestet werden Wenn versucht wird mehr als 3 Aliquote aus einem Probenr hrchen zu pipettieren kann es zu Fehlern aufgrund unzureichender Mengen kommen E Vorbereitung des Systems Richten Sie das System und die Arbeitsliste entspre
43. 4 2 2 2 40 0 1 6 110 3 4 5 28 4 1 1 52 3 2 1 Neg Niedrig 217 1132 100 30 3 2 6 61 0 5 3 0 0 0 20 7 1 8 18 5 1 6 Niedrig Neg 214 1053 100 72 8 6 9 1 5 0 1 73 8 7 0 28 5 2 7 26 9 2 5 Mittel Mittel 214 2429 100 48 8 2 0 40 0 1 6 101 1 4 1 0 0 52 9 2 1 Niedrig Niedrig 216 2112 99 5 112 3 5 3 84 1 3 9 33 2 1 5 34 2 1 6 52 9 2 5 Niedrig Hoch 216 2282 100 77 3 3 3 97 8 4 2 59 3 2 6 0 0 41 7 1 8 Hoch Niedrig 215 2318 100 61 1 2 6 50 7 2 1 86 2 3 7 4 6 0 2 42 4 1 8 SA Standardabweichung VK prozentualer Variationskoeffizient bereinst prozentuale bereinstimmung Konz Konzentration Hinweis Die Variabilit t von einigen Faktoren kann numerisch negativ sein Das kann auftreten wenn die durch diese Faktoren bedingte Variabilit t sehr klein ist In diesem Fall wird die mit Standardabweichung und VK gemessene Variabilit t auf 0 gesetzt Siehe die NCCLS Approved Guidelines EP5 A 22 Niedrige Panelproben wurden bei den beanspruchten analytischen Sensitivit ten des Assays versetzt 5 fg CT rRNA Assay 250 fg GC rRNA Assays bzw beide f r die doppelt positive Panelprobe F r CT ist das getestete Target Level das quivalent von ca 36 fg Abstrichprobe und 25 fg mL Urin F r GC entspricht der getestete Target Spiegel ca 1800 fg Abstrichprobe und 1250 fg mL Urin Auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus ist 5 fg das quivalent von 1 IFU CT und 250 fg das quiva
44. 6 1 99 8 99 3 97 5 99 9 86 7 99 6 Gesamt 14 1 4 278 Positiv 19 0 0 1 6 Negativ 0 1 6 337 5 2 100 82 4 100 99 7 98 4 100 95 0 100 Gesamt 19 1 6 338 Positiv 87 1 0 11 Alle Negativ 3 4 16 1525 5 5 96 7 90 6 99 3 99 2 98 7 99 6 87 9 99 8 Gesamt 90 5 16 1536 D Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay APTIMA COMBO 2 Assay 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Chlamydia trachomatis Analyse auf Infektionsstatus bei weiblichen Patienten Tabelle 7a Endozervixabstrich und Urinprobe NAAT 1 NAAT 2 APTN COMES 2 Symptom status Patienteninfektionsstatus Assay FU FS FU FS FU FS Sympt Asympt Infiziert NA NA 1 0 Infiziert NA NA 1 0 Infiziert NA 0 1 Infiziert NA 1 0 Infiziert 4 0 Infiziert 6 1 Infiziert 1 0 Infiziert 7 3 Infiziert NA 1 0 Infiziert NA
45. 89 502183DE Rev C ce Gen Probe Incorporated San Diego CA 92121 USA EMERGO EUROPE US und internationale Kontaktinformationen Molenstraat 15 Kundendienst 1 858 410 8002 2513 BH Den Haag customerservice gen probe com Niederlande Technischer Kundendienst 1 858 410 8511 technicalsupport gen probe com Geb hrenfreie Nummern f r Anrufe aus USA und Kanada Kundendienst 1 800 523 5001 Technischer Kundendienst 1 888 484 4747 www gen probe com GEN PROBE GEN PROBE und das Design APTIMA APTIMA und das Design APTIMA COMBO 2 DTS LEADER PACE PANTHER SB100 und TIGRIS sind Marken von Gen Probe Incorporated eppendorf stilisiert und REPEATER sind Marken der Eppendorf AG PRESERVCYT und THINPREP sind Marken der Hologic Inc TECAN und FREEDOM EVO sind Marken der Tecan Group AG Alle anderen Marken die m glicherweise in dieser Packungsbeilage erscheinen sind das Eigentum ihrer jeweiligen Besitzer 2001 2013 Gen Probe Incorporated 502183DE Rev C 2013 04 APTIMA COMBO 2 Assay 90 502183DE Rev C
46. 98 1 99 4 93 8 99 1 Gans os SS gt zb _ See ee nm ee ee SS ES eee TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ Pravalenz Uberschatzt aufgrund Einschrankung der anfanglichen Probenentnahme auf Screening auf symptomatische Probanden APTIMA COMBO 2 Assay 54 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 6b Vaginale Abstrichproben mit dem APTIMA COMBO2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Pos Neg Probe ea ae TP FP TWN FN se eons En en un PPV NPV 1 70 14 3 53 0200 100 76 8 100 94 6 85 1 98 9 82 4 100 2 45 13 3 29 0289 100 75 3 100 90 6 75 0 98 0 81 3 100 3 4 4 2 9 0 8 9 100 39 8 100 95 1 83 5 99 4 66 7 100 A l 4 152 6 3 2 A 4 6 85 7 42 1 99 6 99 7 94 1 99 6 66 7 99 3 selbst pal 5 10 7 3 120 0 54 100 59 0 100 97 6 93 0 99 5 70 0 100 ee 6 75 8 2 65 0 107 100 63 1 100 97 0 89 6 99 6 80 0 100 7 68 5 1 62 0 74 100 47 8 100 98 4 91 5 100 83 3 100 8 43 3 1 3 0 7 0 100 29 2 100 97 5 86 8 99 9 75 0 100 ALLE 628 60 18 549 1 9 7 98 4 91 2 100 96 8 95 0 98 1 76 9 99 8 1 227 34 9 182 2 15 9 94 4 81 3 99 3 95 3 91 2 97 8 79 1 98 9 2 196 50 5 19 2 26 5 96 2 86 8 99 5 96 5 92 1 98 9 90 9 98 6 3 139 310 0 8 0 100 66 4 100 97 1 91 8 99 4 75 0 100 TR ER 4 262
47. Drehen Sie die zusammengef gten Flaschen langsam um Lassen Sie die L sung aus der Flasche in das Glasfl schchen ablaufen Abb 2 Schritt 3 g Mischen Sie die L sung im Fl schchen durch behutsames Schwenken Beim Schwenken des Fl schchens Schaumbildung vermeiden Abb 2 Schritt 4 h Warten Sie bis sich das gefriergetrocknete Reagenz aufgel st hat und drehen Sie dann die zusammengef gten Flaschen erneut um Ein Neigungswinkel von 45 erm glicht die Schaumbildung auf ein Mindestma zu beschr nken Abb 2 Schritt 5 Lassen Sie die gesamte Fl ssigkeit in die Kunststoffflasche zur cklaufen i Entfernen Sie das Rekonstitionsverbindungsst ck und das Glasfl schchen Abb 2 Schritt 6 j Verschlie en Sie die Plastikflasche wieder Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das Rekonstitutionsdatum auf dem Etikett ein Abb 2 Schritt 7 k Entsorgen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Glasfl schchen Abb 2 Schritt 8 Warnung Bei der Rekonstitution von Reagenzien Schaumbildung vermeiden Schaum beeintr chtigt die F llstandsmessung im TIGRIS DTS System 1 DI If han A SD 5 YG N Abb 2 Rekonstitutionsverfahren mit dem TIGRIS DTS System oder PANTHER System 2 Vorbereitung von Target Capture Arbeitsreagenz Working Target Capture Reagent wTCR a Paaren Sie die entsprechenden Flaschen TCR und TCR B b Pr fen Sie die Reagenzchargennummern auf dem Hauptchar
48. Einstechen a Wenn sich im Probenr hrchen im Raum zwischen der Fl ssigkeit und dem Deckel Luftblasen befinden zentrifugieren Sie das R hrchen 5 Minuten bei 420 RCF um die Luftblasen zu entfernen b Wenn ein Probenr hrchen ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt wenn die Entnahmeanleitung befolgt wurde zentrifugieren Sie das R hrchen 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet c Falls der Fl ssigkeitsstand in einem Urinprobenr hrchen nicht zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien liegt muss die Probe verworfen werden Nicht in ein berf lltes Reaktionsgef stechen d Wenn ein Urinprobenr hrchen ein Pr zipitat enth lt die Probe bis zu 5 Minuten auf 37 C erw rmen Wenn das Pr zipitat nicht wieder in L sung geht stellen Sie sicher dass das Pr zipitat nicht die Probenabgabe verhindert Hinweis Bei Nichtbefolgen von Schritt 4a 4c kann aus dem Probenr hrchendeckel Fl ssigkeit auslaufen 5 Vor dem Testen von Proben mit Standardkappen undurchstechbar m ssen diese Proben 5 Minuten bei 420 RCF Relative Zentrifugalkraft zentrifugiert werden um vor der Abnahme der Kappe die gesamte Fl ssigkeit zum Boden des Reaktionsgef es zu bringen Verspritzen und Kreuzkontamination vermeiden 6 Setzen Sie ausreichend Zehn Gef Einheiten Ten Tube Units TTUs in den TTU St nder f r die Kontrollen und Proben 7 Wenn eine Arbeitsliste g
49. NCT APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT 5x1 7ml Nicht infekti se GC Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 50 GC Zellen 250fg Test Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verhaltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Hinweis Materialien die von Gen Probe erh ltlich sind sind mit der Katalognummer aufgef hrt sofern nicht anders angegeben Kat Nr PANTHER System 303095 APTIMA Assay Fluids Kit 303014 1000 Tests APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsfl ssigkeit und APTIMA Olreagenz APTIMA Auto Detect Kit Auto Detect Kit 303013 1000 Tests Multi R hrchen Einheiten Multi tube Units MTUs 104772 02 PANTHER Entsorgungsbeutel Kit 902731 PANTHER Abfallbeh lterabdeckung 902714 Oder PANTHER Durchlaufkit 303096 5000 Tests enth lt MTUs Entsorgungsbeutel Abfallbeh lterabdeckungen Assay Fluids und Auto Detect Reagenzien APTIMA COMBO 2 Assay 32 502183DE Rev C PANTHER System Spitzen 1000 uL leitf hig zur Fl ssigkeitsstandmessung APTIMA Probentransferkit Zur Verwendung mit Proben in PreservCyt L sung APTIMA Probenentnahmekit f r Vaginalabstriche APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA
50. RIS DTS System Operator s Manual entnehmen APTIMA COMBO 2 Assay 25 502183DE Rev C TIGRIS DTS System Kat Nr Einweghandschuhe SysCheck Kalibrationsstandard 301078 APTIMA durchl ssige Kappen 105668 Ersatzkappen undurchl ssig 103036A Ersatzkappen f r Kits mit 250 Tests Rekonstitutionsl sungen f r Amplifikations und Sondenreagenz CL0041 100 Kappen Rekonstitutionsl sung f r Enzymreagenz 501616 100 Kappen TCR und Selektionsreagenz CL0040 100 Kappen Optionale Materialien Kat Nr APTIMA Kontrollenkit 301110 GEN PROBE Bleichmittelverst rker 302101 f r die routinem ige Reinigung von Oberfl chen und Ger ten Testverfahren mit dem TIGRIS DTS System Hinweis N here Verfahrensinformationen zum TIGRIS DTS System finden Sie im Bedienungsanleitung f r das TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System Operator s Manual A Vorbereitung des Arbeitsbereichs 1 Reinigen Sie Arbeitsfl chen auf denen Reagenzien und Proben vorbereitet werden sollen Wischen Sie die Arbeitsfl chen mit einer Natriumhypochloritl sung von 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen einwirken Sp len Sie sie anschlie end mit Wasser ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Decken Sie die Arbeitsfl che auf der die Reagenzien und Proben vorbereitet werden mit sauberen absorbierenden Labortischunterlagen mit Kunststoffunterschicht ab B Reagenzr
51. TS System Eines der 5 weiblichen Urin Panel Replikate von einem separaten Panel war CT auf den DTS Systems Tabelle 16 Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Ergebnisse mit Endozervixabstrichen und m nnlichen urethralen Abstrichproben DTS Systeme TIGRIS DTS System Gesamt CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC 30 0 0 0 30 CT GC 0 108 0 2 110 CT GC 1 0 67 0 68 CT GC 0 12 2 796 810 Gesamt 31 120 69 798 1018 Prozentuale bereinstimmung 96 8 83 3 99 9 90 0 83 2 94 7 97 1 89 9 99 6 99 7 99 1 100 nicht zutr 95 V I Prozentuale Gesamt bereinstimmung 95 V I 98 3 97 3 99 0 bezeichnet positiv bezeichnet negativ nicht zutr nicht zutreffend Nicht dargestellte Daten Zwei Proben zeigten sowohl mit dem TIGRIS DTS System als auch mit den DTS Systems ein unbestimmtes Ergebnis f r CT GC Eine Probe war CT GC auf dem TIGRIS DTS System aber CT GC unbestimmt auf den DTS Systems Beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems war diese Probe CT GC Die Probe war auch GC im alternativen TMA Amplifikationsassay 74 1 war CT GC beim Wiederholungstest auf den DTS Systems und war CT im alternativen TMA Amplifikationsassay 311 12 wurden erneut getestet 11 11 waren CT GC beim Wiederholungstest im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems 9 11 waren CT beim Wiederholungstest im alternativen TMA Amplifikationsassay und 2 11 waren CT 4
52. Ubertragbaren Infektionen Allein in den Vereinigten Staaten wurden den Centers for Disease Control im Jahre 2010 schatzungsweise 1 307 893 Neuinfektionen mit CT 426 0 Falle pro 100 000 Einwohner und 309 341 Neuinfektionen mit GC 100 8 pro 100 000 Einwohner gemeldet 5 Chlamydiae sind unbewegliche Gram negative obligat intrazellulare Bakterien Die CT Spezies besteht aus 15 Serovaren A B Ba C D E F G H I J K L1 L2 und L3 die eine Erkrankung beim Menschen verursachen k nnen 34 Die Serovaren D bis K sind die Hauptursache von genitalen Chlamydieninfektionen beim Mann und bei der Frau 26 C trachomatis kann nicht gonorrhoische Urethritis Epididymitis Proktitis Zervizitis akute Salpingitis und PID entz ndliche Beckenerkrankungen verursachen 3 15 28 29 C trachomatis Infektionen sind oft asymptomatisch bei M nnern und Frauen Bei Neugeborenen von infizierten M ttern besteht ein signifikant h heres Risiko f r Einschlusskonjunktivitis und Chlamydien Pneumonie 1 11 27 In der Vergangenheit wurden mehrere Verfahren zum CT Nachweis im klinischen Labor verwendet darunter Zellkulturen direkte Fluoreszenz Antik rpertests und Enzymimmunoassays EIA Die neueren Methoden zum CT Nachweis umfassen direkte DNA Sondentests und Nukleins ure Amplifikationstests NAATs DNA Sondentests Zellkulturen galten einst als Goldstandard zum Nachweis von CT Kulturen sind zwar spezifisch aber wissenschaftliche Publikati
53. Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und Frauen APTIMA Urinproben Transportr hrchen f r Urinproben von M nnern und Frauen Chlorbleiche 5 bis 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung Einweghandschuhe SysCheck Kalibrationsstandard APTIMA durchl ssige Kappen Ersatzkappen undurchl ssig Ersatzkappen f r Kits mit 250 Tests Rekonstitutionsl sungen f r Amplifikations und Sondenreagenz CL0041 100 Kappen 501616 100 Kappen CL0040 100 Kappen Rekonstitutionsl sung f r Enzymreagenz TCR und Selektionsreagenz Ersatzkappen f r Kits mit 100 Tests Rekonstitutionsl sungen f r Amplifikations Enzym und Sondenreagenz CL0041 100 Kappen 501604 100 Kappen TCR und Selektionsreagenz Optionale Materialien APTIMA Kontrollenkit GEN PROBE Bleichmittelverst rker f r die routinem ige Reinigung von Oberfl chen und Ger ten 10612513 Tecan 301154C 301162 301041 301040 105575 301078 105668 103036A Kat Nr 301110 302101 APTIMA COMBO 2 Assay 33 502183DE Rev C PANTHER System Testverfahren mit dem PANTHER System Hinweis N here Verfahrensinformationen zum PANTHER System finden Sie im Bedienungsanleitung f r das PANTHER System PANTHER System Operator s Manual A Vorbereitung des Arbeitsbereichs 1 Reinigen Sie Arbeitsfl chen auf denen Reagenzien und Proben vorbereitet werden sollen Wischen Sie die Arbeitsfl chen mit einer Natriumhypochloritl sung v
54. a OS GEN PROBE APT MA APTIMA COMBO 2 Assay Zur Verwendung in der n vitro Diagnostik Nur zum US Export Allgemeine Informationen 2 05 2 Verwendungszweck 00000 eee ee 2 Zusammenfassung und Testerkl rung 2 000 ees 2 Testprfinzi 4 2 2u een Ohba bbe ee bd ke ran ees 3 Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen 00e 0 eee 4 Lagerungs und Handhabungsbedingungen f r Reagenzien 7 Probenentnahme und lagerung 20000e eee ee eaee 8 Testauswertung Qualitatskontrolle Patientenergebnisse 39 EINSCHIaNkKUNGEN ence sipsien aeina as 42 Sollwerte mit DTS Systemen 0 00 c cece eee eee 45 Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen 47 Analytische Leistung der DTS Systeme 2 000055 70 Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System 74 Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System 81 Analytische Leistung des PANTHER Systems 85 Literatur 26 26 20600 eect Bed Re eee a a eee eee 88 DTS DTS TIGRIS ch DTS Systeme zuususansonnnnnnnsnnunnunnunnunzunnunnansunnnnnnnnnnnnnnnn 11 TIGRIS DTS System uunensensenssunnunnunnunnunnnnanunnunnunnnnnnnn 24 Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien 11 Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien 24 Erforderliche j
55. ad und mischen Sie die Reaktionsr hrchen indem Sie den St nder vorsichtig von Hand sch tteln APTIMA COMBO 2 Assay 18 502183DE Rev C DTS Systeme 8 Den St nder bei 42 C 1 C in einem Wasserbad f r die Dauer von 60 15 Minuten inkubieren E Dual Kinetic Assay DKA Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das SB100 Anwendungsblatt Der zur Hybridisierung und f r die Selektionsschritte verwendete Wiederholungspipetten muss zur ausschlie lichen Verwendung in diesen Schritten bereitgestellt werden Siehe Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen 1 Hybridisierung a Entfernen Sie den St nder aus dem Wasserbad und berf hren Sie ihn in den DKA Bereich Geben Sie mit der Wiederholungspipette 100 uL des rekonstituierten Sondenreagenzes in jedes Reaktionsr hrchen Alle Reaktionsmischungen sollten jetzt eine gelbe Farbe aufweisen b Decken Sie die Reaktionsgef e mit Abdeckfolie ab und mischen Sie den St nder mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e c Den St nder bei 62 C 1 C in einem Wasserbad f r die Dauer von 20 5 Minuten inkubieren d Entfernen Sie den St nder aus dem Wasserbad und inkubieren Sie ihn 5 1 Minute bei Raumtemperatur 2 Selektion a Geben Sie mit der Wiederholungspipette 250 uL Selektionsreagenz in jedes Reaktionsr hrchen hinzu Alle Reaktionsmischungen sollten jetzt eine rote Farbe aufweisen b Decken Sie die Reaktionsgef e mit Abdeckfolie ab misc
56. agern E Nach der Rekonstitution sind das Enzymreagenz Amplifikationsreagenz und das Sondenreagenz stabil f r 30 Tage bei Lagerung im Temperaturbereich von 2 C bis 8 C F Entsorgen Sie alle unbenutzten rekonstituierten Reagenzien und wTCR nach 30 Tagen bzw nach Ablauf des Verfallsdatums der Hauptcharge das fr here Datum ist ausschlaggebend APTIMA COMBO 2 Assay 7 502183DE Rev C Allgemeine Informationen G Kontrollen sind bis zum auf dem jeweiligen Fl schchen angegebenen Datum stabil H Im TIGRIS DTS System aufbewahrte Reagenzien haben eine Haltbarkeit von 48 Stunden im System I Im PANTHER System aufbewahrte Reagenzien haben eine Haltbarkeit von 72 Stunden im System J Das Sondenreagenz und das rekonstituierte Sondenreagenz sind lichtempfindlich Die Reagenzien sind vor Licht gesch tzt zu lagern Die angegebene rekonstituierte Stabilit t basiert auf einer 12 st ndigen Exposition des rekonstituierten Sondenreagenzes gegen ber zwei 60 Watt Leuchtstoffbirnen im Abstand von ca 43 cm 17 Zoll und bei einer Temperatur von unter 30 C K Nach Erw rmung auf Raumtemperatur k nnen manche Kontrollgef e eine Tr bung aufweisen oder Pr zipitate enthalten Tr bung oder Pr zipitate in Verbindung mit Kontrollen haben keine Auswirkung auf die Leistung der Kontrollen Wenn klare Kontrollen gew nscht werden kann die Solubilisierung beschleunigt werden indem sie im oberen Raumtemperaturbereich 15 C bis 30 C ink
57. ammengefasst Tabelle 4 Zusammenfassung der zervikalen Probenentnahmeger te die in der Studie mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap verwendet wurden Klinischer Entnahmeort Zervikales Probenentnahmeger t Gesamt 1 2 3 4 5 6 Spatel Cytobrush 0 124 475 287 57 364 1307 Besenartiges Ger t 100 0 0 0 240 0 340 APTIMA COMBO 2 Assay 51 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Leistungstabellen f r Chlamydia trachomatis C trachomatis Sensitivit t und Spezifit t Tabelle 5a Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus des Patienten Probe Symptom Sensitivit t Spezifit t status N T F TN FN 95 V I 95 V I Sympt 676 190 15 464 7 96 4 92 8 98 6 96 9 94 9 98 2 Abstrich Asympt 388 70 5 309 4 94 6 86 7 98 5 98 4 96 3 99 5 Alle 1065 260 20 774 11 95 9 92 9 98 0 97 5 96 1 98 5 M nnlich Sympt 694 199 8 484 3 98 5 95 7 99 7 98 4 96 8 99 3 Urin Asympt 400 77 4 316 3 96 3 89 4 99 2 98 8 96 8 99 7 Alle 1095 276 12 801 6 97 9 95 4 99 2 98 5 97 4 99 2 Sympt 819 133 22 653 11 92 4 86 7 96 1 96 7 95 1 97 9 Abstrich Asympt 569 61 6 501 1 98 4 91 3 100 98 8 97 4 99 6 Alle 1389 195 28 1154 12 94 2 90 1 97 0 97 6 96 6 98 4 Weiblich Sympt 821 136 8 668 9 93 8 88 5 97 1 98 8 97 7 99 5 Urin Asympt
58. anzen Abstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden einzeln mit den folgenden potenziell interferierenden Substanzen versetzt 10 Blut Verh tungsmittel Gel Spermizid Hautcreme H morrhoiden An sthetikum K rper l Puder Pilzsalbe Scheidengleitmittel Intimspray und Leukozyten 1 0 x 10 Zellen mL Urinproben wurden einzeln mit den folgenden potenziell interferierenden Substanzen versetzt 30 Blut Urinanalyte Protein Glukose Ketone Bilirubin Nitrat Urobilinogen pH 4 sauer pH 9 basisch Leukozyten 1 0 x 10 Zellen mL Zellfragmente Vitamine Mineralien Acetaminophen Aspirin und Ibuprofen Alle wurden auf potenzielle APTIMA COMBO 2 Assay 502183DE Rev C Analytische Leistung der DTS Systeme Testinterferenz bei Abwesenheit und Gegenwart von CT und GC beim gesch tzten rRNA quivalent von 1 0 CT IFU Test 5 fg Test und 50 GC Zellen Test 250 fg Test getestet Die rRNA quivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Bei keiner der getesteten Substanzen wurde eine Interferenz beobachtet Keine Amplifikationsinhibitoren wurden im APTIMA COMBO 2 Assay beobachtet Gewinnung Escherichia coli und Gardnerella vaginalis 2 4 x 10 Zellen Assay und Lactobacillus acidophilus Gardnerella vaginalis Bacteroides ureolyticus und Staphylococcus epidermis 1 0 x 10 Zellen Assay
59. ation i Zwischen Zwischen e RLU Laufintern Zwischen L ufen H 5 fg Assay berein Pr fzentren Bedienern N immun Mittelwert CT Gc g x1000 SA VK SA VK SA VK SA VK x1000 x1000 x1000 x1000 0 0 162 97 5 9 7 31 6 NA 3 4 NA 6 4 NA 4 7 NA 0 5000 54 96 3 1296 146 11 3 54 8 4 2 0 0 0 0 0 0 0 0 2000 0 54 100 1140 54 1 47 79 8 7 0 101 8 9 2 4 0 2 2000 5000 54 100 2345 79 6 3 4 78 0 3 3 94 7 4 0 37 9 1 6 0 250 54 100 953 114 12 0 0 0 0 0 161 16 9 90 7 9 5 5 0 54 100 971 58 3 6 0 71 7 7 4 22 8 2 4 85 0 8 8 1000 2500 54 100 2294 114 5 0 88 9 3 9 153 6 7 0 0 0 0 100 250 54 98 1 1911 139 7 3 130 6 8 348 18 2 39 7 2 1 5 5000 54 100 2136 113 5 3 130 6 1 98 8 4 6 166 7 8 2000 250 54 96 3 2044 138 6 7 169 8 3 360 17 6 26 9 1 3 RLU relative Lichteinheiten Relative Light Units SA Standardabweichung VK Variationskoeffizient NA bedeutet dass die Probe f r negative Panelproben nicht zutrifft Proben mit widerspr chlichen und unbestimmten Ergebnissen wurden in der Signalvariabilit tsanalyse ber cksichtigt F r VK und SA Werte gleich 0 0 ist die Variabilit t aufgrund dieser Quelle sehr gering relativ zu anderen Variationsquellen APTIMA COMBO 2 Assay 69 502183DE Rev C Analytische Leistung der DTS Systeme Analytische Leistung der DTS Systeme Siehe Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System im Anschluss an den Abschnitt Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System
60. auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Diese Panels wurden auf drei PANTHER Systemen unter Verwendung von drei Reagenzienchargen in 96 Replikaten getestet Die bereinstimmung mit dem erwarteten Ergebnis wurde berechnet Die bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen betrug 100 95 V I 96 1 100 f r alle Urin Panels 100 95 V I 96 0 100 f r alle PreservCyt L sung Panels und 100 95 V I 96 1 100 f r alle STM Panels Die analytische Sensitivit t f r den Assay betr gt 2 5 IFU mL f r CT und 125 CFU mL f r GC Reproduzierbarkeitsstudie Die Pr zision des APTIMA COMBO 2 Assays wurde ber drei PANTHER Systeme drei Kitchargen des APTIMA COMBO 2 Assays und einen Zeitraum von 24 Tagen hinweg beurteilt Die Panels wurden hergestellt indem STM bei den in Tabelle 26 gezeigten Konzentrationen mit CT und oder GC rRNA versetzt wurde Die Bediener f hrten zwei Durchl ufe pro Tag durch wobei jede Panelprobe in zwei Replikaten pro Durchlauf analysiert wurde Die bereinstimmung mit dem erwarteten Ergebnis wurde berechnet und die Pr zision wurde gem den NCCLS Guidelines EP5 A2 24 gesch tzt Die Gesamtzahl der Replikate f r jedes Panel betrug 96 Tabelle 26 stellt die RLU Pr zisionsdaten nach Mittelwert Standardabweichung Variationskoeffizient VK und prozentualer bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen f r die Berechnung der Variabilit t zw
61. ay auf den DTS Systems und war CT im alternativen TMA Amplifikationsassay Tabelle 18 Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Ergebnisse mit vaginalen Abstrichproben DTS Systeme TIGRIS DTS System Gesamt CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC 26 0 0 0 26 CT GC 0 44 0 2 46 CT GC 0 0 24 0 24 CT GC 0 0 1 73 74 Gesamt 26 44 25 75 170 Prozentuale Ubereinstimmung 100 86 8 100 100 92 0 100 96 0 79 6 99 9 97 3 90 7 99 7 nicht zutr 95 V I Prozentuale Gesamt bereinstimmung 95 V I 98 2 94 9 99 6 bezeichnet positiv bezeichnet negativ nicht zutr nicht zutreffend Tabelle 19 Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Ergebnisse mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap DTS Systeme TIGRIS DTS System Gesamt CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC 26 0 0 0 26 CT GC 0 44 0 1 45 CT GC 0 0 24 0 24 CT GC 0 1 1 73 75 Gesamt 26 45 25 74 170 Prozentuale bereinstimmung 100 86 8 100 97 8 88 2 99 9 96 0 79 6 99 9 98 6 92 7 100 nicht zutr 95 V I Prozentuale Gesamt bereinstimmung 95 V I 98 2 94 9 99 6 bezeichnet positiv bezeichnet negativ nicht zutr nicht zutreffend APTIMA COMBO 2 Assay 77 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Tabelle 20 Studie zur bereinstimmung des klinischen CT GC Panels
62. b die sich von APTIMA COMBO 2 Assay 49 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen den Zielsequenzen des APTIMA COMBO 2 Assays eindeutig unterscheiden Die Ergebnisse der alternativen TMA Assays wurden nicht verwendet um die urspr nglichen Patientenkategorisierungen zu ndern Tabellen 5b und 9b Von den 1464 in die Studie aufgenommenen Probanden hatten 13 einen unbekannten Patienteninfektionsstatus f r CT und 14 Probanden hatten einen unbekannten Patienteninfektionsstatus f r GC Die Probanden wurden mit einem unbekannten Patienteninfektionsstatus belegt wenn es keine Ergebnisse gab die eine endg ltige Entscheidung ber den Infektionsstatus erlaubt h tten Die Ergebnisse dieser Probanden wurden in den Leistungsberechnungen nicht ber cksichtigt Unter den 5782 Vaginalabstrichergebnissen des APTIMA COMBO 2 Assays in der multizentrischen klinischen Studie gab es einen kleinen Prozentsatz 28 0 5 von Vaginalabstrichproben die anf nglich ein ung ltiges oder unbestimmtes Testergebnis f r CT oder GC hatten Nach Wiederholungstests waren nur drei CT Ergebnisse und zwei GC Ergebnisse unbestimmt und wurden aus der Analyse ausgeschlossen Keine Proben hatten bei den Wiederholungstests ein ung ltiges Ergebnis Klinische Studie zu Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Eine prospektive multizentrische klinische Studie wurde durchgef hrt um die Verwendung der PreservC
63. bereinstimmung mit erwarteten CT und GC Ergebnissen f r endozervikale Abstrichproben m nnliche urethrale Abstrichproben sowie weibliche und m nnliche Urin Panels Konzentration der Panelproben CT Ge ee Replikate TIGRIS DTS TIGRIS DTS CT GC CT GC IFU mL CFU mL sag 5 fi a Ubereinst bereinst bereinst Ubereinst Niedrig niedrig 2 5 125 20 100 100 100 100 Niedrig hoch 2 5 125 000 20 100 95 100 100 Hoch niedrig 2500 125 20 100 100 100 100 Hoch hoch 2500 125 000 20 100 100 100 100 Sehr niedrig neg 0 25 0 20 85 100 100 100 Niedrig neg 2 5 0 20 100 100 100 100 Mittel neg 25 0 20 100 100 100 100 Hoch neg 2500 0 20 100 100 100 100 Neg sehr niedrig 0 12 5 20 100 100 100 100 Neg niedrig 0 125 20 100 100 100 100 Neg mittel 0 1250 19 100 100 100 100 Neg hoch 0 125 000 20 100 100 100 100 Neg neg 0 0 20 100 100 100 100 Prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS und DTS 95 V I 99 3 98 3 99 8 IFU einschlussbildende Einheiten Inclusion Forming Units CFU koloniebildende Einheiten Colony Forming Units TIGRIS Ubereinst bereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und erwarteten Ergebnissen DTS Ubereinst bereinstimmung zwischen DTS Systems und erwarteten Ergebnissen Ein Entnahmer hrchen enth lt ca 2 9 mL Transportmedium f r Abstrichproben und 4 0 mL einer Transportmedium Urin Mischung f r Urinproben Die CT Konzentration in dieser
64. ch 0 200 und 400 Tagen getestet Alle gespikten Proben erf llten das Annahmekriterium von 95 bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen APTIMA COMBO 2 Assay 73 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Die bereinstimmung zwischen den Ergebnissen des APTIMA COMBO 2 Assays die mit dem vollautomatischen TIGRIS DTS System und den halbautomatischen DTS Systems erzeugt wurden wurde anhand von Tests von Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben Vaginalabstrichen und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap beurteilt Jede der klinischen Proben wurde einzeln mit dem APTIMA COMBO 2 Assay sowohl auf dem TIGRIS DTS System als auch den DTS Systems bei Gen Probe getestet Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Endozervixabstrich m nnliche urethrale Abstrichprobe weibliche und m nnliche Urinproben Probanden und Probandinnen die eine Klinik f r Geschlechtskrankheiten dringende Behandlung ffentliche Gesundheit und Familienplanung besuchten wurden an sieben geographisch verschiedenen Pr fzentren mit geringer bis hoher CT und GC Pr valenz aufgenommen Die Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben beurteilte die bereinstimmung zwischen den beiden Systemen unter Einsatz von Abstrich und Urinproben von 485 m nnlichen und 576 weiblichen P
65. chachtel Schachtel 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Menge Menge Symbol Bestandteil Kit f r 250 Kit f r Tests 100 Tests AR APTIMA COMBO 2 1x 27 7 mL 1x 11 9 mL Amplifikationsrekonstitutionsl sung W ssrige L sung mit Konservierungsmitteln ER APTIMA COMBO 2 Enzymrekonstitutionsl sung 1x 11 1 mL 1x 6 3 mL HEPES gepufferte L sung mit oberfl chenaktiver Substanz und Glyzerol PR APTIMA COMBO 2 1x 35 4 mL 1x 15 2 mL Sondenrekonstitutionsl sung Sukzinatgepufferte L sung mit lt 5 Detergens APTIMA COMBO 2 Assay 31 502183DE Rev C PANTHER System APTIMA COMBO 2 Raumtemperatur Schachtel Schachtel 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Menge Menge Symbol Bestandteil Kit f r 250 Kit f r Tests 100 Tests S APTIMA COMBO 2 Selektionsreagenz 1x 108 mL 1 x 43 0 mL 600 mM Boratpufferl sung mit oberflachenaktiver Substanz TCR APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz 1x 54 mL 1 x 26 0 mL Gepufferte Salzl sung mit Festphase und F nger Oligomeren Rekonstitutions verbindungsst cke 3 3 Hauptchargen Barcode Blatt 1 Blatt 1 Blatt APTIMA Kontrollenkit nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge PCT NGC APTIMA Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC 5x 1 7 ml Nicht infekti se CT Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 1 CT IFU 5fg Test PGC
66. chend den Anweisungen im Bedienungsanleitung f r das TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System Operator s Manual und im Abschnitt Verfahrenshinweise ein Verfahrenshinweise A Controls 1 Anfangs und Endkontrollen sind erforderlich um einen vorschriftsm igen Betrieb mit der APTIMA Assay Software f r das TIGRIS DTS System sicherzustellen Die Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC m ssen in der ersten Position und der vorletzten Position einer Arbeitsliste sein Das Etikett dieser Kontrolle ist rosa Der Etiketttext lautet CONROL CT PCT CONTROL GC NGC Die Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT m ssen in der zweiten Position und der letzten Position einer Arbeitsliste sein Diese Kontrolle hat ein blau gr nes Etikett Der Etiketttext lautet CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT 2 Jedes APTIMA Kontrollgef kann einmal getestet werden Wenn versucht wird mehr als einmal aus dem R hrchen zu pipettieren kann es zu Fehlern aufgrund unzureichender Mengen kommen B Temperatur Raumtemperatur ist definiert als 15 C bis 30 C C Handschuhpuder Wie in jedem Reagenzsystem kann berm iger Puder auf manchen Handschuhen eine Kontamination ge ffneter Reaktionsgef e verursachen Es werden ungepuderte Handschuhe empfohlen APTIMA COMBO 2 Assay 29 502183DE Rev C TIGRIS DTS System D berwachungsprotokoll f r Laborkontamination f r das TIGRIS DTS System Es gibt viele laborspezifische Faktoren
67. chproben APTIMA Probentransferkit SysCheck Kalibrationsstandard Bleichmittel 5 ige bis 7 ige 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung Standard Urinsammelbeh lter ohne Konservierungsmittel Plastikbeh lter mit gro em Deckel APTIMA durchl ssige Kappen Ersatzkappen undurchl ssig Optionale Materialien PACE Probenentnahmekit f r Proben aus der m nnlichen Harnr hre oder Bindehaut PACE Probenentnahmekit f r endozervikale Proben APTIMA Adapterkit GEN PROBE Bleichmittelverst rker f r die routinem ige Reinigung von Oberfl chen und Ger ten APTIMA Kontrollenkit APTIMA Assay Fluids APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsfl ssigkeit und APTIMA Olreagenz STD Proficiency Panel Spitzen 1000 uL leitf hig zur Fl ssigkeitsstandmessung TECAN Freedom EVO 100 4 mit DTS 800 Systems APTIMA COMBO 2 Deckplatte 105200 Reagenzien Vorratsbeh lter Viertelmodul 40 mL 104765 Geteilter Reagenzien Vorratsbeh lter Viertelmodul 19 mL x 2 104763 DTS Systeme Kat Nr 105049 705512 Fisher TU0022 104578 301041 301040 105575 301162 301154C 301078 105668 103036A Kat Nr 103275 103300 301087 302101 301110 302002C 102325 10612513 Tecan 900932 APTIMA COMBO 2 Assay 13 502183DE Rev C DTS Systeme Testverfahren mit DTS Systemen A Ger tevorbereitung 1 Temperieren Sie ein Wasserbad auf 62 C 1 C f r Target Capture und Primer Annealing ein zweite
68. chritt 6 APTIMA COMBO 2 Assay 14 502183DE Rev C DTS Systeme i Verschlie en Sie die Flasche wieder Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das Rekonstitutionsdatum auf dem Etikett ein Abb 1 Schritt 7 j Werfen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Fl schchen weg Abb 1 Schritt 8 1 5 3 4 Sg rn Abb 1 Rekonstitutionsverfahren mit DTS Systems 2 Zuvor rekonstituierte Amplifikations Enzym und Sondenreagenzien m ssen vor dem Start des Assays auf Raumtemperatur 15 C bis 30 C gebracht werden Wenn das Sondenreagenz ein Pr zipitat enth lt das bei Raumtemperatur nicht wieder in L sung geht erw rmen Sie es 1 bis 2 Minuten auf 62 C Nach diesem Erw rmungsschritt kann das Sondenreagenz verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Nach der Resuspension durch vorsichtiges Umdrehen vermischen Schaumbildung vermeiden Hinweis Dieser Umdrehschritt muss jedes Mal erfolgen wenn das Pr zipitat in L sung gebracht wird ob durch Erhitzen auf 62 C oder Erw rmen auf Raumtemperatur 3 Vorbereitung von Target Capture Arbeitsreagenz Working Target Capture Regeant wTCR a Transferieren Sie 20 mL des TCR in einen speziell reservierten sauberen trockenen Beh lter von entsprechender Gr e b Geben Sie mit einer Mikropipette 200 uL des TCR B in das TCR Mischen Sie die L sung gr ndlich durch Schwenken Etikettieren Sie den Beh lter
69. dded can influence false negative rates in the LCx assay but not in the APTIMA COMBO 2 Assay when testing for inhibitors J Clin Microbiol 41 778 782 9 Crotchfelt K A B Pare C Gaydos and T C Quinn 1998 Detection of Chlamydia trachomatis by the Gen Probe AMPLIFIED Chlamydia Trachomatis assay AMP CT in urine specimens from men and women and endocervical specimens from women J Clin Microbiol 36 391 394 10 Farrel D J 1999 Evaluation of AMPLICOR Neisseria gonorrhoeae PCR using cppB nested PCR and 16S rRNA PCR J Clin Microbiol 37 386 390 APTIMA COMBO 2 Assay 88 502183DE Rev C 11 Frommell G T R Rothenberg S Wang and K Mcintosh 1979 Chlamydial infection of mothers and their infants Journal of Pediatrics 95 28 32 12 Gaydos C A T C Quinn D Willis A Weissfeld E W Hook D H Martin D V Ferraro and J Schachter 2003 Performance of the APTIMA COMBO 2 Assay for detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae in female urine and endocervical swab specimens J Clin Microbiol 41 304 309 13 Goessens W H F J W Mouton W I Van Der Meijden S Deelen T H Van Rijsoort Vos N L Toom H Verbrugh and R P Verkooyen 1997 Comparison of three commercially available amplification assays AMP CT LCx and COBAS AMPLICOR for detection of Chlamydia trachomatis in first void urine J Clin Microbiol 35 2628 2633 14 Holmes K K G W Counts and H N Beatz 1971 Dis
70. den Umfasst 1 m nnlichen Probanden und 1 weibliche Probandin f r die die Symptome nicht berichtet wurden Alternative GC TMA Ergebnisse stellen Anzahl positive Ergebnisse Anzahl getestete Proben dar a 5 5 b 12 12 c 17 17 d 0 1 e 2 2 f 2 3 g 13 15 h 2 2 i 15 17 j 4 7 k 0 2 I 4 9 m 18 20 n 14 14 0 32 34 p 4 8 q 2 4 und r 6 12 Tabelle 9b Vaginale Abstrichproben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Probe Symptom Sensitivitat Spezifitat status FP TN FN 95 V I 95 V I Vom Patienten yacinalet selbst a Asympt 629 3 605 0 100 83 9 100 99 5 98 6 99 9 Abstrich durch gef hrter Vom Arzt n Sympt 807 51 7 747 2 96 2 87 0 99 5 99 1 98 1 99 6 entnom AA Asympt 637 21 4 611 1 95 5 77 2 99 9 99 3 98 3 99 8 mener Alle 1444 72 11 1358 3 96 0 88 8 99 2 99 2 98 6 99 6 E a enemas TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ Alternative GC TMA Amplifikationsergebnisse stellen Anzahl positive Ergebnisse Anzahl getestete Proben dar a 3 3 b 6 7 c 3 4 und d 9 11 APTIMA COMBO 2 Assay 60 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 9c PreservCyt Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus der Patientin Symptom Tery t sig eu Ie
71. den Probenentnahmekits entnommenen Proben wurde nicht beurteilt e APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben e _APTIMA Urinproben Transportr hrchen f r Urinproben von M nnern und Frauen e APTIMA Entnahmekit f r Vaginalabstrichproben APTIMA Probentransferkit zur Verwendung mit in PreservCyt L sung entnommenen gyn kologischen Proben Spezifisch f r DTS Systeme e PACE Probenentnahmekit f r m nnliche urethrale oder konjunktivale Proben in Verbindung mit dem APTIMA Adapterkit e _ _PACE Probenentnahmekit f r endozervikale Proben in Verbindung mit dem APTIMA Adapterkit F Die Entnahme von Urinproben Vaginalabstrichen und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap soll kein Ersatz f r Zervixuntersuchungen und endozervikale Proben zur Diagnose von urogenitalen Infektionen bei Frauen sein Die Patientinnen k nnen Zervizitis Urethritis Harnwegsinfektionen oder Vaginalinfektionen mit anderen Ursachen oder gleichzeitige Infektionen durch andere Erreger haben APTIMA COMBO 2 Assay 42 502183DE Rev C Einschr nkungen G Der APTIMA COMBO 2 Assay ist nicht zur Beurteilung bei Verdacht auf sexuellen Missbrauch oder f r andere rechtsmedizinische Indikationen bestimmt Bei Patienten bei denen ein falsch positives Ergebnis eine psychosoziale Beeintr chtigung ausl sen kann empfehlen die CDC einen Wiederholungstest 4 H Zuver
72. e jedes Organismus berechnet Die gek hlte Schachtel enth lt auch die folgenden Artikel in einer Aufbewahrungsschale nach Empfang bei 2 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge AR APTIMA COMBO 2 Amplifikationsrekonstitutionsl sung 1x 9 3 mL W ssrige L sung mit Konservierungsmitteln ER APTIMA COMBO 2 Enzymrekonstitutionsl sung 1x 3 3 mL HEPES gepufferte L sung mit oberfl chenaktiver Substanz und Glyzerol PR APTIMA COMBO 2 Sondenrekonstitutionsl sung 1x 12 4 mL Sukzinatgepufferte L sung mit lt 5 Detergens APTIMA COMBO 2 Assay 11 502183DE Rev C DTS Systeme Die gek hlte Schachtel enth lt auch die folgenden Artikel in einer Aufbewahrungsschale nach Empfang bei 2 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge S APTIMA COMBO 2 Selektionsreagenz 1x 31 mL 600 mM Boratpufferl sung mit oberfl chenaktiver Substanz Rekonstitutions verbindungsst cke 3 Abdeckfolie 1 Packung APTIMA COMBO 2 Raumtemperatur Schachtel Schachtel 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge TCR APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz 1x 22 mL Gepufferte Salzl sung mit Festphase und Fanger Oligomeren Ww APTIMA Waschl sung 1x402 mL 10 mM HEPES gepufferte L sung mit lt 2 Detergens DF APTIMA Puffer f r Deaktivierungs fl ssigkeit 1x402 mL 800 mM Bicarbonat gepufferte L sung O APTIMA lreagenz 1 x 24 6 mL Silikon l Erforderliche jedoch
73. e unten Ein Testergebnis kann aufgrund eines Parameters der au erhalb der normal erwarteten Bereiche liegt ung ltig sein Anf ngliche unbestimmte oder ung ltige Testergebnisse sollten durch Testwiederholung neu bestimmt werden Gesamt RLU x1000 f r CT Ergebnis Kinetiktyp Negativ Unbestimmt Positiv Nur CT 1 bis lt 25 25 bis lt 100 100 bis lt 4500 CT und GC 1 bis lt 85 85 bis lt 250 250 bis lt 4500 CT unbestimmt 1 bis lt 85 85 bis lt 4500 NA Gesamt RLU x1000 f r GC Ergebnis Kinetiktyp Negativ Unbestimmt Positiv Nur GC 1 bis lt 60 60 bis lt 150 150 bis lt 4500 GC und CT 1 bis lt 85 85 bis lt 250 250 bis lt 4500 GC unbestimmt 1 bis lt 85 85 bis lt 4500 NA Ergebnisse und Akzeptanz von Qualit tskontrollen Die Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC und die Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT fungieren als Kontrollen f r die Assayschritte Target Capture Amplifikation und Nachweis Es k nnen weitere Kontrollen f r Zytolyse und RNA Stabilisierung mit aufgenommen werden um den Richtlinien oder Anforderungen von rtlichen regionalen und oder staatlichen Bestimmungen und Akkreditierungs organisationen zu gen gen Die Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC dient als Negativkontrolle f r die GC Assayergebnisse Die Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT dient als Negativkontrolle f r die CT Testergebnisse Auf Wunsch kann zur berwachung d
74. ebnisse der alternativen Amplifikationsassays wurden nicht verwendet um die urspr nglichen Patientenkategorisierungen zu ndern Tabellen 5a und 9a Endozervikale Abstrichproben wurden auf die Wirkung von Blut auf die CT und GC Assayleistung beurteilt Von den 2454 Proben die auf CT Leistung hin beurteilt wurden waren 234 9 5 blutig Von den 2829 Proben die auf GC Leistung hin beurteilt wurden waren 247 8 7 blutig Weder die CT noch die GC Assayleistung zeigte einen statistischen Unterschied f r blutige im Vergleich zu unblutigen Proben Zus tzliche Daten zu Bluttests finden Sie in Interferierende Substanzen Die Leistung des Assays mit endozervikalen Abstrichen und Urinproben von Schwangeren wurde in der klinischen Studie beurteilt F r CT betrug die Sensitivit t f r die endozervikalen Abstriche und Urinproben jeweils 100 8 8 und 100 8 8 Die Spezifit t f r endozervikale Abstriche und Urinproben betrug jeweils 95 8 23 24 und 100 24 24 F r GC betrug die Sensitivit t f r die endozervikalen Abstriche und Urinproben jeweils 100 8 8 und 100 8 8 Die Spezifit t f r endozervikale Abstriche und Urinproben betrug jeweils 100 26 26 und 100 26 26 Von den 11 406 Testergebnissen des APTIMA COMBO 2 Assays aus dieser multizentrischen klinischen Studie waren drei CT Ergebnisse und neun GC Ergebnisse in Wiederholungstests unbestimmt und wurden aus der Analyse ausgeschlossen Eine Probe wurde wegen Ung ltigkeit d
75. edoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien eenneensententeenn 1 Materialien u een men 25 Optionale Materialien ensenennennnn 13 Optionale Materialien uanannnnnneennennnnnennnnnnn 26 Testverfahren mit DTS Systemen unnsensunnsennnnnnennnnnnnnnnnnnn 14 Testverfahren mit dem TIGRIS DTS System 26 Verfahrenshinweise cccccccicssesbessedretieecoepectevatecesseassiesseanesiest 20 Verfahrenshinweise e ccccccccccccccccecccccccccececccecceccccecceceeceeceeceeces 29 pepesa PANTHER PANTHER System asssssssuessunnsnunennnnennnnnnnnnnnnnnnnnennnnnnnn nnn 31 Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien 31 Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene M terialien 2 28 Re senenenieaknahe 32 Optionale Materialien 222404442nnnennnnnnnnnnnnnnnennnnn 33 Testverfahren mit dem PANTHER System nunnunenssnnnenennnns 34 Verfahrenshinweise 20044244004nnnnnnnnnnnnnnnnannnnnnnnnnnnnn 37 1 502183DE Rev C Allgemeine Informationen Allgemeine Informationen Verwendungszweck Der APTIMA COMBO 2 Assay ist ein Targetamplifikationstest mithilfe von Nukleins uresonden der Target Capture zum qualitativen n vitro Nachweis und zur Differenzierung von ribosomaler RNA rRNA aus Chlamydia trachomatis CT und oder Neisseria gonorrhoeae GC verwendet und als Hilfsmittel bei der Diagnose von Chlamydien und oder Gonokokkeninfektionen des Urogenitalsystems mi
76. ehmbare Volumen der zum Reaktionsr hrchen hinzugef gten Kontrolle oder Probe ist 400 uL 100 uL Weitere Informationen siehe unter Verfahrenshinweise Pipettierung von Kontrollen und Proben Target Capture Die Verwendung des GEN PROBE Target Capture Systems ist in der Bedienungsanleitung des Target Capture Systems Target Capture System Operator s Manual beschrieben Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das SB100 Anwendungsblatt 11 Bedecken Sie die TTUs mit Abdeckfolien und sch tteln Sie den St nder vorsichtig von Hand Nicht mit dem Vortex Mischer mischen Den St nder bei 62 C 1 C in einem Wasserbad f r die Dauer von 30 5 Minuten inkubieren 12 Entfernen Sie den St nder aus dem Wasserbad und tupfen Sie den Boden der Reaktionsr hrchen auf saugf higem Material ab 13 Stellen Sie sicher dass die Abdeckfolien fest angelegt sind Ersetzen Sie sie ggf durch neue Abdeckfolien und versiegeln Sie die TTUs fest 14 Mischen Sie den St nder 60 Sekunden mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e Einzelheiten siehe unter Verfahrenshinweise Mischen mit dem Vortex Mischer Beginnen Sie mit dem Mischen mit dem Vortex Mischer innerhalb von 2 Minuten nach der Entnahme des St nders aus dem Wasserbad 15 Inkubieren Sie den St nder mit angelegten Abdeckfolien bei Raumtemperatur f r 30 5 Minuten 16 Setzen Sie den St nder 5 bis 10 Minuten auf den magnetischen Sockel des TCS 17 Saugen Sie die Pumple
77. eitet Positive Ergebnisse bei Populationen mit niedriger Pr valenz sollten sorgf ltig interpretiert werden unter der Annahme dass die Wahrscheinlichkeit eines falsch positiven Ergebnisses h her sein kann als die eines wahren positiven Ergebnisses N F r die klinischen Studien mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap stammen die Leistungsangaben des APTIMA COMBO 2 Assays beim Nachweis von CT und GC prim r aus Populationen mit niedriger Pr valenz Trotzdem sollten positive Ergebnisse bei Populationen mit niedriger Pr valenz vorsichtig interpretiert werden unter der Annahme dass die Wahrscheinlichkeit eines falsch positiven Ergebnisses h her sein kann als die eines wahren positiven Ergebnisses O Die Leistung des APTIMA Probentransferkits wurde f r die Testung desselben Papanicolaou Abstrichs in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap sowohl vor und nach der ThinPrep Papanicolaou Bearbeitung nicht beurteilt P Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die mit anderen Geraten als dem ThinPrep 2000 Prozessor bearbeitet wurden wurden zur Verwendung in APTIMA Assays nicht beurteilt Q Von den Patienten selbst durchgef hrte vaginale Abstriche sind eine Diagnoseoption f r Frauen wenn anderweitig keine gyn kologische Untersuchung indiziert ist R Die Anwendung von von den Patienten selbst durchgef hrten vaginalen Abstrichen ist auf Gesundh
78. eitsversorgungseinrichtungen beschr nkt wo Unterst tzung Beratung zur Erl uterung der Verfahren und Vorsichtsma nahmen zur Verf gung stehen APTIMA COMBO 2 Assay 43 502183DE Rev C Einschr nkungen S Der APTIMA COMBO 2 Assay wurde nicht zur Verwendung mit Vaginalabstrichproben die von Patientinnen zuhause entnommen wurden validiert T Die Leistung von vaginalen Abstrichproben bei Schwangeren wurde nicht beurteilt U Die Leistung von endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurde bei Jugendlichen unter 16 Jahren nicht beurteilt V Die Leistung des TIGRIS DTS Systems wurde nicht auf H hen ber 2240 m 7355 Fu ermittelt Weitere volumetrische Pr fungen und assayspezifische Untersuchungen werden vor oder im Zuge des Aufstell und Abnahmeverfahrens in Laboren die auf einer H he ber N N von mehr als 2240 m 7355 Fu liegen durchgef hrt W Die Leistung des PANTHER Systems wurde nicht auf H hen ber 2000 m 6561 Fu ermittelt X Es gibt keinen Nachweis f r Abbau von Nukleins uren in PreservCyt L sung Wenn ein Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap geringe Mengen an CT und GC Zellmaterial aufweist kann eine ungleiche Verteilung dieses Zellmaterials auftreten Im Vergleich zur direkten Probenentnahme mit dem APTIMA Tupfertra
79. ekonstitution Vorbereitung eines neuen Kits Hinweis Die Reagenzrekonstitution sollte vor Beginn von Arbeiten mit dem TIGRIS DTS System durchgef hrt werden 1 Kombinieren Sie zur Rekonstitution der Amplifikations Enzym und Sondenreagenzien die Flaschen des gefriergetrockneten Reagenzes mit der Rekonstitutionsl sung Wenn sie gek hlt sind lassen Sie die Rekonstitutionsl sungen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur kommen a Paaren Sie jede Rekonstitutionsl sung mit ihrem gefriergetrockneten Reagenz Stellen Sie vor Anbringung des Rekonstitutionsverbindungsst cks sicher dass die Rekonstitutionsl sung und das gefriergetrocknete Reagenz entsprechend farbcodierte Etiketten aufweisen b Pr fen Sie die Chargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien richtig miteinander gepaart wurden c ffnen Sie das Fl schchen mit dem gefriergetrockneten Reagenz und stecken Sie das gekerbte Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Fl schchen ffnung Abb 2 Schritt 1 APTIMA COMBO 2 Assay 26 502183DE Rev C TIGRIS DTS System d ffnen Sie die Flasche mit der entsprechenden Rekonstitutionsl sung und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che e Halten Sie die Flasche mit der Rekonstitutionsl sung auf dem Labortisch fest und stecken Sie das andere Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Flaschen ffnung Abb 2 Schritt 2 f
80. ellen Sie sicher dass das Pr zipitat nicht die Probenabgabe verhindert Hinweis Bei Nichtbefolgen von Schritt 4a 4c kann aus dem Probenr hrchendeckel Fl ssigkeit auslaufen APTIMA COMBO 2 Assay 36 502183DE Rev C PANTHER System Hinweis Pro fehlgeschlagen R hrchen k nnen bis zu 3 getrennte Aliquote getestet werden Wenn versucht wird mehr als 3 Aliquote aus einem Probenr hrchen zu pipettieren kann es zu Bearbeitungsfehlern kommen E Vorbereitung des Systems 1 Richten Sie das System entsprechend den Anweisungen im PANTHER System Operator s Manual und im Abschnitt Verfahrenshinweise ein Achten Sie darauf dass Reagenzienst nder und TCR Adapter geeigneter Gr e verwendet werden 2 Laden Sie die Proben Verfahrenshinweise A Controls 1 Um einen vorschriftsm igen Betrieb mit der APTIMA Assay Software f r das PANTHER System sicherzustellen ist ein Paar Kontrollen erforderlich Die R hrchen mit Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC und Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT k nnen in eine beliebige St nderposition bzw Bahn im Probenfach des PANTHER Systems geladen werden Die Pipettierung der Patientenproben beginnt sobald eine der beiden folgenden Bedingungen erf llt ist a Das System bearbeitet derzeit ein Kontrollenpaar b G ltige Ergebnisse f r die Kontrollen werden auf dem System registriert 2 Sobald die Kontrollenr hrchen f r ein bestimmtes Kit pipettiert wurden und in Bearbe
81. en Pool der Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden mit GC 250 fg rRNA hergestellt und 60 Replikate wurden auf dem TIGRIS DTS System getestet Die prozentuale Positivit t 95 V I auf dem TIGRIS DTS System betrug 100 95 1 100 f r vaginale Abstrichproben und 100 95 1 100 f r nachbearbeitete Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap Studie mit einem mit CT GC rRNA gespikten klinischen Panel Vaginalabstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Die CT GC rRNA gespikte klinische Panelstudie beurteilte die bereinstimmung zwischen den beiden Systemen unter Verwendung von zwei von Gen Probe hergestellten klinischen CT GC Panels die mit 0 bis 5000 fg rRNA Test CT und oder 0 bis 250 000 fg rRNA Test GC gespikt wurden Die klinischen CT GC Panels wurden aus Vaginalabstrichproben und APTIMA COMBO 2 Assay 81 502183DE Rev C Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap hergestellt die von 309 weiblichen Probandinnen entnommen wurden deren Proben beim Test bei Gen Probe negative Ergebnisse mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems hatten Die negativen Proben wurden nach Probentyp gepoolt entweder mit CT und oder GC rRNA gespikt oder nicht und als Replikate einer jeden Panelprobe aliquotiert Replikate d
82. ente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Hinweis Materialien die von Gen Probe erh ltlich sind sind mit der Katalognummer aufgef hrt sofern nicht anders angegeben Kat Nr TIGRIS DTS System 105118 APTIMA Assay Fluids Kit 302382 APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsfl ssigkeit und APTIMA lreagenz APTIMA Auto Detect Kit Auto Detect Kit 301048 APTIMA System Fluid Preservative Kit Konservierungsmittel Kit f r 302380 Systemfl ssigkeit Spitzen 1000 uL leitf hig zur Fl ssigkeitsstandmessung 10612513 Tecan TIGRIS DTS System Durchlaufkit mit 301191 Multi R hrchen Einheiten Multi tube Units MTU 104772 02 MTU Spitzen Entsorgungstaschen Kit 900907 MTU Abfalldeflektoren 900931 MTU Abfallabdeckungen 105523 APTIMA Probentransferkit 301154C Zur Verwendung mit Proben in PreservCyt L sung APTIMA Entnahmekit fur Vaginalabstrichproben 301162 APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und 301041 m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und 301040 Frauen APTIMA Urinproben Transportr hrchen f r Urinproben von 105575 M nnern und Frauen Chlorbleiche 5 bis 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung Wasser f r das TIGRIS DTS System Spezifikationen bitte dem TIG
83. er einzelnen 13 Panelproben mit unterschiedlichen gespikten rRNA Konzentrationen wurden kombiniert um ein klinisches Panel f r jeden Probentyp zu erstellen Jedes Panel enthielt insgesamt 132 Replikate Ein Vaginalabstrichproben Replikat der Panelprobe mit sehr niedriger CT Konzentration 0 05 fg rRNA Test hatte ein unbestimmtes CT Ergebnis auf den DTS Systemen Tabelle 24 zeigt die prozentuale bereinstimmung f r jede rRNA Konzentration in den Panels f r die vaginale Abstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap jeweils mit den erwarteten CT und GC Ergebnissen f r das TIGRIS DTS System und f r die DTS Systems Die Konzentrationen lagen im Bereich von 1 log unterhalb bis 3 log oberhalb des 5 fg rRNA Test f r CT und 250 fg rRNA Test f r GC Tabelle 24 zeigt auch die prozentuale Gesamt bereinstimmung 99 2 f r das Panel mit Vaginalabstrichproben und 100 f r das Panel mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap Tabelle 24 Studie zur Ubereinstimmung der CT GC rRNA gespikten klinischen Panels Ubereinstimmung mit erwarteten CT und GC Ergebnissen ftir das Panel mit Vaginalabstrichproben und das Panel mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Panel mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Konzentration Vaginalabstrichproben Panel fg rRNA Test Pane
84. er Blutinterferenz auf dem PANTHER System hinsichtlich dieser potenziell interferierenden Substanz zu bestimmen Frisches Blut wurde Pools der klinischen vaginalen Abstrichproben nachbearbeiteten Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben hinzugesetzt Dann wurden sie auf potenzielle Assayinterferenz in Abwesenheit und Gegenwart von CT und GC Target getestet Das gesch tzte rRNA Aquivalent von einer APTIMA COMBO 2 Assay 87 502183DE Rev C CT IFU Assay 5 fg Assay bzw 50 GC Zellen Assay 250 fg Assay wurde als Zielkonzentration verwendet da diese Werte die analytische Sensitivitat des Assays darstellen Die Proben wurden auf dem PANTHER System getestet Alle Proben die Target Nukleins uren enthielten waren bei Tests mit einem Gehalt von 10 Vol Blut in Abstrichproben oder nachbearbeiteten Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und mit einem Gehalt von 30 Vol Blut in Urinproben positiv Alle Proben die kein Target enthielten wurden korrekt als negativ f r CT und GC identifiziert Diese Ergebnisse sind identisch mit denen die f r die das TIGRIS DTS System aufgezeigt wurden wenn die Proben mit den gleichen Blutmengen versetzt wurden Blut das Abstrichproben Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben in viel gr eren Mengen hinzugesetzt wurde als sie bei der normalen Probenentnahme e
85. er CT und der GC Ergebnisse aus der Studie ausgeschlossen APTIMA COMBO 2 Assay 48 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Klinische Studie der vaginalen Abstrichproben In der multizentrischen klinischen Studie von Vaginalabstrichen wurden 1464 symptomatische und asymptomatische Probandinnen die in Kliniken f r Geschlechts krankheiten STD Frauenheilkunde Geburtshilfe Teenager und Familienplanung kamen in die klinische Studie aufgenommen Von den 646 asymptomatischen Probandinnen die an der Studie teilnahmen waren 2 im Alter von unter 16 Jahren 158 waren im Altersbereich von 16 bis 20 231 waren im Altersbereich von 21 bis 25 und 255 waren im Alter von ber 25 Jahren Von den 818 symptomatischen Probandinnen die an der Studie teilnahmen waren 160 im Altersbereich von 16 bis 20 324 waren im Altersbereich von 21 bis 25 und 334 waren im Alter von ber 25 Jahren Von allen geeigneten Probandinnen wurden f nf Proben genommen eine Urinprobe ein von der Patientin selbst durchgef hrter vaginaler Abstrich ein vom Arzt entnommener vaginaler Abstrich sowie zwei randomisierte Endozervixabstriche APTIMA COMBO 2 Assay Ergebnisse wurden aus zwei vaginalen Abstrichen einem der Endozervixabstriche und einem Aliquot der Urinprobe bezogen Der zweite Endozervixabstrich und ein zweites Aliquot der Urinprobe wurden mit einem anderen im Handel erh ltlichen NAAT auf CT und einem anderen im Handel erh ltlichen NAAT auf
86. ereitung bis hin zu DKA Proben Ger te und Reagenzien sollten nicht in einen Bereich zur ckgebracht werden wo ein vorheriger Schritt ausgef hrt wurde Auch sollte das Personal nicht in vorherige Arbeitsbereiche gehen ohne die vorschriftsm igen Sicherheitsvorkehrungen gegen Kontamination zu treffen Probenbezogen K Dieser Assay wurde nur mit endozervikalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap vaginalen Abstrichproben und weiblichen und m nnlichen Urinproben getestet Die Leistung bei Proben die nicht mit einem der unter Probenentnahme und lagerung aufgef hrten Probenentnahmekits entnommen wurden wurde nicht beurteilt Labors k nnen auch andere Entnahmeger te validieren 21 23 Die PACE Entnahmekits wurden auf DTS Systemen nur zur Verwendung mit dem APTIMA Adapterkit validiert Das PACE Entnahmekit und das APTIMA Adapterkit sind gegenw rtig nicht zur Verwendung mit dem TIGRIS DTS System oder dem PANTHER System qualifiziert Gyn kologische Proben die zur Vorbereitung mit dem ThinPrep 2000 System gesammelt wurden sollten mit einem besenartigen Ger toder einem endozervikalen B rsten Kunststoffspatel Kombinationsentnahmeger t gesammelt werden L Die Verfallsdaten auf den Probenentnahmekits beziehen sich auf die Entnahmestelle und nicht die Testeinrichtung Zu irgendeinem Zeitpunkt vor dem Verfallsdatum des Probenentnahmekits gesammelte Pr
87. ervCyt Solution liquid Pap erhalten wurden Die Gesamt bereinstimmung betrug 98 2 f r vaginale Abstrichproben und 98 2 f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap Die gesch tzten Leistungsdaten f r Tests von vaginalen Abstrichproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems gehen aus den Tabellen 5b 5c 9b und 9c hervor Die klinischen Leistungssch tzwerte f r das TIGRIS DTS System mit vaginalen Abstrichproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap w rden angesichts der bereinstimmungsergebnisse erwartungsgem hnlich sein Studie zur bereinstimmung des klinischen CT GC Panels Endozervixabstriche m nnliche urethrale Abstrichproben weibliche und m nnliche Urinproben Die Studie zur bereinstimmung des klinischen CT GC Panels beurteilte die quivalenz zwischen den beiden Systemen unter Einsatz von 13 von Gen Probe hergestellten klinischen CT GC Panels die 0 bis 2500 einschlussbildende Einheiten IFU mL CT und oder 0 bis 125 000 koloniebildende Einheiten CFU mL GC enthielten Die klinischen CT GC Panels wurden aus Abstrich und Urinproben hergestellt die von 222 m nnlichen und 117 weiblichen Probanden entnommen wurden die aufgrund von negativen Abstrich und Urinprobenergebnissen mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems f r nicht infiziert befu
88. es Hintergrundsignals eine vom Benutzer bereitgestellte doppelte Negativkontrolle hinzugef gt werden Die richtige Vorbereitung der Proben wird visuell durch das Vorhandensein eines einzigen APTIMA Probenabstrichtupfers im Swab Specimen Transportr hrchen ein endg ltiges Urinvolumen zwischen den schwarzen F lllinien eines Urinproben Transportr hrchens oder die Abwesenheit eines Abstrichtupfers im APTIMA Probentransferr hrchen f r Papanicolaou Abstriche liquid Pap best tigt Die Positivkontrollen m ssen die folgenden Testergebnisse produzieren Kontrolle Gesamt RLU x1000 CT Ergebnis GC Ergebnis Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT 2 100 und lt 3000 Positiv Negativ 2 150 und lt 3000 Negativ Positiv 1 Die APTIMA Assay Software beurteilt die Kontrollen automatisch entsprechend den vorstehenden Kriterien und berichtet den Run Status als PASS ERFOLGREICH wenn die Laufkontrollkriterien erf llt sind und FAIL FEHLGESCHLAGEN wenn die Laufkontrollkriterien nicht erf llt sind 2 Wenn der Run Status FAIL FEHLGESCHLAGEN ist sind alle Testergebnisse im gleichen Lauf ung ltig und d rfen nicht berichtet werden APTIMA COMBO 2 Assay 39 502183DE Rev C Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse 3 Jedes Labor sollte entsprechende Kontrollverfahren implementieren um die Anforderungen der CLIA Vorschriften Abschnitt 493 1256 zu erf llen
89. ew nscht wird erstellen Sie diese jetzt Die Anleitung zur Erstellung einer Arbeitsliste finden Sie in der Software Bedienungsanleitung f r den APTIMA Assay APTIMA Assay Software Operator s Manual 8 Das wTCR gr ndlich mischen Geben Sie mit der Wiederholungspipette 100 uL in jedes Reaktionsr hrchen hinzu APTIMA COMBO 2 Assay 16 502183DE Rev C DTS Systeme 9 Zur vorschriftsm igen Funktion mit der APTIMA Assay Software muss die Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC in der ersten Position des ersten TTU sein a Halten Sie das Reaktionsgef mit der Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC in einer Hand oder lassen Sie es im St nder Dieses Etikett ist rosa Der Etiketttext lautet CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC Durchstechen Sie den Verschluss mit einer Mikropipette Dabei nicht die Spitze bis zum Boden des Reaktionsgef es dr cken Geben Sie 400 uL der Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC in das erste Reaktionsr hrchen hinzu b Geben Sie auf die gleiche Weise und mit einer neuen Pipettenspitze 400 uL der Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT zum zweiten Reaktionsr hrchen hinzu Das Etikett der zweiten Kontrolle ist blau gr n Der Etiketttext lautet CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT 10 Fahren Sie mit dem St nderaufbau fort indem Sie 400 uL jeder Probe in die restlichen Reaktionsr hrchen hinzuf gen Verwenden Sie f r jede Probe und Kontrolle eine neue Pipettenspitze Das ann
90. f r die f r das TIGRIS DTS System spezifische analytische Leistung Siehe Analytische Leistung des PANTHER Systems f r die f r das PANTHER System spezifische analytische Leistung Analytische Sensitivit t Die analytische Sensitivit t f r Chlamydia trachomatis Nachweisgrenze wurde durch direkten Vergleich von Verd nnungen von CT Organismen in Zellkultur und im Assay bestimmt Der analytische Sensitivit tsanspruch f r den Test ist eine einschlussbildende Einheit IFU Inclusion Forming Unit pro Test 7 25 IFU Abstrichprobe 5 0 IFU mL Urin und 9 75 IFU mL Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap f r alle 15 CT Serovaren A B Ba C D E F G H I J K L1 L2 und L3 Verd nnungen von unter 1 0 IFU Test aller Serovaren zeigten jedoch ein positives Testergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Die analytische Sensitivit t von Neisseria gonorrhoeae wurde durch direkten Vergleich von Verd nnungen von 57 verschiedenen klinischen Isolaten in Kultur und im APTIMA COMBO 2 Assay mit Abstrichproben und Urinproben sowie 20 klinischen Isolaten mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap bestimmt Der analytische Sensitivit tsanspruch f r den Test ist 50 Zellen Test 362 Zellen Abstrich 250 Zellen mL Urin und 488 Zellen mL Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung Alle getesteten St mme waren jedoch positiv mit weniger als 50 Zellen Test Analytische Spezifit t
91. gen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien im Kit miteinander gepaart wurden c ffnen Sie die Flasche mit TCR und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che d ffnen Sie die Flasche mit TCR B und gie en Sie den gesamten Inhalt in die Flasche mit TCR Sie k nnen erwarten dass eine geringe Menge Fl ssigkeit in der TCR B Flasche verbleibt e Verschlie en Sie die TCR Flasche und schwenken Sie die L sung behutsam um den Inhalt zu mischen Vermeiden Sie w hrend dieses Schritts Schaumbildung APTIMA COMBO 2 Assay 27 502183DE Rev C TIGRIS DTS System f Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein g Werfen Sie die TCR B Flasche und den Deckel weg 3 Vorbereitung von Selektionsreagenz a Pr fen Sie die Chargennummer auf der Reagenzflasche um sicherzustellen dass sie mit der Chargennummer auf dem Hauptchargen Barcodeblatt bereinstimmt b Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein Hinweis Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umdrehen der Reagenzien Schaumbildung vermeiden C Vorbereitung von Reagenzien f r bereits rekonstituierte Reagenzien 1 Zuvor rekonstituierte Sonden Amplifikations Enzym und Sondenreagenzien m ssen vor dem Start des Assays auf Raumtemperatur 15 C bis 30 C gebracht werden 2 Wenn das re
92. gen berechnet wurden Die Gesamtsensitivit t und spezifit t fur CT betrug 96 1 bzw 98 0 Tabelle 2 Die Gesamtsensitivitat und spezifit t f r GC betrug 97 8 bzw 99 2 Tabelle 3 Der tats chliche anhand der Daten aus klinischen Studien berechnete PPV und NPV geht aus den Tabellen 6a und 10a Abstriche und Urinproben 6b und 10b Vaginalabstriche sowie 6c und 10c Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap hervor Tabelle 2 Hypothetische PPV und NPV f r CT Tabelle 3 Hypothetische PPV und NPV f r GC Pr valenz Sensitivit t Spezift t nradiktiver pr diiver Pr yalenz Sensitivit t Speziit t gradikiver prdiktver Wert Wert Wert Wert 1 96 1 98 0 33 1 100 0 1 97 8 99 2 55 3 100 0 96 1 98 0 50 0 99 9 2 97 8 99 2 71 4 100 0 96 1 98 0 72 0 99 8 5 97 8 99 2 86 6 99 9 10 96 1 98 0 84 5 99 6 10 97 8 99 2 93 2 99 7 15 96 1 98 0 89 6 99 3 15 97 8 99 2 95 6 99 6 20 96 1 98 0 92 4 99 0 20 97 8 99 2 96 8 99 4 25 96 1 98 0 94 2 98 7 25 97 8 99 2 97 6 99 2 30 96 1 98 0 95 4 98 3 30 97 8 99 2 98 1 99 0 APTIMA COMBO 2 Assay 46 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Siehe Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System im Anschluss an den Abschnitt Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System f r die f r das TIGRIS DTS System spezifische klinische Leistung
93. gen des Laufs Alle zus tzlichen Kontrollen m ssen als Patientenproben eingegeben werden und vom Bediener auf Eignung berwacht werden B Pipettierung von Kontrollen und Proben Das Volumen der Kontrolle oder Probe die zum Reaktionsr hrchen hinzugegeben wird muss 400 uL 100 uL betragen Eine visuelle Kontrolle des in das Reaktionsr hrchen pipettierten Volumens wird empfohlen um den Transfer des korrekten Volumens sicherzustellen Das vorgeschriebene Kontroll oder Probenvolumen ist f r die Erzielung korrekter Ergebnisse erforderlich Wenn nicht das richtige Volumen pipettiert wurde pipettieren Sie das wTCR und die Kontrolle oder Probe neu in ein neues Reaktionsr hrchen C Reagenzien In der Sondenrekonstitutionsl sung kann sich w hrend der Lagerung ein Niederschlag bilden Erw rmen Sie in diesem Fall die Sondenrekonstitutionsl sung 1 bis 2 Minuten auf 62 C Nach diesem Schritt kann die Sondenrekonstitutionsl sung verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Nach der Resuspension das Fl schchen durch vorsichtiges Umdrehen vermischen Schaumbildung vermeiden D Temperatur 1 Die Schritte Target Capture Amplifikation Hybridisierung und Selektion sind temperaturabh ngig Daher ist es unbedingt erforderlich dass die Wasserb der innerhalb der angegebenen Temperaturbereiche gehalten werden 2 Raumtemperatur ist definiert als 15 C bis 30 C 3 Die Nachweisschritte im Test m ssen bei 18 C bi
94. gkeit dekontaminiert werden wie unter Nachweis beschrieben Die TTUs d rfen nicht wieder verwendet werden 3 F hren Sie eine regelm ige Dekontamination der Ger te und Arbeitsfl chen nach der in Verfahrenshinweise Dekontamination beschriebenen Anleitung durch APTIMA COMBO 2 Assay 22 502183DE Rev C DTS Systeme 4 Wie in jedem Reagenzsystem kann berm iger Puder auf manchen Handschuhen eine Kontamination ge ffneter Reaktionsgef e verursachen Es werden ungepuderte Handschuhe empfohlen J Protokoll zur berwachung auf Laborkontamination f r DTS Systems Es gibt viele laborspezifische Faktoren die zu Kontamination beitragen k nnen darunter Testvolumen Arbeitsablauf Krankheitspr valenz und verschiedene andere Laboraktivit ten Diese Faktoren sind zu ber cksichtigen wenn die H ufigkeit der Kontaminations berwachung festgelegt wird Die Intervalle zur Kontaminations berwachung sollten im Hinblick auf die Praktiken und Verfahren jedes Labors festgelegt werden Zur berwachung auf Laborkontamination kann das folgende Verfahren mit dem APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben durchgef hrt werden 1 Beschriften Sie die Tupfertransportr hrchen mit den Zahlen die den zu testenden Bereichen entsprechen 2 Nehmen Sie den Abstrichtupfer blauer Schaft mit gr nem Aufdruck aus der Verpackung feuchten Sie den Tupfer im Tupfertransportmedium an und nehmen S
95. hen Patienten Tabelle 8 C trachomatis Analyse der urethralen Abstrichproben und Urinproben auf Patienteninfektionsstatus bei Mannern Patientenintekti onestafus NAAT 1 NAAT 2 APTIMA COMBO 2 Assay Symptom status MU MS MU MU MS Sympt Asympt Infiziert NA 2 0 Infiziert 10 4 Infiziert NA NA 4 6 Infiziert NA 2 0 Infiziert NA 21 1 Infiziert 3 3 Infiziert 4 3 Infiziert NA 1 0 Infiziert NA 8 2 Infiziert 12 4 Infiziert 1 0 Infiziert 1 3 Infiziert NA 1 0 Infiziert 1 1 Infiziert 131 53 Nicht infiziert NA 0 2 Nicht infiziert NA 13 8 Nicht infiziert 461 303 Nicht infiziert 10 5 Nicht infiziert 3 4 Nicht infiziert 5 0 Gesamt 694 402 MU Male Urine Urin Mann MS Male Urethral Swab m nnl urethrale Abstrichprobe NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar APTIMA COMBO 2 Assay 59 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Leistungstabellen f r Neisseria gonorrhoeae N gonorrhoeae Sensitivit t und Spezifit t Tabelle 9a Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus des Patienten Sensitivit t Spezifit t 4 Probe Symptome N TP FP TN FN 95 V I 95 V
96. hen Sie den St nder 10 Sekunden in einem Vortex Mischer oder bis sich eine gleichm ige F rbung einstellt und inkubieren Sie den St nder 10 1 Minuten bei 62 C 1 C in einem Wasserbad c Nehmen Sie den St nder aus dem Wasserbad 3 Nachweis Der Nachweis muss bei 18 C bis 28 C ausgef hrt werden a Inkubieren Sie den St nder bei 18 C bis 28 C f r 15 3 Minuten Hinweis Dieser Temperaturbereich ist kritisch f r die Testleistung b Bei Einsatz des LEADER HC Luminometers und der APTIMA Assay Software beziehen Sie sich bitte auf die Bedienungsanleitung f r das LEADER HC Luminometer LEADER HC Luminometer Operator s Manual und die Bedienungsanleitung f r die APTIMA Assay Software APTIMA Assay Software Operator s Manual c Stellen Sie sicher dass ausreichende Auto Detect 1 und Auto Detect 2 Volumina zur Durchf hrung der Tests bereit stehen d Bereiten Sie das LEADER HC Luminometer vor indem Sie eine leere TTU in Kassettenposition 1 setzen und das Wasch Protokoll durchf hren e Laden Sie die TTUs in das Luminometer f Melden Sie sich am Computer an Klicken Sie auf New Run Neuer Lauf w hlen Sie das APTIMA COMBO 2 assay protocol APTIMA COMBO 2 Assay Protokoll APTIMA COMBO 2 Assay 19 502183DE Rev C DTS Systeme und geben Sie die Anzahl der R hrchen Kontrollen und Proben ein Klicken Sie auf Next Weiter um den Lauf zu beginnen Hinweis Der Lauf muss innerhalb von 2 Stunden vo
97. ie im ausgewiesenen Bereich mit einer Kreisbewegung einen Abstrich auf 3 Setzen Sie den Tupfer sofort in das Transportr hrchen ein 4 Den Tupferschaft an der Einkerbung vorsichtig brechen Dabei darauf achten dass der Inhalt nicht verspritzt wird 5 Verschlie en Sie das Tupfertransportr hrchen wieder fest 6 Wiederholen Sie Schritt 2 bis 5 f r alle Abstrichbereiche 7 Testen Sie den Tupfer mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gem Testverfahren mit DTS Systems Wenn die Ergebnisse CT bzw GC positiv oder unbestimmt sind siehe Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse ist m glicherweise die Oberfl che kontaminiert und sollte durch Behandlung mit Natriumhypochloritl sung wie in Testverfahren mit DTS Systemen Ger tevorbereitung empfohlen dekontaminiert werden Hinweis Wenn eine Kontamination des Wasserbades vermutet wird kann das Wasser mit dem Testverfahren f r Urinproben getestet werden indem 2 0 mL des Wassers in ein Urinproben Transportr hrchen hinzugegeben wird K Fehlersuche 1 Niedrige Werte bei Positivkontrollen k nnen durch falsche Temperaturen in verschiedenen Schritten des Assays oder durch berschreiten der Selektionszeit im Selektionsschritt ber die empfohlene Zeit hinaus verursacht werden 2 Hohe Hintergrundwerte k nnen auftreten wenn die Selektionszeit im Selektionsschritt verk rzt wird die Selektionstemperatur nicht korrekt ist oder nach der Zugabe des Selektionsreagenzes nich
98. ier D Ram and H H Lee 1996 Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae by Ligase chain reaction based assays with clinical specimens from various sites implications for diagnostic testing and screening J Clin Microbiol 34 2395 2400 3 Cates Jr W and J N Wasserheit 1991 Genital chlamydia infections epidemiology and reproductive sequelae Am J Obstet Gynecol 164 1771 1781 4 Centers for Disease Control and Prevention 2002 Screening Tests to Detect Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae infections United States Morbid and Mortal Weekly Rep 51 RR 15 5 Centers for Disease Control and Prevention 2011 Sexually Transmitted Disease Surveillance 2010 Atlanta GA U S Department of Health and Human Services November 6 Chernesky M A D Jang J Sellors K Luinstra S Chong S Castriciano and J B Mahony 1996 Urinary inhibitors of polymerase chain reaction and Ligase chain reaction and testing of multiple specimens may contribute to lower assay sensitivities for diagnosing Chlamydia trachomatis infected women Mol Cell Probes 11 243 249 7 Ching S H Lee E W Hook Ill M R Jacobs and J Zenilman 1995 Ligase chain reaction for detection of Neisseria gonorrhoeae in urogenital swabs J Clin Microbiol 33 3111 3114 8 Chong S D Jang X Song J Mahony A Petrich P Barriga and M Chernesky 2003 Specimen processing and concentration of Chlamydia trachomatis a
99. ils 98 5 324 329 und 99 4 1221 1228 Tabelle 6c zeigt die Sensitivit ts und Spezifit tswerte f r CT in Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung mit dem APTIMA COMBO 2 Assay nach Pr fzentrum und insgesamt auf F r CT lag die Sensitivit t im Bereich von 92 9 bis 100 Die Spezifit t lag im Bereich von 97 7 bis 100 Die Sensitivit t und Spezifit t f r GC in Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die mit dem APTIMA COMBO 2 Assay getestet wurden nach Symptomstatus und insgesamt gehen aus Tabelle 9c hervor F r GC betrug die Gesamtsensitivit t 92 3 12 13 Bei symptomatischen und asymptomatischen Probanden lagen die Sensitivit ten jeweils bei 100 7 7 und 83 3 5 6 Die Gesamtspezifit t f r die Papanicolaou Abstriche in GC PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap betrug 99 8 1630 1634 Bei symptomatischen und asymptomatischen Probanden betrug die Spezifit t jeweils 100 352 352 und 99 7 1278 1282 Tabelle 10c zeigt die Sensitivit ts und Spezifit tswerte f r GC in Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap mit dem APTIMA COMBO 2 Assay nach Pr fzentrum und insgesamt auf F r GC lag die Sensitivit t im Bereich von 80 0 bis 100 Die Spezifit ten lagen im Bereich von 99 0 bis 100 Die Verteilung der Entnahmeger te f r Zervixproben die in dieser klinischen Studie verwendet wurden ist nach Pr fzentrum in Tabelle 4 zus
100. inproben erzeugt Die Urinproben wurden mit CT und GC bei Endkonzentrationen von jeweils 10 IFU und 100 CFU pro Reaktion gespikt Zwei Reihen von gespikten Urinproben wurden 24 Stunden bei 4 C und 30 C belassen bevor sie dem Urintransportmedium Urine Transport Media UTM hinzugegeben wurden Die beiden Reihen von UTM Proben wurden dann bei 4 C und 30 C gehalten und dreifach an den Tagen 0 1 5 20 und 35 getestet Alle Proben waren positiv f r CT und GC wenn die Urinproben vor der Hinzugabe des UTM bei 4 C gehalten wurden Wenn die Urinproben vor der Hinzugabe des UTM bei 30 C gehalten wurden waren alle Proben positiv f r CT und 95 der Proben waren positiv f r GC an Tag 35 Dieselben Proben wurden nach 116 Lagerungstagen bei 20 C und 70 C getestet Alle Proben waren unter den gleichen Lagerbedingungen positiv f r CT und GC E Zus tzliche Stabilit tsstudie mit bei 20 C gefrorener Probe Die Daten zur Belegung der empfohlenen Lagerbedingungen bei 20 C f r endozervikale urethrale vaginale weibliche und m nnliche Urinproben sowie Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden mit 90 Proben f r jeden Typ mit negativem Ergebnis erzeugt wobei 30 Proben mit CT und GC bei jeweils 1 0 IFU und 50 CFU pro Reaktion versetzt wurden 30 Proben bei jeweils 0 1 IFU und 5 CFU pro Reaktion versetzt wurden sowie 30 Proben ohne Zusatz blieben Alle Proben wurden bei 20 C gelagert und na
101. ischen Ger ten zwischen Chargen zwischen L ufen innerhalb des Laufs sowie insgesamt dar APTIMA COMBO 2 Assay 86 502183DE Rev C Analytische Leistung des PANTHER Systems Tabelle 26 PANTHER System Pr zision f r den APTIMA COMBO 2 Assay RLU Zwischen Zwischen Zwischen Laufintern Gesamt Matrix CT GC Mittel ber Ger ten Chargen L ufen IFU mL CFU mL wert einst SA VK SA VK SA VK SA VK SA VK x1000 x1000 x1000 x1000 x1000 x1000 0 0 96 6 100 0 06 1 0 88 13 5 0 0 1 02 15 7 1 3 20 1 0 25 0 95 1226 100 7003 57 2003 16 843 0 7 47 05 38 871 7 1 2 5 0 96 1249 100 77 97 62 6 11 0 5 0 0 32 87 26 848 68 25 0 95 1268 100 72 85 57 153 12 0 0 3958 31 843 66 0 12 5 96 1081 100 1844 17 2859 2 6 0 0 2668 2 5 432 4 STM 0 125 96 1266 100 29 81 2 4 0 0 886 0 7 27 58 22 41 6 3 3 0 1250 96 1309 100 2941 2 2 0 0 983 08 31 83 24 444 3 4 2 5 125 96 2456 100 86 58 3 5 0 0 0 0 52 99 22 101 5 4 1 2 5 2500 96 2509 100 73 13 2 9 0 0 198 08 46 77 1 9 89 3 5 1000 2500 96 2496 100 31 72 13 614 0 2 0 0 193 66 7 8 196 3 7 9 1000 125 96 2471 100 8363 34 936 0 4 0 0 52 35 21 99 1 4 0 0 94 6 100 0 2 32 066 108 036 5 9 1 16 3 1 3 21 2 0 25 0 95 863 100 70 73 82 165 65 19 2 47 97 5 6 132 27 15 3 228 6 26 5 2 5 0 95 1129 100 56 02 5 89 56 7 9 856 08 74 19 66 1294 11 5 Urin 25 0 96 1246 100 6045 49 1397 1 1 13 36 1 1 4303 35 767 62 0 12 5 96 1016 100
102. ischen dem TIGRIS DTS System und den DTS Systemen hinsichtlich dieser potenziell interferierenden Substanz zu bestimmen Frisches Blut wurde Pools der klinischen Abstrichproben vaginalen Abstrichproben nachbearbeiteten Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben hinzugesetzt Dann wurden sie auf potenzielle Testinterferenz in Abwesenheit und Gegenwart von CT und GC Target getestet Das gesch tzte rRNA Aquivalent von einer CT IFU Assay 5 fg Assay und 50 GC Zellen Assay 250 fg Assay wurden verwendet da diese die analytische Sensitivit t des Assays darstellen Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Die Proben wurden auf zwei TIGRIS DTS Systemen getestet Alle Proben die Target Nukleins uren enthielten waren positiv als sie bei einem Gehalt von 10 Vol Blut in Abstrichproben Vaginalabstrichproben nachbearbeiteten Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und bei einem Gehalt von 30 Vol Blut in Urinproben getestet wurden Alle Proben die kein Target enthielten wurden korrekt als negativ f r CT und GC identifiziert Diese Ergebnisse sind identisch mit denen die f r die DTS Systeme aufgezeigt wurden wenn die Proben mit den gleichen Blutmengen gespikt wurden Blut das Abstrichproben Vaginalabstrichproben nachbearbeiteten Papanicolaou Abstriche
103. itere Tests auf dem TIGRIS DTS System ausgew hlt Mit dem APTIMA COMBO 2 Assay positiv getestete Proben sowie eine Untergruppe von mit dem APTIMA COMBO 2 Assay negativ getesteten Proben wurden f r Vergleichstests auf dem TIGRIS DTS System ausgew hlt 170 vaginale Abstrichproben und 170 Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap von 181 weiblichen Probanden wurden auf beiden Systemen getestet Die Mehrheit der Proben 110 vaginale Abstrichproben und 107 Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die f r Vergleichstests ausgew hlt wurden stammten von symptomatischen Frauen Siebzehn 17 Arbeitslisten wurden begonnen 13 76 5 waren g ltig und 4 23 5 waren ung ltig weil das Ger t einen hohen Hintergrund im Luminometer erfasste Das Ger t wies lockere Detect 1 und 2 Anschlussst cke auf die es erm glicht haben k nnten dass Luft in die Leitungen geriet oder dass falsche Mengen Detect Reagenzien eingespritzt wurden Diese Arbeitslisten waren bei Wiederholungstests g ltig Von den 340 getesteten Proben hatten keine anf nglich ung ltige oder unbestimmte Testergebnisse auf dem TIGRIS DTS System Die Tabellen 18 und 19 zeigen die prozentuale Gesamt bereinstimmung f r den CT und GC Nachweis f r alle gepaarten Testergebnisse auf die auf dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems jeweils f r vaginale Abstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung Pres
104. itung der Dosierstation an indem Sie APTIMA Waschl sung durch die Dosiervorrichtung pumpen Pumpen Sie ausreichend Fl ssigkeit durch das System so dass keine Luftblasen in der Leitung vorliegen und alle zehn D sen einen st ndigen Fl ssigkeitsstrom abgeben 18 Schalten Sie die Vakuumpumpe ein und trennen Sie die Absaugvorrichtung am ersten Anschluss zwischen der Absaugvorrichtung und der Auffangflasche Stellen Sie sicher dass das Vakuummessger t den Vorschriften f r die Dichtheitspr fung entspricht Es kann 15 Sekunden dauern bis dieser Messwert erreicht ist Schlie en Sie die Absaugvorrichtung wieder an und stellen Sie sicher dass das Vakuummessger t der Spezifikation des Vakuumniveaus entspricht Lassen Sie die Vakuumpumpe 1 Beziehen Sie sich auf das Vakuumspezifikationsblatt f r das Target Capture System Target Capture System Vacuum Specifications Sheet hinten in der Bedienungsanleitung des Target Capture Systems Target Capture System Operator s Manual oder nehmen Sie mit dem Technischen Kundendienst Kontakt auf APTIMA COMBO 2 Assay 17 502183DE Rev C DTS Systeme eingeschaltet bis alle Target Capture Schritte abgeschlossen und die Schlauche der Absaugvorrichtung trocken sind 19 Setzen Sie die Absaugvorrichtung fest auf dem ersten Satz Spitzen auf Aspirieren Sie die gesamte Flussigkeit indem Sie die Spitzen in die erste TTU herablassen bis sie kurz den Boden der Reaktionsgef e ber hren Die Spitzen nich
105. itung sind k nnen mit dem zugeh rigen Kit bis zu 24 Stunden lang Patientenproben ausgef hrt werden es sei denn dass a die Kontrollenergebnisse ung ltig sind b das zugeh rige Assayreagenzienkit aus dem System entfernt wird c die Haltbarkeit des zugeh rigen Assayreagenzienkits berschritten ist 3 Jedes APTIMA Kontrollgefa amp kann einmal getestet werden Wenn versucht wird mehr als einmal aus dem R hrchen zu pipettieren kann es Bearbeitungsfehlern kommen B Temperatur Raumtemperatur ist definiert als 15 C bis 30 C C Handschuhpuder Wie in jedem Reagenzsystem kann berm iger Puder auf manchen Handschuhen eine Kontamination ge ffneter Reaktionsgef e verursachen Es werden ungepuderte Handschuhe empfohlen APTIMA COMBO 2 Assay 37 502183DE Rev C PANTHER System D berwachungsprotokoll f r Laborkontamination f r das PANTHER System Es gibt viele laborspezifische Faktoren die zu Kontamination beitragen k nnen darunter Testvolumen Arbeitsablauf Krankheitspr valenz und verschiedene andere Laboraktivit ten Diese Faktoren sind zu ber cksichtigen wenn die H ufigkeit der Kontaminations berwachung festgelegt wird Die Intervalle zur Kontaminations berwachung sollten im Hinblick auf die Praktiken und Verfahren jedes Labors festgelegt werden Zur berwachung auf Laborkontamination kann das folgende Verfahren mit dem APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Ab
106. klinischen CT GC Panelprobe liegt eine Logarithmenstufe unter der beanspruchten analytischen Sensitivit t f r den APTIMA COMBO 2 Assay von 1 IFU Assay 7 25 IFU Abstrich 5 IFU mL Urin Eines von 5 weiblichen Urin Panel Replikaten war CT auf den DTS Systems Drei von 5 weiblichen Urin Panel Replikaten waren CT auf dem TIGRIS DTS System Tabelle 21 Studie zur bereinstimmung des klinischen CT GC Panels CT Ergebnisse f r die Panels mit Endozervixabstrichen mannlichen urethralen Abstrichproben sowie weiblichen und mannlichen Urinproben DTS Dist BIS DTS es ee Probe N TIGRIS TIGRIS TIGRIS TIGRIS 95 V I 95 V I n n n n Abstrich 129 80 0 0 49 100 95 5 100 100 92 7 100 Urin 130 76 3 1 50 96 2 89 3 99 2 98 0 89 6 100 bezeichnet positiv bezeichnet negativ V I Vertrauensintervall Drei der 5 weiblichen Urin Panel Replikate die eine Logarithmenstufe unter der beanspruchten analytischen Sensitivit t des APTIMA COMBO 2 Assays von 1 IFU Test f r CT lagen waren CT auf dem TIGRIS DTS System Eines von 5 weiblichen Urin Panel Replikaten war CT auf den DTS Systems APTIMA COMBO 2 Assay 78 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Tabelle 22 Studie zur bereinstimmung des klinischen CT GC Panels GC Ergebnisse f r die Panels mit endozervikalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben sowie Urin von M nnern und Frauen DTS DTS DTS DTS Po
107. konstituierte Sondenreagenz einen Niederschlag enth lt der bei Raumtemperatur nicht wieder in L sung geht erw rmen Sie die mit Deckel verschlossene Flasche 1 bis 2 Minuten auf eine Temperatur nicht ber 62 C Nach diesem Erw rmungsschritt kann das Sondenreagenz verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Mischen Sie das Sondenreagenz durch Umdrehen ohne Schaum zu bilden vor der Ladung ins System 3 Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umdrehen der Reagenzien Schaumbildung vermeiden 4 F llen Sie Reagenzflaschen nicht nach Das TIGRIS DTS System erkennt Flaschen die nachgef llt wurden und nimmt sie nicht an D Probenhandhabung 1 Lassen Sie die Kontrollen und Proben vor der Verarbeitung auf Raumtemperatur kommen 2 Proben nicht mit dem Vortex Mischer mischen 3 berpr fen Sie optisch dass jedes Probenr hrchen eines der folgenden Kriterien erf llt a In Unisex Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner blauer APTIMA Entnahmetupfer b In Vagina Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner rosafarbener APTIMA Entnahmetupfer c In Urin Probentransportr hrchen liegt das End Urinvolumen zwischen den schwarzen F llstandsmarkierungen d In APTIMA Probentransportr hrchen f r Liquid Pap Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap befindet sich kein Tupfer
108. l ssige Ergebnisse h ngen von einer angemessenen Probenentnahme ab Weil das f r diesen Test verwendete Transportsystem keine mikroskopische Beurteilung der Eignung der Probe zul sst ist eine Schulung des klinischen Personals in den ordnungsgem en Probenentnahmetechniken erforderlich Bitte lesen Sie dazu die Packungsbeilage des entsprechenden GEN PROBE Probenentnahmekits I Ein therapeutischer Misserfolg oder Erfolg kann nicht mit dem APTIMA COMBO 2 Assay bestimmt werden da Nukleins ure nach der entsprechenden antimikrobiellen Therapie fortbestehen kann J Die Ergebnisse des APTIMA COMBO 2 Assays sollten in Verbindung mit anderen dem Arzt verf gbaren Labor oder klinischen Daten ausgewertet werden K Ein negatives Ergebnis schlie t eine m gliche Infektion nicht aus weil die Ergebnisse von der angemessenen Probenentnahme abh ngen Die Testergebnisse k nnen durch eine unsachgem e Probenentnahme technische Fehler Probenverwechslung oder Target Konzentrationen unter der Nachweisgrenze des Assays beeintr chtigt sein L Der APTIMA COMBO 2 Assay liefert qualitative Ergebnisse Daher kann keine Korrelation zwischen der Gr e eines positiven Testmesssignals und der Anzahl der Organismen in einer Probe aufgestellt werden M F r klinische Studien mit Vaginalabstrichen Endozervikalabstrichen m nnlichen urethralen Abstrichen und Urinproben wird die Leistung zum Nachweis von CT und GC von Populationen mit hoher Pr valenz abgel
109. lelement Ba Replikate CT GC CT GC TIGRIS DTS TIGRIS DTS TIGRIS DTS TIGRIS DTS CT GC Uber Uber Uber Uber Uber Uber Uber Uber einst einst einst einst einst einst einst einst Niedrig niedrig 5 250 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Niedrigfhocch 5 250 000 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Hoch niedrig 5000 250 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Hoch hoch 5000 250 000 10 100 100 100 100 100 100 100 100 an 0 5 0 10 100 88 9 100 100 100 100 100 100 Niedrigineg 5 0 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Mittel neg 50 0 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Hoch neg 500 0 10 100 100 100 100 100 100 100 100 en 0 25 10 100 100 100 100 100 100 100 100 NegJniedrig 0 250 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Neg mittel 0 2500 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Neg hoch 0 250 00 10 100 100 100 100 100 100 100 100 Neg neg 0 0 12 100 100 100 100 100 100 100 100 Prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS und DTS 95 V I 99 2 95 8 100 Prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS und DTS 95 V I 100 97 2 100 DTS Ubereinst Ubereinstimmung zwischen DTS Systemen und erwarteten Ergebnissen TIGRIS Ubereinst Ubereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und erwarteten Ergebnissen 11 10 Replikate hatte unbestimmte CT Ergebnisse auf den DTS Systems und wurde aus dieser Analyse ausgeschlossen 8 9 stimmten mit den erwarteten Ergebnissen berein 1
110. lent von 50 Zellen GC APTIMA COMBO 2 Assay 80 502183DE Rev C Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System Siehe Analytische Leistung des PANTHER Systems f r die f r das PANTHER System spezifische analytische Leistung quivalenzstudie zur analytischen Sensitivit t Verd nnungen von drei CT Serovaren E F G die mit Urogenitalkrankheiten assoziiert sind wurden auf drei TIGRIS DTS System Ger ten und parallel dazu auf den DTS Systems getestet Die CT Serovaren wurden in Tupfertransportmedien und einem Pool von bearbeiteten Urinproben verd nnt Die Konzentrationen lagen im Bereich von 3 einschlussbildenden Einheiten Inclusion Forming Units IFU pro Test bis 0 1 IFU pro Test was ein log unter der beanspruchten analytischen Sensitivit t f r den Test von einer IFU pro Test ist 7 25 IFU Abstrichprobe 5 IFU mL Urin Die prozentuale Positivit t zwischen dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems entsprach einem 95 Vertrauensbereich f r alle drei Serovaren bis hinunter zum beanspruchten analytischen Spiegel Die Verd nnungen unterhalb dieses Levels zeigten ebenfalls positive Ergebnisse auf beiden Plattformen Insgesamt wurde eine vergleichbare Sensitivit t auf einer Nachweisstufe von einer IFU pro Assay zwischen dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems nachgewiesen Ein Sensitivit tspanel im Vaginalabstrichproben Pool und ein Sensitivit tspanel im
111. lla osloensis Staphylococcus aureus Citrobacter freundii Morganella morganii Staphylococcus epidermidis Clostridium perfringens Mycobacterium smegmatis Streptococcus agalactiae Corynebacterium genitalium Mycoplasma genitalium Streptococcus bovis Corynebacterium xerosis Mycoplasma hominis Streptococcus mitis Cryptococcus neoformans meningitidis Serogruppe A Streptococcus mutans Cytomegalovirus meningitidis Serogruppe B Streptococcus pneumoniae Deinococcus radiodurans meningitidis Serogruppe C 4 Streptococcus pyogenes Derxia gummosa meningitidis Serogruppe D Streptococcus salivarius Eikenella corrodens meningitidis Serogruppe Y Streptococcus sanguis Enterobacter aerogenes N N N N N N meningitidis Serogruppe W135 Streptomyces griseinus Enterobacter cloacae Neisseria cinerea 4 Trichomonas vaginalis Entercoccus avium Neisseria dentrificans Ureaplasma urealyticum Entercoccus faecalis Neisseria elongata 3 Vibrio parahaemolyticus Entercoccus faecium Neisseria flava Yersinia enterocolitica Erwinia herbicola Neisseria flavescens 2 Erysipelothrix rhusiopathiae Neisseria lactamica 9 n Anzahl der getesteten St mme Alle getesteten Organismen produzierten ein negatives Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay aufgrund des Kinetikprofiltyps und RLU Interferierende Subst
112. lungsschritten vermeiden Die Proben k nnen sehr hohe Konzentrationen von Organismen aufweisen Es ist sicherzustellen dass die Probenbehalter nicht miteinander in Ber hrung kommen Benutzte Materialien d rfen nicht ber offene Beh lter hinweg entsorgt werden Wechseln Sie die Handschuhe wenn sie mit Proben in Kontakt kommen R Wenn das Labor ein Abstrichproben Transportr hrchen ohne Tupfer mit zwei Tupfern einem Reinigungstupfer oder einem nicht von Gen Probe gelieferten Tupfer erh lt muss die Probe abgelehnt werden Vor der Ablehnung eines Tupfertransportr hrchen ohne Tupfer sicherstellen dass es kein APTIMA Probentransferr hrchen ist da dieses Probentransferr hrchenkeinen Tupfer enth lt S F r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap ist die Probenentnahme entsprechend der Herstelleranleitung vorzunehmen Aliquote die anschlie end aus dem PreservCyt Fl schchen zum Test mit dem APTIMA COMBO 2 Assay entnommen werden d rfen nur mit dem APTIMA Probentransferkit bearbeitet werden T Nach der Punktion kann unter bestimmten Bedingungen aus den Verschl ssen der APTIMA Transportr hrchen Fl ssigkeit auslaufen Um dies zu verhindern sind die Anweisungen im jeweiligen Abschnitt Testverfahren zu befolgen Assaybezogen U Die Leistung von vaginalen Abstrichproben bei Schwangeren wurde nicht beurteilt V Die Leistung von endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben m
113. m Ende der Inkubation im Selektionsschritt abgeschlossen werden g Bereiten Sie die Deaktivierungsfl ssigkeit vor indem Sie gleiche Volumina einer 5 igen bis 7 igen 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung und des APTIMA Puffers f r Deaktivierungsfl ssigkeit in einem Plastikbeh lter mit gro em Verschluss vermischen Beschriften Sie den Plastikbeh lter einschl Verfallsdatum Die Deaktivierungsfl ssigkeit ist 4 Wochen bei Raumtemperatur stabil Entsorgen Sie die Deaktivierungsfl ssigkeit nach 4 Wochen oder nachdem 100 bearbeitete Proben deaktiviert wurden der zuerst eintretende Zeitpunkt ist ma gebend h Setzen Sie nach Entfernen der gebrauchten TTUs aus dem Luminometer diese TTUs in den Beh lter mit der Deaktivierungsl sung Belassen Sie die TTUs 15 Minuten vor der Entsorgung im Beh lter Der Laborleiter muss die richtigen Handhabungs und Entsorgungverfahren festlegen Verfahrenshinweise A Controls Zur vorschriftsm igen Funktion mit der APTIMA Assay Software muss die Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC in der ersten Position des ersten TTU sein Das Etikett dieser Kontrolle ist rosa Der Etiketttext lautet CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC Die Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT muss in der zweiten Position der ersten TTU sein Diese Kontrolle hat ein blau gr nes Etikett Der Etiketttext lautet CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT Eine Platzierung in der falschen Position f hrt zum Fehlschla
114. n Arthritis Rheum 10 173 21 McCurdy Brenda W 1997 Cumitech Guide on Verification and Validation of Procedures in the Microbiology Laboratory February 1997 American Society for Microbiology ASM Press 22 National Committee for Clinical Laboratory Standards 1999 NCCLS EP5 A Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices Approved Guideline Vol 19 No 2 23 National Committee for Clinical Laboratory Standards 2002 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance Approved Guideline for additional Guidance on Appropriate Internal Quality Control Testing Practices 24 National Committee for Clinical Laboratory Standards 2004 NCCLS EP5 A2 Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods Approved Guideline 2nd edition Vol 24 No 25 25 Peterson E M V Darrow J Blanding S Aarnaes and L M de La Maza 1997 Reproducibility problems with the AMPLICOR PCR Chlamydia trachomatis test J Clin Microbiol 35 957 959 26 Schachter J 1985 Chlamydiae Psittacosis Lymphogranuloma Venereum Trachoma group p 856 862 In E H Lennette et al ed Manual of Clinical Microbiology 4 ed American Society for Microbiology Washington D C 27 Schachter J and M Grossman 1981 Chlamydial infections Ann Rev Med 32 45 61 28 Schachter J 1978 Medical progress chlamydial infections third of three parts NEJM 298 540 549 29 Schachter J E C Hill E B Ki
115. n emittiert wird als Photonensignale in einem Luminometer gemessen und als relative Lichteinheiten Relative Light Units RLU berichtet Bei DKA erm glichen Unterschiede in den kinetischen Profilen der CT und GC markierten Sonden die Signaldifferenzierung kinetische Profile werden von Messungen der Photonenausgabe w hrend der Nachweisablesezeit abgeleitet Die chemilumineszierende Nachweisreaktion f r das CT Signal hat eine sehr schnelle Kinetik und ist vom Flasher Kinetiktyp Die chemilumineszierende Nachweisreaktion f r das GC Signal ist relativ langsamer und ist vom Glower Kinetiktyp Die Testergebnisse werden nach einem Grenzwert auf der Grundlage der Gesamtanzahl der RLU und des kinetischen Kurventyps ermittelt Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen A Zur Verwendung in der In vitro Diagnostik B Zus tzliche spezifische Warnhinweise Vorsichtsma nahmen und Verfahren zur Einschr nkung von Kontamination f r das TIGRIS DTS System finden Sie in der Bedienungsanleitung des TIGRIS DTS Systems TIGRIS DTS System Operator s Manual C Zus tzliche spezifische Warnhinweise Vorsichtsma nahmen und Verfahren zur Einschr nkung von Kontamination f r das PANTHER System finden Sie in der Bedienungsanleitung des PANTHER Systems PANTHER System Operator s Manual Laborbezogen D Der Assay wurde nicht an Patientenpopulationen mit einer niedrigen Pr valenz von CT Erkrankungen gepr ft Die Leistungsf higkeit bei niedriger P
116. n in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben in viel gr eren Mengen hinzugesetzt wurde als sie bei der normalen Probenentnahme erwartet w rden zeigte keine interferierende Wirkung auf die Ergebnisse mit dem TIGRIS DTS System Verschleppungsstudien f r das TIGRIS DTS System Um nachzuweisen dass das TIGRIS DTS System das Risiko falsch positiver Ergebnisse infolge von Verschleppungskontamination auf ein Mindestma beschr nkt wurde eine Analysestudie ber mehrere Tage mit gespikten Panels auf drei TIGRIS DTS Systemen durchgef hrt Die Studie verwendete 20 High Target GC Proben die 1 0 x10 Zellen Reaktion enthielten und die im Zufallsverfahren unter 80 negativen Proben die Tupfertransportmedium enthielten verteilt wurden Im Verlauf der Studie wurden 1372 High Target Proben und 5516 negative Proben auf den drei TIGRIS DTS Systemen getestet Die Gesamtverschleppungsrate einschlie lich falsch positive und unbestimmte Ergebnisse lag im Durchschnitt bei 0 3 18 5491 Insgesamt 25 negative Proben wurden als ung ltig berichtet und aus der Berechnung ausgeschlossen Eine separate Analyse wurde an einer Teilmenge der Studienpopulation durchgef hrt die aus den negativen Proben bestand die APTIMA COMBO 2 Assay 83 502183DE Rev C Analytische Leistung des Assays auf dem TIGRIS DTS System sich unmittelbar an ein High Target positives Ergebnis anschlossen Die Verschleppungsrate f r diese Teilmenge der Po
117. n Sie die Probe bei 20 C bis 70 C f r bis zu 12 Monate nach dem Transfer ein siehe Probenstabilit tsstudien APTIMA COMBO 2 Assay 9 502183DE Rev C Allgemeine Informationen C Probenlagerung nach dem Test 1 Die bereits getesteten Proben m ssen aufrecht in einem St nder gelagert werden 2 Die Probentransportr hrchen sind mit einem neuen Barriereschutz aus sauberem Plastik oder Folie zu bedecken 3 Wenn getestete Proben gefroren oder versandt werden m ssen entfernen Sie die durchstechbaren Kappen und setzen Sie neue undurchstechbare Kappen auf die Probentransportr hrchen Wenn Proben zum Test an eine andere Einrichtung versandt werden m ssen m ssen die empfohlenen Temperaturen eingehalten werden Vor der Entfernung des Deckels von bereits getesteten und wieder verschlossenen Proben m ssen die Probentransportr hrchen 5 Minuten bei 420 RCF Relative Zentrifugalkraft zentrifugiert werden um die gesamte Fl ssigkeit zum Boden des Reaktionsgef es zu bringen Verspritzen und Kreuzkontamination vermeiden Hinweis Der Versand der Proben muss in bereinstimmung mit geltenden nationalen und internationalen Frachtbestimmungen erfolgen APTIMA COMBO 2 Assay 10 502183DE Rev C DTS Systeme DTS Systeme Die Reagenzien f r den APTIMA COMBO 2 Assay f r CT und GC auf den DTS Systems sind unten aufgef hrt Die Symbole zur Identifikation der Reagenzien sind neben dem Reagenznamen angegeben DTS T Im Liefe
118. n mit Hilfe von Magneten zur Seite des APTIMA COMBO 2 Assay 3 502183DE Rev C Allgemeine Informationen Reaktionsgef es gezogen und der berstand wird aspiriert Die Partikel werden gewaschen um Restprobenmatrix zu entfernen die Amplifikationsreaktionshemmer enthalten k nnen Nach Abschluss der Target Capture Schritte sind die Proben zur Amplifikation bereit Target Amplifikationsassays basieren auf der F higkeit von komplement ren Oligonukleotid Primern zur Bindung an spezifischen Stellen Annealing und zur Erm glichung einer enzymatischen Amplifikation der Target Nukleins urestr nge Der APTIMA COMBO 2 Assay repliziert eine spezifische Region der 23S rRNA von CT und eine spezifische Region der 16S rRNA von GC ber DNA Intermediate F r jedes Targetmolek l wird eine spezifische Reihe von Primern verwendet Der Nachweis der rRNA Amplifikationsproduktsequenzen Amplikon wird durch Nukleinsaurehybridisierung erbracht Einstr ngige chemilumineszierende DNA Sonden die komplement r zu einer Region jedes Target Amplikons sind werden mit verschiedenen Acridiniumestermolek len markiert Die markierten DNA Sonden vereinigen sich mit Amplikon und bilden stabile RNA DNA Hybride Das Selektionsreagenz differenziert die hybridisierte von der nicht hybridisierten Sonde und eliminiert somit die Erzeugung eines Messsignals von einer nicht hybridisierten Sonde W hrend des Nachweissschritts wird Licht das von den markierten RNA DNA Hybride
119. n symptomatischen und asymptomatischen Probanden die jeweils als mit CT oder GC infiziert oder nicht infiziert ausgewiesen wurden nach dem Algorithmus f r den Patienteninfektionsstatus zusammengefasst F r diese klinische Studie wurden zwei im Handel erh ltliche NAATs zur Bestimmung des GC Infektionsstatus verwendet Es wurde keine Kultur als Referenztest verwendet da der APTIMA COMBO 2 Assay bereits f r andere Probentypen im Vergleich zur Kultur beurteilt wurde Einzelheiten siehe Klinische Studie mit Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben und Urinproben Die Sensitivit t und Spezifit t f r CT nach Geschlecht Probentyp und Symptomstatus gehen aus Tabelle 5b hervor Tabelle 6b zeigt die Sensitivit t Spezifit t und pr diktiven Werte des APTIMA COMBO 2 Assays f r CT im Vergleich zum Patienteninfektionsstatus f r jedes Pr fzentrum und insgesamt auf Die Sensitivit t und Spezifit t f r den Nachweis von GC nach Geschlecht Probentyp und Symptomstatus gehen aus Tabelle 9b hervor Tabelle 9b zeigt die Sensitivit t Spezifit t und pr diktiven Werte des APTIMA COMBO 2 Assays f r GC im Vergleich zum Patienteninfektionsstatus f r jedes Pr fzentrum und insgesamt auf Die Proben die positiv im APTIMA COMBO 2 Assay waren und einen negativen Patienten infektionsstatus hatten d h offenbar falsch Positive wurden in alternativen TMA Assays f r CT und GC getestet Diese alternativen TMA Assays zielen auf Sequenzen a
120. nalis Neisseria perflava Actinomyces pyogenes Gemella haemolysans Neisseria polysaccharea Aerococcus viridans Haemophilus ducreyi Paracoccus denitrificans Aeromonas hydrophila Haemophilus influenzae Peptostreptococcus anaerobius Agrobacterium radiobacter Herpes simplex Virus Peptostreptococcus productus Alcaligenes faecalis Herpes simplex Virus II Plesiomonas shigelloides Bacillus subtilis Humanes Papillomavirus 16 Propionibacterium acnes Bacteriodes fragilis Kingella dentrificans Proteus mirabilis Bacteriodes ureolyticus Kingella kingae Proteus vulgaris Bifidobacterium adolescentis Klebsiella oxytoca Providencia stuartii Bifidobacterium brevi Klebsiella pneumoniae Pseudomonas aeruginosa Branhamella catarrhalis Lactobacillus acidophilus Pseudomonas fluorescens Brevibacterium linens Lactobacillus brevis Pseudomonas putida Campylobacter jejuni Lactobacillus jensonii Rahnella aquatilis Candida albicans Lactobacillus lactis Rhodospirillum rubrum Candida glabrata Legionella pneumophila 2 Saccharomyces cerevisiae Candida parapsilosis Leuconostoc paramensenteroides Salmonella minnesota Candida tropicalis Listeria monocytogenes Salmonella typhimurium Chlamydia pneumoniae Micrococcus luteus Serratia marcescens Chlamydia psittaci 2 Moraxella lacunata Staphylococcus saprophyticus Chromobacterium violaceum Moraxe
121. nd aus sechs identischen 12 Element Pr zisionspanels mit 0 bis 2000 fg Assay CT rRNA und oder 0 bis 2433 fg Assay GC rRNA Jede Arbeitsliste bestand aus sechs identischen 12 Element Prazisionspanels mit 0 bis 2000 fg Assay CT rRNA und oder 0 bis 5 000 fg Assay GC rRNA Panelproben die CT und GC enthielten wurden in die folgenden Kategorien eingeteilt niedrige 5 oder 100 fg Assay mittlere 1000 fg Assay oder hohe 22000 fg Assay CT Konzentration sowie niedrige 250 fg Assay mittlere ca 2400 fg Assay oder hohe 5000 fg Assay GC Konzentration Die Reproduzierbarkeit wurde mit einem gespikten Tupfertransportmedium mit rRNA ermittelt Die Reproduzierbarkeit von Tests von Abstrich und Urinproben mit Zielorganismen wurde nicht ermittelt Die Prazision wurde nach den NCCLS Guidelines NCCLS Dokument EP5 A 22 geschatzt APTIMA COMBO 2 Assay 79 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Tabelle 23 Pr zisionsdaten mit TIGRIS DTS System Konz Laufintern Zwischen Zwischen Zwischen Zwischen L ufen RLU Pr fzentren Chargen Bedienern ittel o CT GC a Ober A In ntti ris ety K En bis A un N x1000 einst x1000 x1000 9 x100 9 x100 9 x1000 9 Neg Neg 647 4 100 1 25 26 2 0 66 13 9 0 05 1 0 0 08 1 7 0 30 6 4 Neg Hoch 215 1216 100 28 5 2 3 61 2 5 0 10 0 0 8 0 0 17 1 1 4 Hoch Neg 216 1266 100 38 8 3 0 0 0 93 1 7 3 40 8 3 2 40 4 3 1 Hoch Hoch 210 2445 100 5
122. nden wurden Jedes der 13 CT GC Panels bestand aus 5 Replikaten eines jeden Probentyps endozervikale Abstrichprobe m nnliche urethrale Abstrichprobe weibliche Urinprobe m nnliche Urinprobe f r insgesamt 20 Replikate pro Panel Tabelle 20 zeigt die prozentuale bereinstimmung mit den erwarteten CT und GC Ergebnissen f r das TIGRIS DTS System und f r die DTS Systems f r jedes der 13 CT GC Panels Die Konzentrationen lagen im Bereich vom 10 Fachen unterhalb bis zum 1000 Fachen oberhalb der beanspruchten Analysegrenzwerte des APTIMA COMBO 2 Assays von 1 IFU Assay f r CT und 50 CFU Assay f r GC Tabelle 20 zeigt auch die prozentuale Gesamt bereinstimmung 99 3 zwischen den CT GC Panel Ergebnissen vom TIGRIS DTS APTIMA COMBO 2 Assay 75 502183DE Rev C Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System System und von den DTS Systems Die positive und negative bereinstimmung f r CT bzw GC Panel Ergebnisse geht aus Tabelle 21 bzw 22 hervor F r Abstrichproben und Urin Panels lagen die positiven bereinstimmungen f r CT jeweils bei 100 und 96 2 und f r GC jeweils bei 100 F r Abstrichproben und Urin Panels lagen die negativen bereinstimmungen f r CT jeweils bei 100 und 98 0 und f r GC jeweils bei 100 Drei der 5 weiblichen Urin Panel Replikate die eine Logarithmenstufe unter der beanspruchten analytischen Sensitivit t des APTIMA COMBO 2 Assays von 1 IFU Assay f r CT lagen waren CT auf dem TIGRIS D
123. ng V R Coleman P Jones and K F Meyer 1975 Chlamydial infection in women with cervical dysplasia Am J Obstet Gynecol 123 753 757 30 Stary A E Schuh M Kerschbaumer B Gotz and H Lee 1998 Performance of transcription mediated amplification and Ligase chain reaction assays for detection of chlamydial infection in urogenital samples obtained by invasive and noninvasive methods J Clin Microbiol 36 2666 2670 31 Toye B W Woods M Bobrowska and K Ramotar 1998 Inhibition of PCR in genital and urine specimens submitted for Chlamydia trachomatis testing J Clin Microbiol 36 2356 2358 32 Verkooyen R P A Luijendijk W M Huisman W H F Goessens J A J W Kluytmans J H Rijsoort Vos and H A Verbrugh 1996 Detection of PCR inhibitors in cervical specimens by using the AMPLICOR Chlamydia trachomatis assay J Clin Microbiol 34 3072 3074 33 Vincelette J J Schirm M Bogard A Bourgault D Luijt A Bianchi P C Van Voorst Vader A Butcher and M Rosenstraus 1999 Multicenter evaluation of the fully automated COBAS AMPLICOR PCR test for detection of Chlamydia trachomatis in urogenital specimens J Clin Microbiol 3 74 80 34 Yuan Y Y X Zhang N G Watkins and H D Caldwell 1989 Nucleotide and deduced amino acid sequences for the four variable domains of the major outer membrane proteins of the 15 Chlamydia trachomatis serovars Infect Immun 57 1040 1049 APTIMA COMBO 2 Assay
124. nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Hinweis Materialien die von Gen Probe erh ltlich sind sind mit der Katalognummer aufgef hrt sofern nicht anders angegeben Kat Nr LEADER HC Luminometer 104747 01 GEN PROBE Target Capture System TCS 104555 Inkubatoren und Vortexer 2 Vortex Mischer f r mehrere R hrchen 102160 3 zirkulierende Wasserb der 104586 62 C 1 C 42 C 1 C 62 C1 3 Wasserbad Distanzst cke 104627 ODER 2 SB100 Dry Heat Bath Vortexer 105524 Bei steigendem Testvolumen werden eventuell weitere SB100 B der ben tigt APTIMA Auto Detect Kit Auto Detect Kit 301048 2 eppendorf Repeater Plus Pipettors 105725 2 Pipetten 1000 uL RAININ PR1000 901715 eppendorf Pipette 20 uL bis 200 uL 105726 Spitzen f r Wiederholungspipetten 2 5 mL 21 381 329 Spitzen f r Wiederholungspipetten 5 0 mL 21 381 330 Spitzen f r Wiederholungspipetten 25 0 mL 21 381 115 APTIMA COMBO 2 Assay 12 502183DE Rev C Spitzen P1000 Ausf hrung Spitze mit Sonderdurchmesser nur von Gen Probe erh ltlich Pipettenspitzen 20 uL bis 200 uL Zehn R hrchen Einheiten Ten Tube Units TTU Zehn Spitzen Kassetten Ten Tip Cassettes TTC APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit fur endozervikale und mannliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und Frauen APTIMA Urinproben Transportr hrchen f r Urinproben von M nnern und Frauen APTIMA Entnahmekit f r Vaginalabstri
125. nliche und weibliche Probanden aufgenommen die zu einer Klinik f r Geschlechtskrankheiten STD Familienplanung und Frauenheilkunde Geburtshilfe kamen Bis zu drei urethrale Abstrichproben und eine Urinprobe wurden von den m nnlichen Probanden und vier Endozervixabstriche und eine Urinprobe wurden von den Probandinnen entnommen Bei M nnern die eine urethrale Abstrichprobe bereitstellten wurde nur ein GC Kulturtest durchgef hrt Bei M nnern die drei Abstrichproben bereitstellten umfassten die Tests eine GC Kultur den APTIMA COMBO 2 Assay und einen im Handel erh ltlichen NAAT f r CT und GC Die Tests der Endozervix Abstrichproben umfassten den APTIMA COMBO 2 Assay zwei im Handel erh ltliche NAATs f r CT einen im Handel erh ltlichen NAAT f r GC und eine GC Kultur Der Abstrich f r die GC Kultur wurde zuerst entnommen und die Reihenfolge der Entnahme der restlichen Abstriche wurde abgewechselt um eine entnahmebedingte Verf lschung Bias auf ein Mindestma zu beschr nken Urin wurde mit dem APTIMA COMBO 2 Assay zwei im Handel erh ltlichen NAATs f r CT und einem im Handel erh ltlichen amplifizierten Test f r GC getestet Die im Handel erh ltlichen Amplifikationsassays wurden als Referenztests in dieser klinischen Studie mit dem APTIMA COMBO 2 Assay verwendet Alle Leistungsberechnungen beruhten auf der Gesamtanzahl der APTIMA COMBO 2 Assay Ergebnisse f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben und m nnliche und
126. norrhoeae Analyse auf Infektionsstatus bei weiblichen Patienten Tabelle 11a Endozervixabstrich und Urinprobe APTIMA COMBO 2 Patienteninfektions NAAT Kultur Assay Symptom status Saus FU FS FS FU FS Sympt Asympt Infiziert NA 1 1 Infiziert 3 _ 0 1 Infiziert 5 2 Infiziert 9 2 Infiziert NA 1 0 Infiziert E 3 1 Infiziert NA 0 1 Infiziert a 11 2 Infiziert 2 1 Infiziert 62 21 Nicht infiziert NA 2 3 Nicht infiziert z a 768 559 Nicht infiziert 12 2 Nicht infiziert 7 z 4 3 Nicht infiziert 3 0 Gesamt 883 599 FU Female Urine Urin Frau FS Female Endocervical Swab weibl Endozervix Abstrichprobe NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar APTIMA COMBO 2 Assay 65 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 11b Von der Patientin selbst durchgef hrter vaginaler Abstrich und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe Probenanalyse Patienteninfektions NAAT 1 NAAT 2 c EEE Symptom status sans en FS FU FS FU PVS Cvs Sympt Asympt Infiziert 44 15 59 Infiziert 1 0 1 Infiziert NA 0 1 1 Infiziert 2 2 4 Infiziert NA 1 0 1 Infiziert 1 1
127. nsportmedium ergibt auch das zus tzliche Volumen der PreservCyt L sung eine gr ere Verd nnung des Probenmaterials Diese Faktoren k nnen die F higkeit beeintr chtigen kleine Mengen von Organismen im gesammelten Material nachzuweisen Wenn negative Ergebnisse aus der Probe nicht dem klinischen Eindruck entsprechen kann eine neue Probenentnahme notwendig sein Y Die Kunden m ssen einen LIS Transfer unabh ngig validieren APTIMA COMBO 2 Assay 44 502183DE Rev C Sollwerte mit DTS Systemen Sollwerte mit DTS Systemen Pr valenz Die CT und oder GC Pr valenz in Patientenpopulationen h ngt von Risikofaktoren wie Alter Geschlecht Pr senz von Symptomen Art der Klinik und dem Testverfahren ab Eine Zusammenfassung der Pr valenz von drei CT und GC Erkrankungsergebnissen gem Bestimmung durch den APTIMA COMBO 2 Assay f r drei multizentrische klinische Pr fungen jeweils nach Pr fzentrum und insgesamt geht aus den Tabellen 1a 1b und 1c hervor Pr valenz von C trachomatis und oder N gonorrhoeae Erkrankung gem Bestimmung anhand der Ergebnisse des APTIMA COMBO 2 Assays nach Pr fzentrum Tabelle 1a Endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche und Urinproben Pr f Endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche Urin zen Pr valenz Anz positiv Anz getestet Pr valenz Anz positiv Anz getestet trum CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC CT GC 1 10 0 39 392 1
128. nstests wurden an drei Pr fzentren durchgef hrt um Ma e der Wiederholbarkeit und Reproduzierbarkeit zu erhalten Die Pr zisionsstudien wurden als Teil der klinischen Studie der Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben und Urinproben sowie der klinischen Studie zu Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap durchgef hrt F r die erstere Studie wurden jedem Pr fzentrum drei identische Panels mit 13 Proben mit 0 bis 500 fg CT rRNA 0 bis 25 000 fg GC rRNA oder Kombinationen von CT und GC rRNA bereitgestellt Die Tests wurden Uber einen Zeitraum von drei Tagen mit verschiedenen Testkitchargen an jedem Tag durchgefuhrt Die Gesamt RLU und die deskriptiven Statistiken innerhalb eines Laufs zwischen Laufen und zwischen Prufzentren sind in Tabelle 14a zusammengefasst Fur die spatere Prazisionsstudie wurde die Reproduzierbarkeit mit einem 12 Elemente Panel das durch Spiken der PreservCyt L sung mit 0 bis 2000 fg Test CT und 0 bis 5000 fg Test GC rRNA und Aliquotieren von 1 0 mL in das APTIMA Probentransferkit Sammelgef erzeugt wurde bestimmt Zwei 2 Bediener an jedem der drei Pr fzentren f hrten einen Lauf pro Tag an jedem der drei Tage durch was insgesamt drei g ltige L ufe pro Bediener ergab Die Tests wurden mit einer Testkitcharge durchgef hrt Die Ergebnisse dieser Pr zisionsstudie sind in Tabelle 14b zusammengefasst F r beide Studien wurde die Reproduzierbarkeit durch S
129. oben die gem der Packungsbeilage transportiert und gelagert wurden sind g ltig f r Tests selbst wenn das Verfallsdatum auf dem Entnahmegef berschritten wurde M Die PreservCyt L sung wurde als alternatives Medium zum Test mit dem APTIMA COMBO 2 Assay validiert Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die mit dem ThinPrep 3000 Prozessor oder anderen Ger ten bearbeitet wurden wurden nicht zum Test auf Chlamydia trachomatis und Neisseria gonorrhoeae mit dem APTIMA COMBO 2 Assay beurteilt N Nach der Zugabe von Urin muss der F llstand im Urintransportr hrchen zun chst zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien auf dem R hrchenetikett liegen Sonst muss die Probe verworfen werden APTIMA COMBO 2 Assay 5 502183DE Rev C Allgemeine Informationen O Um die Probenintegrit t zu wahren m ssen w hrend des Probenversands die ordnungsgem en Lagerbedingungen aufrecht erhalten werden Die Probenstabilit t unter anderen Versandbedingungen als den hier empfohlenen wurde nicht beurteilt P Proben k nnen infekti s sein Bei der Durchf hrung dieses Tests sind die allgemein g ltigen Vorsichtsma nahmen zu befolgen Der Laborleiter muss die richtigen Handhabungs und Entsorgungverfahren festlegen Es darf nur Personal das in der Handhabung von infekti sen Materialien geschult wurde gestattet werden dieses Diagnoseverfahren auszuf hren Q Kreuzkontamination in den Probenbehand
130. ois Sensitivitat Spezifitat status Ergebnis 95 V I 95 V I Positiv 5 0 1 3 Asympt Negativ 1 0 5 1273 83 3 35 9 99 6 99 7 99 2 99 9 Gesamt 6 0 6 1276 Positiv 7 0 0 0 Sympt Negativ 0 0 0 352 100 59 0 100 100 99 0 100 Gesamt 7 0 0 352 Positiv 12 0 1 3 Alle Negativ 1 0 5 1625 92 3 64 0 99 8 99 8 99 4 99 9 Gesamt 13 0 6 1628 EE zz zz _ Z zz _ 1 Eine Probe wies ein widerspr chliches Ergebnis auf Unbestimmtes Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AGC Assay APTIMA COMBO 2 Assay 61 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Neisseria gonorrhoeae Leistung nach Pr fzentrum Tabelle 10a Proben mit dem APTIMA COMBO 2 Assay gegen ber Infektionsstatus des Patienten Pos Neg Probe am N TP FP TN FN Pr
131. on 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen einwirken Sp len Sie sie anschlie end mit Wasser ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Decken Sie die Arbeitsfl che auf der die Reagenzien und Proben vorbereitet werden mit sauberen absorbierenden Labortischunterlagen mit Kunststoffunterschicht ab B Reagenzrekonstitution Vorbereitung eines neuen Kits Hinweis Die Reagenzrekonstitution sollte vor Beginn von Arbeiten mit dem PANTHER System durchgef hrt werden 1 Mischen Sie zur Rekonstitution von Amplifikations Enzym und Sondenreagenz jeweils die Flasche mit gefriergetrocknetem Reagenz mit der Rekonstitutionsl sung Wenn sie gek hlt sind lassen Sie die Rekonstitutionsl sungen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur kommen a Paaren Sie jede Rekonstitutionsl sung mit ihrem Iyophilisierten Reagenz Stellen Sie vor Anbringung des Rekonstitutionsverbindungsst cks sicher dass die Rekonstitutionsl sung und das Reagenz bereinstimmende Etikettenfarben aufweisen b Pr fen Sie die Chargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien richtig miteinander gepaart wurden c ffnen Sie das Fl schchen mit dem gefriergetrockneten Reagenz und stecken Sie das gekerbte Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Fl schchen ffnung Abb 3 Schritt 1 d ffnen Sie die Flasche mit
132. on Verschleppung auf dem PANTHER System nachzuweisen Probenvorbereitungskontrolle optional Die im Kit bereitgestellte Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC und die Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT fungieren als Kontrollen fur die Assayschritte Target Capture Amplifikation und Nachweis und mussen in jedem Testlauf mitgefuhrt werden Bei Bedarf k nnen Kontrollen f r Zytolyse und RNA Stabilisierung entsprechend den Anforderungen der entsprechenden Akkreditierungsorganisationen oder der Laborverfahren der einzelnen Einrichtungen in entsprechenden Transportmedien PreservCyt L sung STM getestet werden Bekannte positive Proben k nnen als Kontrollen dienen indem sie in Verbindung mit unbekannten Proben vorbereitet und getestet werden Proben die als Vorbereitungskontrollen verwendet werden m ssen gem den Informationen in der Packungsbeilage gelagert gehandhabt und getestet werden Die Probenvorbereitungskontrollen sollten in der gleichen Weise ausgewertet werden wie es f r die Patiententestproben beschrieben wurde Siehe Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Patienten Testergebnisse D Patienten Testergebnisse 1 Wenn die Kontrollen in einem Lauf nicht die erwarteten Ergebnisse produzieren d rfen die Testergebnisse f r die Patientenproben des gleichen Laufs nicht berichtet werden APTIMA COMBO 2 Assay 40 502183DE Rev C Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse
133. onen haben belegt dass NAAT DNA Sondentechnologien eine h here klinische Sensitivit t als Kulturen haben 2 9 17 30 Aufgrund ihrer geringeren klinischen Sensitivit t und der Leistungsvariation zwischen den Labors sind Kulturen in vielen Labors von direkten DNA Sondentests und NAATs abgel st worden APTIMA COMBO 2 Assay 2 502183DE Rev C Allgemeine Informationen N gonorrhoeae ist der Erreger von Gonorrh N gonorrhoeae sind unbewegliche Gram negative Diplokokken Der Gro teil der Gonorrh infektionen sind unkomplizierte Infektionen des unteren Genitaltrakts die asymptomatisch sein k nnen Wenn sie bei Frauen jedoch unbehandelt bleiben k nnen sie aszendieren und entz ndliche Beckenerkrankungen PID verursachen PID kann sich als Endometritis Salpingitis Beckenperitonitis und Tuboovarialabszess manifestieren Bei einem kleineren Prozentsatz von Personen mit Gonokokkeninfektionen kann sich eine disseminierte Gonokokkeninfektion DGI entwickeln 14 20 Die herk mmliche Diagnose einer GC Infektion erfordert eine Isolierung des Organismus auf Selektivmedien oder die Beobachtung von Diplokokken in nach Gram gef rbten Ausstrichen 16 Die Kulturmethoden k nnen eine gute klinische Sensitivit t aufweisen sind aber hochgradig abh ngig von der vorschriftsm igen Probenhandhabung Die falsche Probenlagerung und falscher Probentransport kann zum Verlust der Lebensf higkeit des Organismus f hren und falsch negative Testergebni
134. ou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und in weiblichen und m nnlichen Urinproben von symptomatischen und asymptomatischen Personen nach Testprinzip Der APTIMA COMBO 2 Assay kombiniert die Technologien Target Capture TMA und DKA Die Proben werden in ihren jeweiligen Probentransportr hrchen gesammelt Die Transportl sungen in diesen Reaktionsr hrchen setzen die rRNA Targets frei und sch tzen sie vor Abbau w hrend der Lagerung Bei der Durchf hrung des APTIMA COMBO 2 Assays im Labor werden die Target rRNA Molek le durch Verwendung von Fanger Oligomeren mittels Target Capture mit magnetischen Mikropartikeln von den Proben isoliert Die F nger Oligomere enthalten Sequenzen die zu spezifischen Bereichen der Targetmolek le komplement r sind sowie Deoxyadenosinreste F r jedes Target wird ein separates F nger Oligomer verwendet W hrend des Hybridisierungsschritts binden sich die sequenzspezifischen Regionen der F nger Oligomere an spezifische Regionen der Targetmolek le Das Capture des F nger Oligomer Target Komplexes aus der L sung erfolgt dann durch Verminderung der Reaktionstemperatur auf Raumtemperatur Diese Temperatursenkung erm glicht das Auftreten einer Hybridisierung zwischen dem Desoxyadenosinbereich auf dem F nger Oligomer und den Polydesoxythymidin Molek le die kovalent an die Magnetpartikel gebunden sind Diese Mikropartikel einschlie lich die an sie gebundenen Targetmolek le werde
135. pfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner rosafarbener APTIMA Entnahmetupfer c In Urin Probentransportr hrchen liegt das End Urinvolumen zwischen den schwarzen F llstandsmarkierungen d In APTIMA Probentransportr hrchen f r Liquid Pap Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap befindet sich kein Tupfer 4 Pr fen Sie die Probenr hrchen vor dem Laden in den St nder a Wenn sich im Transportgef im Raum zwischen der Fl ssigkeit und dem Deckel Luftblasen befinden zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um die Luftblasen zu entfernen b Wenn ein Transportrgef ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt wenn die Sammelanleitung befolgt wurde zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet c Falls der Fl ssigkeitsstand in einem Urintransportr hrchen nicht zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien liegt muss die Probe verworfen werden Falls ein Urintransportr hrchen ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt zentrifugieren Sie das R hrchen 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet Nicht in ein berf lltes Reaktionsgef stechen d Wenn eine Urinprobe ein Pr zipitat enth lt die Probe bis zu 5 Minuten auf 37 C erw rmen Wenn das Pr zipitat nicht wieder in L sung geht st
136. piken des entsprechenden Transportmediums STM PreservCyt L sung mit rRNA bestimmt Die Reproduzierbarkeit von Tests von Abstrichproben Urinproben oder klinischen Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap mit Zielorganismen wurde nicht ermittelt APTIMA COMBO 2 Assay 68 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen Tabelle 14a Tupfertransportmedium RLU Laufintern Zwischen L ufen Zwischen Panelprobe N Mittelwert Pr fzentren x1000 SA RLU VK SA RLU VK SA RLU VK CT Abstrich 54 1055 76 588 7 3 83 711 7 9 150 332 14 2 Doppel 54 2338 93 449 4 0 90 317 3 9 142 898 6 1 Hoch Abstrich Doppel Urin 54 2281 91 487 4 0 106 715 4 7 152 747 67 GC Abstrich 54 1265 30 561 2 4 55 642 4 4 34 413 2 7 CT Abstrich 54 1001 69 831 70 77 701 7 8 159 774 16 0 Mittel Doppel 54 2241 152 377 6 8 58 353 2 6 139 983 6 2 Abstrich GC Abstrich 54 1249 35 142 2 8 60 638 4 9 46 364 3 7 CT Abstrich 54 1013 61 795 6 1 90 906 9 0 131 207 13 0 BR Doppel 4 2085 286 034 13 7 161 764 7 8 58 837 2 8 Niedrig Abstrich Doppel Urin 54 2201 95 705 4 3 118 760 54 106 802 4 9 GC Abstrich 54 1177 42 478 3 6 69 821 5 9 29 836 2 5 j Abstrich 54 7 1301 18 3 2311 32 5 1901 26 8 Negativ Urin 54 7 861 12 0 2299 32 1 1994 27 9 Doppelt positive Panelproben enthielten CT und GC rRNA Tabelle 14b PreservCyt L sung Konzentr
137. probenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Positives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im AC2 Assay Negatives Endozervix Abstrichprobenergebnis im ACT Assay APTIMA COMBO 2 Assay 53 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen C trachomatis Leistung nach Pr fzentrum Tabelle 6a APTIMA COMBO 2 Assay Proben vs Patienteninfektionsstatus Pos Neg Probe zon N TP FP TN FN he evi Ban Wert Wert trum i PPV NPV 1 157 35 6 115 1 229 97 2 85 5 99 9 95 0 89 5 98 2 85 4 99 1 2 93 19 2 72 0 204 100 82 4 100 97 3 90 6 99 7 90 5 100 3 248 76 5 165 2 315 97 4 91 0 99 7 97 1 93 3 99 0 93 8 98 8 apstricn 29112 1 8 0 236 100 735 100 974 86 5 99 9 923 100 5 138 24 O 113 1 18 1 96 0 79 6 99 9 100 96 8 100 100 99 1 6 353 74 6 268 5 224 93 7 85 8 97 9 97 8 95 3 99 2 92 5 982 7 2 0 0 3 2 88 0 90 9 70 8 08 9 100 29 2100 100 60 0 EN ALLE 1065 260 20 774 11 25 4 95 9 92 9 98 0 97 5 96 1 98 5 92 9 98 6 1 157 35 6 115 1 229 97 2 85 5 99 9 95 0 89 5 98 2 854 99 1 2 9 22 1
138. pulation einschlie lich falsch positive und unbestimmte Ergebnisse lag im Durchschnitt bei 1 1 12 1097 F r falsch Positive in dieser Teilmenge lag die Verschleppungsrate im Bereich von 0 bis 1 1 auf den drei TIGRIS DTS Systemen F r Unbestimmte in dieser Teilmenge lag die Verschleppungsrate im Bereich von 0 bis 0 9 aud den drei TIGRIS DTS Systemen Diese Ergebnisse zeigen dass die Verschleppung auf dem TIGRIS DTS System auf ein Mindestma beschr nkt ist APTIMA COMBO 2 Assay 84 502183DE Rev C Analytische Leistung des PANTHER Systems Analytische Leistung des PANTHER Systems bereinstimmungsstudie mit einem gespikten klinischen Panel Einzelne negative Urinproben wurden mit CT Serovar G GC oder einer Kombination aus CT und GC gespikt sodass sich ein Panel mit 120 CT positiven 120 GC positiven und 120 f r beide Erreger positiven Panelproben ergab Die CT positiven Panelproben wurden mit Organismen in den Konzentrationen 0 25 IFU mL 2 5 IFU mL oder 25 IFU mL 0 5 fg Assay 5 fg Assay oder 50 fg Assay gespikt Die GC positiven Panelproben wurden mit Organismen in den Konzentrationen 12 5 CFU mL 125 CFU mL oder 1250 CFU mL 25 fg Assay 250 fg Assay oder 2500 fg Assay gespikt Die f r beide Erreger positiven Panelproben wurden mit Organismen in den folgenden Konzentrationen gespikt CT bei 2 5 IFU mL 5 fg Assay und GC bei 2 500 000 CFU mL 5 000 000 fg Assay oder CT bei 25 IFU mL 50 fg Assay und GC bei 1250 CFU mL 250
139. r hrchen bei 2 C bis 30 C zu transportieren und aufzubewahren Die Proben m ssen innerhalb von 60 Tagen nach der Entnahme mit dem APTIMA COMBO 2 Assay getestet werden Wenn eine l ngere Lagerung erforderlich ist bei 20 C bis 70 C bis zu 12 Monate nach der Entnahme gefrieren siehe Probenstabilit tsstudien 2 Urinproben a Urinproben die noch im prim ren Sammelbeh lter sind m ssen bei 2 C bis 30 C ins Labor transportiert werden Transferieren Sie die Urinprobe innerhalb von 24 Stunden nach der Entnahme in das APTIMA Urinproben Transportr hrchen Lagern Sie sie bei 2 C bis 30 C und testen Sie sie innerhalb von 30 Tagen nach der Entnahme b Nach der Entnahme sind die bearbeiteten Urinproben im APTIMA Urinproben Transportr hrchen bei 2 C bis 30 C zu transportieren und bis zum Test bei 2 C bis 30 C zu lagern Die bearbeiteten Urinproben sollten innerhalb von 30 Tagen nach der Entnahme mit dem APTIMA COMBO 2 Assay getestet werden Wenn eine l ngere Lagerung erforderlich ist bei 20 C bis 70 C bis zu 12 Monate nach der Entnahme gefrieren siehe Probenstabilit tsstudien 3 Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap a Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die f r CT bzw GC Assays bestimmt sind m ssen innerhalb von 30 Tagen nach der Entnahme f r die Zytologie bearbeitet bzw in ein APTIMA Probentransferr hrchen transferie
140. r valenz ist daher unbestimmt E Nur die im Lieferumfang enthaltenen oder angegebenen Einweg Laborprodukte verwenden F Die normalen Vorsichtsma nahmen im Labor ergreifen In den ausgewiesenen Arbeitsbereichen nicht essen trinken oder rauchen Ungepuderte Einweghandschuhe Augenschutz und Laborkittel beim Umgang mit Proben und Kitreagenzien tragen Nach der Handhabung von Proben und Kitreagenzien die H nde gr ndlich waschen G Warnung Reiz und tzstoffe Kontakt von Auto Detect 1 und Auto Detect 2 mit der Haut den Augen und Schleimh uten vermeiden Bei Kontakt dieser Fl ssigkeiten mit der APTIMA COMBO 2 Assay 4 502183DE Rev C Allgemeine Informationen Haut oder den Augen den betroffenen Bereich mit Wasser abwaschen Bei Versch ttung dieser Fl ssigkeiten mit Wasser verd nnen und aufwischen H Arbeitsfl chen Pipetten und andere Ger te m ssen regelm ig mit einer 2 5 igen bis 3 5 igen 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung dekontaminiert werden Spezifisch f r DTS Systeme I Ein getrennter Bereich f r DKA wird dringend empfohlen um die Amplikonkontamination im Test auf ein Mindestma zu beschr nken Dieser speziell reservierte Bereich sollte von den Reagenzvorbereitungs Target Capture und Amplifikations bereichen entfernt sein J Um Kontamination der Laborbereiche mit Amplikon zu vermeiden sollte im Laborbereich ein Arbeitsfluss in einer Richtung implementiert werden angefangen bei der Reagenzvorb
141. rehen der Reagenzien Schaumbildung vermeiden APTIMA COMBO 2 Assay 35 502183DE Rev C PANTHER System C Vorbereitung von Reagenzien f r bereits rekonstituierte Reagenzien 1 Zuvor rekonstituierte Sonden Amplifikations Enzym und Sondenreagenzien m ssen vor dem Start des Tests auf Raumtemperatur 15 C bis 30 C gebracht werden 2 Wenn das rekonstituierte Sondenreagenz einen Niederschlag enth lt der bei Raumtemperatur nicht wieder in L sung geht erw rmen Sie die mit Deckel verschlossene Flasche 1 bis 2 Minuten auf eine Temperatur nicht ber 62 C Nach diesem Erw rmungsschritt kann das Sondenreagenz verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Mischen Sie das Sondenreagenz durch Umdrehen ohne Schaum zu bilden vor der Ladung ins System 3 Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umdrehen der Reagenzien Schaumbildung vermeiden 4 F llen Sie Reagenzflaschen nicht nach Das PANTHER System erkennt Flaschen die nachgef llt wurden und nimmt sie nicht an D Probenhandhabung 1 Lassen Sie die Kontrollen und Proben vor der Verarbeitung auf Raumtemperatur kommen 2 Proben nicht mit dem Vortex Mischer mischen 3 berpr fen Sie optisch dass jedes Probenr hrchen eines der folgenden Kriterien erf llt a In Unisex Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner blauer APTIMA Entnahmetupfer b In Vagina Tu
142. rfahrenshinweise AB Separate Wasserb der sind f r die ausschlie liche Verwendung in den Assayschritten Target Capture Amplifikation und DKA bereitzustellen AC Abdeckfolien sollten sofort nach ihrer Entfernung von den Reaktionsr hrchen im Abfallbeh lter entsorgt werden Es sind stets neue Abdeckfolien zu verwenden Sie d rfen niemals aus einem vorherigen Schritt noch einmal verwendet werden Abdeckfolien sind fest oben auf allen Reaktionsr hrchen anzubringen Lagerungs und Handhabungsbedingungen f r Reagenzien A Die folgenden Reagenzien sind stabil bei Lagerung im Bereich von 2 C bis 8 C gek hlt APTIMA COMBO 2 Amplifikationsreagenz APTIMA COMBO 2 Enzymreagenz APTIMA COMBO 2 Sondenreagenz APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz B APTIMA Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC APTIMA Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT B Die folgenden Reagenzien sind stabil bei Lagerung im Bereich von 2 C bis 30 C APTIMA COMBO 2 Amplifikationsrekonstitutionsl sung APTIMA COMBO 2 Enzymrekonstitutionsl sung APTIMA COMBO 2 Sondenrekonstitutionsl sung APTIMA COMBO 2 Selektionsreagenz C Die folgenden Reagenzien sind stabil bei Lagerung im Bereich von 15 C bis 30 C Raumtemperatur Target Capture Reagent APTIMA Waschlosung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsfl ssigkeit APTIMA lreagenz D Target Capture Arbeitsreagenz wTCR ist bei Lagerung im Bereich von 15 C bis 30 C 30 Tage lang stabil Nicht gek hlt l
143. rholungstest unbestimmte Probe dar APTIMA COMBO 2 Assay 66 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen N gonorrhoeae Analyse auf Infektionsstatus bei weiblichen Patienten Tabelle 11c Ergebnisse f r Patienteninfektionsstatus f r N gonorrhoeae in klinischer Studie mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Endozervixabstrich Patienteninfektions Ergebnis Symptom status status AC2 AGC Sympt Asympt Infiziert 7 6 Nicht infiziert 0 1 Nicht infiziert 0 5 Nicht infiziert 352 1276 Gesamt 359 1288 N gonorrhoeae Analyse auf Infektionsstatus bei m nnlichen Patienten Tabelle 12 Urethrale Abstrichprobe und Urinprobe Patienteninfektions NAAT 1 Kultur BONBO 2 Aa Symptom status status MU MS MS MU MS Sympt Asympt Infiziert NA 1 0 Infiziert NA NA 0 1 Infiziert NA 1 0 Infiziert 1 0 Infiziert 4 1 Infiziert NA NA 0 1 Infiziert NA NA 8 0 Infiziert NA 1 0 Infiziert NA 50 1 Infiziert 4 1 Infiziert NA 0 Infiziert 11 1 Infiziert 0 Infiziert 3 0 Infiziert NA 1 0 Infiziert 229 9 Nicht infiziert NA 0 1 Nicht infiziert NA 0 1 Nicht infiziert NA 17 9 Nicht infiziert 411 349 Nicht infiziert
144. robanden Unter den 1991 getesteten Proben gab es einen kleinen Prozentsatz von Proben die zun chst ein ung ltiges oder unbestimmtes CT oder GC Ergebnis auf dem TIGRIS DTS System 20 1 0 und auf den DTS Systems 14 0 7 aufwiesen Bei den Wiederholungstests gab es zwei 2 klinische Proben mit unbestimmten GC Ergebnissen auf dem TIGRIS DTS System die nicht in den quivalenzberechnungen ber cksichtigt wurden Die prozentuale Gesamt bereinstimmung und die prozentuale positive und negative bereinstimmung wurden berechnet Die Proben die widerspr chliche Ergebnisse zwischen den DTS Systems und dem TIGRIS DTS System ergaben wurden in alternativen TMA Amplifikationsassays f r CT und GC getestet hierbei handelte es sich um Nukleins ure Amplifikationsassays NAATs die auf CT oder GC rRNA Sequenzen abzielen die sich von den Targets im APTIMA COMBO 2 Assay unterscheiden Wiederholungstests mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems wurden auch bei Proben die mit dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems abweichende Ergebnisse erbrachten durchgef hrt Die Tabellen 16 und 17 zeigen die prozentuale Gesamt bereinstimmung f r alle gepaarten Testergebnisse auf die mit dem TIGRIS DTS System und den DTS Systems jeweils f r Abstrich und Urinproben erhalten wurden Die Gesamt bereinstimmung lag bei 98 3 f r Abstrichproben und 99 2 f r Urinproben Siehe Tabellen 5a und 9a f r die Leistungssch tzwerte f r den APTIMA COMBO 2 Assay
145. roben im APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systems wurden auf Beeintr chtigung durch Blut gyn kologische Gleitmittel und Spermizide beurteilt Urinproben wurden auf Beeintr chtigung durch Blut h ufig verwendete Vitamine Mineralien und rezeptfreie Schmerzmittel beurteilt Die Beeintr chtigung durch Blut wurde auf dem TIGRIS DTS System sowie dem PANTHER System ebenfalls beurteilt Die Daten zeigten auf dass keine Testbeeintr chtigungen durch diese Stoffe auftraten C Die Auswirkungen von Tamponverwendung Intimduschen und variablen Faktoren bei der Probenentnahme auf den Nachweis von CT oder GC wurden nicht beurteilt D Die Pr senz von Schleim in Endozervikalproben beeintr chtigt den Nachweis von CT oder GC mit dem APTIMA COMBO 2 Assay nicht Um die Entnahme von Zellen die mit CT infiziert sind sicherzustellen sollten jedoch s ulenf rmige Epithelzellen entlang der Endozervix entnommen werden Wenn berm iger Zervikalschleim nicht entfernt wird ist die Probenentnahme dieser Zellen nicht gew hrleistet E Dieser Assay wurde nur mit den folgenden Proben getestet e Vom Arzt entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale Abstrichproben Vom Arzt entnommene Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap e Von der Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche e Von den Patienten selbst gesammelte weibliche und m nnliche Urinproben Die Leistung von anderen als mit den folgen
146. rt werden wenn sie bei 2 C bis 30 C gelagert werden siehe Probenstabilit tsstudien b Bei Verwendung des ThinPrep Aliquot Entfernungsverfahrens finden Sie eine Anleitung zur Aliquotentfernung im Anhang der Bedienungsanleitung f r den ThinPrep 2000 oder ThinPrep 3000 Prozessor ThinPrep 2000 oder ThinPrep 3000 Processor Operator s Manual Addendum Transferieren Sie 1 ml des entfernten Aliquots gem der Anleitung in der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits in ein APTIMA Probentransferr hrchen c Beim Test der Probe nach der Bearbeitung mit dem ThinPrep 2000 Prozessor bearbeiten Sie den Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap gem der Bedienungsanleitung f r den ThinPrep 2000 Prozessor ThinPrep 2000 Processor Operator s Manual und der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits Transferieren Sie 1 ml der restlichen Fl ssigkeit im Fl schchen mit der PreservCyt L sung gem der Anleitung in der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits in ein APTIMA Probentransferr hrchen d Nach dem Transfer des Papanicolaou Abstrichs in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap in das APTIMA Probentransferr hrchen muss diese Probe innerhalb von 30 Tagen mit dem APTIMA COMBO 2 Assay getestet werden wenn sie bei 2 C bis 8 C gelagert wird oder innerhalb von 14 Tagen wenn sie bei 15 C bis 30 C gelagert wird Wenn l ngere Lagerungszeiten erforderlich sind friere
147. rumfang enthaltene Reagenzien und Materialien APTIMA COMBO 2 Assay Kit 100 Tests 2 Schachteln Kat Nr 301032 APTIMA COMBO 2 gek hlte Schachtel Schachtel 1 von 2 nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge A APTIMA COMBO 2 Amplifikationsreagenz 1 Fl schchen Nicht infekti se Nukleins uren getrocknet in gepufferter L sung mit lt 5 F llstoff E APTIMA COMBO 2 Enzymreagenz 1 Fl schchen Reverse Transkriptase und RNA Polymerase getrocknet in HEPES gepufferter L sung mit lt 10 F llreagenz P APTIMA COMBO 2 Sondenreagenz 1 Flaschchen Nicht infekti se chemilumineszierende DNA Sonden getrocknet in sukzinatgepufferter L sung mit lt 5 Detergens TCR B APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz B 1x 0 35 mL Nicht infekti se Nukleins uren in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens PCT NGC APTIMA Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC 3x1 7mL Nicht infekti se CT Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 1 CT IFU 5 fg Assay PGC NCT APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT 3x1 7mL Nicht infekti se GC Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 50 GC Zellen 250 fg Assay Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zell
148. rwartet w rden zeigte keine interferierende Wirkung auf die Ergebnisse mit dem PANTHER System Verschleppungsstudien f r das PANTHER System Um nachzuweisen dass das PANTHER System das Risiko falsch positiver Ergebnisse infolge von Verschleppungskontamination auf ein Mindestma beschr nkt wurde eine Analysestudie ber mehrere L ufe mit gespikten Panels auf drei PANTHER Systemen durchgef hrt Die Verschleppung wurde beurteilt indem etwa 20 Proben mit hohem GC Titer zwischen negative Proben gestellt wurden Es wurden Durchl ufe sowohl mit Ansammlungen hoch positiver Proben und Ansammlungen negativer Proben als auch mit einzelnen im Durchlauf nach einem bestimmten Muster verteilten hoch positiven Proben durchgef hrt Die Proben mit hohem Titer wurden hergestellt indem STM mit GC rRNA bei einer Endkonzentration von 5 x 10 fg rRNA Reaktion rRNA aquivalent zu 2 5 x 10 CFU mL versetzt wurde Die Tests erfolgten anhand von jeweils 5 Durchl ufen auf drei PANTHER Systemen mit insgesamt 2936 negativen Proben Die Gesamtverschleppungsrate betrug 0 bei einem 95 Vertrauensintervall von 0 0 1 Vier negative Proben wurden als ung ltig berichtet und aus der Berechnung ausgeschlossen Literatur 1 Beem M O and E M Saxon 1977 Respiratory tract colonization and a distinctive pneumonia syndrome in infants infected with Chlamydia trachomatis NEJM 296 306 310 2 Buimer M G J J Van Doornum S Ching P G H Peerbooms P K Pl
149. s 28 C ausgef hrt werden APTIMA COMBO 2 Assay 20 502183DE Rev C DTS Systeme E Zeit Die Reaktionen Target Capture Amplifikation Hybridisierung und Selektion sind zeitabh ngig Halten Sie die unter Testverfahren mit DTS Systemen angegebenen Zeiten ein F Mischen mit dem Vortex Mischer Richtiges Mischen mit dem Vortex Mischer ist f r die erfolgreiche Performance des APTIMA COMBO 2 Assays wichtig Bei Erzielung einer geeigneten Vortexbewegung rotiert die Suspension bei einer Geschwindigkeit die in der Lage ist die L sung in die obere H lfte des R hrchens anzuheben Diese Manipulation Mischen mit dem Vortex Mischer wird f r angegebene Zeitr ume aufrecht erhalten Zum Mischen von Reaktionsmischungen mit dem Vortex Mischer stellen Sie den Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e auf die niedrigste Geschwindigkeitseinstellung ein sichern den St nder und schalten den Mischer ein Steigern Sie langsam das Tempo bis die Fl ssigkeit auf die halbe H he des Reaktionsgef es angestiegen ist Mischen Sie mit dem Vortex Mischer 10 Sekunden ber den angegebenen Zeitraum oder bis sich eine gleichm ige Farbe einstellt Stellen Sie dann die Geschwindigkeit auf die niedrigste Einstellung bevor Sie den Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e ausschalten und den St nder entnehmen Die Reaktionsmischungen d rfen nicht die Abdeckfolie ber hren G Wasserb der 1 Der Wasserpegel in den Wasserb dern muss im Bereich
150. s Wasserbad auf 42 C 1 C f r Amplifikation und ein drittes Wasserbad auf 62 C 1 C f r DKA Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers lesen Sie im Anwendungsblatt f r den SB100 Dry Heat Bath Vortexer SB100 Application Sheet nach 2 Arbeitsflachen und Pipetten m ssen vor Assaybeginn mit einer 2 5 igen bis 3 5 igen 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung dekontaminiert werden Die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen und Pipetten einwirken lassen und anschlie end mit Wasser absp len Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Decken Sie die Arbeitsfl che auf der der Test durchgef hrt wird mit sauberen absorbierenden Labortischunterlagen mit Kunststoff unterschicht ab 3 Setzen Sie eine ausreichende Zahl von Zehn Spitzen Kassetten in das Target Capture System TCS Stellen Sie sicher dass die TCS Waschflasche mit der APTIMA Waschl sung gef llt ist und die Absaugvorrichtung an der Vakuumpumpe angeschlossen ist Siehe die Bedienungsanleitung des Target Capture Systems Target Capture System Operator s Manuall B Reagenzrekonstitution Hinweis Die Reagenzrekonstitution sollte vor Beginn des Probentransfers durchgef hrt werden 1 Kombinieren Sie zur Rekonstitution von Amplifikations Enzym und Sondenreagenz jeweils die Flasche mit gefriergetrocknetem Reagenz mit der Rekonstitutionsl sung Lassen Sie ggf gek hlte Rekonstitutionsl sungen vor Gebrauch
151. sche Probenlagerung technische Fehler oder Probenverwechselung beeintr chtigt sein e Wie bei allen anderen Nicht Kultur Verfahren gilt dass eine positive Probe die von einem Patienten nach einer therapeutischen Behandlung bezogen wurde nicht so ausgelegt werden kann dass sie die Pr senz von lebensf higen CT oder GC anzeigt e Wie bei allen Urintestverfahren gilt dass ein negatives Urinergebnis bei einer Patientin mit Verdacht auf eine Chlamydien oder Gonokokkeninfektion nicht die Pr senz von CT oder GC im Urogenitaltrakt ausschlie t In solchen F llen werden Tests einer endozervikalen Probe empfohlen Ein negatives Urinergebnis f r GC von einer Probandin hat ebenfalls einen niedrigeren negativen pr diktiven Wert als ein endozervikales Abstrichergebnis Der Test von Endozervikalproben wird bei Patientinnen empfohlen bei denen der klinische Verdacht auf eine Chlamydien oder Gonokokkeninfektion besteht Wenn sowohl ein Papanicolaou Abstrich als auch eine Endozervix Abstrichprobe entnommen werden muss der Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap vor der Endozervix Abstrichprobe entnommen werden APTIMA COMBO 2 Assay 41 502183DE Rev C Einschr nkungen Einschr nkungen A Dieser Test darf nur von Mitarbeitern durchgef hrt werden die im Verfahren unterwiesen wurden Eine Nichtbefolgung der Anweisungen in dieser Packungsbeilage kann fehlerhafte Ergebnisse zur Folge haben B Abstrichp
152. seminated Gonococcal infection Ann of Intern Med 74 979 993 15 Holmes K K H H Handsfield S P Wang B B Wentworth M Turck J B Anderson and E R Alexander 1975 Etiology of nongonococcal urethritis NEJM 292 1199 1205 16 Hook E W Ill and H H Handsfield 1999 Gonococcal infections in the adult p 458 In K Holmes et al eds Sexually Transmitted Diseases McGraw Hill New York NY 17 Jaschek G C A Gaydos L E Welsh and T C Quinn 1993 Direct detection of Chlamydia trachomatis in urine specimens from symptomatic and asymptomatic men by using a rapid polymerase chain reaction assay J Clin Microbiol 31 1209 1212 18 Krauss S J R C Geller G H Perkins and D L Rhoden 1976 Interference of Neisseria gonorrhoeae growth by other bacterial species J Clin Microbiol 4 288 295 19 Mahony J S Chong D Jang K Luinstra M Faught D Dalby J Sellors and M Chernesky 1998 Urine specimens from pregnant and nonpregnant women inhibitory to amplification of Chlamydia trachomatis nucleic acid by PCR Ligase chain reaction and transcription mediated amplification identification of urinary substances associated with inhibition and removal of inhibitory activity J Clin Microbiol 36 3122 3126 20 Masi A T and B I Eisenstein 1981 Disseminated Gonococcal Infections DGI and Gonococcal Arthritis GCA II Clinical Manifestations Diagnosis Complications Treatment and Prevention Semi
153. sichtbar ist kann das Gef angenommen werden Wenn kein Pellet sichtbar ist sollte die Probe erneut getestet werden Wenn die gleiche Probe in diesem Schritt in einem anschlie enden Lauf kein Magnetpartikel Pellet enth lt kann dies ein Hinweis auf ein probenspezifisches Problem sein In dieser Situation wird die erneute Entnahme der Probe empfohlen D Amplifikation Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das SB100 Anwendungsblatt 1 Geben Sie mit der Wiederholungspipette 75 uL des rekonstituierten Amplifikationsreagenzes in jedes Reaktionsr hrchen Alle Reaktionsmischungen im St nder sollten nun eine rote F rbung aufweisen 2 Geben Sie mit der Wiederholungspipette 200 uL lreagenz in jedes Reaktionsr hrchen hinzu 3 Decken Sie die Reaktionsgef e mit Abdeckfolie ab und mischen Sie sie mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e 4 Den St nder bei 62 C 1 C in einem Wasserbad f r die Dauer von 10 5 Minuten inkubieren 5 Den St nder in ein Wasserbad mit 42 C 1 C transferieren und f r die Dauer von 5 2 Minuten inkubieren 6 Entfernen Sie wahrend der Stander im Wasserbad ist vorsichtig die Abdeckfolie und geben Sie mit der Wiederholungspipette 25 uL des rekonstituierten Enzymreagenzes zu jedem Reaktionsr hrchen hinzu Alle Reaktionsmischungen sollten jetzt orangefarben sein 7 Bedecken Sie die R hrchensofort mit einer frischen Abdeckfolie nehmen Sie den St nder aus dem Wasserb
154. sitive _ Negative Probe N TIGRIS TIGRIS TIGRIS TIGRIS Ubereinstimmung Ubereinstimmung n n n n 95 V I 95 V I Abstrich 129 79 0 0 50 100 95 4 100 100 92 9 100 Urin 130 80 0 0 50 100 95 5 100 100 92 9 100 bezeichnet positiv bezeichnet negativ V I Vertrauensintervall TIGRIS TIGRIS DTS System Prazisionsstudie Die Prazision d h Reproduzierbarkeit des TIGRIS DTS Systems wurde an zwei externen Pr fzentren und bei Gen Probe beurteilt Die Pr zision des APTIMA COMBO 2 Assays wurde ber drei TIGRIS DTS Systeme zwei Pr fzentren zwei Kitchargen des APTIMA COMBO 2 Assays und vier Bediener beurteilt Tabelle 23 stellt die RLU Prazisionsdaten nach Mittelwert Standardabweichung Variationskoeffizient VK und prozentualer bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen f r die Berechnung der Variabilit t zwischen Pr fzentren zwischen Bedienern zwischen Chargen zwischen L ufen sowie innerhalb des Laufs dar Am externen Testzentrum f hrten zwei Bediener jeweils drei g ltige Arbeitslisten d h Durchl ufe pro Kitcharge des APTIMA COMBO 2 Assays auf einem TIGRIS DTS System aus was insgesamt jeweils 6 vollst ndige Arbeitslisten ergab Bei Gen Probe f hrten zwei Bediener jeweils drei Arbeitslisten pro Kitcharge des APTIMA COMBO 2 Assays auf zwei TIGRIS DTS Systemen aus d h sie f hrten jeweils insgesamt 12 Arbeitslisten durch Es wurden somit insgesamt 36 Arbeitslisten durchgef hrt Jede Arbeitsliste besta
155. sse produzieren Au erdem k nnen eine unsachgem e Probenentnahme toxisches Probenentnahmematerial und die Wachstumshemmung durch Bestandteile der K rpersekrete ebenfalls zu falsch negativen Testergebnissen f hren 7 18 H ufig verwendete Nicht Kultur Verfahren zum GC Nachweis umfassen direkte DNA Sondentests und Nukleins ure Amplifikationstests nucleic acid amplification tests NAATS NAATs der ersten Generation f r CT und GC waren mit technologischen Problemen verbunden die sich einschr nkend auf ihre Leistung auswirkten Zu diesen Problemen geh ren eine umst ndliche Probenbearbeitung und eine Hemmung der Proben die falsch negative Testergebnisse produzieren kann 6 10 13 19 25 31 32 33 Der APTIMA COMBO 2 Assay ist ein NAAT der zweiten Generation der die Technologien Target Capture transkriptionsvermittelte Amplifikation Transcription Mediated Amplification TMA und Dual Kinetic Assay DKA zur Rationalisierung der Probenbearbeitung zur Target rRNA Amplifikation und zum Nachweis von Amplikon verwendet Neuere Studien zum Vergleich der Leistung und Hemmung der Proben von verschiedenen Amplifikationssystemen haben die Vorteile der Technologien Target Capture TMA und DKA nachgewiesen 8 12 Der APTIMA COMBO 2 Assay weist CT und oder GC rRNA qualitativ in vom Arzt entnommenen endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben von den Patienten selbst durchgef hrten vaginalen Abstrichen in Papanicola
156. ssung im PANTHER System 1 N 3 4 amp 5 Abb 3 Rekonstitutionsverfahren mit dem TIGRIS DTS System oder PANTHER System 2 Vorbereitung von Target Capture Arbeitsreagenz Working Target Capture Reagent wTCR a Paaren Sie die entsprechenden Flaschen TCR und TCR B b Pr fen Sie die Reagenzchargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien im Kit miteinander gepaart wurden c ffnen Sie die Flasche mit TCR und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che d ffnen Sie die Flasche mit TCR B und gie en Sie den gesamten Inhalt in die Flasche mit TCR Sie k nnen erwarten dass eine geringe Menge Fl ssigkeit in der TCR B Flasche verbleibt e Verschlie en Sie die TCR Flasche und schwenken Sie die L sung behutsam um den Inhalt zu mischen Vermeiden Sie w hrend dieses Schritts Schaumbildung f Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein g Werfen Sie die TCR B Flasche und den Deckel weg 3 Vorbereitung von Selektionsreagenz a Pr fen Sie die Chargennummer auf der Reagenzflasche um sicherzustellen dass sie mit der Chargennummer auf dem Hauptchargen Barcodeblatt bereinstimmt b Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein Hinweis Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Laden in das System durch vorsichtiges Umdrehen gr ndlich durch Beim Umd
157. strichproben durchgef hrt werden 1 Beschriften Sie die Tupfertransportgef e mit den Zahlen die den zu testenden Bereichen entsprechen 2 Nehmen Sie den Abstrichtupfer blauer Schaft mit gr nem Aufdruck aus der Verpackung feuchten Sie den Tupfer im Tupfertransportmedium an und nehmen Sie im ausgewiesenen Bereich mit einer Kreisbewegung einen Abstrich auf 3 Setzen Sie den Tupfer sofort in das Transportgef ein 4 Den Tupferschaft an der Einkerbung vorsichtig brechen Dabei darauf achten dass der Inhalt nicht verspritzt wird 5 Verschlie en Sie das Tupfertransportgef wieder fest 6 Wiederholen Sie Schritt 2 bis 5 f r alle Abstrichbereiche Wenn die Ergebnisse CT bzw GC positiv oder unbestimmt sind lesen Sie unter Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse nach Weitere f r das PANTHER System spezifische Informationen zur Kontaminations berwachung erteilt der Technische Kundendienst von Gen Probe APTIMA COMBO 2 Assay 38 502183DE Rev C Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse A Testauswertung Die Testergebnisse werden automatisch von der APTIMA Assay Software mit dem APTIMA COMBO 2 Protokoll ausgewertet und als einzelne CT und GC Assayergebnisse pr sentiert Ein Test kann gem Feststellung anhand des Kinetiktyps und der Gesamt RLU im Nachweisschritt negativ unbestimmt positiv oder ung ltig sein sieh
158. t ausreichend gemischt wird 3 Wenn die Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC positiv oder unbestimmt f r GC ist oder wenn die Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT positiv oder unbestimmt f r CT ist siehe die weiteren Informationen unter Verfahrenshinweise Assaykontamination APTIMA COMBO 2 Assay 23 502183DE Rev C TIGRIS DTS System LGAs Vis system TIGRIS DTS System TIGRIS Die Reagenzien fur den APTIMA COMBO 2 Assay fur CT und GC auf dem ie TIGRIS DTS System sind unten aufgef hrt Die Symbole zur Identifikation der Reagenzien sind neben dem Reagenznamen angegeben Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien APTIMA COMBO 2 Assay Kit 250 Tests 2 Schachteln und 1 Kontrollenkit Kat Nr 301130 und 301130B APTIMA COMBO 2 gek hlte Schachtel Kasten 1 von 2 nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge A APTIMA COMBO 2 Amplifikationsreagenz 1 Fl schchen Nukleins uren getrocknet in gepufferter L sung mit lt 5 F llstoff E APTIMA COMBO 2 Enzymreagenz 1 Fl schchen Reverse Transkriptase und RNA Polymerase getrocknet in HEPES gepufferter L sung mit lt 10 F llreagenz P APTIMA COMBO 2 Sondenreagenz 1 Flaschchen Nicht infekti se chemilumineszierende DNA Sonden getrocknet in sukzinatgepufferter L sung mit lt 5 Detergens TCR B APTIMA COMBO 2 Target Capture Reagenz B 1x 0 61 mL Nicht infekti se Nukleins uren in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens
159. t l nger mit dem Boden der Gef e in Kontakt lassen 20 Nach Abschluss der Aspiration werfen Sie die Spitzen in ihre Original Zehn Spitzen Kassette aus Wiederholen Sie die Aspirationsschritte f r die restlichen TTUs wobei Sie eine gesonderte Spitze f r jede Probe verwenden 21 Setzen Sie die Dosiervorrichtung ber jedes TTU und geben Sie unter Verwendung der Dosierstationspumpe 1 0 mL der APTIMA Waschl sung in jedes TTU Reaktionsr hrchen ab 22 Decken Sie die Gef e mit Abdeckfolie ab und nehmen Sie den St nder aus dem magnetischen Sockel des TCS Mischen Sie den St nder einmal mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e Einzelheiten siehe unter Verfahrenshinweise Mischen mit dem Vortex Mischer 23 Setzen Sie den St nder 5 bis 10 Minuten auf den magnetischen Sockel des TCS 24 Aspirieren Sie die gesamte Fl ssigkeit wie in Schritt 19 und 20 beschrieben 25 Entfernen Sie den St nder nach der letzten Aspiration aus dem magnetischen Sockel des TCS und unterziehen Sie die Gef e einer Sichtpr fung um sicherzustellen dass die gesamte Fl ssigkeit aspiriert wurde und dass alle Gef e Magnetpartikel Pellets aufweisen Wenn Fl ssigkeit sichtbar ist setzen Sie den St nder noch einmal 2 Minuten auf den magnetischen Sockel des TCS und wiederholen die Aspiration f r diese TTU mit den gleichen Spitzen die zuvor f r jede Probe verwendet wurden Hinweis Wenn nach Abschluss der Aspiration ein Magnetpartikel Pellet
160. thilfe des TIGRIS DTS Systems des PANTHER Systems oder der halbautomatischen Gerateder DTS Systems wie angegeben dient Der Assay kann fur Tests mit den folgenden Probentypen von symptomatischen Personen verwendet werden vom Arzt entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale Abstrichproben sowie weibliche und m nnliche Urinproben Der Assay kann f r Tests mit den folgenden Probentypen von asymptomatischen Personen verwendet werden vom Arzt entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale Abstrichproben von der Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche sowie weibliche und m nnliche Urinproben Dieser Assay ist auch zum Test von gyn kologischen Proben von symptomatischen und asymptomatischen Patientinnen bestimmt Diese in Fl schchen mit PreservCyt L sung gesammelten endozervikalen Proben k nnen sowohl vor als auch nach der Papanicolaou Bearbeitung getestet werden Der Test von Proben nach der Papanicolaou Bearbeitung ist ausschlie lich auf Proben beschr nkt die mit dem ThinPrep 2000 System bearbeitet wurden Von der Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche sind eine Diagnoseoption f r Frauen wenn anderweitig keine gyn kologische Untersuchung indiziert ist Das Vaginaltupfer Probenentnahmekit ist nicht f r den Gebrauch zu Hause bestimmt Zusammenfassung und Testerkl rung Chlamydia trachomatis CT und Neisseria gonorrhoeae GC Infektionen sind weltweit zwei der haufigsten sexuell
161. ubiert werden L Die Reagenzien nicht einfrieren Probenentnahme und lagerung Der APTIMA COMBO 2 Assay ist auf den Nachweis von CT und GC in den folgenden Proben ausgelegt endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche vaginale Abstriche Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und weibliche und m nnliche Urinproben Die Leistung bei Proben die nicht mit einem der nachstehend aufgef hrten Probenentnahmekits entnommen wurden wurde nicht beurteilt e APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und Frauen APTIMA Probenentnahmekit f r Vaginalabstriche e APTIMA Probentransferkit zur Verwendung mit in PreservCyt L sung entnommenen gyn kologischen Proben Spezifisch f r DTS Systeme e PACE Probenentnahmekit f r m nnliche urethrale oder konjunktivale Proben in Verbindung mit dem APTIMA Adapterkit e PACE Probenentnahmekit f r endozervikale Proben in Verbindung mit dem APTIMA Adapterkit A Anweisungen zur Probenentnahme Die Anleitung zur Probengewinnung ist in der Packungsbeilage des entsprechenden Probenentnahmekits enthalten APTIMA COMBO 2 Assay 8 502183DE Rev C Allgemeine Informationen B Probentransport und lagerung vor dem Test 1 Abstrichproben a Nach der Sammlung ist die Abstrichprobe bis zum Test im Abstrichproben Transport
162. weibliche Urinproben im Vergleich zu einem Algorithmus zur Bestimmung des Patienteninfektionsstatus f r jedes Geschlecht In jedem geschlechtsspezifischen Algorithmus wurde die Kennzeichnung eines Probanden als infiziert nicht infiziert oder nicht eindeutig auf der Grundlage der kombinierten Ergebnisse f r die Endozervixproben und m nnlichen urethralen Abstrichproben und Urinproben im Referenz NAAT getroffen F r den Status CT infiziert kennzeichneten zwei beliebige positive Referenz NAAT Ergebnisse einer Kombination APTIMA COMBO 2 Assay 47 502183DE Rev C Klinische Leistung des Assays auf den DTS Systemen einer Abstrichprobe und Urin den Probanden als infiziert Wenn alle Referenztest Ergebnisse negativ waren wurde der Proband als nicht infiziert ausgewiesen Wenn es nur ein positives Ergebnis gab wurde der Patient mit dem Status nicht eindeutig belegt F r den Status GC infiziert kennzeichneten eine positive Kultur oder positive Abstrich und Urinergebnisse im amplifizierten Referenztest den Probanden als infiziert Eine negative Kultur und ein einziges positives Ergebnis im amplifizierten Referenztest ergab den Status nicht eindeutig Wenn alle Referenztest Ergebnisse negativ waren wurde der Proband als nicht infiziert ausgewiesen In den Tabellen 7a 7b 7c 8 7a 11b 11c und 12 ist die H ufigkeit der Testergebnisse f r die beiden Referenz NAATs und den APTIMA COMBO 2 Assay f r die Probanden in den klinischen Studien
163. yt L sung eine Komponente des ThinPrep 2000 Systems als alternatives Medium f r gyn kologische Proben zum Nachweis von CT und GC zu beurteilen 1647 symptomatische und asymptomatische Probandinnen die zu einer Klinik f r Gyn kologie Geburtshilfe Familienplanung ffentliche Gesundheitspflege Frauenklinik und Klinik f r sexuell bertragbare Krankheiten STD kamen wurden in der klinischen Studie beurteilt Von den 1647 verf gbaren Probandinnen waren 1288 asymptomatisch und 359 waren symptomatisch Die Probandinnen wurden an Pr fzentren mit einer CT Pr valenz im Bereich von 3 2 bis 14 0 und GC Pr valenz im Bereich von 0 bis 5 0 aufgenommen Von allen geeigneten Probandinnen wurden zwei Proben genommen ein Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und ein Endozervixabstrich Die Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden gem der Bedienungsanleitung f r den ThinPrep 2000 Prozessor ThinPrep 2000 Processor Operator s Manual und der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits bearbeitet Nach der Bearbeitung des Papanicolaou Abstrichs in PreservCyt L sung mit dem ThinPrep 2000 Prozessor wurde die Probe in das APTIMA Probentransferkit zum Test mit dem APTIMA COMBO 2 Assay transferiert Die Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung und endozervikalen Abstrichproben wurden mit dem APTIMA COMBO 2 Assay getestet Die Sensitivit t und Spezifit t wurden f
164. zusammengefasst Die APTIMA COMBO 2 Assay Ergebnisse der vom Arzt entnommenen endozervikalen und m nnlichen urethralen Abstriche und der m nnlichen und weiblichen Urinproben wurden mit dem Algorithmus des Patienteninfektionsstatus verglichen um die Sensitivit t Spezifit t und pr diktiven Werte zu bestimmen Insgesamt 15 661 CT und 14 144 GC Assayergebnisse wurden in der Datenanalyse verwendet Die Sensitivit t und Spezifit t f r CT nach Geschlecht Probentyp und Symptomstatus sind in Tabelle 5a gezeigt Tabelle 6a zeigt die Sensitivit t Spezifit t und pradiktiven Werte des APTIMA COMBO 2 Assays f r CT im Vergleich zum Patienteninfektionsstatus f r jedes Pr fzentrum und insgesamt auf Die Sensitivit t und Spezifit t f r den Nachweis von GC nach Geschlecht Probentyp und Symptomstatus gehen aus Tabelle 9a hervor Tabelle 10a zeigt die Sensitivit t Spezifit t und pr diktiven Werte des APTIMA COMBO 2 Assays f r GC im Vergleich zum Patienteninfektionsstatus f r jedes Pr fzentrum und insgesamt auf Die Proben die positiv im APTIMA COMBO 2 Assay waren und einen negativen Patienteninfektionsstatus hatten d h offenbar falsch Positive wurden in alternativen GEN PROBE Amplifikationsassays f r CT und GC getestet Diese Tests amplifizieren andere CT und GC Sequenzen als die die im APTIMA COMBO 2 Assay amplifiziert werden Die Tests erfolgten jeweils an einer Probe d h nicht unbedingt an gepaarten Abstrich und Urinproben und die Erg

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