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Bedienungsanleitung – BioSpectrometer kinetic

1. 2022 101 101 11 4 Photometrische Eigenschaften 00 0000 102 11 5 1 11 1 0 102 11 6 Weitere technische Parameter 666 103 11 7 Anwendungsparameter 2 0 104 T2 AUSWEteVeErba len 11 9 105 12 1 EXxtinktionsSwerte een dhe ates Soe dee eae 00 105 12 1 1 Blank nee ee ee sn nr 105 12 1 2 Background Korrektur eeeeeee es 105 12 1 3 Kuvettenkorrektun 3 ee 106 12 2 Auswertung mit Faktor oder Standard 2200 6206 107 12 3 Auswertung mit Standardkurve gerade eeeeeeee es 108 12 4 Verd nnung zu erden Shee baer eee Sed 109 12 5 Spezielle Auswerteverfahren f r Nukleins uren und Protein UV 109 12 5 1 Korrektur 260 und Korrektur Azg0 200 606 109 12 5 2 Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 0 6666 110 12 5 3 Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen 110 12 5 4 Berechnung des Faktors f r Protein in General Method Parameter 112 12 6 Spezielle Auswe
2. 2 3 8 11111 9 2 Allgemeine 516 68 2 6 11 2 1 Bestimmungsgem er Gebrauch eee eo 11 2 2 Anforderung an den Anwender 2222 ee eo 11 2 3 Gef hrdungen bei bestimmungsgem em Gebrauch 0 0 eee eee 11 2 3 1 Personerischaden zu u 00000 u we eo 11 2 3 2 Gef tesch den u N en AE Fe ee ee agin ee 13 2 4 Hinweise zur Produkthaftung 2 eee eo 15 2 5 Sicherheitshinweise am Ger t 22eeeeee ei 15 3 Prod ktbeschreib ng u ce in dsl 3 0 17 3 1 Gesamtillustr ti n ar Worn weal Patents cooled shen ep ase wees ee ee ee LE 17 3 2 Lieferumfang 0 aeg ee le ee no i corse hated cabs oe ct 17 3 3 Produkteigenschaften 1 Weep ae ee ee 18 3 3 1 Methoden warum i ann 3131 0 18 33 2 ers ee ersehen 18 3 3 3 Ergebnisausgabes i ss i ce ks is sole oo TO eee a 18 3 3 4 Selbsttest des Gerdts 0 cc eee een en e rennen 18 4 22m ei ira dein 19 4 1 Installation vorbereiten e eo ee 19
3. Dil korr C x Cbil korr Mit Verd nnungsfaktor umgerechnetes Ergebnis Vp Volumen der Probe in der Messl sung Vpy Volumen des Diluents in der Messl sung 12 5 Spezielle Auswerteverfahren f r Nukleins uren und Protein UV Dieser Abschnitt bezieht sich auf die Auswertung von Nukleins uren bzw Proteinen in den Methodengruppen Nucleic acids und Proteins direct UV sowie der entsprechenden Biomolek lkomponenten in der Methodengruppe Dye labels 12 5 1 Korrektur 260 und Korrektur A280 Anwendung Korrektur des Einflusses der Farbstoffextinktion auf die Nukleins ure bzw Proteinextinktion bei 260 und 280 nm bei den Methoden der Gruppe Dye labels Die Anwendung des Auswerteverfahrens kann in den Parametern Correct A260 bzw Correct A280 aktiviert werden Ayyy corr Axor CF x Ayyy Axxx korr rechnerisch korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge 260 nm bzw 280 nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge 260 nm bzw 280 nm CF Korrekturfaktor f r die Wellenl nge 260 nm bzw 280 nm die beiden Korrekturfaktoren f r 260 nm und f r 280 nm sind f r einen Farbstoff spezifisch und werden in General Method Parameter Dyes im Bereich Functions programmiert Ayyy gemessene Extinktion bei der Wellenl nge des Farbstoffs i Die in den Ergebnisanzeigen dargestellten Extinktionswerte sind die direkt gemessenen nicht korrigierten Extinktionswerte 110 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer
4. MAC Infol Informationen zu Netzwerkeinstellungen e Save nderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren Cancell In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren 76 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE E Mail Settings mailserver example com Port 25 Sender e mail address biospec example com SMTP authentication YE Password ed Recipient e mail address email example comy jv SMTP server Test ABC Save Cancel E mail address eat J New Delete ok Region Europe ly City Berlin Current time 2015 06 04 10 16 00 Manual time setting Date 2015 06 04 YYYY MM DD Time 10 15 10 HH MM SS ONetwork time Time server pool nip org L_ tS save canca 7 1 5 Device Calibration E Mail Settings Fragen Sie ihren Netzwerk Administrator welche Einstellungen erforderlich sind SMTP Server E Mail Server eingeben Port eintragen Absender Ger tenamen eingeben SMTP Authentifizierung verwenden Falls eine Authentifizierung erforderlich ist muss ein Benutzername und ein Passwort vergeben werden e Empf nger E Mail Adresse Liste mit E Mail Adressen E Mail Adressen bearbeiten Wahlen Sie in der Dropdownliste Edit und best tigen Sie mit enter Es ffnet sich ein Fenster in dem die E Mail Adressen bearbeitet werden k nnen Softkeys E
5. Voraussetzung Auf dem Ger t ist die Software Version 3 4 4 0 oder h her installiert In den Druckereinstellungen ist der Thermodrucker DPU S445 ausgew hlt siehe Device Settings auf S 74 Schlie en Sie den Thermodrucker DPU S445 an den USB Anschluss f r Drucker an 1 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem USB Anschluss f r Drucker 4 siehe Gesamtillustration auf S 17 2 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem Drucker 3 Schlie en Sie den Drucker ber das mitgelieferte Steckernetzteil und Netzkabel Zubeh r des Druckers an das Stromnetz an und schalten Sie ihn ein Hinweise zum Drucker finden Sie in der Bedienungsanleitung des Druckers Installation Eppendorf BioSpectrometer kinetic 21 Deutsch DE 4 6 PC oder USB Stick fur Datenexport anschlie en Sie k nnen einen USB Stick FAT 32 formatiert an den USB Anschluss 4 anschlie en siehe Gesamtillustration auf S 17 Alternativ k nnen Sie das Ger t f r den Datenexport ber ein USB Kabel direkt mit einem PC verbinden Voraussetzung PC mit Windows Version XP SP2 oder h here Version e USB Kabel mit je einem Stecker Typ A und Typ B gt Verbinden Sie das Ger t mit dem PC ber das USB Kabel am USB Anschluss 8 siehe Gesamtillustration auf S 17 Sie ben tigen keine spezielle PC Software f r die Daten bertragung Ubertragene Datenpakete werden vom PC wie ein USB Stick als Wechseldatentr ger erkannt Um die Daten sichtbar zu machen m
6. cote ee al ee be wale 5 81 8 3 1 Spektrometereinheit berpr fen 0 2 0 es 81 8 3 2 Temperiereinheit berpr fen 22 CC ee ee een ees 85 8 33 SelbSttest des Geratse oso u nn sw eee aha eget ve ten ee 86 8 4 Sicherungenrersetzen ne at er Baa tee RE Ea E ee ee ee eats nates 86 8 5 Dekontamination vor Versand 2 ee ee 87 9 Problembehebung 2 1 1 0 701 89 9 1 22 89 9 2 Fehlermeldungen bee 91 9 3 Ergebniskennzeichnungen 2 05 so os be Rene en eine ah 95 10 Transport Lagerung und Entsorgung 2 cece eee oes 99 101 Transport she see ae 3 3 3 3 3 1 1311 99 10 2 99 103 5 100 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 11 Techmische Daten siesena so osc taped wot erence 5 a apace BR te ste bios 101 11 1 Stromversorgung 3 11111 0 101 1 2
7. free eset 2 Save Cancel Bei allen 3 Varianten f hrt der Softkey reset zoom zur Ausgangsdarstellung des Spektrums zur ck More calculations Drucken Sie den Softkey More calc process results more calc dsDNA 2012 06 01 17 04 47 Entries 13 Total volume of sample 100 pL ID Molecular mass REY basepairs 196 kDa 6 0 Calculations s UugimL dsDNA 6 0 pg mL 0 120 Ay 0 6 pg total amount in sample 30 7 pmol mL 3 1 pmol total amount in sample Jl I Save II Cancel process results more calc ssDNA Cy 3 2010 11 29 12 08 12 Entries 03 Total volume of sample 50 yL ID Molecular mass 8300 bases 0 kDa 9 0 Calculations UngimL ssDNA 9 0 pg mL 0 244 Aso 0 5 pg total amount in sample Dye 1 0 214 pMolyl Cy3 0 214 pMolyL 10 7 pmol total amount in sample Il Save II It J Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 61 Deutsch DE Methodengruppe Nucleic acids Nach Eingabe der Molmasse alternativ in Basen Basenpaaren oder in kDa Konzentrationsergebnis in die molare Konzentration umrechnen Nach Eingabe des Probenvolumens Gesamtmenge in der Probe berechnen Methodengruppe Dye labels Nukleins ure e Nach Eingabe der Molmasse alternativ in Basenpaaren oder in kDa Konzentrationsergebnis in die molare Konzentration umrechnen Nach Eingabe des Probenvolumens Gesamtmenge in der Probe ber
8. 10 ms bei 90 V Ca 20 ms bei 230 V Schutzklasse Sicherungen T 2 5 A 250 V 5 mm x 20 mm 2 St ck 11 2 _Umogebungsbedingungen Betrieb Umgebungstemperatur 15 C bis 35 C Rel Luftfeuchte 25 bis 70 Luftdruck 86 kPa bis 106 kPa Luftdruck Verwendung bis zu einer H he von 2000 m ber Meeresh he Vor direktem Sonnenlicht sch tzen 11 3 _ Gewicht Ma e Gewicht 5 3 kg Abmessungen Breite 295 mm Tiefe 400 mm H he 150 mm Ben tigter Raum Breite 500 mm mit Thermodrucker 750 mm Tiefe 500 mm 102 Technische Daten Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 11 4 Photometrische Eigenschaften Messprinzip Absorptions Einstrahlspektralphotometer mit Referenzstrahl Lichtquelle Xenon Blitzlampe Spektrale Zerlegung Holographisches Aberations korrigiertes Konkavgitter Strahlungsempfanger CMOS Photodiodenarray Wellenlangen 200 nm bis 830 nm Wellenlangenwahl Methodenabhangig frei wahlbar Spektrale Bandbreite lt 4nm Kleinste Schrittweite 1 Systematische Messabweichung 1 nm der Wellenlange Zufallige Messabweichung der lt 0 5 nm Wellenlange Photometrischer Messbereich 0A bis 3 0 A bei 260 nm Ablesegenauigkeit AA 0 001 Zufallige Messabweichung des Photometers lt 0 002 bei A 0 lt 0 005 0 5 bei A 1 Systematische Messabweichung 1 beiA 1 des Photometers Fal
9. Clear ai ok J cancel Softkeys e Clear dil Werte f r die Probenverd nnung l schen OK Probenverd nnung best tigen und zur Probenmessung zur ckkehren e Cancel Eingabe abbrechen und zur Probenmessung zur ckkehren Die Verd nnung wird f r alle nachfolgenden Probenergebnisse angewendet bis sie durch erneute Eingabe ge ndert wird Proben ID eingeben Die ID wird f r das nachfolgende Probenergebnis angewendet Bei Eingabe einer ID wird die zuletzt eingegebene ID vorgegeben um so schnell fortlaufend strukturierte IDs eingeben zu k nnen Eine doppelte Vergabe derselben ID innerhalb einer Messreihe ist nicht m glich 1 Dr cken Sie den Softkey Edit ID 2 Geben Sie die Proben ID maximal 12 stellig ein Enter a sample ID for the next sample Alternativen zur Texteinga be Tastenblock Bei mehrmaligem Drucken der Taste sample 0 EEE direkt hintereinander werden die Eingabem glichkeiten dieser Taste durchlaufen Tastatur mit Softkey Keyboard einblenden Zeichen mit den Cursor Tasten ausw hlen und mit enter best tigen Keyboard I ok Cancel Softkeys Keyboard Tastatur einblenden e abc Wechsel zwischen Gro und Kleinbuchstaben bei Eingabe ber den Tastenblock OK ID Eingabe best tigen und zur Probenmessung zur ckkehren e Cancel Eingabe abbrechen und zur Probenmessung zur ckkehren Methoden Eppendorf BioSpectrometer
10. Select all De sel all OK Cancel Export starten Die Daten werden als Excel Datei xls oder als PDF bertragen Excel Dateien sind mit Excel Versionen ab Excel 97 lesbar F r jedes der ausgew hlten Datenpakete wird ein Tabellenblatt in Excel angelegt Der Dateiname setzt sich aus dem Methodenamen der Uhrzeit und dem Datum der Messreihe zusammen Bo un e Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und Select an export method g i OExport to external storage medium best tigen Sie mit enter OExport to PC I CS e Export to external storage medium Daten auf email example com P einen USB Stick speichern Wenn kein USB Stick angeschlossen ist ist diese Variante nicht anw hlbar e Export to PC Daten auf einem PC speichern n USE e Export via email Daten an eine E Mail Adresse schicken Ly I J 1 cance Export auf USB Stick 1 Schlie en Sie einen USB Stick FAT 32 formatiert an den USB Anschluss 4 an siehe Gesamtillustration aufS 17 2 Starten Sie mit Export den Export auf ein externes Speichermedium Export auf PC Voraussetzung f r das Betriebsystem des PC Windows XP SP2 oder h here Version 1 Verbinden Sie das Ger t mit dem PC ber das USB Kabel am USB Anschluss 8 siehe Gesamtillustration aufS 17 2 Stellen Sie bei wiederholtem Export sicher dass zuvor exportierte Daten auf die Festplatte des PC gespeichert wurden da diese sonst durch den erneuten Export
11. berschrieben w rden Starten Sie mit Export den Export auf den PC 4 Das exportierte Datenpaket wird auf Ihrem PC als Wechseldatentrager mit dem Namen eppendorf angezeigt Offnen Sie die Datei in diesem Laufwerk und speichern Sie sie auf der Festplatte w 66 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Export an eine E Mail Adresse 1 Wahlen Sie aus der Liste eine E Mail Adresse oder wahlen Sie Edit um eine neue E Mail Adresse einzurichten 2 Starten Sie mit Export den Versand an eine EMail Adresse EE e W hlen Sie in der Dropdownliste Edit und E mail address best tigen Sie mit enter Es ffnet sich ein Fenster in dem die E Mail Adressen bearbeitet werden k nnen Edit E Mail Adresse bearbeiten e New Neue E Mail Adresse anlegen Delete E Mail Adresse loschen Edit New Delete OK Ausdruck starten Die Daten k nnen Uber Drucker im Netzwerk oder ber einen angeschlossenen USB Drucker ausgedruckt werden i Wenn das Ger t an ein Netzwerk angeschlossen ist werden automatisch alle kompatiblen Drucker im Netzwerk erkannt und angezeigt Besteht keine Verbindung zum Netzwerk steht nur ein angeschlossener USB Drucker zur Auswahl ete cae 2 Starten Sie mit Print den Ausdruck der Daten HP Color LaserJet 2605dn IP address Seiko DPU S445 192 168 20 10 Seiko DPU 414 Print Cancel Methoden Eppendorf BioSpectrom
12. e Extinktion bzw A min f r den Reagent Blank 58 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 4 5 process results Nach der Probenmessung folgen im Methodenablauf zwei optionale Schritte process results und print amp export Im Schritt process results k nnen Sie bei einigen Methoden die Ergebnisse nachbearbeiten Beispiel Ver nderung des Spektrenausschnitts eines Scans Wie in der Ergebnisanzeige k nnen Sie mit den Cursor Tasten und zwischen den Probenergebnissen der Messreihe navigieren und gezielt Ergebnisse zur Nachbearbeitung ausw hlen Tab 6 3 Optionen bersicht Option Erl uterung Verf gbar in Methode Zoom Achsenbegrenzung bei Grunds tzlich alle Methoden f r die Extinktions Wellenl ngen Graphen ver ndern um die Darstellung auf vergr erte Ausschnitte des Graphen zu beschr nken der Parameter Scan angeboten wird und aktiviert wurde e Multi A Scan e Nucleic acids e Proteins direct UV e Dye labels More calculations Konzentrationsergebnisse in molare Konzentrationen sowie nach Volumeneingabe in Gesamtmengen umrechnen Nucleic acids Dye labels mit Nukleins uren als Biomolek l Peak detection Peaks in Extinktions Wellenl ngen Spektren erkennen e Scan Linear regression Zeitfenster f r die Auswertung einer Kinetik durch lineare Regression ver ndern Grunds tzlich alle Kinetik Methoden bei denen das Messverfa
13. 600 900 12060 vom and Dilution Edit ID Data Finish lt Back Next gt 5 3 2 6 Optional Ergebnisse nachbearbeiten Bei einigen Methoden k nnen Sie im dsDNA measure samples A print amp 0x s DNA 2010 07 16 163254 Methodenschritt process results Ergebnisse ai x nachbearbeiten Zum Beispiel k nnen Sie in 0 450 Spektren die Zoom Funktion SpectraZoom nutzen 0 360 ji 25 2 Wahlen Sie mit den Cursor Tasten O und 0 270 gezielt Ergebnisse der Messreihe fur die 0 180 if Nachbearbeitung aus 0 090 ioe 230 260 290 320 Alam Zoom More Calc Data Finish lt Back Next gt 30 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 5 3 2 7 Drucken und exportieren dsDNA Hmeasure samples process results print amp export few series dsDNA 2015 06 04 10 16 30 Data packets Samples Results Format data 3 6 OPDF Graph data XLS only OXLS amp PDF Method GParameters Select data packets Key sl Bebe el Print Export Samples Finish lt Back Next gt Stellen Sie Datenpakete fur alle oder fur ausgewahlte Proben zusammen Drucken Sie die Daten aus speichern Sie sie auf einem USB Stick bertragen Sie sie ber ein USB Kabel an einen PC oder exportieren Sie sie per E Mail 5 3 3 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 31 Deutsch DE Wichtig
14. BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 95 Warnungen und Fehlermeldungen zu Ergebnissen erscheinen in der Hilfebox unten rechts im Display Bei Warnungen ist die Kopfzeile der Hilfebox gelb unterlegt bei Fehlermeldungen rot Warnungen Entscheiden Sie unter Berucksichtigung der angezeigten Warnung ob das Ergebnis fur Sie nutzbar ist Fehlermeldungen Es wird kein Ergebnis dargestellt die Begrundung wird in der Fehlermeldung angezeigt Symptom Meldung Standardkurve ist nicht monoton Bitte anderen Curve Mogliche Ursache e Bei Auswertung einer Standardkurve mit den Curve Fit Verfahren spline interpolation quadratical Abhilfe 9 Anderes Curve Fit Verfahren w hlen Fit w hlen regression oder cubical regression wurde kein verwertbares Ergebnis erhalten Einige Bei mindestens einer gt Wenn die Extinktionswerte der Extinktionswerte bei Nebenwellenl ngen sind zu hoch und werden nicht angezeigt Nebenwellenl nge war die Extinktion oberhalb des Messbereichs Nebenwellenl ngen werden nicht f r die Berechnung des Konzentrationsergebnisses herangezogen sondern f r andere Zwecke benutzt Z B Methode dsDNA Extinktion bei 280 nm f r die Berechnung von Ratio 260 280 Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs Nebenwellenl ngen relevant sind Probe verd nnen bzw durch Zentrifugation Tr bung beseitigen und Messung wiederholen Da
15. Faktor wird entweder beim Auswerteverfahren Factor direkt als Parameter eingegeben oder beim Auswerteverfahren Standard Auswertung mit einer Standardkonzentration berechnet F berechneter Faktor Cs Konzentration des Standards als Parameter eingegeben As gemessene Extinktion des Standards Wurde f r den Standard Mehrfachmessung 2 oder 3 Replikate programmiert wird aus den gemessenen Extinktionen der Replikate der Mittelwert gebildet und als As eingesetzt 108 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 12 3 Auswertung mit Standardkurve gerade Wird mit mehr als einem Standard ausgewertet konnen mit dem Curve fit im Methodenschritt measure standards new folgende Auswerteverfahren fur die Standardkurve gerade ausgewahlt werden Auswerteverfahren Beschreibung Erforderliche Mindestzahl an Standardpunkten linear interpolation Lineare Mindestens 2 Standards Punkt zu Punkt Verbindung im Extinktions Konzentrations Graph en der Standardauswertung linear regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 3 Standards ersten Grades quadratical regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 4 Standards zweiten Grades cubical regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 5 Standards dritten Grades spline interpolation Interpolation durch nat rliche Mindestens 3 Standards kubische Splines Zus tzlich kann f r Regressionsverfahren gew
16. Fehler Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 89 Deutsch DE Fehler Messergebnisse sind unprazise Mogliche Ursache Haltbarkeit des Reagenzes uberschritten Reagenz nicht richtig vorbereitet Pipettierung nicht richtig Ablauf der Inkubation vor der Messung nicht richtig Kuvette verschmutzt K vette nicht vollst ndig und blasenfrei mit Messl sung bef llt Tr bungen in der Messl sung Spektralphotometer driftet K vettenschacht verschmutzt Abhilfe gt gt Stellen Sie sicher dass das Reagenz noch haltbar ist und richtig vorbereitet wird Benutzen Sie f r die Vorbereitung sofern ben tigt sauberes demineralisiertes Wasser von ausreichender Qualit t Stellen Sie sicher dass die Pipette kalibriert ist und richtig pipettiert Sofern der Methodenablauf vor der Messung eine Inkubation erfordert stellen Sie sicher dass die Temperatur und Zeit f r die Inkubation korrekt eingehalten werden Reinigen und sp len Sie die K vette Achten Sie bei einem K vettenwechsel darauf dass das optische Fenster der K vette sauber bleibt und nicht mit den Fingern ber hrt wird Wenn das K vettenfenster durch Fingerabdr cke verschmutzt ist reinigen Sie es durch Abwischen mit einem fusselfreien Labortuch das mit Ethanol oder Isopropanol getr nkt ist Stellen Sie sicher dass das erforderliche Mindestvolumen der K vette f r eine Messung erreicht wir
17. Ger teanzeigen mit Fehlermeldungen k nnen Sie mit dem Softkey OK verlassen Systemfehler erfordern eine Beurteilung durch den Technischen Service Diese Fehler werden in Englisch dargestellt System error Bitte wenden Sie sich in diesen Fallen an den Technischen Service Andere Fehlermeldungen bei denen Sie selbst Ma nahmen ergreifen k nnen sind in der folgenden Tabelle erl utert Symptom Meldung Selbsttest fehlgeschlagen M gliche Ursache K vettenschachtabdeckung war beim Selbsttest offen e Der K vettenschacht war beim Selbsttest nicht leer Abhilfe Wiederholen Sie den Selbsttest mit leerem Kuvettenschacht und geschlossener Kuvettenschachtabdeckung Gerat ist defekt Wenden Sie sich an den Eppendorf Service Die Datei konnte nicht exportiert werden Beim Export von Daten e USB Stick falsch formatiert oder defekt e USB Stick zu fr h w hrend des Exports aus dem Ger t entfernt gt USB Stick neu formatieren oder ersetzen gt USB Stick erneut anschlie en und Export wiederholen Der Drucker konnte nicht initialisiert werden Drucker nicht angeschlossen oder ausgeschaltet Drucker falsch konfiguriert gt Drucker anschlie en und anschalten gt Drucker neu konfigurieren Die Druckereinstellungen zur richtigen Konfiguration finden Sie in der Installationsbeschreibung siehe Drucker am USB Anschluss anschlie en auf S 20 Blank Mes
18. M gliche Ursache Bei der Auswertung musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematisch nicht zul ssig Beispiele Berechnung eines Faktors bei Einpunktkalibrierung Berechnung einer Ratio 260 280 bei Nukleins uremessungen Abhilfe gt berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionsergebnis oder Parameter Formula b ist Null Bei der Auswertung einer Methode des Typs Division Methodengruppe Dual wavelength musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematisch nicht zul ssig gt berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung gt Geben Sie als Wert f r den Parameter Formula b nicht Null ein 10 10 1 Transport Transport Lagerung und Entsorgung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Transport Lagerung und Entsorgung gt Verwenden Sie die Originalverpackung fur den Transport Deutsch DE Lufttemperatur Relative Luftfeuchte Luftdruck Allgemeiner Transport 25 C 60 C 10 95 30 kPa 106 kPa Luftfracht 40 C 55 C 10 95 30 kPa 106 kPa 10 2 Lagerung Lufttemperatur Relative Luftfeuchte Luftdruck in Transportverpackung 25 C 55 C 25 75 70 kPa 106 kPa ohne 5 C 45 C 25 75 70 kPa 106 kPa
19. Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und Methoden 56 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Methodengruppe Ergebnisanzeige Erlauterung Hauptgruppe Basic Factor standard Analog zu Protein direct UV siehe oben Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge Calibration curve Analog zu Proteins with reagent siehe oben Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge e Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Simple kinetics 61 measure samples a Vor der Messung Simple kinetics 2010 11 25 16 44 19 e Methodenschritt check 01 ID parameters Anzeige der Temperierung Wenn die in den 2 990 Parametern eingestellte 1 993 amin Temperatur erreicht ist und die Anzeige von Tempering auf Ready wechselt konnen Sie in die Messung wechseln 0 000 7 ag min sec 00 06 00 14 0022 0090 0050 M Ergebnisanzeige and j Konzentrationsergebnis mit Dilution Edit ID Data Finish lt Back Next gt Extinktion bzw A min bei der Messwellenlange e Nur bei Messverfahren linear regression Graph mit Extinktions Zeit Anzeige und eingezeichneter Regressionsgerade Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen
20. Vp gesamt Gesamtvolumen der Probe im Probengef Geben Sie diesen Wert in More calculations ein Einheit uL Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic 111 Deutsch DE 12 5 3 2 Berechnung der molaren Konzentration Anwendung Berechnung der molaren Konzentration der Nukleinsaure aus Massenkonzentration und relativer Molmasse Die Molmasse wird entweder direkt eingegeben oder vom Gerat aus der eingegebenen Zahl der Basen bzw Basenpaare pro Nukleinsauremolekul errechnet Cx10 Mol MM Cryo berechnete molare Konzentration der Nukleins ure Einheit pmol mL C aus der Messung berechnete Massenkonzentration der Nukleins ure Einheit ug mL oder ng uL MM relative Molmasse Einheit kDa Falls in More calculations statt der relativen Molmasse die Zahl der Basen bzw Basenpaaren pro Nukleins uremolek l eingegeben wurde wird MM aus der Zahl der Basen bzw Basenpaaren berechnet F r dsDNA MM bpx 2x330x10 F r ssDNA RNA Oligo MM bx330x10 MM berechnete relative Molmasse Einheit kDa bp eingegebene Zahl der Basenpaare pro Molek l b eingegebene Zahl der Basen pro Molek l e Fur dsDNA wird bei der Berechnung der molaren Konzentration eine doppelstrangige Nukleinsaure angenommen Fur die Methoden ssDNA RNA und Oligo wird eine einzelstr ngige Nukleins ure angenommen e F r Methoden die in der Hauptgruppe Routine Methodengruppe Nucleic acids ber lt New Method gt neu programmiert
21. au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an ACHTUNG Korrosion durch aggressive Reinigungs und Desinfektionsmittel 9 Verwenden Sie weder tzende Reinigungsmittel noch aggressive L sungs oder schleifende Poliermittel gt Inkubieren Sie das Zubeh r nicht l ngere Zeit in aggressiven Reinigungs oder Desinfektionsmitteln 1 Wischen Sie die Oberfl chen mit einem Tuch ab das Sie mit einem milden Reinigungsmittel befeuchtet haben K vettenschacht reinigen 2 Reinigen Sie den K vettenschacht nur mit einem mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten fusselfreien Wattest bchen Vermeiden Sie dass Fl ssigkeit in den K vettenschacht gelangt Sofern zur Beseitigung der Verunreinigung mit Wasser befeuchtet werden musste reinigen Sie abschlie end mit einem mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten Wattest bchen um das Trocknen des K vettenschachts zu beschleunigen 80 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 8 1 1 Kuvettenschachtabdeckung reinigen Wenn Sie nicht nur die direkt zug ngliche Oberfl che der K vettenschachtabdeckung reinigen m chten k nnen Sie die Abdeckung ausbauen gt Weichen Sie die K vettenschachtabdeckung nicht in Reinigungsmittel ein gt Reinigen Sie die K vettenschaftabdeckung wie beschrieben 1 Heben Sie die K vettenschachtabdeckung mit einer Hand an 2 Fassen Sie mit der anderen Hand die Abdeckung auf H he des Haltestifts und
22. eines Graphen Auf der x Achse des Graphen navigieren um z B in einem Scan die Wellenl ngen abh ngigen Extinktionswerte anzuzeigen Tasten und in einem Extinktions Wellenl ngen Spektrum Bildausschnitt ver ndern Verfahren SpectraZoom siehe Tab 6 3 auf 5 60 delete Aktuelle Auswahl in die nachsthohere Ebene verlassen Eingabe l schen Innerhalb einer Zeichenfolge wird das Zeichen links vom Cursor gel scht Ausgew hlte Methode oder Funktion aufrufen Auswahlliste ffnen Eingabe oder Auswahl best tigen standard Standardmessung starten Leerwertmessung starten Probenmessung starten Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 25 Deutsch DE 5 1 1 Text eingeben Texte k nnen Sie bei der Vergabe von Methodennamen und Ergebniseinheiten eingeben Einschr nkung Fur Methodennamen sind nur Ziffern und Buchstaben sowie der Unterstrich _ erlaubt En aaa es Mit den Cursor Tasten und navigieren Sie im Eingabefeld und k nnen einzelne Positionen im Method name dsDNA Namen ver ndern Target directory 0716075 l OFavorites MyMethods Keyboard Tastatur einblenden e abc Wechsel zwischen Gro und Kleinbuchstaben bei Eingabe uber den Tastenblock Save Eingegebenen Text speichern W hlen Sie dasisklusil
23. erste Standard die niedrigste Konzentration erh lt und die weiteren Standardkonzentrationen eine aufsteigende Folge bilden Mindestens zwei eingegebene Standardkonzentrat ionen sind gleich Bitte Standardkonzentrat ionen korrigieren Siehe Fehlertext gt Die Standardkonzentrationen so eingeben dass der erste Standard die niedrigste Konzentration erh lt und die weiteren Standardkonzentrationen eine aufsteigende Folge bilden Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 93 Symptom Meldung Die Messwerte sind nicht streng monoton Mogliche Ursache Fehler bei der Messung einer Standardreihe Die gemessenen Extinktionswerte der Standardreihe sind nicht kontinuierlich steigend oder fallend Abhilfe 9 Standardmessungen wiederholen oder einzelnes fehlerhaft gemessenes Standardergebnis loschen Die ID kann nicht gesetzt werden Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten Fehler bei der Eingabe der Proben ID Verschiedene Ursachen sind m glich 9 Siehe Information in der Hilfebox Die Verd nnung kann nicht gesetzt werden Fehler bei der Eingabe der Verd nnung Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten 9 Siehe Information in der Hilfebox Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionsergebnis oder Parameter Formul
24. f r die Auswertung von Zwei Wellenl ngen Messverfahren sowie f r Kinetiken mit anspruchsvolleren Auswerteoptionen Favorites In Favorites k nnen Sie mit lt New Folder gt eigene Ordner einrichten und Ihre h ufig benutzten Methoden in diese Ordner kopieren um schnell auf diese Methoden zugreifen zu k nnen In allen Ordnern k nnen Sie mit lt New Method gt neue Methoden erstellen In Favorites k nnen Sie eigene Ordner erstellen z B f r personenorientierte Zuordnung umbenennen und l schen 36 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Tab 6 2 Softkeys in der Methodenauswahl Cut und Paste Methoden ausschneiden und einf gen Copy und Paste Methoden kopieren und einfugen Delete Methoden l schen Renamel Methoden umbenennen Kopierte oder ausgeschnittene Methoden k nnen Sie entweder in einen anderen Ordner unter Favorites oder unter neuem Namen in den urspr nglichen Ordner einf gen Navigieren Sie mit den Cursor Tasten in die Spalte Methods des gew nschten Ordners und dr cken Sie paste zum Einf gen der Methode 6 2 Methodenbeschreibung Photometrie In diesem Kapitel werden die vorprogrammierten Methoden und Methoden Templates beschrieben 6 2 1 Methodengruppe Absorbance Single A Extinktionsmessung bei einer Wellenl nge Keine nachgeschaltete Auswertung Single A continuous e Wiederholte Extinktionsmessung bei einer Wellenl nge P
25. mit und Zusatzdaten Softkey Data In Abh ngigkeit vom Messverfahren e Extinktions Zeit Wertepaare f r den ersten Messpunkt und den letzten Messpunkt Verfahren endpoint nur ein Messpunkt G teparameter f r lineare Regression entf llt f r Kinetiken mit einer Steigung unterhalb von 0 050 E min Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 57 Methodengruppe Ergebnisanzeige Hauptgruppe Advanced Erlauterung Dual wavelength Division heck E measure samples We rint amp export Hhew series Division 2010 07 02 14 27 47 02 Dil 10 90 pL ID 20 08 pg mL 0 803 a 1 0 679 A2 0 845 Ass N A v Dilution Editio Finish lt Back Next gt Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis Wird aus Acalc Mit Faktor oder Standardauswertung berechnet Acalc Wird mit der in den Parametern definierten Formel aus den bei den beiden Wellenlangen gemessenen Extinktionen berechnet e Extinktionswerte die bei den beiden Messwellenlangen gemessen wurden Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden Extinktionswert f r die Background Wellenl nge Advanced kinetics Analog zu Simple kinetics siehe oben Zus tzlich zu den Daten wie bei Methodengruppe Simple kinetics Zusatzdaten Softkey Data Sofern der entsprechende Parameter aktiviert wurde
26. neu messen Das berechnete Ergebnis ist negativ Messl sung falsch angesetzt Faktor falsch eingegeben falsches Vorzeichen gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen neu messen Mindestens eines der Ergebnisse ist negativ Bei Methoden mit mehreren Ergebnissen z B Dye labels Messl sung falsch angesetzt Faktor falsch eingegeben falsches Vorzeichen gt Unter Ber cksichtigung der moglichen Ursachen neu messen Ergebnis hat mehr als 6 Vorkommastellen Sehr hohe Probenkonzentration Konzentrationseinheit passt nicht zu dem erwarteten Bereich der Probenkonzentrationen gt Probe verd nnen und neu messen gt Konzentrationseinheit Parameter Unit ndern und neu messen Das Ergebnis liegt um mehr als 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrat ionen Bei Methoden mit Auswertung ber Standardkurven nichtlinearen Auswerteverfahren Das Probenergebnis liegt um mehr als 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrationen gt Probe unter Bedingungen neu messen unter denen das Ergebnis im Bereich der Standardkonzentrationen liegt Probe verd nnen Standardkonzentrationen ver ndern und neu messen 98 Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Symptom Meldung Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionserge bnis ist Null Fehler bei der Berechnung Division durch Null
27. vetten wie z B Hellma TrayCell oder Mikroliterk vetten hnlicher Bauart leiten die Strahlung der Lichtquelle innerhalb der K vette um sodass die Strahlung der Lichtquelle bei nicht geschlossenem Deckel nach oben austreten kann gt Vergewissern Sie sich vor dem Start einer Messung dass der Deckel auf der Mikroliterk vette aufliegt WARNUNG Gesundheitssch digung durch giftige radioaktive oder aggressive Chemikalien sowie durch infekti se Fl ssigkeiten und pathogene Keime gt Beachten Sie die nationalen Bestimmungen zum Umgang mit diesen Substanzen die biologische Sicherheitsstufe Ihres Labors sowie die Sicherheitsdatenbl tter und Gebrauchshinweise der Hersteller 9 Tragen Sie Ihre pers nliche Schutzausr stung Entnehmen Sie umfassende Vorschriften zum Umgang mit Keimen oder biologischem Material der Risikogruppe Il oder h her dem Laboratory Biosafety Manual Quelle World Health Organization Laboratory Biosafety Manual in der jeweils aktuell g ltigen Fassung WARNUNG Gesundheitsgefahr durch kontaminiertes Ger t und Zubeh r gt Dekontaminieren Sie Ger t und Zubeh r vor dem Lagern oder Versenden VORSICHT Sicherheitsm ngel durch falsche Zubeh r und Ersatzteile Zubeh r und Ersatzteile die nicht von Eppendorf empfohlen sind beeintr chtigen die Sicherheit Funktion und Pr zision des Ger ts F r Sch den die durch nicht empfohlene Zubeh r und Ersatzteile oder unsachgem en Gebrauch veru
28. ziehen Sie die Abdeckung nach rechts bis der Haltestift ganz herausgezogen ist i e Ziehen Sie die Abdeckung im 90 Grad Winkel nach rechts 3 Reinigen Sie die Abdeckung mit einem Tuch oder einem fusselfreien Wattest bchen das Sie mit einem milden Reinigungsmittel befeuchtet haben 4 Schieben Sie den Haltestift bis zum Anschlag wieder in das Geh use hinein Der Haltestift ist im Geh use ganz verschwunden Verschlie en Sie bei Nichtgebrauch des Photometers den K vettenschacht mit der blauen K vettenschachtabdeckung um ihn vor Staub und anderen Verschmutzungen zu sch tzen Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 8 2 Desinfektion Dekontamination AN GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit A 9 Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen gt Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen gt F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an 1 Reinigen Sie das Ger t vor der Desinfektion mit einem milden Reinigungsmittel siehe Reinigung auf S 79 2 W hlen Sie eine Desinfektionsmethode die den f r Ihren Anwendungsbereich geltenden gesetzlichen Bestimmungen und Richtlinien entspricht 3 Verwenden Sie z B Alkohol Ethanol Isopropanol oder alkoh
29. zu editieren w hlen Sie mit O und den zu editierenden Dyename New dye Parameter Wavelength 550 nm u gt Best tigen Sie mit enter 5 Ext coeff 100000 L mol cm Factor 10 pMol pL k Corr A260 0 0 Corr A280 oj Name me op be Keyboard abe OK Cancel Softkeys OK Eingabe speichern und in die Auswahl der Parametergruppe zur ckkehren Cancel In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Bei der Programmierung einer Methode der Methodengruppen Dye labels oder Proteins direct UV k nnen Sie auf die Eintr ge in General Method Parameter zugreifen u nae zugeh rige Parametergruppe in das Ave mm u Methodenprogramm zu importieren ber die BR meen Auswahl edit beim Parameter Nucleic acid Nucleic acid ssDNA Y Sor k nnen Sie auch direkt in die Funktion General Decimal places a Method Parameter gelangen und dort die Dye 1 Newdyel Parameter ansehen sowie editieren Correct A260 1 Correct A280 1 3 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic 73 Deutsch DE Tab 7 2 Parameter in General Method Parameter Parameter Proteins Erlauterung Diese Parameter werden bei der Auswahl eines Proteins bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Dye labels sowie Proteins direct UV in die Methodenparameter geladen e Protein name Factor A01 Ext coeff Molecular mass Neben dem Namen und der W
30. 0 34 53 Spectrometer unit Temperature unit 11 WT J Save Cancel Network Settings IP Get IP settings via DHCP IP address 192 168 20 61 Subnet mask 255 255 255 0 Default gateway 192 168 20 1 DNS Get DNS settings via DHCP Primary DNS server 192 168 20 1 Secondary DNS server 192 168 20 1 Test MAC Info Save Cancel Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic 75 Deutsch DE General Device Settings e Sprache ausw hlen Deutsch Englisch Franzosisch Spanisch Italienisch Geratename Haufigkeit der automatischen Selbstuberprufung nach dem Einschalten des Ger ts einstellen Informationen zum letzen Selbsttest werden angezeigt Softkeys Save Anderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren Cancell In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Network Settings Fragen Sie ihren Netzwerk Administrator welche Einstellungen erforderlich sind Auswahl ob IP Einstellungen automatisch per DHCP erfolgen sollen Die IP Einstellungen k nnen auch manuell eingegeben werden IP Adresse Subnetzmaske Standardgateway Auswahl ob DNS Einstellungen automatisch per DHCP erfolgen sollen Nur verf gbar wenn IP Einstellungen automatisch per DHCP bezogen werden Folgende DNS Einstellungen k nnen manuell eingegben werden Prim rer DNS Server Sekund rer DNS Server Softkeys
31. 00 nm Die Extinktionen der Filter werden gegen das Leerwertfilter AD gemessen Zus tzlich zu den Informationen ber die Richtigkeit erhalten Sie auch Informationen ber die Pr zision Aus den jeweils 15 Messungen pro Wellenl nge wird neben dem Mittelwert auch der Variationskoeffizient VK Wert berechnet Zur Messung setzen Sie zun chst das Leerwertfilter f r die Leerwertmessung und anschlie end die Pr ffilter wie K vetten in den K vettenschacht ein Die f r die Pr ffilter gemessenen Extinktionswerte werden gegen den zul ssigen Wertebereich verglichen Die Grenzwerte f r den zul ssigen Bereich sind f r die einzelnen Filter in einer Tabelle im Deckel des Filterkastens abgedruckt Wenn Sie die Werte dokumentieren wollen schlie en Sie den Eppendorf Thermodrucker an 81 Instandhaltung 82 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE BioSpectrometer reference filter set eppendorf Function Device calibration Spectrometer unit Order No Best Nr 6135 928 001 Set No Satz Nr 006 Limits measured against Blank A 0 at approx 20 C SN 6135 914 006 916 006 917 006 937 006 i 922 006 Sample Sample Sample Sample 260 nm 280 nm 800 nm A2 0 197 0 221 1 078 1 101 1 857 1 888 0 193 0 217 1 024 1 047 1 717 1 749 0 173 0 196 0 923 0 947 1 478 1 509 0 161 0 184 0 903 0 926 1 429 1 461 0 172 0 195 0 930 0 959 1 487 1 526 0 172 0 195 0 941 0 968 1 496 1 530 0 172 0 195 0 943 0 969 1 503 1 538 0 169 0
32. 192 0 935 0 984 1 517 1 570 pC 0 958 1 124 Random error of wavelength Random error of photometer Zuf llige Messabweichung der Wellenl nge Zuf llige Messabweichung des Photometers Limiting values CV Grenzwerte VK lt 3 0 lt 2 0 lt 15 3 0 2 0 3 0 Wavelength and photometric accuracy Wellenl ngen und photometrische Richtigkeit traceable to r ckf hrbar auf NIST SRM 2034 SN 04 A und SN 667 Wave a K ers All characteriz reference UV Vis spectrophotometer SN EL 99023107 The instrument is requalified regularly by the manufacturer and is confirmed and documented to perform within manufacturer s specifications The current instrument qualification is valid through April 2015 For the current instrument qualification the following NIST traceable certified secondary spectrometric calibration standards were used Nellenlangen unc me he Bestimmung der Filter Alle Messungen werden auf einem Cary 100 Bio Referenz UV Vis Spektrophotometer Seriennummer EL99023107 durchgef hrt Dieses Instrument wird regelm ig vom Hersteller requalifiziert und die spezifikationsgem e Funktion dokumentiert Die aktuelle Qualifizierung ist bis April 2015 g ltig und verwendet folgende NIST r ckf hrbare und zertifizierte spektrometrische Sekund rstandards Starna RM O660HLKCSITX Hellma 666 F1 666 F2 666 F3 666 F4 SRM 2031a SN 667 valid through g ltig bis 12 2014 The valid certificates are part of the re
33. 4 2 Standort wahlen sissors n A eaa aaa ane aa E Ea a EA Ra aA Ea a EEE ESEE 19 4 3 Gerat an das Netz anschlie en 2 0600 19 4 4 Ger t mit einem Netzwerk 2 0000 0 20 4 5 Drucker am USB Anschluss anschlie en 0 cece ene 20 4 5 1 Thermodrucker DPU S445 222eooooo ts 20 4 6 PC oder USB Stick fur Datenexport anschlie en 2 2 2 eee 21 5a Bedienung eos ices ee 0 0 5 E 0 00 23 5 1 bersicht Bedienelemente 000 6 2 23 5 1 1 TEXtCING ODEN Tara ra 0 3 ST 25 5 2 KUVEeLteE ISEBEN sn ES DR SN en le 26 5 3 bersicht ber den Messablauf u a sans an 27 5 3 1 Messung vorbereiten 27 53 2 6 5 27 5 3 3 Wichtige Hinweise f r die 2000 6200 31 5 3 4 Hinweise zum Arbeiten mit K vettentemperierung 2006 32 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 Methoden 2 ann ee 0 3 17 7 1 35 6 1 Methode auswanhleni gehe 35 6 2 Methodenbeschreibung Photometrie 2 0066 36 6 2 1 Methodengruppe Absorbance 0 ee eee 36 6 2 2 Methodengruppe Routine 02 eee teen eee 37 6 2 3 Methodengruppe BaSic 0 cece eee ence r
34. A 260 1 Dye 2 active Auswahl ein aus Nur f r die Methodengruppe Dye labels M glichkeit auch einen zweiten Farbstoff parallel zu messen Anwendung Markierung eines Biomolek ls mit zwei Farbstoffen Dye 2 Auswahl Liste von Farbstoffen die in der Funktion General Method Parameters Dyes hinterlegt sind Nur f r die Methodengruppe Dye labels bei Messung von 2 Farbstoffen Auswahl des zweiten Farbstoffs vgl Parameter Dye 1 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 43 Parameter Eingabe Erlauterung Correct A260 2 Auswahl Nur f r die Methodengruppe Dye labels bei Messung von 2 ein aus Farbstoffen Analog zu Parameter Correct A 260 1 Correct A 280 2 Auswahl Nur fur die Methodengruppe Dye labels bei Messung von 2 ein aus Farbstoffen Analog zu Parameter Correct A 280 1 Show scan Auswahl Anzeige eines Scans Extinktions Wellenlangen Graphen ein aus zusatzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung Start A Werteeingabe Startwellenlange fur die Aufnahme des Scans Wellenlange in nm Bereich 200 bis 830 nm Stop A Werteeingabe Stoppwellenlange fur die Aufnahme des Scans Wellenlange in nm Bereich 200 bis 830 nm Wert muss h her sein als der Wert fur Start A A260 A280 Auswahl Nur fur Nukleinsauren ein aus Anzeige der Ratio A260 A280 zusatzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung A260 A230 Auswahl Nur f r Nukleins uren ein a
35. A and Dilution Editio Finish lt Back Next gt Weitere Daten oben rechts 1 Zeile Probennummer wird fortlaufend gez hlt und f r jede neue Messreihe wieder auf 1 gesetzt Probenverd nnung sofern eingegeben oben rechts 2 Zeile Probenidentifikation ID sofern eingegeben e oben links Dateiname unter dem die Daten im Methodenschritt print and export als Excel Datei exportiert werden siehe S 64 Softkeys e Dilution Probenverd nnung eingeben e Edit ID Proben ID eingeben e Data Zus tzliche Ergebnisdaten anzeigen nicht bei allen Methoden e Finish Messreihe beenden und zur Methodenauswahl zur ckkehren Die angezeigten Extinktionswerte entsprechen immer den direkt gemessenen Werten Verdunnungs oder Kuvettenfaktor sowie Backgroundextinktionen werden erst fur die anschlie ende Ergebnisberechnung einbezogen siehe Extinktionswerte auf S 105 50 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Verd nnung eingeben Der Softkey Dilution ist aktiviert nachdem der Leerwert Taste blank gemessen worden ist 1 Dr cken Sie den Softkey Dilution Enter dilution for next sample 2 Geben Sie die Volumina f r die Probe maximal 3 stellig und f r den Verd nnungspuffer maximal 4 stellig ein Die nachfolgenden Probenergebnisse werden vom Ger t mit dem errechneten Verd nnungsfaktor multipliziert 20 sample BQ yt diluent I
36. BioSpectrometer kinetic Methodengruppe Proteins direct UV Ergebnisanzeige Albumin A 280 check Parameters Je measure samples Albumin A 280 2010 12 16 18 05 23 Abs A 30 ID 0 800 1 46 mg mL 0 600 0 966 As 0 400 0 200 inte 0 000 ens A nm ng x 4 and gt key Dilution Edit 1D Data Finish lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls in den Parametern aktiviert Scan Navigieren zwischen den Messpunkten im Graphen die fur die Ergebnisberechnung herangezogen werden konnen mit und Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden e Extinktionswert f r 260 nm Extinktionswert fur die Background Wellenlange Proteins with reagent Bradford Bradford 2010 11 25 16 28 23 Abs A measure samples aula export 1 200 0 900 pe 0 600 9 300 0 000 0 300 600 900 Conc 213 Abs 0 393 1206556 OL ew series 08 ID 2 1 3 pg mL 0 393 Ass ar Dilution Edit 1D a Finish Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange e Bei Auswertung mit Standardreihe Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Methoden Eppendorf BioSpectr
37. C x V pioa M berechnete Gesamtmenge Masse des Farbstoffs im Probengef Einheit pmol C aus der Messung berechnete Konzentration des Farbsroffs Einheit pmol uL Vp gesamt Gesamtvolumen der Probe im Probengef wird vom Anwender in More calculations eingegeben Einheit uL 113 114 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 12 7 Dual wavelength F r Methoden der Gruppe Dual Wavelength k nnen Extinktionen die bei zwei Wellenl ngen gemessen wurden miteinander verrechnet werden bevor die berechnete Extinktion in die weitere Auswertung mit Faktor oder mit Standard eingeht F r die Ermittlung der berechneten Extinktion kann in den Parametern eine Auswertung ber Division oder ber Subtraktion definiert werden axA cale T xc d bxA A ax A bx A xc d cale T A1 A2 gemessene Extinktionen a b c d Faktoren die in den Parametern eingegeben werden Es k nnen auch negative Zahlen eingegeben werden 12 8 Kinetik Aus den zur Auswahl stehenden Messverfahren wird entweder ein Extinktionswert A oder eine auf eine Minute normierte Extinktionsdifferenz AA min ermittelt Dieser ermittelte Extinktionswert geht in die Konzentrationsberechnung mittels Faktor oder nur f r Advanced kinetics mit Einpunktstandard ein 12 8 1 Messverfahren Endpoint Am Ende der Wartezeit Inkubationszeit Parameter Delay wird ein Extinktionswert gemessen und f r die Konzentrationsberech
38. Formeltyp f r die Verrechnung der Extinktionen bei den beiden Messwellenl ngen vor Auswertung mit Faktor oder Standard Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 41 Deutsch DE Parameter Eingabe Erlauterung Formula a Werteeingabe Nur fur die Methodengruppe Dual wavelength Wert fiir a in der Wert f r a in den Formeln a A1 b A2 c d und a A1 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Formula b Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert f r b in der Wert f r b in den Formeln a A 1 b A2 c d und a A1 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Formula c Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert f r c in der Wert f r c in den Formeln a A1 b A2 c d und a A1 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Formula d Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength Wert f r d in der Wert f r d in den Formeln a A1 b A2 c d und a A1 Auswerteformel b A2 c d Grenze max 5 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Calculation Auswahl Auswerteverfahren f r die Berechnung der Factor Standard Probenkonzentration aus der gemessenen Extinktion Factor Werteeingabe Faktor f r die Umrechnung von Extinktionswerten in die Faktor Konzentration Grenze max 6 stellig Be
39. Ger t auf einen USB Stick einen Drucker oder direkt auf einen PC bertragen Wenn das Ger t mit einem Netzwerk verbunden ist k nnen die Ergebnisse auf einem Netzwerkdrucker ausgedruckt oder per E Mail verschickt werden Es ist nicht m glich die Ergebnisse auf einem Netzlaufwerk zu speichern 3 3 4 Selbsttest des Ger ts Direkt nach dem Einschalten berpr ft das Ger t selbstt tig die Funktion der Spektrometereinheit und der Temperiereinheit Um das Ger t umfassender zu pr fen rufen Sie die Funktion Device calibration auf siehe Selbsttest des Ger ts auf 5 86 Installation Eppendorf BioSpectrometer kinetic 19 Deutsch DE 4 Installation 4 1 Installation vorbereiten Heben Sie den Transportkarton und das Verpackungsmaterial f r einen sp teren sicheren Transport oder f r eine Lagerung auf gt Kontrollieren Sie anhand der Angaben zum Lieferumfang die Vollst ndigkeit der Lieferung siehe Lieferumfang auf S 17 gt Pr fen Sie alle Teile auf eventuelle Transportbesch digungen 4 2 Standort w hlen W hlen Sie den Standort f r das BioSpectrometer kinetic nach folgenden Kriterien 2 Steckdosen mit Schutzleiter f r das BioSpectrometer kinetic und f r den Drucker Fester Labortisch mit waagerechter Arbeitsplatte Platzbedarf des Ger tes 50 cm mit Drucker 75 cm Breite 50 cm Tiefe Temperatur 15 C bis 35 C Vermeiden Sie Temperaturschwankungen z B durch ge ffnete Fenster Vermeid
40. Regressionsauswertung 1 200 W hlen Sie den Messpunkt mit und aus Ae 3 023 Bestatigen Sie mit enter 2 015 e Softkey Last pt Definieren Sie letzten gao Messpunkt fur die Regressionsauswertung se Wahlen Sie den Messpunkt mit und aus Best tigen Sie mit enter 0000 00 06 00 14 00 22 00 30 0038 Timm suring par Parallel mit der nderung der Zeitpunkte wird m _ Eee 1 0 0 das Ergebnis jeweils neu berechnet Hierfur wird First pt tast pt 5 J cance auch der Reagenzleerwert in dem neu definierten Zeitfenster neu berechnet 64 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 4 7 print amp export Im letzten optionalen Methodenschritt konnen Sie Datenpakete fur alle oder fur ausgewahlte Proben einer Messreihe zusammenstellen e f r den Ausdruck auf dem Drucker e f r den Export auf einen USB Stick e f r den Export ber USB Kabel direkt zu einem PC e f r den Export per E Mail fressure sampies Process En a ooon frew er Datenpakete auswahlen dsONA 2015 06 04 10 16 30 Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und para paoro best tigen Sie mit enter Samples mi Format xLS Format auswahlen Graph teh XLS Als Excel Tabelle exportieren oder Graph data XLS only OXLS amp PDF d k ausdrucken Method PDF Als PDF exportieren oder ausdrucken Softkeys e Print Ausdruck starten Print Exp
41. Sean 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 0 800 ffi er A Raster EE 20 nm 0 600 1 Min A Abs 0 400 0 400 0 200 en a and key 230 260 290 320 350 lm ae A and V keys Peak table Save Cancel process results peak detect Scan 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 2 Raster 20 nm Min A Abs 0 050 0 400 x 4 and key 0 000 A 230 260 290 320 350 Bu Ac Peak table Save Cancel A Raster 100 nm Mind A Abs 0 050 Der Peak wird nicht erkannt da das A Raster zu gro ist Die Extinktionen am linken Rand des Rasters sind gr er als die Extinktion des Peaks A Raster 20 nm Mind A Abs 0 200 Der Peak wird nicht erkannt da der vorgegebene Wert f r Mind A Abs zu gro ist Die Differenz der Extinktion des Peaks und der niedrigsten Extinktion im Raster ist kleiner als 0 2 A A Raster 20 nm Mind A Abs 0 050 Der Peak wird erkannt Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 63 Deutsch DE Linear regression Bei Kinetikverfahren die ber das Messverfahren Lineare Regression ausgewertet werden k nnen Sie im Methodenschritt process results nachtr glich die Anfangs und End Zeitpunkte f r die Regressionsauswertung definieren Simpie uneses races 0 ncarroores 0 nee Simple kinetics 2010 11 25 16 44 19 e Softkey First pt Definieren Sie den ersten rn soe Messpunkt f r die
42. Service 37 0 ok 42 0 ok The calibration is Ll II Finish lt Back Next gt 86 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 8 3 3 Selbsttest des Gerats Die Haufigkeit des automatischen Selbsttests Dauer ca 1 Minute konnen Sie mit der Funktion Device settings einstellen siehe Device Settings auf S 74 Ab Werk ist als Selbsttest Intervall w chentlich eingestellt Beim Selbsttest werden die folgenden Punkte berpr ft berpr fung des Detektors Bestimmung der zuf lligen Messabweichung ber das gesamte verf gbare Spektrum berpr fung der Lichtquelle berpr fung der maximal verf gbaren Energie der Lichtquelle und der Qualit t der Lichtleitung durch das Ger t Bestimmung der zuf lligen Messabweichung eines Signals am Referenzsensor Bestimmung der Signalh he am Referenzsensor Separate Bestimmung der Lichtintensit t im UV Bereich Bestimmung der systematischen und zuf lligen Messabweichung der Wellenl nge Position eines Intensit tspeaks im UV Bereich des Spektrums Pr zision der Position eines Intensit tspeaks im UV Bereich des Spektrums Zuf llige Messabweichung des Temperatursensors Pr fung der Temperierrate W hlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Perform selftest und best tigen Sie mit enter Nach Ablauf des Selbsttest zeigt das Display die Meldung PASSED Wenn das Display die Meldung FAILED zeigt ist der Selbsttes
43. Transportverpackung 99 100 Transport Lagerung und Entsorgung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 10 3 Entsorgung Bei einer Entsorgung des Produkts sind die einschl gigen gesetzlichen Vorschriften zu beachten Hinweise zur Entsorgung von elektrischen und elektronischen Ger ten in der Europ ischen Gemeinschaft Innerhalb der Europ ischen Gemeinschaft wird die Entsorgung von elektrischen Ger ten durch nationale Vorschriften geregelt die auf der EU Richtlinie 2012 19 EU ber Elektro und Elektronik Altger te WEEE basieren Nach diesen Vorschriften d rfen alle nach dem 13 August 2005 gelieferten Ger te im Business to Business Bereich in den dieses Produkt einzuordnen ist nicht mehr im kommunalen Abfall oder Hausm ll entsorgt werden Um dies zu dokumentieren sind sie mit folgendem Symbol gekennzeichnet Da sich die Entsorgungsvorschriften innerhalb der EU von Land zu Land unterscheiden k nnen bitten wir Sie sich bei Bedarf bei Ihrem Lieferanten zu informieren Technische Daten Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 101 11 Technische Daten 11 1 Stromversorgung Spannungsversorgung 100 V bis 240 V 10 50 Hz bis 60 Hz Uberspannungskategorie Verschmutzungsgrad 2 Leistungsaufnahme Maximal auftretende Leistung laut Typenschild 50 W Ca 30 W im Bedienablauf Ca 5 W mit gedimmtem Display und ausgeschalter Temperierung Zulassige Netzunterbrechung Ca
44. a b ist Null Bei der Auswertung einer Methode des Typs Division Methodengruppe Dual wavelength musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematisch nicht zul ssig gt berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung gt Geben Sie als Wert f r den Parameter Formula b nicht Null ein Es kann nur noch eine Messung in dieser Messreihe durchgef hrt werden Die maximale Anzahl an Messungen in einer Messreihe ist erreicht Die Zahl an Messungen in einer Messreihe ist auf 99 begrenzt gt Nach maximal 99 Messungen eine neue Messreihe starten 94 Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Symptom Meldung Ungultiges Zoom Intervall M gliche Ursache Fehler im Methodenschritt process results im Zoom Modus Zul ssiger Zoom Bereich f r die Wellenl ngenskala e Wellenl ngenintervall mindestens 10 nm e Eingaben f r Wellenl ngen nur innerhalb des f r die Methode in den Parametern programmierten Bereichs Zul ssiger Zoom Bereich f r die Extinktionsskala e Extinktionsintervall mindestens 0 02 A e Ober und Untergrenze f r Extinktionsintervall 3 A bzw 3 A Abhilfe Beachten Sie beim Zoom Ablauf die genannten Grenzen Ger tekonfiguratio n wurde von auf ge ndert Ein BioSpectrometer kinetics wird nicht als Kinetikvariante sondern als BioSpect
45. aktor mit einem Standard oder mit einer Standardreihe ausgewertet werden e Methoden fur die Berechnung ber Subtraktion sowie ber Division und nachfolgender Auswertung mit Faktor sind vorprogrammiert Advanced kinetics ber die Beschreibung der Methode Simple kinetics Methodengruppe Basic hinaus haben Sie folgende M glichkeiten Messung einer Reagenzleerwert Kinetik Das Leerwertergebnis wird vor der Auswertung von allen Probenergebnissen subtrahiert Alternativ zur Auswertung ber Faktor ist auch eine Auswertung ber einen Standard m glich 40 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 3 Methodenparameter In diesem Kapitel werden die Parameter fur die Programmierung der Methoden erlautert Die Reihenfolge der Parameter in der Ger teanzeige kann im Vergleich zur Reihenfolge in der Tabelle bei einigen wenigen Methoden leicht ver ndert sein um die Parameter in der Anzeige bersichtlich darzustellen Die Tabelle stellt die Gesamtheit aller f r die verschiedenen Methoden verf gbaren Parameter dar F r die jeweilige Methode wird davon nur ein geringer Teil ben tigt und in der Anzeige dargestellt Parameter Eingabe Erl uterung Cuvette Auswahl Optische Schichtdicke der K vette Extinktionswerte werden 1015121110 510 21 vom Ger t immer automatisch auf die Schichtdicke 10 mm 0 1 mm einer Standardkuvette umgerechnet siehe Extinktionswerte auf S 105 Faktoren wie 50 fur die Berechnun
46. arametereingabe zur Temperierung zwischen 20 und 42 C ist m glich Voreinstellung 37 C Parametereingabe von Gesamt und Intervallzeit f r die Messpunkte W hrend der Messung ist ein vorzeitiger Stopp m glich Auswertung als Kinetik ber Lineare Regression Nachtr gliche nderung des Zeitfensters f r die Auswertung ist m glich e Die Messwerte werden in einem Extinktions Zeit Graphen dargestellt e Um Messwerte nachtr glich als Kinetik ber Lineare Regression auszuwerten dr cken Sie den Softkey Next gt und gehen Sie zum Methoden Schritt process results Multi A Extinktionsmessungen bei zwei bis sechs Wellenl ngen e Keine nachgeschaltete Auswertung Scan Messung eines Extinktions Wellenl ngen Spektrums ber einen definierten Wellenl ngenbereich e Anzeige von Wellenl nge und Extinktion im Spektrum durch Navigation mit einem Wellenl ngen Cursor Ver nderung des Spektrenausschnitts ber 3 verschiedene Zoom Varianten m glich Peak Erkennung m glich Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 2 2 Methodengruppe Routine Die Methoden der Gruppe Routine sind als feste Methoden vorprogrammiert Nach Anderung von Methodenparametern in den fest vorprogrammierten Methoden muss daher ein neuer Methodenname vergeben werden Nucleic acids Konzentrationsbestimmung von Nukleinsauren durch Messung bei 260 nm und Auswertung uber Faktor Verschiedene Nukleinsauremethoden wie dsDNA
47. argestellt Eine vorzeitige Speicherung der Auswertung und Wechsel zur Probenmessung ber die Taste Next gt ist dann m glich Grafische Ansicht der Standardauswertung Mit den Cursor Tasten und navigieren Sie zwischen den Standards um die Ergebnisse anzuzeigen Bei mehr als einem Replikat pro Standard k nnen Sie mit und zwischen den Replikatergebnissen wechseln Auch aus der grafischen Anzeige k nnen Sie einzelne Standards anw hlen und messen oder neu messen Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 49 Deutsch DE Softkeys e Table In die tabellarische Anzeige der Standardergebnisse wechseln e Next gt Standardauswertung speichern und zur Probenmessung wechseln 6 4 3 measure samples Mit der Taste sample messen Sie der Reihe nach Ihre Proben Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit m glich Mit den Tasten O und k nnen Sie zwischen den bisher in der Messreihe erzielten Probenergebnissen navigieren Bradterd 2010 11 25 16 28 23 e Das Konzentrationsergebnis 6 stellig mit Flie gkomma wird deutlich hervorgehoben gt e Mit Grafik Ergebnis rechts in der Anzeige 0 900 7 213 Ohne Grafik Ergebnis zentral in der Anzeige 0 393 Am e Zus tzlich zum Ergebnis wird der zugrunde er Y liegende Extinktionswert kleiner angezeigt 0 300 d z En e00 900 1206 6
48. b Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device settings Device calibration Info Into I I J Method Softkey Info Firmware Version und Seriennummer des BioSpectrometer kinetic aufrufen Tab 7 1 bersicht ber die Funktionen Untergruppe Erl uterung Results memory Gespeicherte Ergebnisse anzeigen Die Ergebnisse sind nach Methoden und nach Messreihen strukturiert abrufbar und k nnen aus dem Speicher heraus gedruckt und exportiert werden General method Parameter die bergreifend f r verschiedene Methoden genutzt werden sind im parameters Bereich Functions zentral gespeichert Diese Parameter k nnen hier editiert ge ndert oder neu erstellt werden Im Methodenschritt Check parameters sind die bergreifenden Parameter ber Auswahlboxen dann einfach ausw hlbar e Proteins Nucleic acids Dyes enthalten Parameter die f r Methoden der Gruppe Dye labels und Proteins direct UV genutzt werden e Units Einheiten f r Konzentrationsergebnisse die f r viele Methoden genutzt werden k nnen Absorbance spectra Extinktions Wellenlangen Spektren wichtiger Substanzen z B DNA library Die Spektren dienen der Information und k nnen als Vergleich zum Spektrum eines Probenergebnisses herangezogen werden Device settings Editierbare Ger teeinstellungen z B Sprache Device calibration M glichkeit zur berpr fung des Spektralphot
49. bweichen Das Ausma der Abweichung ist abh ngig vom Messvolumen vom K vettenmaterial von der Form der K vetten und von der Umgebungstemperatur Auch die Temperiergeschwindigkeit ist von diesen Faktoren abh ngig K vetten aus Kunststoff werden langsamer temperiert als K vetten aus Glas Die direkt an der Wand des K vettenhalters anliegende Fl che der K vette sollte f r eine schnelle Temperierung m glichst gro sein Daher werden Kunststoff Halbmikrok vetten sowie z B die UVette nur langsam temperiert Als Hilfestellung werden in den folgenden Tabellen typische bei Eppendorf gemessene Werte f r die Temperierung in geschlossenen K vetten bei geschlossener K vettenschachtabdeckung angegeben Die Temperatur wurde in der Messl sung gemessen die Umgebungstemperatur betrug 24 5 C Tab 5 1 Einzustellende Temperatur f r die Temperierung einer Messlosung K vettentyp Messvolumen Zieltemperatur In den Methodenparametern einzustellende Temperatur Quarzglas Makrok vette 1 500 uL 25 C 25 C 30 C 30 4 C 37 C 37 7 C Kunststoff Makrok vette 1 000 uL 25 C 25 C 30 C 30 4 C 37 C 37 7 C Quarzglas Halbmikrok vette 25 C 25 C 500 30 C 30 4 C 37 C 37 7 C Quarzglas Ultramikrok vette 25 C 25 C 60 pL 30 C 30 3 C 37 C 37 6 C Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 33 Deutsch DE Tab 5 2 Dauer f r die Temperierung einer Messl s
50. can 2010 07 09 16 08 18 samples process results print amp export fz Abs A 01 ID 0 800 0 600 0 400 0 200 info 0 000 ar 230 260 290 320 350 A 305 Abs 0 012 a gt key Edit Finish lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige e Scan Graph mit Extinktions Wellenlange Anzeige e Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und Hauptgruppe Routine Nucleic acids Abs A 0 450 0 360 0 270 0 180 ee 0 090 0 000230 260 290 320 om X 260 Abs 0 504 dsDNA check parameters measure samples process results tk dsDNA 2010 07 16 16 32 54 01 ID 25 2 00m 0 504 Ax A260 A280 1 86 Edit J Data Finish Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls in den Parametern aktiviert Ratio A260 A280 Falls in den Parametern aktiviert Scan Navigieren zwischen den Messpunkten im Graphen die fur die Ergebnisberechnung herangezogen werden konnen mit und O Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden Extinktionswert f r 280 nm Ratio A260 A230 und Extinktionswert fur 230 nm Extinktionswert f r die Background Wellenlange Methoden 54 Deutsch DE Eppendorf
51. d und dass keine Blasen in der Messl sung sind Zentrifugieren Sie tr be partikelhaltige Messl sungen und benutzen Sie den klaren berstand Wenden Sie sich an den Eppendorf Service Halten Sie die Umgebungsbedingungen ein Vermeiden Sie Temperaturschwankungen Reinigen Sie den K vettenschacht Problembehebung 90 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Fehler Messergebnisse sind unrichtig Mogliche Ursache Methode falsch programmiert Standardlosung nicht richtig vorbereitet e Extinktion des Reagenz driftet e Die K vette ist nicht richtig positioniert Abhilfe gt Stellen Sie sicher dass die Methodenparameter richtig eingegeben sind 9 Stellen Sie sicher dass der richtige Standard benutzt wird und die Messl sung f r den Standard richtig vorbereitet wird gt Bei instabiler Reagenzextinktion und Endpunkt Methoden Messen Sie bei der Messung einer langen Probenserie den Reagenzleerwert nicht nur zu Beginn sondern auch w hrend der Probenserie Bei st rkerer Drift des Reagenzleerwerts ist das Reagenz nicht geeignet f r fehlerfreie Messungen und muss durch neues Reagenz ersetzt werden gt Positionieren Sie die K vette so im Kuvettenschacht dass die optischen Fenster in Lichtwegrichtung zeigen gt Lichtweg Photometrie von hinten nach vorn 9 2 Fehlermeldungen Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 91
52. deren Parameter auf General Method Parameter zur ckgreift wurde festgestellt dass mindestens ein Parameter Farbstoff Nukleins ure Protein Einheit dort nicht mehr existiert also vermutlich gel scht wurde gt Wahlen Sie einen anderen Parameter aus der vorhandenen Liste Falls erforderlich programmieren Sie in General Method Parameter einen neuen Listeneintrag um bei der Programmierung einer Methode darauf zur ckgreifen zu k nnen Der Wert des mit markierten Parameters ist nicht in den Gen Meth Param definiert Bitte korrigieren Sie den Parameter Diese Fehlermeldung erscheint beim Editieren von Methodenparametern Parameter in General Method Parameter ist nicht definiert gt Wahlen Sie einen anderen Parameter aus der vorhandenen Liste Falls erforderlich programmieren Sie in General Method Parameter einen neuen Listeneintrag um bei der Programmierung einer Methode darauf zur ckgreifen zu k nnen Ung ltiges Zoom Intervall Beim Zoom Vorgang mit freier Eingabe der Grenzen Softkey Free Die Untergrenzen f r den Zoombereich wurden unterschritten gt Werte so eingeben dass das Intervall nicht die Berreichsgrenzen von 0 02 A und 10 nm unterschreitet Die eingegebenen Standardkonzentrat ionen sind nicht monoton steigend bzw monoton fallend Bitte Standardkonzentrat ionen korrigieren Siehe Fehlertext gt Die Standardkonzentrationen so eingeben dass der
53. dit E Mail Adresse bearbeiten New Neue E Mail Adresse anlegen e Delete E Mail Adresse l schen Date and Time Settings Region ausw hlen e Stadt ausw hlen e Anzeige der aktuellen Zeit ManuelleZeiteinstellung Datum und Zeit eingeben Netzwerkzeit Zeitserver Gew nschten Zeitserver eintragen Softkeys e Save nderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren Cancell In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Die Ger te berpr fung ist separat beschrieben siehe Ger t berpr fen auf S 87 7 1 6 Functions Main Groups Info Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device settings Device calibration Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Unter dem Men punkt Copyright finden Sie Lizenzinformationen zur Open Source Software 77 Funktionen 78 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 79 Deutsch DE 8 Instandhaltung 8 1 Reinigung A GEFAHR Stromschlag durch eintretende Flussigkeit 9 Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und
54. e Hinweise f r die Messungen Beachten Sie bei jeder Messung Bei Kunststoffk vetten Wie viele Messungen nacheinander k nnen in der K vette zuverl ssig durchgef hrt werden Messen Sie vor Proben oder Standardmessungen den Leerwert der K vette um neben dem Reagenzleerwert auch den K vettenleerwert zu kompensieren Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit auch zwischen Probenmessungen m glich Die angezeigten Extinktionswerte entsprechen immer den direkt gemessenen Werten Verd nnungs oder K vettenfaktor sowie Background Extinktionen werden erst f r die anschlie ende Ergebnisberechnung einbezogen siehe Extinktionswerte auf S 105 Die Dauer vom Start einer Messung bis zur Anzeige eines Messergebnisses betr gt typischerweise ca 2 bis 3 Sekunden Wenn bei hohen Extinktionswerten wenig Licht auf den Empf nger gelangt kann die Messzeit automatisch auf bis zu 9 Sekunden verl ngert werden um die Pr zision der Messung zu erh hen Bei Kinetikmessungen wird diese automatische Messzeitverl ngerung nicht angewendet um Konflikte mit der vorprogrammierten Intervallzeit f r die Messpunktaufnahme zu vermeiden Achten Sie darauf dass die gemessenen Extinktionswerte die Obergrenze des photometrischen Messbereichs nicht berschreiten Verwerfen Sie in diesem Fall das Messergebnis Die Obergrenze des photometrischen Messbereichs ist nicht nur von der Wellenl nge siehe Ph
55. e Verzeichnis Cancell Texteingabe abbrechen oder ein Zielverzeichnis in Favorites Keyboard abc Save Cancel Eingabe ber eingeblendete Tastatur Mit den Cursor Tasten w hlen Sie die Enter the name and storage location eingeblendeten Zeichen aus n best tigen jeweils mit der Taste enter Wie bei einer PC Tastatur Method name PCR prod konnen Sie mit der Shift bzw der Feststelltaste fur Target directory Favorites MyMethods RR die nachstfolgende bzw fur alle folgenden Eingaben OFavorites MyMethods v f zwischen Gro und Kleinschreibung wechseln Softkeys l lalalals ie 78 eo Numbers Zur Eingabe ber den Tastenblock GE e i 1 5 Current entry wechseln Joa s a 1 Ijhjijk lj e Keyboard S Ei b T ich TP 2 0 9 7 Numeric keypad e Save ingegebenen Text speichern Numbers Space pads Cancel Texteingabe abbrechen Numbers abc Save Cancel 26 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 52 K vette einsetzen In die K vettenaufnahme k nnen Sie handels bliche Rechteckk vetten aus Glas oder Kunststoff einsetzen Au enma e 12 5 mm x 12 5 mm Lichtwegh he 8 5 mm ber dem K vettenboden Gesamth he mindestens 36 mm Die K vetten m ssen bei der jeweiligen Messwellenl nge optisch transparent sein F r Mess
56. e sich an den Eppendorf Service Lassen Sie die Filter nach 2 Jahren vom Eppendorf Service neu zertifizieren 8 3 1 2 Wellenl ngenrichtigkeit berpr fen gt F r die berpr fung der Wellenl ngenrichtigkeit verfahren Sie entsprechend Hier messen Sie mit 3 Pr ffiltern bei der entsprechenden Wellenl nge Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 85 Deutsch DE 8 3 2 Temperiereinheit berpr fen Pr fung bei ca 20 C durchf hren Sicherstellen dass der K vettenschacht bei der Pr fung leer ist 1 W hlen sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Temperature unit und best tigen Sie Spectrometer unit mit enter B Temperature unit Functions Main Groups Sub Groups Functions Perform selftest 2 Stellen Sie sicher dass der Kuvettenhalter leer evice Calibration ist und starten sie den Prufablauf mit Next gt eee Die folgende Pr fung der Temperierung bei 5 ee Temperaturen dauert ca 30 Minuten W hrend 0 der Pr fung wird die gesch tzte Restdauer 30 0 angezeigt 37 0 42 0 nd pros I II Abort lt Back Next gt J en m Ein positives Ergebnis der Pr fung wird durch ok hinter dem Temperaturwert angezeigt Sollte bei mindestens einer Temperatur als Ergebnis Temperature C Spec value Status 0 0 ok ok failed angezeigt werden wenden Sie sich bitte 30 0 ok an den Eppendorf
57. echnen Farbstoff Nach Eingabe des Volumens der Probe Gesamtmenge in der Probe berechnen i e Fur dsDNA wird bei der Berechnung der molaren Konzentration eine doppelstr ngige Nukleinsaure angenommen Fur die Methoden ssDNA RNA und Oligo wird eine einzelstrangige Nukleinsaure angenommen Fur Methoden die in der Hauptgruppe Routine Methodengruppe Nucleic acids uber lt New Method gt neu programmiert wurden werden fur die Berechnung der molaren Konzentration immer doppelstrangige Nukleinsauren angenommen 62 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Peak detection Drucken Sie den Softkey Peaks Zur Peak Erkennung k nnen Sie zwei Kriterien variieren A Raster Beurteilungsraster auf der Wellenl ngenskala f r die Peak Erkennung z B 10 nm Beispiel 10 nm Der Spektrenausschnitt von 5 nm bis 5 nm in Bezug auf den zu erkennenden Peak wird beurteilt Mind A Abs Minimale Differenz zwischen dem zu erkennenden Peak und der niedrigsten Extinktion im Beurteilungsraster Gleichzeitig darf kein Extinktionswert im Raster h her sein als der Wert des Peaks z B 0 5 Beispiele Scan 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 0 800 IN A Raster 100 nm 0 60011 3 7 Verte iN Min A Abs 0 050 0 400 Sa 4 j gt ke y 0 000 nn 230 260 290 320 350 mm Move A curso A and V keys Peak table Save Cancel process results peak detect
58. ehalt verwenden oder Standardreihe und Proben neu messen Scan Einige gemessene Extinktionen sind zu hoch und werden nicht angezeigt Bei mindestens einer Wellenlange des Scans war die Extinktion oberhalb des Messbereichs Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs gt Wenn die nicht angezeigten Bereiche des Scans relevant sind Probe verdunnen bzw durch Zentrifugation Trubung beseitigen und Messung wiederholen Messung nicht Kinetikverfahren Sie haben die 9 Messergebnis mit reduzierter vollstandig Messung mit dem Softkey Stop Messzeit akzeptieren oder neu mit vorzeitig abgebrochen Wenn langerer Messzeit messen mindestens 2 Messpunkte vorliegen wird ein Ergebnis berechnet und angezeigt Die Kinetik ist e Kinetikverfahren mit Messverfahren 9 Messergebnis akzeptieren oder Probe nichtlinear lineare Regression Das neu messen Vor der Neumessung die Bestimmtheitsma ist lt 0 95 Bestimmtheitsma fur die Regressionsauswertung deutet auf eine erhebliche Abweichung der Messpunkte von der Regressionsgeraden hin Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs Zu hohe Aktivit tskonzentration des Enzyms Ursache f r die Nichtlinearit t bewerten und ber cksichtigen z B Messl sung durch Zentrifugation kl ren oder Probe verdunnen Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deut
59. eihe von 2 bis 12 Standards Verschiedene Auswerteverfahren Curve fit wie lineare Regression nichtlineare Regression sind ausw hlbar Grafische und tabellarische Anzeige der Standardergebnisse e Nutzung der letzten gespeicherten Standardauswertung ist m glich Eine Methode f r die Auswertung mit Standardkurve ist vorprogrammiert Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 39 Deutsch DE Simple kinetics Messung einer Kinetik bei einer Wellenl nge und nachfolgende Auswertung mit Faktor 3 verschiedene Messverfahren sind m glich linear regression Auswertung einer in Intervallen aufgenommenen Reihe von Messpunkten two point Berechnung von AA min aus 2 Messpunkten zu definierten Zeitpunkten endpoint Aufnahme eines Messpunkts zu einem definierten Zeitpunkt Parametereingabe zur Temperierung zwischen 20 und 42 C ist m glich Voreinstellung 37 C e Bei dem Messverfahren linear regression wird der Extinktion Zeit Verlauf graphisch dargestellt e Eine Methode f r die Auswertung mit linearer Regression ist vorprogrammiert und kann durch einfache Auswahl f r andere Auswerteverfahren endpoint two point ver ndert werden 6 2 4 Methodengruppe Advanced Dual wavelength Messung bei zwei Wellenl ngen und Auswertung der gemessenen Extinktionswerte ber zwei Grundformeln Subtraktion Division Varianten der Grundformeln k nnen definiert werden Des Resultat kann mit einem F
60. eins sollte hier ann hernd Null betragen Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Bei der Methodenprogrammierung wird durch einfache Auswahl des Proteins aus einer vorgegebenen Liste der zugeh rige Faktor importiert Die Definition der Faktoren erfolgt separat in den Funktionen der Gruppe Gen method param Verschiedene Proteine sind in Gen method param vorprogrammiert Weitere k nnen Sie hinzuf gen Proteins with reagent Konzentrationsbestimmung von Proteinen durch Messung nach Farbreaktionen und Auswertung ber Standards oder Faktor typisch Auswertung mit Standardkurve e Die Methoden Bradford Bradford micro Lowry Lowry micro BCA und BCA micro sind bereits vorprogrammiert Je nach Reagenzhersteller muss gegebenenfalls der Curve fit Standardkurventyp ver ndert werden Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Dye labels Fur Farbstoff markierte Biomolekule Konzentrationsbestimmung des Biomolekuls Nukleinsaure oder Protein durch Messung bei 260 bzw 280 nm sowie des Farbstoffs in einem Messablauf Auswertung mit Faktor Neben dem Biomolekul k nnen bis zu zwei Farbstoffe bei zwei unterschiedlichen Wellenl ngen parallel gemessen werden Zus tzlich Auswertung der Einbaurate des Farbstoffes FOI Auswahl zwischen zwei verschiedenen FOI Berechnungsverfahren Bereits vorprogrammierte Methoden ssDNA markiert mit Cy 3 bzw Cy 5 Korrektur des Einflusses des Farbstoff Spektrum
61. ellenl nge k nnen Sie zur Definition des Faktors f r die Berechnung der Konzentration aus der Extinktion die folgenden Daten eingeben Faktor oder Ag 1 oder Extinktionskoeffizient und Molmasse Nucleic acids Diese Parameter werden bei der Auswahl einer Nukleins ure bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Dye labels in die Methodenparameter geladen NA name e Factor e Double stranded Der Faktor wird zur Berechnung der Konzentration aus der Extinktion benutzt Der Parameter Double stranded hat Einfluss auf die Berechnung der molaren Nukleins urekonzentration siehe Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen auf S 110 Dyes Diese Parameter werden bei der Auswahl eines Farbstoffs Dyes bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Dye labels in die Methodenparameter geladen e Dye name Neben dem Namen k nnen Sie zur Definition des Faktors f r die e Wavelength Berechnung der Konzentration aus der Extinktion die folgenden Daten e Ext coeff eingeben Factor Faktor oder Extinktionskoeffizient e Corr A260 Die Korrekturfaktoren f r die Extinktionen bei 260 bzw 280 nm werden e Corr A280 benutzt wenn die Korrekturfunktion in den Methodenparametern aktiviert ist Genaueres ist im Kapitel zur Auswertung beschrieben siehe Korrektur 260 und Korrektur A2g auf S 109 Units Aus allen verfugbaren Einheiten konnen Sie bei der Programmierung von Methodenparametern eine Einhe
62. en z B Std Conc 1 Std Conc 2 Decimal places Werteeingabe Zahl der Nachkommastellen fur das Ergebnis Bereich 0 bis 3 Zahl der Nachkommastellen f r das berechnete Konzentrationsergebnis Dye 1 Auswahl Liste von Farbstoffen die in der Funktion General Method Parameters Dyes hinterlegt sind Nur f r die Methodengruppe Dye labels Bei der Auswahl des Farbstoffs werden aus der Funktion General Method Parameters Dyes auch die dort programmierten dem Farbstoff zugeh rigen Parameter importiert Faktor Wellenl nge ggf Korrekturfaktoren f r die Messung bei 260 bzw 280 nm siehe Beschreibung des folgenden Parameters Correct A260 1 Auswahl ein aus Nur f r die Methodengruppe Dye labels Korrektur des Einflusses des Farbstoffspektrums auf die Extinktion bei der Messwellenl nge des Biomolek ls 260 bzw 280 nm Die Farbstoffspektren haben z T eine geringe Extinktion bei 260 und 280 nm Diese Extinktionen verf lschen die Berechnungen f r die Nukleins uren bzw Proteine dieser Methoden Zur Minimierung dieser Verf lschung werden Korrekturfaktoren benutzt sofern diese f r die jeweiligen Farbstoffe bekannt sind Wird der Parameter eingeschaltet wird der Korrekturfaktor aus der Funktion General Method Parameters Dyes importiert Correct A 280 1 Auswahl ein aus Nur f r die Methodengruppe Dye labels Zur Erl uterung siehe Beschreibung des obigen Parameters Correct
63. en Sie direktes Sonnenlicht Luftfeuchtigkeit 25 bis 70 relative Feuchtigkeit i Achten Sie darauf dass keine Gegenst nde unter dem Ger t liegen z B lose Bl tter Hefte die die Luftzufuhr behindern k nnen 4 3 Ger t an das Netz anschlie en 1 Stellen Sie das BioSpectrometer kinetic auf eine geeignete Arbeitsfl che 2 berzeugen Sie sich dass Netzspannung und Netzfrequenz mit den Angaben auf dem Typenschild bereinstimmen 3 Verbinden Sie das Ger t mit dem Stromnetz und schalten Sie es mit dem Netzschalter ein 4 Entfernen Sie die Schutzfolie vom Display 20 Installation Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 4 4 Gerat mit einem Netzwerk verbinden i Die Verbindung des Ger ts mit einem Netzwerk ist optional Sie k nnen das Ger t auch ohne Netzwerkverbindung betreiben Informationen zu Netzwerkeinstellungen siehe Device Settings auf S 74 Voraussetzung Ethernet Kabel RJ45 1 Verbinden Sie das Ethernet Kabel mit der Anschlussbuchse des Netzwerks 2 Verbinden Sie das Ethernet Kabel mit der Anschlussbuchse Ethernet 10 siehe Gesamtillustration auf S 17 Netzwerkdrucker Ein Netzwerkdrucker wird unter folgenden Voraussetzungen automatisch vom Ger t erkannt e Drucker befindet sich im gleichen Netzwerksegment wie das Ger t e Drucker unterst tzt das Zeroconf Protokoll Drucker ist PostScript f hig 4 5 Drucker am USB Anschluss anschlie en 4 5 1 Thermodrucker DPU S445
64. en der Ergebnis und Standardauswertung Probennummer Probenname Datum und verwendetem Parametersatz des Methodenprogramms Die Anzahl der gespeicherten Ergebnisse ist abh ngig von der Anzahl der gespeicherten Methoden Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic 105 Deutsch DE 12 Auswerteverfahren Dieses Kapitel beschreibt die in den Methodenprogrammen verf gbaren Auswerteverfahren sowie die Berechnung einer Verd nnung durch die Ger te Software Beachten Sie beim Vergleich Messergebnissen mit den Ergebnissen anderer Photometer Spektralphotometer dass die Werte von der Bandbreite der Ger te abh ngen k nnen In den folgenden F llen k nnen die Unterschiede erheblich sein Das Extinktionsspektrum weist bei der Messwellenl nge einen schmalen Peak auf e Es wird nicht am Maximum sondern auf der Flanke eines Peaks gemessen Kontrollieren Sie daher die Richtigkeit der Methode durch die Messung von Standards 12 1 Extinktionswerte Extinktionswerte werden als Axxx XXX steht f r die Wellenl nge dargestellt Diese Anzeigen entsprechen immer den direkt gemessenen Werten d h ohne Korrekturen die in die anschlie ende Auswertung einflie en wie z B Korrekturen f r optische Schichtdicken der K vette oder Background Korrekturen 12 1 1 Blank Alle Extinktionswerte sind immer auf den zuletzt gemessenen Blank Leerwert bezogen Eine Blank Messung ist daher zu Beginn einer jeden Messreihe
65. enee A 38 6 2 4 Methodengruppe Advanced 2 0 2c eee 39 6 3 Methodenparametern uun 2 0 eee oa eee Ee Bh eee ee ee ren ote ee eee 40 6 4 Methodenablaur an 11 6 46 6 4 1 check parameters 22 0600 0 47 6 4 2 Measure standards u nee see esse sehe 48 6 4 3 measure samples sen en en 49 6 4 4 measure samples Ergebnisanzeigen 6600 51 6 45 1 11 1 5 2 090 58 6 4 6 process results Optionen 2 60 6 4 7 40 nn RR nr 64 6 4 8 Messreihe abschlie en 2 6606 67 7 ee ee ake LEE DG DG Dd 69 7 1 Funktionen der Hauptgruppe User 0 2 ene eee 69 7 1 1 Results MEMORY re 1 7 70 7 1 2 General Method Parameters 0006 71 7 1 3 ADSorbance Spectra Library gt ee ee ee ee 74 DEVICE SELINGSS 5 ee antenne sub 74 FAS Device Calibrations 632i Le ci ei de 76 7 11 1111 1 0 77 8 33 Da DI N De 79 8 1 Reinigung 3 1111 09 79 8 1 1 K vettenschachtabdeckung reinigen cee eee eee eens 80 8 2 Desinfektion Dekontamination 0 0 0 0 eee eee ae 81 Gerdt berpf fen
66. eppendorf Register your instrument www eppendorf com myeppendorf Bedienungsanleitung Copyright 2015 Eppendorf AG Germany All rights reserved including graphics and images No part of this publication may be reproduced without the prior permission of the copyright owner Trademarks Cy is a registered trademark of GE Healthcare UK Ltd UK Hellma is a registered trademark of Hellma GmbH amp Co KG Germany Eppendorf and the Eppendorf logo are registered trademarks of Eppendorf AG Germany Eppendorf BioSpectrometer Eppendorf SpectraZoom and UVette are registered trademarks of Eppendorf AG Germany Registered trademarks and protected trademarks are not marked in all cases with or in this manual This product is manufactured under license to issued U S Patent No 6 122 052 Protected by U S Patent No 8 464 171 6136 900 054 04 062015 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Inhaltsverzeichnis T Amwendungshinweise cece cee cece cere tere cette reece tenses eens 7 1 1 Anwendung dieser Anleitung 2 cece eee tee eee ee ene eees 7 1 2 Gefahrensymbole und Gefahrenstufen eeeeo eos 7 1 2 1 Gef hrensymbole 3 oh aks re oe Pade E 7 12 2 66 0 Sle a he SON eee Br 7 1 3 0
67. ersatz 6135 928 001 6135928001 Filtersatz zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit und Wellenl ngenrichtigkeit gem NIST Eppendorf pCuvette G1 0 6138 000 018 6138000018 Eppendorf Mikrovolumen Messzelle fur die Eppendorf BioPhotometer und BioSpectrometer Thermodrucker DPU S445 inkl Netzteil und Druckerkabel 6135 011 000 230 V EU 6135 010 004 6135010004 115 V 110V USA JP 6135 012 007 230 V UK Thermopapier 0013 021 566 952010409 5 Rollen Eppendorf UVette 220 nm 1 600 nm Original Eppendorf Kunststoffk vette PCR clean Protein free 0030 106 300 952010051 50 2 000 uL 80 St ck einzeln verpackt Eppendorf UVette routine pack 220 nm 1 600 nm Eppendorf Quality 0030 106 318 952010069 50 2 000 uL 200 St ck wiederverschlie bare Box Eppendorf macro Vis Cuvettes 0030 079 345 0030079345 10 x 100 St ck Eppendorf semi micro Vis Cuvettes 0030 079 353 0030079353 10 x 100 St ck 4308 078 006 940001102 K vettenst nder f r 16 K vetten Bestellinformationen 118 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE ww L ws HR ies Le wm ee re ri er A ee c 6 ri 6 er 6 pa ce x ee ce a ce ce CE ce CE Ee ce Ce ce Ce CE ve CE ce ek ce GY ce Ce Ee CE Te CE ee en ee CE re Ce eT ce Se ce ce CE ce ce TE et EG Konformit tserkl rung wer AA EC Conformity Declaration RT Das bezeichnete Produkt entspricht den einschl gigen grundlegenden A
68. erval Werteeingabe Nur f r Kinetikmethoden und Messverfahren lin regr Zeit zwischen zwei Zeitintervalle zwischen den Messpunkten Messpunkten Bereich 00 05 bis 10 00 min sec Autoprint Auswahl Ausdruck eines Messergebnisses direkt nach der Messung mit ein aus dem Thermodrucker Es werden nur die wesentlichen Ergebnisdaten ausgedruckt F r die Ausgabe detaillierterer Daten k nnen Sie zum Abschluss der Messserie im Methodenschritt print amp export die gew nschten Datenpakete zusammen stellen und ausdrucken 46 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 4 Methodenablauf Bradtord neck parameters a el Der Wizard am oberen Rand der Anzeige f hrt Sie durch den Methodenablauf Der jeweils aktive coe tomni N Methodenschritt ist hervorgehoben Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off Edit Pace up Page dn Abort lt Back Next gt Ein Methodenablauf umfasst maximal 5 Schritte Der jeweils aktive Schritt ist optisch hervorgehoben Nach dem letzten Schritt print amp export einer Messreihe wird als weiterer Schritt der Start einer neuen Messreihe angeboten Diese beginnt wieder mit der Probenmessung Methodenschritt Erlauterung check parameters Methodenparameter berpr fen nderung bei Bedarf measure standards Nur bei Methoden mit Standardauswertung Standards messen und auswerten Alternativ Nutzu
69. eter kinetic 67 Deutsch DE 6 4 8 Messreihe abschlie en Im Anschluss an den letzten Methodenschritt print amp export k nnen Sie eine neue Messreihe mit der gew hlten Methode starten oder eine neue Methode w hlen Messreihe abschlie en und neue Messreihe starten Abumin A 200 omeesure sampies process export AETS e Softkey Next gt Methodenschritt new series Albumin A 280 2010 11 19 18 32 05 aufrufen Softkey New Methodenschritt measure samples aufrufen und eine neue Messreihe starten i Info es es Se CPT ee Messreihe abschlie en und eine neue Methode w hlen e Softkey Finish Messreihe abschlie en und Methodenauswahl aufrufen Methoden 68 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic 69 Deutsch DE 7 Funktionen 7 1 Funktionen der Hauptgruppe User Mit der Taste function oder dem Softkey Function gelangen Sie in ein Menu mit Funktionen wie Gerateeinstellungen oder Abrufen gespeicherter Ergebnisse Die Funktionen sind analog zur Methodenauswahl in 3 Spalten strukturiert F r Sie sind die Funktionen in der Hauptgruppe User zug nglich Wie in der Methodenauswahl navigieren Sie mit den Cursor Tasten um zun chst die gew nschte Untergruppe und danach in der rechten Spalte die gew nschte Funktion auszuw hlen Mit enter rufen Sie die Funktion auf Functions Main Groups User Su
70. g von dsDNA Konzentrationen mussen daher nicht von Ihnen verandert werden wenn Sie den Parameter Cuvette verandern No of Werteeingabe Nur f r die Methodengruppe Multi A wavelengths Bereich 2 bis 6 Anzahl der Wellenl ngen bei denen gemessen werden soll Wavelength Werteeingabe Messwellenl nge Auf der Basis der bei dieser Wellenl nge Messwellenl nge in gemessenen Extinktion wird die Konzentration ausgerechnet nm Bei den Methodengruppen Multi A sowie Dual wavelength Bereich 200 bis 830 geben Sie mehr als eine Wellenl nge ein F r einige nm Methodengruppen z B Nucleic acids und Proteins direct UV sind die Wellenl ngen fest vorprogrammiert Bei der Methodengruppe Dye labels geben Sie die Messwellenl ngen nicht einzeln im Methodenablauf ein Sie importieren sie ber die einfache Auswahl von Biomolek l sowie Farbstoff automatisch aus der Funktion General Method Parameters Unit Auswahl Einheit f r das Konzentrationsergebnis mg mL ug mL ng mL pg mL ug uL mg dL umol mL nmol mL pmol mL pmol uL U U mL U L Abs A min Zus tzlich freie Programmierbarkeit weiterer Einheiten in der Funktion General Method Parameters Units Max 7 Stellen Die Auswahl ist bei den fest vorprogrammierten Methoden der Gruppe Routine auf f r diese Methoden sinnvolle Einheiten begrenzt Formula type Auswahl division subtraction Nur f r die Methodengruppe Dual wavelength
71. h lineare Interpolation zwischen diesen Messpunkten im Extinktions Zeit Graphen Extinktionsergebnis AA min Reagent blank Auswahl ein aus Nur f r Kinetikmethoden der Methodengruppe Advanced kinetics bei Auswertung mit Faktor Messung eines Reagenzleerwertes RL Der RL wird nach demselben Messverfahren wie eine Probe gemessen Das Extinktionsergebnis in A bzw AA min wird vom Extinktionsergebnis der Probe subtrahiert bevor die Probenkonzentration berechnet wird Anwendung Korrektur von Probenergebnissen bei Kinetiken mit Reagenzdrift Der Reagenzleerwert enth lt das Reagenz sowie demineralisiertes Wasser als Probe Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 45 Parameter Delay Eingabe Werteeingabe Zeit vom Start bis zum ersten Messpunkt Bereich 00 00 bis 10 00 min sec Erlauterung Nur fur Kinetikmethoden Zeit vom Start des Messablaufs bis zur Aufnahme des ersten Messpunkts Measuring time Werteeingabe Zeit zwischen erstem Nur f r Kinetikmethoden und Messverfahren lin regr und two point und letztem Zeit von der Aufnahme des ersten bis zur Aufnahme des letzten Messpunkt Messpunkts Bereich 00 05 bis 59 59 min sec Total time Werteeingabe Nur f r die Kinetikmethode Single A cont Zeit zwischen erstem Zeit von der Aufnahme des ersten bis zur Aufnahme des letzten und letztem Messpunkts Messpunkt Bereich 00 05 bis 59 59 min sec Int
72. hlt werden dass die Regressionsgerade Regressionskurve durch den Nullpunkt geht 0 Verwenden Sie f r Kalibrationsgeraden das Verfahren linear regression Testen Sie bei kurvenf rmigen Verl ufen welches Auswerteverfahren quadratische Regression kubische Regression Spline Interpolation die f r die Standardauswertung am besten geeignete Funktion ergibt Die Spline Interpolation verbindet die Messpunkte durch kubische Polynome w hrend die Regressionsverfahren eine quadratische bzw kubische Funktion so zwischen die Messpunkte legen dass f r die Messpunkte m glichst geringe Abweichungen von der Funktion resultieren Bei den Regressionsverfahren wird neben der berechneten Regressionsgleichung auch das Bestimmtheitsma coefficient of determination als Ma f r die Streuung der Messpunkte um die berechnete Funktion angezeigt Bei einem Wert von lt 0 8 f r das Bestimmtheitsma wird das Ergebnis mit einer Warnung versehen Wenn der erste Standard die Konzentration 0 hat w hlen Sie die Einstellung dass die Regressionsgerade Regressionskurve durch den Nullpunkt geht Wenn keines der f r kurvenf rmige Verl ufe empfohlenen Verfahren zufriedenstellende Ergebnisse bringen w hlen Sie das Verfahren linear interpolation Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic 109 Deutsch DE 12 4 Verd nnung Im Methodenschritt measure samples eingegebene Verd nnungen werden bei der Ergebnisberechnung ber cksichtigt
73. hren Linear regression benutzt wurde e Single A continuous e Simple kinetics Advanced kinetics es0na _ measure process esu print amp export frew series 0 2010 07 16 16 3254 Optionen fur die Nachbearbeitung werden auf den beiden linken Softkeys angeboten In diesem Abs Alr 0 450 0 360 L L 0 270 0 180 0 090 O 7 IN 0 000 4 X 230 260 290 320 Aine Zoom More Calc Data 3 Finish lt Back al Next gt Beispiel Zoom und More Calculations process results zoom Abs A 0 460 0 400 0 340 0 280 0 220 dsDNA 2010 07 16 16 32 54 A260 A280 1 86 Change image section amp and Y keys Move A cursor 4 and gt keys Would you like to apply Apply to all samples the change to all samples in the dsDNA 2010 07 02 14 series of measurements Yes Apply to all samples No Apply only to the current sample lI I Yes No Cancel Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 59 Deutsch DE Nach nderungen k nnen Sie den aktuellen Modus mit den beiden rechten Softkeys verlassen Savel nderung speichern und zum Methodenschritt process results zur ckkehren Cancel Abbrechen und zum Methodenschritt process results zur ckkehren Nach Speicherung der nderungen k nnen Sie diese m
74. i den folgenden Methodengruppen k nnen Sie auch einschlie lich negative Faktoren eingeben Simple kinetics Advanced Dezimalpunkt kinetics Dual wavelength Factor Bei der Methodengruppe Dye labels geben Sie die Faktoren nicht einzeln im Methodenablauf ein Sie importieren sie ber die einfache Auswahl von Biomolek l sowie Farbstoff automatisch aus der Funktion General Method Parameters Protein Auswahl Nur f r die Methodengruppen Dye labels und Proteins direct Liste von Proteintypen UV die in der Funktion Bei der Auswahl des Proteins wird aus der Funktion General General Method Method Parameters Proteins auch der dort programmierte Parameters Proteins zugeh rige Parameter Factor importiert hinterlegt sind Standards Werteeingabe Zahl der verschiedenen Standardkonzentrationen f r die Zahl der Standards Bereich 1 bis 12 Auswertung mit Standards Bei einigen Methoden ist der Bereich f r die Anzahl der Standards auf einen kleineren Bereich als 1 bis 12 begrenzt 42 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Parameter Eingabe Erlauterung Replicates Werteeingabe Zahl der Wiederholungsmessungen fur die verschiedenen Zahl der Replikate pro Standardkonzentrationen Standard Bereich 1 bis 3 Std Conc Werteeingabe Je nach Zahl der Standards wird dieser Parameter fur alle Konzentrationswerte der Standards Grenze Max 6 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Standards angebot
75. ie nderung nicht gespeichert wurde Softkeys Save und Save as nderungen speichern Bei Save as m ssen Sie der Methode einen neuen Namen geben Das ist immer der Fall wenn Sie die von Eppendorf vorprogrammierten Methoden der Gruppe Routine ndern Cancell Editiermodus ohne Speicherung der nderungen verlassen Speichern der Methode unter neuem Namen Sie k nnen die Methode entweder im selben Ordner speichern in dem Sie die Methode aufgerufen haben oder in der Methodengruppe Favorites in einem frei w hlbaren Ordner speichern Den Namen maximal 20 stellig k nnen Sie ber eine eingeblendete Tastatur Softkey Keyboard oder direkt ber den Tastenblock siehe Text eingeben auf S 25 eingeben Nach dem Speichern gelangen sie zur ck in die Anzeige check parameters 48 Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 4 2 measure standards measure standards new Conc Abs pg mL Standard 1 100 Sane x Standard 2 250 x Standard 3 500 x en Linear regression not calculated Softkeys tas ca Curve Fit Graph Der erste zu messende Standard ist in der Anzeige markiert Messen Sie nach dem Leerwert Taste blank der Reihe nach alle Standards Taste standard Wenn Sie mehr als ein Replikat pro Standard messen wird der Mittelwert fur jeden Standard automatisch errechnet und angezeigt M
76. ige ist jeweils der nachste zu messende Standard markiert Mit den Softkeys Graph bzw Table konnen Sie die Ergebnisansicht wechseln gt Mit Next akzeptieren Sie die aus den Standardergebnissen errechnete Auswertung Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 29 Deutsch DE 5 3 2 4 Proben messen gt Mit der Taste sample messen Sie der Reihe nach Ihre Proben Bradford jjmeasure stanc Bradford 2010 11 25 16 28 23 ie Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe 2 gespeichert Eine neue Leerwertmessung ist aber 0 900 Pag ve jederzeit moglich In der hier gezeigten Abbildung 0 393 Are eines Messablaufs mit Auswertung Uber er ES Standardkurve wird zusatzlich zum Probenergebnis ER der Graph der Standardauswertung angezeigt Er Measure blank or sample 0 300 600 900 12067 6 ppm and key Dilution Edit iD aia Finish lt Back Next gt 5 3 2 5 Methode abschlie en Bradford measure EED measure samples 9 samples print amp export new series 1 Dr cken Sie Finish um die Messreihe zu Bradtord 2010 11 25 16 28 23 beenden und zur Methodenauswahl Abs A m 15 aa zur ckzukehren 1 200 y z K 2 Schalten Sie nach Abschluss aller Messungen 0 900 TOT das Ger t aus und schlie en Sie die 0 929 Arn Kuvettenschachtabdeckung um den gu K vettenschacht vor Verschmutzung zu SS sch tzen Measure blank or sample 9 000300
77. it Yes auf alle Proben der Messreihe bertragen Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 6 4 6 process results Optionen Zoom Drucken Sie den Softkey Zoom und wahlen Sie eine der folgenden Varianten aus se EAOa Cursor Tasten und Wellenl ngen Cursor Abs A 01 A ID bewegen Dieser bestimmt den Zoom Mittelpunkt 0 460 ber der x Achse 0 400 25 2 e Cursor Tasten und Angezeigten Ausschnitts sass a der x Achse stufenweise nach dem A260 A280 1 86 SpectraZoom Verfahren vergr ern und Lc verkleinern 0 220 Der angezeigte Ausschnitt der y Achse wird bei 238 246 254 282 270 2781 jedem Schritt automatisch so angepasst dass ua Maximum und Minimum der darzustellenden spectra wee Jfesorzooni save cancer Daten den Ausschnitt optimal ausnutzen ESNA Variante spectra 0 dsDNA 2010 07 16 16 32 54 Entspricht der Variante spectra mit der Ausnahme Abs A Die untere Grenze des dargestellten Ausschnitts der 2 y Achse entspricht immer 0 A 0 360 25 2 0 270 0 504 Ase 0 180 A260 A280 1 86 0 090 0 000 MIPS ETH GO SONA 201007 16 163254 Intervallgrenzen fur beide Achsen konnen frei eingegeben werden pe Navigation zwischen den Eingabefeldern mit den sites DE P Cursor Tasten O 0 370 0 504 Axo 0 280 f A260 A280 1 86 0 190 235 248 257 266 275 spectra spectra 0
78. it auswahlen e Unit Eine noch nicht programmierte Einheit fur das Konzentrationsergebnis eingeben e Kenndaten fur Proteine die nicht ab Werk vorprogrammiert sind k nnen in der Datenbank expasy ermittelt werden http www expasy org tools protparam html e Eine Tabelle mit A o Werten f r viele Proteine finden Sie auch in C N Pace et al Protein Science 1995 4 2411 2423 Tabelle 5 Die A1o Werte m ssen mit 0 1 multipliziert werden um die ben tigten Ag 19 Werte zu erhalten 74 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 7 1 3 Absorbance Spectra Library Functions Main Groups Sub Groups Functions Nitrophenol Functions Main Groups Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device setting Device calibration Info Cone I II I mea In der rechten Spalte w hlen Sie das Spektrum aus das Sie aufrufen m chten und best tigen Sie mit enter Softkeys Export und Print Auf einen USB Stick oder per USB Kabel zu einem PC exportieren bzw drucken siehe print amp export auf S 64 e OK In die Funktionsauswahl zur ckkehren Folgende Einstellungen k nnen angepasst werden Device Settings General Network E Mail Date and Time Language Engish ly Device name BioSpectrometer kinetic Self test interval Weekly ix last self test 2015 06 04 1
79. it den Cursor Tasten und k nnen Sie auch gezielt bestimmte Standards zur Messung auswahlen Auch eine Neumessung einzelner Standards ist so moglich Last call Die zuletzt gespeicherte Standardauswertung fur diese Methode aufrufen um diese fur Probenmessungen zu nutzen e Curve fit Verfahren zur Standardauswertung ausw hlen Sie k nnen das Verfahren auch nachtr glich ndern solange das Ergebnis nicht gespeichert wurde Hinweise zur Auswahl des Auswerteverfahrens finden Sie im Kapitel Auswerteverfahren siehe Auswertung mit Standardkurve gerade auf S 108 e Graph In die grafische Anzeige der Standardergebnisse wechseln measure standards new l Standard 3 Standard 4 Standard 5 1000 Quadratical regression Conc 532 44 A 234 21 A 71 562 Coefficient of determination R 0 9998 and Last Gal J Curve Fr _Graph a TT Te Abs A 1 200 sina 0 900 FE 0 600 0 300 0 300 600 900 12069 Std 6 Rep 2 1500 pg mL 1 289 0 000 Quadratical regression Conc 924 41 A 134 52 A 123 14 Coefficient of determination R 0 9970 A and vid and gt ics ca Curve Fit Table Abort lt Back Next gt Sobald die minimale Zahl von Ergebnissen fur die Auswertung mit dem gewahlten Verfahren Curve fit vorliegt wird das Auswertungsergebnis im rechten Teil der Anzeige d
80. k Angeschlossene Ger te m ssen den Sicherheitsanforderungen gem IEC 60950 1 entsprechen Technische Daten 104 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 11 7 Anwendungsparameter Methoden Vorprogrammierte und frei programmierbare Methoden fur alle Mess und Auswerteverfahren e Extinktionsmessungen bei einer oder mehreren Wellenl ngen Scans Nukleins uren und Proteine OD600 Dye Methoden parallele Messung von Biomolek l und Farbstoff Markierung Methoden mit Auswertung ber Faktor Standard und Standardreihe Zweiwellenl ngen Verfahren mit Subtraktions und Divisionsauswertung Kinetikverfahren Endpunkt Zweipunkt Lineare Regression Methodenabh ngige Auswertung Extinktion Konzentration ber Faktor und Standard Konzentration ber Standardreihe Lineare Regression Nichtlineare Regression Polynom 2 und 3 Grades e Spline Auswertung e Lineare Interpolation Punkt zu Punkt Auswertung Extinktionsverrechnungen ber Subtraktion und Division Zusatzdaten f r Nukleins uren Ratio 260 280 und 260 230 Molare Konzentration Gesamtausbeute Zusatzdaten f r Dye Methoden FOI Frequency of incorporation Markierungsdichte Scans Zoom Peak Auswertung Kinetiken Nachtr gliche Modifizierung des Zeitfensters f r die Regressionsauswertung Methodenspeicher gt 100 Methodenprogramme Messwertspeicher und Kalibrationsspeicher Speicher f r gt 1 000 Ergebnisse mit allen Dat
81. k nnen Glask vetten und Kunststoffk vetten im Volumenbereich von 1 uL bis 3000 uL benutzen 3 3 1 Methoden Zahlreiche Methoden f r die Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren Proteinen und Farbstoff markierten Nukleins uren und Proteinen sowie die Methode OD 600 f r die Bestimmung der Bakteriendichte durch Tr bungsmessung sind bereits vorprogrammiert Weiterhin sind Methoden Templates f r unterschiedliche Mess und Auswerteverfahren Ein und Mehrwellenl ngenmessungen Spektrenaufnahmen Kinetikverfahren Auswertungen mit Faktor Standard und Standardkurve vorprogrammiert Eigene Methoden k nnen auf Basis der vorprogrammierten Methoden und Templates erstellt werden Mit den Templates der Methodengruppe Absorbance k nnen Sie schnell Extinktionen oder Spektren ohne weitere Auswertung messen 3 3 2 Bedienung Die vorprogrammierten Methoden und Templates sind in bersichtlichen Gruppen zusammengefasst aus denen Sie schnell Ihre gew nschte Methode ausw hlen k nnen Nach Methodenaufruf werden Sie in bersichtlichen Schritten durch den Messablauf gef hrt Eine Hilfebox in der Anzeige gibt Ihnen bei Bedarf Hinweise Die 3 runden Messtasten standard blank sample erm glichen den schnellen direkten Start einer Messung 3 3 3 Ergebnisausgabe Das BioSpectrometer kinetic gibt die Ergebnisse ber die Ger teanzeige oder ber einen bei Eppendorf erh ltlichen Drucker aus ber den USB Anschluss k nnen Sie Ergebnisdaten aus dem
82. kinetic Deutsch DE 12 5 2 Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Anwendung Information zur Reinheit der gemessenen Nukleins ure Die Anwendung des Auswerteverfahrens kann in den Parametern A260 280 beziehungsweise A260 A230 aktiviert werden Ratio bezeichnet den Quotienten der gemessenen Extinktionen bei den genannten Wellenl ngen Literaturwerte f r die Ratio Werte bei reinen Nukleins uren A260 A280 e DNA 1 8 bis 1 9 RNA 1 9 bis 2 0 Current Protocols in Molecular Biology 1994 A260 A230 F r die Ratio A260 A230 findet man in der Literatur unterschiedliche Angaben f r reine Nukleins uren e DNA 2 3 bis 2 5 The Nucleic Acids 1955 e DNA 1 9 Current Protocols in Molecular Biology 1994 Die Werte sind stark vom pH Wert abh ngig Nukleins uren sollten daher nicht in Wasser sondern in einem Puffer mit pH Wert 7 bis 7 2 gemessen werden z B TE Puffer 12 5 3 Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen Die Umrechnung kann nur f r Nukleins uren und Dye Methoden mit Nukleins uren als Biomolek lkomponente angewendet werden Sie erfolgt im Methodenschritt process results More calculations 12 5 3 1 Berechnung der Menge Anwendung Berechnung der Menge Masse an Nukleins ure im gesamten Probenvolumen M CxV gesamt M berechnete Gesamtmenge Masse der Nukleins ure im Probengef Einheit ug C aus der Messung berechnete Konzentration der Nukleins ure Einheit ug mL oder ng uL
83. kinetic 51 Deutsch DE Ergebnisbild mit Verd nnung und ID Ergebnisbild mit Verd nnung und Proben ID Bradford tmeasure standards measure samples print amp export ew series Bradtord 2010 12 02 17 08 03 09 Dil 20 80 pL ID 812 Abs A 1 200 ye 0 900 Gi 1 71 Bom A 0 566 Amm 0 600 0 300 XE SS 300 600 900 12067 6 ml A and key Dilution Edit iD osis Finish lt Back J Next gt 6 4 4 measure samples Ergebnisanzeigen In diesem Abschnitt erhalten Sie fur alle Methodengruppen eine Darstellung typischer Ergebnisanzeigen sowie einen berblick ber weitere Ergebnisdaten die Sie ber den Softkey Data erreichen Methodengruppe Ergebnisanzeige Erlauterung Hauptgruppe Absorbance Single Single A measure samples Ergebnisanzeige Single A 2010 07 02 14 15 18 e Extinktion bei der 01 EN rs Messwellenlange e Nur bei Verd nnung oder anderer K vette als 10 mm Zus tzliche Anzeige des Extinktionswerts vor 4 390 der Umrechnung 0 439 Aso a Dilution Edit 1D Wl Finish Jl lt Back Next gt Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Methodengruppe Ergebnisanzeige Erlauterung Single Seen ct ed a measure samples gj Vor der Messung continuous Single A cont 2010 11 25 16 40 37 e Methodenschritt check Abs A 01 p ID parameters Anzeige der 1 500 gt Tem
84. ller dieses Produktes ACHTUNG Sch den durch unsachgem e Verpackung Die Eppendorf AG haftet nicht f r Sch den durch unsachgem e Verpackung 9 Lagern und transportieren Sie das Ger t nur in der Originalverpackung ACHTUNG Sch den durch unsachgem e Reinigung des K vettenschachts gt Reinigen Sie den K vettenschacht nur mit einem feuchten Wattestabchen siehe Reinigung auf S 79 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeit in den K vettenschacht gelangen 9 Fassen Sie nicht mit dem Finger in den K vettenschacht 2 4 Hinweise zur Produkthaftung Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioSpectrometer kinetic 15 Deutsch DE In den folgenden F llen kann der vorgesehene Schutz des Ger ts beeintr chtigt sein Die Haftung fur entstehende Sach und Personensch den geht dann auf den Betreiber ber Das Ger t wird nicht entsprechend der Bedienungsanleitung benutzt Das Ger t wird au erhalb des bestimmungsgem en Gebrauchs eingesetzt Das Ger t wird mit Zubeh r oder Verbrauchsartikeln verwendet die nicht von Eppendorf empfohlen werden Das Ger t wird von Personen die nicht von Eppendorf autorisiert wurden gewartet oder instand gesetzt Am Ger t werden vom Anwender unautorisiert nderungen vorgenommen 2 5 Sicherheitshinweise am Ger t Darstellung Bedeutung Gefahrenstelle gt Beachten Sie die Bedienungsanleitung Ort R ckseite des Ger ts Ger t nach dem ffne
85. misst das Pruffilter 15 mal bei 9 Wellenl ngen und zeigt anschlie end die Mittelwerte sowie die VK Werte der Messreihe f r alle 9 Wellenl ngen an 84 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE BCI 1 0 spectrometer Unit Device Calibration Check photometric accuracy 01 ID SAMPLE A1 Wavelength Mean VK 260 nm 0 192 A 1 1 280 nm 0 190 A 1 2 320 nm 0 167 A 1 4 405 nm 0 154 A 0 7 550 nm 0 164 A 0 7 562 nm 0 163 A 0 8 595 nm 0 165 A 0 7 700 nm 0 168 A 0 5 filter SAM and 800 nm 0 169 A 15 ee pe Abort lt Back Next Device Calibration Device Caltvation Check photometric accuracy 03 ID SAMPLE A3 Wavelength Mean VK 260 nm 1 404 A 0 3 280 nm 1 384 A 0 1 320 nm 1 382 A 0 3 405 nm 1 423 A 0 1 550 nm 1 412A 0 3 562 nm 1 406 A 0 3 595 nm 1 396 A 0 5 700 nm 1 359 A 0 2 ene ung 800 nm 1 342 A 0 3 4 Ergebnisanzeige nach Messung eines Pr ffilters zum Test auf Photometrische Richtigkeit Messen Sie die beiden anderen Pruffilter A2 und A3 Ergebnisanzeige nach Messung aller 3 Pruffilter zum Test auf Photometrische Richtigkeit Mit den Tasten und k nnen Sie sich nochmals die Ergebnisse f r die verschiedenen Pr ffilter ansehen Mit Finish beenden sie die Pr fung Vergleichen Sie die Mittelwerte und VK Werte mit der mitgelieferten Tabelle Sollten die gemessenen Werte nicht mit dem zul ssigen Wertebereich bereinstimmen wenden Si
86. n 2 Stellen Sie die Kuvetten fur die Messungen bereit siehe Kuvette einsetzen auf S 26 3 Stellen Sie die Messl sungen f r die Messungen der Leerwerte ggf der Standards und der Proben bereit 4 ffnen Sie die Abdeckung des K vettenschachts W hrend der Messungen kann die Abdeckung ge ffnet bleiben Messlosungen fur Standards und Proben mit geringeren Extinktionen als 0 05 A sollten nicht eingesetzt werden Die Nachweisgrenze des Gerats liegt zwar wesentlich niedriger jedoch ist der Einfluss von Storungen aus den Messlosungen z B Partikel Blasen Trubungen auf die Zuverl ssigkeit des Ergebnisses bei diesen geringen Extinktionen sehr gro Weitere Informationen wie z B den Userguide Nr 013 finden Sie auf unserer Internetseite www eppendorf com 5 3 2 Messablauf 5 3 2 1 Methode ausw hlen Wahlen Sie mit den Cursor Tasten die gew nschte Methode und rufen Sie die Methode Method Selection Main Groups Sub Groups Methods A Bradford mit der Taste enter auf a Eine bersicht und detaillierte Beschreibung der BCA mioro Methoden finden sie im nachsten Kapitel siehe Lowry Methoden auf S 35 Lowry micro B lt New Method gt J Copy J 0 J ease I 1016 check parameters standards measure sampies Wizard Der Wizard am oberen Rand der Anzeige f hrt Sie schrittweise durch de
87. n justieren Adjust device after opening Wenn das Ger t ge ffnet wird muss es neu justiert werden gt Ger t nicht ffnen Unterseite des Ger ts Allgemeine Sicherheitshinweise 16 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Produktbeschreibung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 3 Produktbeschreibung 3 1 Gesamtillustration 1 2 3 3 Abb 3 1 Vorder und Ruckansicht _ an an A U N Display 7 Netzanschluss K vettenschacht 8 USB Anschluss f r PC K vettenschachtabdeckung 9 Anschluss RS 232 Drucker USB Anschluss f r USB Stick und Drucker 10 Anschlussbuchse Ethernet Netzschalter 11 Bedienelemente Sicherungshalter Das Typenschild befindet an der Unterseite des Ger ts links hinten 3 2 Lieferumfang Anzahl Beschreibung 1 BioSpectrometer kinetic 1 Netzkabel 4 4 UVetten Original Eppendorf Kunststoffk vette einzeln verpackt PCR clean Protein free Bedienungsanleitung mehrsprachig 17 18 Produktbeschreibung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 3 3 Produkteigenschaften Das BioSpectrometer kinetic ist ein UV Vis Spektralphotometer fur die Messung von Fl ssigkeiten in Kuvetten im Wellenlangenbereich von 200 nm bis 830 nm Es ist fur den Einsatz im molekularbiologischen biotechnologischen biochemischen und zellbiologischen Bereich in Entwicklung und Forschung vorgesehen Sie
88. n Methodenablauf Cuveite 10 mm RR Hilfebox Bei jedem Schritt des Ablaufs erhalten Sie unten rechts in der Anzeige Hilfetexte Sm dir Softkeys Mit den Softkeys lt Back und Next gt en anni bewegen Sie sich im Wizard einen Methodenschritt EIER 8 vor oder zur ck Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off t paramet eat Page dn Abon mr 28 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 5 3 2 2 Parameter pr fen Lc check parameters measure standards measure samples Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint 5 3 2 3 Blank und Standards messen gt berpr fen Sie die Parametereinstellung Mit den Softkeys Page dn und Page up rufen Sie die Seiten der Parameterliste auf Mit Edit andern und speichern Sie Parameter Bei Auswertung ohne Standards z B DNA Messungen entf llt dieser Methodenschritt Standard 1 Linear regression not calculated Standard 2 250 Standard 3 Quadratical regression Conc 924 41 A 134 52 A 123 14 Standard 4 3 Coefficient of determination Standard 5 1000 R 0 9970 Standard 6 1 Messen Sie zunachst einen Leerwert Taste blank 2 Messen Sie der Reihe nach alle Standards Taste standard In der Anze
89. nen Extinktionen vor der Umrechnung in Probenergebnisse auf Messergebnisse mit einer Kuvette der Schichtdicke 10 mm korrigiert Diese Korrektur wird angewendet auf e Methoden mit Auswertung ber Faktor e Methoden der Gruppe Absorbance bei denen nur Extinktionswerte ausgegeben werden Die Korrektur wird nicht angewendet auf e Methoden mit Auswertung ber Standards da vorausgesetzt wird dass Standards und Proben in K vetten derselben Schichtdicke gemessen werden e Berechnungen mit Division Methode Division Methodengruppe Dual wavelength sowie Berechnung von Ratios wie A26 A2g0 bei Nukleins uremessungen 10 A 1 5 x Cuv AxxX korrCuv rechnerisch korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Cuv Schichtdicke der K vette Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic 107 Deutsch DE 12 2 Auswertung mit Faktor oder Standard C AxF C berechnete Konzentration A Extinktion F Faktor Der Faktor ist in der Parameterliste programmiert und kann ver ndert werden Er bezieht sich immer auf die K vettenschichtdicke 10 mm Wenn Sie den Parameter Cuvette ndern wird die nderung vom Ger t bei der Ergebnisberechnung ber cksichtigt Sie m ssen den Faktor f r die Auswertung also nicht ndern Wenn Sie die Konzentrationseinheit ndern m ssen Sie dagegen darauf achten dass der Faktor an die gew hlte Einheit angepasst ist Der
90. nforderungen der e e ce aufgef hrten EG Richtlinien und Normen Bei einer nicht mit uns abgestimmten nderung des 6 ce ce ce Produktes oder einer nicht bestimmungsgem en Anwendung verliert diese Erkl rung ihre G ltigkeit ce ce c The product named below fulfills the relevant fundamental requirements of ce 6 ce ce the EC directives and standards listed In the case of unauthorized modifications to the product ce C 73 or an unintended use this declaration becomes invalid ce ce Produktbezeichnung Product name c e Eppendorf BioSpe 2004 108 EG EN 2011 65 EU ce c c Vorstand Board of Management Projektmanagement Project Management 07 08 2013 ce ce Hamburg Date ce e Eppendorf AG Barkhausenweg 1 22339 Hamburg Germany ce lt te C 4 ern ce ce ac Te ee rr 6 A ce vi ce Car ce Ce Ye Ce Tec et a gt C 0 e CS ce ce 2 CE CE 001508350902 CE Te CS o E Cn ct ce Ve ce e CS ce Sun Evaluate Your Manual Give us your feedback www eppendorf com manualfeedback Your local distributor www eppendorf com contact Eppendorf AG 22331 Hamburg Germany eppendorf eppendorf com www eppendorf com eppendorf
91. ng der zuletzt gespeicherten Standardauswertung m glich measure samples Proben messen process results Nur bei einigen Methoden Ergebnisse nachbearbeiten z B Scan Graphen zoomen print amp export Datenpakete f r Druck oder Export der Daten zusammenstellen Mit den Softkeys Next gt und lt Back navigieren Sie zwischen den Methodenschritten Mit Abort und Finish k nnen sie den Messablauf abbrechen bzw beenden Der Name dieses Softkeys wechselt nach der ersten Probenmessung von Abort auf Finish 6 4 1 check parameters Cuvette 10mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Beca piacot 0 Autoprint off Edit paramete Edit Page Page dn Abort lt Back Next gt Cuvette 10mm Y Page 1 2 Wavelength 1595 nm Unit pg mL v Calculation Standard 7 Standards amp Replicates ia Bacim placas 2 Pino Autoprint G Number of repeat Jl Paos un Page dn Save Save As Cancel Eich check parameters save as OFavorites MyMethods Enter the name and storage location Method name Bradford 1 Target 0 00 v Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 47 Deutsch DE Softkeys e Page dn und Page up Zwischen den 1 bis 3 Parameterseiten wechseln Edit In den Editiermodus f r Parameter wechseln Editiermodus f r Parameter Ge nderte Parameter werden mit einem roten Stern markiert solange d
92. nung benutzt Two point Nach Ablauf des Delay wird ein Messpunkt nach Ablauf der Messzeit ein zweiter Messpunkt genommen Aus Extinktions und Zeitdifferenz wird AA min berechnet 4 A A min f t Ay t Extinktion und Zeitpunkt f r den ersten Messpunkt Az 12 Extinktion und Zeitpunkt f r den zweiten Messpunkt Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic 115 Deutsch DE Linear regression Nach Ablauf des Delay werden in festen Zeitintervallen Messpunkte von Beginn bis zum Ende der Messzeit aufgenommen Uber die Messpunkte im Extinktions Zeit Diagramm wird eine lineare Regression durchgefuhrt Ergebnis Extinktionswert in AA min 12 8 2 Reagenzleerwert Bei den Methoden der Gruppe Advanced kinetics kann die Messung eines Reagenzleerwerts in den Parametern programmiert werden Primare Anwendung Kompensation einer Reagenzdrift bei dem Messverfahren Lineare Regression Der Reagenzleerwert enthalt das Reagenz und demineralisiertes Wasser statt Probe und wird nach demselben Messverfahren wie die Probe gemessen Er wird zu Beginn der Probenserie gemessen das Extinktionsergebnis wird von dem Extinktionsergebnis der Probe vor der Auswertung subtrahiert A A A RB corr RB ARB corr korrigiertes Extinktionsergebnis in A oder AA min der Probe A gemessenes Extinktionsergebnis in A oder AA min der Probe Arg Extinktionsergebnis in A oder AA min des Reagenzleerwerts i Wenn im Methodenschritt
93. obligatorisch und auch w hrend einer Messreihe jederzeit m glich Die Blank Messung sollte idealerweise alle Einflussm glichkeiten auf den Extinktionswert der Messl sung kompensieren k nnen Der Blank sollte daher mit dem auch f r die Probenmessung benutzten Puffer sowie in derselben K vette wie der Probenwert gemessen werden es sei denn die f r Blank und Probenmessung benutzten K vetten sind optisch gegeneinander abgeglichen haben also denselben Extinktionswert bei der Messwellenl nge 12 1 2 Background Korrektur Hauptanwendung Partielle Korrektur von Verf lschungen der Extinktion bei Nukleins uremessungen durch Tr bungen in der Messl sung Beispielsweise wird die Extinktion bei 320 nm die bei reinen Nukleins uren etwa bei 0 A liegen sollte von der Extinktion bei 260 nm der Messwellenl nge f r Nukleins uren subtrahiert A A A XXX corrBkgr XXX Bkgr AXxx korrBkgr rechnerisch korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm ABkgr gemessene Extinktion bei der Background Wellenlange 106 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 12 1 3 Kuvettenkorrektur Samtliche Extinktionswerte die in Ergebnisberechnungen eingehen sind auf die Kuvetten Schichtdicke 10 mm normiert Wird eine Kuvette mit einer anderen Schichtdicke benutzt muss diese Schichtdicke im Parameter Cuvette definiert werden In diesem Fall werden die gemesse
94. oder RNA sind vorprogrammiert Die Parameter unterscheiden sich durch den Faktor Vorprogrammierte Methode fur Mikroliterkuvetten Messung von DNA in Probenvolumen im Mikroliterbereich mit Lichtweg 1 mm mit Mikroliterk vetten wie Eppendorf uCuvette G1 0 oder Hellma TrayCell Zusatzinformationen zur Reinheit der gemessenen Nukleins ure Ratio A260 A280 Ratio A260 A230 Extinktions Wellenl ngen Spektrum der Nukleins ure Extinktion der Background Wellenl nge voreingestellt 320 nm die Extinktion der reinen Nukleins ure sollte hier ann hernd Null betragen Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Umrechnung der Konzentrationen in molare Konzentrationen sowie nach Eingabe des Probenvolumens in Nukleins uremengen m glich Methodenschritt process results Proteins direct UV Konzentrationsbestimmung von Proteinen durch Messung bei 280 nm und Auswertung ber Faktor oder Standard Vorprogrammierte Methoden zur direkten Ausgabe der Extinktionen als Ergebnis Protein A 280 sowie zur Auswertung ber Albumin spezifischen Extinktionskoeffizienten Albumin A 280 Vorprogrammierte Methode f r Mikroliterk vetten Messung von Protein in Probenvolumen im Mikroliterbereich mit Lichtweg 1 mm mit Mikroliterk vetten wie Eppendorf uCuvette G1 0 oder Hellma TrayCell Zusatzinformationen zur Reinheit des gemessenen Proteins Extinktion der Background Wellenl nge voreingestellt 320 nm die Extinktion des reinen Prot
95. offmarkierten Biomolek len M mol L molar 00600 Optische Dichte bei der Wellenlange 600 nm RNA Ribonucleic acid Ribonukleins ure RNS ssDNA single stranded DNA einzelstr ngige DNS UV Ultraviolette Strahlung Vis Visible light sichtbares Licht VK Variationskoeffizient Standardabweichung Mittelwert in Prozent 9 Anwendungshinweise 10 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioSpectrometer kinetic 11 Deutsch DE 2 Allgemeine Sicherheitshinweise 2 1 Bestimmungsgem er Gebrauch Einsatzgebiet des BioSpectrometer kinetic ist das Forschungslabor in Molekularbiologie Biochemie und Zellbiologie Das BioSpectrometer kinetic ist ausschlie lich f r die Verwendung in Innenr umen bestimmt Die l nderspezifischen Sicherheitsanforderungen f r den Betrieb elektrischer Ger te im Laborbereich m ssen eingehalten werden Das BioSpectrometer kinetic dient zur photometrischen Konzentrationsbestimmung von Analyten in Fl ssigkeiten und zur Aufnahme von Extinktions Wellenl ngen Spektren in K vetten Verwenden Sie ausschlie lich Eppendorf Zubeh r oder von Eppendorf empfohlenes Zubeh r 2 2 Anforderung an den Anwender Ger t und Zubeh r d rfen nur von ausgebildetem Fachpersonal bedient werden Lesen Sie vor der Anwendung die Bedienungsanleitung und die Gebrauchsanweisung des Zubeh rs sorgf ltig und machen Sie sich mit der Arbeitsweise des Ger ts vertra
96. olhaltige Desinfektionsmittel 4 Wischen Sie die Oberfl chen mit einem Tuch ab welches Sie mit Desinfektionsmittel befeuchtet haben 5 Wenn zur Desinfektion die K vettenschachtabdeckung ausgebaut werden muss verfahren Sie zum Ausbau und Zusammenbau wie beschrieben siehe K vettenschachtabdeckung reinigen auf 5 80 6 Die demontierte K vettenschachtabdeckung k nnen Sie mittels Spr hdesinfektion desinfizieren 8 3 Ger t berpr fen Voraussetzungen e Umgebungsbedingungen einhalten siehe Umgebungsbedingungen auf S 101 Pr fung bei ca 20 C durchf hren Temperaturschwankungen vermeiden z B durch ge ffnete Fenster Filter nur kurzfristig dem Filterkasten entnehmen und vor Verschmutzung oder Besch digung der Filteroberfl chen sch tzen Filter vor Staub Hitze Fl ssigkeit und aggressiven D mpfen sch tzen Filter ist so eingesetzt dass der Aufkleber mit der Filterbezeichnung zum Detektor hin zeigt Bei berpr fung der Spektrometereinheit Aufkleber zeigt nach vorn K vettenschacht ist frei von Verschmutzungen 8 3 1 Spektrometereinheit berpr fen Zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit und der Wellenl ngenrichtigkeit wird von Eppendorf ein Filtersatz BioSpectrometer Referenzfiltersatz angeboten Der Satz enth lt ein Leerwertfilter AO und drei Filter A1 A2 und A3 zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit sowie 3 Filter zur berpr fung der Wellenl ngenrichtigkeit im Bereich von 260 nm bis 8
97. ometer kinetic 55 Deutsch DE Methodengruppe Dye labels Ergebnisanzeige ssDNA Cy 3 Icheck parameters measure samples process results ssDNA Cy 3 2010 11 24 14 37 18 Abs A 02 0 440 ID 0 350 1 O Orom 0 260 0 269 Aro I 0 170 Dye 1 0 251pMoly l fi 0 080 N Measure bla 20 360 440 520 soo am A 260 Abs 0 269 a gt Dilution Edit ID Data 1 lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnisse mit Extinktion bei der Messwellenlange des Biomolekuls Falls in den Parametern aktiviert Scan Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Extinktionswerte fur 280 nm und 230 nm sowie fur die Messwellenlange des Farbstoffs FOl Wert Extinktionswerte f r die Background Wellenl ngen Bei der Messung von Farbstoff markierten Proteinen werden Ratios und FOI nicht angezeigt Bacterial density OD 600 check parameters measure samples Sm JAULAS AA OD 600 2010 07 02 14 20 39 0 846 x 0 846 Axo 01 ID a vi Dilution Edit 1D Finish lt Back Next gt Ergebnisanzeige Berechnetes Ergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls in den Parametern aktiviert Scan
98. ometers Hierzu ben tigen Sie einen Filtersatz von Eppendorf M glichkeit zur berpr fung der Temperiereinheit Info Open Source Lizenzen und Informationen zu eingetragenen Warenzeichen 70 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 7 1 1 Results Memory Functions Main Groups Sub Groups Functions dsDNA parameters ample results dsDNA 2010 07 09 15 07 35 B dsDNA 2010 07 08 11 02 35 Cuvette 10 mm Page 1 2 Unit pg mL Molar Unit pmol mL Factor 50 Decimal places 1 A260 A280 on Aha e Autoprint off Pago up oF Page dn Wahlen Sie in der rechten Spalte die Methode aus f r die Sie gespeicherte Ergebnisse aufrufen m chten gt Best tigen Sie mit enter gt Wahlen Sie die gew nschte Messreihe mit den Cursor Tasten gt Best tigen Sie mit enter Wie im Methodenablauf k nnen Sie auch hier der Reihe nach durch die Anzeigen der Parameter der Standards der Probenergebnisse und zuletzt der Datenpakete f r Druck und Export wechseln Die Belegung der Softkeys entspricht der Belegung im Methodenablauf dsDNA parameters sample results DNA 2012 06 29 155728 Data packets Samples Results print amp export Data Graph data not for printing Method GParameters __Print_ _Export_ Samples Finish lt Back Nox gt 7 1 2 General Method Parameters Functions Main Group
99. ort Samples Finish lt Back Next gt Exportl Export starten e Sample Einzelne Probenergebnisse ausw hlen Datenpakete ausw hlen Results Prim re Ergebnisdaten nicht ausw hlbar da sie immer bertragen werden Data Zus tzliche Ergebnisdaten die in den Ergebnisanzeigen w hrend der Messung mit dem Softkey Datal angezeigt werden Graph Extinktions Wellenl ngen Spektrum Nur bei Kinetikmethoden mit Messverfahren Lineare Regression Extinktions Zeit Graph Graph data Die nummerischen Basisdaten f r den Graphen export only Nur f r den Export nicht f r den Ausdruck verf gbar Parameters Methodenparameter Standards Results Ergebnisdaten der Standardauswertung Standards Graph Nur bei Standardauswertungen mit mehreren Standards Extinktions Konzentrations Graph In Abh ngigkeit von der Methode und von der Parametereinstellung werden nur die jeweils verf gbaren Datenpakete angeboten Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 65 Deutsch DE Einzelne Probenergebnisse auswahlen nn Dr cken Sie den Softkey Samples um die Probenauswahl aufzurufen Sample selection 01 0 000 Azs ae i 01 0 33mg mL Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und 02 1 34mg mL bestatigen Sie mit enter 03 0 33mg mL 04 0 89mg mL 05 0 11mg mL Softkeys Select all Alle Proben ausw hlen e De Sel all Auswahl zur cksetzen Print Export
100. otometrische Eigenschaften auf 5 102 sondern auch vom K vettenleerwert abh ngig Ultramikrok vetten mit kleiner Blende wie TrayCell Hellma k nnen einen K vettenleerwert bis ca A 1 besitzen Um diesen Betrag wird der verf gbare photometrische Messbereich reduziert Den K vettenleerwert k nnen Sie absch tzen wenn Sie die mit demineralisiertem Wasser gef llte K vette als Probe gegen den leeren K vettenschacht als Blank messen Der K vettenleerwert der Eppendorf uCuvette G1 0 ist zu vernachl ssigen nahe A 0 Entfernen Sie nach der Messung die Messl sung vollst ndig bevor Sie die n chste Messl sung einf llen um Verschleppung zu minimieren Wenn aufgrund von hohen Konzentrationsunterschieden Verschleppung von einer Probe zur n chsten Probe zu erwarten ist sp len Sie die K vette zwischen den Messungen Bei Temperaturunterschieden zwischen Lampe und Umgebung kann photometrische Drift auftreten Bringen Sie daher ein Ger t das aus einer k lteren Umgebung kommt zun chst auf Umgebungstemperatur Vermeiden Sie schnelle Temperaturwechsel F hren Sie bei l ngeren Messreihen oder bei Messungen nach einem l ngeren Zeitraum eine neue Leerwertmessung durch 32 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 5 3 4 Hinweise zum Arbeiten mit K vettentemperierung Die Temperierung wird ber eine Messung am K vettenhalter geregelt Die Temperatur in der Messl sung kann von der Temperatur am K vettenhalter a
101. perierung Wenn die in den 1 1 984 Parametern eingestellte 0 900 Temperatur erreicht ist und die an A Anzeige von Tempering auf Ready wechselt k nnen Sie in die 0 300 m Messung wechseln 0 000 5 tm 600 ps ce 10 08 09 19 OE DON Wahrend der Messung t 00 00 Abs 0 036 a TT 7 YT Sie k nnen die Messung mit dem Edit ID Data Finish lt Back Next gt i Softkey Stop vorzeitig abbrechen Ergebnisanzeige e Graph mit Extinktions Zeit Anzeige und eingezeichneter Regressionsgerade e Aus der linearen Regression errechneter Wert f r A min Zusatzdaten Softkey Data e Extinktions Zeit Wertepaare f r den ersten und den letzten Messpunkt G teparameter f r lineare Regression Navigieren Sie zwischen den Messpunkten im Graphen mit und e ndern Sie bei Bedarf im Methodenschritt process results das Zeitfenster f r die Auswertung mit linearer Regression Multi A aye ee Gosaria Ergebnisanzeige Multi A 2010 07 09 16 08 45 e Extinktionen bei den ao Messwellenlangen ID g Zusatzdaten Softkey Data 1 dioii e Nur bei Verd nnung oder anderer A2 0 735 Ax Kuvette als 10 mm a3 Te Extinktionswerte vor der 4 0 006 Axo Umrechnung and Vi J edit io J VL Finish lt Back Next gt Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 53 Methodengruppe Ergebnisanzeige Scan S
102. process results das Zeitfenster f r die Kinetikauswertung mit linearer Regression verk rzt wird wird das k rzere Messfenster automatisch auch f r die Berechnung des Reagenzleerwerts benutzt der in die Berechnung dieses Probenergebnisses einbezogen wird Der Reagenzleerwert wird nur f r die Berechnung dieses Probenergebnisses also noch einmal neu berechnet F r die Berechnung der anderen Probenergebnisse wird weiterhin das Reagenzleerwertergebnis benutzt das auf Basis des urspr nglich benutzten Zeitfensters errechnet wurde herangezogen Bei Auswertung der Kinetikmethode mit Standards steht die Messung eines Reagenzleerwerts nicht zur Verf gung Hier kann alternativ der Reagenzleerwert als der erste Standard Konzentration null definiert werden Auswerteverfahren 116 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 13 Bestellinformationen Bestellinformationen Eppendorf BioSpectrometer kinetic 117 Deutsch DE Best Nr International 6135 000 009 Best Nr Nordamerika Beschreibung Eppendorf BioSpectrometer basic 230 V 50 60 Hz Netzstecker Europa weitere Netzanschlussvarianten erhaltlich 6135 000 017 6135000017 120 V 50 60 Hz Netzstecker Nordamerika Eppendorf BioSpectrometer kinetic 6136 000 002 230 V 50 60 Hz Netzstecker Europa weitere Netzanschlussvarianten erhaltlich 6136 000 010 6136000010 120 V 50 60 Hz Netzstecker Nordamerika BioSpectrometer Referenzfilt
103. qualification documentation Die Giltigkeitszertifikate sind Teil der Qualifizierungsdokumentation Please protect against dust heat cold and liquid The limits are valid for max 2 years Bitte vor Staub Hitze K lte und Fl ssigkeiten sch tzen Signature Die Grenzwerte gelten f r max 2 Jahre Unterschrift Abb 8 1 Deckel Innenseite des Filterkastens Muster 8 3 1 1 Photometrische Richtigkeit berpr fen Functions Main Groups Sub Groups Functions y B Spectrometer unit thod p Temperature unit OA f brary Perform selftest t Device calibration into A IOO J JO Vene UC spectrometer Unit 260 nm 280 nm 800 nm Check photometric accuracy Device Calibration Spectrometer unit Device Calbration Check photometric accuracy ID Insert filter AO and press blank EEE EEE J Abort lt Back Next gt Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 83 Deutsch DE Wahlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Spectrometer unit und bestatigen Sie mit enter Wahlen Sie aus ob Sie die Wellenlangenrichtigkeit oder die Photometrische Richtigkeit berpr fen wollen und best tigen Sie mit enter Wechseln Sie mit Next gt zur Messung Folgen Sie den Anweisungen in der Ger teanzeige und messen Sie zun chst das Leerwertfilter AO und danach das erste Pr ffilter Al Das Gerat
104. rometer basic erkannt Die Kinetikmethoden werden daher nicht angezeigt gt Ger t aus und wieder einschalten Tritt der Fehler erneut auf Technischen Service benachrichtigen Die Temperierung ist defekt Bitte programmieren Sie die Methode ohne Temperierung oder brechen Sie die Die Temperierung des Ger tes ist defekt gt Wenden Sie sich an den Eppendorf Service Vor Reparatur der Temperierung verwenden Sie nur Methoden f r die keine Temperierung programmiert ist Methode ab Die Bei Kinetikmethoden mit Temperierung Stellen sie sicher dass die Umgebungstemper Die vom Ger t gemessene Umgebungstemperatur in dem atur ist zu hoch Umgebungstemperatur liegt oberhalb des spezifizierten Bereichs Bereich liegt der f r den Betrieb des Ger tes spezifiziert ist Lineare Regression konnte nicht auf alle Messungen angewendet werden Bei Kinetikmethoden wurde im Methodenschritt process results das Zeitfenster f r die Auswertung mit linearer Regression ver ndert und die Ver nderung sollte auf alle Messergebnisse ausgedehnt werden Die erforderliche Anzahl der Messpunkte war aber bei mindestens einem Probenergebnis nicht vorhanden 9 Ver ndern Sie im Methodenschritt process results das Zeitfenster f r die Auswertung mit linearer Regression nur f r die Proben f r die ausreichend Messpunkte vorhanden sind 9 3 Ergebniskennzeichnungen Problembehebung Eppendorf
105. rsacht werden wird jede Gew hrleistung und Haftung durch Eppendorf ausgeschlossen 9 Verwenden Sie ausschlie lich von Eppendorf empfohlenes Zubeh r und Original Ersatzteile 2 3 2 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioSpectrometer kinetic 13 Deutsch DE Gerateschaden ACHTUNG Schaden durch aggressive Chemikalien 9 Verwenden Sie am Gerat und Zubehor keine aggressiven Chemikalien wie z B starke und schwache Basen starke Sauren Aceton Formaldehyd halogenierte Kohlenwasserstoffe oder Phenol gt Reinigen Sie das Ger t bei Verunreinigungen durch aggressive Chemikalien umgehend mit einem milden Reinigungsmittel ACHTUNG Ger teschaden durch Begasung mit aggressiven Chemikalien gt F hren Sie am Ger t keine Desinfektion durch Begasung durch ACHTUNG Korrosion durch aggressive Reinigungs und Desinfektionsmittel 9 Verwenden Sie weder tzende Reinigungsmittel noch aggressive L sungs oder schleifende Poliermittel gt Inkubieren Sie das Zubeh r nicht l ngere Zeit in aggressiven Reinigungs oder Desinfektionsmitteln ACHTUNG Sch den und Fehlmessungen durch Kondenswasser Bei hoher Luftfeuchtigkeit kann sich an einer K vette mit deutlich geringerer Temperatur als Umgebungstemperatur Kondenswasser bilden Das Kondenswasser kann Sch den an der Optik sowie falsche Messergebnisse verursachen 9 Setzen Sie keine K vetten in den K vettenschacht ein deren Temperatur deutlich unter der Umgebungs
106. rteverfahren f r die Dye Methoden 0 0 0 0 112 12 6 1 Berechnung des Faktors f r den Farbstoff aus dem Extinktionskoeffizienten 112 12 6 2 Berechnung der FOI 0 0 re 113 12 6 3 Umrechnung in Farbstoffmengen 0 2 2 cee ee nenn 113 12 7 Dual wavelength sken er are ee ices dee nee meer EA 0 114 12 87 5833 3 37 115 ORR 114 12 8 1 2 0 114 12 8 2 Reagenzleerwert 2 115 13 Bestellinform tionen a te eee eed ee es 117 Zertifikate 4502 ek ae re eT LT CES wn a EC EE CS 119 6 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Anwendungshinweise Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 1 Anwendungshinweise 1 1 Anwendung dieser Anleitung gt Lesen Sie diese Bedienungsanleitung vollst ndig bevor Sie das Ger t das erste Mal in Betrieb nehmen Beachten Sie ggf die Gebrauchsanweisungen des Zubeh rs Diese Bedienungsanleitung ist Teil des Produkts Bewahren Sie sie gut erreichbar auf F gen Sie diese Bedienungsanleitung bei Weitergabe des Ger ts an Dritte bei gt Die aktuelle Version der Bedienungsanleitung in den verf gbaren Sprachen finden Sie auf unserer Internetseite ww
107. s Ergebnis liegt au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrat ionen Bei Methoden mit Auswertung ber Standardkurven nichtlineare Auswerteverfahren Das Probenergebnis liegt um bis zu 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrationen 9 Messergebnis akzeptieren oder Probe unter Bedingungen neu messen bei denen das Ergebnis im Bereich der Standardkonzentrationen liegt Probe verd nnen oder Standardkonzentrationen ver ndern und neu messen 96 Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Symptom Meldung Das Bestimmtheitsma ist lt 0 8 Mogliche Ursache e Bei Methoden mit Auswertung von Standardreihen ber Regressionsverfahren Das Bestimmtheitsma f r die Regressionsauswertung deutet auf eine erhebliche Abweichung der Messpunkte von der Regressionsgeraden hin Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs Abhilfe 9 Ergebnis der Standardauswertung akzeptieren oder Standards neu messen gt Auf klare Messl sungen achten Das Bestimmtheitsma f r die Regressionsauswer tung der Standardreihe ist lt 0 8 Bei Methoden mit Auswertung von Standardreihen uber Regressionsverfahren Warnung erscheint nach Messungen von Proben wenn die Regressionsauswertung fur die Standardreihe nichtlinear war die Standardauswertung aber vom Anwender akzeptiert wurde 9 Probenergebnisse unter dem genannten Vorb
108. s Sub Groups Functions Proteins Nucleic acids Ce I e General Method Parameter Dye name 5 Wavelength 650 nm Ext coeff 250000 L mol cm pMol pL Corr A260 Corr A280 0 05 Factor Edit J New I Delete I I OK Softkeys e Edit Ausgew hlte Parametergruppe editieren e New Neue Parametergruppe erstellen e Delete Ausgew hlte Parametergruppe l schen OK In die Funktionsauswahl zur ckkehren Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic 71 Deutsch DE gt Wenn Sie Ergebnisse drucken oder exportieren m chten w hlen Sie die Datenpakete aus Der Ablauf f r Druck und Export sowie die Bedeutung der Funktionstasten entspricht dem Methoden Schritt print amp export gt Wahlen Sie in der rechten Spalte die Parametergruppe aus f r die Sie Parameter editieren m chten gt Best tigen Sie mit enter In diesem Beispiel sind Parametergruppen f r verschiedene Dyes Farbstoffkomponenten f r die Dye Methoden zusammengefasst und jeweils unter einem Namen abgelegt Unter diesem Namen kann die gew nschte Parametergruppe bei der Editierung einer Dye Methode in das Methodenprogramm importiert werden Display links Name des Dyes W hlen Sie mit O und rechts zugeh rige Parameter 72 Funktionen Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE gt Um eine Parametergruppe
109. s auf die Richtigkeit der Biomolek lmessung ist m glich Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Zusatzinformationen zur Reinheit der gemessenen Stoffe Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Ratio Werte nur f r Nukleins uren Extinktions Wellenl ngen Spektrum Bei der Methodenprogrammierung werden durch einfache Auswahl des Biomolek ls sowie des Farbstoffs aus vorgegebenen Listen verschiedene zugeh rige Parameter wie Messwellenl ngen und Auswertefaktoren importiert Die Definition dieser Parameter erfolgt separat in den Funktionen der Gruppe Gen method param Verschiedene Nukleins uren Proteine und Farbstoffe sind in Gen method param vorprogrammiert Sie k nnen weitere Nukleins uren Proteine und Farbstoffe hinzuf gen Nur f r markierte Nukleins uren Umrechnung der Konzentrationen in molare Konzentrationen sowie nach Eingabe des Probenvolumens in Nukleins ure und Farbstoffmengen m glich Methodenschritt process results Bacterial density e Tr bungsmessung zur Bestimmung der Bakteriendichte Messung bei 600 nm ist bereits vorprogrammiert Zusatzinformationen Extinktions Wellenl ngen Spektrum 6 2 3 Methodengruppe Basic Factor Standard Messung bei einer Wellenl nge und Auswertung ber Faktor oder Standard e Methoden f r die Auswertung ber Faktor und Standard sind vorprogrammiert Calibration curve Messung bei einer Wellenl nge und nachfolgende Auswertung mit einer R
110. sch DE 97 Symptom Meldung Die Kinetik ist fur mindestens einen Standard nichtlinear Bestimmtheitsma ist lt 0 95 Mogliche Ursache e Kinetikverfahren mit Messverfahren lineare Regression und Auswerteverfahren uber Standards Das Bestimmtheitsma fur die Regressionsauswertung mindestens einer Standardmessung deutet auf eine erhebliche Abweichung der Messpunkte von der Regressionsgeraden hin Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs Zu hohe Aktivitatskonzentration des Enzyms Abhilfe 9 Messergebnis akzeptieren oder Standard neu messen Vor der Neumessung die Ursache fur die Nichtlinearitat bewerten und ber cksichtigen z B Messl sung durch Zentrifugation kl ren oder Standard mit niedriger Konzentration benutzen Die Temperatur lag w hrend der Kinetikmessung au erhalb des zul ssigen Bereichs Umgebungstemperatur au erhalb des spezifizierten Bereichs Temperierung defekt gt Probe bei Umgebungstemperatur innerhalb des spezifizierten Bereichs 15 C bis 35 C messen Wenn die Warnung dennoch auftritt wenden Sie sich an den Eppendorf Service Extinktion bei der Messwellenl nge ist zu hoch Tr bungen in der Messl sung Optische Fl chen der K vette verschmutzt K vette in falscher Orientierung in den K vettenschacht gesteckt Zu hohe Extinktion der Messl sung gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen
111. schlichtanteil lt 0 05 11 5 Temperierung Einstellbarer Temperaturbereich 20 C bis 42 C Kleinste Schrittweite 0 1 C Maximale Temperaturunsicherheit bezogen auf die Temperatur in der Probe siehe Tab 5 1 auf S 32 Systematische Messabweichung der Temperatur 0 2 C bei 25 C bis 37 C Zuf llige Messabweichung der Temperatur 0 15 C bei 25 C bis 37 C Technische Daten Eppendorf BioSpectrometer kinetic 103 Deutsch DE 11 6 Weitere technische Parameter Kuvettenmaterial Fur Messungen im UV Quarzglas oder UV transparenter Kunststoff UVette von Eppendorf 220 nm bis 1600 nm Fur Messungen im sichtbaren Bereich Glas oder Kunststoff Kuvettenschacht 12 5 mm x 12 5 mm temperiert Gesamthohe der Kuvetten Mind 36 mm Hohe des Lichtstrahls in der 8 5 mm K vette Tastatur 22 Folientasten 6 Folientasten als Softkeys Ergebnisausgabe Extinktion Konzentration Scan Extinktions Wellenl ngen Spektrum Methodenabh ngig weitere Zusatzdaten Ratio FOI Background Extinktionen Display VGA TFT Display 5 7 Sprachen f r Bedienerf hrung Englisch Franz sisch Spanisch Italienisch Deutsch Schnittstellen USB Master F r USB Stick und Thermodrucker DPU S445 USB Slave F r Verbindung mit einem PC Serielle Schnittstelle RS 232 F r Thermodrucker DPU 414 Ethernet Schnittstelle RJ45 F r Verbindung mit einem Netzwer
112. sind in Haupt und Untergruppen geordnet Method Selection dsDNA 1mm ssDNA RNA Oligo lt New Method Die wichtigsten Methoden der Molekularbiologie Sie k nnen die Parameter zwar ver ndern dann aber nur unter neuem Methodennamen abspeichern Copy Schreibgesch tzte Methoden E3 Nicht schreibgesch tzte Methoden Sie k nnen die Parameter beliebig ver ndern und nach Speichern direkt mit der Messung beginnen Templates fur neue Methoden Jede Methodengruppe enthalt ein Template das zur Erleichterung der Programmierung neuer Methoden bereits mit kompletten Parametersatzen vorprogrammiert ist Die Parameter konnen beliebig verandert und unter neuem Namen abgespeichert werden Um eine Methode aufzurufen wahlen Sie mit den Cursor Tasten zunachst die Hauptgruppe Untergruppe und die Methode aus Best tigen Sie jeweils mit enter Tab 6 1 Photometrische Methoden Absorbance Methoden f r schnelle einfache Extinktionsmessungen ohne weitere Auswertungen Routine H ufig genutzte Methoden der Molekularbiologie Die Methoden sind fest vorprogrammiert Eine nderung von Parametern ist aber mit Speichern unter neuem Namen m glich Basic Methoden f r die Auswertung von Extinktionsmessungen mit Faktor Standard oder Standardkurve gerade Methoden Template f r die Messung und Auswertung von Kinetiken Advanced Methoden
113. ssen Sie das angemeldete Datenpaket nur ffnen e Die bertragung von Daten auf den USB Stick oder an den PC starten Sie nach Abschluss der Messreihe im Methodenschritt print amp export siehe print amp export auf S 64 Installation 22 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 5 Bedienung 5 1 Ubersicht Bedienelemente Abb 5 1 Bedienelemente des BioSpectrometer kinetic 23 24 Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Taste Funktion Tastenblock Zahlen und Text eingeben Tasten 1 bis 9 sowie 0 Bei Texteingabe konnen Sie neben Ziffern auch Buchstaben und Sonderzeichen durch mehrmaliges Drucken der Taste eingeben Alternativ wechseln Sie mit Keyboard zu einer eingeblendeten Tastatur Au erhalb von Eingabefeldern Methodenauswahl aufrufen Au erhalb von Eingabefeldern Funktionsauswahl aufrufen 6 6 5 66 Softkey Funktionen anwahlen Die Belegung der Taste wechselt mit dem Software Dialog Die aktuelle Funktion wird im Display direkt ber der Taste angezeigt Cursor nach links rechts oben unten bewegen Navigieren zwischen Eingabefeldern e Cursor Tasten und innerhalb eines Eingabefeldes Innerhalb der Zeichenfolge navigieren Tasten und in einer Ergebnisanzeige Zwischen den Probenergebnissen der Messreihe navigieren e Tasten und innerhalb
114. sung Eine Intensit t an einem eine Haupt oder Neben oder Scanwellenl nge beeinflussenden Pixel ist zu niedrig e Die fur die Blank Messung benutzte Leerwertl sung hat eine zu hohe Extinktion Falsche oder tr be Leerwertl sung e Bei Scans Wellenl ngenbereich zu gro da die Probe in einem Teil des Wellenl ngenbereichs sehr stark absorbiert 9 Leerwertl sung berpr fen und Blank ggf neu messen gt Bei Scans Wellenl ngenbereich an Spektrum der Probe anpassen Der eingegebene Name ist nicht g ltig Fehler bei der Eingabe von Namen Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten 9 Siehe Information in der Hilfebox Problembehebung Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Symptom Meldung Es existiert bereits eine Methode oder ein Ordner Dye Protein Nucleic acid Unit mit diesem Namen Mogliche Ursache e Der Name unter dem die Methode abgespeichert werden soll wurde bereits f r eine andere Methode in demselben Ordner verwendet e Die Meldung erscheint auch wenn bereits vergebene Namen f r einen Ordner oder unter General Method Parameter f r eine Nukleins ure Farbstoff Protein Konzentrationseinheit editiert wurden Abhilfe gt Anderen Namen vergeben Folgende Parameterwerte sind in General Method Parameter nicht definiert Beim ffnen einer Methode
115. t fehlgeschlagen Wenn sich dieser Fehler nicht beheben l sst siehe Fehlermeldungen auf 5 91 wenden Sie sich an den Eppendorf Service 8 4 Sicherungen ersetzen GEFAHR Stromschlag A 9 Schalten Sie das Ger t aus und ziehen Sie den Netzstecker bevor Sie mit der Wartung bzw Reinigung beginnen Der Sicherungshalter befindet sich zwischen der Netzanschlussbuchse und dem Netzschalter Ziehen Sie den Netzstecker Dr cken Sie die Kunststofffedern 1 oben und unten zusammen und ziehen Sie den Sicherungshalter 2 vollst ndig heraus Ersetzen Sie defekte Sicherungen und setzen Sie den Sicherungshalter wieder ein Achten Sie auf die korrekte Position der F hrungsschiene 3 Instandhaltung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 87 Deutsch DE 8 5 Dekontamination vor Versand Wenn Sie das Ger t im Reparaturfall zum autorisierten Technischen Service oder im Entsorgungsfall zu Ihrem Vertragsh ndler schicken beachten Sie Folgendes WARNUNG Gesundheitsgefahr durch kontaminiertes Ger t A 1 Beachten Sie die Hinweise der Dekontaminationsbescheinigung Sie finden diese als PDF Datei auf unserer Internetseite www eppendorf com decontamination 2 Dekontaminieren Sie alle Teile die Sie versenden 3 Legen Sie der Sendung die vollst ndig ausgef llte Dekontaminationsbescheinigung bei Instandhaltung 88 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 9 Problembehebung 9 1 Allgemeine
116. temperatur liegt 9 Temperieren Sie die K vette nicht dauerhaft deutlich unterhalb der Umgebungstemperatur Beachten Sie gegebenfalls den vorliegenden Taupunkt ACHTUNG Sch den an elektronischen Bauteilen durch Kondensatbildung Nach dem Transport des Ger ts von einer k hlen in eine w rmere Umgebung kann sich im Ger t Kondensat bilden gt Warten Sie nach dem Aufstellen des Ger ts mindestens 3 h Schlie en Sie das Ger t erst danach an das Stromnetz an ACHTUNG Beeintr chtigung der Funktion durch mechanische Sch den gt Stellen Sie nach einer mechanischen Besch digung des Ger tes durch eine berpr fung sicher dass die Mess und Auswertefunktionen des Ger tes korrekt ablaufen 14 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf Bi Deutsch DE oSpectrometer kinetic ACHTUNG Schaden durch Uberhitzung 9 Stellen Sie das Ger t nicht in der Nahe von Warmequellen z B Heizung Trockenschrank auf 9 Setzen Sie das Ger t keiner direkten Sonneneinstrahlung aus gt Gew hrleisten Sie eine ungehinderte Luftzirkulation Halten Sie um alle L ftungsschlitze einen Abstand von mindestens 5 cm frei ACHTUNG Sachsch den durch falsche Anwendung 9 Setzen Sie das Produkt nur f r den in der Bedienungsanleitung beschriebenen bestimmungsgem en Gebrauch ein 9 Achten Sie auf eine ausreichende Materialbest ndigkeit bei der Anwendung von chemischen Substanzen gt Wenden Sie sich in Zweifelsf llen an den Herste
117. thodengruppe Dye labels Wellenlange bei der der Background fur den Farbstoff gemessen werden soll Der zu messende Farbstoff in reiner nicht kontaminierter Form sollte bei dieser Wellenlange den Extinktionswert Null haben Temperature on Auswahl ein aus Nur f r Kinetikmethoden Nutzung der K vettentemperierung Temperature Werteeingabe Temperatur in C Bereich 20 bis 42 C Nur f r Kinetikmethoden Temperatureingabe f r die K vettentemperierung wenn Parameter Temperature auf on gesetzt ist Achtung Sch den und Fehlmessungen durch Kondenswasser Bei hoher Luftfeuchtigkeit kann sich an einer K vette mit deutlich geringerer Temperatur als Umgebungstemperatur Kondenswasser bilden Das Kondenswasser kann Sch den an der Optik sowie falsche Messergebnisse verursachen 9 Temperieren Sie die K vette nicht dauerhaft deutlich unterhalb der Umgebungstemperatur Beachten Sie ggf den vorliegenden Taupunkt Measuring procedure Auswahl lin regr endpoint two point Nur f r Kinetikmethoden linear regression Messung ber mehrere Zeitpunkte in festen Zeitintervallen in einem definierten Zeitraum Auswertung durch lineare Regression des Extinktions Zeit Graphen innerhalb der Messzeit Extinktionsergebnis AA min endpoint Messung eines Messpunktes nach einer definierten Zeit Extinktionsergebnis A two point Messung von 2 Messpunkten zu definierten Zeitpunkten Auswertung durc
118. ung K vettentyp Messvolumen Ausgangs und Zieltemperatur Temperierdauer Quarzglas Makrokuvette 1 500 uL 25 C gt 37 C ca 7 min 37 C gt 25 C ca 11 min 25 C gt 30 C ca 7 min Kunststoff Makrokuvette 1 000 uL 25 C gt 37 C ca 13 min 37 C gt 25 C ca 19 min Quarzglas Halbmikrokuvette 25 C gt 37 C ca 7 min neue 37 C 25 C ca 12 min Quarzglas Ultramikrok vette 25 C gt 37 C ca 7 min 60 pL 37 C gt 25 C ca 9 min 25 C gt 30 C ca 5 min F r eine effiziente Temperierung sollte das Volumen der Messl sung in der K vette nicht ber den Rand des K vettenhalters hinausragen Zur Beschleunigung des Messablaufs bei der Messung von Serien k nnen Sie K vetten mit Reagenz in einem Thermostaten au erhalb des BioSpectrometers vortemperieren bevor Sie die K vette in den K vettenhalter einsetzen und Probe zugeben Beachten Sie beim Wechsel von einer Methode mit Temperierung auf eine Methode ohne Temperierung dass die Temperatur des K vettenhalters langsam zur ck in Richtung Raumtemperatur driftet Die Ergebnisse der Methode ohne Temperierung k nnen davon beeinflusst werden Bedienung 34 Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic 35 Deutsch DE 6 Methoden 6 1 Methode auswahlen Methoden und Methoden Templates sind bereits mit Auslieferung vorprogrammiert Die Methoden
119. ungen im UV Bereich bietet Eppendorf mit der UVette eine Kunststoffk vette an die bei Wellenl ngen ab 220 nm transparent und damit auch f r die Messung von Nukleins uren geeignet ist Eppendorf mi i mi Cuvettes uCuvette 61 0 Hellma TrayCell UVette Ultra micro Semi micro Macro Basic area 12 5 mm x 12 5 mm Min overall height 36 mm Min filling level 10 mm Light path 8 5 mm Max height of base 7mm 0 mm Min volume Photometry See manufacturer See manufacturer 50 uL 70 uL 400 uL 1000 uL information information or similar microliter cuvette Voraussetzung K vette ist frei von Verschmutzung durch Staub oder Fingerabdr cke und frei von Kratzern K vettenschacht ist frei von Partikeln Staub und Fl ssigkeit Messvolumen in der K vette ist ausreichend Minimales Messvolumen beachten Messl sung ist frei von Partikeln und Blasen Die Richtung des Lichtwegs ist mit einem Pfeil auf dem Gehause gekennzeichnet 1 Positionieren Sie die K vette so dass das optische Fenster der K vette in Richtung des Lichtwegs zeigt 2 Dr cken Sie die K vette beim Einsetzen gegen einen leichten Widerstand ganz nach unten Bedienung Eppendorf BioSpectrometer kinetic 27 Deutsch DE 5 3 Ubersicht Uber den Messablauf 5 3 1 Messung vorbereiten 1 Schalten Sie das Gerat und gegebenenfalls den Drucker ein Das Ger t f hrt einen Selbsttest durch Dauer ca 1 Minute und zeigt die Methodenauswahl a
120. us Anzeige der Ratio A260 A230 zus tzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung FOI Auswahl Nur f r die Methodengruppe Dye labels none dye kb pmole Anzeige des FOI zus tzlich zum Ergebnis bei der ug Probenmessung Der FOI Frequency of Incorporation ist ein Ma f r die Zahl der in die Nukleinsaure eingebauten Farbstoffmolekule pro Molek l der Nukleins ure Einheiten sind dye kb Molek le Farbstoff pro 1000 Basen oder pmole ug pmol Farbstoff pro ug Nukleins ure none keine FOl Berechnung Background Auswahl Vor der Ergebnisberechnung einer Probe wird die Extinktion ein aus einer Background Wellenl nge bei der der zu messende Analyt die Extinktion Null zeigen soll von der Extinktion der Messwellenl nge subtrahiert H ufige Anwendung Partielle Tr bungskorrektur bei Messung von Nukleins uren Background Wellenl nge hierf r 320 nm oder 340 nm Wavelength Wellenlange in nm Wellenlange bei der der Background gemessen werden soll Bereich 200 bis 830 nm Der zu messende Analyt sollte hier in reiner Form den Extinktionswert Null haben Background for dyes Auswahl ein aus Nur fur die Methodengruppe Dye labels Anwendung der Background Korrektur auf die Messung des Farbstoffs siehe Parameter Background Methoden Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Parameter Wavelength Eingabe Wellenlange in nm Bereich 200 bis 830 nm Erlauterung Nur fur die Me
121. ut 2 3 Gef hrdungen bei bestimmungsgem em Gebrauch 2 3 1 Personenschaden N GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit IN 9 Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen gt F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an GEFAHR Explosionsgefahr A gt Betreiben Sie das Ger t nicht in R umen in denen mit explosionsgef hrlichen Stoffen gearbeitet wird gt Bearbeiten Sie mit diesem Ger t keine explosiven oder heftig reagierenden Stoffe gt Bearbeiten Sie mit diesem Ger t keine Stoffe die eine explosive Atmosph re erzeugen k nnen 12 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf Bi Deutsch DE oSpectrometer kinetic A A A WARNUNG Stromschlag durch Sch den am Ger t oder Netzkabel 9 Schalten Sie das Ger t nur ein wenn Ger t und Netzkabel unbesch digt sind gt Nehmen Sie nur Ger te in Betrieb die fachgerecht installiert oder instand gesetzt wurden gt Trennen Sie das Ger t im Gefahrenfall von der Netzspannung durch Ziehen des Netzsteckers aus dem Ger t oder der Netzsteckdose oder mit Hilfe der vorgesehenen Trennvorrichtung z B Notschalter im Labor WARNUNG Schaden durch UV Strahlung Mikroliterk
122. w eppendorf com 1 2 Gefahrensymbole und Gefahrenstufen Die Sicherheitshinweise in dieser Anleitung haben die folgenden Gefahrensymbole und Gefahrenstufen 1 2 1 Gefahrensymbole Stromschlag Explosionsgefahr Giftige Stoffe Be Sachschaden 1 2 2 Gefahrenstufen Gefahrenstelle GEFAHR Wird zu schweren Verletzungen oder zum Tod f hren WARNUNG Kann zu schweren Verletzungen oder zum Tod f hren VORSICHT Kann zu leichten bis mittelschweren Verletzungen f hren ACHTUNG Kann zu Sachsch den f hren Anwendungshinweise Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 1 3 Darstellungskonventionen Darstellung Bedeutung 1 Handlungen in vorgegebener Reihenfolge 2 gt Handlungen ohne vorgegebene Reihenfolge Liste oder sample Taste dr cken um eine beschriebene Handlung durchzuf hren Copy oder Copy Softkey drucken um eine beschriebene Handlung durchzufuhren 0 Zusatzliche Informationen 1 4 Abkurzungen A Absorbance Extinktion DNA Deoxyribonucleic acid Desoxyribonukleins ure DNS dsDNA double stranded DNA doppelstr ngige DNS Dye Methoden Anwendungshinweise Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE Methoden der Gruppe Dye labels fur die Messung von farbstoffmarkierten Biomolek len FOI Frequency of Incorporation Ma f r die Menge an Farbstoffmolek len bezogen auf die Zahl der Nukleotide in farbst
123. wurden werden f r die Berechnung der molaren Konzentration immer doppelstr ngige Nukleins uren angenommen 112 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 12 5 4 Berechnung des Faktors fur Protein in General Method Parameter Dieser Abschnitt gilt nur fur Berechnung der Proteinkomponente in den Methodengruppen Dye labels und Proteins direct UV Bei diesen Methodengruppen wird in den Parametern die Proteinkomponente ausgew hlt siehe Methodenparameter auf S 40 Der Proteinkomponente ist ein Faktor zugeordnet der in der Funktion General Method Parameter Proteins f r jedes Protein eingegeben wird Alternativ zur Eingabe des Faktors kann entweder Ag 79 oder der Extinktionskoeffizient plus die Molmasse des Proteins eingegeben werden In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet 1 F Aoa F Faktor f r das Protein Einheit g L Ag 1 Extinktion des Proteins bei einer Konzentration von 0 1 1 g L Bei Eingabe des molaren Extinktionskoeffizienten und der relativen Molmasse des Proteins kann Ag 1 hieraus berechnet werden P Avian MM Ep molarer Extinktionskoeffizient des Proteins Einheit cm 1M 1 MMp relative Molmasse des Proteins Einheit Da Eingabe in General Method Parameter in kDa 12 6 Spezielle Auswerteverfahren f r die Dye Methoden 12 6 1 Berechnung des Faktors f r den Farbstoff aus dem Extinktionskoeffizienten Bei den Dye Methoden wird die Kon
124. zentration des Farbstoffs mit einem Faktor aus der gemessenen Extinktion errechnet siehe Auswertung mit Faktor oder Standard auf S 107 Der Faktor wird in der Funktion General Method Parameter Dyes f r jeden Farbstoff eingegeben Alternativ zur Eingabe des Faktors kann der Extinktionskoeffizient eingegeben werden In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet F Faktor f r den Farbstoff Einheit pmol uL Extinktionskoeffizient f r den Farbstoff Einheit 6 1101711 Auswerteverfahren Eppendorf BioSpectrometer kinetic Deutsch DE 12 6 2 Berechnung der FOI Als Wert fur das Verh ltnis von Farbstoffmolek len zur Menge der Nukleotide in der Nukleins ure wird bei den Dye Methoden die Einbaurate FOI Frequency of Incorporation berechnet und angezeigt Die Berechnung kann fur zwei verschiedene Ergebniseinheiten ausgewahlt werden Einheit MOLEKULE dye kb _ Any 10 xMM A FOI E Dye xxx X F NA Einheit pmol ug DNA bzw RNA FOI Ay y x 10 E Dye Ayxx xF NA Ayyy Extinktion des Farbstoffs Axxx Extinktion der Nukleins ure MM y durchschnittliche Molmasse der Nukleotide 330 g mol Fya Faktor zur Berechnung der Nukleins ure Epye Extinktionskoeffizient f r den Farbstoff Einheit cm1M71 12 6 3 Umrechnung in Farbstoffmengen Die Berechnung der Menge Masse an Farbstoff im gesamten Probenvolumen erfolgt im Methodenschritt process results More calculations M

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