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APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Package Insert

1. Asympt Infiziert 43 15 58 Infiziert 1 0 1 Infiziert 1 0 1 Infiziert T NA 0 1 1 Infiziert 2 2 4 Infiziert NA 1 0 1 Infiziert 1 1 2 Infiziert 1 1 2 Infiziert T 1 0 1 Infiziert 2 1 3 Infiziert 1 0 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 5 1 6 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 5 2 T Nicht infiziert 0 1 1 Nicht infiziert 2 1 3 Nicht infiziert 2 1 3 Nicht infiziert 3 1 4 Nicht infiziert 3 1 4 Nicht infiziert 696 577 1273 Nicht infiziert NA 0 1 1 Nicht infiziert 0 1 1 Nicht infiziert NA 16 9 25 Nicht infiziert NA NA 0 Nicht infiziert NA 2 4 Nicht infiziert NA NA 0 1 Nicht infiziert 11 10 21 Nicht infiziert NA 0 1 1 Nicht infiziert 1 1 2 Nicht infiziert NA 0 1 1 Nicht infiziert NA NA NA 1 0 1 Nicht infiziert NA 5 4 9 Nicht infiziert 1 1 2 Gesamt 811 640 1451 a S ALLDI SALIZSDLLLLLFldduuuuiiii J Sympt symptomatisch Asympt asymptomatisch NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar Das Gleichheitszeichen steht f r unbestimmt im Wiederho
2. C 1 C in einem Wasserbad c Nehmen Sie den St nder aus dem Wasserbad 3 Detektion Der Nachweis muss bei 18 C bis 28 C durchgef hrt werden a Inkubieren Sie den St nder 15 3 Minuten lang bei 18 C bis 28 C Hinweis Dieser Temperaturbereich ist kritisch f r die Testleistung b Bei Einsatz des LEADER HC Luminometers und der APTIMA Assay Software beziehen Sie sich bitte auf die Bedienungsanleitung f r das LEADER HC Luminometer LEADER HC Luminometer Operator s Manual und die Bedienungsanleitung f r die APTIMA Assay Software APTIMA Assay Software Operator s Manual C Stellen Sie sicher dass ausreichende Auto Detect 1 und Auto Detect 2 Volumina zur Durchf hrung der Tests bereit stehen d Bereiten Sie das LEADER HC Luminometer vor indem Sie eine leere TTU in Kassettenposition 1 setzen und das Wasch Wash Protokoll durchf hren e Laden Sie die TTUs in das Luminometer f Melden Sie sich am Computer an Klicken Sie auf New Run Neuer Lauf w hlen Sie APTIMA GC Assay Protocol APTIMA GC Assay Protokoll und geben Sie die Anzahl der R hrchen Kontrollen und Proben ein Klicken Sie auf Next Weiter um den Lauf zu beginnen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 18 502185DE Rev E DTS Systeme Hinweis Der Lauf muss innerhalb von 2 Stunden vom Ende der Inkubation im Selektionsschritt abgeschlossen werden g Bereiten Sie die Deaktivierungsfl ssigkeit vor indem Sie gleiche Volumina einer 596 bis
3. Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Packungsbeilage gelagert gehandhabt und getestet werden Die Probenvorbereitungs kontrollen sollten in der gleichen Weise ausgewertet werden wie es f r die Patiententestproben beschrieben wurde Siehe Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Patienten Testergebnisse D Patienten Testergebnisse Wenn die Kontrollen in einem Lauf nicht die erwarteten Ergebnisse produzieren d rfen die Testergebnisse f r die Patientenproben des gleichen Laufs nicht berichtet werden 2 Ergebnisse von Abstrichproben Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap Siehe die Anmerkungen unten a Erste Ergebnisse GC Pos Positiv f r GC rRNA GC Neg Vermutlich negativ f r GC rRNA GC unbest Die Probe sollte neu getestet werden Ung ltig Die Probe sollte neu getestet werden b Ergebnisse des wiederholten Tests GC Pos Positiv f r GC rRNA GC Neg Vermutlich negativ f r GC rRNA GC unbest Unbestimmt Neue Probe entnehmen Ung ltig Unbestimmt Neue Probe entnehmen Positive Probenergebnisse mit niedrigem RLU sind in dieser Kategorie enthalten Siehe oben unter Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Anmerkungen Das erste g ltige nicht unbestimmte Ergebnis f r jedes Analyt ist das Ergebnis das berichtet werden sollte Eine sorgf ltige Betrachtung der Leistungsdaten wird b
4. e Lassen Sie die Vakuumpumpe eingeschaltet bis die Schlauche der Absaugvorrichtung trocken sind um R ckfluss zu verhindern f Dekontaminieren Sie die Oberfl chen der Absaugvorrichtung wie in TCS Einheit beschrieben APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 20 502185DE Rev E DTS Systeme 3 TCS Abfallbeh lter Entfernen Sie die Abfallflasche aus dem Target Capture System wenn die Abfallflasche 25 voll ist bzw jede Woche a Schalten Sie die Vakuumpumpe aus und lassen Sie den Vakuumdruck angleichen b Geben Sie die Schnellverschlussvorrichtungen zwischen der Abfallflasche und der berlaufflasche sowie der Abfallflasche und der Absaugvorrichtung frei Entfernen Sie die Abfallflasche vom Plexiglasbeh lter f r die Absaugflaschen Entfernen Sie den Deckel und geben Sie vorsichtig 400 mL 5 bis 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung in die Flasche hinzu oder 1 L wenn eine 10 Liter Flasche verwendet wird Hinweis Das kann unter einem Dunstabzug erfolgen um die Freisetzung von D mpfen in das Labor zu verhindern e Verschlie en Sie die Abfallflasche mit dem Deckel und vermischen Sie den Inhalt vollst ndig durch vorsichtiges Schwenken f Lassen Sie die Abfallflasche 15 Minuten stehen und entsorgen Sie dann den Inhalt Abfall g Sp len Sie die Abfallflasche mit Wasser um etwaigen Restabfall zu entfernen h Verschlie en Sie die leere Abfallflasche und stellen Sie sie in den Plexiglasbeh lter f r
5. 100 98 0 99 9 Gesamt T 0 0 352 Positiv 5 0 1 1 83 3 5 6 99 8 1280 1282 A h symptomatisc Negativ 1 0 5 1275 35 9 99 6 99 4 100 Gesamt 6 0 6 1276 Positiv 12 0 1 3 92 3 12 13 99 8 1630 1634 Alle Negativ 1 0 5 1625 64 0 99 8 99 4 99 9 Gesamt 13 0 6 1628 M Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Eine Probe zeigte ein abweichendes Ergebnis unbestimmtes Ergebnis f r eine endozervikale Abstrichprobe mit dem APTIMA COMBO 2 Assay positives Ergebnis f r eine endozervikale Abstrichprobe mit dem APTIMA GC Assay APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 50 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 6 Sensitivit t Spezifit t und pr diktive Werte des APTIMA GC Assays relativ zum Patien
6. Gemella haemolysans Haemophilus ducreyi Haemophilus influenzae Herpes simplex Virus Herpes simplex Virus Il Humanes Papillomavirus 16 Kingella dentrificans Kingella kingae Klebsiella oxytoca Klebsiella pneumoniae Lactobacillus acidophilus Lactobacillus brevis Lactobacillus jensonii Lactobacillus lactis Legionella pneumophila 2 Leuconostoc paramensenteroides Listeria monocytogenes Micrococcus luteus Moraxella lacunata Moraxella osloensis Morganella morganii Mycobacterium smegmatis Mycoplasma genitalium Mycoplasma hominis N meningitidis Serogruppe A N meningitidis Serogruppe B N meningitidis Serogruppe C 4 N meningitidis Serogruppe D N meningitidis Serogruppe Y N meningitidis Serogruppe W135 Neisseria cinerea 4 Neisseria dentrificans Neisseria elongata 3 Neisseria flava Neisseria flavescens 2 Neisseria lactamica 9 Organismus Neisseria mucosa 3 Neisseria sicca 3 Neisseria subflava 14 Neisseria perflava Neisseria polysaccharea Paracoccus denitrificans Peptostreptococcus anaerobius Peptostreptococcus productus Plesiomonas shigelloides Propionibacterium acnes Proteus mirabilis Proteus vulgaris Providencia stuartii Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Pseudomonas putida Rahnella aquatilis Rhodospirillum rubrum Saccharomyces cerevisiae Salmonella minnesota Salmonella typhimurium Serratia marcescens Staphylococcus saprophyticus Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Strept
7. PreservCyt liquid Pap 100 95 1 100 Mit GC rRNA gespikte klinische Panelstudie Die mit GC rRNA gespikte klinische Panelstudie beurteilte die bereinstimmung zwischen den beiden Systemen unter Einsatz von sechs von Gen Probe hergestellten klinischen GC Panels die mit O bis 250 000 fg rRNA Test von GC gespikt wurden Die klinischen GC Panels wurden aus Endozervixabstrichen Vaginalabstrichen urethralen Abstrichen m nnlichen und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap hergestellt die auf den DTS Systemen im Test bei Gen Probe negative Ergebnisse im APTIMA GC Assay aufwiesen Die negativen Proben wurden nach Probentyp gepoolt entweder mit GC rRNA gespikt oder nicht und als Replikate einer jeden Panelprobe aliquotiert Replikate der einzelnen 6 Panelproben mit unterschiedlichen gespikten rRNA Konzentrationen wurden kombiniert um ein klinisches Panel f r jeden Probentyp zu erstellen Jedes Panel enthielt insgesamt 132 Replikate Die anf nglichen Daten f r die m nnlichen und weiblichen Urinproben zeigen dass manche Panelproben die rRNA mit einer Konzentration unter der beanspruchten analytischen Sensitivit t enthielten unerwartete negative Ergebnisse auf dem TIGRIS DTS System erzeugten Es wurden zwei Anschlussstudien durchgef hrt um die bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen aus gespikten m nnlichen oder weiblichen Urin Panels nachzuweisen und zu best tigen Das ur
8. Sehr niedrig Niedrig Mittel Hoch Kein Target Sehr niedrig Niedrig Mittel Hoch Kein Target Sehr niedrig Niedrig Mittel Hoch Konzentration fg rRNA Test 0 25 250 2500 250 000 0 25 250 2500 250 000 0 25 250 2500 250 000 0 25 250 2500 250 000 0 25 250 2500 250 000 0 25 250 2500 250 000 Replikate 12 30 30 30 30 12 29 30 30 30 12 30 30 30 30 12 30 30 30 30 18 30 30 30 30 18 30 30 30 30 TIGRIS berein stimmung 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 63 3 19 30 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Wegen nicht ausreichender Probenvolumen nicht auf beiden Systemen getestet DTS berein stimmung 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Gesamt berein stimmung zwischen TIGRIS und DTS 95 V I 100 97 2 100 100 97 2 100 100 97 2 100 91 7 85 6 95 8 100 97 4 100 100 97 4 100 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 71 502185DE Rev E Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems Tabelle 14 Mit GC rRNA gespikte klinische Panel bereinstimmungsstudie Fortsetzung Gesamt berein TIGRIS DTS stimmung zwischen Konzentration Probe Panelelement fg rRNA Test Replikate Er Be TIGRIS
9. anschlie enden Lauf kein Magnetpartikel Pellet enth lt kann dies ein Hinweis auf ein probenspezifisches Problem sein In dieser Situation wird die erneute Entnahme der Probe empfohlen D Amplifikation Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das SB100 Anwendungsblatt SB100 Application Sheet 1 Geben Sie mit der Wiederholungspipette 75 uL rekonstituiertes Amplifikationsreagenz GC in jedes Reaktionsr hrchen Alle Reaktionsmischungen im St nder sollten nun eine rote F rbung aufweisen 2 Geben Sie mit der Wiederholungspipette 200 uL Olreagenz in jedes Reaktionsr hrchen 3 Decken Sie die Reaktionsgef e mit Abdeckfolie ab und mischen Sie sie mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e 4 Inkubieren Sie den St nder in einem Wasserbad 10 5 Minuten lang bei 62 C 1 C 5 Den St nder in ein Wasserbad mit 42 C x 1 C transferieren und 5 2 Minuten lang inkubieren 6 Entfernen Sie w hrend der St nder im Wasserbad ist vorsichtig die Abdeckfolie und geben Sie mit der Wiederholungspipette 25 uL rekonstituiertes Enzymreagenz zu jedem Reaktionsr hrchen hinzu Alle Reaktionsmischungen sollten jetzt orangefarben sein APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 17 502185DE Rev E DTS Systeme T Bedecken Sie die Gef e sofort mit einer frischen Abdeckfolie nehmen Sie den St nder aus dem Wasserbad und mischen Sie die Reaktionsgef e indem Sie den St nder vorsichtig von Hand sch tteln 8 I
10. 109 0 35 100 39 8 100 99 1 95 0 100 80 0 100 4 260 1 254 0 19 100 478 100 99 6 97 8 100 83 3 100 Abstrich 5 199 1 196 0 10 100 158 100 99 5 97 2 100 66 7 100 6 294 19 5 269 1 68 950 75 1 99 9 98 2 95 8 99 4 79 2 99 6 7 102 0 102 0 00 NA 100 96 4 100 NA 100 8 48 1 0 47 O0 21 100 25 100 100 92 5 100 100 100 Alle 1440 72 13 1353 2 51 97 3 90 6 99 7 99 0 98 4 99 5 84 7 99 9 WEIDEN 1 297 1 2 213 1 53 91 7 615 998 99 1 96 7 99 9 84 6 99 5 2 198 30 0 167 1 15 7 96 8 83 3 99 9 100 97 8 100 100 99 4 3 113 4 0 109 0 35 100 39 8 100 100 96 7 100 100 100 4 265 5 0 260 0 19 100 478 100 100 98 6 100 100 100 Urin 5 199 2 0 197 0 1 0 100 158 100 100 98 1 100 100 100 6 206 16 1 275 4 68 80 0 56 3 94 3 99 6 98 0 100 94 1 98 6 7 102 0 0 102 0 00 NA 100 96 4 100 NA 100 8 49 1 0 48 0 20 100 25 100 100 92 6 100 100 100 Ale 1449 69 3 1371 6 52 92 0 83 4 97 0 99 8 99 4 100 95 8 99 6 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 51 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 6 Sensitivit t Spezifit t und pr diktive Werte des APTIMA GC Assays relativ zum Patienteninfektionsstatus nach Pr fzentrum und insgesamt f r m nnliche urethrale Abstrichproben m nnliche Urinproben weibliche Endozervix Abstrichproben weibliche Urinproben von der asymptomatischen Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichproben Fortsetzung Pos Neg Probe Es N TP
11. 5 Nicht infiziert 1 4 5 Nicht infiziert 1 1 2 Nicht infiziert 0 1 1 Nicht infiziert NA 0 1 1 Nicht infiziert 2 6 8 Nicht infiziert 0 2 2 Gesamt 576 745 1321 ZZ a JG a H J o d Ome n Sympt symptomatisch Asympt asymptomatisch NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar Das Gleichheitszeichen steht f r unbestimmt im Wiederholungstest MS Male Urethral Swab m nnl urethrale Abstrichprobe MU m nnlicher Urin APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 55 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 7c Endozervikale Abstrichproben und Urinergebnisse von Probandinnen die mit N gonorrhoeae infiziert oder nicht infiziert waren gem Patienteninfektionsstatus NAAT 1 m lcm APTIMA COMBO 2 Assay NAAT 2 APTIMA GC Assay Symptom status Bas FS FU FS FU FS FU Sympt Asympt Infiziert T F t 43 16 59 Infiziert 2 0 2 Infiziert 2 1 3 Infiziert 0 1 1 Infiziert NA 1 0 1 Infiziert 1 1 2 Infiziert T 1 1 2 Infiziert 1 0 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 2 0 2 Infiziert 1 0 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 0 1 1 Infiziert 1 0 1 Nicht infizie
12. 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung und des APTIMA Puffers f r Deaktivierungsfl ssigkeit in einem Plastikbeh lter mit gro em Verschluss vermischen Beschriften Sie den Plastikbeh lter einschl Verfallsdatum Die Deaktivierungsfl ssigkeit ist 4 Wochen bei Raumtemperatur stabil Entsorgen Sie die Deaktivierungsfl ssigkeit nach 4 Wochen oder nachdem 100 verarbeitete Proben deaktiviert wurden der zuerst eintretende Zeitpunkt ist ma gebend h Setzen Sie nach Entfernen der gebrauchten TTUs aus dem Luminometer diese TTUs in den Beh lter mit der Deaktivierungsl sung Belassen Sie die TTUs 15 Minuten vor der Entsorgung im Beh lter Der Laborleiter muss die richtigen Handhabungs und Entsorgungverfahren festlegen Verfahrenshinweise A Controls F r eine ordnungsgem e Funktion mit der APTIMA Assay Software muss die Negativkontrolle f r GC die die Bezeichnung CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC hat in der ersten Position der ersten TTU sein Die Positivkontrolle f r GC die die Bezeichnung CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT hat muss in der zweiten Position der ersten TTU sein Eine Platzierung in der falschen Position f hrt zum Fehlschlagen des Laufs Alle zus tzlichen Kontrollen m ssen als Patientenproben eingegeben werden und vom Bediener auf Eignung berwacht werden Die Positivkontrolle f r CT dient als Negativkontrolle f r den APTIMA GC Assay B Pipettierung von Kontrolle und Probe Das Volumen de
13. 7 mL NGC Nicht infekti se CT Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA quivalent von 1 CT IFU 5 fg Test Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Hinweis Materialien die von Gen Probe erh ltlich sind sind mit der Katalognummer aufgef hrt sofern nicht anders angegeben Kat Nr TIGRIS DTS System 105118 APTIMA Assay Fluids Kit 302382 APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsfl ssigkeit und APTIMA Olreagenz APTIMA Auto Detect Kit Auto Detect Kit 301048 APTIMA System Fluid Preservative Kit Konservierungsmittel Kit 302380 f r Systemfl ssigkeit Spitzen 1000 uL leitf hig zur Fl ssigkeitsstandmessung 10612513 Tecan APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 24 502185DE Rev E TIGRIS DTS System Durchlaufkit mit Multi R hrchen Einheiten Multi Tube Units MTU 104772 02 MTU Spitzen Entsorgungstaschen Kit 900907 MTU Abfalldeflektoren 900931 MTU Abfallabdeckungen 105523 APTIMA Probentransferkit Zur Verwendung mit Proben in PreservCyt L sung APTIMA Entnahmekit f r Vaginalabstrichproben APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und
14. 79 6 99 9 100 94 0 100 100 80 5 100 99 2 95 8 100 100 97 3 100 98 6 92 5 100 99 2 95 8 100 100 93 0 100 t gibt ein positives Ergebnis an ein negatives Ergebnis V I Vertrauensintervall Endozervikale und vaginale Abstrichproben zusammen genommen Eine Nicht bereinstimmung bei der vaginalen Abstrichprobe APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 67 502185DE Rev E Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Pr zisionsstudie Der Effekt verschiedener Faktoren auf die Variabilit t der Testleistung des APTIMA GC Assays auf dem TIGRIS DTS System wurde mit 12 Element STD Reproduzierbarkeitspanels beurteilt Die Panelproben enthielten O bis 250 000 fg GC rRNA Test Das Panel umfasste Panelproben mit GC Konzentrationen beim analytischen Sensitivit tsanspruch von 250 fg GC rRNA Test Die Panels wurden in einem externen Testzentrum und bei Gen Probe unter Einsatz von zwei Reagenzchargen des APTIMA GC Assays getestet Bei Gen Probe f hrten zwei Bediener jeweils drei g ltige Arbeitslisten pro Reagenzcharge auf jedem der beiden TIGRIS DTS Systemger te aus Am externen Testzentrum f hrten zwei Bediener jeweils drei g ltige Arbeitslisten pro Reagenzcharge auf einem TIGRIS DTS Systemger t aus Eine Arbeitsliste bestand aus Laufkontrollen und sechs 12 Element Panels Die Proben mit anf nglich ung ltigen oder unbestimmten Ergebnissen aus den g ltigen Test Arbeitslisten wu
15. GC Assays nach oymptomstatus und insgesamt Die Gesamtsensitivit t betrug 92 3 12 13 Bei symptomatischen und asymptomatischen Probanden lagen die Sensitivit ten jeweils bei 100 7 7 und 83 3 5 6 Die Gesamtspezifit t betrug 99 8 1630 1634 Bei symptomatischen und asymptomatischen Probanden lagen die Spezifit ten jeweils bei 99 4 350 352 und 99 8 1280 1282 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 49 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 6a zeigt die Sensitivit ten und Spezifit ten des APTIMA GC Assays nach Probenentnahmeort und insgesamt Die Sensitivit t lag im Bereich von 80 0 bis 100 Die Spezifit ten lagen im Bereich von 99 0 bis 100 Tabelle 5 Verteilung des Zervixprobenentnahmeger ts das f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap verwendet wurde Verwendetes Klinischer Entnahmeort Zervixprobenentnahmeger t 4 2 3 4 5 6 Sesami Spatel Cytobrush 0 124 475 287 57 364 1307 Besenartiges Ger t 100 0 0 0 240 0 340 Tabelle 5a Sensitivit t und Spezifit t des APTIMA GC Assays relativ zum Patienteninfektionsstatus nach Symptomstatus und insgesamt f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Ergebnis von APTIMA VEA T Symptom GC Assay f r S An en Bee i PreservCyt Losung 95 V I 95 V I Positiv 7 0 0 2 l 100 7 7 99 4 350 352 h Negat Symptomatisc egativ 0 0 0 350 59 0
16. Halten Sie die Flasche mit der L sung auf dem Labortisch fest und stecken Sie das andere Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks in die Flaschen ffnung Abb 3 Schritt 2 f Drehen Sie die zusammengef gten Flaschen langsam um Lassen Sie die L sung aus der Flasche in das Glasfl schchen ablaufen Abb 3 Schritt 3 g Mischen Sie die L sung in der Flasche durch behutsames Schwenken Vermeiden Sie Schaumbildung beim Schwenken der Flasche Abb 3 Schritt 4 h Warten Sie bis sich das gefriergetrocknete Reagenz aufgel st hat und drehen Sie dann die zusammengef gten Flaschen erneut um Ein Neigungswinkel von 45 erm glicht die Schaumbildung auf ein Mindestma zu beschr nken Abb 3 Schritt 5 Lassen Sie die gesamte Fl ssigkeit in die Kunststoffflasche zur cklaufen i Entfernen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Glasfl schchen Abb 3 Schritt 6 j Verschlie en Sie die Plastikflasche Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das Rekonstitutionsdatum auf dem Etikett ein Abb 3 Schritt 7 k Entsorgen Sie das Verbindungsst ck und das Fl schchen Abb 3 Schritt 8 Warnung Bei der Hekonstitution von Reagenzien Schaumbildung vermeiden Schaum beeintr chtigt die F llstandsmessung im PANTHER System Abb 3 Rekonstitutionsverfahren mit dem PANTHER System 2 Vorbereitung von Target Capture Arbeitsreagenz GC wTCR GC a Paaren Sie die entsprechenden Flaschen TCR GC und TCR B b Pr fen Sie
17. Kundendienst 1 800 523 5001 Technischer Kundendienst 1 888 484 4747 www gen probe com GEN PROBE GEN PROBE und das Design APTIMA APTIMA und das Design APTIMA COMBO 2 DTS LEADER PANTHER SB100 und TIGRIS sind Marken von Gen Probe Incorporated eppendorf stilisiert und REPEATER sind Marken der Eppendorf AG PRESERVCYT und THINPREP sind Marken der Hologic Inc KOVA TROL ist eine Marke von Hycor Biomedical Inc RAININ ist eine Marke von Rainin Instrument LLC TECAN und FREEDOM EVO sind Markennamen der Tecan Group AG Alle anderen Markennamen die m glicherweise in dieser Packungsbeilage erscheinen sind das Eigentum ihrer jeweiligen Besitzer 2003 2013 Gen Probe Incorporated 502185DE Rev E 2013 05 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 77 502185DE Rev E
18. Sie das Fl schchen mit dem gefriergetrockneten Reagenz und stecken Sie das gekerbte Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Fl schchen ffnung Abb 1 Schritt 1 c Offnen Sie die Flasche mit der entsprechenden Rekonstitutionsl sung und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che d Halten Sie die Flasche mit der Rekonstitutionsl sung auf dem Labortisch fest und stecken Sie das andere Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Flaschen ffnung Abb 1 Schritt 2 e Drehen Sie die die zusammengebaute Einheit aus Flasche und Fl schchen langsam um Lassen Sie die L sung aus der Flasche in das Fl schchen ablaufen Abb 1 Schritt 3 f Mischen Sie die L sung im Fl schchen durch behutsames Schwenken Beim Schwenken des Fl schchens Schaumbildung vermeiden Abb 1 Schritt 4 g Warten Sie bis sich das gefriergetrocknete Reagenz aufgel st hat und drehen Sie dann die zusammengebaute Einheit aus Flasche und Fl schchen erneut um Ein Neigungswinkel von 45 erm glicht die Schaumbildung auf ein Mindestma zu beschr nken Abb 1 Schritt 5 Lassen Sie die gesamte Fl ssigkeit in die Flasche zur cklaufen h Entfernen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck von der Flasche Abb 1 Schritt 6 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 13 502185DE Rev E DTS Systeme i Verschlie en Sie die Flasche wieder Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das Rekonstitutionsdatum auf d
19. Testkontamination APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 22 502185DE Rev E TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System TIGRIS Die Reagenzien f r den APTIMA GC Assay auf dem TIGRIS DTS qc System sind unten aufgef hrt Die Symbole zur Identifikation der Reagenzien sind neben dem Reagenznamen angegeben Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Kit 100 Tests 2 Schachteln und 1 Kontrollenkit Kat Nr 303092 2 x 50 Tests 2 Schachteln und 1 Kontrollenkit Kat Nr 302225 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay gek hlte Schachtel Kasten 1 von 2 nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Menge Symbol Bestandteil Kit f r 100 Kit f r 2 x 50 Tests Tests A APTIMA Amplifikationsreagenz GC 1 Fl schchen 2 Fl schchen Nukleins uren getrocknet in gepufferter L sung mit lt 5 F llstoff E APTIMA Enzymreagenz 1 Fl schchen 2 Fl schchen Reverse Transkriptase und RNA Polymerase getrocknet in HEPES gepufferter L sung mit lt 10 F llreagenz P APTIMA Sondenreagenz GC 1 Fl schchen 2 Fl schchen Nicht infekti se chemilumineszie rende DNA Sonden getrocknet in Succinatpuffer l sung mit 5 Detergens TCR B APTIMA Target Capture Reagenz B 1x0 30 mL 2x0 143mL Nicht infekti se Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Rekonstitutions verbindungsst cke 6 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Raumtemperatur Schachtel Kasten 2 von 2 nach Empfang bei 15 C b
20. Wenn eine Urinprobe ein Pr zipitat enth lt die Probe bis zu 5 Minuten auf 37 C erw rmen Wenn das Pr zipitat nicht wieder in L sung geht stellen Sie sicher dass das Pr zipitat nicht die Probenabgabe verhindert Hinweis Bei Nichtbefolgen von Schritt 4a 4c kann aus dem Probenr hrchendeckel Fl ssigkeit auslaufen Hinweis Pro fehlgeschlagen R hrchen k nnen bis zu 3 getrennte Aliquote getestet werden Wenn versucht wird mehr als 3 Aliquote aus einem Probenr hrchen zu pipettieren kann es zu Fehlern aufgrund unzureichender Mengen kommen E Vorbereitung des Systems Richten Sie das System und die Arbeitsliste entsprechend den Anweisungen im Bedienungsanleitung f r das TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System Operator s Manual und im nachstehenden Abschnitt Verfahrenshinweise ein Verfahrenshinweise A Kontrollen 1 Anfangs und Endkontrollen sind erforderlich um einen vorschriftsm igen Betrieb mit der APTIMA Assay Software f r das TIGRIS DTS System sicherzustellen Die Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC m ssen in der ersten Position und der vorletzten Position einer Arbeitsliste sein Das Etikett dieser Kontrolle ist rosa Der Etiketttext lautet CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC Die Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT m ssen in der zweiten Position und der letzten Position einer Arbeitsliste sein Diese Kontrolle hat ein blau gr nes Etikett Der Etiketttext lautet CONTROL GC PGC CONTRO
21. brechen Dabei darauf achten dass der Inhalt nicht verspritzt wird 5 Verschlie en Sie das Tupfertransportgef wieder fest Wiederholen Sie Schritt 2 bis 5 f r alle Abstrichbereiche 7 Testen Sie den Tupfer mit dem APTIMA GC Assay gem Testverfahren mit DTS Systemen gt Wenn die Ergebnisse GC positiv oder unbestimmt sind siehe Testauswertung Qualitatskontrolle Patientenergebnisse ist moglicherweise die Oberflache kontaminiert und sollte durch Behandlung mit Natriumhypochlorit wie in Testverfahren mit DTS Systemen Ger tevorbereitung empfohlen dekontaminiert werden Hinweis Wenn eine Kontamination des Wasserbades vermutet wird kann das Wasser mit dem Testverfahren f r Urinproben getestet werden Dazu werden 2 0 mL des Wassers in ein Urinproben Transportr hrchen gegeben K Fehlersuche 1 Niedrige Werte bei positiven Kontrollen k nnen durch falsche Temperaturen in verschiedenen Schritten des Tests oder durch berschreiten der Selektionszeit im Selektionsschritt ber die empfohlene Zeit hinaus verursacht werden 2 Hohe Hintergrundwerte k nnen auftreten wenn die Selektionszeit im Selektionsschritt verk rzt wird die Selektionstemperatur nicht korrekt ist oder nach der Zugabe des Selection Reagenzes nicht ausreichend gemischt wird 3 Wenn die APTIMA Negativkontrolle f r GC die als CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC gekennzeichnet ist positiv oder unbestimmt f r GC ist siehe Verfahrenshinweise
22. in women with cervical dysplasia Am J Obstet Gynecol 123 753 757 Stary A E Schuh M Kerschbaumer B Gotz and H Lee 1998 Performance of transcription mediated amplification and Ligase chain reaction assays for detection of chlamydial infection in urogenital samples obtained by invasive and noninvasive methods J Clin Microbiol 36 2666 2670 Toye B W Woods M Bobrowska and K Ramotar 1998 Inhibition of PCR in genital and urine specimens submitted for Chlamydia trachomatis testing J Clin Microbiol 36 2356 2358 Verkooyen R P A Luijendijk W M Huisman W H F Goessens J A J W Kluytmans J H Rijsoort Vos and H A Verbrugh 1996 Detection of PCR inhibitors in cervical specimens by using the AMPLICOR Chlamydia trachomatis assay J Clin Microbiol 34 3072 3074 Vincelette J J Schirm M Bogard A Bourgault D Luijt A Bianchi P C Van Voorst Vader A Butcher and M Rosenstraus 1999 Multicenter evaluation of the fully automated COBAS AMPLICOR PCR test for detection of Chlamydia trachomatis in urogenital specimens J Clin Microbiol 37 74 80 A CE Gen Probe Incorporated San Diego CA 92121 EMERGO EUROPE US und internationale Kontaktinformationen Molenstraat 15 Kundendienst 1 858 410 8002 2513 BH Den Haag customerservice gen probe com Niederlande Technischer Kundendienst 1 858 410 8511 technicalsupport gen probe com Geb hrenfreie Nummern f r Anrufe aus USA und Kanada
23. positiven und negativen Proben von symptomatischen Probanden auf aber die Gesamt bereinstimmung f r symptomatische Probanden lag bei 100 f r APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 65 502185DE Rev E asymptomatische Probanden bei 97 6 40 41 und f r alle symptomatisch und Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System asymptomatisch zusammen genommen betrug die Gesamt bereinstimmung 99 2 128 129 F r m nnliche urethrale Abstrichproben lag die Gesamt bereinstimmung f r symptomatische asymptomatische und alle Probanden bei 100 F r die weiblichen Urinproben betrug die Gesamt bereinstimmung f r symptomatische Probanden 100 f r asymptomatische Probanden 96 0 24 25 und f r alle 98 6 71 72 F r die m nnlichen Urinproben betrug die Gesamt bereinstimmung f r symptomatische Probanden 98 6 69 70 f r asymptomatische Probanden 100 und f r alle 99 2 129 130 F r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap lag die Gesamt bereinstimmung f r symptomatische asymptomatische und alle Probanden bei 100 Aufgrund der relativ kleineren Anzahl an Proben von asymptomatischen Probanden k nnen diese Ergebnisse m glicherweise nicht f r APTIMA GC Assays auf dem TIGRIS DTS System mit Proben von asymptomatischen Probanden verallgemeinert werden Siehe Tabelle 4 f r Leistungssch tzwerte f r den APTIMA GC Assay f r endozervikale Abstrichproben vagin
24. und DTS g g 95 V I Kein Target 0 12 100 100 Sehr niedrig 25 30 13 3 4 30 100 Erste Studie Niedrig 250 30 80 24 30 100 75 8 67 5 82 8 Mittel 2500 30 100 100 Hoch 250 000 30 100 100 Kein Target 0 18 100 100 Sehr niedrig 25 30 96 7 29 30 100 YWelbilene ANSCHINSS Niedrig 250 30 100 100 99 3 96 0 100 Urinprobe studie 1 Mittel 2500 30 100 100 Hoch 250 000 30 100 100 Kein Target 0 18 100 100 Sehr niedrig 25 30 90 27 30 100 Ansenidss Niedrig 250 30 100 100 97 8 93 8 99 5 studie 2 Mittel 2500 30 100 100 Hoch 250 000 30 100 100 Kein Target 0 12 100 100 Papanicolaou Abstrich in PED DISerg gt a R PreservCyt L sung Niedrig 250 30 100 100 100 97 2 100 Preserve yeuquid Pap Mittel 2500 30 100 100 Hoch 250 000 30 100 100 Wegen nicht ausreichender Probenvolumen nicht auf beiden Systemen getestet quivalenzstudie zur analytischen Spezifit t F r einen Nukleins ure Amplifikationstest wird die analytische Spezifit t hinsichtlich einzelner Organismen zum Gro teil durch die Chemie des Tests z B Oligonukleodidsequenzen anstatt durch die Plattform bestimmt Weil die Reagenzien f r den APTIMA GC Assay identisch f r das TIGRIS DTS System und die DTS Systeme sind wurden die analytischen Spezifit tsversuche auf dem TIGRIS DTS System so konzipiert dass sie sich auf die Kulturisolate die die gr te Herausforderung darstellen konzentrieren Diese Organismen umfassten diejenigen die bekannterma en in anderen Amplif
25. und der APTIMA COMBO 2 Assay zielen beide auf die 16S rRNA Untereinheit f r Capture und Nachweis ab Die Capture Sonde ist bei beiden Tests gleich aber der APTIMA GC Assay erkennt zum Nachweis eine andere Region der 16S rRNA Untereinheit als der APTIMA COMBO 2 Test Testprinzip Der APTIMA GC Assay kombiniert die Technologien des Target Capture TMA und HPA Die Proben werden in ihren jeweiligen Probentransportgef en gesammelt Die Transportl sung in diesen Gef en setzt das rRNA Target frei und sch tzt es vor Abbau w hrend der Lagerung Bei der Durchf hrung des APTIMA GC Assays im Labor wird das Target rRNA Molek l durch Verwendung eines F nger Oligomers mittels Target Capture mit magnetischen Mikropartikeln von den Proben isoliert Das F nger Oligomer enth lt eine Sequenz die zu einem spezifischen Bereich des Targetmolek ls komplement r ist sowie Deoxyadenosinreste W hrend des Hybridisierungsschritts bindet sich die sequenzspezifische Region des F nger Oligomers an eine spezifische Region des Targetmolek ls Das Capture des F nger Oligomer Target Komplexes aus der L sung erfolgt dann durch Verminderung der Reaktionstemperatur auf Raumtemperatur Diese Temperatursenkung erm glicht das Auftreten einer Hybridisierung zwischen dem Desoxyadenosinbereich auf dem Fanger Oligomer und den Polydesoxythymidin Molek le die kovalent an die Magnetpartikel gebunden sind Diese Mikropartikel einschlie lich der an sie gebundenen Targetmol
26. versucht wird mehr als einmal aus dem R hrchen zu pipettieren kann es zu Fehlern aufgrund unzureichender Mengen kommen B Temperatur Raumtemperatur ist definiert als 15 C bis 30 C C Handschuhpuder Wie in jedem Reagenzsystem kann berm iger Puder auf manchen Handschuhen eine Kontamination ge ffneter Reaktionsgef e verursachen Es werden ungepuderte Handschuhe empfohlen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 36 502185DE Rev E PANTHER System D berwachungsprotokoll f r Laborkontamination f r das PANTHER System Es gibt viele laborspezifische Faktoren die zu Kontamination beitragen k nnen darunter Testvolumen Arbeitsablauf Krankheitspr valenz und verschiedene andere Laboraktivit ten Diese Faktoren sind zu ber cksichtigen wenn die H ufigkeit der Kontaminations berwachung festgelegt wird Die Intervalle zur Kontaminations berwachung sollten im Hinblick auf die Praktiken und Verfahren jedes Labors festgelegt werden Zur berwachung auf Laborkontamination kann das folgende Verfahren mit dem APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben durchgef hrt werden 1 Beschriften Sie die Tupfertransportgef e mit den Zahlen die den zu testenden Bereichen entsprechen 2 Nehmen Sie den Abstrichtupfer blauer Schaft mit gr nem Aufdruck aus der Verpackung feuchten Sie den Tupfer im Tupfertransportmedium an und nehmen Sie im ausgewiesenen Bereich mit einer Kre
27. x1000 VISA x1000 Men x1000 LANA x1000 MSS x1000 MISA 0 859 4 6 100 1 7 NA 0 0 NA 0 3 NA 0 7 NA 2 7 NA 250 429 4148 3 100 236 57 170 44 212 51 949 23 222 53 2500 429 5361 998 275 54 145 27 278 541 251 05 482 90 25000 430 5871 100 325 55 163 28 303 52 106 18 176 30 250 000 431 6037 10 317 52 167 28 3080 50 126 21 186 34 LA A e w Y X JJ 1 I bereinst bereinstimmung Konz Konzentration VK Variationskoeffizient NA nicht zutreffend f r negative Proben RLU relative Lichteinheiten SA Standardabweichung SA und VK Werte werden entsprechend dem Zufallseffektmodell jeweils auf O und 0 0 gesetzt wenn die Variabilit t aufgrund dieser Quelle relativ zu Zufallsfehlern und oder Variation anderer Quellen numerisch negativ ist 4 Proben wurden aus dieser Analyse wegen endg ltig ung ltiger Ergebnisse ausgeschlossen Au erdem fehlte in einer Arbeitsliste je ein Replikat einer GC negativen Panelprobe 3 Proben wurden aus dieser Analyse wegen endg ltig ung ltiger Ergebnisse ausgeschlossen 2 Proben wurden aus dieser Analyse wegen endg ltig ung ltiger Ergebnisse ausgeschlossen Au erdem fehlte in zwei Arbeitslisten je ein Replikat einer Panelprobe mit 2500 fg GC rRNA Test und ei
28. 0 66 4 100 100 54 1 100 Gesamtuber einstimmung 95 V I 100 95 9 100 100 96 1 100 100 92 5 100 98 6 92 3 100 100 89 7 100 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 66 502185DE Rev E Tabelle 12 Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben positive negative und Gesamt bereinstimmung nach Symptomstatus Fortsetzung Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Symptom Probe Abstrich Asympt Urin PreservCyt Abstrich Alle Urin PreservCyt Geschlecht Weiblich M nnlich Weiblich M nnlich Weiblich Weiblich M nnlich Weiblich M nnlich Weiblich N 41 40 25 60 17 129 133 12 130 51 DTS TIGRIS TIGRIS TIGRIS TIGRIS 23 12 78 73 33 65 40 DTS 1 1 DTS 17 33 15 55 50 60 38 64 11 Positive bereinstim mung 95 V I 100 85 2 100 100 59 0 100 100 66 4 100 100 47 8 100 100 73 5 100 100 95 4 100 100 95 1 100 100 89 4 100 98 5 91 8 100 100 91 2 100 Negative bereinstim mung 95 V I 94 4 72 7 99 9 100 89 4 100 93 8 69 8 99 8 100 93 5 100 100 47 8 100 98 0 89 6 100 100 94 0 100 97 4 86 5 99 9 100 94 4 100 100 71 5 100 Gesamt ber einstimmung 95 V I 97 6 87 1 99 9 100 91 2 100 96 0
29. 33 m nnliche urethrale Abstrichproben 72 weibliche Urinproben 130 m nnliche Urinproben und 51 Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap mit GC positiven und GC negativen Ergebnissen aus dem APTIMA COMBO 2 Assay wurden zu Vergleichstests mit dem TIGRIS DTS System und DTS Systemen f r den APTIMA GC Assay ausgew hlt Die Mehrheit der Proben 88 weibliche Abstrichproben 93 m nnliche Abstrichproben 47 weibliche Urinproben 70 m nnliche Urinproben und 34 Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap die in die Vergleichstests aufgenommen wurden stammten von symptomatischen Personen Die Proben mit anf nglich ung ltigen oder unbestimmten Ergebnissen wurden mit dem gleichen System erneut getestet auf dem auch das Ergebnis erzeugt worden war Drei weibliche Urinproben eine vaginale Abstrichprobe und eine m nnliche urethrale Abstrichprobe wiesen auf den DTS Systemen ein anf nglich unbestimmtes Ergebnis auf beim Wiederholungstest war das Ergebnis bei allen g ltig Eine m nnliche und eine weibliche Urinprobe wiesen auf dem TIGRIS DTS System ein anf nglich ung ltiges Ergebnis auf beim Wiederholungstest waren beide Ergebnisse g ltig Tabelle 12 zeigt die positiven negativen und Gesamt bereinstimmungen f r alle gepaarten Ergebnisse f r jeden Probentyp nach symptomatischem Status Die weiblichen Abstrichproben endozervikal und vaginal zusammen genommen weisen ein Ungleichgewicht relativ zu
30. 737 100 21835 32 23849 35 66 22 1 17672 26 3744 556 0 95 6 100 19 33 6 0 0 054 95 596 1052 63 1112 125 96 3358 100 2579 77 0 0 0 0 485 45 145 5497 164 PreservCyt 125 96 5272 100 24309 46 201 89 3 8 0 0 751 72 143 8154 15 5 1250 96 5945 100 35595 6 51 06 0 9 0 0 759 35 128 8402 14 1 Hinweis Die Variabilitat von einigen Faktoren kann numerisch negativ sein Das kann auftreten wenn die durch diese Faktoren bedingte Variabilit t sehr klein ist In diesem Fall gilt SA 0 und VK 0 Die Anzahl n von 95 bezieht sich auf 1 ungultiges Replikat unter 96 das nicht wiederholt wurde Analytische Spezifitat Die analytische Spezifitat wurde nicht auf dem PANTHER Gerat gepruft Siehe die Aquivalenzstudie zur analytischen Spezifit t im Abschnitt Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems quivalenzstudie zu interferierenden Substanzen Blut das h ufig in Urogenitalproben vorgefunden wird kann in manchen Amplifikationstests interferierend wirken Vollblut wurde verwendet um das Ausma der Blutinterferenz auf dem PANTHER System hinsichtlich dieser potenziell interferierenden Substanz zu bestimmen Frisches Blut wurde klinischen Pools von vaginalen Abstrichproben nachbearbeiteten Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben hinzugesetzt Dann wurden sie auf potenzielle Assayinterferenz in Abwesenheit und Gegenwart von GC Target getestet Das gesch tzte rRNA Aquivalent von 125 GC CFU mL 250
31. B100 Dry Heat Bath Vortexer SB100 Application Sheet 2 Arbeitsflachen und Pipetten m ssen vor Testbeginn mit einer 2 5 bis 3 596 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung dekontaminiert werden Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen und Pipetten einwirken Sp len Sie sie anschlief5end mit Wasser ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Decken Sie die Arbeitsfl che auf der der Test durchgef hrt wird mit sauberen absorbierenden Labortischunterlagen mit Kunststoffunter schicht ab 3 Setzen Sie eine ausreichende Zahl von Zehn Spitzen Kassetten in das Target Capture System TCS Stellen Sie sicher dass die TCS Waschflasche mit der APTIMA Waschl sung gef llt ist und die Absaugvorrichtung an der Vakuumpumpe angeschlossen ist Siehe die Bedienungsanleitung des Target Capture Systems Target Capture System Operator s Manual B Reagenzrekonstitution Hinweis Die Reagenzrekonstitution sollte vor Beginn des Probentransfers durchgef hrt werden 1 Zur Rekonstitution von Amplifikations GC Enzym und Sonden GC Reagenz mischen Sie die jeweilige Flasche mit lyophilisiertem Reagenz mit der Rekonstitutionsl sung Lassen Sie ggf gek hlte Rekonstitutionsl sungen vor Gebrauch auf Raumtemperatur kommen a Paaren Sie die entsprechende Rekonstitutionsl sung mit dem lyophilisierten Reagenz Die Etiketten sind farbcodiert um die korrekte Paarung zu erleichtern b ffnen
32. DTS System spezifische analytische Leistung Siehe Analytische Leistung des PANTHER Systems f r die f r das PANTHER System spezifische analytische Leistung Analytische Sensitivit t Die analytische Sensitivit t Nachweisgrenze f r N gonorrhoeae wurde durch direkten Vergleich von Verd nnungen von 51 verschiedenen klinischen Isolaten in Kultur und im APTIMA GC Assay bestimmt Der analytische Sensitivit tsanspruch f r den Test ist 50 CFU Test 362 CFU Abstrich 250 CFU mL Urin und 487 5 CFU mL Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap Analytische Spezifitat Insgesamt 154 Kulturisolate wurden mit dem APTIMA GC Assay evaluiert Diese Isolate umfassten 86 Organismen die aus dem Urogenitaltrakt isoliert werden k nnen und 68 zus tzliche Organismen die einen phylogenetischen Querschnitt von Organismen darstellen Die getesteten Organismen umfassten Bakterien Pilze Hefe Parasiten und Viren Alle Organismen au er C psittaci C pneumoniae U urealyticum und die Viren wurden bei 1 0 x 10 Zellen Test in KOVA Trol Urintransportmedien und 60 Organismen wurden in Tupfertransportmedien getestet Die Chlamydia und Neisseria Organismen wurden im PreservCyt L sungsmedium getestet C psittaci VR601 wurde bei 8 0 x 10 Zellen Assay und C psittaci VR125 wurde bei 1 0 x 10 Zellen Assay getestet C pneumoniae wurde bei 4 0 x 10 Zellen Assay und U urealyticum wurde bei 6 7 x 10 Zellen Assay geteste
33. FP TN FN jin poids Spezifit t 95 V I M Mae PPV NPV ve 1 70 5 1 64 0 71 100 478 100 98 5 91 7 100 83 3 100 2 46 7 1 38 0 152 100 590 100 97 4 86 5 99 9 87 5 100 3 45 2 0 43 0 44 100 158 100 100 918 100 100 100 EU Vaginaler 4 152 1 0 151 0 07 100 25 100 100 97 6 100 100 100 selbst ae 5 130 1 O 129 0 08 100 25 100 100 97 2 100 100 100 tice matisch 6 75 5 2 68 0 67 100 478 100 97 1 90 1 99 7 714 100 7 68 0 0 68 0 00 NA 100 94 7 100 NA 100 8 43 0 0 43 0 00 NA 100 91 8 100 NA 100 Ale 629 21 4 604 0 33 100 839 100 99 3 98 3 99 8 84 0 100 1 227 12 2 213 0 53 100 73 5 100 99 1 96 7 99 9 85 7 100 2 197 30 3 163 1 15 7 96 8 83 3 99 9 98 2 94 8 99 6 90 9 994 3 113 4 0 109 0 35 100 39 8 100 100 96 7 100 100 100 4 263 5 3 255 0 1 9 100 478 100 98 8 96 6 99 8 62 5 100 gt ae 5 199 2 0 197 0 1 0 100 15 8 100 100 98 1 100 100 100 6 295 19 3 272 1 68 95 0 75 1 99 9 98 9 96 8 99 8 864 99 6 7 102 0 0 102 0 0 0 NA 100 96 4 100 NA 100 8 50 1 0 49 0 20 100 25 100 100 92 7 100 100 100 Alle 1446 73 11 1360 2 52 97 3 90 7 99 7 99 2 98 6 99 6 86 9 99 9 ZZ zz nun a M AC I US E _ TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assa
34. Frauen APTIMA Urinproben Transportgef e f r m nnliche und weibliche Urinproben Chlorbleiche 5 bis 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung Wasser f r das TIGRIS DTS System Spezifikationen bitte dem Bedienungsanleitung des TIGRIS DTS Systems TIGRIS DTS System Operator s Manual entnehmen Einweghandschuhe SysCheck Kalibrationsstandard APTIMA durchl ssige Kappen Ersatzkappen undurchl ssig Ersatzkappen f r die Kits mit 100 Tests Rekonstitutionsl sungen f r Amplifikations Enzym und Sondenreagenz CL0041 100 Kappen TCH und Selektionsreagenz 501604 100 Kappen Ersatzkappen f r die Kits mit 50 Tests Rekonstitutionsl sungen f r Amplifikations Enzym und Sondenreagenz 501603 100 Kappen TCH und Selektionsreagenz 501604 100 Kappen Optionale Materialien APTIMA Kontrollenkit GEN PROBE Bleichmittelverstarker f r die routinem ige Reinigung von Oberfl chen und Ger ten Testverfahren mit dem TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System Kat Nr 301191 301154C 301162 301041 301040 105575 301078 105668 103036A Kat Nr 301110 302101 Hinweis N here Verfahrensinformationen zum TIGRIS DTS System finden Sie im TIGRIS DTS System Operator s Manual Bedienungsanleitung f r das TIGRIS DTS System APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 25 502185DE Rev E TIGRIS DTS System A Vorbereitung des Arbeitsbereichs Reinigen Sie Arbeitsfl chen auf denen Reagenzien und Proben vorbereit
35. IMA COMBO 2 Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA COMBO 2 Assay Negatives Endozervixabstrich Ergebnis im APTIMA GC Assay Eine Probe zeigte ein abweichendes Ergebnis unbestimmtes Ergebnis f r eine endozervikale Abstrichprobe mit dem APTIMA COMBO 2 Assay positives Ergebnis f r eine endozervikale Abstrichprobe mit dem APTIMA GC Assay APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 53 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 7a Ergebnisse f r m nnliche urethrale Abstriche von symptomatischen Probanden die mit N gonorrhoeae infiziert oder nicht infiziert waren gem Patienteninfektionsstatus Patienten APTIMA ee 2 Assay NAAT 2 APTIMA GC Assay E infektionsstatus MS MU MS MU MS Infiziert 164 Infiziert 1 Infiziert 3 Infiziert 1 Infiziert 2 Infiziert 1 Nicht infiziert 2 Nicht infiziert 1 Nicht infiziert 1 Nicht infiziert 1 Nicht infiziert 2 Ni
36. L CT NCT 2 Jedes APTIMA Kontroligef kann einmal getestet werden Wenn versucht wird mehr als einmal aus dem R hrchen zu pipettieren kann es zu Fehlern aufgrund unzureichender Mengen kommen B Temperatur Raumtemperatur ist definiert als 15 C bis 30 C C Handschuhpuder Wie in jedem Reagenzsystem kann berm iger Puder auf manchen Handschuhen eine Kontamination ge ffneter Reaktionsgef e verursachen Es werden ungepuderte Handschuhe empfohlen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 29 502185DE Rev E TIGRIS DTS System D berwachungsprotokoll f r Laborkontamination f r das TIGRIS DTS System Es gibt viele laborspezifische Faktoren die zu Kontamination beitragen k nnen darunter Testvolumen Arbeitsablauf Krankheitspr valenz und verschiedene andere Laboraktivit ten Diese Faktoren sind zu ber cksichtigen wenn die H ufigkeit der Kontaminations berwachung festgelegt wird Die Intervalle zur Kontaminations berwachung sollten im Hinblick auf die Praktiken und Verfahren jedes Labors festgelegt werden Zur berwachung auf Laborkontamination kann das folgende Verfahren mit dem APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben durchgef hrt werden 1 Beschriften Sie die Tupfertransportgef e mit den Zahlen die den zu testenden Bereichen entsprechen 2 Nehmen Sie den Abstrichtupfer blauer Schaft mit gr nem Aufdruck aus der Verpackung feuchten Sie den
37. Reverse Transkriptase und RNA Polymerase getrocknet in HEPES gepufferter L sung mit 1096 F llreagenz P APTIMA Sondenreagenz GC 1 Fl schchen Nicht infekti se chemilumineszie rende DNA Sonden getrocknet in Succinatpuffer l sung mit lt 5 Detergens TCR B APTIMA Target Capture Reagenz B GC 1x0 30 mL Nicht infekti se Nukleins uren in gepufferter L sung mit 596 Detergens APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Raumtemperatur Schachtel Schachtel 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge AR APTIMA L sung zur Rekonstitution des 1x11 9 mL Amplifikationsreagenzes GC W ssrige L sung mit Konservierungsmitteln ER APTIMA Enzymrekonstitutionsl sung GC 1x6 3mL HEPES gepufferte L sung mit oberfl chenaktiver Substanz und Glyzerol PR APTIMA Sondenrekonstitutionsl sung GC 1x15 2mL Sukzinatgepufferte L sung mit 5 Detergens S APTIMA Selektionsreagenz GC 1x43 0 mL 600 mM Boratpufferl sung mit oberfl chenaktiver Substanz TCR APTIMA Target Capture Reagenz GC 1x26 0 mL Gepufferte Salzl sung mit Festohase und Fanger Oligomeren Rekonstitutions verbindungsst cke 3 Hauptchargen Barcode Blatt 1 Blatt APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 31 502185DE Rev E PANTHER System APTIMA Kontrollenkit nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge PGC NCT APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT 5x1 7mL Nicht infekti se GC Nukleins ure in gepuffe
38. Tupfer im Tupfertransportmedium an und nehmen Sie im ausgewiesenen Bereich mit einer Kreisbewegung einen Abstrich auf 3 Setzen Sie den Tupfer sofort in das Transportgef ein 4 Den Tupferschaft an der Einkerbung vorsichtig brechen Dabei darauf achten dass der Inhalt nicht verspritzt wird 5 Verschlie en Sie das Tupfertransportgef wieder fest 6 Wiederholen Sie Schritt 2 bis 5 f r alle Abstrichbereiche Wenn die Ergebnisse GC positiv oder unbestimmt sind siehe Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse f r weitere f r das TIGRIS DTS System spezifische Informationen zur Kontaminations berwachung Siehe die Bedienungsanleitung f r das TIGRIS DTS System TIGRIS DTS System Operator s Manual APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 30 502185DE Rev E PANTHER System Die Reagenzien f r den APTIMA GC Assay auf dem PAS AER PANTHER System sind unten aufgef hrt Die Symbole zur Identifikation der Reagenzien sind neben dem Reagenznamen angegeben Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Kit 100 Tests 2 Schachteln und 1 Kontrollenkit Kat Nr 302927 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay gek hlte Schachtel Schachtel 1 von 2 nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge A APTIMA Amplifikationsreagenz GC 1 Fl schchen Nukleins uren getrocknet in gepufferter L sung mit 596 F llstoff E APTIMA Enzymreagenz GC 1 Fl schchen
39. a gonorrhoeae Assay 26 502185DE Rev E TIGRIS DTS System Bei den Flaschen f r 100 Tests Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das Rekonstitutionsdatum direkt auf dem Etikett ein siehe Abb 3 k Werfen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Glasfl schchen weg Abb 2 Schritt 8 Warnung Bei der Hekonstitution von Reagenzien Schaumbildung vermeiden Schaum beeintr chtigt die F llstandsmessung im TIGRIS DTS System Abb 2 Rekonstitutionsverfahren mit dem TIGRIS DTS System 2 Vorbereitung von TC Arbeitsreagenz GC wTCR GC f r den Kit mit 100 Tests a b f g Paaren Sie die entsprechenden Flaschen TCR GC und TCR B Pr fen Sie die Reagenzchargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien im Kit miteinander gepaart wurden ffnen Sie die Flasche mit TCR GC und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che ffnen Sie die Flasche mit TCR B und gie en Sie den gesamten Inhalt in die Flasche mit TCR GC Sie k nnen erwarten dass eine geringe Menge Fl ssigkeit in der TCR B Flasche verbleibt Verschlie en Sie die TCR GC Flasche und schwenken Sie die L sung behutsam um den Inhalt zu mischen Vermeiden Sie w hrend dieses Schritts Schaumbildung Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein Werfen Sie die TCR B Flasche und den Deckel weg 3 Vorbereitung von TC Arbeitsreagenz GC
40. ale Abstrichproben m nnliche urethrale Abstrichproben und m nnliche und weibliche Urinproben und Tabelle 5a f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap die auf den DTS Systemen getestet wurden Die klinischen Leistungssch tzwerte f r das TIGRIS DTS System mit endozervikalen Abstrichproben vaginalen Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap w rden angesichts der bereinstimmungsergebnisse erwartungsgem hnlich sein Tabelle 12 Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben positive negative und Gesamt Ubereinstimmung nach Symptomstatus Symptom Probe Geschlecht Weiblich Abstrich M nnlich Sympt Weiblich Urin M nnlich PreservCyt Weiblich N 88 93 47 70 34 DTS TIGRIS TIGRIS TIGRIS TIGRIS 55 66 24 60 28 DTS DTS 0 0 33 0 0 27 0 0 23 1 0 9 0 0 6 DTS Positive bereinstim mung 95 V I 100 93 5 100 100 94 6 100 100 85 8 100 98 4 91 2 100 100 87 7 100 t gibt ein positives Ergebnis an ein negatives Ergebnis V I Vertrauensintervall Endozervikale und vaginale Abstrichproben zusammen genommen Eine Nicht bereinstimmung bei der vaginalen Abstrichprobe Negative bereinstim mung 95 V I 100 89 4 100 100 87 2 100 100 85 2 100 10
41. alytischen Spezifit t Die analytische Sensitivit t des APTIMA GC Assays wurde mithilfe von drei Matrices aus repr sentativen Proben gepr ft Dabei handelte es sich um mit Urintransportmedium UTM bearbeiteten Urin mit Tupfertransportmedium STM verd nnte PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap sowie STM Pools dieser drei Matrices wurden bei den folgenden Konzentrationen mit GC rRNA versetzt 25 fg Assay 250 fg Assay und 2500 fg Assay rRNA quivalent zu 12 5 CFU mL 125 CFU mL oder 1250 CFU mL Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Diese Panels wurden auf drei PANTHER Ger ten unter Verwendung von zwei Reagenzienchargen in 96 Replikaten getestet Die positive bereinstimmung mit dem erwarteten Ergebnis wurde berechnet Die bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen betrug 100 95 V I 96 2 100 f r alle Urin Panels 100 95 V I 96 2 100 f r alle PreservCyt L sung Panels und 100 95 V I 96 1 100 f r alle STM Panels Die analytische Sensitivit t f r den Assay betr gt 125 CFU mL APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 74 502185DE Rev E Analytische Leistung des PANTHER Systems Reproduzierbarkeitsstudie Die Pr zision des APTIMA GC Assays wurde ber drei PANTHER Systeme zwei Kitchargen des APTIMA GC Assays und einen Zeitraum von 24 Tagen hinweg beurteilt Die Panels wurden hergestellt indem STM bei den
42. as wICR GC gr ndlich Geben Sie mit der Wiederholungspipette 100 uL in jedes Reaktionsr hrchen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 15 502185DE Rev E DTS Systeme 9 Das erste Gef des Tests muss die negative Kontrolle und das zweite Gef muss die positive Kontrolle enthalten a Das Etikett der Negativkontrolle f r den APTIMA GC Assay ist rosa Der Etikettentext identifiziert die Negativkontrolle als CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC Das Etikett der Positivkontrolle f r den APTIMA GC Assay ist blau gr n Der Etikettentext identifiziert die Positivkontrolle als CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT b Halten Sie das Gef mit der Negativkontrolle rosa R hrchenetikett in einer Hand oder lassen Sie es im St nder Durchstechen Sie den Verschluss mit einem Mikropipettierer Dabei nicht die Spitze bis zum Boden des Reaktionsgef es dr cken Geben Sie 400 uL der Negativkontrolle rosa R hrchenetikett in das erste Reaktionsr hrchen hinzu Geben Sie auf die gleiche Weise und mit einer neuen Pipettenspitze 400 pL der Positivkontrolle blau gr nes R hrchenetikett zum zweiten Reaktionsr hrchen hinzu 10 Fahren Sie mit dem St nderaufbau fort indem Sie 400 uL jeder Probe in die restlichen Reaktionsr hrchen geben Verwenden Sie f r jede Probe und Kontrolle eine neue Pipettenspitze Das annehmbare Volumen der zum Reaktionsr hrchen hinzugef gten Kontrolle oder Probe ist 400 uL 100 uL Weitere Informationen sie
43. atischen Probanden die anhand des Patienteninfektionsstatus Algorithmus als infiziert oder nicht infiziert mit GC gekennzeichnet wurden zusammen Von den 2787 teilnehmenden Probanden hatten 15 einen unbekannten GC Patienteninfektionsstatus Die Probanden wurden mit einem unbekannten Patienteninfektionsstatus belegt wenn es keine Ergebnisse gab die eine endg ltige Entscheidung ber den Infektionsstatus erlaubt h tten Die Ergebnisse dieser Probanden wurden in den Leistungsberechnungen nicht ber cksichtigt Unter den 7704 Ergebnissen des APTIMA GC Assays waren 22 Proben 0 29 die zuerst ung ltige oder unbestimmte Testergebnisse erzeugten Nach dem Wiederholungstest dieser Proben waren noch 4 unbestimmt und wurden aus den Analysen ausgeschlossen Die restlichen 18 Proben produzierten nach dem Wiederholungstest g ltige Ergebnisse und wurden in den Berechnungen zur klinischen Leistung ber cksichtigt Tabelle 4 Sensitivit t und Spezifit t des APTIMA GC Assays relativ zum Patienteninfektionsstatus nach Symptomstatus und insgesamt f r m nnliche urethrale Abstrichproben m nnliche Urinproben weibliche Endozervix Abstrichproben weibliche Urinproben von der asymptomatischen Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichproben Symptom status Abstrich Symptomatisc 55 171 10 393 1 994 968 100 97 5 95 5 98 8 Probe N TP FP TN FN Sensitivit t 95 V I Spezifit t 95 V I M n
44. belle 10 APTIMA GC Assay Laborinterne Pr zisionsdaten f r PreservCyt unter Einsatz eines 4 Elemente Pr zisionspanels mit 0 bis 500 CFU mL GC Zellen RLU Bediener Zwischen Zwischen i intern Tagen Bedienern Gesamt Panel CFU mL CFU ber ber Mittel n g element PreservCyt rxn einst inet wert SA VK SA VK SA VK SA VK x1000 x1000 x1000 99 x1000 x1000 A 1 0 1 140 39 27 9 313 7 758 3 241 7 132 5 42 2 0 0 00 769 8 245 4 B 5 0 5 140 113 80 7 1211 1 1031 3 85 2 169 8 14 0 150 4 12 4 1056 0 87 2 C 500 50 140 140 100 5636 8 220 7 3 9 135 7 2 4 0 0 0 0 259 1 4 6 D 0 O 136 136 100 1 2 0 5 NA 0 NA 0 3 NA 0 6 NA Vier ung ltige Ergebnisse waren durch Fehlplatzierung einer TTU im Leader HC bedingt Hinweis Die Variabilit t von einigen Faktoren kann numerisch negativ sein Das kann auftreten wenn die durch diese Faktoren bedingte Variabilit t klein ist Wenn das auftritt wird die Variabilit t mit SA gemessen und VK wird auf Null gesetzt 12 NA nicht zutreffend f r negative Panelproben Bediener Lauf Proben mit widerspr chlichen Ergebnissen wurden in der Signalvariabilit tsanalyse ber cksichtigt APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 60 502185DE Rev E Analytische Leistung der DTS Systeme Analytische Leistung der DTS Systeme Siehe Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems im Anschluss an den Abschnitt Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System f r die f r das TIGRIS
45. bstanzen wurde eine Interferenz beobachtet Keine Amplifikationsinhibitoren wurden im APTIMA GC Assay beobachtet Gewinnung Escherichia coli Gardnerella vaginalis Lactobacillus acidophilus Bacteroides ureolyticus und Staphylococcus epidermidis 1 0 x 10 Zellen Assay wurden Proben hinzugef gt die das rRNA Aquivalent von ca 50 GC Zellen 250 fg enthielten Durch diese Zus tze ergab sich keine Interferenz der Amplifikation und Nachweis des GC rRNA mit dem APTIMA GC Assay Probenstabilitatsstudien A Abstrichproben und Urinproben Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen f r endozervikale urethrale und vaginale Abstrichproben wurden mit gepoolten negativen Abstrichproben erzeugt Gepoolten Proben wurde GC mit einer endg ltigen Konzentration von ca 50 CFU pro Reaktion zugesetzt gespikt Die gespikten Proben wurden bei 70 C 20 C 4 C und 30 C gehalten Die Proben wurden im Doppel an den Tagen 0 20 77 und 117 getestet Alle Testbedingungen waren zu allen Zeiten und Temperaturen positiv f r GC Die Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen f r Urinproben wurden mit weiblichen und m nnlichen negativen Urinproben erzeugt Den Urinproben wurde GC mit einer endg ltigen Konzentration von 100 CFU pro Reaktion zugesetzt gespikt Die Proben wurden 24 Stunden bei 30 C belassen bevor sie dem Urintransportmedium UTM hinzugegeben wurden Die UTM Proben wurden dann bei 4 C un
46. bstrichproben sowie weibliche und m nnliche Urinproben Der Assay kann f r Tests mit den folgenden Probentypen von asymptomatischen Personen verwendet werden vom Arzt entnommene endozervikale und vaginale Abstrichproben von der Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche sowie weibliche und m nnliche Urinproben Dieser Assay ist auch zum Test von gyn kologischen Proben von symptomatischen und asymptomatischen Patientinnen bestimmt Diese in Fl schchen mit PreservCyt L sung gesammelten endozervikalen Proben k nnen sowohl vor als auch nach der Papanicolaou Bearbeitung getestet werden Der Test von Proben nach der Papanicolaou Bearbeitung ist ausschlie lich auf Proben beschr nkt die mit dem ThinPrep 2000 System bearbeitet wurden Von den Patienten selbst durchgef hrte vaginale Abstriche sind eine Diagnoseoption f r Frauen bei denen anderweitig keine gyn kologische Untersuchung indiziert ist Das Vaginaltupfer Probenentnahmekit ist nicht f r den Gebrauch zu Hause bestimmt Zusammenfassung und Testerkl rung Neisseria gonorrhoeae Infektionen geh ren zu den weltweit h ufigsten sexuell bertragbaren Infektionen Allein in den Vereinigten Staaten wurden den Centers for Disease Control im Jahre 2010 sch tzungsweise 309 341 Neuinfektionen mit GC 100 8 pro 100 000 Einwohner gemeldet 2 N gonorrhoeae ist der Erreger von Gonorrh Neisseria sind unbewegliche Gram negative Diplokokken Der Gro teil der Gonorrh infektion
47. chen f r Liquid Pap Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap befindet sich kein Tupfer A Pr fen Sie die Probenr hrchen vor dem Laden in den St nder a Wenn sich im Transportgef im Raum zwischen der Fl ssigkeit und dem Deckel Luftblasen befinden zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um die Luftblasen zu entfernen b Wenn ein Transportrgef ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt wenn die Sammelanleitung befolgt wurde zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet c Falls der Flussigkeitsstand in einem Urintransportrohrchen nicht zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien liegt muss die Probe verworfen werden Nicht in ein berf lltes Reaktionsgef stechen d Wenn eine Urinprobe ein Pr zipitat enth lt die Probe bis zu 5 Minuten auf 37 C erw rmen Wenn das Pr zipitat nicht wieder in L sung geht stellen Sie sicher dass das Pr zipitat nicht die Probenabgabe verhindert APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 35 502185DE Rev E PANTHER System Hinweis Bei Nichtbefolgen von Schritt 4a c kann aus dem Probenr hrchendeckel Fl ssigkeit auslaufen Hinweis Pro fehlgeschlagen R hrchen k nnen bis zu 3 getrennte Aliquote getestet werden Wenn versucht wird mehr als 3 Aliquote aus einem Probenr hrchen zu pipettieren kann es zu Fehlern aufgrund unzureich
48. cht infiziert 3 Nicht infiziert 2 Nicht infiziert 386 Nicht infiziert 1 Nicht infiziert NA 1 Nicht infiziert 1 Nicht infiziert 1 Nicht infiziert 2 Gesamt 576 ee NA keine Probe genommen oder fur den Test verf gbar Das Gleichheitszeichen steht f r unbestimmt im Wiederholungstest MS Male Urethral Swab m nnl urethrale Abstrichprobe MU m nnlicher Urin APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 54 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 7b Ergebnisse f r m nnliche Urinproben von Probanden die mit N gonorrhoeae infiziert oder nicht infiziert waren gem Patienteninfektionsstatus Patienten APTIMA nn 2 Assay NAAT 2 APTIMA GC Assay Symptom status Bade infektionsstatus 0 Do MS MU MS MU MU Sympt Asympt Infiziert 164 8 172 Infiziert 1 0 1 Infiziert 3 1 4 Infiziert 1 0 1 Infiziert 2 0 2 Infiziert 1 1 2 Nicht infiziert 0 1 1 Nicht infiziert 2 13 15 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 0 1 1 Nicht infiziert 1 1 2 Nicht infiziert 2 2 4 Nicht infiziert 3 1 4 Nicht infiziert 2 1 3 Nicht infiziert 0 3 3 Nicht infiziert 386 691 1077 Nicht infiziert 1 2 3 Nicht infiziert NA 1 4
49. d 30 C gehalten und dreifach an den Tagen 1 14 32 und 35 getestet Die UTM Proben wurden ebenfalls bei 20 C und 70 C gehalten und dreifach an den Tagen 1 35 und 109 getestet Alle Replikate waren positiv f r GC bei den UTM Proben die bei 4 C und 70 C gehalten wurden Wenn die UTM Proben bei 30 C gehalten wurden waren 94 der Replikate positiv f r GC an Tag 35 Wenn die UTM Proben bei 20 C gehalten wurden waren 98 der Replikate positiv f r GC an Tag 109 B Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Die Daten zur Belegung der empfohlenen Versand und Lagerbedingungen f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden mit den negativen durchgef hrten und nicht durchgef hrten fl ssigen Papanicolaou Abstrichen liquid Pap erzeugt F r die nicht bearbeiteten Proben wurden vier Pools mit Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap getestet nachdem sie im Cytyc PreservCyt L sungsfl schchen gelagert worden waren Jedes Proben Pool wurde mit 50 bis 100 CFU GC Test gespikt bei 2 C 10 C und 30 C gehalten und dann an der APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 63 502185DE Rev E Analytische Leistung der DTS Systeme Baseline und den Tagen 5 7 8 14 18 21 25 und 36 getestet Alle gespikten Proben waren zu allen Zeitpunkten und Temperaturen positiv f r GC F r die bearbeiteten Proben wurden vier Pools mit Proben in Pres
50. d m nnliche urethrale Abstrichproben von den Patienten selbst durchgef hrte vaginale Abstriche und Urinproben vom Mann und von der Frau sind in Tabelle 6 f r jedes Pr fzentrum und insgesamt aufgezeigt Der tats chliche positive pr diktive Wert PPV und negative pr diktive Wert NPV f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap sind in Tabelle 6a dargestellt Tabelle 2 Positive und negative Vorhersagewerte f r hypothetische Pr valenzraten in Nordamerika Hypothetische Pos pr d Wert PPV Neg pr d Wert Pr valenzrate Sensitivit t Spezifit t NPV OT 120 96 993 972 994 RLU Verteilung f r APTIMA GC Assay Abbildung 4 zeigt die RLU Verteilung f r den APTIMA GC Assay f r die folgenden Probentypen die in der klinischen Studie getestet wurden Bei symptomatischen Probanden waren dies vom Arzt entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale Abstrichproben sowie vom Patienten durchgef hrte weibliche und m nnliche Urinproben und bei asymptomatischen Probanden vom Arzt entnommene endozervikale und vaginale Abstrichproben sowie vom Patienten bzw der Patientin durchgef hrte vaginale Abstrichproben weibliche und m nnliche Urinproben Tabelle 3 fasst die RLU Verteilung f r die gesamten positiven und gesamten negativen Ergebnisse sowie die falsch positiven und falsch negativen Ergebnisse f r jeden Probentyp relativ zum Patienteninfektionsstatus
51. denreagenzien m ssen vor dem Start des Tests auf Raumtemperatur 15 C bis 30 C gebracht werden 2 Wenn das rekonstituierte Sondenreagenz einen Niederschlag enth lt der bei Raumtemperatur nicht wieder in L sung geht erw rmen Sie die mit Deckel verschlossene Flasche 1 bis 2 Minuten auf eine Temperatur nicht ber 62 C Nach diesem Erw rmungsschritt kann das Sondenreagenz verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Mischen Sie das Sondenreagenz durch Umdrehen ohne Schaum zu bilden vor der Ladung ins System 3 Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umdrehen der Reagenzien Schaumbildung vermeiden 4 F llen Sie Reagenzflaschen nicht nach Das PANTHER System erkennt Flaschen die nachgef llt wurden und nimmt sie nicht an D Probenhandhabung 1 Lassen Sie die Kontrollen und Proben vor der Verarbeitung auf Raumtemperatur kommen 2 Proben nicht mit dem Vortex Mischer mischen 3 berpr fen Sie optisch dass jedes Probenr hrchen eines der folgenden Kriterien erf llt a In Unisex Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner blauer APTIMA Entnahmetupfer b In Vagina Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner rosafarbener APTIMA Entnahmetupfer c In Urin Probentransportr hrchen liegt das End Urinvolumen zwischen den schwarzen F llstandsmarkierungen d In APTIMA Probentransportr hr
52. die Absaugflaschen Bringen Sie die Schnellverschlussvorrichtung an der TCS Einheit an Entsorgen Sie beide Handschuhe vorsichtig 4 TCS Einheit Wischen Sie die Oberfl chen der TCS Einheit der Absaugvorrichtung und der Waschpuffer Auswurfspitzen mit Papiert chern ab die mit 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung angefeuchtet wurden Sp len Sie sie im Anschluss an den Bleichschritt mit Wasser ab und trocknen Sie die Oberfl chen vollst ndig mit Papiert chern ab 5 Stander Tauchen Sie die St nder in 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung Stellen Sie dabei sicher dass sie von der Natriumhypochloritl sung bedeckt sind Lassen Sie die St nder 10 Minuten eingetaucht Eine l ngere Exposition kann Besch digung der St nder zur Folge haben Sp len Sie die St nder gr ndlich mit Wasser ab und setzen Sie sie auf eine saubere saugf hige Unterlage Lassen Sie die St nder gut an der Luft trocknen Lassen Sie die St nder aufrecht nicht umgedreht trocknen um ihre Lebensdauer zu verl ngern Testkontamination 1 Verunreinigungsmaterialien k nnen eingeschleppt werden wenn w hrend des Testprotokolls nicht mit gen gend Vorsicht vorgegangen wird 2 Die TTUs m ssen in Deaktivierungsfl ssigkeit dekontaminiert werden wie unter Detektion beschrieben Die TTUs d rfen nicht wieder verwendet werden 3 F hren Sie eine regelm ige Dekontamination der Ger te und Arbeitsfl chen nach der
53. die Reagenzchargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien im Kit miteinander gepaart wurden c Offnen Sie die Flasche mit TCR GC und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che d ffnen Sie die Flasche mit TCR B und gie en Sie den gesamten Inhalt in die Flasche mit TCR GC Sie k nnen erwarten dass eine geringe Menge Fl ssigkeit in der TCR B Flasche verbleibt e Verschlie en Sie die TCR GC Flasche und schwenken Sie die L sung behutsam um den Inhalt zu mischen Vermeiden Sie w hrend dieses Schritts Schaumbildung f Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein g Werfen Sie die TCR B Flasche und den Deckel weg APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 34 502185DE Rev E PANTHER System 3 Vorbereitung von Selektionsreagenz a Pr fen Sie die Chargennummer auf der Reagenzflasche um sicherzustellen dass sie mit der Chargennummer auf dem Hauptchargen Barcodeblatt bereinstimmt b Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein Hinweis Mischen Sie Amplifikations GC Enzym GC Sonden GC und Selektions GC Reagenz vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umarehen der Heagenzien Schaumbildung vermeiden C Vorbereitung von Reagenzien f r bereits rekonstituierte Reagenzien 1 Zuvor rekonstituierte Sonden Amplifikations Enzym und Son
54. e Ger te m ssen regelm ig mit einer 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung dekontaminiert werden Spezifisch f r DTS Systeme H Ein getrennter Bereich f r HPA wird dringend empfohlen um die Amplikonkontamination im Test auf ein Mindestma zu beschr nken Dieser speziell reservierte Bereich sollte von den Reagenzvorbereitungs Target Capture und Amplifikationsbereichen entfernt sein Um Kontamination der Laborbereiche mit Amplikon zu vermeiden sollte im Laborbereich ein Arbeitsfluss in einer Richtung implementiert werden angefangen bei der Reagenzvorbereitung bis hin zu HPA Proben Ger te und Reagenzien sollten nicht in einen Bereich zur ckgebracht werden wo ein vorheriger Schritt ausgef hrt wurde Auch sollte das Personal nicht in vorherige Arbeitsbereiche gehen ohne die vorschriftsm igen Sicherheitsvorkehrungen gegen Kontamination zu treffen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 4 502185DE Rev E Allgemeine Informationen Probenbezogen J F r die Entnahme von endozervikalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben darf nur das APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden F r die Sammlung von Urinproben darf nur das APTIMA Urinprobenentnahmekit f r m nnliche und weibliche Urinproben verwendet werden F r vom Arzt entnommene bzw von der Patientin selbst durchgef hrte Vaginalabstriche darf nur das APTIMA Probenentnahmekit
55. e des Rekonstitutionsverbindungsst cks fest in die Fl schchen ffnung Abb 2 Schritt 1 d Offnen Sie die Flasche mit der entsprechenden Rekonstitutionsl sung und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che e Halten Sie die Flasche mit der Rekonstitutionsl sung auf dem Labortisch fest und stecken Sie das andere Ende des Rekonstitutionsverbindungsst cks in die Flaschen ffnung Abb 2 Schritt 2 f Drehen Sie die zusammengef gten Flaschen langsam um Lassen Sie die L sung aus der Flasche in das Glasfl schchen ablaufen Abb 2 Schritt 3 g Mischen Sie die L sung im Fl schchen durch behutsames Schwenken Beim Schwenken des Fl schchens Schaumbildung vermeiden Abb 2 Schritt 4 h Warten Sie bis sich das gefriergetrocknete Reagenz aufgel st hat und drehen Sie dann die zusammengef gten Flaschen erneut um Ein Neigungswinkel von 45 erm glicht die Schaumbildung auf ein Mindestma zu beschr nken Abb 2 Schritt 5 Lassen Sie die gesamte Fl ssigkeit in die Kunststoffflasche zur cklaufen i Entfernen Sie das Rekonstitionsverbindungsst ck und das Glasfl schchen Abb 2 Schritt 6 j Verschlie en Sie die Flasche wieder e Ziehen Sie bei den 50 Test Flaschen das obere Etikett ab und werfen Sie es weg Tragen Sie die Initialen des Bedieners das Rekonstitutionsdatum und die Chargennummer des lyophilisierten Reagenzes auf dem verbleibenden Etikett ein Abb 2 Schritt 7 APTIMA Neisseri
56. ei der Auswertung von APTIMA GC Assayergebnissen f r asymptomatische Personen oder Personen in Populationen mit geringer Pr valenz empfohlen Ein negatives Ergebnis schlie t nicht das Vorliegen einer GC Infektion aus weil die Ergebnisse von der angemessenen Probenentnahme Abwesenheit von Inhibitoren und ausreichender nachzuweisender rRNA abh ngen Die Testergebnisse k nnen durch eine unsachgem e Probenentnahme falsche Probenlagerung technische Fehler Probenverwechslung oder Target Konzentrationen unter der Nachweisgrenze des Assays beeintr chtigt sein Der Test von Endozervikalproben wird bei Patientinnen empfohlen bei denen der klinische Verdacht auf eine Chlamydien oder Gonokokkeninfektion besteht Wenn sowohl ein Papanicolaou Abstrich als auch eine Endozervix Abstrichprobe entnommen werden muss der Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap vor der Endozervix Abstrichprobe entnommen werden APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 40 502185DE Rev E Einschr nkungen Einschr nkungen A Dieser Test darf nur von Mitarbeitern durchgef hrt werden die im Verfahren unterwiesen wurden Eine Nichtbefolgung der Anweisungen in dieser Packungsbeilage kann fehlerhafte Ergebnisse zur Folge haben B Die Auswirkungen von Tamponverwendung Intimduschen und variablen Faktoren bei der Probenentnahme auf den Nachweis von GC wurden nicht beurteilt C Die Pr senz von Schleimhaut in Endozervikalproben bee
57. eiten ein APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 19 502185DE Rev E DTS Systeme F Mischen mit dem Vortex Mischer Richtiges Mischen mit dem Vortex Mischer ist fur die erfolgreiche Performance des APTIMA GC Assays wichtig Bei Erzielung einer geeigneten Vortexbewegung rotiert die Suspension bei einer Geschwindigkeit die in der Lage ist die L sung in die obere Halfte des Gef f es anzuheben Diese Manipulation Mischen mit dem Vortex Mischer wird f r angegebene Zeitr ume aufrecht erhalten Zum Mischen von Reaktionsmischungen mit dem Vortex Mischer stellen Sie den Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e auf die niedrigste Geschwindigkeitseinstellung ein sichern den St nder und schalten den Mischer ein Steigern Sie langsam das Tempo bis die Fl ssigkeit auf die halbe H he des Reaktionsgef es angestiegen ist Mischen Sie mit dem Vortex Mischer 10 Sekunden ber den angegebenen Zeitraum oder bis sich eine gleichm ige Farbe einstellt Stellen oie dann die Geschwindigkeit auf die niedrigste Einstellung bevor Sie den Vortex Mischer f r mehrere R hrchen ausschalten und den St nder entnehmen Die Reaktionsmischungen d rfen nicht die Abdeckfolie ber hren G Wasserbader 1 Der Wasserpegel in den Wasserb dern muss im Bereich von 3 8 cm bis 5 cm 1 5 Zoll 2 0 Zoll gemessen vom Metall Auflagetablett unten am Wasserbad bis zur Wasseroberfl che gehalten werden Damit wird eine ordnungsgem e W rme bertragung sicherge
58. ek le werden mithilfe von Magneten zur Seite des Reaktionsr hrchens gezogen und der berstand wird aspiriert Die Partikel werden gewaschen um Restprobenmatrix zu entfernen die Amplifikationsreaktionshemmer enthalten k nnen Nach Abschluss der Target Capture Schritte sind die Proben zur Amplifikation bereit Target Amplifikationstests basieren auf der F higkeit von komplement ren Oligonukleotid Primern zur Bindung an spezifischen Stellen Annealing und zur Erm glichung einer enzymatischen Amplifikation der Target Nukleins urestr nge Die Gen Probe TMA Reaktion repliziert eine spezifische Region des 16S rRNA von GC ber DNA Intermediate F r das Targetmolek l wird eine spezifische Reihe von Primern verwendet Die Detektion der rRNA Amplifikationsproduktsequenzen Amplikon wird durch Nukleins urehybridisierung erbracht Eine einstr ngige chemilumineszierende DNA Sonde die komplement r zu einer Region des Target Amplikons ist wird mit einem Acridiniumestermolek l markiert Die markierte DNA Sonde vereinigt sich mit Amplikon und bildet stabile RNA DNA Hybride Das Selection APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 3 502185DE Rev E Allgemeine Informationen Reagenz differenziert die hybridisierte von der nicht hybridisierten Sonde und eliminiert somit die Erzeugung eines Messsignals von einer nicht hybridisierten Sonde W hrend des Detektionsschritts wird Licht das von den markierten RNA DNA Hybriden emittiert wird als Photonens
59. em Etikett ein Abb 1 Schritt 7 j Werfen Sie das Rekonstitutionsverbindungsst ck und das Fl schchen weg Abb 1 ochritt 8 Abb 1 Rekonstitutionsverfahren mit DTS Systemen 2 Zuvor rekonstituiertes Sonden GC Amplifikations GC und Enzymreagenz muss vor dem Start des Assays auf Raumtemperatur 15 C bis 30 C gebracht werden Wenn das Sondenreagenz ein Pr zipitat enth lt das bei Raumtemperatur nicht wieder in L sung geht erw rmen Sie es 1 bis 2 Minuten auf 62 C Nach diesem Erw rmungsschritt kann das Sondenreagenz verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Nach der Resuspension durch vorsichtiges Umdrehen vermischen Schaumbildung vermeiden Hinweis Dieser Umdrehschritt muss jedes Mal erfolgen wenn das Pr zipitat in L sung gebracht wird ob durch Erhitzen auf 62 C oder Erw rmen auf Raumtemperatur 3 Vorbereitung von Target Capture Arbeitsreagenz GC wTCR GC a Transferieren Sie 20 mL des TCR GC in einen speziell reservierten sauberen trockenen Beh lter von entsprechender Gr e b Geben Sie mit einer Mikropipette 200 uL TCR B in das TCR GC Mischen Sie die L sung gr ndlich durch Schwenken Etikettieren Sie den Beh lter Tragen Sie die Initialen des Bedieners das Herstellungsdatum und beide Chargennummern ein Hinweis F r eine kleinere Anzahl an Reaktionen Proben und Kontrollen verwenden Sie die folgenden Angaben zur Berechnung der TCR GC und TCR B Volumina V
60. eme Klinische Leistung der DTS Systeme Siehe Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System im Anschluss an den Abschnitt Analytische Leistung der DTS Systeme f r die f r das TIGRIS DTS System spezifische klinische Leistung Klinische Probenstudie mit Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben Vaginalabstrichproben und Urinproben Vom Arzt entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale Abstrichproben von den Patienten selbst durchgef hrte vaginale Abstriche und Urinproben vom Mann und der Frau wurden von 2787 symptomatischen und asymptomatischen m nnlichen und weiblichen Probanden entnommen die an acht geographisch verschiedenen Pr fzentren in Nordamerika an Kliniken f r Gyn kologie Geburtshilfe sexuell bertragbare Krankheiten STD Teenager und Familienplanung teilnahmen Die Probanden wurden als symptomatisch klassifiziert wenn sie Symptome wie Ausfluss Dysurie und Unterleibsschmerzen berichteten Die Probanden wurden als asymptomatisch klassifiziert wenn sie keine Symptome berichteten Von den 1392 asymptomatischen Probanden die an der Studie teilnahmen waren 2 im Alter von unter 16 Jahren 237 waren im Altersbereich von 16 bis 20 423 waren im Altersbereich von 21 bis 25 und 730 waren im Alter von ber 25 Jahren Von den 1395 symptomatischen Probanden die an der Studie teilnahmen waren 211 im Altersbereich von 16 bis 20 494 waren im Altersbereich von 21 bis 25 und 690 waren
61. en f r Zytolyse und RNA Stabilisierung mit aufgenommen werden um den Richtlinien oder Anforderungen von rtlichen regionalen und oder staatlichen Bestimmungen und Akkreditierungsorganisationen zu gen gen Die Positivkontrolle f r GC mit der Bezeichnung CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT enth lt nicht infekti se GC rRNA Bei Bedarf k nnen zus tzliche Kontrollen als Kit bestellt werden Die richtige Vorbereitung der Proben wird visuell durch das Vorhandensein eines einzigen APTIMA Probenabstrichtupfers im Probentransportgef ein endg ltiges Urinvolumen zwischen den schwarzen F lllinien eines Urinproben Transportgef es oder die Abwesenheit eines Abstrichtupfers im APTIMA Probentransportgef f r Papanicolaou Abstriche liquid Pap best tigt APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 38 502185DE Rev E Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Die positiven Kontrollen m ssen die folgenden Testergebnisse produzieren Kontrolle Gesamt RLU x1000 GC Ergebnis Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT 0 und lt 50 Negativ gt 100 und lt 12 000 Positiv A Ein Ergebnis von Null 0 x 1000 RLU auf dem Laufbericht stellt einen Wert zwischen Null und 999 RLU dar RLU Werte von unter 160 auf DTS Systemen oder 690 auf dem TIGRIS DTS System oder PANTHER System werden als ung ltig berichtet 1 Die APTIMA Assay Software beurteilt die Kontrollen a
62. en DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Das gek hlte Kit enth lt auch die folgenden Artikel in einer Aufbewahrungsschale nach Empfang bei 2 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge AR APTIMA L sung zur Rekonstitution des Amplifikationsreagenzes GC 1x9 3mL W ssrige L sung mit Konservierungsmitteln ER APTIMA Enzymrekonstitutionsl sung 1x 3 3 mL HEPES gepufferte L sung mit oberfl chenaktiver Substanz und Glyzerol PR APTIMA Sondenrekonstitutionsl sung GC 1x 12 4 mL Sukzinatgepufferte L sung mit lt 5 Detergens APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 10 502185DE Rev E DTS Systeme Das gek hlte Kit enth lt auch die folgenden Artikel in einer Aufbewahrungsschale nach Empfang bei 2 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge S APTIMA Selection Reagenz 1 x 31 mL 600 mM Boratpufferl sung mit oberfl chenaktiver Substanz Rekonstitutions verbindungsst cke 3 Abdeckfolie 1 Packung APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Raumtemperatur Schachtel Schachtel 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Symbol Bestandteil Menge TCR APTIMA Target Capture Reagenz GC 1x22mL Gepufferte Salzl sung mit Festphase und F nger Oligomeren W APTIMA Waschl sung 1x402 mL 10 mM HEPES gepufferte L sung mit 2 Detergens DF APTIMA Puffer f r Deaktivierungs fl ssigkeit 1x402 mL 800 mM Bicarbonat gepufferte L sung O APTIMA Olreagenz 1 x 24 6 mL Silikon l Erforderliche jed
63. en Sondenreagenzes sollte entsprechend eingeschr nkt werden Nach Erw rmung auf Raumtemperatur k nnen manche Kontrollgef e eine Tr bung aufweisen oder Pr zipitate enthalten Tr bung oder Pr zipitate in Verbindung mit Kontrollen haben keine Auswirkung auf die Leistung der Kontrollen Wenn klare Kontrollen gew nscht werden kann die Solubilisierung beschleunigt werden indem sie im oberen Raumtemperaturbereich 15 C bis 30 C inkubiert werden M Die Reagenzien nicht einfrieren Probenentnahme und lagerung Der APTIMA GC Assay ist zum Nachweis der Pr senz von GC in vom Arzt entnommenenendozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben von der Patientin selbst durchgef hrten vaginalen Abstrichen weiblichen und m nnlichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap bestimmt Die Leistung von anderen als mit den folgenden Probenentnahmekits entnommenen Proben wurde nicht beurteilt APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und Frauen APTIMA Probenentnahmekit f r Vaginalabstriche APTIMA Probentransferkit zur Verwendung mit in PreservCyt L sung entnommenen gyn kologischen Proben A Anweisungen zur Probenentnahme Die Anleitung zur Probengewinnung ist in der Packungsbeilage des entsprechenden Probenentnahmekits enthalten B Probentransport
64. en sind unkomplizierte Infektionen des unteren Genitaltrakts die asymptomatisch sein k nnen Wenn sie bei Frauen jedoch unbehandelt bleiben k nnen sie aszendieren und entz ndliche Beckenerkrankungen pelvic inflammatory disease PID verursachen PID kann sich als Endometritis Salpingitis Beckenperitonitis und Tuboovarialabszess manifestieren Bei einem kleineren Prozentsatz von Personen mit Gonokokkeninfektionen kann sich eine disseminierte Gonokokkeninfektion Disseminated Gonococcal Infection DGI entwickeln 8 11 Die herk mmliche Diagnose von GC Infektion erfordert eine Isolierung des Organismus auf selektiven Mitteln oder die Beobachtung von Diplokokken in nach Gram gef rbten Ausstrichen 9 Die Kulturmethoden k nnen eine gute klinische Sensitivit t aufweisen sind aber hochgradig abh ngig von der vorschriftsm igen Probenhandhabung Die falsche Probenlagerung und falscher Probentransport kann zum Verlust der Lebensf higkeit des Organismus f hren und falsch negative Testergebnisse produzieren Au erdem k nnen eine unsachgem e Probenentnahme toxisches Probenmaterial und die Wachstumshemmung durch Bestandteile der K rpersekrete ebenfalls zu falsch negativen Testergebnissen f hren 3 10 H ufig verwendete Nicht Kultur Verfahren zur GC Dektektion umfassen direkte DNA Sondentests und Nukleins ure Amplifikationstests nucleic acid amplification tests NAATs APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 2 502185DE Rev E Allge
65. en und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurde bei Jugendlichen unter 16 Jahren nicht beurteilt T Testen von urethralen Abstrichproben von asymptomatischen M nnern wird wegen des geringen pr diktiven Wertes eines positiven Ergebnisses wie es in der klinischen Studie beobachtet wurde nicht empfohlen U Die Leistung des TIGRIS DTS Systems wurde nicht auf H hen ber 2240 m 7355 Fu ermittelt Weitere volumetrische Pr fungen und assayspezifische Untersuchungen werden vor oder im Zuge des Aufstell und Abnahmeverfahrens in Laboren die auf einer H he ber N N von mehr als 2240 m 7355 Fuf3 liegen durchgef hrt V Die Leistung des PANTHER Systems wurde nicht auf H hen ber 2000 m 6561 Fu ermittelt W Es gibt keinen Nachweis f r Abbau von Nukleins uren in PreservCyt L sung Wenn ein Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap geringe Mengen an GC Zellmaterial aufweist kann eine ungleiche Verteilung dieses Zellmaterials auftreten Im Vergleich zur direkten Probenentnahme mit dem APTIMA Tupfertransportmedium ergibt auch das zus tzliche Volumen der PreservCyt L sung eine gr ere Verd nnung des Probenmaterials Diese Faktoren k nnen die F higkeit beeintr chtigen kleine Mengen von Organismen im gesammelten Material nachzuweisen Wenn negative Ergebnisse aus der Probe nicht dem klinischen Eindruck entsprechen kann eine
66. ender Mengen kommen E Vorbereitung des Systems 1 Richten Sie das System entsprechend den Anweisungen im Bedienungsanleitung f r das PANTHER System PANTHER System Operator s Manual und im Abschnitt Verfahrenshinweise ein Achten Sie darauf dass Reagenzienst nder und TCR Adapter geeigneter Gr e verwendet werden 2 Laden Sie die Proben Verfahrenshinweise A Kontrollen 1 Um einen vorschriftsm igen Betrieb mit der APTIMA Assay Software f r das PANTHER System sicherzustellen ist ein Paar Kontrollen erforderlich Die R hrchen mit Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC und Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT k nnen in eine beliebige St nderposition bzw Bahn im Probenfach des PANTHER Systems geladen werden Die Pipettierung der Patientenproben beginnt sobald eine der beiden folgenden Bedingungen erf llt ist a Das System bearbeitet derzeit ein Kontrollenpaar b G ltige Ergebnisse f r die Kontrollen werden auf dem System registriert 2 Sobald die Kontrollenr hrchen f r ein bestimmtes Reagenzienkit pipettiert wurden und in Bearbeitung sind k nnen mit dem zugeh rigen Assayreagenzienkit bis zu 24 Stunden lang Patientenproben ausgef hrt werden es sei denn dass a die Kontrollen ung ltig sind b das zugeh rige Assayreagenzienkit aus dem System entfernt wird c die Haltbarkeit des zugeh rigen Assayreagenzienkits berschritten ist 3 Jedes APTIMA Kontrollgef kann einmal getestet werden Wenn
67. ervCyt L sung verwendet um die Stabilit t der bearbeiteten Proben bei 2 C bis 30 C zu bestimmen Jedes negative Proben Pool wurde mit 50 bis 100 CFU GC Test gespikt und dann an der Baseline getestet Vor der Bearbeitung wurden die Proben in PreservCyt L sung sieben 7 Tage bei 30 C gelagert um den Zeitablauf zwischen der Probenentnahme der Verarbeitung der Papanicolaou Abstriche und dem Versand an ein Mikrobiologie Testlabor zu simulieren Nach sieben Tagen bei 30 C wurden 1 mL Aliquote eines jeden Pools in ein APTIMA Probentransferr hrchen transferiert und an der Baseline getestet bevor sie bei 2 C 10 C und 30 C aufbewahrt wurden Die bearbeiteten Proben wurden dann 17 Tage bei einer Lagertemperatur von 30 C und 36 Tage bei einer Lagertemperatur von 2 C bis 10 C getestet Alle gespikten Proben waren zu allen Zeitpunkten und Temperaturen positiv f r GC Die Daten zur Belegung l ngerer Lagerbedingungen wurden von vier Pools negativer bearbeiteter Proben in PreservCyt L sung die bei Temperaturen unter dem Gefrierpunkt getestet wurden erzeugt Jedes Pool wurde mit 50 bis 100 CFU GC Test gespikt und dann an der Baseline getestet Jedes Pool wurde zuerst 14 Tage bei 30 C aufbewahrt und dann bei 20 C oder 70 C im Verlauf von 106 Tagen gelagert Alle gespikten Proben waren zu allen Zeitpunkten und Temperaturen positiv f r GC Zus tzliche Stabilit tsstudie mit bei 20 C gefrorener Probe Die Daten zur Belegung de
68. et werden sollen Wischen Sie die Arbeitsfl chen mit einer Natriumhypochloritl sung von 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen einwirken Sp len Sie sie anschlie end mit Wasser ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Decken Sie die Arbeitsfl che auf der die Reagenzien und Proben vorbereitet werden mit sauberen absorbierenden Labortischunterlagen mit Kunststoffunterschicht ab B Reagenzrekonstitution Vorbereitung eines neuen Kits Hinweis Die Heagenzrekonstitution sollte vor Beginn von Arbeiten mit dem TIGRIS DTS System durchgef hrt werden 1 Zur Rekonstitution von Amplifikations GC Enzym und Sonden GC Reagenz f r die Kits mit 100 Tests und 50 Tests mischen Sie die Flaschen mit lyophilisiertem Reagenz mit der Rekonstitutionsl sung Lassen Sie ggf gek hlte Rekonstitutionsl sungen vor Gebrauch auf Raumtemperatur kommen a Paaren Sie jede Rekonstitutionsl sung mit ihrem lyophilisierten Reagenz Stellen Sie vor Anbringung des Rekonstitutionsverbindungsst cks sicher dass die Rekonstitutionsl sung und das lyophilisierte Reagenz entsprechend farbcodierte Etiketten aufweisen b Pr fen Sie die Chargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien richtig miteinander gepaart wurden c Offnen Sie das Fl schchen mit dem gefriergetrockneten Reagenz und stecken Sie das gekerbte End
69. f r Vaginalabstriche verwendet werden K Die Verfallsdaten auf den Probenentnahmekits beziehen sich auf die Entnahmestelle und nicht die Testeinrichtung Zu irgendeinem Zeitpunkt vor dem Verfallsdatum des Probenentnahmekits gesammelte Proben die gem der Packungsbeilage transportiert und gelagert wurden sind g ltig f r Tests selbst wenn das Verfallsdatum auf dem Entnahmegef berschritten wurde L Die PreservCyt L sung wurde als alternatives Medium zum Test mit dem APTIMA GC Assay validiert Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die mit dem ThinPrep 3000 Prozessor oder anderen Ger ten bearbeitet wurden wurden nicht zum Test auf Neisseria gonorrhoeae mit dem APTIMA GC Assay beurteilt M Nach der Zugabe von Urin muss der F llstand im Urintransportgef zun chst zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien auf dem Reaktionsgef etikett liegen Sonst muss die Probe verworfen werden N Um die Probenintegrit t zu wahren m ssen w hrend des Probenversands die ordnungsgem en Lagerbedingungen aufrecht erhalten werden Die Probenstabilitat unter anderen Versandbedingungen als den hier empfohlenen wurde nicht beurteilt O Proben k nnen infekti s sein Bei der Durchf hrung dieses Tests sind die allgemein g ltigen Vorsichtsma nahmen zu befolgen Der Laborleiter muss die richtigen Handhabungs und Entsorgungverfahren festlegen Es darf nur Personal das in der Handhabung von infek
70. f Null gesetzt 12 Die laborinterne Pr zision f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap die mit dem APTIMA GC Assay getestet wurden wurde durch Spiken der PreservCyt Flaschchen mit 20 GC CFU pro Fl schchen 0 1 CFU pro Reaktion und 100 GC CFU pro Fl schchen 0 5 CFU pro Reaktion bestimmt Die Fl schchen mit 10 000 GC CFU pro Fl schchen 50 CFU pro Reaktion und ungespikte PreservC yt Fl schchen wurden als positive und Negativkontrollen getestet Zehn auf jeder CFU Stufe gespikte Flaschchen und zehn ungespikte Fl schchen wurden zwischen zwei Bedienern aufgeteilt Die Bediener mischten die Fl schchen im Vortex Mischer und transferierten dann 14 Aliquote je 1 0 mL pro Fl schchen in 14 APTIMA Transferr hrchen wie in der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits beschrieben Die Bediener wurden bez glich der Titer der Proben verblindet Jede der resultierenden Pap STM Proben wurde einmal im APTIMA GC Assay getestet Insgesamt f nf L ufe wurden ber einen Zeitraum von f nf Tagen durchgef hrt um 140 Ergebnisse auf der 0 1 0 5 und 50 CFU Stufe zu erhalten Es wurden 136 g ltige Ergebnisse und 4 ung ltige Ergebnisse f r das negative Kontroll Panel erhalten Die ung ltigen Ergebnisse waren durch Fehlplatzierung einer TTU im Leader HC bedingt Die Ergebnisse sind in Tabelle 10 zusammengestellt APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 59 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Ta
71. fg Assay wurde als Zielkonzentration verwendet da diese die analytische Sensitivit t des Assays darstellt Die Proben wurden auf dem PANTHER System getestet APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 75 502185DE Rev E Alle Proben die Target Nukleins uren enthielten waren positiv als sie bei einem Gehalt von 10 Vol Blut in Abstrichproben Vaginalabstrichproben nachbehandelten Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und bei einem Gehalt von 30 Vol Blut in Urinproben getestet wurden Alle Proben die kein Target enthielten wurden korrekt als negativ identifiziert Diese Ergebnisse sind identisch mit denen die f r die das TIGRIS DTS System aufgezeigt wurden wenn die Proben mit den gleichen Blutmengen versetzt wurden Blut das Abstrichproben Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap und Urinproben in viel gr eren Mengen hinzugesetzt wurde als sie bei der normalen Probenentnahme erwartet w rden zeigte keine interferierende Wirkung auf die Ergebnisse mit dem PANTHER System Verschleppungsstudien f r das PANTHER System Um nachzuweisen dass das PANTHER System das Risiko falsch positiver Ergebnisse infolge von Kontamination auf ein Mindestma beschr nkt wurde eine Analysestudie ber mehrere Tage mit gespikten Panels auf drei PANTHER Systemen durchgef hrt Die Verschleppung wurde beurteilt indem etwa 20 Proben mit hohem GC Titer zwischen negative P
72. gt 12 000 A Ein Ergebnis von Null 0 x 1000 RLU auf dem Laufbericht stellt einen Wert zwischen Null und 999 RLU dar RLU Werte von unter 160 auf DTS Systemen oder 690 auf dem TIGRIS DTS System oder PANTHER System werden als ung ltig berichtet Die CDC Guidelines sehen vor Man sollte zus tzliche Routinetests bei Personen mit positiven CT oder GC Screeningtests erw gen wenn die Risikofaktor Informationen oder tats chliche Surveys aufzeigen dass die Pr valenz gering ist was einen niedrigeren PPV Wert ergibt z B lt 90 N here Einzelheiten zu Zusatztests und Patientenbehandlung nach einem positiven Screeningtest entnehmen Sie bitte den CDC Guidelines 1 A Siehe Tabelle 3 f r RLU Verteilung der Ergebnisse Die RLU Gr e ist kein Hinweis auf die Organismenkonzentration in der Probe m niedrigen positiven Bereich weisen die Daten darauf hin dass positive Ergebnisse sorgf ltig ausgewertet werden sollten unter der Annahme dass die Wahrscheinlichkeit eines falsch positiven Ergebnisses h her sein kann als die eines wahren positiven Ergebnisses Ergebnisse und Akzeptanz von Qualit tskontrollen Die APTIMA Negativkontrolle f r GC mit der Kennzeichnung CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC und die APTIMA Positivkontrolle f r GC mit der Kennzeichnung CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT fungieren als Kontrollen f r die Assayschritte Target Capture Amplifikation und Nachweis Es k nnen weitere Kontroll
73. he unter Verfahrenshinweise Pipettierung von Kontrolle und Probe Target Capture Die Verwendung des GEN PROBE Target Capture Systems ist in der Bedienungsanleitung des Target Capture Systems Target Capture System Operator s Manual beschrieben Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das SB100 Anwendungsblatt 11 Bedecken Sie die TTUs mit Abdeckfolien und sch tteln Sie den St nder vorsichtig von Hand Nicht mit dem Vortex Mischer mischen Den St nder 30 x 5 Minuten lang bei 62 C 1 C in einem Wasserbad inkubieren 12 Entfernen Sie den Stander aus dem Wasserbad und tupfen Sie den Boden der Reaktionsgef e auf saugfahigem Material ab 13 Stellen Sie sicher dass die Abdeckfolien fest angelegt sind Ersetzen Sie sie ggf durch neue Abdeckfolien und versiegeln Sie die TTUs fest 14 Mischen Sie den Stander 60 Sekunden mit dem Vortex Mischer fur mehrere Rohrchen Einzelheiten siehe unter Verfahrenshinweise Mischen mit dem Vortex Mischer Beginnen Sie mit dem Mischen mit dem Vortex Mischer innerhalb von 2 Minuten nach der Entnahme des Standers aus dem Wasserbad 15 Inkubieren Sie den Stander mit angelegten Abdeckfolien bei Raumtemperatur 30 5 Minuten lang 16 Setzen Sie den Stander 5 bis 10 Minuten lang auf den magnetischen Sockel des TCS 17 Saugen Sie die Pumpleitung der Dosierstation an indem Sie APTIMA Waschlosung durch die Dosiervorrichtung pumpen Pumpen Sie ausreichend Flussigkeit durch das System so das
74. ie die Chargennummer auf der Reagenzflasche um sicherzustellen dass sie mit der Chargennummer auf dem Hauptchargen Barcodeblatt bereinstimmt b Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein Hinweis Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umdrehen der Heagenzien Schaumbildung vermeiden C Vorbereitung von Reagenzien f r bereits rekonstituierte Reagenzien 1 Zuvor rekonstituiertes Amplifikations GC Enzym und Sonden GC Reagenz muss vor dem Start des Assays auf Raumtemperatur 15 C bis 30 C gebracht werden 2 Wenn das rekonstituierte Sonden GC Reagenz einen Niederschlag enth lt der bei Raumtemperatur nicht wieder in L sung geht erw rmen Sie die mit Deckel verschlossene Flasche 1 bis 2 Minuten auf eine Temperatur nicht ber 62 C Nach diesem Erw rmungsschritt kann das Sonden GC Reagenz verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Mischen Sie das Sonden GC Reagenz durch Umdrehen ohne Schaum zu bilden vor dem Einsetzen in das System 3 Mischen Sie alle Reagenzien vor dem Einsetzen in das System gr ndlich durch vorsichtiges Umdrehen Beim Umdrehen der Reagenzien Schaumbildung vermeiden 4 F llen Sie Reagenzflaschen nicht nach Das TIGRIS DTS System erkennt Flaschen die nachgef llt wurden und nimmt sie nicht an D Probenhandhabung 1 Lassen Sie die Kontrollen und Proben vor der Verarbeitung a
75. ignale in einem Luminometer gemessen und als relative Lichteinheiten Relative Light Units RLU berichtet Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen A Zur Verwendung in der n vitro Diagnostik B Zus tzliche spezifische Warnhinweise Vorsichtsma nahmen und Verfahren zur Einschr nkung von Kontamination f r das TIGRIS DTS System finden Sie in der Bedienungsanleitung des TIGRIS DTS Systems TIGRIS DTS System Operator s Manual C Zus tzliche spezifische Warnhinweise Vorsichtsma nahmen und Verfahren zur Einschr nkung von Kontamination f r das PANTHER System finden Sie in der Bedienungsanleitung des PANTHER Systems PANTHER System Operator s Manual Laborbezogen D Nur die im Lieferumfang enthaltenen oder angegebenen Einweg Laborprodukte verwenden E Die normalen Vorsichtsmaf35nahmen im Labor ergreifen In den ausgewiesenen Arbeitsbereichen nicht essen trinken oder rauchen Ungepuderte Einweghandschuhe Augenschutz und Laborkittel beim Umgang mit Proben und Kitreagenzien tragen Nach der Handhabung von Proben und Kitreagenzien die H nde gr ndlich waschen F Warnung Reiz und tzstoffe Kontakt von Auto Detect 1 und Auto Detect 2 mit der Haut den Augen und Schleimh uten vermeiden Bei Kontakt dieser Fl ssigkeiten mit der Haut oder den Augen den betroffenen Bereich mit Wasser abwaschen Bei Versch tten dieser Fl ssigkeiten die Versch ttung mit Wasser verd nnen und dann aufwischen G Arbeitsfl chen Pipetten und ander
76. ikationstests eine Kreuzreaktion zeigen 24 Kulturisolate wurden aus dem Panel der Organismen in Tabelle 11 ausgew hlt darunter 17 Organismen die am n chsten mit GC verwandt sind Alle getesteten Organismen produzierten negative Ergebnisse ausgenommen ein 1 648 falsch positives Ergebnis Das wurde bei C pneumoniae beobachtet wo 1 von 27 getesten Replikaten ein falsches Ergebnis produzierte Die Wiederholungstests belegten keine Kreuzreaktivit t f r diesen Organismus C pneumoniae da bei 6 zus tzlichen Testreplikaten keine positiven Tests beobachtet wurden APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 72 502185DE Rev E Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems quivalenzstudie zu interferierenden Substanzen Vollblut eine Substanz die h ufig in urogenitalen Proben vorgefunden wird und die bekannterma en in manchen Amplifikationsassays interferierend wirkt wurde verwendet um festzustellen dass das TIGRIS DTS System hnliche Konzentrationen von potenziell interferierenden Substanzen toleriert wie die DTS Systeme Frisches Blut wurden den Pools mit klinischen Abstrichproben Vaginalabstrichproben Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap hinzugef gt und dann auf potenzielle Testinterferenz bei Absenz und Pr senz des GC Targets beim gesch tzten rRNA quivalent von 50 GC CFU Test 250 fg Test getestet Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tz
77. im Alter von ber 25 Jahren Drei Proben wurden von jedem der 1322 qualifizierten m nnlichen Probanden gesammelt F nf Proben wurden von jeder der 1465 qualifizierten Probandinnen gesammelt Bei den mannlichen Probanden wurden zwei randomisierte urethrale Abstrichproben gefolgt von einer Urinprobe gesammelt Bei den Probandinnen wurde eine Urinprobe gefolgt von einem vom Patienten selbst durchgef hrten vaginalen Abstrich eine vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe und zwei randomisierte Endozervix Abstrichproben entnommen Die GC Ergebnisse des APTIMA GC Assays und des APTIMA COMBO 2 Assay wurden von den beiden Vaginalabstrichproben einer endozervikalen Abstrichprobe einer m nnlichen urethralen Abstrichprobe und einem m nnlichen und weiblichen Urinaliquot erzeugt Die restlichen endozervikalen Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben und m nnlichen und weiblichen Urinaliquote wurden mit einem anderen im Handel erh ltlichen NAAT getestet Endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben und m nnliche und weibliche Urinproben die im APTIMA COMBO 2 Assay und dem anderen im Handel erh ltlichen NAAT getestet wurden wurden als Referenz NAATs verwendet um den Infektionsstatus f r jeden Probanden zu ermitteln Die Proben wurden entweder am Pr fzentrum des jeweiligen Probanden oder an einem externen Testzentrum getestet Alle Leistungsberechnungen beruhten auf der Gesamtanzahl der APTIMA GC Assay Ergebnisse f r vom Arz
78. in Tabelle 17 gezeigten Konzentrationen mit GC rRNA versetzt wurde Die Bediener f hrten zwei Durchl ufe pro Tag durch wobei jede Panelprobe in zwei Replikaten pro Durchlauf analysiert wurde Die bereinstimmung mit dem erwarteten Ergebnis wurde berechnet und die Pr zision wurde gem den NCCLS Guidelines EP5 A2 14 gesch tzt Die Gesamtzahl der Replikate f r jedes Panel betrug 96 Tabelle 17 stellt die RLU Pr zisionsdaten nach Mittelwert Standardabweichung Variationskoeffizient VK und prozentualer bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen f r die Berechnung der Variabilit t zwischen Ger ten zwischen Chargen zwischen L ufen sowie innerhalb eines Laufs dar Tabelle 17 PANTHER System Pr zision f r den APTIMA GC Assay RLU P ZWISCHEN piii uri Laufintern Gesamt GC Mittel ber Ger ten Chargen aufen Matrix WEE M CFU mL wert eins SA yk SA VK SA VK SA VK SA VK x1000 x1000 96 x1000 x1000 969 x1000 x1000 96 0 96 3 100 0 0 0 0 0 0 201 72 8 2 72 5 m 12 55 96 3951 100 215 14 5 4 0 0 0 0 568 24 144 6076 15 4 125 95 5839 100 370 17 63 0 0 0 0 772 58 132 8567 147 1250 96 6207 100 338 25 5 4 0 0 0 0 787 64 12 7 8572 138 0 95 3 100 0 60 216 O81 255 0 77 242 243 763 28 878 Us 12 5 96 3460 100 0 0 195 84 57 11327 33 20753 6 307 89 rin 125 96 6047 100 15867 2 6 17032 28 0 0 20624 34 31 5 1 1250 96 6
79. intr chtigt nicht die Detektion von GC mit dem APTIMA GC Assay Um jedoch die sachgem e endozervikale Probenentnahme sicherzustellen sollte berm ige Schleimhaut entfernt werden D Die Entnahme von Urinproben Vaginalabstrichen und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap soll kein Ersatz f r Zervixuntersuchungen und endozervikale Proben zur Diagnose von urogenitalen Infektionen bei Frauen sein Die Patientinnen k nnen Zervizitis Urethritis Harnwegsinfektionen oder Vaginalinfektionen mit anderen Ursachen oder gleichzeitige Infektionen durch andere Erreger haben E Der APTIMA GC Assay ist nicht zur Beurteilung bei Verdacht auf sexuellen Missbrauch oder f r andere rechtsmedizinische Indikationen vorgesehen Bei Patienten wo ein falsch positives Ergebnis eine nachteilige psychosoziale Auswirkung haben kann empfehlen die CDC einen Wiederholungstest unter Einsatz einer alternativen Technologie 1 F Zuverl ssige Ergebnisse h ngen von einer angemessenen Probenentnahme ab Weil das f r diesen Test verwendete Transportsystem keine mikroskopische Beurteilung der Eignung der Probe zul sst ist eine Schulung des klinischen Personals in den ordnungsgem en Probenentnahmetechniken erforderlich Bitte lesen Sie dazu die Packungsbeilage des entsprechenden APTIMA Probenentnahmekits G Ein therapeutischer Misserfolg oder Erfolg kann nicht mit dem APTIMA GC Assay bestimmt werden da Nukleinsaure nach de
80. is 30 C lagern Menge Symbol Bestandteil Kit f r 100 Kit f r 2x 50 Tests Tests AR APTIMA L sung zur Rekonstitutiondes 1x1 9mL 2x64mL Amplifikationsreagenzes GC W ssrige L sung mit Konservierungsmitteln ER APTIMA Enzymrekonstitutionsl sung 1x6 3mL 2 x 3 3 mL HEPES gepufferte L sung mit oberfl chenaktiver Substanz und Glyzerol PR APTIMA Sondenrekonstitutionsl sung GC 1x 15 2 mL 2x7 7mL Sukzinatgepufferte L sung mit lt 5 Detergens APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 23 502185DE Rev E TIGRIS DTS System APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Raumtemperatur Schachtel Kasten 2 von 2 nach Empfang bei 15 C bis 30 C lagern Menge Symbol Bestandteil Kit f r 100 Kit f r 2 x 50 Tests Tests S APTIMA Selection Reagenz 1 x 43 0 mL 2x20mL 600 mM Boratpufferl sung mit oberfl chenaktiver Substanz TCR APTIMA Target Capture Reagenz GC 1x 26 0 mL 2x17mL Gepufferte Salzl sung mit Festphase und F nger Oligomeren Rekonstitutions verbindungsst cke 3 Transferpipetten 2 Hauptchargen Barcode Blatt 1 Blatt 1 Blatt APTIMA Kontrollenkit nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge PGC APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT 5x1 7mL NCT Nicht infekti se GC Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 50 GC Zellen 250 fg Test PCT APTIMA Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC 5x1
81. isbewegung einen Abstrich auf 3 Setzen Sie den Tupfer sofort in das Transportgef ein 4 Den Tupferschaft an der Einkerbung vorsichtig brechen Dabei darauf achten dass der Inhalt nicht verspritzt wird 5 Verschlie en Sie das Tupfertransportgef wieder fest 6 Wiederholen Sie Schritt 2 bis 5 f r alle Abstrichbereiche Wenn die Ergebnisse GC positiv oder unbestimmt sind lesen Sie unter Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse nach Weitere f r das PANTHER System spezifische Informationen zur Kontaminations berwachung erteilt der Technische Kundendienst von Gen Probe APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 37 502185DE Rev E Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse A Testauswertung Die Assayergebnisse werden von der APTIMA Assay Software mit dem GC Protokoll automatisch ausgewertet Ein Test kann gem Feststellung anhand der Gesamt RLU im Nachweisschritt negativ unbestimmt positiv oder ung ltig sein siehe unten Ein Testergebnis kann aufgrund von RLU Werten die au erhalb der normal erwarteten Bereiche liegen ung ltig sein Anf ngliche unbestimmte oder ung ltige Testergebnisse sollten durch Testwiederholung neu bestimmt werden Testauswertung Gesamt RLU x1000 Negativ 0 bis lt 50 Unbestimmt 50 bis lt 100 Niedriger RLU Wert positiv 100 bis 2000 Positiv 2000 bis lt 12 000 Ung ltig 0 oder
82. ischen ist erforderlich um korrekte Testergebnisse zu erhalten Vollst ndige Einzelheiten siehe Testverfahren mit DTS Systemen Verfahrenshinweise AA Separate Wasserb der sind f r die ausschlie liche Verwendung in den Assayschritten Target Capture Amplifikation und HPA bereitzustellen AB Die Testreproduzierbarkeit wurde mit einem mit rRNA gespikten Tupfertransportmedium ermittelt Die Reproduzierbarkeit von Tests von Abstrich und Urinproben mit Zielorganismen wurde nicht ermittelt AC Abdeckfolien sollten sofort nach ihrer Entfernung von den Reaktionsgef en im Abfallbeh lter entsorgt werden Es sind stets neue Abdeckfolien zu verwenden Sie d rfen niemals aus einem vorherigen Schritt noch einmal verwendet werden Abdeckfolien sind fest oben auf allen Reaktionsgef en anzubringen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 6 502185DE Rev E Allgemeine Informationen Lagerungs und Handhabungsbedingungen f r Reagenzien A Die folgenden Reagenzien sind stabil bei Lagerung im Bereich von 2 C bis 8 C gek hlt APTIMA Amplifikationsreagenz GC APTIMA Enzymreagenz APTIMA Sondenreagenz GC APTIMA Target Capture Reagenz B APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT APTIMA Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC B Die folgenden Reagenzien sind stabil bei Lagerung im Bereich von 2 C bis 30 C APTIMA L sung zur Rekonstitution des Amplifikationsreagenzes GC APTIMA Enzymrekonstitutionsl sung APTIMA Sonden
83. it GC gespikt sodass sich ein Panel mit 120 GC positiven Proben ergab Die GC positiven Panelproben wurden mit Organismen in den Konzentrationen 12 5 CFU mL 125 CFU mL oder 1250 CFU mL 25 fg Assay 250 fg Assay oder 2500 fg Assay gespikt Dar ber hinaus wurden 120 GC negative Urinproben entnommen Die positiven und negativen Panels wurden auf drei PANTHER Systemen und drei TIGRIS DTS Systemen getestet Die positive prozentuale bereinstimmung zwischen dem PANTHER System und dem TIGRIS DTS System betrug 100 mit einem unteren 95 Vertrauensintervall von 98 9 Die negative prozentuale bereinstimmung zwischen dem PANTHER System und dem TIGRIS DTS System betrug 100 mit einem unteren 95 Vertrauensintervall von 98 9 Die Ergebnisse der Studie sind in Tabelle 16 zusammengefasst Tabelle 16 bereinstimmungsstudie mit einem gespikten klinischen Panel bereinstimmung mit erwarteten GC Ergebnissen Konzentration TIGRIS PANTHER Panelelement Replikate on ae fn is fa CFU mL fg Assay o Ubereinstimmung Ubereinstimmung Sehr niedrig positiv 12 5 25 117 100 100 Niedrig positiv 125 250 120 100 100 Mittel positiv 1250 2500 120 100 100 Negativ 0 0 360 100 100 Positive prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und PANTHER System 95 V I 100 98 9 100 Negative prozentuale Gesamt bereinstimmung zwischen TIGRIS DTS System und PANTHER System 95 V I 100 98 9 100 Studie zur an
84. it niedriger Pr valenz bezogen Trotzdem sollten positive Ergebnisse bei Populationen mit niedriger Pr valenz vorsichtig interpretiert werden unter der Annahme dass die Wahrscheinlichkeit eines falsch positiven Ergebnisses h her sein kann als die eines wahren positiven Ergebnisses M Die Leistung des APTIMA Probentransferkits wurde f r die Testung desselben Papanicolaou Abstrichs in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap sowohl vor und nach der ThinPrep Papanicolaou Bearbeitung nicht beurteilt N Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap die mit anderen Ger ten als dem ThinPrep 2000 Prozessor bearbeitet wurden wurden zur Verwendung in APTIMA Assays nicht beurteilt O Von den Patienten selbst durchgef hrte vaginale Abstriche sind eine Diagnoseoption f r Frauen wenn anderweitig keine gyn kologische Untersuchung indiziert ist P Die Anwendung von von den Patienten selbst durchgef hrten vaginalen Abstrichen ist auf Gesundheitsversorgungseinrichtungen beschr nkt wo Unterst tzung Beratung zur Erl uterung der Verfahren und Vorsichtsmaf3nahmen zur Verf gung stehen Q Der APTIMA GC Assay wurde nicht zur Verwendung mit Vaginalabstrichproben die von Patientinnen zuhause entnommen wurden validiert R Die Leistung von vaginalen Abstrichproben bei Schwangeren wurde nicht beurteilt S Die Leistung von endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlich
85. iumhypochloritl sung nicht trocknen Decken Sie die Arbeitsfl che auf der die Reagenzien und Proben vorbereitet werden mit sauberen absorbierenden Labortischunterlagen mit Kunststoffunterschicht ab B Reagenzrekonstitution Vorbereitung eines neuen Kits Hinweis Die Reagenzrekonstitution sollte vor Beginn von Arbeiten mit dem PANTHER System durchgef hrt werden 1 Mischen Sie zur Rekonstitution von Amplifikations GC Enzym GC und Sonden GC reagenz die jeweilige Flasche mit gefriergetrocknetem Reagenz mit der Rekonstitutionsl sung Wenn sie gek hlt sind lassen Sie die Rekonstitutionsl sungen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur kommen a Paaren Sie jede Rekonstitutionsl sung mit ihrem Iyophilisierten Reagenz Stellen Sie vor Anbringung des Rekonstitutionsverbindungsst cks sicher dass die Rekonstitutionsl sung und das Iyophilisierte Reagenz entsprechend farbcodierte Etiketten aufweisen b Pr fen Sie die Chargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien richtig miteinander gepaart wurden c ffnen Sie das Fl schchen mit dem Iyophilisierten Reagenz und stecken Sie das gekerbte Ende des Rekonstitutionsverbindungsstucks fest in die Flaschchenoffnung Abb 3 Schritt 1 d Offnen Sie die entsprechende Rekonstitutionsl sung und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 33 502185DE Rev E PANTHER System e
86. lmenge der Studienpopulation durchgef hrt die aus den negativen Proben bestand die sich unmittelbar an ein High Target positives Ergebnis anschlossen Die Verschleppungsrate f r diese Teilmenge der Population lag im Durchschnitt bei 0 95 4 422 F r falsch Positive in dieser Teilmenge lag die Verschleppungsrate im Bereich von 0 bis 2 16 auf den drei TIGRIS DTS Systemen Diese Ergebnisse zeigen dass die Kontamination auf dem TIGRIS DTS System auf ein Mindestma beschr nkt ist Tabelle 15 Zusammenfassung der gesamten Verschleppung im TIGRIS DTS System Anz g ltiger pesamfanzan falsch positiver Vertrauensintervalle erat negativer Tests AOL POSING GC Ergebnisse 95 V I g GC Ergebnisse g Be TIGRIS 1 787 0 0 00 0 00 0 38 TIGRIS 2 791 1 0 13 0 00 0 70 TIGRIS 3 792 4 0 51 0 14 0 29 Alle Ger te 2370 5 0 21 0 07 0 49 a TIGRIS DTS System 1 hatte keine falsch positiven GC Ergebnisse direkt im Anschluss an eine High Target positive Probe b TIGRIS DTS System 2 hatte ein falsch positives GC Ergebnis direkt im Anschluss an eine High Target positive Probe c TIGRIS DTS System 3 hatte drei falsch positive GC Ergebnisse direkt im Anschluss an eine High Target positive Probe APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 73 502185DE Rev E Analytische Leistung des PANTHER Systems Analytische Leistung des PANTHER Systems bereinstimmungsstudie mit einem gespikten klinischen Panel Einzelne negative Urinproben wurden m
87. lungstest FS Female Endocervical Swab weibl Endozervix Abstrichprobe FU Female Urine weibl Urin PVS Patient Collected Vaginal Swab von der Patientin selbst durchgef hrter Vaginalabstrich CVS Clinician Collected Vaginal Swab vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 57 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 7e Ergebnisse f r Patienteninfektionsstatus f r N gonorrhoeae in klinischer Studie mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Liquid Pap Endozervix Abstrichprobe Patienteninfektionsstatus APTIMA COMBO 2 Assay Infiziert Positiv Nicht infiziert Negativ Nicht infiziert Negativ Nicht infiziert Unbestimmt Gesamt APTIMA GC Assay Positiv Negativ Positiv Positiv Symptom status Symptomatisch Asymptomatisch 7 6 352 1276 0 5 0 1 359 1288 RLU Verteilung von APTIMA Kontrollen Die Verteilung der RLUs f r die APTIMA Positivkontrolle GC Negativkontrolle CT und die APTIMA Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC aus allen APTIMA GC Assay L ufen die w hrend der klinischen Probenstudie durchgef hrt wurden sind in Tabelle 8 pr sentiert Tabelle 8 RLU Verteilung der APTIMA Kontrollen im Rahmen der klinischen Probenstudien einschlie lich Studien zu endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung P
88. mbole zur Identifikation der Reagenzien sind neben dem Reagenznamen angegeben DTS sistas Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Kit 100 Tests 2 Schachteln Kat Nr 301091 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay gek hlte Schachtel Schachtel 1 von 2 nach Empfang bei 2 C bis 8 C lagern Symbol Bestandteil Menge A APTIMA Amplifikationsreagenz GC 1 Fl schchen Nukleins uren getrocknet in gepufferter L sung mit 5 F llstoff E APTIMA Enzymreagenz 1 Fl schchen Reverse Transkriptase und RNA Polymerase getrocknet in HEPES gepufferter L sung mit lt 10 F llreagenz P APTIMA Sondenreagenz GC 1 Fl schchen Nicht infekti se chemilumineszierende DNA Sonden getrocknet in sukzinatgepufferter L sung mit 5 Detergens Nicht infekti se Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens PGC APTIMA Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT 3x1 7mL NCT Nicht infekti se GC Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA Aquivalent von 50 GC Zellen 250 fg Assay PCT APTIMA Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC 3x1 7 mL NGC Nicht infekti se CT Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA quivalent von 1 CT IFU 5 fg Assay Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzt
89. meine Informationen NAATs der ersten Generation f r GC waren mit technologischen Problemen verbunden die sich einschr nkend auf ihre Leistung auswirkten Zu diesen Problemen geh ren eine umst ndliche Probenbearbeitung und eine Hemmung der Proben die falsch negative Testergebnisse produzieren kann 6 Der APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay APTIMA GC Assay ist ein NAAT der zweiten Generation der die Technologien Target Capture transkriptionsvermittelte Amplifikation Transcription Mediated Amplification TMA und Hybridisierungsschutzassay Hybridization Protection Assay HPA zur Rationalisierung der Probenbearbeitung zur Target rRNA Amplifikation und zum Nachweis von Amplikon verwendet Studien zum Vergleich der Leistung und Hemmung der Proben von verschiedenen Amplifikations Ger tesystemen haben die Vorteile von Target Capture TMA und HPA nachgewiesen 4 7 Laut den 2002 Screening Guidelines f r Chlamydia trachomatis und Neisseria gonorrhoeae empfehlen die CDC Centers for Disease Control and Prevention eine Reihe von Optionen als Anschlusstest bei einem positiven Screening Test wenn ein niedriger positiver pr diktiver Wert erwartet werden kann oder ein falsch positives Ergebnis ernsthafte psychosoziale oder juristische Folgen haben w rde 1 Eine dieser Optionen f r zus tzliche Tests kann ein anderer FDA gepr fter Nukleins ure Amplifikationstest sein der ein anderes Target verwendet als der erste Test Der APTIMA GC Assay
90. mener Abstrich APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 48 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Klinische Probenstudie zu Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Liquid Pap Eine prospektive multizentrische klinische Studie wurde durchgef hrt um die Verwendung des PreservCyt Transportmediums eine Komponente des ThinPrep 2000 System als alternatives Medium f r gyn kologische Proben zum Nachweis von N gonorrhoeae mit dem APTIMA GC Assay zu beurteilen 1647 symptomatische und asymptomatische Probanden die zu einer Klinik f r Gyn kologie Geburtshilfe Familienplanung ffentliche Gesundheitspflege Frauenklinik und Klinik f r sexuell bertragbare Krankheiten STD kamen wurden in der klinischen Studie beurteilt Von diesen 1647 Probanden waren 1288 asymptomatisch und 359 waren symptomatisch Tabelle 7e Die aufgenommenen Probanden kamen aus Pr fzentren mit einer GC Pr valenz im Bereich von 0 0 bis 5 0 Tabelle 6a Von allen geeigneten Probandinnen wurden zwei Proben genommen ein Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap und ein Endozervixabstrich Die Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap wurden mit dem Spatel der Cytobrush oder einem besenartigen Zervixprobenentnahmeger t entnommen Die Verteilung der Zervixprobenentnahmegerate ist in Tabelle 5 nach Probenentnahmeort und insgesamt zusammengefasst Die Papanicolaou Abstriche in PreservCy
91. n u022440022400 nn nennen 12 Optionale Materialien 2022240022420 Rennen 25 Testverfahren mit DTS Systemen 13 Testverfahren mit dem TIGRIS DTS System 25 Verfahrenshinweise ccccccccssssssecseeecseceeeeeeesseseeeess 19 Verfahrenshinweise scene 29 Bm NER EN NN PAIGER PANTHER System a 31 Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und iussis p EN C RH 31 Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien NE EET TT UT 32 Optionale Materialien 0002220022400 Rennen 33 Testverfahren mit dem PANTHER System 33 Verfahrenshinweise eese 36 502185DE Rev E Allgemeine Informationen Allgemeine Informationen Verwendungszweck Der APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay ist ein Targetamplifikationstest mithilfe von Nukleins uresonden der Target Capture zum qualitativen n vitro Nachweis von ribosomaler RNA rRNA aus Neisseria gonorrhoeae GC verwendet und als Hilfsmittel bei der Diagnose von durch Gonokokken ausgel sten Urogenitalkrankheiten mithilfe des TIGRIS DTS Systems des PANTHER Systems oder der halbautomatischen Ger teder DTS Systems wie angegeben dient Der Assay kann f r Tests mit den folgenden Probentypen von symptomatischen Personen verwendet werden vom Arzt entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale A
92. nd dem Testverfahren ab Eine Zusammenfassung der Pr valenz von GC in Nordamerika nach Probentyp gem Bestimmung durch den APTIMA GC Assay ist in Tabellen 1 und 1a f r zwei klinische Pr fungen pr sentiert Eine Beschreibung der Leistungsmerkmale f r klinische Proben finden Sie in den Abschnitten Klinische Probenstudie mit Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben Vaginalabstrichproben und Urinproben und Klinische Probenstudie zu Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Liquid Pap unter Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 1 Pr valenz von N gonorrhoeae nach Pr fzentrum und insgesamt gem Bestimmung anhand der Ergebnisse mit dem APTIMA GC Assay Pr f Anz positiv Anz getestet zentr m MS MU FS FU PVS CVS 1 244 54 252 214 54 252 6 1 14 22 57 13 230 64 14 219 6 1 14 230 2 26 5 93 351 201 71 354 161 32 199 15 0 30 200 162 32 198 166 33 199 3 0 0 0 4 00 0 4 44 5 114 35 4 113 36 4 111 35 4 113 4 NA NA 2 3 6 266 19 5 270 2 2 6 267 3 0 8 269 5 55 11 200 55 11 200 15 3 199 10 2 199 10 2 199 10 2 199 6 14 5 44 304 13 4 41 305 82 24 294 5 7 17 296 8 3 24 290 7 5 22 295 7 58 12 207 5 8 12 207 0 0 0 102 0 0 0 102 0 0 0 102 0 0 0 102 8 NA NA 20 1 49 20 1 49 2 1 1 48 2 0 1 51 Alle 162 214 1318 14 3 189 1322 59 85 1452 49 72 1459 58 83 1434 5 8 84 1458 MS Male Urethral Swab m nnl u
93. ne Arbeitsliste enthielt ein zus tzliches Replikat eines Panelelements mit 2500 fg GC rRNA Test 2 Proben wurden aus dieser Analyse wegen endg ltig ung ltiger Ergebnisse ausgeschlossen Eine Arbeitsliste umfasste ein zus tzliches Replikat einer Panelprobe mit 25 000 fg GC rRNA Test In der gleichen Arbeitsliste fehlte 1 Replikat einer Panelprobe mit 25 000 fg GC rRNA Test In einer Arbeitsliste fehlte 1 Replikat einer Panelprobe mit 250 000 fg GC rRNA Test Hinweis Proben mit ung ltigen Testergebnissen wurden ausgeschlossen Die Analyse der Signalvariabilit t umfasste Proben mit widerspr chlichen Ergebnissen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 69 502185DE Rev E Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems Siehe Analytische Leistung des PANTHER Systems f r die f r das PANTHER System spezifische analytische Leistung quivalenzstudie zur analytischen Sensitivit t Die Sensitivit tspanels im Endozervixabstrich Pool Vaginalproben Pool Urinproben Pool und Pool mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap wurden mit GC 250 fg Test rRNA hergestellt und mit 60 Replikaten auf dem TIGRIS DTS System getestet Die prozentuale Positivitat 95 V I auf dem TIGRIS DTS System fur Endozervixabstriche betrug 100 95 1 100 f r vaginale Abstrichproben 100 95 1 100 f r Urinproben 100 95 1 100 und f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung
94. neue Probenentnahme notwendig sein X Die Kunden m ssen einen LIS Transfer unabh ngig validieren APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 42 502185DE Rev E Ergebnisse von klinischen Studien Ergebnisse von klinischen Studien Die Leistungsmerkmale des APTIMA GC Assays wurden im Rahmen von zwei klinischen Pr fungen die in Nordamerika durchgef hrt wurden bestimmt Zun chst bestimmte die klinische Probenstudie die Sensitivit t Spezifit t und pradiktiven Werte des APTIMA GC Assays unter Einsatz von vom Arzt entnommenen endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben von den Patienten selbst durchgef hrten vaginalen Abstrichen und Urinproben von M nnern und Frauen Die erste Studie beurteilte auch die Pr zision des APTIMA GC Assays wenn er gem den NCCLS Guidelines durchgef hrt wurde 12 Die zweite klinische Pr fung bestimmte die Sensitivit t Spezifit t und pr diktiven Werte des APTIMA GC Assays unter Einsatz des PreservCyt Transportmediums eine Komponente des ThinPrep 2000 Systems Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden auch auf die laborinterne Pr zision mit dem APTIMA GC Assay beurteilt APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 43 502185DE Rev E Sollwerte mit DTS Systemen Sollwerte mit DTS Systemen Pr valenz Die GC Pr valenz in Patientenpopulationen h ngt von Risikofaktoren wie Alter Geschlecht Pr senz von Symptomen Art der Klinik u
95. nformationen Testbezogen T Die Leistung von vaginalen Abstrichproben bei Schwangeren wurde nicht beurteilt U Die Leistung von endozervikalen vaginalen und m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurde bei Jugendlichen unter 16 Jahren nicht beurteilt V Ein Testkit nicht nach dem Verfallsdatum verwenden W Reagenzien aus Kits mit verschiedenen Chargennummern nicht austauschen vermischen oder kombinieren APTIMA Kontrollen und Assay Fluids d rfen aus verschiedenen Chargen stammen Spezifisch f r DTS Systeme X Es m ssen Spitzen mit hydrophoben St pseln verwendet werden Mindestens zwei Wiederholungspipetten m ssen zur ausschlie lichen Verwendung mit diesem Assay reserviert werden einer zur Verwendung in den Schritten Target Capture und Amplifikation und einer zur Verwendung in den HPA Schritten Zwei Mikropipetten m ssen zur ausschlie lichen Verwendung in diesem Test reserviert werden eine f r den Probentransfer und eine f r die Reagenzienvorbereitung Alle Pipetten m ssen regelm ig gereinigt werden wie in Testverfahren mit DTS Systemen Verfahrenshinweise beschrieben Y Bei Verwendung von Wiederholungspipettierern zur Zugabe von Reagenzien darf das Reaktionsgef nicht mit der Pipettenspitze ber hrt werden um Kontamination von einem Reaktionsgef zum anderen zu vermeiden Z Ausreichendes M
96. ng PreservCyt Solution liquid Pap die f r GC Assays bestimmt sind m ssen innerhalb von 30 Tagen nach der Entnahme f r die Zytologie bearbeitet und oder in ein APTIMA Probentransferr hrchen transferiert werden wenn sie bei 2 C bis 30 C gelagert werden siehe Probenstabilit tsstudien b Bei Verwendung des ThinPrep Aliquot Entfernungsverfahrens finden Sie eine Anleitung zur Aliquotentfernung im Anhang der Bedienungsanleitung f r den ThinPrep 2000 oder ThinPrep 3000 Prozessor ThinPrep 2000 oder ThinPrep 3000 Processor Operator s Manual Addendum Transferieren Sie 1 mL des entfernten Aliquots gem der Anleitung in der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits in ein APTIMA Probentransferr hrchen c Beim Test der Probe nach der Bearbeitung mit dem ThinPrep 2000 Prozessor bearbeiten Sie den Papanicolaou Abstrich in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap gem der Bedienungsanleitung f r den ThinPrep 2000 Prozessor ThinPrep 2000 Processor Operator s Manual und der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits Transferieren Sie 1 mL der restlichen Fl ssigkeit im Fl schchen mit der PreservCyt L sung gem der Anleitung in der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits in ein APTIMA Probentransferr hrchen d Nach dem Transfer des Papanicolaou Abstrichs in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap in das APTIMA Probentransferr hrchen muss diese Probe innerhalb von 30 Tagen mit dem APTIMA GC A
97. nkubieren Sie den St nder in einem Wasserbad 60 15 Minuten lang bei 42 C 1 C E HPA Hybridization Protection Assay Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das SB100 Anwendungsblatt Der zur Hybridisierung und f r die Selektionsschritte verwendete Wiederholungspipettierer muss zur ausschlie lichen Verwendung in diesen Schritten bereitgestellt werden Siehe Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen 1 Hybridisierung a Entfernen Sie den St nder aus dem Wasserbad und berf hren Sie ihn in den HPA Bereich Geben Sie mit der Wiederholungspipette 100 uL rekonstituiertes Sondenreagenz GC in jedes Reaktionsr hrchen Alle Reaktionsmischungen sollten jetzt eine gelbe Farbe aufweisen b Decken Sie die Reaktionsgef e mit Abdeckfolie ab und mischen Sie den St nder mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef f e Inkubieren Sie den St nder in einem Wasserbad 20 5 Minuten lang bei 62 C x 1 C Entfernen Sie den St nder aus dem Wasserbad und inkubieren Sie ihn 5 1 Minute lang bei Raumtemperatur 2 Selektion a Geben Sie mit dem Wiederholungspipettierer 250 uL Selection Reagenz in jedes Reaktionsgef hinzu Alle Reaktionsmischungen sollten jetzt eine rote Farbe aufweisen b Decken Sie die Reaktionsr hrchen mit Abdeckfolie ab mischen Sie den St nder 10 Sekunden lang bzw bis sich eine gleichm ige F rbung einstellt in einem Vortex Mischer und inkubieren Sie den St nder 10 1 Minuten lang bei 62
98. nlich m Symptomatisch 576 11 4 40 1 994 96 8 100 99 0 97 5 99 7 io EC EISE RM KE d ORUM EE d NN MN COMM OMNE ar MEM Mf Asymptomatisch 745 9 5 730 1 90 0 55 5 99 7 993 98 4 99 8 Alle 1321 180 9 1130 2 989 96 1 99 9 992 98 5 99 6 Symptomatisch 805 52 8 744 1 98 1 89 9 100 98 9 97 9 99 5 Abstrich LLL Asymptomatisch 635 20 5 609 1 95 2 76 2 99 9 99 2 98 1 99 7 Alle 1440 72 13 1353 2 97 3 90 6 99 7 99 0 98 4 99 5 Weiblich re Symptomatisch 810 48 2 199 5 90 6 79 3 96 9 99 7 99 0 100 Hd ea a o co ec AMT Asymptomatisch 639 21 1 616 1 95 5 77 2 99 9 99 8 99 1 100 Alle 1449 69 3 1371 6 92 0 83 4 97 0 99 8 99 4 100 Vom Patienten l Vaginaler selbst Asymptomatisch 629 21 4 604 0 100 83 9 100 99 3 98 3 99 8 5 Abstrich durchgef hrter Symptomatisch 809 52 7 749 1 98 1 89 9 100 99 1 98 1 99 6 Asymptomatisch 637 21 4 611 1 95 5 77 2 99 9 99 3 98 3 99 8 Alle 1446 73 11 1360 2 97 3 90 7 99 7 99 2 98 6 99 6 a A uk 4L 441 n Tg Gm z_zr gt 9 TP True Positive echt positiv FP False Positive falsch positiv TN True Negative echt negativ FN False Negative falsch negativ APTIMA COMBO 2 Assay GC Ergebnisse Anz positive Ergebnisse Anz getestete Proben a 2 10 b 1 4 c 1 5 d 2 9 e 5 8 f 2 5 g 7 13 h 1 2 i 1 1 j 2 3 k 3 4 I 8 11 m 6 7 n 3 4 o 9 11 Vom Arzt Vaginaler entnom
99. nn o GEN PROBE APT MA APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay Zur Verwendung in der n vitro Diagnostik Nur zum US Export Allgemeine Informationen 2 Verwendungszweck esee hh 2 Zusammenfassung und Testerkl rung 000 eee eee 2 VESIDIINZID 464 aan ORE e een de bout DEG entire 3 Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen eee 4 Lagerungs und Handhabungsbedingungen fur Reagenzien T Probenentnahme und lagerung llli 8 Testauswertung Qualit tskontrolle Patientenergebnisse 38 Einschr nkungen eee 41 Ergebnisse von klinischen Studien 43 Sollwerte mit DTS Systemen llllll leen 44 Klinische Leistung der DTS Systeme LL 47 Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System 65 Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems 70 Analytische Leistung des PANTHER Systems 74 Hic a Drm 76 DTS sa TIGRIS ER DTS SYStEME unse aana 10 TIGRIS DIS Systeri mascansessne 23 Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Im Lieferumfang enthaltene Reagenzien und Materialien T 10 Materialien aussen 23 Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene enthaltene Materialien sees 11 M terl lien essen 24 Optionale Materialie
100. ntifizierten Proben wurden auf dem TIGRIS DTS System und im Anschluss daran auf DTS Systemen getestet Studie zur bereinstimmung der klinischen Proben Endozervixabstriche m nnliche urethrale Abstrichproben weibliche und m nnliche Urinproben Vaginalabstriche und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Liquid Pap Die Probanden und Probandinnen die zu einer Klinik f r Geschlechtskrankheiten STD Familienplanung und Frauenheilkunde Geburtshilfe aus acht geografisch verschiedenen Pr fzentren mit niedriger bis hoher Pr valenz f r GC kamen steuerten Endozervix Abstrichproben m nnliche urethrale Abstrichproben m nnliche und weibliche Urinproben Vaginalabstrichproben und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap bei Die Proben wurden zum Testen direkt an Gen Probe berf hrt Bei Gen Probe wurden die Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben zuerst einem Screening mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf dem TIGRIS DTS System unterzogen Die Vaginalabstriche und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap wurden einem Screening mit dem APTIMA COMBO 2 Assay auf den DTS Systemen unterzogen Die Proben mit endg ltig ung ltigen oder unbestimmten Ergebnissen wurden nicht in der klinischen Proben bereinstimmungsstudie mit dem APTIMA GC Assay ausgew hlt 129 weibliche Abstrichproben 70 endozervikal und 59 vaginal 1
101. nual 5 Negative Kontrollen sind u U bei der berwachung von zuf lliger Kontamination nicht effektiv Siehe Analytische Leistung des TIGHIS DTS Systems f r die Ergebnisse einer analytischen High Target Kontaminationsuntersuchung die durchgef hrt wurde um die Kontrolle von Verschleppung auf dem TIGRIS DTS System nachzuweisen Siehe Analytische Leistung des PANTHER Systems f r die Ergebnisse einer analytischen High Target Kontaminationsuntersuchung die durchgef hrt wurde um die Kontrolle von Verschleppung auf dem PANTHER System nachzuweisen Probenvorbereitungskontrolle optional Die APTIMA Negativkontrolle f r GC mit der Kennzeichnung CONTROL CT PCT CONTROL GC NGC und die APTIMA Positivkontrolle f r GC mit der Kennzeichnung CONTROL GC PGC CONTROL CT NCT fungieren als Kontrollen f r die Assayschritte Target Capture Amplifikation und Nachweis und m ssen in jedem Assaylauf mitgef hrt werden Bei Bedarf k nnen Kontrollen f r Zytolyse und RNA Stabilisierung entsprechend den Anforderungen der entsprechenden Akkreditierungsorganisationen oder der Laborverfahren der einzelnen Einrichtungen im Test mitgef hrt werden Bekannte positive Proben k nnen als Kontrollen dienen indem sie in Verbindung mit unbekannten Proben vorbereitet und getestet werden Proben die als Vorbereitungskontrollen verwendet werden m ssen gem den Informationen in der APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 39 502185DE Rev E
102. oben in Verfahrenshinweise Dekontamination beschriebenen Anleitung durch 4 Wie in jedem Reagenzsystem kann berm iger Puder auf manchen Handschuhen eine Kontamination ge ffneter Reaktionsgef e verursachen Es werden ungepuderte Handschuhe empfohlen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 21 502185DE Rev E DTS Systeme J Protokoll zur berwachung auf Laborkontamination f r DTS Systeme Es gibt viele laborspezifische Faktoren die zu Kontamination beitragen k nnen darunter Testvolumen Arbeitsablauf Krankheitspr valenz und verschiedene andere Laboraktivit ten Diese Faktoren sind zu ber cksichtigen wenn die H ufigkeit der Kontaminations berwachung festgelegt wird Die Intervalle zur Kontaminations berwachung sollten im Hinblick auf die Praktiken und Verfahren jedes Labors festgelegt werden Zur berwachung auf Laborkontamination kann das folgende Verfahren mit dem APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstrichproben durchgef hrt werden 1 Beschriften Sie die Tupfertransportgef e mit den Zahlen die den zu testenden Bereichen entsprechen 2 Nehmen Sie den Abstrichtupfer blauer Schaft mit gr nem Aufdruck aus der Verpackung feuchten Sie den Tupfer im Tupfertransportmedium an und nehmen Sie im ausgewiesenen Bereich mit einer Kreisbewegung einen Abstrich auf 3 Setzen Sie den Tupfer sofort in das Transportr hrchen ein 4 Den Tupferschaft an der Einkerbung vorsichtig
103. och nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Hinweis Materialien die von Gen Probe erh ltlich sind sind mit der Katalognummer aufgef hrt sofern nicht anders angegeben Kat Nr LEADER HC Luminometer 104747 01 GEN PROBE Target Capture System TCS 104555 Inkubatoren und Vortexer 2 Vortex Mischer f r mehrere R hrchen 102160 3 Zirkulierende Wasserb der 104586 62 C 1 42 C 1 0 62 Ct1 3 Wasserbad Distanzst cke 104627 oder 2 SB100 Dry Heat Bath Vortexer 105524 Bei steigendem Testvolumen werden eventuell weitere SB100 B der ben tigt APTIMA Auto Detect Kit Auto Detect Kit 301048 2 eppendorf Repeater Plus Pipettors 105725 2 Pipetten 1000 uL RAININ PR1000 901715 eppendorf Pipette 20 uL bis 200 uL 105726 Spitzen f r Wiederholungspipetten 2 5 mL 21 381 329 Spitzen f r Wiederholungspipetten 5 0 mL 21 381 330 Spitzen f r Wiederholungspipetten 25 0 mL 21 381 115 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 11 502185DE Rev E opitzen P1000 Ausf hrung Spitze mit Sonderdurchmesser nur von Gen Probe erh ltlich Pipettenspitzen 20 uL bis 200 uL Zehn R hrchen Einheiten TTU Zehn Spitzen Kassetten TTC APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endozervikale und m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und Frauen APTIMA Urinproben Transportgef e f r m nnliche und weibliche Urinproben APTIMA Entnahmekit f r Vaginalabstrichproben APTIMA P
104. ococcus agalactiae Streptococcus bovis Streptococcus mitis Streptococcus mutans Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Streptococcus salivarius Streptococcus sanguis Streptomyces griseinus Trichomonas vaginalis Ureaplasma urealyticum Vibrio parahaemolyticus Yersinia enterocolitica n Anzahl der getesteten St mme Alle getesteten Organismen produzierten ein negatives Ergebnis im APTIMA GC Assay APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 62 502185DE Rev E Analytische Leistung der DTS Systeme Interferierende Substanzen Abstrichproben Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap und oder Urinproben wurden einzeln mit den folgenden interferierenden Substanzen versetzt 10 Blut Verh tungsmittel Gel Spermizid Hautcreme H morrhoiden An sthetikum K rper l Puder Pilzsalbe Scheidengleitmittel Intimspray und Leukozyten 1 0 x 10 Zellen mL 30 Blut Urinanalyte Protein Glukose Ketone Bilirubin Nitrat Urobilinogen pH 4 sauer pH 9 basisch Leukozyten 1 0 x 10 Zellen mL Zellfragmente Vitamine Mineralien Acetaminophen Aspirin und Ibuprofen Alle wurden auf potenzielle Testinterferenz bei Abwesenheit und Gegenwart von GC beim gesch tzten rRNA Aquivalent von 50 GC Zellen Test 250 fg Test getestet Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Bei keiner der getesteten Su
105. olumen von TCR mL Anzahl der Reaktionen 5 extra Reaktionen x 0 1 mL Volumen von TCR B mL Volumen von TCR mL 100 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 14 502185DE Rev E DTS Systeme C Target Capture Der zur Target Capture und Amplifikation verwendete Wiederholungspipettierer muss zur ausschlie lichen Verwendung in diesen Schritten bereitgestellt werden Weitere Informationen siehe unter Warnhinweise und Vorsichtsma nahmen St nderaufbau 1 Lassen Sie die Kontrollen und Proben vor der Verarbeitung auf Raumtemperatur kommen 2 Proben nicht mit dem Vortex Mischer mischen 3 berpr fen Sie optisch dass jedes Probenr hrchen eines der folgenden Kriterien erf llt a In Unisex Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner blauer APTIMA Entnahmetupfer b In Vagina Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner rosafarbener APTIMA Entnahmetupfer c In Urin Probentransportr hrchen liegt das End Urinvolumen zwischen den schwarzen F llstandsmarkierungen d In APTIMA Probentransportr hrchen f r Liquid Pap Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap befindet sich kein Tupfer 4 Inspizieren Sie die Transportgef e vor dem Einstechen a Wenn sich im Transportgef im Raum zwischen der Fl ssigkeit und dem Deckel Luftblasen befinden zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um die Luftblasen zu entfernen b Wenn ein Transp
106. ortrgef ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt wenn die Sammelanleitung befolgt wurde zentrifugieren Sie das Reaktionsgef 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet c Falls der Fl ssigkeitsstand in einem Urintransportrohrchen nicht zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien liegt muss die Probe verworfen werden Nicht in ein berf lltes Reaktionsgef stechen d Wenn eine Urinprobe ein Pr zipitat enth lt die Probe bis zu 5 Minuten auf 37 C erw rmen Wenn das Pr zipitat nicht wieder in L sung geht stellen Sie sicher dass das Pr zipitat nicht die Probenabgabe verhindert Hinweis Bei Nichtbefolgen von Schritt 4a 4c kann aus dem Probenr hrchendeckel Fl ssigkeit auslaufen 5 Vor dem Testen von Proben mit Standardverschl ssen undurchl ssige Kappen m ssen diese Proben 5 Minuten bei 420 RCF Relative Zentrifugalkraft zentrifugiert werden um vor dem Abnehmen der Kappe die gesamte Fl ssigkeit zum Boden des R hrchens zu bringen Verspritzen und Kreuzkontamination vermeiden 6 Setzen Sie ausreichend Zehn Gef Einheiten Ten Tube Units TTUs in den TTU St nder f r die Kontrollen und Proben 7 Wenn eine Arbeitsliste gew nscht wird erstellen Sie diese jetzt Die Anleitung zur Erstellung einer Arbeitsliste finden Sie in der Software Bedienungsanleitung f r den APTIMA Assay APTIMA Assay Software Operator s Manual 8 Mischen Sie d
107. r Kontrolle bzw Probe die zum Reaktionsr hrchen hinzugegeben wird muss 400 uL 100 uL betragen Eine visuelle Kontrolle des in das Reaktionsgef pipettierten Volumens wird empfohlen um den Transfer des korrekten Volumens sicherzustellen Das vorgeschriebene Kontroll oder Probenvolumen ist f r die Erzielung korrekter Ergebnisse erforderlich Wenn nicht das richtige Volumen pipettiert wurde pipettieren Sie wTCR GC und die Kontrolle bzw Probe neu in ein neues Reaktionsr hrchen C Reagenzien In der Sondenrekonstitutionsl sung kann sich w hrend der Lagerung ein Niederschlag bilden Erw rmen Sie in diesem Fall die Sondenrekonstitutionsl sung 1 bis 2 Minuten auf 62 C Nach diesem Schritt kann die Sondenrekonstitutionsl sung verwendet werden selbst wenn noch ein Restpr zipitat vorhanden ist Nach der Resuspension das Fl schchen durch vorsichtiges Umdrehen vermischen Schaumbildung vermeiden D Temperatur 1 Die Schritte Target Capture Amplifikation Hybridisierung und Selektion sind temperaturabh ngig Daher ist es unbedingt erforderlich dass die Wasserb der innerhalb der angegebenen Temperaturbereiche gehalten werden 2 Raumtemperatur ist definiert als 15 C bis 30 C 3 Die Nachweisschritte des Assays m ssen bei 18 C bis 28 C ausgef hrt werden E Zeit Die Reaktionen Target Capture Amplifikation Hybridisierung und Selektion sind zeitabhangig Halten Sie die unter Testverfahren mit DTS Systemen angegebenen Z
108. r empfohlenen Lagerbedingungen bei 20 C f r endozervikale urethrale vaginale Abstriche weibliche und m nnliche Urinproben sowie Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wurden mit 90 Proben f r jeden Typ mit negativem Ergebnis erzeugt wobei 30 Proben mit GC bei 50 CFU pro Reaktion versetzt wurden 30 Proben mit GC bei 5 CFU pro Reaktion versetzt wurden sowie 30 Proben ohne Zusatz blieben Alle Proben wurden bei 20 C gelagert und nach 0 200 und 400 Tagen getestet Alle gespikten Proben erf llten das Annahmekriterium von 9596 bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 64 502185DE Rev E Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Die bereinstimmung zwischen den Ergebnissen des APTIMA GC Assays die mit dem vollautomatischen TIGRIS DTS System und den halbautomatischen DTS Systemen erzeugt wurden wurde anhand von Tests von Endozervix Abstrichproben m nnlichen urethralen Abstrichproben m nnlichen und weiblichen Urinproben Vaginalabstrichen und Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap beurteilt Jede der klinischen Proben wurde einzeln mit dem APTIMA GC Assay sowohl auf dem TIGRIS DTS System als auch den DTS Systemen bei Gen Probe getestet Die Testreihenfolge war nicht randomisiert Die zur Inklusion ide
109. r entsprechenden antimikrobiellen Therapie fortbestehen kann H Die Ergebnisse des APTIMA GC Assays sollten in Verbindung mit anderen dem Arzt verf gbaren Labor oder klinischen Daten ausgewertet werden I Ein negatives Ergebnis schlie t eine m gliche Infektion nicht aus weil die Ergebnisse von der angemessenen Probenentnahme abh ngen Die Testergebnisse k nnen durch eine unsachgem e Probenentnahme technische Fehler Probenverwechslung oder Target Konzentrationen unter der Detektionsgrenze des Tests beeintrachtigt sein J Der APTIMA GC Assay liefert qualitative Ergebnisse Daher kann keine Korrelation zwischen der Gr e eines positiven Testmesssignals und der Anzahl der Organismen in einer Probe aufgestellt werden K F r klinische Studien mit Vaginalabstrichen Endozervikalabstrichen m nnlichen urethralen Abstrichen und Urinproben wird die Leistung zum Nachweis von GC von Populationen mit hoher Pr valenz abgeleitet Positive Ergebnisse bei Populationen mit niedriger Pr valenz sollten sorgf ltig interpretiert werden unter der Annahme dass die Wahrscheinlichkeit eines falsch positiven Ergebnisses h her sein kann als die eines wahren positiven Ergebnisses APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 41 502185DE Rev E Einschr nkungen L F r die klinischen Studien mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap wird die APTIMA GC Assay Leistung zum Nachweis von GC prim r aus Populationen m
110. rden nicht wiederholt getestet 11 Proben wiesen endg ltig ung ltige Ergebnisse auf und wurden aus den Reproduzierbarkeitsanalysen ausgeschlossen Die Reproduzierbarkeit wurde ermittelt indem die bereinstimmung zwischen den endg ltigen Testergebnissen und dem erwarteten Resultat f r jede Panelprobe berechnet wurde Die Reproduzierbarkeit wurde auch anhand einer Berechnung der SA und des Variationskoeffizienten VK des Signals im Hinblick auf Pr fzentren Bediener Chargen und Arbeitslisten beurteilt F r GC negative Panelproben wurden wegen niedriger Signalwerte die theoretisch gleich Null sein k nnten keine VK berechnet Tabelle 13 zeigt die Reproduzierbarkeitsergebnisse auf Alle Ergebnisse des APTIMA GC Assays auf dem TIGRIS DTS System stimmten mit den erwarteten Ergebnissen f r Panelproben mit 0 250 25 000 und 250 000 fg GC rRNA Test berein F r Panelproben mit 2500 fg GC rRNA Test betrug die bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen 99 8 Die VK Werte waren kleiner oder gleich 9 0 Diese Daten zeigen eine gute Reproduzierbarkeit des APTIMA GC Assays bei Verwendung des TIGRIS DTS Systems auf APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 68 502185DE Rev E Klinische Proben bereinstimmung mit dem TIGRIS DTS System Tabelle 13 Pr zisionsdaten mit TIGRIS DTS System Zwischen Zwischen Zwischen Zwischen Innerhalb Konz RLU ber Pr fzentren Bedienern Chargen Arbeitslisten Arbeitslisten oi Rer aper pte cae P m
111. rekonstitutionsl sung GC APTIMA Selektionsreagenz C Die folgenden Reagenzien sind stabil bei Lagerung im Bereich von 15 C bis 30 C Raumtemperatur APTIMA Target Capture Reagenz GC APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungs fl ssigkeit APTIMA lreagenz D Target Capture Arbeitsreagenz GC wTCR GC ist bei Lagerung im Bereich von 15 C bis 30 C 60 Tage lang stabil Nicht gek hlt lagern E Nach der Rekonstitution sind das Enzymreagenz Amplifikationsreagenz GC und das Sondenreagenz GC stabil f r 60 Tage bei Lagerung im Temperaturbereich von 2 C bis 8 C F Entsorgen Sie alle unbenutzten rekonstituierten Reagenzien einschlie lich wTCR nach 60 Tagen oder nach Ablauf des Verfallsdatums der Hauptcharge das fr here Datum ist ausschlaggebend G Kontrollen sind bis zum auf dem jeweiligen Fl schchen angegebenen Datum stabil H Reagenzien aus im TIGRIS DTS System aufbewahrten 50 Test Flaschen sind 48 Stunden im System stabil I Im TIGRIS DTS System aufbewahrte Reagenzien aus den Flaschen f r 100 Tests haben eine Haltbarkeit von 96 Stunden im System J Im PANTHER System aufbewahrte Reagenzien haben eine Haltbarkeit von 72 Stunden im System K Das Sondenreagenz GC und das rekonstituierte Sondenreagenz GC sind lichtempfindlich Die Reagenzien sind vor Licht gesch tzt zu lagern APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 7 502185DE Rev E Allgemeine Informationen L Die Lichtexposition des rekonstituiert
112. reservCyt Liquid Pap Kontrolle Positive Kontrolle GC Negative Kontrolle CT Positive Kontrolle CT Negative Kontrolle GC Statistik N Mittel wert SA Maximum 75 Perzentil Median 25 Perzentil Minimum N Mittel wert SA Maximum 75 Perzentil Median 25 Perzentil Minimum RLU x1000 Klinische Studie zu Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt Losung PreservCyt Liquid Pap Klinische Studie zu Abstrichproben und Urinproben 193 218 5048 4561 1071 1295 6765 6791 5763 5450 5175 4859 4645 3804 229 158 193 218 2 15 2 60 2 20 2 80 20 29 2 3 2 2 1 2 0 1 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 58 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Pr zisionsstudie Die Pr zision d h Reproduzierbarkeit des APTIMA GC Assays wurde an zwei externen Pr fzentren und bei Gen Probe beurteilt Die Pr zision des APTIMA GC Assays wurde ber drei Kitchargen des APTIMA GC Assays drei Pr fzentren sechs Bediener und 108 APTIMA GC Assay L ufe beurteilt Zwei Bediener an jedem der drei Pr fzentren f hrten insgesamt sechs APTIMA GC Assay L ufe pro Kitcharge d h insgesamt 36 L ufe pro Kitcharge durch Jeder Lauf bestand aus einem 12 Elemente Pr zisionspanel mit O bis 2433 fg Test von GC rRNA Die Reproduzierbarkeit wurde mit einem mit rRNA gespikten Tupfertransportmedium ermittelt Die Reproduzierbarkeit von Tests von Abstrich und Urinproben mit Zielorganismen wurde nicht ermittel
113. rethrale Abstrichprobe MU Male urine m nnlicher Urin FS Female Endocervical Swab weiblicher Endozervixabstrich FU Female Urine weiblicher Urin PVS Patient Collected Vaginal Swab von der Patientin selbst durchgef hrter Vaginalabstrich CVS Clinician Collected Vaginal Swab vom Arzt entnommener Vaginalabstrich Tabelle 1a Pr valenz von N gonorrhoeae nach Pr fzentrum und insgesamt gem Bestimmung anhand der Ergebnisse mit dem APTIMA GC Assay bei Verwendung von Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt Liquid Pap Pr f zentrum Anz positiv Anz getestet 1 5 0 5 100 2 0 8 1 124 3 0 8 4 475 4 1 4 4 287 5 0 0 0 297 6 0 5 2 364 Alle 1 0 16 1647 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 44 502185DE Rev E Sollwerte mit DTS Systemen Positive und negative Vorhersagewerte f r hypothetische Pr valenzraten in Nordamerika Die gesch tzten positiven und negativen pradiktiven Werte PPV und NPV f r verschiedene hypothetische Pr valenzraten unter Einsatz des APTIMA GC Assays sind in Tabelle 2 gezeigt Diese Berechnungen basieren auf hypothetischen Pr valenzraten und der Gesamtsensitivit t und spezifit t die vom Patienteninfektionsstatus gesch tzt wurden Die Gesamtsensitivitat und spezifit t f r GC betrug jeweils 97 6 und 99 3 Tabelle 2 Der tats chliche positive pr diktive Wert PPV und negative pr diktive Wert NPV f r vom Arzt entnommene endozervikale vaginale un
114. roben gestellt wurden Es wurden Durchl ufe sowohl mit Ansammlungen hoch positiver Proben und Ansammlungen negativer Proben als auch mit einzelnen im Durchlauf nach einem bestimmten Muster verteilten hoch positiven Proben durchgef hrt Die Proben mit hohem Titer wurden hergestellt indem STM mit GC rRNA bei einer Endkonzentration von 5 x 10 fg rRNA Reaktion rRNA Aquivalent zu 2 5 x 10 CFU mL versetzt wurde Die Tests erfolgten anhand von jeweils 5 Durchl ufen auf drei PANTHER Systemen mit insgesamt 2923 negativen Proben Die Gesamtverschleppungsrate betrug 0 bei einem 95 Vertrauensintervall von 0 0 196 Insgesamt 17 negative Proben aus L ufen mit hohem Titer wurden als ung ltig berichtet und aus der Berechnung ausgeschlossen Literatur 1 Centers for Disease Control and Prevention 2002 Screening Tests to Detect Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae infections United States Morbid and Mortal Weekly Rep 51 RR 15 2 Centers for Disease Control and Prevention 2011 Sexually Transmitted Disease Surveillance 2010 Atlanta GA U S Department of Health and Human Services November 3 Ching S H Lee E W Hook Ill M R Jacobs and J Zenilman 1995 Ligase chain reaction for detection of Neisseria gonorrhoeae in urogenital swabs J Clin Microbiol 33 3111 3114 4 Chong S D Jang X Song J Mahony A Petrick P Barriga and M Chernesky 2003 Specimen Processing and Concentration of Chlamydia trachomati
115. robentransferkit SysCheck Kalibrationsstandard Chlorbleiche 5 bis 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung Standard Urinsammelbeh lter ohne Konservierungsmittel Plastikbeh lter mit gro em Deckel APTIMA durchl ssige Kappen Ersatzkappen undurchl ssig Optionale Materialien APTIMA Kontrollenkit APTIMA Assay Fluids APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsl sung und APTIMA Olreagenz GEN PROBE Bleichmittelverst rker f r die routinem ige Reinigung von Oberfl chen und Ger ten STD Proficiency Panel Spitzen 1000 ul leitf hig zur Fl ssigkeitsstandmessung TECAN Freedom EVO 100 4 mit DTS 800 Systems APTIMA COMBO 2 Deckplatte 105200 Reagenzien Vorratsbeh lter Viertelmodul 40 mL 104765 Geteilter Reagenzien Vorratsbeh lter Viertelmodul 19 mL x 2 104763 DTS Systeme Kat Nr 105049 705512 Fisher TU0022 104578 301041 301040 105575 301162 301154C 301078 105668 103036A Kat Nr 301110 302002C 302101 102325 10612513 Tecan 900932 APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 12 502185DE Rev E DTS Systeme Testverfahren mit DTS Systemen A Geratevorbereitung 1 Ein Wasserbad auf 62 C 1 C fur Target Capture und Primer Reassoziation ein zweites Wasserbad auf 42 C 1 C f r Amplifikation und ein drittes Wasserbad auf 62 C 1 C fur HPA temperieren Bei Verwendung des SB100 Dry Heat Bath Vortexers siehe das Anwendungsblatt f r den S
116. rt 4 1 5 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert T 1 0 1 Nicht infiziert 5 2 T Nicht infiziert 2 2 4 Nicht infiziert 1 2 3 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert 718 589 1307 Nicht infiziert 1 0 1 Nicht infiziert NA 2 3 5 Nicht infiziert 11 11 22 Nicht infiziert 1 1 2 Nicht infiziert NA NA 1 1 2 Nicht infiziert NA NA 5 4 9 Nicht infiziert 1 1 2 Gesamt 811 640 1451 m M P Sympt symptomatisch Asympt asymptomatisch NA Probe nicht entnommen oder nicht zum Test verf gbar Das Gleichheitszeichen steht f r unbestimmt im Wiederholungstest FS Female Endocervical Swab weibl Endozervix Abstrichprobe FU Female Urine weibl Urin APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 56 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 7d Ergebnisse f r vaginale Abstriche von Probandinnen die mit N gonorrhoeae infiziert oder nicht infiziert waren gem Patienteninfektionsstatus NAAT 1 Patienten APTIMA COMBO 2 NAAT 2 APTIMA GC Assay Symptom status infektionsstatus Assay ern FS FU FS FU PVS CVS Sympt
117. rter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA quivalent von 50 GC Zellen 250 fg Test PCT NGC APTIMA Positivkontrolle CT Negativkontrolle GC 5x1 7mL Nicht infekti se CT Nukleins ure in gepufferter L sung mit lt 5 Detergens Jede 400 uL Probe enth lt das gesch tzte rRNA quivalent von 1 CT IFU 5 fg Test Die rRNA Aquivalente wurden auf der Grundlage der Genomgr e und des gesch tzten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Erforderliche jedoch nicht im Lieferumfang enthaltene Materialien Hinweis Materialien die von Gen Probe erh ltlich sind sind mit der Katalognummer aufgef hrt sofern nicht anders angegeben Kat Nr PANTHER System 303095 APTIMA Assay Fluids Kit 303014 1000 Tests APTIMA Waschl sung APTIMA Puffer f r Deaktivierungsfl ssigkeit und APTIMA lreagenz APTIMA Auto Detect Kit Auto Detect Kit 303013 1000 Tests Multi Rohrchen Einheiten MTUs 104772 02 PANTHER Entsorgungsbeutel Kit 902731 PANTHER Abfallbeh lterabdeckung 902714 Oder PANTHER Durchlaufkit 303096 5000 Tests enth lt MTUs Entsorgungsbeutel Abfallbeh lterabdeckungen Assay Fluids und Auto Detect Reagenzien Spitzen 1000 pL leitf hig zur Fl ssigkeitsstandmessung 10612513 Tecan APTIMA Probentransferkit 301154C Zur Verwendung mit Proben in PreservCyt L sung APTIMA Entnahmekit f r Vaginalabstrichproben 301162 APTIMA Unisex Tupfer Probenentnahmekit f r endo
118. s Added Can Influence False Negative Rates in the LCx Assay but Not in the APTIMA Combo 2 Assay When Testing for Inhibitors J Clin Microbiol 41 778 782 5 CUMITECH 31 Verification and Validation of Procedures in the Clinical Microbiology Laboratory ASM PRESS FEBRUARY 1997 6 Farrel D J 1999 Evaluation of AMPLICOR Neisseria gonorrhoeae PCR using cppB nested PCR and 16S rRNA PCR J Clin Microbiol 37 386 390 7 Gaydos C A T C Quinn D Willis A Weissfeld E W Hook D H Martin D V Ferraro and J Schachter 2003 Performance of the APTIMA Combo 2 Assay for Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae in Female Urine and Endocervical Swab Specimens J Clin Microbiol 41 304 309 8 Holmes K K H H Handsfield S P Wang B B Wentworth M Turck J B Anderson and E R Alexander 1975 Etiology of nongonococcal urethritis NEJM 292 1199 1205 9 Hook Ill E W and H H Handsfield 1999 Gonococcal Infections in the Adult p 458 In K Holmes et al eds Sexually Transmitted Diseases McGraw Hill New York N Y 10 Krauss S J R C Geller G H Perkins and D L Rhoden 1976 Interference of Neisseria gonorrhoeae growth by other bacterial species J Clin Microbiol 4 288 295 11 Masi A T and B I Eisenstein 1981 Disseminated Gonococcal Infections DGI and Gonococcal Arthritis GCA II Clinical Manifestations Diagnosis Complications Treatment and Prevention Semin Ar
119. s keine Luftblasen in der Leitung vorliegen und alle zehn Dusen einen standigen Flussigkeitsstrom abgeben 18 Schalten Sie die Vakuumpumpe ein und trennen Sie die Absaugvorrichtung am ersten Anschluss zwischen der Absaugvorrichtung und der Auffangflasche Stellen Sie sicher dass das Vakuummessgerat den Vorschriften f r die Dichtheitsprufung entspricht Es 1 Beziehen Sie sich auf das Vakuumspezifikationsblatt f r das Target Capture System Target Capture System Vacuum Specifications Sheet hinten in der Bedienungsanleitung des Target Capture Systems Target Capture System Operator s Manual oder nehmen Sie mit dem Technischen Kundendienst Kontakt auf APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 16 502185DE Rev E DTS Systeme kann 15 Sekunden dauern bis dieser Messwert erreicht ist Schlie en Sie die Absaugvorrichtung wieder an und stellen Sie sicher dass das Vakuummessger t der opezifikation des Vakuumniveaus entspricht Lassen Sie die Vakuumpumpe eingeschaltet bis alle Target Capture Schritte abgeschlossen und die Schl uche der Absaugyvorrichtung trocken sind 19 Setzen Sie die Absaugvorrichtung fest auf dem ersten Satz Spitzen auf Aspirieren Sie die gesamte Fl ssigkeit indem Sie die Spitzen in die erste TTU herablassen bis sie kurz den Boden der Reaktionsgef e ber hren Die Spitzen nicht l nger mit dem Boden der Gef e in Kontakt lassen 20 Nach Abschluss der Aspiration werfen Sie die Spitzen in ihre Original Zehn Spitzen Kas
120. sette aus Wiederholen Sie die Aspirationsschritte f r die restlichen TTUs wobei Sie eine gesonderte Spitze f r jede Probe verwenden 21 Setzen Sie die Dosiervorrichtung ber jede TTU und geben Sie unter Verwendung der Dispensierpumpe 1 0 mL APTIMA Waschl sung in jedes TTU Rohrchen 22 Decken Sie die Gef f3e mit Abdeckfolie ab und nehmen Sie den St nder aus dem magnetischen Sockel des TCS Mischen Sie den St nder einmal mit dem Vortex Mischer f r mehrere Reaktionsgef e Einzelheiten siehe unter Verfahrenshinweise Mischen mit dem Vortex Mischer 23 Setzen Sie den St nder 5 bis 10 Minuten auf den magnetischen Sockel des TCS 24 Aspirieren Sie die gesamte Fl ssigkeit wie in Schritt 19 und 20 beschrieben 25 Entfernen Sie den St nder nach der letzten Aspiration aus dem magnetischen Sockel des TCS und unterziehen Sie die R hrchen einer Sichtpr fung um sicherzustellen dass die gesamte Fl ssigkeit aspiriert wurde und dass alle R hrchen Magnetpartikel Pellets enthalten Wenn Fl ssigkeit sichtbar ist setzen Sie den St nder noch einmal 2 Minuten auf den magnetischen Sockel des TCS und wiederholen die Aspiration f r diese TTU mit den gleichen Spitzen die zuvor f r jede Probe verwendet wurden Hinweis Wenn nach Abschluss der Aspiration ein Magnetpartikel Pellet sichtbar ist kann das Gef angenommen werden Wenn kein Pellet sichtbar ist sollte die Probe erneut getestet werden Wenn die gleiche Probe in diesem Schritt in einem
121. spr ngliche Studiendesign kombinierte negative Proben in einem einzigen Hauptpool Das Design der Anschlussstudie f r m nnliche und weibliche Urinproben wurde ge ndert Die Proben wurden in best tigte negative Mini Pools aliquotiert um die positiven und negativen Panels herzustellen 138 Replikate wurden f r jedes Panel erstellt Tabelle 14 zeigt die prozentuale bereinstimmung f r jede rRNA Konzentration in den Panels f r die endozervikale Abstrichprobe vaginale Abstrichprobe urethrale Abstrichprobe m nnliche und weibliche Urinprobe und Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap jeweils mit den erwarteten GC Ergebnissen f r das TIGRIS DTS System und f r die DTS Systeme Die Konzentration lag im Bereich von 1 log unterhalb bis 3 log oberhalb des 250 fg rRNA Test f r GC Tabelle 14 zeigt auch die prozentualen Gesamt bereinstimmungen der klinischen Panelstudie zwischen dem TIGRIS DTS System und den DTS Systemen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 70 502185DE Rev E Analytische Leistung des TIGRIS DTS Systems Tabelle 14 Mit GC rRNA gespikte klinische Panel bereinstimmungsstudie Probe Endozervix Abstrich Vaginal Urethral Erste Studie M nnliche Urinprobe Anschluss studie 1 Anschluss studie 2 Panelelement Kein Target Sehr niedrig Niedrig Mittel Hoch Kein Target Sehr niedrig Niedrig Mittel Hoch Kein Target Sehr niedrig Niedrig Mittel Hoch Kein Target
122. ssay getestet werden wenn sie bei 2 C bis 8 C gelagert wird oder innerhalb von 14 Tagen wenn sie bei 15 C bis 30 C gelagert wird Wenn l ngere Lagerungszeiten erforderlich sind frieren Sie die Probe bei 20 C bis 70 C bis zu 12 Monate nach dem Transfer ein siehe Probenstabilit tsstudien C Probenlagerung nach dem Test 1 Die bereits getesteten Proben m ssen aufrecht in einem St nder gelagert werden 2 Die Probentransportgef e sind mit einem neuen Barriereschutz aus sauberem Plastik oder Folie zu bedecken 3 Wenn getestete Proben gefroren oder versandt werden m ssen entfernen Sie die durchstechbaren Kappen und setzen Sie neue undurchstechbare Kappen auf die Probentransportr hrchen Wenn Proben zum Test an eine andere Einrichtung versandt werden m ssen m ssen die empfohlenen Temperaturen eingehalten werden Vor der Entfernung des Deckels von bereits getesteten und wieder verschlossenen Proben m ssen die Probentransportr hrchen 5 Minuten bei 420 RCF Relative Zentrifugalkraft zentrifugiert werden um die gesamte Fl ssigkeit zum Boden des Gef es zu bringen Verspritzen und Kreuzkontamination vermeiden Hinweis Der Versand der Proben muss in bereinstimmung mit geltenden nationalen und internationalen Frachtbestimmungen erfolgen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 9 502185DE Rev E DTS Systeme DTS Systeme Die Reagenzien f r den APTIMA GC Assay auf den DTS Systems sind unten aufgef hrt Die Sy
123. stellt 2 Zur Vermeidung von Kreuzkontaminationen sollten die Wasserb der jeweils ausschlie lich f r einen bestimmten Testschritt reserviert werden H Dekontamination 1 Oberfl chen und Pipettierer Arbeitsfl chen im Labor und Pipetten m ssen regelm ig mit einer 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M Natrium hypochloritl sung dekontaminiert werden Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen einwirken Sp len Sie sie anschlie end mit Wasser ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung nicht trocknen Chlorl sungen k nnen Ger te und Metall angreifen Sp len Sie mit Chlorbleiche behandelte Ger te gr ndlich mit Wasser ab um Lochfra zu verhindern 2 CS Absaugyvorrichtung a Setzen Sie eine neue TTC in den TTC St nder Schalten Sie die Vakuumpumpe ein Bringen Sie die Absaugvorrichtung an den Spitzen im TTC an Aspirieren Sie die gesamte Waschl sung die noch in der Einsp lwanne der Dosierstation der Waschl sung ist Schieben Sie die Dosiervorrichtung aus dem Weg b Gie en Sie mindestens 100 mL 0 5 bis 0 7 0 07 M bis 0 1 M oder falls bevorzugt 2 596 bis 3 596 0 35 M bis 0 5 M Natriumhypochloritl sung in die Einsp lwanne Aspirieren Sie die gesamte L sung durch die Absaugvorrichtung c Gie en Sie mindestens 100 mL deionisiertes Wasser in die Einsp lwanne Aspirieren Sie das gesamte Wasser durch die Absaugvorrichtung d Werfen Sie die Spitzen in ihre Original TTC aus
124. t Die Viren wurden wie folgt getestet a Herpes simplex Virus I 2 5 x 10 TCIDaso Assay b Herpes simplex Virus Il 6 0 x 10 TCIDao Assay c Human papillomavirus 16 2 9 x 10 DNA Kopien Assay und d Cytomegalovirus 4 8 x 10 Zellen Assay Die getesteten Organismen sind in Tabelle 11 aufgelistet APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 61 502185DE Rev E Tabelle 11 Analytische Spezifit t Analytische Leistung der DTS Systeme Organismus Achromobacter xerosis Acinetobacter calcoaceticus Acinetobacter lwoffi Actinomyces israelii Actinomyces pyogenes Aerococcus viridans Aeromonas hydrophila Agrobacterium radiobacter Alcaligenes faecalis Bacillus subtilis Bacteriodes fragilis Bacteriodes ureolyticus Bifidobacterium adolescentis Bifidobacterium brevi Branhamella catarrhalis Brevibacterium linens Campylobacter jejuni Candida albicans Candida glabrata Candida parapsilosis Candida tropicalis Chlamydia pneumoniae Chlamydia psittaci 2 Chromobacterium violaceum Citrobacter freundii Clostridium perfringens Corynebacterium genitalium Corynebacterium xerosis Cryptococcus neoformans Cytomegalovirus Deinococcus radiodurans Derxia gummosa Eikenella corrodens Enterobacter aerogenes Enterobacter cloacae Entercoccus avium Entercoccus faecalis Entercoccus faecium Erwinia herbicola Erysipelothrix rhusiopathiae Organismus Escherichia coli Flavobacterium meningosepticum Fusobacterium nucleatum Gardnerella vaginalis
125. t Tabelle 9 stellt die RLU Pr zisionsdaten nach Mittelwert Standardabweichung Variationskoeffizient VK und prozentualer bereinstimmung mit den erwarteten Ergebnissen f r die Berechnungen der Variabilit t zwischen Pr fzentren zwischen Bedienern zwischen Chargen zwischen L ufen sowie die laufinterne Variabilit t dar Tabelle 9 Prazisionsdaten f r APTIMA GC Assay unter Einsatz eines 12 Elemente Pr zisionspanels mit 0 bis 2433 fg Test von GC rRNA Zwischen Zwischen Zwischen Zwischen Laufintern 2 E RLU Pr fzentren Chargen Bedienern L ufen K trati N Mittel onzentration ittelwert bareinet SA me SA Vic SA site SA dic SA T x1000 RLU 94 RLU 94 RLU 94 RLU 94 RLU 94 x1000 x1000 x1000 x1000 x1000 Neg 0 fg mL 540 11 7 99 8 2333 NA 0 NA 0 NA 4 3 NA 0 NA Niedrig 324 55744 99 7 6172 111 1892 34 5181 93 3113 56 5274 95 608 625 fg mL 7 I I I 7 7 7 I 7 I I Mittel 6082 fg mL 108 6502 6 100 138 8 21 0 00 4819 74 5148 79 574 89 EE no tl 304 6786 0 100 270 3 40 0 00 5813 86 4107 61 6471 95 SA Standardabweichung VK 96 prozentualer Variationskoeffizient bereinst prozentuale bereinstimmung NA nicht zutreffend f r negativen Analyten Hinweis Die Variabilit t von einigen Faktoren kann numerisch negativ sein Das kann auftreten wenn die durch diese Faktoren bedingte Variabilit t sehr klein ist Wenn dies auftritt wird die anhand von SA und VK gemessene Variabilit t au
126. t L sung PreservCyt liquid Pap wurden gem der Bedienungsanleitung des ThinPrep 2000 Prozessors ThinPrep 2000 Processor Operator s Manual und der Packungsbeilage des APTIMA Probentransferkits durchgef hrt Nach der Bearbeitung der Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap mit dem ThinPrep 2000 Prozessor wurde die Probe in das APTIMA Probentransferkit zum Test mit dem APTIMA GC Assay transferiert Die Sensitivit t und Spezifit t des APTIMA GC Assays mit Papanicolaou Abstrichen in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap wurden berechnet indem die Ergebnisse mit dem Patienteninfektionsstatus verglichen wurden Der Algorithmus umfasst die Ergebnisse des APTIMA COMBO 2 Tests und APTIMA GC Assays f r endozervikale Abstrichproben Beide Referenz NAATs mussten zum Nachweis des Patientenstatus infiziert positiv sein Mindestens ein Referenz NAAT musste negativ sein um den Patientenstatus nicht infiziert nachzuweisen Das eine unbestimmte Ergebnis das von einem Referenz NAAT erhalten wurde wurde f r die Zwecke der Leistungsberechnung als widerspr chlich zum Pr fungstest angesehen und der Patienteninfektionsstatus wurde daher als nicht infiziert n 1 klassifiziert Tabelle 7e bietet eine bersicht ber die H ufigkeit der Testergebnisse f r die Endozervix Abstrichproben die mit dem APTIMA COMBO 2 Assay und APTIMA GC Assay getestet wurden Tabelle 5a zeigt die Sensitivit ten und Spezifit ten des APTIMA
127. t entnommene endozervikale vaginale und m nnliche urethrale Abstrichproben und m nnliche und weibliche Urinproben im Vergleich zu einem Algorithmus zur Bestimmung des Patienteninfektionsstatus f r jedes Geschlecht Im Algorithmus wurde die Kennzeichnung eines Probanden als mit GC infiziert oder nicht infiziert auf Ergebnissen f r Abstrichproben und Urinproben des im Handel erh ltlichen APTIMA COMBO 2 Tests und dem anderen im Handel erh ltlichen NAAT basiert Die Probanden wurden als mit GC infiziert angesehen wenn zwei der vier Abstrichproben und Urinproben im APTIMA COMBO 2 Assay und dem anderen Referenz NAAT ein positives Ergebnis aufwiesen positives Testergebnis f r eine Probe in jedem NAAT Die Probanden wurden als nicht infiziert angesehen wenn weniger als zwei Referenz NAAT Ergebnisse positiv waren Es wurde keine Kultur als Referenztest verwendet APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 47 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Insgesamt 7653 Ergebnisse des APTIMA GC Assays wurden zur Berechnung der Sensitvit t und Spezifit t herangezogen Die Sensitivit t und Spezifit t f r GC nach Geschlecht Probentyp und Symptomstatus sind jeweils in Tabelle 4 gezeigt Tabelle 6 zeigt die Sensitivit t Spezifit t und pr diktiven Werte des APTIMA GC Assays im Vergleich zum Patienteninfektionsstatus f r jedes Pr fzentrum und insgesamt auf Die Tabellen 7a 7e fassen die Anzahl der Ergebnisse von symptomatischen und asymptom
128. ten DNA RNA Verh ltnisses Zelle jedes Organismus berechnet Die Proben wurden auf zwei TIGRIS DTS Systemen getestet Alle Proben die Target Nukleins uren enthielten waren positiv als sie bei einem Gehalt von 10 Blut in Abstrichproben Vaginalabstrichproben Papanicolaou Abstrichen in PreservC yt L sung PreservCyt liquid Pap und bei einem Gehalt von 30 Blut in Urinproben getestet wurden Alle Proben die kein Target enthielten waren GC negativ Diese Ergebnisse zeigen auf dass es unwahrscheinlich ist dass Vollblut bei den getesteten Konzentrationen einen Einfluss auf die GC Ergebnisse auf dem TIGRIS DTS System hat Verschleppungsstudien f r das TIGRIS DTS System Um nachzuweisen dass das TIGRIS DTS System das Risiko falsch positiver Ergebnisse infolge von Kontamination durch Verschleppung auf ein Mindestma beschr nkt wurde eine otudie mit gespikten Panels auf drei TIGRIS DTS Systemen durchgef hrt Die Studie verwendete 20 High Target GC Proben die 1 0 x 10 Zellen Reaktion enthielten und die im Zufallsverfahren unter 80 negativen Proben die Tupfertransportmedium enthielten verteilt wurden In der Studie wurden 576 High Target Proben und 2376 negative Proben auf den drei TIGRIS DTS Systeme getestet Tabelle 15 zeigt auf dass die Gesamt Verschleppungsrate im Durchschnitt bei 0 21 5 2370 lag Insgesamt 6 negative Proben wurden als ung ltig berichtet und aus der Berechnung ausgeschlossen Eine separate Analyse wurde an einer Tei
129. teninfektionsstatus nach Pr fzentrum und insgesamt f r m nnliche urethrale Abstrichproben m nnliche Urinproben weibliche Endozervix Abstrichproben weibliche Urinproben von der asymptomatischen Patientin selbst durchgef hrte vaginale Abstriche und vom Arzt entnommene Vaginalabstrichproben Pos Neg Probe Eod TP FP TN FN jin pod Spezifit t 95 V I M Mae PPV NPV ve 99 1 145 49 96 0 33 8 100 92 7 100 100 96 2 100 100 100 2 177 66 102 1 379 98 5 9200 100 92 7 86 2 96 8 892 99 0 3 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA 4 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA Abstrich 5 49 7 1 4 14 3 100 59 0 100 97 6 87 4 99 9 87 5 100 6 150 37 112 24 7 100 90 5 100 99 1 9522 100 97 4 100 7 54 12 0 42 22 2 100 73 5 100 100 91 6 100 100 100 8 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA Ale 575 171 10 393 1 299 994 96 8 100 97 5 95 5 98 8 94 5 99 7 M nnlich 1 252 53 1 198 21 0 100 93 3 100 99 5 97 2 100 98 1 100 2 353 68 280 19 8 97 1 90 1 99 7 98 9 96 9 99 8 95 8 99 3 3 4 0 4 0 0 NA 100 39 8 100 NA 100 4 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA Urin 5 200 8 189 40 100 63 1 100 98 4 95 5 99 7 72 7 100 6 305 39 264 12 8 100 910 100 99 2 97 3 99 9 95 1 100 7 207 12 195 58 100 73 5 100 100 98 1 100 100 100 8 NA NA NA NA NA NA NA NA NA NA Alle 1321 180 9 1130 2 13 8 98 9 96 1 99 9 99 2 98 5 99 6 95 2 99 8 1 226 12 2 212 0 53 100 73 100 99 1 96 7 99 9 85 7 100 2 197 29 3 164 1 152 96 7 828 999 98 2 94 8 99 6 90 6 994 3 14 4 1
130. thritis Rheum 10 173 12 National Committee for Clinical Laboratory Standards 1999 NCCLS EP5 A Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices Approved Guideline Vol 19 No 2 13 National Committee for Clinical Laboratory Standards 2002 NCCLS EP12 A User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance Approved Guideline for additional guidance on appropriate internal quality control testing practices APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 76 502185DE Rev E 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 National Committee for Clinical Laboratory Standards 2004 NCCLS EP5 A2 Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods Approved Guideline 2nd edition Vol 24 No 25 Peterson E M V Darrow J Blanding S Aarnaes and L M de La Maza 1997 Reproducibility problems with the AMPLICOR PCR Chlamydia trachomatis test J Clin Microbiol 35 957 959 Schachter J 1985 Chlamydiae Psittacosis Lymphogranuloma Venereum Trachoma group p 856 862 n E H Lennette et al ed Manual of Clinical Microbiology 4 ed American Society for Microbiology Washington D C Schachter J and M Grossman 1981 Chlamydial infections Ann Rev Med 32 45 61 Schachter J 1978 Medical progress chlamydial infections third of three parts NEJM 298 540 549 Schachter J E C Hill E B King V R Coleman P Jones and K F Meyer 1975 Chlamydial infection
131. ti sen Materialien geschult wurde gestattet werden dieses Diagnoseverfahren auszuf hren P Kreuzkontamination in den Probenbehandlungsschritten vermeiden Die Proben k nnen sehr hohe Konzentrationen von Organismen aufweisen Es ist sicherzustellen dass die Probenbehalter nicht miteinander in Ber hrung kommen Benutzte Materialien d rfen nicht ber offene Beh lter hinweg entsorgt werden Wechseln Sie die Handschuhe wenn sie mit Proben in Kontakt kommen Q Wenn das Labor ein Abstrichproben Transportgef ohne Tupfer mit zwei Tupfern einem Reinigungstupfer oder einem nicht von Gen Probe gelieferten Tupfer erh lt muss die Probe abgelehnt werden Vor der Ablehnung eines Tupfertransportgef es ohne Tupfer sicherstellen dass es kein APTIMA Probentransfergef ist da dieses Probentransfergef keinen Tupfer enth lt R F r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt liquid Pap ist die Probenentnahme entsprechend der Herstelleranleitung vorzunehmen Aliquote die anschlie end aus dem PreservCyt Fl schchen zum Test mit dem APTIMA GC Assay entnommen werden d rfen nur mit dem APTIMA Probentransferkit durchgef hrt werden S Nach der Punktion kann unter bestimmten Bedingungen aus den Verschl ssen der APTIMA Transportgef e Fl ssigkeit auslaufen Um dies zu verhindern sind die Anweisungen im jeweiligen Abschnitt Testverfahren zu befolgen APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 5 502185DE Rev E Allgemeine I
132. uf Raumtemperatur kommen 2 Proben nicht mit dem Vortex Mischer mischen 3 berpr fen Sie optisch dass jedes Probenr hrchen eines der folgenden Kriterien erf llt a In Unisex Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner blauer APTIMA Entnahmetupfer b In Vagina Tupfer Probentransportr hrchen befindet sich jeweils ein einzelner rosafarbener APTIMA Entnahmetupfer c In Urin Probentransportr hrchen liegt das End Urinvolumen zwischen den schwarzen F llstandsmarkierungen d In APTIMA Probentransportr hrchen f r Liquid Pap Proben in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap befindet sich kein Tupfer APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 28 502185DE Rev E TIGRIS DTS System A Pr fen Sie die Probenr hrchen vor dem Laden in den St nder a Wenn sich in einem Probenr hrchen im Raum zwischen der Fl ssigkeit und dem Deckel Luftblasen befinden zentrifugieren Sie das R hrchen 5 Minuten bei 420 RCF um die Luftblasen zu entfernen b Wenn ein Probenr hrchen ein geringeres Volumen aufweist als es in der Regel vorliegt wenn die Entnahmeanleitung befolgt wurde zentrifugieren Sie das R hrchen 5 Minuten bei 420 RCF um sicherzustellen dass sich keine Fl ssigkeit im Deckel befindet c Falls der Flussigkeitsstand in einem Urintransportrohrchen nicht zwischen den beiden schwarzen Markierungslinien liegt muss die Probe verworfen werden Nicht in ein berf lltes Reaktionsgef stechen d
133. und lagerung vor dem Test 1 Abstrichproben a Nach der Sammlung ist die Abstrichprobe bis zum Test im Abstrichproben Transportr hrchen bei 2 C bis 30 C zu transportieren und aufzubewahren Die Proben m ssen innerhalb von 60 Tagen nach der Entnahme mit dem APTIMA GC Assay getestet werden Wenn eine l ngere Lagerung erforderlich ist bei 20 C bis 70 C bis zu 12 Monate nach der Entnahme gefrieren siehe Probenstabilit tsstudien 2 Urinproben a Urinproben die noch im prim ren Entnahmebehalter sind m ssen bei 2 C bis 30 C ins Labor transportiert werden Transferieren Sie die Urinprobe innerhalb von 24 Stunden nach der Entnahme in das APTIMA Urinproben Transportgefals Lagern Sie sie bei 2 C bis 30 C und testen Sie sie innerhalb von 30 Tagen nach der Gewinnung b Nach der Gewinnung sind die behandelten Urinproben im APTIMA Urinproben Transportr hrchen bei 2 C bis 30 C zu transportieren und bis zum Test bei 2 C bis 30 C zu lagern Die durchgef hrten Urinproben sollten innerhalb von 30 Tagen nach der Sammlung mit dem APTIMA GC Assay getestet werden Wenn eine l ngere Lagerung erforderlich ist bei 20 C bis 70 C bis zu 12 Monate nach der Entnahme gefrieren siehe Probenstabilitatsstudien APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 8 502185DE Rev E Allgemeine Informationen 3 Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution liquid Pap a Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L su
134. utomatisch entsprechend den vorstehenden Kriterien und berichtet den Run Status als PASS ERFOLGREICH wenn die Laufkontrollkriterien erf llt sind und FAIL FEHLGESCHLA GEN wenn die Laufkontrollkriterien nicht erf llt sind 2 Wenn der Run Status FAIL FEHLGESCHLAGEN ist sind alle Testergebnisse im gleichen Lauf ung ltig und d rfen nicht berichtet werden 3 Jedes Labor sollte entsprechende Kontrollverfahren implementieren um die Anforderungen der CLIA Vorschriften Abschnitt 493 1256 zu erf llen Hinweis Siehe Fehlersuche oder kontaktieren Sie den Technischen Kundendienst von Gen Probe wenn Sie Hilfe bei Kontrollen auBerhalb des zul ssigen Bereichs mit den DTS Systemen ben tigen 4 Ein TIGRIS DTS System Parameter erm glicht jedem Standort die Angabe einer Kontrollensegmentierungs H ufigkeit wonach zus tzliche S tze von Kontrollen an definierten Intervallen in die Arbeitsliste gesetzt werden k nnen Wenn dieser Parameter angegeben wird erfordert das TIGRIS DTS System dass ein Satz Kontrollen nach der festgelegten Zahl von Proben im Kontrollensegment gesetzt wird Das TIGRIS DTS System beurteilt automatisch jede Kontrolle in der Arbeitsliste gem den vorstehenden Kriterien und macht alle Proben im betroffenen Kontrollensegment bzw segmenten ung ltig wenn die Kontrollkriterien nicht erf llt sind Weitere Einzelheiten finden Sie in der Bedienungsanleitung des TIGRIS DTS Systems TIGRIS DTS System Operator s Ma
135. wTCR GC f r den Kit mit 50 Tests a b Paaren Sie die entsprechenden Flaschen TCR GC und TCR B Pr fen Sie die Reagenzchargennummern auf dem Hauptchargen Barcodeblatt um sicherzustellen dass die entprechenden Reagenzien im Kit miteinander gepaart wurden ffnen Sie die Flasche mit TCR GC und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che ffnen Sie die Flasche mit TCR B und legen Sie den Deckel auf eine saubere abgedeckte Arbeitsfl che Entfernen Sie die Transferpipette aus der Verpackung APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 27 502185DE Rev E TIGRIS DTS System f Transferieren Sie ca 2 mL TCR GC in die TCR B Flasche In diesem Schitt nicht die Transferpipette wegwerfen g Verschlie en Sie die TCR B Flasche wieder und vermischen Sie den Inhalt durch Umdrehen h F llen Sie das wTCR GC aus der TCR B Flasche wieder in die TCR GC Flasche i Wiederholen Sie Schritt h mehrere Male bis die Mischung in der TCR B Flasche wieder in die TCR GC Flasche zur ck transferiert wurde j Verschlie en Sie die TCR GC Flasche und schwenken Sie die L sung behutsam um den Inhalt zu mischen Vermeiden Sie w hrend dieses Schritts Schaumbildung k Tragen Sie die Initialen des Bedieners und das aktuelle Datum auf dem Etikett ein Tragen Sie die TCR B Chargennummer ein Werfen Sie die TCR B Flasche und den Deckel weg Entsorgen Sie die Transferpipette 4 Vorbereitung von Selektionsreagenz a Pr fen S
136. y 52 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Systeme Tabelle 6a Sensitivit t Spezifit t und pr diktive Werte des APTIMA GC Assays relativ zum Patienteninfektionsstatus nach Pr fzentrum und insgesamt f r Papanicolaou Abstriche in PreservCyt L sung PreservCyt Solution Liquid Pap Ergebnis von Pos Neg Pr f ADM Pra Sensitivit t Spezifitat prag pr d GC Assayf r l s Wert zentrum 9o 95 V I 95 V I Wert PreservCyt PPV NPV L sung t Positiv 5 0 0 0 l 100 5 5 100 95 95 1 Negat 1 1 egativ 0 0 0 95 5 0 47 8 100 96 2 100 00 00 Gesamt 5 0 0 95 Positiv 1 0 0 0 l 100 1 1 100 123 123 2 Negativ 0 0 0 123 0 8 2 5 100 97 0 100 100 100 Gesamt 1 0 0 123 Positiv 4 0 0 0 80 0 4 5 100 470 470 Negat 1 47 1 1 1 3 egativ 0 0 0 28 4 99 5 99 2 100 00 99 8 Gesamt 5 0 0 470 Positiv 1 0 0 3 100 1 1 99 0 283 286 4 Negativ 0 0 3 280 0 3 2 5 100 97 0 99 8 25 0 100 Gesamt 1 0 3 283 Positiv 0 0 0 0 100 297 297 Negat 297 NA NA 1 5 egativ 0 0 0 9 0 0 98 8 100 00 Gesamt 0 0 0 297 Positiv 1 0 T 0 100 1 1 99 7 362 363 6 Negativ 0 0 2 360 0 3 2 5 100 98 5 100 50 0 100 Gesamt 1 0 3 360 Positiv 12 0 1 3 92 3 12 13 99 8 1630 1634 All Negat 1 162 7 e egativ 0 5 625 0 8 64 0 99 8 99 4 99 9 5 0 99 9 Gesamt 13 0 6 1628 MIL NA nicht zutreffend Positives Endozervixabstrich Ergebnis im APT
137. zervikale und 301041 m nnliche urethrale Abstriche verwendet werden APTIMA Urinprobenentnahmekit f r Urinproben von M nnern und 301040 Frauen APTIMA Urinproben Transportgef e f r m nnliche und weibliche 105575 Urinproben Chlorbleiche 5 bis 7 0 7 M bis 1 0 M Natriumhypochloritl sung Einweghandschuhe APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 32 502185DE Rev E PANTHER System SysCheck Kalibrationsstandard 301078 APTIMA durchl ssige Kappen 105668 Ersatzkappen undurchl ssig 103036A Ersatzkappen f r die Kits mit 100 Tests Rekonstitutionsl sungen f r Amplifikations Enzym und Sondenreagenz CL0041 100 Kappen TCH und Selektionsreagenz 501604 100 Kappen Optionale Materialien Kat Nr APTIMA Kontrollenkit 301110 GEN PROBE Bleichmittelverst rker 302101 f r die routinem ige Reinigung von Oberfl chen und Ger ten Testverfahren mit dem PANTHER System Hinweis N here Verfahrensinformationen zum PANTHER System finden Sie im Bedienungsanleitung f r das PANTHER System PANTHER System Operator s Manual A Vorbereitung des Arbeitsbereichs 1 Reinigen Sie Arbeitsfl chen auf denen Reagenzien und Proben vorbereitet werden sollen Wischen Sie die Arbeitsfl chen mit einer Natriumhypochloritl sung von 2 5 bis 3 5 0 35 M bis 0 5 M ab Lassen Sie die Natriumhypochloritl sung mindestens eine 1 Minute auf den Fl chen einwirken Sp len Sie sie anschlie end mit Wasser ab Lassen Sie die Natr
138. zusammen Bei bestimmten Probentypen ist mit zunehmenden RLU Werten ein Trend zu einem steigenden Anteil an wahren positiven Testergebnissen zu beobachten APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 45 502185DE Rev E Sollwerte mit DTS Systemen 7000 6000 5000 Oo Neaati Niedriger Positi I en iia i RLU Wert M O 4000 Sun positiv O T N c lt 3000 2000 1000 0 O O O o O Oo o o S S S S S e e Be 8 S S SS S S S S S Q o o Sd S 2 L V L L L L U N v e v PS e N Vv e N RLUs x1000 Abb 4 H ufigkeit der RLU Verteilung f r den APTIMA GC Assay Tabelle 3 RLU Verteilung f r den APTIMA GC Assay RLUs x 1000 20 30 40 50 100 1000 2000 3000 4000 5000 6000 wgs 9 e EZ EZ EZ ER mi insgesamt Falsch Positive MI to tto Lom o o d EN NN E 31 EN NNI 0 7 o 7 0 M8 RP mM Negative insgesamt Negative insgesamt CVS Clinician Collected Vaginal Swab vom Arzt entnommene Vaginalabstrichprobe PVS von der Patientin selbst durchgef hrter Vaginalabstrich nur bei asymptomatischen Probandinnen FS Female Endocervical Swab weiblicher Endozervixabstrich MS m nnlicher urethraler Abstrich nur bei symptomatischen Probanden FU Female Urine weiblicher Urin MU m nnlicher Urin Die schattierte Spalte gibt einen unbestimmten Bereich an APTIMA Neisseria gonorrhoeae Assay 46 502185DE Rev E Klinische Leistung der DTS Syst

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