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ÄKTA™ avant - GE Healthcare Life Sciences

1. 1 Probeneinlassventil 2 Probenpumpe 3 Einlassventil A 4 Systempumpe A 5 Quatern res Ventil 6 Einlassventil B 7 Systempumpe B 8 Einspritzventil 9 Probenschleife oder Superloop 10 S ulenventil 11 S ule 12 UV Monitor 13 Leitf higkeitsmonitor 14 PH Ventil mit pH Monitor und Durchflussbegrenzer 15 Auslassventil 16 Fraktionssammler Schl uche und Anschl sse Die folgende Tabelle zeigt welche Schl uche und Verbinder f r verschiedene Zwecke verwenden sind KTA avant 25 Verwendungs Schlauch Verbinder zweck Einlass FEP AD 1 8 Schlauchverbinder schlauch ID 1 6 mm 5 16 Ferrule gelb 1 8 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 75 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten 76 Verwendungs zweck Schlauch Verbinder Verwendungs zweck Schlauch Schl uche PEEK AD Anschlussst ck 1 16 zum An 1 16 ID 0 50 schluss der mm e S ulen Auslass und ETFE AD Anschlussst ck 1 16 Ablaufschl u 1 16 ID 1 0 che mm KTA avant 150 Verbinder Einlass FEP AD 3 16 Schlauchverbinder schlauch ID 2 9 mm 5 16 Ferrule blau Cora 3 16 Schl uche PEEK AD Anschlussst ck 1 16 zum An 1 16 ID 1 0 schluss der mm S ulen Auslass FEP AD 1 8 Schlauchverbinder schlauch ID 1 6 mm 5 16 Ferrule gelb Abfallschlauch ETFE AD Anschlussst ck 1 16 1 16
2. Manual Ignored System Cancelled e Auf OK klicken um das Dialogfeld zu schlie en 122 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Flussbild 7 Eine Methode durchf hren 7 4 Methode berwachen Anmerkung Diese Aktionen bestimmen welche Daten w hrend eines Programm laufs im Run Log Fenster angezeigt werden Die urspr nglichen Roh daten werden gespeichert und k nnen niemals ge ndert oder aus dem Ergebnis gel scht werden Das Flow Scheme Fenster zeigt den aktuellen Str mungsweg w hrend des Programm laufs an Die Bedeutung der Farben wird in der nachstehenden Tabelle erl utert Au er dem werden Echtzeitdaten von den Monitoren im Durchflussbild angezeigt Siehe Abbil dung unten Farbe Indikation Gr n Offener Str mungsweg Grau Geschlossener Str mungsweg Rot nicht abgebildet Alarm SyP to Col Syr to Loop to W Column 1 PreC 0 00 MPa DeltaC 0 00 MPa J uv1 0 27 mAU Cond 0 00 mS cm 0 00 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 123 7 Eine Methode durchf hren 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt die Reinigungsverfahren f r das Ger t und die S ulen nach einem Chromatographiedurchlauf sowie die Vorbereitung des Systems auf die Lagerung Ger t und S ulen sollten zwischen den Programml ufen gereinigt werden
3. Phase Properties Text Instructions iT Sample Application Use the same flow rate as in Method Settings Flow rate 10 000 ml min 0 000 25 000 Inject sample from loop Inject sample directly onto column Tipp Fill the loop using Manual load v Loop type Capillary loop v mi Sample inlet Fill loop with Empty loop with Sample volume 00 ml Inlet amp l C Use the same inlets as in Method Settings v Inlet B B1 v 00 U Fill the system with the selected buffer Die Probenschleife mit einem Puffervolumen leeren das das Volumen der Schleife bersteigt Hierdurch wird sichergestellt dass die Schleife vollst ndig entleert wird Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 2 Auftragen der Probe F llen einer Probenschleife Die nachstehenden Anweisungen befolgen um die Probenschleife mit Probe zu f llen Schritt Ma nahme 1 Eine geeignete Probenschleife an die Einspritzventilports LoopF F llen und LoopeE Leeren anschlie en Eine Spritze mit Probe f llen Die Spritze an den Einspritzventilport Syr anschlie en Probe in die Probenschleife laden Um einen Probenverlust aufgrund einer Siphonwirkung zu vermeiden die Spritze im Port lassen bis die Probe w h rend des Programmlaufs auf die S ule injiziert wurde Tipp Die Schleife sollte berladen werden um sicherzustellen d
4. Vordefinierte Methoden und Phasen Eine Methode besteht aus verschiedenen Phasen Jede Phase repr sentiert einen wichtigen Verfahrensschritt in der Methode z B quilibrierung oder Elution F r verschie dene Chromatographieverfahren und auch f r die Systemreinigung sind vordefinierte Methoden verf gbar die alle f r den Betrieb des Systems ben tigten Phasen enthalten Informationen ber die verf gbaren vordefinierten Methoden und die Methodenerstellung sind dem UNICORN 6 Method Manual zu entnehmen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 47 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 1 Methodeneditormodul Methodeneditorfenster Wie nachstehend abgebildet werden standardm ig vier Fenster im Method Editor angezeigt Verf gbare Phasen sind in der Phase Library 1 zu finden und eine bersicht ber die Phasen die in der aktiven Methode enthalten sind werden in einer Method Outline 2 angezeigt Detaillierte Informationen ber die Methode stehen im rechten oberen Fenster 3 das die beiden Registerkarten Phase Properties und Text Instructions enth lt Der in der Methode verwendete Gradient wird in einer Gradient Abbildung dar gestellt 4 1 3 in Ceen Camm wen Samye Appin aron Posen ind pecchen 0D PRRD Renee mik v 2 gen 00 Ppi wi 3 Base t w fr FE Uwe fo mincter Corn Wash Fam Rte Uet rn w Unser Cohn ion Ponten 1 Tr ne Dan Wavcmghe NO 700 m Nm ua 1 000 sini
5. Abbildung des Systems Die nachstehende Abbildung zeigt das KTA avant Ger t mit auf einem Computer instal lierter UNICORN Software In diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt die folgenden Abschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t 38 4 2 UNICORN Software bersicht 42 4 3 UNICORN Softwaremodule 46 37 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t Einf hrung Design Dieser Abschnitt enth lt einen berblick ber das KTA avant Ger t Technische Einzel heiten ber das Ger t und die einzelnen Module finden sich im KTA avant User Manual KTA avant ist modular aufgebaut wobei sich alle Pipettiersystemmodule au en am Ger t befinden Puffergef e werden auf die Pufferablage oben auf dem Ger t gestellt Ein Ger tedisplay befindet sich auf der Vorderseite Von dieser Seite aus werden der eingebaute Fraktionssammler sowie die Probe gehandhabt Die restlichen Module befin den sich auf der rechten Seite des Ger ts Diese Seite kann durch eine Faltt r und eine Pumpenabdeckung abgedeckt werden Dank des Drehfu es am Ger t ist jede Seite leicht zug nglich Betriebsbereiche 38 Aus der folgenden Tabelle sind die Grenzwerte f r den Betrieb des Ger ts ersichtlich KTA avant 25 Parameter Grenzen Durchflussrate bis zu 25 ml min
6. Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 3 Starten eines Methodenlaufs Schritt Ma nahme 4 Auf der letzten Seite von Start Protocol auf Finish klicken Ergebnis e Wenn bei der Installation von UNICORN die S ulenprotokollierung aus gew hlt wurde und bei der Methodenerstellung ein S ulentyp ausge w hlt wurde ffnet sich der Select Columns Dialog Weiter mit den Schritten 5 9 Select Columns System3 Enter or select a column individual Code Enter ID O Select ID Disable column logging for this run Apply to all methods with the same column type Methods Remark Column Barcode Column type Column Handling Scouting run 2 HiPrep 26 10 Desalting Column Handling Scouting run 3 HiPrep 26 10 Desalting e Wenn die S ulenprotokollierung bei der Installation von UNICORN nicht ausgew hlt wurde und oder bei der Methodenerstellung kein S ulentyp ausgew hlt wurde beginnt der Programmlauf direkt 5 Ist die zu verwendende S ule bereits registriert e Wenn Nein weiter mit Schritt 6 e Wenn Ja weiter mit Schritt 9 6 Im Dialogfeld Select Columns auf New klicken Ergebnis Das erste New Column Dialogfenster wird ge ffnet New Column C The Column has a uniTag has a fixed Code and exp Continue Cancel Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 115 7 Eine Methode durchf hren 7 3 Starten eines Methodenlaufs Schritt Ma nahme
7. Nach der quilibrierung und der Probenapplikation werden negativ geladene Proteine in den S ulenliganden absorbiert Nach einem Waschvorgang zum Entfernen von ungebundener Probe wird die Elution mit einem Gradienten steigender Salzkonzentration z B NaCl durchgef hrt Schlie lich wird die S ule gewaschen und mit Startpuffer neu quilibriert Cation Ex change Chro matography CIEX Nach der quilibrierung und der Probenapplikation werden positiv geladene Proteine in den S ulenliganden absorbiert Nach einem Waschvorgang zum Entfernen von ungebundener Probe wird die Elution mit einem Gradienten steigender Salzkonzentration z B NaCl durchgef hrt Schlie lich wird die S ule gewaschen und mit Startpuffer neu quilibriert Chromatofocu sing CF Nach der quilibrierung und der Probenapplikation wird die Elution mit einem pH Gradienten durchgef hrt Die Proteine werden ge m ihrer isoelektrischen Punkte getrennt und eluiert Schlie lich wird die S ule neu quilibriert Nur erh ltlich f r KTA avant 25 Column CIP Die S ule wird mit einer Reinigungsl sung gef llt Einlasspositionen ausw hlen Die Identit t der L sung Volumen Durchflussrate und Inkubationsdauer eingeben Durch Hinzuf gen weiterer Schritte k nnen mehrere Reinigungsl sungen verwendet werden Empfehlungen f r Reinigungsschritte sind f r verschiedene S u lentypen verf gbar Erste Schritte mit KTA a
8. Hinweis Bei der Ausf hrung der Column packing flow Anweisung betr gt die maximale Durchflussrate f r KTA avant 25 50 ml min Max Betriebsdruck 20 MPa Wellenl nge 19 700 nm Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA KTA avant 150 4 Das Ger t und die Software 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t Parameter Grenzen Durchflussrate bis zu 150 ml min Hinweis Bei der Ausf hrung der Column packing flow Anweisung betr gt die maximale Durchflussrate f r KTA avant 150 300 ml min Max Betriebsdruck 5 MPa Wellenl nge 190 700 nm Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 39 4 Das Ger t und die Software 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t Abbildung der Hauptkomponenten des Ger ts Die folgende Abbildung zeigt die Lage der Hauptkomponenten des Ger ts Teil Funktion Funktion 1 Fraktionssammler 7 Halterschienen 2 Pufferablage 8 Ver Entriegelungsknopf f r den Drehfu 3 Ger tedisplay 9 Drehfu 4 Feuchte Seite 10 Herausschwenkbarer Werk zeugkasten 5 Faltt r 11 Netzschalter 6 Pumpenabdeckung 40 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t Abbildung der Ger temodule der feuchten Seite Die folgende Abbildung zeigt die Module der feuchten Seite des Ger ts 1 2 34 35 Teil Funktion Fun
9. Anschl sse an der R ckseite d rfen nicht mit Firewire Anschl s sen verwechselt werden Keine externen Ger te an die UniNet 9 Anschl sse anschlie en Das UniNet 9 Buskabel darf nicht abgetrennt oder verlegt werden 20 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Systembedienung 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen ACHTUNG Um Verletzungen bei Bedienung des KTA avant Systems zu ver meiden die nachstehenden Anweisungen befolgen e Drehen des Ger ts Sicherstellen dass mindestens 20 cm Freiraum um das KTA avant Ger t gegeben sind um ausrei chende Bel ftung und eine Drehung auf dem Drehfu zu erm g lichen Beim Drehen des Ger ts darauf achten dass Schl uche und Kabel nicht durch Dehnen oder Quetschen besch digt werden Ein abgetrenntes Kabel kann den Strom oder die Netzwerkverbindung unterbrechen Gedehnte Schl uche k n nen dazu f hren dass Flaschen herunterfallen und zerbrechen und Fl ssigkeit ausl uft Gequetschte Schl uche k nnen eine Druckerh hung verursachen oder den Fl ssigkeitsstrom blo ckieren Um zu vermeiden dass Flaschen umkippen die Fla schen vor dem Drehen des Ger ts stets auf die Pufferablage stellen und die T ren schlie en e Probenflaschen befestigen Flaschen und Kassetten stets an den Schienen an der Probenablage befestigen Die passenden Halter f r Flaschen verwenden Glasscherben von herunterge fallenen Flaschen k nnen Verletzungen veru
10. Die Method Settings Phase kann nicht verschoben werden 2 Die Phase in die gew nschte Position im Method Outline Fenster ziehen Ergebnis Die ausgew hlte Phase wird an die gew nschte Position verscho ben Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Eine Wartungsmethode ausw hlen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Es sind verschiedene vordefinierte Methoden f r die Vorbereitung und Reinigung verf g bar Diese Wartungsmethoden anwenden um das System und die S ulen vorzubereiten und zu reinigen und um das System und die S ule mit Lagerungsl sung zu f llen In der nachfolgenden Tabelle stehen Empfehlungen zu Methoden und L sungen f r die ver schiedenen Zwecke Wenn Sie Phase Methode L sung Schl uche und Ger temodule vor einem Vorbereitung des Sys geeignete Puffer Programmlauf pr parieren wollen tems die S ule vor einem Programmlauf pr Vorbereitung derS u geeignete Puffer parieren wollen le Schl uche und Module reinigen wollen System CIP 0 5 1 M NaOH die S ule reinigen wollen S ule CIP 0 5 1 M NaOH das System mit Lagerungsl sung stehen System CIP 20 Ethanol lassen wollen die S ule mit Lagerungsl sung stehen S ule CIP 20 Ethanol lassen wollen Tipp CIP Cleaning In Place und Vorbereitung von S ulen und System k n nen entw
11. Issued Processing NN min Naise radictinn IV AN feer IM amnleted Find Adjust retention zero to injection number Included ent y types Included feedback types Base I Set Mark Issued Time 7 Block Start Processing O Volume v Alarms Wamings and Enors 7 Completed 7 Method Failed Manual Ignored System Cancelled Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 133 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 2 Peakintegration 8 2 Peakintegration Einf hrung Die Peakintegration wird zur Identifizierung und Messung von Kurveneigenschaften einschlie lich Peakbereichen Verweilzeiten und Peakbreiten verwendet Dieser Abschnitt beschreibt das Verfahren zur Durchf hrung einer Peakintegration mit der UNICORN Software F r weitere Informationen ber die Peakintegration siehe UNICORN 6 Evaluation Manual Durchf hren einer Peakintegration Die nachstehenden Anweisungen befolgen um die Kurven in ein Ergebnis zu integrieren Schritt Ma nahme di Das Evaluation Modul ffnen und ein Ergebnis aus dem Result Navigator ffnen 2 Auf das Symbol Peak Integrate klicken Ergebnis Der Dialog Peak Integrate wird ge ffnet 134 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 2 Peakintegration Schritt Ma nahme 3 Im Dialogfenster Peak Integrate e Ausw hlen
12. beiten siehe KTA avant User Manual Die Wartung ist unterteilt in e T gliche Wartung e W chentliche Wartung e Monatliche Wartung e Halbj hrliche Wartung e Wartung nach Bedarf ACHTUNG Stromschlaggefahr Alle Reparaturen m ssen von Servicepersonal durchgef hrt werden das von GE Healthcare autorisiert wurde Keine Abdeckungen ffnen oder Teile austauschen es sei denn dies wird ausdr cklich in der Benutzerdokumentation angegeben Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 9 Wartung Regelm iges Wartungsprogramm Der Bediener des KTA avant Ger ts sollte die folgenden regelm igen Wartungsarbeiten durchf hren T glich Den pH Monitor kalibrieren W chentlich Druckmonitore kalibrieren W chentlich Pumpensp ll sung wechseln W chentlich Online Filter im Mischer austauschen Monatlich Durchflussbegrenzer pr fen Halbj hrlich UV Durchflusszelle reinigen Halbj hrlich pH Elektrode austauschen Wartung nach Bedarf Der Bediener des KTA avant Ger ts sollte die folgenden Wartungsarbeiten nach Bedarf durchf hren Wartungsarbeit Au enfl chen des Ger ts reinigen CIP Verfahren beim Systems durchf hren CIP Verfahren bei der S ule durchf hren Fraktionssammler reinigen Schl uche und Anschl sse austauschen Lagerung der pH Elektrode pH Elektrode reinigen Leitf higkeitsmesszelle reinigen Leitf higkeitsmonitor kalibrie
13. laufs Column Wash W scht ungebundene Probe nach der Probenapplikation aus oder entfernt stark gebundene Proteine nach der Elution Elution Eluiert Probe von der S ule Definiert Parameter f r die Elutions und Fraktionierungseinstellungen Column Preparati Pr pariert die S ule vor der Verwendung indem Lagerungsl on sung entfernt und die S ule quilibriert wird Durch Hinzuf gen weiterer Schritte k nnen mehrere Pr parationsl sungen sequen ziell verwendet werden Column CIP Reinigt die S ule nach Aufreinigungsl ufen durch Aussp len mit einer Reinigungsl sung um unspezifisch gebundene Prote ine zu entfernen Durch Hinzuf gen weiterer Schritte k nnen mehrere Reinigungsl sungen sequenziell verwendet werden System Preparati Bereitet das System vor einem Programmlauf vor indem Lage on rungsl sung entfernt und System und Einl sse mit Pufferl sung gef llt werden Pro Phase wird eine Pr parationsl sung verwen det System CIP Reinigt das System nach der Aufreinigung durch Sp len mit einer Reinigungsl sung Pro Phase wird eine Reinigungsl sung ver wendet Column Perfor mance Test Bestimmt die Leistung der gef llten S ule durch die H he im Vergleich mit einer theoretischen Platte HETP und dem Peak Asymmetriefaktor AJ Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 67 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 3 Vordefi
14. 4 Sind Sie mit dem Layout zufrieden e Wenn Ja weiter mit Schritt 5 e Wenn Nein File Exit w hlen um den Generate Report Dialog wieder aufzurufen und ein anderes Format auszuw hlen 142 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken Schritt Ma nahme 5 Im Customize Report Dialog auf das Symbol Print klicken Ergebnis Das Dialogfenster Print wird ge ffnet Printer Microsoft Office Document Image Writer EN Properties Print Range Copies Oa Number of copies 1 O Pages Enter page numbers and or page ranges seperated by commas For example 1 3 5 23 6 Im Print Dialog Printer aus der Liste ausw hlen und auf OK klicken Ergebnis Ihr Bericht wird gedruckt Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 143 9 Wartung 9 Wartung Einf hrung Dieses Kapitel enth lt Zeitpl ne f r die vorbeugende Wartung die vom Benutzer des KTA avant durchzuf hren ist Eine regelm ige Wartung ist unerl sslich f r die zuver ssige Funktion und verl ssliche Ergebnisse Ausf hrliche Anweisungen siehe KTA avant User Manual ACHTUNG Stets angemessene Schutzausr stung w hrend des Betriebs und der Wartung des KTA avant Systems verwenden Wartungsprogramm 144 Ein berblick ber vorbeugende Wartungsarbeiten die am KTA avant ausgef hrt werden m ssen ist nachstehend dargestellt Ausf hrliche Informationen ber die Wartungsar
15. Cohn posten Bppar Pom ide 1 000 min 9000 25 000 17 Cornol fhe Som to avos overpressure Uan maruandh paganed baten ka Tal o wep Use MlaFro Imzoruabe bafio pantaran hecee m 20 70 beconmendoti Coc Dined by iope bx mdiconporeni tuie Pend Nane amp Locaton Stat Paatocol Method Noten Ur rekotien MettodEsselind DV Flow Rate Und mien Menke eer Waveenghe 190 100 rm w zu mm Dw2 m ow E Eratie phi montoring Entin a sorote aian Dira Eiran C E50 7 Cohn Lotos Erte kg D Cotan Patoma Toit poar Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Schritt 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Ma nahme 4 Im Phase Properties Fenster der Method Settings Phase auf die Schaltfl che Result Name amp Location klicken um den Namen und den Speicherort der Ergebnisse von den Methodenl ufen anzugeben Result Name amp Location Ergebnis Das Dialogfenster Result Name amp Location wird ge ffnet Result Name amp Location No Result Result location DefaultHome Folder name for Design of Experiments or Scouting Result name O Name Variable Method name O Date Add unique identifier Im Dialogfenster Result Name amp Location e Result location einstellen und zwar durch Klicken auf die Browse Schalt fl che und Ausw hlen eines Ordn
16. Dies verhindert beispielsweise eine Kontaminierung der Proben eine Eiwei ausf llung und das Verstopfen der S ule Wenn das Ger t ein paar Tage oder l nger nicht verwendet wird sollten das Ger t die S ulen und die pH Durchflusszelle mit Lagerungsl sung gef llt werden Wei tere Hinweise zu Reinigungs und Wartungsmethoden siehe Bedienungsanleitung Tipp Um das Ger t und die S ulen mit Lagerungsl sung zu f llen System CIP und Column CIP entweder als getrennte vordefinierte Methoden oder Phasen innerhalb einer chromatographischen Methode durchf h ren ACHTUNG Gef hrliche Chemikalien w hrend der Wartung Bei Verwendung von gef hrlichen Chemikalien f r die Reinigung des Systems oder der S ule das System oder S ule in der letzten Phase oder am Schluss mit einer neutralen L sung abwaschen Reinigen des Systems Nach einem Methodenlauf wie folgt vorgehen Das Ger t mit einer oder mehreren Reinigungsl sungen z B NaOH Pufferl sung oder destilliertes Wasser unter Anwendung des System CIP Verfahrens sp len Den Fraktionssammler leeren Versch ttete Fl ssigkeiten auf dem Ger t und dem Labortisch mit einem feuchten Tuch aufwischen Ablaufbeh lter leeren Sicherstellen dass sich die pH Elektrode im richtigen Puffer befindet 124 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf Systemlagerung Wenn das Ger t ein paa
17. ID 1 0 mm Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Einlassanschl sse Die folgende Tabelle zeigt die Einlassanschl sse von Einlassventil A Einlassventil B und Probeneinlassventil Ventile und Anschl sse Abbildungen Einlassventil A Einlassanschl sse e AI A7 Out V9 IA Einlassventil B Einlassanschl sse e B1 B7 Out V9 IB Probeneinlassventil Einlassanschl sse e S1 S7 Puffer Out V9 15 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 77 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Vorbereiten der Einlassschl uche Einlassschl uche an die zu verwendenden Einlassanschl sse anschlie en und alle Ein lassschl uche die f r den Methodenlauf verwendet werden sollen in die korrekten Puffer tauchen Vorbereiten der Auslassschl uche Auslassschl uche an die Auslassanschl sse des Auslassventils anschlie en die w hrend des Programmlaufs verwendet werden sollen Wenn der Fraktionssammler eingesetzt werden soll sicherstellen dass der Schlauch zwischen dem Anschluss Frac des Auslass ventils und dem Fraktionssammler angeschlossen ist Fraktionssammler vorbereiten Andernfalls den Auslassschlauch in geeignete R hrchen oder Gef e stecken Ablaufanschl sse Die folgende Tabelle zeigt die
18. e Auf die Save Schaltfl che klicken Save Ergebnis Die erstellte Methode wird im ausgew hlten Ordner gespeichert Phasen zu einer Methode hinzuf gen Die nachstehenden Anweisungen befolgen um Phasen zu einer Methode hinzuzuf gen Schritt Ma nahme Die gew nschte Phase aus dem Phase Library Fenster ausw hlen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 61 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Schritt Ma nahme 2 Die Phase in die gew nschte Position im Method Outline Fenster ziehen Die Phase kann an einer beliebigen Position unter der Method Settings Phase platziert werden Ergebnis Die Phase ist an der gew nschten Position in der Methode enthal ten Phasen aus einer Methode l schen Die nachstehenden Anweisungen befolgen um Phasen aus einer Methode zu l schen Schritt Ma nahme 1 Die zu l schende Phase aus dem Method Outline Fenster ausw hlen Anmerkung Die Method Settings Phase kann nicht gel scht werden 2 Auf die Delete Schaltfl che unter dem Method Outline Fenster klicken Ergebnis Die ausgew hlte Phase ist aus der Methode gel scht Phasen innerhalb einer Methode verschieben 62 Die nachstehenden Anweisungen befolgen um Phasen innerhalb einer Methode zu verschieben Schritt Ma nahme 1 Die zu verschiebende Phase aus dem Method Outline Fenster ausw hlen Anmerkung
19. en die Faltt r und die Pumpenabde ckung vor jedem Arbeitsgang schlie en e Schnittverletzungen Der Schlauchschneider ist sehr scharf und muss vorsichtig verwendet werden um Verletzungen zu vermeiden 18 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen Einbau und Verstellen des Ger ts ACHTUNG Um Verletzungen beim Einbau oder Verstellen des KTA avant Ger ts zu vermeiden die nachstehenden Anweisungen be folgen e Schweres Objekt Das KTA avant Ger twiegt ca 116 kg Zum Bewegen des Ger ts eine angemessene Hebevorrichtung ver wenden oder mindestens vier Personen zu Hilfenehmen Beim Heben und Bewegen m ssen lokale Vorschriften befolgt wer den e Horizontales Verstellen des Instruments Zum horizontalen Verstellen des Instruments werden drei Personen empfohlen e Versorgungsspannung Vor Anschlie en des Netzkabels ge w hrleisten dass die Versorgungsspannung an der Wandsteck dose der Kennzeichnung am Ger t entspricht e Schutzerde Das KTA avant Ger t muss immer an eine geer dete Steckdose angeschlossen werden e Netzkabel Nur geerdete Netzkabel verwenden die von GE Healthcare geliefert oder zugelassen wurden e Zugang zum Netzschalter und Netzkabel Nicht die R ck und Seitenverkleidung des Ger ts blockieren Der Netzschalter muss stets gut zug nglich sein Das Netzkabel muss stets schnell gezogen werden k nnen e Installatio
20. enden Dies kann von einem beliebigen UNICORN Modul ausgef hrt werden sich aus UNICORN ab w hlen Sie File Log off melden m chten g Log off Eric Exit UNICORN Ergebnis Alle ge ffneten UNICORN Module werden ge schlossen und das Log On Dialogfeld wird ge ffnet UNICORN beenden w hlen Sie File Exit UNICORN m chten Log off Eric Exit UNICORN Ergebnis Alle ge ffneten UNICORN Module werden ge schlossen Anmerkung Wenn eine bearbeitete Methode oder ein Ergebnis ge ffnet und nicht gespeichert ist wenn Sie versuchen das Programm zu beenden oder sich von UNICORN abzumelden erscheint ein Warnhinweis Auf Yes klicken um zu speichern auf No um zu beenden ohne zu speichern oder auf Cancel um angemeldet zu bleiben Method Editor A Do you want to save the changes made to Method 1 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 127 7 Eine Methode durchf hren 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf Das Ger t herunterfahren Den Strom zum Ger t durch Dr cken des Netzschalters auf Position O ausschalten 128 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 Ergebnisse auswerten und drucken Zu diesem Kapitel Dieses Kapitel beschreibt wie das Evaluation Modul zur Auswertung und zum Druck der Ergebnisse eines Programmlauf verwendet wird Weitere Informationen finden Sie in UNICORN 6 Evaluation Manual In diesem Kapitel Dieses Kapi
21. positionen erhalten werden klicken Sie auf das Symbol Hold o die Methode kurrzeitig unterbrechen und alle Pumpen stoppen wollen klicken Sie auf das Symbol Pause Lit einen angehaltenen oder unterbrochenen Methodenlauf wieder aufnehmen wollen klicken Sie auf das Symbol Continue Ed Anmerkung Eine beendete Methode kann nicht unter brochen werden den Programmlauf permanent beenden wollen klicken Sie auf das Symbol End e Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 109 7 Eine Methode durchf hren 7 1 Vor dem Start Anmerkung Beim vorzeitigen Beenden eines Methodenlaufs kann das Teilergebnis gespeichert werden Warnhinweise bez glich der Verwendung gef hrlicher Substanzen ACHTUNG Gef hrliche Chemikalien w hrend eines Laufs Bei der Verwen dung gef hrlicher Chemikalien System CIP und Column CIP aus f hren um das gesamte Schlauchsystem mit destilliertem Wasser durchzusp len bevor Instandsetzungs und Wartungsarbeiten durchgef hrt werden ACHTUNG Gef hrliche biologische Substanzen w hrend eines Laufs Bei Verwendung von gef hrlichen biologischen Substanzen System CIP und Column CIP ausf hren um s mtliche Systemschl uche mit bakteriostatischer L sung zu sp len z B NaOH gefolgt von einem neutralen Puffer und destilliertem Wasser bevor Instandset zungs und Wartungsarbeiten durchgef hrt werden 110 Erste Schritte mit KTA
22. r Computer und Monitor sind ebenfalls zu beachten Siehe Dokumentation des Herstellers Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 31 2 Sicherheitsanweisungen 2 4 Informationen zum Recycling 2 4 Informationen zum Recycling Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt das Vorgehen bei Entsorgung und Recycling des KTA avant Entsorgung des Ger ts Wenn der KTA avant 25 und 150 au er Betrieb genommen wird e Das Ger t muss von einem Administrator dekontaminiert werden e Die einzelnen Bestandteile m ssen gem nationalen und lokalen Umweltbestim mungen getrennt und recycelt werden VORSICHT Vorsicht Bei der Entsorgung stets angemessene Schutzausr s tung verwenden Entsorgung elektrischer Komponenten M ll der Elektro und Elektronikaltger te enth lt darf nicht als unsortierter Hausm ll entsorgt werden und ist getrennt zu sammeln Nehmen Sie Kontakt mit einem autorisier ten Vertreter des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung des Ger ts zu erhalten 32 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 3 Hochfahren 3 Hochfahren Einf hrung In diesem Kapitel wird beschrieben wie das System gestartet wird sowohl die Software als auch das Instrument Hierbei wird vorausgesetzt dass das Benutzerprofil bereits erstellt wurde F r Informa tionen ber das Einrichten und das Definieren von Benutzern Benutzergruppen und Zugriffsberechtigungen siehe UNICORN 6
23. 0 5 mm er setzen bevor der RPC Programmlauf mit 100 igem Acetonitril durchgef hrt wird Den Systemdruck Alarm auf 10 MPa einstel len RPC Programml ufe mit 100 igem Acetonitril in KTA avant 150 Immer den beigen PEEK Schlauch zwischen der verwen deten Systempumpe und dem Pumpendruckmonitor durch einen orangefarbenen PEEK Schlauch mit einem I D von 0 5 mm ersetzen bevor der RPC Programmlauf mit 100 igem Acetoni tril durchgef hrt wird Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 73 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Einf hrung Der Str mungsweg enth lt Schl uche Ventile Pumpen und Monitore Dieser Abschnitt gibt einen berblick ber den Str omungsweg und beschreibt das Pr parieren des Str mungswegs vor einem Programmlauf Abbildung des Str mungswegs Die nachfolgende Abbildung zeigt das Durchflussschema wie es im System Control Mo dul abgebildet ist Die einzelnen Ger temodule werden in der nachstehenden Tabelle vorgestellt SyP to Col Syr to Loop to W Column 1 2 i P 2 5 z 3 11 PreC 0 00 MPa DeltaC 0 00 MPa Uyi 0 27 mAU m Cond 0 00 mS cm pH 0 00 Inlet B B 1 74 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Teil Beschreibung
24. Ablaufanschl sse von Injektionsventil pH Ventil und Aus lassventil Ventile und Anschl sse Abbildungen Einspritzventil p Ablaufanschl sse W1 W2 78 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Ventile und Anschl sse Abbildungen pH Ventil Ablaufanschluss W3 Auslassventil Ablaufanschluss e W Out6 v9 0 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 79 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Position der Abfallschl uche Alle Abfallschl uche befinden sich auf der R ckseite des Instruments siehe nachstehende Abbildung nnnus0nonunuununm omunwssannss samsznszszzas Teil Beschreibung 1 Abfallschlauch von Injektionsventil pH Ventil und Auslassventil W W1 W2 und W3 2 Abwasserschlauch von Fraktionssammler und Pufferablage Vorbereiten der Abfallschl uche Zur Vorbereitung des Ablaufschlauchs die nachstehenden Anweisungen befolgen 80 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Schritt Ma nahme 1 Sicherstellen dass die vier Abfallschl uche von Injektionsventil PH Ventil und Auslassventil W W1 W2 und W3 in einen Ablaufbeh lter unter dem Tisch getaucht sind HI
25. Hochdruck Der KTA avant arbeitet mit Hochdruck Stets eine Schutzbrille tragen Checkliste Sicherstellen dass das System ordnungsgem vorbereitet wurde Pr fen dass e das System gem den Einstellungen in der durchzuf hrenden Methode vorbereitet ist e eine geeignete S ule f r die Anwendung ausgew hlt wurde unter Ber cksichtigung des Zielproteins und Druckbereichs e der Puffereinlaufschlauch in die korrekten Puffergef e getaucht ist unter Ber ck sichtigung von Identit t und Volumen der L sung e s mtliche Ablaufschl uche in die richtigen Ablaufbeh lter gesteckt sind unter Be r cksichtigung von Gef gr e platzierung und werkstoff 108 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 1 Vor dem Start e die Schl uche nicht verdreht sind und der Durchflusspfad nicht undicht ist Programmlauf halten unterbrechen oder stoppen Am Ende einer Methode stoppt der Programmlauf automatisch Alle Pumpen stoppen und die Pumpe gibt ein akustisches Endsignal ab und zeigt End im Run Log an Um eine Methode w hrend eines Programmlaufs zu unterbrechen k nnen die Symbole Hold Pause oder End in System Control verwendet werden Eine gehaltene oder unter brochene Methode kann durch Dr cken auf das Symbol Continue wieder aufgenommen werden Siehe Anweisungen in der nachstehenden Tabelle die Methode kurzzeitig anhalten wollen wobei aktuelle Durchflussrate und Ventil
26. Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 49 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 2 Systemsteuerungsmodul 4 3 2 Systemsteuerungsmodul Einf hrung Das System Control Modul wird verwendet um einen Methodenlauf zu starten anzu sehen und zu steuern Systemsteuerungsfenster Wie nachstehend abgebildet werden standardm ig vier Fenster im System Control angezeigt Im Fenster Run Data 1 stehen aktuelle Daten in numerischen Werten w h rend das Fenster Chromatogram w hrend des gesamten Methodenlaufs 2 Daten in Kurvenform darstellt Informationen ber den Fortschritt der Methode werden im Run Log Fenster 3 angezeigt und der aktuelle Str mungsweg wird im Flow Scheme Fenster 4 dargestellt a sptem3 settod2 g ena L i i i lt x Ennii Acc vokas 5 7 iock ine Epinions gt gt Tu 5 E gt Metodin Nm 20m ten E J x 1 000 mimin er ar va CEIA p 5 ja pet Be a Gremien x AEE 3 Bsssszss o 02 os os os 1 12 1s We we 2 2 2 2 2 9 92 3 anioiaren es DA m Syska Ko 1 000 Imker Pie ehem presse Komehkindh D mi Bloch Slat hac Ehen fsiued Procesno Kompieiech N mime Samataharn 21 mi Fisetionaben Vohme 3 ni Abes 01 md Net abe fiad Pocenangl 23 mi Fiactorshen Voke 3 mi hub 01 im Nest Abe Kom 2 mi Last Abe Mad Pane faruni Processing 29 wi Lact ke flod Paa Complete 229 at End Boch Annund Procenangl IComciet
27. System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 4 Anschlie en einer S ule Schritt Ma nahme 2 Einen passenden S ulenhalter an die Schiene am Ger t anschlie en 3 Die S ule an den S ulenhalter anschlie en 4 Einen passenden Schlauch an einen S ulenventilport beispielsweise Port 2A wenn die S ulenposition 2 in der auszuf hrenden Methode ausgew hlt wurde anschlie en Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 93 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 4 Anschlie en einer S ule Schritt Ma nahme 5 94 Das Modul System Control ffnen und Manual Execute Manual Instructions w hlen Ergebnis Der Dialog Manual instructions wird ge ffnet Im Dialogfenster Manual instructions e Flow path Column position w hlen e Die Position ausw hlen die f r den An In diesem Beispiel ist dies Position 2 schluss der S ule verwendet wird e Den Flow Direction Abw rtsstrom ausw hlen Manual instructions System3 Instructions Pumps and pressures Parameters for Column position 5 Flow path Injection valve Position 2 Column position Inlet A Inlet B pH valve Sample inlet Outlet valve Injection mark Monitors amp Fraction collection x Flow Direction Down flow Save result as v Auto update parameter fields will be updated during method run Klicken Erecute _ O Up flow Ergebnis Das S ulenventil schaltet
28. T Die S ule unter Verwendung des 2D Strichcodeleseger ts folgenderma en registrieren e Sicherstellen dass sich der Zeiger in der ersten Position des Code Feldes befindet e Das 2D Strichcodeleseger t zum Datenmatrixschild an der S ule richten e Den Trigger dr cken um einen Laserstrahl zu erzeugen e Wenn das 2D Strichcodeleseger t piept wurde die S ulen ID registriert und wird im Dialog angezeigt vom Me e Die S ulen ID auf dem S ulenschild kann auch ber die Tastatur manuell in das Dialogfeld eingegeben werden e Auf Continue klicken Ergebnis Das erweiterte New Column Dialogfeld wird ge ffnet New Column Column ID Alias optional Technique Desalting Column type HiPrep 26 10 Desalting C Use medium batch ID 116 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 3 Starten eines Methodenlaufs Schritt Ma nahme 8 Im erweiterten New Column Dialog e Alias eingeben optional e Eine Technique und Column type aus der Dropdown Liste w hlen e Das Set medium expiration date K stchen markieren und ein Datum aus der Dropdown Liste w hlen e Auf OK klicken Tipp Alias kann zur leichten Identifizierung einer S ule verwendet werden Ergebnis Die eingegebenen Daten werden gespeichert und der Dialog wird geschlossen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 117 7 Eine Methode durchf hren 7 3 Starten eines Methodenlau
29. UNICORN e Methoden erstellen e Das System auf Programml ufe vorbereiten e Programml ufe ausf hren e Einfache Auswertungen durchf hren e Berichte ausdrucken F r optimale Ergebnisse die Schritte im Leitfaden Seite f r Seite vor dem System befolgen 6 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Voraussetzungen Um dieser Anleitung zu folgen und das System auf zweckm ige Weise zu bedienen m ssen folgende Voraussetzungen gegeben sein 1 Einf hrung 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer Sie m ssen ber allgemeine Kenntnisse der Funktionsweise von PC und Windows verf gen Sie m ssen das Konzept der Fl ssigchromatographie verstehen Sie m ssen sich mit den Sicherheitsanweisungen in den Benutzerunterlagen vertraut gemacht haben Das Ger t und die Software m ssen unter Befolgung der Anweisungen in KTA avant Installationsanleitung installiert konfiguriert und kalibiert worden sein Ein Benutzerkonto muss gem UNICORN 6 Administration and Technical Manual erstellt worden sein ber die Erste Schritte hinausgehende Informationen Benutzer die mit Ger t und Software vertraut sind und mehr ber die erweiterten Funktionen des Systems erfahren m chten sollten die nachfolgende Liste beachten Um mehr zu erfahren ber lesen Sie bitte Installation KTA avant Installationsanleitung Datenbankverwaltung UNICORN 6 Administration and Technical M
30. Vorschriften e an andere Ger te von GE Healthcare angeschlossen ist oder e _anandere Produkte angeschlossen ist die in der Benutzerdokumentation empfohlen oder beschrieben sind und e im selben Zustand verwendet wird indem es von GE Healthcare ausgeliefert wurde mit Ausnahme der in der Benutzerdokumentation beschriebenen Modifikationen Internationale Normen Dieses Produkt erf llt die Anforderungen der folgenden Normen Norm EN ISO 12100 Beschreibung Sicherheit von Maschinen Allgemei ne Gestaltungsleits tze Risikobeur teilung und Risikoreduzierung Hinweise Die EN ISO Norm stimmt mit der EU Richtlinie 2006 42 EG berein EN 61010 1 IEC 61010 1 UL 61010 1 CAN CSA C22 2 Nr 61010 1 Sicherheitsanforderungen f r elek trische Mess Steuer und Laborge r te Die EN Norm stimmt mit der EU Richtlinie 2006 95 EG berein EN 61326 1 IEC 61326 1 Emissionen ent sprechend CISPR 11 Gruppe 1 Klasse A Elektrische Mess Steuer und La borger te EMV Anforderungen Die EN Norm stimmt mit der EU Richtlinie 2004 108 EG berein EN 301 489 1 EN Elektromagnetische Vertr glichkeit Die EN Norm stimmt mit und Funkfrequenzangelegenheiten ERM Funkger te geringer Reichwei te SRD Funkger te f r den Einsatz im Frequenzbereich 9 kHz bis 25 MHz und Induktionsschleifensystem im Frequenzbereich 9 kHz bis 30 MHz 301 489 3 und Funkfrequenzangelegenheit
31. absorbiert Nach einem Waschvorgang zum Entfernen von unge bundener Probe wird die Elution mit einem Gradienten abnehmen der Salzkonzentration durchgef hrt Schlie lich wird die S ule gewaschen und mit Startpuffer neu quilibriert Intelligent Packing Packt die AxiChrom S ulen eines vorbestimmten S ulentyps mit Hydraulikfl ssigkeit die den Adapter herunterdr ckt Der Be nutzer startet die Kompression genau an dem Punkt wenn der Adapter die Oberfl che des konsolidierten Betts erreicht Der Ad apter komprimiert das Bett gem dem Packing Factor oder der Target Bed Height je nach Auswahl Zwei Column Performance Test Phasen Auf oder Abw rtsfluss werden automatisch ausge f hrt nachdem die AxiChrom S ule gepackt wurde Nur erh ltlich f r KTA avant 150 Reversed Phase Chromatogra phy RPC Nach der quilibrierung und der Probenapplikation werden hydro phobe Proteine in den S ulenliganden absorbiert Nach einem Waschvorgang zum Entfernen von ungebundener Probe wird die Elution durch die Erzeugung eines Gradienten eines nichtpolaren organischen L sungsmittels wie z B Acetonitril durchgef hrt Schlie lich wird die S ule gewaschen und neu quilibriert Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 65 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 2 Vordefinierte Methoden Methode Beschreibung System CIP Das System wird mit einer Reinigungsl sung
32. avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 2 Auftragen der Probe 7 2 Auftragen der Probe Einf hrung Es sind verschiedene Techniken zur Probenapplikation verf gbar Die Probe kann entwe der direkt ber die Probenpumpe auf die S ule aufgetragen werden oder ber eine Probenschleife Eine Probenschleife kann entweder manuell oder mit der Probenpumpe gef llt werden Dieser Abschnitt beschreibt die Probenapplikation mit einer Spritze zum manuellen F llen einer Probenschleife Die beiden Stufen der Probenapplikation werden in der nachstehenden Tabelle beschrieben F r genaue Anweisungen und Informationen ber die verschiedenen Probenapplikationsmethoden siehe Bedienungsanleitung Stufe Beschreibung Laden Die Probenschleife wird mit Probe gef llt Injizie Die Probe wird auf die S ule injiziert ren Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 111 7 Eine Methode durchf hren 7 2 Auftragen der Probe Probenapplikation ber eine Probenschleife 112 Eine Probenschleife wird mit einer an den Einspritzventilport Syr angeschlossenen Spritze manuell gef llt W hrend des Methodenlaufs wird die Probe automatisch auf die S ule gespritzt Die Probenschleife wird mit Puffer aus den Systempumpen entleert und gewaschen Das Puffergesamtvolumen das zum Entleeren und Waschen der Proben schleife ben tigt wird wird auf der Registerkarte Phase Properties der Sample Applica tion Phase unter Empty loop with eingestellt
33. durchf hren 7 4 Methode berwachen 7 4 Methode berwachen Einf hrung Der Methodenlauf kann im System Control Modul nachverfolgt werden Der aktuelle Systemstatus wird im System state Feld im Run Data Fenster angezeigt Zum Beispiel kann Run Wash oder Hold angezeigt werden Dieselben Informationen werden auch auf dem Ger tedisplay angezeigt In diesem Abschnitt werden die w hrend eines Programmlaufs in der Systemsteuerung angezeigten Daten das Layout des Moduls und das Verfahren zur Anpassung der ver schiedenen Fenster beschrieben Abbildung der Benutzerschnittstelle der Systemsteuerung Im System Control Modul werden standardm ig vier Fenster angezeigt siehe Abbildung und Tabelle unten ferne Reim an iodi Eminga eie feriempreonn gt Come gt gt Na 20m nen 260mm 6 n GT MPs a7 f pen gt gt LE gt gt Tod 55 Cohen it gt gt Findet A gt gt CEN mE mia 0157 mA Ensim Ih If ue hi A rm rn x EEEE sussszss o2 0 os 0 1 3 Sie 0 a BE a u m 2 22 DIT CI z z 220 m yohan hm 1 DUO babari Pre cokan perne Hunt Piocmerg mi Bloch Slat dae Eisen Jouet Procesoro Kongkindh mbase taishan Ischenahien Vome ni Abes 01 in Nest abe fmad Pocmsro 1273 wi Fiactonshen Vome 3 si kbar 01 mi Nat Abe Congitadi 1229 mi Lat Ade iied Pane fuad Whocamungl 229 m Last kbe fod Pana oma 229 mi End Bock Juust Pocessng IComgisted 229 m Mioch Ln
34. fil the pH cell with storage solution since the pH valve is in calibration position For calibration preferably use pH standard buffers PH 4 or 7 as the first calibration point and a pH standard buffer close to the lowest or highest pH you need to measure as your second point pH for buffer 1 pH for buffer 2 Last calibrated on 2009 01 13 10 52 07 01 00 Calibrated electrode slope Parameters pH for buffer 1 Assymel y potential at pH 7 mV pH for buffer 2 LOSE BIER BARRER b4 Im Calibration Dialog pH aus der Monitor to calibrate Dropdown Liste w hlen P fi librati Folgende Schaltfl che dr cken Prepare tor calibration _ Ergebnis Das pH Ventil schaltet in die Kalibrierposition Mindestens 10 ml Lagerungsl sung zubereiten Hierzu die gleiche Menge Standardpuffer pH 4 und 1 M Kaliumnitratl sung KNO mischen Eine Spritze mit ca 10 ml Lagerungsl sung aufziehen Die Spritze an den PH Ventilport Cal anschlie en und die Lagerungsl sung injizieren Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf Schritt Ma nahme 6 Folgende Schaltfl che dr cken e Ergebnis Das pH Ventil schaltet zur ck in die Standardposition und der Ca libration Dialog wird geschlossen Es wurde keine Kalibrierung durchgef hrt Abmelden oder UNICORN schlie en Die nachstehenden Anweisungen befolgen um sich abzumelden oder UNICORN zu be
35. kg Max Flaschengr e auf Vorderwand Keine Flaschen mit ei nem Fassungsverm gen von mehr als 1 Liter in den Schienen an der Vorderwand befestigen Explosionsgefahr Keine 15 ml Mischerkammer in KTA avant 25 verwenden Der Maximaldruck f r die 15 ml Mischerkammer betr gt 5 MPa Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 23 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen HINWEIS Um eine Besch digung am KTA avant oder an anderen Ger ten beim Betrieb des Instruments zu vermeiden die nachstehenden Anweisungen befolgen e Die UV Durchflusszelle sauber halten Keine L sungen die gel ste Salze Proteine oder andere gel ste Substanzen enthal ten in der Durchflusszelle austrocknen lassen Keine Partikel in die Durchflusszelle eindringen lassen um eine Besch digung der Durchflusszelle zu vermeiden e Splitter des Glasrohrs Wenn der Superloop angeschlossen ist muss der auf die Probe ausge bte Druck unterhalb des maximalen Drucks des Superloop liegen ehe ber den Dialog f r manuelle Anweisungen ein Durchfluss ausgef hrt wird e Kondensation vermeiden Wenn der KTA avant in einer K l tekammer einem K lteschrank oder einem hnlichen Bereich aufgestellt wird muss er eingeschaltet bleiben um das Konden sationsrisiko soweit wie m glich zu vermeiden e berhitzung vermeiden Wenn das KTA avant Ger t in einem K lteschrank aufgestellt ist und der K lteschrank ausgeschaltet wird
36. mit KTA avant 29 0351 83 AA 135 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 2 Peakintegration Abbildung von Chromatogramm und Peak Tabelle Die Abbildung unten zeigt ein Chromatogram Fenster mit einer Peak Table Chrom 1 l UV 1_280_Chrom 1 id101b 001 UV 1_280 01 BASEM Edited 1 _Chrom 1 Run 1 220 210 200 190 180 150 140 Conc B_Chrom 1 id101b 001 33 84 Ki A UV 1_280 01 PEAK Edited Peak data Integration summary No Peak name Retention ml Area m mAU Height mal gt N 31 93 206 2683 2 33 58 94 1728 3 33 84 121 6052 4 34 78 13 1725 Peak Tabelle konfigurieren Standardm ig wird jeder Peak in der Peak Table mit Verweilzeit Bereich und H he angezeigt Die nachstehenden Anweisungen befolgen um andere Peak Daten anzuzeigen e Auf das Customize Symbol klicken um den Customize Dialog zu ffnen B e Unter der Registerkarte Peak Table Aus der Select peak table columns Liste ausw hlen welche Daten in den Peak Tabellen angezeigt werden sollen 136 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 2 Peakintegration Auf OK klicken um die Auswahl zu best tigen und das Dialogfeld zu schlie en Customize Chrom 1 Curve Style and Color Edit Texts Layout Librar Header CurveNames Yaris XAsis Curve Peak Table Select table to display Select peak table columns A Y Peak name Peaktabl
37. muss gem den Einstellungen in der durchzuf hrenden Methode vorbereitet werden Vor der Systemvorbereitung die Einstellungen im Method Editor berpr fen und sicherstellen dass alle ben tigten Zubeh rteile verf gbar sind Checkliste Das Systems muss gem den Einstellungen in der durchzuf hrenden Methode vorbe reitet werden Pr fen e welche Ventilports f r Ein und Ausl sse verwendet werden e welcher S ulentyp verwendet wird e welche S ulenposition verwendet wird e Vorzubereitende Puffer und Proben e welche Probenapplikationsmethode verwendet wird e dass die pH Elektrode angeschlossen ist falls vorhanden e welche Kassetten mit entsprechenden Deep Well Platten und oder R hrchen im Fraktionssammler verwendet werden falls zutreffend e obessich um einen Programmlauf f r Umkehrphasenchromatographie RPC handelt ACHTUNG Fraktionssammiler Keine brennbaren Fl ssigkeiten fraktionie ren Bei der Umkehrphasenchromatographie oder anderen Verfahren die organische L sungsmittel verwenden Fraktionen durch das Auslassventil sammeln 72 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 1 Vor der Vorbereitung des Systems ACHTUNG RPC Programml ufe mit 100 igem Acetonitril in KTA avant 25 Immer den gr nen PEEK Schlauch zwischen der verwende ten Systempumpe und dem Pumpendruckmonitor durch einen orangefarbenen PEEK Schlauch mit einem I D von
38. oben stehenden Anweisungen anzeigen Vor dem Ausdruck sicherstellen dass e die richtigen Kurven angezeigt werden e die richtigen Daten in der Peak Tabelle angezeigt werden e eine geeignete Achsen Skalierung ausgew hlt wurde e ein geeigneter Zoom Faktor ausgew hlt wurde Ein Chromatogramm und eine Peak Tabelle drucken Die nachstehenden Anweisungen befolgen um ein Chromatogramm und falls eine Peakintegration durchgef hrt wurde die entsprechende Peak Tabelle zu drucken Schritt Ma nahme 1 Das Evaluation Modul und ein Ergebnis ffnen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 139 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken Schritt Ma nahme 2 Auf das Symbol Print klicken Ergebnis Der Dialog Print Chromatograms wird ge ffnet Print Chromatograms Printer Microsoft Office Document Image writer i Print Format LJ B ll Chromatograms in each column Chromatograms in each row Use thick lines 3 Im Dialogfenster Print Chromatograms e Printer und Print Format w hlen e Auf die Preview Schaltfl che klicken Ergebnis Eine Vorschau des Chromatogramms wird im Customize Re port Fenster angezeigt 4 Sind Sie mit dem Layout zufrieden e Wenn Ja weiter mit Schritt 5 e Wenn Nein File Exit w hlen um den Print Chromatograms Dialog wieder aufzurufen und ein anderes Druckformat auszuw hlen 140 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Erg
39. 52 Ein Methode ausdrucken 69 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten sunuenenesnensnenenenennnnenen 71 6 1 Vor der Vorbereitung des Systems aenansessseeennennnensensenssennnnnennnnnnnnnansnnennnnennnnnnnnnnn 72 6 2 Ben Stromungsweg vorbereiten aikiienenselikune 74 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften 83 6 4 Anschlie en einer S ule une u 92 6 5 Den pH Monitor kalibrieren u 97 6 6 Fraktionssammler vorbereiten unnnne n 99 6 7 Vorbereitung f r einen Programmlauf in einem K lteschrank ueeee 105 7 Eine Methode durchf hren s ssssesesesesesessssesesssesesesessesesesesesesesseseseseseseseseoseses 107 7 1 S iE o LEI NESIE e T nern ETA E EATEN E 108 7 2 Auftragen der Probe a Mi 7 3 Starten eines Methodenlaufs ueueeeeneeenseneeeenneennnne 114 7 4 Methode berwachen aan ina AA AAs 119 75 Verfahren nach dem Programmlauf une 124 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 3 Inhaltsverzeichnis 8 Ergebnisse auswerten und drucken 4045x02s2a000000Haonhesunnneneenine 129 8 1 DIE Ergebnisse ANZeigen unieenkeikinenae en nentrn ent 130 82 Peakintegr tion a a E RANER 134 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken ennnnssnesnnnnssnnenssnssnsennennnnnen 139 9 WOUN ee a 144 4 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 1 Einf hrung 1 Einf hrung Zu diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt wichtige Informationen f r den Benutzer sowie e
40. Administration and Technical Manual Das Instrument und den Computer starten Die nachstehenden Anweisungen zum Starten des Ger ts und des Computers befolgen Schritt Ma nahme 1 Zum Einschalten des Instruments den Netzschalter auf I stellen Ergebnis Das Ger t wird gestartet und auf dem Ger tedisplay erscheint Not connected Nicht angeschlossen 2 Den Computer und Monitor gem den Herstelleranweisungen einschalten Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 33 3 Hochfahren UNICORN starten und sich anmelden Die nachstehenden Anweisungen befolgen um UNICORN zu starten und sich beim Pro gramm anzumelden Schritt Ma nahme 1 Auf das Symbol UNICORN auf dem Desktop doppelklicken Ergebnis Das Dialogfeld Log On wird ge ffnet Anmerkung Auch ohne Verbindung zur Datenbank ist es m glich sich bei UNICORN anzu melden und ein laufendes System zu steuern Der Dialog Log On enth lt die Option f r einen Start von System Control ohne eine Datenbank Auf Start System Control klicken um mit dem n chsten Log On Dialog fortzufahren 34 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 3 Hochfahren Schritt Ma nahme 2 Im Dialogfeld Log On e User Name ausw hlen und e Password eingeben Anmerkung Es ist auch m glich das K stchen Use Windows Authentication zu markieren und eine Netzwerk ID in das Feld User Name einzugeben f Log On UNICORN C Use Windows Authentication Use
41. Die Position des zu f llenden Einlasses aus der Dropdown Liste ausw h len An der Einlassposition mit der h chsten Nummer beginnen und an der Einlassposition mit der niedrigsten Nummer enden Manual instructions System3 Selected column type Select Parameters for Inlet B amp Pumps and pressures a Posbon S Flow path Injection valve B1 Column position Inlet pH valve Sample inlet Outlet valve Injection mark Monitors amp Fraction collection Save result as Browse V Auto update of parameters during run Klicken _Execue_ Ergebnis Einlassventil B schaltet auf den ausgew hlten Anschluss Instructions 3 Eine 25 30 ml Spritze an eines der Sp lventile der Pumpenk pfe der System pumpe B anschlie en Sicherstellen dass die Spritze fest in den Sp lanschluss passt 84 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Schritt 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Ma nahme 4 Das Sp lventil ffnen indem es um eine Dreiviertelumdrehung gegen den Uhrzeigersinn gedreht wird Langsam Fl ssigkeit in die Spritze aufziehen bis die Fl ssigkeit die Pumpe erreicht Das Sp lventil im Uhrzeigersinn drehen um das Sp lventil zu schlie en Die Spritze abziehen und den Inhalt entleeren Schritte 2 5 f r jedes Teil des Einlassschlauchs B wiederholen das w hrend des Pr
42. GE Healthcare Life Sciences Erste Schritte mit KTATM avant bersetzt aus dem Englischen Inhaltsverzeichnis Inhaltsverzeichnis L EHEIDFUBS ee a as paasa aiio aes 5 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer z 6 1 2 B nordliche Vorschriften isssnsssssinnsiinassiinanainaisi anA 10 2 Sicherheitsanweisungen s ssessssessssssesrssssressesssessssseressesesessesesssseesessesessssesesses 14 21 Sicherheitsvorkehrungenismsussssisdiistestsssessscesutieiietinessiesnkeregrteiknterssehtaseeneeinnis htsherneehhn 15 22 Schilder asian 26 2 3 Vorgehensweise in Notf llen ia 29 24 Informationen z m Recyelind ea 32 3 HOChTANTEN ruiniert 33 4 Das Ger t und die SoftWareua unuinnnkkiiinuiennnunanknni 37 4 1 berblick ber das KTA avant Ger t ansnmenmennnnnenennnnnnnnnennnnnnnnnneennnnnnnnnnn 38 42 UNIGORN SORtWware bersicht u 42 43 UNICORN SOftwaremod len ueenetsinenni an enandbnnn 46 4 3 1 Methodeneditormodu1 47 4 3 2 Systemsteuerungsmodul ie 50 4 3 3 Auswertungsmod lssnssensssssiserssessusssesiesesessinnessehneensenseessessssirnsunsdissteasseneeenhninsssessssenaeenennnen 52 5 Ein Verlohren erstellenen asensunsnssnesnnHanmarieen 54 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 55 5 1 1 _ Erstellen und Bearbeiten von Methoden ee 56 5 1 2 Vordefinierte Methoden uuuu en 64 51 3 Vordefiniente Phasen aniisencdseriussiiinenadannainnnansesndiee 67
43. N 31 93 206 2683 26 47 47 39 164 965 2 3358 94 1728 12 08 21 64 188 497 3 3384 121 6052 15 60 27 94 225 321 4 34 78 13 1725 1 69 3 03 6 747 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 137 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 2 Peakintegration Ergebnisse speichern Die nachstehenden nderungen befolgen um die nderungen zu speichern nderungen des ur klicken Sie auf das Save Symbol in der Symbolleiste spr nglichen Ergebnis ses speichern wollen j das ge nderte Ergebnis e w hlen Sie File Save As um das Dialogfeld Save Result als neues Ergebnis spei As zu ffnen chern wollen e Im Dialogfenster Save Result As w hlen Sie den Speicherort f r das neue Ergebnis geben Sie einen Namen f r das neue Ergebnis ein klicken Sie auf Save 138 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt das Verfahren zum Ausdrucken eines Chromatogramms und eines Berichts in Standardformat UNICORN verwendet die auf Ihrem Computer in stallierten Drucker und Druckereinstellungen Ansicht konfigurieren Vor dem Ausdrucken sicherstellen dass die Ansicht so eingestellt wird dass all das an gezeigt wird was im Bericht Ausdruck ben tigt wird Das Chromatogramm und oder die Peak Tabelle konfigurieren und Einzelheiten des Chromatogramms gem der
44. NWEIS Der h chste Pegelstand im Ablaufbeh lter f r die Ab fallschl uche von den Ventilen muss weniger als 30 cm oberhalb des Labortisches liegen 2 Sicherstellen dass die drei Abfallschl uche 2 von Fraktionssammler und Pufferablage in einen Ablaufbeh lter unter dem Tisch getaucht sind HINWEIS Der maximale Pegelstand im Ablaufbeh lter f r die Abfallschl uche von Fraktionssammler und Pufferab lage muss unterhalb der Tischoberfl che liegen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 81 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten Schritt Ma nahme 3 Sicherstellen dass die Abfallschl uche von Fraktionssammler und Pufferab lage auf die passende L nge zugeschnitten sind Es ist wichtig dass die Schl uche w hrend des Programmlaufs weder geknickt noch in Fl ssigkeit getaucht werden Sm gt Anmerkung Wenn der Schlauch zu kurz ist ihn durch einen neuen Schlauch ersetzen Den Schlauch nicht verl ngern denn dadurch k nnen Verstopfungen und eine Flutung der Fraktionssammler Kammer auftreten VORSICHT Sicherstellen dass die Ablaufbeh lter das gesamte Volumen eines Programmlaufs aufnehmen k nnen F r KTA avant 25 sollte ein geeigneter Ablaufbeh lter normalerweise ein Volumen von 2 10 aufweisen F r KTA avant 150 sollte ein Ablaufbeh lter ein Volu men von 40 aufweisen 82 Erste Schritte mi
45. O Empty Method Method Description cation exchange column is equilibrated with start buffer Sample is applied and positive charged proteins are bound Unbound material is washed away Bound proteins are eluted using a gradient of increasing concentration of e g NaCl Finally the column is washed with a high concentration of salt and re equilibrated with start buffer Ergebnis Die in der ausgew hlten Methode enthaltenen Phasen erscheinen im Method Outline Fenster und die Standardeinstellungen f r jede Phase werden im Fenster Phase Properties angezeigt Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 57 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Schritt Ma nahme 3 58 Im Phase Properties Fenster der Method Settings Phase k nnen allgemeine Einstellungen wie Column type und Method Base Unit bearbeitet werden UNICORN berechnet automatisch die korrekten Einstellungen f r Volumen Durchflussrate und Druckgrenzen auf Basis des ausgew hlten S ulentyps Die nachstehende Abbildung zeigt das Method Outline Fenster und das Phase Properties Fenster der Method Settings Phase Equiitration Sample Application Cohen Wash Erason Cohen Wash Equlibration Brsnsvee Cohn seiecten Show ty echnicgue Catan Eucharge Cohn pe n Cohn wisse 01m si Poncusm i pechan 200 MPa p02 2000 Presne int dekacchen ZU MPa P02 2000 E Ure how earet
46. S Um Besch digungen am KTA avant oder an anderen Ger ten zu vermeiden bei der Wartung des KTA avant Ger ts die nachste henden Anweisungen befolgen e Reinigung Das KTA avant Ger t trocken und sauber halten Regelm ig mit einem weichen feuchten Tuch und nach Bedarf mit einem milden Reinigungsmittel abwischen Das KTA avant Ger t vor Inbetriebnahme vollst ndig trocknen lassen e Erweiterte Wartung Vor der Zerlegung des Pumpenkopfes die Anweisungen sorgf ltig durchlesen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 25 2 Sicherheitsanweisungen 2 2 Schilder 2 2 Schilder Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt die Sicherheits und Warnschilder bez glich gef hrlicher Substanzen am KTA avant Ger t Informationen zu Computer Kennzeichnungen finden Sie in den Herstelleranweisungen Schilder am KTA avant Ger t Die nachstehenden Abbildungen zeigen die am KTA avant Ger t angebrachten Schilder 26 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Sicherheitssymbole 2 Sicherheitsanweisungen 2 2 Schilder Die nachstehenden Sicherheitssymbole werden auf den Schildern verwendet Beschriftung Bedeutung Warnung Stromschlaggefahr Alle Reparaturen m ssen von Servicepersonal durchgef hrt werden das von GE Healthcare autorisiert wurde Keine Abdeckungen ffnen und keine Teile austauschen es sei denn dies wird ausdr cklich in der Benutzerdokumentation an gegeben Versorgu
47. S ule angeschlossenen gegen ber liegt in diesem Fall Anschluss 2B A 11 Auf das Symbol End in der System Control Symbolleiste klicken um den Programmlauf zu beenden 96 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 5 Den pH Monitor kalibrieren 6 5 Den pH Monitor kalibrieren Einf hrung Wenn der pH Wert w hrend des Chromatographielaufs gemessen wird sollte der pH Monitor vor Beginn des Programmlaufs kalibriert werden Zwei pH Kalibrierungspuffer mit einer Differenz von mindestens einer pH Einheit verwenden Vorzugsweise einen PH Standardpuffer mit einem pH Wert von 4 oder 7 als ersten Kalibrierpunkt verwenden und einen pH Standardpuffer der so nah wie m glich am niedrigsten oder h chsten pH Wert liegt der als zweiter Punkt gemessen werden soll Vor der Verwendung die Puffer auf Betriebstemperatur aufw rmen lassen Anmerkung W hrend der pH Kalibrierung keinen Systemdurchfluss starten Den pH Monitor kalibrieren Die nachstehenden Anweisungen befolgen um die Kalibrierung durchzuf hren Schritt Ma nahme 1 Das Modul System Control ffnen und System Calibrate w hlen Ergebnis Das Dialogfenster Calibration wird ge ffnet Calibration System3 Monaco cab e EEE Cuert va Calibration procedure Prepare for calibration Calibration for pH electrode buffer 1 Description a pH calibrates the pH electrode with two point pH for b
48. Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen Personenschutz ACHTUNG Um gef hrliche Situationen bei der Arbeit mit dem KTA avant System zu vermeiden folgende Ma nahmen zum Personen schutz treffen e Stets angemessene Schutzausr stung w hrend des Betriebs und der Wartung des KTA avant Systems verwenden e Gef hrliche Substanzen Bei Verwendung von gef hrlichen chemischen und biologischen Substanzen alle angemessenen Schutzma nahmen einhalten wie beispielsweise das Tragen einer Schutzbrille und Handschuhe die resistent gegen die verwendeten Substanzen sind Regionale und oder nationale Vorschriften f r den sicheren Betrieb und die Wartung des Systems befolgen e Verbreitung biologischer Substanzen Der Bediener muss alle notwendigen Ma nahmen treffen um die Verbreitung von ge f hrlichen biologischen Substanzen im Bereich des Ger ts zu vermeiden Die Anlage sollte die nationalen Richtlinien f r bio logische Sicherheit erf llen e Hochdruck Das KTA avant Ger t arbeitet mit Hochdruck Stets eine Schutzbrille tragen VORSICHT Um gef hrliche Situationen bei der Arbeit mit dem KTA avant System zu vermeiden folgende Ma nahmen zum Personen schutz treffen e Vorsicht Bei der Entsorgung stets angemessene Schutzausr s tung verwenden e T ren schlie en Um das Risiko eines Kontakts mit gef hrlichen Chemikalien und unter Druck stehenden Fl ssigkeiten soweit wie m glich auszuschlie
49. Um zu vermeiden dass die S ule zuhohem Druck ausgesetzt wird sicherstellen dass die Druckgrenze auf den angegebenen H chstdruck der S ule eingestellt ist Vor Anschluss einer S ule an das KTA avant Instrument die Gebrauchsanleitung der S ule le sen Die Methoden enthalten automatisch einen Druckalarm der auf den Spezifikationen des ausgew hlten S ulentyps basiert Bei manuellen Programml ufen muss der Benutzer die Druckgrenzwerte jedoch selbst einstellen Anmerkung Beim Anschlie en der S ulen nicht zu stark anziehen Zu starkes Anzie hen kann zum Brechen der Anschl sse f hren oder die Schl uche zu sammendr cken und dadurch hohen Gegendruck erzeugen Einen S ulenhalter montieren und eine S ule anschlie en Die nachstehenden Anweisungen befolgen um eine S ule an das Instrument anzuschlie Ben Immer einen S ulenhalter verwenden Die S ule wird mit geeigneten Schl uchen und Konnektoren an zwei gegen berliegende Teile des S ulenventils angeschlossen Schritt Ma nahme 1 Eine S ule gem der in der auszuf hrenden Methode ausgew hlten S u lenoptionen ausw hlen Column selection Show by technique Anion Exchange Columntype HiSoreen Capto Q x E Column volume 4657 ml Pressure limit pre column 0 50 MPa 0 02 20 00 Pressure limit delta colum 0 30 MPa 0 02 20 00 7 Use flow restrictor 92 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das
50. Vorbereiten des Systems die nachstehenden Anweisungen befolgen Schritt Ma nahme 1 Sicherstellen dass der an Injektionsventilport W1 angeschlossene Ablauf schlauch in einen Ablaufbeh lter gelegt ist 2 Das Modul System Control ffnen und Manual Execute Manual Instructions w hlen Ergebnis Das Dialogfenster Manual instructions wird ge ffnet 3 Im Dialogfenster Manual instructions e Ein Flow path lnjection valve und System pump waste aus der Position Dropdown Liste w hlen Klicken auf _Execute Ergebnis Das Injektionsventil schaltet auf die Ablaufposition Das ist er forderlich um einen niedrigen Gegendruck w hrend des Sp lverfahrens zu erzielen e Pumps and pressures System flow ausw hlen F r KTA avant 25 die Flow rate auf 1 0 ml min einstellen F r KTA avant 150 die Flow rate auf 10 0 ml min einstellen Klicken auf _Exesue_ Ergebnis Eine Systemstr mung startet Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Systempumpe B sp len Nachstehende Anweisungen zum Sp len beider Pumpenk pfe der Systempumpe B be folgen Schritt Ma nahme 1 Im Dialogfenster Manual instructions e Pumps and pressures Gradient ausw hlen Target auf 100 B und Length auf 0 min einstellen Manual instructions System3 Selected column type Select Parameters for Gradient 5 Pumps
51. ader Information oben am Chromatogramm angezeigt werden sollen e Auf OK klicken um die nderungen zu speichern und das Dialogfeld zu schlie en Anmerkung Diese Verfahren bestimmen welche Kurven angezeigt werden sowie deren Erscheinungsbild im Chromatogram Fenster und auf den Aus drucken Die urspr nglichen Rohdatenkurven k nnen niemals ge ndert oder aus dem Ergebnis gel scht werden Einzelheiten im Chromatogramm ansehen Die folgenden Anweisungen befolgen um ausgew hlte Teile des Programms anzuzeigen eine Kurve identifizieren positionieren Sie den Mauszeiger auf der interessierenden wollen Kurve Ergebnis Der Name der Kurve wird angezeigt ausw hlen wollen auf welche Kurve sich die Skala der Y Achse be zieht klicken Sie auf die interessierende Kurve Ergebnis Die Skala der Y Achse ndert sich auf die Einheit die auf die Kurve zutrifft an die Kurven heranzoo men w hlen Sie den gew nschten Bereich aus Hierzu den Mauszeiger mit gedr ckter linker Maustaste bewegen Ergebnis Der ausgew hlte Bereich wird vergr ert 132 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 1 Die Ergebnisse anzeigen Wenn Sie wieder herauszoomen klicken Sie mit der rechten Maustaste und w hlen Sie Re wollen set Zoom Ergebnis Der urspr ngliche Bereich wird in einem Schritt wiederhergestellt Dokumentation anzeigen Anzeigen
52. age mit dem GE Logo zur Vorderseite des Schubfachs zeigt und auf den zwei Stiften eingehakt ist 7 Das Fraktionssammler Schubfach schlie en Sicherstellen dass es in ge schlossener Position einschnappt 50 ml Schlauchfach Schritt Ma nahme I 50 ml Schl uche in das 50 ml Schlauchfach legen 2 Das Schubfach des Fraktionssammlers ffnen Hierzu den Griff nach oben dr cken und das Schubfach herausziehen 102 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten Schritt Ma nahme 3 Das 50 ml Schlauchfach auf die Halterung f r F cher des Fraktionssammlers legen Sicherstellen dass die Vorderseite des Fachs mit dem GE Logo zur Vorderseite des Schubfachs zeigt und auf den zwei Stiften eingehakt ist Anmerkung Das Kassettenfach soll nicht verwendet werden wenn das Fach f r 50 ml R hrchen oder die 250 ml Flasche im Schubfach des Fraktionssammlers platziert werden 4 Das Fraktionssammler Schubfach schlie en Sicherstellen dass es in ge schlossener Position einschnappt Identifikation der Kassette Nachdem das Fraktionssammler Schubfach geschlossen wurde scannt der Arm des Fraktionssammlers den Code jeder Kassette um den Kassettentyp zu identifizieren Bei Verwendung von Deep Well Platten identifiziert das Ger t au erdem den Plattentyp ACHTUNG Bewegen von Teilen im Fraktionssammler Die Schublade des Fraktion
53. ahrensschritt in der Methode z B quilibrierung oder Elution Auf Wunsch kann eine vordefinierte Methode durch Hinzuf gen L schen oder Umgestalten von Phasen bzw durch nderung der Einstellungen jeder zu der Methode geh renden Phase bearbeitet werden Abbildung der Benutzerschnittstelle des Methodeneditors Nachstehende Abbildung und Tabelle zeigen das Method Editor Modul und dessen Fenster 56 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Fl che Beschreibung 1 Phase Library Zeigt alle verf gbaren Phasen an 2 Method Outline Stellt eine bersicht der Phasen in der aktiven Methode dar Phase Properties Gibt genaue Einstellungen f r die ausgew hlte Phase Gradient llustriert den in der aktiven Methode verwendeten Gradienten Ein Verfahren erstellen Die nachstehenden Anweisungen befolgen um eine chromatographische Methode auf Basis einer vordefinierten Methode zu erstellen und zu bearbeiten Schritt Ma nahme 1 Das Method Editor Modul ffnen und auf das New Method Symbol klicken T Wan vn Ergebnis Das Dialogfenster New Method wird ge ffnet System und Predefined Method aus dem Dialogfeld ausw hlen Auf OK kli cken New Method Create a new method by using the Predefined Method Cation Exchange Chromatography CIEX
54. and pressures A Target 0 0 100 0 System flow 5 Sample flow 100 07 B Length 0 00 100000 0 Pump wash A ge System wash 0 00 min Quatemary start concentrations Quaternary gradient BufferPro pH z Column packing flow amp Flow path Monitors Instructions IX Save result as Browse lo v Auto update of parameters during run Klicken Execute Ergebnis Nur Systempumpe B ist aktiv Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 87 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Schritt Ma nahme 2 Im Dialogfenster Manual instructions e Flow path Inlet B ausw hlen e Die Position eines der zu verwendenden Einl sse aus der Dropdown Liste ausw hlen Manual instructions System3 Selected column type Select Instructions Parameters for Inlet B Pumps and pressures a Position Flow path Injection valve B1 dr Column position Inlet A d pH valve Sample inlet Outlet valve Injection mark amp Monitors Fraction collection v Save result as _ Browse V Auto update of parameters during run Klicken _Execute Ergebnis Einlassventil B schaltet auf den ausgew hlten Anschluss 3 Eine 25 30 ml Spritze an das Sp lventil des linken Pumpenkopfes der Sy stempumpe B anschlie en Sicherstellen dass die Spritze fest in
55. anual Ger temodule und KTA avant User Manual funktionen Kalibrierung KTA avant User Manual vordefinierte Methoden UNICORN 6 Method Manual Umgang mit den S ulen UNICORN 6 Method Manual manuelle Methodenbe UNICORN 6 Method Manual arbeitung BufferPro automati UNICORN 6 Method Manual sche Pufferpr parierung Scouting UNICORN 6 Method Manual Design des Experiments UNICORN 6 Method Manual Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 1 Einf hrung 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer Um mehr zu erfahren lesen Sie bitte ber Auswertung UNICORN 6 Evaluation Manual Peakintegration UNICORN 6 Evaluation Manual spezifisch konfiguriertes UNICORN 6 Evaluation Manual Druckformat Verwendungsbereiche KTA avant ist ein Fl ssigchromatographiesystem f r die Prozessentwicklung Das System kann verwendet werden um die optimale Auswahl von S ulen Medien und Programm laufparametern f r die Aufreinigung bestimmter Proteine zu bestimmen Das KTA avant System ist nur f r Forschungszwecke gedacht und darf nicht in klinischen Verfahren oder f r Diagnosezwecke eingesetzt werden Sicherheitshinweise Diese Benutzerdokumentation enth lt WARNUNGEN VORSICHTSHINWEISE und HINWEISE zur sicheren Verwendung des Produkts Siehe nachfolgende Definitionen Warnhinweise ACHTUNG WARNUNG Weist auf eine gef hrliche Situation hin die zu schweren oder lebensbedrohlichen Verlet
56. ass sie vollst ndig gef llt ist Der berschuss tritt ber Port W1 aus dem Ventil aus Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 113 7 Eine Methode durchf hren 7 3 Starten eines Methodenlaufs 7 3 Starten eines Methodenlaufs Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt wie ein Programmlauf unter Verwendung einer zuvor erstell ten Methode gestartet wird Wenn Column Logbook w hrend der Installation der Soft ware aktiviert wurde ist eine Registrierung und Auswahl einzelner S ulen beim Start der Methode m glich Die Funktion Column Logbook umfasst unter anderem eine Protokol lierung des S ulenverlaufs Weitere Informationen ber den Umgang mit S ulen siehe UNICORN 6 Method Manual Eine Methode ausw hlen und starten 114 Die nachstehenden Anweisungen beschreiben wie eine Methode ge ffnet und ein Pro grammlauf gestartet wird Schritt Ma nahme 1 Das System Control Modul ffnen und auf das Open Method Navigator Sym bol klicken Ergebnis Das Method Navigator Fenster wird ge ffnet Method Navigator Open ww feal Methods Method Q E Folder name Z System A B Eric Methods al Method System3 Method2 System3 Results 2 Die auszuf hrende Methode ausw hlen und auf das Run Symbol klicken 2a a Ergebnis Das Dialogfenster Start Protocol wird ge ffnet 3 Die angezeigten Seiten in Start Protocol durchgehen die angefragten Daten eingeben und nach Bedarf nderungen vornehmen Auf Next klicken
57. auf Position 2 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 4 Anschlie en einer S ule Schritt Ma nahme 7 Im Dialogfenster Manual instructions e Pumps and pressure System flow w hlen e Einen niedrigen Wert f r Flow rate eingeben z B 0 2 ml min Manual instructions System3 Instructions ee S o mi r wN Pumps and pressures A Te megi 5 0 000 25 000 System flow a s 1 Sample flow 0 2 2 ml min m Gradient Pressure control u Pump wash i System wash Off u Wash settings F BufferPro pH Pressure control parameters E Aow path a amp Monitors U amp Fraction collection Fe a L_ 0 i Save result as o o i M Auto update parameter fields will be updated during method run a e Klicken _Execue Ergebnis Es beginnt ein Systemdurchfluss von 0 2 ml min 8 Wenn ein kontinuierlicher Pufferstrom aus dem Schlauch an Port 2A austritt und der obere Teil der S ule mit Puffer gef llt ist den Schlauch oben an der S ule anschlie en Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 95 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 4 Anschlie en einer S ule Schritt Ma nahme 9 Einen Schlauch an der Unterseite der S ule anschlie en 10 Wenn aus dem unteren Teil der S ule ein kontinuierlicher Pufferstrom austritt diesen Schlauch an das S ulenventil anschlie en Den Anschluss verwenden der dem bereits an die
58. ben 42 Eingeben eines Moduls e Auf die Taskbar Schaltfl che des gew nschten Moduls klicken 3 System Control gt Method Editor Pz Administration EF Evaluation oder e Das gew nschte Modul aus dem Tools Men in einem der anderen Softwaremodule ausw hlen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 2 UNICORN Software bersicht Die folgende Abbildung zeigt das Tools Men des Evaluation Moduls 4 Column Handling Ctri L Administration Method Editor amp System Control Options Change Passwords Hilfsprogramm aufrufen Die UNICORN Software enth lt ein umfassendes Hilfsprogramm Die nachstehende Ta belle beschreibt wie die einzelnen Teile des Hilfsprogramms aufgerufen werden Informationen ber ein Help Help for im gew nschten UNICORN Modul ausw h UNICORN Modul finden len Help For Method Editor X Contextual Help Fi Instruction Set Column CIP poygan About UNICORN Informationen ber das e die F1 Taste drc ken wenn das gew nschte Element aktuell ausgew hlte und ausgew hlt und fokussiert ist fokussierte Element z B ein Fenster einen Anmerkung Dialog oder eine Metho Um Informationen ber eine Phase zu finden sicherstel denphase finden len dass die Phase Properties Registerkarte ausge w hlt wurde bevor die F1 Taste gedr ckt wird oder e auf das Help Symbol im offe
59. cken Schritt Ma nahme 3 Auf das Symbol Print klicken Ergebnis Das Dialogfenster Print wird ge ffnet Print Method 1 Printer MAA v Properties Print items Phase range V Text instructions All phases X Variable list O Phase Method Setting 4 Im Dialogfenster Print e Printer w hlen e Auf OK klicken Ergebnis Die Methode wird ausgedruckt 70 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 Das System auf einen Programm lauf vorbereiten Zu diesem Kapitel vor dem Beginn eines Programmlaufs erforderlich sind n diesem Kapitel wird beschrieben welche Ma nahmen zur Vorbereitung des Systems ACHTUNG gemessene Schutzausr stung verwenden W hrend Betrieb und Wartung des KTA avant Systems stets an In diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt die folgenden Abschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 6 1 Vor der Vorbereitung des Systems 72 6 2 Den Str mungsweg vorbereiten 74 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften 83 6 4 Anschlie en einer S ule 92 6 5 Den pH Monitor kalibrieren 97 6 6 Fraktionssammler vorbereiten 99 6 7 Vorbereitung f r einen Programmlauf in einem K lteschrank 105 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 71 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 1 Vor der Vorbereitung des Systems 6 1 Vor der Vorbereitung des Systems Einf hrung Das System
60. den Sp lan schluss passt 4 Das Sp lventil ffnen indem es um eine Dreiviertelumdrehung gegen den Uhrzeigersinn gedreht wird Eine kleine Menge Fl ssigkeit langsam in die Spritze ziehen mit einer Rate von etwa 1 ml pro Sekunde 88 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Schritt 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Ma nahme 5 Das Sp lventil im Uhrzeigersinn drehen um das Sp lventil zu schlie en Die Spritze abziehen und den Inhalt entleeren Die Spritze an das Sp lventil am rechten Pumpenkopf der Systempumpe B anschlie en und die Schritte 4 und 5 wiederholen Den Systemfluss laufen lassen Systempumpe A sp len Zum Entl ften der beiden Pumpenk pfe von Systempumpe A die nachstehenden Anwei sungen befolgen Schritt Ma nahme 1 Im Dialogfenster Manual instructions e Pumps and pressures Gradient ausw hlen e Target auf 0 B und Length auf O min einstellen Klicken _Execue_ Ergebnis Nur Systempumpe A ist aktiv Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 89 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Schritt Ma nahme 2 90 Im Dialogfenster Manual instructions e Flow path Inlet A ausw hlen e Die Position eines der zu verwendenden Einl sse aus der Dropdown Liste ausw hlen Klicken LExesue_ Ergebnis Einla
61. der Dokumentation des Programmlaufs e Auf das View Documentation Symbol klicken um den Documentation Dialog zu ffnen e Die gew nschte Registerkarte ausw hlen Die Anzeige der Registerkarten h ngt von den Einstellungen in der aktiven Methode ab e Auf OK klicken um das Dialogfeld zu schlie en Documentation Fraction Collector Variable List Scouting Text Instructions Notes BuffePro Columns Evaluation Procedures Method Information Result Information Start Protocol System Settings Calibration ers Evaluation Log Questions 0 00 min Method Run 2009 01 23 09 55 33 01 00 Method Dokumentation Result Moa Dokumentation Dokumentation 001 User MA 0 00 min Batch ID sdfgfihzrtnizfgtnz 0 00 min Base Volume 20 106 ml GSTPrep FF 16 10 0 00 min The method flow is now calculated based on the system flow System 0 00 min Phase Method Settings Issued Processing Completed 0 00 min Base SameAsMain 0 00 min Alarm pre column pressure Enabled 20 00 MPa 0 00 MPa Issued Processing 0 01 min Alarm pre column pressure Enabled 20 00 MPa 0 00 MPa Completed 0 01 min Alarm delta column pressure Enabled 3 50 MPa 0 00 MPa Issued Processing 0 01 min Alarm delta column pressure Enabled 3 50 MPa 0 00 MPa Completed 0 01 min Wavelength 280 nm Off nm Off nm Issued Processing 0 02 min Wavelength 280 nm Off nm Off nm Completed 0 02 min Noise reduction UV 5 0 sec
62. e Abschnitt Siehe auf Seite 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 55 5 2 Eine Methode ausdrucken 69 54 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode Zu diesem Abschnitt Dieser Abschnitt beschreibt wie eine neue Methode auf Basis einer vordefinierten Me thode erstellt und bearbeitet wird Er gibt au erdem einen berblick ber die verf gbaren vordefinierten Methoden und Phasen Weitere Informationen ber die Methodenerstellung sind UNICORN 6 Method Manual zu entnehmen In diesem Abschnitt Dieser Abschnitt enth lt die folgenden Unterabschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden 56 5 1 2 Vordefinierte Methoden 64 5 1 3 Vordefinierte Phasen 67 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 55 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Einf hrung Die Methodenerstellung in UNICORN 6 erfolgt mit dem Method Editor Modul F r verschiedene Chromatographieverfahren wie Affinit tschromatographie und Gelfil tration sind vordefinierte Methoden verf gbar Au erdem gibt es vordefinierte Methoden zur Vorbereitung der S ule und zum Reinigen des Systems Eine Methode besteht aus verschiedenen Phasen Jede Phase repr sentiert einen wichtigen Verf
63. e A Retention Peaktable B p Peaktable C je endpoint retentions Peaktable D raa Peaktable E Percent of total area Peaktable F C Percent of total peak area Peaktable G Height Peaktable H Width Peaktable l Width at half height Peaktable J Sigma ae Fraction tube id Peaktable M Type of peak limits Peaktable N Peak endpoint heights Filter Peaks Fill settings Height less than U Fill peaks Width less than Pattern Area less than Width more than C Peak must be one of 20 largest C Do not show integration summary C Apply to all chromatograms Peakeigenschaften studieren Die Peaks im integrierten Chromatogramm werden automatisch mit ihren Retensions werten beschriftet Die Peak Table wird unter Verwendung derselben Basiseinheit ml CV oder min wie im Chromatogramm gew hlt berechnet Die nachstehenden Anwei sungen befolgen um den gew nschten Peak zu finden Schritt Ma nahme 1 Den Retentionswert ber einem Peak im Chromatogram suchen 2 Die Peak Table nach demselben Retentionswert durchsuchen 3 In derselben Zeile die interresierende Eigenschaft suchen z B Area Peak data Integration summary No Peak Retention Area of total of total Height name ml ml maU area peak area m u gt
64. e F1 Taste dr cken Manual Execute Manual Instructions w hlen eine berschrift erweitern und die gew nschte Anwei sung ausw hlen die F1 Taste dr cken oder auf das Help Symbol im Dialog klicken Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 45 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 _UNICORN Softwaremodule Zu diesem Abschnitt Drei der vier UNICORN Module werden in dieser Kurzanleitung verwendet und in diesem Abschnitt beschrieben Method Editor System Control und Evaluation Das Adminis tration Modul und dessen Symbole werden in UNICORN 6 Administration and Technical Manual beschrieben In diesem Abschnitt Dieser Abschnitt enth lt die folgenden Unterabschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 4 3 1 Methodeneditormodul 47 4 3 2 Systemsteuerungsmodul 50 4 3 3 Auswertungsmodul 52 46 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 1 Methodeneditormodul 4 3 1 Methodeneditormodul Einf hrung In der UNICORN Software sind die Anweisungen zur Steuerung eines Chromatographie laufs in einer Methode definiert Zur Erstellung oder Bearbeitung derartiger Methoden wird das Method Editor Modul verwendet Die grafische Benutzeroberfl che kombiniert Standardeinstellungen mit der Option Einstellungen zu ndern Hierdurch wird die Me thodenerstellung vereinfacht und der Methodenassistent in fr heren Versionen des UNICORN ersetzt
65. e nachstehenden Anweisungen zur Vorbereitung des Fraktionssammlers vor einem Programmablauf befolgen Kassetten und Kassettenfach Schritt Ma nahme 1 Falls verwendet Kassetten mit QuickRelease Funktion einfache L sung der Fixierung ffnen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 99 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten Schritt Ma nahme 2 Die Schl uche und Deep Well Platten in die Kassetten legen Sicherstellen dass die Deep Well Platten so gedreht sind dass das mit Al gekennzeich nete N pfchen ber der Al Markierung an der Kassette liegt 3 Kassetten mit QuickRelease Funktion einfache L sung der Fixierung schlie en 100 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten Schritt Ma nahme 4 Die Kassetten auf das Kassettenfach legen Sicherstellen dass der Code des Kassettentyps siehe nachstehende Abbildung zur Vorderseite des Fachs mit dem GE Logo zeigt 5 Das Schubfach des Fraktionssammlers ffnen Hierzu den Griff nach oben dr cken und das Schubfach herausziehen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 101 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten Schritt Ma nahme 6 Das Kassettenfach auf der Halterung f r Kassettenf cher des Fraktions sammlers platzieren Sicherstellen dass die Vorderseite der Abl
66. ebnisse auswerten und drucken 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken Schritt Ma nahme 5 Im Customize Report Fenster auf das Symbol Print klicken Ergebnis Das Dialogfenster Print wird ge ffnet Printer Microsoft Office Document Image Writer EN Properties Print Range Copies al Number of copies 1 O Pages Enter page numbers and or page ranges seperated by commas For example 1 3 5 23 6 Im Print Dialog Printer aus der Liste ausw hlen und auf OK klicken Ergebnis Ihr Chromatogramm wird gedruckt Einen Bericht drucken Die nachstehenden Anweisungen befolgen um einen Standardbericht auszudrucken Schritt Ma nahme 1 Das Evaluation Modul und ein Ergebnis ffnen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 141 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken Schritt Ma nahme 2 Auf das Symbol Report klicken m mi Ergebnis Das Dialogfenster Generate Report wird ge ffnet Generate Report Format Global Chromatogram Global Chromatogram including logs Global Chromatogram including peak table Global Chromatogram including pH curve Global Full report Global Full report including pH curve 3 Im Dialogfenster Generate Report e Eines der vordefinierten Formate aus der Liste ausw hlen e Auf die Preview Schaltfl che klicken Preview Ergebnis Eine Vorschau des Berichts wird im Customize Report Fenster angezeigt
67. ed 229 mi Bloch Lem Gaent Bund Pocesing Conget 229 mi Dane Sanaruhlan 1229 mi Gnachers 100 00 EB 10 00 KV Janua Ihocesungl 229 mi Graders 100 09 PN 1000 V Kongista m 50 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 2 Systemsteuerungsmodul Symbole auf der Systemsteuerungs Symbolleiste Die untenstehende Tabelle zeigt die Symbole der Symbolleiste Systemsteuerung auf die in diesem Erste Schritte verwiesen wird Symbol Funktion Open Method Navigator ffnet den Method Naviga tor in dem verf gbare Me thoden aufgef hrt werden Symbol Funktion Run Startet einen Metho denlauf Hold Unterbricht den Me thodenlauf w hrend die aktuelle Durchflussrate und die Ventilpositionen erhal ten bleiben Pause Unterbricht den Me thodenlauf und stoppt alle Pumpen Continue Nimmt beispiels weise einen angehaltenen End Beendet den Metho denlauf permanent Programmlaufdatengrup pen und der Inhalt des Pro grammlaufprotokolls einge stellt werden k nnen I gt Ud oder unterbrochenen Metho mi denlauf wieder auf Customize ffnet das Cu _ Connectto Systems ffnet A stomize Dialogfenster in P i das Connect to Sys A dem Kurveneinstellungen nA tems Dialogfenster in dem Systeme verbunden werden k nnen und aktuell verbun dene Benutzer angezeigt werden Er
68. eder als separate vordefinierte Methoden oder als Phasen im Rahmen von Chromatographiemethoden durchgef hrt werden Tipp Die Phasen System CIP und System Preparation verwenden je eine Reinigungsl sung Die System Preparation Methode beinhaltet zwei System Preparation Phasen und die System CIP Methode beinhaltet drei System CIP Phasen Um zus tzliche L sungen sequenziell zu verwenden Phasen zur Methode hinzuf gen Anmerkung Normalerweise wird 0 5 1 M NaOH zur Reinigung von System und S ule verwendet Jedoch sind vor der Auswahl von Reinigungsmitteln stets die verwendeten Medien und Puffer sowie die Chemikalienbest n digkeit der S ule zu ber cksichtigen 63 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 2 Vordefinierte Methoden 5 1 2 Vordefinierte Methoden Die verf gbaren vordefinierten Methoden werden in der nachstehenden Tabelle beschrie ben Methode Beschreibung Affinity Chroma tography AC Nach der quilibrierung und der Probenapplikation wird das ge w nschte Protein in den S ulenliganden absorbiert Nach einem Waschvorgang zum Entfernen von ungebundener Probe wird die Elution entweder durch Verwendung eines Puffers der ein kom petitives Element enth lt um das gew nschte Protein zu verdr n gen oder durch nderung des pH oder der lonenst rke durchge f hrt Schlie lich wird die S ule mit Startpuffer neu quilibriert Anion Ex change Chro matography AIEX
69. em goderti Pisac Pocesing Corgtsted 22 mi Bare Sammer 220 mi Graders 100 00 148 10 00 1V prad Pocssingi 229 mi Giadart 10000 R0 1000 EV Kompinnch AZI mi Last ade fied The an sd pane ahia he delay vohuna Aas baen coiecisd pin Cornecten Corwectedn rtrd TCoreraiediy Uner AE ENO EFA Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 119 7 Eine Methode durchf hren 7 4 Methode berwachen Teil Beschreibung 1 Run Data Zeigt die aktuellen Programmlaufdaten an 2 Chromatogram Stellt Daten in Kurvenform dar 3 Run Log Zeigt alle registrierten Aktionen an 4 Flow Scheme Zeigt den aktuellen Str mungsweg an Programmlaufdaten konfigurieren Das Run Data Fenster zeigt Echtzeitda ten von verf gbaren Monitoren w hrend EEEE EEE E EE des Programmlaufs an s M Rundata U System state Andern der im Fenster anzuzeigenden M Acc volume M Block volume Parameter B Acc time M Block time 5 P U Scouting no e Auf das Customize Symbol klicken D System flow 5 m C System pressure um den Customize Dialog zu ffnen O Conc B O Sample flow C Sample pressure EE O Prel pressure t O DettaC pressure AR O PostC pressure A Ouvi iman lt lt Pen Duwv2 Duv3 OpH O BufferPro pH e Inder Run Data Groups Registerkar Dem a one te die anzuzeigenden Parameter E Cone 03 onc ausw hlen O Cond O Z Cond e Auf OK klicken um das Dialogfeld zu schlie en Chr
70. en Fl ssigkeiten ACHTUNG Bei Verwendung von brennbaren Fl ssigkeiten mit dem KTA avant Ger t diese Vorsichtsma nahmen befolgen um ein Brand oder Explosionsrisiko auszuschlie en Feuergefahr Vor Inbetriebnahme des Systems sicherstellen dass weder Instrument noch Schl uche undicht sind Explosionsgefahr Um die Bildung einer explosiven Atmosph re bei Verwendung von brennbaren Fl ssigkeiten zu vermeiden sicherstellen dass die Raumbel ftung den rtlichen Anforde rungen entspricht Fraktionssammiler Keine brennbaren Fl ssigkeiten fraktionie ren Bei der Umkehrphasenchromatographie oder anderen Verfahren die organische L sungsmittel verwenden Fraktionen durch das Auslassventil sammeln RPC Programml ufe mit 100 igem Acetonitril in KTA avant 25 Immer den gr nen PEEK Schlauch zwischen der verwende ten Systempumpe und dem Pumpendruckmonitor durch einen orangefarbenen PEEK Schlauch mit einem I D von 0 5 mm er setzen bevor der RPC Programmlauf mit 100 igem Acetonitril durchgef hrt wird Den Systemdruck Alarm auf 10 MPa einstel len RPC Programml ufe mit 100 igem Acetonitril in KTA avant 150 Immer den beigen PEEK Schlauch zwischen der verwen deten Systempumpe und dem Pumpendruckmonitor durch einen orangefarbenen PEEK Schlauch mit einem I D von 0 5 mm ersetzen bevor der RPC Programmlauf mit 100 igem Acetoni tril durchgef hrt wird Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 17 2
71. en den EU Richtlinien ERM elektromagnetische Vertr g 1999 5 EG und lichkeit EMV Norm f r Funkanlagen 2004 108 EG berein und Dienstleistungen EN 300 330 2 Elektromagnetische Vertr glichkeit Die EN Norm stimmt mit der EU Richtlinie 1999 5 EG berein Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 11 1 Einf hrung 1 2 Beh rdliche Vorschriften FCC Erkl rung Das KTA avant Ger t mit Ausnahme der vom Mischer M9 und UV Detektor U9 D abge strahlten Hochfrequenzenergie erf llt die Vorschriften von FCC Federal Communications Commission 47 CFR Teil 15b Titel 47 des CFR Code of Federal Regulations Teil 15b Hochfrequenzger te Konformit tserkl rung f r Software 12 Anmerkung Dieses Ger t wurde getestet und als normgerecht mit den Grenzwerten f r Digitalger te der Klasse Agem Abschnitt 15 der FCC Vorschriften befunden Diese Grenzwerte dienen dem angemessenen Schutz vor St rungen bei Betrieb der Ausr stung in einer gewerblichen Umgebung Dieses Ger t erzeugt nutzt und strahlt m glicherweise Hochfrequen zenergie ab und kann wenn es nicht der Gebrauchsanweisung ent sprechend installiert und eingesetzt wird zu St rungen im Funkverkehr f hren Der Betrieb dieses Ger ts in einem Wohngebiet verursacht vermutlich St rungen die der Benutzer auf eigene Kosten korrigieren muss Die Module Mischer M9 und UV Detektor U9 D entsprechen FCC 47 CFR Abschnitt 15c Anmerkung Diese
72. en Strom zum Ger t durch Dr cken des Netzschalters auf die O Position ausschalten Der Programmlauf wird sofort angehalten Stromausfall Die Auswirkungen eines Stromausfalls h ngen davon ab welche Einheit betroffen ist Stromausfall an KTA avant Ger t e Der Programmlauf wird sofort unterbrochen e Die bis zum Zeitpunkt des Stromausfalls erfass ten Daten stehen in UNICORN zur Verf gung 30 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Stromausfall an 2 Sicherheitsanweisungen 2 3 Vorgehensweise in Notf llen Computer Der UNICORN Computer schaltet sich aus Das Ger tedisplay zeigt den Status Not connected an Der Programmlauf wird sofort unterbrochen Daten die bis zu 10 Sekunden vor dem Strom ausfall erstellt wurden k nnen wiederherge stellt werden Anmerkung Der UNICORN Client kann sich w hrend einer vorl ufigen berlastung des Prozessors abschal ten Dies sieht ggf wie eine Computerst rung aus Der Programmlauf wird fortgesetzt und der UNICORN Client kann jetzt neu gestartet werden um wieder die Kontrolle ber den Pro grammlauf zu erlangen Unterbrechungsfreie Stromversorgung USV Eine USV kann einen Datenverlust bei einem Stromausfall verhindern und Zeit f r eine kontrollierte Abschaltung des KTA avantschaffen Informationen zu den Leistungsanforderungen der USV siehe Systemspezifikationen im KTA avant User Manual Die Spezifikationen f
73. ers in dem die Ergebnisse gespeichert werden sollen Standardm ig werden die Ergebnisse im Stammordner gespeichert e Result name w hlen Bei der Standardauswahl Method name werden die Ergebnisse mit dem Methodennamen und einer Seriennummer be nannt e Auf OK klicken um die Auswahl zu best tigen und das Dialogfeld zu schlie en Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 59 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Schritt Ma nahme 5 Im Phase Properties Fenster der Method Settings Phase auf die Start Protocol Schaltfl che klicken wenn ein Startprotokoll mit einbezogen werden soll Start Protocol Ergebnis Das Dialogfenster Start Protocol wird ge ffnet Start Protocol Method Items to display at method start v Current setting item description Fraction Collector Variable List Displays the fraction collector setup tube type and position Scouting Text Instructions Notes Gradient BufferPro Columns Evaluation Procedures Method Information System Settings Calibration Questions Changeable Batch ID Result Name and Location 2 eire tuese Im Dialogfenster Start Protocol Elemente ausw hlen die bei einem Methodenstart angezeigt werden sollen Standardm ig ist Result Name and Location ausgew hlt Auf OK k
74. estellt wird muss er eingeschaltet bleiben um das Kondensationsrisiko soweit wie m glich zu vermeiden HINWEIS berhitzung vermeiden Wenn das KTA avant Ger t in einem K lteschrank aufgestellt ist und der K lteschrank ausgeschaltet wird muss sichergestellt sein dass das KTA avant Ger t ausge schaltet wird und der K lteschrank ge ffnet bleibt um berhitzung zu vermeiden HINWEIS Den Computer bei Raumtemperatur aufbewahren Wenn das KTA avant Ger t in einem K hlraum steht einen Computer der f r einen K hlraum geeignet ist verwenden oder den Computer au erhalb des K hlraums aufstellen und das im Lieferumfang des Ger ts enthaltene Ethernet Kabel verwenden um das Ger t an den Computer anzuschlie en Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 105 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 7 Vorbereitung f r einen Programmlauf in einem K lteschrank Anmerkung Wenn das Ger t in einem kalten Raum aufbewahrt wird ist es wichtig dass alle Schlauchverbinder einschlie lich der Einlassverteilerverbinder festgezogen werden Andernfalls kann Luft in den Str mungsweg ge langen Tipp Wenn Programml ufe in einem K lteschrank ausgef hrt werden si cherstellen dass die Zieltemperatur der Temperatursteuerung des Fraktionssammlers angepasst wird Die Zieltemperatur ist standard m ig 20 C Die Einstellungen f r die Temperatursteuerung k nnen im System Sett
75. fs Schritt Ma nahme 9 Im Dialogfenster Select Columns e Enter ID w hlen e Die S ulen ID mit dem 2D Strichcodeleseger t siehe Schritt 7 eingeben Select Columns System3 Enter or select a column individual Code lot exp ID Enter ID ks 9288 13 12345678 0000 00 0005 Clear Select ID 28 9288 13 1234 00 0005 HiPre New Disable column logging for this run Apply to all methods with the same column type Methods Remark Column Barcode Column Handling 000 1 g Column Handling Scouting run 2 HiPrep 26 10 Desalting Column Handling Scouting run 3 HiPrep 26 10 Desalting Cancel e Oder Select ID w hlen und die f r den Programmlauf zu verwendende S ule aus der Dropdown Liste ausw hlen Select Columns System3 Enter or select a column individual Code Enter ID E Select ID 28 9298 13 28928813 0000 00 1234 HiPrep 261 v Disable column logging Apply to all methods with the same column type Methods Remark Column Barcode Column Handling 23 HiPrep 26 10 D g Column Handling Scouting run 2 HiPrep 26 10 Desalting Column Handling Scouting run 3 HiPrep 26 10 Desalting e Auf OK klicken Ergebnis Der Programmlauf startet Alle notwendigen Aktionen werden ge m der Methode automatisch durchgef hrt einschlie lich der Beendigung des Programmlaufs 118 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode
76. gef llt Beispielsweise Einl sse Ausl sse und S ulenpositionen ausw hlen die gereinigt werden sollen In der Methode sind drei System CIP Phasen ent halten um die Verwendung drei verschiedener Reinigungsl sun gen zu erm glichen Auf Wunsch k nnen zus tzliche System CIP Phasen von der Phase Library hinzugef gt werden System Prepara Das System wird mit einer Pr parationsl sung gef llt Beispiels tion weise Einl sse Ausl sse und S ulenpositionen ausw hlen die pr pariert werden sollen In der Methode sind zwei System Prepa ration Phasen enthalten Auf Wunsch k nnen zus tzliche System Preparation Phasen von der Phase Library hinzugef gt werden 66 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 3 Vordefinierte Phasen 5 1 3 Vordefinierte Phasen Die vordefinierten Phasen die in den vordefinierten Methoden und in der Phase Library verf gbar sind werden in der nachstehenden Tabelle beschrieben Phase Beschreibung Method Settings Diese erste Phase in einer Methode ist obligatorisch Definiert gemeinsame Parameter die in nachfolgenden Phasen verwen det werden Equilibration quilibriert die S ule oder Aufreinigung oder quilibriert die S ule nach der Aufreinigung neu Sample Applicati Appliziert Probe auf die S ule Definiert die Probenapplikations on Technik das Probenvolumen und die Handhabung des Durch
77. igen Lizenzvereinbarungen f r Endanwender von GE Healthcare f r Life Sciences Software Produkte Eine Kopie dieser standardm igen Software Lizenzverein barung f r Endanwender ist auf Anfrage erh ltlich GE Healthcare Europe GmbH Munzinger Strasse 5 D 79111 Freiburg Germany GE Healthcare UK Limited Amersham Place Little Chalfont Buckinghamshire HP7 9NA UK GE Healthcare Bio Sciences Corp 800 Centennial Avenue P O Box 1327 Piscataway NJ 08855 1327 USA GE Healthcare Japan Corporation Sanken Bldg 3 25 1 Hyakunincho Shinjuku ku Tokyo 169 0073 Japan 29 0351 83 AA 03 2013
78. ine Beschreibung der Sicherheitshinweise der rechtlichen Hinweise und des vorgesehenen Einsatzzwecks des KTA avant In diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt die folgenden Abschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer 6 1 2 Beh rdliche Vorschriften 10 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 1 Einf hrung 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer Vor Verwendung des KTA avant Systems lesen Alle Benutzer m ssen das KTA avant Installationsanleitung und das Erste Schritte mit KTA avant gr ndlich durchlesen bevor das System aufgebaut verwendet oder gewartet wird Das KTA avant System nur auf die Weise bedienen wie sie in der Benutzerdokumenta tion beschrieben ist Andernfalls k nnen Sie Gefahren ausgesetzt sein die Verletzungen und Ger tesch den verursachen k nnen Zweck der Erste Schritte Dieser Leitfaden wurde erstellt um Benutzern die ber wenig oder keine Erfahrung mit der UNICORNT Software und dem KTA avant Ger t verf gen eine schnelle und einfache Anleitung zu bieten Der Arbeitsablauf wird in Form von praktischen Anweisungen zur Bedienung von Software und Ger t dargestellt Die Anweisungen bilden einen grundle genden Rahmen der durch das Lesen von ausgew hlten Teilen der anderen Handb cher ausgeweitet werden kann Diese Erste Schritte behandelt folgende Themen e _ Grundfunktionen von KTA avant und
79. ings Dialog von System Control oder im Text Instruc tions Fenster in Method Editor bearbeitet werden 106 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 Eine Methode durchf hren Zu diesem Kapitel Dieses Kapitel beschreibt den Start und die Durchf hrung einer Methode sowie den Umgang mit dem System nach dem Programmlauf In diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt die folgenden Abschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 7 1 Vor dem Start 108 7 2 Auftragen der Probe 111 7 3 Starten eines Methodenlaufs 114 7 4 Methode berwachen 119 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf 124 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 107 7 Eine Methode durchf hren 7 1 Vor dem Start 7 1 Vor dem Start Einf hrung Vor Beginn eines Programmlaufs m ssen Sie die Informationen in diesem Abschnitt lesen und verstehen und die nachstehend aufgef hrten Pr fungen durchf hren ACHTUNG Stets angemessene Schutzausr stung w hrend des Betriebs und der Wartung des KTA avant tragen ACHTUNG Gefahrstoffe Bei Verwendung von gef hrlichen chemischen und biologischen Substanzen alle angemessenen Schutzma nahmen beachten wie beispielsweise das Tragen einer Schutzbrille sowie von Handschuhen die resistent gegen die verwendeten Substanzen sind Regionale und oder nationale Vorschriften f r den sicheren Betrieb bzw gefahrlose Wartung und Entsorgung des Ger ts befol gen ACHTUNG
80. isse anzeigen Abbildung des Chromatogrammfensters Das Chromatogram Fenster zeigt die Kurven vom Methodenlauf an Chrom UV 1_280_Chrom 1 id101b 001 Conc B_Chrom 1 id101b 001 Fraction_Chrom 1 id101b 001 UV 1_280 01 BASEM Edited_Chrom 1 Run 1 mau 225 220 215 210 205 200 195 7 190 185 180 175 170 165 160 155 150 145 140 135 130 125 F 120 115 110 105 100 ss 30 85 80 75 70 65 80 55 50 45 40 35 30 25 20 10 43 a o o SE can ef 548 5 oo G a vv o 45 5 E ELP epp ETE P 5 mi 10 5 o 5 10 15 20 25 30 35 40 45 so 55 80 Chromatogramm konfigurieren ndern der Chromatogramm Eigenschaften e Auf das Customize Symbol klicken um den Customize Dialog zu ffnen e Die gew nschten Optionen unter den in der nachstehenden Tabelle beschriebenen Registern ausw hlen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 131 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 1 Die Ergebnisse anzeigen Registerkarte Konfiguration Curves Die anzuzeigenden Kurven ausw hlen Curve style and color Das Erscheinungsbild der angezeigten Kurven konfigu rieren X axis Basiseinheit Zeit CV oder Volumen w hlen und die Skala der X Achse einstellen Y axis Ausw hlen welche Y Achsen angezeigt werden sollen und die Skala der Y Achse f r die verschiedenen Kurven einstellen Header Ausw hlen welche Parameter Variablen Fragen und oder Notizen in der He
81. ktion 1 Einspritzventil 11 Einlassventil A 2 Durchflussbegrenzer 12 Systempumpe A 3 pH Ventil 13 Mischer 4 S ulenventil 14 Druckmonitor der Probenpum pe 5 UV Monitor 15 Probenpumpe 6 Leitf higkeitsmonitor 16 Schl uche des Pumpenkolben Sp lsystems 7 Einlassventil B 17 Probeneinlassventil 8 Quatern res Ventil 18 Auslassventil 9 Systempumpe B 19 Halterschienen 10 Druckmonitor der Systempum pen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 41 4 Das Ger t und die Software 4 2 UNICORN Software bersicht 4 2 _UNICORN Software bersicht Einf hrung Dieser Abschnitt enth lt eine kurze bersicht ber die UNICORN Software ein Komplett paket zur Steuerung berwachung und Auswertung von Chromatographieger ten und Aufreinigungsl ufen Er beschreibt wie man das in UNICORN integrierte Hilfsprogramm aufruft bersicht ber UNICORN Module UNICORN besteht aus vier Modulen Administration Method Editor System Control und Evaluation Die Hauptfunktionen der einzelnen Module werden in der nachstehenden Tabelle beschrieben Modul Hauptfunktionen Administration Einrichtung von Benutzer und System Systemprotokoll und Datenbankverwaltung Method Editor Erstellen und Bearbeiten von Methoden System Control Starten Anzeigen und Steuern von Programml ufen Evaluation Ergebnisse ffnen Programml ufe auswerten und Berich te erstellen Ein UNICORN Modul einge
82. licken um die Auswahl zu best tigen und das Dialogfeld zu schlie en 6 Die n chste Phase im Method Outline Fenster durch Anklicken ausw hlen und die entsprechenden Parameterwerte im Phase Properties Fenster ausw hlen 7 Schritt 6 wiederholen bis alle Phasen bearbeitet wurden Tipp Wenn das Ger t ein paar Tage oder l nger nicht verwendet werden soll eine oder mehrere System CIP Phasen wie nachstehend beschrieben zum Ende der Methode hinzuf gen 60 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Schritt 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 1 Erstellen und Bearbeiten von Methoden Ma nahme 8 Auf das Symbol Save the method klicken a Ergebnis Das Dialogfenster Save As wird ge ffnet 5 Methods v Folder name System Last modified Createdby J UNICORN Database Anita 01 14 2009 12 35 Default Anna 12701 2008 14 12 lotta Anne 12 01 2008 14 06 lotta Bj mJ 01714 2009 12 42 Default Biomd 01 14 2009 12 44 Default Christer 12 01 2008 14 38 Default Christine 12 02 2008 17 54 Default Claes 11721 2008 08 32 Default B DefaultHome 09 25 2008 13 07 System Asa DH 01 12 2009 15 56 Default lt Name UNTITLED System System3 Cancel In the Save As dialog e Einen Zielordner ausw hlen um die Save Schaltfl che zu aktivieren e Einen Name f r die Methode eingeben e Ein System aus der Liste ausw hlen
83. muss sichergestellt sein dass das KTA avant Ger t ausgeschaltet wird und der K lteschrank ge ffnet bleibt um berhitzung zu vermeiden e Den Computer bei Raumtemperatur aufbewahren Wenn das KTA avant Ger t in einem K hlraum steht einen Computer der f r einen K hlraum geeignet ist verwenden oder den Computer au erhalb des K hlraums aufstellen und das im Lieferumfang des Ger ts enthaltene Ethernet Kabel verwenden um das Ger t an den Computer anzuschlie en 24 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen Wartung ACHTUNG Um Verletzungen bei Durchf hrung von Wartungsarbeiten am KTA avant Ger t zu vermeiden die nachstehenden Anweisungen befolgen e Stromschlaggefahr Alle Reparaturen m ssen von Serviceper sonal durchgef hrt werden das von GE Healthcare autorisiert wurde Keine Abdeckungen ffnen und keine Teile austauschen es sei denn dies wird ausdr cklich in der Benutzerdokumenta tion angegeben e Stromquelle trennen Bevor Teile am Instrument ausgetauscht werden stets die Stromzufuhr zum Instrument abschalten wenn in der Benutzerdokumentation nicht anderweitig ange geben e Gef hrliche Chemikalien w hrend der Wartung Bei Verwen dung von gef hrlichen Chemikalien f r die Reinigung des Sys tems oder der S ule das System oder S ule in der letzten Phase oder am Schluss mit einer neutralen L sung abwaschen HINWEI
84. n 10000 25 000 wi 0 m vo v V Cam de ae Io pead ven Dwa i Coama Wash Dwa m tram mer v 1 Use maruah puegnd tufon v Det wea a o o Bits ph morteiro E guate non C Une manae tan pnpanaten PaP inti u wen dem ecse Bra fe a Bries a aes D Sams vriet 1 DEEN peconmeidedi Nee me Dry mibe he innen him amn Logod g I Symbole auf der Symbolleiste des Methodeneditors Die nachstehende Tabelle zeigt die Symbole in der Method Editor Symbolleiste auf die in dieser Kurzanleitung verwiesen wird Funktion Funktion u New Method ffnet den Open Method Navigator a New Method Dialog in ffnet den Method Naviga dem Methoden erstellt wer tor in dem verf gbare Me den k nnen thoden aufgef hrt werden 48 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Symbol id Funktion Save Speichert die aktive Methode Symbol 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 1 Methodeneditormodul Funktion Print ffnet das Print Dia logfeld ausdem heraus eine Methode ausgedruckt wer den kann T Copy Kopiert die ausge w hlte Methode oder den Ordner Paste F gt eine kopierte Methode oder einen Ordner in einen neuen Ordner ein N Undo Setzt die Methode wieder in jenen Zustand zu r ck in dem sie sich vor der letzten nderung befand Redo Setzt die Methode wieder in den Zustand zu r ck in dem sie sich vor dem letzten Undo Befehl befand Erste
85. n des Computers Der Computer muss unter Befol gung der Anweisungen des Computerherstellers installiert und verwendet werden VORSICHT Sicherstellen dass die Ablaufbeh lter das gesamte Volumen eines Programmlaufs aufnehmen k nnen F r KTA avant 25 sollte ein geeigneter Ablaufbeh lter normalerweise ein Volumen von 2 10 aufweisen F r KTA avant 150 sollte ein Ablaufbeh lter ein Volu men von 40 aufweisen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 19 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen HINWEIS Um eine Besch digung am KTA avant oder an anderen Ger ten beim Einbau oder Verstellen des Ger ts zu vermeiden die nachste henden Anweisungen befolgen e Der h chste Pegelstand im Ablaufbeh lter f r die Abfallschl u che von den Ventilen muss weniger als 30 cm oberhalb des Labortisches liegen e Der maximale Pegelstand im Ablaufbeh lter f r die Abfallschl u che von Fraktionssammler und Pufferablage muss unterhalb der Tischoberfl che liegen e L ftungsschlitze am KTA avant Ger t Um angemessene Bel ftung sicherzustellen Papier und andere Objekte von den L ftungsschlitzen am Ger t fernhalten e Stromquelle trennen Um Ger tesch den zu vermeiden stets die Stromversorgung des KTA avant Ger ts trennen bevor ein Ger temodul ein oder ausgebaut wird oder ein Kabel an geschlossen oder abgetrennt wird e Falscher Gebrauch der UniNet 9 Anschl sse Die UniNet 9
86. nen Dialog klicken Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 43 4 Das Ger t und die Software 4 2 UNICORN Software bersicht die online Hilfe navigie e Help Help for aus einem der UNICORN Module aus ren w hlen siehe Abbildung oben e im Fenster TOC Inhaltsverzeichnis die gew nschten berschriften erweitern um durch den Inhalt zu navi gieren e auf die gew nschte berschrift klicken um einen Ab schnitt zu ffnen einen bestimmten Be e Help Help for aus einem der UNICORN Module aus griff in der online Hilfe w hlen siehe Abbildung oben suchen e im Search Fenster den gew nschten Begriff im Einga befeld eingeben e auf die Search Schaltfl che klicken Zugang zu denHandb e Help Help for aus einem der UNICORN Module aus chern im PDF Format w hlen siehe Abbildung oben e im Fenster TOC die berschrift UNICORN 6 online documentation portal erweitern und Documentation overview ausw hlen e im PDF manuals Abschnitt auf einen der Textlinks klicken e auf die Abbildung oder den Textlink des gew nschten Handbuchs klicken 44 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 2 UNICORN Software bersicht Informationen ber eine Methodenanweisung finden Im Method Editor Modul Im System Control Modul eine Methode ffnen die gew nschte Anweisung unter Instruction box im Text instruction Fenster ausw hlen di
87. ngsspannung Vor Anschlie en des Netzka bels sicherstellen dass die Versorgungsspannung an der Wandsteckdose der Kennzeichnung am Ger t entspricht Warnung Fraktionssammler Keine brennbaren Fl ssigkeiten fraktionieren Beider Umkehrphasenchromatographie oder anderen Verfahren die organische L sungsmittel verwenden Fraktionen durch das Auslassventil sam meln Asse N3732 Das System erf llt die Anforderungen an elektroma gnetische Vertr glichkeit in Australien und Neuseeland AA Das System erf llt geltende europ ische Richtlinien Th listed Intertek 4001767 2 Dieses Symbol zeigt an dass das Ger t von einem national anerkannten Testlabor NTRL zertifiziert wurde Ein NRTL ist eine Einrichtung die von der US amerikanischen Beh rde f r Unfallverh tung und Ge sundheitsschutz am Arbeitsplatz Occupational Safety and Health Administration OSHA anerkannt ist da sie die gesetzlichen Vorschriften in den USA Titel 29 der Bundesgesetzsammlung Code of Federal Regulations 29 CFR Teil 1910 7 erf llt Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 27 2 Sicherheitsanweisungen 2 2 Schilder Schilder zu Gefahrstoffen 28 Die folgenden Symbole auf den Schildern beziehen sich auf Gefahrenstoffe Beschriftung Bedeutung Dieses Symbol kennzeichnet Elektro und Elektronikger te die nicht mit dem unsortierten Haus oder Sperrm ll ent sorgt werden d
88. nierte Phasen Phase Beschreibung Intelligent Hydraulische Fl ssigkeit dr ckt den Adapter nach unten Der Packing Benutzer startet die Kompression genau an dem Punkt wenn der Adapter die Oberfl che des konsolidierten Betts erreicht Der Adapter komprimiert das Bett gem dem Packing Factor oder der Target Bed Height je nach Auswahl Nur erh ltlich f r KTA avant 150 68 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 5 Ein Verfahren erstellen 5 2 Eine Methode ausdrucken 5 2 Eine Methode ausdrucken Einf hrung In diesem Abschnitt wird beschrieben wie die Textanweisungen und Variablen einer Methode ausgedruckt werden UNICORN verwendet die auf Ihrem Computer installierten Drucker und Druckereinstellungen Ausdrucken einer Methode Die nachstehenden Anweisungen befolgen um eine Methode auszudrucken Schritt Ma nahme 1 Das Method Editor Modul ffnen und auf das Open Method Navigator Sym bol auf der Symbolleiste klicken Ergebnis Das Method Navigator Fenster wird ge ffnet Method Navigator Open ww a Methods Method Qu Zr Folder name System B Eric Methods Method System3 Method2 System3 Results 2 Die zu druckende Methode ausw hlen und auf das Open a Method Symbol auf der Navigator Symbolleiste klicken Open Ergebnis Die ausgew hlte Methode wird ge ffnet Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 69 5 Ein Verfahren erstellen 5 2 Eine Methode ausdru
89. nktion Save Speichert nderun gen am aktuellen Ergebnis Ta Print ffnet das Print chromatograms Dialog feld aus dem heraus ein Chromatogramm ausge druckt werden kann F Copy Kopiert das ausge w hlte Ergebnis oder den Ordner Paste F gt ein kopiertes Ergebnis oder einen Ordner in den ausgew hlten Ord ner ein ks Undo Setzt das Ergebnis wieder in den Zustand zu r ck in dem es sich vor der letzten nderung befand Report ffnet das Create report Dialogfeld in dem ein Bericht des Ergebnisses erstellt werden kann m View Documentation ff net das Documentati on Dialogfeld das die kom plette Dokumentation f r einen Methodenlauf enth lt Customize ffnet das Cu stomize Dialogfeld indem Kurveneinstellungen der Inhalt der Peaktabelle sowie Header eingestellt werden k nnen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Peak Integrate ffnet das Peak Integrate Dialogfeld aus dem heraus Kurven in tegriert werden k nnen 53 5 Ein Verfahren erstellen 5 Ein Verfahren erstellen Zu diesem Kapitel Eine Methode wird im Method Editor Modul erstellt Dieses Kapitel beschreibt die Metho denerstellung anhand vordefinierter Methoden sowie das Verfahren zum Ausdrucken einer Methode Weitere Informationen ber die Methodenerstellung sind im UNICORN 6 Method Manual enthalten In diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt die folgenden Abschnitt
90. ogrammlaufs verwendet wird Vorf llen der Einlassschl uche A Die nachstehenden Anweisungen zum F llen aller im Programmlauf zu verwendenden Einlassschl uche A mit dem entsprechenden Puffer L sung befolgen Schritt Ma nahme 1 Sicherstellen dass alle Einlassschl uche A die f r den Methodenlauf verwen det werden sollen in die korrekten Puffer getaucht werden Im Dialogfenster Manual instructions Flow path lnlet A ausw hlen e Die Position des zu f llenden Einlasses aus der Dropdown Liste ausw h len Klicken L_Execute_ Ergebnis Einlassventil A schaltet auf den ausgew hlten Anschluss Eine 25 30 ml Spritze an eines der Sp lventile der Pumpenk pfe der System pumpe A anschlie en Sicherstellen dass die Spritze fest in den Sp lanschluss passt Das Sp lventil ffnen indem es um eine Dreiviertelumdrehung gegen den Uhrzeigersinn gedreht wird Langsam Fl ssigkeit in die Spritze aufziehen bis die Fl ssigkeit die Pumpe erreicht Das Sp lventil im Uhrzeigersinn drehen um das Sp lventil zu schlie en Die Spritze abziehen und den Inhalt entleeren Schritte 2 5 f r jedes Teil des Einlassschlauchs A wiederholen das w hrend des Programmlaufs verwendet wird Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 85 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften System vor Entl ftung der Systempumpenk pfe vorbereiten 86 Zum
91. omatogramm konfigurieren Das Chromatogram Fenster stellt grafisch die registrierten Daten von verf gbaren Monitoren w hrend des Programmlaufs dar ndern der Chromatogramm Eigenschaften e Auf das Customize Symbol klicken um den Customize Dialog zu ffnen FFRI Ag 120 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 7 Eine Methode durchf hren 7 4 Methode berwachen e Die gew nschten Optionen unter den in der nachstehenden Tabelle beschriebenen Registern ausw hlen Registerkarte Konfiguration Curves Die anzuzeigenden Kurven ausw hlen Curve style and color Das Erscheinungsbild der angezeigten Kurven konfigu rieren X axis Basiseinheit Zeit oder Volumen w hlen und die Skala der X Achse einstellen Y axis Ausw hlen welche Y Achsen angezeigt werden sollen und die Skala der X Achse f r die verschiedenen Kurven einstellen e Auf OK klicken um das Dialogfeld zu schlie en Anmerkung Diese Verfahren bestimmen welche Kurven angezeigt werden sowie deren Erscheinungsbild im Chromatogram Fenster und auf den Aus drucken Die urspr nglichen Rohdatenkurven k nnen niemals ge ndert oder aus dem Ergebnis gel scht werden Einzelheiten im Chromatogramm Die folgenden Anweisungen befolgen um ausgew hlte Teile des Programms anzuzeigen eine Kurve identifizieren wollen positionieren Sie den Mauszeiger auf der interessierenden Kurve Ergebnis Der Name der Kurve wird angezeigt a
92. ordnung Nr No Registrierung Bewertung Zulassung und Beschr nkung 1907 2006 chemischer Stoffe REACH ACPEIP Verwaltung zur Kontrolle von durch Elektronikger ten verursachte Umweltverschmutzungen chinesische Richtlinie zur Beschr nkung der Verwendung bestimmter gef hrlicher Stoffe RoHS Richtlinie Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 13 2 Sicherheitsanweisungen 2 Sicherheitsanweisungen Zu diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt Anweisungen ber den sicheren Umgang mit dem KTA avant Ger t In diesem Kapitel Dieses Kapitel enth lt die folgenden Abschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 2 1 Sicherheitsvorkehrungen 15 2 2 Schilder 26 2 3 Vorgehensweise in Notf llen 29 2 4 Informationen zum Recycling 32 14 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen Einf hrung Das KTA avant Ger t wird mit Netzstrom gespeist und arbeitet mit unter Druck stehen den Fl ssigkeiten die gef hrlich sein k nnen Vor der Installation Bedienung oder War tung des Systems m ssen Sie sich der in dieser Bedienungsanleitung beschriebenen Gefahren bewusst sein Die gegebenen Anweisungen befolgen um Verletzungen oder Ger tesch den zu vermeiden Die Sicherheitsvorkehrungen in diesem Abschnitt werden in die folgenden Kategorien unterteilt e Allgemeine Vorsichtsma nahmen e Entflammbare Fl ssigkeiten e Personenschut
93. r Name Eric Password Domain Access Administrators w Group e Auf die Schaltfl che Options klicken und ausw hlen welche UNICORN Module gestartet werden sollen Start UNICORN Administration _ System Control Method Editor C Evaluation e OK anklicken Ergebnis Die ausgew hlten UNICORN Module werden ge ffnet E Evaluation al FE Administration System Control Method Editor unic f User IS TAGRA 2 Verbindung mit System herstellen Befolgen Sie die unten stehenden Anweisungen um das Ger t am UNICORN anzuschlie Ben Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 35 3 Hochfahren 36 Schritt Ma nahme 1 Im System Control Modul auf das Symbol Connect to Systems klicken Ergebnis Das Connect to Systems Dialogfeld wird ge ffnet Connect to Systems Connected systems 1 selected max 3 System name Control View E System E System2 System3 E Systems E 8 Systems E Systeme E System Im Dialogfeld Connect to Systems e Ein System ausw hlen e Control Modus ausw hlen e Auf OK klicken Ergebnis Das ausgew hlte Instrument kann jetzt von der Software gesteuert werden Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 4 Das Ger t und die Software 4 Das Ger t und die Software Zu diesem Kapitel Dieses Kapitel bietet eine bersicht ber KTA avant Ger t Software und Zubeh r
94. r Tage oder l nger nicht verwendet wird au erdem folgende Verfahren durchf hren e System und Einl sse unter Anwendung des System CIP Verfahrens mit Lagerungs l sung f llen z B 20 iges Ethanol S ulenreinigung Nach einem Methodenlauf folgende Schritte durchf hren e Die S ule unter Anwendung des Column CIP Verfahrens mit einer oder mehreren Reinigungsl sungen reinigen S ulenlagerung Wenn die S ule ein paar Tage oder l nger nicht verwendet wird au erdem folgende Verfahren durchf hren e Die S ule unter Anwendung des Column CIP Verfahrens mit Lagerungsl sung f llen z B 20 iges Ethanol Lagerung der pH Elektrode Die pH Durchflusszelle entsprechend der untenstehenden Anweisungen mit Lagerungs l sung f llen Die Kalibrierungsfunktion wird zum Schalten der pH Ventilposition verwen det Es wird aber keine Kalibrierung durchgef hrt Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 125 7 Eine Methode durchf hren 7 5 Verfahren nach dem Programmlauf Schritt Ma nahme 126 Das Modul System Control ffnen und System Calibrate w hlen Ergebnis Der Dialog Calibration wird ge ffnet Calibration System3 Morio to care EEE Cure vol Calibration procedure Prepare for calibration Calibration for pH electrode buffer 1 Description a pH calibrates the pH electrode with two point calibration Le using two pH calibration solutions It can also be used to
95. r wiederholen Ergebnis Kalibrierungsdatum und uhrzeit sowie die Werte f r Calibrated electrode slope und Asymmetry potential at pH 7 werden auf dem Dialog feld angezeigt Liegt die Calibrated electrode slope 2 80 und die Asymmetry potential at pH 7 innerhalb des Intervalls von 60 mV Wenn Ja Auf klicken um das pH Ventil zur ck in die Standard position zu schalten und das Calibration Dialogfeld zu schlie en e Wenn Nein Die pH Elektrode reinigen und das Kalibrierungsverfahren wiederholen Hilft dies nicht die Elektrode austauschen Informationen zur Reinigung und zum Austausch der pH Elektrode siehe Bedienungsanleitung Kapitel Wartung VORSICHT PH Elektrode Vorsicht beim Umgang mit der pH Elektrode Die Glasspitze kann zerbrechen und Verletzungen verursachen 98 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten Einf hrung In diesem Abschnitt wird beschrieben wie der Fraktionssammler vorbereitet wird Infor mationen zu den Arten von Deep Well Platten Schl uchen und Kassetten finden Sie unter KTA avant User Manual ACHTUNG Fraktionssammler Keine brennbaren Fl ssigkeiten fraktionieren Bei der Umkehrphasenchromatographie oder anderen Verfahren die organische L sungsmittel verwenden Fraktionen durch das Auslassventil sammeln Fraktionssammler vorbereiten Di
96. ren UV Monitor kalibrieren Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 145 9 Wartung 146 Wartungsarbeit Mischer austauschen O Ring im Mischer austauschen UV Durchflusszelle austauschen Durchflussbegrenzer austauschen Einlassfilter austauschen R ckschlagventile pr fen R ckschlagventile austauschen Pumpenkolbendichtungen austauschen Pumpenkolben austauschen Schl uche des Pumpensp lsystems austauschen Ventilmodule austauschen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Kontaktinformationen f r lokale Niederlassun gen finden Sie unter wwu gelifesciences com contact GE Healthcare Bio Sciences AB Bj rkgatan 30 75184 Uppsala Schweden www gelifesciences com AKTA imagination at work GE imagination at work und GE monogram sind Marken von General Electric Company KTA AxiChrom und UNICORN sind Marken von GE Healthcare companies Windows ist eine Marke von Microsoft Corporation 2009 2012 General Electric Company Alle Rechte vorbehalten Erste Ver ffentlichung Dezember 2012 Der Verkauf aller Waren und Dienstleistungen unterliegt den Verkaufsbedingun gen der Firma innerhalb von GE Healthcare die diese liefert Eine Kopie dieser Bedingungen ist auf Anfrage erh ltlich Wenden Sie sich an Ihren GE Healthcare Vertreter bez glich der aktuellsten Informationen UNICORN Die Verwendung dieser Software unterliegt den standardm
97. rfen sondern getrennt zu sammeln sind Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem autorisierten Vertreter des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung des Ger ts zu erhalten A O Dieses Symbol kennzeichnet Produkte deren m glicher Gehalt an sch dlichen Substanzen die im chinesischen Standard SJ T11363 2006 Requirements for Concentration Limits for Certain Hazardous Substances in Electronic Infor mation Products Anforderungen hinsichtlich der Konzen trationsh chstwerte f r bestimmte sch dliche Substanzen in elektronischen Informationsprodukten etablierten Grenzwerte berschreitet Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 3 Vorgehensweise in Notf llen 2 3 Vorgehensweise in Notf llen Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt die Durchf hrung einer Notausschaltung des KTA avant Systems Dieser Abschnitt beschreibt au erdem die Auswirkungen eines Strom ausfalls oder einer Netzwerkunterbrechung Notausschaltung In einem Notfall folgende Schritte ausf hren um den Programmlauf anzuhalten Schritt Ma nahme 1 Auf Pause auf dem Ger tedisplay dr cken Dies stoppt alle Pumpen im Ger t Um den Programmlauf von UNICORN aus anzuhalten auf das Pause Symbol klicken System Control Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 29 2 Sicherheitsanweisungen 2 3 Vorgehensweise in Notf llen Schritt Ma nahme 2 Nach Bedarf d
98. rsachen Versch t tete Fl ssigkeit kann eine Brandgefahr darstellen und Verlet zungen verursachen _ e Stromschlaggefahr nach Versch tten Wenn die Gefahr be steht dass gro e Mengen versch tteter Fl ssigkeit in das Ge h use des KTA avant Ger ts eindringen k nnen das Ger t sofort ausschalten das Stromkabel ziehen und einen Service techniker verst ndigen Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen ACHTUNG e Bewegen von Teilen im Fraktionssammnler Die Schublade des Fraktionssammlers nicht ffnen wenn der Fraktionssammler in Betrieb ist Ist Zugang zum Fraktionssammler erforderlich auf Pause dr cken und vor dem ffnen der Schublade sicher stellen dass die Bewegung angehalten hat e Verwenden eines Superloops Nach dem Laden eines Super loops den Syr Anschluss am Injektionsventil stets mit einem Verschlussstopfen schlie en Wenn ein Superloop an das Ventil angeschlossen ist kann w hrend der Einspritzung berdruck entstehen e Gef hrliche Chemikalien w hrend eines Laufs Bei der Ver wendung gef hrlicher Chemikalien System CIP und Column CIP ausf hren um das gesamte Schlauchsystem mit destillier tem Wasser durchzusp len bevor Instandsetzungs und War tungsarbeiten durchgef hrt werden e Gef hrliche biologische Substanzen w hrend eines Laufs Bei Verwendung von gef hrlichen biologischen Substanzen System CIP und Col
99. s Ger t entspricht den Regeln von Abschnitt 15c Der Betrieb des Systems unterliegt folgenden beiden Bedingungen e Dieses Ger t darf keine sch dlichen St rungen verursachen und e das Ger t muss gegen ber eingehenden St rungen st rfest sein einschlie lich St rsignale die einen unerw nschten Betrieb ausl sen k nnen Der Benutzer wird eindringlich darauf hingewiesen dass jegliche nicht ausdr cklich vom Hersteller genehmigten nderungen oder Modifika tionen dazu f hren k nnen dass die Genehmigung des Benutzers zur Bedienung des Ger ts erlischt UNICORN 6 ist technisch mit allen relevanten Abschnitten der FDA 21 CFR Part 11 kom patibel Eine Bewertunggsliste f r ein Part 11 System ist auf Anfrage ber den rtlichen GEHC Vertreter erh ltlich Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 1 Einf hrung 1 2 Beh rdliche Vorschriften Einhaltung der Vorschriften der angeschlossenen Ger te Alle Ger te die an das KTA avant angeschlossen sind m ssen die Sicherheitsanforde rungen von EN 61010 1 IEC 61010 1 oder andere relevante harmonisierte Normen er f llen Innerhalb der EU m ssen angeschlossene Ger te das CE Kennzeichen aufweisen Umweltkonformit t Bestimmung Titel 2011 65 EU Richtlinie zur Beschr nkung der Verwendung bestimmter gef hrlicher Stoffe RoHS Richtlinie 2002 96 EG Richtlinie ber die Abfallentsorgung von Elektro und Elektronikaltger ten WEEE EG Ver
100. ssammlers nicht ffnen wenn der Fraktionssammler in Betrieb ist Ist Zugang zum Fraktionssammler erforderlich auf Pause dr cken und vor dem ffnen der Schublade sicherstellen dass die Bewegung angehalten hat Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 103 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 6 Fraktionssammler vorbereiten Inhalt des Fraktionssammlers ansehen Um den Inhalt des Fraktionssammlers anzusehen das System control Ger t ffnen und View Fraction Collector Content ausw hlen Fraction Collector Content System3 kak aalala F HHH 0 0o EEEBEEELELIE 00 3 z Q 8 D n D fe 104 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 7 Vorbereitung f r einen Programmlauf in einem K lteschrank 6 7 Vorbereitung f r einen Programmlauf in einem K lte schrank Einf hrung Damit das Instrument KTA avant in einen K lteschrank passt k nnen die Faltt r und der Pumpenabdeckung entfernt werden Anweisungen siehe KTA avant User Manual Wenn das Instrument in einer K ltekammer oder einem K lteschrank verwendet wird sicherstellen dass die nachstehenden Vorsichtsma nahmen ergriffen werden Vorsichtsma nahmen f r Programml ufe in einem K lteschrank HINWEIS Kondensation vermeiden Wenn der KTA avant in einer K ltekam mer einem K lteschrank oder einem hnlichen Bereich aufg
101. ssventil A schaltet auf den ausgew hlten Anschluss Eine 25 30 ml Spritze an das Sp lventil des linken Pumpenkopfs von System pumpe A anschlie en Sicherstellen dass die Spritze fest in den Sp lanschluss passt Das Sp lventil ffnen indem es um eine Dreiviertelumdrehung gegen den Uhrzeigersinn gedreht wird Eine kleine Menge Fl ssigkeit langsam in die Spritze ziehen mit einer Rate von etwa 1 ml pro Sekunde Das Sp lventil im Uhrzeigersinn drehen um das Sp lventil zu schlie en Die Spritze abziehen und den Inhalt entleeren Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Schritt Ma nahme 6 Die Spritze an das Sp lventil am rechten Pumpenkopf von Systempumpe A anschlie en und die Schritte 5 6 wiederholen Den Systemfluss aufrechter halten Beenden des Programmlaufs Auf das Symbol End in der System Control Symbolleiste klicken um den Programmlauf zu beenden al Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 9 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 4 Anschlie en einer S ule 6 4 Anschlie en einer S ule Einf hrung In diesem Abschnitt wird beschrieben wie eine S ule unter Verwendung eines S ulen halters und ohne Luft in den Str mungsweg eintreten zu lassen an das Instrument an geschlossen wird F r KTA avant sind mehrere S ulenhalter verf gbar ACHTUNG
102. ste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 51 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 3 Auswertungsmodul 4 3 3 Auswertungsmodul Einf hrung Das Evaluation Modul wird zur Auswertung der Ergebnisse eines Chromatographielaufs verwendet Auswertungsfenster 52 Wie unten dargestellt enth lt das Evaluation Modul drei Fenster Wenn ein Ergebnis aus dem Result Navigator 1 heraus ge ffnet wird wird das Chromatogram Fenster 2 angezeigt Nach Durchf hrung einer Peakintegration werden Einzelheiten ber die Peaks im rechten unteren Fenster 3 sowie unter den Registerkarten Peak data und In tegration summary angezeigt Au erdem ist es m glich im Evaluation Modul die vollst ndige Dokumentation der Ergebnisse anzuzeigen und Berichte zu erstellen wad Faces um Fred Mend an EA Renas Ool fends ir Foda ne KH UNCOPN Dauba Buwa Bimma Daai Pesi name Neiman ji Ama EmA Hape AU wW s 31728 188497 a urs Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA Symbole in der Auswertungs Symbolleiste Die untenstehende Tabelle zeigt die Symbole in der Evaluation Symbolleiste auf die in diesem Erste Schritte verwiesen wird Symbol m Funktion Open Result Navigator ffnet den Result Naviga tor in dem verf gbare Er gebnisse aufgef hrt wer den Symbol 4 Das Ger t und die Software 4 3 UNICORN Softwaremodule 4 3 3 Auswertungsmodul Fu
103. t KTA avant 29 0351 83 AA 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften 6 3 _Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Einf hrung Vor dem Gebrauch der Systempumpen sind folgende Punkte wichtig 1 die Einl sse vorgef llt werden die Puffereinl sse mit Fl ssigkeit gef llt werden 2 die Systempumpen entl ftet werden die Luft aus den Pumpenk pfen entfernt wer den bersicht Das Verfahren besteht aus folgenden Phasen Alle w hrend des Programmlaufs zu verwendenden Einlassschl uche B vorf llen Alle w hrend des Programmlaufs zu verwendenden Einlassschl uche A vorf llen Das System vor dem Sp len der Systempumpen vorbereiten 1 2 3 4 Systempumpe B sp len 5 Systempumpe A sp len 6 Beenden des Programmlaufs Vorf llen Einlassschlauch B Zum F llen aller Einlassschl uche B die im Durchlauf mit dem entsprechenden Puffer der entsprechenden L sung verwendet werden sollen die nachstehenden Anweisungen befolgen Schritt Ma nahme 1 Sicherstellen dass alle Einlassschl uche B die f r den Methodenlauf verwen det werden sollen in die korrekten Puffer getaucht werden Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 83 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 3 Puffereinl sse vorf llen und Systempumpen entl ften Schritt Ma nahme 2 Im Dialogfenster Manual instructions e Flow path Inlet B ausw hlen e
104. t z B Program Files GE Health care UNICORN bin UNICORN Instrument Server exe config Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 9 1 Einf hrung 1 2 Beh rdliche Vorschriften 1 2 Beh rdliche Vorschriften Einf hrung Dieser Abschnitt beschreibt die Richtlinien und Normen die das KTA avant erf llt Herstellerinformationen Die folgende Tabelle enth lt eine Zusammenfassung der erforderlichen Herstellerinfor mationen Weitere Informationen finden Sie in der EU Konformit tserkl rung Anforderung Inhalt Name und Anschrift des Herstellers GE Healthcare Bio Sciences AB Bj rkgatan 30 SE 751 84 Uppsala Schweden CE Konformit t Dieses Produkt erf llt die entsprechenden harmonisierten Normen und entspricht somit den in der nachstehenden Tabelle aufgef hrten europ ischen Richtlinien Weitere Infor mationen siehe EU Konformit tserkl rung Richtlinie Titel 2006 42 EG Maschinenrichtlinie 2006 95 EG Niederspannungsrichtlinie 2004 108 EG Richtlinie zur elektromagnetischen Vertr glichkeit EMV 1999 5 EG Richtlinie ber Funkanlagen und Telekommunikations endeinrichtungen R amp TTE CE Kennzeichnung ce Die CE Kennzeichnung und die entsprechende EG Konformit tserkl rung gilt f r das Ger t wenn es e als eigenst ndiges Ger t verwendet wird oder 10 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 1 Einf hrung 1 2 Beh rdliche
105. tel enth lt die folgenden Abschnitte Abschnitt Siehe auf Seite 8 1 Die Ergebnisse anzeigen 130 8 2 Peakintegration 134 8 3 Die Ergebnisse ausdrucken 139 129 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 1 Die Ergebnisse anzeigen 8 1 Die Ergebnisse anzeigen Einf hrung Ein Ergebnis enth lt eine komplette Aufzeichnung des Programmlaufs einschlie lich Methode Systemeinstellungen Chromatogramm und Programmlaufprotokoll Dieser Abschnitt beschreibt wie ein Ergebnis angezeigt wird und wie die Anzeigeeinstellungen im Evaluation Modul ge ndert werden Ein Ergebnis ffnen Die nachstehenden Anweisungen befolgen um ein Ergebnis zu ffnen Schritt Ma nahme 1 Das Evaluation Modul ffnen und auf das Open Result Navigator Symbol klicken ei Ergebnis Das Result Navigator wird ge ffnet Results Recent Runs Find Results Open Ham e Results DoE Results X Folder name System a Eric Methods E Results m Runt System3 PI Runz System3 2 Die Results Registerkarte ausw hlen 3 Das zu ffnende Ergebnis ausw hlen und auf die Open a Result Schaltfl che auf der Navigator Symbolleiste klicken Open Ergebnis Das Ergebnis wird in einem Chromatogram Fenster ge ffnet Verf gbare Chromatogramme und Peak Tabellen werden angezeigt 130 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 8 Ergebnisse auswerten und drucken 8 1 Die Ergebn
106. uffer 1 calibration ie using two pH calibration solutions It can also be used to fill the pH cell with storage solution since the pH valve is in calibration position pH for buffer 2 For calibration preferably use pH standard buffers pH 4 or 7 as the first calibration point and a pH standard buffer close to the lowest or highest pH Last calibrated on 2009 01 13 10 52 07 01 00 you need to measure as your second point Calibrated electrode slope Parameters PH for buffer 1 Assymetry potential at pH 7 mv pH for buffer 2 ern tt u b4 2 Den pH Monitor als Monitor to calibrate einstellen Hierzu pH aus der Liste ausw hlen 5 Klicken Prepare for calibration Ergebnis Das pH Ventil schaltet in die Kalibrierposition 4 Den pH Wert des ersten pH Standardpuffers im Feld pH for buffer 1 einge ben Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 97 6 Das System auf einen Programmlauf vorbereiten 6 5 Den pH Monitor kalibrieren Schritt Ma nahme 5 10 Eine Spritze mit ca 10 ml des ersten pH Standardpuffers aufziehen Die Spritze an den Luer Anschluss im pH Ventilport Cal anschlie en und den Puffer injizieren Wenn Current value stabil ist Folgendes anklicken Die pH Durchflusszelle waschen Hierzu Wasser mit einer neuen Spritze in den pH Ventilport Cal injizieren Den pH Wert des zweiten pH Standardpuffers im Feld pH for buffer 2 einge ben Schritte 5 6 mit dem zweiten pH Standardpuffe
107. umn CIP ausf hren um s mtliche System schl uche mit bakteriostatischer L sung zu sp len z B NaOH gefolgt von einem neutralen Puffer und destillierttem Wasser bevor Instandsetzungs und Wartungsarbeiten durchgef hrt werden 22 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen VORSICHT Um gef hrliche Situationen beim Betrieb des KTA avant Systems zu vermeiden die nachstehenden Anweisungen befolgen Explosionsgefahr Keine 15 ml Mischerkammer in KTA avant 25 verwenden Der Maximaldruck f r die 15 ml Mischerkammer betr gt 5 MPa Risiko eines Bruchs der Glasfl schchen Keine berm ige Kraft auf die Glasfl schchen anwenden wenn Fl schchen der falschen Gr e in die Kassetten des Fraktionssammlers ge dr ckt werden Die Glasfl schchen k nnen zerbrechen und Verletzungen verursachen Gef hrliche Chemikalien oder biologische Substanzen in der UV Durchflusszelle Sicherstellen dass die gesamte Durchfluss zelle vor Instandsetzung und Wartung gr ndlich mit bakteri ostatischer L sung z B NaOH und destilliertem Wasser gesp lt wurde PH Elektrode Vorsicht beim Umgang mit der pH Elektrode Die Glasspitze kann zerbrechen und Verletzungen verursachen Max Gewicht auf der Pufferablage Keine Beh lter mit einem Fassungsverm gen von mehr als je 10 Litern auf die Pufferab lage stellen Das zul ssige Gesamtgewicht auf der Pufferablage ist 40
108. usw hlen wollen auf welche Kurve sich die Skala der Y Achse be zieht klicken Sie auf die interessierende Kurve Ergebnis Die Skala der Y Achse ndert sich auf die Einheit die auf die Kurve zutrifft an die Kurven heranzoo men wollen w hlen Sie den gew nschten Bereich aus Hierzu den Mauszeiger mit gedr ckter linker Maustaste bewegen Ergebnis Der ausgew hlte Bereich wird vergr ert Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 121 7 Eine Methode durchf hren 7 4 Methode berwachen Wenn Sie wieder herauszoomen klicken Sie mit der rechten Maustaste und w hlen Sie Re wollen set Zoom Ergebnis Der urspr ngliche Bereich wird in einem Schritt wiederhergestellt Programmlaufprotokoll konfigurieren Das Run Log Fenster zeigt alle registrierten Aktionen w hrend des Programmlaufs an Nach oben scrollen um das gesamte Protokoll anzusehen ndern der im Fenster anzuzeigenden Elemente e Auf das Customize Symbol klicken um den Customize Dialog zu ffnen Aral Ag Inder Run Log Registerkarte die anzuzeigenden Elemente ausw hlen Customize System3 Run Data Groups Run Data Color Curves Curve Style and Color XAsis Y Axis Run Log 7 Autoscroll ncluded entry types Included feedback types Set Mark Issued Block Start Processing 7 v 7 Alarms Wamings and Errors Completed V Method Failed v v
109. vant 29 0351 83 AA 5 Ein Verfahren erstellen 5 1 Leitfaden zur Erstellung einer Methode 5 1 2 Vordefinierte Methoden Methode Beschreibung Column Perfor mance Test Nach der quilibrierung der S ule wird die Probe injiziert und iso kratisch eluiert Es sollte eine nicht absorbierende Probe wie Aceton oder Salz verwendet werden Nach dem Programmlauf die S ulenleistung im Auswertungsmodul berechnen Die Leistung der S ule wird durch die H he im Vergleich zu einer theoretischen Platte HETP und dem Peak Asymmetriefaktor A bestimmt Das Ergebnis wird im Logbuch der S ule protokolliert Column Prepa ration Die S ule wird mit einer Reinigungsl sung gef llt Einlasspositionen ausw hlen Die Identit t der L sung Durchflussrate und Inkuba tionsdauer eingeben Durch Hinzuf gen weiterer Schritte k nnen mehrere Pr parationsl sungen verwendet werden Desalting DS Nach der quilibrierung und der Probenapplikation werden die Proteine isokratisch eluiert Dieses Verfahren wird h ufig beim Pufferaustausch angewendet Gel Filtration GF Nach der quilibrierung und der Probenapplikation werden Prote ine je nach Gr e getrennt und eluiert die gr ten zuerst Hydrophobic Interaction Chromatogra phy HIC Nach der quilibrierung und der Probenapplikation einen Puffer mit hoher Salzkonzentration verwenden zum Beispiel 2 M Ammo niumsulfat werden hydrophobe Proteine in den S ulenliganden
110. welche Kurve integriert werden soll z B UV1_280 f r Prote ine e Eine Peak Zieltabelle zum Speichern des Ergebnisses ausw hlen e Calculate baseline aus der Baseline Liste ausw hlen e Auf OK klicken Peak Integrate Chromatogram Target peak table Chrom 1 001 UY 1 EEE A 002 UY 2_0_Chrom 1 Manual Run 001 Result recove 003 UY 3_0_Chrom 1 Manual Run 001 Result recove 004 Cond_Chrom 1 Manual Run 001 Result recovere 005 Cond_Chrom 1 Manual Run 001 Result recove 006 Conc B_Chrom 1 Manual Run 001 Result recove 007 pH_Chrom 1 Manual Run 001 Result recovered 008 System flow_Chrom 1 Manual Run 001 Result re 009 System pressure_Chrom 1 Manual Run 001 Rest 010 Cond temp_Chrom 1 Manual Run 001 Result rec 013 Sample flow_Chrom 1 Manual Run 001 Result re 014 Sample pressure_Chrom 1 Manual Run 001 Res 015 PreC pressure_Chrom 1 Manual Run 001 Result 016 DeltaC pressure_Chrom 1 Manual Run 001 Resu NN Past nressiire Phram 1 Man al Riun AN fRas ll gt u wu Peak table name UV 1_280 01 PEAK s Peak Window 4 ccept negative peak Baseline Settings Reject Peaks O Peak skim 1 00 ratio Baseline Column height bed height 0 00 cm Column Vt 0 00 Ergebnis Die Peak Table wird unter dem aktiven Chromatogramm angezeigt und die Start und Endpunkte jedes Peaks werden durch vertikale Markierun gen im Chromatogramm gekennzeichnet Erste Schritte
111. z e Einbau und Verstellen des Ger ts e Systembedienung e Wartung Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 15 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen Allgemeine Vorsichtsma nahmen ACHTUNG Bei Verwendung dieses KTA avant Ger ts stets diese allgemeinen Vorsichtsma nahmen befolgen um Verletzungen zu vermeiden e Das KTA avant Ger t nur auf die in den Handb chern KTA avant und UNICORN beschriebene Weise bedienen e Die Bedienung und Wartung des KTA avant Ger ts darf nur von entsprechend geschultem Personal durchgef hrt werden e Um zu vermeiden dass die S ule zu hohem Druck ausgesetzt wird sicherstellen dass die Druckgrenze auf den angegebenen H chstdruck der S ule eingestellt ist Vor Anschluss einer S ule an das KTA avant Instrument die Gebrauchsanleitung der S ule lesen e Kein Zubeh r verwenden das nicht von GE Healthcare geliefert oder empfohlen wurde e Das KTA avant Instrument keinesfalls verwenden wenn es nicht ordnungsgem funktioniert bzw besch digt wurde zum Beispiel Besch digung des Netzkabels oder Steckers Besch digung durch Fallenlassen des Ger ts Besch digung durch Fl ssigkeiten HINWEIS Vermeiden von Kondensatbildung indem das Instrument an die Umgebungstemperatur angeglichen wird 16 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 2 Sicherheitsanweisungen 2 1 Sicherheitsvorkehrungen Verwendung von brennbar
112. zungen f hren kann falls sie nicht vermieden wird Es darf erst dann fortgefahren werden wenn alle angegebenen Bedingungen erf llt und verstanden wurden Vorsichtsma nahmen VORSICHT VORSICHT Weist auf eine gef hrliche Situation hin die zu leichten oder mittelschweren Verletzungen f hren kann falls sie nicht ver mieden wird Es darf erst dann fortgefahren werden wenn alle angegebenen Bedingungen erf llt und verstanden wurden 8 Erste Schritte mit KTA avant 29 0351 83 AA 1 Einf hrung 1 1 Wichtige Informationen f r Benutzer Hinweise HINWEIS HINWEIS Weist auf Anweisungen hin die befolgt werden m ssen um Sch den am Produkt oder anderen Ger ten zu vermeiden Anmerkungen und Tipps Anmerkung Eine Anmerkung weist auf Informationen hin die f r eine st rungsfreie und optimale Verwendung des Produkts wichtig sind Tipp Ein Tipp enth lt n tzliche Informationen die Ihre Verfahren verbessern oder optimieren k nnen Typographische Konventionen Software Elemente werden im Text durch kursive Fettschrift gekennzeichnet Ein Dop pelpunkt trennt Men ebenen So bezieht sich File Open auf das Kommando Open im Men File Hardware Steuerung Anzeigen und Verbindungen werden im Text durch fettgedruckte Schrift gekennzeichnet z B Power Schalter Texteintr ge die von UNICORN erstellt oder vom Anwender eingegeben werden werden durch eine Monotype Schriftart dargestell

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