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1. BIOLABO www biolabo fr FABRICANTE BIOLABO SAS Les Hautes Rives BIOLABO 02160 Maizy France CALCIO M todo CPC Reactivo para la determinaci n cuantitativa del calcio en plasma suero humano u orina REF 80004 R11x200 mL R21x200 mL R31x10 mL SOPORTE TECNICO Y PEDIDOS Tel 33 03 23 25 15 50 Fax 33 03 23 256 256 CODIGO CNQ E2 USO IN VITRO AAA OUN SIGNIFICACION CLINICA 1 2 El calcio total est constituido por 3 diferentes formas qu micas en el plasma de las cuales aproximadamente el 50 est bajo forma de calcio libre o ionizado 40 est ligado a las prote nas del plasma y el 10 se acopla a peque os aniones La concentraci n del calcio s rico puede estar alterada por una mala absorci n intestinal por una alteraci n de la tasa de prote nas plasm ticas en particular la alb mina la cual es importante determinar conjuntamente a la tasa de calcio La hipercalcemia est asociada al hiperparatiroidismo al mieloma m ltiple a las neoplasias seas y paratiroideas y a los estados acompa ados de una desmineralizaci n r pida del hueso La hipocalcemia est asociada al hipoparatiroidismo y en ciertos casos a la nefrosis y a la pancreatitis aguda AAA PRINCIPIO 4 El m todo CPC descrito derivado de Moorehead y Briggs permite determinar la concentraci n de Calcio total en el suero el plasma o en la orina En medio alcalino la O cresolftale na complexo2. Los viales de pl stico o de cristal son susceptibles de adsorber el calcio durante el almacenamiento sobre todo en soluciones diluidas Una estancia prolongada en el congelador puede conllevar una evaporaci n una liofilizaci n o una coprecipitaci n con la fibrina plasma heparinizado o los l pidos INTERFERENCIAS 3 El an lisis dicrom tico o multilongitud de onda o la realizaci n de un blanco suero permiten reducir las interferencias positivas o negativas ligadas a una hem lisis importante ictericia lipemia o paraprote nas La interferencia del magnesio es reducida por la Hidroxi 8 quinole na Para evitar cualquier contaminaci n con el calcio medioambiental manipular con precauci n los controles muestras y calibradores Utilizar preferentemente tubos o cubetas de uso nico lavar la cristaler a con HCI 0 1 N y enjuagar bien con agua desmineralizada Young D S ha publicado una lista de las sustancias que interfieren con la prueba Versi n 03 03 2014 REACTIVOS Y MATERIAL COMPLEMENTARIO 1 Equipamiento de base del laboratorio de an lisis m dico 2 Sangres de control normales y patol gicos 3 EDTA soluci n 10 mM para efectuar un blanco suero A CALIBRACION 6 e Standard de la caja vial R3 o BIOLABO Multicalibrator 95015 trazable sobre srm909b e O cualquier calibrador trazable sobre un m todo o un material de referencia La frecuencia de calibraci n depende de las prestaciones del analizador y de
3. BRIGGS H G Clin Chem 1974 20 p 1458 1460 5 W L CLARCK E L BALINSKI S S MARIE et B ZAK Spectrometric Study of a direct determination of Serum Calcium Microchem J 20 1975 p 22 32 6 SPRM Standard Referrence Material o Lii LOT AN e gt Fabricante Fecha de caducidad Uso in vitro Temperatura de conservaci n Referencia del producto Consultar instrucciones Numero de lote Protegido de la luz Suficiente para Diluir con Made in France Ultima Versi n www biolabo fr Versi n 03 03 2014
4. de los deshechos respetar la legislaci n en vigor Por medida de seguridad tratar toda muestra como potencialmente infecciosa Respetar la legislaci n en vigor AAA ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Almacenar a 18 25 C en el vial de origen bien cerrado y protegido de la luz e Standard vial R3 transvasar la cantidad necesaria tapar bien de nuevo y almacenar a 18 25 C e En ausencia de contaminaci n los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja almacenados y utilizados en las condiciones adecuadas e El reactivo de trabajo es estable un d a en ausencia de contaminaci n e No utilizar el reactivo si hay turbidez o si su absorbencia a 570 nm es gt 0 400 e No utilizar el reactivo de trabajo despu s de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja AAA A AA TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA 1 Suero o plasma heparinizado No utilizar el citrato el oxalato o el EDTA Extraer la sangre del paciente en ayunas con un m nimo de estasis venosa y fuera de todo ejercicio f sico o despu s de haber restaurado la circulaci n durante por lo menos 1 minuto Orina de 24 h acidificar durante la prueba con 20 a 30 mL de HCI 6N para disolver todo el calcio eventualmente precipitado Mezclar bien y despu s diluir 1 2 en agua desmineralizada antes de la prueba El calcio es estable en el suero e Por lo menos 7 d as a 2 8 C e 6 meses a 20 C
5. las condiciones de conservaci n del reactivo Se recomienda calibrar nuevamente en los siguientes casos 1 Cambio de lote del reactivo 2 Despu s de operaci n de mantenimiento sobre el analizador 3 Los valores de control obtenidos salen de los l mites de confianza incluso despu s de la utilizaci n de un segundo vial de suero de control reci n reconstituido CONTROL DE CALIDAD e BIOLABO EXATROL N Tasa 95010 e BIOLABO EXATROL P Tasa Il 95011 e Cualquier otro suero de control titulado para este m todo e Programa externo de control de calidad Es recomendado controlar en los siguientes casos e Al menos un control por rutina e Al menos un control cada 24 horas e Cambio de vial del reactivo e Despu s de operaci n de mantenimiento sobre el analizador Cuando un valor de control se encuentra fuera de los l mites de confianza recomendados aplicar las siguientes acciones correctivas 1 Repetir la operaci n utilizando el mismo control 2 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites preparar un suero de control reci n reconstituido y repetir el test 3 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites utilizar otro calibrador o un calibrador reci n reconstituido y repetir el test 4 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites calibrar nuevamente utilizando otro vial de reactivo y repetir el test 5 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites contactar el servicio t cnico BIOLABO o el distrib
6. eactivo MODO DE EMPLEO TECNICA MANUAL La intensidad de la coloraci n var a con la temperatura Mantener la temperatura constante durante toda la serie de medida Mezclar bien Incubar 5 minutos a temperatura ambiente Leer las absorbencias a 570 nm 550 590 contra el blanco reactivo La coloraci n es estable una hora protegida de la luz Notas v Sueros turbios o ict ricos despu s de haber le do las absorbencias seg n el modo de empleo indicado arriba efectuar un blanco suero a adiendo una gota EDTA soluci n 10 mM 25 uL a los tubos prueba y blanco reactivo mezclar y leer nuevamente Deducir este valor del le do anteriormente para la muestra v An lisis dicrom tico 2 longitud de onda 500 650 700 nm v Procedimientos espec ficos est n disponibles para los analizadores autom ticos Contactar el servicio t cnico BIOLABO A CALCULO El resultado est determinado seg n la siguiente f rmula Abs Pruebas gt NE ASA Suero o plasma Resultado N s St ndard X Concentraci n del Standard Orinas diluidas 1 2 multiplicar el resultado por 3 factor de diluci n BIBLIOGRAFIA 1 TIETZ N W Text book of clinical chemistry 3 Ed C A Burtis E R Ashwood W B Saunders 1999 p 1395 1406 p 1435 1439 2 Clinical Guide to Laboratory Test 4 Ed N W TIETZ 2006 p 202 207 3 YOUNG D S Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests 4 Ed 1995 p 3 115 3 124 4 MOOREHEAD W R
7. n o CPC reacciona con los iones calcio para formar un complejo coloreado rojo oscuro del cual la absorbencia medida a 570 nm es proporcional a la concentraci n en calcio de la muestra REACTIVOS TAMPON Concentraci n en el test Amino 2 methil 2 propanol 1 1 70 mol L pH 11 0 a 20 C Acido clorh drico 210 mmol L Xi R36 38 Irrita los ojos y la piel R52 53 Nocivo para los organismos acu ticos puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio ambiente acu tico S36 37 39 Usar indumentaria y guantes adecuados y protecci n para los ojos la cara CROMOGENO Concentraci n en el test O cresolftale na complexon 78 pmol L Hidroxi 8 Quinole na 3 36 mmol L Acido clorh drico 25 mmol L Vial R3 STANDARD Calcio 10 mg dL 2 5 mmol L PREPARACION DE LOS REACTIVOS Reactivo de trabajo mezclar 1 volumen del vial R1 con 1 volumen del vial R2 en un vial cuidadosamente lavado Se pueden tambi n a adir los reactivos por separado Made in France Ultima Versi n www biolabo fr PRECAUCIONES Los reactivos BIOLABO est n destinados nicamente a profesionales para uso in vitro e Verificar la integridad de los reactivos antes de su utilizaci n e Utilizar equipamientos de protecci n bata guantes gafas e No pipetear con la boca e En caso de contacto con la piel o los ojos enjuagar abundantemente y consultar al m dico e Laficha de datos de seguridad puede obtenerse por petici n e Eliminaci n
8. uidor local CODE CNQ E2 INTERVALOS DE REFERENCIA 2 CALCIO total En el suero Poblaci n mg dL mmol L Prematuro 6 2 11 0 1 55 2 75 0 10 d as 7 6 10 4 1 90 2 60 10 d as 24 meses 9 0 11 0 2 25 2 75 24 meses 12 a os 8 8 10 8 2 20 2 70 12 a os 18 a os 8 4 10 2 2 10 2 55 18 60 a os 8 6 10 0 2 15 2 50 60 90 a os 8 8 10 2 2 20 2 55 gt 90 a os 8 2 9 6 2 05 2 40 En orinas de 24 h 100 300 mg 24 h 2 5 7 5 mmol 24 h Se recomienda a cada laboratorio definir sus propios intervalos de referencias para la poblaci n estimada PRESTACIONES Intra serie Tasa Tasa Inter serie Tasa Tasa N 20 media elevada N 20 media elevada Media mg dL 8 69 Media mg dL 10 35 13 06 S D mg dL 0 116 0 212 S D mg dL 0 06 C V 0 7 C V 1 12 1 62 L mite de detecci n aproximadamente 0 16 mg dL Sensibilidad para 1 mg dL 0 105 Abs a 570 nm Comparaci n con reactivo comercial y 1 0249 x 0 237 r 0 9985 tal z IVD K E LIMITE DE LINEALIDAD 5 La reacci n es lineal entre 7 5 y 17 5 mg dL 1 88 a 4 37 mmol L Por debajo de 7 5 mg dL aumentar la toma de muestra y calcular de nuevo el resultado Ej para V 50 uL multiplicar el resultado por 0 51 M s all de 17 5 mg dL diluir la muestra con agua desmineralizada exenta de calcio y hacer nuevamente la prueba teniendo en cuenta la diluci n en el c lculo del resultado El l mite de linealidad depende de la relaci n de la diluci n muestra r
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