1006 B 27 single Box
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1. PCR 8 Protocolo de electroforese em gel de agarose 9 0197 Prepara o do gel a 2 9 Electroforese PARE DER PRE e ERREI Esquema da placa HLA B 27 Single 1 0 RREO Identifica o da placa HLA B 27 Single 1 0 10 Folha de interpreta o dos Resultados 11 Tabela de interpreta o dos Resultados LI Guia de resolu o de problemas eerees 12 ege Aaa EE E aa 13 U genesox Gula TECNICO ricino aiaiai LA EN pesenvorvmenTo E PRODU O Garantias acasigis sap tengo anseia LD biocant centro de inova o em biotecnologia Aviso de Garantia iasence n eian area iiu argain 16 n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal Folha de dados de seguran a 18 Declara o de Conformidade ccemeemenenmee L7 tel 351 231 410 946 eter ncias fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 22 24 3 24 O HLA B 27 tem vindo a ser associado a v rias doen as inflamat rias e autoimunes destacando se a artrite reumat ide a espondilite anquilosante o sindroma de Bechterew o sindroma de Reiter a espond lose uve tes etc Contudo nem todos os subtipos do HLA B 27 est o directamente associados a estas doen as Este kit cont m placas com misturas de primers desidratadas e PCR Master Mix para efectuar a identifica o do alelo HLA B 27 Altera es e melhoramento do Produto O kit HLA B 27 Single est constantemente a ser actualizado ao n vel da2. ou 202C Ao optar pela congela o das amostras devem ser evitadas ciclos repetidos de congela o descongela o de modo a impedir a degrada o da amostra As amostras de DNA armazenadas em dH 0 permanecem est veis durante pelo menos 4 semanas a 42C ou 2 anos a 202C As amostras de DNA armazenadas em tamp o TE permanecem est veis durante pelo menos 2 anos a 42C ou 5 anos a 20 C 15 24 Guia T cnico 1 Pureza e Concentra o do DNA Para obter bons resultados com o HLA B 27 Single 1 0 Typing Kit a pureza da amostra de DNA cr tica Ter uma amostra pura significa obter uma raz o 260nm 280nm de DO superior a 1 6 e uma por o de DNA superior a 9 4 kb A elevada degrada o do DNA ou uma raz o 260nm 280nm inferior a 1 5 requer uma nova extrac o de DNA Cada amostra de DNA deve ter aproximadamente 100 a 200 ng l Concentra es elevadas de DNA provocam um decl nio consider vel na especificidade da PCR Recomenda se o uso de qualquer kit de extrac o de DNA que apresente marca o CE de modo a obter um DNA extra puro tr M 2 Taq Polimerase O HLA B 27 Single 1 0 Typing Kit foi intensivamente testado utilizando a Taq da Reagente 5 Reagente 5 Lisboa Portugal 3 Mistura de reac o Para uma boa performance da tipagem com o HLA B 27 Single 1 0 Typing Kit obrigat ria a utiliza o da PCR Master Mix fornecida com o Kit 4 Procedimentos de amplifica o No fim da PCR exam
3. 0197 HIH U genesox 000 DESENVOLVIMENTO EPREDU O DE TESTES DE DIAGN STICO biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 24 24 C digo do Produto 10 06 HLA B 27 Single Box 1 0 Typing Kit Dispositivo para utiliza o in vitro Manual de Instru es oqo oe geneBox 000 DESENVOLVIMENTO E PRODU O DE TESTES DE DIAGN STICO Vers o1 6 Junho de 2011 0197 As euVe genesox 000 DESENVOLVIMENTO E PRODU O DE TESTES DE DIAGN STICO biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 2 24 Sis eve genesox 000 DESENVOLVIMENTO EIPRODU O biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel 351 231 410 946 fax 351 231 410 947 e mail info genebox com www genebox com 23 24 Apresenta o iene rrenan eram anas 4 Altera es e Melhoramento do produto 4 Controlo da Qualidade D Valida o Linhas Celulares aan Ena a ado coa at n atado Componentes do HLA B 27 Single 1 0 Typing Kit 6 Protocolo de amplifica o por PCR 7 REAGENTES anina i yani a Extrac o de DNA 7 Amplifica o por PCR T Par metros do programa de
4. 4 IHW 09377 FH5 IHW 09380 FH6 N o foram registados Falsos positivos ou falsos negativos O controlo negativo pode detectar contamina o cruzada com produtos de PCR Valida o Linhas Celulares Kit de tipagem por PCR SSP HLA B 27 Single Tipagem celular Linha celular Po os positivos HLA A HLA B HLA Cw 9380 FH6 2402 2901 2702 0705 6 02022 1505 Todos 9376 FH4 0101 2703 2705 02022 Todos 9266 PAR 11011 2402 2706 4801 03041 0801 Todos 9377 FH5 2902 0201 2709 4403 0102 1601 Todos 5 24 Componentes do HLA B27 Sino e Placas de tipagem de HLA B 27 88 tipagens 4 Placas 22 amostras cada conservar de 15 a 302C e Mistura de reac o com Taq Polimerase 4 X 80 ul conservar de 15 a 302C e Selantes de Placas 12 c psulas selantes e Manual de instru es 1 Manual de Instru es com pares de primers espec ficos desidratados 22 pares de primers espec ficos 1 controlo positivo e 1 controlo negativo por placa Componentes da PCR Master Mix Nucle tidos concentra o final de cada dNTP 600 uM Tamp o da PCR concentra es finais s o 3 3x NH4 2 0 mM MgCl e 0 4 u ul Taq DNA polimerase pH 8 3 Glicerol concentra o final 16 6 Vermelho de cresol concentra o final de 300ug ml 6 24 Folha de Dados de Seguran a 2 3 Material Safety Data Sheet MSDS 6 Protec o pessoal Protec o das m os use luvas ap
5. 714 718 7 Tamouza R Mansour Bouguacha N Klayme S Djouadi K Laoussadi S Azoury M Dulphy N Ramasawmy R Krishnamoorthy R Toubert A Naman R Charron D A new HLA B 27 allele B 2719 identified in a Lebanese patient affected with ankylosing spondylitis Tissue Antigens 2001 58 30 33 8 Orchard TR Thiyagaraja S Welsh KI Wordsworth BP Hill Gaston JS Jewell DP Clinical phenotype is related to HLA genotype in the peripheral arthropathies of inflammatory bowel disease Gastroenterology 2000 118 274 278 9 Hemmatpour SK Dunn PP Evans PR Green A Howell WM Functional characterization and exon 2 intron 2 exon 3 gene sequence of HLA B 2712 as found in a British family Eur J Immunogenet 1998 25 395 402 10 Fraile A Martin J Lopez Nevot MA Mataran L Nieto A HLA B 27 subtyping by PCR RFLP in Spanish patients with ankylosing spondylitis Tissue Antigens 1998 52 492 496 11 Oguz FS Ocal L Diler AS Ozkul H Asicioglu F Kasapoglu E Bozkurt G Konice M Carin M HLA B 27 subtypes in Turkish patients with spondyloarthropathy and healthy controls Dis Markers 2004 20 309 312 12 Weissensteiner T Lanchbury JS An integrated multiplex PCR and PCR RFLP typing system for markers associated with seronegative arthritides Hum Immunol 1998 59 119 132 13 Nomenclature for factors of the HLA System Compiled by Steven G E Marsh for the WHO Nomenclature Committee for Factors of the HLA System http www antho
6. CR s valida na presen a da banda controlo ou nalguns casos na presen a da banda espec fica Na aus ncia da banda controlo por favor repita a tipagem NOTA Se o PCR tiver bandas com tamanhos diferentes dos previstos n o as considere pois pode tratar se de bandas n o espec ficas ou artefactos 11 24 Guia de resolu o de problemas PROBLEMAS Bandas controlo e espec ficas fracas POSSIVEIS CAUSAS Concentra o da amostra de DNA baixa SUGEST ES Verifique a qualidade e concentra o do DNA Reextraia a amostra de DNA ou tente n o adicionar gua mistura de reac o Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Presen a de inibidores da Taq polimerase nas amostras de DNA Repurifique a amostra de DNA Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Os controlos internos falharam em diversos po os Presen a de inibidores da Taq polimerase nas amostras de DNA Repurifique a amostra de DNA Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Produtos de amplifica o secos Verifique a selagem das placas Repita a tipagem utilizando um adaptador de silicone para placas de 96 e ou adicione leo mineral Falsos negativos de uma banda espec fica com o controlo interno normal Degrada o da amostra de DNA Reextraia a amostra de DNA de material fresco Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Detec o de mais de dois alelos e
7. aturas de utiliza o e armazenamento recomendadas A sua utiliza o em gamas distintas de temperaturas pode causar rupturas impossibilitando a utiliza o normal do kit Verifique a concentra o e qualidade de todas as amostras de DNA antes de utilizar este kit Instru es de gerais de seguran a no laborat rio N o coma beba ou fume dentro do laborat rio Utilize sempre luvas descart veis e mude as com frequ ncia Utilize batas limpas e proteja os olhos sempre que se justifique Lave as m os antes e depois de qualquer manipula o de amostras ou reagentes Lave a rea de trabalho antes e depois de qualquer manipula o N o pipete com a boca 13 24
8. da est ril num tubo de 1 5 ml 2 Agite vigorosamente durante 15 segundos 3 Pipete 9 pl da mistura para cada po o da placa de tipagem 4 Pipete 1 yu da amostra de DNA conc 100 200 ng ul em cada po o excepto no controlo positivo e negativo 5 Repita os passos anteriores para cada uma das amostras DNA num total de 22 amostras por placa 6 Sele a placa de tipagem com as c psulas selantes e coloque num aparelho PCR de 96 po os 1 24 Par metros do programa PCR Passo Temperatura Tempo Ciclos Denatura o 96 2C 1 min 1 Denatura o 96 2C 25 seg 21 Emparelhamento 65 C 45 seg Extens o 722C 30 seg Extens o 72 2C 10 min 1 No final da PCR guarde a placa a 2 8 C 8 Detecte os produtos do PCR com uma electroforese em gel de agarose a 2 9 Use a Tabela de interpreta o de resultados para interpretar os resultados 8 24 Declara o de Conformidade Nome do Produto HLA B 27 Single Box Numero do Produto GB 10 06 Utiliza o Detec o do alelo HLA B 27 Produ o geneBOX R amp D Diagnostic Tests biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal N s geneBOX investiga o e desenvolvimento de testes de diagn stico indubitavelmente declaramos que este produto ao qual se relaciona esta declara o de conformidade est em conformidade com os seguintes documentos normativos ISO 9001 2008 e ISO 13485 2004 Seguindo ainda as indica e
9. de extin o n o aconselhados n o existem restri es conhecidas Perigos espec ficos de exposi o em caso de inc ndio podem emitir fumos t xicos de di xido e mon xido de carbono nitrog nio f sforo cloreto de hidrog nio e g s hidrog nio Equipamento especial de combate ao inc ndio quando s o libertadas grandes quantidades de subst ncia trabalhe apenas com protec o adequada para olhos e pele 11 Medidas a tomar no caso de derrame acidental Precau es pessoais evite o contacto directo com a subst ncia Limpeza limpe normalmente a rea afectada n o s o necess rios cuidados adicionais Protec o da pele use uma bata de laborat rio 19 24 Folha de Dados de Seguran a 1 3 Material Safety Data Sheet MSDS geneBOX R amp D Diagnostic Tests PCR SSP Kits Produtos de tipagem SSP da geneBOX Esta folha de dados de seguran a aplic vel a todos os produtos de tipagem por PCR SSP da geneBOX 1 Produtos Qu micos e Identifica o da Companhia Data de realiza o Junho 2011 Grupo do produto Produtos de tipagem SSP da geneBOX Manufactura o geneBOX R amp D Diagnostic Tests biocant centro de inova o em biotecnologia n cleo 4 lote 3 3060 197 cantanhede portugal tel fax 351 231 410 946 351 231 410 947 e mail info genebox com 2 Composi o e Informa o sobre os reagentes Componente Qu mico Nome vulgar Placa Acido Desoxiribonucleico Oligonucle tido Ve
10. ecomenda es da Genebox Separe fisicamente as reas de pr PCR e de p s PCR O fluxo Laboratorial deve ser sempre unidireccional da rea pr PCR para a rea p s PCR Deve sempre utilizar se equipamentos espec ficos para cada area de trabalho prepara o de amostras pr amplifica o amplifica o e p s amplifica o Todos os equipamentos utilizados na rea de p s PCR n o devem sais desta zona Utilize micropipetas luvas e batas espec ficas para cada rea Utilize preferencialmente luvas sem talco uma vez que o talco pode inibir a reac o de PCR Utilize pontas de filtro de forma a minimizar contamina es cruzadas Verifique periodicamente as micropipetas de forma a assegurar a varia o de pipetagem inferior a 5 Utilize micropipetas adaptadas a cada volume de pipetagem Verifique periodicamente os termocicladores de forma a assegurar a varia o de temperaturas inferiores a 1 Abra e feche os reagentes com cuidado Depois de utilizar armazene os restantes componentes do kit s temperaturas recomendadas devidamente fechados N o utilize o kit com a validade expirada Os componentes dos kits s o resistentes s temperaturas de armazenamento indicadas O armazenamento dos kits a temperaturas n o recomendadas podem levar rupturas no material e contamina o dos reagentes dos kits Os materiais pl sticos fornecidos neste kit s o resistentes gama de temper
11. ine o grau de evapora o e de condensa o da mistura de reac o da PCR Se as perdas de volume forem superiores a 20 n o devem ser validados os resultados obtidos De forma a prevenir esta situa o devem adicionar previamente leo mineral mistura de reac o ou utilizar um adaptador de silicone para placas de 96 Tamb m se deve ter em aten o a temperatura de aquecimento do aparelho Se a temperatura de aquecimento n o for suficiente v o se verificar problemas de condensa o 5 Termociclador Recomenda se utiliza o de qualquer Termociclador que apresente as seguintes caracter sticas heating rate superior a 2 5 C sec cooling rate superior a 1 5 C sec gama de temperaturas 4 100 C uniformidade de temperaturas 0 5 C heated lid superior a 1002C 6 Validade Como especificado na embalagem Se os problemas persistirem por favor contactem com o apoio t cnico para o 351 231 410 946 14 24 Folha de interpreta o de resultados Banda Banda Posi o HLA B 27 especifica Controlo cP Controlo Positivo 150 eum CN Controlo Negativo emma 0Os pares de primers controlo emparelham com sequ ncias n o polim rficas Os primers de controlo positivo interno amplificam segmentos do gene HLA DRB1 originando fragmentos com 790 pares de bases Na presen a da banda espec fica a banda controlo pode ver diminu da a sua intensidade A reac o de P
12. nynolan com HIG nomenc html 21 24 Folha de Dados de Seguran a 3 3 Material Safety Data Sheet MSDS 12 Informa o ecol gica N o existem dados dispon veis 13 Informa o sobre a elimina o de res duos Elimine o material de acordo com toda a regulamenta o aplic vel os res duos devem ser devidamente tratados e ou incinerados 14 Informa o sobre o transporte No transporte dos Kits devem estar a seguradas as temperaturas n o devendo ultrapassar os 252C A dura o do transporte n o deve ser superior a 3 dias de modo a garantir que todos os componentes do Kit cheguem em perfeitas condi es aos seus destinat rios 15 Contactos teis N mero Nacional de Emerg ncia 112 Centro de Informa o Anti Venenos 808 250 143 16 Outras informa es As informa es a cima dispon veis s o baseados no n vel de conhecimento actual devendo ser utilizado apenas como guia A geneBOX R amp D Diagnostic Tests n o se responsabiliza por qualquer dano causado pela manipula o inapropriada ou pelo contacto com os referidos produtos Para mais esclarecimentos por favor contactem com o apoio t cnico para o 351 231 410 946 20 24 Controlo de Qualidade Foram usadas amostras de DNA de 4 linhas celulares constantes do SSOP Panel do 13th International Histocompatibility Workshop para verificar a especificidade das misturas de primers deste kit Nome do Workshop Designa o IHW 09266 PAR IHW 09376 FH
13. rmelho de Cresol Mistura de reac o Desoxiribonucle tidos Nucle tidos Tamp o NH Cloreto de Magn sio Mgci2 Vermelho de Cresol Glicerol Taq DNA Polimerase Taq 3 Propriedades f sico qu micas Componente Aspecto Cor Odor Placa seco no fundo do po o vermelho nenhum Mistura de reac o l quido vermelho rosa nenhum 4 Informa o Toxicol gica Qu mico Toxicidade Glicerol LD50 oral 4090 mg kg ratinho LD50 oral 12600 mg kg rato LD50 oral 1480 mg kg humano 5 Estabilidade e reactividade Condi es a evitar Calor e humidade Incompatibilidades Bases e agentes oxidantes fortes 18 24 Protocolo de amplifica o por PCR Reagentes e Amostra de DNA 100 200 ng ul e PCR Master Mix e gua bi destilada est ril n o fornecida Extrac o de DNA Para a tipagem por SSP necess rio DNA extra puro Recomenda se que o isolamento de DNA seja efectuado utilizando kits de extrac o com marca o CE que garantam um r cio DO 260 280 maior do que 1 6 e uma concentra o entre 100ng 200 ng ul Alternativamente o DNA pode ser extra do utilizando sais de Brometo de Trimetilamonia DTAB CTAB ou por salting out dissolvendo o em Tamp o TE Devem ser asseguradas o mesmo n vel de DO e de concentra o N O UTILIZE SANGUE HEPARINIZADO COM ESTE M TODO Amplifica o por PCR 1 Agite brevemente os tubos de DNA e da mistura de reac o Junte 80 ul da PCR Master Mix e 160 ui de gua bi destila
14. rolo Positivo CN Controlo negativo 10 24 000000060 V0000006 geneBOX investiga o e desenvolvimento de teste diagn sticos garante que os primers presentes no kit de tipagem HLA B 27 single apresentam as especificidades dadas nas folhas e tabelas de interpreta o de resultados do produto 1 Placa de Tipagem Armazenamento a 20 C os primers desidratados permanecem est veis durante 12 a 19 meses a partir da data de produ o ver validade do lote na embalagem Armazenamento a 42C os primers desidratados permanecem est veis durante 12 meses a partir da data de produ o temperatura ambiente os primers desidratados permanecem est veis durante 3 a 4 semanas a partir da data de recep o Quando o selante removido os primers desidratados permanecem est veis durante 2 dias no m ximo desde que n o humede am 2 Mistura de Reac o Armazenamento a 20 C a mistura de reac o permanece est vel durante 18 meses a partir da data de produ o ver validade do lote na embalagem Armazenamento a 4 C a mistura de reac o permanece est vel durante 15 dias a partir da data de recep o temperatura ambiente a mistura de reac o permanece est vel durante 3 dias a partir da data de recep o A mistura de reac o nunca deve ser deixada ou armazenada com a tampa aberta 3 DNA O DNA extra do por salting out ou por qualquer outro m todo deve ser armazenado a 4 C
15. ropriadas resistentes a qu micos Protec o dos olhos recomenda se o uso de culos de protec o qu mica 7 Manipula o e armazenamento Manipula o evite o contacto directo com a subst ncia Armazenamento armazene temperatura aconselhada proteja do contacto com a luz Danifica o da embalagem protectora rejeitar o constituinte contido na embalagem 8 Perigos Os componentes da mistura de reac o podem ser perigosos se inalados ingeridos ou absorvidos pela pele Este material pode causar irrita o da pele dos olhos e do tracto respirat rio A ingest o de grandes quantidades desta mistura pode causar dores de est mago v mitos ou diarreia 9 Medidas de Primeiros Socorros No caso de contacto com os olhos deve lavar imediatamente os olhos com gua abundante por cerca de 15 minutos Deve consultar o seu m dico No caso de contacto com a pele deve lavar imediatamente a zona afectada com gua corrente e sab o Lave a roupa contaminada antes da sua utiliza o No caso de ingest o lave a boca com gua abundante Deve contactar o seu m dico se necess rio No caso de inala o mudar a v tima para um local arejado Se se encontrar inanimado aplique respira o artificial Se apresentar dificuldades respirat rias aplique oxig nio Deve consultar o seu m dico 10 Medidas a tomar em caso de inc ndio Meios de extin o gua di xido de carbono p qu mico seco ou espuma apropriada Meios
16. s da Directiva Europeia 98 79 CE sobre dispositivos m dicos de diagn stico in vitro Anexo II lista B conformidade de acordo com o Anexo IV transposto para as leis nacionais dos estados membros da Uni o Europeia A ficha e os documentos t cnicos deste produto s o mantidos na geneBOX biocant centro de inova o em biotecnologia 3060 197 Cantanhede Portugal Organismo Notificador T V Rheinland Product Safety GmbH T V Rheinland Group Am Grauen Stein 51105 K ln Cologne Germany Organismo notificador n mero 0197 Sandra Balseiro Directora T cnica 17 24 Aviso de garantia geneBOX investiga o e desenvolvimento de teste diagn sticos responsabiliza se perante os seus clientes pelos defeitos no material e componentes dos seus produtos aplicados em condi es normais Os produtos da empresa que apresentam esta garantia devem ser substitu dos sem encargos para o cliente Esta garantia aplica se s para produtos que sejam manipulados e armazenados de acordo com as especifica es e recomenda es de utiliza o As reclama es devem ser enviadas por escrito directamente para a geneBOX e devem ser acompanhadas por uma c pia da guia de transporte ou factura do produto Este produto n o pode ser reformulado reembalado ou revendido em nenhuma forma sem o expresso consentimento da geneBOX investiga o e desenvolvimento de teste diagn sticos 16 24 Protocolo de electroforese em gel de agaro
17. se Prepara o do gel de agarose a 2 1 Dissolver 4 gramas de p agarose em 200 ml de tamp o TAE 1X 2 Dissolver completamente a agarose aquecendo a no microondas 3 Arrefe a o gel at aproximadamente 502C 4 Adicione pelo menos 20 ul de brometo de et dio 10 mg ml ou de Sybr Safe 10000x concentrado agarose Agite at estar completamente incorporado 5 Numa superf cie nivelada monte a placa do gel com 96 po os 6 Verta uma camada de gel com cerca de 5mm 7 Deixe o gel arrefecer Aten o este reagente um forte agente mutag nico leia atentamente a MSDS do produto Electroforese Submirja o gel na tina de electroforese com tamp o TAE 1X Remova os pentes com cuidado do gel Adicione 10 pl do produto de PCR em cada po o Rc E a Ligue a tina de electroforese corrente com uma voltagem m dia 115V 5 Deixe a electroforese correr por cerca de 20 minutos ou at o corante estar a 2 3 da linha 6 Ponha o gel no transiluminador 7 Fotografe o gel e identifique o 8 Use a Folha de interpreta o de resultados para interpretar os resultados 9 24 Esquema da placa HLA B 27 Single Box 1 0 Direc o de pipetagem 000000060 A numera o pode variar de placa para placa sendo o n 1 equivalente a 4 7 10 o n 2 equivalente a 5 8 11 o n 3 equivalente a 6 9 12 I dentifica c o da placa HLA B 27 Single Box 1 0 Posi o Produto CP Cont
18. spec ficos Amostra de DNA muito concentrada Verifique a qualidade e concentra o do DNA Dissolva o DNA em q H20 de forma a obter a concentra o exacta Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Contamina o com outros produtos de PCR ou outras amostras de DNA durante a prepara o do PCR Limpe a zona de trabalho Trabalhe em zonas Pr e P s PCR separadas Utilize batas distintas para a zona Pr e P s PCR Mude de luvas frequentemente Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Esfrega o de bandas 12 24 Degrada o da amostra de DNA Reextraia a amostra de DNA de material fresco Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Amostra de DNA muito concentrada Verifique a qualidade e concentra o do DNA Dissolva o DNA em q H20 de forma a obter a concentra o exacta Repita a tipagem com um DNA de boa qualidade Problemas com tamp o de electroforese Fora de prazo ou composi o errada Use um tamp o recomendado novo Avisos e precau es A amplifica o por PCR permite nos obter milh es de c pias de DNA a partir de uma pequena quantidade de amostra Infelizmente isto tamb m verdade para o DNA contaminante que pode comprometer performance da nossa reac o Consequentemente pr ticas laboratoriais espec ficas podem evitar a presen a de amplifica es inespec ficas Em baixo encontram se descriminadas as r
19. sua especificidade e interpreta o de modo a incluir novas associa es a doen a que venham a ser descritas Este produto pode tamb m ser melhorado de modo a aumentar o seu rendimento As altera es adi es ou modifica es de primers em rela o ao lote anterior est o detalhadas na tabela abaixo Tubo Primers motivo N A 4 24 Refer ncias 1 Hulsemann JL Zeidler H Undifferentiated arthritis in an early synovitis out patient clinic Clin Exp Rheumatol 1995 13 37 43 2 Kim YA Bagley MP Thomas Incomplete Reiter s syndrome in a black patient showing HLA B 27 Cutis 1991 47 253 254 3 Schilling F Stollenwerk R Dreher R Traditional and new types of spondarthritis with special consideration of spondylodiscitis Neurosurg Rev 1990 13 273 278 4 Sampaio Barros PD Conde RA Donadi EA Kraemer MH Persoli L Coimbra IB Costallat LT Samara AM Bertolo MB Undifferentiated spondyloarthropathies in Brazilians importance of HLA B27 and the B7 CREG alleles in characterization and disease progression J Rheumatol 2003 30 2632 2637 5 Voorter CE Swelsen WT van den Berg Loonen EM B 27 in molecular diagnostics impact of new alleles and polymorphism outside exons 2 and 3 Tissue Antigens 2002 60 25 35 6 Orchard TR Chua CN Ahmad T Cheng H Welsh KI J ewell DP Uveitis and erythema nodosum in inflammatory bowel disease clinical features and the role of HLA genes Gastroenterology 2002 123
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