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Conceitos básicos e aplicados em imuno-hematologia

1. Fonte 3M do Brasil 2009 e Protetores auditivos S o recomendados para uso em locais cujos n veis de press o sonora sejam superiores aos estabelecidos pela NR 15 anexo I e II podendo ser conjugados com capacete e protetor facial Funda o Oswaldo Cruz 2003b Seu uso em laborat rios s est indicado nos casos em que existam equipamentos que produzam alto grau de ru do tais como centr fugas exaustores e cabines de seguran a Nos bancos de san gue esse tipo de risco n o representa um grave problema no entanto os protetores auditivos devem ser fornecidos ao trabalhador caso ele solicite norma t cnica aplic vel ANSI S 12 6 1997 2 2 8 Equipamentos de prote o coletiva EPCs Esses equipamentos tamb m destinados a proteger a integridade f sica dos profissionais ou minimizar os efeitos de um agravo n o pro 135 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira tegem necessariamente ao mesmo tempo toda a equipe de trabalho como um exaustor muitas vezes s o apenas de uso coletivo como no caso do chuveiro a Chuveiros e lava olhos Chuveiros e lava olhos de emerg ncia ou seguran a s o equipamentos especificamente projetados para fornecer um fluxo de gua abundante e de baixa press o suficiente para remover qualquer tipo de contaminante ou calor sem causar o agravamento de poss veis les es Os lava olhos podem estar aco
2. GIRELLO A L KUHN T I B Fundamentos da imuno hematologia eritro cit ria S o Paulo Editora Senac 2002 GOLDIN Y et al Rheological Consequences of Acute Infections The Rheo difference between Viral and Bacterial Infections Clinical Hemorheology and Microcirculation v 36 n 2 p 111 119 2007 Goopnow C C et al Control Systems and Decision Making for Antibody Production Nature Immunology v 11 n 8 p 681 688 2010 GUZELSU N WIENSTIEN C KOTHA S P A New Streaming Poten tial Chamber for Zeta Potential Measurements of Particulates Review of Scientific Instruments v 81 n 1 p 015 106 20 Jan 2010 Disponivel em http rsi aip org resource 1 rsinak v81 il p015106_s1 Acesso em 2 out 2012 HOFFBRAND A V et al Fundamentos em hematologia Porto Alegre Artmed 2008 Hyono A et al Analysis of Enzyme Treated Red Blood Cell Surface and Haemagglutination Using a Theory of Soft Particle Electrophoresis Vox Sanguinis v 95 n 2 p 131 136 2008 Jacosson K et al Revisiting the Fluid Mosaic Model of Membranes Science v 268 n 5 216 p 1 441 1 442 June 1995 JAGER U Autoimmune Hemolytic Anemia in Solid Tumors An Underdiagno sed Phenomenon Wiener Klinische Wochenschrift v 122 n 7 8 p 192 193 2010 JAN K M CHIEN S Influence of Ionic Composition of Fluid Medium on Red Cell Aggregation Journal of General Physiology v 61 n 5 p 655 668 1973 Role of Surfa
3. e externos processos infecciosos e inflamat rios No caso dos processos infecciosos pode se observar o mimetismo molecular que consiste na reatividade cruzada da c lula imunol gica com os epitopos dos ant ge nos presente tanto no agente infeccioso ex geno quanto nos ant genos pr prios end genos J nos processos inflamat rios decorrentes de alte ra es anat micas ocorre a exposi o de s tios localizados em estruturas pr prias que n o haviam sido expostas antes ao sistema imunol gico 61 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques sendo passiveis portanto de resposta imune Os processos autoimunes podem ser classificados como fisioldgi cos e patol gicos e o potencial para a ocorr ncia desses processos onipresente pois reflete a diversidade dos receptores das c lulas T e B Em algumas situa es esses processos s o fisiol gicos por exemplo a destrui o de hem cias velhas hemocaterese que perderam a sua maleabilidade e consequentemente a fun o de transporte de gases respirat rios Nesse caso a retirada dessas c lulas da circula o um processo ben fico para o organismo pois permite a renova o celular na circula o sangu nea A autoimunidade patol gica rara em torno de 5 e resultante de complexas intera es gen ticas e de fatores do meio ambiente O espec tro das doen as autoimunes vai desde doen as
4. hemoglobinuria parox stica ao frio f rmacos metildopa fludarabina doen a rara que pode ser prim ria ou estar associada a infec es 2 3 Complexo principal de histocompatibilidade Todo organismo multicelular possui algum sistema de defesa que identifica os agentes infecciosos e parasit rios e elimina os do hospedeiro Os grandes vertebrados t m um sistema imune mais evolu do que lhes permite discriminar o que estranho do que n o estranho e ter uma resposta seletiva A vantagem de tal imuni dade espec fica a r pida adapta o do sistema imune aos agentes patog nicos mais frequentemente encontrados no meio ambiente local Essa capacidade resulta do complexo principal de histocom patibilidade MHC do ingl s major histocompatibility complex cujos produtos desempenham um papel no reconhecimento in tercelular e na discrimina o entre o pr prio e o n o pr prio A 54 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia identifica o das mol culas do MHC ocorreu ap s investiga o da sua fun o na resposta imunol gica aos tumores na rejei o de transplantes de pele e no controle da resposta imune 2 3 1 Estrutura das mol culas do MHC Os genes que codificam as mol culas do MHC est o localizados no cromossomo 6 humano e no cromossoma 17 em camundongos e s o denominados respectivamente ant genos leucocit rios humanos HLA do ingl s human leukocyte antigens e de histocompatibilida
5. segundo Samuel Pepys 1633 1703 administrou sangue de ovelha num jovem com a inten o de mudar seu car ter Desconhecem se os resultados de tal experimento Jean Baptiste Denis 1643 1704 considerado o primeiro a re alizar uma transfus o humana Em 1667 administrou tr s frascos de sangue de carneiro a um rapaz de vida agitada com a finalidade de suavizar seu car ter violento torn lo manso como um cordei rinho Isso produziu no jovem grave rea o que culminou na sua morte No julgamento que se seguiu Denis foi exonerado de toda a culpa mas a Faculdade de Paris proibiu futuras transfus es Dez anos mais tarde o Parlamento as declarou ilegais O governo italiano tam b m proibiu as transfus es de pessoa a pessoa mas a Real Sociedade de Londres n o colocou obje o a elas Durante os s culos XVIII e XIX ficou demonstrado mediante trans fus es experimentais em animais e tamb m em homens que o sangue 44 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia retirado de animais podia ser restitu do a eles que o sangue transpor tava o oxig nio e que o sangue n o coagulava se houvesse extra o de seu conte do de fibrina podendo ser administrado assim a animais Finalmente ficou demonstrado que as transfus es de animais para o ho mem eram perigosas mas durante muitos anos as transfus es de sangue e as inje es intravenosas de diversas solu es eram s vezes acompa nhadas de rea es
6. A hematologia uma rea da ci ncia que estuda as c lulas san gu neas hem cias leuc citos e plaquetas assim como a hemostasia Essas c lulas encontram se imersas no plasma l quido constitu do basicamente de gua sais minerais lip deos glic deos e prote nas que formam o sangue Ap s sofrer coagula o o plasma passa a ser representado pelo soro e pelo co gulo O soro apresenta composi o menos rica que a do plasma pois ao ser formado o co gulo incorpo ra e consome algumas subst ncias O enfoque da hematologia neste cap tulo ser o estudo dos eritr citos incluindo a eritropoese a estru tura a fun o e as altera es morfol gicas dessas c lulas A imunologia a rea da ci ncia que estuda os mecanismos imu nol gicos relacionados s c lulas e s mol culas do sistema imune O enfoque neste cap tulo ser o de introduzir as rea es imunol gicas hipersensibilidade autoimunidade e a o do sistema complemento aos ant genos eritrocit rios 35 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques 1 Hematologia 1 1 A eritropoese A eritropoese o processo pelo qual os eritr citos se formam ama durecem e passam a fazer parte do sangue circulante Esse processo ocorre no indiv duo adulto na medula ssea vermelha dos ossos longos e chatos por interm dio da linhagem eritrobl stica Nos fetos e em ane mias graves esse processo pode oco
7. Alguns exemplares de anti K reagem fracamente com hem cias suspensas em meios de baixa for a i nica como o LISS e em al guns sistemas automatizados Schultz 1990 O anti K pode apresentar efeito de dose embora a percep o des se efeito nem sempre seja evidente Quase todos os autoanticorpos Kell est o associados aos ant genos de alta frequ ncia do sistema Kell no entanto a identifica o desses autoanticorpos revelou especifici dades anti K anti Kp e anti K13 Marsh Dinapoli e Oyen 1979 3 5 Sistema Lewis O sistema de grupo sangu neo Lewis apresenta a caracter stica de n o ser produzido pelos eritr citos e n o estar integrado na estrutura mem branar o que o torna um sistema diferente dos demais Os ant genos des se sistema s o elaborados por c lulas teciduais e secretados nos fluidos corporais principalmente nas secre es e no plasma Harmening 2006 81 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias O gene Lewis Le produz uma L glicosiltransferase que acrescenta uma L fucose a uma subst ncia precursora b sica para a produ o dos ant genos do sistema Lewis O gene Le encontra se localizado no bra o curto do cromossomo 19 p13 3 estando ligado ao locus do complemen to C3 Oriol Le Pendu e Mollicone 1986 Uma vez que os ant genos do sistema Lewis s o produzidos por c lulas teciduais a produ o dos ant genos dependente tanto da he ran a dos genes Lewis quanto da heran a do g
8. com muitas mol culas de Igs cada uma com afinidade nica e especi ficidade acurada em resposta a um ant geno A imunoglobulina IgM produzida como receptor de membrana du rante as fases iniciais do linf cito B e h mudan a de isotipo nessa c lula quando estimulada pelo ant geno Isso permite a manuten o da re gi o vari vel espec fica para o ant geno correspondente garantindo a especificidade ao ant geno correspondente nos diferentes isotipos e orientando as suas distintas fun es efetoras A afinidade do anticorpo ao ant geno na resposta prim ria menor do que na resposta secund ria Na resposta prim ria o anticorpo da classe IgM tende a ser de afinidade relativamente baixa e pode contar com avidez adicional decorrente da sua estrutura pentam rica Na res posta secund ria IgG e outras classes de imunoglobulinas tendem a ter afinidade maior 2 2 2 Distribui o e propriedades dos isotipos Os agentes infectoparasit rios se alojam em s tios do organismo que lhes proporcionem as melhores condi es de sobreviv ncia Des se modo os anticorpos tamb m devem alcan ar as v rias partes do organismo a fim de controlar ou inativar tais agentes Os anticorpos apresentam varia es denominadas isot picas que lhes permitem entre outras caracter sticas melhor adequa o aos di ferentes s tios do organismo Os primeiros anticorpos a serem produzidos numa resposta imu ne humoral s o sempre da classe Ig
9. ltimo frag mento mant m se ligado ao C3b de forma fraca Subsequentemente ocorre a liga o de C6 e C7 ao C5b Finalmente a liga o do C8 mem brana do microrganismo leva o C9 a sofrer altera o conformacional transformando se em uma mol cula anfip tica capaz de se inserir na bicamada lip dica e promover a polimeriza o em um complexo de ataque membrana denominado MAC do ingl s membrane attack 58 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia complex O canal transmembranar formado perme vel gua e a eletr litos e por causa da grande press o osm tica coloidal no interior da c lula ocorre um influxo de Na e gua acarretando a lise celular A via cl ssica do sistema complemento como mencionado re quer a presen a do anticorpo ligado ao ant geno a fim de que a for ma o da cascata ocorra Nessa fase inicial o primeiro componente chamado Clq assemelha se ao col geno e consiste de seis cadeias polipept dicas cada uma das quais possui uma subunidade de li ga o ao anticorpo Essa liga o de Clq imunoglobulina ocorre no dom nio constante 2 da cadeia pesada C 2 localizado na por o Fc da mol cula A regi o C 2 da mol cula rica em prolina e essa composi o de amino cidos faz que a mol cula tenha flexibili dade naquele local permitindo a exposi o do s tio de liga o com o componente Clq Por m a mudan a conformacional da mol cula na regi o C 2 que
10. o em Imuno Hematologia da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven n cio Fiocruz e do Curso de Especializa o Lato Sensu em Imuno Hema tologia da Universidade Federal do Rio de Janeiro Elmo Eduardo de Almeida Amaral farmac utico doutor em Ci n cias pela Universidade Federal do Rio de Janeiro e mestre em Qu mica Biol gica pela Universidade Federal do Rio de Janeiro pesquisador do Instituto Oswaldo Cruz Fiocruz Fl via Coelho Ribeiro m dica veterin ria doutora em Ci ncias Diagn stico de Doen as Infecciosas pelo Instituto de Pesquisa Cli nica Evandro Chagas Fiocruz e mestre em Patologia Veterin ria pela Universidade Federal de Vi osa com especializa o em Doc ncia do Ensino Superior pela Universidade C ndido Mendes professora pesquisadora da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Fiocruz Joseli Maria da Rocha Nogueira bi loga doutora em Ci ncias pela Escola Nacional de Sa de P blica Sergio Arouca Fiocruz mestre em Microbiologia Veterin ria pela Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro e especialista em Microbiologia e An lises Cl nicas pela 151 Conceitos basicos e aplicados em imuno hematologia Sociedade Barramansense de Ensino Superior tecnologista s nior da Escola Nacional de Sa de Publica Sergio Arouca Fiocruz professora colaboradora da Universidade Federal do Rio de Janeiro professora ad junta da Universidade do Grande Rio e professora convidada da Escola Polit cnica de S
11. qu micos f sicos ergon micos e psicossociais no mbito ocupacio nal comunit rio e ambiental Borba et al 2009 Nesse sentido podemos definir a biosseguran a como sendo a con di o de seguran a alcan ada por um conjunto de a es destinadas a prevenir controlar minimizar ou eliminar riscos inerentes s ativida des que possam comprometer a sa de humana animal vegetal e o am biente bem como afetar um trabalho a ser realizado Brasil 2010b O decreto n 3 029 de 6 de abril de 1999 aprovou o regulamento da Ag ncia Nacional de Vigil ncia Sanit ria visando necessidade de preve nir e reduzir os riscos sa de e ao meio ambiente A partir da a direto ria colegiada da Ag ncia Nacional de Vigil ncia Sanit ria no uso de suas atribui es aprovou v rias resolu es da diretoria colegiada RDCs com o intuito de estabelecer normas e padr es sobre limites de contaminantes res duos t xicos desinfetantes metais pesados e outros materiais que en volvam risco sa de 100 Biosseguran a em laborat rios de sa de A RDC n 57 de 16 de dezembro de 2010 estabelece o regulamen to sanit rio para servi os que desenvolvam atividades relacionadas ao ciclo produtivo do sangue humano e seus componentes e para proce dimentos transfusionais Segundo essa resolu o o servi o deve dispo nibilizar os equipamentos de prote o individual e coletiva necess rios para a seguran a dos seus funci
12. to A manuten o pode ser classificada em tr s categorias predi tiva preventiva e corretiva Paula 2006 A manuten o preditiva o acompanhamento peri dico dos equipamentos baseado na an lise de dados coletados por meio da monitora o ou de ins pe es em campo A manuten o preditiva tem sido reconheci da como uma t cnica eficaz de gerenciamento de manuten o A manuten o preventiva visa aproveitar ao m ximo a vida til de cada equipamento e mant lo sempre em perfeito estado pro 143 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira dutivo reduzindo dessa forma o n mero de paradas n o progra madas A manuten o preventiva demanda a confec o de um cronograma com foco na periodicidade de cada manuten o como troca de leo ajuste de velocidade etc As certifica es ISO hoje mais comuns no mercado exigem uma rotina de manuten o bem definida com o registro de controles de processos para fu turas auditorias Por ltimo a manuten o corretiva refere se manuten o n o peri dica que variavelmente poder ser neces s ria por falhas e erros demandando a corre o de danos atuais e n o iminentes h Extintores lava olhos e chuveiros s o equipamentos de uso co i letivo cuja finalidade proteger os profissionais que trabalham em laborat rios importante que o trabalhador conhe a al gumas regras b sicas de biosseguran a e identifique adeq
13. vari vel da cadeia pesada CL constante da cadeia leve Cy1 primeiro dom nio constante da cadeia pesada da IgG Cy segundo dominio constante da cadeia pesada da IgG Cy3 terceiro dom nio constante da cadeia pesada da IgG Figura 2 Estrutura b sica de uma mol cula de IgG Fonre Reproduzido de Teva Fernandez e Silva 2009 A mol cula de imunoglobulina pode ser digerida por enzimas pro teol ticas fig 3 como a papa na e a pepsina A papa na cliva a mol cu la em tr s fragmentos dois chamados Fab do ingl s fragment antingen binding que se ligam ao ant geno espec fico e um fragmento Fc do ingl s fragment crystallizable chamado fragmento cristaliz vel por formar cristais quando armazenado em locais frios J a pepsina cliva na mesma regi o mas na por o carboxiterminal das pontes dissul f dicas produzindo o Fab no qual os dois bra os do anticorpo se encontram unidos MN ON E ca ap ia aaa 5 Ed mee Figura 3 Fragmentos enzimaticos da mol cula de imunoglobulina ap s ativa o enzim tica Fonre Reproduzido de Teva Fernandez e Silva 2009 47 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques 2 2 1 Gera o da diversidade na resposta imune humoral e matura o da afinidade Para produzir uma mol cula de Ig ocorrem combina es ao aca so dos diferentes componentes g nicos levando enorme diversidade
14. 2 Hemoterapia 3 Pessoal de laborat rio 4 Seguran a do sangue 5 Exposi o a agentes biol gicos T tulo Il Ribeiro Fl via Coelho lll Vizzoni Alexandre Gomes CDD 616 079 ISBN 978 85 98768 69 4 Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Avenida Brasil n 4 365 Manguinhos 21040 360 Rio de Janeiro RJ T 21 3865 9717 Sumario 11 35 65 99 153 Prefacio Margarida de Oliveira Pinho Apresenta o Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Fl via Coelho Ribeiro Alexandre Gomes Vizzoni Bioqu mica eritrocit ria Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto Hematologia e imunologia aplicadas imuno hematologia Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva Marcos Antonio P Marques Imuno hematologia eritrocit ria Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias Biosseguran a em laborat rios de sa de Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Os autores Prefacio Ter sido convidada para prefaciar um livro sobre imuno hematologia voltado para t cnicos de laborat rio foi muito gratificante n o s pelo tema mas tamb m pelo elevado n vel t cnico cient fico da equipe de autores integrantes do quadro de profissionais da Funda o Oswaldo Cruz institui o reconhecida internacionalmente pela excel ncia de seu desempenho na pesquisa A imuno hematologia constitui uma especialidade dentro da
15. Acesso em 31 out 2012 AG NCIA NACIONAL DE VIGIL NCIA SANIT RIA ANVISA Crit rios para a habilita o de laborat rios segundo os princ pios das boas pr ticas de laborat rio Bras lia Ger ncia Geral de Laborat rios de Sa de P blica 2001b Procedimentos operacionais da Reblas F Protocolo das a es de vigil ncia sanit ria Brasilia Anvisa 2007b RDC n 57 de 16 de dezembro de 2010 Determina o regulamento sanit rio para servi os que desenvolvem atividades relacio nadas ao ciclo produtivo do sangue humano e componentes e procedimen tos transfusionais Di rio Oficial da Uni o Bras lia 17 dez 2010c RDC n 306 Regulamento t cnico para o geren ciamento de res duos de servi os de sa de Bras lia Anvisa 2004 MINIST RIO DO MEIO AMBIENTE CONSELHO NACIONAL DO MEIO AMBIENTE CONAMA Resolu o Conama n 275 Bras lia Minist rio do Meio Ambiente 2001c MINIST RIO DO TRABALHO E EMPREGO NR15 Atividades e opera es insalubres Bras lia Minist rio do Trabalho e Emprego 2008a Dispon vel em http www mte gov br legislacao normas_regulamentadoras nr Acesso em 11 out 2010 NR9 Programa de preven o de riscos ambientais Bras lia Minist rio do Trabalho e Emprego 1994 NR24 Condi es sanit rias e de conforto nos locais de trabalho Bras lia Minist rio do Trabalho e Emprego 2008b Portaria n 397 Classifica o B
16. Os res duos de cido si lico fig 3 s o abundantes na membrana plasm tica do eritr cito 60 da carga negativa presente na membrana do eritr cito s o provenientes da pre sen a do cido si lico A manuten o da carga negativa nos eritr citos importante nas intera es eritr cito eritr cito e eritr cito c lulas sangu neas como veremos mais adiante Es nc OH Figura 3 Estrutura qu mica do cido si lico A glicoforina A ou sialoglicoproteina formada por 131 amino ci dos e apresenta apenas um dom nio transmembranar A glicoforina A est intimamente ligada prote na banda 3 que importante para a s ntese e a estabilidade da glicoforina A Apesar de o cido si lico presente na glicoforina A ser respons vel pela carga negativa da membrana plasm tica dos eritr citos c lulas deficientes em glicoforina A n o apresentaram mudan as na carga da superf cie da membrana plasm tica 14 Bioqu mica eritrocit ria O citoesqueleto da membrana plasm tica do eritr cito formado por tr s prote nas principais a espectrina a prote na 4 1 e a actina Essas prote nas presentes no lado citos lico da bicamada lip dica formam uma rede horizontal essencial na manuten o da forma ca racter stica da hem cia A espectrina constitu da por duas cadeias as cadeias a e B que se unem para formar uma estrutura heterodim rica Os heterod meros ligam se cabe a com cabe a formando
17. Por causa da similaridade visual de certos respiradores descart veis e de muitas m scaras cir rgicas e de procedimento suas diferen as nem sempre s o bem entendidas Entretanto eles s o muito diferentes na ve da o facial no tempo de uso e principalmente na finalidade de uso Os respiradores s o projetados para auxiliar na redu o da exposi o respirat ria do usu rio a contaminantes dispersos no ar tais como parti culas gases ou vapores Alguns tipos s o capazes de reter part culas me nores que 100 um de tamanho Isso inclui aeross is que podem conter material biol gico como fungos Bacillus anthracis e Mycobacterium 133 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira tuberculosis e v rios v rus As m scaras cir rgicas e de procedimento n o t m propriedades de filtra o ou veda o facial adequadas para fornecer prote o respirat ria ao usu rio S o usadas para ajudar a pre venir a contamina o do ambiente de trabalho ou campo est ril com part culas grandes geradas pelo usu rio por exemplo saliva e muco M scaras cir rgicas tamb m podem ser usadas para ajudar a reduzir o risco de proje es ou respingos de sangue fluidos corp reos secre es e excre es atingirem a boca ou o nariz do usu rio A utiliza o correta desses EPIs recomendada juntamente com as capelas de exaust o sempre que no laborat rio forem manuseadas subst ncias qu micas com alto t
18. berto em 1939 tornou se o sistema de grupo sangu neo com mais alto polimorfismo entre os marcadores conhecidos da membrana eritro cit ria At o presente momento 49 ant genos foram identificados no sistema Rh e os estudos gen ticos e bioqu micos t m sido caracteri zados pelas controv rsias O per odo de descoberta dos primeiros ant genos do sistema Rh D C E c e pode ser descrito pelo breve hist rico a seguir e 1939 Levine e Stetson atribuem a causa da eritroblastose fetal de um rec m nascido atividade de anticorpos maternos contra suas hem cias e 1940 Landsteiner e Wiener produzem por imuniza o de coe lhos com hem cias de macaco rhesus soros anticorpos capazes de aglutinar 85 das hem cias humanas e 1941 Wiener e Levine publicam um trabalho preciso sobre doen a hemol tica do rec m nascido provocada pelo anti Rh demons trando como os indiv duos n o portadores do ant geno Rh podem se imunizar e as consequ ncias dessa imuniza o 70 Imuno hematologia eritrocit ria e 1941 1943 foram observados em indiv duos politransfundidos e em mult paras outros anticorpos capazes de aglutinar hem cias humanas cuja frequ ncia variava em indiv duos Rh positivos e Rh negativos As complexidades sorol gica e fenot pica associadas a esse sis tema levaram elabora o de nomenclaturas diferentes o sistema Rh Hr Wiener a terminologia CDE Fischer e Race e o siste ma num rico Rosenfiel
19. cia chamamos essa rea o de anemia hemol tica A agrega o dos anticorpos aos an t genos eritrocit rios reduz muito a vida m dia da c lula pois facilita o reconhecimento pelos fag citos e consequentemente o seu transporte para o ba o Al m da a o de c lulas fagoc ticas pode ocorrer a a o do sistema complemento pela via cl ssica levando lise celular e portan to anemia hemol tica em se tratando de hem cias 2 6 Aspectos gerais das rea es autoimunes As rea es autoimunes s o decorrentes da a o do sistema imuno l gico sobre estruturas pr prias ou seja ant genos aut logos causando danos teciduais De modo geral as rea es autoimunes ocorrem pela participa o de linf citos autorreativos c lulas que escaparam da sele o negativa nos rg os linfoides prim rios e secund rios e que s o ca pazes de reconhecer os ant genos end genos tornando efetiva a resposta imunol gica A sele o negativa que ocorre nos rg os linfoides impede a matura o de linf citos espec ficos aos autoant genos mecanismo co nhecido como autotoler ncia imunol gica Por meio de mecanismos de anergia clonal apoptose e supress o poss vel manter a autotoler ncia imunol gica e portanto evitar processos autoimunes mediados pelos linf citos autorreativos Os processos autoimunes s o multifatoriais Eles incluem aspectos gen ticos horm nio sexual feminino HLA repert rio de linf citos
20. cula As extremidades dos dois bra os do Y variam dependendo da mol cula de anticorpo e s o designadas regi es V regi o amino N terminal vari vel Essas ex tremidades est o envolvidas na liga o ao ant geno ao passo que a base do Y ou regi o C regi o carboxi C terminal constante conservada e interage com outras mol culas e c lulas efetoras do sistema imune Figura 5 Estrutura da mol cula de anticorpo CP cadeia pesada constante CL cadeia leve constante VP cadeia pesada vari vel VL cadeia leve vari vel S S liga es dissulfidricas 17 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto A estrutura b sica da mol cula de imunoglobulina consiste em quatro cadeias polipept dicas no caso da IgG com cerca de qui nhentos amino cidos sendo duas cadeias leves L e duas cadeias pesadas H unidas por liga o covalente as pontes dissulfidicas formando uma prote na globular Em cada mol cula de imunoglobu lina as duas cadeias pesadas e as duas cadeias leves s o id nticas de modo que uma mol cula de anticorpo possui dois s tios de liga o ao ant geno A haste do Y denominada fragmento Fc do ingl s frag ment crystallizable definida pela estrutura de sua cadeia pesada ela respons vel pela atividade biol gica fun o efetora dos anticorpos Diferen as estruturais na regi o Fc definem os cinco subtipos principais ou classes de imunoglobul
21. lulas precursoras de granul citos Os linf citos ligam se fortemente FC ao passo que os mon citos e seus precursores apenas moderadamente A intensidade de liga o de c lulas nucleadas eritro cit rias semelhante dos linf citos A intensidade de liga o dos pr eritroblastos e normoblastos FC id ntica no in cio mas vai au mentando na fase final dos normoblastos e diminuindo em seguida nos reticul citos e eritr citos maduros Essa propriedade de superf cie de liga o e afinidade pela ferriti na cationizada que est diretamente relacionada com a intera o c lula c lula ou c lula substrato tamb m conhecida como tens o super ficial Ela resulta principalmente da exposi o superficial de segmentos moleculares hidrof bicos amino cidos hidrof bicos de glicoprote nas As hem cias comportam se como part culas eletronegativas e os grupos carbox licos COOH das sialoglicoprote nas integrantes da membrana eritrocit ria s o os maiores respons veis pela eletronegatividade Como cargas iguais se repelem os eritr citos em suspens o per manecem separados uns dos outros em meio salino Os eletr litos contidos no meio envolvem cada hem cia como uma nuvem de ons positivos que se torna menos densa medida que se distancia do gl bulo Na figura 7 observamos a representa o esquem tica do eritr cito em solu o fisiol gica gas umeo iie EM maes cats Figura 7 Eritr
22. m disso a principal imunoglobulina contida no colostro e no leite e constitui a principal fonte de prote o contra pat genos no intestino do neonato A IgE est difundida de maneira moderada nos espa os extravas culares e sua principal propriedade a sensibiliza o de mast citos e bas filos que promove a rea o inflamat ria mediante a libera o de mediadores qu micos como a histamina que provoca vasodila ta o e permite a passagem de anticorpos atrav s dos vasos sanguine os em dire o rea lesada e fatores quimioatraentes que recrutam fag citos para o local de infec o Al m disso podem participar em proces sos al rgicos e na elimina o de helmintos wW a il y VW RAS IgA E N4 G Il N nr Figura 4 Isotipos de imunoglobulinas humanas Fonte Reproduzido de Teva Fernandez e Silva 2009 49 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques 2 2 3 Anticorpos monoclonais Em 1975 Georges Kohler e C sar Milstein planejaram um metodo para a preparacao do anticorpo monoclonal Ac Mo por meio da fusao da c lula B ativada normal produtora de anticorpo com uma c lula de mieloma uma c lula plasmatica cancerosa Nesse evento produziram uma c lula h brida hibridoma que possu a as propriedades de crescimento imortal da c lula do mieloma de secre o de anticorpo produzido pela c lula B Ap s a obten o dos hibr
23. mico por lisina da cadeia da hemoglobina e que apresentam cristais nos eritr citos e uma leve anemia hemol tica t m altera o na estrutura da membrana e na carga de superf cie dos eritr citos Para avaliar essas altera es foi utilizado um ensaio de mobilidade eletrofor tica para determinar o potencial zeta de eritr citos normais AA e de eritr citos portadores da hemogloblina CC Foram obser vadas diferen as nas suas estruturas de membrana associadas a altera es da fisiologia de c lulas inteiras Nos eritr citos com hemoglobina CC existe uma mudan a na for a repulsiva das hem cias como re sultado da redu o no potencial zeta Essa diferen a no potencial zeta pode ser reflexo da associa o de prote nas do plasma nas membranas desses eritr citos Enzimas proteol ticas s o utilizadas com frequ ncia na sorologia para identifica o de grupos sangu neos O tratamento com essas enzi mas permite que o eritr cito se torne aglutin vel por anticorpo que n o consegue efetuar a aglutina o em eritr citos normais Muitos estudos t m sido realizados para explicar esse mecanismo pela interfer ncia do potencial zeta O fen meno da n o aglutina o dos eritr citos com deter minados anticorpos causado pela redu o do potencial zeta das c lulas vermelhas do sangue A neuraminidase enzima que remove o cido N acetilneuram nico ou o cido si lico causa a redu o da carga de superf cie da membrana do
24. o de mais um sonho agradecemos Fiocruz ins titui o qual nos orgulhamos de pertencer dire o da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio que incentivou e apoiou a produtiva parceria que culminou na produ o deste livro aos que ridos colegas autores e revisores dos cap tulos respons veis dire tos pela idealiza o e realiza o desta obra doutora Margarida Pinho que gentilmente aceitou o convite para prefaciar esta edi o e um agradecimento especial a Josane Ferreira Filho que secre tariou este livro com carinho e efici ncia Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Fl via Coelho Ribeiro Alexandre Gomes Vizzoni 10 Bioquimica eritrocitaria Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto Introdu o A membrana plasm tica importante para a vida da c lula pois al m de englobar e definir seus limites ela mant m as diferen as es senciais entre os meios intra e extracelular Podemos definir a mem brana plasm tica como um filme muito fino composto de lip deos e prote nas que permanecem unidos por intera es n o covalentes A composi o da membrana plasm tica do eritr cito cont m 39 5 de prote nas 35 1 de lip deos e 5 8 de carboidratos esses ltimos presentes no lado extracelular da bicamada lip dica Os lip deos da membrana plasm tica se arranjam numa camada du pla cont nua com espessura de aproximadamente 5 nm Essa bicamada lip dica
25. os de controle de qualidade e de pesquisas relacionados sa de humana vegetal e ani mal e ao meio ambiente Borba et al 2009 99 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira A biosseguran a e suas aplica es evolu ram muito com o passar dos anos No Brasil ela est atrelada legalmente aos organismos gene ticamente modificados OGMs e s c lulas tronco embrion rias pela lei n 11 105 2005 que estabelece normas de seguran a e mecanismos de fiscaliza o so bre a constru o o cultivo a produ o a manipula o o transporte a transfer ncia a importa o a exporta o o ar mazenamento a pesquisa a comercializa o o consumo a libera o no meio ambiente e o descarte de organismos gene ticamente modificados OGM e seus derivados tendo como diretrizes o est mulo ao avan o cient fico na rea de biosse guran a e biotecnologia a prote o vida e sa de humana animal e vegetal e a observ ncia do princ pio da precau o para a prote o do meio ambiente Brasil 2005 Estabelece tamb m normas de uso apenas para fins de pesquisa e terapia de c lulas tronco embrion rias obtidas de embri es humanos produzidos por fertiliza o in vitro e n o utilizados no respectivo pro cedimento Brasil 2005 Na rea da sa de a biosseguran a est contextualizada na preven o de acidentes e agravos gerados por agentes de riscos biol gicos
26. para rotular as subst ncias e terebentina formula es com a nota o de inflam vel seu ponto de fulgor deve estar entre 21 C e 55 C Precau o evitar contato dos produtos com materiais ignitivos Manipular longe de chamas ou calor Manipular com prote o adequada e em capela de ar for ado ou exaust o 109 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Altamente inflam vel Classifica o materiais altamente inflam veis gases inflam veis combust veis l quidos subst ncias e prepara es que podem se aquecer e finalmente inflamar se em contato com o ar a uma temperatura normal sem fornecimento de energia subst ncias s lidas que podem inflamar se facilmente por breve a o de uma fonte incandescente e que continuam a arder ou a se consumir ap s o afastamento da fonte subst ncias em estado l quido cujo ponto de fulgor seja inferior a 21 C ou subst ncias gasosas inflam veis em contato com o ar a press o normal ou que em contato com a gua ou o ar mido desenvolvam gases facilmente inflam veis em quantidades perigosas Precau o evitar contato dos produtos com materiais ignitivos Essas subst ncias devem ser manipuladas longe de chamas ou de emissores de calor Quando vol teis manipular com prote o adequada e em capela de ar for ado ou exaust o Todas essas subst ncias devem ser adequadamente identificadas
27. raramen te respons vel por rea es hemol ticas transfusionais diminui o da sobrevida das c lulas ou doen a hemol tica do rec m nascido suficiente fornecer unidades compat veis na prova cruzada a 37 C 77 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias e na fase de antiglobulina sem ser necess ria a fenotipagem para o ant geno M 3 2 3 Anticorpos anti N Esse anticorpo uma aglutinina fria reativa em salina de classe IgG ou IgM que n o liga complemento e nem reage com hem cias tratadas previamente com enzimas Anti N demonstra efeito de dose reagindo melhor com hem cias com fen tipo M N N o clinica mente significativo a menos que reaja a 37 C Anti N mais raro que anti M Numa s rie de 86 mil pacientes fo ram detectados apenas dois exemplares de anti N Mollison Engelfriet e Contreras 1997 Tamb m foi observado em pacientes renais dialisados em equipamento esterilizado com formalde do independentemente do tipo MN 3 2 4 Anticorpos anti S e anti s Quase todos os exemplares de anti S e anti s s o IgG eles s o rea tivos a 37 C e na fase de antiglobulina Alguns exemplares expressam reatividade tima em temperaturas mais baixas 4 C Os anticorpos podem ou n o reagir com hem cias previamente tratadas Embora detectados menos frequentemente que anti M anticorpos anti S ou anti s t m maior probabilidade de ser clinicamente significati vos Podem ativar o sistema complemento
28. remove frag mentos de prote nas da membrana clivando glicoprote nas da superf cie celular e diminuindo a carga negativa da mem brana plasm tica dos eritr citos 26 Bioqu mica eritrocit ria 2 Varia o da composi o do meio pela adi o de subst ncias macromoleculares como albumina bovina polietilenoglicol PEG polibreno que alteram a constante diel trica do meio D quanto maior a constante diel trica do meio menor ser o potencial zeta e consequentemente maior ser a sensibiliza o aglutina o das hem cias 3 Modifica o da for a i nica u utilizando se por exemplo solu o de baixa for a i nica Outros fatores podem modificar o valor do potencial zeta pH modifica a constante de equil brio temperatura exposi o aguda ao frio altera es no potencial zeta na membrana dos eritr citos s o ob servadas durante a exposi o ao frio podendo ocorrer a preven o da agrega o eritrocit ria concentra o de sais concentra o de ons efeito do palmitato modificando o potencial de membrana do eritr cito dentre outros Medicamentos como a vancomicina um antibi tico policati nico que pode causar agrega o espont nea nos eritr citos por causa da diminui o do potencial zeta tamb m podem influenciar na agrega o das hem cias Grande parte das doen as como a hipertens o arterial a doen a obstrutiva coronariana a diabetes e algumas infec es a
29. rg o espec ficas caso da anemia hemol tica autoimune rg o inespec ficas e as que incluem esses dois grupos 2 6 1 Aspectos imunol gicos da anemia autoimune A anemia hemol tica autoimune AHA uma doen a pouco fre quente que ocorre na sua forma mais branda como anemia normocr mica compensada mas pode se apresentar como doen a hemol tica de grande gravidade inclusive potencialmente fatal Essa doen a pode ser uma condi o prim ria ou mesmo secund ria a v rias doen as infla mat rias autoimunes ou infecciosas O processo de destrui o dos eritr citos conhecido como hem li se caracterizado por uma rea o imunol gica direcionada a ant ge nos presentes na superf cie dessas c lulas Nessa rea o predominam os autoanticorpos eritrocit rios quentes os quais s o eficazes em tem peraturas em torno de 37 C Contudo n o se pode descartar a ocor r ncia da rea o mediada pelos anticorpos conhecidos como frios por agirem melhor em temperaturas abaixo de 37 C Em geral os autoanticorpos quentes as IgG s o direcionados para os ant genos do fator Rh presentes na superf cie dos eritr citos Em decorr ncia desse processo a ativa o da via cl ssica do sistema com plemento deflagrada Como resultado dessa rea o s o evidencia dos v rios achados cl nicos e laboratoriais maior produ o celular e diminui o de sua vida m dia dentre outros 62 Hematologia e imunologi
30. rios de sa de Classe de risco 1 risco baixo individual e risco baixo para a co letividade compreende os agentes biol gicos conhecidos por n o originarem doen as de forma natural em pessoas ou animais adultos sadios Exemplos Lactobacillus sp Escherichia coli K12 Classe de risco 2 risco moderado individual e risco limitado para a comunidade compreende os agentes biol gicos que causam infec es no homem ou nos animais e que possuem potencial de propaga o limitada na comunidade e no meio ambiente Al m disso para esses agentes existem medidas terap uticas e profil ticas eficazes Exemplos Schistosoma mansoni Entamoeba histolytica Classe de risco 3 risco individual alto e risco moderado para a co munidade compreende os agentes biol gicos potencialmente le tais que podem ser transmitidos por via respirat ria para o homem ou animais causando patologias para as quais existem usualmente medidas de tratamento e ou de preven o Se disseminados na comunidade e no meio ambiente representam risco de grau mo derado visto que podem se propagar de pessoa a pessoa Exemplos Bacillus anthracis Mycobacterium tuberculosis Classe de risco 4 alto risco individual e para a comunidade compreende os agentes biol gicos de transmiss o desconhecida ou com grande poder de transmissibilidade por via respirat ria N o se conhece at o momento nenhuma medida profil tica ou terap utica eficaz contra sua infec o Causam
31. sa de de reas end micas definidas pelo Minist rio da Sa de ser o considerados como do tipo A e sobras de alimento que tenham tido contato com secre es excre es e outros fluidos corp reos excluem se os alimen tos provenientes de reas de isolamento e pap is sanit rios de funcion rios ou pacientes que n o este jam em rea de isolamento e embalagens secund rias de quaisquer medicamentos ou de pro duto m dico hospitalar frascos pl sticos de soros vidros ou pl s ticos de medicamentos ou outro produto n o inclu do no grupo B ap s o esvaziamento s o considerados materiais recicl veis Grupo E risco potencial sa de p blica e ao meio ambiente em decorr ncia do risco associado a caracter sticas perfurocortantes e materiais perfurocortantes como objetos e instrumentos con tendo cantos bordas pontos ou protuber ncias r gidas e agu das capazes de cortar ou perfurar l mina de barbear bisturi agulhas escalpes ampolas pipetas vidro quebrado etc podem ser descartados separadamente no local de sua gera o ime diatamente ap s o uso em recipientes com tampa de paredes r gidas resistentes n o s a punctura ruptura e vazamento mas tamb m ao processo de esteriliza o devidamente identi ficados com o s mbolo internacional de risco biol gico acresci do da inscri o PERFUROCORTANTE e de informa o sobre os riscos adicionais qu mico ou radiol gico Gerenciament
32. veis dos laborat rios que devem assegurar a integra o de pr ticas e procedimentos laboratoriais seguros na forma o b sica do pessoal A esteriliza o pelo calor em autoclave o m todo preferencial para todos os processos de descontamina o 129 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira e Deve se adotar um sistema de identifica o e separa o de ma teriais e recipientes infecciosos que siga os regulamentos nacio nais e internacionais de descarte e As agulhas hipod rmicas uma vez utilizadas n o devem ser reintroduzidas nos seus inv lucros partidas ou retiradas das seringas descart veis Todo o conjunto deve ser colocado num recipiente para descart veis e As seringas descart veis utilizadas com ou sem agulhas devem ser colocadas em recipientes para descart veis e incineradas ap s descontamina o em autoclave e preciso preparar e implantar programa espec fico sobre prote o biol gica em laborat rio segundo as exig ncias do servi o o tipo de trabalho realizado e as condi es locais e As precau es de seguran a tal como t cnicas de assepsia e pr ticas microbiol gicas seguras devem fazer parte do trabalho de rotina de laborat rio e Deve estar afixada no laborat rio uma c pia dos procedimentos necess rios em caso de derrames todo o pessoal do laborat rio deve ler e compreender esses procedimentos 2 2 6 Checklist recomendado pel
33. vel W intensidade fraca do ingl s weak de aglutina o CM campo misto presen a de hem cias aglutinadas e hem cias livres Fonte Adaptado de American Association of Blood Banks 1996 Outro variante deficiente do gene H caracterizado como fen tipo para Bombaim Ah Bh e ABh Os eritr citos de indiv duos portado res desse fen tipo apresentam quantidades m nimas dos ant genos A e Be pouco ou nenhum ant geno H Esse fen tipo difere do fen tipo Bombaim cl ssico por apresentar uma transferase H com atividade muito fraca o que leva as poucas quantidades de subst ncia H pro duzidas a serem convertidas aos ant genos A e B pelas suas respecti vas transferases Por causa da presen a regular de anticorpos naturais hemol ticos no sistema ABO uma regra b sica n o transfundir hem cias porta doras de ant genos que possam ser reconhecidos pelos anticorpos do receptor Assim de acordo com essa norma podemos estabelecer as seguintes regras de compatibiliza o no sistema ABO 69 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias 1 transfus es de isogrupos sempre que poss vel 2 transfus es de heterogrupos apenas excepcionalmente respei tando se o seguinte esquema Grupo A Grupo O _ Grupo AB wen Grupo B 2 Sistema Rh O sistema Rh o mais complexo sistema de grupos sangu neos e depois do sistema ABO o de maior import ncia cl nica Desco
34. 125 220 Toscano C Kosi L Cartilha de vacinas para quem quer mesmo saber das coisas Bras lia Organiza o Pan Americana da Sa de 2003 Disponi vel em http www opas org br sistema arquivos cart_vac pdf Acesso em 8 nov 2010 UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS Classe de produtos quimicos pe rigosos Alfenas Comiss o de Riscos Qu micos Universidade Federal de Alfenas s d Dispon vel em http www unifal mg edu br riscosquimicos Acesso em 4 mar 2011 WoRrLD HEALTH ORGANIZATION WHO INTERNATIONAL PROGRAMME ON CHEMICAL SAFETY IPCS INTERNATIONAL LABOUR ORGANIZATION ILO Safety in the Use of Chemicals at Work Genebra ILO 1991 Disponivel em http actrav itcilo org actrav english telearn osh kemi ctm2 htm Acesso em 2 set 2010 150 Os autores Alexandre Gomes Vizzoni bidlogo mestre em Ci ncias area de concentra o Doen as Infecciosas pelo Instituto de Pesquisa Cl nica Evandro Chagas Fiocruz com especializa o em Imuno Hematologia pela Universidade Federal do Rio de Janeiro e com profici ncia t cnica em Imuno Hematologia pela Associa o Brasileira de Hematologia e Hemoterapia chefe do Laborat rio de Imuno Hematologia e da Ag n cia Transfusional do Instituto de Pesquisa Cl nica Evandro Chagas Fiocruz coordenador da Especialidade em Hemoterapia do Curso de Especializa o em Biologia Parasit ria e Biotecnologia do Instituto Oswaldo Cruz Fiocruz e coordenador do Curso de Especializa
35. BHATTACHARYYA M Dynamic and Electro kinetic Behavior of Erythrocyte Membrane in Diabetes Mellitus and Dia betic Cardiovascular Disease Biochimica et Biophysica Acta v 1 780 n 2 p 108 115 2008 ALBERTS B et al Molecular Biology of the Cell Nova York Garland Science 2004 BERLINER S et al Increased Erythrocyte Adhesiveness Aggregation in the Peripheral Venous Blood of Patients with Ischaemic Heart Disease and an Eventful Course Acta Cardiologica v 56 n 2 p 121 126 2001 CAREL J Van Oss VAN REGENMORTEL Marc H V Immunochemistry Nova York Marcel Dekker 1994 DANIELS G Functional Aspects of Red Cell Antigens Blood Reviews v 13 n 1 p 14 35 1999 Davies D R COHEN G H Interactions of Protein Antigens with Anti bodies Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America v 93 n 1 p 7 12 1996 DE OLIVEIRA S SALDANHA C An Overview about Erythrocyte Mem brane Clinical Hemorheology and Microcirculation v 44 n 1 p 63 74 2010 29 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto DIERICKX D et al Autoimmune Hemolytic Anemia Journal of Internal Medicine v 266 n 5 p 484 491 2009 GARRATTY G Immune Hemolytic Anemia Associated with Drug Therapy Blood Reviews v 24 n 4 5 p 143 150 2010 GEDDE M M Huestis W H Membrane Potential and Human Erythrocyte Shape Biophysical Journal v 72 n 3 p 1 220 1 233 1997
36. Benzeno Etanol Acetona Extremamente inflam vel Classifica o subst ncias e formula es l quidas cujo ponto de fulgor se situa abaixo de 0 C possuindo tamb m baixa temperatura de ebuli o abaixo de 35 C Gases extremamente inflam veis formam facilmente com o ar uma mistura explosiva em condi es normais Precau o igual ao anterior Hidrog nio Propano ter diet lico T xico Classifica o subst ncias e prepara es que por inala o ingest o ou penetra o cut nea podem implicar riscos graves agudos ou cr nicos ou mesmo morte Precau o todo o contato com o corpo humano deve ser evitado observando se tamb m cuidados especiais com produtos cancer genos teratog nicos ou mutag nicos 110 Cloreto de b rio Mon xido de carbono Metanol Biosseguran a em laborat rios de sa de Classifica o subst ncias e Cianureto prepara es que por inala o ingest o E ou penetra o cut nea podem implicar nn de riscos graves agudos ou cr nicos ou mesmo morte Nicotina Muito t xico Precau o todo o contato com o corpo humano deve ser evitado observando se tamb m cuidados especiais com produtos cancer genos teratog nicos ou mutag nicos Classifica o subst ncias e Cloreto prepara es n o corrosivas que por de c lcio contato imediato prolong
37. C NOGUEIRA J M R Conceitos e t cnicas b sicas aplica dos ao laborat rio In MOLINARO E CAPUTO L AMENDOEIRA R Conceitos e m todos para forma o de profissionais em laborat rios de sa de volume 1 Rio de Janeiro Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio 2009 p 67 123 ORGANISATION FOR ECONOMIC CO OPERATION AND DEVELOPMENT OECD Biological Resource Centres Paris OECD 2001 Dispon vel em http www oecd org dataoecd 26 19 31685725 pdf Acesso em 29 out 2010 ORGANIZA O MUNDIAL DA SA DE OMS Manual de seguran a biol gica em laborat rio 3 ed Genebra OMS 2004 Paura A S Proposta para implanta o de manuten o preventiva em bancada de teste hidr ulico 2006 Monografia Gradua o em Engenharia Mec nica Faculdade de Engenharia Universidade Estadual do Maranh o S o Luis 2006 149 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira SHimizu H E RIBEIRO E J G Ocorr ncia de acidente de trabalho por materiais perfurocortantes e fluidos biol gicos em estudantes e trabalhadores da sa de de um hospital escola de Bras lia Revista da Escola de Enfermagem da USP S o Paulo v 36 n 4 p 367 365 2002 STEPHENS P R S et al Virologia In MOLINARO E CAPUTO L AMENDOEIRA R Conceitos e m todos para forma o de profissionais em laborat rios de sa de volume 4 Rio de Janeiro Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio 2009 p
38. Oswaldo Cruz 1998 Como j foi dito entre as regras b sicas para o trabalho em qual quer n vel de biosseguran a laboratorial est o as de considerar todo material biol gico como infeccioso trabalhar sempre com muita aten o sempre lavar as m os ap s os procedimentos nunca sair do laborat rio com jaleco ou avental nunca pipetar com a boca sem pre observar os sinais de aviso de risco e relatar qualquer acidente imediatamente ao supervisor do laborat rio Al m disso o treina mento quanto s precau es e aos procedimentos de biosseguran a indispens vel Laborat rios b sicos n veis de biosseguran a 1 e 2 A denomina o laborat rio NB 1 se aplica geralmente aos labora t rios de ensino b sico para os quais n o exigido nenhum projeto arquitet nico especial mas sim um bom planejamento espacial e fun cional com a ado o de boas pr ticas laboratoriais Nesses ambientes geralmente s o manipulados somente microrganismos pertencentes classe de risco 1 119 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira A designa o laborat rio NB 2 se aplica comumente aos laborat rios cl nicos ou hospitalares de n veis prim rios de diagn stico Al m das boas pr ticas preciso que esse tipo de laborat rio adote o uso de barreiras f sicas como cabine de seguran a biol gica e equipamen tos de prote o individual o desenho as instala es e a organiza o do l
39. Xk est ligada gli coproteina Kell por uma ponte de dissulfeto formando um complexo que afeta suas express es reciprocamente 2 Imunologia 2 1 Ant genos Convencionou se denominar ant geno a qualquer subst ncia so l vel celular ou particulada que pode ser especificamente ligada aos anticorpos ou receptores de c lulas T TCR do ingl s T cell receptor previamente sensibilizados Existem dois tipos de ant genos a o an t geno completo que re ne propriedades imunog nicas e antig ni cas ou seja a capacidade de induzir resposta imune espec fica fala se ent o de imun geno e imunogenicidade bem como a compet ncia para interagir com anticorpos e receptores de linf citos sensibiliza dos antigenicidade b o ant geno incompleto ou hapteno dotado apenas de antigenicidade que a capacidade de interagir com os an ticorpos e TCRs que lhe correspondem mas n o capaz de estimular uma resposta imunol gica Os s tios de liga o dos anticorpos e dos receptores de ant geno de c lulas T interagem com o determinante antig nico ou ep topo a menor rea da mol cula de ant geno respons vel pela liga o ao TCR ou ao anticorpo A presen a de v rios determinantes iguais chamada de polival ncia ou multival ncia e cada um pode inte ragir com a regi o vari vel das mol culas de TCR As superf cies celulares incluindo os eritr citos geralmente possuem grande quantidade de ant genos que re nem v
40. as do tipo B a Bl a mais simples funcionando como a do tipo A por m com exaust o externa Notipo B2 n o h nenhumarecircula o de ar dentro da c mara o ar filtrado na entrada com reten o biol gica e qu mica e antes de ser eliminado para o exterior Na B3 a c mara mais cara dessa categoria o cuidado para n o haver ne nhum tipo de vazamento de res duo qu mico ou biol gico maior protegendo o ambiente com maior efic cia Classe III fornece prote o maxima para o ambiente e o operador constru da para atividades NB4 fechada hermeticamente e pos sui visor fixo e luvas resistentes de borracha acopladas Seu acesso feito por caixa de porta dupla que poder ser descontaminada ap s a opera o Al m dos filtros possui um incinerador de ar 137 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira c Capelas de exaust o Equipamento imprescind vel em laborat rios onde se manuseiem produtos qu micos ou particulados a capela de exaust o tamb m pode ser chamada de capela qu mica ou gabinete de exaust o um gabi nete que deve ser ventilado e projetado de forma que o sistema leve para fora do edif cio os efluentes indesej veis provocados por qual quer procedimento efetuado no seu interior O sistema de exaust o da capela s deve ser desligado 10 a 15 mi nutos ap s o t rmino dos trabalhos para que todos os gases sejam exauridos Ao fazer opera es nas capel
41. capacidade de clivar a IgG Tamb m s o desnaturados por formalde do ou pelo aquecimento a 56 C du rante 30 minutos Harmening 2006 Ant genos Duffy se degradam com a estocagem mesmo quando congelados Possuem a capacidade de eluir dos eritr citos estoca dos em meio com baixa concentra o i nica ou pH baixo Mollison Engelfriet e Contreras 1997 H associa o entre os ant genos Duffy e a infec o pelo parasito causador da mal ria estando resistentes infec o por P vivax os indiv duos negros americanos e africanos com fen tipo Fy a b 3 6 2 Anticorpos anti Fy e anti Fy Geralmente pertencem classe IgG e reagem melhor fase da an tiglobulina humana sendo rara a liga o ao complemento Alguns anticorpos podem apresentar reatividade na fase salina principal mente ap s est mulo secund rio Os anticorpos podem apresentar efeito de dose e n o reagem com he m cias tratadas por enzimas sendo essa uma caracter stica til na an li se da identifica o de m ltiplos anticorpos no soro que contenha anti Fy ou anti Fy Est o associados a rea es transfusionais hemol ticas com grau mo derado de hem lise Na presen a de anticorpos anti Fy ou anti Fy no soro do paciente o mesmo deve obrigatoriamente receber sangue com aus ncia do ant geno correspondente Anticorpos Duffy est o implicados em rea es transfusionais tar dias principalmente em pacientes com anemia falciforme e m ltip
42. circulantes em geral dirigidos contra os ant genos Rhesus Esses eritr citos opsoni zados s o sequestrados no ba o e em certos casos no f gado por ma cr fagos residentes nesses rg os As autoaglutininas frias s o anticorpos da classe IgM dirigidos contra a membrana das hem cias Ocorrem na popula o normal por m nunca em t tulos superiores a 1 32 Interferem na tipagem san gu nea na prova cruzada em an lises hematol gicas e em rea es imunol gicas A anemia hemol tica por anticorpos frios pode ser cr nica caso em que ocorre com mais frequ ncia como doen a prim 53 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques ria Pode manifestar se tamb m como uma complica o transit ria e autolimitada de infec o por determinados agentes Altos t tulos surgem em infec es pelo Mycoplasma pneumoniae influenza v rus Epstein Barr bem como em doen as do col geno linfomas e ocasio nalmente na cirrose Quadro 1 Principais causas das anemias hemol ticas autoimunes Tipo quente Tipo frio l pus eritematoso sist mico e outros dist rbios do tecido conjuntivo pneumonia por Mycoplasma pneumoniae outras doen as autoimunes por exemplo hepatite autoimune mononucleose infecciosa leucemia linfoc tica cr nica leucemia linfoc tica cr nica linfoma n o Hodgkin linfoma maligno teratoma de ov rio colite ulcerativa
43. cito em solu o fisiol gica NaCl 0 85 24 Bioqu mica eritrocit ria A diferen a de potencial entre a nuvem de c tions atra dos pelas cargas el tricas negativas da membrana eritrocit ria e o meio cha mada de potencial zeta O potencial zeta a medida da intera o das for as de atra o de van der Waals e as for as eletrost ticas ou seja a medida do potencial el trico que circunda as part culas em sus pens o de um coloide Quanto maior o potencial zeta mais est vel um coloide pois as part culas carregadas se repelem umas s outras e essa for a supera a tend ncia natural agrega o o que significa menor agrega o e menor coagula o O potencial zeta se reduz a partir da superf cie da part cula e se torna zero onde a concentra o de cargas el tricas igual O potencial zeta au menta medida que diminui a dist ncia em rela o superf cie da par t cula e a sua redu o se consegue pelo ajuste do pH pr ximo do ponto isoel trico O ponto isoel trico o valor de pH em que uma mol cula por exemplo um amino cido ou uma prote na apresenta carga el trica igual a 0 ou seja um pH no qual h equil brio entre as cargas negativas e positivas dos grupamentos i nicos O potencial zeta pode ser reduzi do pela adi o de ons ou coloides com carga oposta ao sistema coloidal Quanto o potencial zeta se aproxima de zero perto do ponto isoel trico o sistema est meno
44. coinfec o ou por portador cr nico desse tipo de hepatite As vias de transmiss o s o semelhantes s do v rus da hepa tite B sendo a exposi o percut nea a mais importante As medidas de controle s o as mesmas utilizadas para a hepatite B inclusive a vacina Stephens et al 2009 A Sociedade Brasileira de Infectologia e o CDC t m demonstrado pre ocupa o com os acidentes causados por agulhas sobretudo no que se re fere notifica o e monitora o dos acidentados bem como ado o de medidas padr o pelos trabalhadores da sa de visando preven o tanto da transmiss o do v rus HIV quanto das hepatites Be C Nessa perspectiva listamos a seguir sob a forma de itens as reco menda es sobre biosseguran a baseadas principalmente em publi ca o da Organiza o Mundial de Sa de 2004 e O principal ponto para a pr tica da seguran a biol gica a ava lia o dos riscos Para isso o respons vel pelo laborat rio deve assegurar se da realiza o de avalia es de riscos adequadas e trabalhar em estreita liga o com a comiss o de seguran a e o pessoal da institui o a fim de assegurar a disponibilidade de equipamento e instala es apropriadas para apoiar as ativida des em quest o 128 Biosseguran a em laborat rios de sa de Nunca pipetar com a boca Existem os mais diversos formatos de dispositivos que podem ser acoplados pipeta e com isso proporcionar um procedimento seg
45. competentes Caso sejam isolados dentro do territ rio nacional dever o ser tratados no labo rat rio com n vel de biosseguran a determinado pelos crit rios que orientam seu n vel de risco Nessas classifica es foram considerados somente os poss veis efeitos dos agentes em indiv duos sadios Os poss veis efeitos em casos de por tadores de transtornos imunol gicos com patologia pr via em uso de medica o durante a gravidez ou em fase de lacta o n o foram avaliados O estabelecimento de uma analogia direta entre a classe de risco do agente biol gico e o n vel de biosseguran a uma dificuldade frequente no momento de definir o n vel de conten o Por exemplo estabelecer que para os agentes biol gicos da classe de risco 3 deve se trabalhar em um la borat rio NB 3 sem considerar o procedimento diagn stico que ser uti lizado pode culminar em gastos desnecess rios o que remonta ao que foi dito no in cio deste cap tulo sobre ger ncia conhecimento e organiza o Assim dependendo da t cnica utilizada para a realiza o do diagn stico um laborat rio NB 2 poderia ser suficiente nesse caso Da mesma forma um agente de classe de risco 2 que deva ser cultivado em grandes concen tra es ou volumes provavelmente vai requerer um laborat rio NB 3 2 2 3 N veis de biosseguran a Os laborat rios podem ser classificados de acordo com o n vel de biosseguran a que est relacionado com as normas que ele
46. contato pela segunda vez com o mesmo ant geno em geral n o apresenta nenhum sinal ou sintoma De acordo com Coombs e Gell 1968 foram definidos quatro tipos de rea o de hipersensibilidade tipos I II III e IV Exceto a rea o de tipo IV que uma rea o mediada por c lulas e considerada tardia as outras tr s rea es s o mediadas por anticorpos No caso do tipo I tamb m conhecida como anafil tica ou imediata os anticorpos s o da classe IgE j as rea es dos tipos II e III s o mediadas por IgG e IgM A ocorr ncia da rea o de hipersensibilidade tipo I est associada participa o de mast citos e bas filos assim como de seus mediadores qu micos entre eles a histamina A diferen a b sica entre as rea es de hipersensibilidade tipos II e II a localiza o do ant geno Na rea o tipo II o ant geno que se localiza na superf cie da c lula induz forma o de anticorpos naquele local inclusive com a subsequente ativa o do sistema complemento pela via cl ssica levando lise de toda a estrutura inserida naquele contexto J na rea o tipo II conhecida tamb m como rea o por imunocomplexo o ant geno se encontra ligado a um anticorpo formando um imunocom plexo livre e circulante A deposi o desses imunocomplexos em super f cies celulares como as regi es das articula es e vasculares pode levar respectivamente artrite e vasculite Por causa da presen a do imuno com
47. cord o inicialmente fenotipados como Le a b Anti Le n o pode ser separado por t cni cas de adsor o utilizando se c lulas Le a b ou de cord o 3 6 Sistema Duffy Foi identificado em 1950 em um paciente hemof lico chamado Duffy que fora submetido a m ltiplas transfus es o primeiro exem plar de anti Fy Cutbush Mollinson e Parkin 1950 No ano pos terior Ikin et al 1951 descreveram o anticorpo que definiu o seu par antit tico denominado anti Fy no soro de uma mulher multi para Os principais ant genos do sistema Duffy na rotina imuno hematol gica s o Fy e Fy O gene Duffy est localizado perto do centr mero no bra o longo do cromossomo 1q22 23 3 6 1 Antigenos Fy e Fy Os ant genos Fy e Fy s o produtos de alelos codominantes que residem em uma glicoprote na cida gp Fy que transpassa a mem brana sete vezes e tem um N terminal no dom nio extracelular e um C terminal no dom nio intracelular Est o expressos em eritr citos fetais a partir da 6 semana de ida de gestacional estando bem desenvolvidos ao nascimento Esses anti genos n o foram detectados em plaquetas linf citos granul citos ou mon citos entretanto puderam ser detectados no c rebro endot lio ba o tireoide timo e rins Cartron e Rouger 1995 S o destru dos por 84 Imuno hematologia eritrocit ria enzimas proteol ticas como a papa na bromelina ficina e quimio tripsina al m do ZZAP que tem a
48. de dois loci Em 1953 Wiener comunicou a descoberta de um anticorpo para um ant geno de alta frequ ncia que foi denominado U Esse ant ge no encontra se em uma glicoprote na bem caracterizada chamada MN sialogligoproteinas MN SGP ou glicoforina A GPA 3 2 1 Antigenos MNSs Os ant genos MN podem ser detectados na 9 semana de gesta o e estao bem desenvolvidos ao nascimento Uma vez que os antige nos MN estao na extremidade externa da GPA podem ser facilmente destruidos ou removidos por enzimas proteoliticas M e N sao basica mente eritrocitarios e estao localizados no cromossomo 4 Embora dados mais antigos tenham sugerido a presen a do anti geno M em linf citos M e N n o foram detectados em linf citos mo n citos ou granul citos por citometria de fluxo e imunofluoresc ncia Ant genos MN foram detectados no epit lio e endot lio de capilares renais Hawkins 1985 76 Imuno hematologia eritrocit ria Os ant genos Ss muito parecidos com os ant genos MN est o loca lizados em uma glicoprote na menor chamada Ss sialoglicoproteina Ss SGP ou glicoforina B GPB Existem cerca de 2x10 c pias de GPB por eritr cito entretanto nem todas est o dispon veis para a li ga o do anticorpo Os ant genos Ss encontram se bem desenvolvidos ao nascimento e est o presentes nos eritr citos a partir da 12 semana de idade gesta cional S o menos degradados por enzimas porque os ant genos est o localizados e
49. febris interpretadas como algo inerente natureza do processo Assim pouco a pouco foram iniciadas as transfus es de homem a homem Cientistas como Blundell Ponfick Landis Arthur e Pager demonstraram os efeitos fisiol gicos e qu micos das transfus es mas foram os trabalhos imunol gicos de Ehrlich Bordet e Gengou en tre outros que permitiram a Karl Landsteiner 1868 1943 descrever a exist ncia dos grupos sangu neos classificando os e isso possibilitou a incorpora o da transfus o sangu nea na pr tica m dica Em 1901 Landsteiner descreveu os tipos A Be O das hem cias posteriormente Decastello e Sturli descreveram o tipo AB Assim uma pessoa com o ant geno A em suas c lulas sangu neas tem an ticorpos contra o ant geno B no soro ou plasma e o indiv duo com ant geno B tem anticorpos contra o ant geno A O doador univer sal termo inventado por Ruben Ottenberg em 1911 n o tem ant ge nos em suas c lulas mas tem anticorpos circulantes contra A e B no plasma ou no soro As transfus es de sangue incompat vel causam rea es grav ssimas acarretando les es renais e por vezes levando morte Por m isso n o era conhecido at 1908 quando Ottenberg co me ou a testar o sangue do doador e do receptor antes de cada trans fus o No entanto ainda que n o se proceda determina o pr via de incompatibilidade como resultado da distribui o matem tica dos grupos sangu neos as rea es de in
50. forma parte el trica refrigera o dreno gua puri ficada e sistema de gerador de vapor limpo devem ser analisados e projetados para cada caso levando se em conta o consumo a vaz o a produtividade e a efici ncia de cada equipamento Al guns equipamentos s o de uso comum para os laborat rios da rea da sa de e por isso merecem aten o especial S o eles sistema de purifica o de agua bidestilador desmi neralizador deionizador e purificador por osmose reversa entre outros autoclave forno estufa sistema de filtra o de ar incubadoras banho maria freezer c mara fria mi crosc pio e centr fuga O monitoramento e a valida o dos equipamentos refor am um dos elementos das boas pr ticas de laborat rio que a preocupa o com o maquin rio e de vem ser feitos diariamente com a confec o de uma tabela de registros com os principais par metros do equipamento e Pessoal o pessoal um dos quatro pilares das boas pr ticas de la borat rio Todos os laborat rios devem ter um organograma com descri o dos cargos fun es e responsabilidades t cnicas de seus 142 Biosseguran a em laborat rios de sa de trabalhadores Os profissionais devem possuir qualifica o t cnica para ocupar e responder pelos cargos inclusive por cargos geren ciais uma vez que a lideran a vai funcionar como determinante estrat gico na condu o da equipe Um dos pontos nevr lgicos nessa rea a moral d
51. geno K o segundo mais imunog nico de todos os ant genos de grupos san guineos o ant geno D o mais imunog nico deles Um paciente com fen tipo K que receba uma nica transfus o com a presen a 80 Imuno hematologia eritrocit ria do ant geno tem uma probabilidade de at 10 para a forma o do anticorpo correspondente Hughes Jones e Gardner 1971 O ant geno K de baixa frequ ncia ao passo que o ant geno k de alta frequ ncia e pode ser encontrado em aproximadamente 99 8 da popula o Os ant genos Kell n o s o desnaturados por enzimas como bro melina ficina e papa na entretanto s o inativados por tripsina quimiotripsina solu es de ditiotreitol DTT 2 mercaptoetanol 2 ME 2 aminoetilisotiour nio AET e ZZAP que cont m DTT e enzima proteol tica papa na ativada com ciste na 3 4 2 Anticorpos Kell Dentre os anticorpos irregulares mais detectados pelos servi os de hemoterapia com exce o do anti D o anti K o anticorpo mais co mumente encontrado De forma geral apresenta se como um anticor po de classe IgG reativo na fase de antiglobulina no entanto alguns poucos anticorpos aglutinam c lulas suspensas em solu o fisiol gica Aproximadamente 20 dos anticorpos do sistema Kell fixam com plemento at C3 mas n o possuem capacidade hemol tica Por m os anticorpos anti K e anti k t m sido implicados em casos de DHRN e envolvidos em rea es transfusionais hemol ticas
52. graves doen as em humanos e animais com alta capacidade de dissemina o na comunidade e no meio ambiente Essa classe inclui principal mente os v rus Exemplos virus Ebola virus Marburg Classe de risco especial alto risco de causar doen a animal grave e de dissemina o no meio ambiente compreende agentes biol gicos de doen a animal n o existentes no pa s e que embora n o sejam obrigatoriamente pat genos de im port ncia para o homem podem gerar graves perdas econ mi cas e ou na produ o de alimentos Exemplos v rus da c lera su na v rus da peste avi ria 117 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira 2 2 2 Observa es sobre a classifica o dos agentes biol gicos Quando mais de uma esp cie de um mesmo g nero tem potencial patog nico ser o apontadas aquelas mais importantes As demais ser o representadas pelo nome do g nero seguido da denomina o sp com a qual se indica que outras esp cies do g nero podem ser patog nicas A classifica o de parasitas e as medidas de conten o associadas a eles aplicam se apenas para os est gios de seus ciclos em que eles sejam infecciosos para o homem ou os animais Os agentes pertencentes classe especial precisam ser manuseados obrigatoriamente em laborat rio com n vel de biosseguran a 4 NB 4 antes de circularem no pa s devendo ter sua importa o limitada e sujeita pr via licen a das autoridades
53. hematologia eritrocit ria gicamente compat vel pode em alguns casos causar maior dano ao paciente Avaliar bem cada caso na cl nica transfusional importante para o bom aproveitamento da transfus o sem o agravamento do es tado cl nico do paciente 5 Pesquisa e identifica o de anticorpos irregulares A detec o e a identifica o dos anticorpos s o as duas reas mais interessantes em toda a imuno hematologia em especial para os inician tes Elas representam grande desafio para o estudante que est apren dendo os princ pios e procedimentos do banco de sangue Na maioria das amostras de sangue testadas em um laborat rio de imuno hematologia feita uma triagem de anticorpos no soro desses pa cientes Em geral essa detec o de anticorpo compreende a triagem do soro do paciente testado contra duas ou tr s hem cias fenoti padas do grupo O de um reagente de avalia o As hem cias rea gentes tamb m s o referidas como painel de triagem ou sele o Elas s o sempre do grupo O para que poss veis anticorpos anti A e anti B dos indiv duos a serem testados n o interfiram na detec o dos anti corpos e cont m os ant genos mais comumente encontrados e cli nicamente importantes Essas c lulas s o encontradas por meio de teste de fabrica o comercial Um diagrama relacionando a consti tui o antig nica de cada c lula de avalia o fornecido com cada exemplar pelo fabricante quadro 5 Quadro 5 Per
54. imu nologia Sua inclus o de forma mais espec fica na forma o de t cni cos de laborat rio de grande relev ncia para os laborat rios cl nicos e para a medicina transfusional um segmento da hemoterapia A imuno hematologia o estudo dos ant genos presentes nas he m cias eritr citos dos anticorpos a eles correspondentes e de seu significado cl nico A descoberta dos primeiros grupos sangu neos A Be O em 1901 pelo m dico austr aco Karl Landsteiner foi o marco entre a era emp rica e a era cient fica na hist ria da hemoterapia O in cio da era cient fica possibilitou a descoberta de outros ant genos de grupos sangu neos utilizando se o m todo sorol gico para detectar aglutina o direta decorrente da rea o ant geno anticorpo Em 1945 foi descrito por Coombs Mourant e Race o teste de Coombs preferen cialmente chamado de teste de antiglobulina humana uma das t cnicas mais importantes usadas no estudo dos grupos sangu neos humanos O soro antiglobulina humana utilizado para detectar anticorpos que n o causam aglutina o direta das hem cias o que revolucionou a sorologia dos grupos sangu neos possibilitando a descoberta de anticorpos produ zidos por aloimuniza es decorrentes de transfus o ou gesta o Na ltima d cada a biologia molecular foi respons vel por mais um avan o com especial foco no estudo da estrutura e fun o do material gen tico e seus produtos de express o as prote
55. nas membra nares que geram os ant genos de grupos sangu neos 7 A compreens o da imuno hematologia eritrocit ria depende do conhecimento multidisciplinar em gen tica imunologia e bioquimi ca para apoio b sico indispens vel aos laborat rios de diagn stico e principalmente aos servi os de hemoterapia A qualidade da imuno hematologia na execu o dos exames imuno hematol gicos como tipagem sangu nea prova de com patibilidade pesquisa e identifica o de anticorpos irregulares teste direto de antiglobulina humana e fenotipagens e na correta utiliza o do soro antiglobulina humana fundamental para o diagn stico da doen a hemol tica perinatal da anemia hemol tica autoimune e da conduta transfusional nos transplantes ABO e ou Rh incompat veis contribuindo para a seguran a transfusional A import ncia da imuno hematologia para a forma o de t cnicos de laborat rio fez os autores escreverem este livro E a inclus o de um cap tulo sobre biosseguran a complementa e contribui para a ado o de boas pr ticas de laborat rio Por causa da minha experi ncia na rea de hemoterapia com n fase em imuno hematologia e tamb m como docente contribuindo na forma o e na capacita o de profissionais da sa de tenho a sa tisfa o de cumprimentar os autores que oportunamente decidi ram preencher esta lacuna de forma simples e clara possibilitando o avan o no conhecimento da imuno hematologia pa
56. o o i nica Intera es hidraf bicas For a sde van der Waals Liga o i nica Figura 6 For as de intera o antigeno anticorpo As for as de van der Waals ou for as eletrodin micas s o flutu a es nas nuvens de el trons em torno de mol culas polarizando de maneira oposta os tomos vizinhos H uma atra o geral entre todos os tomos e mol culas que ficam suficientemente perto para que ocorra a liga o Em solu o aquosa essas for as s o frequentemente atrativas e representam menos de 10 da intera o total As for as hidrof bicas ou intera es atrativas cido base s o grupos hidrof bicos interagindo desfavoravelmente com a gua que tendem a se agrupar para a exclus o de mol culas de gua A atra o tamb m envolve for as de van der Waals As for as de intera o mencionadas acima contribuem para a liga o ant geno anticorpo a dist ncia entre as mol culas de ant geno e as do anticorpo podem alterar as for as envolvidas na liga o especi fica e importante ferramenta no estudo dessas intera es 20 Bioqu mica eritrocit ria As intera es eletrost ticas ocorrem entre cadeias laterais de amino cidos carregados Nas liga es de hidrog nio e nas for as de van der Waals de menor alcance tamb m podem ocorrer intera es entre di polos el tricos Altas concentra es de sal e pH extremos enfraquecem as intera es eletrost ticas e
57. ocupacionais bem como pro teger a integridade e a capacidade produtiva do trabalhador Inicialmente necess rio definir adequadamente os conceitos de doen a ocupacional e de acidente de trabalho pois apesar de distintos podem ocasionar alguma confus o As doen as ou patologias ocupa cionais s o aquelas que se originam do exerc cio de determinadas pro fiss es por uma a o lenta e cont nua sendo comprovadas pela rela o causa efeito Em outras palavras s o enfermidades especificamente ocasionadas por determinado trabalho ou pelas condi es insalubres em que ele se realiza Brasil 1999b Na atualidade para evitar enganos dentro dos conceitos alguns au tores optaram por considerar os problemas relacionados ao trabalho dentro da mesma categoria todavia preferimos manter essa divis o de forma a que o leitor perceba bem essa diferen a e possa se prevenir de forma mais adequada 1 Doen as ocupacionais Quando falamos de doen as ocupacionais estamos nos referindo tanto quelas ocasionadas por agentes biol gicos quanto s decorrentes de fatores f sicos e qu micos associados ao risco do trabalho Brasil 2001a Como nem sempre f cil definir uma patologia como ocupa cional o conhecimento dos fatores desencadeantes em cada uma das atividades de trabalho seus meios de preven o e o diagn stico preco ce s o uma excelente associa o para prevenir essas doen as Entre as patologias ocupacionais mais con
58. organismo podem ser a inala o a absor o e a ingest o resultando em doen as respirat rias cr nicas doen as do sistema nervoso doen as nos rins e f gado e at mesmo alguns tipos de c ncer Em outras palavras o risco igual ao peri go associado exposi o risco perigo x exposi o Portanto a boa comunica o quanto aos perigos alerta o profissional para que ele possa reduzir ao m nimo a sua exposi o diminuindo assim o risco inerente atividade 2 1 1 S mbolos de risco Representados geralmente no interior de figuras geom tricas os s mbolos de risco s o pictogramas s mbolos que representam um ob jeto ou um conceito que devem ser utilizados para informar sobre uma propriedade importante de um produto ou mesmo para simbolizar o risco inerente a determinado local No caso de produtos qu micos muitas vezes os s mbolos comunicam o principal risco que a subst ncia representa quando entramos em contato com ela por exemplo explo s o queimadura e intoxica o No Brasil os s mbolos de risco correspondem norma NBR 7500 da Associa o Brasileira de Normas T cnicas ABNT mas exis tem normativas internacionais como as sugeridas pela Organiza o Mundial de Sa de OMS pela Organiza o Internacional do Tra balho OIT e pelo Programa Internacional de Seguran a Quimica PISQ World Health Organization International Programme on Chemical Safety e International Labour Organization 2
59. respons vel pela estrutura fluida da membrana e serve como uma barreira relativamente imperme vel passagem da maioria das mol culas hidrossol veis As prote nas presentes na bicamada lip dica atuam como mediadoras para praticamente todas as outras fun es da membrana entre elas o transporte de mol culas espec ficas atrav s da bicamada lip dica Tamb m atuam como ligantes estruturais que conec tam o citoesqueleto por meio da bicamada lip dica tanto matriz celular quanto s c lulas adjacentes servindo como receptores para a detec o e a transdu o de sinal fazendo a c lula interagir com o ambiente que a envolve Quando comparamos a camada interna camada citos lica e a camada externa camada extracelular da bicamada lip dica encontra mos diferen as na composi o dos lip deos Essas diferen as refletem as v rias fun es das duas monocamadas da membrana plasm tica 11 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto Todos os lip deos que formam a membrana plasm tica s o anfipati cos ou anfif licos isto apresentam uma parte hidrof bica apolar e uma parte hidrof lica polar Essa caracter stica anfip tica dos lip deos respons vel pela forma o espont nea da bicamada lip dica em am biente aquoso Isso faz que a por o hidrof lica esteja voltada para a gua enquanto a por o hidrof bica est voltada para o interior Existem tr s principais classes de lip
60. rio deve seguir as normas b sicas de ergonometria A les o por esfor o repetitivo LER que acomete profissionais da rea ou na terminologia mais atual o dist rbio osteomuscular rela cionado ao trabalho Dort doen a ocupacional com maiores ndices de notifica o na previd ncia social podem ser evitados com medidas pre ventivas como imposi o de limites de horas di rias na mesma posi o e instru o quanto correta postura Sugere se como medida preventiva 104 Biosseguran a em laborat rios de sa de para profissionais que trabalham em bancadas a preocupa o de manter eventualmente intervalos alternados com alongamento e relaxamento dos bra os punhos m os e principalmente da coluna 2 Acidentes de trabalho Os acidentes de trabalho diferentemente das doen as ocupacio nais ocorrem n o por uma exposi o prolongada mas por um agra vo imprevisto no exerc cio da atividade e que pode ser extremamente desastroso principalmente para profissionais que lidam com fluidos biol gicos como o sangue Sabemos que em laborat rios de imuno hematologia o sangue testado amplamente n o s quanto aos sis temas antig nicos ABO Rh etc e anticorpos mas tamb m quanto a poss veis doen as transmiss veis por meio dele como hepatite e Aids entre outras A exposi o acidental do profissional a sangue contami nado pode acarretar s rios preju zos sua sa de de acordo com os agentes que venham a
61. rios determinantes antig nicos Os determinantes antig nicos de prote nas glicoprote nas ou lipoprote nas tanto podem ser formados pela sequ ncia de amino ci dos determinantes sequenciais quanto por amino cidos adjacentes determinantes n o sequenciais n o ligados por liga es pept dicas que se encontram pr ximos por causa da preserva o da estrutura da mol cula 42 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia A estimula o de linf citos de uma esp cie animal com prote na de outro animal da mesma esp cie resulta em uma resposta imune muito baixa frequentemente indetect vel Por sua vez se essas pro te nas forem inoculadas em animal de outra esp cie tendem a de sencadear rea es imunit rias bastante elevadas Isso acontece por que quanto mais pr xima for a rela o filogen tica menor ser o est mulo e vice versa Embora esse atributo da rela o filogen tica reflita boa parte das aplica es imunol gicas n o pode ser tomado como regra A rejei o de transplantes e a rea o por incompati bilidade em transfus es de sangue s o causadas por uma resposta imune potente aos ant genos que comp em o complexo principal de histocompatibilidade MHC do ingl s major histocompatilibi ly complex e s c lulas do tecido transplantado bem como pelas diferen as nos ant genos do grupo sangu neo do doador Essas di feren as s o ditas alog nicas e a resposta imune que esses ant
62. ser transmitidos Em todos os casos o uso adequado de equipamentos de prote o a imuniza o e o conhecimento dos riscos s o fundamentais em qual quer rea para o desempenho seguro das atividades espec ficas entre tanto lembramos que na rea de laborat rio um pequeno descuido pode trazer consequ ncias muito graves para a sa de do trabalhador Nesse contexto destacamos os t cnicos de laborat rio de an lises cl ni cas principalmente os que coletam analisam e processam sangue e seus derivados inclusive os profissionais de bancos de sangue porque est o especialmente expostos a doen as de cunho ocupacional e a acidentes de trabalho Esses profissionais devem possuir uma carteira de vacina o que contemple os principais agentes imunopreven veis No Brasil o pro grama de vacina o do Minist rio da Sa de Toscano e Kosim 2003 come a no primeiro m s de vida do beb e segue ao longo de toda a vida do indiv duo Os profissionais de sa de al m do esquema nor mal de vacina o devem estar imunizados contra aqueles agentes que representem risco em sua atividade Destacamos assim a ne cessidade da vacina antitet nica que deve ser administrada a cada dez anos e da vacina contra o virus da hepatite B HBV que deve 105 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira ser administrada em tr s doses 0 1 e 6 meses com a realiza o do esquema vacinal completo necess ria pa
63. 003 Segun 107 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira do esses organismos os s mbolos e indica es de perigo que devem ser utilizados s o e corrosivo c digo C um s mbolo de um cido ativo e explosivo c digo E uma bomba detonante e comburente ou oxidante c digo O uma chama acima de um c rculo e inflam vel n o possui c digo facilmente ou altamente infla m vel c digo F e extremamente inflam vel c digo F uma chama e t xico c digo T e muito t xico c digo T representa o de uma caveira sobre t bias cruzadas e irritante c digo Xi ou nocivo c digo Xn uma cruz de Santo Andr perigoso para o ambiente c digo N representa o de agravos a um peixe e a uma rvore Quadro 1 S mbolos internacionais de risco qu mico defini o precau o e exemplos S mbolo e nome Defini o precau o Exemplos Classifica o nesse grupo est o cido inclu dos principalmente cidos clor drico anidridos e lcalis Podem causar E destrui o de tecidos vivos e ou Acido fluor drico materiais inertes ocasionar danos aos c recipientes e contaminar as reas OMOSINO de armazenagem Precau o deve se evitar o contato com olhos pele e roupa e tamb m impedir a inala o mediante medidas de prote o especiais como m scara com filtros espec ficos 1
64. 08 Biosseguran a em laborat rios de sa de Explosivo Classifica o s o compostos qu micos Nitroglicerina extremamente inst veis e sens veis a choques ou fric es e que podem explodir sob o efeito de calor excessivo Trinitrotolueno TNT Precau o frascos com esse tipo de material devem ser mantidos longe de fontes de calor e armazenados em local ventilado e isolado da a o do fogo do calor e de fa scas Em caso de cilindros de gases comprimidos deve se tamb m evitar pancadas Esse composto pode facilitar a combust o dificultando a extin o de algum prov vel inc ndio Em geral os per xidos tamb m s o irritantes do aparelho respirat rio pele e olhos Comburente ou oxidante Classifica o produto qu mico que Oxig nio alimenta a combust o ato de queimar processo de combina o Nitrato de de uma subst ncia com o oxig nio pot ssio O material pode iniciar ou facilitar a Per xido de combust o quando em contato com hidrog nio subst ncias inflam veis dificultando o combate ao fogo Precau o evitar contato com subst ncias combust veis que possam desencadear um inc ndio A longo prazo o uso de produtos oxidantes pode danificar metais e outras superf cies Oliveira e Nogueira 2009 A utiliza o de EPIs fundamental para a seguran a do trabalhador Inflam vel Classifica o materiais inflam veis leo de
65. 1 Antigenos eritrocitarios Os ant genos presentes nos eritr citos e nas plaquetas desempenham papel preponderante na pr tica transfusional pela sua capacidade de in duzir resposta imunit ria A utiliza o de sangue seja com a inten o de salvar vidas seja com prop sito vitalizante e rejuvenescedor como prati cado por antigas civiliza es eg pcia grega romana invariavelmente era malsucedida pois n o se conhecia o sistema da circula o sangu nea o sangue nem sempre era administrado por via endovenosa e frequente mente se utilizava sangue de outras esp cies animais A demonstra o por William Harvey 1578 1657 da circula o con t nua do sangue atrav s do sistema vascular contribuiu para a admi nistra o intravenosa de medicamentos e possibilitou a realiza o das primeiras transfus es sangu neas entre animais de modo que j no s culo XVII se injetavam subst ncias no interior da corrente sangui nea com alguns xitos e muitos fracassos Assim era de uso corrente in jetar vinho nos c es de ca a para o tratamento de algumas enfermidades Johann Daniel Major 1634 1693 administrava medica o intrave nosa mediante o uso de finos cilindros de prata Sugeriu como haviam feito outros autores que era poss vel injetar sangue nas veias mas n o h provas de que o tenha feito em homens No s culo XVII Richard Lower 1631 1691 foi talvez o primeiro a realizar uma transfus o de um animal para outro
66. 4 o de n vel de conten o mais alto Nesse am biente a fonte de todo o ar provido aos profissionais deve ser externa ao laborat rio e o controle de entrada e sa da da ventila o deve ser feito com filtro absoluto tipo HEPA A manipula o ocorre em c ma ras de seguran a biol gica de n vel 3 Al m disso o laborat rio deve estar posicionado geograficamente em reas que ofere am menor pro babilidade de dispers o de agentes de alto risco e ser funcionalmente independente de outras reas necess rias s boas pr ticas como cen trais de prepara o de material Esses laborat rios requerem al m dos requisitos f sicos e operacionais dos n veis de conten o 1 2 e 3 120 Biosseguran a em laborat rios de sa de barreiras de conten o instala es desenho e equipamentos de pro te o e procedimentos especiais de seguran a como autoclaves de porta dupla e tratamento obrigat rio do esgoto Somente nesse tipo de laborat rio podemos trabalhar com microrganismos da classe de risco 4 2 2 4 Res duos provenientes do laborat rio e seu descarte correto Como comentado anteriormente todo e qualquer material seja ele biol gico qu mico ou de outra categoria deve ser avaliado quan to ao risco para a sa de do ambiente e para os seres vivos Todavia devemos nos preocupar com essas subst ncias n o s no mbito do laborat rio e de sua manipula o mas tamb m no que diz respeito sua disposi o na f
67. IgG 3 Alguns anticorpos da classe IgM podem ocorrer transitoriamente no in cio da aloimuniza o Raros anti E e anti C podem ser observados sem um est mulo antig nico conhecido sendo considerados naturais A transfus o a via mais frequente de imuniza o contra ant genos Rh No caso espec fico do ant geno D estima se em 80 a probabilida de de imuniza o ap s uma transfus o incompat vel J a imuniza o por gravidez representa a maioria dos casos de doen a hemol tica do rec m nascido sendo devida ao anti D Entretanto com a profilaxia por imunoglobulinas anti RhD o n mero de aloimuniza es mater nas contra o ant geno D diminuiu mas o mesmo n o ocorreu com os ant genos E c e C Os anticorpos Rh s o clinicamente significativos reativos a 37 C e na fase de antiglobulina humana AGH Em geral esses anticorpos n o fixam complemento e a hem lise resultante de uma transfus o incompat vel ser extravascular caracterizando uma rea o transfu sional hemol tica retardada O receptor da transfus o contendo ant geno Rh correspondente ao anticorpo previamente formado pode apresentar febre inexplic vel com 74 Imuno hematologia eritrocit ria eleva o da bilirrubina e redu o da hemoglobina e haptoglobina De modo usual a t cnica da antiglobulina direta Coombs direto apresenta resultado positivo principalmente por IgG tendo os estudos de elui o importante papel na elucida o da esp
68. M Eles s o produzidos antes que a c lula B tenha sofrido hipermuta o som tica portanto tendem a ser de baixa afinidade como visto anteriormente A IgM forma pent me ros nos quais os dez s tios de liga o com o ant geno podem se unir simultaneamente a ant genos multivalentes como os polissacar deos de parede celular bacteriana Essa estrutura pentam rica tamb m 3 Parte do texto deste item foi reproduzida de Teva Fernandez e Silva 2009 48 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia torna a IgM capaz de ativar o complemento de maneira mais eficaz e isso contribui para o controle mais eficiente de uma infec o Quanto IgD n o se conhece muito bem a sua fun o mas ela parece exercer um papel na diferencia o dos linf citos B induzida pelo ant geno O principal isotipo de imunoglobulina no sangue e nos fluidos extra celulares a IgG com todas as suas subclasses IgG1 IgG2 IgG3 e IgG4 A IgG tem propriedades diversas dentre elas confere prote o ao feto pois a nica classe de imunoglobulina humana que pode ser transporta da atrav s da placenta diretamente para a corrente circulat ria do feto A IgG tamb m atua na neutraliza o de toxinas na imobiliza o de bact rias na sensibiliza o para c lulas NK na ativa o do complemento e na opsoniza o A IgA a principal imunoglobulina presente em secre es externas como saliva muco suor suco g strico e l grimas Al
69. Os ant genos Jk t m maior express o na membrana eritrocit ria quando presentes em indiv duos homozig ticos Jk Jk quando comparados com indiv duos que apresentam os ant genos em heterozigose Jk Jk Masouredis et al 1980 Os ant genos n o s o encontrados em plaquetas linf citos mon ci tos ou granul citos usando se t cnicas sens veis de radioimunoensaio ou de imunofluoresc ncia Mollison Engelfriet e Contreras 1997 3 7 2 Anticorpos anti Jk e anti Jk O anticorpo anti Jk um perigoso anticorpo encontrado no soro humano que pode determinar severa rea o hemol tica trans fusional imediata ou tardia uma IgG e reage melhor com AGH poliespec fica em geral fixa complemento e em alguns casos de termina ligeira hem lise ou aglutina o direta com hem cias trata das com enzimas 86 Imuno hematologia eritrocit ria Anticorpos anti Jk podem determinar rea o hemol tica trans fusional imediata ou tardia e raramente est o relacionados DHRN Geralmente s o uma IgG detectada pela t cnica de Coombs indireto A reatividade desses anticorpos pode ser acentuada pelo uso de solu es de baixa for a i nica LISS ou polietilenoglicol PEG me diante o aumento do volume de soro a ser acrescentado no teste ou seja utilizam se 4 gotas em vez de 2 procurando aumentar a rela o entre o anticorpo e o ant geno Apresentam a propriedade de demonstrar efeito de dose o que di ficulta a identi
70. a es podem ocorrer tamb m por rearranjos g nicos entre os genes RHD e RHCE alelos h bridos A diferencia o entre D fraco e D parcial por m todos sorol gicos em nossa popula o de dif cil resolu o pois poss vel encontrar mais de um tipo de D fraco numa mesma amostra resultado de uma 73 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias grande miscigena o Portadores do ant geno D parcial e alguns D fracos est o propensos a imuniza es de anti D Consequentemente uma correta classifica o do ant geno pode evitar desperd cio de uni dades RhD negativas e ou imuniza o decorrente de transfus o de hem cias RhD positivas Os m todos moleculares podem confirmar ou excluir a presen a desses ant genos entretanto n o devem ser analisados de forma isolada ou seja sem a realiza o de testes sorol gicos pois nem sempre a presen a do gene resulta na express o da prote na No siste ma Rh ocorre essa exce o e h pessoas que possuem o gene RhD mas n o expressam a prote na s o os famosos pseudogenes Dessa forma ao utilizarmos os m todos moleculares em imuno hematologia devemos confrontar os resultados dos testes gen tipos com os fen tipos que s o evidenciados por testes de sorologia de grupos sangu neos 2 2 Anticorpos Rh Os anticorpos anti Rh resultam praticamente de uma aloimuni za o por transfus o sangu nea ou por gravidez pertencendo quase sempre classe IgG IgG 1 ou
71. a de Joaquim Ven ncio Fiocruz Marcos Antonio Pereira Marques bi logo mestre em Microbio logia Veterin ria pelo Instituto de Veterin ria da Universidade Fe deral Rural do Rio de Janeiro com especializa o em Virologia pelo Instituto de Microbiologia e em Hematologia pela Faculdade de Far m cia ambos da Universidade Federal do Rio de Janeiro professor pesquisador e coordenador de cursos t cnicos da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Fiocruz Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira doutora em Ci ncias na rea de Ensino em Bioci ncias e Sa de pelo Instituto Oswaldo Cruz mestre em Educa o pela Universidade Est cio de S e especialista em Microbiologia e Liofiliza o pela Edwards Inglaterra tecnologista s nior em Sa de P blica lotada na Ger ncia de Risco do N cleo de Vigil ncia Hospitalar do Instituto Nacional de Sa de da Mulher da Crian a e do Adolescente Fernandes Figueira Fiocruz Paulo Marcelo T Cotias farmac utico e bioqu mico graduado em Farm cia e Bioqu mica pela Universidade Federal de Pernambuco com especializa o em Patologia Cl nica pela Sociedade Brasileira de An lises Cl nicas imuno hematologista do Instituto de Pesqui sa Cl nica Evandro Chagas Fiocruz exercendo at 2011 as seguintes atribui es chefia do Laborat rio de Imuno Hematologia e da Ag n cia Transfusional do Instituto de Pesquisa Cl nica Evandro Chagas Fiocruz coordenador da Especialidade em Hemote
72. a Organiza o Mundial de Sa de 2004 para o trabalho em laborat rio 1 Para o seu trabalho normal todos os profissionais disp em de roupa de prote o com modelos e tecidos aprovados tais como batas jalecos aventais luvas 2 Para trabalhar com produtos qu micos perigosos o pessoal dis p e de roupa e equipamento de prote o suplementar 3 Os trabalhadores disp em de culos de prote o e protetor facial 4 Existem locais para lavagem dos olhos 5 Existem chuveiros de emerg ncia 130 Biosseguran a em laborat rios de sa de 6 A prote o contra radia es est de acordo com as normas nacio nais e internacionais inclusive com o fornecimento de dosimetros 7 O laborat rio disp e de m scaras respirat rias que s o regular mente limpas desinfetadas verificadas e guardadas em condi es de limpeza e higiene 8 Essas m scaras s o providas de filtros apropriados por exemplo filtros HEPA para reten o de microrganismos e filtros especiais para gases e part culas 9 As m scaras se adaptam bem aos seus usu rios conforto e utilidade 2 2 7 Equipamentos de prote o individual Com o objetivo de aplicar a norma regulamentadora NR6 o texto da portaria da Secretaria de Inspe o do Trabalho SIT n 25 de 15 de outubro de 2001 Brasil 2001d considera equipamento de prote o individual todo dispositivo ou produto de uso individual pelo trabalha dor destinado prote o
73. a aplicadas em imuno hematologia Refer ncias bibliogr ficas ABBAS A K LICHTMAN A H PoBER J S Imunologia celular e molecular 3 ed Rio de Janeiro Revinter 2000 Coomss R R A GELL G H Clinical Aspects of Immunology 2 ed Oxford Blackwell Scientific 1968 Lyons A PETRUCELLI J Hist ria da medicina S o Paulo Manole 1997 PEREIRA I B CARDOSO M V G org Textos de apoio em hemoterapia Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2000 V 1 Rorrr I BrOSTOFE J MALE D Imunologia 6 ed S o Paulo Manole 2003 SILVA W D Mora I Bier imunologia b sica e aplicada 5 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2003 TERR A I et al Imunologia m dica 10 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2004 Teva A FERNANDEZ J C C SILVA V L Imunologia In MOLINARO E M Caputo L F G AMENDOEIRA M R R Conceitos e m todos para a forma o de profissionais em laborat rios de sa de volume 4 Rio de Janeiro Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Instituto Oswaldo Cruz 2009 p 19 124 ZAGO M A FALC O R P PASQUINI R Hematologia fundamentos e pr tica Rio de Janeiro Atheneu 2004 63 Imuno hematologia eritrocitaria Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias Introducao A imuno hematologia eritrocit ria uma ci ncia que estuda os gru pos sangu neos mediante a an lise dos mais diversos ant genos eritroci t rios e de seus correspo
74. a da hemoglobina f Reticul cito Nesse est gio a c lula ainda permanece de um a dois dias na me dula ssea antes de migrar para o sangue A identifica o dessa c lula requer o emprego do corante azul de cresil brilhante que a torna azula da como resultado da presen a dos fragmentos de RNA que se coram exibindo o aspecto de ret culo filamentoso Nessa fase algumas c lulas j circulam no sangue perif rico recebendo o nome de eritr citos poli cromat filos que s o maiores que os eritr citos maduros g Eritr cito ou hem cia A perda dos res duos nucleares e a redu o do tamanho dos reticul citos caracterizam os eritr citos Em mam feros apresentam forma de discos bic ncavos anucleados A colora o vermelha conferida pela he moglobina que ocupa um ter o do volume da c lula A principal carac ter stica fisiol gica dos eritr citos a maleabilidade ou deformabilidade que facilita a sua passagem pelos capilares Na circula o essas c lulas s o vi veis por um per odo m dio de 120 dias Ap s a perda da malea bilidade os eritr citos s o retirados da circula o e levados para o ba o onde ocorre a hemocateresel importante ressaltar que os eritr citos podem sofrer altera es fisiol gicas e morfol gicas durante a sua produ o As altera es morfol gicas podem ser agrupadas em tr s grandes grupos e anisocitose altera o no tamanho da hem cia que pode ser mi croc ti
75. a equipe A maioria dos laborat rios tem ne cessidade de tarefas coletivas ou sequenciais e dessa forma o traba lho de um afeta o trabalho do outro e a capacidade de se trabalhar em equipe sem perder o foco individual faz toda a diferen a A forma o de pessoal com qualifica o para o trabalho pe a fun damental para a qualidade da execu o de rotinas e exames labo ratoriais A chefia do laborat rio deve desenvolver procedimentos para identificar a necessidade de capacita o e atualiza o dos pro fissionais al m de propor sempre que necess rio a implanta o de programas de desenvolvimento profissional f Alarmes alguns equipamentos como freezers geladeiras liofi lizadores e incubadoras n o podem parar de funcionar por falta de energia el trica ou por falhas no equipamento pois h risco de perda de insumos reagentes e produtos ocasionando preju izos financeiros ou mesmo ao trabalho Por isso importante que esses equipamentos avisem sobre a ocorr ncia de algu ma pane para que se possa solucionar o problema rapidamente ou pelo menos transferir os produtos para outro equipamento Esses alarmes podem ser localizados isto acoplados a cada equi pamento ou fazer parte de uma central de alarmes na qual o ope rador pode detectar o problema e encaminhar a solu o g Manuten o todo laborat rio deve prever a manuten o dos equipamentos na qual se incluem o seu controle e monitoramen
76. a imuno hematologia eritrocitaria Sao Paulo Editora Senac 2002 HARMENING D T cnicas modernas em banco de sangue e transfusdo 4 ed Rio de Janeiro Revinter 2006 HAWKINS P et al Localization of MN Blood Group Antigens in Kidney Transplantation Proceedings Houston v 17 n 2 p 1 697 1 700 1985 HENRY S ORIOL R SAMUELSON B Lewis Histo blood Group System and Associated Secretory Phenotypes Vox Sanguinis Basel Su a v 69 n 3 p 166 182 1995 et al A Second Nonsecretor Allele of the Blood Group a 1 2 Fucosyltransferase Gene FUT2 Vox Sanguinis Basel Suica v 70 p 21 1996 HuGHES JONES N C GARDNER B The Kell System Studies with Radioactively Labelled Anti K Vox Sanguinis Basel Su a v 21 p 154 1971 Ipixio H A MANICKAVEL V Lewis Blood Group Antigens a and b in Human Breast Tissues Loss of Lewis n in Breast Cancer Cells and Correla tion with Tumor Grade Cancer v 68 n 6 p 1 303 1991 IKIN E W et al P1 Antigen in the Human Foetus Nature Londres n 192 p 883 1961 95 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias et al Discovery of the Expected Haemagglutinin Anti Fy Nature Londres n 168 p 1 077 1 078 Dec 1951 Iss TT P D ANsTEE D J Applied Blood Group Serology 4 ed Durham Montgomery Scientific 1998 LANDSTEINER K LEVINE P Further Observations on Individual Differ ences of Human Blood Proceedings of the Soci
77. a pres s o atmosf rica pois medida que ela diminui ocorre menor libera o de oxig nio para os tecidos Dessa forma o organismo produz mais 2 3 DPG a fim de compensar a baixa press o de O hip xia 40 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia 1 3 Antigenos da membrana eritrocitaria Os aglutinog nios eritrocit rios s o estruturas macromoleculares que podem ser de natureza proteica glic dica ou glicoproteica Loca lizados na superf cie da membrana possuem fun es fisiol gicas es pec ficas podendo atuar na estrutura celular e no transporte como as mol culas de ades o com a o enzim tica Na fun o estrutural podemos citar as glicoforinas que s o prote nas altamente glicosiladas importantes na manuten o da carga ne gativa do glicoc lix A intera o da glicoforina com a fosfoproteina da membrana eritrocit ria juntamente com o complexo espectrina actina prote nas estruturais desempenha papel importante na ma nuten o da forma celular e na estabilidade da membrana Uma altera o quantitativa dessas prote nas resulta na caracteris tica diminui o da estabilidade da membrana o que leva altera o na forma discoide das hem cias formando se elipt citos fig 2 em graus variados na poiquilocitose Outra prote na de import ncia a banda 3 que funciona como ponto de ancoragem para o citoesqueleto da membrana median te a intera o com a anquirina Determi
78. aborat rio tamb m possuem regras obrigat rias mais consisten tes que as do laborat rio NB 1 como sistema el trico de emerg ncia acesso restrito a pessoas autorizadas portas autom ticas e estrutura f sica de f cil higieniza o Laborat rios de conten o n veis de biosseguran a 3 e 4 O laborat rio NB 3 considerado de conten o Para esse tipo de la borat rio s o requeridos al m dos itens referidos no n vel de biossegu ran a 2 desenho e constru o laboratoriais especiais como ventila o pr pria com press o negativa e instala o de filtros HEPA do ingl s high efficiency particulate air nas entradas e sa das de ar com preven o de refluxo Deve ser mantido controle rigoroso quanto opera o manuten o e inspe o das instala es e equipamentos Al m disso o pessoal t cnico n o pode trabalhar sozinho e deve receber treinamen to espec fico sobre procedimentos seguros na manipula o de grandes volumes e altas concentra es de microrganismos da classe de risco 2 bem como para microrganismos de risco 3 uma vez que laborat rios desse n vel de biosseguran a t m autoriza o para manipular agen tes desse grupo de risco O laborat rio tamb m deve contar com reas separadas para a troca de roupa e deve se utilizar protetor para os sa patos em alguns casos recomendado o uso de dois pares de luvas na manipula o do material Funda o Oswaldo Cruz 1998 O laborat rio NB
79. actosiltransferase D galactose B frenhuma nenhum jo Os ant genos do sistema ABO n o est o restritos membrana eri trocit ria sendo encontrados na saliva e nos l quidos biol gicos de indiv duos que apresentem o gene secretor S o encontrados tamb m na maioria das c lulas epiteliais e endoteliais Sua presen a nos linf citos e nas plaquetas parece estar relacionada absor o do plasma Os ant genos ABO est o expressos desde a 5 6 semanas de vida intrauterina por m somente ao redor dos 2 a 4 anos de vida que o n mero de s tios antig nicos apresenta express o plena Os anticorpos ABO s o dirigidos contra os ant genos ausentes nas hem cias do pr prio indiv duo S o de classe IgM e IgG ativos a 37 C e capazes de fixar e ativar o complemento provocando hem lises intravasculares severas em casos de incompatibilidades trans fusionais Tamb m est o relacionados com a doen a hemol tica do rec m nascido DHRN geralmente de intensidade leve Os anticorpos do sistema ABO aparecem espontaneamente depois dos 3 6 meses de idade com pico de produ o dos 5 aos 10 anos de idade e com diminui o progressiva na velhice Uma das explica es para o seu aparecimento a ampla distribui o de estruturas semelhantes a esses ant genos na natureza princi palmente nas bact rias Por isso esses anticorpos s o chamados de ocorr ncia natural As bact rias presentes no trato intestinal na poeira e em alimen
80. adas incompatibilidade entre o HLA do doador e o do receptor M ltiplas transfus es podem levar sensibi liza o dos pacientes que passam a desenvolver aloanticorpos contra ant genos de superf cie das c lulas alog nicas principalmente con tra ant genos correspondentes ao HLA Desse processo podem advir graves complica es com importante significado cl nico como refra tariedade plaquet ria em pacientes trombocitop nicos rea o febril n o hemol tica insufici ncia pulmonar aguda relacionada transfus o TRALI do ingl s transfusion related acute lung injury e o potencial para desenvolvimento da doen a do enxerto versus hospedeiro asso ciada transfus o DEVH AT em pacientes imunodeprimidos A aloimunizac o pode ocorrer tanto pelos ant genos HLA classe I presentes na superf cie das plaquetas e leuc citos quanto pelos an t genos HLA classe II presentes na superf cie de alguns leuc citos Uma das grandes preocupa es da hemoterapia minimizar ou evitar essa sensibiliza o Alguns dos procedimentos indicados pela medicina transfusional foram apresentados com o prop sito de dimi nuir a alossensibiliza o e garantir maior seguran a para os pacientes politransfundidos Dentre esses procedimentos a af rese realizada em grandes centros hemoter picos quando poss vel a mais indica da por m os m todos mais acess veis incluem a filtra o e a radia o 2 4 Aspectos gerais do sistema co
81. adas e bem cuidadas preferencialmente n o devem estar pintadas com esmalte pois ele libera part culas por microfraturas principalmente em reas limpas e labora t rios de cultura celular 2 4 Boas pr ticas de laborat rio As boas pr ticas de laborat rio conhecidas pelas siglas BPL ou GLP do ingl s good laboratory practices s o definida pela Anvisa como um sistema de qualidade relativo ao processo organizacional e s condi es sob as quais estudos n o cl nicos referentes sa de e ao meio am biente s o planejados realizados monitorados registrados arquivados e relatados Brasil 2001b p 10 Os princ pios das boas pr ticas de labo rat rio s o aplic veis a pr ticas que dizem respeito ao uso seguro de pro dutos relacionados sa de humana vegetal animal e ao meio ambiente 140 Biosseguran a em laborat rios de sa de O conceito de boas pr ticas de laborat rio tem como alicerce qua tro pilares conhecidos como os quatros M por causa das iniciais dos termos homem materiais maquin rios e m todos em ingl s man materials machinery e methods Esses pilares se referem a pon tos estrat gicos do laborat rio os quais por isso merecem aten o especial No entanto quem trabalha em laborat rios de sa de sabe que eles apresentam grande complexidade fato que deve ser levado em conta na hora de abordar as boas pr ticas de laborat rio Listare mos a seguir os principais
82. ade de for as e podem ser desfeitas por altas concentra es de sal pH extremo tempe ratura detergente e algumas vezes competi o com altas concentra es do pr prio ep topo puro As for as envolvidas nessas condi es interfe rem na intera o ant geno anticorpo ocasionando o seu rompimento Na figura 6 est o exemplificadas as diferentes for as envolvidas na liga o ant geno anticorpo As for as eletrostaticas liga o i nica podem ser repulsivas ou atrativas dependendo de sua a o sobre cargas iguais ou sobre cargas de sinais opostos Intera es eletrost ticas entre ant geno e anticorpo s o resultado da presen a de um ou mais s tios io nizados do epitopo Esses s tios s o tipicamente formados por grupos COO e NH ou NH de amino cidos de mol culas de ant geno ou an ticorpo nos quais o ant geno uma prote na ou peptideo ou similar mente alterando estruturas de carboidratos ou outros ant genos n o proteicos Um tomo de hidrog nio compartilhado entre to mos eletronegativos F N O leva forma o dasliga es de hidrog nio 19 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto Na pr tica o encaixe de liga es de H entre epitopo e anticorpo possui pequena relev ncia porque nem todas as liga es de hidrog nio s o realmente feitas Es Liga o de cH OH eee 0 C CH CH hidrog nio CH CH AD 7 CH CH Liga
83. ado de cord o umbilical que gera resultados falso positivos e A demora na realiza o do teste pode ocasionar falsos resultados pois as amostras estocadas h muito tempo e em condi es diferen tes das ideais tendem elui o natural dos anticorpos que inicial mente estavam ligados hem cia e A centrifuga o inadequada pode promover falsos resultados A interpreta o de TAD positivo exige conhecimento do diagn sti co do paciente e da hist ria gestacional e transfusional e avalia o das medica es em uso assim como a informa o de presen a de anemia hemol tica autoimune O resultado sorol gico do teste apenas n o diagn stico Ele deve ser avaliado em conjunto com os dados cl nicos e demais dados laboratoriais hemat crito bilirrubina haptoglobina e contagem de reticul citos Testes pr transfusionais em pacientes com autoanticorpos podem apresentar os seguintes problemas 1 autoanticorpos reativos a frio podem apresentar autoaglutina o causando tipagens ABO e Rh err neas 2 eritr citos fortemente cobertos por globulinas podem sofrer aglutina o espont nea com reagentes usados para tipagens 3 a presen a de autoanticorpos livres no soro pode dificultar a identifica o de anticorpos irregulares e a realiza o de pro vas cruzadas Embora a resposta a esses problemas sorol gicos seja importante o adiamento da transfus o na esperan a de encontrar sangue sorolo 90 Imuno
84. ado ou Carbonato repetido com a pele ou as mucosas des dio podem provocar rea o inflamat ria Irritante Precau o os gases n o devem ser inalados e o contato com a pele e os olhos deve ser evitado Classifica o subst ncias e Etanol prepara es que por inala o ingest o ou penetra o cut nea podem implicar Diclorometano riscos de gravidade limitada Cloreto de Precau o deve ser evitado o contato potassio Nocivo com o corpo humano assim como a inala o dessa subst ncia Defini o a libera o da subst ncia Hicrocarbonetos no ambiente pode provocar dano ao de petr leo a aa P gua de pot ssio Perigoso para o ambiente animais Precau o por causo do seu risco potencial n o deve ser liberada em encanamentos solo ou ambiente Esse tipo de composto deve ser tratado antes de ser descartado ou ent o guardado e entregue a local onde receber tratamento adequado Tetracloreto de carbono Fonte K nig 2009 111 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Quadro 2 Esquema simplificado de incompatibilidades dos produtos qu micos e que deve ser adotado em reas de estocagem de subst ncias qu micas A A Proibido A Precau es A Autorizado Fonte Carvalho 1999 Al m dos simbolos quimicos de periculosidade descritos acima ou tros pictogramas de perigo como presen a de material ra
85. almente podem se detec tar os aloanticorpos anti A em crian as B anti B em crian as A ou ambos os aloanticorpos em crian as O em decorr ncia principal mente da crescente microbiota intestinal Nos indiv duos A e B esses anticorpos naturais s o predominantemente IgM Os indiv duos de grupo sangu neo O possuem ainda outro tipo de anticorpo natural designado anti A B Anti A B geralmente IgG e pos sui atividade sorol gica n o encontrada em misturas de anti A e anti B de pessoas B e A respectivamente Assim fazendo se reagir o soro de indiv duos O com hem cias A e em seguida eluindo se esse anticorpo das hem cias verifica se que o eluato reage n o apenas com hem cias A mas tamb m com hem cias B embora mais fracamente Os anticorpos anti Lewis podem ser encontrados em indiv duos Le a b s o da classe IgM geralmente e fixam complemento Indiv duos n o secretores de Lewis podem apresentar anticorpos naturais anti Leb enquanto os secretores podem apresentar anti Lea Os anticorpos dirigidos contra as subst ncias de grupo que se desen volvem por transfus o de sangue incompat vel ou por gravidez heteroes pec fica por exemplo feto B em m e A ou O feto Rh em m e Rh s o designados anticorpos imunes e s o predominantemente da classe IgG Al m dos anticorpos naturais e imunes encontrados em indivi duos A B ou O outros soros e reagentes podem ser utilizados nas tipagens dos diferentes grupos san
86. as deve se manter as janelas das mesmas com o m nimo de abertura poss vel deixando na capela apenas o material a ser analisado d Extintor de inc ndio Esse EPC de extrema import ncia em qualquer ambiente de tra balho e n o s no laborat rio mas nele principalmente necess rio identificar bem o tipo de inc ndio que se vai combater antes de esco lher o agente extintor ou equipamento de combate ao fogo Um erro na escolha pode tornar in til o combate s chamas ou mesmo piorar a situa o majorando ainda mais o fogo por espalhamento ou criando novas causas de inc ndio curtos circuitos Os inc ndios em seu in cio s o relativamente f ceis de controlar Quanto mais r pido o ataque s chamas maiores ser o as possibilidades de reduzi las e elimin las O aparelho cont m diferentes tipos de produto ou uma mistura de les gua espuma p qu mico di xido de carbono CO e gases entre outros Esses diferentes tipos de agentes extintores s o usados de acordo com o tipo espec fico de inc ndio Classes de inc ndio A ocorrem em materiais de combust o f cil com a propriedade de queimarem em sua superf cie e em profundidade deixando res duos Exemplo tecidos madeira papel fibras etc B ocorrem em inflam veis e produtos que queimam somente em sua superf cie sem deixar res duos Exemplo leos graxas vernizes tintas gasolina etc 3 Parte do texto deste item foi reproduzida de Olive
87. as rea es com c lulas do cord o e com fen tipo em heterozigose Lu a b Anti Lu tem sido implicado na diminui o da sobrevida de c lulas transfundidas e na icter cia p s transfusional mas n o foi des crita a ocorr ncia de hem lise grave ou aguda Pode ser considerado clinicamente significativo mas n o se deve deixar de administrar o sangue em situa es de emerg ncia apenas porque n o puderam ser encontradas unidades compat veis 3 4 Sistema Kell O sistema Kell um sistema eritrocit rio descoberto em 1946 ap s a implanta o da t cnica de Coombs no soro de uma paciente a sra Kellacher que reagiu com as hem cias de seu filho rec m nascido de seu marido e de sua filha mais velha o terceiro mais importante e imu nog nico sistema de grupos sangu neos Seu correspondente antit tico foi descrito por Levine et al 1949 e denominado k cellano sendo um ant geno de alta frequ ncia 3 4 1 Ant genos Kell S o codificados pelo gene KEL que est localizado no bra o lon go do cromossoma 7 A express o desses ant genos tamb m con trolada por um gene regulador XK localizado no bra o curto do cromossoma X Os ant genos do sistema Kell n o est o presentes em plaquetas linf citos granul citos ou mon citos Podem ser detectados nas c lulas fetais a partir da 10 semana de gesta o estando bem de senvolvidos ao nascimento S o ant genos extremamente imunog nicos sendo o ant
88. aves Os anti S anti s e anti U s o os que mais se relacionam DHRN quando comparados aos anti M e anti N b Autoanticorpos A doen a hemol tica nos adultos e nos rec m nascidos pode ser cau sada pela presen a de autoanticorpos antieritrocit rios Tais anticorpos ligados membrana eritrocit ria in vivo podem ser detectados no tes te direto de antiglobulina Esses anticorpos podem ser IgM ou IgG No que se refere IgG importante determinar a sua subclasse porque a sequestra o dos eritr citos sensibilizados depende da subclasse do an ticorpo Isto decorre das diferen as existentes na capacidade de ativar o complemento e de se ligar aos receptores Fc dos fag citos De modo ge ral a a o hemol tica das subclasses da IgG abrange um espectro de ele vado a reduzido na seguinte ordem IgG3 gt IgG1 gt IgG2 gt IgG4 Uma das caracter sticas dos autoanticorpos antieritrocit rios con siste na sua natureza f sico qu mica em sua maioria 80 a 90 eles reagem mais favoravelmente com seus alvos em temperaturas que giram em torno de 37 C sendo esses anticorpos denominados auto anticorpos quentes Os demais chamados de autoanticorpos frios s o autoaglutininas frias ou crioglobulinas que reagem com seus alvos em temperaturas abaixo de 37 C apresentando reatividade tima entre 0 C e 5 C quadro 1 As anemias hemol ticas mediadas por anticorpos quentes resul tam da presen a de IgG que revestem os eritr citos
89. baixo do permitido por lei E em compara o com outros tipos de laborat rio principalmente da rea de produ o ru dos e trepida es como os causa das por centr fugas exaustores e cabines de seguran a n o representam um risco t o grande de aquisi o de doen as ocupacionais Todavia o profissional deve ficar atento e informar qualquer poss vel desconforto sua ger ncia 1 1 4 Ergonometria A ergonomia objetiva modificar os sistemas de trabalho para adequar a atividade neles existentes s caracter sticas habilidades e limita es das pessoas com vistas aos seus desempenhos eficientes confort veis e segu ros Hermosilla 2006 O sentido do termo ergonometria vai al m da de fini o de ergonomia pois inclui tamb m a ideia de preven o e cuidado Podemos dizer que a ergonometria um ramo da ergonomia que visa principalmente ajustar o ambiente ao indiv duo Em locais de trabalho as m quinas e mobili rios devem estar de acordo com o biotipo de cada trabalhador para que ele n o venha a ter problemas sseos musculares ou at mesmo de constitui o Como todo trabalhador o t cnico de laborat rio tamb m est exposto a problemas ergon micos que podem ao longo do tempo causar danos graves Para que isso n o aconte a os bancos utili zados ao se trabalhar em bancadas devem ser altos e com possibi lidade de ajuste de acordo com as necessidades de cada trabalhador estatura peso etc O mobili
90. bproduto C3b ou uma mol cula similar o C3i o componente mais abundante do sistema complemento As rea es enzim ticas que ocorrem durante o processo de ativa o desse sistema requerem a presen a de alguns ons como os de magn sio A intera o desses ons com determi nadas prote nas do sistema propicia a forma o de outras mol culas que apresentam atividade enzim tica sobre algum substrato Como exemplo dessa situa o temos a intera o do componente C3 com o fator B uma prote na presente no plasma Essa intera o me diada pelo magn sio e a forma o desse complexo favorece a ex posi o na prote na B de um s tio que reconhecido e clivado por outra prote na presente no sangue o fator D O produto final de toda essa rea o o complexo C3bBb que a enzima C3 convertase A representa o desse complexo com um tra o em cima caracteriza a sua atividade enzim tica espec fica sobre o componente C3 J as letras min sculas como o b representam o subproduto resultado da clivagem dos componentes C3 e B O excesso de enzimas C3 convertases aderidas aos carboidratos presentes na superf cie dos microrganismos favorece a clivagem de mol culas C3 gerando os subprodutos C3b necess rios forma o da enzima C3 convertase Al m disso a deposi o de C3b a C3 conver tase gera outra enzima chamada C5 convertase cuja fun o clivar o componente C5 gerando dois fragmentos C5a e C5b Esse
91. ca normoc tica ou macroc tica Destrui o das hem cias por c lulas fagoc ticas 38 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia e anisocromasia altera o na cor da hemacia de acordo com a carga de hemoglobina podendo ser hipocr mica normocr mica ou hipercr mica e poiquilocitose altera o na forma da hem cia que pode apre sentar forma de foice na anemia falciforme dacri citos esto mat citos etc 1 2 Estrutura do eritr cito Os eritr citos s o c lulas bic ncavas com di metro m dio de 7 2 u e com vida m dia de 120 dias Essas c lulas encontram se no sangue de um indiv duo adulto normal na quantidade de 4 5 a 6 5 x 10 mm essa quantidade varia segundo o g nero a mulher apresenta quantidade me nor de eritr citos Os eritr citos s o respons veis pelo transporte de gases respirat rios como o oxig nio O e o g s carb nico CO Para o transporte desses gases o eritr cito carreia O dos alv olos pulmonares para os tecidos Nesse local o CO captado e levado aos alv olos a fim de que ocorra a troca gasosa O principal componente do eritr cito a hemoglobina Hb que respons vel pela cor vermelha do sangue por causa da presen a do ferro Fe e tem peso molecular aproximado de 64 500 Da A produ o de hemoglobina iniciada na medula ssea na fase de eritroblasto policrom tico Nesse processo utilizado o ferro cap tado da circula o obtido por
92. casos a tem peratura ambiente Anticorpos patol gicos s o aglutininas da classe IgM mais poten tes com t tulos mais altos e com uma faixa t rmica mais ampla de reatividade at 32 C A produ o de autoanti I pode ser estimulada por microrganis mos que cont m o ant geno similar a I em sua superf cie Pacientes com Mycoplasma pneumoniae formam frequentemente fortes crioa glutininas com especificidade para I 3 8 3 Anticorpos anti i Na maioria o anticorpo anti i um autoanticorpo IgM que reage melhor com c lulas suspensas em salina a 4 C Exemplares potentes 88 Imuno hematologia eritrocit ria est o associados a mononucleose infecciosa leucemias miel ides re ticuloses e cirrose alco lica T tulos altos e ampla faixa t rmica podem contribuir para a hem li se mas tendo em vista que a express o de i fraca raramente causam hem lise significativa Tamb m foi descrito anti i de classe IgG que foi associado DHRN 4 Teste da antiglobulina humana A t cnica de antiglobulina para a detec o de anticorpos do sis tema Rh n o aglutinantes que se apresentavam de forma fraca foi descrita primeiramente por Coombs Mourant e Race 1945 No ano seguinte os mesmos pesquisadores descreveram o uso de anti globulina humana na detec o da sensibiliza o in vivo das hem cias de beb s com DHRN Coombs Mourant e Race 1946 A t cnica de antiglobulina pode ser utilizada na detec o de he m
93. ce Electric Charge in Red Blood Cell Interac tions Journal of General Physiology v 61 n 5 p 638 654 1973 JaNEway C A et al Imunobiologia o sistema imune na sa de e na doen a 5 ed Porto Alegre Artmed 2002 JAYAVANTH S PARK B C Microrheologic Dysfunctions in Blood during Ma laria Indian Journal of Experimental Biology v 45 n 45 p 111 120 2007 30 Bioqu mica eritrocit ria Jounson S T Drug induced Immune Hemolytic Anemia Transfusion and Apheresis Science v 40 n 3 p 205 207 2009 Kaszusa M et al High concentration Zeta Potential Measurements Using Light Scattering Techniques Philosophical Transactions of the Royal Society Series A Mathematical Physical and Engineering Sciences v 368 n 1 927 p 4 439 4 451 2010 KONSTANTINOVA E et al Rheological Properties of Blood and Parameters of Platelets Aggregation in Arterial Hypertension Clinical Hemorheology and Microcirculation v 35 n 1 2 p 135 138 2006 LISOWSKA E Antigenic Properties of Human Glycophorins An Update In Wu A M Molecular Immunology of Complex Carbohydrates 2 Nova York Springer Science Business Media 2001 p 155 169 Lroyp C W Sialic Acid and Social Behavior of Cells Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society v 50 n 3 p 325 350 1975 Cook G M W Membrane Glycoprotein Containing Fraction which Promotes Cell Aggregation Biochemical and Biophysical Research Commu
94. chemical Characterization and Stability of the Polymeric Nanoparticle Systems for Drug Administration Quimica Nova v 26 n 5 p 726 737 2003 SINGER S J NICOLSON C L The Fluid Mosaic Model of the Structure of Cell Membranes Science v 175 p 720 731 1972 SUNDBERG E J Structural Basis of Antibody Antigen Interactions Methods in Molecular Biology v 524 p 23 36 2009 et al Estimation of the Hydrophobic Effect in an Antigen Antibody Protein Protein Interface Biochemistry v 39 n 50 p 15 375 15 387 2000 TANNER M J A The Major Integral Proteins of the Human Red Cell Baillieres Clinical Haematology v 6 n 2 p 333 356 1993 TOKUMASU F et al Altered Membrane Structure and Surface Potential in Homozygous Hemoglobin C Erythrocytes Plos One v 4 n 6 2009 Dispon vel em http www plosone org article infoy3Adoi 2F10 1371 2 Fjournal pone 0005828 Acesso em 2 out 2012 Vanoss C J Moun J F CUNNINGHAM R K Influence of Various Physicochemical Factors on Hemagglutination Vox Sanguinis v 34 n 6 p 351 361 1978 WAUTIER M P et al Modulation of RAGE Expression Influences the Adhesion of Red Blood Cells from Diabetic Patients Clinical Hemo rheology and Microcirculation v 35 n 3 p 379 386 2006 WEBSTER D M Henry A H Rees A R Antibody Antigen Interactions Current Opinion in Structural Biology v 4 n 1 p 123 129 1994 WILLIAM E PAUL M D Fundamental I
95. cias sensibilizadas por aloanticorpos autoanticorpos e ou com ponentes do complemento A sensibiliza o pode ocorrer in vivo ou in vitro A detec o da sensibiliza o das hem cias in vitro deter minada pela t cnica de antiglobulina indireta ou Coombs indireto e pode ser aplicada para os testes de compatibilidade triagem de anticorpos identifica o de anticorpos fenotipagem de hem cias e estudos de titula o de anticorpos ao passo que a sensibiliza o in vivo realizada pela t cnica de antiglobulina direta TAD ou Coombs direto 4 1 Caracter sticas importantes da t cnica de antiglobulina direta TAD e M todo de pesquisa de hem cias sensibilizadas in vivo por IgG e ou fra es de complemento e Importante no aux lio ao diagn stico de anemia hemol tica au toimune DHRN hem lise induzida por drogas e rea es hemo l ticas p s transfusionais 89 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias e Lavar as hem cias importante pois globulinas e subst ncias como lip deos prote nas presentes no plasma podem neutralizar o soro antiglobulina humana provocando resultados falso negativos al m disso as cargas el tricas das subst ncias bioqu micas do plasma formam o potencial zeta um potencial que interfere no processo de sensibiliza o e aglutina o Outro composto respons vel por interfer ncias nesse teste a geleia de Wharton um tecido con juntivo mucoso presente no sangue colet
96. cionado com as altera es clim ticas Os Centros de Controle de Doen as e Preven o dos Estados Unidos publicaram em 1988 a lista dos fluidos corp reos para os quais devem ser aplicadas precau es sangue l quido c rebro espinhal l quido pleural l quido sinovial fluido peric rdico flui do peritoneal fluido amni tico s men e secre o vaginal Segundo o CDC as precau es s se aplicam a urina fezes leite humano saliva secre es nasais pus suor l grimas ou v mito se esses flui dos contiverem sangue Al m dessas amostras biol gicas podem ser fonte de contamina o aeross is poeira alimentos gua e ins trumentos de laborat rio Mamizuka et al 2000 Por ltimo mas n o menos importante preciso levar em conta os fatores inerentes a cada indiv duo tais como susceptibilidade gen tica condi o imunol gica idade sexo exposi o pr via gravidez lacta o consumo de lcool e de medicamentos e higiene pessoal Somado a isso enfatiza se a experi ncia a concentra o e a qualifica o dos profissionais principalmente no que concerne percep o dos riscos e aos cuidados em seguir as normas de biosseguran a incluindo o uso de equipamento de prote o individual e coletiva de forma correta Segundo o Minist rio da Sa de Brasil 2007a os agentes biol gicos que afetam os seres vivos e o ambiente s o classificados da se guinte forma 116 Biosseguran a em laborat
97. citoblasto Apresenta um di metro superior a 140 u com citoplasma basof lico O n cleo celular que tem cromatina fina e delicada encontra se bem no centro da c lula o n cleo pode apresentar de dois a tr s nucl olos bem vis veis Os hemocitoblastos apresentam ribossomos em sua estrutu ra citoplasm tica est o presentes na medula na porcentagem de 0 5 a 1 b Pr eritroblasto Apresenta contorno irregular com proemin ncias citoplasma ba sof lico e n cleo com membrana fina e delicada contendo geralmente dois nucl olos que podem estar muito ou pouco vis veis c Eritroblasto bas filo Essas c lulas t m citoplasma bas filo e com cromatina mais con densada sem a presen a de nucl olos vis veis Apresentam uma rea esbranqui ada perinuclear como resultado do in cio da condensa o da cromatina nuclear 37 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques d Eritroblasto policromat filo C lula menor que a sua precursora possui cromatina mais conden sada O citoplasma apresenta cor acinzentada caracteristica em decor r ncia do in cio do processo de hemoglobiniza o da c lula e Eritroblasto ortocrom tico Apresenta cromatina condensada sendo que nessa fase o n cleo se desloca em dire o membrana citoplasm tica As contra es e ondula es do citoplasma levam extrus o do n cleo O citoplasma acid filo por causa da presen
98. compatibilidade n o ocorrem com frequ ncia e cerca de um ter o das transfus es casuais n o apre sentava incompatibilidades ABO Contudo e apesar da preocupa o de estabelecer a tipagem dos grupos sangu neos e sua equipara o at que m todos de comprova o dos diferentes tipos de hem cias fossem descobertos ocasionalmente havia graves rea es n o explic veis Hoje em dia mais de 600 ant genos eritrocit rios foram descritos ant genos esses que em suas diferentes combina es obedecendo a um padr o de heran a mendeliana geram mais de 300 mil combina es fenot picas 45 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva Marcos Antonio P Marques 2 2 Anticorpos Os anticorpos sintetizados por linf citos B e plasm citos s o glicoprote nas com fun o imunit ria Ao interagirem com an t genos espec ficos promovem a ativa o de v rios mecanismos efetores ativa o da via cl ssica do sistema complemento opso niza o dos ant genos para fagocitose e citotoxicidade celular de pendente de anticorpo ADCC do ingl s antibody dependent cell mediated cytotoxicity Essas a es que resultam em prote o s o as mesmas que resultam em rea es adversas na hemoterapia em doen as hemol ticas autoimunes na doen a hemol tica do rec m nascido DHRN e em rea es a tecidos transplantados As fun es dos anticorpos s o exercidas em s tios estrutural mente separados
99. cos Os produtos qu micos podem ser classificados de diferentes for mas e isso causa muitas diverg ncias e problemas normativos A varia o nas informa es sobre o risco dos diversos produtos qui micos existentes traduz se n o apenas em problemas de seguran a pa ses que n o t m exig ncias espec ficas podem possuir r tulos ou fichas que trazem diferentes informa es para o mesmo produ to qu mico mas tamb m em quest es de natureza comercial subs t ncias restritas apenas em alguns pa ses Al m disso o n mero de produtos qu micos existentes e a velocidade com que novos produtos s o criados dificultam a regulamenta o de todos os produtos qui 106 Biosseguran a em laborat rios de sa de micos perigosos Acredita se que a maioria das subst ncias qu micas atualmente em utiliza o n o tenha sido submetida a ensaios de toxi cidade Di Vitta 2005 Segundo o Manual de biosseguran a do N cleo de Biossegu ran a da Funda o Oswaldo Cruz s d risco qu mico o perigo a que determinado indiv duo est exposto ao manusear produtos qu micos que podem prejudicar sua sa de ou causar danos f sicos Os danos f sicos relacionados exposi o qu mica incluem desde irrita o dos olhos e da pele e queimaduras at outros de maior severidade causados por inc ndio ou explos o Os danos sa de podem ocorrer por exposi o de curta ou longa dura o a produtos t xicos as vias de penetra o no
100. d que se basearam em diferentes teorias quanto gen tica desse sistema de grupo sangu neo quadro 4 Quadro 4 Nomenclaturas propostas para ant genos do sistema Rh Ocorr ncia dCejdce ahe 23 45 Fonte Adaptado de Harmening 2006 dCejdce ahi 2 345 A localiza o cromoss mica dos genes pode ser definida por 1p36 34 Mediante a an lise do DNA gen mico de diferentes fen ti pos Rh indiv duos RhD positivos possuem os genes RHD e RHCE enquanto indiv duos RhD negativos apresentam somente o gene RHCE Na maioria dos indiv duos RhD negativo o gene RHD est 71 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias deletado portanto n o existe o alelo d O gene RHD codifica o po lipept deo D e o gene RHCE alelos RHCe RHcE RHce e RHCE codifica os polipept deos C c e E e Os genes RHD e RHCE apresentam um elevado grau de homo logia com uma varia o de 36 amino cidos em 416 posi es O po limorfismo E e resulta da substitui o de um nico amino cido no xon 5 na quarta al a extracelular quando da substitui o de uma prolina E na posi o 226 para uma alanina e No polipept deo Rh que carreia os ant genos C e c ocorre uma substitui o de quatro amino cidos em uma cadeia de 416 amino cidos embora apenas uma substitui o pare a ser cr tica para o polimorfismo C c a subs titui o de uma serina C na posi o 103 por uma prolina c Por outra parte o polipept deo codificado pel
101. da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical v 39 n 4 p 370 375 jul ago 2006 FUNDA O OswALDO CRUZ FIOCRUZ COMISS O T CNICA DE BIOSSEGURAN A CTBro Procedimentos para a manipula o de microrganismos patog nicos e ou recombinantes na Fiocruz Rio de Janeiro Fiocruz 1998 N CLEO DE BIOSSEGURAN A NuBio Manual de biosseguran a Rio de Janeiro Fiocruz s d Dispon vel em http www fiocruz br biosseguranca Bis lab virtual riscos quimicos html Acesso em 31 out 2012 EPI para prote o dos olhos e face Rio de Janeiro NuBio 2003a Dispon vel em http www fiocruz br biosseguranca Bis lab virtual epiprotecaoolhoseface html Acesso em 20 out 2010 EPI para prote o auditiva Rio de Janeiro NuBio 2003b Dispon vel em http www fiocruz br biosseguranca Bis lab virtual epiprotecaoauditiva html Acesso em 20 out 2010 GARCIA L P FACCHINI L A Vacina o contra a hepatite B entre tra balhadores da aten o b sica sa de Cadernos de Sa de P blica Rio de Janeiro v 24 n 5 p 1 130 1 140 maio 2008 Dispon vel em http www scielo br pdf csp v24n5 20 pdf Acesso em 13 out 2010 GIRARDI S N FERNANDES JR H CARVALHO C L A regulamenta o das profiss es de sa de no Brasil Espa o para a Sa de v 2 n 1 dez 2000 Dispon vel em http www ccs uel br espacoparasaude v2n1 RPSB htm Acesso em 31 out 2012 148 Biosseguran a em laborat r
102. dade s o a urtic ria f sica ocasionada pelo calor ou pelo frio CID L50 2 e a geladura frostbite superficial CID T33 ou com necrose de tecidos CID T34 que s o les es localizadas resultantes da a o direta da exposi o ao frio por per odo curto ou longo a temperaturas abaixo dos 0 C Brasil 19990 1 1 2 Radia es Chamamos aten o tamb m para o risco das radia es muitas ve zes usadas com fim de esteriliza o ou diagn stico Tanto as radia es ionizantes como os raios X quanto as n o ionizantes como os raios ultravioleta UV podem ser perigosas para os trabalhadores No segmento laboratorial a exposi o radia o UV bastante utiliza da como germicida em laborat rios um risco para os profissionais e pode gerar n o s problemas dermatol gicos mas at mesmo o c ncer 1 1 3 Ru dos e trepida es No que diz respeito ao ru do as normas do Minist rio do Trabalho NRI5 Brasil 2008a e NR9 Brasil 1994 estabelecem que o limite acei 103 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira t vel no banco de sangue de 50 decib is com o limite de conforto si tuado na faixa dos 40 decib is Logo esse fator apesar de n o ser dos mais graves pode ter consequ ncias na sa de do trabalhador a longo prazo As atividades desenvolvidas nos bancos de sangue n o oferecem no entan to risco de perda auditiva uma vez que em geral os ru dos ficam a
103. de H 2 O MHC pode ser dividido em quatro subconjuntos de genes ou clas ses classes I II III e IV sendo que os de classe I e II est o ligados ao processamento e apresenta o de ant genos enquanto os genes que comp em as classes III e IV codificam para outras prote nas algumas delas relacionadas com a resposta imune tais como componentes do sistema complemento algumas citocinas etc Em humanos existem tr s loci g nicos que codificam as mol culas de classe I denominados HLA A HLA B e HLA C e tr s loci g nicos do MHC de classe II denominados HLA DP HLA DQ e HLA DR Normalmente um indiv duo herda duas c pias de cada locus g nico uma de cada proge nitor Assim em humanos temos seis loci de classe I e seis loci de clas se II Todos esses loci apresentam alto grau de polimorfismo ou seja t m m ltiplos alelos na popula o As mol culas do MHC de classe I que est o presentes na maioria das c lulas nucleadas s o reconhecidas principalmente pelo TCR de linf citos T CD8 ao passo que as mol culas de classe II presentes principalmente na superf cie das c lulas apresentadoras de ant genos profissionais s o reconhecidas pelo TCR dos linf citos T CDA a MHC de classe I As mol culas do MHC de classe I s o expressas na membrana celular da maioria das c lulas nucleadas dos vertebrados Sua estru tura constituida por uma cadeia a de aproximadamente 45 kDa que atravessa a membrana plasm tica A ou
104. de riscos capazes de amea ar a seguran a e a sa de no trabalho Para a comercializa o de EPIs necess rio atender a essa nor ma e obter um certificado de aprova o que dever ser expedido renovado fiscalizado por rg o competente em seguran a e sa de no trabalho do Minist rio do Trabalho e Emprego O mesmo rg o deve definir os prazos de validade desses certificados cabendo ao fabri cante desses itens providenciar instru es em portugu s incluindo orienta o de utiliza o e manuten o e restri es de uso Compete ao Servi o Especializado em Engenharia de Seguran a e em Medicina do Trabalho SESMT ou comiss o interna de preven o de acidentes Cipa nas empresas desobrigadas de manter o SESMT reco mendar ao empregador o EPI adequado ao risco existente em determi nada atividade Criado em 17 de dezembro de 1996 o Conselho Deliberativo da ABNT aprovou em reuni o ordin ria a cria o do Comit Brasileiro de Equi pamentos de Prote o Individual ABNT CB 32 visando agilizar a ela bora o e a revis o das normas de equipamentos de prote o individual 131 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Fazem parte da lista de EPIs de uso em laborat rios jalecos ou rou pas de prote o m scaras cir rgicas e com filtros prote o auditiva luvas de seguran a culos de seguran a e protetor facial a Avental ou roupas de prote o Os jalecos de
105. deos de membrana os fos folip deos o colesterol e os glicolip deos Os fosfolip deos s o os lip deos mais abundantes representam 60 dos lip deos de membrana Eles apresentam uma extremidade polar cabe a polar e duas caudas apolares compostas de hidrocarbonetos As caudas apolares normal mente s o cidos graxos que podem apresentar diferentes n meros de tomos de carbono variando assim o seu comprimento Uma cauda pode ser insaturada e a outra saturada Essas diferen as na satura o e no comprimento dos cidos graxos presentes nos fosfolip deos influen ciam na fluidez da membrana plasm tica fig 1 Cabe a polar AURA a Figura 1 Fosfolip deos que comp em a bicamada lip dica A membrana plasm tica cont m 30 de colesterol A finalidade do colesterol na membrana plasm tica diminuir a permeabilidade da membrana a pequenas mol culas Isso acontece porque o colesterol in terage com os fosfolip deos presentes na bicamada lip dica com o seu anel esteroide r gido e em forma de placa o colesterol posiciona se na bicamada lip dica interagindo com a cadeia de cido graxo do fosfoli p deo e ocasionando a redu o da sua mobilidade Os glicolip deos que representam 10 dos lip deos da membrana plasm tica s o lip deos que cont m a car Essas mol culas s o en contradas exclusivamente na camada extracelular camada externa da membrana plasm tica Eles t m como fun o permiti
106. dioativo ioni zante ou material infectante risco biol gico s o de uso obrigat rio j a partir da porta do laborat rio em que o risco exista Y7 S mbolo internacional da S mbolo internacional de perigo presen a de radia o ionizante biol gico biohazard 2 2 Riscos biol gicos Os t cnicos de sa de que coletam e manipulam sangue e seus deri vados est o expostos a v rios tipos de acidentes Um deles o contato 112 Biosseguran a em laborat rios de sa de acidental com materiais biol gicos Para isso importante a vaci na o contra os agentes imunopreven veis o conhecimento do ciclo biol gico dos microrganismos possivelmente infectantes e de suas vias de contamina o e o uso correto dos EPIs Podemos definir materiais biol gicos como qualquer material que contenha informa o gen tica e seja capaz de autorreprodu o ou de ser reproduzido em um sistema biol gico Brasil 2010a Essa in forma o gen tica pode ser proveniente de microrganismos agentes biol gicos entre eles bact rias fungos v rus pr ons e protozo rios A melhor preven o contra os riscos biol gicos n o se aciden tar Para isso al m dos cuidados mencionados o profissional de sa de deve estar concentrado no seu trabalho e ter conhecimento das normas de biosseguran a Nessa rea o uso de luvas indispen s vel al m de culos de seguran a ou protetor facial para prote o dos olhos e rosto A caixa d
107. do com quatro genes A A Be O Os genes respons veis pela s ntese dos ant genos A e B das he m cias codificam a produ o de enzimas denominadas glicosil transferases que s o respons veis por catalisar as rea es entre o substrato e o a car receptor transglicoliza o A atividade das glicosiltransferases dos ant genos A e B varia em diversos subgru pos do sistema ABO As glicosiltransferases adicionam carboidratos terminais subs t ncia H que serve como estrutura b sica para esses dois ant genos fig 1 O gene A por meio da enzima alfa 1 3 N acetilgalactosa miniltransferase respons vel pela adi o de N acetil D galac tosamina formando o ant geno A o gene B por interm dio da enzima alfa 3 galactosiltransferase adiciona D galactose forman do o ant geno B A subst ncia H formada pela a o da enzima alfa 2 L fucosiltransferase que adiciona L fucose galactose ter minal Essa enzima codificada no locus FUT1 do cromossomo 19 na posi o q13 3 sendo portanto geneticamente independente do locus ABO mm N acetilgalactosamina E frutose a N acetilglicosamina WB galactose glicose A B c Figura 1 A Ant geno H B ant geno A C ant geno B 66 Imuno hematologia eritrocit ria Quadro 1 Bioss ntese dos ant genos ABO Locus Transferase A car alfa 3 N N acetil D A acetilgalactosaminiltransferase galactosamina ABO alfa 3 gal
108. do si lico As glicoproteinas de membrana s o as princi pais respons veis pela carga negativa da superf cie celular A carga negativa da superf cie celular varia n o s entre diferentes tipos de c lula mas tamb m nas diferentes fases do ciclo de desenvol vimento de um mesmo tipo de c lula Existe uma correla o entre o estado de matura o da c lula e a intensidade de liga o de part culas de ferritina cationizada FC superf cie de c lulas hematopoi ticas Essa intensidade de liga o FC varia de acordo com a carga de su perf cie de cada c lula Quanto maior a quantidade de carga negativa maior ser a liga o da FC Todas as c lulas da medula ssea apresentam liga o para a ferri tina cationizada na sua superf cie A extens o de liga o a part culas de FC difere de c lula para c lula e est relacionada ao est gio de matura o das c lulas de uma dada linhagem As s ries neutrofilica e mielobl stica possuem moderada liga o com a FC ao passo que pro miel citos e miel citos ligam se apenas minimamente A liga o de FC aumentada sequencialmente em metamiel citos neutr filos segmenta dos e bast es Eosin filos e miel citos eosinofilicos apresentam padr es 23 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto similares de diferencia o de membrana mostrando afinidade de liga o semelhante j os bas filos apresentam liga o mais forte FC do que outras c
109. e 10 a 30 frascos de he m cias do grupo O de diferentes indiv duos previamente fenotipados para os principais sistemas sangu neos Esse painel geralmente deno minado painel de identifica o de anticorpos quadro 6 Quadro 6 Perfil antig nico das hem cias de identifica o de anticorpos diagrama para identifica o de anticorpos irregulares Sistemas re uns Kid pufy Lewis P Lutheran C lulas of efef efef ao eelef Pee e EB Antigenos destru dos pelo tratamento com enzimas proteol ticas A avalia o e a interpreta o dos resultados do painel devem ser reali zadas utilizando se diagrama elaborado da forma acima procurando se 92 Imuno hematologia eritrocit ria assegurar a identifica o apropriada sem que as especificidades passem despercebidas ou possam estar encobertas por outros anticorpos im portante avaliar a presen a de autoanticorpos quando o resultado nega tivo do autocontrole e o painel apresentando rea es positivas indiquem a presen a de aloanticorpos Outra abordagem deve dizer respeito s fases e intensidade das rea es encontradas pois rea es de mesma intensidade sugerem a presen a de apenas um anticorpo embora possam ocorrer exce es e as rea tividades em determinadas fases revelam o comportamento sorol gico dos anticorpos Dessa forma anticorpos direcionad
110. e cerca de 3 As consequ n cias da infec o pelo HBV s o muito vari veis e o indiv duo infectado pode vir a se tornar um portador assintom tico Stephens et al 2009 No entanto esse fato atenuado pela exist ncia de vacina contra a he 127 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira patite B que faz parte do calend rio obrigat rio para os trabalhadores da sa de O v rus da hepatite C segundo essa mesma pesquisa tem um ndice de infec o um pouco mais baixo ficando em torno de 1 8 Infelizmente ainda n o existe vacina para a hepatite C No caso de acidente com materiais perfurocortantes que conte nham fluidos biol gicos o profissional orientado pelo servi o m di co a avaliar a necessidade de iniciar o tratamento contra HIV entre 1 a 2 horas ap s o acidente enquanto a amostra ainda est sendo ana lisada Caso a mesma seja positiva para HIV o trabalhador deve dar continuidade ao tratamento com orienta o m dica A dura o da quimioprofilaxia em m dia de um m s Brasil 2001a A indica o do uso de antirretrovirais deve ser baseada em uma avalia o cri teriosa do risco de transmiss o do HIV em fun o do tipo de acidente ocorrido e da toxicidade dessas medica es Maia 2002 p 21 O v rus da hepatite D defectivo pois necessita do v rus da hepa tite B para se replicar e por isso s pode ser adquirido junto com o v rus da hepatite B
111. e descarte de material perfurocortante com dispositivo para encaixe de agulha deve conter no seu inte rior solu o de hipoclorito de s dio a 2 para descontamina o do material Lembramos que o recapeamento de agulhas terminan temente proibido pelas normas de biosseguran a Al m do sangue ainda podemos ter amostras biol gicas provenientes de fluidos cor porais pe as cir rgicas e bi psias 2 2 1 Avalia o de risco Para uma avalia o de risco mais precisa principalmente no que se refere aos agentes biol gicos alguns crit rios devem ser conside rados O primeiro ponto que destacamos a virul ncia do agente biol gico por ser um par metro importante na classifica o do ris co biol gico como descreveremos mais abaixo Outros crit rios que tamb m devem ser considerados na avalia o de risco s o o modo de transmiss o do microrganismo sua capacidade de sobreviv ncia no ambiente o volume do material manipulado a dose infectante a origem do agente biol gico a disponibilidade de medidas profi l ticas e a exist ncia ou n o de tratamento eficaz Os profissionais que trabalham diretamente com sangue devem n o apenas conhecer em profundidade o ciclo biol gico dos poss veis mi crorganismos infectantes mas tamb m participar constantemente de 113 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira cursos de desenvolvimento profissional e de congressos na rea para estarem
112. ecificidade do anticorpo 3 Outros sistemas de grupos sangu neos 3 1 Sistema P O grupo sangu neo P foi descrito em 1927 por Landsteiner e Levine Em sua busca por novos ant genos injetaram eritr citos hu manos em coelhos e produziram um anticorpo inicialmente chama do anti P que dividia os eritr citos humanos em dois grupos P e P Em 1959 Levine et al 1951 descreveram o anticorpo anti Ij atual mente conhecido como anti PP PS A express o de P no desenvolvimento fetal vari vel O ant ge no encontrado em eritr citos fetais desde a 12 semana mas sua express o diminui com a idade gestacional Ikin et al 1961 O anti geno fracamente expresso ao nascimento e sua express o completa acontece perto dos 7 anos O ant geno P deteriora rapidamente quando estocado Se c lulas antigas s o tipadas ou utilizadas como controles para reagentes de tipagem ou na detec o de anti P no soro podem ocorrer rea es falso negativas Anti P um anticorpo da classe IgM comum de ocorr ncia na tural no soro dos indiv duos P e n o determina rea o transfusio nal ou doen a hemol tica perinatal Apenas em raros casos trata se de uma potente IgG ativa a 37 C com import ncia transfusional Esse anticorpo reage mediante a aglutina o direta em baixas tem peraturas com hem cias P positivas Cerca de 20 dos doadores de sangue s o P negativos Habitualmente uma aglutinina com fraca rea o a frio e
113. elular e Molecular pelo Instituto Oswaldo Cruz Fiocruz com habilita o em An lises Cl nicas pela Universidade Federal do Rio de Janeiro 153 Este livro foi impresso pela Suprema Grafica Editora para a Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Fiocruz em agosto de 2013 Utilizaram se as fontes Minion Pro e Myriad Pro na composi o papel p len bold 70g m no miolo e cart o supremo 250g m na capa 155 156
114. em instala es radiativas Bras lia Comiss o Nacional de Energia Nuclear 1985 Norma CNEN NE 3 05 Requisitos de radiopro te o e seguran a para servi os de medicina nuclear Bras lia Comiss o Nacional de Energia Nuclear 1996 MINIST RIO DA PREVID NCIA SOCIAL Manual de instru es para preenchimento da comunica o de acidente de trabalho CAT Bras lia Minist rio da Previd ncia Social 1999b Item V Conceito defini es e outros MINIST RIO DA SA DE Classifica o de riscos dos agentes biol gicos Bras lia Minist rio da Sa de 2007a S rie Normas e Manuais T cnicos Diretrizes gerais para o trabalho em conten o com agentes biol gicos 3 ed Bras lia Minist rio da Sa de 2010a Manual de procedimentos para o diagn stico e manejo das doen as relacionadas ao trabalho nos servi os de sa de Bras lia Minist rio da Sa de 1999c Doen as relacionadas ao trabalho manual de procedimen tos para os servi os de sa de Bras lia Minist rio da Sa de Opas 200la Portaria n 1 286 Direitos do paciente Bras lia Minist rio da Sa de 1993 Portaria n 3 204 de 20 de outubro de 2010 Norma t cni ca de biosseguran a para laborat rios de sa de p blica Bras lia Minist rio 146 Biosseguran a em laborat rios de sa de da Sa de 2010b Dispon vel em http bvsms saude gov br bvs saudelegis gm 2010 prt3204 20 10 2010 html
115. ene secretor Sese de subst ncias ABH H uma intera o g nica entre os genes Lewis e os genes ABO uma vez que a quantidade de ant geno Lewis detectada no eritr cito influenciada pelos genes ABO herdados 3 5 1 Ant genos Lewis A subst ncia Le secretada por todos os indiv duos independen temente da presen a do gene secretor de modo que indiv duos n o secretores sese de ant genos ABH podem conter ant genos Le nos fluidos corporais que ser o posteriormente adsorvidos membrana dos eritr citos produzindo o fen tipo Le a b Dessa forma os indi v duos Le a b s o n o secretores de subst ncias ABH Henry Oriol e Samuelson 1995 A enzima Lewis est presente na saliva no leite nas gl ndulas submaxilares na mucosa g strica e em fluidos de cistos Salmon Cartron e Rouger 1984 A forma o do ant geno Le est associada intera o dos genes Sese ABO Hh e Lewis Cabe destacar que os ant genos Le e Le n o s o alelos O resultado da intera o g nica entre os genes Lele e Sese a produ o do fen tipo Le a b O fen tipo Le a b n o decorrente da aus ncia do gene i FUT 3 mas de muta es pontuais espec ficas no gene Le que v o originar uma transferase Lewis n o funcional ou parcialmente ativa determinando assim a express o negativa nos eritr citos Henry Oriol e Samuelson 1995 Elmgren et al 1996 A diminui o dos ant genos Lewis tem sido demonstrada em m
116. eor de evapora o ou na presen a de alta contamina o biol gica Elas podem ser de prote o total boca nariz e olhos ou prote o facial boca e nariz Quando necess rio devem estar dispon veis no laborat rio respi radores com filtros de acordo com a necessidade de uso e os filtros fora da validade ou que estejam saturados devem ser obrigatoriamente substitu dos por novos Quadro 4 Particularidades e diferen as entre m scaras e respiradores M scara cir rgica Respirador Composi o Em geraltripla camada de Tripla camada de n o tecido e n o tecido filtro especial com tratamento eletrost tico Tipo de Protege de infec es por Protege de infec es por inala o prote o inala o de got culas de aeross is contendo agentes biol gicos v rus bact rias fungos Reduz o risco de proje es Reduz o risco de proje es ou ou respingos de sangue respingos de sangue fluidos fluidos corp reos e corp reos e secre es atingirem secre es atingirem a a boca e o nariz do usu rio boca e o nariz do usu rio Minimiza a contamina o Minimiza a contamina o do ambiente com secre es do ambiente com respirat rias por exemplo secre es respirat rias saliva e muco Certifica es e Possui registro no Considerado pela Anvisa registros Minist rio da Sa de equipamento de prote o respirat ria desde que com o certificado de aprova o emi
117. estejam dilu das em altas concentra es de albumina ou caso as hem cias tenham recebido tratamento pr vio com certas enzimas proteol ticas Os anticorpos equivocadamente designados incomple tos podem ainda ser usados nas tipagens do sistema Rh utilizando se o teste de Coombs indireto Quanto aos anticorpos dirigidos para os ant genos do sistema Duffy anti Fya e anti Fyb sabe se que o primeiro relativamente raro e a maioria imune ao isotipo IgG podendo ser encontrado alguns na turais do isotipo IgM Tanto anti Fya quanto anti Fyb s o pass veis de causar rea o transfusional e DHRN Os anticorpos dirigidos contra ant genos Kidd s o clinicamente significantes resultando de transfus es ou gesta es al m de serem capazes de fixar complemento constituem causa frequente de rea o transfusional hemol tica tardia com hem lise intravascular e insufi ci ncia renal aguda Al m disso s o capazes de provocar DHRN Os anticorpos que reagem aos ant genos do sistema MNSs anti M anti N anti S anti s e anti U podem ser naturais ou imunes Os natu 52 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia rais n o s o encontrados em todos os indiv duos nos quais falta o anti geno correspondente como ocorre com o sistema ABO Os anticorpos desse sistema s o encontrados raramente O anti M o mais comum A transfus o incompat vel para esses anticorpos causa rea es trans fusionais algumas vezes gr
118. ety for Experimental Biology and Medicine Malden Massachusetts v 24 p 941 1927 LANGKILDE N C WoLF H ORNTOFT T F Lewis Negative Phenotype and Bladder Cancer Lancet Londres v 14 n 335 p 926 Apr 1990 LEVINE P et al A New Human Hereditary Blood Property Cellano Present in 99 8 of All Bloods Science Washington v 109 p 464 466 1949 et al Isoimmunization by a New Blood Factor in Tumor Cells Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine Malden Massachusetts v 77 n 3 p 403 405 1951 Marsu W L DINAPOLI J OYEN R Autoimmune Hemolytic Anemia Caused by Anti K13 Vox Sanguinis Basel Su a v 36 p 174 1979 MASOUREDIS S P et al Quantitative Immunoferritin Microassay of Fy Fy Jk U and Di Antigen Site Numbers on Human Red Cells Blood Washington v 56 p 969 977 1980 Mccann H WENK R E Alloimunization to the D Antigen By a Patient With Weak D Type 21 Immunohematology Philadelphia v 26 n 1 p 27 29 2010 MoLLISON P L ENGELFRIET C P CONTRERAS M Blood Transfusion in Clinical Medicine Londres Blackwell Scientific 1997 NATHALANG O et al Comparison between the Conventional Tube Tech nique and the Gel Technique in Direct Antiglobulin Tests Vox Sanguinis Basel Su a v 72 n 3 p 169 171 1997 NovaretTtTl M C Z Curso de imuno hematologia avan ada S o Paulo Funda o Pr Sangue Hemocentro de Sao Pau
119. fica o desses anticorpos para imuno hematologistas iniciantes Observa se ainda a necessidade de utilizar uma amostra recente para identifica o desses anticorpos Anticorpos Kidd podem causar rea es hemol ticas transfusionais especialmente do tipo tardio Observa se em alguns casos a ocorr n cia de hem lise intravascular em rea es graves embora a remo o desses anticorpos possa ocorrer no n vel extravascular pelo f gado Os t tulos de anti Jk e anti Jk declinam rapidamente in vivo Isso significa que um anticorpo identificado num primeiro momento pode n o ser percept vel posteriormente o que torna a verifica o dos re gistros dos pacientes com esses anticorpos previamente formados uma necessidade que n o deve ser negligenciada Anti Jk um anticorpo pertencente classe IgG que reage com a antiglobulina Indiv duos portadores desse anticorpo apresentam o fe n tipo nulo Jk Jk O anti Jk est associado DHRN leve e a rea es hemol ticas transfusionais tardias 3 8 Cole o de grupo sangu neo A exist ncia de crioaglutininas no soro de pessoas com anemia hemol tica adquirida conhecida h muito tempo Wiener Unger e Feldman 1956 nomearam essas crioaglutininas como ant geno I de individualidade O anticorpo reagiu com apenas 5 de 22 mil amostras de sangue testadas ou seja a maioria das amostras era I Acredita se que as amostras I n o reativas possu am um raro gene h
120. fil antig nico das hem cias de triagem diagrama para triagem de anticorpos Sistemas Rn wet mns Kidd utiy Lewis P Lutheran C us o fe fe fe fe e jie fte rue ur MMEGGEEGOA jo dedet t o fede fofo del e fedele EB Antigenos destru dos pelo tratamento com enzimas proteol ticas Anticorpos irregulares podem ocorrer em 0 3 a 2 da popula o em geral Giblett 1977 Boral e Henry 1977 embora essa preval ncia possa estar aumentada em determinados grupos de pacientes principal 91 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias mente os politransfundidos e os portadores de anemia falciforme Orlina Sosler e Koshy 1991 Os testes de detec o de anticorpos usando m todos em tubo de ensaio podem ser realizados por diferentes t cnicas Entretanto qual quer que seja a metodologia empregada ela deve ser capaz de detectar anticorpos clinicamente significantes atrav s da fase de temperatura ambiente incuba o a 37 C e utiliza o da antiglobulina humana Dependendo do tipo de potencializador utilizado na rea o determi nadas fases podem ser suprimidas como a supress o da leitura a 37 C quando utilizamos o PEG Toda pesquisa de anticorpos irregulares PAI positiva deve ter a especificidade do anticorpo investigada Esse procedimento realiza do pela identifica o de anticorpos irregulares IAI por meio de um painel de hem cias industrializadas contendo d
121. ge nos induzem chamada alorrea o Ant genos como as mol culas correspondentes ao MHC e ao grupo sangu neo que variam entre membros de uma mesma esp cie s o denominados aloant genos Para a maioria dos ant genos proteicos quanto maior for a mol cu la maior ser o n mero de ep topos e quanto maior a complexidade maior ser a imunogenicidade Um ant geno complexo cont m v rios determinantes antig nicos os determinantes mais eficientes na indu o da resposta imune s o chamados imunodominantes A imunogenicidade e a antigenicidade de uma prote na n o de pendem apenas de sua estrutura prim ria isto da sequ ncia de amino cido mas tamb m das estruturas secund rias terci rias e at quatern rias A configura o espacial e a acessibilidade de diversos ep topos em uma nica mol cula de prote na permi tem a liga o do anticorpo de v rias formas desde que esse s tio de liga o esteja acess vel na superf cie da mol cula alvo da respos ta imunit ria As rea es dos anticorpos s o mais intensas ao interagirem com ant genos hom logos ant genos espec ficos que induziram a forma o desses anticorpos quando comparadas s rea es ante os ant ge nos heter logos rea es cruzadas em virtude da similaridade entre os determinantes antig nicos de ant genos diferentes 43 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques 2 1
122. gu neos 51 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques Assim a especificidade H pode ser reconhecida por certas lectinas extraidas de Ulex europeus e Lotus tetragonolobus que aglutinam he m cias contendo H e n o aglutinam c lulas de indiv duos com fen tipo de Bombaim O soro de enguias e certos soros bovinos tamb m podem reagir com a subst ncia H Lectina extra da de Bandeiraea simplicijolia aglutina predominantemente hem cias B e em menor escala AB j a lectina de Dolichos biflorus aglutina hem cias A Os aloanticorpos do sistema Rh ao contr rio do que ocorre com os do sistema ABO n o existem de forma natural no soro S o pre dominantemente IgG e n o fixam complemento Esses anticorpos s o encontrados em casos de imuniza o com ant genos do sistema Rh em casos de transfus es incompat veis e em mult paras cujos fetos apresentem especificidade Rh diferente da m e Hem cias podem ser fenotipadas quanto ao sistema Rh utilizando se antissoros espec ficos Assim o soro anti D reage somente com hem cias Rh O soro anti C reage com hem cias Rh e Rh desde que apresente o ant geno C e o soro anti E tamb m reage com hem cias Rh e Rh Dois tipos de anticorpos anti Rh podem ser obtidos por imuniza o a anticorpos que em solu o salina aglutinam hem cias e b an ticorpos designados incompletos e que somente aglutinam hem cias caso elas
123. hecidas podemos citar as pneumoconioses que s o doen as do trato respirat rio associa das acumula o de determinadas part culas nos pulm es ou s rea es dos tecidos na sua presen a Sua preven o depende da na tureza do agente nocivo Assim al m da ventila o adequada para o trabalho em lugares insalubres os trabalhadores devem ter sua dis 102 Biosseguran a em laborat rios de sa de posi o equipamentos de prote o individual EPIs e equipamentos de prote o coletiva EPCs educa o e medicina preventiva 1 1 Doen as ocupacionais causadas por agentes f sicos Al m das pneumoconioses outras patologias ocupacionais es t o associadas a agentes f sicos como calor frio radia es ru dos e trepida es 1 1 1 Temperatura Nos laborat rios os trabalhadores podem estar submetidos a altas temperaturas os profissionais que trabalham com esteriliza o por exemplo Esse tipo de atividade exige um local espec fico para a insta la o de fornos e autoclaves que n o devem ficar na mesma rea fisi ca dos laborat rios que realizam t cnicas de imuno hematologia e dos bancos de sangue Nesses ambientes o mais comum a necessidade de se trabalhar em baixas temperaturas tanto pela pr pria refrigera o do local quanto pelas atividades desenvolvidas em c maras frias ou manipulando produtos criopreservados Dois exemplos de doen as que podem estar relacionadas a esse tipo de ativi
124. iana de Andrade Neto Quadro 1 Anomalias nas formas da membrana plasmatica do eritr cito ocasionadas por defeito nas prote nas Prote na afetada Anormalidade Anquirina Banda 3 Espectrina esferocitose eliptocitose Prote na 4 1 esferocitose eliptocitose Outra anomalia da membrana plasm tica observada a altera o na composi o lip dica causada por anomalias cong nitas ou pela mudan a nos quantitativos de colesterol e fosfolip deos Por exemplo o grande au mento seletivo do colesterol pode causar a forma o de acant citos 1 Caracter sticas bioqu micas da rea o ant geno anticorpo liga es de hidrog nio for as eletrost ticas for as de van der Waals e liga es hidrof bicas Os linf citos do sistema imune atuam identificando e combatendo uma ampla quantidade de pat genos eles se desenvolveram para reco nhecer grande n mero de diferentes ant genos ou seja toda part cula ou mol cula capaz de iniciar uma resposta imune provenientes de bact rias v rus e outros organismos causadores de doen a A resposta imune espec fica realizada de forma coletiva e coordenada por mol culas e c lulas cada uma das quais realiza uma fun o Os linf citos B reconhecem os ant genos por interm dio de mol culas de reconhe cimento chamadas imunoglobulinas Ig Essas prote nas atuam de forma espec fica a uma ampla variedade de ant genos cada Ig produ zida possui especificidade nica As im
125. icas aloimunes s o observadas em rea es a transfus es de sangue quando os anticorpos produzidos pelo doador reagem com os eritr citos do receptor da transfus o Os anticorpos do doador reconhecem as estruturas da membrana da hemacia protei nas carboidratos etc como um ant geno e isso ocasiona a destrui o das hem cias 22 Bioqu mica eritrocit ria Anemias hemol ticas tamb m podem ser induzidas por alguns f rmacos A penicilina por exemplo pode ligar se membrana dos eritr citos e dessa forma induzir a produ o de anticorpos contra o complexo penicilina eritr cito levando a um quadro de hem lise Podemos compreender ent o a relev ncia do estudo dos ant genos das hem cias que fornecem ferramentas importantes para a investiga o da superf cie dos gl bulos vermelhos e s o muito teis como mar cadores gen ticos na fam lia e em estudos populacionais e forenses 2 Potencial zeta A superf cie da c lula possui carga el trica que principalmente conferida por s tios terminais das glicoprote nas e dos glicolip deos Essa carga geralmente negativa e seu grau de negatividade pode va riar de acordo com o n mero e a carga de ons expressos na superf cie A membrana plasm tica possui ganglios deos cerca de 6 ou menos os quais s o glicoesfingolip deos que cont m cabe as oligossacar dicas polares Essas cabe as carregam uma carga negativa atrav s de seus re s duos de ci
126. icas qu micas do res duo e quimioter picos e materiais descart veis por eles contaminados e perfurocortantes contaminados com quimioter pico ou outro produto qu mico e res duos farmac uticos droga vencida contaminada inter ditada ou n o utilizada e antimicrobianos e horm nios sint ticos e merc rio de am lgamas e outros res duos de metais pesados e saneantes e domissanit rios e l quidos reveladores de filmes e res duos do grupo D ver abaixo contaminados por ma terial qu mico e demais produtos considerados perigosos pela norma da ABNT NBR 10004 tais como res duos t xicos corrosivos inflam veis e reativos Grupo C risco potencial sa de p blica e ao meio ambiente de corrente das caracter sticas radioativas do res duo e rejeitosradioativos materiaisradioativosou contaminados com radionuclideos provenientes de laborat rios de an li ses cl nicas ou de servi os de medicina nuclear e radiote rapia em conformidade com a norma CNEN NE 6 05 e servi os com atividade em medicina nuclear devem obser var ainda a norma CNEN NE 3 05 e todos os res duos dos grupos A B e D contaminados por radionuclideos seringas f rmacos compressas vestimenta luvas sapatilhas etc 123 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Grupo D res duos comuns e todos os que n o se enquadrem nos grupos anteriores por m quando gerados em estabelecimentos de
127. idomas eles devem ser dilu dos e distri bu dos em placas de cultura apropriada na concentra o de 0 5 c lula por po o Tal procedimento nos dar a certeza de que o anticorpo pro duzido oriundo de um nico clone e como n o existe meia c lula teo ricamente teremos um po o vazio e outro com apenas uma c lula Feito isso cada hibridoma ap s multiplica o e produ o de anticorpo ser examinado por teste sorol gico tendo em vista a identifica o dos hibri domas desejados ou seja aqueles que sintetizam o anticorpo monoclo nal que reage com o ant geno correspondente Uma vez identificados os hibridomas s o induzidos prolifera o e se tornam assim uma fonte inesgot vel de anticorpos altamente espec ficos Os Ac Mo s o muito teis como reagentes para testes de diagn sti co exames de imagem e procedimentos terap uticos na pr tica m dica No diagn stico podem ser utilizados para detec o de gravidez diag n stico de diversos microrganismos patog nicos medidas de n veis sangu neos de v rias drogas tipagem sangu nea tipagem de ant genos de histocompatibilidade caracteriza o fenot pica de diversos tipos ce lulares e detec o de ant genos produzidos por determinados tumores Por exemplo para esse ltimo prop sito Ac Mo radiomarcados podem ser utilizados in vivo na detec o ou localiza o de ant genos tumo rais Isso permite diagn stico precoce de alguns tumores prim rios ou me
128. inas IgM IgD IgG IgE e IgA Esses subtipos diferem entre si em tamanho carga el trica composi o de amino cidos e conte do de carboidratos Os bra os das mol culas de imunoglobulina s o denominados fragmentos Fab do ingl s fragment antigen binding e constituem a regi o de liga o com o ant geno As mol culas de imunoglobulina ou anticorpos apresentam diferen as na sequ ncia de amino cidos nas por es Fab em regi es denominadas regi es determinantes de complementaridade CDRs do ingl s complementary determinig region Essas regi es formam uma superf cie complementar para o ep to po o s tio ou local de liga o do ant geno com o anticorpo No anti geno o epitopo determina a especificidade do anticorpo conferindo atividade espec fica nos dom nios de liga o A diversidade nesses s tios de liga o ao ant geno garante que haja um repert rio quase ilimitado de especificidades de anticorpos As CDRs determinam a conforma o dos s tios de liga o ant geno anticorpo Os ant genos podem se unir ao anticorpo de diferentes maneiras A varia o nas sequ ncias dos dom nios de cadeia vari vel do anticorpo determina a especificidade em rela o ao ant geno As regi es de cadeia vari vel de um anticorpo s o diferentes para cada mol cula de anticorpo e essa varia o concentrada em alguns locais As regi es localizadas na sequ ncia hipervari vel formam o s tio de liga o com o ant gen
129. ios de sa de HERMOSILLA L Abordagem ergon mica de sistemas Revista Cient fica Ele tr nica de Sistema de Informa es Faculdade de Ci ncias Humanas de Gar a Gar a v 3 n 5 ago 2006 Dispon vel em http www revista inf br siste mas05 artigos edic5anolIlagosto2006 artigo02 pdf Acesso em 31 out 2012 Hirscu E B TAM V H Detection and Treatment Options for Klebsiella pneumoniae carbapenemases KPCs An Emerging Cause of Multidrug Resistant Infection Journal of Antimicrobial Chemotherapy v 65 n 6 p 1 119 1 125 2010 Jones K E et al As tend ncias globais em doen as infecciosas emergentes Nature n 451 p 990 993 Feb 2008 KLENK H D FELDMANN H Ebola and Marburg Viruses Molecular and Cellular Biology Norfolk Horizon Bioscience 2004 Konic B Hazard Symbols In NOP Online Regensburg Alemanha Institut f r Organische Chemie Universitat Regensburg 2009 Dispon vel em http www oc praktikum de en articles pdf HazardSymbols_en pdf Acesso em 25 jul 2011 Mais A D M Riscos ocupacionais em trabalhadores de banco de sangue 2002 Monografia Especializa o em Medicina do Trabalho Sociedade Universit ria Est cio de S Associa o M dica de Mato Grosso do Sul Campo Grande 2002 MAMIZUKA E M et al Seguran a nas universidades classifica o dos microrganismos infecciosos por grupo de risco Revista CIPA v 22 n 253 p 50 93 2000 OLIVEIRA M B S
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131. ira e Nogueira 2009 138 Biosseguran a em laborat rios de sa de C ocorrem em equipamentos el tricos energizados Exemplo motores transformadores quadros de distribui o fios etc D ocorrem em elementos pirof ricos aqueles que se inflamam espontaneamente em contato com o ar Exemplo magn sio zirc nio tit nio etc Uso e tipos de extintores port teis e o extintor tipo espuma usado em fogos classes A e B o extintor tipo di xido de carbono utilizado preferencial mente nos fogos classes B e C embora possa ser usado tamb m nos fogos classe A em seu in cio e o extintor tipo qu mico seco deve ser empregado nos fogos classes B e C as unidades de tipo maior com 60 a 150 kg devem ser montadas sobre rodas e nos inc ndios classe D ser usado o extintor tipo qu mico seco por m o p qu mico ser especial para cada material cr cr I9 e o extintor tipo gua pressurizada ou gua g s com capacida de vari vel entre 10 e 18 litros deve ser usado em fogos classe A Em qualquer um desses casos de inc ndio quando em um ambiente tomado pela fuma a deve se usar um len o molhado para cobrir o na riz e a boca e sair rastejando procurando respirar junto ao piso Deve se tamb m molhar bem as roupas e manter se vestido para se proteger Uma pessoa com as roupas em chamas deve ser obrigada a se jogar no ch o e ser envolvida em um cobertor cor
132. it ria reconhecidas como ant genos est o envol vidas na forma o de complexos imunes e na regula o do comple mento causando destrui o das hem cias por exemplo a prote na receptora de complemento 1 CR1 importante na ader ncia imune Como j mencionado banda 3 e glicoporina A GPA s o as duas proteinas integrais mais abundantes na membrana dos eritr citos Observa se a produ o de anticorpos contra essa prote na das hem cias em condi es fisiol gicas e patol gicas A produ o de anticorpos contra os componentes da membrana eri trocit ria pode causar anemias hemol ticas Essa condi o que pode ser heredit ria ou adquirida resulta do aumento no ritmo de destrui o dos eritr citos Dentre as anemias hemol ticas adquiridas podemos citar as autoimunes aloimunes rea es hemol ticas em transfus es de sangue e aquelas associadas ao uso de drogas As anemias hemol ticas autoimunes s o causadas pela produ o de anticorpos contra prote nas da membrana dos eritr citos do pr prio organismo Essas prote nas s o reconhecidas pelos anticorpos como ant genos como um corpo estranho e isso leva ent o des trui o das hem cias O autoanticorpo liga se a estruturas da mem brana dos eritr citos principalmente da circula o perif rica Esses anticorpos s o principalmente IgM bastante eficientes na fixa o de complemento ocorrendo hem lise extra e intravascular As anemias hemol t
133. itish Journal of Experimental Pathology Londres v 26 n 4 p 255 266 1945 Cow es J W SPITALNIK S L BLUMBERG N The Fine Specificity of Lewis Blood Group Antibodies Evidence for Maturation of the Immune Response Vox Sanguinis Basel Su a v 56 n 2 p 107 111 1989 CRAWFORD M N et al The Phenotype Lu a b together with Unconven tional Kidd Groups in One Family Transfusion Malden Massachusetts v 1 p 228 1961 CUTBUSH M MOLLINSON M PARKIN D M A New Human Blood Group Nature Londres n 165 p 188 1950 94 Imuno hematologia eritrocit ria DURAN J A RODRIGUES M J Teste de antiglobulina directo aus ncia de significado cl nico como teste pr transfusional Revista ABO Nacional n 1 p 9 15 mar 2000 ELMGREN et al DNA Sequencing and Screening for Point Mutations in the Human Lewis FUT3 Gene Enables Molecular Genotyping of the Human Lewis Blood Group System Vox Sanguinis Basel Su a v 70 p 97 1996 EscoLA POLIT CNICA DE SA DE JOAQUIM VEN NCIO org Textos de apoio em hemoterapia Rio de Janeiro Editora Fiocruz 2000 V 1 FLEGEL W A The Genetics of the Rhesus Blood Group System Blood Transfusion Mil o v 5 n 2 p 50 57 Apr 2007 GIBLETT E R Blood Group Alloantibodies An Assessment of Some Laboratory Practices Transfusion Malden Massachusetts v 17 n 4 p 299 1977 GIRELLO A L Kunn T I B de Fundamentos d
134. la o cresce e avan a para reas de matas e florestas virgens causando modifica es na geografia local ou altera es na biodiversidade da vida selvagem Des sa forma a melhor maneira de prevenir a emerg ncia de doen as infec ciosas proteger o desenvolvimento das zonas ricas em biodiversidade Jones et al 2008 115 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Al m disso os pesquisadores tamb m conclu ram nessa pesquisa que 60 das doen as emergentes s o origin rias de doen as de ani mais que podem ser transmiss veis ao homem zoonoses a maioria delas 71 proveniente de pat genos com uma fonte de vida selvagem Segundo Jones et al 2008 as zonas em que h mais riscos de zoonoses s o a totalidade do Sudeste Asi tico o subcontinente indiano o delta da Nig ria e a regi o dos Grandes Lagos africanos Outro ponto importante destacado pelos pesquisadores o aumen to das doen as emergentes cuja origem reside na resist ncia de alguns agentes aos tratamentos principalmente em decorr ncia da utiliza o crescente de antibi ticos nos pa ses ricos A pesquisa mostra ainda que a d cada de 1980 conheceu um aumento de novas patologias provavel mente devido pandemia de Aids que tem como caracter stica fun damental a diminui o da imunidade j os anos 1990 foram marcados por um pico de doen as vetoriais causadas por exemplo por mosqui tos o que pode estar rela
135. libe ram ar filtrado HEPA para a superf cie de trabalho ou para o operador a fluxo vertical protege principalmente o operador das subst n cias que ele est manuseando Parte do texto deste item foi reproduzida de Oliveira e Nogueira 2009 136 Biosseguran a em laborat rios de sa de b fluxo horizontal protege principalmente o produto que est sendo processado somente podem ser envasados ou manipula dos materiais que n o apresentem riscos de contamina o para o operador As cabines se seguran a biol gica podem ser divididas em tr s classes sendo que a classe II tem v rias subdivis es Classe I fornece seguran a pessoal e ambiental mas n o do pro duto funcionando como uma coifa provida de filtro HEPA para prote o ambiental sua utilidade no laborat rio muito limitada geralmente usada para acondicionar equipamentos que po dem gerar aeross is como centr fugas Classe II essa classe que engloba cabines que fornecem prote o pessoal ambiental e do produto pode ser subdividida em v rios tipos A B1 B2 e B3 O ar captado pela grelha frontal prote gendo o operador e passa por filtros HEPA diminuindo a con tamina o na superf cie interna de trabalho Na c mara de tipo A a mais comum nos laborat rios brasileiros por causa do fator custo benef cio o ar filtrado recirculado ao laborat rio Nas ca maras do tipo B o ar eliminado para o exterior do pr dio Dentre
136. lo 1998 ORIOL R LE PENDU J MOLLICONE R Genetics of ABO H X and Related Antigens Vox Sanguinis Basel Su a v 51 p 161 1986 ORLINDA A SOSLER S D Kosuy M Problems of Chronic Transfusion in Sickle Cell Disease Journal of Clinical Apheresis Malden Massachusetts v 6 p 243 263 1991 96 Imuno hematologia eritrocit ria PETZ L D et al Clinical Practice of Transfusion Medicine 3 ed Nova York Churchill Livingstone 1995 ReiD M D Lomas Francis C The Blood Group Antigens Facts Book Nova York Academic Press 1997 SALMON C CARTRON J P ROUGER P The Human Blood Groups Nova York Masson Publisher 1984 SCHULTZ M H Serology and Clinical Significance of Kell Blood Group System Antibodies In LAIRD FRYER B et al org Blood Group System Kell Arlington American Association of Blood Banks 1990 THE AMERICAN NATIONAL RED Cross Immunohematology methods and procedures Rockville The American National Red Cross 1993 WENDELL R F Clinical Immunohematology Basic Concept and Clinical Applications Oxford Blackwell Scientific 1991 WIENER A S UNGER L J FELDMAN J Type specific Cold Auto antibodies as a Cause of Acquired Hemolytic Anemia and Hemolytic Transfusion Reactions Biologic Test with Bovine Red Cells Annals of Internal Medicine Philadelphia v 44 n 2 p 221 240 1956 97 Biosseguran a em laborat rios de sa de Maria Beatriz Siqueira Cam
137. logias Da o termo v rus emergente Outro v rus de classe 4 que causa quadro semelhante ao Ebola o Marburg bastante conhecido pelos profissionais de sa de Ele se manifestou pela primeira vez na cidade alem de Marburg de onde se originou o seu nome por causa do manejo inadequado realizado pelo t cnico respons vel pelos animais de laborat rio ao final des se surto 31 pessoas haviam sido infectadas e 7 morreram da a import ncia de se conhecer os riscos inerentes s profiss es ligadas rea da sa de e atender as normativas de biosseguran a Klenk e Feldmann 2004 Alguns organismos bacterianos tamb m podem representar risco para quem trabalha em laborat rios de an lises cl nicas Al m disso o uso indiscriminado de antibi ticos pode propiciar a sele o de bac 114 Biosseguran a em laborat rios de sa de t rias cada vez mais resistentes Em v rios hospitais brasileiros j se tem not cia da exist ncia atualmente de diferentes tipos de bact rias multirresistentes entre elas o Staphylococcus aureus resistente me ticilina MRSA a mesma esp cie resistente vancomicina VRSA e a Klebsiella pneumoniae que possui a enzima carbapenemase KPC Essa ltima vem sendo chamada pela m dia de superbact ria pois a carbapenemase gera resist ncia da bact ria s penicilinas cefalos porinas carbapenemas e ao aztreonam todos eles antimicrobianos Hirsch e Tam 2010 Na atualidade es
138. los anticorpos apresentando o fen tipo Fy a b Harmening 2006 Anti Fy um anticorpo encontrado com certa frequ ncia e que pode causar rea o transfusional hemol tica RTH e algumas ve zes DHRN Anti Fy um anticorpo pouco frequente por m imune Em raras ocasi es foi relacionado com RTH de leve a severa e ocasionalmente pode causar DHRN de intensidade leve 85 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias 3 6 3 Anticorpo anti Fy produzido por indiv duos com fen tipo Fy a b que nao expres sam nenhuma glicoproteina Duffy Reagem com fen tipos Fy a b e Fy a b e como os ant genos Fy n o s o destru dos por tratamento enzim tico esses anticorpos mant m a sua reatividade mesmo quan do as c lulas Fy s o tratadas por enzimas proteol ticas 3 7 Sistema Kidd O sistema Kidd foi descoberto em 1951 ap s a implanta o da t c nica de Coombs em uma paciente sra Kidd que gerou um feto com DHRN em decorr ncia de um anticorpo ent o denominado anti Jk Allen Diamond e Niedziela 1951 Posteriormente foi revelado o anti Jk 3 7 1 Antigenos Jk e Jk Os ant genos Jk s o detectados em eritr citos fetais a partir da 11 semana de idade gestacional para o ant geno Jk essa detec o poss vel a partir da 7 semana Ant genos Jk e Jk est o bem desenvolvidos ao nascimento e n o s o alterados por enzimas proteol ticas ZZAP DTT AET e difosfa to de cloroquina
139. m em caucasianos detectado sorologi camente por meio da capacidade desses eritr citos aglutinarem com o soro anti A e de n o aglutinarem com o soro lectina anti A Dolichos biflorus ao contr rio do fen tipo A cujas hem cias s o aglutinadas na presen a desse reagente A elucida o de subgrupos sangu neos pode ser realizada mediante fenotipagem das amostras com lectinas anti A e anti H Ulex europaeus al m de t cnicas de fixa o e elui o e pesquisa de ant genos na saliva de indiv duos secretores A aus ncia do gene H e consequentemente do ant geno H deno minada fen tipo Bombaim ou O foi descrita em 1952 Esse fen tipo distingue se pela perda total da atividade das transferases ABH nos eritr citos e nas secre es corp reas e pelas grandes quantidades de anticorpos anti H Por causa da presen a do ant geno H na superf cie dos seus eritr citos indiv duos com fen tipos Bombaim s o incom pat veis com os eritr citos de doadores do tipo O 68 Imuno hematologia eritrocit ria Quadro 3 Identifica o dos principais subgrupos ABO Rea es das hem cias Es Fon tlbas Soro Soro Soro Hem Saliva do POS Anti A Anti B Anti AB Anti A Anti H B secretor A 4 Ca tow o om o fee fofo A owe ware e polar en ES ENE ES CEES CAC Ea e o o ow a a ar oo o ben 8 o fowl oa a a o o u a ocorr ncia de anticorpos anti Al nesses fen tipos vari
140. m salina n o observada nos testes de rotina A atividade do anticorpo pode ser contornada pelo uso de m todos de teste de pr aquecimento Como a express o do ant geno P nos eritr citos varia e se deterio ra durante o armazenamento anticorpos podem reagir apenas com as 75 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias c lulas com express o mais intensa ou com a adi o de enzimas para intensificar as rea es O fornecimento de bolsas compat veis a 37 C e na fase de AGH uma abordagem aceit vel para a transfus o Raros exemplares de anticorpos P que reagem a 37 C podem cau sar destrui o de eritr citos in vivo entretanto h relatos de rea o hemol tica transfusional imediata e tardia A DHRN n o est associa da anti P presumivelmente porque o anticorpo habitualmente de natureza IgM 3 2 Sistema MNSs Ap s a descoberta do sistema ABO a busca por novas especi ficidades de anticorpos por meio da imuniza o de coelhos com eritr citos humanos foi iniciada por Landsteiner e Levine Den tre os anticorpos recuperados dos soros desses coelhos foram de tectados anti M e anti N ambos divulgados num artigo em 1927 Landsteiner e Levine 1927 Com a implanta o da t cnica da antiglobulina em 1947 Walsh e Montgomery descobriram o ant geno S que embora distinto era geneticamente ligado ao MN Seu alelo s foi descoberto em 1951 eo sistema MN passou a ser conhecido como MNSs um sistema
141. m um local mais remoto da glicoproteina e os locais sen s veis enzima s o menos acess veis A atividade de Ss pode ser des tru da por papa na ficina e bromelina embora o grau de degrada o dependa da concentra o da solu o enzim tica da sua dura o e da propor o utilizada Ss s o considerados ant genos eritrocit rios n o sendo encontra dos em plaquetas linf citos mon citos ou granul citos Assim como MN est o localizados no cromossomo 4 3 2 2 Anticorpos anti M Os anticorpos anti M s o em sua maioria crioaglutininas reativas em salina de ocorr ncia natural e sem import ncia transfusional A maioria dos exemplos de anti M s o IgG reativos a baixa tem peratura TA 4 C entretanto foram descritos casos raros reativos a 37 C capazes de promover rea o transfusional importante Devido ao efeito de dose anticorpos anti M podem reagir melhor com hem cias M N gen tipo MM Anti M muito fraco pode n o reagir com hem cias M N tor nando dif cil sua detec o no painel de identifica o A reatividade do anticorpo pode ser acentuada ao se aumentar a rela o entre as c lulas do painel e o volume de soro e ou o tempo de incuba o Pode se adicionar um meio potencializador como a albumina ou um meio de baixa for a i nica LISS do ingl s low ionic strenght solution Esse anticorpo pode ser detectado no plasma que ligeiramente mais cido em decorr ncia do anticoagulante Anti M
142. mbora na maioria das vezes o anticorpo seja uma IgM fo ram relatados casos de anticorpos IgG ap s transfus es maci as con tendo o ant geno Le Cowles Spitalnik e Blumberg 1989 O comportamento sorol gico do anticorpo revela melhor afinida de por c lulas suspensas em salina em temperatura ambiente embora algumas vezes reaja a 37 C e na fase da antiglobulina humana AGH podendo ocasionar rea es transfusionais hemol ticas Anti Le pode ser facilmente neutralizado por plasma ou saliva que contenha a subst ncia Le Indiv duos portadores do fen tipo Le a b n o produzem anti Le pelo fato de a estrutura do anti geno Le estar contida dentro do epitopo de Le e por apresenta rem a subst ncia Le no seu plasma e na sua saliva Henry Oriol e Samuelson 1995 Petz et al 1995 83 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias 3 5 4 Anticorpo anti Le N o encontrado rotineiramente nos testes pr transfusionais sendo habitualmente uma IgM que n o se fixa ao complemento t o facilmente quanto o anti Le produzido por indiv duos apresentando o fen tipo Le a b e ocasionalmente por indiv duos Le a b Pode ser neutralizado facil mente por plasma ou saliva contendo a subst ncia Le 3 5 5 Anticorpo anti Le Apresenta aglutina o com todos os eritr citos Le a b e Le a b sendo formado em indiv duos de fen tipo Le a b Apresenta agluti na o de aproximadamente 90 dos sangues de
143. meio da alimenta o A mol cula de hemoglobina composta de globina uma prote na com dois pares de cadeia de amino cidos chamadas a e 8 e quatro grupos heme os quais apresentam um tomo de ferro cada um O grupo heme uma porfirina cont m um tomo de ferro no estado ferroso Fe 2 locali zado no centro da mol cula e sintetizado em todas as c lulas do orga nismo A maior porcentagem de Hb de um indiv duo adulto normal a Hb A que apresenta as caracter sticas j mencionadas Apenas aproximadamente 2 das hemoglobinas s o do tipo A Essa hemo Classe de mol culas org nicas formadas por quatro an is pirr licos que geralmente albergam no centro um on met lico como o ferro 39 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques globina tem quatro pares de cadeias polipeptidicas sendo duas do tipo alfa e duas do tipo delta Outro tipo de hemoglobina a do tipo F presente durante a vida fetal at aproximadamente um ano de vida e que tamb m possui quatro pares de cadeias polipept dicas sendo duas do tipo alfa e duas do tipo gama Essa hemoglobina possui maior afi nidade pelo O do que os outros tipos de hemoglobina e permite mais capta o do O pelo feto Estudos cient ficos acerca das hemoglobinas descreveram dezenas de mol culas com estrutura alterada sendo que em aproximadamente 10 desses casos foram observadas como resultado altera es funci
144. micos e nitr lica inadequadas para solu es aquosas indicadas para uso prolongado com alguns produtos qu micos sendo consideradas de bom uso em solventes arom ticos e halogenados 132 Biosseguran a em laborat rios de sa de e PVA bom uso para cidos e bases ruim para a maioria dos solven tes org nicos e PVC bom uso para cidos bases per xidos hidrocarbonetos alco is e fen is e ruim para solventes arom ticos e halogenados e neoprene bom uso para cidos e bases dilu dos p ssimas para solventes org nicos c Equipamentos de prote o ocular e facial S o utilizados para prote o contra impactos de part culas lumino sidade intensa radia o ultravioleta ou radia o infravermelha A nor ma t cnica aplic vel a ANSI Z 87 1 1989 Funda o Oswaldo Cruz 2003a Os culos devem ser usados em todas as atividades de risco como manipula o de produtos biol gicos e de produtos qu micos al m daquelas que portam risco de radia o nesse caso s o recomen dados culos especiais com indica o de prote o contra radia o Caracter sticas e n o devem distorcer as imagens ou limitar o campo visual e devem ser resistentes aos produtos que ser o manuseados e devem ser confort veis e de f cil limpeza e conserva o e devem ter lente panor mica incolor ser de pl stico resistente e at xico com arma o flex vel e prote o lateral d M scaras e respiradores
145. mmunology 4 ed Nova York Lippincott Willians amp Wilkins 1999 WILLIAMS L DoMEN R E Zeta Potential and Vancomycin Red Blood Cell Interactions Archives of Pathology amp Laboratory Medicine v 114 n 12 p 1 262 1 263 1990 32 Bioqu mica eritrocit ria WILSON I A et al Structural Aspects of Antibodies and Antibody Antigen Complexes Ciba Foundation Symposia v 159 p 13 39 1991 ZAVODNIK I B et al The Effects of Palmitate on Human Erythrocyte Membrane Potential and Osmotic Stability Scandinavian Journal of Clinical amp Laboratory Investigation v 56 n 5 p 401 407 1996 ZELTSER D et al The Erythrocyte Adhesiveness Aggregation Test in the Peripheral Blood of Patients with Ischemic Brain Events Acta Neurologica Scandinavica v 103 n 5 p 316 319 2001 33 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia Paulo Roberto Soares Stephens Flavia Coelho Ribeiro Valmir Laurentino da Silva Marcos Antonio Pereira Marques Este capitulo objetiva dar subsidios aos estudantes para o enten dimento de algumas associa es da imuno hematologia com outras reas como a imunologia e a hematologia Para isso necess rio des crever determinados mecanismos imunol gicos e tamb m conceitos hematol gicos mostrando os aspectos mais importantes dessas reas Este cap tulo permite que o aluno compreenda os conceitos b sicos da imuno hematologia sem o aux lio de bibliografia suplementar
146. mplemento O sistema complemento compreende um grupo de mais de qua renta prote nas presentes no plasma e encontradas na forma de pr enzimas zimog nios as quais ao reagirem sequencialmente for mam enzimas que por sua vez clivam outras pr enzimas Essas outras pr enzimas se combinam e formam novas enzimas em uma rea o em cascata que culmina na lise celular Existem tr s mecanismos de ativa o do sistema complemento pe las vias cl ssica alternativa e das lectinas Em cada uma dessas vias observamos uma sequ ncia peculiar de prote nas ou seja apesar dos ob jetivos das tr s vias serem os mesmos os de promover a lise o in cio da forma o das cascatas constitu do por uma sequ ncia diferente de pro 57 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva Marcos Antonio P Marques te nas Al m disso para a ativa o do sistema complemento pela via cl s sica necess ria a presen a do anticorpo ligado a um ant geno espe c fico J nas outras duas vias a ativa o se d apenas com a presen a do ant geno Por isso as vias alternativa e das lectinas s o mecanismos imunol gicos mais simples e inerentes imunidade inata As prote nas do sistema complemento s o designadas pela letra C seguida de n meros por exemplo C3 ou de letras e n meros no caso de a prote na ter sofrido clivagem por exemplo C3b O C3 que clivado em condi es fisiol gicas gerando o su
147. na mol cula A regi o que se liga ao ant geno varia amplamente sendo conhecida como regi o vari vel ou regi o V A regi o que participa da fun o efetora conhecida como regi o constante ou regi o C e ela se mant m preservada embora tenha cinco formas principais especializadas na ativa o de diferentes mecanismos efetores As mol culas de anticorpos apresentam not vel diversidade por causa de um mecanismo que faz os genes expressos nas mol culas serem reunidos por rearranjos de DNA que juntam dois ou tr s dife rentes segmentos para formar um gene de regi o vari vel Rearran jos nucleicos subsequentes podem reunir o gene da regi o vari vel a qualquer gene da regi o constante formando os diferentes isotipos IgG IgA IgM IgD e IgE ver fig 4 A imunoglobulina formada estruturalmente por duas cadeias leves L do ingl s light id nticas e por duas cadeias pesadas H do ingl s heavy tamb m id nticas fig 2 As cadeias leves est o liga das s cadeias pesadas por pontes dissulf dicas Cada uma das duas cadeias leve e pesada possui uma regi o vari vel e outra constante Logo uma imunoglobulina apresenta uma regi o constante C e uma regi o vari vel V na cadeia leve as mesmas caracter sticas es t o presentes na cadeia pesada que tem uma regi o constante C e uma regi o vari vel V 46 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia VL vari vel da cadeia leve VH
148. nados res duos da banda 3 s o cofacilitadores dos eritr citos na retirada de g s carb nico dos tecidos subsequentemente liberando oxig nio nos pulm es por meio da anidrase carb nica Apresenta tamb m tr s intera es com a glicoforina as quais sugerem que sua presen a ou au s ncia pode alterar a efic cia do transporte de nions Uma das fun es mais importantes est associada atividade hemocater tica quando a prote na banda 3 liga se a res duos desnaturados de hemoglobina formando agregados que geram ep topos na super f cie eritrocit ria e podem ser reconhecidos por autoanticorpos da classe IgG que promovem a sua remo o da circula o sangu nea Dentre as altera es mais conhecidas da forma poiquilocitose est o a esferocitose e a estomatocitose fig 3 que s o altera es cau sadas pela intera o da anquirina e da banda 3 com o complexo pro teico Rh por causa dessa intera o indiv duos com fen tipo nulo podem ter uma s ndrome caracterizada por anemia hemol tica cr ni ca de intensidade vari vel cujo resultado o aumento da fragilidade osm tica e anormalidades na morfologia dos eritr citos 41 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva Marcos Antonio P Marques Na acantocitose a aus ncia da prote na Xk chamada de fen ti po McLeod caracterizada pela associa o de acantocitose distrofia muscular e cardiopatia Nos eritr citos a prote na
149. ndentes anticorpos s ricos estando diretamente relacionada a tr s disciplinas e Imunologia que identifica os ant genos eritrocit rios e os distribui em sistemas e que estuda tamb m as imuniza es provocadas por esses ant genos e os problemas imunol gicos resultantes das rea es ant geno anticorpo e Gen tica que estuda a transmiss o heredit ria dos grupos san gu neos de acordo com as leis de Mendel e Bioqu mica que estuda os ant genos inseridos na membrana eri trocit ria como estruturas reativas lip deos prote nas glic dios As bases cient ficas da transfus o de sangue foram adquiridas so mente no in cio do s culo XX Os grupos sangu neos A B e O foram descritos em 1901 por Landsteiner o grupo AB por Decastello e Sturli em 1902 As t cnicas de hemaglutina o direta ou indireta permitiram o conhecimento dos grupos sangu neos sendo hoje relatados mais de 280 ant genos agrupados em 30 sistemas notadamente o ABO o Rh eo MNS al m de outros mais complexos 65 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias 1 Sistema ABO o mais importante e mais conhecido sistema de grupos sangui neos Em decorr ncia da presen a de ant genos ABO na maioria dos tecidos do organismo trata se mais de um sistema de histocompati bilidade do que simplesmente de um sistema de grupos sangu neos Os genes ABO est o localizados no bra o longo do cromossoma 9 posi o 9q34 1 q34 2 contan
150. nications v 67 n 2 p 696 700 1975 Mozes N ROUxHET P G Methods for Measuring Hydrophobicity of Micro organisms Journal of Microbiological Methods v 6 n 2 p 99 112 1987 NELSON D L Cox M M Lehninger Principles of Biochemistry 5 ed Nova York W H Freeman 2008 Onno H et al Changes in Zeta Potential of the Red Cell Membrane in Humans during Acute Exposure to Cold Japanese Journal of Experimental Medicine v 55 n 5 p 207 209 1985 PANTALEO A et al Naturally Occurring Anti band 3 Antibodies and Red Blood Cell Removal under Physiological and Pathological Conditions Autoimmunity Reviews v 7 n 6 p 457 462 2008 Poore J Red Cell Antigens on Band 3 and Glycophorin A Blood Reviews v 14 n 1 p 31 43 2000 PUTHENPARAMBIL J LECHNER K KORNEK G Autoimmune Hemo lytic Anemia as a Paraneoplastic Phenomenon in Solid Tumors A Crit ical Analysis of 52 Cases Reported in the Literature Wiener Klinische Wochenschrift v 122 n 7 8 p 229 236 2010 31 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto RIDDICK T M Control of Emulsion Stability through Zeta Potential Soap and Chemical Specialities v 45 n 10 p 77 1969 Ravina L A Electrophoresis Industrial and Engineering Chemistry v 62 n 7 p 70 73 July 1970 ROTHMAN J E LENARD J Membrane Asymmetry Science v 195 n 4 280 p 743 753 Feb 1977 SCHAFFAZICK S R et al Physico
151. ntendo D fraco devem ser consideradas Rh positivas podendo provocar dessa forma aloimuniza o transfusional ou feto materna A incid ncia de D fraco tem sido descrita como presente em 0 2 a 0 5 da popula o da Europa e em 3 da popula o dos Estados Unidos Aloanticorpos anti D n o ocorrem na maioria dos pacientes portadores de D fraco mas alguns pacientes com fen tipo D fraco incluindo aqueles com tipo 21 podem produzir anticorpos contra ep topos n o pr prios do ant geno D McGann e Wenk 2010 ALITER Figura 2 Pontos de substitui o de amino cidos na por o intracelular da membrana eritrocit ria nos fen tipos D fraco Fonte Adaptado de Flegel 2007 Antigenos D parciais apresentam altera es qualitativas e quanti tativas quando comparados com o ant geno D normal Essas altera es podem ser caracterizadas pela aus ncia de um ou mais ep topos do ant geno D que foram substitu dos por ep topos da prote na CcEe e podem ocorrer por muta es de ponto missenses no gene RHD que levam a substitui es de amino cidos predominantemen te nas al as extracelulares mas tamb m dispersas na prote na por isso possuem ep topos alterados com amino cidos diferentes que os reagentes monoclonais n o reconhecem As muta es de ponto missenses podem ser nicas uma nica muta o num determinado xon do gene RHD ou dispersas mais de uma muta o de ponto em mais de um xon do gene RHD As mu t
152. o nais e cl nicas no indiv duo As altera es gen ticas no cromossomo 11 ocorrem devido presen a das Hb SS ou Hb AS que acarretam res pectivamente a anemia falciforme ou tra os dessa doen a por causa das altera es dos eritr citos Asaltera es na mol cula de globina tamb m podem levar a anemias como o caso das talassemias anemia de Cooley A doen a que ocorre predominantemente em popula es do Mediterr neo frica e sia decorrente das modifica es nas cadeias alfa e beta que constituem a globina Como resultado observa se o surgimento de globina com pig menta o e fun es alteradas A associa o do CO com a hemoglobina forma um complexo cha mado carboxi hemoglobina que impede a liga o do ferro com o oxi g nio No entanto desde que haja disponibilidade adequada de oxig nio para o indiv duo respirar essa rea o revers vel Nesse caso cada mol cula de O se liga a um tomo de ferro presente em cada grupo heme da hemoglobina formando o complexo chamado oxi hemoglobina Para a libera o do oxig nio necess rio o cofator 2 3 difosfogli cerato 2 3 DPG encontrado no interior dos eritr citos que altera a hemoglobina geometricamente tornando a deoxi hemoglobina Esse cofator tem potencial de reduzir a for a de liga o entre o oxig nio e a hemoglobina permitindo a libera o desse g s para os tecidos Um importante fator que influencia a capta o do oxig nio
153. o pulm o p ncreas placenta Reid e Lomas Francis 1997 Embora tenham sido detectados em eritr citos fetais com apenas 10 12 sema nas de gesta o est o fracamente desenvolvidos ao nascimento e n o atingem n veis adultos at os 15 anos de idade Os ant genos demonstram efeito de dose sendo notadas diferen as n tidas entre membros homozigotos e heterozigotos em uma mes ma fam lia 3 3 2 Anticorpos anti Lu A maioria dos exemplares de aglutininas de ocorr ncia natural com rea o em salina e que reagem melhor em temperatura ambiente que a 37 C Alguns exemplares reagem a 37 C e no teste de antiglo bulina humana AGH Frequentemente o anti Lu passa despercebido nos testes de rotina porque a maioria das c lulas de triagem para anticorpos irregulares s o Lu negativo A reatividade do anticorpo n o profundamente alterada pe las enzimas de rotina do banco de sangue Em sua maioria os anticorpos Lu n o s o clinicamente significativos em transfus o e tendem a desaparecer alguns meses depois de terem sido detec tados Podem ocasionar DHRN embora na maioria dos casos de forma branda 79 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias 3 3 3 Anticorpos anti Lu gt A maioria pertence classe IgG sendo reativos a 37 C e na fase de AGH S o produzidos em resposta gravidez ou transfus o Anti Lu reage com todas as c lulas testadas exceto o autocontrole sendo mais fracas
154. o A liga o ant geno anticorpo feita de forma revers vel e pode ser entendi da como uma intera o de macromol culas com seus ligantes em geral O complexo ant geno anticorpo exibe alto grau de complementaridade qu mica e estrutural com intera o das suas superf cies 18 Bioqu mica eritrocit ria O princ pio b sico da termodin mica na intera o ant geno anticorpo o mesmo daquele de uma rea o de ligantes revers veis A rea o ant geno anticorpo obedece ao princ pio da lei de a o das massas A constante de equil brio Keq mede a afinidade intr nseca do anticorpo pelo ant geno A Keq definida como a concentra o de liga o ac ag sobre a concentra o de ag e ac Esta a f rmula da constante de equil brio k _ ac ag k ac ag Keq Os anticorpos ligam se aos ant genos pelo contato nas CDRs com os amino cidos por m os detalhes da liga o dependem do tamanho e da forma do ant geno As cadeias leves e pesadas das CDRs criam um s tio de liga o com o ant geno As sequ ncias das CDRs diferem entre os anticorpos assim como as formas criadas por essas CDRs Como ideia geral os anticorpos se unem a ligantes cujas superf cies lhes sejam complementares As for as de liga o envolvidas nas intera es espec ficas entre ant genos e anticorpos n o apresentam liga o covalente de natureza f sico qu mica Essas intera es espec ficas envolvem uma varied
155. o com s mbolo de risco risco de acidente biol gico perfurocortante ou escarificante 2 2 5 Acidente de trabalho por materiais perfurocortantes Segundo Shimizu e Ribeiro 2002 a principal causa de contato acidental com materiais biol gicos em laborat rio s o agulhas con taminadas Segundo esses autores diversos estudos mostram que os acidentes provocados por agulhas resultam geralmente da pr tica de reencape de agulhas antes do descarte do uso de luvas de procedi mentos de tamanho incorreto da falta de habilidade e concentra o do t cnico e da agita o psicomotora do paciente Um alerta dessa pesquisa diz respeito ao baixo registro oficial de acidentes aumentando com isso a subnotifica o dos aciden tes causados por materiais perfurocortantes e fluidos biol gicos Os autores atribuem esse problema pouca import ncia que os profis sionais da equipe de sa de d o a esse tipo de acidente por causa da percep o equivocada de que a les o pequena e que por isso n o ocasionar danos para a sua sa de Em rela o aos agentes biol gicos Shimizu e Ribeiro 2002 destacam estudos que mostram que a cada 1 000 pun es acidentais ocorrem de 1 a 4 soroconvers es positivas para o v rus da imunodefici ncia humana HIV J a contamina o de profissionais de sa de por v rus da he patite B HBV por causa do seu grande poder infectante bem mais alta com um risco m dio de infec o d
156. o da mobilidade eletrofor tica das par t culas carregadas em uma suspens o aquosa as part culas eletrica mente carregadas movimentam se sob a a o de um campo el tri co aplicado Quando um campo el trico aplicado atrav s de um eletr lito part culas carregadas em suspens o s o atra das para o campo de carga oposta A velocidade da part cula no campo de finida como mobilidade eletrofor tica que a rela o entre a velo cidade da part cula e o campo el trico aplicado e convertida em potencial zeta a partir da equa o de Helmholtz Smoluchowski Quanto maior a carga superficial maior ser a velocidade com que as part culas se deslocam em dire o aos eletrodos de carga O poten cial zeta que est relacionado com a for a de repuls o entre as he m cias pode ser calculado atrav s da seguinte f rmula desenvolvida por Pollack y Z Du onde Z potencial zeta y eletronegatividade da hem cia D constante diel trica do meio u for a i nica do meio O potencial zeta de um sistema pode ser modificado de duas maneiras 1 Redu o da carga el trica das hem cias y que pode ser obtida por fixa o de anticorpos como os ep topos dos anticorpos s o carregados positivamente quando se fixam membrana eritrocit ria neutralizam as cargas dos ant genos espec ficos reduzindo o potencial zeta ou por tratamento enzim tico a adi o de enzimas proteol ticas como a tripsina
157. o de res duos Ap s a segrega o deve se proceder ao acondicionamento dos re s duos seguindo a RDC n 306 e agulhas descart veis grupo E devem ser desprezadas junta mente com as seringas quando descart veis sendo proibido reencap las ou proceder sua retirada manualmente 124 Biosseguran a em laborat rios de sa de recipientes coletores para res duos do grupo E devem ser confec cionados em material resistente desenvolvido especialmente para a utiliza o em servi os de sa de e possuir desconectador de agulhas o volume dos recipientes coletores ou de acondicionamento deve ser compat vel com a gera o di ria desse tipo de res duo os recipientes devem ser preenchidos somente at dois ter os de sua capacidade ou o n vel de preenchimento deve ficar a 5 cm de dist ncia da boca do recipiente os recipientes coletores devem estar localizados o mais pr ximo poss vel da rea de uso dos materiais a serem descartados neles expressamente proibido o esvaziamento desses recipientes para o seu reaproveitamento res duos s lidos dos grupos A B e C devem ser dispostos em sacos biodegrad veis de cor branco leitosa com r tulos do s mbolo de risco biol gico e a express o RES DUO BIOL GICO RES DUO T XICO ou RES DUO RADIOATIVO de acordo com as suas caracter sticas no caso de res duos classificados no grupo D eles devem ser acondicionados em sacos pl sticos transparentes de cor clara exce
158. o gene RHD difere daquele codificado pelo RHCE em 36 amino cidos Essas diferen as talvez possam explicar em parte a imunogenicidade do ant geno RhD pois quando um indiv duo RhD negativo exposto a hem cias RhD positivo o seu sistema imune estimulado por uma pro te na que difere em 36 amino cidos daquela que ele possui Na pr tica transfusional o sistema Rh o sistema mais importante depois do sistema ABO tendo sido respons vel por casos de doen a hemol tica do rec m nascido de intensidade vari vel chegando mes mo a ser grave e levar at a bito fetal al m de ter sido responsabi lizado por rea es transfusionais hemol ticas que podem ser graves Ainda que 49 ant genos estejam relacionados ao sistema Rh apenas 5 D C c E e s o respons veis pela grande maioria dos problemas cl nicos associados a esse sistema 2 1 D fraco e D parcial Os ant genos D fraco apresentam se como uma express o en fraquecida do ant geno D reagindo de maneira vari vel com os antissoros anti D comerciais Normalmente esse ant geno n o detectado por t cnicas de aglutina o direta e sim por t cnicas com plementares como tratamento enzim tico das hem cias e t cnica de Coombs indireto Esse fen tipo ocorre por uma varia o qualitativa do ant geno RhD que produz uma altera o quantitativa de s tios antig nicos ex 72 Imuno hematologia eritrocit ria pressos na membrana eritrocit ria As hem cias co
159. odem ser necess rios 93 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias Refer ncias bibliogr ficas ABBAS A K LICHTMAN A H PoBER J S Imunologia celular e molecular 4 ed Rio de Janeiro Revinter 2002 ALLEN F H DIAMOND L K NIEDZIELA B A New Blood Group Antigen Nature Londres n 167 p 482 1951 ALVAREZ A et al Relative Sensitivity of Direct Antiglobulin Test Antibody s Elution and Flow Cytometry in the Serologic Diagnosis of Immune Hemolytic Transfusion Reaction Haematologica Pavia Italia v 85 n 2 p 186 2000 AMERICAN ASSOCIATION OF BLOOD BANKS Technical Manual 12 ed Bethesda AABB 1996 BECK M L The I blood group collection In MOULDS J M Woops L L org Blood Groups P I Sda and Pr Arlington American Association of Blood Banking 1991 Boral L Henry I B The Type and Screen A Safe Alternative and Supple ment in Selected Surgical Procedures Transfusion Malden Massachusetts v 17 p 163 1977 CARTRON J P ROUGER P Blood Cell Biochemistry Nova York Plenum 1995 V 6 Molecular Basis of Human Blood Group Antigens CHURCHILL W H Kurtz S R Transfusion Medicine Oxford Blackwell 1988 Coomss R A A MOURANT A E RACE R R In Vivo Isosensitisation of Red Cells in Babies with Haemolytic Disease Lancet Londres v 264 p 264 266 Feb 1946 A New Test for the Detection of Weak and Incomplete Rh Agglutinins Br
160. omozigoto produ tor do ant geno i Verificou se que muitas crioaglutininas tinham especificidade para I 87 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias Tendo em vista que I e i n o s o ant genos antit ticos distintos produzidos por genes alelos eles n o s o classificados como um siste ma e sim como uma cole o 3 8 1 Antigenos li Tanto os ant genos I quanto os ant genos i s o encontrados em alta frequ ncia na popula o Ao nascimento os eritr citos do rec m nato s o ricos em i j I praticamente n o detect vel Durante os primeiros 18 meses de vida a quantidade de i decresce lentamente ao passo que I vai aumentando at serem atingidas as propor es nor mais de um adulto Algumas pessoas parecem n o mudar sua situa o com rela o a i de pois do nascimento Esses indiv duos constituem o raro fen tipo i adulto ou fen tipo I negativo Harmening 2006 3 8 2 Anticorpos anti l O anti I um autoanticorpo que pode ser benigno ou patol gico Beck 1991 Issitt 1998 Ele apresenta rea es fortes com c lulas de adultos e rea es fracas com c lulas de cord o A utiliza o de m to dos enzim ticos e albumina na identifica o dos anticorpos podem acentuar a reatividade de anti I De forma habitual uma aglutinina fraca da classe IgM reativa em salina e de ocorr ncia natural que n o detectada em testes de rotina pois geralmente reage apenas a 4 C e em alguns
161. on rios e deve haver treinamento pe ri dico de toda a equipe acerca dos procedimentos de biosseguran a As normas legais s o instrumentos de a o sanit ria que regula mentam as caracter sticas de instala es f sicas e infraestrutura para estabelecimentos de sa de Essas normas em conjunto com as nor mas regulamentadoras do Minist rio do Trabalho e Emprego e com as normas de biosseguran a devem nortear o funcionamento de labo rat rios especializados para que a qualidade e o desempenho humano materializem a efetiva o dos objetivos na evolu o da pesquisa e na melhoria da sa de das popula es Bahia 2001 p 61 Com base nessa complexidade tem tica entendemos que a biossegu ran a deve considerar as v rias dimens es que norteiam a quest o se jam elas referentes a procedimentos boas pr ticas ou infraestrutura instala es f sicas e equipamentos de prote o ou ainda associadas informa o educa o qualifica o das equipes reconhecendo se que o gerenciamento e a organiza o do trabalho tamb m devem ser analisados como poss veis objetos geradores de acidentes doen as e sofrimentos ou como integrantes fundamentais de um programa de biosseguran a nas institui es Quando pensamos em escrever um cap tulo sobre seguran a labo ratorial dentro do segmento da hemoterapia e mais especificamente da imuno hematologia tivemos a certeza que n o poder amos falar ape nas das patologia
162. or es poss veis As intera es ant geno anticorpo como mencionado anteriormen te dependem de alguns fatores como especificidade determinada pela combina o das estruturas reativas do ant geno e do anticorpo reversibilidade determinada pela dissocia o do complexo ant geno anticorpo equil brio determinado pela constante de associa o K do complexo antigeno anticorpo exotermia libera o de calor pelas rea es antigeno anticorpo afinidade for a de atra o entre o ant geno e o anticorpo avidez for a de uni o entre o ant geno e o anticorpo A membrana dos eritr citos formada por prote nas que s o sub divididas por grupos funcionais e estruturais e carboidratos que podem funcionar como ant genos estimulando o sistema imune 21 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto Os anticorpos produzidos se ligam aos componentes da membrana da hem cia reconhecidos como ant genos A intera o antigeno anticorpo observada realizada pelas for as descritas acima As prote nas presentes na membrana eritrocit ria desempenham diversos pap is como os de receptoras do complemento 1 prote na regulat ria receptoras de quimiocina e aquaporinas prote nas que formam canais para o transporte da gua receptoras de ades o de banda 3 prote na que forma canais para anions e de glicoporina A e transportadoras de ureia dentre outros Algumas prote nas da membrana eritroc
163. orma de res duo A classifica o inicial dos tipos de res duos de servi os de sa de foi estabelecida pela RDC n 33 2003 da qual ap s longa discuss o t cnica originou se a RDC n 306 2004 Essa resolu o aplica se a todos os res duos gerados pela rea da sa de inclusive em trabalhos de campo e nos servi os de acupuntura e tatuagem Essa resolu o s n o se aplica aos res duos de fontes ra dioativas seladas que s o da al ada da Comiss o Nacional de Energia Nuclear CNEN importante nesse caso a exist ncia de um plano gestor manejo segrega o acondicionamento identifica o coleta armazenamento transporte tratamento e disposi o final de todos os res duos por parte do estabelecimento gerador esse plano deve ser composto de t cnicas processos e procedimentos que assegurem a minimiza o de riscos ao ambiente e sa de p blica A disposi o dos res duos deve considerar a responsabilidade solid ria entre gerador e poder p blico Classifica o dos diferentes tipos de res duo Grupo A res duos com a presen a de agentes biol gicos poten cialmente infectantes identificados pelo s mbolo da subst ncia in fectante constante da NBR 7500 da ABNT Grupo B res duos contendo subst ncias qu micas res duos qu micos identificados pelo s mbolo de risco associado de acordo com a NBR 7500 da ABNT e com a discrimina o da subst ncia qu mica e frases informando o tipo de ri
164. os contra ant genos destru dos por tratamento enzim tico podem apresentar reatividade nas fases de temperatura ambiente t rmica e de antiglobulina mas n o rea gir o quando se fa a um painel enzim tico Os anticorpos s o exclu dos quando h aus ncia de reatividade do soro do paciente com uma c lula portadora do ant geno correspondente Aten o especial deve ser dada s c lulas heterozigotas pois determina dos anticorpos podem apresentar efeito de dose e n o reagir com as he m cias teste Sempre que poss vel deve ser feita a fenotipagem do paciente a aus ncia no paciente do ant geno correspondente ao anticorpo iden tificado demonstra que os resultados de identifica o est o corretos quando se considera um autocontrole negativo poss vel que seja necess rio testar o soro do paciente contendo determinado anticorpo com um n mero suficiente de amostras tr s no m nimo com o ant geno correspondente e com outras em que o ant geno esteja ausente a fim de se comprovar a especificidade suspeita Deve se considerar que a presen a de m ltiplos aloanticorpos pode ocorrer quando o padr o de reatividade n o se encaixe na reatividade de um nico anticorpo suspeito ou quando ocorrem varia es nas intensidades das rea es que n o podem ser explica das com base na dose homozigose ou heterozigose do ant geno Assim outras t cnicas adicionais ou o encaminhamento da amos tra para um centro de refer ncia p
165. os e servi os que n o possam ser interrompidos c Banheiros vesti rios e airlocks segundo a NR24 Brasil 2008b que disp e sobre as condi es sanit rias e de conforto nos locais de trabalho as instala es sanit rias devem ser separadas por 141 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira sexo e estar submetidas a processo permanente de higieniza o de tal forma que sejam mantidas limpas e desprovidas de quais quer odores durante toda a jornada de trabalho Todos os labora t rios de sa de devem ter vesti rios tamb m separados por sexo e que por uma quest o de funcionalidade sirvam como entrada ao local de servi o permitindo ao trabalhador a coloca o de seu uniforme e em alguns casos a troca de sapatos ou a coloca o de sapatilhas descart veis O n vel de conten o para laborat rios NB 3 exige a intensifica o dos programas de boas pr ticas la boratoriais e de seguran a al m da exist ncia obrigat ria de dispositivos eletr nicos de seguran a para o fechamento de por tas conhecidos como airlocks e do uso igualmente obrigat rio de cabines de seguran a biol gica Os trabalhadores devem usar roupas de prote o espec ficas para a rea e equipamentos de pro te o individual Funda o Oswaldo Cruz s d d Instala es para equipamentos cada laborat rio deve prever os equipamentos necess rios s suas an lises e s atividades de ro tina Dessa
166. ou as liga es de hidrog nio rompendo a liga o ant geno anticorpo Essas duas intera es a intera o eletrost tica entre cadeias laterais com carga e as liga es de hidrog nio possuem caracter sticas espec ficas fortalecendo completamente a intera o Para alguns ant genos as intera es hidrof bicas certamente s o as respons veis pela maior parte da energia de liga o Mol culas de gua que s o captadas na interface do ant geno e do anticorpo podem contri buir para a liga o especialmente entre res duos de amino cidos polares Intera es de van der Waals e intera es hidrof bicas agem sobre dist ncias muito pequenas e servem para unir superf cies de forma tos complementares A intera o entre essas for as depende muito do anticorpo espec fico e do ant geno envolvido Os anticorpos possuem muitos amino cidos arom ticos em seus s tios de liga o com o anti geno esses amino cidos participam principalmente na forma o das for as de van der Waals e nas liga es hidrof bicas mas podem tam b m formar liga es de hidrog nio A complementaridade total da superf cie tem um papel importante nas intera es ant geno anticorpo mas liga es hidrof bicas e inte ra es eletrost ticas espec ficas parecem determinar a especificidade ou a afinidade do anticorpo As liga es ant geno anticorpo consis tem principalmente de for as eletrost ticas e for as polares em todas as prop
167. permite a liga o de Clq s poss vel pelo fato de a imunoglobulina estar ligada ao ant geno por interm dio de sua por o Fab Ap s a liga o de Clq imunoglobulina as outras duas subuni dades do componente Cl Clr e Cls assumem o sitio enzim tico da enzima formada a qual age em dois substratos C4 e C2 Ambos os componentes s o clivados em uma regi o originando dois fragmentos aeb Ap s C4b ligar se de forma covalente s hidroxilas e aminas exis tentes nas membranas dos microrganismos o C2b liga se ao C4b de forma fraca liga o essa dependente do c lcio O produto dessa rea o a mol cula C4b2a enzima respons vel por clivar o componente C3 gerando C3a e C3b Esse ltimo por conter o radical tio ster liga se aos radicais amina e hidroxila da membrana Diferentemente da via alter nativa nessa via a enzima C5 convertase formada pelo C4bC2bC3b A partir do MAC ou seja CSbC6C7C8CY a cascata apresenta a mesma sequ ncia nas duas vias 2 5 Aspectos gerais das rea es de hipersensibilidade As rea es de hipersensibilidade foram descritas a partir da obser va o de que alguns indiv duos ap s terem contato repetido com o mesmo ant geno desencadeavam respostas imunol gicas exacerbadas contrariamente ao que se sabia acerca da mem ria imunol gica ou 59 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva Marcos Antonio P Marques seja de que o individuo ao entrar em
168. plados ao chuveiro ou ter forma de bisnagas de press o que s o recipientes port teis pequenos feitos de material flex vel e que projetam fluxos de gua quando apertados prestando se ao objetivo de livrar os olhos de part culas e contami nantes sem necessidade de instala o hidr ulica no local de trabalho Por serem equipamentos de emerg ncia devem estar preparados para uso imediato a qualquer instante estando sempre presentes em locais de manuseio de produtos qu micos e em situa es de risco de contamina o ou de queimaduras por calor b Cabines de seguran a biol gica CBSs e fluxos laminares As cabines de seguran a biol gica e as capelas de fluxo laminar s o usadas para manipula o de agentes biol gicos produ o de diluentes e imunobiol gicos meios de cultura e diversos materiais que precisam ser processados em ambiente est ril Al m disso algumas capelas de flu xo laminar n o apenas protegem o operador da exposi o de produtos biol gicos como tamb m precisam garantir a seguran a do produto e do ambiente Existem diferentes modelos de cabines mas todos possuem filtros absolutos ou filtros HEPA que apresentam alta efici ncia no m nimo 99 97 de part culas com at 0 3 um coletadas e devem ser substitu dos periodicamente de acordo com a sua satura o Os fluxos chamados de bancada limpa podem ser encontrados em dois modelos que n o s o de c maras de biosseguran a pois ou
169. plexo ligado aos tecidos ocorre a ativa o do sistema complemento pela via cl ssica com consequente lise de toda aquela estrutura 2 5 1 Rea es transfusionais e hipersensibilidade tipo Il As hem cias dos seres humanos apresentam v rias mol culas di ferentes em sua superf cie muitas das quais est o envolvidas na ca racteriza o dos grupos sangu neos como o grupo ABO e o fator Rh dentre outros A presen a de um ou outro ant geno na superf cie das hem cias por exemplo do grupo A leva forma o no organis mo de anticorpos principalmente da classe IgM Esses anticorpos s o gerados como resultado de contatos pr vios com ant genos de microrganismos presentes na flora intestinal que apresentam simila ridade estrutural com os carboidratos dos grupos sangu neos e por tanto ocasionam reatividade imunol gica cruzada que s o os graves problemas decorrentes das transfus es sangu neas incompat veis 60 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia 2 5 2 Anemia hemolitica e hipersensibilidade tipo Il Nas rea es de hipersensibilidade tipo II evidenciamos o direcio namento de anticorpos a ant genos ligados s c lulas ou tecidos do pr prio indiv duo Tais ant genos tornaram se mol culas estranhas ao sistema imune pelo fato de terem sido alteradas de alguma forma por exemplo pela liga o com alguma droga ou ant genos microbianos Caso a rea o imunol gica mencionada ocorra na hem
170. pontos incluindo os quatro M a Instala es prediais materiais utilizados para piso teto e parede devem ser f ceis de limpar n o podem ter frestas e devem ser resistentes ao uso de desinfetantes Os cantos do teto e do ch o devem ser arredondados para evitar o ac mulo de sujeira e fa cilitar a limpeza e o uso de desinfetantes A ilumina o deve ser feita por um n mero suficiente de lumin rias de prefer ncia lu min rias seladas para evitar o ac mulo de sujeira a fim de que o ambiente fique bem claro Em rela o a esse ponto impor tante lembrar que o contr rio tamb m pode prejudicar o trabalho isto o excesso de luz pode diminuir a qualidade da vis o pois pode causar ofuscamento principalmente quando a luz se refle te em superf cies brilhantes ocasionando fadiga visual A troca das l mpadas deve ser feita pelo forro e n o pela sala evitando se assim aumento das fontes de contamina o As portas devem ser de material que facilite a limpeza sem frestas com veda o e com abertura para fora As janelas fixas n o podem ser abertas e n o devem ser utilizadas cortinas b Eletricidade o sistema deve prever toda carga el trica deman dada pelos equipamentos utilizados no laborat rio O uso de benjamins deve ser evitado Al m disso alguns laborat rios precisam observar a necessidade de instala o de geradores de emerg ncia a fim de suprir a falta de energia el trica para equi pament
171. pos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira A biosseguran a em laborat rios de sa de um tema complexo e abrangente que inclui conceitos relacionados a biosseguran a bio tica conten o e infraestrutura laboratorial boas pr ticas laborato riais etc Borba et al 2009 No Brasil a normatiza o de seguran a em laborat rios de sa de segue par metros internacionais entre outros da Organiza o Mundial de Sa de OMS dos Centros de Controle e Preven o de Doen as CDC do ingl s Centers for Disease Control and Preven tion e dos Institutos Nacionais de Sa de NIH do ingl s National Institutes of Health os dois ltimos rg os do governo americano e normas brasileiras que podem ser gerais como as definidas pelo Minist rio da Sa de por meio da Ag ncia Nacional de Vigil ncia Sanit ria Anvisa eas normas regulamentadoras NR do Minist rio do Trabalho e Emprego MTE Al m desses par metros existem normas espec ficas geralmente fixadas pela pr pria institui o de sa de com o objetivo de atender as recomenda es nacionais e in ternacionais e as peculiaridades de cada setor Tanto a OMS quanto o Minist rio da Sa de publicam periodica mente manuais sobre seguran a em laborat rios de sa de impor tante que os laborat rios conhe am essas normas e as mantenham atualizadas Segundo a Anvisa as boas pr ticas de laborat rio BPL s o princ pios aplic veis a laborat rios de servi
172. presenta au mento de agrega o eritrocit ria portanto potencial zeta diminu do Evid ncias quantitativas e qualitativas mostram altera o de prote nas da membrana dos eritr citos em pacientes com diabe tes A diabetes mellitus tipo 2 uma s ndrome respons vel pelo desenvolvimento de aterosclerose e doen as card acas Evid ncias mostram que a diabetes uma desordem de estresse oxidativo que produz esp cies reativas de oxig nio ROS do ingl s reactive oxy gen species contribuindo para o in cio e a progress o de ateros clerose e outras complica es A hiperglicemia observada nesses pacientes induz um estresse oxidativo que provoca altera o nas propriedades din micas e eletrocin ticas das hem cias O poten cial zeta pode ser utilizado para o diagn stico de doen as hemol ticas e para estudos de permeabilidade da membrana e de altera es que levam destrui o de eritr citos Por causa da altera o no com portamento din mico e eletrocin tico da bicamada lip dica dos 27 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto eritr citos levando altera o no potencial zeta e que resulta da hiperglicemia dos pacientes com diabetes o potencial zeta pode ser usado como marcador para o diagn stico de doen a cardiovascular em pacientes diab ticos Pacientes que s o homozigotos para hemoglobina CC ou seja por tadores de hemoglobinopatia C causada pela substitui o de cido glut
173. prote nas integrais temos as glicoforinas fig 2 OS O Figura 2 Tipos de prote nas encontradas na membrana plasm tica dos eritr citos em azul as prote nas perif ricas ligadas membrana plasm tica dos eritr citos apenas em um dos lados da membrana em verde as prote nas integrais que atravessam toda a bicamada lip dica e podem ser encontradas nos dois lados da membrana De acordo com a sua fun o as prote nas tamb m podem ser dividi das em tr s grupos prote nas estruturais integrais de membrana ban 13 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto da 3 glicoforina prote nas do citoesqueleto banda 4 1 espectrina actina prote nas de ancoragem anquirina Banda 3 uma prote na majorit ria integral de membrana presente na membrana celular dos eritr citos composta de 911 amino cidos e apre senta de 12 a 14 dom nios transmembranares A regi o da prote na vol tada para o citosol chamada dom nio citoplasm tico est associada a diversas prote nas Esse dom nio respons vel pela ancoragem de v rias prote nas como a anquirina a prote na 4 2 e prote nas do citoesqueleto A banda 3 existe na forma de d mero duas formas id nticas das mesmas prote nas unidas ou na forma de tetr mero quatro ban das 3 unidas formando uma nica prote na As glicoforinas A s o prote nas integrais de membrana que con t m um res duo de cido si lico
174. r que a c lula interaja com o ambiente extracelular 12 Bioqu mica eritrocit ria Os amino cidos s o mol culas que t m na sua estrutura um gru pamento carbox lico um grupamento amino e um grupamento R diferenciado substituinte todos ligados ao carbono a A substitui o do grupamento R faz que existam vinte tipos de amino cidos As prote nas s o macromol culas biol gicas presentes em todas as c lulas Elas possuem grande variedade de fun es biol gicas Todas as prote nas s o formadas a partir do mesmo conjunto de vinte amino cidos ligados covalentemente e linearmente sendo a linea ridade da liga o dos amino cidos caracter stica de cada prote na A maior parte das prote nas da membrana plasm tica do eritr cito pode ser dividida em prote nas perif ricas e prote nas integrais As pro te nas perif ricas s o prote nas presentes no lado citos lico da bicamada lip dica que n o atravessam a membrana plasm tica do eritr cito Como exemplo de prote nas perif ricas podemos citar as espectrinas As pro te nas integrais est o inteiramente embebidas na bicamada lip dica Elas atravessam a membrana plasm tica e s o encontradas tanto na por o extracelular quanto na por o intracelular camada citos lica As pro te nas integrais podem atravessar a membrana uma nica vez ou v rias vezes Chamamos dom nio transmembranar cada uma das passagens da prote na atrav s da membrana Como exemplo de
175. ra a forma o de t cnicos de laborat rio Dra Margarida de Oliveira Pinho Respons vel pelo Laborat rio de Imuno hematologia do Servi o de Hemoterapia do Instituto Nacional do C ncer Inca Apresentacao Este livro fruto do trabalho coletivo de profissionais de diferentes unidades da Fiocruz com um mesmo objetivo o do ensino de quali dade para t cnicos de laborat rio Professores da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio EPSJV da Escola Nacional de Sa de P bli ca Sergio Arouca Ensp do Instituto Oswaldo Cruz IOC do Institu to Fernandes Figueira IFF e do Instituto de Pesquisa Cl nica Evandro Chagas Ipec se uniram para elaborar o livro Conceitos b sicos e apli cados em imuno hematologia que pretende atender a demanda nacio nal dos cursos t cnicos na rea Al m disso a presen a no Curso de Imuno Hematologia da EPSJV de estudantes provenientes de pa ses africanos de l ngua portuguesa fortalece a necessidade de uma pro du o did tica para esses alunos refor ando a coopera o t cnica in ternacional firmada entre a Fiocruz e esses pa ses A rea de imuno hematologia complexa Abarca a origem e as fun es das c lulas sangu neas e a intera o molecular entre ant ge nos e anticorpos que s o a base para o entendimento de quest es fun damentais na pr tica do servi o de sa de e para a decis o de trans fundir considerando a necessidade do paciente o risco e o benef cio Nes
176. ra a imuniza o Garcia e Facchini 2008 O laborat rio por si s j possui caracter sticas cr ticas tais como o manejo de materiais perfurocortantes de vidrarias diversas e de pro dutos qu micos prejudiciais sa de Somando se a isso ainda temos a rotina e muitas vezes uma carga excessiva de trabalho que acabam gerando um ambiente prop cio a acidentes Esses riscos s o ampliados quando as depend ncias do laborat rio est o no interior de um hos pital pois pacientes com doen as infectoparasit rias funcionam como constantes fontes de contamina o de pessoas materiais e ambientes Al m disso como j foi dito os trabalhadores dessa rea independen temente do layout do laborat rio lidam com materiais potencialmente infectados e a exposi o a poss veis agentes etiol gicos pode ocasionar s rios agravos Os profissionais da rea de sa de que trabalham em bancos de sangue e laborat rios de hematologia como j comentamos est o tamb m expostos direta e ou indiretamente a riscos qu micos di versos Em muitos casos cilindros de g s comprimido assim como botij es de nitrog nio l quido e de reagentes qu micos utilizados na rotina de diferentes an lises est o localizados de forma inadequada na rea comum dos laborat rios de biodiagn stico Dessa forma o conhecimento dos riscos inerentes aos produtos qu micos funda mental para o profissional de sa de de maneira geral 2 1 Riscos qu mi
177. rapia do Curso de Especializa o em Biologia Parasit ria e Biotecnologia do Institu to Oswaldo Cruz Fiocruz e coordenador e preceptor do Curso de Es pecializa o em Imuno Hematologia da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Fiocruz Paulo Roberto Soares Stephens bi logo mestre em Microbiologia e Imunologia pela Universidade Federal do Rio de Janeiro tecnologista s nior em Sa de P blica do Laborat rio de Imunologia Cl nica do Ins 152 Autores tituto Oswaldo Cruz Fiocruz atuando na area de HIV coordenador da rea de Virologia dos Cursos de Especializa o e T cnico em Bio logia Parasit ria e Biotecnologia do Instituto Oswaldo Cruz Fiocruz e professor dos cursos t cnicos do Instituto Oswaldo Cruz Fiocruz e da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Fiocruz Valmir Laurentino Silva bi logo doutor em Ci ncias pela Uni versidade Federal Rural do Rio de Janeiro professor das disciplinas de Imunologia B sica e Imunologia M dica da Faculdade de Medicina de Campos Funda o Benedito Pereira Nunes professor convidado da Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Fiocruz e tecnolo gista em Sa de P blica do Departamento de Ci ncias Biol gicas da Escola Nacional de Sa de P blica Sergio Arouca Fiocruz Valter Viana de Andrade Neto farmac utico bioqu mico douto rando do Programa de P s gradua o em Biologia Celular e Molecu lar do Instituto Oswaldo Cruz Fiocruz mestre em Biologia C
178. rasileira de Ocupa es CBO Bras lia Minist rio do Trabalho e Emprego 2002 SECRETARIA DE INSPE O DO TRABALHO SIT NR6 Por taria SIT n 25 de 15 de outubro de 2001 Bras lia Minist rio do Trabalho e Emprego 2001d 3M DO BRASIL Respiradores e m scaras cir rgicas uma compara o S o Paulo 3M do Brasil 2009 Dispon vel em http multimedia 3m com mws mediawebserver mwsId SSSSSu7zK1fslxtUn8mZnY 9ev7gel7zHvTSevTS eSSSSSS amp fn RespiradoresxMascaras pdf Acesso em 20 out 2010 147 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira CARVALHO P R Boas pr ticas qu micas em biosseguran a Rio de Janeiro Interci ncia 1999 CHAVES C D Controle de qualidade no laborat rio de an lises cl nicas Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial v 46 n 5 p 352 2010 CoEeLHO H Manual de gerenciamento de res duos s lidos de servi os de sa de Rio de Janeiro Funda o Oswaldo Cruz 2001 Dr VITTA P B Classifica o e rotulagem de produtos qu micos o sistema GHS S o Paulo Instituto de Qu mica Universidade de S o Paulo 2005 Dias J C P Epidemiologia In BRENER Z ANDRADE Z A BARRAL NETO M org Trypanosoma cruzi e doen a de Chagas Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2000 p 48 74 Notas sobre o Trypanosoma cruzi e suas caracter sticas bioeco l gicas como agente de enfermidades transmitidas por alimentos Revista
179. rrer no f gado e no ba o A forma o dessas c lulas um processo cont nuo por causa da necessidade di ria de reposi o das hem cias que compensa a destrui o fisiol gica e n o fisiol gica delas A regula o da eritropoese se d pelo horm nio eritropoetina produzido principalmente pelas c lulas renais peritu bulares A s ntese desse horm nio determinada pela quantidade de oxig nio nos tecidos e tamb m pode ser estimulada por outros horm nios como o horm nio estimulante da tireoide TSH do ingl s thyroid stimulating hormone Em regi es onde existe baixa tens o de oxig nio como em altitudes elevadas ocorre um est mulo para que a produ o de hem cias seja aumentada que ocasiona um maior transporte de oxi g nio para os tecidos Na figura 1 poss vel observar a rela o entre a produ o de hem cias o transporte de O ea produ o de eritropoetina N vel de oxig nio Est mulo hip xia devido diminui o da do sangue normal contagem de gl bulos vermelhos diminui o da disponibilidade de O para o sangue ou aumento das demandas de tecido para O Aumento da capacidade de transporte de O no sangue Reduz os niveis de oxig nio no sangue Eritropoetina estimula a medula ssea Rins e em menor e quantidade o f gado liberam eritropoetina Figura 1 Correla o entre a produ o de hem cias o transporte de O e a produ o de eritropoetina Fonre Reprodu
180. s Conceitos b sicos e aplicados em imuno hematologia a m gi h IN e e Beatriz Siqueira a Coelt o Ribeiro i dre es Vizzon a A POUTE o E IM VENA FUNDACAO OSWALDO CRUZ Presidente Paulo Gadelha ESCOLA POLITECNICA DE SAUDE JOAQUIM VENANCIO Diretor Paulo C sar de Castro Ribeiro Vice diretora de Ensino e Informa o P ulea Zaquini Monteiro Lima Vice diretora de Pesquisa e Desenvolvimento Tecnol gico Marcela Alejandra Pronko Vice diretor de Gest o e Desenvolvimento Institucional Jos Orbilio de Souza Abreu Conceitos basicos e aplicados em imuno hematologia Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Flavia Coelho Ribeiro Alexandre Gomes Vizzoni organiza o Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Rio de Janeiro2013 2013 Copyright 2013 dos organizadores Todos os direitos desta edicdo reservados a Escola Polit cnica da Sa de Joaquim Ven ncio Funda o Oswaldo Cruz Coordena o editorial Marcelo Paix o Edi o de texto Lisa Stuart Capa projeto gr fico e diagrama o Maycon Gomes Cataloga o na fonte Escola Polit cnica de Sa de Joaquim Ven ncio Biblioteca Em lia Bustamante 048c Oliveira Maria Beatriz Siqueira Campos de org Conceitos b sicos e aplicados em imuno hematologia Organiza o de Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Fl via Coelho Ribeiro e Alexandre Gomes Vizzoni Rio de Janeiro EPSJV 2013 156 p il 1 Imunologia
181. s devem seguir os equipamentos de seguran a como EPIs e EPCs de que devem dispor e o projeto arquitet nico do laborat rio 118 Biosseguran a em laborat rios de sa de preciso n o confundir o n vel de seguran a de um laborat rio com o risco biol gico de qualquer microrganismo nele manipulado Mesmo que em geral se trabalhe com organismos altamente perigo sos em laborat rios de alto n vel de biosseguran a n o h qualquer problema de se trabalhar com microrganismos de risco 1 nesses am bientes O contr rio n o verdadeiro dado que microrganismos de risco 3 ou 4 s devem ser manipulados com conten o Os laborat rios podem ser divididos em laborat rios b sicos ou de conten o e subdivididos de acordo com os n veis de biosseguran a em quatro n veis NB 1 a NB 4 Podemos observar as mesmas catego rias definidas com outras siglas como P prote o ou BSL biosafety level dependendo do pa s em que est localizado o centro de pes quisa e da norma seguida por ele Esses n veis crescentes em raz o do n vel de prote o e comple xidade permitem avaliar em que ambiente mais adequada a ma nipula o deste ou daquele material de acordo com o risco e ou o microrganismo presente na amostra Quando n o se conhece o po tencial patog nico do material a ser manipulado deve se proceder an lise criteriosa de todas as condi es experimentais a fim de se determinar o ambiente adequado Funda o
182. s eritr citos Essa remo o do cido si lico permite que os eritr ci tos possam ser aglutinados por algumas subst ncias como o dextran um polissacar deo natural Em eritr citos n o tratados com a enzima neuraminidase o dextran promove o aumento do potencial zeta pro vavelmente por causa da diminui o da for a i nica provocando a desagrega o desses eritr citos Esse resultado demonstra a import ncia do cido si lico e do potencial zeta para a manuten o da homeostasia das c lulas sangu neas e como as altera es nos eritr citos podem afetar a aglutina o 28 Bioqu mica eritrocit ria O potencial zeta um fen meno fundamental com importante implica o na estabilidade dos coloides existentes na natureza Quan to maior o valor absoluto de potencial zeta maior a probabilidades de que a suspens o seja est vel pois as part culas carregadas se repelem e essa for a supera a tend ncia natural de agrega o O potencial zeta est presente no sangue mantendo o equil brio do meio e controlando a agrega o e a coagula o sangu neas Refer ncias bibliogr ficas ACKERMAN G A Surface Differentiation of Developing Hematopoietic Cells in Normal Human Bone Marrow Anatomical Record v 181 n 2 p 520 1975 Surface Differentiation of Hematopoietic Cells Demonstrated Ultrastructurally with Cationized Ferritin Cell and Tissue Research v 159 n 1 p 23 37 1975 ADAK S CHOWDHURY S
183. s est vel podendo ocorrer a coagula o quanto maior a diferen a de potencial mais est vel o sistema O sangue um exemplo de coloide biol gico sujeito ao potencial zeta Se o potencial zeta estiver baixo pode haver agrega o eritro cit ria altera o no fluxo nos vasos sangu neos e at trombose Os sistemas coloidais como o sangue s o mantidos est veis por meio de uma pequena carga el trica que conserva as part culas afastadas umas das outras Essa carga el trica gera uma diferen a de potencial na superf cie das part culas coloidais Por terem grande quantidade de cido N acetilneuram nico e outros grupos carregados negativamente ancorados na superf cie de outras glicoproteinas de membrana os eritr citos possuem carga ne gativa elevada ou seja um potencial zeta elevado O potencial zeta pode ser determinado experimentalmente e como reflete a carga efetiva nas part culas correlaciona se com a repuls o ele trost tica entre as cargas e com a estabilidade da suspens o Determi nando se o potencial zeta poss vel estimar a carga de superf cie de part culas como as hem cias Algumas t cnicas utilizadas atualmen 25 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter Viana de Andrade Neto te para medir o potencial zeta s o eletroforese eletro osmose poten cial de esgotamento e potencial de sedimenta o A eletroforese a t cnica mais utilizada para medir o potencial zeta Ela consiste da medi
184. s ocupacionais mas principalmente dos acidentes de trabalho associados a esse segmento e suas consequ ncias que muitas 1 Em rela o s normas regulamentadores que podem estar relacionadas com o tema da biosse guran a destacamos NRI1 Informa o sobre riscos e cumprimento de recomenda es NRS comiss o interna de preven o de acidentes Cipa NR6 Equipamentos de prote o individual NR7 Programa de Controle M dico e Sa de Ocupacional PCMSO NR8 Edifica es NR9 Programa de Preven o de Riscos Ambientais PPRA NRIO Instala es e servi os em ele tricidade NR15 Atividades e opera es insalubres NR16 Atividades e opera es perigosas NRI7 Ergonomia NR19 Explosivos NR20 L quidos combust veis e inflam veis NR 23 Pro te o contra inc ndios NR24 Condi es sanit rias e de conforto nos locais de trabalho NR 25 Res duos industriais NR26 Sinaliza o de seguran a e NR32 Seguran a e sa de no trabalho em estabelecimentos de assist ncia sa de 101 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira vezes podem ser graves A preven o um item de absoluta import n cia ao se trabalhar com essas metodologias e com qualquer material de origem humana principalmente sangue e hemoderivados Podemos conceituar a seguran a do trabalho de modo geral como um conjunto de medidas adotadas visando prevenir minimizar e ou controlar acidentes de trabalho e doen as
185. sa perspectiva o livro introduz aos t cnicos de laborat rio por meio de uma linguagem clara objetiva e acess vel conte dos te ricos para a compreens o das bases da imuno hematologia b sica e aplicada Os cap tulos 1 e 2 resgatam conceitos b sicos de bioqu mica imu nologia e hematologia tais como bioss ntese dos grupos sangu neos caracter sticas das c lulas sangu neas e bases dos testes laboratoriais em imuno hematologia eritrocit ria O cap tulo 3 d continuidade an lise das aplica es pr ticas dos principais ant genos de grupos sangu neos eritrocit rios sistemas ABO Rh e outros importan tes na hemoterapia dos princ pios e fundamentos t cnicos da rotina imuno hematol gica e bases para a sua aplica o aos processos imuno 9 hematol gicos O cap tulo 4 aborda a biosseguran a apresentando um panorama geral das normas internacionais publicadas periodicamente pela Organiza o Mundial da Sa de OMS e das normas nacionais recomendadas pelo Minist rio da Sa de para profissionais da rea da sa de enfocando principalmente agentes e riscos a que est o expostos esses trabalhadores Este livro pretende preencher uma lacuna na rea da produ o de li vros t cnicos ao atender a demanda do t cnico de laborat rio especia lista na rea de imuno hematologia por um material direcionado para o seu trabalho mas com conte do abrangente e com bastante funda menta o te rica Pela realiza
186. sas bact rias s o consideradas muito perigosas para pacientes com sistema imunol gico debilitado Al m disso seu cont gio ocorre de forma direta podendo ser transmitidas por um simples aperto de m o Com base nisso a lavagem cuidadosa das m os com detergente neutro e a higieniza o com desinfetante devem ser a es obrigat rias e rotineiras no ambiente laboratorial Profissionais de sa de que executam coletas sangu neas em quar tos e enfermarias de hospitais tamb m devem seguir rigorosamen te as normas de biosseguran a para evitar o agravamento desse quadro e sua dissemina o Um trabalho publicado na revista Nature Jones et al 2008 anali sou 335 doen as emergentes no per odo 1940 2004 O estudo reuniu pesquisadores da Sociedade Zool gica de Londres da Escola de Eco logia da Universidade da Georgia do Centro para o Recolhimento de Informa o Internacional em Ci ncias da Terra Ciesin e do Cons r cio para uma Medicina Ambiental do Wildlife Trust e serviu princi palmente para elaborar mapas que identificaram os pontos quentes hotspots do planeta aquelas localidades onde futuras doen as infec ciosas emergentes podem surgir A cartografia das zonas de risco significa um avan o na preven o de patologias importantes uma vez que ser poss vel prever de forma cien t fica onde as doen as surgir o De acordo com esse trabalho a princi pal amea a para a sa de p blica vem de zonas onde a popu
187. sco 121 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Grupo C res duos com radionucl deos rejeitos radioativos nor ma CNEN NE 6 02 Grupo D res duos comuns Grupo E materiais perfurocortantes com presen a de agentes biol gicos devem ser acrescidos da inscri o PERFUROCOR TANTE Classifica o dos res duos s lidos Grupo A risco potencial sa de p blica e ao meio ambiente de corrente de agentes biol gicos e sangue hemoderivados bolsas de sangue etc e animais de experimenta o carca as e v sceras e materiais contactantes cama e forra es e excre es secre es e l quidos org nicos quando coletados e meios de cultura e vacinas e material descart vel que tenha tido contato com mat ria or g nica como esparadrapo gaze gesso luvas etc e membros humanos produtos de fecunda o e pe as anat micas e res duos de reas de isolamento fraldas pap is sanit rios absorventes higi nicos etc e filtros de gases aspirados e de aparelhos de ar condicionado de reas de isolamento e res duos de laborat rios de an lises cl nicas ou ambulat rios e lodo de tratamento de esgoto de unidades de sa de e res duos do grupo D ver abaixo contaminados por ma terial biol gico 122 Biosseguran a em laborat rios de sa de Grupo B risco potencial sa de p blica e ao meio ambiente de corrente das caracter st
188. se II tamb m sao expressas na mem brana celular mas na superficie de c lulas apresentadoras de antigenos profissionais Essas c lulas incluem as c lulas dendriticas os macr fa gos e os linf citos B A mol cula de classe II formada por uma cadeia a e uma p A cadeia a tem 32 34 kDa a cadeia B tem 29 32 kDa As duas cadeias do MHC de classe II s o codificadas dentro da regi o gen mica do MHC e ambas s o polim rficas ou seja s o vari veis As cadeias a e b na por o extracelular possuem dom nios al e a2 e Bl e B2 a por o vari vel das duas cadeias s o os segmentos al e 61 Os dominios al e B1 interagem para formar a fenda de liga o ao pept deo que estrutural mente bastante similar mol cula do MHC de classe I Nessa fenda ou bolsa encaixa se o pept deo a ser apresentado c lula T Assim como seria de se esperar essa tamb m a regi o da mol cula do MHC de classe II que apresenta maior variabilidade Na mol cula de classe II as extremidades da fenda de liga o do pept deo s o abertas isso per mite a liga o de pept deos com 10 a 30 amino cidos mas pode ocorrer liga o de pept deos maiores o que n o acontece com a mol cula de classe I que tem as extremidades fechadas 56 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia 2 3 2 Complica es hemotransfusionais relacionadas ao HLA V rias complica es decorrentes das transfus es de produtos he moter picos est o associ
189. sempre atualizados uma vez que novas descobertas s o feitas a cada dia modificando paradigmas historicamente conhecidos Um exemplo desse fato a transmiss o do Trypanosoma cruzi por via oral Segundo Dias 2006 em alimentos como o leite ou caldo de cana temperatura ambiente o parasita pode manter se vi vel por 24 horas ou mais Em acidentes de laborat rio a conta mina o oral foi comprovada em t cnicos que se infectaram pela ingest o de formas de cultura ou de sangue contaminado Dias 2000 Assim confirma se que os fluidos biol gicos podem fun cionar como ve culo de contamina o por diversas vias de pene tra o a rea cut nea ocular oral apresentando a capacidade de conter organismos de diferentes classes de risco como protozo rios v rus e bact rias Alguns v rus s o respons veis por graves doen as tanto pelo ele vado ndice de mortalidade quanto por n o existirem tratamentos eficazes at o momento Isso representa um alto risco para os traba lhadores da rea da sa de Estudos comprovam que o virus Ebola que causa quadros gravissi mos nos seres humanos parasita animais selvagens no continente afri cano com os quais mant m rela o pouco agressiva Ao explorar as florestas o ser humano destr i o ambiente natural do v rus causando um desequil brio ecol gico ao mesmo tempo em que proporciona a ele a possibilidade de adapta o a novos reservat rios podendo gerar novas pato
190. tast ticos em pacientes sob investiga o Na imunoterapia o Ac Mo espec fico para determinado ant geno tumoral de superf cie acoplado a um quimioter pico ou radioter pico pode ser potente agente terap utico 2 2 4 Anticorpos antieritrocit rios a Aloanticorpos A presen a de anticorpos antieritrocit rios secund rios gravi dez transfus o sangu nea ou transplante de rg os pode comprome 50 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia ter transfus es subsequentes e em algumas situa es at uma futura gravidez Esses anticorpos s o chamados de aloanticorpos Aloanticorpo o nome dado a qualquer anticorpo surgido em um membro de uma esp cie contra um ant geno alot pico de outro mem bro da mesma esp cie Os aloanticorpos correspondentes aos ant genos de grupo sangu neo podem ser divididos em duas categorias naturais e imunes Os anticorpos chamados de naturais existem em baixos t tulos no plasma de uma pessoa normal e s o o resultado de estimula o espont nea das bact rias que comp em a microbiota in testinal e que expressam mol culas com elevada homologia aos an t genos de grupo sangu neo Quando a crian a nasce suas hem cias cont m as mol culas grupo espec ficas s quais seu sistema imune tolerante por lhe serem pr prias No entanto o soro do rec m nascido n o cont m as aglutininas de s ntese pr pria para o sistema ABO A partir do 3 ao 6 m s de idade ger
191. tendo sido implicados em re a o hemol tica grave causada por transfus o Tamb m causam DHRN Unidades de sangue selecionadas para transfus o devem ser ne gativas para o ant geno correspondente a esses anticorpos e com pat veis nas provas cruzadas Tendo em vista que apenas 11 dos brancos e 3 dos negros s o s pode ser dif cil obter sangue para um paciente com anti s 3 2 5 Anti U Anti U um anticorpo raro encontrado na ra a negra Cerca de 1 dos negros americanos e de 1 a 35 dos negros africanos n o apresenta o ant geno U o que torna muito dif cil encontrar sangue compat vel Pode determinar rea o transfusional e DHRN Habi tualmente os pacientes apresentam fen tipo S s U 78 Imuno hematologia eritrocit ria 3 3 Sistema Lutheran Esse sistema foi descoberto em 1945 por causa da presen a de anti Lu um ant geno de baixa frequ ncia no soro de um paciente ap s transfus o Seu par antit tico um ant geno de alta frequ ncia tamb m foi descoberto no mesmo ano tendo recebido a denomina o de anti Lu O sistema de grupo sangu neo parecia completo at o in cio da d cada de 1960 quando Crawford et al 1961 descreveram o primeiro fen tipo Lu a b 3 3 1 Antigenos Lu e Lu Antigenos Lu e Lu s o ant genos produzidos por genes codomi nantes al licos N o foi detectada a presen a de ant genos Lutheran em plaquetas linf citos e mon citos mas h presen a no c rebr
192. tido pelo Minist rio do Trabalho e com registro do Minist rio da Sa de N o considerado pela Anvisa um equipamento de prote o respirat ria 134 Biosseguran a em laborat rios de sa de Descarte Imediato ap s Imediato ap s atendimento atendimento sendo sendo importante a lavagem das importante a lavagem das m os ap s o descarte m os ap s o descarte Recomenda o Normalmente Normalmente recomendado de uso recomendado por por profissionais de seguran a enfermeiros m dicos do trabalho que det m do setor de controle de conhecimento de programas de infec o prote o respirat ria e ou por enfermeiras do setor de controle de infec o Diferen as Composta por um filtro tecnicamente denominada de uso comum chamado de n o respirador E formada por tecido Pode ter uma ou filtros especiais com poder de mais camadas filtrar part culas extremamente pequenas como o caso de v rus bact rias e outros agentes biol gicos Prote o mais adequada por m exige o uso correto especialmente quanto ao ajuste no rosto Prote o mais limitada porque a veda o no rosto prec ria nesse tipo de m scara Tamb m s o considerados respiradores outros equipamentos com outros n veis de prote o como respiradores com filtros qu micos respiradores motorizados equipamentos de ar mandado
193. tina etc 2 3 Cuidados b sicos pessoais e de higiene no mbito do laborat rio Cabelos devem ser mantidos permanentemente presos na sua totalidade em reas de trabalho com riscos qu mico e biol gico o uso do gorro obrigat rio 139 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira Sapatos devem ser exclusivamente fechados n o deve ser per mitido o uso de sand lias dentro de reas hospitalares e labora toriais Em alguns casos necess rio tamb m a utiliza o de prop sapatilha descart vel ou sapato de uso exclusivo Joias e bijuterias deve se usar o m nimo poss vel n o usar an is com reentr ncias ou incrusta es nem pulseiras e colares Maquiagem deve ser proibida pois a rea laboratorial e hospi talar grande fonte de part culas que na sua maior parte s o aderentes contendo glicerina mica e tit nio entre outras subs t ncias Entre os produtos cosm ticos destacamos o batom o laqu e o r mel como fontes de contaminantes biol gicos Perfumes devem ser evitados porque s o poluentes ambientais causam intoler ncia em pacientes que est o com a sa de debilitada ou que fazem uso de medicamentos como aqueles em tratamen to de quimioterapia podem causar enjoo nas mulheres gr vidas agravar o estado de sa de de muitos pacientes al rgicos impreg nar ambientes fechados que contenham filtros e afetar sistemas de refrigera o Unhas devem ser apar
194. to branca a identifica o de res duos do grupo D destinados reciclagem ou reutiliza o deve ser feita nos recipientes e nos abrigos de guarda de recipientes usando se o c digo de cores e suas correspondentes nomea es baseado na resolu o do Conse lho Nacional do Meio Ambiente Conama n 275 2001 Brasil 2001c e s mbolos do tipo de material recicl vel I azul pap is II amarelo metais III verde vidros IV vermelho pl sticos V marrom res duos org nicos VI cinza demais res duos do grupo D 125 Maria Beatriz Siqueira Campos de Oliveira Joseli Maria da Rocha Nogueira No caso das cores das lixeiras utilizadas para segregar o material a ser reciclado segue se a mesma l gica de cores e numera o apenas no item VI lixeiras que cont m refugos que devem ser enviados ao aterro sanit rio a cor cinza substitu da por preto Tipo de E oa rasiduo Descri o Acondicionamento Grupo Res duos que necessitam Lixeira com tampa e pedal ae a eae Identificar na frente com g ao s mbolo de risco biol gico T ien a Tampa deve trazer etiqueta p ioe com descri o dos res duos imunohematol gicos Stom entos d Saco branco leitoso com g s mbolo de risco biol gico hemocomponentes utilizados para provas de Recolhimento quando atingir compatibilidade 2 3 de sua capacidade ou ao menos uma vez por dia Soroteca de pacientes e plasmateca de doadores Gr
195. tos promovem uma exposi o constante de todos os indiv duos a essas estruturas semelhantes aos a cares A e B presentes nas hem cias A identifica o dos fen tipos ABO quadro 2 est relacionada presen a ou aus ncia dos ant genos A e ou B na membrana das he m cias prova direta e detec o ou aus ncia de anticorpos contra os ant genos eritrocit rios que n o est o presentes na superf cie das hem cias prova reversa 67 Alexandre Gomes Vizzoni Paulo Marcelo T Cotias Quadro 2 Principais fen tipos ABO Anti B A A A A A O De ma Nenhum e eventual Anti A A2ZA AO A B Diferentes express es dos ant genos A ou B varia es quantitati vas podem ser encontradas na fenotipagem direta ABO Essas diferen as podem revelar discrep ncias entre a prova direta e a prova reversa Por exemplo a prova direta indicando o grupo sangu neo A al m da presen a de anticorpos no soro e ou plasma do indiv duo a ser testado que aglutinam as hem cias fenotipadas da tipagem reversa do grupo A e B Embora sejam formados pelo mesmo a car os subgrupos do gru po A apresentam diferen as quantitativas e qualitativas Sabe se que o gene A difere do gene A por uma dele o de base na regi o C terminal al m de apresentar uma muta o que determina uma substitui o de amino cidos prolina para leucina na glicosiltransferase resultante O fen tipo A comu
196. tra a B2 microglobulina de 12 kDa que se encontra fracamente ligada membrana Os ge nes que codificam a cadeia a vari vel est o localizados dentro da 55 Paulo Roberto S Stephens Fl via C Ribeiro Valmir L da Silva e Marcos Antonio P Marques regi o gen mica do MHC enquanto os genes que codificam a p2 microglobulina invari vel est o localizados fora da regi o do MHC no cromossomo 15 humano A cadeia a formada por tr s segmen tos al a2 e a3 A regi o em que o pept deo se liga corresponde a regi o amino terminal e composta pelos segmentos al e a2 que formam uma fenda ou bolsa onde ele se encaixa O tamanho dessa fenda permite ligar pept deos de 8 a 11 amino cidos e corresponde regi o do MHC de classe I que interage com o TCR do linf cito T Por essa raz o os ant genos proteicos precisam ser processados a fim de gerar pept deos suficientemente pequenos para se ligarem mol cula do MHC A regi o invari vel que corresponde ao segmento a3 se liga ao correceptor CD8 do linf cito T Essa liga o confere a especificidade da mol cula de classe I com a c lula T CD8 O dominio a3 tamb m se liga de forma n o covalente mol cula 2 microglobulina sendo esse com plexo estabilizado pelo pept deo processado que se liga aos dom nios al e a2 A mol cula de MHC de classe I expressa na superf cie das c lulas somente nessa forma est vel b MHC de classe II As mol culas do MHC de clas
197. uada mente os dispositivos de prote o a fim de us los apenas para a finalidade a que se destinam ele deve responsabilizar se por sua guarda e conserva o comunicar chefia imediata qual quer altera o que os torne impr prios para o uso solicitando a sua substitui o e compreender a import ncia da obrigatorie dade de seu uso Universidade Federal de Alfenas s d Cronograma de prote o contra insetos e roedores exist ncia de prote o contra insetos e roedores e um cronograma de dedetiza o e desratiza o peri dico observando se os efeitos dessas me didas e as poss veis incompatibilidades com os produtos qu micos utilizados Brasil 2007b Controle de qualidade e garantia da qualidade s o dois setores distintos O controle de qualidade de um laborat rio de imuno hematologia deve garantir que os resultados produzidos refli tam de forma consistente e fidedigna os ensaios realizados dentro das normas t cnicas prescritas assegurando que n o representem o resultado de alguma interfer ncia no processo J o setor da garantia da qualidade determina os procedimen tos e metas para assegurar o controle sobre todas as etapas do processo incluindo o controle de insumos e reagentes o 144 Biosseguran a em laborat rios de sa de plano de amostragem o controle de temperaturas do ambiente e do maquin rio a verifica o de registros a padroniza o de to das as atividades e o uso correto dos eq
198. uipamentos No labora t rio de imuno hematologia a garantia da qualidade deve ter um esquema de processos a serem controlados que vai desde o atendimento ao paciente at a libera o do laudo Segundo Chaves 2010 todas essas atividades devem ser documen tadas por meio de procedimentos operacionais padr o POP ou instru es de trabalho IT que sempre devem estar aces s veis aos funcion rios envolvidos nas atividades Segundo a mesma autora com a incessante procura por qualidade nos processos foram criados os programas de acredita o brasi leiros visando atender s necessidades de ampla e melhor ava lia o dos laborat rios cl nicos laboratoriais Fazem parte des ses sistemas o Programa de Acredita o de Laborat rios Cl nicos Palc da Sociedade Brasileira de Patologia Cl nica Medicina La boratorial SBPC ML e o Departamento de Inspe o e Creden ciamento da Qualidade Dicq da Sociedade Brasileira de An li ses Cl nicas Sbac Vale a pena ressaltar que o setor da garantia da qualidade deve ter autonomia e ser respons vel tamb m pela vali da o de metodologias anal ticas e controle de padr es Refer ncias bibliogr ficas BAHIA SECRETARIA DA SA DE SUPERINTEND NCIA DE VIGIL NCIA E PROTE O DA SA DE DIRETORIA DE VIGIL NCIA E CONTROLE SANIT RIO Manual de biosseguran a Salvador Secret ria da Sa de 2001 Parte 2 Unidades de sa de biosseguran a em unidades hemoter picas e laborat r
199. ulheres gr vidas resultando no fen tipo Le a b no decorrer da gesta o Churchill e Kutz 1988 Harmening 2006 Pacientes com c ncer cirrose alco lica infec es virais e parasit rias podem n o expressar os ant genos Lewis nos eritr citos Essa modifica o do fe 82 Imuno hematologia eritrocit ria n tipo positivo para fen tipo negativo decorrente de metabolismo lip dico anormal por altera es de triglicer deos e de prote nas de alta densidade Henry Oriol e Samuelson 1995 e ou outras altera es neopl sicas que ocorrem em pacientes com c ncer Langkilde Wolf e Orntoft 1990 Idikio e Manickavel 1991 N o s o encontrados nos eritr citos do sangue do cord o ou em rec m nascidos de forma que se forem testadas essas c lulas apre sentar o o fen tipo Le a b N o demonstram efeito de dose nas rea es sorol gicas 3 5 2 Anticorpos Lewis S o produzidos geralmente por indiv duos Le a b sem qualquer exposi o pr via ao ant geno frequentemente s o de natureza IgM e n o atravessam a placenta n o sendo assim respons veis por DHRN S o capazes de ativar o complemento podendo provocar hem lise in vitro e in vivo Apresentam reatividade exacerbada quando as c lu las s o tratadas por enzimas proteol ticas 3 5 3 Anticorpo anti Le o anticorpo mais frequente do sistema Lewis sendo produzido por aproximadamente 20 dos indiv duos que apresentam fen tipo Le a b E
200. uma estrutura tetram rica As extremidades caudais de quatro ou cinco tetr meros est o agrupadas pela liga o com filamentos curtos de actina e com a prote na 4 1 Essa uni o forma o que chamamos de complexo de jun o O resultado final do complexo de jun o uma estrutura male vel em forma de rede que recobre toda a superf cie citos lica da membrana plasm tica do eri tr cito essa estrutura que permite s hem cias suportarem a press o quando passam atrav s de capilares muito finos fig 4 O citoesqueleto est ligado membrana plasm tica mediante a inte ra o entre prote nas A anquirina e a prote na 4 2 s o as respons veis por essa intera o Essas prote nas ligam a banda 3 ao complexo de jun o Especificamente a anquirina uma prote na de ancoragem que promove a liga o da banda 3 com a espectrina A liga o da banda 3 com a espectrina por meio da anquirina tamb m reduz a difus o da banda 3 pela bicamada lip dica fig 4 Res duos de carboidratos s e p _ Glicoforina A PATA VADIA TAVA Y a Prote na 4 1 Actina Espectrina cadeias a e B Actina Prote na 4 1 Figura 4 Estrutura da membrana plasm tica do eritr cito Algumas anomalias na forma da membrana plasm tica do eritr cito por exemplo a esferocitose e a eliptocitose podem ser decor rentes de defeitos nas prote nas que comp em a bicamada lip dica 15 Elmo Eduardo de Almeida Amaral Valter V
201. unoglobulinas que possuem a mesma especificidade de ant geno s o secretadas como anticorpos por linf citos B diferenciados ou plasm citos linf citos B ativados Esses anticorpos ligam se ao seu ant geno espec fico e representam a princi pal fun o efetora dos linf citos B na resposta imune Os linf citos B s o as nicas c lulas capazes de produzir anticorpos A secre o de anticorpos ativada pelo contato com algum ant geno As fun es efetoras dos anticorpos s o desencadeadas quando 16 Bioqu mica eritrocit ria ocorre a sua liga o com o ant geno espec fico V rios efeitos biol gi cos dos anticorpos s o conhecidos neutraliza o do ant geno opsoniza o ativa o de fatores do complemento entre outros A qualidade e a quantidade de anticorpos produzidos que circulam no nosso sangue ao final de uma resposta contra determinado ant geno est o reguladas por um sistema de controle muito elaborado e complexo Para entender como ocorre a liga o ant geno anticorpo antes pre ciso analisar a estrutura t pica de uma mol cula de anticorpo Os anticor pos s o mol culas sol veis secretadas em grande quantidade pelos lin f citos B t m a forma de um Y fig 5 A estrutura do anticorpo permite que ele exer a duas fun es de liga o a uma variedade de ant genos e de liga o a um n mero limitado de c lulas e mol culas efetoras Cada fun o exercida por diferentes por es da mol
202. upo N O necessitam tratamento Lixeira com tampa e pedal E ico PreMo Identificar na frente com 9 e luvas s mbolo de risco biol gico algod o Tampa deve trazer etiqueta com descri o dos res duos gaze cart ese microblac s Saco branco leitoso com p s mbolo de risco biol gico usadas em exames imuno hematol gicosem Recolhimento quando atingir doadores e pacientes 2 3 de sua capacidade ou ao menos uma vez por dia GrupoD Res duos que n o apresentam Lixeira com tampa e pedal a ede e a se Identificar na parte da frente quip com s mbolo de lixo comum domiciliares apel higi nico Tampa deve trazer etiqueta pap g com descri o dos residuos papel toalha utilizado para Saco plastico secar as m os materialadiministrativo Recolhimento quando atingir 2 3 de sua capacidade e sobras de alimentos e res duos provenientes da copa 126 Biosseguran a em laborat rios de sa de Grupo E Res duo perfurocortante Coletor de perfurocortante com risco biol gico recipientes r gidos resistentes a punctura ruptura e vazamentos com s mbolo de seringas res duo biol gico e inscri o RES DUO BIOL GICO acrescida de PERFUROCORTANTE agulhas e lancetas e tubos de vidro se As caixas ou recipientes devem e frascos de vidro vazio ser lacrados quando atingirem 2 3 de sua capacidade e e tubos quebrados colocados em saco branco todo material com leitos
203. uro e eficaz obrigat rio utilizar c maras de seguran a biol gica sempre que se manuseie material infeccioso principalmente se houver alto potencial de produ o de aeross is importante que as autoclaves e as c maras de seguran a bio l gica sejam validadas com m todos apropriados antes de serem utilizadas A recertifica o deve ser feita segundo as instru es do fabricante a intervalos peri dicos Deve ser feito um cronograma de vacina o para o pessoal que trabalha nos laborat rios constando as vacinas obrigat rias para a rea da sa de tais como vacina contra hepatite B e antitet ni ca Al m disso preconizada a vacina o especial para determi nados servi os tais como vacina antirr bica para profissionais que trabalham com experimenta o animal e vacina contra fe bre amarela para profissionais que trabalham na produ o desse imunobiol gico Cada peculiaridade do servi o deve ser avaliada por uma comiss o m dica importante que haja vigil ncia apropriada da sa de do pes soal do laborat rio de modo a se detectarem precocemente infec es adquiridas no local al m disso deve haver regras r gidas visando excluir as pessoas altamente suscept veis mu lheres gr vidas e pessoas imunodeficientes de trabalhos labo ratoriais de alto risco essencial assegurar uma forma o cont nua in loco sobre medi das de seguran a Um programa eficaz nessa rea come a pelos respons
204. vem ser de algod o com mangas longas e comprimen to na altura do joelho os profissionais de laborat rio devem usar cal a comprida e jaleco de manga longa de tecido resistente e cor clara es pec fico para uso do funcion rio do servi o de forma a identific lo de acordo com a sua fun o sugere se que esses EPIs devem ser descon taminados antes da lavagem e que se a lavagem ocorrer na resid n cia do trabalhador o mesmo deve realiz la de forma individual e n o juntamente com outras roupas que n o sejam de servi o os aventais devem ficar no ambiente do laborat rio e n o devem ser utilizados fora do servi o em espa os comuns como corredores e refeit rios aven tais descart veis n o protegem contra subst ncias qu micas s o alta mente inflam veis e devem ser usados uma nica vez b Luvas Existem quatro par metros para medir a efic cia das luvas 1 bloqueio capacidade de impedir o contato 2 permea o velocidade com que um produto passa atrav s da mesma 3 tempo de resist ncia tempo decorrido entre o contato inicial com o lado externo da luva e a detec o do produto na parte interna da luva 4 degrada o mudan as em quaisquer propriedades f sicas da luva Materiais nenhuma luva pode proteger de todos os produtos e latex adequadas prote o biol gica e para uma ampla variedade de solventes org nicos cidos e bases todavia s o perme veis em diferentes graus a produtos qu
205. zido de Teva Fernandez e Silva 2009 36 Hematologia e imunologia aplicadas em imuno hematologia Os diferentes estagios de desenvolvimento da linhagem eritroci t ria s o caracterizados por altera es nucleares e citoplasmaticas A medula ssea vermelha est envolvida nas seguintes atividades produ o matura o reserva amadurecimento estoque e libera o de c lulas Essas atividades nos permitem compreender melhor o processo de forma o celular para sua reposi o no sangue peri f rico podendo tamb m ser aplicada linhagem mieloide Desse modo poss vel observar na medula ssea nitidamente as tr s eta pas fundamentais no desenvolvimento da eritropoese diminui o do tamanho celular perda da basofilia citoplasm tica e picnose nuclear e sua posterior expuls o ainda na fase de eritroblasto orto crom tico medida que a c lula se desenvolve ela passa por todas essas etapas at ser liberada na circula o O reticul cito c lula precursora dos eritr citos amadurece ainda na medula ssea Essas c lulas s o encontradas no sangue perif ri co na propor o de at 1 5 sendo de extrema import ncia para a avalia o terap utica da anemia pois sinalizam o comportamento da medula ssea do paciente ante a terap utica utilizada Abaixo s o des critas as principais c lulas que representam as fases de diferencia o do eritr cito com as suas respectivas caracter sticas b sicas a Hemo

Conceitos básicos e aplicados em imuno-hematologia

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