FOLHETO INFORMATIVO INTERNACIONAL PARA O TESTE COM
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1. 2 Retirar as pettes uma para cada doente do saco de pl stico 3 Fechar o saco e colocar de novo no frigor fico 4 Com as janelas para baixo rotular cada pette com a identifica o do doente NOTA Conservar o kit entre 2 8 C quando n o est em uso Procedimento A Preparar o tamp o de lavagem conforme as instru es da sec o 6 PREPARA O DOS REAGENTES B Rehidratar as Pettes C 1 2 3 Preencher o tubo da frasco dispensador com tamp o de lavagem at todas as bolhas serem removidas Fixar o tubo da solu o de lavagem parte superior da primeira pette Lavar cada pette uma vez com 10ml solu o premindo uma vez com for a moderada a bomba do dispensador NOTA Deixar cada pette escoar completamente antes de continuar para o passo seguinte Encher a pette com soro 1 Bater a ponta da pette no papel absorvente para remover qualquer l quido residual Fixar a seringa de 3cc parte superior da pipeta Inserir a parte inferior da pette no frasco ampola com o soro do doente NOTA Evitar qualquer precipita o e ou camada lip dica Puxar LENTAMENTE o mbolo da seringa para aspirar o soro at cobrir completamente a ltima janela Verificar que n o existem K bolhas de ar NOTA Confirmar que o soro cobre completamente a janela do controlo positivo D Tapar e incubar as pipetas i 2 Com a seringa ainda fixa parte superior da pette colocar a tampa branca2. na seguinte tabela N veis de anticorpos detetados Classe CLA Concentra o de IgE espec fica para Espec fica LUs l quidos o alergeno 4 gt 242 N veis de anticorpos muito elevados 3 143 242 N veis de anticorpos elevados 2 66 142 N veis de anticorpos moderados 1 27 65 N veis de anticorpos baixos 0 0 26 Anticorpos n o detetados Os valores da classe 1 ou superior representam um incremento progressivo nas concentra es de anticorpos espec ficos de alergenos A classe O representa uma aus ncia ou um n vel n o detet vel de anticorpos espec ficos de alergenos Limita es do Procedimento Os resultados medidos podem variar em 1 classe Resultados positivos baixos devem ser interpretados no contexto da avalia o cl nica efetuada Soro hemolisado ou lip mico pode afetar o desempenho do ensaio OPTIGEN O diagn stico cl nico definitivo e ou regimes de dosagem para imunoterapia n o devem ser fundamentados somente nos resultados de um nico teste de diagn stico devendo ser feitos pelo m dico depois de avaliar todos os dados cl nicos e laboratoriais O Ensaio OPTIGEN fornece resultados semiquantitativos O m todo n o tem nenhum padr o absoluto e os seus n veis de classifica o foram definidos arbitrariamente Como a capacidade que liga o do anticorpo IgE especifico pode variar de alergeno para alergeno a classifica o semelhante de alergenos diferentes n o
3. 98 Nota Para a grande maioria dos alergenos clinicamente significativos n o existem refer ncias de alergenos para compara o entre m todos Bibliografia 1 Safety Management No CDC 22 Decontamination of laboratory sink drains to remove azide salts Atlanta GA Centers for Disease Control April 30 1976 2 U S Dept of Health and Human Services Centers for Disease Control Guidelines For Prevention of Transmission of Human Immunodeficiency Virus and Hepatitis B Virus to Health Care and Public Safety Workers February 1989 3 Richardson SH Barkley WE eds Biosafety in microbiological and biomedical laboratories 2nd ed Washington DC US Dept of Health and Human Services 1988 4 Federal OSHA Standard 1910 1030 Bloodborne pathogens 29 CFR 1910 1030 5 Dados dispon veis a pedido Para assist ncia t cnica contacte Hitachi Chemical Diagnostics Fora dos Estados Unidos contactar o seu representante local de Hitachi Chemical Diagnstics Hitachi Chemical Diagnostics Inc Hitachi Europe Ltd r E x X Whitebrook Park Hitachi Chemical Diagnostics Inc Lower Cookham Road 630 Clyde Court Maidenhead Berkshire SL6 8YA Mountain View California 94043 Reino Unido Tel 650 961 5501 Tel 44 0 1628 585 590 Fax 650 969 2745 Fax 44 0 1628 585 594 2010 Hitachi Chemical Diagnstics Inc OPTIGEN uma marca registada da Hitachi Chemical Diagnstics Inc Fabricado sob uma ou mais das patentes dos E
4. Preparar a mistura dos Fotoreagentes como indicado na Sec o 6 Prepara o dos Reagentes NOTA Permitir que os fotoreagentes atinjam a temperatura ambiente antes de usar NOTA O fotoreagente depois de misturado deve ser usado imediatamente para obter os melhores resultados Encher as Pettes com a Mistura dos Fotorreagentes Bater a ponta da pette em papel absorvente para remover qualquer solu o de lavagem residual Fixar a seringa parte superior da pette Inserir a parte inferior da pette no recipiente com a mistura do fotoreagente Puxe LENTAMENTE o mbolo da seringa para aspirar o fotoreagente at encher a pipeta completamente NOTA Confirmar que o fotoreagente cobre completamente a ltima janela Colocar as Tampas 1 2 3 4 Com a seringa ainda fixa parte superior da pette coloque a tampa branca na parte inferior da pette Retire a seringa e coloque a tampa preta Verificar que n o existe l quido derramado Limpar da parte externa das pettes qualquer resto de fotoreagente com um toalhete sem fibras limpo e h mido Incubar as pettes durante 10 minutos 15 Incubar as c maras de teste durante 10 minutos antes de proceder leitura no Luminometer E necess rio proceder leitura de todas as c maras de teste nos 60 minutos segintes adi o do fotorreagente Ver a sec o da opera o do Luminometer na parte Leitura para mais informa o Fazer a Leitura no CLA 1 Lum
5. o frasco do concentrado da solu o de lavagem v rias vezes para misturar e Deitar o conte do do frasco da solu o de lavagem 50ml para o frasco dispensador de 2l e Adicionar gua destilada ou desionizada at marca de 1000 ml e Misturar completamente e Uma vez preparado o tamp o est vel durante 1 m s quando armazenado temperatura ambiente 20 25 C ou refrigerado 2 8 C Anticorpo e Permitir que o anticorpo atinja a temperatura ambiente antes de usar e Com suavidade inverter o frasco do anticorpo antes de usar e O anticorpo est vel at data indicada no r tulo conservado sob refrigera o 2 8 C enquanto n o for utilizado e Um frasco de anticorpo suficiente para vinte 20 pettes de OPTIGEN Mistura de Fotoreagentes Preparar a Mistura de Fotoreagentes imediatamente antes da utiliza o e Permitir que os fotoreagentes AB e CD atinjam a temperatura ambiente antes de utilizar e Usar uma micropipeta com pontas descart veis misturar partes iguais dos fotoreagentes AB e CD Medir 250 ul de cada fotoreagente AB e CD para cada pette Medir para um recipiente descart vel NOTA Para evitar a contamina o dos reagentes utilizar uma ponta descart vel nova para cada fotoreagente e Rodar cuidadosamente o recipiente para misturar e A mistura fotoreagente deve ser usada dentro de 60 minutos NOTA O fotoreagente depois de misturado deve ser usado imediatamente para obter o
6. prepara o e armazenamento do soro para uso no teste OPTIGEN 1 Colher uma amostra de sangue venoso para um tubo separador de soro de 10 ml ou para um tubo de tampa vermelha O doente n o necessita de estar em jejum N o s o necess rias nenhumas prepara es especiais NOTA Os tubos separadores de soro STT serum separator tu bes cont m um material inerte que separa o soro das c lulas quando centrifugado A hem lise pode afetar negativamente o desempenho do ensaio OPTIGEN Inverter o tubo da colheita 3 5 vezes Identificar o tubo com o nome do doente e a data da colheita Deixe o sangue coagular no tubo original durante 2 horas ou at a coagula o ocorrer temperatura ambiente 5 Centrifugar o sangue coagulado durante 10 a 20 minutos a 2000 3000 x g ou 2500 3600 rpm no tubo original 6 Transferir o soro do tubo de centrifuga o para um tubo novo de pl stico com identifica o apropriada 7 As amostras de soro podem ser armazenadas uma semana entre 2 8 C Para per odos mais longos congelar as amostras a 20 C AON NOTA Evitar congelar e descongelar repetidamente as amostras Homogeneizar completamente as amostras depois de descongeladas antes de centrifugar Depois de retirar as amostras do local de conserva o e imediatamente antes de iniciar o teste as amostras devem ser recentrifugadas durante 10 20 minutos a 2000 3000x g ou 2500 3600 rpm J Procedimento do Ensaio Consultar o Ma
7. HITACHI Hitachi Chemical Diagnostics Inc FOLHETO INFORMATIVO INTERNACIONAL PARA O TESTE COM OPTIGEN Para uso diagn stico in vitro Doc No 0649 POR Rev 04 Data de revis o 10 13 Uso Pretendido O ensaio OPTIGEN um teste in vitro para uso na determina o semiquantitativa das concentra es de IgEs espec ficas para determinados alergenos no soro humano Destina se a apoiar o diagn stico cl nico de perturba es al rgicas mediadas por IgEs conjuntamente com a avalia o cl nica efectuada O dispositivo foi concebido para ser utilizado em laborat rios de an lises cl nicas Resumo e Explica o do Teste A Imunoglobulina E uma classe distinta de anticorpos s ricos mediadores das rea es de hipersensibilidade de tipo 1 tamb m conhecidas como alergia at pica Os linf citos B imunocompetentes quando estimulados por um antig nio alergeno produzem anticorpos IgE espec ficos contra os alergenos que se combinam com os recetores de superf cie dos mast citos e dos leuc citos bas filos Se o mesmo alergeno reintroduzido para o sistema por via inalat ria por ingest o ou por contacto d rmico liga se a esses anticorpos IgE j ligados s c lulas Isto ativa a desgranula o das c lulas e a liberta o de aminas vasoativas para os tecidos circundantes As aminas vasoativas como a histamina s o respons veis pela contra o do m sculo liso dos br nquios prurido cut neo incha o lo
8. UA seguintes 3 941 876 4 031 197 4 459 360 e patentes correspondentes concedidas no Canad Austr lia Jap o Espanha Fran a Alemanha It lia Su cia e Gr Bretanha 4 510 393 4 558 013 5 567 149 e patentes correspondentes concedidas no Canad Austr lia Jap o Espanha Fran a Alemanha It lia Su cia Su a Austria B lgica Holanda Luxemburgo e Gr Bretanha 4 568 184 285 485 4 743 541 e patentes correspondentes concedidas no Canad Austr lia Jap o Fran a Alemanha Su cia Su a e Gr Bretanha e 5 082 768 e patente correspondente concedida no Jap o
9. cal e perda dos fluidos extracelulares atrav s das barreiras mucosas que caracterizam as rea es de hipersensibilidade de tipo 1 As manifesta es cl nicas mais comuns das rea es de hipersensibilidade de tipo 1 incluem sinusite asma dermatite urtic ria e em casos mais raros choque anafil tico O doseamento do n vel de IgE espec fica do alergeno do doente em conjunto com a avalia o cl nica valioso para o m dico na confirma o do diagn stico e tratamento da alergia at pica Princ pio do Procedimento O ensaio OPTIGEN utiliza um pequeno dispositivo pl stico conhecido como Pette placa com po os ou como c mara para testes Este dispositivo permite a exposi o simult nea do soro dos pacientes com v rios alergenos ou misturas de alergenos A pette constitu da por uma fase s lida de poliestireno e de pequenas lentes integradas e tamb m um controlo negativo branco e um controlo positivo do procedimento O ensaio OPTIGEN pode ser realizado manualmente ou com o processador semiautom tico AP 720STM O ensaio executado fazendo uma lavagem pette seguida do do enchimento dos po os da pette com as amostras de soro dos doentes Durante a incuba o a IgE s rica liga se ao alergeno que reveste os po os Depois da incuba o a pette lavada com a solu o tamponada para remover componentes do soro que n o foram ligados A seguir a pette enchida com anticorpos anti lgE marcados com en
10. e programadas 4 Fazer a Leitura e Imprimir os Resultados a Depois de programar todas as 5 posi es da cassete no ecr do CLA 1 Luminometer aparece a lista programada correspondente LOAD LIST Se os pain is estiverem corretos confirmar com a tecla ENTER e d se inicio leitura b O CLA 1 Luminometer imprime os resultados depois de aproximadamente 1 minuto c Escrever a identifica o do doente nos resultados impressos e anexar os resultados aos Registos do Teste do CLA 1 Luminometer Controlo de Qualidade A Po os do Controlo Interno Cada pette cont m um controlo Positivo do procedimento e um controlo negativo branco Estes controlos funcionam como indicadores internos em cada pette Controlo positivo do procedimento comprova o desempenho dos reagentes do kit Este tem que produzir uma leitura igual ou superior a 243 LUs no CLA 1 Luminometer Controlo negativo branco Compensa qualquer liga o inespec fica de IgE Este tem que produzir uma leitura igual ou inferior a 69 LUs no CLA 1 Luminometer Resultados Inaceit veis dos Controlos Internos se o resultado de qualquer controlo interno n o estiver dentro dos limites definidos acima fazer o seguinte Reposicionar as pettes na cassete verificar que est bem colocada e repetir a leitura Se os resultados se mantiverem inaceit veis consulte as Sec es 6 e 7 B Controles de Soros IgE Positivo e Negativo Hitachi Chemical Diagnost
11. ics recomenda que cada kit de um novo lote de reagentes e pettes utilizadas no ensaio OPTIGEN para determina o de IgE espec fica de alergeno seja testado com dois n veis de controles para IgE soro de controlo positivo e soro de controlo negativo As Ag ncias Reguladoras podem requerer o uso mais frequente de controlos positivos e negativos Confirmar com ag ncia reguladora aplic vel Os soros de controlo positivo e negativo de IgE para o OPTIGEN est o dispon veis para compra na Hitachi Chemical Diagnostics Inc e s o enviados com a folha de resultados esperados O soro de controlo enviado congelado e deve permanecer congelado at a altura do uso As especifica es dos controlos internos e dos controlos de soros devem ser aprovados para que os resultados possam ser registrados em laudos Resultados O Luminometro CLA 1 mede a quantia de luz emitida pelos alergenos nas pettes O Luminometer mede a emiss o em unidades de luminesc ncia LU Para calcular a resposta da IgE dos doentes o instrumento automaticamente subtrai o n vel de emiss o do controlo negativo ao n vel de emiss o de cada alergeno S o atribu das classes CLA de 0 a 4 de acordo com a quantidade de luz emitida por cada alergeno na pette Estes valores constituem o sistema de pontua o de classes de alergia CLA do ensaio de IgE espec fica OPTIGEN As quantidades de IgE associadas aos valores das Classes CLA e s leituras do aparelho s o apresentadas
12. implica necessariamente equival ncia cl nica Nos testes para alergia alimentar pode se n o detetar anticorpos circulantes de IgE se eles s o dirigidos a formas alteradas dos alergenos como cozinhados processados ou digeridos e as formas alteradas n o est o presentes na mesma forma que esses alergenos neste teste Resultados de falso positivo nos testes efetuados as pessoas com alergias de alimentos podem levar a uma restri o diet tica inadequada enquanto resultados de falso negativos a pessoas sens veis podem resultar em rea es anafil ticas de severidade variada Nos testes para alergias de agentes inalados os resultados de falsos positivos podem resultar na prescri o de medicamento impr prio para essas pessoas Resultados de falsos negativos podem resultar na falta de tratamento m dico adequado Se os valores de IgE total forem iguais ou superiores a 2500 Ul ml a resposta dos alergenos de n vel baixo deve ser interpretada com precau o Quando o procedimento do ensaio levado at ao fim de acordo com as instru es do produto e a total concord ncia com os bons procedimentos do controlo de qualidade obter se o resultados fidedignos e reprodut veis Foi verificado que a contamina o com lix via interfere com o teste Material do laborat rio descontaminado com lix via deve ser enxaguado completamente com gua destilada ou desionizada NOTA O uso de solu es com base alco lica para desinfetar o s
13. inometer NOTA Nunca abrir em circunst ncia alguma o CLA 1 Luminometer Se o abrir a garantia do instrumento anulada o CLA 1 Luminometer fica inoperacional e necessita ser ajustado na fabrica e o operador fica sujeito a les es pessoais graves Colocar a pette na cassete a Colocar a pette na cassete pela ordem indicada na Folha de Planeamento OPTIGEN b Inserir completamente a pette com a tampa preta primeiro e com as janelas para cima no tabuleiro de cassete da pette c Verificar que n o existe l quido entornado Limpar com papel absorvente sem fibras h mido Inserir a cassete no CLA 1 Luminometer a Carregar uma vez na tecla OPEN CLOSE no CLA 1 Luminometer para abrir a porta de transporte b Segure na asa da cassete e introduza a mesma na ranhura de transporte at ouvir um clique c Carregar novamente na tecla OPEN CLOSE A cassete automaticamente transportada para o interior do CLA 1 Luminometer e a porta de transporte fechada Programar a Lista de Trabalho no CLA 1 Luminometer a Identificar o painel da pette que est em cada uma das 5 posi es utilizando a Folha de Planeamento Luminometer como guia b Carregar nas teclas UP ou DOWN no CLA 1 Luminometer para selecionar o painel c Carregar na tecla ENTER para confirmar a sele o do painel para essa posi o d Repetir os passos acima at que todas as pettes nas outras posi es da cassete do CLA 1 Luminometer tenham sido adequadament
14. irar o anticorpo at cobrir completamente a ltima janela NOTA Confirmar que a ltima janela est completamente coberta de anticorpo Isto evita a forma o de bolhas que podem interferir com os resultados do teste H Tapar e incubar as pettes 1 2 3 Com a seringa ainda fixa parte superior da pette colocar a tampa branca na parte inferior da pette Retirar a seringa e colocar a borracha preta na parte superior da pette Colocar as pettes na posi o vertical no suporte workstation Incubar durante 2 horas 10 minutos temperatura ambiente marcar o tempo de incuba o NOTA Manter o kit entre 2 8 C quando n o est em uso Escoar o anticorpo J L N 3 2 3 1 Retirar a tampa inferior de cada pette e colocar novamente no suporte Retirar a tampa superior de cada pette e deixar escoar para o dep sito do esgoto Anotar na Folha de Planeamento a hora a que terminou a incuba o Enxugar as tampas e guardar para os passos seguintes Lavagem das pettes 1 Preencher o tubo do frasco do tamp o de lavagem com solu o at todas as bolhas de ar sa rem Fixar o tubo da solu o de lavagem parte superior da primeira pette Lavar cada pette com 10ml de tamp o de lavagem premindo uma vez a bomba dispensadora utilize for a moderada NOTA Permitir o escoamento completo de cada pette antes de continuar para o pr ximo passo Preparar a Mistura dos Fotoreagentes
15. na parte inferior da pette Retirar a seringa e colocar a tampa preta na parte superior da pette Nota As tampas devem ser empurradas completamente para evitar derrames Colocar as pettes com soro em posi o vertical no suporte workstation Incubar temperatura ambiente durante 2 horas 10 minutos Escoar o soro Retirar a tampa inferior de cada pette e colocar a pette novamente no suporte Retirar a tampa superior de cada pette e deixar o soro escoar para o dep sito de esgoto Enxugar as tampas e guardar para os passos seguintes Lavagem das pettes Preencher o tubo da garrafa de lavagem com solu o at todas as bolhas de ar sa rem Fixar o tubo da solu o de lavagem parte superior da primeira pette Lavar cada pette com 10ml premindo uma vez a bomba do dispensador utilizar for a moderada NOTA Permitir o escoamento completo de cada pette antes de continuar para o pr ximo passo Encher pettes com anticorpo Deixar os reagentes atingirem a temperatura ambiente Agitar suavemente o anticorpo antes de o usar Para evitar contamina o do anticorpo transferir um pouco de anticorpo para um copo descart vel ou outro recipiente Bater a ponta da pette em papel absorvente para remover qualquer solu o de lavagem residual Fixar a seringa de 3cc parte superior da pette Colocar a parte inferior da pette no recipiente descart vel com o anticorpo Lentamente puxe o mbolo da seringa para asp
16. nual de Utiliza o OPTIGEN P N 60501 e o Manual do Utilizador do CLA 1 Luminometer Doc N 0277 para obter as instru es completas sobre como realizar o ensaio pelo procedimento manual Para instru es sobre a utiliza o com o equipamento semiautom tico AP 720S consulte o Manual de Instru es AP 720S Doc N 0780 e o Guia do Painel LCD do AP 720S Doc N 0781 Materiais Inclu dos e Ensaio OPTIGEN ver a sec o 4 REAGENTES COMPONENTES Materiais necess rios mas n o inclu dos e Kit do equipamento OPTIGEN incluindo Suporte para as amostras para at 40 pettes Dep sito para o esgoto Frasco graduado de 2 para dispensar o tamp o de lavagem Recipientes descart veis para os reagentes 10ml Seringa de 3cc fecho luer Pipeta de volume fixo eletr nica ou manual opcional e Proveta ou frasco graduado de 1l para preparar o tamp o de lavagem e gua desionizada ou destilada Tubos separadores de soro ou com tampa vermelha de 10ml ou tubos de colheita de amostras de 5 ml Centr fuga com capacidade de 2000 3000 x g ou 2500 3600 rpm Tubos de ensaio de pl stico para prepara o das amostras Toalhas de papel absorvente Toalhetes sem fibras Sistema Luminometer CLA 1 Prepara o das Pettes e das Amostras dos Doentes 1 Sea amostra de soro n o tiver sido centrifugada no dia do teste deve se centrifug la imediatamente antes do uso ver a sec o 8 Colheita e Prepara o das Amostras
17. r Tampaspretas para a parte superior das pettes 22 tampas Tampas para as pettes inferior Tampas brancas para a parte inferior das placas 22 tampas e Precau es e O ensaio OPTIGEN destina se a ser utilizado em diagn stico in vitro e O concentrado da solu o de lavagem cont m azida de s dio como conservante Foi documentado que a azida de s dio reage com chumbo ou cobre da canaliza o formando azidas met licas potencialmente explosivas Assim quando se utiliza este reagente dever ter se o cuidado de enxaguar sempre com um volume adequado de gua para prevenir a forma o das azidas met licas no sistema de canaliza o e N o utilize os componentes do kit ap s a data de validade indicada em cada componente e Os componentes reagentes dos kits de ensaio OPTIGEN s o fornecidos num conjunto isto reagentes e pettes N o misture reagentes de outras linhas de produtos uma vez que n o s o compat veis e Foi documentado que contamina o com lix via interfere com o teste 6 Prepara o dos Reagentes Tamp o de lavagem e Permitir que o concentrado do Tamp o de Lavagem atinja a temperatura ambiente Confirmar que todos os cristais de sal dissolveram Se existirem cristais remanescentes colocar o frasco bem fechado numa proveta de gua morna at que todos os cristais dissolvam e Lavar o frasco da solu o de lavagem e a tubagem com gua destilada e Com suavidade inverter
18. s melhores resultados Instru es de Armazenamento e Armazenar o kit entre 2 8 C Quando armazenado como indicado os componentes podem ser usados at s datas indicadas nos r tulos cada componente e N o congele os componentes do kit e As pettes encontram se acondicionadas com um agente exsicante e devem ser adequadamente seladas depois de cada uso Quando armazenadas no saco fechado entre 2 8 C as pettes s o est veis at data de validade indicada no r tulo e N o utilizar componentes do kit se houver sinais de deteriora o Sinais de deteriora o incluem um odor pouco usual turva o e outros sinais de contamina o EJ Colheita e Prepara o das Amostras Manipular todas as amostras dos doentes e os componentes do kit como recomendado para qualquer amostra de sangue ou soro humano potencialmente infecioso Siga as Precau es Universais ou outras orienta es estabelecidas na institui o sempre que manuseie amostras de doentes Para o m todo manual o volume m nimo de soro humano requerido por cada teste o seguinte 500 ul de soro para a pette de gt 20 alergenos 300 ui de soro para a pette de lt 20 alergenos Para o m todo semiautom tico utilizando o AP 7208 o volume m nimo de soro humano necess rio por cada teste o seguinte 600 ul de soro para a pette de gt 20 alergenos 490 ul de soro para a pette de lt 20 alergenos O protocolo seguinte deve ser usado para a colheita
19. uporte pode provocar a abertura de rachas no pl stico e inutiliza o precoce do suporte Valores esperados Recomenda se que cada laborat rio estabele a seus pr prios limites de normalidade para a popula o em quest o Foi estabelecido tr s desvios padr o acima do valor m dio da popula o normal como o limiar de corte entre resultados positivos e negativos Caracter sticas do Desempenho do Procedimento Padr o Precis o Intraensaio Foram analisadas dez repeti es de amostras de soro em um lote Os coeficientes de varia o m dios dos resultados de todos os alergenos testados foram calculados por classe Classe CV 1 31 2 16 3 16 4 5 Interensaios Foram analisadass dez repeti es de um soro em cinco dias diferentes Os coeficientes de varia o m dios dos resultados de todos os alergenos testados foram claculados por classe Classe CV 1 25 2 15 3 9 4 1 B Limite de Dete o O limite de dete o dos ensaios varia entre 12 26 LUs e depende do alergeno C Especificidade Anal tica N o existem rea es cruzadas com as imunoglobulinas IgA IgM IgG ou IgD a n veis normais fisiol gicos no soro humano D Compara o de M todos In Vitro Em m dia a concord ncia calculada como efici ncia entre cada alergeno CLA e ensaios alternativos in vitro de aproximadamente 90 com um intervalo de concord ncias de 83 a
20. zima Estes anticorpos ligam se IgE j ligada aos po os Depois da segunda lavagem a pette enchida com uma mistura de fotoreagentes que reagem com o anticorpo anti lgE marcado com enzima para produzir luz gerada quimicamente quimioluminisc ncia A quantidade de luz emitida por cada po o diretamente proporcional quantidade de IgE espec fica do alergeno contida no soro do doente El Reagentes Componentes Ensaio OPTIGEN Conservar entre 2 8 C durante o prazo de validade N o congelar Descri o do Componente C maras para testes A c mara pette cont m uma fase s lida de poliestireno com pequenas lentes contendo um alergeno ou mistura de alergenos Cada kit de 20 testes cont m 20 pettes Tamp o de Lavagem Concentrado Solu o que depois de dilu da cont m Soro fisiol gico com tamp o fosfato 0 01M Tween 20 0 1 e azida de s dio 0 001 Um frasco 50 ml Anticorpo IgE Solu o azul constitu da por Anti IgE humana preparada em cabras e marcado enzimaticamente soro fisiol gico com tamp o Fosfato 0 01M pH 7 2 estabilizantes de prote na Proclin 0 1 como conservante 1 frasco 16 ml Fotoreagente AB Solu o cont m 3 aminoftalo hidrazida 7 15 mM luminol Enhancer 5 25uM e tamp o de Borato 0 025M pH 9 4 1 frasco 8ml Fotoreagente CD Solu o cont m Laranja de etilo 0 00125M Per xido de hidrog nio 0 002M 1 frasco 8ml Tampas para as pettes superio
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