Ensaio dos genótipos do HPV 16 18/45 Aptima
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1. Taxa de Positividade x n Popula o ASC US Popula o NILM 2 21 anos 2 30 anos HPV 16 HPV 18 45 HPV 16e Outros 11 de HPV 16 HPV 18 45 HPV 16e Outros 11 de Pos Pos 18 45 Pos HR Pos Pos Pos 18 45 Pos HR Pos Tudo 7 8 5 3 0 3 26 0 0 5 0 5 lt 0 1 3 6 71 911 48 911 3 911 237 911 50 10 839 49 10 839 1 10 839 391 10 839 Grupo et rio anos 13 4 5 2 0 5 37 9 Ras 52 388 20 388 2 388 147 388 WA NA NA NA 30a39 5 5 6 7 0 4 23 1 0 7 0 7 0 5 1 14 255 17 255 1 255 59 255 31 4 183 31 4 183 0 4 183 215 4 183 gt 40 1 9 4 1 0 11 6 0 3 0 3 lt 0 1 2 6 E 5 268 11 268 0 268 31 268 19 6 656 18 6 656 1 6 656 176 6 656 Local de teste 4 5 6 6 6 0 3 27 0 0 4 0 4 lt 0 1 3 6 17 304 20 304 1 304 82 304 16 3 610 16 3 610 1 3 610 130 3 610 2 9 6 3 6 0 3 26 4 0 5 0 4 0 3 6 29 303 11 303 1 303 80 303 18 3 614 15 3 614 0 3 614 130 3 614 3 8 2 5 6 0 3 24 7 0 4 0 5 0 3 6 25 304 17 304 1 304 75 304 16 3 615 18 3 615 0 3 615 131 3 615 N A N o aplic vel HR alto risco Pos positivo Nota Mulheres com resultados negativos do Aptima HPV assay no Panther System foram designadas como negativas no Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 no Panther System para fins de an lise Tipos de HPV 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 e 68 Na popula o NILM nem todos os indiv duos com resultado2. 14 Materiais necess rios mas dispon veis Materiais necess rios mas dispon veis separadamente aca ese eeedoccvasncustencosceaceancbocuveseesabetoee 9 separadamente ease isesendrasessandrenssnicndeans 15 Procedimento de teste do Tigris DTS System 10 Procedimento de teste no Panther System 16 Notas sobre o procedimento s 12 Notas sobre o procedimento reesen 18 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 1 AW 11504 601 Rev 002 PT Informa es gerais Apti ma Informa es gerais Utiliza o prevista O Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima um teste de amplifica o de cido nucleico in vitro para a detec o qualitativa de RNA mensageiro mRNA E6 E7 viral a partir dos tipos de alto risco 16 18 e 45 do v rus do papiloma humano human papillomavirus HPV em amostras provenientes de mulheres com resultados do Aptima HPV Assay positivos O mRNA do HPV detectado em esp cimes de Papanicolau do colo do utero baseados em citologia l quida colhidos em frascos ThinPrep contendo solu o PreservCyt pr ou p s processamento de Papanicolau ou em esp cimes colhidos com o Kit Aptima de Colheita e Transporte de Esp cimes Cervicais Os esp cimes cervicais colhidos no Fluido Conservante SurePath podem ser testados com o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima O ensaio utilizado com o Tigris DTS System e o Panther
3. 2CIN2 2CIN3 Resultado do Resultado do ensaio int inr iac o Aptima HPV Assay AHPV GT preta Risco absoluto Risco absoluto CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 8 8 3 34 5 9 2 34 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 2 2 17 8 1 0 13 3 HPV 16 Pos 0 0 0 17 0 0 0 17 HPV 18 45Neg APenas HPV 16 Pos 99 15 5 0 0 14 3 HPV 16 Neg Apenas 17 6 3 17 11 8 2 17 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 3 2 35 4 1 3 27 0 Positiva EAD os ES ENA HPV 18 45 pos HPV 16 e 18 45 Pos N A 0 0 N A 0 0 Outros HPV de 4 0 5 124 2 4 3 124 HPV 16 18 45 Neg ai 1 7 62 0 7 4 2 Pos ou Neg HPV de HR Pos Es a a fe P on Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg O o O o Preval ncia 2 4 9 375 1 6 6 375 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 14 8 4 27 14 8 4 27 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 4 7 27 3 5 1 22 8 HPV 16 Pos 28 6 4 14 28 6 4 14 HPV 18 45Neg APenas HPV 16 Pos g s 50 7 6 4 46 5 HPV 16 Neg Apenas 0 0 0 13 0 0 0 13 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 0 0 20 1 0 0 17 1 Positiva TEVE os Sania ce HPV 18 45 Pos HPV 16 e 18 45 Pos N A 0 0 N A 0 0 Outros HPV de 2 7 3 113 0 9 1 113 HPV 16 18 45 Neg EA 0 7 58 0 0 3 1 Pos ou Neg HPV de HR Pos e So ve o Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg O Nes O E Preval ncia 2 6 11 428 1 2 5 428 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo N A n o ap
4. HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo O teste de PCR para o HPV s diferencia o HPV 16 e HPV 18 dos outros 12 gen tipos de alto risco incluindo HPV 45 Mulheres com resultados negativos no Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Tabela 16 Risco relativo de 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e um teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado Resultados do Aptima Assay Resultados do teste de PCR para o HPV P Risco relativo para 2CIN3 Risco relativo para 2CIN3 Interpreta o do teste CI de 95 Interpreta o do teste CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Positivo vs 14 8 HPV 16 e ou 18 Positivo vs 12 6 HPV de HR Negativo 4 3 50 3 HPV de HR Negativo 3 8 41 9 HPV 16 e ou 18 45 Positivo vs 2 0 HPV 16 e ou 18 Positivo vs 3 9 outro HPV de HR positivo 0 8 4 6 outro HPV de HR Positivo 1 6 9 5 Outro HPV de HR Positivo vs 7 5 Outro HPV de HR Positivo vs 3 2 HPV de HR Negativo 2 0 28 6 HPV de HR Negativo 0 8 12 8 HPV de HR Positivo vs 10 0 HPV de HR Positivo vs 7 4 HPV de HR Negativo 3 0 32 7 HPV de HR Negativo 2 3 24 3 Preval ncia 4 9 Preval ncia 5 0 Ensaio dos genotipos do HPV 16 18 45 Aptima 35 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Ap
5. AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo N A n o aplic vel Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 51 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima Tabela 31 Popula o NILM 2 30 anos Risco absoluto de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay por grupo et rio estimativas n o ajustadas Resultado do 2CIN2 2CIN3 Resultado do J Aptima HPV Ensaio AHPV GT Interpreta o Risco absoluto Risco absoluto Assay CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 8 1 3 37 5 4 2 37 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 2 0 16 4 0 9 12 3 HPV 16 Pos 0 0 17 0 0 17 HPV 18 45 Neg Apenas HPV 16 Pos 0 0 15 5 0 0 14 3 HPV 16 Neg Apenas HPV 18 45 15 0 3 20 10 0 2 20 HPV 18 45 Pos Pos 3 9 30 6 1 0 22 8 Positiva HEUEE os POETA HPV 18 45 Pas HPV 16 e 18 45 Pos N A 0 0 N A 0 0 Outros HPV de 3 6 4 111 2 7 3 111 HPV 16 18 45 N eg HR Pos 1 2 6 2 0 7 4 7 Pos ou Neg HPV de HR Pos 4 7 7 148 3 4 5 148 2 6 6 1 1 6 4 3 0 9 2 230 0 4 1 230 HPV 16 18 45 N HPV de HR N Negativa eg eg 0 1 2 2 0 0 1 6 Preval ncia
6. O Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima deve ser interpretado em conjunto com outros dados laboratoriais e cl nicos dispon veis ao m dico Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 22 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Resultados previstos do Tigris DTS System Preval ncia de mRNA do HPV de alto risco Resultados previstos do Tigris DTS System Preval ncia de mRNA do HPV de alto risco A preval ncia de infec o por HPV de alto risco varia amplamente e influenciada por diversos factores para os quais a idade o factor com mais preponder ncia Diversos estudos investigaram a preval ncia do HPV conforme determinado pela detec o de DNA do HPV contudo poucos estudos reportaram a preval ncia baseada na detec o do MRNA do HPV oncog nico Foram inscritas num estudo cl nico prospectivo conhecido por ensaio CLEAR mulheres provenientes de diversas cl nicas n 18 representando uma ampla distribui o geogr fica e uma popula o diversa 10 estados dos Estados Unidos da Am rica para avaliar o Aptima HPV Assay o qual detecta 14 tipos de HPV de alto risco Foram avaliadas amostras de mulheres no ensaio CLEAR com resultados positivos no Aptima HPV Assay com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima num estudo cl nico em separado A preval ncia do HPV 16 18 e 45 bem como dos restantes 11 tipos de HPV de alto risco observada no estudo cl nico com base nos resultados do teste com o Aptima HPV assay e com o
7. OPT 100 C lulas MS751 0 2 c lulas Negativa E 100 Poe a go IVT de HPV 16 24 c pias Positiva 085100 as q re IVT de HPV 18 26 c pias Negativa 088100 OPT 100 IVT de HPV 45 35 c pias Negativa 088100 AT 100 Amostra cl nica do HPV 16 2 Positiva as q 506 ae Or Amostra clinica do HPV 16 3 Positiva aa q dos aa DT Amostra clinica do HPV 18 45 2 Negativa e 5400 OT 100 Amostra clinica do HPV 18 45 3 Negativa 1796 6 100 OT 100 C lulas SiHa 0 001 c lulas Negativa o o aa 4 294 C lulas HeLa 0 001 c lulas Negativa 088100 Or 100 C lulas MS751 0 006 c lulas Negativa 088100 Or 100 Amostra clinica negativa 1 do HPV Negativa 085100 OPT 100 Amostra clinica negativa 2 do HPV Negativa 088 100 er 100 HPV negativo em PreservCyt 1 Negativa 685 100 SRT 100 HPV negativo em PreservCyt 2 Negativa 085100 OPT 100 Cl Intervalo de Confian a da Pontua o Nota A concord ncia percentual pode ter sido afectada por varia es na aditiva o dilui o e ou aliquotagem Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 58 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Tabela 40b Precis o do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Estudo 1 e 2 Descri o do painel e concord ncia percentual com os resultados previstos do HPV 18 45 Descri o do painel Concord
8. MS751 2 6 1 9 4 2 c pias por reac o para transcritos in vitro e c lulas por reac o para linhas celulares Precis o do Ensaio A precis o do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi avaliada em dois estudos utilizando o mesmo painel de 22 membros O Estudo 1 foi realizado em 3 locais de teste externos a fim de determinar a reprodutibilidade do ensaio O Estudo 2 foi realizado internamente com o objectivo de determinar a precis o em laborat rio O painel incluiu catorze membros do HPV 16 e ou 18 45 positivos com concentra es iguais ou superiores ao limite de detec o do ensaio positividade prevista 2 95 5 membros do HPV 16 e ou 18 45 positivos com concentra es abaixo do limite de detec o do ensaio positividade prevista gt 0 a lt 25 e 3 membros do HPV negativos Os membros positivos do painel do HPV 16 e ou 18 45 foram preparados aditivando c lulas cultivadas infectadas com HPV SiHa HeLa e MS751 ATCC Manassas Virginia em esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep residuais agrupados ou diluindo esp cimes cl nicos do HPV 16 18 e ou 45 em esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep residuais agrupados Os membros negativos do painel do HPV foram preparados com esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep residuais agrupados No Estudo 1 2 operadores em cada um dos 3 locais de teste 1 instrumento por local executaram 2 listas de trabalho do Ensaio dos gen tipos HPV 1
9. Estado de doen a verificada 2CIN2 verificada 2CIN3 n o verificada Resultado Resultado Teste do Total de do Aptima do Ensaio DNA do mulheres Mulheres Mulheres mulheres Mulheres Mulheres com HPV Assay AHPV GT HPV doentes n o doentes n o estado de doen a doentes doentes desconhecido 2CIN2 2CIN3 lt CIN2 lt CIN3 desconhecida Positiva Positiva 88 6 52 5 53 30 34 1 Positiva Negativa 10 1 5 1 5 4 40 0 Positiva ee 2 0 1 0 1 1 50 0 resultado Positiva Negativa Positiva 291 7 169 4 172 115 39 5 Negativa Negativa 85 0 14 0 14 71 83 5 Sem R Negativa resultado 15 0 4 0 4 11 73 3 Total 491 14 245 10 249 232 47 3 N A Positiva 282 3 177 1 179 102 36 2 N A Negativa 9467 2 362 0 364 9103 96 2 Negativa N A Semia 599 1 4 0 5 594 99 2 resultado Total 10 839 20 788 11 797 10 031 92 5 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima N A n o aplic vel Todas as amostras apresentaram resultados finais v lidos quando foi realizado o teste inicial ou ap s resolu o de resultados iniciais inv lidos por procedimento 616 mulheres com resultados do Aptima HPV assay n o apresentaram resultados do teste do DNA do HPV devido sobretudo ao volume insuficiente do esp cime citol gico Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen
10. Negativa e O O OO Aa ado 100 107 107 100 162 162 Amostra cl nica do HPV 16 1 Positiva 96 5 100 97 7 100 T 100 108 108 98 8 160 162 Amostra cl nica do HPV 18 45 1 Negativa 96 6 100 95 6 99 7 C lulas SiHa 1 6 c lulas e Positiva 100 108 108 98 8 160 162 c lulas HeLa 3 3 c lulas 96 6 100 95 6 99 7 C lulas SiHa 1 6 c lulas e Positiva 100 108 108 99 4 161 162 c lulas MS751 42 5 c lulas 96 6 100 96 6 99 9 C lulas SiHa 15 7 c lulas e Positiva 100 108 108 100 161 161 c lulas HeLa 0 3 c lulas 96 6 100 97 7 100 C lulas SiHa 15 7 c lulas e Positiva 100 108 108 100 162 162 c lulas MS751 4 3 c lulas 96 6 100 97 7 100 E es 97 2 105 108 98 8 160 162 C lulas SiHa 1 6 c lulas Positiva 92 1 99 1 95 6 99 7 r 5 100 108 108 100 161 161 C lulas HeLa 0 3 c lulas Negativa 96 6 100 97 7 100 C lulas MS751 4 3 c lulas Negativa e Sor Oo o o 97 2 104 107 94 4 152 161 Amostra cl nica do HPV 16 2 Positiva 92 1 99 0 88 7 97 0 Amostra cl nica do HPV 18 45 2 Negativa ao oa E A E 85 2 92 108 84 6 137 162 C lulas SiHa 0 1 c lulas Negativa 77 3 90 7 78 2 89 3 C lulas HeLa 0 02 c lulas Negativa seo a C lulas MS751 0 04 c lulas Negativa do o ror i 95 4 103 108 92 6 150 162 Amostra cl nica do HPV 16 3 Negativa 89 6 98 0 87 5 95 7 Amostra cl nica do HPV 18 45 3 Negativa E pe nid Amostra clinica ne
11. i Sem n Negativa resultado 13 0 6 0 6 7 53 8 Total 515 15 283 10 288 217 42 1 N A Positiva 306 3 178 1 180 125 40 8 Negativa N A 9 420 1 322 0 323 9 097 96 6 Negativa N A Semar 605 1 0 0 1 604 99 8 resultado Total 10 846 20 783 11 792 10 043 92 6 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima N A n o aplic vel Todas as amostras apresentaram resultados finais v lidos quando foi realizado o teste inicial ou ap s resolu o de resultados iniciais inv lidos por procedimento 620 mulheres com resultados do Aptima HPV Assay n o tinham resultados do teste do DNA do HPV sobretudo devido ao volume insuficiente do esp cime de citologia Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Os riscos absolutos de doen a ajustados 2CIN2 e 2CIN3 de acordo com o resultado do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e o resultado do Aptima HPV Assay s o apresentados na Tabela 9a O risco de 2CIN2 em mulheres com HPV do tipo 16 18 e ou 45 presente foi de 12 6 comparativamente a 3 4 em mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes e 0 6 em mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Os riscos absolutos de doen a n o ajustados s o apresentados em geral na Tabela 9b e por grupo et rio na Tabela 10 Ensaio dos gen
12. n 15 n o foram colhidas biopsias n 3 e l minas da biopsia perdidas n 1 Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Uma mulher apresentava adenocarcinoma in situ AIS O risco absoluto de doen a 2CIN2 e 2CIN3 segundo o resultado do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 e o resultado do Aptima HPV assay apresentado na Tabela 24 O risco de 2CIN2 em mulheres com HPV do tipo 16 18 e ou 45 presente foi de 28 8 comparativamente a 14 0 em mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes e 2 6 em mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes O risco absoluto apresentado por grupo et rio na Tabela 25 Tabela 24 Popula o ASC US 2 21 anos Risco absoluto de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay gt CIN2 gt CIN3 Resultado do Aptima Resultado do Ensaio interpretacao HPV Assay AHPV GT pretag Risco absoluto Risco absoluto CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 28 8 34 118 16 9 20 118 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 22 2 35 7 12 1 21 8 HPV 16 Pos 37 1 26 70 21 4 15 70 HPV 18 45 Neg Apenas HEN 16 Pos 27 4 47 4 13 8 29 5 HPV 16 Neg Apenas 13 3 6 45 8 9 4 45 Positiva HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 5 5 25 1 2 9 19 1 HPV 16 Pos 66 7 2 3 33 3 1
13. ncia percentual CI de 95 Resultado c pias ou c lulas reac o po REM 3 Ria a 1 Rede ai IVT de HPV 16 240 c pias Negativa 088100 SRT 100 IVT de HPV 18 260 c pias Positiva 065100 SRT OO IVT de HPV 45 350 c pias Positiva 088100 OT OO Amostra cl nica do HPV 16 1 Negativa 988100 Or O Amostra cl nica do HPV 18 45 1 Positiva 088100 SAT 100 C lulas SiHa 4 c lulas e Sea 100 108 108 100 162 162 c lulas HeLa 0 7 c lulas 96 6 100 97 7 100 C lulas SiHa 0 4 c lulas e Secs 100 108 108 100 162 162 c lulas HeLa 7 c lulas 96 6 100 97 7 100 C lulas SiHa 0 4 c lulas Negativa 088100 BB a0 C lulas HeLa 0 7 c lulas Positiva 088100 OPT 100 C lulas MS751 0 2 c lulas Positiva aa 5 09 8 CA IVT de HPV 16 24 c pias Negativa 065100 SRT OO IVT de HPV 18 26 c pias Positiva Moa 09 8 SRT 100 IVT de HPV 45 35 c pias Positiva aa 5 09 8 a 604 Amostra cl nica do HPV 16 2 Negativa 065100 SRT OO Amostra cl nica do HPV 16 3 Negativa 068100 Or 100 Amostra clinica do HPV 18 45 2 Positiva 985 100 ae OBO Amostra clinica do HPV 18 45 3 Positiva 088100 Bs 607 C lulas SiHa 0 001 c lulas Negativa 088100 Orr 100 C lulas HeLa 0 001 c lulas Negativa o 601 a 004 C lulas MS751 0 006 c lulas Negativa ee 82 2 aa o RF Amostra cl nica negativa 1
14. o dos resultados do Ensaio Aptima Risco relativo Risco relativo CI de 95 CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 9 9 50 7 HPV de HR Neg 3 4 28 4 6 2 414 4 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 3 0 4 5 outro HPV de HR pos 1 1 8 2 1 3 15 4 Outro HPV de HR Pos vs 3 3 11 3 HPV de HR Neg 1 1 9 7 1 3 100 7 HPV de HR Pos vs 4 9 21 2 HPV de HR Neg 1 9 12 7 2 7 164 7 Preval ncia 2 5 20 808 1 4 11 808 Cl intervalo de confian a HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 53 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima As rela es de probabilidade 2CIN2 e 2CIN3 segundo o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima s o apresentadas na Tabela 34 desvio de verifica o ajustado e na Tabela 35 n o ajustado Os tipos de HPV 16 18 e ou 45 tinham 17 1 vezes mais probabilidade de estarem presentes numa mulher com 2CIN2 e 21 9 vezes mais probabilidade de estarem presentes numa mulher com 2CIN3 Tabela 34 Popula o NILM gt 30 anos Rela es de probabilidade para 2CIN2 e 2CIN3 segundo os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas ajustadas do desvio de verifica o 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resul
15. 1 5 6 9 0 0 2 7 Preval ncia 13 1 50 383 5 2 20 383 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 32 3 10 31 16 1 5 31 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 19 0 45 9 7 0 25 4 HPV 16 Pos 50 0 7 14 21 4 3 14 HPV 18 45 Neg APenas HPV 16 Pos 24 2 74 2 5 1 41 6 HPV 16 Neg Apenas HPV 18 8 3 16 12 5 2 16 a HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 3 0 40 6 1 3 30 8 Positiva HPV 16 P 0 0 1 0 0 1 os HPV 18 45 Pos HPV 16 e 18 45 Pos 0 0 93 5 0 0 93 3 Outros HPV de 12 7 7 55 3 6 2 55 HEV 16 18 45 Neg HR Pos 6 2 20 5 0 6 9 1 19 8 17 86 8 1 7 86 Pos ou Neg HPV de HR Pos 15 1 23 9 4 7 10 3 7 1 2 2 167 0 6 1 167 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 0 2 3 5 0 0 2 3 Preval ncia 7 5 19 253 3 2 8 253 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 33 3 5 15 20 0 3 15 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 12 4 55 0 4 1 36 0 HPV 16 Pos 66 7 4 6 33 3 2 6 HPV 18 45 Neg Apenas HPV 16 Pos 27 1 93 5 6 2 69 2 HPV 16 Neg Apenas HPV 11 1 1 9 11 1 1 9 D HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 0 5 39 7 0 5 37 1 Positiva HPV 1EP os HPV 18 45 Pos HPV 16 e 18 45 Pos 0 0 0 0 Outros HPV de 3 4 1 29 0 0 29 HEN ISI ai Neg HR Pos 0 1 14 0 0 0 8 2 13 6 6 44 6 8 3 44 Pos ou Neg HPV de HR Pos 6 5 20 6 1 8 11 4 7 1 9 4 213 0 9 2 213 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 0 6 3 4 0 1 2 0 Preval ncia 3 9 10 257 1 9 5 257 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR
16. 12 3 1 9 18 6 HPV de HR Positivo vs 8 7 11 4 HPV de HR Negativo 4 8 15 9 4 0 32 0 Preval ncia 8 8 79 893 Cl intervalo de confianga HR alto risco 3 7 33 893 Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise As rela es de probabilidade 2CIN2 e 2CIN3 segundo o resultado do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima s o apresentados na Tabela 6 Os tipos de HPV 16 18 e ou 45 tinham 4 2 vezes mais probabilidade de estar presentes numa mulher com 2CIN2 e 5 1 vezes mais probabilidade de estar presente numa mulher com 2CIN3 Tabela 6 Popula o ASC US 2 21 anos Rela es de probabilidade para 2CIN2 e 2CIN3 pelos resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay Interpreta o dos resultados do Aptima Assay 2CIN2 2CIN3 Rela o de probabilidade CI de 95 Rela o de probabilidade CI de 95 e 4 2 5 1 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 3 0 5 8 3 4 6 9 Pe 1 7 1 2 Outro HPV de HR Positivo 1 3 2 3 0 6 1 9 E 0 2 0 2 HPV de HR Negativo 0 1 0 4 0 1 0 4 Cl intervalo de confian a HR alto risco Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tip
17. 14 4 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 7 6 17 3 10 4 18 1 HPV 16 Pos e 16 4 16 8 HPV 18 45 Neg Apenas HPV 16 Pos 9 2 23 9 11 6 21 9 HPV 16 Neg e ou Apenas HPV 18 45 3 3 7 1 o HPV 18 45 Pos Pos 0 1 13 2 1 0 18 8 Positiva gt 1 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e HPV 18 45 33 3 14 3 HPV 18 45 Pos Pos 1 8 83 7 0 7 49 9 HPV 16 Neg e ou Outros HPV de HR 2 0 2 1 HPV 18 45 Neg Pos 1 0 3 1 1 1 3 3 10 2 8 5 Pos ou Neg HPV de HR Pos 8 4 11 7 7 0 9 5 HPV 16 Neg e ou 1 0 1 1 N t kk ea HPV 18 45 Neg HEM de NR Neg 0 2 2 4 0 3 2 8 Preval ncia 4 0 5 0 HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo O teste de PCR para o HPV s diferencia o HPV 16 e HPV 18 dos outros 12 gen tipos de alto risco incluindo HPV 45 Mulheres com resultados negativos no Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Tabela 37 Risco relativo de 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e um teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado Resultados do Aptima Assay Resultados do teste de PCR para o HPV x Risco relativo para 2CIN3 gt Risco relativo para 2CIN3 Interpreta o do teste CI de 95 Interpreta o do teste CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 13 1 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 12 6 vs HPV de HR Negativo 3 7 45 9 vs HPV de HR Negativo 3 8 41 9 HPV 16 e ou 18 45 Positivo
18. 2 4 9 378 1 6 6 378 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 14 3 4 28 14 3 4 28 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 4 8 26 4 5 0 21 9 HPV 16 Pos 26 7 4 15 26 7 4 15 HPV 18 45 Neg Apenas HPV 16 Pos 6 4 47 9 6 5 43 1 HPV 16 Neg Apenas HPV 18 45 0 0 12 0 0 12 HPV 18 45 Pos Pos 0 0 21 5 0 0 18 6 Positiva PVC os 0 0 0 1 0 0 0 1 HPV 16 e 18 45 P sia wee HPV 18 45 Pos bd Ao 0 0 93 4 0 0 93 1 Outros HPV de 3 6 3 83 1 2 1 83 HPV 16 18 45 N eg HR Pos 1 0 7 8 0 0 4 1 6 3 7 111 4 5 5 111 P N HPV de HR P os ou Neg e os 3 3 8 9 2 3 5 4 i 1 3 4 1319 0 0 319 HPV 16 18 45 N HPV de HR N Negativa eg e eg 0 4 2 3 0 0 0 8 Preval ncia 2 6 11 430 1 2 5 430 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo N A n o aplic vel Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 52 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System O risco relativo de doen a para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com resultados positivos vs negativos s o apresentados na Tabela 32 desvio de verifica o ajustado e na Tabela 33 n o ajustado Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 12 7 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 1
19. 21 6 es HPV 16 Pos HPV 16 e 100 2 2 50 0 1 2 wee HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 27 0 100 2 9 97 1 Outros HPV de 17 1 25 146 5 5 8 146 HRV 16 18 45 Neg HR Pos 12 7 21 7 2 8 8 6 20 5 45 219 9 1 20 219 Pos ou Neg HEV de DOR 17 9 23 0 7 5 10 2 4 2 7 166 0 6 1 166 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 1 9 7 6 0 0 2 7 Preval ncia 13 5 52 385 5 5 21 385 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 30 0 9 30 16 7 5 30 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 16 5 43 9 6 9 26 2 HPV 16 Pos Apenas HPV 50 0 7 14 21 4 3 14 HPV 18 45 Neg 16 Pos 24 2 74 2 5 1 41 6 HPV 16 Neg Apenas HPV 13 3 2 15 13 3 2 15 a HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 1 3 35 2 1 3 32 1 Positiva ee HPV 16 Pos HPV 16e 0 0 1 0 0 1 Ses HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 0 0 93 5 0 0 93 3 Outros HPV de 12 1 7 58 3 4 2 58 HPN 16 18 45 Neg HR Pos 5 7 19 5 0 5 8 5 18 2 16 88 8 0 7 88 Fos ou Neg HPV de HR Pos 13 4 22 3 4 6 10 0 1 8 3 163 0 6 1 163 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg ee oo os Preval ncia 7 6 19 251 3 2 8 251 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 33 3 5 15 20 0 3 15 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 12 4 55 0 4 1 36 0 HPV 16 Pos Apenas HPV 80 0 4 5 40 0 2 5 HPV 18 45 Neg 16 Pos 36 8 99 0 6 3 78 2 HPV 16 Neg Apenas HPV 10 0 1 10 10 0 1 10 HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 0 4 36 6 0 4 33 1 Positiva HPV 16 Pos HPV 16e gt 40 anos HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 0 0 0 0 Outros HPV de 3 2 1
20. 3 c lulas 96 6 100 97 7 100 C lulas SiHa 1 6 c lulas e Positiva 100 108 108 99 4 161 162 c lulas MS751 42 5 c lulas 96 6 100 96 6 99 9 C lulas SiHa 15 7 c lulas e Positiva 63 9 69 108 67 7 109 161 c lulas HeLa 0 3 c lulas 54 5 72 3 60 1 74 4 C lulas SiHa 15 7 c lulas e Positiva 98 1 106 108 92 0 149 162 c lulas MS751 4 3 c lulas 93 5 99 5 86 8 95 3 A a z 100 108 108 99 4 161 162 C lulas SiHa 1 6 c lulas Negativa 96 6 100 96 6 99 9 F E ais 71 3 77 108 92 5 149 161 C lulas HeLa 0 3 c lulas Positiva 62 1 79 0 87 4 95 7 o 86 1 93 108 69 1 112 162 C lulas MS751 4 3 c lulas Positiva 78 3 91 4 61 6 75 7 Pa E 100 107 107 99 4 160 161 Amostra clinica do HPV 16 2 Negativa 96 5 100 96 6 99 9 Ea ais 88 0 95 108 79 6 129 162 Amostra cl nica do HPV 18 45 2 Positiva 80 5 92 8 72 8 85 1 E x 100 108 108 100 162 162 C lulas SiHa 0 1 c lulas Negativa 96 6 100 97 7 100 E i 92 6 100 108 86 4 140 162 C lulas HeLa 0 02 c lulas Negativa 86 1 96 2 80 3 90 9 F x F 97 2 105 108 98 1 159 162 C lulas MS751 0 04 c lulas Negativa 92 1 99 1 94 7 99 4 ee E 100 108 108 99 4 161 162 Amostra cl nica do HPV 16 3 Negativa 96 6 100 96 6 99 9 Aa 80 6 87 108 81 5 132 162 Amostra clinica do HPV 18 45 3 Negativa 72 1 86 9 74 8 86 7 rae E 100 108 108 99 4 161 162 Amostra cl nica negat
21. 31 0 0 31 dC 16 18 45 Neg HR Pos 0 1 13 2 0 0 7 8 13 0 6 46 6 5 3 46 Pos ou Neg HPV de HR Pos 6 1 19 7 1 7 10 9 1 9 4 210 1 0 2 210 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 0 6 3 4 0 1 2 0 Preval ncia 3 9 10 256 2 0 5 256 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 47 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima O risco relativo de doen a para resultados positivos vs negativos do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima apresentado na Tabela 26 Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 11 1 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 22 8 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 2 1 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 4 0 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes Tabela 26 Popula o ASC US 2 21 anos Risco relativo de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resultad
22. HPV O Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay n o foi avaliado em casos de suspeita de abuso sexual A preval ncia de infec o por HPV numa popula o pode afectar o desempenho Os valores de progn stico positivo diminuem quando se examinam popula es com baixa preval ncia ou indiv duos sem risco de infec o Os esp cimes de citologia l quida ThinPrep com menos de 1 ml ap s a prepara o de l minas para o exame de Papanicolau ThinPrep s o considerados inadequados para o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima Os resultados dos testes podem ser afectados por uma colheita conserva o ou processamento de esp cimes incorrectos O Controlo Interno monitoriza os passos de captura do alvo amplifica o e detec o do ensaio N o se destina a controlar a adequa o da amostra do colo do tero Um resultado negativo do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima n o exclui a possibilidade de anormalidades citol gicas ou CIN2 CIN3 ou cancro subjacente ou no futuro O Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima proporciona resultados qualitativos Portanto n o se pode fazer uma correla o entre a magnitude de um sinal de ensaio positivo e o n vel de express o do mRNA num esp cime A detec o de mRNA do HPV de alto risco tipos 16 18 e 45 est dependente do numero de c pias presentes no esp cime e pode ser afectada pelos m todos de colheita do esp cime de factores do doente da fase da infec o e d
23. HPV de HR Pos vs 5 6 5 6 HPV de HR Neg 1 8 17 7 1 2 26 0 HPV de HR Pos vs 8 5 10 1 HPV de HR Neg 2 9 24 8 2 7 38 2 Preval ncia 0 9 0 5 Cl intervalo de confian a HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Tabela 12 Popula o NILM 2 30 anos Riscos relativos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay estimativas n o ajustadas 2CIN2 2CIN3 Interpreta o do teste do Aptima Assay Risco relativo Risco relativo CI de 95 CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 11 6 49 7 HPV de HR Neg 3 8 35 4 6 1 406 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 3 4 5 8 outro HPV de HR pos 1 3 9 0 1 7 20 0 Outro HPV de HR Pos vs 3 4 8 5 HPV de HR Neg 1 1 10 3 1 0 75 8 HPV de HR Pos vs 5 1 16 9 HPV de HR Neg 1 9 13 8 2 2 132 Preval ncia 2 5 20 803 1 4 11 803 Cl intervalo de confianga HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 33 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima As rela es de probabilida
24. HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Todas as amostras apresentaram resultados finais v lidos quando foi realizado o teste inicial ou ap s resolu o de resultados iniciais inv lidos por procedimento 44 mulheres realizaram a consulta de colposcopia no entanto n o foi poss vel determinar um diagn stico pelas seguintes raz es n o p de ser alcan ado consenso devido aos esp cimes inadequados n 28 n o foram colhidas biopsias devido a factores subjacentes n 13 n o foram colhidas nem analisadas biopsias devido a erro n 3 Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Tr s mulheres apresentavam adenocarcinoma in situ AIS Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 29 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima Das 515 mulheres com resultados positivos do Aptima HPV Assay e resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima 217 mulheres apresentavam um estado de doen a n o verificado incluindo indeterminado Tabela 8 Das 10 331 mulheres com resultados negativos do Aptima HPV Assay do ensaio CLEAR original 9826 apresentavam um estado de doen a n o verificado Devido a apenas terem sido encaminhadas para colposcopia mulheres seleccionadas aleatoriamente com resultados negativos para o Aptima HPV Assay e para o teste do DNA do HPV d
25. Volte a colocar a tampa no frasco de pl stico Anote as iniciais do operador e a data de reconstitui o na etiqueta Figura 2 Passo 7 k Deite fora o colarinho de reconstitui o e o frasco Figura 2 Passo 8 Advert ncia Evite formar espuma quando reconstituir os reagentes A espuma compromete o sensor de n vel no Panther System Nota Misture bem os Reagentes de Amplifica o Enzim tico de Sonda e de Selec o invertendo suavemente antes de carregar no sistema Evite formar espuma durante a invers o dos reagentes Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 16 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Panther System N fz or D gt fi CR 5 6 q a gi ial Y Figura 2 Processo de reconstitui o do Panther System 2 Prepare o Reagente de Capta o do Alvo de trabalho wTCR a b Emparelhe os frascos de TCR e de Controlo Interno IC adequados Verifique os n meros do lote de reagente na Ficha de C digos de Barras do Lote Principal para garantir que est o emparelhados os reagentes adequados do kit Abra o frasco de TCR e deposite a tampa numa superf cie de trabalho limpa e coberta Abra o frasco de IC e deite todo o conte do no frasco de TCR Uma pequena quantidade de l quido dever ficar no frasco de IC Tape o frasco de TCR e agite suavemente a solu o para misturar o conte do Evite formar espuma durante este passo Anote as inici
26. alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 27 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Os resultados para o risco relativo de doen a positivos vs negativos do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima s o apresentados na Tabela 5 Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 13 2 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 22 1 vezes mais probabilidade de ter 2ZCIN3 do que mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 2 0 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 3 8 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes Tabela 5 Popula o ASC US 2 21 anos Riscos relativos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay Interpreta o dos resultados do Aptima Assay 2CIN2 2CIN3 Risco relativo CI de 95 Risco relativo CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Positivo vs 13 2 22 1 HPV de HR Negativo 7 0 24 7 7 7 63 8 HPV 16 e ou 18 45 Positivo vs 2 0 3 8 outro HPV de HR positivo 1 3 3 1 1 8 7 8 Outro HPV de HR Positivo vs 6 5 5 9 HPV de HR Negativo 3 4
27. amplifica o mediada por transcri o Transcription Mediated Amplification TMA e detec o dos produtos de amplifica o pelo ensaio de protec o da hibrida o Hybridization Protection Assay HPA O ensaio incorpora um controlo interno Internal Control IC para controlar a capta o amplifica o e detec o do cido nucleico bem como o erro do operador ou do instrumento Os esp cimes s o colhidos ou transferidos para um tubo que cont m um meio de transporte de esp cimes Specimen Transport Media STM submete as c lulas ao processo de lise liberta o MRNA e o protege da degrada o durante a conserva o Quando se executa o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima o mRNA alvo isolado do esp cime atrav s da utiliza o de olig meros de capta o que est o ligados a micropart culas magn ticas Os olig meros de capta o cont m sequ ncias complementares para regi es espec ficas das mol culas alvo do MRNA do HPV bem como uma cadeia de res duos de desoxiadenosina Durante o passo de hibrida o as regi es espec ficas das sequ ncias dos olig meros de capta o ligam se a regi es espec ficas das mol culas alvo do mRNA do HPV O complexo do olig mero de capta o alvo ent o captado e retirado da solu o reduzindo a temperatura da reac o para a temperatura ambiente Esta redu o da temperatura permite que a hibrida o ocorra entre a regi o da desoxiadenosina no olig mero de capt
28. anos e idade superior com resultados citol gicos de NILM Foram analisadas mulheres provenientes de 18 cl nicas sobretudo cl nicas de obstetr cia ginecologia que abrangeram uma ampla distribui o geogr fica e uma popula o diversificada Durante o ensaio CLEAR foram testados esp cimes citol gicos de encaminhamento residuais com o Aptima HPV assay no Tigris DTS System e com um teste de DNA do HPV aprovado pela FDA Foram testados esp cimes citol gicos de encaminhamento residuais eleg veis do ensaio CLEAR com o Aptima HPV assay no Panther System Para o ensaio cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foram testadas amostras dos esp cimes citol gicos de encaminhamento residuais com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System Todas as mulheres no Estudo ASC US foram encaminhadas para colposcopia independentemente dos seus resultados do teste de HPV Foi obtida uma curetagem endocervical ECC biopsia e biopsias cervicais por pun o 1 biopsia de cada um dos 4 quadrantes Caso fosse vis vel uma les o era obtida uma biopsia por pun o m todo direccionado 1 biopsia por les o e quadrantes sem uma les o vis vel foram submetidos a biopsia na jun o escamo colunar m todo aleat rio No Estudo NILM as mulheres positivas com o Aptima HPV assay no Tigris DTS System e ou com o teste do DNA do HPV aprovado pela FDA bem como as mulheres seleccionadas aleatoriamente que tinham sido negativas c
29. cruzada reactividade cruzada Bact rias Acinetobacter Iwoffii 1x10 CFU ml Lactobacillus acidophilus 1x10 CFU ml Actinomyces israelii 1x10 CFU ml Lactobacillus crispatus 1x10 CFU ml Alcaligenes faecalis 1x10 CFU ml Listeria monocytogenes 1x10 CFU ml Atopobium vaginae 1x10 CFU ml Mobiluncus curtisii 1x10 CFU ml Bacteroides fragilis 1x10 CFU ml Mycoplasma genitalium 2 5x10 c pias ml Bifidobacterium adolescentis 1x10 CFU ml Mycoplasma hominis 1x10 CFU ml Campylobacter jejuni 1x10 CFU ml Neisseria gonorrhoeae 1x10 CFU ml Chlamydia trachomatis 1x10 IFU ml Peptostreptococcus magnus 1x10 CFU ml Clostridium difficile 1x10 CFU ml Prevotaella bivia 1x10 CFU ml Corynebacterium genitalium 1x10 CFU ml Propionibacterium acnes 1x10 CFU ml Cryptococcus neoformans 1x10 CFU ml Proteus vulgaris 1x10 CFU ml Enterobacter cloacae 1x10 CFU ml Pseudomonas aeruginosa 1x10 CFU ml Enterococcus faecalis 1x10 CFU ml Staphylococcus aureus 1x10 CFU ml Escherichia coli 1x10 CFU ml Staphylococcus epidermidis 1x10 CFU ml Fusobacterium nucleatum 1x10 CFU ml Streptococcus agalactiae 1x10 CFU ml Gardnerella vaginalis 1x10 CFU ml Streptococcus pyogenes 1x10 CFU ml Haemophilus ducreyi 1x10 CFU ml Ureaplasma urealyticum 1x10 CFU ml Klebsiella pneumoniae 1x10 CFU ml Gen tipos de HPV de alto risco nao visados HPV 31 2 5x10 c pias ml HPV 56 2 5x10 c pias ml HPV 33 2 5x10 c pias ml HPV 58 2 5x1
30. do HPV Negativa oa 5 00 8 Or OO Amostra cl nica negativa 2 do HPV Negativa 068100 Or OO HPV negativo em PreservCyt 1 Negativa 065100 OPT 100 HPV negativo em PreservCyt 2 Negativa Mees 100 Or 100 Cl Intervalo de Confian a da Pontua o Nota A concord ncia percentual pode ter sido afectada por varia es na aditiva o dilui o e ou aliquotagem Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 59 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima Reactividade cruzada Os testes de organismos potencialmente com reactividade cruzada para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foram realizados utilizando o Tigris DTS System Consulte os resultados em Reactividade cruzada Tabela 20 na sec o Tigris DTS System Interfer ncia Foi realizado o teste com potenciais subst ncias de interfer ncia para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima utilizando o Tigris DTS System Consulte Interfer ncia Tabela 21 na sec o Tigris DTS System para obter resultados Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 60 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Bibliografia Bibliografia 1 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Walboomers J M M V Jacobs M M Manos F X Bosch J A Kummer K V Shah P J Snijders J Peto C J Meijer N Mufioz 1999 Human papillomavirus is a necessary cause of inva
31. do instrumento durante a realiza o do ensaio Uma execu o inv lida tem de ser repetida As execu es abortadas devem ser repetidas Crit rios de aceita o do calibrador A tabela abaixo define os crit rios de RLU para as r plicas dos Calibradores Negativo e Positivo Tigris DTS System Panther System Calibrador negativo 18 45 RLU 2 0 e lt 60000 RLU 2 0 e lt 60 000 RLU IC 16 RLU gt 75 000 e lt 300 000 RLU 2 75 000 e lt 300 000 RLU Calibrador positivo 1 18 45 RLU 2 850 000 e lt 2 200 000 RLU 2 800 000 e lt 2 200 000 RLU IC 16 RLU lt 475 000 RLU lt 475 000 RLU Calibrador positivo 2 18 45 RLU lt 115 000 RLU lt 115 000 RLU IC 16 RLU 2 625 000 e lt 4 000 000 RLU 2 625 000 e lt 4 000 000 RLU Cutoff do IC O cutoff do IC determinado a partir do sinal do analito do IC 16 das r plicas v lidas do calibrador negativo Cutoff do IC 0 5 x RLU m dia do IC 16 das r plicas v lidas do calibrador negativo Cutoff do analito 16 O cutoff do analito para o HPV 16 determinado a partir do sinal do IC 16 RLU das r plicas v lidas do calibrador negativo e das r plicas v lidas do calibrador positivo 2 2 x RLU m dia do IC 16 das r plicas v lidas do calibrador negativo Cutoff do analito 16 as am A a 0 1 x RLU m dia do IC 16 das r plicas v lidas do calibrador positivo 2 Cutoff do analito 18 45 O cutoff do analito para o HPV 18 45 determinado a p
32. e n o s instala es de testes Os esp cimes colhidos transferidos a qualquer momento antes destas datas de validade s o v lidos para efeitos de testes desde que tenham sido transportados e conservados de acordo com o folheto informativo apropriado mesmo que estas datas de validade tenham passado Os esp cimes podem ser infecciosos Empregue Precau es Universais ao executar este ensaio Os m todos de manuseamento e elimina o adequados devem ser estabelecidos pelo director do laborat rio Apenas o pessoal com a devida forma o no manuseamento de materiais infecciosos deve ter permiss o para realizar este procedimento Evite a contamina o cruzada durante os passos de manuseamento dos esp cimes Certifique se de que os recipientes de esp cimes n o entram em contacto uns com os outros e deite fora os materiais usados sem pass los por cima de recipientes abertos Mude de luvas se elas entrarem em contacto com o esp cime Pode verificar se descarga de l quido das tampas do tubo ap s a perfura o em determinadas condi es Consulte o Procedimento de Teste do Tigris DTS System Tigris DTS System Test Procedure ou o Teste de Procedimento do Panther System Panther System Test Procedure para obter mais informa o Os esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep e de Colheita e Transporte de Esp cimes do Colo do Utero Cervical Specimen Collection and Transport CSCT devem ser rejeitados se tiver sido deixado um d
33. esp cime dilu do para mistur lo evite a cria o de espuma Teste o esp cime dilu do em conformidade com o procedimento de ensaio padr o Nota N o dilua um esp cime dilu do inv lido Se um esp cime dilu do produzir um resultado inv lido dever ser obtido um novo esp cime do doente Resultado do Ensaio dos gen tipos do Crit rios HPV 16 18 45 Aptima RLU do IC HPV 16 2 cutoff do IC e S CO do HPV 16 lt 1 00 e S CO do HPV 18 45 lt 1 00 S CO do HPV 16 lt 1 00 e S CO do HPV 18 45 gt 1 00 e RLU do HPV 18 45 lt 3 000 000 S CO HPV 16 gt 1 00 e RLU do IC HPV 16 lt 4 000 000 e S CO do HPV 18 45 lt 1 00 S CO HPV 16 gt 1 00 e Positivo 16 RLU do IC HPV 16 lt 4 000 000 e Positivo 18 45 S CO do HPV 18 45 gt 1 00 e RLU do HPV 18 45 lt 3 000 000 S CO do HPV 16 lt 1 00 e S CO do HPV 18 45 lt 1 00 e RLU do IC HPV 16 lt cutoff do IC Negativa 16 Negativa 18 45 Negativa 16 Positivo 18 45 Positivo 16 Negativa 18 45 Invalida ou RLU do IC HPV 16 gt 4 000 000 ou RLU do HPV 18 45 gt 3 000 000 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 21 AW 11504 601 Rev 002 PT Limita es Aptima Limita es A Q Os tipos de esp cimes que n o estejam identificados na utiliza o prevista n o foram avaliados O desempenho do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima n o foi avaliado para indiv duos vacinados contra o
34. local x 3 instrumentos x 3 operadores x 3 lotes x 2 listas de trabalho x 3 r plicas Os membros do painel encontram se descritos na Tabela 40a e na Tabela 40b juntamente com um resumo da concord ncia com resultados previstos para o HPV 16 e HPV 18 45 respectivamente Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 57 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Tabela 40a Precis o do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Estudo 1 e 2 Descri o do painel e concord ncia percentual com os resultados previstos do HPV 16 ns Resultados Concord ncia percentual Cl de 95 Descri o do painel r vistos do c pias ou c lulas reac o p HBO Estudo 1 Estudo 2 3 locais de teste 1 local de teste IVT de HPV 16 240 c pias Positiva e 6 100 OT 100 IVT de HPV 18 260 c pias Negativa 085100 Or 100 IVT de HPV 45 350 c pias Negativa Mo Y PAra e a ie Amostra clinica do HPV 16 1 Positiva 088100 OPT 100 Amostra clinica do HPV 18 45 1 Negativa 088100 OPT 100 C lulas SiHa 4 c lulas e E 100 108 108 100 162 162 c lulas HeLa 0 7 c lulas 96 6 100 97 7 100 C lulas SiHa 0 4 c lulas e ER 99 1 107 108 97 5 158 162 c lulas HeLa 7 c lulas 94 9 99 8 94 0 99 1 C lulas SiHa 0 4 c lulas Positiva aa q asr aa a F C lulas HeLa 0 7 c lulas Negativa 088100
35. menos que a os calibradores n o sejam v lidos b o respectivo kit de reagente de ensaio seja removido do Panther System c o respectivo kit de reagente de ensaio tenha ultrapassado os limites de estabilidade As tentativas de pipetar mais de duas r plicas a partir de um tubo do calibrador podem originar erros de volume insuficiente Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 18 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Panther System B Temperatura A temperatura ambiente define se como uma temperatura entre 15 C e 30 C C P das luvas Como em qualquer sistema de reagentes o excesso de p nalgumas luvas pode causar a contamina o de tubos abertos E recomendada a utiliza o de luvas sem p Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 19 AW 11504 601 Rev 002 PT Procedimentos de controlo de qualidade Aptima Procedimentos de controlo de qualidade A Crit rios de validade da execu o O software determina automaticamente a validade da execu o O software invalida uma execu o se qualquer das seguintes condi es ocorrer e Mais de uma r plica de Calibrador Negativo inv lido e Mais de uma r plica de Calibrador Positivo 1 inv lido e Mais de uma r plica de Calibrador Positivo 2 inv lido e Mais do que 1 de 6 r plicas de calibradores inv lidas combinadas Uma execu o pode ser invalidada por um operador se forem observadas e documentadas dificuldades t cnicas do operador ou
36. no Panther System Sessenta e sete 67 mulheres tinham 2CIN2 e 30 tinham 2CIN3 Das 353 mulheres suscept veis de serem avaliadas com resultados positivos do Ensaio do HPV Aptima no Panther System 118 mulheres registaram resultados positivos no Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System indicando a presen a do HPV 16 e ou do HPV 18 45 235 registaram resultados negativos indicando a presen a de um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco conforme detectado pelo Aptima HPV assay ou seja HPV do tipo 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 e 68 Um n mero adicional de 539 mulheres suscept veis de serem avaliadas com 21 anos ou idade superior com resultados citol gicos ASC US registaram resultados negativos com o Aptima HPV assay no Panther System Um resultado negativo com o Aptima HPV assay indica que nenhum dos 14 tipos de HPV de alto risco se encontram presentes e foram designados como negativos para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System para fins de an lise A preval ncia de 2CIN2 e 2CIN3 em mulheres suscept veis de serem avaliadas com resultados citol gicos de ASC US foi de 9 1 e 3 8 respectivamente Com base em testes efectuados com o Panther System os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima de acordo com o resultado do Aptima HPV assay e o consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia s o apresentados na Tabela 23 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 1
37. o alcan ar a temperatura ambiente antes de serem utilizadas a Emparelhe cada solu o de reconstitui o com o respectivo reagente liofilizado Certifique se de que a solu o de reconstitui o e o reagente t m cores de etiqueta correspondentes antes de aplicar o colarinho de reconstitui o b Verifique os n meros do lote na Ficha de C digos de Barras do Lote Principal para garantir que est o emparelhados os reagentes adequados c Abra o frasco do reagente liofilizado e insira bem a extremidade com entalhe do colarinho de reconstitui o na abertura do frasco Figura 2 Passo 1 d Abra a solu o de reconstitui o correspondente e coloque a tampa sobre uma superf cie de trabalho limpa e coberta e Segurando o frasco de solu o na bancada insira bem a outra extremidade do colarinho de reconstitui o no frasco Figura 2 Passo 2 f Inverta suavemente os frascos montados Deixe a solu o vazar do frasco para o frasco de vidro Figura 2 Passo 3 g Agite suavemente a solu o no frasco para mistur la bem Evite criar espuma quando agitar o frasco Figura 2 Passo 4 h Aguarde que o reagente liofilizado se dissolva e depois inverta novamente os frascos montados inclinando os a um ngulo de 45 para minimizar a forma o de espuma Figura 2 Passo 5 Deixe o l quido vazar todo de novo para o frasco de pl stico i Retire o colarinho de reconstitui o e o frasco de vidro Figura 2 Passo 6 j
38. o se dissolva novamente temperatura ambiente aque a o a uma temperatura maxima de 60 C durante 1 ou 2 minutos N o utilize se houver precipitado ou nebulosidade Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 17 AW 11504 601 Rev 002 PT Panther System Aptima 3 Seo wTCR contiver precipitado aque a o wTCR a uma temperatura de 42 C a 60 C durante um m ximo de 90 minutos Deixe o wTCR equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado persistir Se o Reagente de Selec o contiver precipitado aque a o Reagente de Selec o a 60 C 1 C por um m ximo de 45 minutos para facilitar a dissolu o do precipitado Misture o frasco suavemente a cada 5 a 10 minutos Deixe o Reagente de Selec o equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado ou a nebulosidade persistir Misture bem cada reagente invertendo o suavemente antes de o colocar no sistema Evite formar espuma durante a invers o dos reagentes N o ateste frascos de reagente O Panther System reconhece e rejeita os frascos que tenham sido atestados D Manuseamento de amostras 1 Permita que as amostras calibradores esp cimes e quaisquer amostras de qualidade de controlo externas fornecidas pelo utilizador alcancem a temperatura ambiente antes de iniciar o processamento N o coloque as amostras no agitador Inspeccione os tubos de amostra antes de os carregar no su
39. precipitado ou nebulosidade Se o wTCR contiver precipitado aque a o wTCR a uma temperatura de 42 C a 60 C durante um m ximo de 90 minutos Deixe o wTCR equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado persistir Se o Reagente de Selec o contiver precipitado aque a o Reagente de Selec o a 60 C 1 C por um m ximo de 45 minutos para facilitar a dissolu o do precipitado Misture o frasco suavemente a cada 5 a 10 minutos Deixe o Reagente de Selec o equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado ou a nebulosidade persistir Misture bem cada reagente invertendo o suavemente antes de ser colocado no sistema Evite formar espuma durante a invers o dos reagentes N o ateste frascos de reagente O Tigris DTS System reconhece e rejeita os frascos que tenham sido atestados D Manuseamento de amostras 1 2 3 Deixe as amostras calibradores e esp cimes alcan ar a temperatura ambiente antes de serem processadas N o coloque as amostras no agitador Inspeccione os tubos de amostras antes de os colocar no suporte Se um tubo de amostra contiver bolhas ou um volume mais inferior ao normalmente observado centrifugue o tubo durante 5 minutos a 420 RCF para garantir que n o h l quido na tampa Nota O n o seguimento do passo 3 pode resultar em descarga de l quido pela tampa do tubo de amostra E Prepara o do sistema Confi
40. r plicas Foram testadas 30 r plicas de cada n vel de c pias para pain is de linhas de c lulas com cada um dos dois lotes de reagentes para um n mero total de 60 r plicas Os testes foram efectuados durante oito dias com um m nimo de tr s execu es realizadas em cada dia e cinco r plicas para um determinado gen tipo testado em cada execu o O limite de detec o de 95 Tabela 39 foi calculado a partir da an lise de regress o Probit dos resultados de positividade para cada painel de dilui o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 56 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Tabela 39 Limite de Detec o no cutoff cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Alvo Limite de detec o CI de 95 HPV 16 23 7 19 1 30 9 HPV 18 26 1 21 2 33 9 HPV 45 34 5 28 5 43 6 SiHa 0 4 0 3 0 7 HeLa 0 7 0 4 1 4 MS751 0 2 0 1 0 3 c pias por reac o para transcritos in vitro e c lulas por reac o para linhas celulares Precis o do Ensaio A precis o do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi avaliada em dois estudos utilizando o mesmo painel de 24 membros O Estudo 1 foi realizado em 3 locais de teste externos a fim de determinar a reprodutibilidade do ensaio O Estudo 2 foi realizado internamente com o objectivo de determinar a precis o em laborat rio O painel incluiu dezassete membros do HPV 16 e ou 18 45 po
41. tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 26 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Tabela 4 Popula o ASC US 2 21 anos Riscos absolutos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay por grupo et rio 21 a 29 anos 30 a 39 anos 2 40 anos Resultado 2CIN2 2CIN3 Resultado do ensaio x do Aptima Interpreta o Risco absoluto Risco absoluto AHPV GT HPV Assay CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 26 8 19 71 15 5 11 71 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 18 3 35 7 9 3 21 8 HPV 16 Pos 28 0 14 50 18 0 9 50 HPV 18 45 Neg Apenas HPV 16 Pos 17 5 39 6 9 9 26 9 HPV 16 Neg Apenas HPV 15 8 3 19 5 3 1 19 HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 3 7 36 3 0 2 22 5 SORIANA HPV 16 P 100 2 2 50 0 1 2 os HPV 18 45 Pos HPV 16 e 18 45 Pos 27 0 100 2 9 97 1 Outros HPV de 17 0 25 147 5 4 8 147 HPV 16 18 49 Neg HR Pos 12 6 21 5 2 8 8 5 20 2 44 218 8 7 19 218 Pos ou Neg HPV de HR Pos 17 6 22 5 7 1 9 8 3 3 6 6 165 0 6 1 165 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg
42. tipos do HPV 16 18 45 Aptima AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Os riscos absolutos de doen a ajustados 2CIN2 e 2CIN3 segundo o resultado do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 e o resultado do Aptima HPV assay s o apresentados na Tabela 30a O risco de 2CIN2 em mulheres com HPV do tipo 16 18 e ou 45 presente foi de 10 8 comparativamente a 3 8 em mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes e 1 0 em mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Os riscos absolutos da doen a n o ajustados s o apresentados em geral na Tabela 30b e de acordo com o grupo et rio na Tabela 31 Tabela 30a Popula o NILM 2 30 anos Risco absoluto de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas ajustadas do desvio de verifica o 2CIN2 2CIN3 Resultado do Resultado do iniarbidlic o E Aptima HPV Assay Ensaio AHPV GT p Risco absoluto Risco absoluto CI de CI de 95 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 9 7 8 5 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 4 6 20 2 3 8 19 2 HPV 16 Pos 10 4 10 3 HPV 18 45 Neg Apenas HEN AD Pos 4 0 27 1 3 9 27 1 HPV 16 Neg Apenas HPV 18 45 8 8 6 5 m HPV 18 45 Pos Pos 2 9 26 4 1 7 25 1 Positiva HPV 16 Pos HPV 16 e 0 0 0 0 HPV 18 45 Pos 18 45 Pos Outros HPV de 3 2 1 8 HPV 16 18 45 Neg HR Pos 1 6 6 3 0 6 4 9 4 6 3 2 Pos ou Neg HPV de
43. 0 c pias ml HPV 35 2 5x10 c pias ml HPV 59 2 5x10 c pias ml HPV 39 2 5x10 copias ml HPV 66 2 5x10 c pias ml HPV 51 2 5x10 c pias ml HPV 68 2 5x10 c pias ml HPV 52 2 5x10 c pias ml Leveduras protozo rios Candida albicans 1x10 CFU ml Trichomonas vaginalis 1x10 c lulas ml Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 40 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Tabela 20 Painel de especificidade anal tica Organismos e concentra o sem reactividade cruzadas continua o Concentra o Concentra o Organismo de teste sem Organismo de teste sem reactividade cruzada reactividade cruzada V rus Adenovirus 5 25x10 PFU ml HIV 1 2 5x10 c pias ml Citomegalov rus 1 58x10 TCIDso ml V rus Herpes simplex 1 3 39x10 TCIDso ml V rus Epstein Barr 1 59x10 TDso ml V rus Herpes simplex 2 2 29x10 TCIDso ml Outros gen tipos de HPV n o visados HPV 6 2 5x10 c pias ml HPV 53 2 5x10 c pias ml HPV 11 2 5x10 c pias ml HPV 67 2 5x10 c pias ml HPV 26 2 5x10 c pias ml HPV 69 2 5x10 c pias ml HPV 30 2 5x10 copias ml HPV 70 2 5x10 c pias ml HPV 34 2 5x10 copias ml HPV 73 2 5x10 c pias ml HPV 42 2 5x10 c pias ml HPV 82 2 5x10 c pias ml HPV 43 2 5x10 c pias ml HPV 85 2 5x10 c pias ml HPV 44 2 5x10 c pias ml CFU unidades formado
44. 2 0 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 3 9 vs outro HPV de HR positivo 0 7 5 4 vs outro HPV de HR positivo 1 6 9 5 Outro HPV de HR Positivo 6 6 Outro HPV de HR Positivo 3 2 vs HPV de HR Negativo 1 6 27 1 vs HPV de HR Negativo 0 8 12 8 HPV de HR Positivo 10 7 HPV de HR Positivo 7 4 vs HPV de HR Negativo 3 3 35 1 vs HPV de HR Negativo 2 3 24 3 Preval ncia 4 0 Preval ncia 5 0 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 55 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com colheita e transporte de esp cimes cervicais O desempenho do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi avaliado utilizando amostras CSCT colhidas em mulheres encaminhadas para uma consulta de acompanhamento devido a um resultado de Papanicolau anormal Os esp cimes foram inicialmente testados com o Aptima HPV assay n 651 Esp cimes com um resultado positivo com o Aptima HPV assay n 414 foram posteriormente testados com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima tanto no Tigris DTS System como no Panther System A concord ncia cl nica do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a detec o de HPV 16 18 e 45 de alto risco para o Panther System foi determinada com base no resultado do Tigris DTS System como m todo de refer ncia Foram calculadas percentagens de concord ncia positivas e negativas e foram associadas pontua es de intervalos de con
45. 3 HPV 18 45 Pos HEV 10 618745 FOS 15 2 98 2 1 8 84 6 Outros HPV de 14 0 33 235 4 3 10 235 HPM 16 1845 Neg HR Pos 10 7 17 7 2 3 6 7 19 0 67 353 8 5 30 353 Pos ou Neg HPV de HR Pos 16 21 i 2 9 6 f F 2 6 14 539 0 7 4 539 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 1 5 4 0 0 2 1 6 a 9 1 3 8 pevalonele 81 892 34 892 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 46 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Tabela 25 Popula o ASC US 2 21 anos Risco absoluto de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay por grupo et rio Resultado 2CIN2 2CIN3 Resultado do da do Aptima HPV Ensaio AHPV GT Interpreta o Risco absoluto Risco absoluto Assay CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 27 4 20 73 16 4 12 73 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 19 0 36 2 10 3 22 5 HPV 16 Pos Apenas HPV 29 4 15 51 19 6 10 51 HPV 18 45 Neg 16 Pos 18 8 41 1 11 3 28 5 HPV 16 Neg Apenas HPV 15 0 3 20 5 0 1 20 Positiva HPV 18 45 Pos 18 45 Pos 3 6 34 6 0 2
46. 3 7 0 5 0 0 3 25 2 0 5 0 3 0 4 1 21 301 15 301 1 301 76 301 16 3509 12 3509 0 3509 144 3509 N A N o aplic vel HR alto risco Pos positivo Tipos de HPV 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 e 68 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 23 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Desenho do estudo cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep O Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi avaliado utilizando encaminhamentos de esp cimes de Papanicolau colhidos em mulheres que expressaram o seu consentimento durante o estudo cl nico americano multic ntrico e prospectivo conhecido por CLEAR O ensaio CLEAR foi executado para determinar o desempenho cl nico do Aptima HPV Assay na detec o de neoplasia intraepitelial cervical de grau 2 ou doen a cervical mais grave 2CIN2 As mulheres foram inscritas tanto no Estudo ASC US como no Estudo NILM com base nos seus resultados de encaminhamento baseados em citologia l quida ThinPrep provenientes de rastreios de rotina ao cancro do colo do tero A popula o do Estudo ASC US incluiu mulheres com 21 anos e idade superior com resultados citol gicos de ASC US e a popula o do Estudo NILM incluiu mulheres com 30 anos e idade superior com resultados citol gicos de NILM Foram analisadas mulheres p
47. 45 231 apresentaram resultados negativos indicando a presen a de um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco conforme detectado pelo Aptima HPV Assay ou seja HPV do tipo 31 33 35 39 51 52 56 58 59 66 e 68 545 outras mulheres suscept veis de serem avaliadas com 21 anos ou idade superior com resultados de citologia ASC US apresentaram resultados negativos do Aptima HPV Assay durante o ensaio CLEAR Um resultado de Aptima HPV Assay negativo indica que nenhum dos 14 tipos de HPV de alto risco se encontram presentes e foram designados como negativos para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade desta an lise A preval ncia de 2CIN2 e 2CIN3 em mulheres suscept veis de serem avaliadas com resultados de citologia de ASC US foi de 8 8 e 3 7 respectivamente Os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima pelo resultado do Aptima HPV Assay e o consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia s o apresentados na Tabela 2 Tabela 2 Popula o ASC US 2 21 anos Resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay pelo consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado do Consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado do Aptima HPV Interpreta o E Assay ensaio AHPV GT Indeterminado Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancro Total HPV 16 Pos HPV 18 45 Neg HPV 16 Pos 1 27 18 11 14 0
48. 45 Neg 1 q 137 133 Total 126 44 9 199 378 Pos Positivo Neg Negativo Concord ncia positiva 98 3 176 179 95 CI 95 2 99 4 Concord ncia negativa 99 0 197 199 95 CI 96 4 99 7 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 36 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Sensibilidade anal tica O limite de detec o Limit of Detection LOD no cutoff cl nico uma concentra o que positiva acima do cutoff cl nico 95 das vezes O LOD do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi determinado testando esp cimes de citologia l quida cl nicos negativos individuais ThinPrep aditivados com transcritos de HPV in vitro em diversas concentra es Trinta r plicas de cada n vel de c pias foram testadas com cada um de tr s lotes de reagente para um total de 90 r plicas O teste foi efectuado durante 6 dias com tr s execu es efectuadas por dia e 5 r plicas de um determinado gen tipo testado em cada execu o O limite de detec o de 95 Tabela 18 foi calculado a partir da an lise de regress o Probit dos resultados de positividade para cada painel de dilui o Tabela 18 Limite de Detec o no cutoff cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Ave Limite de Detec o CI de 95 HPV 16 57 3 46 5 74 6 HPv 18 84 8 66 1 115 6 HPV 45 60 0 46 6 82 3 SiHa 1 2 0 9 1 7 HeLa 0 4 0 3 0 5
49. 6 18 45 Aptima por dia durante 3 dias O teste foi executado utilizando 1 lote de reagente Cada lista de trabalho continha 3 r plicas de cada um dos membros do painel de reprodutibilidade Foram testados cento e oito 108 tubos de amostra individuais para cada membro do painel 3 locais x 1 instrumento x 2 operadores x 1 lote x 2 listas de trabalho por dia x 3 dias x 3 r plicas No Estudo 2 o teste foi efectuado internamente durante 20 dias com um total de 162 reac es testadas para cada membro do painel 1 local x 3 instrumentos x 3 operadores x 3 lotes x 2 listas de trabalho x 3 r plicas Os membros do painel encontram se descritos na Tabela 19a e na Tabela 19b juntamente com um resumo da concord ncia com resultados previstos para o HPV 16 e HPV 18 45 respectivamente Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 37 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Tabela 19a Precis o do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Estudo 1 e 2 Descri o do painel e concord ncia percentual com os resultados previstos do HPV 16 Les Resultados Concord ncia percentual Cl de 95 Descri o do painel c lulas reac o previstos do Estudo 1 Estudo 2 HPV 16 3 locais de teste 1 local de teste C lulas SiHa 3 0 c lulas Positiva do or C lulas HeLa 0 6 c lulas Negativa o oo C lulas MS751 11 0 c lulas
50. 71 HPV 16 Neg HPV 18 45 Posti HPV 18 45 Pos Pos 3 Es 14 3 E i H Daki HPV 16 Pos HPV 16 e F E i i E HPV 18 45 Pos 18 45 Pos HPV 16 Neg Outros HPV HPV 18 45 Neg de HR Pos tes 13 es 9 233 Total 6 176 105 38 28 1 354 HPV 16 18 45 HPV de Negativa Neg HR Neg 13 458 75 8 4 0 558 Total 19 634 180 46 32 q aise 912 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima CIN1 neoplasia intraepitelial cervical de grau 1 HR alto risco Neg Negativo Pos Positivo Todas as amostras apresentaram resultados finais v lidos quando foi realizado o teste final ou ap s resolu o de resultados iniciais inv lidos por procedimento 19 mulheres realizaram a consulta de colposcopia no entanto n o foi poss vel determinar um diagn stico pelas seguintes raz es lt 5 de esp cimes de biopsia obtidos todos com resultados de histologia normais CIN1 n 15 n o foram colhidas biopsias n 3 e l minas da biopsia perdidas n 1 Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Uma mulher apresentava adenocarcinoma in situ AIS Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima O risco absoluto de doen a 2CIN2 e 2CIN3 de acordo com o resultado do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Ap
51. 8 4 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 2 9 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 3 8 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes Tabela 32 Popula o NILM 2 30 anos Risco relativo de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas ajustadas do desvio de verifica o 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resultados do Ensaio Aptima Risco relativo Risco relativo CI de 95 CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 12 9 53 3 HPV de HR Neg 3 1 54 6 1 5 gt 999 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 3 0 4 8 outro HPV de HR pos 1 1 8 8 1 2 19 2 Outro HPV de HR Pos vs 4 3 11 0 HPV de HR Neg 1 2 15 1 0 4 289 2 HPV de HR Pos vs 6 1 20 2 HPV de HR Neg 1 8 21 0 0 7 567 7 Preval ncia 1 1 0 8 Cl intervalo de confian a HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Tabela 33 Popula o NILM 2 30 anos Risco relativo de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas n o ajustadas 2CIN2 2CIN3 Interpreta
52. 8 45 Aptima 45 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima Tabela 23 Popula o ASC US 2 21 anos Resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay de acordo com o consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado do Consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia E Resultado do o Aptima HPV E Interpreta o 2 Assay Ensaio AHPV GT Indeterminado Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancro Total HPV 16 Pos HPV 18 45 Neg HPV 16 Pos 1 26 18 11 15 0 71 HPV 16 Neg HPV 18 45 Positiva HPV 18 45 Pos Pos 23 18 2 3 HPV 16 Pos HPV 16 e HPV 18 45 Pos 18 45 Pos o 1 o i 0 HPV 16 Neg Outros HPV de HPV 18 45 Neg HR Pos A 192 70 23 10 0 Zot Total 6 182 104 37 29 1 359 x HPV 16 18 45 HPV de Negativa Neg HR Neg 13 450 75 10 4 0 552 Total 19 632 179 47 33 RS 911 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima CIN1 neoplasia intraepitelial cervical de grau 1 HR alto risco Neg Negativo Pos Positivo Todas as amostras apresentaram resultados finais ap s o teste final ou ap s resolu o de resultados iniciais inv lidos por procedimento 19 mulheres compareceram na consulta de colposcopia no entanto n o foi poss vel determinar um diagn stico pelas seguintes raz es lt 5 de esp cimes de biopsia obtidos todos com resultados de histologia normais CIN1
53. AL2 Calibrador Positivo 2 do HPV 16 18 45 5 frascos Transcrito in vitro n o infeccioso do HPV 16 a 1000 c pias por ml numa solu o tamp o contendo lt 5 de detergente NCAL Calibrador Negativo do HPV 16 18 45 5 frascos Solu o tamp o contendo lt 5 de detergente Materiais necess rios mas dispon veis separadamente Nota Os materiais dispon veis na Aptima t m a indica o do c digo de produto a menos que seja especificado em contr rio Panther System Kit de Execu es Panther Kit de Fluidos de Ensaio Aptima Solu o de Lavagem Aptima Tamp o Aptima para Fluido de Desactiva o e Reagente de leo Aptima Kit Aptima Auto Detect Unidades Multitubos MTU Kit do Saco de Res duos Panther Tampa do Recipiente de Res duos Panther Pontas condutoras de 1000 ul detec o de l quido Kit de Transfer ncia de Esp cimes Aptima Kit Aptima de Colheita e Transporte de Esp cimes Cervicais Tampas Perfur veis Aptima Tampas n o perfur veis de substitui o Tampas sobresselentes para kits de 100 testes Solu es de reconstitui o do Reagente de Amplifica o e do Reagente de Sonda Solu o de reconstitui o do Reagente Enzim tico TCR e Reagente de Selec o Lix via m nimo de 5 ou 0 7 M de solu o de hipoclorito de s dio Luvas descart veis Kit de Solu o de Transfer ncia Aptima apenas para esp cimes SurePath Materiais opcionais Intensificador de Lix via para limpeza C digo de Pro
54. CIN1 CIN2 CIN3 Cancro Total HPV 16 Pos HPV 18 45 Neg HPV 16 Pos 2 28 0 0 3 1 34 HPV 16 Neg a HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 1 28 1 1 0 2 33 HPV 16 Pos HPV 16 e HPV 18 45 Pos 18 45 Pos i E q 0 o HPV 16 Neg Outros HPV de HPV 18 45 Neg HR Pos n 175 E i q 205 Total 14 232 13 4 7 3 273 Negativa a HPV de HR Neg 31 527 16 5 1 0 580 Total 45 759 29 9 8 pd 853 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo Todas as amostras apresentaram resultados finais v lidos quando foi realizado o teste inicial ou ap s resolu o de resultados iniciais inv lidos por procedimento 45 mulheres compareceram na consulta de colposcopia no entanto n o foi poss vel determinar um diagn stico pelas seguintes raz es n o p de ser alcan ado consenso devido a esp cimes inadequados n 29 n o foram colhidas biopsias devido a factores subjacentes n 13 n o foram colhidas nem analisadas biopsias devido a erro n 3 Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Tr s mulheres apresentavam adenocarcinoma in situ AIS Ensaio dos genotipos do HPV 16 18 45 Aptima AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima Das 491 mulheres com resultados positivos no Aptima HPV assay no Panther System e resultados do Ensaio dos ge
55. Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi categorizada em geral de acordo com o grupo et rio e com o local de teste Os resultados s o apresentados na Tabela 1 para as popula es de c lulas escamosas at picas de significado indeterminado Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance ASC US e negativo para les o intraepitelial ou malignidade Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy NILM Tabela 1 Preval ncia de mRNA do HPV de alto risco em popula es de acordo com o grupo et rio local de teste e todas em conjunto Taxa de positividade x n Popula o ASC US Popula o NILM 2 21 anos 2 30 anos HPV 16 HPV 18 45 HPV 16e Outros 11 de HPV 16 HPV 18 45 HPV 16e Outros 11 de Pos Pos 18 45 Pos HR Pos Pos Pos 18 45 Pos HR Pos Tudo 7 8 5 2 0 3 25 5 0 4 0 4 0 3 9 71 912 47 912 3 912 233 912 47 10 846 47 10 846 0 10 846 421 10 846 Grupo etario anos 13 2 4 9 0 5 38 3 aha 51 386 19 386 2 386 148 386 WA NA NA NA 30 a 39 5 4 7 0 0 4 21 8 0 7 0 6 0 5 3 14 257 18 257 1 257 56 257 30 4188 27 4188 0 4188 221 4188 gt 40 2 2 3 7 0 10 8 0 3 0 3 0 3 0 E 6 269 10 269 0 269 29 269 17 6658 20 6658 0 6658 200 6658 Local de teste 4 9 0 4 3 0 7 24 9 0 4 0 5 0 3 8 27 301 13 301 2 301 75 301 13 3666 18 3666 0 3666 141 3666 2 7 4 6 1 0 26 5 0 5 0 5 0 3 7 23 310 19 310 0 310 82 310 18 3671 17 3671 0 3671 136 3671
56. Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay apresentado na Tabela 15 S o apresentados resultados semelhantes para o teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado que diferencia o HPV 16 e HPV 18 mas n o o HPV 45 distintamente em rela o aos outros gen tipos de alto risco O risco relativo de doen a para resultados positivos versus negativos de gen tipos apresentado na Tabela 16 para o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e o teste de PCR para o HPV Tabela 15 Risco absoluto de 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e um teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado Risco absoluto Risco absoluto Resultado para Resultado para o interpretacho de 2CIN3 de 2CIN3 HPV de HR gen tipo preta Aptima PCR para o HPV CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 14 6 14 4 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 9 6 19 5 10 4 18 1 HPV 16 Pos e HPV 19 4 16 8 18 45 Neg Apenas HEV 16 Pos 12 0 26 8 11 6 21 9 HPV 16 Neg e ou Apenas 3 3 7 1 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 0 1 13 8 1 0 18 8 Positiva HPV 16 Pos e ou HPV 16 e 25 0 14 3 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 1 3 75 2 0 7 49 9 HPV 16 Neg e ou Outros HPV de HR 2 5 2 1 HPV 18 45 Neg Pos 1 4 3 7 1 1 3 3 9 8 8 5 Pos ou Neg HPV de HR Pos 8 1 11 2 7 0 9 5 HPV 16 Neg e ou 1 0 1 1 N t kk ita HPV 18 45 Neg HEM de Hi Neg 0 2 2 4 0 3 2 8 Preval ncia 4 9 5 0
57. F Os reagentes do Aptima HPV 16 18 45 Genotype Assay permanecem est veis durante um per odo cumulativo de 48 horas quando conservados integrados no Tigris DTS System G Os reagentes do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima permanecem est veis durante um per odo cumulativo de 72 horas quando conservados no Panther System H O Reagente de Sonda e o Reagente de Sonda Reconstitu do s o fotossens veis Conserve os reagentes ao abrigo da luz I N o congele os reagentes Colheita e conserva o de esp cimes A Colheita e processamento de esp cimes Esp cimes de citologia l quida ThinPrep 1 Efectue a colheita de esp cimes do colo do tero em frascos de exame de Papanicolau ThinPrep que contenham Solu o PreservCyt com dispositivos de colheita tipo vassoura ou escova esp tula de acordo com as instru es do fabricante 2 Antes ou depois do processamento com o Sistema ThinPrep 2000 ou o Sistema ThinPrep 3000 transfira 1 ml de esp cime de citologia l quida ThinPrep para um tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima de acordo com o folheto informativo do Kit de Transfer ncia de Esp cimes Aptima Esp cimes de citologia l quida SurePath 1 Proceda colheita de um esp cime de citologia l quida SurePath de acordo com as instru es de utiliza o do exame de Papanicolau SurePath e ou do PrepStain System 2 Transfira o esp cime de citologia l quida SurePath para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima d
58. HOLOGIC Aptima Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima Para utiliza o em diagn stico in vitro Exclusivamente para exporta o dos EUA Informa es geralS sas ssa ua da o A DS ie a eee Be E ae 2 Utiliza o previstas saem essi pas a nan e hae E URU ANE Ree ee ee eee eee 2 Resumo e explica o do teste cciciiiisi eee 2 Princ pios do procedimento 2 0 a 3 Advert ncias e precau es cciiicii teeta 4 Requisitos de conserva o e manuseamento dos reagentes 00 0005 5 Colheita e conserva o de esp cimes 2 aa 6 Interpreta o do teste a ea ee ass eee ee ee PERO DRA aa O Ra RE O a 21 Limita es ss a maa eee ae a ane are wes Sate ada 22 Resultados previstos do Tigris DTS System Preval ncia de mRNA do HPV Ce allo FISCO sua acusa ae wae aa ara cuecas saw abe Wd nara SU eee ta Sr a We a 23 Desempenho do ensaio no Tigris DTS System 0 000 24 Resultados previstos do Panther System Preval ncia de mRNA do HPV de alto FISCO eee see eee mia ee re ee ee a a ee E 43 Desempenho do ensaio no Panther System 0 0 e eee eee eee 44 Bibliografian ssa apar en l ra Ap ne ee 61 Tigris DTS System Panther System Tigris DTS System sss ss isssrsseeraennes 8 Panther System ceccceceeeseneeseeeensseeeeseeeeeseesneseeens 14 Reagentes e materiais fornecidos 8 Reagentes e materiais fornecidos
59. HR Pos 2 8 7 4 1 7 5 9 Negati HPV 16 18 45 Neg HPV de HRN ne 0 2 a eg e ue yeg 0 2 2 5 0 0 4 8 Preval ncia 1 1 0 8 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo N A n o aplic vel Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Tabela 30b Popula o NILM 2 30 anos Risco absoluto de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas n o ajustadas 2CIN2 2CIN3 Resultado do Resultado do interpretac o Aptima HPV Assay Ensaio AHPV GT p Risco absoluto Risco absoluto CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 10 8 7 65 9 2 6 65 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 5 1 17 7 4 3 14 2 HPV 16 Pos 12 5 4 32 12 5 4 32 HPV 18 45 Neg Apenas HPV 18 Pos 3 7 25 2 3 9 23 1 HPV 16 Neg Apenas HPV 18 45 9 4 3 32 6 3 2 32 7 HPV 18 45 Pos Pos 2 2 21 8 0 9 16 8 Positiva HPV 16 Pos 0 0 0 1 0 0 0 1 HPV 18 45 Pos Hee pe ins 0 0 93 5 0 0 93 4 Outros HPV de 3 6 7 194 2 1 4 194 HPV 16 18 45 Neg ELES 1 7 6 0 0 7 3 9 5 4 14 259 3 9 10 259 Pos ou Neg HPV de HR Pos 3 7 6 8 2 6 4 5 F 1 1 6 549 0 2 1 549 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 0 5 1 9 0 0 0 8 RE 2 5 1 4 revalencia 20 808 11 808
60. Negativo 0 2 0 4 0 1 0 4 Cl intervalo de confian a HR alto risco Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 48 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Popula o NILM 2 30 anos Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep Na totalidade verificaram se 512 mulheres suscept veis de serem avaliadas com 30 anos ou idade superior com resultados citol gicos NILM e resultados positivos do Aptima HPV assay no Panther System cujas amostras citol gicos de encaminhamento foram eleg veis para teste com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Destas mulheres 21 11 realizaram colposcopia e 10 n o realizaram colposcopia n o dispunham de volume de amostra citol gica de encaminhamento para teste neste estudo ap s uma an lise dos valores em falta estes n o foram inclu dos nos c lculos de desempenho As 491 mulheres suscept veis de serem avaliadas apresentaram resultados v lidos no Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Destas 273 realizaram colposcopia Catorze 14 mulheres tinham 2CIN2 e 10 tinham 2CIN3 245 mulheres tinham histologia normal CIN1 14 mulheres apresentavam um estado de doen a indeterminado Das 259 mulheres susce
61. System Resumo e explica o do teste O cancro do colo do tero um dos tipos de cancro feminino mais comuns em todo o mundo O HPV o agente etiol gico respons vel por mais de 99 de todos os cancros do colo do tero O HPV um v rus de DNA comum transmitido por via sexual constitu do por mais de 100 gen tipos O genoma viral do HPV um DNA circular de cadeia dupla com um comprimento aproximado de 7900 pares de bases O genoma tem oito grelhas de leitura aberta sobrepostas H seis genes precoces E dois genes tardios L e uma longa regi o de controlo n o traduzida Os genes L1 e L2 codificam as prote nas das c psides major e minor Os genes precoces regulam a replica o viral do HPV Os genes E6 e E7 dos gen tipos de HPV alto risco s o conhecidos como oncogenes As prote nas expressas do mRNA policistr nico E6 E7 alteram as fun es das prote nas celulares p53 e retinoblastoma dando origem falha dos pontos de verifica o do ciclo celular e instabilidade do genoma da c lula Catorze gen tipos do HPV s o considerados patog nicos ou de alto risco para a progress o da doen a do colo do tero Diversos estudos t m associado os gen tipos 16 18 31 33 35 39 45 51 52 56 58 59 66 e 68 progress o da doen a Os doentes que apresentam uma infec o persistente com um desses tipos possuem um maior risco de desenvolver displasia grave ou carcinoma do colo do tero Estudos
62. a o e as mol culas de polidesoxitimidina que est o ligadas por coval ncia s part culas magn ticas As micropart culas incluindo as mol culas alvo do mRNA do HPV captadas ligadas a elas s o arrastadas para a parte lateral do tubo de reac o pela utiliza o de manes e o sobrenadante aspirado As part culas s o lavadas para remover a matriz de esp cime residual que possa conter inibidores de amplifica o Terminada a capta o do alvo o mRNA do HPV amplificado por TMA que um m todo de amplifica o do cido nucleico baseado na transcri o e que utiliza duas enzimas a transcriptase reversa MMLV e a polimerase do RNA T7 A transcriptase reversa utilizada para gerar uma c pia do DNA da sequ ncia alvo do mRNA contendo uma sequ ncia promotora para a polimerase do RNA T7 A polimerase do RNA T7 produz v rias c pias do produto de amplifica o do RNA a partir do modelo da c pia do DNA A detec o do produto de amplifica o feita atrav s do HPA utilizando sondas de cido nucleico de cadeia simples marcadas por quimioluminesc ncia que s o complementares do produto de amplifica o As sondas de cido nucleico marcadas s o hibridadas especificamente no produto de amplifica o O Reagente de Selec o diferencia entre sondas hibridadas e n o hibridadas atrav s da desactiva o da marca nas sondas n o hibridadas Durante o passo de detec o a luz emitida dos h bridos RNA DNA rotulados me
63. a HPV Assay estimativas n o ajustadas 2CIN2 2CIN3 Resultado do Resultado do interpretac o Aptima HPV Assay ensaio AHPV GT p Risco absoluto Risco absoluto CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 11 5 7 61 9 8 6 61 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 5 4 18 9 4 6 15 2 HPV 16 Pos 12 9 4 31 12 9 4 31 HPV 18 45 Neg Apenas HEN ASE OS 4 0 26 0 4 3 23 8 HPV 16 Neg 10 0 3 30 6 7 2 30 HPV 18 45 Pos Apenas HPY 18 49 ROS 2 4 23 0 0 8 17 7 Positiva TEME eg HPV 18 45 Pos RE To GA18 49 F0S N A 0 0 N A 0 0 HPV 16 18 45 Neg Outros HPV de HR Pos E o 1 Hs Say Pos ou Neg HPV de HR Pos Teer p ae Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg O o E o Preval ncia 2 5 14 20 803 11 803 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo N A n o aplic vel Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 31 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima Tabela 10 Popula o NILM 2 30 anos Riscos absolutos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay por grupo et rio estimativas n o ajustadas
64. a presen a de subst ncias interferentes A infec o por HPV n o um indicador de HSIL citol gica nem de CIN subjacente de alto grau nem implica que CIN2 CIN3 ou cancro se ir o desenvolver A maioria das mulheres infectadas com um ou mais tipos de HPV de alto risco n o desenvolvem CIN2 CIN3 ou cancro Os seguintes aspectos podem interferir com o desempenho do ensaio quando se encontram presentes concentra es superiores s especificadas lubrificantes vaginais que contenham Poliquat rnio 15 a 1 p v creme anti f ngico que contenha tioconazol a 0 03 p v muco a 0 3 p v hormonas intravaginais que contenham progesterona a 1 p v Trichomonas vaginalis a 3 x 10 c lulas ml Concentra es altas de HPV 45 podem reduzir a capacidade de detec o da presen a de baixos n veis de HPV 16 pelo Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima N o foram avaliados os efeitos de outras potenciais vari veis como corrimento vaginal utiliza o de tamp es etc nem as vari veis de colheita de amostras A utiliza o deste dispositivo deve ser limitada a pessoal com forma o na utiliza o do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima A contamina o cruzada de amostras pode originar resultados falsos positivos A taxa de contamina o cruzada no Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Tigris DTS System e no Panther System foi de 0 35 e 0 19 respectivamente conforme determinado em estudos n o cl nicos
65. ais do operador e a data actual na etiqueta Deite fora o frasco e a tampa do IC poss vel que haja forma o de precipitado no wTCR o que pode resultar em resultados inv lidos devido aos erros de verifica o de volume O precipitado pode ser dissolvido aquecendo o wTCR a uma temperatura de 42 C a 60 C durante um m ximo de 90 minutos Deixe o wTCR equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado persistir 3 Prepare o Reagente de Selec o a b Verifique o n mero do lote de reagente na Ficha de C digos de Barras do Lote Principal para garantir que pertence ao kit Se o Reagente de Selec o contiver precipitado aque a o Reagente de Selec o a 60 C 1 C por um m ximo de 45 minutos para facilitar a dissolu o do precipitado Misture o frasco suavemente a cada 5 a 10 minutos Deixe o Reagente de Selec o equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado ou a nebulosidade persistir Nota Misture bem todos os reagentes invertendo os suavemente antes de os colocar no sistema Evite formar espuma durante a invers o dos reagentes C Prepara o de reagentes previamente reconstitu dos 1 2 Os Reagentes de Amplifica o Enzim tico e de Sonda previamente reconstitu dos t m de alcan ar a temperatura ambiente 15 C a 30 C antes do in cio do ensaio Se o Reagente de Sonda reconstitu do contiver precipitado que n
66. artir do sinal 18 45 da RLU das r plicas v lidas do calibrador negativo e das r plicas v lidas do calibrador positivo 1 1 x RLU m dia 18 45 das r plicas v lidas do calibrador negativo Cutoff do analito 18 45 E seo 2 f ai 0 18 x RLU m dia 18 45 das r plicas v lidas do calibrador positivo 1 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 20 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Interpreta o do teste Interpreta o do teste Os resultados dos testes s o automaticamente determinados pelo software do ensaio Um resultado do teste pode ser negativo tanto para o HPV 16 como para o HPV 18 45 negativo para o HPV 16 e positivo para o HPV 18 45 positivo para o HPV 16 e negativo para o HPV 18 45 positivo tanto para o HPV 16 como para o HPV 18 45 ou inv lido conforme determinado pelas rela es de RLU do IC e do S CO conforme descrito na tabela abaixo Um resultado de teste tamb m pode ser inv lido devido a outros par metros por ex forma anormal da curva que estejam fora dos intervalos de valores normalmente esperados Os resultados de testes inv lidos devem ser repetidos Os esp cimes do Kit CSCT podem ser dilu dos para transpor potenciais subst ncias inibit rias Dilua 1 parte do esp cime inv lido em 8 partes de meio de transporte de esp cimes a solu o nos tubos do kit CSCT p ex 560 ul do esp cime para um novo tubo do kit CSCT que cont m 4 5 ml de meio de transporte de esp cimes Inverta suavemente o
67. as de les es vis veis m todo directo 1 biopsia por les o O acompanhamento de mulheres no Estudo NILM que n o apresentavam 2CIN2 na linha de refer ncia prossegue h 3 anos com consultas de citologia anuais As mulheres com ASC US ou resultados citol gicos mais graves durante o per odo de acompanhamento s o encaminhadas para colposcopia utilizando o mesmo procedimento de biopsia realizado para a avalia o da linha de refer ncia O estado da doen a foi determinado a partir de um consenso do painel de revis o de histologia que foi baseado na concord ncia de pelo menos 2 patologistas especialistas O estado de HPV e de citologia das mulheres n o foi apresentado aos patologistas especialistas bem como os diagn sticos de histologia um do outro Os resultados do Aptima HPV Assay e do teste de DNA de HPV dispon vel no mercado n o foram apresentados aos investigadores m dicos e mulheres at depois da conclus o da consulta de colposcopia a fim de evitar desvio Para validar a utiliza o prevista do gen tipo do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima como um teste de reflexo de um resultado positivo do Aptima HPV Assay foram eleg veis para teste esp cimes residuais de encaminhamento de Papanicolau de todas as mulheres suscept veis de serem avaliadas no estudo ASC US e no estudo NILM com um resultado positivo do Aptima HPV Assay com Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Foi avaliado o desempenho cl nico do Ensaio dos ge
68. de 2CIN2 e 2CIN3 segundo o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima s o apresentadas na Tabela 13 desvio de verifica o ajustado e na Tabela 14 n o ajustado Os tipos de HPV 16 18 e ou 45 tinham 17 1 vezes mais probabilidade de estar presentes numa mulher com 2CIN2 e 21 9 vezes mais probabilidade de estar presente numa mulher com 2CIN3 Tabela 13 Popula o NILM gt 30 anos Rela es de probabilidade para 2CIN2 e 2CIN3 segundo os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas ajustadas do desvio de verifica o 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resultados do Ensaio Aptima Rela o de probabilidade Rela o de probabilidade CI de 95 CI de 95 17 1 21 9 HPV 16 e ou 18 45 Pos 6 2 46 9 7 3 65 2 4 2 3 8 Outros HPV de HR Pos 1 7 10 1 1 2 12 6 0 7 0 7 HPV de HR Negativo 0 5 1 0 0 4 1 1 Cl intervalo de confianga HR alto risco Pos positivo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Tabela 14 Popula o NILM 2 30 anos Rela es de probabilidade e probabilidades de doen as para 2CIN2 e 2CIN3 por resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas n o ajustadas 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resultados o do Ensaio Aptima Rela o
69. de probabilidade Rela o de probabilidade CI de 95 CI de 95 5 1 7 9 HPV 16 e ou 18 45 Pos 2 3 9 1 3 5 12 9 1 4 1 2 Outros HPV de HR Pos 0 7 2 2 0 4 2 3 i 0 4 0 1 HPV de HR Negativo 0 1 0 7 0 0 0 6 CI intervalo de confian a HR alto risco Pos positivo Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 34 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes de citologia l quida SurePath Foram colhidos esp cimes de citologia l quida SurePath de mulheres canadianas encaminhadas para seguimento devido a um ou mais exames Papanicolau an malos infec o por HPV ou outra raz o Uma al quota 0 5 ml de cada esp cime foi transferida para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima e depois tratada com a Solu o de Transfer ncia Aptima Uma nica r plica de cada esp cime foi testada com o Aptima HPV Assay n 494 As amostras positivas foram ent o testadas com o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima Uma al quota individual 1 ml de cada esp cime foi retirada para ser avaliada com um teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado n 557 O risco absoluto de doen a 2CIN3 conforme os resultados do
70. de produto a menos que seja especificado em contr rio Tigris DTS System Kit de Execu o do Tigris DTS System Unidades Multitubos Multi tube Units MTU Saco de Res duos de MTU Pontas Deflectores do Recipiente de Res duos de MTU Tampas do Recipiente de Res duos de MTU Kit de Fluidos do Aptima Assay Solu o de Lavagem Aptima Tamp o Aptima para Fluido de Desactiva o e Reagente de leo Aptima Kit Aptima Auto Detect Kit de Conservante do Fluido do Sistema Aptima Pontas 1000 ul condutoras detec o de l quido Kit de Transfer ncia de Esp cimes Aptima Kit Aptima de Colheita e Transporte de Esp cimes Cervicais Tampas Perfur veis Aptima Tampas n o perfur veis de substitui o Tampas sobresselentes para kits de 100 testes Solu es de reconstitui o do Reagente de Amplifica o e do Reagente de Sonda Solu o de reconstitui o do Reagente Enzim tico TCR e Reagente de Selec o Lix via m nimo de 5 ou 0 7 M de solu o de hipoclorito de s dio C digo de Produto 105118 301191 104772 02 900907 900931 105523 302382 301048 302380 10612513 Tecan 301154C 302657 105668 103036 CL0041 CL0041 501604 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 9 AW 11504 601 Rev 002 PT Tigris DTS System Aptima gua para O Tigris DTS System E Consulte o Manual do Operador do Tigris DTS System Tigris DTS System Operator s Manual para especifica es Luvas de
71. demonstraram que os diferentes tipos de HPV de alto risco apresentam diferentes n veis de risco para o desenvolvimento de displasia grave ou carcinoma do colo do tero Em todo o mundo os tipos 16 18 e 45 do HPV est o associados a aproximadamente 80 de todos os cancros do colo do tero invasivos Estes tr s tipos s o encontrados em 75 de todos os carcinomas escamosos sendo que o tipo 16 constitui a maioria 85 destas infec es Em adenocarcinomas os tipos de HPV 16 18 e 45 s o encontrados em 80 94 dos casos com os tipos 18 e 45 constituindo quase metade de todas estas infec es A presen a do HPV de tipo 18 numa fase inicial do cancro do colo do tero foi reportada como estando associada a um diagn stico fraco Os tipos 18 e 45 do HPV s o sub reportados em les es pr oncol gicas que podem ser causadas pela presen a de les es ocultas no canal cervical inacess vel ao exame de colposcopia Em mulheres infectadas com HPV de tipo 16 e ou 18 o risco cumulativo de desenvolvimento de cancro do colo do tero 10 vezes superior comparativamente ao risco de desenvolvimento de cancro devido a outros tipos de alto risco Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 2 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Informa es gerais Princ pios do procedimento O Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima envolve tr s passos principais os quais ocorrem num nico tubo capta o do alvo amplifica o do alvo por
72. dida como sinais de fot es denominados Unidades de Luz Relativa URL num lumin metro Os resultados finais do ensaio s o interpretados com base no sinal para cutoff S CO do analito O IC adicionado a cada reac o atrav s do Reagente de Capta o do Alvo O IC controla os passos da capta o amplifica o e detec o do alvo do ensaio O ensaio cin tico Dual Dual Kinetic Assay DKA o m todo utilizado para distinguir os sinais do HPV e o sinal do IC O produto de amplifica o do IC e do HPV 16 s o detectados por sondas com cin tica de emiss o de luz r pida sinal intermitente O sinal do IC em cada reac o distinguido do sinal do HPV 16 atrav s da magnitude da emiss o de luz Os produtos de amplifica o espec ficos ao HPV 18 e 45 s o detectados utilizando sondas com cin tica de emiss o de luz relativamente mais lenta sinal cont nuo Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 3 AW 11504 601 Rev 002 PT Informa es gerais Apti ma Advert ncias e precau es A B Para utiliza o em diagn stico in vitro Para obter advert ncias e precau es espec ficas relacionadas com a instrumenta o consulte o Manual de Instru es do Tigris DTS System Tigris DTS System Operator s Manual ou o Manual de Instru es do Panther System Panther System Operator s Manual Relacionados com o laborat rio C D E F Utilize apenas os artigos de laborat rio descart ve
73. duto 303095 303096 303014 303013 104772 02 902731 902714 10612513 Tecan 301154C 302657 105668 103036A CL0041 CL0041 501604 303658 C digo de Produto 302101 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima AW 11504 601 Rev 002 PT Panther System Aptima Procedimento de teste no Panther System Nota Consulte o Manual do Operador do Panther System Panther System Operator s Manual para mais informa es sobre o procedimento do Panther System A Prepara o da rea de trabalho Limpe as superf cies de trabalho onde ser o preparados os reagentes e as amostras Limpe as superf cies de trabalho com 2 5 a 3 5 0 35 M a 0 5 M de solu o de hipoclorito de s dio Deixe a solu o de hipoclorito de s dio entrar em contacto com as superf cies durante pelo menos 1 minuto e depois enxag e com gua N o deixe secar a solu o de hipoclorito de s dio Cubra a superf cie da bancada onde ser o preparados os reagentes e as amostras com capas limpas e absorventes para bancadas de laborat rios com forro pl stico B Reconstitui o prepara o dos reagentes de um novo kit Nota A Reconstitui o do Reagente deve ser realizada antes de qualquer trabalho no Panther System 1 Para reconstituir os Reagentes de Amplifica o Enzim tico e de Sonda combine os frascos do reagente liofilizado com a solu o de reconstitui o Se estiverem refrigeradas deixe as solu es de reconstitui
74. e acordo com as instru es no folheto informativo do Kit de Transfer ncia de Esp cimes Aptima Esp cimes do Kit Aptima de Colheita e Transporte de Esp cimes Cervicais Proceda colheita do esp cime de acordo com as instru es de utiliza o do Kit CSCT B Transporte e conserva o antes do teste Esp cimes de citologia l quida ThinPrep 1 Transporte os esp cimes de citologia l quida ThinPrep a uma temperatura de 2 C a 30 C 2 Os esp cimes devem ser transferidos para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima num prazo de 105 dias ap s a colheita Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 6 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Informa es gerais 3 Antes da transfer ncia os esp cimes de citologia l quida ThinPrep devem ser conservados a uma temperatura de 2 C a 30 C e n o mais de 30 dias a temperaturas acima de 8 C 4 Os esp cimes de citologia l quida ThinPrep transferidos para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima podem ser conservados a uma temperatura de 2 C a 30 C durante um m ximo de 60 dias 5 Se for necess rio um per odo de conserva o mais longo o esp cime citol gico de base l quida ThinPrep ou o esp cime citol gico de base l quida ThinPrep dilu do no Tubo de Transfer ncia de Esp cimes pode ser conservado a uma temperatura entre 20 C a 70 C durante um m ximo de 24 meses Esp cimes de citologia l quida SurePath 1 Transporte os esp cimes de ci
75. e sonda do HPV 16 18 45 Reagente do controlo interno do HPV 16 18 45 Calibradores positivos de HPV 16 18 45 e calibradores negativos de HPV 16 18 45 Os seguintes reagentes s o conservados a uma temperatura de 15 C a 30 C temperatura ambiente Solu o de reconstitui o de amplifica o do HPV 16 18 45 Solu o de reconstitui o enzim tica do HPV 16 18 45 Solu o de reconstitui o de sondas do HPV 16 18 45 Reagente de capta o do alvo do HPV 16 18 45 Reagente de selec o do HPV 16 18 45 Solu o de lavagem Reagente de leo Tamp o para o fluido de desactiva o Reagente Auto Detect 1 Reagente Auto Detect 2 Conservante do fluido do sistema Aptima apenas Tigris DTS System Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 5 AW 11504 601 Rev 002 PT Informa es gerais Apti ma C Ap s a reconstitui o os seguintes reagentes permanecem est veis durante 30 dias desde que conservados a uma temperatura de 2 C a 8 C Reagente de amplifica o do HPV 16 18 45 Reagente enzim tico do HPV 16 18 45 Reagente de sonda do HPV 16 18 45 D O reagente de capta o do alvo de trabalho working Target Capture Reagent wTCR permanece est vel durante 30 dias desde que conservado a uma temperatura de 15 C a 30 C Nao refrigere E Deite fora quaisquer reagentes reconstituidos e o wTCR n o utilizados ap s 30 dias ou ap s a data de validade do lote principal conforme o que ocorrer primeiro
76. ectivo reagente liofilizado b Verifique os n meros do lote na Ficha de C digos de Barras do Lote Principal para garantir que est o emparelhados os reagentes adequados c Abra o frasco do reagente liofilizado e insira bem a extremidade com entalhe do colarinho de reconstitui o na abertura do frasco Figura 1 Passo 1 d Abra a solu o de reconstitui o correspondente e coloque a tampa sobre uma superf cie de trabalho limpa e coberta e Segurando o frasco de solu o na bancada insira bem a outra extremidade do colarinho de reconstitui o na abertura do frasco Figura 1 Passo 2 f Inverta suavemente os frascos montados Deixe a solu o vazar do frasco para o frasco de vidro Figura 1 Passo 3 g Agite suavemente a solu o no frasco para a misturar bem Evite criar espuma quando agitar o frasco Figura 1 Passo 4 h Aguarde que o reagente liofilizado se dissolva e depois inverta novamente os frascos montados inclinando os a um ngulo de 45 para minimizar a forma o de espuma Figura 1 Passo 5 Deixe o l quido vazar todo de novo para o frasco de pl stico Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 10 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Tigris DTS System k Retire o colarinho de reconstitui o e o frasco Figura 1 Passo 6 Volte a colocar a tampa no frasco de pl stico Anote as iniciais do operador e a data de reconstitui o na etiqueta Figura 1 Passo 7 Deite fora o co
77. esp cimes citol gicos de encaminhamento residuais de todas as mulheres suscept veis de serem avaliadas no estudo ASC US e no estudo NILM com um resultado positivo do Aptima HPV assay com Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System Foi avaliado o desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System para a detec o de 2CIN2 e neoplasia intraepitelial de grau 3 ou doen a do colo do tero mais grave 2CIN3 Popula o ASC US 2 21 anos Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep Na totalidade foram registadas 404 mulheres suscept veis de serem avaliadas com 21 anos ou idade superior com resultados citol gicos ASC US e resultados positivos do Aptima HPV assay no Panther System cujas amostras citol gicas de encaminhamento foram eleg veis para teste com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System Destas mulheres 45 n o dispunham de volume de amostra citol gica de encaminhamento para teste neste estudo e 6 registavam diagn sticos de doen a indeterminada ap s uma an lise dos valores em falta estes n o foram inclu dos nos c lculos de desempenho As 353 mulheres suscept veis de serem avaliadas com um estado de doen a conclusivo registavam resultados v lidos do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System com base no teste de reflexo para um resultado positivo do Ensaio do HPV Aptima
78. fian a de 95 Os resultado s o apresentados na Tabela 38 Tabela 38 Concord ncia cl nica do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System para a detec o do HPV 16 18 e 45 de alto risco em esp cimes CSCT Resultado do Tigris DTS System HPV 16 Pos HPV 16 Neg HPV 16 Pos HPV 16 Neg HPV 18 45 Neg HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Neg Total HPV 16 Pos HPV 18 45 Neg 194 0 3 198 HPV 16 Neg HPV 18 45 Pos 0 a 9 q ow Resultado do HPV 16 Pos Panther System HPV 18 45 Pos 0 0 7 0 7 HPV 16 Neg HPV 18 45 Neg 1 1 g TES 1 5 Total 195 35 8 176 414 Pos Positivo Neg Negativo Concord ncia positiva 98 7 235 238 CI de 95 96 4 99 6 Concord ncia negativa 98 3 173 176 CI de 95 95 1 99 4 Sensibilidade anal tica O limite de detec o Limit of Detection LOD no cutoff cl nico consiste numa concentra o que positiva acima do cutoff cl nico 95 das vezes O LOD do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi estimado testando esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep cl nicos negativos individuais ou agrupados aditivados com transcritos de HPV in vitro ou c lulas cultivadas infectadas com HPV SiHa HeLa e MS751 ATCC Manassas Virginia em diversas concentra es Para os pain is de transcrito in vitro foram testadas 60 r plicas de cada n vel de c pias com cada um dos dois lotes de reagentes para um n mero total de 120
79. gativa 1 do HPV Negativa oe 00 er dou Amostra clinica negativa 2 do HPV Negativa Ma rio Amostra cl nica negativa 3 do HPV Negativa peng pera Cl Intervalo de Confian a da Pontua o Nota A concord ncia percentual pode ter sido afectada por varia es na aditiva o dilui o e ou aliquotagem Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 38 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Tabela 19b Precis o do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Estudo 1 e 2 Descri o do painel e concord ncia percentual com os resultados previstos do HPV 18 45 Concord ncia percentual CI de 95 Descri o do painel Resultado c lulas reacgao previsto do HPV Rees Fstudo 2 3 locais de teste 1 local de teste 18 45 A 100 108 108 98 8 160 162 C lulas SiHa 3 0 c lulas Negativa 96 6 100 95 6 99 7 2 E E 93 5 101 108 98 1 159 162 C lulas HeLa 0 6 c lulas Positiva 87 2 96 8 94 7 99 4 E F eis 92 6 100 108 92 6 150 162 C lulas MS751 11 0 c lulas Positiva 86 1 96 2 87 5 95 7 eds 100 107 107 100 162 162 Amostra clinica do HPV 16 1 Negativa 96 5 100 97 7 100 ae i 99 1 107 108 99 4 161 162 Amostra clinica do HPV 18 45 1 Positiva 94 9 99 8 96 6 99 9 C lulas SiHa 1 6 c lulas e Positiva 100 108 108 100 162 162 c lulas HeLa 3
80. gure o instrumento e a lista de trabalho de acordo com as instru es no Manual do Operador do Tigris DTS System Tigris DTS System Operator s Manual e na sec o Notas sobre o procedimento abaixo Notas sobre o procedimento A Calibradores 1 2 Cada lista de trabalho deve conter 2 r plicas do Calibrador Negativo e cada Calibrador Positivo De modo a poder trabalhar adequadamente com o software do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima o calibrador negativo deve estar na primeira posi o do tubo do primeiro suporte da lista de trabalho o calibrador positivo 1 deve estar na segunda posi o do tubo do primeiro suporte da lista de trabalho e o calibrador positivo 2 deve estar na terceira posi o do tubo do primeiro suporte da lista de trabalho As tentativas de pipetar mais de tr s r plicas a partir de um tubo de calibrador podem originar erros de volume insuficiente Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 12 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Tigris DTS System 3 Os calibradores devem ser utilizados com o lote principal dos reagentes correspondente O operador deve verificar para se certificar se utilizado o lote correcto de calibradores com o kit de reagentes do lote principal correspondente conforme indicado na Ficha de C digos de Barras do Lote Principal Deve ser referenciado o n mero do lote adequado quando encomendar calibradores adicionais B Temperatura A temperatura ambiente define se como
81. is que sejam fornecidos ou especificados Empregue todas as precau es laboratoriais de rotina N o coma n o beba nem fume nas reas de trabalho designadas Utilize luvas sem p descart veis protec o ocular e batas de laborat rio quando manusear esp cimes e reagentes de um kit Lave bem as m os depois de manusear os esp cimes e os reagentes do kit Advert ncia Irritantes e Corrosivos Evite o contacto do Auto Detect 1 e 2 com a pele olhos e membranas mucosas Se estes fluidos entrarem em contacto com a pele ou os olhos lave bem com gua a zona afectada Se estes fluidos derramarem dilua o derrame com gua antes de o limpar e secar As superf cies de trabalho as pipetas e outro equipamento t m de ser regularmente descontaminados com solu o de hipoclorito de s dio de 2 5 a 3 5 0 35 M a 0 5 M Consulte o Procedimento de Teste do Tigris DTS System Tigris DTS System Test Procedure ou o Teste de Procedimento do Panther System Panther System Test Procedure para obter mais informa o Relacionados com os esp cimes G Mantenha as condi es de temperatura adequadas durante o envio e conserva o dos esp cimes de modo a garantir a integridade dos esp cimes A estabilidade do esp cime n o foi avaliada em condi es de envio e conserva o para al m das recomendadas As datas de validade indicadas nos kits e tubos de colheita transfer ncia de esp cimes referem se ao local da colheita transfer ncia
82. ispon vel no mercado a propor o de mulheres com estado de doen a n o verificado neste grupo foi elevada 96 6 Para ajustar este desvio de verifica o foi utilizado um m todo de imputa o m ltipla para efectuar a estimativa de mulheres com doen a que teriam sido identificadas caso todas as mulheres tivessem sido submetidas a colposcopia S o apresentadas tanto as estimativas de desempenho ajustadas do desvio de verifica o como as estimativas de desempenho n o ajustadas com base nas 803 mulheres com estado de doen a verificado Tabela 8 Popula o NILM 2 30 anos Classifica o de mulheres com NILM suscept veis de serem avaliadas atrav s do Aptima HPV Assay Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima resultados do teste do DNA do HPV estado da doen a 2CIN2 e 2CIN3 e estado de verifica o da doen a Estado de doen a Estado de doen a Estado de doen a verificada 2CIN2 verificada 2CIN3 n o verificada Resultado Resultado Teste do Total de do Aptima do ensaio DNA do lares Mulheres Mulheres Mulheres Mulheres Mulheres com HPV Assay AHPV GT HPV doentes n o doentes n o estado de doen a doentes doentes desconhecido 2CIN2 2CIN3 2CIN2 2CIN3 desconhecida Positiva Positiva 83 6 48 5 49 29 34 9 Positiva Negativa 9 1 5 1 5 3 33 3 Positiva seo 2 0 1 0 1 1 50 0 resultado Positiva Negativa Positiva 271 7 171 4 174 93 34 3 Negativa Negativa 137 1 52 0 53 84 61 3
83. ispositivo de recolha no tubo de amostra Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 4 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Informa es gerais M Os esp cimes de citologia l quida SurePath devem ser rejeitados se n o estiver presente um dispositivo de colheita no frasco Relacionados com o ensaio N O Armazene os reagentes s temperaturas especificadas O desempenho do ensaio pode ser afectado pela utiliza o de reagentes conservados de forma incorrecta Evite a contamina o microbiana ou com ribonuclease dos reagentes N o utilize o kit ap s a data de validade N o troque misture ou combine reagentes do ensaio ou calibradores de kits com n meros de lote diferentes Os fluidos do ensaio Aptima o conservante do fluido do sistema Aptima apenas para o Tigris DTS System e os reagentes Auto Detect n o fazem parte do lote mestre pode ser utilizado qualquer lote S necess rio misturar bem os reagentes do ensaio para alcan ar resultados exactos Tem de utilizar pontas com encaixes hidrof bicos Requisitos de conserva o e manuseamento dos reagentes N o utilize reagentes que ultrapassem o prazo de validade indicado nos frascos Consulte outras instru es de conserva o abaixo A Os seguintes reagentes s o conservados a uma temperatura de 2 C a 8 C refrigerados ap s a recep o Reagente de amplifica o do HPV 16 18 45 Reagente enzim tico do HPV 16 18 45 Reagente d
84. iva 1 do HPV Negativa 96 6 100 96 6 99 9 ve 100 108 108 100 162 162 Amostra clinica negativa 2 do HPV Negativa 96 6 100 97 7 100 Beas E 100 108 108 99 4 161 162 Amostra cl nica negativa 3 do HPV Negativa 96 6 100 96 6 99 9 CI Intervalo de Confian a da Pontua o Nota A concord ncia percentual pode ter sido afectada por varia es na aditiva o dilui o e ou aliquotagem Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 39 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima Reactividade cruzada A especificidade anal tica do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi avaliada com grupos de esp cimes de citologia ThinPrep dilu dos 1 2 9 em STM compar vel ao esp cime transferido para um tubo de transfer ncia Aptima e aditivado com bact rias leveduras ou fungos cultivados v rus cultivados ou tanscritos de HPV in vitro n o visados Os organismos e concentra es de teste para os quais n o foi observada reactividade cruzada s o identificados na Tabela 20 Os crit rios do estudo para a avalia o do efeito da presen a de microrganismos na especificidade do ensaio basearam se na positividade Tabela 20 Painel de especificidade anal tica Organismos e concentra o sem reactividade cruzadas Concentra o Concentra o Organismo de teste sem Organismo de teste sem reactividade
85. larinho de reconstitui o e o frasco Figura 1 Passo 8 Advert ncia Evite formar espuma quando reconstituir os reagentes A espuma compromete a detec o de n vel no Tigris DTS System Nota Misture bem os Reagentes de Amplifica o Enzim tico de Sonda e de Selec o invertendo suavemente antes de carregar no sistema Evite formar espuma durante a invers o dos reagentes 1 ED If 4 o 5 Tr 7 8 e S Pal Figura 1 Processo de reconstitui o do Tigris DTS System 2 Prepare o Reagente de Capta o do Alvo de trabalho working Target Reagent wTCR a b Emparelhe os frascos de TCR e de Controlo Interno Internal Control IC adequados Verifique os n meros do lote de reagente na Ficha do Lote Principal para garantir que est o emparelhados os reagentes adequados Abra o frasco de TCR e deposite a tampa numa superf cie de trabalho limpa e coberta Abra o frasco de IC e deite todo o conte do no frasco de TCR Uma pequena quantidade de l quido dever ficar no frasco de IC Tape o frasco de TCR e agite suavemente a solu o para misturar o conte do Evite formar espuma durante este passo Anote as iniciais do operador e a data actual na etiqueta Deite fora o frasco e a tampa do IC poss vel que haja forma o de precipitado no wTCR o que pode resultar em resultados inv lidos devido aos erros de verifica o de volume O precipitado pode ser di
86. lic vel Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 32 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Os riscos relativos de doen a para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com resultados positivos vs negativos s o apresentados na Tabela 11 desvio de verifica o ajustado e Tabela 12 n o ajustado Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 20 9 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 29 4 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Mulheres que apresentaram HPV do tipo 16 18 e ou 45 tinham 3 7 vezes mais probabilidade de ter 2CIN2 e 5 3 vezes mais probabilidade de ter 2CIN3 do que mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes Tabela 11 Popula o NILM gt 30 anos Riscos relativos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay estimativas ajustadas do desvio de verifica o 2CIN2 2CIN3 Interpreta o do teste do Aptima Assay Risco relativo Risco relativo CI de 95 CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 20 9 29 4 HPV de HR Neg 6 3 69 3 7 2 120 8 HPV 16 e ou 18 45 Pos vs 3 7 5 3 outro HPV de HR pos 1 5 9 5 1 5 18 2 Outro
87. m Refrigerada do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima conservar a uma temperatura de 2 C a 8 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade A Reagente de amplifica o do HPV 16 18 45 1 frasco cidos nucleicos n o infecciosos desidratados em solu o tamponada com lt 5 de agente de volume E Reagente enzim tico do HPV 16 18 45 1 frasco Transcriptase reversa e polimerase do RNA desidratadas em solu o tamponada com HEPES com lt 10 de reagente de volume P Reagente de sonda do HPV 16 18 45 1 frasco Sondas de DNA quimioluminescentes n o infecciosas lt 500 ng frasco desidratadas em solu o tamp o com succinato contendo lt 5 de detergente IC Reagente do controlo interno do HPV 16 18 45 1 frasco Transcrito de RNA n o infeccioso em solu o tamponada com lt 5 de detergente Embalagem Temperatura Ambiente do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima conservar a uma temperatura de 15 C a 30 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade AR Solu o de reconstitui o de amplifica o do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o aquosa contendo conservantes ER Solu o de reconstitui o enzim tica do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o tamp o com HEPES contendo um agente tensioactivo e glicerol PR Solu o de reconstitui o de sondas do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o tamponada com succinato contendo lt 5 de detergente S Reagente de selec o d
88. m avaliadas com 30 anos ou idade superior com resultados de citologia de NILM e estado de doen a conclusivo apresentaram resultados negativos do Aptima HPV Assay durante o ensaio CLEAR Um resultado negativo de Aptima HPV Assay indica que nenhum dos 14 tipos de HPV de alto risco se encontram presentes e foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade desta an lise Os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima pelo resultado do Aptima HPV Assay e o consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia s o apresentados na Tabela 7 Tabela 7 Popula o NILM gt 30 anos Resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay pelo consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado do Consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado do A Aptima HPV Interpreta o E Assay ensaio AHPV GT Indeterminado Normal CIN1 CIN2 CIN3 Cancro Total HPV 16 Pos HPV 18 45 Neg HPV 16 Pos 2 27 0 0 3 1 33 HPV 16 Neg HPV 18 45 HPV 18 45 Pos Pos so l 2 a PRANE HPV 16 P HPV 16 os e HPV 18 45 Pos 18 45 Pos a g g o o q 9 HPV 16 Neg Outros HPV HPV 18 45 Neg de HR Pos 16 218 m 4 4 E 293 Total 19 271 12 5 7 3 317 P HPV 16 18 45 HPV de Negativa Neg HR Neg 25 483 17 4 1 0 530 Total 44 754 29 9 8 st 847 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima
89. mbalagem temperatura ambiente do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima conservar a uma temperatura entre 15 C a 30 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade AR Solu o de Reconstitui o de Amplifica o do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o aquosa contendo conservantes ER Solu o de Reconstitui o Enzim tica do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o tamp o com HEPES contendo um agente tensioactivo e glicerol PR Solu o de Reconstitui o de Sondas do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o tamp o com succinato contendo lt 5 de detergente S Reagente de Selec o do HPV 16 18 45 1 frasco Solu o tamp o com 600 mM de borato contendo agente tensioactivo TCR Reagente de Capta o do Alvo do HPV 16 18 45 1 frasco cido nucleico n o infeccioso numa solu o tamp o contendo fase s lida lt 0 5 mg ml Colarinhos de Reconstitui o 3 Ficha de C digos de Barras do Lote Principal 1 folha Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 14 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Panther System Embalagem de Calibradores do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima C digo de Produto 303235 ou 303183 conservar a uma temperatura entre 2 C a 8 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade PCAL1 Calibrador Positivo 1 do HPV 16 18 45 5 frascos Transcrito in vitro n o infeccioso do HPV 18 a 750 c pias por ml numa solu o tamp o contendo lt 5 de detergente PC
90. n tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System 232 mulheres apresentavam um estado de doen a n o verificado incluindo indeterminado Tabela 29 Das 10 348 mulheres com resultados negativos no Aptima HPV assay provenientes do ensaio CLEAR original 9799 apresentavam um estado de doen a n o verificado Dado o estudo ter sido desenhado de modo a que apenas mulheres seleccionadas aleatoriamente com resultados negativos para o Aptima HPV assay no Tigris DTS System e para o teste de DNA aprovado pela FDA fossem encaminhadas para colposcopia a propor o de mulheres com um estado de doen a n o verificado foi elevada neste grupo 96 2 Para ajustar este desvio de verifica o foi utilizado um m todo de imputa o m ltipla para efectuar a estimativa do n mero de mulheres com doen a que teriam sido identificadas caso todas as mulheres tivessem sido submetidas a colposcopia S o apresentadas tanto as estimativas de desempenho ajustadas do desvio de verifica o como as estimativas de desempenho n o ajustadas com base nas 808 mulheres com estado de doen a verificado Tabela 29 Popula o NILM 2 30 anos Classifica o de mulheres com NILM suscept veis de serem avaliadas atrav s do Aptima HPV Assay Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e resultados do teste do DNA do HPV estado da doen a 2CIN2 e 2CIN3 e estado de verifica o da doen a Estado de doen a Estado de doen a
91. n tipos HPV 16 18 45 Aptima para a detec o de zCIN2 e neoplasia intraepitelial de grau 3 ou doen a do colo do tero mais grave 2CIN3 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 24 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Popula o ASC US 2 21 anos Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes de citologia l quida ThinPrep Na totalidade verificaram se 400 mulheres suscept veis de serem avaliadas com 21 anos ou idade superior com resultados de citologia ASC US e resultados do Aptima HPV Assay positivos cujas amostras de encaminhamento de Papanicolau foram eleg veis para teste com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Destas 46 mulheres n o possu am amostras de encaminhamento de Papanicolau dispon veis para teste e 6 apresentavam diagn sticos de doen a indeterminada foram todas exclu das da an lise As restantes 348 mulheres suscept veis de serem avaliadas com estados de doen a conclusivos apresentaram resultados v lidos do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com base no teste de reflexo a partir de um resultado do Aptima HPV Assay positivo Sessenta e sete 67 mulheres tinham 2CIN2 e 29 tinham 2CIN3 Das 348 mulheres suscept veis de serem avaliadas com resultados do Aptima HPV Assay positivos 117 mulheres apresentaram resultados positivos com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima indicando a presen a do HPV 16 e ou do HPV 18
92. o HPV 16 18 45 1 frasco Solu o tamponada com 600 mM de borato contendo agente tensioactivo Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 8 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Tigris DTS System Embalagem Temperatura Ambiente do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima conservar a uma temperatura de 15 C a 30 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade TCR Reagente de capta o do alvo do HPV 16 18 45 1 frasco cido nucleico n o infeccioso numa solu o tamponada contendo fase s lida lt 0 5 mg ml Colarinhos de Reconstitui o 3 Ficha de C digos de Barras do Lote Principal 1 folha Embalagem de Calibradores do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima C digo de Produto 303235 ou 303183 conservar a uma temperatura de 2 C a 8 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade PCAL1 Calibrador positivo 1 do HPV 16 18 45 5 frascos Transcrito in vitro n o infeccioso do HPV 18 a 750 c pias por ml numa solu o tamponada contendo lt 5 de detergente PCAL2 Calibrador positivo 2 do HPV 16 18 45 5 frascos Transcrito in vitro de HPV 16 n o infeccioso a 1000 c pias por ml numa solu o tamponada contendo lt 5 de detergente NCAL Calibrador negativo do HPV 16 18 45 5 frascos Solu o tamp o contendo lt 5 de detergente Materiais necess rios mas dispon veis separadamente Nota Os materiais dispon veis na Aptima t m a indica o do c digo
93. ociety for Colposcopy and Cervical Pathology HPV Genotyping Clinical Update 2009 http www asccp org Portals 9 docs pdfs Consensus 20Guidelines clinical_update_20090408 pdf Accessed March 22 2012 Wright T C S Massad C J Dunton M Spitzer E J Wilkinson and D Solomon 2007 2006 Consensus guidelines for the management of women with abnormal cervical screening tests Journal of Lower Genital Tract Disease 11 4 201 222 Kacian D L and T J Fultz 1995 Nucleic acid sequence amplification methods U S Patent 5 399 491 Arnold L J P W Hammond W A Wiese and N C Nelson 1989 Assay formats involving acridinium ester labeled DNA probes Clin Chem 35 1588 1594 Nelson N C A BenCheikh E Matsuda and M Becker 1996 Simultaneous detection of multiple nucleic acid targets in a homogeneous format Biochem 35 8429 8438 Datta S D L A Koutsky S Ratelle E R Unger J Shlay T McClain B Weaver P Kerndt J Zenilman M Hagensee C J Suhr and H Weinstock 2008 Human Papillomavirus Infection and Cervical Cytology in Women Screened for Cervical Cancer in the United States 2003 2005 Annals Int Med 148 493 Clifford G M S Gallus R Herrero N Mu oz P J F Snijders S Vaccarella P T H Anh C Ferreccio N T Hieu E Matos M Molano R Rajkumar G Ronco S de Sanjos H R Shin S Sukvirach J O Thomas S Tunsakul C J L M Meijer S Franceschi and the IARC HPV Prevalence Su
94. om os dois ensaios foram encaminhadas para colposcopia para a avalia o da linha de refer ncia Foi obtida uma biopsia ECC de cada uma das mulheres que realizaram colposcopia As biopsias por pun o foram obtidas apenas de les es vis veis m todo directo 1 biopsia por les o O acompanhamento de mulheres no Estudo NILM que n o t m 2CIN2 prossegue ha 3 anos com consultas citol gicas anuais As mulheres com ASC US ou resultados citol gicos mais graves durante o per odo de acompanhamento s o encaminhadas para colposcopia utilizando o mesmo procedimento de biopsia realizado para a avalia o da linha de refer ncia O estado da doen a foi determinado a partir de um consenso do painel de revis o de histologia que foi baseado na concord ncia de pelo menos 2 patologistas especialistas O estado de HPV e citologia das mulheres n o foram apresentados aos patologistas especialistas bem como os diagn sticos de histologia um do outro Os resultados do teste do HPV n o foram apresentados aos investigadores m dicos e mulheres at depois da conclus o da consulta de colposcopia com o intuito de evitar desvio Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 44 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Para validar a utiliza o prevista do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System como um teste de reflexo de um esp cime positivo do Aptima HPV assay foram eleg veis para teste de
95. os do Ensaio Aptima Risco relativo Risco relativo CI de 95 CI de 95 HPV 16 e ou 18 45 Positivo vs 11 1 22 8 HPV de HR Negativo 6 2 20 0 8 0 65 6 HPV 16 e ou 18 45 Positivo vs 2 1 4 0 outro HPV de HR positivo 1 3 3 1 1 9 8 2 Outro HPV de HR Positivo vs 5 4 5 7 HPV de HR Negativo 2 9 9 9 1 8 18 1 HPV de HR Positivo vs 7 3 11 5 HPV de HR Negativo 4 2 12 8 4 1 32 2 Preval ncia 9 1 81 892 3 8 34 892 Cl intervalo de confianga HR alto risco Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise As rela es de probabilidade 2CIN2 e 2CIN3 de acordo com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima s o apresentados na Tabela 27 Os tipos de HPV 16 18 e ou 45 tinham 4 1 vezes mais probabilidade de estarem presentes numa mulher com 2CIN2 e 5 2 vezes mais probabilidade de estarem presentes numa mulher com 2CIN3 Tabela 27 Popula o ASC US 2 21 anos Rela es de probabilidade para 2CIN2 e 2CIN3 segundo os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resultados do Ensaio Aptima Rela o de probabilidade Rela o de probabilidade CI de 95 CI de 95 ais 4 1 5 2 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 2 9 5 6 3 5 7 0 is 1 6 1 1 Outro HPV de HR Positivo 1 2 2 1 0 6 1 8 0 3 0 2 HPV de HR
96. os HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes de citologia l quida SurePath Foram colhidos esp cimes de citologia l quida SurePath de mulheres canadianas encaminhadas para seguimento devido a um ou mais exames Papanicolau an malos infec o por HPV ou outra raz o Uma al quota 0 5 ml de cada esp cime foi transferida para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima e depois tratada com a Solu o de Transfer ncia Aptima Uma nica r plica de cada esp cime foi testada com o Aptima HPV Assay n 481 As amostras positivas foram ent o testadas com o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e o Aptima HPV Assay sendo os resultados apresentados na Tabela 36 S o apresentados resultados semelhantes para o teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado que diferencia o HPV 16 e HPV 18 mas n o o HPV 45 distintamente em rela o aos outros gen tipos de alto risco O risco relativo de doen a para resultados positivos versus negativos de gen tipos apresentado na Tabela 37 para o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e o teste de PCR para o HPV Tabela 36 Risco absoluto de 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima e um teste de PCR para o HPV dispon vel no mercado Risco absoluto Risco absoluto Resultado para Resultado para o I terpretac de 2CIN3 de 2CIN3 HPV de HR gen tipo preta Aptima PCR para o HPV CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 12 5
97. os de esp cimes devem ser tapados com uma barreira de pl stico ou de folha de alum nio nova e limpa 3 Se os esp cimes analisados tiverem de ser congelados ou transportados retire a tampa perfur vel e coloque novas tampas n o perfur veis nos tubos de esp cimes Se os esp cimes tiverem de ser transportados para a realiza o de testes noutras instala es as temperaturas especificadas dever o ser mantidas Antes de destapar esp cimes que j tenham sido testados e novamente tapados os tubos de esp cimes t m de ser centrifugados durante 5 minutos a 420 de For a Centr fuga Relativa Relative Centrifugal Force RCF para levar todo o l quido para o fundo do tubo Nota Os esp cimes t m de ser expedidos de acordo com os regulamentos de transporte locais nacionais e internacionais em vigor Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 7 AW 11504 601 Rev 002 PT Tigris DTS System Aptima Tigris DTS System Reagentes e materiais fornecidos Nota Para obter informa es sobre quaisquer declara es de perigo e de precau o que possam estar associadas a estes reagentes consulte a Biblioteca de fichas de dados de seguran a Safety Data Sheet Library em www hologic com sds Kit do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 100 testes 3 embalagens C digo de Produto 303234 ou 303184 Os calibradores podem ser adquiridos em separado Veja abaixo os c digos de produto das embalagens individuais Embalage
98. os do HPV 16 18 45 Aptima 28 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Popula o NILM 2 30 anos Desempenho cl nico do estudo do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes de citologia l quida ThinPrep Na totalidade verificaram se 540 mulheres suscept veis de serem avaliadas com 30 anos ou idade superior com resultados de citologia de NILM e resultados positivos do Aptima HPV Assay cujas amostras de encaminhamento de Papanicolau foram eleg veis para teste com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Destas 25 mulheres n o possu am amostras de encaminhamento de Papanicolau dispon veis para teste foram todas exclu das da an lise As restantes 515 mulheres suscept veis de serem avaliadas apresentaram resultados v lidos do Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima Destas 317 realizaram colposcopia Quinze 15 mulheres tinham 2CIN2 e dez 10 tinham 2CIN3 283 mulheres tinham histologia normal CIN1 19 mulheres tinham um estado de doen a indeterminado Das 298 mulheres suscept veis de serem avaliadas com estado de doen a conclusivo e resultados positivos do Aptima HPV Assay 61 apresentaram resultados positivos no Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima indicando a presen a de HPV 16 e ou HPV 18 45 237 apresentaram resultados negativos indicando a presen a de um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco 505 mulheres adicionais suscept veis de sere
99. porte Se um tubo de amostra apresentar bolhas ou um volume mais baixo do que o normalmente observado centrifugue o tubo durante 5 minutos a 420 RCF para garantir que n o existe l quido na tampa Nota O n o cumprimento do passo 3 pode resultar em descarga de l quido pela tampa do tubo de amostra E Prepara o do sistema Configure o sistema de acordo com as instru es no Manual do Operador do Panther System Panther System Operator s Manual e na sec o Notas sobre o procedimento abaixo Certifique se de que s o utilizados suportes de reagente e adaptadores de TCR de dimens o adequada Notas sobre o procedimento A Calibradores 1 Para trabalhar adequadamente com o software do Ensaio dos gen tipos 16 18 45 Aptima no Panther System s o necess rias duas r plicas do Calibrador Negativo e de cada Calibrador Positivo Pode ser colocado um frasco de cada calibrador em qualquer posi o do suporte numa Pista da Zona de Amostras no Panther System A pipetagem de esp cimes come a quando se verificar uma das duas condi es seguintes a Os calibradores Positivo e Negativo est o actualmente a ser processados pelo Panther System b Os resultados v lidos para os calibradores est o registados no Panther System Uma vez pipetados os tubos de calibrador e quando estiverem a ser processados para um kit de reagente espec fico os esp cimes podem ser executados com o respectivo kit de reagente de ensaio at 24 horas a
100. presentando uma ampla distribui o geogr fica e uma popula o diversificada 10 estados dos Estados Unidos da Am rica para avaliar o Aptima HPV assay o qual detecta 14 tipos de HPV de alto risco Foram avaliadas amostras provenientes de mulheres no ensaio CLEAR com resultados positivos do Aptima HPV assay no Panther System com o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima no Panther System num estudo cl nico separado A preval ncia do HPV 16 18 45 bem como dos restantes 11 tipos de HPV de alto risco observados no estudo cl nico com base nos resultados do teste com o Aptima HPV assay e o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System foi categorizada em geral de acordo com o grupo et rio e com o local de teste Um resultado do Aptima HPV assay negativo no Panther System indica que nenhum dos 14 tipos de HPV de alto risco se encontram presentes e foram designados como negativos para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System para fins de an lise Os resultados s o apresentados na Tabela 22 para as popula es de c lulas escamosas at picas de significado indeterminado Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance ASC US e negativo para les o intraepitelial ou malignidade Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy NILM Tabela 22 Preval ncia de mRNA do HPV de alto risco em popula es de acordo com o grupo et rio local de teste e todas em conjunto
101. pt veis de serem avaliadas com estado de doen a conclusivo e resultados positivos do Aptima HPV assay no Panther System 65 apresentaram resultados positivos no Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System indicando a presen a de HPV 16 e ou HPV 18 45 194 apresentaram resultados negativos indicando a presen a de um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco Um n mero adicional de 549 mulheres suscept veis de serem avaliadas com 30 anos ou idade superior com resultados citol gicos NILM e estado de doen a conclusivo apresentaram resultados negativos no Aptima HPV assay no Panther System Um resultado negativo do Aptima HPV assay indica que nenhum dos 14 tipos de HPV de alto risco se encontram presentes e foram designados como negativos para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Panther System para fins de an lise Os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima segundo o resultado do Aptima HPV assay e o consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia s o apresentados na Tabela 28 Tabela 28 Popula o NILM 2 30 anos Resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay segundo o consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado Consenso do diagn stico do painel de revis o de histologia Resultado do o do Aptima HPV p Interpreta o Assay Ensaio AHPV GT Indeterminado Normal
102. ranco Frazer R Sankaranarayanan J Schiller A Singer T C Wright Jr W Kinney C J Meijer J Linder E McGoogan and C Meijer 2004 Cervical cancer control priorities and new directions Int J Cancer 108 3 329 33 Erratum in Int J Cancer 108 6 945 Cuschieri K S M J Whitley H A Cubie 2004 Human papillomavirus type specific DNA and RNA persistence implications for cervical disease progression and monitoring J Med Virol 73 1 65 70 De Sanjose S et al 2010 Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer a retrospective cross sectional worldwide study The Lancet DOI 10 1016 S1470 2045 10 70230 8 Burger R A B J Monk T Kurosaki H Anton Culver S Vasilv M L Berman and S P Wilczynski 1996 Human Papillomavirus Type 18 Association with poor prognosis in early stage cervical cancer J Nat Cancer institute 88 19 1361 1368 Safaeian M M Schiffman J Gage D Solomon C Wheeler and P Castle 2009 Detection of Precancerous Cervical Lesions Is Differential by Human Papillomavirus Type Cancer Res 69 8 3262 3266 Khan M J P E Castle A T Lorincz S Wacholder M Sherman D R Scott B B Rush A G Glass and M Schiffman 2005 The elevated 10 year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus HPV type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinical practice J Natl Cancer Inst 97 14 1072 1079 ASCCP American S
103. ras de col nias PFU unidades formadoras de placas TDso dose de transforma o 50 TCIDso dose infecciosa de culturas de tecidos 50 Transcrito in vitro testado Embora n o tenha sido observada reactividade cruzada para Trichomonas vaginalis foi observada interfer ncia ver abaixo A sensibilidade anal tica do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima na presen a de microrganismos foi avaliada com o mesmo painel descrito na Tabela 20 que foi tamb m aditivada com uma baixa concentra o de c lulas SiHa infectadas com HPV 1 6 c lula por reac o e c lulas HeLa infectadas por HPV 0 3 c lulas reac o Os crit rios do estudo para a avalia o do efeito da presen a de microrganismos na sensibilidade do ensaio basearam se na positividade A presen a de microrganismos n o interferiu com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima excep o do Trichomonas vaginalis TV Foi observada interfer ncia com TV quando presente em concentra es superiores a 3 x 10 c lulas ml Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 41 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Aptima Interfer ncia As subst ncias descritas na Tabela 21 foram aditivadas individualmente em esp cimes de citologia l quida ThinPrep agrupados dilu dos 1 2 9 em STM s concentra es especificadas na tabela Todas as subst ncias foram testadas com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima na presen a e au
104. rovenientes de 18 cl nicas sobretudo cl nicas de obstetr cia ginecologia que abrangeram uma ampla distribui o geogr fica e uma popula o diversificada Durante o ensaio CLEAR os esp cimes de encaminhamento residuais de Papanicolau foram testados com o Aptima HPV Assay e com um teste do DNA do HPV dispon vel no mercado Para o ensaio cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foram testadas amostras dos esp cimes residuais de encaminhamento de Papanicolau com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Todas as mulheres no Estudo ASC US foram encaminhadas para colposcopia independentemente dos seus resultados do Aptima HPV Assay e do teste do DNA do HPV dispon vel no mercado Foi obtida uma curetagem endocervical ECC biopsia e biopsias cervicais por pun o 1 biopsia de cada um dos 4 quadrantes Caso fosse vis vel uma les o era obtida uma biopsia de pun o m todo direccionado 1 biopsia por les o e quadrantes sem uma les o vis vel foram submetidos a biopsia na jun o escamo colunar m todo aleat rio No Estudo NILM as mulheres positivas com o Aptima HPV Assay e ou o teste do DNA do HPV dispon vel no mercado bem como as mulheres seleccionadas aleatoriamente que tinham sido negativas com os dois ensaios foram encaminhadas para colposcopia para a avalia o da linha de refer ncia Foi obtida uma biopsia ECC de cada uma das mulheres que realizaram colposcopia As biopsias de pun o foram obtidas apen
105. rveys Study Group Worldwide distribution of human papillomavirus types in cytologically normal women in the International Agency for Research on Cancer HPV prevalence surveys a pooled Analysis 2005 The Lancet 366 991 Stoler M H T C Wright Jr J Cuzick J Dockter J Reid D Getman C Giachetti Aptima HPV assay performance in women with atypical squamous cells of undetermined significance cytology results 2013 American Journal of Obstetrics amp Gynecology 208 2 144 145 Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 61 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima ul D Ce Hologic Inc 10210 Genetic Center Drive EMERGO EUROPE Molenstraat 15 San Diego CA 92121 USA 2513 BH The Hague Apoio ao Cliente 1 844 Hologic 1 844 465 6442 Holanda customersupport hologic com Suporte t cnico 1 888 484 4747 molecularsupport hologic com Para obter mais informa es sobre contactos aceda a www hologic com Este produto destina se a ser utilizado apenas no dom nio do diagn stico in vitro de seres humanos Hologic Aptima DTS Panther PreservCyt ThinPrep e Tigris s o marcas comerciais e ou marcas registadas da Hologic Inc e ou respectivas subsidi rias nos EUA e ou em outros pa ses RAININ uma marca comercial da Rainin Instruments LLC SUREPATH e PREPSTAIN s o marcas comerciais da TriPath Imaging Inc Quaisquer outras marcas comerciais que possam aparecer neste folheto informativo pertencem aos respecti
106. s ncia de c lulas cultivadas infectadas com HPV SiHa 1 6 c lulas reac o e HeLa 0 3 c lulas reac o Foi observada interfer ncia com o seguinte quando presente em concentra es superiores s especificadas lubrificantes vaginais que contenham Poliquat rnio 15 a 1 p v creme anti f ngico que contenha tioconazol a 0 03 p v muco a 0 3 p v hormonas intravaginais que contenham progesterona a 1 p v Tabela 21 Subst ncias testadas relativamente a poss vel interfer ncia com o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima Categoria do produto Marca ou tipo de produto Concentra o mais elevada testada que n o interferiu com o ensaio KY natural feeling liquid 10 viv Lubrificante vaginal up amp up Target brand personal lubricant liquid Astroglide 1 piv Espermicida Vaginal Contraceptive Foam VCF ien o gel contraceptivo Options Conceptrol Vaginal Contraceptive Gel up amp up Target brand miconazole 3 10 p v Creme antif ngico Monistat 3 Combination Pack up amp up Target brand Tioconazol 1 0 03 p v Summer s Eve Douche Duche 10 v v up amp up Target brand feminine douche Summer s Eve Feminine Deodorant Spray Spray feminino J 10 p v FDS Feminine Deodorant Spray Muco Mucina porcina 0 3 p v Creme vaginal Estrace estrog nio 10 p v Hormonas intravaginais Creme Crinone progesterona 1 piv Sangue Total Sangue Total 5 viv Leucocitos le
107. s negativos do Aptima HPV assay no Panther System foram testados com o Ensaio dos gen tipos 16 18 45 Aptima no Panther System Para a an lise de acordo com o local de teste os resultados para estas mulheres foram atribu dos aleatoriamente a um dos 3 locais de teste Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 43 AW 11504 601 Rev 002 PT Desempenho do ensaio no Panther System Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Desenho do estudo cl nico do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima com esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep O Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foi avaliado no Panther System utilizando encaminhamentos de esp cimes citol gicos colhidos em mulheres que expressaram o seu consentimento durante o estudo cl nico americano multic ntrico e prospectivo conhecido por ensaio CLEAR O ensaio CLEAR foi realizado para determinar o desempenho cl nico do Aptima HPV assay no Tigris DTS System para a detec o de neoplasia intraepitelial cervical de grau 2 ou doen a cervical mais grave 2CIN2 As mulheres foram inscritas tanto no Estudo ASC US como no Estudo NILM com base nos respectivos resultados de encaminhamento baseados em citologia de base l quida ThinPrep provenientes de rastreios de rotina ao cancro do colo do tero A popula o do Estudo ASC US incluiu mulheres com 21 anos e idade superior com resultados citol gicos de ASC US e a popula o do Estudo NILM incluiu mulheres com 30
108. scart veis Kit de Solu o de Transfer ncia Aptima apenas para esp cimes SurePath 303658 Materiais opcionais C digo de Produto Intensificador de Lix via para limpeza 302101 Procedimento de teste do Tigris DTS System Nota Consulte o Manual do Operador do Tigris DTS System Tigris DTS System Operator s Manual para mais informa es sobre o procedimento do Tigris DTS System A Prepara o da rea de trabalho Limpe as superf cies de trabalho onde ser o preparados os reagentes Limpe as superf cies de trabalho com 2 5 a 3 5 0 35 M a 0 5 M de solu o de hipoclorito de s dio Deixe a solu o de hipoclorito de s dio entrar em contacto com as superf cies e os pipetadores durante pelo menos 1 minuto e depois enxague com agua N o deixe a solu o de hipoclorito de s dio secar Cubra a superf cie da bancada onde ser o preparados os reagentes com capas limpas e absorventes para bancadas de laborat rios com forro pl stico B Prepara o dos reagentes de um novo kit Nota A Reconstitui o dos Reagentes deve ser realizada antes de qualquer trabalho no Tigris DTS System 1 Para reconstituir os Reagentes de Amplifica o Enzim tico e de Sonda combine os frascos do reagente liofilizado com a solu o de reconstitui o Se estiverem refrigeradas deixe as solu es de reconstitui o alcan ar a temperatura ambiente antes de serem utilizadas a Emparelhe cada solu o de reconstitui o com o resp
109. sitivos com concentra es iguais ou superiores ao limite de detec o do ensaio positividade prevista 2 95 3 membros do HPV 16 e ou 18 45 positivos com concentra es abaixo do limite de detec o do ensaio positividade prevista gt 0 a lt 25 e 4 membros do HPV negativos Os membros positivos do painel do HPV 16 e ou 18 45 foram preparados aditivando transcrito in vitro ou c lulas cultivadas infectadas com HPV SiHa HeLa e MS751 ATCC Manassas Virginia em esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep residuais agrupados ou diluindo esp cimes cl nicos do HPV 16 18 e ou 45 em esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep residuais agrupados Os membros negativos do painel do HPV foram preparados com esp cimes citol gicos de base l quida ThinPrep residuais agrupados ou com solu o PreservCyt No Estudo 1 2 operadores em cada um dos 3 locais de teste 1 instrumento por local executaram 2 listas de trabalho do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima por dia durante 3 dias O teste foi executado utilizando 2 lotes de reagentes Cada lista de trabalho continha 3 r plicas de cada um dos membros do painel de reprodutibilidade Foram testados cento e oito 108 tubos de amostra individuais para cada membro do painel 3 locais x 1 instrumento x 2 operadores x 2 lotes x 3 dias x 3 r plicas No Estudo 2 o teste foi efectuado internamente durante 13 dias com um total de 162 reac es testadas para cada membro do painel 1
110. sive cervical cancer worldwide J Pathol 189 12 19 Li N Franceschi S Howell Jones R Snijders P J F Clifford G M Human papillomavirus type distribution in 30 848 invasive cervical cancers worldwide Variation by geographical region histological type and year of publication Int J Cancer 2011 128 927 935 doi 10 1002 ijc 25396 Czegledy J C Losif B G Hansson M Evander L Gergely and G Wadell 1995 Can a test for E6 E7 transcripts of human papillomavirus type 16 serve as a diagnostic tool for the detection of micrometastasis in cervical cancer Int J Cancer 64 3 211 5 Doorbar J 2006 Molecular biology of human papillomavirus infection and cervical cancer Clin Sci Lond 110 5 525 41 Burd E M 2003 Human papillomavirus and cervical cancer Clin Microbiol Rev 16 1 1 17 Lambert P F H Pan H C Pitot A Liem M Jackson and A E Griep 1993 Epidermal cancer associated with expression of human papillomavirus type 16 E6 and E7 oncogenes in the skin of transgenic mice Proc Natl Acad Sci U S A 90 12 5583 7 Kjaer S K A J C van den Brule G Paull E I Svare M E Sherman B L Thomsen M Suntum J E Bock P A Poll and C J L M Meijer 2002 Type specific persistence of high risk human papillomavirus HPV as indicator of high grade cervical squamous intraepithelial lesions in young women population based prospective follow up study BMJ 325 7364 572 579 Monsonego J F X Bosch P Coursaget J T Cox E F
111. ssolvido aquecendo o wTCR a uma temperatura de 42 C a 60 C durante um m ximo de 90 minutos Deixe o wTCR equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado persistir 3 Prepare o reagente de sele c o a b Verifique o n mero do lote de reagente na Ficha de C digos de Barras do Lote Principal para garantir que pertence ao kit Se o Reagente de Selec o contiver precipitado aque a o Reagente de Selec o a 60 C 1 C por um m ximo de 45 minutos para facilitar a dissolu o do precipitado Misture o frasco suavemente a cada 5 a 10 minutos Deixe o Reagente Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 11 AW 11504 601 Rev 002 PT Tigris DTS System Aptima de Selec o equilibrar temperatura ambiente antes de ser utilizado N o utilize se o precipitado ou a nebulosidade persistir Nota Misture bem todos os reagentes invertendo os suavemente antes de os colocar no sistema Evite formar espuma durante a invers o dos reagentes C Prepara o de reagentes previamente reconstitu dos 1 2 Os Reagentes de Sonda Amplifica o e Enzim tico previamente reconstituidos t m de alcan ar a temperatura ambiente 15 C a 30 C antes do in cio do ensaio Se o Reagente de Sonda reconstitu do contiver precipitado que n o se dissolva novamente temperatura ambiente aque a o a uma temperatura m xima de 60 C durante 1 ou 2 minutos N o utilize se houver
112. tados do Ensaio Aptima Rela o de probabilidade Rela o de probabilidade CI de 95 CI de 95 ne 11 2 24 1 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 3 3 38 4 2 6 225 9 Er 3 5 4 7 Outro HPV de HR Positivo 1 3 9 4 0 7 29 8 r 0 8 0 4 HPV de HR Negativo 0 6 1 1 0 1 2 2 Cl intervalo de confianga HR alto risco Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Tabela 35 Popula o NILM 2 30 anos Rela es de probabilidade para 2CIN2 e 2CIN3 segundo os resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e do Aptima HPV Assay estimativas n o ajustadas 2CIN2 2CIN3 Interpreta o dos resultados do Ensaio Aptima Rela o de probabilidade Rela o de probabilidade CI de 95 CI de 95 A 4 8 7 4 HPV 16 e ou 18 45 Positivo 2 1 8 5 3 3 12 0 aa 1 5 1 5 Outro HPV de HR Positivo 0 7 2 5 0 5 2 9 0 4 0 1 HPV de HR Negativo 0 2 0 8 0 0 0 6 Cl intervalo de confian a HR alto risco Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para fins de an lise Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 54 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Panther System Desempenho cl nico do Ensaio dos gen tip
113. tima com colheita e transporte de esp cimes cervicais A colheita dos esp cimes CSCT foi realizada em mulheres em rastreios de rotina ou em consultas de acompanhamento e foram testados com o Aptima HPV assay Esp cimes residuais de CSCT n 378 com um resultado positivo no Aptima HPV Assay foram testados com o ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima no Tigris DTS System O gen tipo do HPV de cada esp cime foi determinado utilizando um teste de genotipagem do DNA Os esp cimes com resultados discordantes entre o teste de genotipagem DNA e ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima foram testados com um teste de sequenciamento PCR de transcriptase reversa validado para resolu o dos respectivos estados HPV 16 HPV 18 e HPV 45 Foi determinada a concord ncia cl nica positiva e negativa do ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a detec o do HPV 16 18 e 45 de alto risco Os resultados s o apresentados na Tabela 17 Tabela 17 Concord ncia Cl nica do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima no Tigris DTS System para a detec o do HPV 16 18 e 45 de alto risco em esp cimes CSCT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima M todo de refer ncia HPV 16 Pos HPV 16 Neg HPV 16 Pos HPV 16 Neg HPV 18 45 HPV 18 45 HPV 18 45 HPV 18 45 Neg Pos Pos Neg Total HPV 16 Pos HPV 18 45 Neg 1 o 1 2 ie HPV 16 Neg HPV 18 45 Pos i o o 1 aa HPV 16 Pos HPV 18 45 Pos 2 o q E HPV 16 Neg HPV 18
114. tima e o resultado do Aptima HPV Assay s o indicados na Tabela 3 O risco de 2CIN2 em mulheres com HPV do tipo 16 18 e ou 45 presente foi de 29 1 comparativamente a 14 3 em mulheres com um ou mais dos outros 11 tipos de HPV de alto risco presentes e 2 2 em mulheres sem tipos de HPV de alto risco presentes Os riscos absolutos s o indicados por grupo et rio na Tabela 4 Resultado do Aptima HPV Assay Resultado do ensaio AHPV GT HPV 16 Pos e ou Interpreta o HPV 16 e ou 2CIN2 Tabela 3 Popula o ASC US 2 21 anos Riscos absolutos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay 2CIN3 Risco absoluto CI de 95 29 1 34 117 Risco absoluto CI de 95 16 2 19 117 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 22 4 36 0 11 4 21 1 HPV 16 Pos 35 7 25 70 20 0 14 70 HPV 18 45 Neg Apenas APY e FOS 26 1 45 9 12 6 28 0 HPV 16 Neg Apenas 15 9 7 44 9 1 4 44 Positiva HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 7 2 28 3 2 9 19 5 HPV 16 Pos 66 7 2 3 33 3 1 3 HPV 18 45 Pos PEM 16 9 P89 Pes 15 2 98 2 1 8 84 6 Outros HPV de 14 3 33 231 4 3 10 231 HRY TOMANDO HR Pos 10 9 17 9 2 4 6 8 19 3 67 348 8 3 29 348 Pos ou Neg HPV de HR Pos 17 1 21 3 6 9 9 4 E E 2 2 12 545 0 7 4 545 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 1 2 3 5 0 2 1 6 Sages 8 8 3 7 pevalencla 79 893 33 893 AHPV GT Ensaio dos gen
115. tipos do HPV 16 18 45 Aptima 30 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Desempenho do ensaio no Tigris DTS System Tabela 9a Popula o NILM 2 30 anos Riscos absolutos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptima HPV Assay estimativas ajustadas do desvio de verifica o 2CIN2 gt CIN3 Resultado do Resultado do inisrorsi c o Aptima HPV Assay ensaio AHPV GT preta Risco absoluto Risco absoluto CI de 95 CI de 95 HPV 16 Pos e ou HPV 16 e ou 12 6 9 5 HPV 18 45 Pos HPV 18 45 Pos 3 7 21 4 2 1 16 8 HPV 16 Pos 14 5 12 1 HPV 18 45 Neg Apenas HEY BROS 2 1 26 9 0 7 23 4 HPV 16 Neg 10 7 6 9 HPV 18 45 Pos Apenas APEB ROS 0 0 22 5 0 0 16 2 Positiva ENE os HPV 18 45 Pos FEM 16671845 ES N A N A 3 4 1 8 HPV 16 18 45 Neg Outros HPV de HR Pos 1 2 5 6 0 1 3 5 Pos ou Neg HPV de HR Pos 2 a 5 1 a 2 0 6 0 4 Negativa HPV 16 18 45 Neg HPV de HR Neg 0 1 1 2 0 0 0 7 Preval ncia 0 9 0 5 AHPV GT Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima HR alto risco Pos Positivo Neg Negativo N A n o aplic vel Mulheres com resultados negativos com o Aptima HPV Assay foram designadas como negativas para o Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima para a finalidade da an lise Tabela 9b Popula o NILM 2 30 anos Riscos absolutos de 2CIN2 e 2CIN3 para resultados do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima e Aptim
116. tologia l quida SurePath a uma temperatura de 2 C a 25 C 2 Os esp cimes devem ser transferidos para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima num prazo de 7 dias ap s a colheita 3 Antes da transfer ncia os esp cimes de citologia l quida SurePath devem ser conservados a uma temperatura de 2 C a 25 C 4 Os esp cimes de citologia l quida SurePath transferidos para um Tubo de Transfer ncia de Esp cimes Aptima podem ser conservados a uma temperatura de 2 Ca25 C durante um m ximo de 7 dias 5 Os esp cimes SurePath transferidos t m de ser tratados com a Solu o de Transfer ncia Aptima antes de serem realizados testes com o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima As amostras tratadas podem ser conservadas entre 2 C e 8 C durante at 17 dias antes da realiza o de testes com o Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima Consulte mais detalhes no folheto informativo do Kit de Transfer ncia de Esp cimes Esp cimes do Kit Aptima de Colheita e Transporte de Esp cimes Cervicais 1 Transporte e conserve os esp cimes a uma temperatura de 2 C a 30 C durante um m ximo de 60 dias 2 Se for necess rio um per odo de conserva o mais longo os esp cimes do kit de transporte podem ser conservados a uma temperatura entre 20 C a 70 C at 24 meses C Conserva o de esp cimes ap s o teste 1 Os esp cimes que tenham sido analisados devem ser conservados na vertical num suporte 2 Os tub
117. uc citos 1x10 c lulas ml solu o de lavagem do cido ac tico glacial solu o CytoLyt 2 6 viv cido ac tico glacial concentra o na amostra de teste esp cime de citologia l quida ThinPrep dilu do 1 2 9 em STM compar vel ao esp cime transferido para um tubo de transfer ncia Aptima Lubrificante pessoal que contenha Poliquat rnio 15 sangue total interferiu com o ensaio quando presente a 10 v v da concentra o do teste solu o de lavagem de cido ac tico glacial preparado misturando 1 parte de cido ac tico glacial e 9 partes de solu o Cytolyt conforme indicado no Manual do Operador do ThinPrep 2000 System ThinPrep 2000 System Operator s Manual Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 42 AW 11504 601 Rev 002 PT Aptima Resultados previstos do Panther System Preval ncia de mRNA do HPV de alto risco Resultados previstos do Panther System Preval ncia de mRNA do HPV de alto risco A preval ncia de infec o por HPV de alto risco varia amplamente e influenciada por diversos factores sendo a idade o factor de maior preponder ncia Diversos estudos investigaram a preval ncia do HPV conforme determinado pela detec o do DNA do HPV no entanto poucos estudos reportam preval ncia com base na detec o do mRNA do HPV oncog nico Foram inscritas num estudo cl nico prospectivo conhecido por ensaio CLEAR mulheres provenientes de diversas cl nicas n 18 re
118. uma temperatura entre 15 C e 30 C C P das luvas Como em qualquer sistema de reagentes o excesso de p nalgumas luvas pode causar a contamina o de tubos abertos E recomendada a utiliza o de luvas sem p Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 13 AW 11504 601 Rev 002 PT Panther System Aptima Panther System Reagentes e materiais fornecidos Ensaio dos gen tipos do HPV 16 18 45 Aptima 100 testes 3 embalagens C digo de Produto 303236 ou 303241 Os calibradores podem ser adquiridos parte Veja abaixo os c digos de produto das embalagens individuais Embalagem refrigerada do Ensaio dos gen tipos HPV 16 18 45 Aptima conservar a uma temperatura entre 2 C a 8 C ap s a recep o S mbolo Componente Quantidade A Reagente de amplifica o do HPV 16 18 45 1 frasco cidos nucleicos n o infecciosos desidratados em solu o tamponada com lt 5 de agente de volume E Reagente Enzim tico do HPV 16 18 45 1 frasco Transcriptase reversa e polimerase do RNA desidratadas em solu o tamponada com HEPES com lt 10 de reagente de volume P Reagente de Sonda do HPV 16 18 45 1 frasco Sondas de DNA quimioluminescentes n o infecciosas lt 500 ng frasco desidratadas em solu o tamp o com succinato contendo lt 5 de detergente IC Reagente do Controlo Interno do HPV 16 18 45 1 frasco Transcrito de RNA n o infeccioso em solu o tamp o com lt 5 de detergente E
119. vos propriet rios 2007 2015 Hologic Inc Todos os direitos reservados AW 11504 601 Rev 002 PT 2015 03 Ensaio dos genotipos do HPV 16 18 45 Aptima 62 AW 11504 601 Rev 002 PT
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