Home

Hoefer SE400 / SE410

1. Sistemas nativos de gel Reisfeld R A et al Acidic buffer system for resolution of cationic proteins Nature 195 281 1962 McLellan T Electrophoresis buffers for polyacrylamide gels at various pH values Anal Biochem 126 94 1982 Hedrick J L and Smith A J Size and charge isomer separation and estimation of molecular weights of proteins by discontinuous gel electrophoresis Arch Biochem Biophys 126 155 1968 Electroforese bidimensional Adams L D and Gallagher S R Two Dimensional Gel Electrophoresis Using the O Farrell System Current Protocols in Molecular Biology pp 10 4 1 10 4 13 1992 Anderson N G Anderson N L and Tollaksen S L Clin Chem 25 1199 1210 1979 Anderson N L and Anderson N G Proc Natl Acad Sci USA 74 5421 5425 1977 Bravo R et al Proc Natl Acad Sci USA 79 2281 2285 1982 Hurkman W J and Tanaka L K Plant Physiology 81 802 906 1986 Mets L J and Bogorad Anal Biochem 57 200 210 1974 O Farrell P H J Biol Chem 250 4007 4021 1975 e p38 Informac es sobre pedidos para 18 x 16 cm de gel quantidade c digo SE400 Sturdier Unidade Vertical completa 1 SE400 15 1 5 Inclui um conjunto de placas de vidro 18 x 16 cm 2 conjuntos de aperto 2 cames e 15 pocos pente e 2 espacadores 1 5 mm de espessura Outros Tamanho pentes e espacadores pedidos separadamente SE400 Sturdier Unidade Vertical de base
2. S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desco necta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Reca lentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhan dah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaborato rium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller lever erade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som r CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd testande laborat
3. 4 Estoque de acrilamida Solu o 1 7 5 ml 10m 12 5m 15 ml 0 67 ml 1 5 M TrisCI pH 8 8 Solu o 2 7 5 ml 7 5m 7 5 m 7 5 ml 0 5 M TrisCl pH 6 8 Soluc o 3 1 25 ml 10 SDS Solu o 4 0 3 ml 0 3 m 0 3 m 0 3 ml 0 05 ml H2O deionizada 14 6 ml 12 1 m 9 6 m 7 1 ml 3 00 ml 10 APS Solu o 45 150 yl 150 u 150 u 150 ul 25 ul TEMED 10 yl 10 y 10 u 10 ul 2 5 pl O volume final 30 0 30 0 m 30 0 m 30 0 ml 5 0 ml Para g is de gradiente linear utilizar volumes iguais de baixa e soluc es de acrilamida elevado Menos APS adicionado para aumentar o tempo de polimerizac o e menos ainda adicionado a soluc o de maior T para permitir que a polimerizac o de ocorrer a partir do topo para baixo Na nossa experi ncia com as concentrac es no exemplo gradiente 10 20 abaixo dez sandu ches de gel pode ser vertida em um rod zio de gel m ltipla com um caudal de 5 10 ml min Tabela 6 Receitas gradiente linear de gel por 100 ml de soluc o 10 T 20 T Estoque de acrilamida Solu o 1 33 30 ml 66 70 ml Sacarose 15 00 g 1 5 M TrisCI pH 8 8 Solu o 2 25 00 ml 25 00 ml 10 SDS Solu o 4 1 00 ml 1 00 ml H20 deionizada para 100 00 ml para 100 00 ml 10 APS Soluc o 5 0 300 ml 0 060 ml TEMED 0 036 ml 0 036 ml e p36 Ap ndice B Bibliografia Geral Gallagher S R and J A Smith Electrophoretic separation of proteins In Current Protocols in Molecular Biology F A Ausub
4. A tampa cont m ambos os eletrodos e os dois conectores de eletrodos O eletrodo de conectores de plugue os conectores de chumbo na c mara inferior buffer O c digo de cores ficha leva em c digo de cores tomadas na fonte de alimentac o Placas de vidro Dois 18 cm placas de vidro de largura s o inclu dos Placas para o SE400 s o 16 cm de comprimento e as placas para o SE410 s o 24 cm de comprimento A placa divisora entalhado pedido separadamente pode ser usado para executar dois g is ao mesmo tempo Grampos Dois 16 cm grampos s o necess rios para fixar a sandu che 16 cent metros de comprimento Estes e um par adicional de 8 cm grampos s o necess rias para assegurar uma sandu che 24 cm de comprimento Fundic o stand O rod zio pode ser nivelado com os p s de nivelamento ajust veis na parte inferior da unidade A veda o de juntas lami nadas a parte inferior do conjunto da placa de vidro quando ele est bloqueado para o stand C maras C maras s o usados duas vezes primeiro para fixar a sandu che montado no suporte de fundic o e novamente para bloquear a sandu che e da c mara de tamp o superior em conjunto Juntas de borracha Existem duas juntas A junta laminada se encaixa na parte inferior do suporte de fundic o e fornece o selo para o fundo da sanduiche de gel A junta ranhurada encaixa sob a c mara superior e fornece a vedac o entre o sanduiche e da c mara superior Dois sulcos
5. Destain solu o II 7 O cido acetico 5 metanol Metanol 5 v v 50 0 ml O cido ac tico 7 N 70 0 ml H20 deionizada para 1 0 liter 12 Cross linking soluc o 10 glutaraldehyde 20 ml de estoque de glutaralde do a 50 gua destilada at 100 ml 13 DTT solu o ditiotreitol 5 pg ml 5 mg DTT Trazer para 1 L com ddH20 14 Soluc o de nitrato de prata 0 1 wW nitrato de prata 1 g nitrato de prata gua destilada 1 a L 15 Soluc o de carbonato de s dio 3 3 w v 60 g de carbonato de s dio Traga a 2 L com gua destilada loja em recipiente de vidro 16 Desenvolvimento de soluc o 3 de carbonato de s dio formalde do 0 019 200 ml de carbonato de s dio 3 100 ul de formalde do a 37 Preparar imediatamente antes da utilizac o 17 Pare de soluc o 2 3 M citrato de s dio 67 64 citrato de s dio di hidratado 294 1 FW Levar o volume final de 100 ml com gua desionizada e p33 Nota Como este 6 um m todo de colora o muito sens vel importante usar luvas ao manusear g is e utilizar recipientes limpos Para reduzir o fundo utilizar apenas de alta pureza reagentes e remover todo o tamp o a partir dos g is durante a fixa o e as etapas de descolora o e p34 Coomassie Protocolo Stain A gel mancha em coomassie soluc o de colorac o a temperatura ambiente durante a noite Os geles podem tamb m ser coradas rapidamente colo cando os a 55 C num ban
6. sador imediatamente antes de verter o gel e Pipetar a soluc o em um canto do sanduiche tomando cuidado para n o introduzir bolhas de ar Veja abaixo o nivel da soluc o adequada N o gel de empilhamento sistema continuo Encha soluc o at um pouco abaixo do topo da aresta da placa superior Se as bolhas est o presos retire com uma pipeta ou seringa Introduzir um pente com uma ligeira inclinac o em cada sandu che tomando cuidado para n o prender as bolhas de ar sob os dentes 2 gel sandu che Soluc o a pipeta em ambas as sandu ches enchendo cada um para o mesmo n vel abaixo da extremidade marcada Empilhamento de gel Encha soluc o para 3 4 cm abaixo do topo da placa de vidro Esta altura permite 1 cm de empilhamento de gel abaixo da pocos Despeje o gel e aplicar uma sobreposic o ver passo 3 Depois de o gel definida preparar o gel de empilhamento como descrito na secc o seguinte 2 D de electroforese sistema descont nuo Para a segunda dimens o gel de resoluc o encher soluc o a 1 0 cm abaixo do topo da placa de vidro deixar espaco extra para um gel de empilhamento se necess rio Um cent metro permite espaco sufici ente para a primeira tira dimens o IPG ou gel tubo e um selo de agarose Durante a transfer ncia tomar cuidado para evitar aprisionamento de ar entre o tubo de gel e gel laje selar o tubo de gel no lugar com agarose em tamp o de eletroforese o pll AAA o pl
7. tradicionalmente utilizado com um sistema de tamp o descont nuo de modo que a taxa de migrac o electrofor tica permanece inal terado durante a execuc o Sob constantes as condic es atuais os aumentos de tens o como os proventos de execuc o A menor configura c o atual recomendado para maior resoluc o O n vel ptimo de corrente deve ser determinada empiricamente os factores principais que deve ser equilibrado s o a concentrac o do gel e da velocidade de migrac o e do aquecimento Joule resultante e distorc o da banda A Tabela 3 lista a partir do ponto diretrizes e ajustes de espessura de gel o n mero de g is ea taxa de migrac o Tabela 3 Laemmli sistema tamp o de partida directrizes do ponto Espessura gel 1 5 mm Corrente por gell 25 mA corrente constante A partir de tens o 80 90 V Comprimento do gel cm modelo tens o final V 16 SE400 200 250 24 SE410 275 325 G is mais grossos ou mais finos exigem proporcionalmente mais ou menos corrente Por exemplo um gel de 0 75 mm que metade da espessura de um gel de 1 5 mm requer a metade da quantidade de corrente ou 12 5 mA TA corrente deve ser multiplicada pelo n mero de geles Por exemplo se um 1 mil metro sandu che 2 gel instalado a corrente de duas vezes mais do que requerido para um gel de 1 mm nico mesma tens o Nota Refrigerac o passiva como a execuc o a unidade num quarto frio pode ser necess ria para
8. verticais Unidades Electroforese Gel Slab se destinam a separac o electrofor tica de prote nas e cidos nucleicos sob ambas as condi es de desnatu rac o e nativos Ate 28 amostras podem ser comparados num gel nica laje Um gel ou dois g is se usando a placa divis ria pedido separadamente convertida no lado suporte de fundic o da unidade O tamanho do gel de 14 x 15 cm se usando o SE400 e 14 x 23 cm se usando o SE410 Ap s a fundic o o sandu che transferido para a c mara inferior tamp o para electroforese A unidade b sica inclui um conjunto de placas de vidro 18 x 16 cm para o SE400 e 18 x24 cm para o SE410 conjuntos de dois grampos SE400 duas bracadeiras 16 cm SE410 duas bracadeiras 16 cm e duas bracadeiras 8 cm e dois exc ntricos A unidade completa inclui um 15 pocos pente e dois espacadores com 1 5 mm de espessura para al m da unidade b sica Desembalar e desmontagem Desembrulhe com cuidado todos os pacotes e comparar o conte do com a lista de embala gem certificando se todos os itens chegaram Se qualquer parte estiver faltando entre em contato com seu escrit rio de vendas local Inspecione todos os componentes de danos que possam ter ocorrido quando o aparelho estava em tr nsito Se qualquer parte estiver danificado contate imediatamente a transportadora Certifique se de manter todo o material de embalagem para pedidos de indemnizac o ou de usar caso seja necess rio p
9. Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird fiir den Innenlaborge brauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann fur das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produk tes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem AnschlieBen der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen f hrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers thylens durch den W rmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hlmittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instru mentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen Uber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die Uberhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Informazioni Importanti Italian Se quest apparecchiatura usata in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornit
10. ajudar a posicionar esta junta Espacador Mate modelo de montagem Alinha espacadores para montagem do sanduiche Maravilha Wedge Ferramenta Separador Plate Use para desmontar sanduiches gel e avaliar espa ador e espessura pente Espa adores Pode ser pedido separadamente Espa adores determinar a espessura do gel Eles s o 2 cm de largura e est o dispon veis em tr s espessuras 0 75 1 0 e 1 5 mm Combs Pode ser encomendado em separado Combs est o dispon veis em tamanhos que formam 10 12 15 20 ou 28 po os Prepara tivo pentes incluem 1 ou 2 po os de refer ncia para al m de um preparativa bem A maioria pentes est o dispon veis em todas as tr s espes suras 0 75 1 0 e 1 5 mm Todos os pentes preparativa e pentes com menos de 28 po os formar po os que s o de 25 mm de profundidade Os 28 po os pente po os formas que s o apenas 15 mm de profundidade para que os po os n o desmoronar quando o pente removido O volume de amostra real izada por cada po o depende da espessura do gel bem profundidade eo n mero de po os por pente Tabela 2 na p gina volume de listas de 15 por 1 mm de profundidade para po os criados por cada tamanho de pente Consulte as infor ma es para pedidos adicionais especifica es do pente Especifica es Tamanho da chapa SE400 18x 16 cm de vidro SE410 18x 24 cm Tamanho aproximado SE400 14 x 15 cm de gel SE410 14 x 23 cm Pot ncia m xima 20W Tens o m x
11. assentos tampa de seguran a instala o observe sem esfor o se todas as tr s caracter sticas est o devidamente alinhados O el ctrodo superior protegido por um escudo encastrada que repousa na c mara tamp o superior uma vez que a tampa est instalado mais f cil de instalar a tampa aproximar se do primeiro c mara tamp o superior a partir da frente e em seguida desli zando a tampa de seguran a para baixo para baixo sobre os conectores Se a tampa n o encaixar correta da ea SEE 7 mente verificar a posic o do escudo eletrodo inferior a c mara inferior tamp o e E EN repousa em frente das guias de gue deve limpar os conectores e descanso na c mara blindagem inferior buffer na frente das as guias do escudo Uma vez gue todas as guias est o no lugar pressione suavemente para conectar os plugues 1 A blindagem el ctrodo recesso superior desliza para dentro da c mara tamp o superior 2 A blindagem inferior do el ctrodo se encaixa dentro 3 Os conectores de eletrodos alin har e encaixar e pl9 Nota A secc o transversal e exig ncia de corrente determinada pela espessura do gel O tempo de execuc o determinado pelo comprimento da placa e p20 2 5 Resolvendo a amostra Par metros de electroforese para g is de poliacrilamida descont nuos G is pode ser executado em ambas corrente constante ou constante configurac es de tens o Uma configurac o de corrente constante
12. che de gel nico com excepc o antes de colocar a placa de vidro de topo colocar a placa divisora no topo do primeiro conjunto de espacadores e um segundo conjunto de espacadores em cima da placa divisora Coloque o entalhe de modo que ele ir estar no topo dos g is Tal como acontece com uma sandu che regular 6 essencial que os espacadores e placas de alinhar perfeitamente a fim de criar um selo Inspecione a parte inferior da sanduiche para se certificar de que as arestas sao alinhados descarga a fim de assegurar uma vedac o completa Ajuste se necess rio ver Fig 4 Opcional Aplique uma fina camada de GelSeal apenas na parte inferior fora cantos se seus sanduiches tendem a vazar Nao utilizar silicone gordura ou vase lina para selar a sanduiche porque estas substancias sao dificeis de remover e finalmente pode causar artefatos no gel Coloque a junta laminado para dentro do suporte de fundic o com o lado de espuma para baixo Coloque o conjunto da placa de vidro no berco de fundic o o parafuso do lado voltado para fora ver Fig 5 24 cm placas Colocar o sanduiche para que os gram pos s o curtas na parte inferior o Inserir uma c mara dentro do furo em cada lado do tabuleiro de fundic o com o rebordo extremidade curta a apontar para cima Selar a sandu che de gel rodando ambos os exc ntricos como medida do necess rio geralmente 90 a 150 at 180 As prensas de ac o
13. concentrac o diferente e pH e do tamp o de electroforese cont m Tris glicina Todos os tamp es cont m 0 1 de SDS Composic o de gel de poliacrilamida indicado por duas percentagens diferentes g acrylamide bisacrylamide 100 ml T x 100 g bisacrylamide g acrylamide bisacrylamide A percentagem total de acrilamida T no gel de resolu o que pode variar de 4 a 20 determina o tamanho dos poros Comumente a quantidade de agente reticulante utilizado C de 2 6 No exemplo seguinte sistema a composi o de gel resolver T 10 2 6 de C o que resulta em um tamanho de poro m dio A composi o de gel de empilhamento T 4 2 6 C O T no gel de empilhamento menor porque um tamanho maior do poro necess ria o p29 Nota As solu es de filtro 1 4 atraves de um filtro de 0 45 Hm Importante Consulte a ficha de seguranca MSDS gue acompanha cada produto qu mico para tratamento detalhado e informac es de seguranca o p30 Soluc es 1 Soluc o estoque de acrilamida 30 8 T 2 6 C Bis 200 ml Acrilamida FW 71 08 30 ww 60 0 g Bis FW 154 2 0 8 ww 1 6g H20 deionizada para 200 ml Armazenar a 4 C ao abrigo da luz N N metilenobisacrilamida 2 Tamp o gel 4X Resoluc o 1 5 M TrisCl pH 8 8 1 liter Tris base FW 121 1 1 5M 181 5 g HCI para pH 8 8 H20 deionizada para 1000 ml Armazenar at 3 meses a 4 C no escuro 3 Tamp o gel 4X E
14. dentes do pente Interface irregular entre o empilhamento e executando os g is Sobrepor o gel rodando com gua saturada de butanol antes da polimerizac o comeca para evitar a formac o de uma superficie do gel desigual A preparac o das amostras concentrac o do gel degradac o Dialisar ou dessalinizar a amostra Mol culas n o s o suficientemente limitada pelo tamanho resolver gel de poro aumentar a T As prote nas podem ser degradados por proteases end genas usar os inibidores da protease durante o passo de isolamento Perto do topo do gel quando a frente de tamp o atingiu o fundo concentrac o do gel precipitac o O tamanho de poro de gel muito pequeno diminuir o T do gel Resolving ou empilhamento A prote na precipitada Aquecer a amostra a uma temperatura inferior 70 C ou menos para 1 2 min Tanto a parte superior e inferior do gel Controlar corante n o afiar para uma zona concentrada no gel de empilhamento concentrac o do gel pobre de empilhamento O intervalo de peso molecular da amostra requer um gradiente de concentrac o de acrilamida para resolver a gama de tamanhos de prote na Despeje um alto gel de empilhamento Para melhores resultados permitir uma altura de empilhamento de gel de 2 5 vezes a altura da amostra no poco qualidade do reagente Descarte de soluc es de acrilamida desatualizados e utilizar apenas o mais alto grau d
15. o inicial posic o de aperto final o p17 Nota N o force os exc ntricos Se encontrar resist ncia invulgar desmontar o aparelho e inspeccionar bracadeira e alinhamento de vidro ao longo do topo da sandu che Alinhe e reinstale a c mara superior Nota Se os vazamentos de montagem pegue a montagem de um lavat rio e parcialmente liberar as c maras para permitir tamp o a escorrer Retire a c mara superior verificar o alinhamento de todos os componentes do sanduiche e ajustar se necess rio e p18 Colocar 100 ml de tamp o de electroforese para dentro da c mara superior dirigindo o fluxo de tamp o contra a parede para evitar perturbar as amostras Inspecione a instalac o quanto a vazamen tos Encha as duas c maras o volume final para cada c mara 6 350 ml Instalac o tampa de seguranca Built in func es de seguranca exigem que todas as tres guias est o devidamente colocados ver Fig 8 o Ligue os fios codificados por cores para as tomadas de uma fonte de alimentac o aprovado min 50 mA 300 V Ligue o fio vermelho no vermelho tomada de salda e o cabo preto na tomada de sa da de preto Na maioria dos sistemas o chumbo vermelho o gual ligado ao el ctrodo de fundo o nodo ea ponta de preto ligado ao el ctrodo de topo o c todo gt escudo guias Fig 8 Instalac o tampa de seguran a Se voc n o estiver familiarizado com a Os
16. o pente com uma ligeira inclina o e muito devagar para evitar danificar o gel G is de agarose Abaixe o pente n o mais do que 1 cm para o gel Use apenas a es recentes dos reagentes mais alta qualidade Se o persulfato de am nio seco n o crepita o quando adicionado a gua substituir com estoque fresco Aumentar TEMED ou concentra o APS ou ambos pH Solu es com valores extremos de pH cido especialmente n o pode polimerizar oxig nio Remover o oxig nio a partir do ambiente de gel Degas a solu o de mon mero min 5 10 antes de verter e depois sobrepor a superf cie do gel com gua saturada de n butanol temperatura Ajustar a temperatura da solu o de gel para um m nimo de 20 C especialmente para g is de baixa T o p25 problema Vazamentos de c mara superior de buffer Dye curvas da frente para cima risos nas bordas Estrias proteina verticalmente Extraordinaria mente lento de execuc o ou r pido o p26 causa possivel Mis alinhados partes rem dio Verifique se as placas de vidro espacadores e grampos est o alinhadas e se encaixam perfeitamente na vedac o da c mara superior Verificar que ambas as juntas s o centradas e que as cristas de posicionamento encaixar no interior das ranhuras Componentes sujos ou danificados O calor excessivo Part culas em Verifique se a vedac o n o est danificado ou comprimido Troque se
17. resultados podem ser comparados Os resultados inconsistentes para o mesmo sistema e as configura es podem indicar poss veis problemas como vazamentos de corrente as concentra es de buffer incorretos elevadas concentra es de sal ou de qualidade qu mica inconsistente Verificar o progresso banda ap s 5 minutos e novamente depois de uma hora observando a taxa de migra o do corante de seguimento A execu o est completa quando o corante de rastreio atinge o fundo do gel Ver o n vel de tamp o e se necess rio reabastecer o como necess rio para manter o el ctrodo superior submersa Um pequeno volume de tamp o pode vazar passado uma placa cortado ou junta ou tamp o pode passar atrav s do gel Dica Para evitar salpicos adicionar colorac o ou soluc o fixadora para a bandeja ap s o gel transferido Nota Use somente pl sticos flex veis ferramentas curiosos para evitar lascar as placas de vidro 2 6 Ap s electroforese Uma vez que o corante de rastreio atinge o fundo do gel desligar a fonte de alimentac o e desligar os fios Remova a tampa de seguranca o uso da alavancagem dedo descansar os seus polegares na parte superior das c maras e puxe a tampa para cima com os dedos indicadores Uma vez solto levante a tampa para cima e ent o para fora para limpar a borda na c mara de amortecimento superior e Despeje o tamp o por unidade invertendo a sobre a pia Libertar a c mara t
18. seguida enxaguar abundantemente com torneira e gua destilada Placas de vidro tamb m pode ser tratada com mas n o s o armazenados em soluc es de limpeza cidas 4 Soluc o de problemas problema Gel vazamen tos sandu che enquanto fundic o Exemplo pocos danificado ou irregular Polimerizac o incompleta gel causa possivel Componentes sujos ou danificados rem dio Placas Espacadores e da junta deve estar completamente limpa Lavar se necess rio Substituir placas fritas especialmente se endireitada perto dos espacadores Verifique a junta rod zio de cortes ou fendas e substituir se necess rio Mis alinhados partes Verifique o alinhamento Placa e espacador realinhar se necess rio Ao longo de aperto As bolhas de ar Ligue came apenas na medida do necess rio para criar uma veda o geralmente 90 150 mas at 180 Em cada espa ador aplicar uma fina camada de gel composto de veda o para a parte inferior para fora canto s N o use graxa de silicone Remova as bolhas de ar antes de inserir pentes Deslize pente em solu o em ngulo Se pente deve ser removida adicione mais solu o de mon mero antes de reinserir o pente Polimeriza o incompleta ou retardada Permitir g is de acrilamida a ser definido para um m nimo de 1h Escombros em pocos Enxaguar a gel n o polimerizada com tamp o de amostra remoc o comb Chemicals Remover
19. 1 SE400 Inclui um conjunto de placas de vidro 18 x 16 cm 2 conjuntos de aperto 2 cames Ordem pente e espacadores separadamente para 18 x 24 cm de gel SE410 Sturdier Unidade de Eletroforese Vertical Slab completa 1 SE410 15 1 5 Inclui um conjunto de placas de vidro de 18 x 24 cm 16 cm dois e dois conjuntos de fixac o 8 cm 2 c maras 15 bem pente e 2 espacadores 1 5 mm de espessura Outros Tamanho pentes e espacadores pedidos separadamente SE410 Sturdier Unidade de Eletroforese Vertical Slab b sico 1 SE410 Inclui um conjunto de placas de vidro de 18 x 24 cm 16 cm dois e dois conjuntos de aperto 8 cm e 2 cames Ordem pente e espacadores separadamente As pecas de reposic o Vedac o de borracha de silicone para Slotted superior tamp o c mara Vedac o de borracha de silicone branco para a fundic o descansar Tampa com eletrodos para SE400 16 cm SE4156 Tampa com eletrodos para SE410 24 cm SE416 1 SE4008B 1 1 1 C mara inferior tamp o casting descansar por 1 SE4151 1 1 1 1 SE4009 C mara de amortecimento superior com junta de SE4154 A alta voltagem conjunto de chumbo seguranca SE6056 HV Maravilha Wedge pl stico gel ferramenta de separac o placa SE1514 GelSeal oz 1 4 tubo SE6070 Grampos e cames Grampo e cam Kit quatro 16 cm de grampos e 8 cames pretas 1 SE6003UK Parafusos de reposi o para grampos 12 SE6003U 2 Cames preto para um
20. 2 Se pentes est o no lugar pule para o passo 4 Se nenhum pentes est o no lugar sobrepor o gel de resoluc o com uma fina camada de gua saturada de n butanol gua ou tamp o de gel dilu do para evitar a exposic o da superf cie de topo da soluc o de gel de oxig nio atmosf rico Lentamente fornecer a soluc o de sobreposic o de uma seringa de vidro eguipada com uma agulha de calibre 22 Aplicar a soluc o perto do espacador e permitir gue ele flui atraves da superficie nu 4 Permitir que o gel para polimerizar durante um minimo de uma hora 2 2 2 Empilhamento de gel Verter o gel de empilhamento antes da remoc o do sanduiche do rodizio de gel Empilhamento resoluc o gel timo quando preparado pouco antes de eletroforese Remover a sobreposic o por lavagem da superficie do gel por v rias vezes com gua destilada Inverter o rod zio para drenar Para garantir um contato cont nuo entre a resolver e empilhamento g is remover o l quido residual borrando um canto com um tecido que n o solte fiapos e Calcular o empilhamento de gel de volume de soluc o de mon mero Preparar a soluc o de mon mero de empilhamento gel deaerate lo e adicionar catalisador e iniciador Verter o gel de empilhamento sobre o gel de resoluc o com uma pipeta de Pasteur descart vel ou a um nivel de cerca de 2 mm a partir do topo da placa de vidro 4 Introduzir um pente com uma ligeira inc
21. Du do su rio Portugu s Hoefer SE400 SE410 As Sturdier verticais eletroforese em gel de laje unidades m SE400 IM Portuguese Rev C0 06 12 A Au O e f e r Conte do Informa es Importantes AAA ji Residuos de Equipamentos El ctricos e Electr nicos REEB vii 1 Fun o da unidade e descriga0 1 Invent rio Anotada vicio 4 ESDECITICACOES sas ss sitar sanaan saunaan maana crea rie 6 2 Instru es de opera o AA 7 3 Cuidados e manuteng o 111111 24 4 Solu o de problemas bk 25 Ap ndice A Laemmli Sistema G6is 29 Receitas de gel criscioni iiaiai ii 36 Ap ndice B Bibliografia 37 Informa es sobre pedidos nn 39 Informac es Importantes Portugu s Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protec o forne cida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que CE marcou ou seguran a registrada por um nacionalmente recon hecido testando laborat rio A tampa de seguran a deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de est
22. amp o superior removendo os exc ntricos Levante a c mara de fora e levante o sandu che fora da c mara baixa Solte as bracadeiras dos sanduiches e remover Com cuidado solte e deslize afastado ambos espacadores Utilizar a Maravilha Wedge ferramenta separador de placa para separar as placas Q Cuidadosamente levante uma placa de vidro Lidar com o gel com cuidado para evitar danific lo Mais uma bandeja vazia mancha quer inverter a placa de reten o do gel perto do fundo do tabuleiro e levan tar um canto de modo que o gel cai para dentro do tabuleiro ou se o gel suficientemente espessa para manusear levant la e local na bandeja Adicionar suficiente fixador ou mancha para submergir comple tamente o gel Limpe a unidade conforme descrito em Cuidados e manuten o na p gina 24 o p23 o p24 3 Cuidados e manutenc o Limpeza e Enx g e com gua imediatamente ap s o uso e Nao autoclave ou aquecer qualquer parte do instrumento acima de 45 C e Nao use solventes org nicos abrasivos soluc es de limpeza fortes ou cidos fortes ou bases fortes para limpar qualquer peca de pl stico e Nao molhe as juntas Limpe com um deter gente neutro e deixar secar ao ar e Manuseie a tampa de seguranca com cuidado para evitar danos aos conectores do eletrodo Placas de vidro limpas e espacadores com uma soluc o dilu da de um limpador de laborat rio tais como RBS 35 em
23. ane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza ze jest nosz ce ozna kowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kraza tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organ icznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki o pv Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no espe cificado por Hoefer Inc la protecci n proporcio nado por el equipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto
24. ara devolver a unidade Esta unidade parcialmente montado para proteger os componentes durante o transporte Para desmontar Posicione o aparelho de modo que os conectores el tricos enfrent lo e Observac o dos orificios em cada lado na c mara tamp o superior Descanse os polegares nesses bura cos e usar os dedos indicadores para levantar os lados da tampa de seguranca delicadamente at que os conectores de eletrodos desligue Primeiro levante a tampa para cima para que o escudo eletrodo superior limpa a sala de cima e em seguida levantar a tampa para fora para voc para remov lo completamente Retire a c mara tamp o superior e em seguida a unidade de placa de vidro 4 Remova os grampos desapertando os parafusos Fig 1 SE400 componentes da s rie principal Inclu dos mas n o apresentados C maras Graxa GelSeal oz Y4 Espacador Mate Maravilha Wedge N vel Obrigat rio mas n o inclu das Fonte de alimentac o aprovada tampa de seguranca codificados por cores conectores 2 c mara tamp o superior placas de vidro 2 grampos c mara inferior tamp o codificados por cores leads 2 p s niveladores 4 Invent rio Anotada Tamp o c maras Ambas as c maras de buffer s o guimicamente resistentes ao comuns buffers eletrofor ticos mas n o a solventes org nicos ou cidos fortes e lcalis Tampa de seguranca
25. com gua e gua destilada completamente antes de cada utilizac o e Instalar a sanduiche de gel na camara inferior tampao Solte o sanduiche do rodizio por remoc o de ambas as c maras Limpar guaisguer gel aderente para o exterior da sanduiche de gel Instale o sanduiche na c mara inferior buffer aperte os parafusos voltadas para as pistas Cuidadosamente encher cada pogo de amostra com tamp o de electroforese em seguida underlay preparado amostra nas cavidades utilizando uma micro seringa de ponta fina ou gel ponta de pipeta de carregamento 4 Anexar a camara tamp o superior para a sanduiche de gel Inverta a sala de cima e pressionar a junta encaixados nas ranhuras para um ajuste preciso Proceda com cuidado para que as amostras nao sejam perturbados Abaixe a camara superior para o sanduiche de gel Instale o cames cume apontando para baixo nos orificios exc ntricos como mostrado na p gina 17 Simultaneamente transformar um ressalto no sentido hor rio e outro sentido anti hor rio uma 180 completo para fixar o conjunto Fig 7 Assembl ia c mara superior buffer Primeiro lugar na c mara superior para a montagem do sandu che em seguida insira as c maras para os buracos cam crista ponta curta apontando para baixo Para fixar o conjunto transformar os exc ntricos um total de 180 de modo que a crista aponta para cima n o mostrado gt N cam a posic
26. de exc ntrico as placas para a junta para vedar a parte inferior da sandu che O selo completar uma vez que a borda de vidro parece mais escuro e quase transparente contra a junta N o aperte o cam al m deste ponto e p9 Fig 5 Caster componentes e montagem 1 Abaixe o sanduiche montado no suporte de gualidade 2 Insira cames nos buracos cam crista at finais placas de vidro 2 3 Ligue came at 180 at que a vedac o placas de vidro contra 4 a junta de vedac o S grampos o n mero necess rio depende do comprimento da placa fy cames 2 Inserir o came s nos furos de came e virar na direc o do centro para bloquear a unidade de placa de vidro junta lado espuma para baixo lan ando ber o 7 p s niveladores 4 A Nota E mais f cil manter o rodizio equilibrada se voc ligar os dois cames em direc o ao centro da roda ir e plo Nota O ap ndice A na p gina 29 enumera receitas para o sistema de gel de Laemmli 2 2 Preparac o de gel de acrilamida Tabela 1 Volume de soluc o aproximada mon mero necess rio para um nico gel Espessura do gel mm Modelo 0 75 1 00 1 5 SE400 15 ml 23 ml 30 ml SE410 23 ml 34 ml 45 ml 2 2 1 Resolvendo gel Preparar a soluc o de mon mero e derramar o gel Preparar a guantidade necess ria de soluc o de mon mero deaerate e adicionar o iniciador e catali
27. de profundidade e p40 Espacadores espessura comprimento largura mm cm cm guantidade c digo 0 75 16 2 2 SE6119 2 75 1 0 16 2 2 SE6119 2 1 0 Ls 16 2 2 SE6119 2 1 5 1 0 16 1 2 SE6118 2 1 0 1 5 16 1 2 SE6118 2 1 5 0 75 24 2 2 SE6619 2 75 1 00 24 2 2 SE6619 2 1 0 1 50 24 2 2 SE6619 2 1 5 Rodinhas de gel Ordem pentes e espacadores separadamente Para at 4 g is Kit Gel Caster 4 g is 18 x 16 cm 1 SE675 Inclui 8 placas de vidro 3 espaco saver chapas 5 folhas de preenchimento 100 folhas de papel de cera Spacer Mate modelo de alinhamento e tamp es de enchimento Para at 10 g is Kit Caster m ltipla Gel 10 g is 18 x 16 1 SE615 Inclui 20 placas de vidro o espaco saver placa 5 folhas de preenchimento 100 folhas de papel de cera Spacer Mate modelo de alinhamento Recomendado Hoefer SE 100 lavagem mate Plate e unidade de armazenamento 1 SE100 Hoefer Alimentac o PS300B 1 PS300B e p41 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Toll Free 1 800 227 4750 Telefone 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer 6 uma marca registrada da Hoefer Inc Coomassie uma marca comercial da ICI plc RBS 35 6 uma marca comercial da Pierce Chemi cal Co O 2012 Hoefer Inc Todos os direitos reservados Impresso nos EUA Hoefer
28. e prata directamente para o gel Agitar suavemente durante 30 minutos e depois lavar o gel durante 1 2 segundos com gua desionizada F Adicionar 50 ml de soluc o de desenvolvedor rapi damente redemoinho do gel e deitar fora desenvol vedor Repita mais uma vez Adicione 100 ml de revelador e agitar at que as bandas s o vis veis Ter a certeza de parar o desen volvimento antes do fundo torna se significativo neutralizando a solu o com 5 ml de solu o de paragem Alternativamente despeje desenvolvedor e adicione 100 ml Destain soluc o II G Lavar o gel em 2 3 mudancas de gua desionizada Manter o gel em solu o Destain Il ou sec lo para o armazenamento permanente e p35 Receitas de gel As receitas de gel Laemmli s o para 30 ml de uma soluc o nica concentrac o suficiente para um de 1 5 mm 18 x 16 gel cm Tabulados s o ingredientes e volumes para g is de poros relativamente grandes 7 5 a 10 intervalo T bem como pequenas g is de poros 12 5 a 15 intervalo T Um gel de 4 de empilhamento comum A receita gradiente linear para 100 ml de soluc o O volume total necess rio depende do n mero de geles fundido e da espessura do gel ajustar conforme necess rio Todos os g is s o reticulados com C 2 6 Tabela 5 Receitas Laemmli gel por 30 ml soluc o de gel de resoluc o 5 ml de soluc o de gel de empilhamento resolvendo gel empilhamento gel 7 5 10 12 5 15
29. e acrilamida A preparac o das amostras Ao preparar as amostras evitar o uso de soluc es com altas concentrac es de sal o p27 problema Resoluc o banda pobre Poor band resolution e p28 causa poss vel condic es de funcionamento rem dio Comece electroforese logo que a amostra carregada para evitar esp cies de baixo peso molecular a partir de difus o Realizar a separa o em uma configura o mais baixa de corrente ou tens o para reduzir o aquecimento Joule qualidade do Utilize apenas os reagentes mais alta qualidade reagente pobre de Use g is apenas que foram recentemente preparado empilhamento Adicionar um gel de empilhamento ou aumentar a altura do gel de empilhamento Preparar a superf cie Resolving gel por primeira lavagem com empilhamento de gel de mon mero antes de vazar o gel de empilhamento para assegurar a continuidade entre os g is Verificar valores de pH das resolver e empilhamento de gel de solu es N o titular back buffers Polimeriza o incompleta gel Permitir gel para polimerizar totalmente A prepara o das amostras Armazenar amostra em gelo antes que seja desnaturado Dialisar ou dessalinizar a amostra As amostras de calor em tamp o de amostra SDS para n o mais do que 1 2 min a 100 C para melhorar a dissocia o das subunidades Armazenar em gelo ap s o aquecimento Ajustar o volume da amostra ou concentra o Adicione
30. el et al eds 10 2 1 10 2 21 1991 Hames B D and Rickwood D Gel Electrophoresis of Proteins A Practical Approach Second edition IRL Press 1990 Sambrook J Fritsch E F and Maniatis T Standard Formaldehyde Protocol Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor NY 1990 Sasse J and Gallagher S R Staining proteins in gels Current Protocols in Molecular Biology F A Ausubel R Brent R E Kingston D D Moore J G Seidman J A Smith and K Struhl eds 10 6 1 10 6 8 1991 Desnaturac o sistemas de gel Laemmli U K Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T Nature 227 680 685 1970 Matsudaira P T and Burgess D R SDS microslab linear gradient polyacrylamide gel electrophoresis Anal Biochem 87 386 396 1978 Schreier M H Erni B and Staehelin T SDS gels pH 8 8 J Mol Biol 116 727 752 1977 Shapiro A L and Maizel J V Jr Molecular weight estimation for polypeptides Anal Biochem 29 505 514 1969 Schaegger H and Von Jagow G Tricine sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa Anal Biochem 166 368 379 1987 Weber K and Osborn M The reliability of molecular weight determinators by dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis J Biol Chem 224 4406 4412 1969 o p37
31. et er utformet for innendors labo ratoriumbruk bare Bare tilbehor og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium Sikkerheten lokket m v re p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjolemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organi ske losemiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overop pheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprz t jest wykorzystywany w spos b nie okre lone przez Hoefer Inc do ochrony przewid zianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarc zone przez Hoefer Inc mog by wykorzyst
32. ho de gua com agitac o durante 30 45 min B Coloque gel em soluc o Destain 4 temperatura ambiente Mude a soluc o destain guando atinge uma cor azul profundo at que os resultados fundo claro C Armazenar o gel em Destain soluc o II Para um m todo mais sens vel prata protocolo mancha recomendada Protocolo Stain Prata Adaptado de Morrissey 1981 Agitac o suave recomendado durante este procedi mento A Mancha do gel como de costume com Coomassie Blue Destain o gel com v rias mudancas de soluc o Destain Il Ou Fixar o gel em 100 ml soluc o Destain durante 30 minutos em seguida coloque o gel em 100 200 ml Destain solu o durante 30 minutos Descartar a solu o de recarga e lavagem com solu o II Destain um segundo 30 minutos B Transferir o gel para 100 ml soluc o de reticulac o durante 30 minutos C Decantar o glutaralde do e lavar o gel com v rias mudancas de gua desionizada ao longo de um per odo de duas horas Ou Nota Alguns brangueamento pode ocorrer se estiver usando Destain solu o II como uma soluc o stop Embeber o gel em 500 ml de gua desionizada durante a noite No dia seguinte lavar o gel com v rias mudancas de gua desionizada durante 30 60 minutos D Colocar o gel em 100 200 ml de DTT 5 ug ml em gua desionizada durante 30 minutos E Decantar a soluc o de DTT mas n o enxaguar o gel Adicionar 100 ml de soluc o de nitrato d
33. ima 500 V at 40 mA Amperagem m xima 30 mA gel 60 ma total at 325 V Temperatura m xima 45 C As condic es ambientais de operac o Uso interno 4 40 C Humidade at 80 Altitude de at 2000 m Categoria Instala o II Grau de polui o II Dimens es L x A x P SE400 24 x 28 x 15 cm SE410 24 x 36 x 15 cm Certifica es de produtos EN61010 1 UL3101 1 CSA C22 2 1010 1 CE Esta declarac o de conformidade v lida apenas para o instrumento quando ele e utilizado em locais de laborat rio e usado como entregues a partir de Hoefer Inc exceto para altera es descritas no manual do usu rio e e ligado a outros CE rotulados instrumentos ou produ tos recomendados ou aprovados por Hoefer Inc 2 Instru es de opera o Procedimentos para fundi o g is e separa o eletrofor tica seguir Incluem se as instru es para tanto percentagem nica homog nea e g is de poliacrilamida gradiente Receitas Ap ndice A enumera e Ap ndice B d uma bibliografia 2 1 Gel prepara o de elenco 2 1 1 Op es g is pr moldados e auto cast g is A unidade de SE400 aceita g is padr o pr moldados adquiridos em fornecedores comer ciais bem como auto cast g is que podem ser preparados usando o embutido de fundi o suporte Para lan ar m ltiplos de 14 x 16 cm de gel o Kit Caster m ltipla Gel que comporta at 10 sandu ches eo Kit Caster Gel que tem capa cidade para a
34. imo de uma hora Ap s a polimerizac o deitar fora a sobreposic o e lavar a superficie do gel v rias vezes com gua destilada Preparar a solu o de mon mero de empilhamento gel verter o gel de empilhamento e introduzir um pente em um ligeiro ngulo para dentro do sandu che tomando cuidado para n o prender o ar sob os dentes Permitir um m nimo de uma hora para o gel para polimerizar Tabela 2 Volume de poco pl por 1 mm de profundidade para cada tamanho de pente espessura pente mm N mero de pocos 0 75 1 0 1 5 10 62 83 12 4 12 58 77 115 15 43 57 S 20 3 1 41 62 28 2 1 27 4 1 E 2 3 A prepara o das amostras A quantidade de amostra carregada depende da espessura do gel a sensibilidade do m todo de detec o utilizado ea quantidade de amostra esperado em cada banda Em um sistema tamp o cont nuo a amostra de prote na deve ser relativamente concentrada porque nenhum gel de empilhamento usado Em um sistema de tamp o descont nuo a zona em que cada esp cie molecular migra afiada pelo gel de empilha mento de modo a amostra n o necessita de ser t o concentrada Prepare os pogos Retire o pente o suavemente para que lado a lado e em seguida levantando o para evitar danificar as paredes tamb m Com cuidado passe cada poco com tamp o de eletroforese para remover a acrilamida n o polimerizada e escorrer pelo sandu che invertendo o gel ou rod zio E
35. ipement pourrait tre diminu e Cet instrument est con u pour l usage de labora toire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entrete nir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationale ment reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre sa place avant connecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur un robinet d eau ou la source d agent de refroidissement ou la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de instrument Les dissolvants organigues causeront des dommages irr parables a l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irreparables a l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte
36. itiotreitoll DTT FW 154 2 0 2 mM 0 31 g Azul de Bromofenol FW 691 9 0 3 mM 2 0 mg H20 deionizada para 10 ml ou 2 mercaptoethanol FW 78 13 2 viv 0 2 ml Dividem se em 1 0 ml al quotas e armazenar a 40 C a 80 C durante at 6 meses Tamp o tratamento 6X Amostra 0 35 M TrisCl 10 SDS 30 glicerina 9 3 DTT pH 6 8 10 ml 0 5 M TrisCl pH 6 8 Solu o 3 0 35 M 7 0 ml SDS FW 288 4 0 35 M 1 0 g Glicerina FW 92 09 30 v v 3 0 ml DTT FW 154 2 0 6 M 0 93 g Azul de Bromofenol FW 691 9 0 175 mm 1 2 mg Dividem se em 1 0 ml aliquotas e armazenar a 70 C e p31 Cuidado Glutaraldeido s deve ser manipulado em um exaustor o p32 8 Tamp o de electroforese 0 025 M Tris 0 192 M glicerina 0 1 SDS pH 8 3 5 0 liters Tris FW 121 1 0 025M 15 1g Glicerina FW 75 07 0 192 M 721g SDS FW 288 4 3 5 mm 5 0 g H20 deionizada para 5 0 liters O pH desta tamp o 6 de cerca de 8 3 N o ajustar o pH Ate 20 litros pode ser preparado e armazenado por at amp 2 meses 9 Coomassie soluc o mancha 0 025 azul de Coomassie R 250 40 metanol 7 O cido ac tico 2 liters Azul de Coomassie R 250 FW 826 0 3 mm 0 58 Metanol Mexa at dissolver 40 viv 800 0 ml O acido ac tico 7 v 140 0 ml H20 deionizada para 2 0 liters 10 Destain solu o I 40 metanol 7 O cido ac tico 1 liter Metanol 40 viv 400 0 ml O acido ac tico 7 vv 70 0 ml H20 deionizada para 1 0 liter 11
37. ket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk oplosningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske oplosningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden Driver ikke med stodpudetemperaturer over o pii maksimummet specificerede tekniske specifica tions Overheding vil for rsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleen glycol door de bitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmid delen in deel van het instrument voor O
38. linac o no sandu che tomando cuidado para n o prender o ar sob os dentes Permitir um m nimo de uma hora para o gel para polimerizar 9007 o 0 00 Fig 6 Derramando um gel de gradiente Nota Com Coomassie Blue 6 possivel detectar 1 ug em uma Unica banda Com as manchas de prata mais sensiveis possivel detectar t o pouco guanto 10 ng 2 2 3 G is de gradiente G is de gradiente linear pode ser vertida em gel do rod zio Para gradiente f cil mistura recomendamos o uso de um dos fabricantes de SG Hoefer gradiente s rie G is de gradiente s o derramadas a partir do topo do rod zio com uma c nula de se utilizar o rod zio de gel fornecido ou a partir do fundo se usando um gel de Hoefer rod zio m ltipla ver instru es que acompanham o rod zio Uma vez que o gel de gradiente de polimeriza um gel de empilha mento derramado Monte o conjunto da placa de vidro para o rodizio conforme descrito no ponto 2 1 2 e Configure o caminho do fluxo da soluc o de mon mero Executar um comprimento de tubagem de vinilo clara atraves de uma bomba perist ltica Anexar uma extremidade do tubo para a porta de saida gradi ente fabricante ea outra extremidade a uma c nula de 20 cm O di metro exterior da c nula deve ser menor do gue a espessura do espacador Cologue a c nula de modo gue assenta na parte inferior da sanduiche a meio caminho entre os espacadores Prepara
39. mais mercaptoetanol ou ditiotreitol verificar o tratamento da amostra Adicionar os inibidores de protease tais como PMSF se necess rio para evitar a degrada o proteol tica da amostra Aumento de glicerol ou sacarose para aumentar a densidade da amostra Armazenar as amostras a serem congelados em al quotas para evitar repetidos de congelamento descongelamento Conservar a 40 a 80 C Cuidado A acrilamida 6 uma neurotoxina Use sempre luvas ao manusear em gualguer forma e usar uma m scara durante a pesagem do p Nunca boca pipetar a soluc o Ap ndice A Laemmli Sistema G is Tabela 4 Laemmli g is concentra es finais resolu o empilhamento tamp o de gel gel electroforese Acrilamida conc 10 T 2 6 C 4 T 2 6 C Tris Cl 0 375 M 0 125 M Tris Glycine 0 025 M Tris base 0 192 M glycine pH 8 8 6 8 8 3 SDS 0 1 0 1 0 1 APS 0 05 w v 0 05 0 1 w v TEMED 0 05 v v 0 05 0 1 v v Para alcancar gualguer concentrac o desejada outro final ajustar os volumes de acrilamida estogue e gua Volumes para diferentes concentrac es est o listados na Tabela 5 Persulfato de am nio Tetrametiletilenodiamina O sistema o protocolo de Laemmli electroforese mais comum para SDS desnaturados prote nas O ido principal neste sistema de tamp o descontinuo cloreto eo o de fuga 6 a glicina Por conseguinte o gel de resoluc o e do gel de empilhamento conter Tris Cl buffers de
40. mpilhamento 0 5 M TrisCl pH 6 8 500 ml Tris base FW 121 1 0 5 M 30 3 g HCI para pH 6 8 H20 deionizada para 500 m Armazenar at 3 meses a 4 C no escuro 4 10 de soluc o de SDS 100 ml SDS FW 288 4 0 35 M 10 0 g H20 deionizada para 100 ml Armazenar at 6 meses em temperatura ambiente Dodecilsulfato de s dio 5 APS 10 iniciador 1 ml APS FW 228 2 044mm 0 1g H20 deionizada para 1 0 ml APS Fresh estalos quando a gua adicionada Se o seu n o substitua o com estoque fresco Preparar imediatamente antes da utilizac o Persulfato de am nio 6 Resolvendo gel de sobreposi o 0 375 M TrisCI 0 1 SDS pH 8 8 100 ml 1 5 M Tris Cl pH 8 8 Solu o 2 0 375M 25 0 ml 10 SDS Solu o 4 3 5mm 1 0ml H20 deionizada para 100 ml Armazenar at 3 meses a 4 C no escuro gua saturada de n butanol Agitar n butanol e desionizada H20 em um funil de separac o Remover a fase inferior aquoso Repetir este procedimento v rias vezes Utilizar a fase superior Se uma sobreposic o interfere com o protocolo preferido isolar o gel a partir de oxig nio atmosf rico atrav s da colocac o de um pente ou resolver prepara tiva em gel ex sobre o gel 7 Tamp o tratamento 2X Amostra 0 125 M TrisCI 4 SDS 20 glicerina 0 2 mM DTT pH 6 8 10 ml 0 5 M Tris CI pH 6 8 Solu o 43 0 125M 2 5 ml 10 SDS 0 35 M Solug o 4 0 14M 40ml Glicerina FW 92 09 20 vv 2 0 ml D
41. ncher cada poco com tamp o de electroforese e Preparar a amostra Aumentar a densidade da amostra liquida com 10 de glicerol ou sacarose Adicionar um corante de rastreio tais como vermelho de fenol azul de bromofenol ou Y pironina Para g is de SDS de prote nas usar tamp o trata mento 2X para desnaturar ambas as amostras de l quido e seco num tubo de ensaio Para amostras de prote na l quidos adicionar um volume igual de tamp o de tratamento 2X Para secar amostras de prote na adicionar volumes iguais de tamp o de tratamento 2X e gua desion izada para atingir a concentrac o desejada Calor o tubo em gua a ferver durante 90 segundos em seguida deixa se arrefecer at temperatura ambiente As amostras tratadas podem ser armazena das a 40 a 80 C para execuc es futuras Prote nas de membrana de calor a 60 C durante 20 minutos Armazenar amostra utilizada a 4 C e p15 Nota Antes da primeira utilizag o desmontar a unidade e lava se com uma solug o dilu da de um detergente de laborat rio e enxaguar primeiro com gua e depois com gua destilada Nota Para ajudar a manter a vedac o contra a c mara tamp o superior solha uma pequena quantidade de GelSeal em cada extremidade da junta e s ent o instalar Importante Um ajuste suave entre o sandu che e junta essencial para uma boa vedac o o pl6 2 4 A montagem final Enxaguar as duas c maras tamp o
42. necess rio Verificar que a c mara de tamp o superior n o deformado a uma exposic o anterior ao calor excessivo Diminua a configurac o da corrente ou tens o Prechill o buffer Execute o gel na sala fria Centrifugar ou amostra do filtro antes de carregar para amostra remover part culas sobrecarga Carregar menos amostra degradac o Adicionar inibidor de protease tais como PMSF Fuga de corrente em Verifigue se h vazamentos todas as placas e os espacadores torno de gel devem estar alinhados e livre de gorduras e rachaduras Amostra ou Se o pH reguerido de uma soluc o 6 ultrapassado n o volta preparac o de titula Descarte e preparar uma soluc o tamp o nova reagentes Verificar receitas as concentrac es de gel e tamp o de dilu ic o Por exemplo n o utilize Tris HCI em vez de Tris para Laemmli tanque tamp o Diminuir a concentrac o de sal de amostras qualidade do Descarte de solu es mais velhos de acrilamida e usar o reagente estoque s da mais alta qualidade Utilize apenas ur ia rec m deionizada As configurac es de tens o ou corrente Para aumentar ou diminuir a taxa de migrac o ajustar o Tens o ou corrente por 25 50 problema Bandas s o enviesadas ou distorcidas Corada coleta Perto da frente tamp o causa poss vel Preparac o de gel incompleta e polimerizac o rem dio Desgaseificar a solug o de empilhamento gel e evitar bolhas de sob os
43. nish Jos t t varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehk isty varusteille saattaa olla avuton T m v line suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen labo ratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan ennen yhdist minen k ytt j nnitelyijyj k ytt j nnit teeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautuk seen eik j hdytysnestel hteeseen miss vesi paine on unregulated o piii Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumen eminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet 6guipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par V gu
44. novo estilo bracadeiras com buracos cam 4 SE6005L Conjuntos de fixa o 8 cm 2 SE6403U Bra adeira assembl ias 16 cm 2 SE6003U Placas de vidro de 18 x 16 cm Placas de vidro 2 SE6102 Placa de vidro divisor de sandu che entalhado 1 SE6102D Placas de vidro de 18 x 24 cm Placas de vidro 2 SE6602 SE6602D k Placa de vidro divisor de sandu che entalhado e p39 Pentes n mero espessura largura de pocos mm mm quantidade c digo 10 0 75 8 3 gi SE511 10 75 10 00 8 3 1 SE511 10 1 0 10 50 8 3 1 SE511 10 1 5 12 0 75 7 6 1 SE511 12 75 12 00 7 6 1 SE511 12 1 0 12 50 76 1 SE511 12 1 5 15 0 75 5 7 1 SE511 15 75 15 00 5 7 1 SE511 15 1 0 15 50 5 7 1 SE511 15 1 5 20 0 75 4 1 1 SE511 20 75 20 00 4 1 E SE511 20 1 0 20 50 4 1 1 SE511 20 1 5 28 0 75 2 7 1 SE511 28 75 28 00 2 7 1 SE511 28 1 0 28 50 2 7 1 SE511 28 1 5 Pente profundidade de 15 mm todos os outros 25 mm Preparativa pentes Estes pentes s o de 25 mm de profundidade ajust vel a 10 ou 15 mm n mero de pocos espessura largura mm prep ref mm prep ref quantidade c digo 1 1 0 75 121 6 SE511 R 75 1 1 1 00 121 6 1 SE511 R 1 0 1 1 1 50 121 6 1 SE511 R 1 5 1 2 0 75 113 6 1 SE511 DR 75 1 2 1 00 113 6 1 SE511 DR 1 0 1 2 1 50 113 6 1 SE511 DR 1 5 Volta pente ajust vel 1 SE511 BKA Necess ria para converter qualquer pente 25 mm de profundidade para 10 ou 15 mm
45. o dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di labora torio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente ricon o piv osciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disin serisce i piombi di potere prima di togliere il coper chio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cosi equipag giato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refriger ante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causera il danno irreparabile all unita Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en mate ikke spesi fisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrument
46. oque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguran a Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instru mento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Super aquecer causar agress o irrepar vel a unidade Dule it Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskyt nut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid musi b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethyleng lykolu pros
47. orium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng V nder sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar bort kraften blyen f re flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla d r vattnet trycket r unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten o pvi Portugu s English French German Italian Spanish IM 134 Lo IM 12 1 Res duos de Equipamentos El ctricos e Electr nicos REEE Este s mbolo indica que os res duos de equipamentos el ctri cos e electr nicos n o devem ser eliminados como res duos urbanos indiferenciados e devem ser recolhidos separada mente Entre em contato com um representante autorizado do fabricante para obter informa es sobre o desmantelamento do seu equipamento This symbol indicates that the waste of electrical and elec tronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representati
48. parafuso para alinhar a pilha Tome muito cuidado no alinhamento para garantir uma vedac o Aperte todos os parafusos Remova o espacador Mate 24 cm sanduiche SE410 Um sanduiche 24 centimetros requer conjuntos de dois grampos de cada lado Alinhar cada extremidade separadamente Ou seja alinhar uma ponta dedo a apertar os parafusos vire o sandu che 180 e alinhar a outra extremidade Em cada caso permitir gue o grampo de deslizar para baixo e alinhar perfeitamente com a borda ou inferior topo das placas de vidro Para placas de 24 cm de comprimento a posic o da bracadeira de 8 cm na parte inferior ver Fig 2 placas de vidro para os lados exteriores da sanduiche placa divisora D A espacadores Fig 3 Montagem sandu che 2 gel gel 2 sanduiches s o limitados a g is mais finas sem espacadores mais espessas do gue 1 5 mm podem ser usados sanduiche bordas superior e inferior deve estar alinhada com os sulcos guia de fixac o bar de press o Fig 4 Montagem do sanduiche Inspecionar placas de vidro para nicks Use apenas placas unchipped para evitar fugas Sugest o Remova a junta lami nada desde o berco e usar o berco elenco para segurar o sanduiche para o alinhamento 2 gel sanduiche A 16 ou 24 cm de placa divis ria longo dentada comprada separadamente duplica o n mero de g is que podem ser expressos e executar ver Fig 3 Montar da mesma maneira como uma sandu
49. r a soluc o de mon mero Calcular o volume total necess rio Preparar uma metade deste volume de maior ea outra metade inferior soluc o de acrilamida Opcional Adicionar 15 de sacarose ou glicerol 25 concentrac o finall para a soluc o superior para melhorar a estratificac o o pl3 o e pl4 Despeje a soluc o light para a c mara de reser vat rio c mara mais afastada da entrada Abrir a torneira o tempo suficiente para deslocar o ar entre as c maras e em Fechar Despeje a soluc o pesado na c mara de mistura e cologue uma barra de agitac o para essa c mara Cologue o fabricante de gradiente em um agitador magn tico e comecar a agitac o a uma taxa gue n o introduz bolhas na soluc o Misturar o gradiente Enquanto a soluc o 6 de agita o come ar a bombear 5 10 ml min a partir da camara de mistura e imediatamente abrir a torneira de passagem para a c mara de reservat rio Elevar a c nula a forma de liquido entra na sanduiche mantendo a ponta na superficie do gel Sobrepor cada gel com uma fina camada de gua saturada de n butanol agua ou tamp o de gel diluido para evitar a exposic o ao oxig nio de gel Lentamente fornecer a soluc o de sobreposic o de uma seringa de vidro eguipada com uma agulha de calibre 22 Aplicar a soluc o perto do espacador e permitir gue ele flui atraves da superficie nu o Permitir gue o gel s a polimerizar durante um m n
50. reduzir os efeitos do aquecimento Joule Importante Ap s monitorizac o inicial n o deixe o aparelho sem vigil ncia por mais de 1 hora sem verificar o andamento das bandas e do n vel de buffer Atual Actos correntes sobre a rea da secc o trans versal total de todos os g is e em termos de um circuito os g is s o considerados para executar em paralelo Portanto qualquer configurac o de corrente para um gel deve ser multiplicada pelo n mero de execuc o g is Para um mil metro de espessura 1 5 gel sugerimos uma configurac o ponto de partida corrente de 25 mA Dois 1 5 g is mm 50 mA Tens o A tens o de partida para um gel de 1 5 mil metros laje ligado a uma fonte de alimenta o definido como 25 mA geralmente 80 90 V para o modelo SE400 e um sistema tamp o Laemmli descont nuo A tens o final tipica mente 200 325 V dependendo do comprimento do gel Veja a Tabela 3 na p gina 20 Tempo Uma execuc o est completa quando o corante de rastreio atinge o fundo do gel A 16 cm de comprimento 1 5 mm de espessura Laemmli SDS em gel executar a 25 mA gel sem arrefe cimento geralmente requer 5 horas Um gel de 24 cent metros requer cerca de 8 horas e p21 e p22 Registre cada corrida Manter um registo da corrente ou tens o config urac o o n mero ea espessura do gel sistema tamp o e as leituras de inicio e no final de corrente ou tens o para cada percurso de modo que os
51. rganische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not speci fied by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating main taining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa Fin
52. t quatro sandu ches podem ser pedidos separadamente Gel para o SE410 deve ser auto expressos Placas de vidro espa adores e os conjuntos de aperto s o dimensionados de modo que a sandu che montados podem ser facilmente alinhadas para criar a veda o necess ria Ao montar sandu ches tomar cuidado extra para alinhar todos os componentes para obter melhores resultados o of0 o o O 0 Of0 oo o o 000000 16 cm 24 cm SE400 SE410 Fig 2 Um sandu che de 24 cm requer dois 16 cm e duas de 8 cm grampos 2 1 2 Preliminares etapas de fundic o Prepare o rodizio Coloque o nivel do espirito para a camara baixa do buffer e ajustar os p s niveladores e Prepare os grampos Solte todos os parafusos de fixac o e abrir espaco para o sanduiche deslizando as placas de press o para os parafusos Construa cada sanduiche gel Para cada sanduiche escolha duas placas de vidro perfeitamente limpo unchipped e dois espacadores Cologue um prato sobre uma superficie plana cologue o modelo de montagem Spacer Mate sobre a placa lado mais largo na parte superior um espacador lugar ao longo de cada borda e colocar a placa de vidro segundo em cima 4 Fixe o sanduiche com grampos Deslizar uma bracadeira de cada vez ao longo dos lados do sanduiche Aperte um parafuso em cada pinga defina a sanduiche na vertical sobre uma superficie plana e afrouxar o
53. t ednictv m v m n k tepla je li to vybav ena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapravi teln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifika cemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specifice ret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan maske sv kkes Dette instrument er designet for indendors labora toriumbrug bare Bare tilbehor og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan m ske bruges for drive funk tionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en stromforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedl get m v re p plads far forbinding stromforsyningsblyet til en stromforsyning Drejer alle stromforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen kolemiddelkilde hvor vandtryk
54. ve of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs l quipement lectrique et lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Haus m ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem auto risierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparec chiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalita di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante Este s mbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo O pvii 1 Func o da unidade e descric o O Hoefer SE400 e SE410 Sturdier

Hoefer SE400 / SE410

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents