Home

Notes:

1. 5 Recommendations for preventing transmission of Human Immunodeficiency Virus and Hepatitis B Virus to patients during exposure prone invasive procedures MMWR 1991 Vol 40 No RR 8 6 Bloodborne pathogens Code of Federal Regulations Title 29 Part 1910 1030 Federal Register 1991 56 64175 64182 Biosafety in Microbiogical and Biomedical Laboratories U S Department of Health and Human Services Public Health Service Centers for Disease Control and Prevention Atlanta GA May 1993 amp BD Flacons de culture BACTEC Myco F Lytic Bouillon Middlebrook 7H9 enrichi et bouillon coeur cervelle N Pour utilisation avec BACTEC 9000MB Les flacons de culture du type BACTEC Myco F Lytic bouillon Middlebrook 7H9 modifi supportent la croissance et la d tection des mycobact ries Frangais APPELLATION APPLICATION Le milieu de culture BACTEC Myco F Lytic lorsqu il est utilis avec l appareil BACTEC 9000MB constitue un milieu de culture non s lectif pour la culture et la mise en vidence qualitative des mycobact ries partir d echantillons sanguins DESCRIPTION SOMMAIRE DU TEST Depuis le milieu des ann es 1980 et depuis la propagation de l pid mie du SIDA la fr quence des cas de septic mie caus e par des mycobact ries oppor tunistes a augment On assiste une recrudescence de Mycobacterium tuberculosis MTB ainsi que d autres mycobact ries non tuberculeuses MOTT en particulier le complexe Mycobac
2. In the rare instance where a vial is found to have leaked contents into the instrument proper or if a vial is accidentally broken turn off the instrument immediately Vacate the affected area Contact your facility s Safety or Infection Control Officer s Determine the necessity of turning off or modifying the settings of the air handling units serving the affected area Do not return to the area until any potential aerosols have settled or have been removed by appropriate ventilation Becton Dickinson and Company should be notified by calling 1 800 544 7434 in the USA or the appropriate Becton Dickinson representative in your area Guidelines for proper handling of accidental mycobacterial contamination due to breakage of culture tubes or broth suspensions have been issued by the CDC 5 6 7 STORAGE INSTRUCTIONS Store at 2 25 C in a dry location out of direct sunlight SPECIMEN COLLECTION NOTE It is recommended that this procedure be reviewed with appropriate personnel prior to use of medium to insure proper specimen collection techniques as described in this section The specimen must be collected using sterile technique to reduce the chance of contamination The range of blood volume which can be cultured is 1 0 mL to 5 0 mL It is recommended that the specimen be inoculated at bedside Most commonly a syringe with a LUER LOK brand tip is used to draw the speci men If appropriate a VACUTAINER brand Needle Holder and a VACUTAINER
3. Last ie esa ns OWN Idrolizzato di caseiria 6o fis en ELLA oe bue 0 10 w v Supplemento H 0 10 w v Inositolo 0 05 wiv Glicerolo 0 10 wiv Sodio polianetol sulfonato 0 025 ww Tween BON as ie DA Sco Mae eh a E Rie BOE ad 0 0025 w v Piridossale HCl i esis sence rsrs ti a RE TS TO 0 0001 w v Citrato ferrico di ammonio 0 006 wiv Fosfato di Dotassio oir eter cance hat ai salad A 0 024 w v S ponina s x sn ee E ee nde eta en 0 24 wiv Agente antischiumogeno 4 0 01 w v Questo terreno di coltura BACTEC fornito con supplemento di CO e O La composizione pu essere stata modificata per soddisfare i requisiti di rendimento desiderati Il terreno BACTEC Myco F Lytic non richiede alcuna aggiunta di supplemento Ogni flacone da 40 mL di terreno BACTEC Myco F Lytic pronto per l uso cos come ricevuto Il terreno ricevuto deve essere di colore giallo ambra chiaro e trasparente PRECAUZIONI Precauzioni diagnostico in vitro Questo prodotto contiene gomma naturale allo stato secco CAMPIONI D ANALISI POTENZIALMENTE INFETTI Osservare le Precauzioni universali 45 e le norme del laboratorio locale per quanto riguarda la manipolazione e l eliminazione di materiale infetto I flaconi BACTEC Myco F Lytic hanno una capacit superiore al volume di campione massimo raccomandato 5 mL p
4. 6 gt a c Manufacturer V robce Producent Fabrikant Tootja Valmistaja Fabricant Hersteller Kartaokeuaotng Gy rt Ditta pro duttrice Gamintojas Producent Fabricante Vyrobca Tillverkare Use by Spotrebujte do Anvendes for Houdbaar tot Kasutada enne Viimeink ytt p iv A utiliser avant Verwendbar bis Huepounia Eng Felhaszn lhat s g d tuma Usare entro Naudokite iki Brukes for Stosowa do Utilizar em Pou ite do Usar antes de Anv nd f re YYYY MM DD YYYY MM MM end of month RRRR MM DD RRRR MM MM konec m s ce AAAA MM DD AAAA MM MM slutning af m ned JJJJ MM DD JJJJ MM MM einde maand AAAA KK PP AAAA KK KK kuu l pp VVVV KK PP VVVV KK kuukauden loppuun menness AAAA MM JJ AAAA MM MM fin du mois JJJJ MM TT JJJJ MM MM Monatsende EEEE MM HH EEEE MM MM t Xog rou uva EEEE HH NN EEEE HH HH h nap utols napja AAAA MM GG AAAA MM MM fine mese MMMM MM DD MMMM MM MM m nesio pabaiga AAAA MM DD AAAA MM MM slutten av m neden RRRR MM DD RRRR MM MM koniec miesiaca AAAA MM DD AAAA MM MM fim do m s RRRR MM DD RRRR MM MM koniec mesiaca aaaa mm dd aaaa mm mm fin del mes AAAA MM DD AAAA MM MM slutet p m naden Catalog number Katalogove c slo Katalognummer Catalogusnummer Kataloogi number Tuotenumero Num ro catalogue Bestellnummer Ap 8u
5. Contenuto sufficiente per n test Pakankamas kiekis atlikti n testy Innholder tilstrekkelig for n tester Zawiera ilos wystarczajaca do n test w Cont mo suficiente para n testes Obsah vysta na n testov Contenido suficiente para n pruebas R ckertill n antal tester Consult Instructions for Use Prostudujte pokyny k pouziti Laes brugsanvisningen Raadpleeg gebruiksaanwijzing Lugeda kasutusjuhendit Tarkista k ytt ohjeista Consulter la notice d emploi Gebrauchsanweisung beachten ZupouAeure re TIG odnyies xprjong Olvassa el a haszn lati utas t st Consultare le istruzioni per l uso Skaitykite naudojimo instrukcijas Se i bruksanvisningen Zobacz instrukcja uzytkowania Consulte as instruc es de utilizac o Pozri Pokyny na pouZ vanie Consultar las instrucciones de uso Se bruksanvisningen 29 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 33 AM Pa 30 e BD ml Becton Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks Maryland 21152 USA 800 638 8663 Ecer BENEX Limited Bay K 1a d Shannon Industrial Estate Shannon County Clare Ireland Tel 353 61 47 29 20 Fax 353 61 47 25 46 ATCC is a registered trademark of the American Type Culture Collection BD BD Logo BACTEC VACUTAINER SAFETY LOK and LUER LOK are trademarks of Becton Dickinson and Company 2005 BD 30
6. brand Blood Collection Set VACUTAINER SAFETY LOK Blood collec tion Set or other tubing butterfly set may be used If using a needle and tubing direct draw carefully observe the direction of the blood flow when starting sample collection Prior to inoculation the medium fill volume should be noted on the label with a pen or marker to indicate the starting point of specimen collection The vacuum in the bottle will usually exceed 5 mL so the user should monitor the volume collected by means of the 5 mL graduation marks on the vial label When the desired 1 5 mL of blood has been drawn the flow should be stopped by crimping the tubing and removing the needle from the BACTEC vial The BACTEC vial should be transported as quickly as possible to the laboratory and placed in the BACTEC instrument A yellow top VACUTAINER Brand Tube containing SPS may also be used to collect the blood sample from the patient The tube should be transported to the laboratory as quickly as possible for transfer into the BACTEC culture vial PROCEDURE Materials Provided BACTEC Myco F Lytic Culture Vials Materials Required But Not Provided Biological Safety Cabinet Autoclave venting unit mycobacterial disinfectant 70 isopropyl alcohol Quality Control Organisms Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 and Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 micro scope and materials for staining slides and subculturing vials CAUTIO
7. gica Para as actividades que envolvam a propaga o e a manipula o do Mycobacterium tuberculosis ou do Mycobacterium bovis que tenham crescido em cultura recomendada a adop o de pr ticas bem como a utiliza o de equipamentos de conten o e instala es do N vel 3 de Seguran a Biol gica 5 6 7 Antes de ser utilizado cada frasco deve ser examinado relativamente a sinais de contamina o tais como turva o abaulamento ou depress o do septo ou fugas N O UTILIZE um frasco que apresente sinais de contamina o fugas ou danos A contamina o do frasco pode n o ser imediatamente aparente Um frasco contaminado pode conter uma press o positiva Se for utilizado um frasco contaminado para colheita directa poder haver um refluxo de g s ou do meio de cultura contaminado para dentro da veia do doente Em raras ocasi es o gargalo do frasco de vidro poder estar rachado e partir se durante a remo o da tampa de encaixe ou durante a manipula o Igualmente em raras ocasi es um frasco poder n o se encontrar sufi cientemente selado Em ambos os casos poder ocorrer uma fuga ou o derrame do conte do do frasco especialmente se o frasco for invertido Para minimizar a possibilidade de fugas durante a inocula o com seringa da amostra dentro dos frascos de cultura utilize seringas com pontas da marca LUER LOK Para evitar picadas de agulha acidentais dever utilizar uma t cnica de inocula o com uma m o e um suporte
8. ments nutritionnels Chaque flacon contient un senseur qui peut d tecter une r duction de la concentration en oxyg ne dans le flacon r sultant de l activit m tabolique des microorgan ismes et de leur croissance Le senseur est lu par l appareil BACTEC 9000MB en vue de d celer une augmentation de la fluorescence laquelle est propor tionnelle la diminution de la teneur en oxyg ne Une lecture positive indique la pr sence possible de microorganismes viables dans le flacon PRINCIPES DE LA METHODE Le flacon de culture BACTEC Myco F Lytic a t con u de fa on assurer une d tection rapide des mycobact ries dans le sang Les chantillons de sang sont inocul s dans le flacon BACTEC Myco F Lytic ou au moyen d une seringue ou directement avec une aiguille et un tube Le flacon est plac dans le sys t me BACTEC 9000MB et est incub en continu 37 C et agit toutes les 10 minutes pour maximiser la mise en vidence Chaque flacon contient un senseur qui peut d tecter une r duction de la concentration en oxyg ne dans le flacon r sultant de l activit m tabolique des microorganismes et de leur croissance Le senseur est lu par le syst me BACTEC 9000MB toutes les dix minutes L analyse du taux de reduction de l oxyg ne tel qu il a t mesur par l augmentation de la fluorescence permet l appareil BACTEC de la s rie fluorescence de d terminer si le flacon est selon lui positif Une lecture posi tive indique la pr senc
9. n o apresentar diferen as vis veis entre os frascos positivos e negativos no entanto o Sistema Fluorescente BACTEC consegue detec tar diferen as na fluoresc ncia do sensor 5 Dever ser efectuada uma repicagem seguida de um esfrega o apropriado a partir dos frascos positivos Todos os frascos positivos dever o ser manipulados utilizando pr ticas e instala es de conten o BSL III N vel de Bioseguran a III Processamento de um frasco positivo detectado pelo instrumento a Retire o frasco do instrumento e transporte o para um rea utilizando pr ticas e instala es de conten o BSL III N vel de Bioseguran a III b Inverta o frasco para misturar o conte do c Numa c mara de seguran a biol gica ventile o frasco para equilibrar a press o do frasco com a press o atmosf rica d Retire uma al quota do frasco aprox 0 1 mL para as prepara es coradas AFB e Gram e Inspeccione o esfrega o e efectue o relat rio dos resultados preliminares apenas ap s a avalia o do esfrega o Se ao fim de um per odo de seis semanas de incuba o um frasco negativo no instrumento apresentar sinais de positividade isto abaulamento do septo ou sangue com cor muito escura dever ser efectuada uma repicagem e colora o AFB devendo o frasco ser manipulado como um frasco pre suntivamente positivo desde que o resultado da colora o seja positivo Repicagem do Frasco A repicagem dever ser efectuada numa c mara
10. 14 Svenska sidan 25 28 See symbol glossary at end of insert Viz popis symbol na konci pribalov ho let ku Se symbolglossaret i slutningen af indl gssedlen Zie lijst met symbolen aan het einde van de bijsluiter Vaadake s mbolite seletust infolehe l pus Katso pakkausselosteen lopussa olevaa kuvamerkkien sanastoa Voir le glossaire des symboles la fin de la notice Siehe Symbol Erkl rungen am Ende der Packungsbeilage Ae te To YAWOC PIO rov GULBOAWV coro T AOG Tou v6srov A jelmagyar zat a haszn lati utas t s v g n tal lhat Vedere il glossario dei simboli alla fine del foglio illustrativo Zr informa cinio lapelio pabaigoje pateikiam simboli glosarijy Se i symbolforklaringen p slutten av produktvedlegget Zobacz obja nienie symboli na ko cu ulotki Consulte o glossario de simbolos no fim do folheto informativo Pozri slovnik symbolov na konci let ka Consulte el glosario de simbolos al final del prospecto Se symbolf rteckningen vid slutet av bipacksedeln Pokyny vam poskytne m stn z stupce spole nosti BD Kasutusjuhiste suhtes kontakteeruge oma kohaliku BD esindajaga Emkoivwvrjote pe rov TOMIK avtimpoowno ng BD yia o nyiec A haszn lati utas t st k rje a BD helyi k pviselet t l Naudojimo instrukcij teiraukit s vietos BD jgaliotojo atstovo Aby uzyska instrukcje u ytkowania skontaktuj sie z lokalnym przedstawicielstwem BD In trukcie z skate u mies
11. 8 32 AM Pa 8 amp BD BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen Angereicherte Middlebrook 7H9 und Hirn Herz Infus Bouillon zur verwendung mit dem BACTEC 9000MB ger t BEZEICHNUNG Deutsch BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen modifizierte Middlebrook 7H9 Bouillon f rdern das Wachstum und den Nachweis von Mykobakterien VERWENDUNGSZWECK BACTEC Myco F Lytic ist ein nicht selektives Kulturmedium das in Verbindung mit dem BACTEC 9000MB Ger t zur qualitativen Kultivierung und Isolierung von Mykobakterien aus Blutproben verwendet wird ZUSAMMENFASSUNG UND ERL UTERUNG DES TESTS Seit Mitte der achtziger Jahre und der Ausbreitung der AIDS Epidemie ist das Auftreten von Septik mie aufgrund von opportunistischen Mykobakterien angestiegen Es ist zu einem Wiederanstieg des Bakteriums Mycobacterium tuberculosis MTB und der nichttuberkul sen Mykobakterien MOTT insbeson dere des Mycobacterium avium Komplexes MAC gekommen Zwischen 1985 und 1992 stieg die Zahl der gemeldeten MTB F lle um 18 Die zwischen 1981 und 1987 durchgef hrten Untersuchungen von AIDS F llen zeigten da 5 5 der Patienten mit AIDS disseminierte nichttuberkul se mykobak terielle Infektionen aufwiesen wie z B MAC Im Jahre 1990 war das kumulative Vorkommen durch die gestiegene Zahl der F lle disseminierter nicht tuberkul ser Infektionen mit Mykobakterien bereits auf 7 6 angestiegen Die U S Centers for Disease Control and Prevention CDC empfehlen d
12. Retirer la capsule de protection du flacon BACTEC et v rifier l absence de fissure de fuite de contamination de turbidit excessive de septum pro tub rant ou en d pression NE PAS UTILISER si un d faut quleconque est observe 2 Etiqueter le flacon de culture avec le num ro d identification de l chantillon et marquer la ligne gradu e de remplissage du milieu sur l tiquette du flacon 3 Avant l injection tamponner le septum avec de l alcool De fa on aseptique injecter 1 5 mL d chantillon par flacon au moyen de la seringue ou les pr lever directement en se servant des lignes gradu es sur l tiquette du flacon voir Limites de la M thode Les flacons inocul s doivent tre plac s dans l appareil BACTEC 9000MB aussit t que possible pour l incubation et la lecture 4 Les flacons introduits dans l appareil seront automatiquement analys s sur toute la dur e du protocole d analyse Les flacons positifs seront identifi s par le syst me fluorescence BACTEC voir le manuel d utilisation BACTEC MA 0092 Le senseur l int rieur du flacon peut ne pas pr senter un aspect visiblement diff rent dans un flacon n gatif par rapport un flacon positif mais le syst me fluorescence BACTEC peut lui d tecter une dif f rence dans la fluorescence du senseur 5 Il est n cessaire de repiquer toute culture positive et de pr parer un frottis pour la coloration de Gram acido r sistante Tous les flacons positifs doivent tre
13. Wasser 7H9 Middlebrook Bouillonbasis ohne Phosphatsalze Hirn Herz Infus Casein Hydrolysat Supplement H ui S xs ies InOsit sia caras trino O Salida id BAT d Ea e aca Glycerol sizer Sr anhand Ri c ere TEES Natriumpolyanetholsulfonat SEO Ta 22d 0 025 96 w v Tween BO sli a Eee gute SE xU Stakes bead 0 0025 w v Pyridoxal HCl x mese mo ot e De do S tmo edo nia 0 0001 96 w v EST 0 006 wiv ARCI 0 024 wiv xs ium quM CER DN 0 24 w v ERICE IAA O II O IT IA 0 01 w v Ammoniumeisen Ill citrat Kaliumphosphat Saponin Anti Schaummitte Dieses BACTEC Medium ist mit CO und O Zusatz abgef llt Die Zusammensetzung kann gem speziellen Leistungsanforderungen abge ndert worden sein BACTEC Myco F Lytic Medium erfordert kein Supplement Jedes 40 mL Fl schchen BACTEC Myco F Lytic ist im Lieferzustand gebrauchsfertig Das Medium sollte beim Erhalt klar und bernsteinfarben sein WARNUNG Sicherheitshinweise zur in vitro Diagnostik Dieses Produkt enth lt trockenen Naturkautschuk POTENTIELL INFEKTI SE TESTPROBE Infekti ses Probenmaterial sollte unter Einhaltung Allgemeiner VorsichtsmaBnahmen 45 und der jeweils beste henden Laborvorschriften gehandhabt und entsorgt werden Da die BACTEC Myco F Lytic Fl schchen mehr als das empfohlene maximale Probenvolumen von 5 mL aufnehmen k nnen sollte das F llvolumen genau berwacht werden Die Anfe
14. an lisis en el instrumento puede ser confirmado mediante la preparaci n de un frotis cidorresistente o una tinci n de Gram Un resultado positivo indica la presencia presunta de microorganismos viables dentro del frasco Si la tinci n es positiva para bacilos cidorresistentes haga un subcultivo en medios s lidos y comunique como positivo en el instrumento positivo por la tinci n de bacilos cidorresistentes identificaci n pendiente Si est n presentes otros microorganismos adem s de bacilos cidorresistentes haga un subcultivo en medio de cultivo s lido y comunique como positivo en el instrumento negativo por la tinci n de bacilos cidorresistentes identificaci n pendiente Si no hay microorganismos presentes en el frotis haga un subcultivo en medios de cultivo s lidos introduzca el frasco en el instrumento de nuevo como un frasco negativo en curso antes de transcurrir 5 horas desde haberlo sacado y deje completarse el protocolo de andlisis No hay resultado comunicable Realice subcultivos del frasco BACTEC Myco F Lytic para pruebas de identificaci n y susceptibilidad LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La detecci n de especies micobacterianas en muestras de sangre depende del numero de organismos presentes en la muestra de los m todos de recogi da de la muestra y de factores del paciente tales como la presencia de sintomas y el tratamiento previo La cidorresistencia de las micobacterias puede variar dependiendo
15. avseende p metoder och sprid ningshindrande faciliteter b V nd upp och ned p flaskan s att inneh llet blandas c Lufta flaskan i ett biologiskt s kerhetssk p s att trycket i flaskan ekvilibreras med atmosf rstrycket d Ta en alikvot ur flaskan cirka 0 1 mL f r beredning av f rgade preparat f rgning f r syrafasta stavar och Gram f rgning e Inspektera utstryket men l mna inte prelimin rsvar f rr n utstrykspreparatet har hunnit bed mas Om en instrumentnegativ flaska vid okul rbesiktning efter sex veckors inkubering f refaller positiv dvs buktande membran kraftigt m rkf rgat blod b r flaskan genomg fortsatt odling och f rgning f r syrafasta stavar samt behandlas som presumptivt positiv f rutsatt att det f rgade utstryket r positivt Fortsatt odling fr n flaska Fortsatt odling skall utf ras i biologiskt s kerhetssk p och l mplig skyddskl dsel inklusive handskar och munskydd skall b ras Innan fortsatt odling utf rs skall flaskan st llas uppr tt och en alkoholtork l ggas ver membranet F r att avlasta eventuellt vertryck i flaskan vilket kan orsakas av v xt av eventuella kontaminanter skall en steril n l 25 G eller finare f rsedd med l mpligt filter eller kompress stickas genom alkoholtorken och membranet N len b r avl gsnas efter att trycket har avlastats och innan prov tas fr n flaskan f r fortsatt odling N len b r f ras in och dras ut rakt undvik vridr relser efte
16. besoins particuliers du laboratoire Le milieu BACTEC Myco F Lytic ne requiert aucune addition de suppl ment Chaque flacon de 40 mL de milieu BACTEC Myco F Lytic est livr pr t l em ploi Le milieu la r ception doit appara tre clair et tre d une couleur l g rement ambr e AVERTISSEMENTS Pr cautions diagnostic in vitro Ce produit contient du caoutchouc naturel s ch ECHANTILLONS POTENTIELLEMENT INFECTIEUX Observer toutes les Pr cautions Universelles 45 et les directives de votre institution lors de la manipu lation et l limination des mat riaux infectieux Les flacons BACTEC Myco F Lytic peuvent accepter plus que les 5 mL de volume maximum recommand s pour l chantillon par cons quent il faut sur veiller le volume de remplissage On recommande l utilisation des pratiques de s curit biologique de niveau 2 et des quipements et des installations de contention pour pr parer les colorations acido r sistantes et pour la culture des chantillons cliniques Pour les activit s comprenant la manipulation et la propagation de cultures de Mycobacterium tuberculosis ou de Mycobacterium bovis les pratiques de s curit biologique de niveau 3 ainsi que des quipements et des installations de contention sont n cessaires 5 6 7 Avant utilisation il convient d examiner les flacons pour v rifier l absence de contamination de turbidit de septum protub rant ou en d pression ou de fuite NE PAS UTILISER
17. de frasco apropriado Antes de eliminar esterilize todos os frascos Myco F Lytic BACTEC inoculados em autoclave Antes de efectuar a colheita a partir de frascos de cultura positivos para repicagem ou colora o etc necess rio libertar o g s frequentemente pro duzido devido ao metabolismo microbiano A colheita de amostras dever ser efectuada numa c mara de seguran a biol gica e utilizando vestu rio protector incluindo luvas e m scaras Consulte a Sec o do Procedimento para obter mais informa es sobre a repicagem FRASCOS COM FUGAS OU PARTIDOS CUIDADO Devido ao facto de um frasco inoculado que apresente fugas ou se encontre partido poder produzir aeross is de micobact rias incluindo M tuberculosis ou outras bact rias o frasco dever ser manipulado de forma apropriada 22 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 23 Se ocorrerem fugas de um frasco inoculado ou se este se partir acidentalmente durante a colheita ou o transporte utilize o procedimento estabelecido na sua institui o para lidar com derrames de micobact rias No m nimo devem ser utilizadas as Precau es Universais Os frascos devem ser elimina dos de uma forma apropriada Nas raras ocasi es em que ocorra uma fuga de um frasco inoculado para dentro do instrumento ou se algum frasco se partir acidentalmente desligue imediatamente o instrumento Abandone a rea afectada Contacte a s Autoridade s de Seguran a ou de Controlo de Infec e
18. de la cepa la edad del cultivo y otras variables Se deben extremar las precauciones para evitar contaminar la muestra durante su extracci n e inoculaci n en el frasco BACTEC Un frasco contaminado dar una lectura positiva en el instrumento pero no indicar un resultado clinico pertinente El usuario debe hacer esta determinaci n de la relevancia clinica en base a factores tales como los resultados de tinci n el tipo de organismo recuperado la presencia del mismo organismo en varios cultivos la historia clinica del paciente etc Los frascos BACTEC Myco F Lytic no son selectivos y favorecen el crecimiento de otros organismos aerobios adem s de micobacteria Los frascos positivos pueden contener una o m s especies de micobacterias y u otras especies que no son micobacterias De estar presentes los organismos de crecimiento r pido pueden ocultar la detecci n de micobacterias de crecimiento m s lento Es necesario realizar subcultivos y procedimientos adicionales A n no se ha establecido la coherencia de la morfologia microsc pica en el medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic La recuperaci n ptima de los aislados se obtiene cuando se a aden 1 5 mL de sangre a cada frasco El empleo de vol menes menores o mayores puede afectar adversamente la recuperaci n los tiempos de detecci n y o la especificidad La frecuencia de los casos de falsos positivos probable mente aumentar cuando el volumen de sangre supera los 5 mL La sangre pue
19. de seguran a biol gica e utilizando vestu rio apropriado incluindo luvas e m s caras Antes de efectuar a repicagem coloque o frasco em posi o vertical e coloque uma compressa com lcool sobre o septo Para libertar a press o posi tiva que possa existir no frasco a qual pode ser provocada pelo crescimento de poss veis contaminantes introduza uma agulha est ril de 25 gauge ou com di metro inferior equipada com um filtro ou um tamp o apropriado atrav s da compressa com lcool e do septo A agulha dever ser retirada ap s a lib erta o da press o existente no frasco e antes da recolha da amostra do frasco para repicagem A introdu o e a remo o da agulha devem ser efectuadas com um movimento em linha recta evitando quaisquer movimentos de lateralidade que possam danificar permanentemente o septo N o volte a colocar a tampa na agulha Elimine as agulhas e as seringas para um recipiente de res duos contaminados resistente a objectos cortantes CONTROLO DE QUALIDADE Em cada caixa de meios de cultura s o fornecidos Certificados do Controlo de Qualidade Recomenda se que cada nova remessa ou lote de meios de cultura Myco F Lytic BACTEC seja testada com os organismos de controlo ATCC identificados na tabela em baixo como controlo positivo e um frasco n o inoculado como controlo negativo Microrganismo Intervalo de Tempo at detec o dias Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 8a 16 Mycobacterium ka
20. der observeres nogen defekter M rk dyrkningsglasset s proven kan identificeres og marker p glassets etikette hvor meget medium der er i glasset Tor membranen af med sprit inden inokulering Injic r sterilt 1 5 mL prove pr glas med en sprojte eller ved direkte provetagning vha skalaen p glasetiketten se afsnittet om procedurens begraensninger Inokulerede dyrkningsglas skal placeres i BACTEC 9000MB instrumentet s hurtigt som muligt til inkubation og registrering 4 Dyrkningsglas der er sat i instrumentet testes automatisk s l nge testen varer Positive dyrkningsglas identificeres af BACTEC Fluorescent sys temet se brugsanvisningen til BACTEC MA 0092 Sensoren i glasset ser ikke anderledes ud i positive i forhold til negative dyrkningsglas men BACTEC Fluorescent systemet kan detektere en forskel i fluorescensen 5 Positive glas skal videredyrkes og der skal klargores et passende udstrygningspraeparat Alle positive glas skal h ndteres i henhold til praksis og med opbevaringsfaciliteter p biosikkerhedsniveau III Behandling af et glas som instrumentet har identificeret som positivt a Fjern glasset fra instrumentet og transport r det til et omr de der anvender procedurer og har opbevaringsfaciliteter i overensstemmelse med biosikkerhedsniveau III b Vend glasset for at blande indholdet c Udlign trykket i glasset i et biologisk sikkerhedsskab d Udtag en prove fra glasset ca 0 1 mL til farvning syrefast og
21. en el instrumento se determin que 1 2 696 fue falso positivo Se determin que la frecuencia de falsos negativos negativos en el instrumento positivos en el frotis y o subcultivo fue 0 en base a subcul tivos terminales de gt 50 de los frascos negativos La frecuencia de contaminaci n encontrada en esta evaluaci n fue 0 9 TABLA 1 RESUMEN DE LOS AISLADOS RECUPERADOS POR EL MEDIO DE CULTIVO MYCO F LYTIC EN ESTUDIOS CLINICOS Total de S lo medio S lo Organismo aislados Myco F Lytic medio 13A Ambos Todas las micobacterias pat genas Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Total 39 5 2 32 BIBLOGGRAFIA Ver References en la pagina 4 amp BD BACTEC Myco F Lytic dyrkningsglas Supplementeret Middlebrook 7H9 og hjerne hjerte infusions bouillon Til brug med BACTEC 9000MB Dansk NAVN BACTEC dyrkningsglas type Myco F Lytic en modificeret Middlebrook 7H9 bouillon n rer v ksten og detektionen af mycobakterier TILSIGTET BRUG Nar BACTEC Myco F Lytic bruges sammen med BACTEC 9000MB instrumentet er det et ikke selektivt dyrkningsmedium til kvalitativ dyrkning og opsam ling af mycobakterier fra blodprover RESUME OG FORKLARING AF TESTEN Siden midten af 1980 erne og spredningen af AIDS epidemien er forekomsten af blodforgiftning pga mycobakterier steget Mycobacterium tuberculo sis MTB og mycobakterier der ikke er tuberkolose MOTT isaer Mycoba
22. f re anv ndning Best ndsdelar Beh ndlat vatten pas aos pai eher pee cide PU NER E Ee inta ES 40 mL q s 7H9 Middlebrook buljongbas utan fosfatsalter 0 12 viv Hjart hjarninfusioni 4204 32 m diese hte Fi dee nt esed e Ant EE 0 596 v v Kaseinhydrolysat cuido ala are Ee eia miii ds 0 1096 v v Supplement Hits Ds dittongo tata dude eo Sinead 0 1096 v v Inositol s ll ni tare en saio dadi ix a e e alii ut si 0 0596 v v cuo 0 1096 v v Natriumpolyanetolsulfonat 0 025 v v Tween 80 o Ui ossia ei dee eme we P epos m aaa 0 002596 v v Pyridoxal HCl 0 000196 v v Jarmammoniumeitrati varati do vu sbt dat DIESE DE uer ix EE er S 0 006 v v Kaliumf sfat snif ko Enos Kr io e Recien dE RARE head 0 024 v v Saponin ara su deret A te RE EQUUM Ue i 0 24 v v Skumd mpare E ines sies DES Detta BACTEC medium dispenseras med tillsats av CO och O Sammans ttningen kan ha justerats f r att uppfylla specifika funktionskrav BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium kr ver ingen ytterligare supplementering Varje BACTEC Myco F Lytic odlingsflaska 40 mL r klar att anv ndas vid leverans Vid leveransen skall mediet ha ett klart och l tt b rnstensf rgat utseende 0 01 v v VARNINGAR De f rdigst llda odlingsflaskorna r avsedda f r in vitro diagnostik Denna produkt inneh ller torrt naturgummi POTENTIELLT INFEKTI ST PROV lakttag Generella f rsiktighetsbea
23. flaska kan verifieras via ett utstryk f r syrafasta stavar eller Gramf rgat preparat Ett positivt resultat indikerar att flaskan kan inneh lla viabla mikroorganismer Om utstryket f r syrafasta stavar r positivt utf rs fortsatt odling p fasta medier och resultatet rapporteras som instrumentpositivt syrafast utstryk positivt identifiering p g r Om andra mikroorganismer n syrafasta bakterier f religger utf rs fortsatt odling p fasta medier och resultatet rapporteras som instrumentpositivt syrafast utstryk negativt identifiering p g r Om inga mikroorganismer uppt cks i utstryken utf rs fortsatt odling p fasta medier flaskan s tts in igen i instrumentet som en p g ende negativ flaska inom 5 timmar efter uttagning ur instrumentet och testprotokollet fullf res Inga rapporterbara resultat Utf r fortsatt odling fr n BACTEC Myco F Lytic flaskan f r identifiering och resistensbest mning METODENS BEGR NSNINGAR Detektion av mykobakteriearter i kliniska prover r beroende av antalet organismer i provet provtagningsmetod och s dana patientfaktorer som sym tom och tidigare behandling Mykobakterier kan variera i syrafasthet beroende p stam odlingens lder och andra variabler F rsiktighet skall iakttagas s att kontamination av provet under provtagning och ympning p BACTEC flaskan f rhindras En kontaminerad flaska kan ge en positiv instrumentavl sning men detta inneb r inte att resultatet r klini
24. g karaA you Katal gussz m Numero di catalogo Katalogo numeris Numer katalogowy N mero do cat logo Katal gov slo N mero de cat logo Authorized Representative in the European Community Autorizovany z stupce pro Evropskou unii Autoriseret repraesentant i EU Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie Volitatud esindaja Euroopa N ukogus Valtuutettu edustaja Euroopan yhteis ss Repr sentant agr pour la C E E Autorisierte EG Vertretung EEouotodomp vos avrinp ownoc omv Eupwrtaikr Kow tnta Hivatalos k pviselet az Eur pai Uni ban Rappresentante autorizzato nella Comunit europea galiotasis atstovas Europos Bendrijoje Autorisert representant i EU Autoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej Representante autorizado na Uni o Europeia Autorizovany z stupca v Eur pskom spolo enstve Representante autorizado en la Comunidad Europea Auktoriserad representant i EU In Vitro Diagnostic Medical Device L ka sk za zen ur en pro diagnostiku in vitro In vitro diagnostisk medicinsk anordning Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur L kinn llinen in vitro diagnostiikkalaite Dispositif m dical de diagnostic in vitro Medizinisches In vitro Diagnostikum In vitro Stayvwortikr latp kr ouokeur In vitro diagnosztikai orvosi eszk z Dispositivo medico diagnostico in vitro In vitro diagnostikos prietaisas In vitro d
25. increasing fluorescence enables the BACTEC fluorescent series instrument to determine if the vial is instrument positive A positive determination indicates the presumptive presence of viable microorganisms in the vial Detection is limited to microor ganisms that will grow in the medium at 37 C The medium is not selective and will support the growth of other aerobic organisms including yeast fungi and bacteria which may interfere if present with the recovery of mycobacteria Culture vials which remain negative for 42 days and which show no visi ble sign of positivity are removed from the instrument and sterilized prior to discarding REAGENTS Each BACTEC Myco F Lytic culture vial contains the following active ingredients prior to processing List of Ingredients Processed Water ecos Denis ne e roi 40 mL qs 7H9 Middlebrook Broth Base without phosphate salts 0 12 wiv Brain Heart Infusion 0 5 wiv Casein Hydrolysate 0 10 wiv Supplement H 0 10 wiv Inositol 0 05 wiv Glycerol 0 10 wiv Sodium Polyanetholsulfonate 0 025 wiv Tween 80 0 0025 w v Pyridoxal HCl 0 0001 w v 0 006 w v 0 024 wiv 0 24 wiv 0 01 wiv Ferric Ammonium Citrate Potassium Phosphate Saponin Antifoam This BACTEC media is dispensed with added CO and O Composition may have been adjusted to meet specific performance requirements BA
26. milieu de culture BACTEC 13A Un total de 28 flacons BACTEC Myco F Lytic contenaient un volume excessif d chantillon entre 6 et 20 mL pendant l tude clinique et ils n ont pas t inclus dans cette tude puisqu ils pr sentaient un volume sup rieur au volume maximum de remplissage et n taient donc pas conformes De ces 28 flacons BACTEC Myco F Lytic 16 57 96 ont t identifi s comme des faux positifs Des 284 chantillons sanguins analys s pendant l tude clinique un seul 0 4 a t d termin comme tant un faux positif sur milieu BACTEC Myco F Lytic positif selon l appareil frottis et ou repiquage n gatifs Des 38 flacons Myco F Lytic jug s positifs par l appareil 1 2 6 96 s est r v l tre un faux positif Le taux de faux n gatifs n gatifs selon l appareil frottis et ou repiquage positifs a t estim 0 sur la base des repiquages finaux de gt 50 96 des flacons n gatifs Le taux de contamination pendant cette tude a t estim 0 9 96 Tableau 1 RESUME DE LA MISE EN EVIDENCE DES ISOLATS SUR MILIEU DE CULTURE MYCO F LYTIC LORS D ESSAIS CLINIQUES Isolats Sur milieu Sur milieu Sur les Organisme totaux Myco F Lytic 13A deux seulement seulement milieux Toutes les mycobact ries pathog nes Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Total 39 5 2 32 REFERENCES voir References a la page 4 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005
27. nel sistema BACTEC 9000MB ed incubato senza interruzione a 37 C con agitazione ogni dieci minuti per ottenere un isolamento ottimale Ogni flacone contiene un sensore capace di rilevare il calo della concentrazione di ossigeno presente nel flacone fenomeno dovuto al metabolismo e alla crescita dei microrganismi Il sensore viene monitorato dal sistema BACTEC 9000MB ogni dieci minuti L analisi del tasso di diminuzione di ossigeno misurato dall aumento di fluorescenza permette allo strumen to BACTEC della serie fluorescente di determinare se il flacone positivo per lo strumento Una lettura positiva indica la presenza presunta di microrganismi vivi nel flacone Questa analisi si limita all isolamento di microrganismi che possono crescere nel terreno di coltura a 37 C Il terreno non selettivo e favorisce anche la crescita di altri organismi aerobi fra cui lieviti funghi e batteri che se presenti possono interferire con l isolamento dei micobatteri I fla coni di coltura che rimangono negativi per 42 giorni senza dare alcun segno visibile di positivit vengono tolti dallo strumento sterilizzati e poi eliminati REAGENTI Prima di essere impiegati i flaconi di coltura BACTEC Myco F Lytic contengono i seguenti reagenti Lista di ingredienti w v peso volume weight per volume Acqua purificata dal bs nta hate faced gud 40 mL q b Brodo base Middlebrook 7H9 senza sale fosfato 0 12 wiv Infuso di cuore e cervello
28. one or more species of mycobacteria and or other non mycobacterial species If present fast growing organisms may mask the detection of slower growing mycobacteria Subculture and additional procedures are required The consistency of microscopic morphology in BACTEC Myco F Lytic has not been established Optimum recovery of isolates will be achieved by adding 1 5 mL of blood to each vial Use of lower or higher volumes may adversely affect recovery detection times and or specificity False positivity most likely will increase when the blood volume is above 5 mL Blood may contain antimicrobials or other inhibitors which may slow or prevent the growth of microorganisms BACTEC Myco F Lytic vials are incubated at 37 C potentially precluding the recovery of mycobacteria requiring other incubation temperatures e g M marinum M ulcerans M haemophilum Recovery of such organisms requires additional culture methods The following isolates were detected as positive in the BACTEC 9000MB instrument using BACTEC Myco F Lytic medium during internal studies and or clinical trials M tuberculosis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M malmoense During internal studies M xenopi and M szulgai exhibited unsatisfactory recovery with BACTEC Myco F Lytic culture medium EXPECTED RESULTS Frequency distribution of recovery ti
29. patogena mykobak terieisolat se tabell 1 Av dessa positiva prover p visades fem 13 i enbart BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium och tv 5 i enbart BACTEC 13A odlingsmedium Totalt 28 st BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor hade fyllts p med f r stor provvolym mellan 6 och 20 mL vid den kliniska utvarderin gen och inkluderades ej i studien eftersom den maximala fyllnadsvolymen verskridits ogiltiga prover Av dessa 28 BACTEC Myco F Lytic flaskor bed mdes 16 57 s som falskt positiva Av de 284 prover som testades i denna kliniska studie bed mdes en 0 4 BACTEC Myco F Lytic flaska vara falsk positiv instrumentpositiv men utstryk och eller fortsatt odling negativ Av de 38 instrumentpositiva Myco F Lytic flaskorna bed mdes 1 2 6 s som falskt positiv Frekvensen falskt negativa resultat instrumentnegativ men utstryk och eller fortsatt odling positiv var 0 baserat p fortsatta odlingar av gt 50 av negativa flaskor efter avslu tad testprotokollperiod Kontaminationsfrekvensen under denna studie var 0 9 TABELL 1 VERSIKT VER ISOLAT P VISADE I MYCO F LYTIC ODLINGSMEDIUM VID KLINISKA STUDIER Totala Bara Myco F Bara 13A Organism isolat lytiska medelk medel B da Alla Patogeniska Mykobakterier Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Totalt 39 5 2 32 REFERENSER Se References p sid 4 28 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 33 AM Pa 29 i i
30. sa mykobak terieinfektioner resulterat i en kumulativ incidens p 7 6 Centers for Disease Control and Prevention CDC rekommenderar alla laboratorier att g ra varje anstr ngning att anv nda de snabbaste metoder som finns tillg ngliga f r diagnostisk mykobakterietestning Dessa rekommendationer innefattar anv ndning av ett flytande medium f r odling av mykobakterier 1 2 3 BACTEC 9000MB systemet r konstruerat f r snabb detektion av mykobakterier i kliniska prover BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium r en Middlebrook 7H9 och hj rt hj rninfusionsbuljong avsedd f r p visning av mykobakterier i blodprover S rskilda modifieringar har gjorts f r att fr mja tillv xt och m jlighet till p visning av mykobakterier Dessa modifieringar innefattar tillsats av j rnammoniumcitrat i syfte att f rse vissa mykobakteries tammar med en j rnk lla tillsats av saponin som hemolyserande agens och tillsats av specifika proteiner och sockerarter som extra n ringstillsats I varje flaska finns en sensor som kan detektera minskningar i koncentrationen l st oxygen i flaskan som resultat av mikroorganismernas metabolism och tillv xt BACTEC 9000MB systemet kontrollerar om sensorn uppvisar n gon fluorescens kning vilken i s fall r proportionell mot minskningen av hal ten l st oxygen En positiv avl sning indikerar att flaskan kan inneh lla viabla mikroorganismer FUNKTIONSPRINCIPER BACTEC Myco F Lytic odlingsflaska r framtagen f r sna
31. the clinical study one BACTEC Myco F Lytic vial 0 496 was determined to be false positive instrument positive smear and or subculture negative Of the 38 instrument positive Myco F Lytic vials 1 2 6 was determined to be false positive The false negative rate instrument negative smear and or subculture positive was determined to be 0 based on terminal subcultures of gt 50 of negative vials The conta mination rate during this evaluation was determination to be 0 9 TABLE 1 SUMMARY OF MYCO F LYTIC CULTURE MEDIUM ISOLATE RECOVERY DURING CLINICAL TRIALS Organism Total Myco F Lytic 13A Medium Both Isolates Medium Only Only All Pathogenic Mycobacteria Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Total 39 5 2 32 REFERENCES 1 Horsburg Jr C R 1991 Mycobacterium Avium Complex Infection in the acquired immunodefieciency syndrome New England Journal of Medicine 324 1332 1338 2 Tenover F C et al 1993 The resurgence of Tuberculosis Is Your Laboratory Ready Journal of Clinical Microbiology 31 767 770 3 Isolation and Identification of Mycobacterium tuberculosis A Guide for the Level II Laboratory U S Department of Health and Human Services Atlanta GA 1981 4 Kent PT and G P Kubica 1985 Public Health Mycobacteriology A Guide for the Level Ill Laboratory U S Department of Health and Human Services Centers for Disease Control and Prevention Atlanta GA
32. to solid media and report as instrument positive AFB smear positive ID pending If microorganisms other than acid fast bacilli are present subculture to solid media and report as instrument positive AFB smear negative ID pending If no microorganisms are present on the smears subculture to solid media re enter the vial into the instrument as an ongoing negative vial within 5 hours of removal and allow to complete test protocol No reportable result Perform subcultures from the BACTEC Myco F Lytic vial for identification and susceptibility testing LIMITATIONS OF THE PROCEDURE Detection of mycobacterial species in blood specimens is dependent on the number of organisms present in the specimen specimen collection methods and patient factors such as presence of symptoms and prior treatment Mycobacteria may vary in acid fastness depending on strain age of culture and other variables Care must be taken to prevent contamination of the sample during collection and inoculation into the BACTEC vial A contaminated vial will give a pos itive instrument reading but will not indicate a relevant clinical result Such a determination must be made by the user based on such factors as stain results type of organism recovered occurrence of the same organism in multiple cultures patient history etc BACTEC Myco F Lytic vials are not selective and will support the growth of other aerobic organisms besides mycobacteria Positive vials may contain
33. ture BACTEC Myco F Lytic RESULTATS ESCOMPTES La distribution de la fr quence des temps de mise en vidence TTD pour les chantillons de sang positifs lors d essais cliniques avec le milieu de culture BACTEC Myco F Lytic est repr sent e graphiquement dans la figure suivante 8 MOTT MAC EN vt Nombre d isolats O NO B Oro x 2 6 7 11 13 15 17 19 21 TTD Jours CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCE Le milieu de culutre BACTEC Myco F Lytic a t valu avec l appareil BACTEC 9000MB sur deux sites cliniques consid r s comme deux grands h pitaux d enseignement de soins tertiaires dans des r gions g ographiques diff rentes Les populations sur chaque site comprenaient des patients pr sum s atteints d une infection mycobact rienne des patients dont le syst me immunitaire tait compromis et des patients ayant recu une greffe Le milieu de culutre BACTEC Myco F Lytic a t compar au milieu de culture BACTEC 13A pour la mise en vidence et l identification de mycobact ries partir des chantillons sanguins Un total de 284 chantillons sanguins conformes ont t analys s pendant cette tude Le nombre total d isolats de mycobac t ries pathog nes mis en vidence dans cette tude tait de 39 voir TABLEAU 1 De ceux ci cinq 13 96 ont t isol s seulement sur le milieu de cul ture BACTEC Myco F Lytic tandis que deux 5 96 n ont t mis en vidence que sur le
34. viables dentro del frasco La detecci n se limita a los microorganismos capaces de crecer en el medio de cultivo a 37 C El medio de cultivo no es selectivo y permite el crecimiento de otros organismos aerobios incluyendo levaduras hongos y bacterias cuya presencia puede interferir con la recuperaci n de micobacterias Los frascos de cultivo que permanecen negativos durante 42 dias y que no muestran indicios visibles de ser positivos se retiran del instrumento y se esterilizan antes de desecharse REACTIVOS Antes de realizar el procedimiento cada frasco de cultivo BACTEC Myco F Lytic contiene los siguientes reactivos Componentes Agua procesada Base de caldo Middlebrook 7H9 sin sales de fosfato Infusi n de cerebro y coraz n Hidrolizado de caseina Suplemento H Inositol Glicerol Polianetolsulforiato s dico 2 44 era a ae la Bene d 0 025 p v Tween 80 0 0025 p v 0 0001 p v 0 006 p v 0 024 p v 0 24 p v 0 01 p v Clorhidrato de piridoxal Citrato f rrico am nico Fosfato pot sico Saponina Antiespumante Este medio BACTEC se suministra con CO y O a adidos La composici n puede haberse modificado de acuerdo con las necesidades especificas de rendimiento El medio BACTEC Myco F Lytic no requiere la adici n de un suplemento Cada frasco de 40 mL de medio BACTEC Myco F Lytic se recibe listo para su empleo inmediato La apariencia de los medio
35. 00MB en dos centros clinicos considerados como grandes hospitales universitarios de atenci n terciaria situados en reas geogr ficamente diversas Las poblaciones de estos lugares incluyeron pacientes con posible infec ci n micobacteriana pacientes inmunocomprometidos y pacientes trasplantados El medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic fue comparado con el medio de cultivo BACTEC 13A para la recuperaci n y detecci n de micobacterias en muestras de sangre Durante el estudio fueron analizadas 284 muestras de sangre que cumplieron las exigencias del an lisis El n mero total de aislados micobacterianos pat genos recuperados en el estudio fue 39 V ase la TABLA 1 De estos aislados positivos se recuperaron cinco 13 en el medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic solamente y se recuperaron dos 5 en el medio de cultivo BACTEC 13A solamente Un total de 28 frascos BACTEC Myco F Lytic que se llenaron con un volumen de muestra excesivo entre 6 y 20 mL durante la evaluaci n cl nica no fueron incluidos en este estudio porque superaban el volumen de llenado m ximo incumplimiento de las exigen cias del an lisis De estos 28 frascos BACTEC Myco F Lytic 16 5796 fueron identificados como falsos positivos De las 284 muestras de sangre analizadas en el estudio cl nico se determin que un frasco BACTEC Myco F Lytic 0 4 fue un falso positivo positivo en el instrumento negativo por el frotis y o subcultivo De los 38 frascos de Myco F Lytic positivos
36. 7 identificeret som falske positiver Ud af de 284 blodpr ver der blev testet i den kliniske unders gelse blev t BACTEC Myco F Lytic glas 0 4 bestemt til at v re falsk positivt instru mentpositivt udstrygnings og eller videredyrkningsnegativt Ud af de 38 intrumentpositive Myco F Lytic glas var der en 2 6 falsk positiv Forekomsten af falske negative instrumentnegative udstrygnings og eller videredyrkningspositive var 0 baseret p terminale videredyrkede kultur er af ca gt 50 af de instrumentnegative glas Forekomsten af kontaminering ved denne evaluering var 0 9 TABEL 1 RESUME AF ISOLATOPSAMLING MYCO F LYTIC DYRKNINGSMEDIE UNDER KLINISKE FORSOG Isolater Kun for Myco F Kun for Organisme i alt lytisk substrat 13A substrat Begge dele Alle patogene mycobacteria Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 I alt 39 5 2 32 REFERENCER Se References pa side 4 BD Frascos de Cultura Myco F Lytic BACTEC Middlebrook 7H9 Suplementado e Meio Liquido de Infus o Cerebro Cora o Para utiliza o com o BACTEC 9000MB Portugu s Os frascos de cultura BACTEC do tipo Myco F Lytic um meio liquido Middlebrook 7H9 modificado sustentam o crescimento e a detec o de micobact rias UTILIZAC O PRETENDIDA Quando o Meio Myco F Lytic BACTEC utilizado com o instrumento 9000MB BACTEC funciona como um meio de cultura n o selectivo para a cultura e o isolam
37. BSL III practices and containment facilities b Invert vial to mix contents In biological safety cabinet vent the vial to equilibrate vial pressure with atmosphere d Remove aliquot from vial approx 0 1 mL for stain preparations AFB and Gram e Inspect smear and report preliminary results only after smear evaluation If at the end of six weeks incubation an instrument negative vial appears to be positive i e bulging septum or very darkened blood it should be sub cultured AFB stained and treated as a presumptive positive providing the stain result is positive PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 3 Subculturing of Vial Subculturing should be performed in a biological safety cabinet and appropriate clothing including gloves and masks should be worn Prior to subculturing place the vial in an upright position and place an alcohol wipe over the septum To release any positive pressure in the vial which could be caused by growth of possible contaminants insert a sterile 25 gauge or smaller needle equipped with an appropriate filter or pledget through the alcohol wipe and septum The needle should be removed after any pressure is released and before sampling the vial for subculture The insertion and withdrawal of the needle should be done in a straight line motion avoiding any side to side motions which could permanently damage the septum Do not re cap the needle Discard needles and syringes in a puncture resistant bio
38. CTEC Myco F Lytic medium requires no supplement addition Each 40 mL vial of BACTEC Myco F Lytic is ready for use when received The appearance of the media upon receipt shall be clear and light amber in color PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 2 WARNINGS Precautions in vitro diagnostic This Product Contains Dry Natural Rubber POTENTIAL INFECTIOUS TEST SPECIMEN Observe Universal Precautions 45 and institutional guidelines when handling and disposing of infectious materials BACTEC Myco F Lytic vials will accept more than the recommended maximum of 5 mL of specimen volume monitoring of fill volume should be conducted Biosafety Level 2 practice containment equipment and facilities are recommended for preparing acid fast stains and for culturing clinical specimens For activities involving the propagation and manipulation of Mycobacterium tuberculosis or Mycobacterium bovis grown in culture Biosafety Level 3 prac tice containment equipment and facilities are recommended 5 6 7 Prior to use each vial should be examined for evidence of contamination such as cloudiness bulging or depressed septum or leakage DO NOT USE any vial showing evidence of contamination leakage or damage Vial contamination may not be readily apparent A contaminated vial could contain posi tive pressure If a contaminated vial is used for direct draw gas or contaminated culture media could be refluxed into the patient s vein On rare occa sions the gla
39. Cora o para o isolamento de micobact rias a partir de amostras de sangue Foram efectuadas modificag es especificas para potenciar o crescimento e o isolamento de micobact rias Estas modifica es incluem o citrato de am nia f rrico para fornecer uma fonte de ferro para estirpes especificas de micobact rias a adi o de saponina como um agente de lise de sangue e a adic o de proteinas e a ucares especificos para fornecerem suplementos nutritivos Cada frasco contem um sensor capaz de detectar diminui es na concentra o de oxig nio no frasco resultantes do metabolismo e do crescimento dos microorganismos O sensor monitorizado pelo Sistema 9000MB BACTEC relativamente ao aumento da fluoresc ncia o qual proporcional diminui o do oxig nio Uma determina o positiva indica a presen a pre suntiva de microorganismos vi veis no frasco PRINC PIOS DO PROCEDIMENTO O frasco de cultura Myco F Lytic BACTEC foi concebido para a detec o r pida de micobact rias no sangue As amostras de sangue s o inoculadas para dentro do frasco Myco F Lytic BACTEC com uma seringa ou atrav s da colheita directa com uma agulha e tubagem O frasco colocado dentro do Sistema 9000MB BACTEC e submetido a uma incuba o cont nua a 37 C sendo o frasco agitado a cada dez minutos para obter um isolamento pti mo Cada frasco cont m um sensor capaz de detectar diminui es na concentra o de oxig nio no frasco resultantes do metaboli
40. F r p visning av s dana organismer kr vs ytterligare odlingsmetoder F ljande isolat detekterades som positiva av BACTEC 9000MB instrumentet vid anv ndning av BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium i b de interna studier och eller kliniska pr vningar M tuberculosis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M malmoense Vid interna studier noterades otillfredsst llande p visning av M xenopi och M szulgai vid anv ndning av BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium F RV NTADE RESULTAT Frekvensdistributionen f r detektionstider f r positiva kliniska blodprover vid anv ndning av BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium illustreras i nedanst ende figur 8 7 MOTT 8 2 MAC 5 E a re v 4 v 3 E 2 2 1 O 2 6 7 11 13 15 17 19 21 TTD dagar FUNKTIONSEGENSKAPER BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium utv rderades med BACTEC 9000MB instrument p tv kliniska platser vilka utgjordes av stora undervisningssjukhus p geografiskt skilda orter Patientpopulationerna p de olika platserna innefattade patienter med misst nkt mykobakterieinfektion immunkompro metterade patienter och transplantationspatienter BACTEC Myco F Lytic odlingsmedium j mf rdes med BACTEC 13A odlingsmedium med avseende p p visning och detektion av mykobakterier i blodprover Totalt 284 giltiga blodprover testades under studien Totalt p visades 39
41. Gram e Se p opstroget og rapport r f rst de forel bige resultater n r opstroget er evalueret Hvis der efter seks ugers inkubering er et instrumentnegativt glas der ser postitvt ud bulnende membran eller meget morkt blod skal det videredyrkes farves for syrefaste bakterier og behandles som en formodet positiv forudsat at farvningen giver et positivt resultat Videredyrkning Videredyrkning skal foretages i et biologisk sikkerhedsskab og man skal baere passende beklaedning inkl handsker og maske Inden videredyrkning skal glasset placeres lodret og en serviet med alkohol skal placeres over membranen For at udligne et eventuelt overtryk i glasset der kan skyldes vaekst af mulige kontaminanter skal man stikke en steril kanyle storrelse 25 G eller mindre der er forsynet med et passende filter eller tampon gennem den alkoholvaedede serviet og membranen Kanylen skal fjernes n r trykket er udlignet og inden der udtages prover til videredyrkn ing Inds tningen og fjernelsen af kanylen skal foretages med en lige bev gelse uden drejende bevaegelser der vil kunne beskadige membranen Sat ikke haetten p kanylen igen Bortskaf kanyler og sprojter i en beholder til bioaffald som n lene ikke kan stikke igennem KVALITETSKONTROL Kvalitetskontrolcertifikater er vedlagt hver pakke med medium Det anbefales at hver ny levering eller parti BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmedium testes med ATCC kontrolorganismerne der er identificere
42. Kulturmedium und zwei 5 ausschlie lich mit dem BACTEC 13A Kulturmedium isoliert W hrend der klinischen Beurteilung wurden insgesamt 28 BACTEC Myco F Lytic Fl schchen berf llt zwischen 6 und 20 mL und nicht in der Studie ber ck sichtigt da das F llvolumen berschritten wurde und die Proben nicht den Testvoraussetzungen entsprachen Von diesen 28 BACTEC Myco F Lytic Fl schchen wurden 16 57 als falsch positiv identifiziert Von den 284 in der klinischen Studie getesteten Blutproben wurde ein 0 4 BACTEC Myco F Lytic Fl schchen als falsch positiv beurteilt Ger te posi tiv Ausstrich und oder Subkultur negativ Von den 38 Ger te positiven Myco F Lytic Fl schchen wurde 1 Fl schchen 2 6 als falsch positiv beurteilt Der Anteil falsch negativer Proben Ger te negativ Ausstrich und oder Subkultur positiv der anhand der Subkulturen von 2 50 der negativen Fl schchen ermittelt wurde betrug 0 Die Kontaminationsrate w hrend dieser Beurteilung betrug 0 9 TABELLE 1 ZUSAMMENFASSUNG DER IN KLINISCHEN STUDIEN MIT DEM MYCO F LYTIC KULTURMEDIUM NACHGEWIESENEN ISOLATE Gesamtzahl Nur Nur 13A Organismus der Myco F Medium Beide Isolate Lytic Medium Alle pathogenen Mykobakterien Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Gesamt 39 5 2 32 LITERATURNACHWEIS Siehe References auf Seite 4 amp BD Flaconi di coltura BACTEC Myco F Lytic Brodo Middlebr
43. L para la preparaci n de tinciones bacilos cidorresistentes y Gram e Inspeccione el frotis y comunique los resultados preliminares s lo despu s de la evaluaci n del frotis Si al final de la incubaci n de seis semanas un frasco negativo en el instrumento parece positivo a simple vista es decir con tap n hinchado o con san gre muy oscurecida se debe efectuar un subcultivo preparar una tinci n de bacilos cidorresistentes y considerar el frasco como presuntamente positi vo siempre que el resultado de la tinci n sea positivo Subcultivo del frasco El subcultivo debe realizarse en una c mara de seguridad biol gica y el operario debe llevar puesta ropa de protecci n incluyendo guantes y mascarilla Antes de realizar el subcultivo ponga el frasco en posici n vertical y coloque un trozo de algod n empapado en alcohol sobre el tap n A fin de dejar escapar cualquier presi n positiva que se haya producido en el interior del frasco debido al crecimiento de contaminantes introduzca una aguja est ril de calibre 25 o menor equipada con un filtro o tap n adecuado a trav s del trozo de algod n empapado en alcohol y el tap n La aguja 16 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 17 debe retirarse una vez reducida la presi n y antes de tomar la muestra para el subcultivo La inserci n y retirada de la aguja deber hacerse en linea recta evitando los movimientos laterales que pueden causar dafio permanente al tap n No vue
44. N BACTEC Myco F Lytic vials must be used with instrument software version 3 6 or higher Inoculation of BACTEC Myco F Lytic Culture Vials 1 Remove the flip off cap from the BACTEC vial top and inspect the vial for cracks leaks contamination excessive cloudiness and bulging or indent ed septum DO NOT USE if any defect is noted 2 Label culture vial with specimen identification and mark medium fill graduation line on vial label 3 Before inoculating swab the septum with alcohol Aseptically inject with a syringe or draw directly with the aid of the graduation lines on the vial label 1 5 mL of specimen per vial see the section on Limitations of the Procedure Inoculated vials should be placed into the BACTEC 9000MB instrument as soon as possible for incubation and monitoring 4 Vials entered into the instruments will be automatically tested for the duration of the testing protocol Positive vials will be identified by the BACTEC Fluorescent System see the BACTEC User s Manual MA 0092 The sensor inside the vial may not appear visibly different in positive or negative vials however the BACTEC Fluorescent System can determine a difference in sensor fluorescence 5 Positive vials should be subcultured and an appropriate smear prepared All positive vials should be handled using BSL III practices and containment facilities Processing an instrument positive vial a Remove the vial from the instrument and transport to an area using
45. Qualidade Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 e Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 microsc pio e materiais para a colora o de l minas e para a repicagem dos frascos CUIDADO Os frascos Myco F Lytic BACTEC dever o ser utilizados com um software da vers o 3 6 ou superior do instrumento Inocula o dos Frascos de Cultura Myco F Lytic BACTEC 1 Retire a tampa de encaixe do topo do frasco BACTEC e inspeccione o relativamente exist ncia de rachas fugas contamina o turva o excessiva e abaulamento ou irregularidades do septo Se for detectado algum defeito N O UTILIZAR 2 Coloque a identifica o da amostra e marque a linha de volume do meio no r tulo do frasco de cultura 3 Antes de inocular limpe o septo com lcool Com a ajuda das linhas de gradua o no r tulo do frasco injecte de forma ass ptica com uma seringa ou colha directamente um m ximo de 1 a 5 mL de amostra por frasco consulte a sec o sobre as Limita es do Procedimento Os frascos inocula dos devem ser colocados o mais rapidamente poss vel dentro do instrumento 9000MB BACTEC para a incuba o e monitoriza o 4 Os frascos introduzidos dentro dos instrumentos ser o automaticamente testados durante o per odo de dura o do protocolo do teste Os frascos positivos ser o identificados pelo Sistema Fluorescente BACTEC consulte o Manual do Utilizador do BACTEC MA 0092 O sensor no interior do frasco poder
46. RISTICHE DI PERFORMANCE Il terreno di coltura BACTEC Myco F Lytic e stato sottoposto a valutazione con lo strumento BACTEC 9000MB in due sedi cliniche ospedaliere importanti situate in localit geografiche diverse La popolazione in esame nelle due sedi comprendeva pazienti sospetti di infezioni micobatteriche pazienti immuno compromessi o che avevano subito trapianti Il terreno di coltura BACTEC Myco F Lytic stato messo a confronto con il terreno BACTEC 13A per la coltura e l isolamento di micobatteri da campioni di sangue Durante lo studio sono stati testati in totale 284 campioni ematici in coppia Il numero totale di isolati micobatterici patogeni recuperati nel corso dello studio stato 39 vedere Tabella 1 Di questi positivi cinque 13 sono stati recu perati solo nel terreno di coltura BACTEC Myco F Lytic e due 596 sono stati recuperati solo col terreno di coltura BACTEC 13A 28 flaconi in totale sono stati esclusi dallo studio clinico perch il volume di campione contenuto superava il limite massimo consentito era tra 6 e 20 mL Di questi 28 flaconi BACTEC Myco F Lytic 16 57 sono stati identificati come falsi positivi Dei 284 flaconi contenenti i campioni di sangue testati nello studio clinico un flacone BACTEC Myco F Lytic 0 4 stato determinato come falso posi tivo positivo per lo strumento negativo a striscio e o subcoltura Dei 38 flaconi Myco F Lytic positivi per lo strumento 1 2 6 stato determinato come fal
47. Revisions SO 0191 5 Rev from Rev to ECO Notes BD Cat Number 442003 442288 Blank Sheet Size Length 24 Width 27 5 Number of Pages 30 Number of Sheets 1 Page Size Length 8 Width 5 5 Final Folded Size 5 5 x 8 Style see illustrations below 7 an HEADER HEADER TT ni DER 3 4 HEADER mA E 5 6 7 See Specification Control Number N A for Material Information Ink Colors Printed two sides Yes _ No No of Colors 1 PMS Black Graphics are approved by Becton Dickinson and Company Supplier has the responsibility for using the most current approved revision level VS Controlled by BD Caribe Ltd Label Design COMPANY CONFIDENTAL THIS DOCUMENT IS 4m BD Becton Dickinson and Company THE PROPERTY OF BECTON DICKINSON AND RA 7 Loveton Circle Proofer COMPANY AND IS NOT TO BE USED OUTSIDE THE COMPANY WITHOUT WRITTEN PERMISSION Sparks MD 21152 USA Category and Description Sheet 1 of 31 Package Insert PP124JAA BACTEC Myco F Lytic Scale N A Checked By Part Number PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 1 amp BD BACTEC Myco F Lytic Culture Vials Supplemented Middlebrook 7H9 and Brain Heart Infusion Broth FOR USE WITH BA English pages 1 4 Espafiol p ginas 15 18 Fran ais pages 4 7 Dansk side 18 21 C PP124JAA G Deutsch Seiten 8 11 Portugu s paginas 21 25 2005 05 Italiano pagine 11
48. Sangue da marca VACUTAINER um Conjunto de Colheita de Sangue SAFETY LOK VACUTAINER ou outro conjunto de borboleta com tubagem Se utilizar uma agulha e tubagem colheita directa observe cuidadosamente a direcc o do fluxo do sangue quan do iniciar a colheita da amostra Antes da inocula o o volume do meio dever ser marcado no r tulo com uma caneta ou marcador para indicar o ponto de inicio da colheita da amostra O vacuo no frasco exceder habitualmente os 5 mL devendo por isso o utilizador monitorizar o volume colhido atrav s das marcas da gradua o de 5 mL existentes no r tulo do frasco Quando tiver sido colhido o volume de sangue pretendido 1 a 5 mL o fluxo dever ser interrompido comprimindo a tubagem e removendo a agulha do frasco BACTEC O frasco BACTEC inoculado dever ser transportado o mais rapidamente possivel para o laborat rio e colocado no instrumento BACTEC Para efectuar a colheita da amostra de sangue do doente tamb m poder ser utilizado um Tubo da Marca VACUTAINER com tampa amarela contendo SPS O tubo dever ser transportado o mais rapidamente possivel para o laborat rio para a amostra ser transferida para dentro do frasco de cultura BACTEC PROCEDIMENTO Materiais Fornecidos Frascos de Cultura Myco F Lytic BACTEC Materiais Necess rios Mas Nao Fornecidos Camara de Seguranga Biol gica Autoclave unidade de ventila o desinfectante micobactericida alcool iso propilico a 70 Organismos de Controlo de
49. a Labors alle Anstrengungen unternehmen um die schnellsten verf gbaren Methoden zum diagnostischen Testen auf Mykobakterien einzusetzen Diese Empfehlungen umfassen die Verwendung eines fl ssigen Mediums zur Kultivierung der Mykobakterien 1 2 3 Das BACTEC 9000MB System dient zum schnellen Nachweis von Mykobakterien in klinischen Proben BACTEC Myco F Lytic ist ein Kulturmedium aus Middlebrook 7H9 und Hirn Herz Infus Bouillon zur Isolierung von Mykobakterien aus Blutproben Zur Verbesserung des Wachstums und der Isolierung von Mykobakterien wurde das Kulturmedium mit verschiedenen Zus tzen modifiziert Diese Zus tze umfassen Ammoniumeisen Ill citrat als Eisenquelle f r spezifische St mme von Mykobakterien Saponin als Blutlysiermittel sowie spezifische Proteine und Zucker als N hrstoffe Jedes Fl schchen enth lt einen Sensor der die durch Metabolismus und Wachstum von Mikroorganismen hervorgerufene Abnahme der Sauerstoffkonzentration im Fl schchen nachweist Das BACTEC 9000MB Ger t berpr ft den Sensor auf eine Zunahme der Fluoreszenz die in einem proportionalen Verh ltnis zur Sauerstoffabnahme steht Eine positive Messung deutet auf das vermutliche Vorhandensein lebensf higer Mikroorganismen im betreffenden Fl schchen hin VERFAHRENSGRUNDLAGEN Das Myco F Lytic Kulturfl schchen dient zum schnellen Nachweis von Mykobakterien in Blut Blutproben werden entweder mit Hilfe einer Spritze oder durch Direktentnahme mit einem Kan len Schlauch
50. a l altro l utilizzo di un terreno liquido per la coltura dei micobatteri 1 2 3 Il sistema BACTEC 9000MB formulato per il rilevamento rapido di micobatteri da campioni clinici Il terreno di coltura BACTEC Myco F Lytic formulato con Brodo Middlebrook 7H9 e Infuso di cuore e cervello per il recupero di micobatteri da campioni di sangue Vi sono state apportate modifiche specifiche 11 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 12 allo scopo di potenziare la crescita e l isolamento dei micobatteri Tali modifiche includono citrato ferrico di ammonio come sorgente di ferro per ceppi specifici di micobatteri l aggiunta di saponina come agente per la lisi ematica e l aggiunta di proteine specifiche e di zuccheri allo scopo di fornire i supple menti nutritivi Ogni flacone contiene un sensore capace di rilevare il calo della concentrazione di ossigeno presente nel flacone fenomeno dovuto al metabolismo e alla crescita dei microrganismi Lo strumento BACTEC 9000MB tiene sotto controllo l aumento di fluorescenza del sensore che diretta mente proporzionale al calo di ossigeno Una lettura positiva indica la presenza presunta di microrganismi vivi nel flacone PRINCIPI DEL PROCEDIMENTO Il flacone di coltura BACTEC Myco F Lytic formulato per il rilevamento rapido di micobatteri da campioni ematici I campioni di sangue vengono inoculati nel flacone BACTEC Myco F Lytic mediante siringa o prelievo diretto con ago e cannula Il flacone viene posto
51. abili per la sicurezza o il controllo delle infezioni A secon da della necessit spegnere o modificare le impostazioni delle unit per la gestione dell aria che servono la zona contaminata Non ritornare nella zona fino a quando tutti gli eventuali aerosol non si siano depositati o siano stati eliminati da un adeguata ventilazione Notificare la Becton Dickinson and com pany rivolgendosi al rappresentante di zona Il CDC ha pubblicato linee guida da seguire in caso di contaminazione micobatterica accidentale dovuta alla rottura delle provette di coltura o delle sospensioni in brodo 5 6 7 ISTRUZIONI PER LA CONSERVAZIONE Conservare a 2 25 C in luogo asciutto e al riparo da luce solare diretta 12 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 13 RACCOLTA DEI CAMPIONI NOTA Prima di usare il terreno si raccomanda di rivedere la procedura a seguito con il personale responsabile in modo da assicurare l utilizzo di tecniche di raccolta appropriate come descritto in questa sezione Il campione deve essere raccolto con tecnica sterile per ridurre il rischio di contaminazione Il volume di sangue per la coltura compreso tra 1 0 mL e 5 0 mL Si raccomanda di inoculare i campioni direttamente al capezzale In genere per prelevare il campione si usano le siringhe con puntali LUER LOK A seconda del caso si possono usare un porta aghi VACUTAINER e un set di raccolta del sangue VACUTAINER un set di raccolta del sangue VACUTAINER SAFETY LOK o u
52. appropriato filtro o compressa attraverso il tampone d alcol e il setto L ago va rimosso non appena la pressione diminuisce e prima di effettuare il prelievo del flacone per la subcoltura l inserimento e la rimozione dell ago devono essere eseguiti con un movimento lineare senza alcuna torsione che potrebbe danneggiare permanente mente il setto Non ritappare l ago Eliminare aghi e siringhe in un contenitore per rifiuti a rischio biologico adatto per oggetti appuntiti CONTROLLO DI QUALIT I Certificati del Controllo di Qualit vengono forniti con ciascuna confezione di terreno Si raccomanda di testare ogni nuova partita o lotto di terreno BACTEC Myco F Lytic con gli organismi ATCC per il controllo di qualit identificati nella tabella a seguito come controllo positivo e con un flacone non inoculato come controllo negativo Organismo Tempo per rilevazione positivit giorni Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 da8al Mycobacterium kansasii ATCC 12478 da3a 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 dala 3 I flaconi positivi devono essere inoculati con la diluizione 1 100 di una sospensione al McFarland N 1 fatta crescere su un terreno solido Inoculare il flacone con 0 1 mL della coltura diluita Questo flacone deve quindi essere registrato ed analizzato nello strumento insieme ad un controllo non inocu lato Il flacone inoculato deve venir identificato come positivo dallo strumento entro il periodo di protocollo Il contr
53. ara la toma de sangre del paciente tambi n puede utilizarse un tubo VACUTAINER de tap n amarillo que contenga SPS El tubo deber ser transportado al laboratorio lo m s rapidamente posible para transferir la muestra a un frasco de cultivo BACTEC PROCEDIMIENTO Materiales suministrados Frascos de cultivo BACTEC Myco F Lytic Materiales necesarios pero no suministrados Camara de seguridad biol gica autoclave unidad de ventilaci n desinfectante micobacteriano alcohol isopropilico al 70 organismos para el control de calidad Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 y Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 microscopio y materiales para la tinci n de portaobjetos y la realizaci n de subcultivos de los frascos PRECAUCION Los frascos BACTEC Myco F Lytic deben utilizarse con la versi n 3 6 de software del instrumento o con versiones superiores a sta Inoculaci n de los frascos de cultivo BACTEC Myco F Lytic 1 Quite el tap n a presi n del frasco BACTEC e inspeccione el frasco para ver si hay roturas contaminaci n turbidez excesiva o tapones hinchados o hundidos NO UTILIZAR si se observa cualquier defecto 2 Etiquete el frasco de cultivo con la informaci n de identificaci n de la muestra y marque en la etiqueta del frasco una linea de graduaci n corre spondiente al nivel de llenado del medio 3 Antes de inocular limpie el tap n con alcohol Inyecte as pticamente con una jeringa o mediante u
54. as kan indeholde en eller flere mycobakterierarter og eller andre ikke mycobakteriearter Hvis der er hurtigtvoksende organismer til stede kan de forhindre at langsomtvoksende mycobakterier bliver detekteret Videredyrkning og yderligere procedurer er p kraevede Der er ikke eftervist konsistent mikroskopisk morfologi i BACTEC Myco F Lytic Man f r den bedste opsamling af isolaterne hvis hvert glas tils ttes 1 5 mL blod Brug af st rre eller mindre m ngder kan p virke opsamlingen detektionstiden og eller specificiteten negativt Forekomsten af falske positiver vil h jst sandsynligt stige n r blodvolumenet er over 5 mL Blod kan indeholde antimikrobielle stoffer eller andre inhibitorer der kan forsinke eller forhindre vaeksten af mikroorganismer 20 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 21 BACTEC Myco F Lytic glas inkuberes ved 37 C hvilket potentielt udelukker opsamlingen af mycobakterier der kraever andre inkuberingstemperaturer f eks M marinum M ulcerans og M haemophilum Opsamlingen af s danne organismer kraever yderligere dyrkningsmetoder Folgende isolater blev domt positive af BACTEC 9000MB instrumentet ved brug af BACTEC Myco F Lytic medium ved de interne studier og eller de kliniske undersogelser M tuberculosis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M mal moense Ved de interne studier fremviste M xenopi og M szulgai util
55. bb detektion av mykobakterier i blod Blodprover ympas p BACTEC Myco F Lytic flaskan antin gen med hj lp av en injektionsspruta eller genom direkt dragning av prov med hj lp av n l och slang Flaskan s tts in i BACTEC 9000MB systemet inku beras kontinuerligt vid 37 C och skakas var tionde minut f r maximal p visningsm jlighet I varje flaska finns en sensor som kan detektera minskningar i koncentrationen l st oxygen i flaskan som resultat av mikroorganismernas metabolism och tillv xt Sensorn avl ses av BACTEC 9000MB systemet var tionde minut Via analys av graden av minskad oxygenhalt m tt s som en fluorescens kning kan BACTEC instrumentet ur fluorescensserien fastst lla om flaskan r positiv En positiv avl sning indikerar att flaskan kan inneh lla viabla mikroorganismer Detektionsm jligheten begr nsas till s dana mikroorganismer som kan v xa i mediet vid 37 C Detta medium r oselektivt varf r andra aeroba organismer inklusive j stsvampar andra svamparter och bakterier kan v xa i mediet och i s fall kan interferera med m jligheten f r p visning av mykobakterier Odlingsflaskor som fortfarande r negati va efter minst 42 dagar och som inte visar n gra tecken p positiv odling vid okul rbesiktning avl gsnas fr n instrumentet och steriliseras innan de bortskaffas 25 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 26 REAGENSER Varje BACTEC Myco F Lytic odlingsflaska inneh ller f ljande aktiva best ndsdelar
56. beitsmaterial BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen Ben tigtes jedoch nicht mitgeliefertes Arbeitsmaterial Biologische Sicherheitswerkbank Autoklav Entl ftungsvorrichtung mykobakterielles Desinfektionsmittel 70 iger Isopropylalkohol Qualit tskontrollorganismen Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 und Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 Mikroskop und das zur Objekttr gerf rbung und Subkultivierung der Fl schchen ben tigte Material VORSICHT BACTEC Myco F Lytic Fl schchen ausschlie lich mit Software 3 6 oder einer neueren Version verwenden Inokulation der BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen 1 Den Abri deckel auf dem BACTEC Fl schchen entfernen und das Fl schchen auf Spr nge undichte Stellen Kontamination starke Tr bung W lbung oder Einbeulung des St psels berpr fen Defekte Fl schchen NICHT VERWENDEN Die Probe auf dem Kulturfl schchen identifizieren und die F llh he des Mediums auf dem Fl schchenetikett markieren Vor dem Inokulieren das Septum mit Alkohol abtupfen Mit Hilfe der Einteilungen auf dem Fl schchenetikett pro Fl schchen 1 5 mL der Probe aseptisch injizieren oder direkt entnehmen siehe Verfahrensbeschrankungen Inokulierte Fl schchen sollten so schnell wie m glich zur Inkubation und Kontrolle in das BACTEC 9000MB Ger t gestellt werden 4 Im Ger t befindliche Fl schchen werden f r die Gesamtdauer der Testprotokollaufnahme automatisch getest
57. cobacterium intracellulare ATCC 13950 8 bis 16 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 3 bis 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1 bis 3 Positive Fl schchen sollten mit einer 1 100 Verd nnung einer auf einem Festmedium kultivierten McFarland Suspension Nr 1 inokuliert werden Die Fl schchen mit 0 1 mL verd nnter Kultur inokulieren Diese Fl schchen und ein uninokuliertes Kontrollfl schchen sollten dann zum Testen ins Ger t gestellt werden Das inokulierte Fl schchen sollte vom Ger t innerhalb des Testprotokolls als positiv identifiziert werden Das negative Kontrollfl schchen mu negativ bleiben Wenn die erwarteten Qualit tskontrollergebnisse nicht erzielt werden das Medium nicht verwenden und den zust ndigen Becton Dickinson Vertreter verst ndigen Informationen bez glich der Qualit tskontrolle f r das BACTEC System sind den Bedienungsanleitung MA 0092 zu entnehmen DOKUMENTATION DER TESTERGEBNISSE Eine Ger te positive Probe kann durch einen s urefesten Ausstrich oder durch Gramf rbung best tigt werden Ein positives Ergebnis weist auf die vermut liche Anwesenheit von lebensf higen Mikroorganismen im Fl schchen hin Bei positiver S urefestigkeitsf rbung eine Subkultur auf festem Medium anlegen und wie folgt dokumentieren Ger te positiv S urefestigkeitsf rbung positiv Identifizierung ausstehend Wenn Mikroorganismen vorliegen die nicht zu den s urefesten Bakterien geh ren eine Subkultur auf festem Medium anle
58. condaria dei flaconi ATTENZIONE I flaconi BACTEC Myco F Lytic devono essere utilizzati con la versione software 3 6 o superiore dello strumento Inoculo dei flaconi di coltura BACTEC Myco F Lytic 1 Togliere il tappo dal flacone BACTEC e assicurarsi che il flacone non sia incrinato contaminato troppo torbido o che non abbia perdite e che il setto non sia rigonfio o incavato NON USARE il flacone se viene notato qualsiasi difetto 2 Apporre sul flacone un etichetta d identificazione ed annotarvi il livello di riempimento di terreno 3 Prima di inoculare pulire il setto con alcol Mediante siringa o con prelievo diretto iniettare nel flacone in modo asettico 1 5 mL di campione usando come riferimento le tacche graduate sul flacone vedere la sezione sui Limiti del Procedimento I flaconi inoculati devono essere introdotti nello strumento BACTEC 9000MB al pi presto per l incubazione e il controllo 4 flaconi dentro allo strumento saranno analizzati automaticamente per tutta la durata del protocollo del test I flaconi positivi saranno identificati dal sistema fluorescente BACTEC vedere il Manuale d uso BACTEC MA 0092 Il sensore dentro il flacone non apparir diverso a seconda che i flaconi siano positivi o negativi ma lo strumento fluorescente BACTEC sar in grado di determinare la differenza di fluorescenza del sensore 5 flaconi positivi vanno sottoposti a coltura secondaria e si deve allestire un vetrino apposito Tutti i f
59. cterium avium complex MAC er genopblusset Fra 1985 til 1992 steg antallet af rapporterede MTB tilf lde med 18 Mellem 1981 og 1987 har overv gning af AIDS patienter vist at 5 5 af AIDS patienterne havde dis seminerede ikke tuberkulose mycobakterieinfektioner f eks MAC I 1990 havde de voksende tilfaelde af disseminerede ikke tuberkulose mycobak terieinfektioner resulteret i en kumulativ forekomst p 7 6 Centrene for sygdomskontrol og forebyggelse CDC har anbefalet at der skal gores alt for at laboratorierne kan benytte de hurtigste metoder til at diagnosticere mycobakterier Disse anbefalinger omfatter brugen af flydende medier til dyrkning af mycobakterier 1 2 3 BACTEC 9000MB systemet er udviklet til hurtig detektering af mycobakterier i kliniske prover BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmediet er en Middlebrook 7H9 og hjerne hjerte infusionsbouillon til opsamling af mycobakterier fra blodprover Der er foretaget specifikke modifikationer for at foroge vaekst og opsamling af mycobakterier Blandt disse modifikationer er ferroammoniumcitrat der fungerer som jernkilde for specifikke stammer af mycobakterier saponin der er et blodlyserende middel og specifikke proteiner og sukkerstoffer der fungerer som naeringssupplement Hvert dyrkningsglas indeholder en sensor der kan detektere det fald i iltkoncentrationen i glasset der skyldes mikroorganismers stofskifte og vaekst Sensoren overv ges af BACTEC 9000MB systemet for at detektere en
60. d besonders wenn das Fl schchen umgedreht wird Um potentielle Sickerverluste bei der Inokulation von Proben in die Kulturfl schchen mit Hilfe von Spritzen so weit wie m glich auszuschlie en sollten Spritzen mit LUER LOK Kegel verwendet werden Bei der Inokulation sollte mit einer Hand gearbeitet und ein geeigneter Fl schchenhalter verwendet werden um eine versehentliche Nadelstichverletzung zu vermeiden Vor der Entsorgung m ssen alle inokulierten BACTEC Myco F Lytic Fl schchen im Autoklaven sterilisiert werden Positive Kulturfl schchen zur Anlage von Subkulturen oder f r F rbungen usw Vor der Probenentnahme mu Gas abgelassen werden das sich h ufig als Folge mikrobiellen Stoffwechsels ansammelt Die Probenentnahme sollte in einer biologischen Sicherheitswerkbank durchgef hrt werden und Schutzkleidung einschlie lich Handschuhen und Gesichtsmaske sollte getragen werden N here Einzelheiten zur Subkultivierung sind dem Abschnitt Verfahren zu entnehmen UNDICHTE ODER ZERBROCHENE FL SCHCHEN ACHTUNG Die Fl schchen m ssen vorsichtig gehandhabt werden da undichte oder zerbrochene inokulierte Fl schchen ein Aerosol mit Mykobakterien einschlie lich M tuberculosis und anderer Bakterien freisetzen k nnen Wenn ein inokuliertes Fl schchen w hrend der Entnahme oder des Transports ausl uft oder versehentlich zerbrochen wird die in Ihrem Labor gel tenden Verfahrensrichtlinien f r den Umgang mit versch ttetem mykobakterie
61. de contener sustancias antimicrobianas u otros inhibidores que pueden retrasar o impedir el crecimiento de microorganismos Los frascos BACTEC Myco F Lytic se incuban a 37 C para excluir la recuperaci n potencial de micobacterias que requieran otras temperaturas de incubaci n como por ejemplo M marinum M ulcerans M haemophilum La recuperaci n de dichos organismos requiere m todos de cultivo adi cionales Los aislados siguientes fueron detectados como positivos en el instrumento BACTEC 9000MB utilizando el medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic durante los estudios internos y o estudios cl nicos M tuberculosis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M malmoense En los estudios internos M xenopi y M szulgai evidenciaron una recuperaci n insatis factoria con el medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic RESULTADOS ESPERADOS En la figura siguiente se muestra la distribuci n de las frecuencias de los tiempos de recuperaci n en muestras de sangre que han sido positivas por medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic en estudios cl nicos 8 MOTT MAC I vrs Ninero de aislados N oO fh I ON 2 6 7 11 13 15 17 19 21 Tiempo de recuperaci das 17 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 18 CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO El medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic fue evaluado con el instrumento BACTEC 90
62. dgangspunkt for indsamlingen af proven Undertrykket i flasken vil almindeligvis udsuge 5 mL s brugeren skal holde oje med det opsamlede volumen vha 5 mL stregen p dyrkningsglassets etikette N r de onskede 1 5 mL er blevet udtaget skal blodstrommen afbrydes ved af boje slangen og fjerne n len fra BACTEC glasset BACTEC glasset skal transporteres til laboratoriet s hurtigt som muligt og s ttes i BACTEC instrumentet Et VACUTAINER ror med gul top der indehoplder SPS kan ogs bruges til at indsamle blodproven fra patienten Roret skal transporteres til laboratoriet s hurtigt som muligt s blodet kan overfores til BACTEC dyrkningsglasset PROCEDURE Medfolgende materialer BACTEC Myco F Lytic dyrkningsglas 19 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 20 Nodvendige materialer der ikke medfolger Biologisk sikkerhedsskab autoklave aftraek desinfektionsmiddel til mycobakterier 70 isopropylalkohol kvalitetskontrolorganismer Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 og Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 mikroskop og materialer til farvning af objektglas og glas til videredyrkning FORSIGTIG BACTEC Myco F Lytic glas skal bruges sammen med software version 3 6 eller nyere Inokulering af BACTEC Myco F Lytic dyrkningsglas 1 Fjern h tten p BACTEC glasset og kontroll r dyrkningsglasset for revner l kage kontaminering uklarheder og bulnende eller indsunken mem bran MA IKKE BRUGES hvis
63. e cultura Myco F Lytic BACTEC e dois 5 foram isolados apenas no meio de cultura BACTEC 13A Durante a avalia o clinica um total de 28 frascos Myco F Lytic BACTEC foram cheios com um volume excessivo entre 6 e 20 mL e n o foram inclu dos neste estudo uma vez que apresentavam um volume superior ao volume de reple o m ximo n o respeitavam os crit rios de selec o Destes 28 frascos Myco F Lytic BACTEC 16 57 foram identificados como falsos positivos Das 284 amostras de sangue testadas no estudo cl nico um frasco Myco F Lytic BACTEC 0 4 foi determinado como sendo falso positivo positivo no instrumento negativo no esfrega o e ou na repicagem Dos 38 frascos Myco F Lytic BACTEC positivos no instrumento 1 2 6 foram determinados como sendo falsos positivos A taxa de falsos negativos negativos no instrumento positivos no esfrega o e ou na repicagem foi de 0 baseada nas repicagens terminais de gt 50 dos frascos negativos Durante esta avalia o a taxa de contamina o foi de 0 9 24 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 25 QUADRO 1 RESUMO DA DETECGAO DE ISOLADOS NO MEIO DE CULTURA MYCO F LYTIC DURANTE OS ENSAIOS CL NICOS N mero Total de Meio L tico Meio 13A Microganismo Isolados Myco F Apenas Apenas Ambos Todas as Micobact rias Patog nicas Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Total 39 5 2 32 BIBLIOGRAFIA Consulte a Refere
64. e omr de Vend ikke tilbage til omr det for alle potentielt skadelige aerosoler har lagt sig eller er blevet fjernet vha passende ventilation Becton Dickinson og Company skal orienteres ved at ringe p 1 800 544 7434 i USA eller ved at kontakte den lokale Becton Dickinson repraesentant CDC har udsendt retningslinier for hvordan man skal h ndtere mycobakteriel kontaminering der skyldes sk rede dyrkningsglas eller itug ede bouillonoplosninger 56 7 OPBEVARINGSINSTRUKTIONER Opbevares tort ved 2 25 C og ikke i direkte sollys INDSAMLING AF PROVER BEM RK Det anbefales at det rette personale vurderer denne procedure inden mediet anvendes for at sikre at der bliver brugt de rette teknikker til proveindsamling som beskrevet i dette afsnit Proverne skal indsamles vha sterile teknikker for at reducere risikoen for kontaminering Man kan dyrke blodvolumener p 1 0 til 5 0 mL Det anbe fales at proven inokuleres med det samme Det er mest almindeligt at bruge en spr jte med LUER LOK spids til at udtage proven Man kan bruge en VACUTAINER kanyleholder og et VACUTAINER blodopsamlingss t et VACUTAINER SAFETY LOK blodopsamlingss t eller et andet blodopsamlingss t med vinger Hvis man bruger en kanyle og en slange direkte provetagning skal man omhyggeligt se efter i hvilken retning blodstrommen g r n r man p begynder provetagningen Inden inokuleringen skal man notere p etiketten hvor meget medium der er i glasset s man har et u
65. e possible de microorganismes viables dans le flacon La d tection se limite aux microorganismes pouvant se d velopper dans le 4 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 5 milieu 37 C Le milieu n est pas s lectif et permet la croissance d autres organismes a robies y compris les levures les champignons et les bact ries lesquels peuvent s ils sont pr sents affecter la mise en vidence des mycobact ries Les flacons de culture qui restent n gatifs pendant 42 jours et qui ne pr sentent aucun signe visible de positivit sont retir s de l appareil et st rilis s avant d tre jet s REACTIFS Avant analyse chaque flacon de culture BACTEC Myco F Lytic contient les r actifs suivants Les pourcentages correspondent au poids rapport au volume Liste des composants Edu trat d ete t titres edt Dude Lento LEE a de RA d Bouillon Middlebrook 7H9 sans sel de phosphate Bouillon coeur cervelle dea hs comedor rad St Hydrolysat de Cas ine s ae NERE o ec Rer NS OS Rn RR RR gg Suppl ment H Inositol Glyc rol Polyan tholsulfonate de sodium Tween 80 Pyridoxal HCl Citrate d ammonium ferriqu RE EE CAREER ECTS Phosphate de potassium SAPONE ok arire ones enn en RN A Und Sins RS tr otras Agent anti mOUsse vesc ia i Ce milieu BACTEC est fourni enrichi en CO et O Il est possible que la composition ait t modifi e pour s adapter aux
66. e ser observada Si se encuentra que un frasco inoculado est mal sellado o sufre una rotura accidental durante la recogida o el transporte utilice el procedimiento establecido de su laboratorio para los derrames de micobacterias Como m nimo deben seguirse las Precauciones universales Se deben desechar los frascos de manera apropiada En los casos raros de encontrar una fuga del contenido de un frasco en el instrumento propiamente dicho o de producirse la rotura accidental de un frasco apague el instrumento inmediatamente Desaloje el rea afectada Contacte al responsable o responsables de la seguridad o del control de infec ciones de su laboratorio Determine si es necesario apagar o modificar los par metros de las unidades de conducci n de aire que sirven el rea afectada No vuelva al rea hasta que todo aerosol potencial se ha depositado o ha sido eliminado por la ventilaci n apropiada Se debe notificar a Becton Dickinson and Company contactando al representante apropiado de Becton Dickinson en su area Los CDC han publicado pautas para la manipulaci n correcta de la contaminaci n accidental por micobacterias producida por la rotura de tubos de medio de cultivo o de suspensiones de caldo 5 6 7 INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Conservar entre 2 25 C en un lugar seco resguardado de la luz directa del sol EXTRACCION DE MUESTRAS NOTA Se recomienda que este procedimiento sea repasado con el personal correspondiente antes d
67. e utilizar el medio de cultivo con el fin de asegurar el uso de t cnicas de recogida de muestras adecuadas como las descritas en esta secci n La muestra debe ser recogida utilizando una t cnica est ril para reducir la posibilidad de contaminaci n Los limites del volumen de sangre que puede ser cultivado son de 1 0 mL a 5 0 mL Se recomienda hacer la inoculaci n de la muestra en la habitaci n del paciente Para la toma de la muestra general mente se utiliza una jeringa con punta LUER LOK Si es necesario se puede utilizar un juego de soporte de aguja VACUTAINER y un juego de toma de san gre VACUTAINER juego de toma de sangre VACUTAINER SAFETY LOK u otro juego de tubos de mariposa Si se utiliza una aguja y tubo toma directa observe cuidadosamente la direcci n del flujo de sangre al empezar la toma de la muestra Antes de hacer la inoculaci n anote el volumen de llenado del medio en la etiqueta con un boligrafo o rotulador para indicar el punto de comienzo para la recogida de la muestra El espacio vacio del frasco habitual mente excede los 5 mL de forma que el usuario deber vigilar el volumen extraido mediante las marcas graduadas de 5 mL en la etiqueta del frasco Una vez extraidos los 1 5 mL de sangre deseados se deber detener el flujo poniendo una pinza en el tubo y quitando la aguja del frasco BACTEC El frasco BACTEC deber ser transportado al laboratorio lo m s rapidamente posible e introducido en el instrumento BACTEC P
68. elbart st n gas av Utrym det ber rda omr det Kontakta s kerhets och infektionskontrollansvariga p din arbetsplats Avg r om det r n dv ndigt att sl av eller modifiera inst llningarna p den ventilationsutrustning som f rs rjer det ber rda omr det terv nd ej till omr det f rr n all eventuell aerosol har sjunkit eller avl gsnats genom l mplig ventilation Becton Dickinson and Company tel 1 800 544 7434 i USA eller lokal Becton Dickinson represen tant b r informeras CDC har utf rdat riktlinjer f r adekvata tg rder vid accidentell mykobakteriekontamination orsakad av skadade odlingsflaskor eller buljongsuspensioner 5 6 7 F RVARINGSANVISNINGAR F rvaras vid 2 25 C p torr plats och skyddade fran direkt solljus PROVTAGNING OBS Det rekommenderas att detta f rfarande genomg s med ber rd personal innan mediet tas i bruk s att korrekt provtagningsteknik enligt beskrivning i detta avsnitt s kerst lles Provtagning m ste ske med steril teknik f r att minska risken f r kontamination Blodvolymer mellan 1 0 och 5 0 mL kan odlas Det rekommenderas att provet ympas p odlingsflaskorna vid s ngkanten Oftast anv nds en spruta med en LUER LOK kona f r provtagning Om l mpligt kan en VACUTAINER n lh llare och VACUTAINER blodprovstagningsset VACUTAINER SAFETY LOK blodprovstagningsset eller annan typ av butterfly set anv ndas Vid anv ndning av n l och slangset provet dras direkt skall blod
69. en PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 10 Subkultivierung von Fl schchen Das Anlegen von Subkulturen mu in einer biologischen Sicherheitswerkbank durchgef hrt werden und Schutzkleidung einschlie lich Handschuhen und Gesichtsmaske sollte getragen werden Die Fl schchen vor der Subkultivierung aufrecht stellen und das Septum dabei mit einem Alkoholtupfer abdecken Um berdruck im Fl schchen abzulassen der sich als Folge des Wachstums der kontaminierenden Mikroorganismen bilden kann Alkoholtupfer und Septum mit einer sterilen Nadel der US St rke 25 oder d nner mit einem passenden Filter oder kleiner Kompresse durchstechen Nach Entweichen des berdrucks und vor der Probenentnahme f r Subkulturen sollte die Nadel entfernt werden Das Einstechen und Zur ckziehen der Nadel sollte mit einer geradlinigen Bewegung ohne Drehungen ausgef hrt werden da diese das Septum permanent sch digen k nnen Die Nadel nicht wieder mit der Kappe versehen Nadeln und Spritzen in einen punktionssicheren Beh lter f r gef hrliche Bioabf lle verwerfen QUALIT TSKONTROLLE Qualit tskontrollzertifikate werden mit jeder Packung mit Medien geliefert Jede neue Lieferung oder Charge von BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen sollten mit den in der nachstehenden Tabelle angegebenen ATCC Kontrollorganismen als positive Kontrolle und einem nicht inokulierten Fl schchen als negative Kontrolle getestet werden Organismus Tage bis zum Nachweis My
70. entant local de Becton Dickinson Des directives pour le traitement ad quat d une contamination accidentelle avec des mycobact ries suite au bris d un tube de culture ou de bouillon ont t mises par les CDC 5 6 7 CONSEILS DE STOCKAGE Conserver 2 25 C dans un endroit sec et l abri de la lumi re solaire directe PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS NOTA il est conseill de r p ter cette proc dure avec le personnel comp tent avant de l utiliser sur le milieu afin d assurer que les techniques de pr l vement des chantillons appropri es d crites dans cette section sont correctement appliqu es Les chantillons doivent tre pr lev s de fa on aseptique afin de r duire les risques de contamination Le volume de sang convenant une h moculture varie de 1 0 mL 5 0 mL Il est conseill d inoculer l chantillon au chevet du malade Le plus souvent une seringue munie d un embout LUER LOK est util is e pour pr lever l chantillon Si appropri un ensemble porte aiguille VACUTAINER et une trousse de pr l vement sanguin VACUTAINER une trousse de pr l vement sanguin VACUTAINER SAFETY LOK ou une autre tubulure du type butterfly peuvent tre utilis s Si on utilise une aiguille et une tubulure pr l vement direct il faut observer soigneusement la direction de l coulement du sang au d but du pr l vement Avant l inoculation le volume occup par le milieu doit tre not sur l tiquette avec un stylo ou un marq
71. ento qualitativo de micobact rias a partir de amostras de sangue RESUMO E EXPLICAC O DO TESTE Desde os meados dos anos 80 e da disseminag o da epidemia de SIDA a incid ncia de septicemia provocada por micobact rias oportunistas tem aumen tado O Mycobacterium tuberculosis MTB e outras micobact rias para al m da tuberculose MOTT especialmente o complexo do Mycobacterium avium t m vindo a ressurgir De 1985 para 1992 o numero de casos de MTB notificados aumentou 18 Entre 1981 e 1987 a vigil ncia dos casos de 21 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 22 SIDA indicou que 5 5 dos doentes com SIDA apresentavam infec es micobacterianas n o tuberculosas disseminadas por ex MAC Em 1990 o aumen to dos casos de infec es micobacterianas n o tuberculosas disseminadas resultou numa incid ncia cumulativa de 7 6 O Centro de Controlo e Preveng o de Doengas Centers for Disease Control and Prevention CDC recomendou aos laborat rios que fossem efectuados todos os esfor os no sentido de utilizarem os m todos mais r pidos disponiveis para o teste de diagn stico de micobact rias Estas recomenda es incluem a utiliza o de um meio liquido e de um meio s lido para a cultura de micobact rias 1 2 3 O Sistema 9000MB BACTEC foi concebido para a detec o r pida de micobact rias em amostras cl nicas O meio de Cultura Myco F Lytic BACTEC uma formula o de meio liquido de Middlebrook 7H9 e de Infus o C rebro
72. er cui bisogna monitorare il volume di riempimento Si raccomandano le pratiche di sicurezza biologica di Livello 2 e l utilizzo di tutte le apparecchiature specifiche quando si preparano le colorazioni acido resistenti e si esegue la coltura dei campioni clinici Per procedure che comportano la possibilit di propagazione e di manipolazione di Mycobacterium tuberculosis o di Mycobacterium bovis cresciuti in coltura si richiedono le pratiche di sicurezza biologica di Livello 3 e tutte le apparec chiature idonee 5 6 7 I flaconi vanno esaminati prima dell uso per assicurarsi che non siano contaminati o torbidi e il setto non sia rigonfio o incavato o che non ci siano perdite NON USARE un flacone se appare contaminato danneggiato o se ha perdite La contaminazione del flacone pu non essere immediatamente visibile Un flacone contaminato pu contenere pressione positiva Se si usa un flacone contaminato per il prelievo diretto gas o terreni di coltura cont aminati possono rifluire nella vena del paziente In rare occasioni il collo del flacone di vetro potrebbe essere incrinato e rompersi al momento della rimozione del tappo o durante la manipolazione Inoltre in occasioni altrettanto rare un flacone potrebbe essere stato sigillato in modo imperfetto In entrambi i casi il contenuto del flacone pu gocciolare o fuoriuscire specialmente se il flacone viene capovolto Per ridurre al minimo il rischio di perdite durante l inoculo del campione med
73. er leur d tection Des repiquages et des proc dures suppl mentaires sont n cessaires La constance de l aspect morphologique microscopique dans BACTEC Myco F Lytic n a pas t tablie Une mise en vidence optimale des isolats sera accomplie en ajoutant 1 5 mL de sang dans chaque flacon L utilisation de volumes inf rieurs ou sup rieurs peut avoir une influence d favorable sur la mise en vidence les temps de d tection et ou la sp cificit De faux positifs ont plus de chance d tre obtenus lorsque le volume de sang est sup rieur 5 mL Le sang peut contenir des agents antimicrobiens ou d autres inhibiteurs qui peuvent ralentir ou emp cher la croissance des microorganismes Les flacons BACTEC Myco F Lytic sont incub s 37 C ce qui exclut potentiellement la mise en vidence de mycobact ries n cessitant des temp ratures d incubation diff rentes soit M marinum M ulcerans M haemophilum La mise en vidence de ces organismes demande des m thodes de culture sup pl mentaires Les isolats suivants ont t reconnus comme positifs par l appareil BACTEC 9000MB sur milieu BACTEC Myco F Lytic lors d tudes internes et ou d essais cliniques M tuberculosis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M malmoense Lors d tudes internes le taux de mise en vidence de M xenopi et M szulgai n tait pas satisfaisant sur le milieu de cul
74. erier til stede skal disse videredyrkes p fast medium og rapporteres som Instrument positive syrefast negative afventer identifikation Hvis der ikke er mikroorganismer i udstrygningerne skal de videredyrkes p fast medium og man skal inden for 5 timer efter fjernelsen s tte glasset tilbage i instrumentet som et igangv rende negativt glas og lade det gennemf re undersogelsesprotokollen Intet rapport rbart resultat Foretag videredyrkninger fra BACTEC Myco F Lytic glasset for at identificere organismerne og foretage en folsomhedsundersogelse PROCEDURENS BEGR ENSNINGER Detektionen af mycobakteriearter i blodprover afhaenger af antallet af organismer i proven de anvendte metoder til indsamling af proverne og patientfaktorer s som symptomer og tidligere behandling Mycobakteriers syrefasthed kan variere alt afhaengig af stammen kulturens alder og andre variabler Man skal vaere omhyggelig med at forhindre at proven kontamineres under provetagningen og inokuleringen i BACTEC glasset Et kontamineret glas vil give en positiv afl sning p instrumentet men vil ikke angive et klinisk relevant resultat En s dan identifikation skal foretages af brugeren p grundlag af faktorer s som resultatet af farvning typen af den isolerede organisme tilstedevaerelsen af den samme organisme i flere kulturer syg domsforlobet etc BACTEC Myco F Lytic glas er ikke selektive og vil n re v ksten af andre mikroorganismer end mycobakterier Positive gl
75. et Positive Fl schchen werden vom BACTEC Ger t der Fluoreszenz Serie identifiziert siehe BACTEC Bedienungsanleitung MA 0092 Der Sensor im Fl schchen wird sich zwar in positiven und negativen Fl schchen nicht sichtbar ver ndern doch das BACTEC Fluoreszenzsystem kann Sensor Fluoreszenzver nderungen feststellen 5 Von allen positiven Kulturen sollte eine Subkultur angelegt und ein entsprechender Ausstrich angefertigt werden Alle positiven Fl schchen m ssen in bereinstimmung mit den Vorschriften f r Biosicherheitsstufe III gehandhabt werden Verarbeitung eines Ger te positiven Fl schchens a Das Fl schchen aus dem Ger t nehmen und in bereinstimmung mit den Vorschriften f r Biosicherheitsstufe III an den Arbeitsplatz trans portieren b Fl schchen kippen um den Inhalt zu mischen c Das Fl schchen in einer biologischen Sicherheitswerkbank entl ften um den berdruck abzulassen d Dem Fl schchen eine kleine Probenmenge etwa 0 1 mL zur Anfertigung von F rbungen s urefester Ausstrich oder Gram F rbung entnehmen e Ausstrich pr fen und nach der Auswertung einen vorl ufigen Bericht erstatten Falls am Ende der sechsw chigen Inkubationsdauer ein Ger te negatives Fl schchen positiv erscheint z B bei W lbung des Septums oder sehr dunkel gewordenem Blut sollte eine Subkultur angelegt ein s urefester Ausstrich angefertigt und das Fl schchen bei positivem F rbungsergebnis als vermut lich positiv behandelt werd
76. fl dets riktning noga observeras i starten av provtagningen F re inokulering skall medi ets volym markeras p etiketten med en penna eller tuschpenna s att man kan se var provvolymen kommer att starta Undertrycket i flaskan verstiger vanligen 5 mL varf r anv ndaren b r kontrollera den insamlade volymen med hj lp av 5 mL graderingen p flaskans etikett N r de nskade 1 5 mL prov har dragits stoppas fl det genom att slangen kl ms av och n len avl gsnas fr n BACTEC flaskan BACTEC flaskan b r s snabbt som m jligt trans porteras till laboratoriet och s ttas in i BACTEC instrumentet Ett VACUTAINER r r med gult lock och SPS tillsats kan ocks anv ndas f r provtagning p patienten R ret skall i s fall s snabbt som m jligt transporteras till laboratoriet f r verf ring till en BACTEC odlingsflaska F RFARANDE Tillhandah llna material BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor 26 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 27 Material som kr vs men ej medf ljer Biologiskt s kerhetssk p autoklav ventilationsenhet mykobakteried dande desinfektionsmedel 70 ig iso propylalkohol organismer f r kvalitetskontroll Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 och Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 mikroskop och material f r f rgning av preparat och fortsatt odling fr n odlingsflaskorna OBS BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor m ste anv ndas med instrument med programvaruversi
77. gen und wie folgt dokumen tieren Ger te positiv S urefestigkeitsf rbung negativ Identifizierung ausstehend Wenn keine Mikroorganismen vorliegen eine Subkultur auf festem Medium anlegen das Fl schchen innerhalb von 5 Stunden nach der Entnahme als laufendes negatives Fl schchen in das Ger t zur ck stellen und das Testprotokoll bis zum Ende durchlaufen lassen Kein Ergebnis zu dokumentieren Von dem BACTEC Myco F Lytic Fl schchen Subkulturen zur Durchf hrung von Identifizierungs und Empfindlichkeitstests anlegen VERFAHRENSBESCHR NKUNGEN Der Nachweis mykobakterieller Spezies in Blutproben ist abh ngig von der Zahl der in der Probe vorliegenden Organismen der Methode der Probenentnahme von Patientenfaktoren wie z B dem Vorliegen von Symptomen und fr herer Therapie Mykobakterien k nnen sich in Abh ngigkeit vom jeweiligen Stamm dem Alter der Kultur und anderen Variablen in bezug auf die S urefestigkeit unterscheiden Eine Kontamination der Probe w hrend der Probenentnahme oder der Inokulation in das BACTEC Fl schchen mu vermieden werden Eine konta minierte Probe ergibt einen positiven Wert ohne klinische Relevanz Eine entsprechende Beurteilung mu vom Anwender auf der Basis von Faktoren wie z B Ergebnisse von F rbungen Art des isolierten Organismus Vorkommen desselben Organismus in mehreren Kulturen Patientenanamnese usw vorgenommen werden BACTEC Myco F Lytic Fl schchen sind nicht selektiv und unterst tzen sow
78. hazard container QUALITY CONTROL Quality Control Certificates are provided with each carton of media It is recommended that each new shipment or lot of BACTEC Myco F Lytic media be tested with the ATCC control organisms identified in the chart below as a positive control and an uninoculated vial as a negative control Organism Range of Time to detection days Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 8 to 16 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 3 to 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1to3 The positive vials should be inoculated using a 1 100 dilution of a McFarland 1 suspension grown on solid medium Inoculate the vial with 0 1 mL of the diluted culture The vials and an uninoculated control vial should be scanned into the instrument and tested The inoculated vial should be detected as positive by the instrument within the test protocol The negative control should remain negative If expected results for Quality Control are not obtained do not use the medium and contact Becton Dickinson Technical Services in the U S only 1 800 638 8663 or your local Becton Dickinson Representative for further assistance For information on quality control for the BACTEC System refer to the User s Manual MA 0092 Reporting of RESULTS An instrument positive vial may be confirmed by acid fast smear or Gram stain A positive result indicates the presumptive presence of viable microorgan isms in the vial If AFB smear positive subculture
79. hematolitico y la adici n de prote nas y az cares especificos para aportar suplementos nutritivos Cada frasco contiene un indicador que puede detectar descensos en la concentraci n de oxigeno en el frasco como resultado del metabolismo y crecimiento de microorganismos El indicador est controlado por el sistema BACTEC 9000MB para detectar el aumento de fluorescencia que es proporcional al descenso de oxigeno Un resultado positivo indica la presencia presunta de microorganismos viables den tro del frasco PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO El frasco de cultivo BACTEC Myco F Lytic esta disefiado para la detecci n r pida de micobacterias en la sangre Las muestras de sangre se inoculan en el frasco BACTEC Myco F Lytic utilizando una jeringa o por toma directa con una aguja y tubo El frasco es introducido en el sistema BACTEC 9000MB e incubado a una temperatura constante de 37 C con agitaci n una vez cada diez minutos para obtener una recuperaci n m xima Cada frasco contiene un indicador que puede detectar descensos en la concentraci n de oxigeno en el frasco como resultado del metabolismo y crecimiento de microorganis mos El indicador es controlado por el sistema BACTEC 9000MB cada diez minutos El an lisis del nivel de disminuci n de oxigeno medida por el aumento en la fluorescencia permite al instrumento BACTEC de la serie fluorescente determinar si el frasco es positivo Un resultado positivo indica la presencia presunta de microorganismos
80. hindre at man risikerer at stikke sig p kanylen Sterilis r alle inokulerede BACTEC Myco F Lytic dyrkningsglas vha autoklavering inden de smides ud Inden man udtager prover fra positive dyrkningsglas til videredyrkning eller farvning etc er det nodvendigt at frigore de luftarter der ofte dannes ved mikroorganismernes stofskifte Proveudtagning skal foretages i et biologisk sikkerhedsskab og man skal baere passende beskyttelsestoj inkl handsker og maske Se procedureafsnittet for at f mere at vide om videredyrkning L KKENDE ELLER SK REDE GLAS FORSIGTIG Da et laekkende eller sk ret glas der er blevet inokuleret kan udsende en aerosol af mycobakterier inkl M tuberculosi skal man tr ffe passende foranstaltninger ved h ndtering heraf Hvis et inokuleret dyrkningsglas laekker eller g r i stykker ved et uheld under indsamling eller transport skal man benytte den praksis der er gaeldende i ens laboratorium til brug ved spild af mycobakterier Man skal som et minimum benytte sig af de universelle forholdsregler Glassene skal bort skaffes p passende m de I det sj ldne tilf lde hvor indholdet af et lakkende glas er l bet ud i selve instrumentet eller hvis et glas g r i styker ved et uheld skal man straks slukke for instrumentet Evakuer det berorte omr de Kontakt sikkerhedschefen Fastsl nodvendigheden af at slukke for eller foretage aendringer af indstillingerne af de enheder der behandler luften i det berort
81. i M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M malmoense Durante os estudos internos M xenopi e M szulgai n o exibiram um isolamento sat isfat rio com o meio de cultura Myco F Lytic BACTEC RESULTADOS ESPERADOS Em ensaios cl nicos a distribui o da frequ ncia dos tempos de isolamento TTD para as amostras de sangue positivas com o meio de Cultura Myco F Lytic BACTEC encontra se ilustrada na figura seguinte MOTT MAC EN vt N mero de Isolados O NW BU ASN 2 6 7 11 13 15 17 19 21 TAD Dias CARACTERISTICAS DO DESEMPENHO O meio de cultura Myco F Lytic BACTEC foi avaliado com o instrumento 9000MB BACTEC em dois locais clinicos considerados como grandes hospitais de cuidados terci rios e universit rios em reas geogr ficas diferentes As popula es locais inclu ram doentes com suspeita de infec o por micobact rias doentes imunodeprimidos e doentes transplantados O meio de cultura Myco F Lytic BACTEC foi comparado com o meio de cultura BACTEC 13A para o isolamento e detec o de micobact rias a partir de amostras de sangue Durante o estudo foram testadas um total de 284 amostras de sangue respei tando os crit rios de selec o O n mero total de isolados de micobact rias patog nicas detectados no estudo foi de 39 Consulte o QUADRO 1 Dos positivos cinco 13 foram isolados apenas no meio d
82. iagnostisk medisinsk utstyr Urzadzenie medyczne do diagnostyki in vitro Dispositivo m dico para diagn stico in vitro Medicinska pom cka na diagnostiku in vitro Dispositivo medico de diagn stico in vitro Medicinsk anordning f r in vitro diagnostik Temperature limitation Teplotni omezeni Temperaturbegreensning Temperatuurlimiet Temperatuuri piirang L mp tilarajoitus Temp rature limite Zul ssiger Temperaturenbereich Opto Beppokpaoiag H mersekleti hat r Temperatura limite Laikymo temperat ra Temperaturbegrensning Ograniczenie temperatury Limitag o da temperatura Ohrani enie teploty Limitaci n de temperatura Temperaturbegr nsning Batch Code Lot K d slo ar e Batch kode Lot Chargenummer lot Partii kood Er koodi LOT Code de lot Lot Chargencode Chargenbezeichnung Kw k g naptidac Maptida T tel sz ma Lot Codice del lotto partita Partijos numeris Lot Batch kode Serie Kod partii seria C digo do lote Lote K d s rie ar a C digo de lote Lote Satskod parti Contains sufficient for n tests Dostatecn mno stv pro n test Indeholder tilstr kkeligt til n test Voldoende voor n tests K llaldane n testide jaoks Sis lt on riitt v n testej varten Contenu suffisant pour n tests Ausreichend f r n Tests l lepi xet enapk Moodtnta n e amp etdosic n teszthez elegend
83. iante siringa nei flaconi di coltura usare siringhe con puntali LUER LOK Usare una tecnica di inoculo ad una mano ed un supporto per il flacone sicuro in modo da ridurre il rischio di punture d ago accidentali Sterilizzare in autoclave tutti i flaconi BACTEC Myco F Lytic inoculati prima di eliminarli Prima del campionamento di flaconi positivi per subcoltura colorazione etc necessario dar sfogo al gas che spesso si accumula dentro in seguito al metabolismo microbico I prelievi devono essere eseguiti in una cappa di sicurezza biologica indossando appropriati indumenti protettivi mascherine e guanti Per ulteriori informazioni sulla procedura di subcoltura vedere la sezione Procedimento FLACONI CON PERDITE O ROTTURE ATTENZIONE Se un flacone inoculato presenta perdite o rotture necessario manipolarlo nel modo appropriato in quanto pu produrre un aerosol di M tuberculosis o di altri micobatteri Se un flacone inoculato ha perdite o viene accidentalmente rotto in fase di raccolta o trasporto usare la normale prassi di laboratorio per le fuoriuscite micobatteriche Come minimo osservare le precauzioni accettate universalmente flaconi devono essere eliminati nel modo appropriato Nei casi rari in cui si riscontri fuoriuscita di liquido dal flacone all interno dello strumento o se un flacone viene rotto accidentalmente spegnere lo stru mento immediatamente Sgomberare la zona contaminata Contattare il responsabile o respons
84. ktanden 45 och institutionens riktlinjer vid hantering och bortskaffning av infek ti st material BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor kan h rb rgera mer n den rekommenderade maximala provvolymen p 5 mL varf r provvolymens storlek skall kontrolleras vid ympning F rfaranden spridningsskyddande utrustning och anl ggningar enligt bios kerhetsniv 2 rekommenderas vid beredning av f rgade preparat f r syrafasta stavar och odling av kliniska prover F r aktiviteter som innefattar propagation och hantering av Mycobacterium tuberculosis eller Mycobacterium bovis som odlats p medium rekommenderas f rfaranden spridningsskyddande utrustning och anl ggningar enligt bios kerhetsniv 567 F re anv ndning skall varje flaska unders kas f r tecken p kontamination s som grumlighet buktande eller indraget membran eller l ckage Flaskor med tecken p kontamination l ckage eller skador F R EJ anv ndas Flaskkontamination r inte s kert tydligt synlig I en kontaminerad flaska kan det vara vertryck Om en kontaminerad flaska anv nds f r direkt provtagning kan gas eller kontaminerat odlingsmedium rinna tillbaka in i patientens ven I s llsynta fall kan sprickor ha uppst tt i flaskhalsen av glas och halsen kan g s nder n r locket dras av eller under hantering Det kan ocks i s ll synta tillf llen f rekomma att flaskan inte r fullst ndigt f rseglad I b da fallen kan flaskans inneh ll l cka eller spillas ut speciellt
85. laconi positivi vanno maneggiati con i conteni tori adatti secondo le prassi di laboratorio richieste dal BSL III Biological Safety Level III Trattamento dei flaconi positivi per lo strumento a Togliere il flacone dallo strumento e porlo in un area apposita secondo le prassi di laboratorio richieste dal BSL III b Capovolgere il flacone per miscelare il contenuto c In una cappa di sicurezza biologica ventilare il flacone per equilibrare la pressione interna con quella atmosferica d Prelevare un aliquota dal flacone ca 0 1 mL per preparare le colorazioni acido resistenza e Gram e Esaminare lo striscio e inoltrare i risultati preliminari solo dopo una valutazione dello stesso Se dopo sei settimane di incubazione un flacone negativo per lo strumento appare positivo all esame visivo cio diaframma rigonfio o sangue molto Scuro si deve eseguire una subcoltura una colorazione per l acido resistenza e considerarlo presuntivamente positivo purch il risultato della col orazione sia positivo Subcoltura dei flaconi La subcoltura deve essere eseguita in una cappa di sicurezza biologica indossando indumenti protettivi mascherina e guanti Prima di eseguire la subcoltura porre il flacone in posizione verticale e collocare sul setto un tampone imbevuto d alcol Per liberare l eventuale pressione positiva contenuta nel flacone causata dalla crescita di possibili contaminanti inserire un ago di calibro 25 o inferiore munito di
86. le d analyse Le flacon de contr le n gatif doit rester n gatif Si les r sultats escompt s pour le contr le de qual it ne sont pas obtenus ne pas utiliser le milieu et contacter votre repr sentant local Becton Dickinson pour une assistance suppl mentaire Pour toute information relative au contr le de qualit pour le systeme BACTEC se reporter au manuel d utilisation MA 0092 RAPPORTER LES RESULTATS Le statut positif tabli par l appareil peut tre confirm par un frottis pour bact ries acido r sistantes ou une coloration de Gram Un r sultat positif indique la pr sence possible de microorganismes viables dans le flacon Si un frottis pour coloration acido r sistante est positif repiquer sur milieu solide et noter pour r sultat positif selon l appareil frottis de la coloration acido r sistante positif identification en cours Si des microorganismes autres que les bacilles acido r sistants sont pr sents repiquer sur un milieu solide et noter pour r sultat positif selon l appareil frottis de coloration acido r sistante n gatif identification en cours Si aucun organisme n est pr sent sur les frottis repiquer sur milieu solide et remettre le flacon dans l appareil en tant que flacon n gatif dans les cinq heures qui suivent sa sortie de l appareil et lui laisser terminer l analyse Aucun r sultat ne peut tre not Effectuer des repiquages partir du flacon BACTEC Myco F Lytic pour les tests d identifica
87. llen Material anwenden Es sollten jedoch zumindest die allgemeinen Vorsichtsma nahmen beachtet werden Fl schchen m ssen ordnungsgem entsorgt werden Sollte der seltene Fall eintreten da der Inhalt eines Fl schchens in das Ger t selbst ausgelaufen ist oder ein Fl schchen im Ger t zerbrochen wird das Ger t sofort ausschalten Den betroffenen Bereich evakuieren Verst ndigen Sie den die f r Ihr Labor zust ndigen Sicherheits oder Infektionskontrollbeauftragte n Entscheiden Sie ob es notwendig ist die Einstellung der raumlufttechnischen Anlage die diesen Bereich mit Luft versorgt zu ver ndern oder diese abzuschalten Den Bereich erst wieder betreten wenn sich potentielle Aerosole abgesetzt haben oder durch angemessene Entl ftung entfernt wurden Der zust ndige Vertreter von Becton Dickinson and Company sollte verst ndigt werden Richtlinien zur ordnungsgem en Handhabung von Mykobakterienkontamination durch zerbrochene Kulturfl schchen oder Bouillonsuspensionen wurden von den CDC erstellt 5 6 7 HINWEISE ZUR LAGERUNG Fl schchen trocken bei 2 25 C und vor direkter Sonneneinstrahlung gesch tzt lagern PROBENENTNAHME HINWEIS Dieses Verfahren sollte vor der Verwendung des Mediums mit dem zust ndigen Personal besprochen werden um sicherzustellen da die Probenentnahme ordnungsgem wie in diesem Abschnitt beschrieben durchgef hrt wird Die Blutprobe mu unter Beachtung aseptischer Kautelen entnommen werden u
88. lva a poner el capuch n a la aguja Deseche las agujas y jeringas en un contenedor para material biol gicamente peligroso resistente a pinchazos CONTROL DE CALIDAD En cada caja de medios se incluyen certificados de control de calidad Se recomienda que cada nuevo envio o lote de medio BACTEC Myco F Lytic sea analizado utilizando los organismos de control ATCC identificados en el cuadro de abajo como el control positivo y un frasco sin inocular como el control negativo Organismo Margen de tiempo para la detecci n dias Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 8a 16 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 3a 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1a 3 Los frascos positivos deben inocularse utilizando una diluci n a 1 100 de una suspensi n a un 1 de turbidez McFarland cultivada en un medio s lido Inocule el frasco con 0 1 mL del cultivo diluido Deben registrarse y analizarse en el instrumento los frascos y un frasco de control sin inocular Dentro del protocolo de andlisis el instrumento debe identificar el frasco inoculado como positivo El frasco de control negativo debe permanecer negativo Si no se obtienen los resultados previstos del control de calidad no utilice el medio y contacte a su representante local de Becton Dickinson para obtener m s ayuda Para obtener informaci n acerca del control de calidad para el sistema BACTEC refi rase al Manual del usuario MA 0092 INFORME DE RESULTADOS Un frasco positivo despu s de su
89. m die M glichkeit einer Kontamination so gering wie m glich zu halten Zur Kultivierung k nnen Blutvolumina zwischen 1 0 mL und 5 0 mL verwendet werden Es wird empfohlen die Blutprobe am Krankenbett zu inokulieren Zur Blutentnahme wird normalerweise eine Spritze mit LUER LOK Kegel verwendet Gegebenenfalls kann ein VACUTAINER Nadelhalter und ein VACUTAIN ER Blutentnahme Set ein VACUTAINER SAFETY LOK Blutentnahme Set oder ein Schlauchset mit Butterfly Griffplatte verwendet werden Bei Verwendung eines Kan len Schlauchsets Direktentnahme zu Beginn der Blutentnahme sorgf ltig auf die Richtung des Blutflusses achten Vor der Inokulation sollte die F llh he des Mediums mit einem Kugelschreiber oder Markierungsstift auf dem Etikett vermerkt werden um den Startpunkt der Blutentnahme anzuzeigen Das Vakuum im Fl schchen betr gt normalerweise mehr als 5 mL Deshalb sollte die Menge des entnommenen Blutes mit der 5 mL Einteilung auf dem Etikett des Fl schchens kontrolliert werden Nach Erreichen der erforderlichen 1 5 mL Blut den Schlauch abknicken und die Kan le vom BACTEC Fl schchen entfernen Das BACTEC Fl schchen mu so schnell wie m glich ins Labor geschickt und in das BACTEC Ger t gestellt werden F r die Blutentnahme kann ebenfalls ein VACUTAINER R hrchen mit gelber Kappe das NPS enth lt verwendet werden Das R hrchen sollte sofort zum Labor geschickt und in das BACTEC Kulturfl schchen umgef llt werden VERFAHREN Mitgeliefertes Ar
90. manipul s conform ment aux pratiques de s curit biologique de niveau III et dans des installations de contention Analyser un flacon positif selon l appareil a Retirer le flacon de l appareil et l amener l endroit appropri en observant les pratiques de s curit biologique de niveau III et en utilisant des r cipients de contention b Inverser le flacon pour m langer le contenu c Dans la hotte de s curit biologique a rer le flacon pour le remettre la pression atmosph rique d Pr lever une fraction aliquote environ 0 1 mL pour les colorations AFB et Gram e Inspecter le frottis et noter les r sultats pr liminaires seulement apr s avoir valu le frottis Si au bout de six semaines un flacon consid r n gatif par l appareil pr sente un aspect visuel positif par exemple septum protub rant ou sang chocola teux il doit tre repiqu et soumis la coloration acido r sistante puis trait comme un flacon pr sum positif si la coloration donne un r sultat positif Repiquage d un flacon les repiquages doivent tre effectu s l int rieur d une hotte de s curit biologique et il convient de porter des v tements appropri s dont des gants et un masque Avant le repiquage poser le flacon debout et placer un coton imbib d alcool sur le septum Pour rel cher toute pression l int rieur du flacon qui pourrait r sulter de la croissance de contaminants ins rer une aiguille st rile de calibre 25 o
91. mes TTD for clinical trial blood specimens positive with the BACTEC Myco F Lytic Culture medium is illustrated in the following figure 8 7 MOTT 6 MAC 5 3 EN vm 4 3 zZz 2 1 0 2 6 7 11 13 15 17 19 21 TTD Days 3 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 4 PERFORMANCE CHARACTERISTICS The BACTEC Myco F Lytic culture medium was evaluated with the BACTEC 9000MB instrument at two clinical sites considered large tertiary care teach ing hospitals in geographically diverse areas The site populations included patients suspected of a mycobacterial infection immunocompromised patients and transplant patients The BACTEC Myco F Lytic culture medium was compared to the BACTEC 13A culture medium for the recovery and detection of mycobacteria from blood specimens A total of 284 compliant blood specimens were tested during the study The total number of patho genic mycobacterial isolates recovered in the study was 39 See TABLE 1 Of these positives five 13 were recovered in the BACTEC Myco F Lytic cul ture medium only and two 5 were recovered by BACTEC 13A culture medium only A total of 28 BACTEC Myco F Lytic vials were over filled with speci men between 6 to 20 mL during the clinical evaluation and were not included in this study since they were above the maximum fill volume not compli ant Of these 28 BACTEC Myco F Lytic vials 16 57 were identified as false positive Of the 284 blood specimens tested in
92. mpi di rilevamento e o la specificit Con volumi superiori a 5 mL si pu verificare pi facilmente la falso positivit Il sangue pu contenere antibiotici o altri inibitori in grado di rallentare o prevenire la crescita dei microrganismi I flaconi BACTEC Myco F Lytic vengono incubati a 37 C il che esclude in teoria il recupero di micobatteri che necessitano di temperature d incubazione diverse es M marinum M ulcerans M haemophilum Il recupero di tali organismi richiede metodi di coltura supplementari Nel corso di studi interni e o di prove cliniche i seguenti isolati sono stati rilevati come positivi nello strumento BACTEC 9000MB utilizzando il terreno di coltura BACTEC Myco F Lytic M tuberculosis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M mal moense Durante gli studi interni l isolamento di M xenopi e M szulgai con il terreno BACTEC Myco F Lytic stato insoddisfacente RISULTATI PREVISTI Il diagramma a seguito mostra la distribuzione della frequenza dei Tempi di Rilevazione della Positi a prove cliniche e riscontrati positivi con il terreno di coltura BACTEC Myco F Lytic t TRP per i campioni di sangue sottoposti 8 MOTT MAC ili 11 13 15 17 19 21 Numero di isolati O NO Pr I O N N o N TRP giorni CARATTE
93. n o s o selectivos e sustentar o o crescimento de outros organismos aer bios para al m de Mycobacterium Os frascos positivos podem conter uma ou mais esp cies de micobact rias e ou outras esp cies al m das micobact rias Quando presentes os organismo de cresci mento r pido podem mascarar a detec o de micobact rias com crescimento mais lento S o necess rias repicagens e procedimentos adicionais A con sist ncia da morfologia microsc pica no Myco F Lytic BACTEC ainda n o foi estabelecida A detec o ptima de isolados ser obtida adicionando 1 a 5 mL de sangue a cada frasco A utiliza o de volumes inferiores ou superiores pode afec tar de forma adversa o per odo de tempo de isolamento e ou a especificidade A probabilidade de falsa positividade ser maior quando o volume de sangue for superior a 5 mL O sangue pode conter antimicrobianos ou outros inibidores os quais podem atrasar ou impedir o crescimento de microorganismos Os frascos Myco F Lytic BACTEC s o incubados a 37 C o que exclui em princ pio o isolamento de micobact rias que necessitem de outras temperaturas de incuba o por ex M marinum M ulcerans M haemophilum O isolamento desses organismos necessita de m todos de cultura suplementares Durante os estudos internos e ou ensaios cl nicos efectuados no instrumento 9000MB BACTEC utilizando o meio Myco F Lytic BACTEC foram detectados como positivos os seguintes isolados M tuberculosis M kansasi
94. n altro set di ago e cannula a farfalla Se viene usato il set di ago e cannula prelievo diretto osservare attentamente la direzione del flusso di sangue quando si inizia a prelevare il campione Prima dell inoculo si deve annotare sull etichetta il volume di riempimento di terreno a penna o pennarello per indicare il livello di partenza della raccolta del campione Il vuoto del flacone supera in genere i 5 mL per cui bisogna controllare il volume di sangue preleva to mediante le tacche da 5 mL Una volta prelevati 1 5 mL di campione necessari per il test arrestare il flusso attorcigliando la cannula e togliere l ago dal flacone BACTEC I flaconi BACTEC devono essere inviati immediatamente al laboratorio e posti nello strumento BACTEC Per il prelievo del campione di sangue dal paziente si pu anche usare la provetta VACUTAINER con tappo giallo contenente SPS La provetta deve essere trasportata al laboratorio appena possibile per poi trasferire il campione nel flacone di coltura BACTEC PROCEDIMENTO Materiali forni Flaconi di coltura BACTEC Myco F Lytic Materiali richiesti ma non forniti Cappa di sicurezza biologica autoclave unit di ventilazione disinfettante micobattericida alcol isopropilico al 7096 organis mi per il controllo di qualit Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 e Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 micro scopio e materiali per la colorazione di vetrini e la coltura se
95. na toma directa una muestra de 1 5 mL en el frasco gui ndose por las l neas de graduaci n en la etiqueta del frasco v ase la secci n de Limitaciones del procedimiento Los frascos inoculados deben introducirse en el instrumento BACTEC 9000MB tan pronto como sea posible para su incubaci n y verificaci n 4 Los frascos que se ponen en el instrumento ser n analizados autom ticamente durante el periodo de protocolo de an lisis Los frascos positivos ser n identificados por el sistema BACTEC de la serie fluorescente v ase el Manual del usuario del instrumento BACTEC MA 0092 Puede no verse una diferencia obvia en el indicador dentro del frasco entre los frascos positivos y negativos Sin embargo el sistema BACTEC de la serie fluorescente puede detectar una diferencia en la fluorescencia del indicador 5 Se debe efectuar un subcultivo de los frascos positivos y preparar un frotis apropiado Todos los frascos positivos deben ser manipulados siguiendo pr cticas de bioseguridad nivel 3 e instalaciones de prevenci n Procesamiento de un frasco positivo en el instrumento a Saque el frasco del instrumento y transp rtelo a un rea siguiendo pr cticas de bioseguridad nivel 3 e instalaciones de prevenci n b Invierta el frasco para mezclar el contenido c En una c mara de seguridad biol gica ventile el frasco para equilibrar la presi n dentro del frasco con la presi n atmosf rica d Extraiga una alicuota del frasco aprox 0 1 m
96. nces na p gina 4 Somente para uso diagn stico in vitro Becton Dickinson Ind strias Cir rgicas Ltda Rua Cyro Correia Pereira 550 Curitiba Paran Brasil CNPJ 21 551 379 0013 31 Ind stria Brasileira Respons vel T cnico Midori Imai CRF PR 3374 Registro ANVISA n 10033430177 Centro de Relacionamento com o cliente 0800 555654 amp BD BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor Supplementerad Middlebrook 7H9 oth hj rt hj rninfusionsbuljong F r anv ndning med BACTEC 9000MB Svenska NAMN BACTEC odlingsflaskor typ Myco F Lytic en modifierad Middlebrook 7H9 buljong kan anv ndas f r odling och p visning av mykobakterier ANV NDNINGSOMR DE BACTEC Myco F Lytic anv nds tillsammans med BACTEC instrument 9000MB och r ett oselektivt odlingsmedium f r kvalitativ odling och p visning av mykobakterier i blod SAMMANFATTNING OCH F RKLARING AV TESTEN Sedan mitten av 1980 talet och spridningen av AIDS epidemin har incidensen av sepsis orsakad av opportunistiska mykobakterier kat Mycobacterium tuberculosis MTB och andra mykobakterier n M tuberculosis MOTT i synnerhet Mycobacterium avium komplex MAC r ter p frammarsch Fr n 1985 till 1992 kade antalet rapporterade MTB fall med 18 Mellan 1981 och 1987 hade 5 5 av AIDS patienterna disseminerade icke tuberkul sa mykobakterieinfektioner s som MAC enligt AIDS fallrapportering Vid 1990 hade kningen av fallen med disseminerade icke tuberkul
97. netolsulfonato de S dio 0 025 p v TWEEN 80 3 RATORI ee 0 0025 p v HGl Piridoxal 25577 345 orti teases kha ein olio det BA AOR Naher 0 0001 p v Citrato de Am nia Ferrico a A e 0 000 Y p v Fosfato de Pot ssiO usas o usa an an nn aa 0 024 p v Saponina 0 24 p v Anti espuma Este meio BACTEC distribu do com CO e O adicionados A composic o pode ter sido ajustada para cumprir exig ncias de desempenho espec ficas O meio Myco F Lytic BACTEC n o necessita da adic o de suplemento Quando recebido cada frasco de 40 mL de Myco F Lytic BACTEC est pronto a ser utilizado Ap s a recepc o os meios devem ser transparentes e com cor mbar suave 0 01 p v ADVERT NCIAS Os frascos de cultura preparados destinam se a ser utilizados no diagn stico in vitro Este Produto Cont m Borracha Natural Desidratada AMOSTRA DE TESTE POTENCIALMENTE INFECCIOSA Cumpra as Precau es Universais 4 5 e as linhas de orienta o da institui o durante a manipu lac o e eliminac o de materiais infecciosos Os frascos Myco F Lytic BACTEC poder o conter mais do que o volume m ximo recomendado da amostra de 5 mL devendo monitorizado do volume de enchimento Para a preparac o de colora es cidas r pidas e para a cultura de amostras cl nicas recomendada a adop o de pr ticas bem como a utilizac o de equipamentos de conten o e instala es de N vel 2 de Seguran a Biol
98. nsasii ATCC 12478 3a 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1a 3 Os frascos positivos dever o ser inoculados utilizando uma dilui o de 1 para 100 de uma suspens o de McFarland 1 cultivada em meio s lido Inocule o frasco com 0 1 mL da cultura dilu da Os frascos e um frasco de controlo n o inoculado dever o ser examinados dentro do instrumento e testados O 23 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 24 frasco inoculado dever ser detectado pelo instrumento como positivo at ao fim do protocolo do teste O controlo negativo dever permanecer nega tivo Se n o forem obtidos os resultados esperados para o Controlo de Qualidade n o utilize o meio e contacte com a Assist ncia T cnica da Becton Dickinson apenas nos E U 1 800 638 8663 ou contacte o Representante local da Becton Dickinson para obter assist ncia Para obter informa es sobre o controlo de qualidade para o Sistema BACTEC consulte o Manual do Utilizador MA 0092 RELAT RIO DOS RESULTADOS Um tubo positivo no instrumento deve ser confirmado por um esfrega o com colora o cida r pida ou uma colora o Gram Um resultado positivo indica a presen a presuntiva de microorganismos vi veis no frasco Se o esfrega o for AFB positivo efectue uma repicagem para um meio s lido e descreva como Positivo no instrumento esfrega o AFB positivo ID pendente Se existirem outros microorganismos al m de bacilos corados pela colora o cida r pida efect
99. ohl das Wachstum von Mykobakterien als auch anderer aerober Organismen Positive Kulturfl schchen k nnen eine oder mehrere Mykobakterien Spezies und oder andere nicht mykobakterielle Spezies enthalten Schnell wach sende Organismen k nnen den Nachweis von langsamer wachsenden Mykobakterien erschweren Daher m ssen Subkulturen angelegt und andere Verfahren durchgef hrt werden Die Best ndigkeit der mikroskopischen Morphologie im BACTEC Myco F Lytic Medium wurde noch nicht festgelegt Eine optimale Ausbeute an Isolaten wird durch die Zugabe von 1 5 mL Blut pro Fl schchen erzielt Die Verwendung kleinerer oder gr erer Volumina kann die Isolierung Nachweiszeiten und oder Spezifit t nachteilig beeinflussen Wenn das Blutvolumen 5 mL bersteigt nimmt die M glichkeit f r falsch positive Ergebnisse wahrscheinlich zu Blut kann antimikrobielle Substanzen oder andere Inhibitoren enthalten die das Wachstum von Mikroorganismen verlangsamen oder verhindern k nnen BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen werden bei 37 C inkubiert so da die Isolierung von Mykobakterien die andere Inkubationstemperaturen erfordern z B M marinum M ulcerans M haemophilum m glicherweise verhindert wird Die Isolierung derartiger Organismen erfordert zus tzliche Kulturverfahren Die folgenden Isolate wurden in internen Studien und oder klinischen Tests im BACTEC 9000MB Ger t bei der Verwendung von BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen nachgewiesen M tubercul
100. ollo negativo deve rimanere invari ato Se con il controllo di qualit non si ottengono i risultati attesi non usare il terreno e rivolgersi al rappresentante di zona della Becton Dickinson per assistenza tecnica Per informazioni sul controllo di qualit del sistema BACTEC consultare il Manuale d uso MA 0092 RAPPORTO DEI RISULTATI presenza di microrganismi vivi nel flacone Se si riscontra positivit al vetrino per l acido resistenza eseguire una subcoltura su terreno solido e segnalare come positivo per lo strumento positivo al vetrino per l acido resistenza in corso di identificazione Se sono presenti microrganismi diversi dai bacilli acido resistenti eseguire una subcoltura su terreno solido e segnalare come positivo per lo strumen to negativo al vetrino per l acido resistenza in corso di identificazione Se il vetrino non evidenzia alcun microrganismo eseguire una subcoltura su terreno solido rimettere il flacone dentro allo strumento come flacone negativo in corso di analisi entro 5 ore dalla precedente rimozione per il completamento del periodo di protocollo Non va dato alcun risultato Eseguire delle subcolture a partire dal flacone BACTEC Myco F Lytic per l identificazione e le prove di sensibilit 13 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 14 LIMITI DEL PROCEDIMENTO Il rilevamento delle specie di micobatteri presenti nei campioni ematici dipende dal numero di organismi presenti nel campione dal me
101. om man v nder upp och ned p flaskan F r att minimera risken f r l ckage vid ympning av prover p odlingsflaskor med hj lp av spruta skall sprutor med LUER LOK kona anv ndas F r att undvika accidentella n lstick b r enhandsteknik och l mplig flaskh llare anv ndas vid inokulationen Innan de kasseras skall alla inokulerade BACTEC Myco F Lytic flaskor steriliseras i autoklav F re provtagning fr n positiva odlingsflaskor f r fortsatt odling eller f rgning etc Gas som ofta ansamlas p grund av den mikrobiella metabolismen m ste sl ppas ut Provtagning m ste utf ras i biologiskt s kerhetssk p och l mplig skyddskl dsel inklusive handskar och munskydd skall b ras Se avs nittet F rfarande f r ytterligare information om fortsatt odling L CKANDE ELLER SKADADE FLASKOR OBS Ett inokulerat r r som l cker eller har g tt s nder kan stadkomma en aerosol av mykobakterier inklusive M tuberculosis eller andra bakterier hantera d rf r s dant r r p l mpligt s tt Om en inokulerad flaska l cker eller g r s nder vid provtagning eller transport skall p institutionen vedertagna tg rder vid spill av mykobakterier vidtagas De i Generella f rsiktighetsbeaktanden beskrivna tg rderna r minimikrav Odlingsflaskorna skall bortskaffas p f rsvarligt s tt Om det mot all f rmodan intr ffar att inneh llet i en flaska l ckt ut i sj lva instrumentet eller en flaska g tt s nder skall instrumentet omed
102. on 3 6 eller h gre Inokulation av BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor 1 Dra av locket p BACTEC flaskan och kontrollera att flaskan inte uppvisar sprickor kontamination kraftig grumling eller buktande eller indragen propp Flaskan F R EJ anv ndas om n gon defekt noteras M rk odlingsflaskan med provdata och m rk ut mediets niv p flaskans etikett F re inokulation skall membranet torkas av med alkohol Injicera aseptiskt med en spruta eller anv nd graderingarna p flasketiketten som hj lp och drag direkt 1 5 mL prov per flaska se avsnittet Metodens begr nsningar Inokulerade flaskor b r s snart som m jligt s ttas in i BACTEC 9000MB instrumentet f r inkubering och avl sning 4 De flaskor som s tts in i instrumentet testas automatiskt under hela testprotokollperioden Positiva flaskor identifieras av BACTEC fluorescenssys temet se anv ndarhandledningen f r BACTEC MA 0092 Sensorerna i positiva respektive negativa flaskor uppvisar inte s kert n gra synliga skill nader en skillnad i fluorescens kan dock detekteras av BACTEC fluorescenssystem 5 Positiva flaskor b r genomg fortsatt odling och ett l mpligt utstryk beredas Alla positiva flaskor skall hanteras i enlighet med metoder och sprid ningshindrande faciliteter enligt bios kerhetsniv III Behandling av en instrumentpositiv flaska a Ta ut flaskan ur instrumentet och verf r det till ett omr de som uppfyller kraven enligt bios kerhetsniv 3 med
103. ook 7H9 and Brain Heart Infusion broth formulation for the recovery of mycobacteria from blood specimens Specific modifications were made to enhance the growth and recovery of mycobacteria These modifications include ferric ammonium citrate to provide an iron source for specific strains of mycobacteria the addition of saponin as a blood lysing agent and the addition of specific proteins and sugars to provide nutritional supplements Each vial contains a sensor which can detect decreases in oxygen concentration in the vial resulting from microorganism metabolism and growth The sensor is monitored by the BACTEC 9000MB System for increasing fluorescence which is proportional to the decrease in oxygen A positive determina tion indicates the presumptive presence of viable microorganisms in the vial PRINCIPLES OF THE PROCEDURE The BACTEC Myco F Lytic culture vial is designed for the rapid detection of mycobacteria in blood Blood specimens are inoculated into the BACTEC Myco F Lytic vial either with a syringe or direct draw with a needle and tubing The vial is placed into the BACTEC 9000MB System and is continuously incubated at 37 C with agitation once every ten minutes for maximum recovery Each vial contains a sensor which can detect decreases in oxygen concen tration in the vial resulting from microorganism metabolism and growth The sensor is monitored by the BACTEC 9000MB System every ten minutes Analysis of the rate of oxygen decrease as measured by
104. ook 7H9 arricchito e Infuso di Cuore e Cervello er l uso con BACTEC 9000MB Italiano I flaconi di coltura BACTEC Myco F Lytic Brodo Middlebrook 7H9 modificato favoriscono la crescita e il rilevamento dei micobatteri USO PREVISTO Il BACTEC Myco F Lytic quando usato con lo strumento BACTEC 9000MB si presta come terreno non selettivo per la coltura qualitativa e l isolamento di micobatteri da campioni ematici SOMMARIO E SPIEGAZIONE DEL TEST A partire dalla met degli anni 80 e in seguito al diffondersi dell epidemia dell AIDS aumentata l incidenza della setticemia causata da lieviti funghi e micobatteri opportunisti Si assistito a una nuova insorgenza del Mycobacterium tuberculosis MTB e dei micobatteri non da tubercolosi MOTT special mente il complesso Mycobacterium avium MAC Tra il 1985 e il 1992 il numero dei casi accertati di MTB aumentato del 18 Tra il 1981 e il 1987 gli studi sui casi di AIDS indicavano che il 5 5 dei pazienti affetti da AIDS avevano contratto infezioni micobatteriche non tubercolari come il MAC Entro il 1990 i casi accertati di infezione micobatterica non tubercolare erano aumentati fino ad avere un incidenza complessiva del 7 6 Gli U S Centers for Disease Control and Prevention CDC hanno esteso ai laboratori la raccomandazione di compiere ogni sforzo per utilizzare i metodi di analisi pi rapidi possibile a disposizione nella diagnosi dei micobatteri Queste raccomandazioni includono fr
105. osis M kansasii M fortuitum M avium M intracellulare M bovis M terrae M simiae M gordonae M celatum M abscessus M malmoense Der Nachweis von M xenopi und M szulgai mit dem BACTEC Myco F Lytic Kulturmediums war bei internen Studien unzufriedenstellend 10 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 11 ZU ERWARTENDE ERGEBNISSE Die Verteilung der Nachweiszeiten f r Blutproben die in klinischen Tests mit dem BACTEC Myco F Lytic Kulturmediums positiv waren ist in der nach stehenden Abbildung dargestellt 8 MOTT MAC en ve Anzahl der Isolate O NO A I ON 2 6 7 11 13 15 17 19 21 Tage bis zum Nachweis LEISTUNGSMERKMALE Das BACTEC Myco F Lytic Kulturmedium wurde mit dem BACTEC 9000MB Ger t in zwei Lehrkrankenh usern der Maximalversorgung an geographisch unterschiedlichen Standorten beurteilt Die Patientenpopulation an den Krankenh usern umfa te Patienten mit Verdacht auf Mykobakterieninfektion Patienten mit Immundefekten und Transplantatempf nger Das BACTEC Myco F Lytic Kulturmedium wurde mit dem BACTEC 13A Kulturmedium zur Isolierung und zum Nachweis von Mykobakterien in Blutproben verglichen Im Verlauf der Studie wurden insgesamt 284 geeignete Blutproben getestet Die Gesamtzahl der in der Studie isolierten pathogenen Mykobakterienisolate betrug 39 Siehe TABELLE 1 Von diesen positiven Kulturen wurden f nf 13 ausschlie lich mit dem BACTEC Myco F Lytic
106. ove i BACTEC Myco F Lytic glassene Derfor bor man holde je med det p fyldte volumen Biosikkerhedsniveau 2 praksis samt opbevaringsudstyr og faciliteter anbefales til klargoring af syrefaste farvninger og dyrkning af kliniske prover Ved aktiviteter der involverer dyrkning og h ndtering af Mycobacterium tuberculosis eller Mycobacterium bovis dyrket i kultur anbefales praksis samt opbevaringsudstyr og faciliteter p biosikkerhedsniveau 5 6 7 Hvert dyrkningsglas skal inden brug unders ges for tegn pa kontaminering s som uklarheder bulnende eller indsunken membran eller l kage MA IKKE BRUGES hvis et dyrkningsglas udviser tegn p kontaminering beskadigelse eller lakage Kontaminering af glasset er ikke nodvendigvis umiddel bart synlig Et kontamineret glas kan indeholde et overtryk Hvis et kontamineret glas bruges til direkte provetagning er der risiko for at luft eller kon tamineret dyrkningsmedium fores ind i patientens vene sjaeldne tilf lde kan halsen p dyrkningsglasset vare revnet s halsen knaekker ved fjernelse af haetten eller ved handtering I sjaeldne tilf lde kan et dyrkningsglas v re utilstraekkeligt forseglet begge tilfaelde kan glassets indhold lobe ud is r hvis det vendes p hovedet For at minimere risikoen for udslip n r en prove inokuleres i dyrkningsglasset med en sprojte skal man bruge sprojter med LUER LOK spidser Der skal bruges en et h nds inokuleringsteknik og en passende glasholder for at for
107. re positive skal fjernes fra instrumentet og steriliseres inden de smides ud 18 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 19 REAGENSER Hvert BACTEC Myco F Lytic dyrkningsglas indeholder folgende reaktive ingredienser inden behandling Ingrediensoversigt Behanhdlet vand sraa E one nn Oo na na i E SS 40 mL q s 7H9 Middlebrook bouillon uden fosfatsalte 0 12 w v Hjerne hjerte infusion 0 5 w v Kasein hydrolysat LE sala EEN ser 0 10 w v Supplement H 0 10 w v Inositol 0 05 wiv Glycerol 0 10 w v Natriumpolyanetholsulfonat 0 025 wiv Tween 80 0 0025 wiv Pyridoxal HCI 0 0001 w v 0 006 wiv 0 024 wiv 0 24 wiv 0 01 wiv Ferroammoniumcitrat Kaliumfosfat Saponin i Skumdaempende middel Dette BACTEC medium leveres med CO og O tilsat Sammens tningen kan v re blevet justeret for at leve op til bestemte ydelseskrav BACTEC Myco F Lytic mediet kr ver ikke yderligere tils tning af supplement Hvert 40 mL glas BACTEC Myco F Lytic er klar til brug n r det modtages Mediet skal ved modtagelsen vaeret klart og lyst ravfarvet ADVARSLER De klargjorte dyrkningsglas er til diagnostisk brug in vitro Dette produkt indeholder tort naturgummi POTENTIELT SMITSOMME PROVER Overhold de universelle forholdsregler 45 og institutionelle retningslinier ved h ndtering og bortskaffelse af smit somt materiale Der kan v re mere end det anbefalede maksimum p 5 mL pr
108. rsom detta kan skada membranet permanent S tt inte p n lskyddet p n len igen Kasta n lar och sprutor i en sticks ker beh llare f r biologiskt riskavfall KVALITETSKONTROLL Kvalitetskontrollbevis medf ljer varje l da odlingsmedier Det rekommenderas att varje ny f rs ndelse eller nytt parti BACTEC Myco F Lytic odlingsmedier testas med de ATCC kontrollorganismer som anges i nedanst ende tabell som positiv kontroll och en oinokulerad flaska som negativ kontroll Organism Tidsrymd f r uppt ckt dagar Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 8 till 16 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 3 till 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1 till 3 De positiva flaskorna b r inokuleras med en 1 100 sp dning av en McFarland nr 1 suspension odlad p fast medium Inokulera flaskan med 0 1 mL av den sp dda kulturen Flaskorna och en oinokulerad kontrollflaska b r skannas in i instrumentet och testas Den inokulerade flaskan b r av instrumentet detekteras s som positiv inom testprotokollperioden Den negativa kontrollen b r f rbli negativ Om kvalitetskontrollen inte ger f rv ntat resultat f r odlingsmedierna ej anv ndas Kontakta i s fall Becton Dickinson Technical Services p 1 800 638 8663 endast inom USA eller lokal Becton Dickinson representant f r assistans F r information om kvalitetskontroll av BACTEC systemet h nvisas till anv ndarhandledningen MA 0092 RAPPORTERING AV RESULTAT En instrumentpositiv
109. rtigung von s urefesten F rbungen und die Kultivierung klinischer Proben sollten nach den Richtlinien und unter Anwendung der physikalis chen Sicherheitsvorkehrungen der Biologischen Sicherheitsstufe 2 durchgef hrt werden Verfahren die die Fortpflanzung und Handhabung von in Kultur PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 9 gez chtetem Mycobacterium tuberculosis oder Mycobacterium bovis einschlie en m ssen nach den Richtlinien und unter Anwendung der physikalis chen Sicherheitsvorkehrungen der Biologischen Sicherheitsstufe 3 durchgef hrt werden 5 6 7 Vor Gebrauch mu jedes Fl schchen auf Anzeichen von Kontamination wie z B Tr bung W lbung oder Einbeulung des Septums oder undichte Stellen untersucht werden Fl schchen die Anzeichen von Kontamination undichten Stellen oder Sch den aufweisen NICHT VERWENDEN Die Kontamination eines Fl schchens ist nicht in allen F llen sichtbar Kontaminierte Fl schchen k nnen berdruck erzeugen Wird zur Direktentnahme ein kontaminiertes Fl schchen verwendet kann Gas oder kontaminiertes Kulturmedium in die Vene des Patienten zur ckflie en In seltenen F llen kann der gl serne Fl schchenhals einen Sprung haben und beim Entfernen des Abri deckels oder w hrend der Handhabung des Fl schchens brechen Auch kann es in seltenen F llen vorkommen da ein Fl schchen nicht richtig verschlossen ist In beiden F llen ist es m glich da der Fl schcheninhalt aus l uft oder versch ttet wir
110. s Determine se necess rio desligar ou modificar os par metros das unidades de tratamento do ar na rea afectada N o regresse rea afectada at os potenciais aeross is terem assentado ou sido removidos atrav s de uma ventila o apropriada A Becton Dickinson and Company dever ser notificada atrav s do n mero de telefone 1 800 544 7434 dos EUA ou contactando com o representante apropriado da Becton Dickinson na sua rea Foram publicadas pelo CDC linhas orientadoras para o tratamento adequado de contamina es acidentais por micobact rias resultantes da quebra de tubos de cultura ou de suspens es de meio liquido 5 6 7 INSTRUGOES DE ARMAZENAMENTO Armazene entre 2 e 25 C num local seco e sem luz solar directa COLHEITA DE AMOSTRAS NOTA Antes da utiliza o do meio recomenda se que este procedimento seja revisto por pessoal apropriado para que possam ser asseguradas as t c nicas de colheita de amostra correctas descritas nesta sec o A colheita de amostras deve ser efectuada utilizando uma t cnica est ril para diminuir a possibilidade de contaminag o O intervalo do volume de sangue que pode ser cultivado de 1 0 mL a 5 0 mL Recomenda se que a inocula o da amostra seja efectuada na cabeceira do doente Para a colheita da amostra utilizada frequentemente uma seringa com uma ponta da marca LUER LOK Se for apropriado podem ser utilizados um Suporte de Agulha da marca VACUTAINER e um Conjunto de Colheita de
111. s cuando son recibidos debe ser transparente y de color ambar claro PRECAUCIONES Precauciones diagn sticos in vitro Este producto contiene goma natural seca MUESTRA POTENCIALMENTE INFECCIOSA PARA ANALISIS Deben seguirse las Precauciones universales 45 y las normas institucionales para el manejo y desecho de materiales infecciosos Los frascos BACTEC Myco F Lytic acogeran un volumen superior al maximo recomendado de 5 mL del volumen de la muestra por lo que el volumen de llenado debe ser controlado Para la preparaci n de tinciones cidorresistentes y el cultivo de muestras cl nicas se recomiendan las pr cticas de bioseguridad de nivel 2 laboratorio y equipo de prevenci n Para las actividades que involucren la propagaci n y manipulaci n de Mycobacterium tuberculosis o Mycobacterium bovis en medios de cultivo se requieren pr cticas de bioseguridad de nivel 3 laboratorio y equipo de prevenci n 567 15 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 16 Se debe examinar cada frasco antes de usarlo para ver si se presentan indicios de contaminaci n por ejemplo turbidez tap n hinchado o hundido o fugas NO DEBE USARSE ning n frasco que presente indicios de contaminaci n fugas o desperfectos Es posible que la contaminaci n del frasco no se perciba a simple vista Un frasco contaminado puede contener presi n positiva Si se usa un frasco contaminado en una toma directa podria refluirse gas o el medio de cultivo contaminado a la
112. set in das BACTEC Myco F Lytic Fl schchen inokuliert Das Fl schchen wird in das BACTEC 9000MB System gestellt bei 37 C kontinuierlich inkubiert und zur Verbesserung der Ausbeute dabei alle zehn Minuten gesch ttelt Jedes Fl schchen enth lt einen Sensor der die durch Metabolismus und Wachstum von Mikroorganismen hervorgerufene Abnahme der Sauerstoffkonzentration im Fl schchen nachweist Der Sensor wird vom BACTEC 9000MB System alle zehn Minuten abgelesen Mit der Analyse der Sauerstoffabnahme die durch zunehmende Fluoreszenz gemessen wird kann das BACTEC Ger t der Fluoreszenz Serie feststellen ob das Fl schchen Ger te positiv ist Eine positive Messung deutet auf das vermut liche Vorhandensein lebensf higer Mikroorganismen im betreffenden Fl schchen hin Der Test ist auf Mikroorganismen beschr nkt die in diesem Medium bei 37 C zum Wachstum f hig sind Das Medium ist nicht selektiv und unterst tzt das Wachstum anderer aerober Organismen wie z B Hefen Pilzen und Bakterien die bei Vorhandensein die Isolierung von Mykobakterien beeintr chtigen k nnen Kulturfl schchen die nach 42 Tagen negativ bleiben und die keine sichtbare Zeichen von Positivit t aufweisen werden von dem Ger t entfernt und vor dem Verwerfen sterilisiert REAGENZIEN Jedes BACTEC Myco F Lytic Kulturfl schchen enth lt vor der Verarbeitung die folgenden aktiven Bestandteile Liste der Bestandteile w v Gewichtsprozent weight per volume Demineralisiertes
113. skt relevant Det kommer an p anv ndaren att avg ra huruvida provet r kontaminerat eller ej med ledning av s dana faktorer som fynd i f rgade preparat typ av p visade organismer upptr dande av samma organism i flera odlingar patientens anamnes etc BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor r oselektiva varf r ven andra aeroba organismer n mykobakterier kan v xa i mediet Positiva odlingsflaskor kan inneh lla en eller flera arter mykobakterier och eller andra icke mykobakterie species Snabbt v xande organismer kan om de f refinnes maskera detektion av l ngsammare v xande mykobakterier Fortsatt odling och ytterligare f rfaranden kr vs Permanensen i den mikroskopiska morfologin i BACTEC Myco F Lytic har ej fastst llts Optimal p visning av isolat uppn s genom ympning av 1 5 mL blod per odlingsflaska Anv ndning av mindre eller st rre volymer kan f rs mra m j ligheten till p visning f rl nga detektionstiden och eller minska specificiteten Falskt positiva avl sningar intr ffar troligen oftare vid blodprovsvolym ver 5 mL Blod kan inneh lla antimikrobiella substanser eller andra inhibitorer som kan f rl ngsamma och f rhindra v xt av mikroorganismer 27 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 28 BACTEC Myco F Lytic odlingsflaskor inkuberas vid 37 C vilket m jligen kan f rhindra p visning av mykobakterier som kr ver andra inkubationstempera turer exempelvis M marinum M ulcerans M haemophilum
114. smo e do crescimento dos microorganismos O sensor monitorizado pelo Sistema 9000MB BACTEC a cada dez minutos A an lise da velocidade da diminui o do oxig nio medida pelo aumento da fluoresc ncia permite ao instrumento da s rie fluorescente BACTEC determinar se a leitura do frasco positiva Uma determi na o positiva indica a presen a presuntiva de microorganismos vi veis no frasco A detec o est limitada aos microorganismos que crescer o no meio a 37 C O meio n o selectivo e sustentar o crescimento de outros organismos aer bios incluindo leveduras fungos e bact rias os quais se estiverem presentes podem interferir com o isolamento de micobact rias Os frascos de cultura que se mantenham negativos durante 42 dias e que n o apresen tem sinal vis vel de positividade s o retirados do instrumento e esterilizados antes de serem eliminados REAGENTES Antes do processamento cada frasco de cultura Myco F Lytic BACTEC cont m os seguintes ingredientes activos Lista de Ingredientes AqtiaiProcessada ra 200 4 miss nt ss ii AA ag isn oles UA AS 40 mL qs Base de Meio Liquido Middlebrook 7H9 sem sais de fosfato 0 12 p v Infus o C rebro Cora o 0 5 p v Hidrolisado de Case na 0 10 piv Suplemento Haiti de a A win awed hen ie is ed 0 10 p v Inositol 0 05 p v Glicerol 0 10 p v Polia
115. so positivo Il tasso dei falsi negativi negativo per lo strumento positivo a striscio e o subcoltura stato dello 0 in base alle subcolture termi nali di gt 50 dei flaconi negativi Il tasso di contaminazione determinato durante questa valutazione stato dello 0 9 TABELLA 1 PROSPETTO RIASSUNTIVO DEL RECUPERO DI ISOLATI NEL TERRENO DI COLTURA MYCO F LYTIC DURANTE LE PROVE CLINICHE Totale Terreno Terreno 13A Organismo isolati Myco F Lytic solamente Entrambi solamente Tutti micobatteri patogeni Mycobacterium avium 30 3 1 26 Mycobacterium tuberculosis 6 0 0 6 Mycobacterium kansasii 3 2 1 0 Totale 39 5 2 32 BIBLIOGRAFIA Vedere References a pag 4 14 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 18 BD Frascos de cultivo BACTEC Myco F Lytic Caldo Middlebrook 7H9 suplementado y caldo de infusi n de cerebro y coraz n Espanol DEBE USARSE con BACTEC 9000MB DENOMINACION Los frascos de cultivo BACTEC de tipo Myco F Lytic caldo Middlebrook 7H9 modificado permiten el crecimiento y la detecci n de micobacterias USO PREVISTO Cuando se utiliza el medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic con el instrumento BACTEC 9000MB es un medio de cultivo no selectivo para el cultivo cuali tativo y la recuperaci n de micobacterias de muestras de sangre RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA Desde mediados de la d cada de los afios 1980 y la diseminaci n de la epidemia del SIDA ha aumentado la incidencia de septicemia prod
116. ss bottle neck may be cracked and the neck may break during removal of the flip off cap or in handling Also on rare occasions a vial may not be sealed sufficiently In both cases the contents of the vials may leak or spill especially if the vial is inverted To minimize the potential of leakage during inoculation by syringe of specimen into culture vials use syringes with LUER LOK brand tips A one hand ed inoculation technique and a suitable vial holder should be employed to prevent accidental needle stick injury Before discarding sterilize all inoculated BACTEC Myco F Lytic vials by autoclaving Before sampling positive culture vials for subculturing or staining etc It is necessary to release gas which often builds up due to microbial metabolism Sampling must be performed in a biological safety cabinet and appropriate protective clothing including gloves and masks should be worn See Procedure Section for more information on subculturing LEAKING OR BROKEN VIALS CAUTION Because an inoculated leaking or broken vial may produce an aerosol of mycobacteria including M tuberculosis or other bacteria appropri ate handling should be observed If an inoculated vial is found to be leaking or is accidentally broken during collection or transport use the established procedure in your facility for dealing with mycobacterial spills As a minimum Universal Precautions should be employed Vials should be discarded in an appropriate manner
117. stigning i fluorescensen der er proportional med faldet i iltindholdet En positiv afl sning angiver den formod ede tilstedevaerelse af levedygtige mikroorganismer i dyrkningsglasset PROCEDURENS PRINCIPPER BACTEC Myco F Lytic dyrkningsglasset er beregnet til hurtig detektion af mycobakterier i blod Blodprover er inokuleret i BACTEC Myco F Lytic dyrkn ingsglasset enten med en sprojte eller ved direkte provetagning med en n l og en slange Dyrkningsglasset placeres i BACTEC 9000MB systemet og inkuberes kontinuerligt ved 37 C med bevaegelse hvert 10 minut for at f den maksimale opsamling Hvert dyrkningsglas indeholder en sensor der kan detektere det fald i iltkoncentrationen i glasset der skyldes mikroorganismers stofskifte og v kst Sensoren overv ges af BACTEC 9000MB systemet hvert 10 minut En analyse af hvor hurtigt iltkoncentrationen falder malt ud fra en for get fluorescens s tter BACTEC fluorescent series instrumentet i stand til at afgore om glasset er positivt En positiv afl sning angiver den formodede tilstedevaerelse af levedygtige mikroorganismer i dyrkningsglas set Detektionen er begr nset til de mikroorganismer der kan vokse i det p g ldende medium ved 37 C Mediet er ikke selektivt og vil n re v ksten af andre aerobe organismer inkl gar svampe og bakterier der kan p virke opsamlingen af mycobakterier hvis de er til stede Dyrkningsglas der for bliver negative i 42 dage og som ikke viser synlige tegn p at va
118. str kkelig opsamling med BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmediet FORVENTEDE RESULTATER Hyppigheden af opsamlingstider TTD for kliniske fors g med blodpr ver der er positive i BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmediet er illustreret i fol gende figur 8 7 MOTT 6 MAC a 5 E EN vv 9 4 s 3 c lt 2 1 O 2 6 7 11 13 15 17 19 21 TTD dage YDELSESKARAKTERISTIKA BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmediet blev evalueret med BACTEC 9000MB instrumentet p to kliniske lokaliteter der anses for store undervisningshos pitaler med forskellig geografisk beliggenhed Blandt de undersogte var patienter med formodet mycobakterieinfektion immunsvaekkede patienter og transplantationspatienter BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmedium blev sammenlignet med BACTEC 13A dyrkningsmediet til opsamling og detektion af mycobakterier fra blodpr ver Der blev unders gt i alt 284 blodpr ver i l bet af unders gelsen Det samlede antal patogene mycobakterieisolater der blev opsamlet i l bet af unders gelsen var 39 se TABEL 1 Ud af disse positiver blev fem 13 kun opsamlet i BACTEC Myco F Lytic dyrkningsmedium og to 5 blev kun opsamlet i BACTEC 13A dyrkningsmedium alt 28 BACTEC Myco F Lytic glas blev under den kliniske evauering overfyldt med prove mellem 6 og 20 mL og blev ikke medtaget i denne undersggelse da de var over det maksimale pafyldningsvolumen ikke kompatibel Ud af disse 28 BACTEC Myco F Lytic glas blev 16 5
119. t herun der som positiv kontrol og et ikke inokuleret glas som negativ kontrol Organisme Omr de af tid til visning dage Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 8 til 16 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 3 til 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1til 3 Det positive glas skal inokuleres vha en 1 100 oplosmning af en 1 McFarland oplosning dyrket p fast medium Inokul r glasset med 0 1 mL af den fortyndede opl sning Disse dyrkningsglas og en ikke inokuleret kontrol s ttes i instrumentet og unders ges Instrumentet skal detektere det inokulerede dyrkningsglas som v rende positivt inden for unders gelsens forl b Den negative kontrol skal forblive negativ Hvis kvalitetskontrollen ikke giver de forventede resultater skal man ikke bruge mediet og man skal kontakte Becton Dickinsons tekniske serviceafdeling kun i USA 1 800 638 8663 eller den lokale Becton Dickinson repraesentant for at f hjaelp Se brugsanvisningen MA 0092 for at f oplysninger om kvalitetskontrol af BACTEC 9000MB systemet RAPPORTERING AF RESULTATER Et instrumentpositivt glas kan verificeres ved et syrefast opstrog eller Gram farvning En positiv afl sning angiver den formodede tilstedev relse af lev edygtige mikroorganismer i dyrkningsglasset Hvis bakterierne er syrefaste skal de videredyrkes p fast medium og rapporteres som Instrument positive syrefast positive afventer identifikation Hvis der er andre mikroorganismer end syrefaste bakt
120. ter des v tements protecteurs appropri s y compris masque et gants Voir la rubrique Methode pour les d tails de la m thode de repiquage FLACONS BRISES OU AYANT UNE FUITE ATTENTION Parce qu un flacon inocul cass ou pr sentant une fuite peut produire un a rosol de mycobact ries contenant M tuberculosis ou d autres bact ries il est n cessaire d appliquer les r gles de manipulation en vigueur Si un flacon inocul est reconnu pr senter une fuite ou est accidentellement bris pendant le pr l vement ou le transport suivre les protocoles en vigueur dans votre laboratoire pour traiter tout liquide r pandu contenant des mycobact ries Au minimum les Pr cautions Universelles doivent tre observ es Les flacons doivent tre jet s de la mani re appropri e Dans les cas rares o on s aper oit que le flacon a fuit et r pandu son contenu dans l instrument lui m me ou si un flacon est accidentellement bris teindre l appareil imm diatement Quitter les lieux Contacter le responsable de la s curit ou du contr le des infections de votre tablissement D cider s il y a lieu ou non d arr ter ou de modifier le fonctionnement des unit s de ventilation desservant les lieux affect s Ne pas retourner sur les lieux avant que tout a rosol potentiel ne se soit d pos ou n ait t limin suite une ventilation appropri e Il faut informer la soci t Becton Dickinson and Company en t l phonant votre repr s
121. terium avium MAC De 1985 1992 le nombre de cas de tuberculose confirm s a augment de 18 Entre 1981 et 1987 le suivi des cas de SIDA r v lait que 5 5 des malades du SIDA avaient contract des infections mycobact riennes non tuberculeuses comme MAC D s 1990 l augmentation des cas d infections mycobact riennes non tuberculeuses se traduisait par une incidence cumul e de 7 6 Les U S Centers for Disease Control and Prevention CDC ont recommande que tous les efforts soient faits pour que les laboratoires utilisent les m thodes les plus rapides actuellement disponibles pour tablir un diagnostic des mycobact ries Ces recommandations mentionnent l utilisation d un milieu liquide pour la culture des mycobact ries 1 2 3 Le syst me BACTEC 9000MB a t con u de fa on assurer une d tection rapide des mycobact ries dans des chantillons cliniques Le milieu de culture BACTEC Myco F Lytic correspond une combinaison bouillon Middlebrook 7H9 et bouillon coeur cervelle pour la mise en vidence des mycobacteries partir d chantillons sanguins Des modifications sp cifiques ont t effectu es afin d am liorer la croissance et la mise en vidence des mycobact ries Ces modifications comprennent l addition de citrate d ammonium ferrique comme source de fer pour des mycobact ries particuli res l addition de saponine comme agent de lyse sanguine et l addition de certaines prot ines et de certains sucres titre de suppl
122. tion et de sensibilit LIMITES DE LA METHODE La d tection des esp ces de mycobact ries dans des chantillons sanguins d pend du nombre d organismes pr sents dans l chantillon de la m thode de pr l vement de l chantillon de facteurs propres au patient tels que la pr sence de sympt mes et les traitements ant rieurs Les mycobact ries peuvent donner des r sultats variables pour la coloration acido r sistante suivant la souche l ge de la culture et diverses autres variables Il convient de veiller ne pas contaminer l chantillon au cours du pr l vement et de l inoculation dans le flacon BACTEC Un flacon contamin donnera un r sultat positif selon l appareil mais ne correspondra pas un r sultat clinique significatif Une telle d termination peut tre r alis e par l utilisateur en fonction de facteurs tels que les r sultats de la coloration le type de microorganisme recueilli la pr sence du m me microorganisme dans plusieurs cultures les ant c dents du malade etc PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 7 Les flacons BACTEC Myco F Lytic ne sont pas s lectifs et permettent la croissance d autres organismes a robies en plus des mycobacteries Les flacons positifs peuvent contenir une ou plusieurs esp ces de mycobact ries et ou d esp ces n appartenant pas aux mycobact ries Si des microorganismes croissance rapide sont pr sents ils peuvent masquer les mycobact ries croissance plus lente et emp ch
123. tneho z stupcu spolo nosti BD NAME BACTEC culture vials type Myco F Lytic a modified Middlebrook 7H9 broth support the growth and detection of mycobacteria INTENDED USE BACTEC Myco F Lytic when used with the BACTEC 9000MB instrument is a non selective culture medium for the qualitative culture and recovery of mycobacteria from blood specimens SUMMARY AND EXPLANATION OF THE TEST Since the mid 1980s and spread of the AIDS epidemic the incidence of septicemia caused by opportunistic mycobacteria has risen Mycobacterium tubercu losis MTB and mycobacteria other than tuberculosis MOTT especially Mycobacterium avium complex MAC have become resurgent From 1985 to 1992 the number of MTB cases reported increased 18 Between 1981 and 1987 AIDS case surveillances indicated that 5 5 of the patients with AIDS had dis seminated nontuberculous mycobacterial infections e g MAC By 1990 the increased cases of disseminated nontuberculous mycobacterial infections had resulted in a cumulative incidence of 7 6 The Centers for Disease Control and Prevention CDC have recommended that every effort must be made for laboratories to use the most rapid meth ods available for diagnostic mycobacteria testing These recommendations include the use of a liquid medium for mycobacterial culture 1 23 The BACTEC 9000MB System is designed for the rapid detection of mycobacteria in clinical specimens BACTEC Myco F Lytic Culture medium is a Middlebr
124. todo di prelievo del campione da fattori dipendenti dal malato come la presenza di sintomi e la terapia somministrata in precedenza L acido resistenza dei micobatteri pu variare a seconda del ceppo dell et della coltura e di altre variabili Fare attenzione a non contaminare il campione in fase di raccolta ed inoculo nel flacone BACTEC Un flacone contaminato dar dei valori positivi alla lettura dello strumento senza per indicare un risultato rilevante dal punto di vista clinico La determinazione della contaminazione deve essere effet tuata dall operatore sulla base di fattori quali il risultato delle colorazioni il tipo di organismo isolato la presenza dello stesso organismo in colture diverse la cartella clinica del paziente etc I flaconi BACTEC Myco F Lytic non sono selettivi e favoriscono la crescita anche di altri organismi aerobi oltre ai micobatteri I flaconi positivi possono contenere una o pi specie di micobatteri e o altre specie non micobatteriche Se sono presenti degli organismi a crescita rapida questi possono mascherare il rilevamento dei micobatteri a crescita pi lenta In questo caso necessario eseguire una subcoltura e altre analisi supplementari La coerenza della morfologia microscopica nel BACTEC Myco F Lytic non stata stabilita Per ottenere un recupero ottimale di isolati aggiungere ad ogni flacone 1 5 mL di sangue L uso di volumi superiori o inferiori pu alterare in senso negativo l isolamento i te
125. u plus petit munie d un filtre ad quat travers le coton imbib d alcool et le septum L aiguille doit tre retir e apr s rel chement de la pression et avant de pr lever pour faire un repiquage L insertion et le r trait de l aiguille doivent tre faits suivant un mouvement rectiligne en vitant tout mouvement lat ral qui pourrait endommager le septum de facon permanente Ne pas recapuchonner l aiguille Jeter les aiguilles et les seringues dans un r cipient r sistant aux perforations et pour mat riel pr sentant un risque biologique CONTROLE DE QUALITE Des Certificats de Contr le de Qualit sont fournis dans chaque carton de milieux Il est recommand de tester chaque nouvelle livraison ou lot de milieu BACTEC Myco F Lytic en utilisant les organismes de contr le ATCC donn s dans le tableau ci dessous comme contr le positif et un flacon non inocul comme contr le n gatif Organisme Temps n cessaire pour la d tection jours Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 8 16 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 3 13 Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 1 3 Il convient d inoculer le flacon positif avec une dilution au 1 100 d une suspension McFarland N 1 cultiv e sur un milieu solide Inoculer le flacon avec 0 1 mL de la culture dilu e Ce flacon et un flacon non inocul doivent tre scann s par l appareil et analys s Le flacon inocul doit tre reconnu positif par l appareil dans le d lai du protoco
126. ucida por micobacterias oportunistas Han resurgido la Mycobacterium tuberculosis MTB y micobacterias no tuberculosas MOTT especialmente el complejo Mycobacterium avium MAC Desde 1985 a 1992 el numero de casos informados de MTB aument en un 18 Entre 1981 y 1987 las encuestas de casos de SIDA indicaron que 5 5 de los pacientes con SIDA habian propagado infecciones micobacterianas no tuberculosas como por ejemplo MAC Hacia 1990 el aumento de los casos de infecciones micobacterianas no tuberculosas diseminadas habia resultado en una frecuencia acumulada del 7 6 Los U S Centers for Disease Control and Prevention CDC han recomendado que los laboratorios hagan todos los esfuerzos posibles por utilizar los m to dos m s r pidos a su alcance para el diagn stico y an lisis de micobacterias Estas recomendaciones incluyen el uso de un medio liquido para el cultivo micobacteriano 123 El sistema BACTEC 9000MB est dise ado para la detecci n rapida de micobacterias en muestras clinicas El medio de cultivo BACTEC Myco F Lytic es una formulaci n de Middlebrook 7H9 y caldo de infusi n de cerebro y coraz n para la recuperaci n de micobacterias en muestras de sangre Se han hecho modificaciones especificas para mejorar el crecimiento y recuperaci n de micobacterias Estas modificaciones incluyen la adici n de citrato f rrico am nico como una fuente de hierro para cepas espec ficas de micobacterias la adici n de saponina como un agente
127. ue a repicagem para um meio s lido e descreva como Positivo no instrumento esfrega o AFB negativo ID pendente Se n o existirem microorganismos nos esfrega os efectue a repicagem para um meio s lido volte a introduzir o frasco dentro do instrumento como se fosse um frasco negativo pendente num prazo de 5 horas ap s a remo o e deixe terminar o protocolo do teste Sem resultado a relatar Efectue as repicagens a partir do tubo Myco F Lytic BACTEC para a identifica o e teste da susceptibilidade LIMITA ES DO PROCEDIMENTO A detec o de esp cies de micobact rias em amostras de sangue depende do n mero de organismos presentes na amostra dos m todos de colheita da amostra de factores relacionados com o doente tais como a presen a de sintomas e tratamentos anteriores As micobact rias podem variar na rapidez com que adquirem a colora o cida dependendo da estirpe da idade da cultura e de outras vari veis Dever ter cuidado para evitar a contamina o da amostra durante a colheita e a inocula o dentro do frasco BACTEC Um frasco contaminado apre sentar uma leitura positiva no instrumento mas n o indicar um resultado clinicamente relevante Tal determina o dever ser efectuada pelo uti lizador com base em factores tais como os resultados das colora es o tipo de organismos isolados a ocorr ncia do mesmo organismo em culturas m ltiplas a hist ria do doente etc Os frascos Myco F Lytic BACTEC
128. ueur afin d indiquer le point de d part du pr l vement de l chantillon L espace vide dans le flacon d passe g n ralement 5 mL si bien que l utilisateur doit v rifier le volume recueilli au moyen des graduations 5 mL pr sentes sur l ti quette du flacon Apr s le pr l vement des 1 5 mL de sang requis il faut arr ter l coulement en pingant le tube et en retirant l aiguille du flacon 5 PP124 G 0505 qxd 08 25 2005 8 32 AM Pa 6 BACTEC Le flacon BACTEC doit tre amen au laboratoire le plus rapidement possible et plac dans l appareil BACTEC Un tube VACUTAINER capuchon jaune contenant SPS peut aussi servir pr lever le sang du patient Le tube doit tre amen au laboratoire le plus rapidement possible pour tre transf r dans le flacon de culture BACTEC METHODE Mat riel fourni Flacons de culture BACTEC Myco F Lytic Mat riels requis mais non fournis hotte de s curit biologique autoclave unit de ventilation d sinfectant mycobact ricide alcool isopropyllique 70 orga nismes de contr le de la qualit Mycobacterium intracellulare ATCC 13950 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 et Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 un microscope et les mat riels n cessaires pour la coloration des lames et le repiquage des flacons ATTENTION Les flacons BACTEC Myco F Lytic doivent tre utilis s avec la version 3 6 ou plus du logiciel Inoculation des flacons de culture BACTEC Myco F Lytic 1
129. un flacon pr sentant des signes de contamination de fuite ou de d t rioration La contamination du flacon peut ne pas apparaitre clairement Les flacons devenus contamin s peuvent tre sous pression Si un flacon contamin est utilis pour le pr l vement direct le gaz ou les milieux contamin s peuvent refluer dans la veine du patient Occasionnellement le goulot du flacon de verre peut tre f l et il peut se rompre quand la capsule de protection est enlev e ou pendant les manipulations De plus un flacon peut de temps autre ne pas avoir t convenablement bouch Dans les deux cas le contenu du flacon risque de fuir ou de se r pandre en particulier si le flacon est retourn Afin de minimiser les risques de fuite pendant l inoculation de l chantillon dans les flacons de culture avec une seringue utiliser une seringue munie d un embout LUER LOK Une technique d inoculation utilisant une seule main et un support flacons ad quat devrait tre employ e afin de r duire les risques de piq re accidentelle Avant de les jeter st riliser l autoclave tous les flacons BACTEC Myco F Lytic inocul s Avant d effectuer un pr l vement sur les flacons de culture positifs pour les repiquages ou les colorations etc il est necessaire de rel cher les gaz qui se sont accumul s du fait du m tabolisme microbien Les prelevements doivent amp tre effectu s dans une hotte biologique de s curit biologique et il convient de por
130. vena del paciente En raras ocasiones el cuello del frasco de vidrio puede estar rajado y puede romperse al quitar el tap n a presi n o al manipular el frasco Tambi n en raras ocasiones es posible que un frasco no est bien precintado En ambos casos el contenido de los frascos puede gotear o derramarse especialmente si se invierte el frasco Para reducir al minimo la posibilidad de producirse p rdidas durante la inoculaci n de las muestras en frascos de cultivo utilizando una jeringa use jeringas con puntas LUER LOK Se debe utilizar la t cnica de inoculaci n con una sola mano y un soporte adecuado para el frasco para evitar el riesgo de pincharse accidentalmente con la aguja Todos los frascos BACTEC Myco F Lytic inoculados deben esterilizarse en el autoclave antes de desecharse Antes de obtener una muestra para subcultivos o tinci n etc de los frascos de cultivo positivos Es necesario liberar el gas que frecuentemente se acu mula debido al metabolismo microbiano La toma de muestras debe efectuarse en una c mara de seguridad biol gica El operario debe llevar puesta ropa de protecci n incluyendo guantes y mascarilla V ase la secci n titulada Procedimiento para obtener m s informaci n sobre subcultivos FRASCOS ROTOS O MAL SELLADOS PRECAUCION Como un frasco roto o mal sellado que ha sido inoculado puede producir un aerosol de micobacterias incluyendo M tuberculosis u otras bacterias la manipulaci n apropiada deb

Notes:

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents