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Spettrofotometro Agilent 8453

1. presente uno sportello pi interno di lamiera e due interruttori di sicurezza indipendenti che spengono automaticamente le lampade quando lo sportello interno aperto Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 17 1 Introduzione al sistema Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica In questa sezione viene fornita una panoramica dell interfaccia utente fornita dal software Agilent ChemStation e vengono illustrati i fondamenti teorici dell analisi dei dati Viene illustrato il metodo di elaborazione dei dati sottolineandone anche i vantaggi dal punto di vista pratico 18 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica Elementi dell interfaccia utente Interruttore modo Nome metodo Barra dei menu Barra degli strumenti Pannello di analisi Pannello dello strumento Il software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili facilita l uso dello spettrofotometro a matrice di fotodiodi in condizioni normali Il software stato concepito per un facile apprendimento e uso L interfaccia utente che visualizza il funzionamento e l uso dello spettrofotometro comprende numerosi elementi che verranno descritti nelle sezioni segu
2. Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 69 4 70 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Salvataggio e recupero dei dati 3 Selezionare uno dei file di dati gi esistenti nella finestra File name del dialogo Save Spectra As o digitare un nome file valido nella finestra File name Save Spectra As ADVEXAM2 5SD ADVEXAM3 SD ADVEXAM4 SD ADVEXAMS SD ADVEXAM7 SD ADVEXAMS SD BENZENE SD CHROM SD Spectra SD STD c HARDDISK x 4 Premere OK per avviare l operazione Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Salvataggio e recupero dei dati Recupero degli spettri 1 Selezionare Load Samples nel menu File 845x UV Visible System 1 Offline TK Edt Method Measure Instrument Math V b 5 4 Save bl Standards 2 Selezionare il file di dati nella finestra File name della finestra di dialogo Load Spectra to SAMPLES File Name Directories CAFFEI NE SD c hpchem 1 data ADVEXAM2 SD ADVEXAM3 SD ADYEXAM 4 5D ADVEXAM5 SD ADVEXAM7 SD ADVEXAM8 SD BENZENE SD CAFFEINE SD List Files of Type Spectra SD STD 7 c HARDDISK 7 File Information c hpchem 1 data caffeine sd SPECTRA Sample Name Caffeine 10mg L Number of Samples 1 Date 10 18 99 Time 16 15 19
3. Verifica del corretto funzionamento del sistema Agilent 8453 La qualit dei dati delle misurazioni dipende dal funzionamento dello spettrofotometro Per una verifica completa del funzionamento dell apparecchio sono necessari standard esterni Le relative procedure sono descritte nel manuale Operational Qualification Performance Verification Jor Agilent 8453 UV visible Spectroscopy Systems Un rapido controllo senza ricorrere a standard esterni pu essere condotto attraverso il self test del modo Verification and Diagnostics Questo test pu essere sempre condotto subito dopo aver avviato lo spettrofotometro Self test del sistema Agilent 8453 1 Verificare di trovarsi nel modo Verification and Diagnostics Il modo indicato sulla barra degli strumenti della sessione di Agilent ChemStation Mode Verification and Diagnostics M 2 Selezionare l attivit Self Test nella finestra del pannello di analisi Task 94 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Verifica del corretto funzionamento del sistema Agilent 8453 3 Selezionare Self Test Start nel menu Task o fare clic su Start per avviare il self test NOTA Prima dell avvio del test lo spettrofotometro dovrebbe trovarsi in condizioni stabili di funzionamento Se queste condizioni non sono presenti potr esse
4. NOTA Si possono visualizzare le informazioni relative a un file spostando la selezione nella finestra di selezione del file Le informazioni sono sempre aggiornate alla selezione corrente Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 71 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Salvataggio e recupero dei dati 3 Fare clic su OK per avviare l operazione Gli spettri disponibili nel file di dati vengono aggiunti ai file gi presenti nel contenitore dei campioni di Agilent ChemStation Cancellazione degli spettri presenti 1 Selezionare Clear Samples nel menu Edit o fare clic sull icona della barra degli strumenti 845x UY Yisible System 1 Offline TK Clear File Method Measure Instrument Math Yiew Mc Il y CI Suf Cirle copy Eite IN Paste ERA Haste Append SHIHET EY Ta Select All Fi Copy to Clipboard Standards REE Annotate Math Results NOTA Digitando Clear Standards e Clear Math si possono cancellare dalla memoria di Agilent ChemStation i risultati ricavati mediante calcoli matematici dagli spettri e i relativi standard 72 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Anteprima di stampa dei rapporti L anteprima di stampa permette di visualizzare un rapporto in un apposita finestra di Agile
5. di materiale ceramico in modo da ridurre al minimo gli effetti della temperatura I principali componenti dello spettrografo sono la lente la fenditura il reticolo e la matrice di fotodiodi con componenti elettronici front end L intervallo medio di campionamento della matrice di fotodiodi 0 9 nm nella gamma di lunghezza d onda 190 1100 nm La larghezza nominale della fenditura per lo spettro 1 nm Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 e Lente dello spettrografo La lente la prima delle parti di cui composto lo spettrografo Montata sulla cassa dell apparecchio rimette a fuoco il fascio di luce collimata dopo che questo ha attraversato il campione e Fenditura La fenditura una stretta apertura della piastra nel punto di fuoco della lente dello spettrografo Ha esattamente le dimensioni di uno dei fotodiodi e limita le dimensioni del fascio luminoso in entrata facendo in modo che ogni banda di lunghezza d onda venga proiettata solo sul fotodiodo appropriato e Reticolo La combinazione di dispersione e visualizzazione dello spettro viene ottenuta usando un reticolo olografico concavo Il reticolo disperde la luce sulla matrice di diodi con un angolo proporzionale alla lunghezza d onda e Matrice di diodi La matrice di fotodiodi rappresenta il cuore dello spettrografo Consiste in una serie di 1024 fotocopie singole e circuiti di cont
6. Introduzione al sistema Questo orientamento preventivo verso le attivit pi comuni permette di regolare rapidamente il software in modo che fornisca la prospettiva e le risposte corrette in base ai dati presenti Le attivit sono state selezionate in base a un indagine sulle pi frequenti attivit dei laboratori di analisi nel campo della spettroscopia per radiazioni UV visibili Storicamente queste attivit sono state sviluppate su colorimetri a filtro o spettrofotometri a scansione Questo spettrofotometro presenta il vantaggio di mettere a disposizione per default l intero spettro delle radiazioni UV visibili dei campioni Quindi le quattro attivit offrono solo la possibilit di disporre di diversi punti di vista sui dati acquisiti Il passaggio da un attivit all altra all interno del modo Standard molto pi rapido del cambiamento completo di modo Un altro vantaggio che la definizione di un metodo pu essere effettuata all interno di una singola finestra di dialogo Fixed Wavelength Task Fixed Wavelengths M L attivit Fixed Wavelength consente di osservare i dati relativi al campione misurato a un massimo di sei lunghezze d onda diverse I dati sono disponibili sotto forma di fattore di assorbimento trasmittanza e da una a quattro derivate Grazie a ulteriori tecniche di acquisizione dello spettro come il metodo di riferimento interno o il metodo dei tre punti possibile apportare correzioni del fon
7. base corretta e una scorretta v L orientamento della cella nella misurazione a vuoto e in quella della sostanza da analizzare lo stesso v Se possibile tra una misurazione e l altra la cella non viene tolta ma riempita e lavata con una pipetta oppure viene utilizzata una cella a flusso v Illasso di tempo intercorrente tra la misurazione a vuoto e quella della sostanza da analizzare dovrebbe essere breve 0 0015 0 0010 0 0005 0 0000 0 0005 0 0010 200 400 600 800 1000 Figura 9 Esempio di una misurazione a vuoto eseguita su acqua che presenta una linea di base adeguata Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 51 3 52 Pratiche di misurazione corrette 0 01 0 00 0 01 0 02 0 03 0 04 200 400 600 800 1000 Figura 10 Esempio di una misurazione a vuoto eseguita su acqua con presenza di bolle che provocano una linea di base inadeguata Se il campione di riferimento o gli spettri mostrano artefatti simili a quello della Figura 10 vedere Solventi a pagina 46 per ottimizzare la procedura di misurazione Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Inserimento di una cella Pratiche di misurazione corrette Alla consegna nella confezione dello spettrofotometro presente anche un contenitore singolo standard da installare nel compartimento del campione Questo contenitore pu accogliere
8. celle standard o celle a flusso Per inserire una cella campione nel contenitore 3 1 Portare in alto la leva di blocco 2 Inserire la cella del campione assicurandosi che sia orientata correttamente lati smerigliati non trasparenti della cella non dovrebbero trovarsi sul tragitto del fascio luminoso Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 53 3 Pratiche di misurazione corrette 3 Fissare la cella in sede spingendo di nuovo verso il Le celle a flusso di volume ridotto e soprattutto le basso la leva di blocco celle con un apertura inferiore a 2 mm possono rendere necessario l uso del contenitore regolabile a opzionale che aiuta a centrare correttamente la cella 2 sul tragitto della luce 54 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Agilent 8453 Sistema di spettroscopia per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Awvio della prima sessione di misurazione 56 Awvio del software per radiazioni UV visibili 58 Misurazione del fattore di assorbimento della caffeina a 273 nm 59 Salvataggio dei parametri come metodo 62 Recupero e stampa dei dati 64 Salvataggio e recupero dei dati 67 Anteprima di stampa dei rapporti 73 Ricerca del fattore di assorbimento massimo della caffeina 76 Inserimento della lunghe
9. diversi di curve di calibrazione e a un gruppo di standard Inoltre grazie all acquisizione dello spettro possibile anche apportare correzioni del fondo ai dati La calibrazione pu essere ottimizzata per un intervallo specifico di concentrazione modificando la lunghezza d onda usata per la calibrazione Vengono eseguite automaticamente una nuova calibrazione e una nuova analisi sulla base dei dati correnti dello standard Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica Elaborazione dei dati nel modo Standard Elaborazione generale dei dati Anche se non strettamente necessaria per usare il software Agilent ChemStation la conoscenza della modalit interna di flusso e di elaborazione dei dati aiuta a comprendere come avvenga l elaborazione dei dati nel software e come tale elaborazione sia controllata dai parametri del metodo prescelto L elaborazione dei dati pu essere descritta facilmente attraverso un diagramma di flusso formato da vari contenitori di dati e di funzioni Elaborazione degli spettri Accesso ai dati Valutazione dei dati Tutti i dati di base entrano in un contenitore Dati non elaborati All avvio della sessione di Agilent ChemStation il contenitore vuoto e si riempie a mano a mano che vengono condotte le misurazioni o caricati i dati da
10. eliminare valori erratici di calibrazione semplicemente cancellando il relativo standard dal gruppo degli standard Metodo calibrato Quando si salva un metodo insieme a esso vengono sempre salvati anche gli standard presenti in memoria Dopo aver caricato un metodo possibile analizzare direttamente i campioni Ottimizzazione per un particolare campione Inoltre possibile ottimizzare le regolazioni delle lunghezze d onda di un campione non comprese nella gamma lineare dei valori della calibrazione corrente Grazie all ottima riproducibilit delle lunghezze d onda da parte dello spettrofotometro possibile passare a un lunghezza d onda con un minore coefficiente di estinzione ottenendo un analisi pi precisa del campione Riassunto La disponibilit di dati non elaborati sullo spettro offre molte altre possibilit per ottimizzare la calibrazione e l analisi e quindi ottenere migliori risultati Tale ottimizzazione pu essere effettuata in modo rapido semplicemente fissando nuovi parametri per quel metodo I nuovi risultati vengono visualizzati quasi istantaneamente La base teorica del processo di analisi dei dati assicura risultati attendibili e uniformi Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Agilent 8453 Sistema di spettroscopia per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 2 Installazione e avvio Riassunto dell installazione del sistema generale Agilent 8453
11. evitare la contaminazione della cella da parte di frammenti di carta velina oppure lavarla con soluzione neutra o soluzione campione La presenza di particelle fluttuanti nella cella provoca deviazione del fascio luminoso producendo valori dello spettro di qualit molto bassa Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Pratiche di misurazione corrette 3 Le particelle fluttuanti deviano e disperdono il fascio luminoso gt Figura 7 Particelle fluttuanti nella cella 0 01 0 00 0 01 0 02 0 03 0 04 200 400 600 800 1000 Figura 8 Misurazione dello spettro con particelle fluttuanti lungo il tragitto della luce Spesso la carta velina per la pulizia delle lenti o per altri usi contiene sostanze detergenti o lubrificanti che possono falsare le misurazioni Se possibile non pulire le facce della cella tra la misurazione a vuoto e quella del campione Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 45 3 Pratiche di misurazione corrette AVVERTENZA Manipolazione delle celle Sistemare la cella in modo che sia sempre orientata nello stesso modo per ridurre al minimo i problemi di mancanza di uniformit tra le celle Per ottenere migliori risultati con le microcelle lasciare la cella campione in sede per tutta la sequenza di misurazione Le soluzioni presenti dovrebbero essere eliminate e sostituite con una pi
12. m In una sequenza automatizzata il sistema di trasporto multicella pu essere usato per l introduzione automatica dei campioni E possibile introdurre un massimo di 8 campioni Se si indicano pi di 8 posizioni viene visualizzata la seguente avvertenza Automation possibile anche controllare un sistema di trasporto multicella a 7 posizioni Le principali differenze sono che una posizione di riferimento assente e che presente una cella in meno 86 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Analisi quantitativa mediante calibrazione con standard L analisi quantitativa basata su una calibrazione con standard Dopo una calibrazione riuscita gli standard misurati possono entrare a far parte di un metodo che pu essere poi usato direttamente per l analisi quantitativa dei campioni Una volta predisposto il metodo possibile analizzare i campioni Sono disponibili diverse visualizzazioni degli standard e della calibrazione sia sui campioni che sui risultati Come rapida introduzione vengono illustrati una calibrazione effettuata utilizzando la legge di Beer con un solo standard e l analisi di un campione Inoltre l unico limite al numero dei campioni e di standard la capacit di memoria dell Agilent ChemStation Per l esperimento pratico come standard viene usato un campione d
13. radiazioni UV visibili vengono illustrati passo per passo procedure ed esempi delle principali operazioni e attivit Agilent Technologies Deutschland GmbH 2002 2003 Stampato in Germania 10 2003 E DE Agilent Technologies
14. un fattore di bloccaggio del 50 a 420 nm Con il filtro in sede le radiazioni luminose di lunghezza d onda inferiore a 400 nm sono considerate luce parassita L intensit della luce parassita viene sottratta dal primo spettro fornendo un valore dello spettro con correzione della luce parassita A seconda del software utilizzato possibile disattivare la correzione della luce parassita software Agilent ChemStation se si desidera effettuare scansioni ripetute molto rapide oppure disattivarla automaticamente mediante il software controllore palmare Compartimento del campione Lo spettrofotometro dotato di un compartimento per il campione aperto che facilita l accesso alla cella contenente il campione Grazie al particolare disegno del compartimento ottico la zona del campione non necessita di coperchio Alla consegna nel compartimento dello spettrofotometro gi installato un contenitore singolo per cella che pu essere sostituito con un regolatore termico Peltier con un contenitore dotato di termostato con un contenitore regolabile con un contenitore con percorso lungo o con un sistema di trasporto multicella Tutti questi contenitori opzionali possono essere montati nel compartimento con un unico sistema di montaggio semplice e rapido Inoltre disponibile un filtro ottico a disco che pu essere impiegato sia con lo spettrofotometro che con la maggioranza degli accessori Spettrografo La cassa dello spettrografo
15. un file Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 29 1 Introduzione al sistema Elaborazione degli spettri Lunghezza d onda 30 usata Il contenitore Dati non elaborati contiene i dati acquisiti in origine in base ai parametri di acquisizione ed contrassegnato ad esempio dalla data e dall ora di acquisizione e anche dal nome dell operatore Data type Absorbance Transmittance Absorbance 1st Derivative 2nd Derivative 3rd Derivative Il metodo prescelto definisce il metodo di analisi dei dati Il primo passaggio l elaborazione degli spettri Gli spettri elaborati a partire dai dati non elaborati vengono trasferiti automaticamente in un secondo contenitore Spettri elaborati Ci permette di esaminare i risultati di questa fase di elaborazione osservando il contenuto del contenitore Spettri elaborati Se ad esempio viene specificato il primo tipo di dati derivati dopo l analisi nel contenitore Spettri elaborati sono disponibili i primi spettri derivati da tutti i dati non elaborati Il tipo di operazione condotta sugli spettri definito dalle regolazioni del metodo prescelto Wavelengths Use wavelength 260 nm Background three point drop line 200 360 Gt Il passo successivo del processo di analisi dei dati l accesso ai dati per un ulteriore valutazione definita in termini di lunghezza d onda e di operazioni di correzione
16. visualizzato il nome ad esempio sistema Agilent 845x per radiazioni UV visibili 1 845x UY Visible System 1 Offline TK File Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help La sessione di ogni strumento permette solo l analisi dei dati e il controllo di quello strumento Sul PC pu essere avviata una sola sessione di controllo dello strumento associata all indicazione Online Tuttavia si possono lanciare pi sessioni di analisi dei dati associate all indicazione Offline Le sessioni offline permettono di effettuare calcoli in base ai dati gi acquisiti e sono utili per il processo di sviluppo di un metodo di analisi Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 23 1 24 Introduzione al sistema Livelli di funzionamento I livelli di funzionamento ovvero livello di gestione e livello di avvio validi per tutti i modi permettono di gestire e avviare una sola applicazione per volta Di solito nel livello di gestione di un applicazione un metodo viene sviluppato e memorizzato in modo permanente sul disco fisso Il livello di gestione protetto da una password Ci serve a salvaguardare l integrit dei metodi e delle sequenze di funzionamento predefiniti Nel livello di avvio disponibile solo un gruppo ridotto di funzioni In particolare non sono disponibili funzioni che possano intaccare l integrit di una procedura di analisi Tuttavia un operator
17. zona del campione e il collegamento dei tubi al contenitore di una cella a flusso o a un contenitore dotato di termostato Esecuzione delle misurazioni Misurazione a vuoto di riferimento e misurazione del campione Lo spettrofotometro un apparecchio a fascio singolo e quindi prima di procedere alla misurazione di un campione occorre effettuare una misurazione a vuoto Per ottenere una precisione elevata la misurazione a vuoto e quella del campione devono avvenire in rapida successione In genere la misurazione a vuoto dovrebbe essere ripetuta il pi spesso possibile Anche in un ambiente termicamente stabile per ottenere risultati precisi si dovrebbe eseguire una misurazione a vuoto ogni mezz ora Dal punto di vista chimico l unica differenza tra il campione di riferimento e il campione da misurare dovrebbe essere la presenza della sostanza da analizzare Per le misurazioni con campioni liquidi per la misurazione a vuoto dovrebbe essere una cella riempita del solvente che si prevede di utilizzare Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Pratiche di misurazione corrette 3 Materiale della cella campione Se si desidera operare nell intera gamma di lunghezze d onda dello spettrofotometro 190 1100 nm occorre usare celle campione di quarzo o celle campione con facce di quarzo Se si prevede di operare solo nella gamma 350 1100 nm radiazioni visibili e o onde cor
18. 3 3 44 Pratiche di misurazione corrette Celle a flusso Per ottenere misurazioni di alta precisione si raccomanda di usare un sistema di aspirazione insieme alla cella a flusso L uso di una cella a flusso elimina la necessit di spostare la cella tra la misurazione a vuoto e quella del campione Inoltre la cella pu essere lavata insieme alla soluzione da misurare Il disegno della cella a flusso dovrebbe ridurre al minimo l intrappolamento di bolle e la canalizzazione del flusso fornendo risultati della massima attendibilit Manipolazione e conservazione delle celle Passivazione di celle nuove Quando si riempie una cella nuova non passivata con il campione si osservano bolle d aria adese alle finestre della cella Per evitare la formazione di queste bolle occorre pulire la cella con un prodotto detergente e passivante n catalogo 5062 8529 La procedura di pulizia descritta sull etichetta del contenitore del prodotto Pulizia delle celle Il grasso presente sulle dita assorbe in modo significativo le radiazioni nella regione degli UV e se non viene eliminato dalle superfici ottiche pu dar luogo a risultati erronei Eliminare eventuali ditate o sostanze contaminanti dalla cella campione prima di usarla Usare solo carta velina per la pulizia di lenti di qualit elevata n catalogo 9300 0761 e non asciugare mai l interno della cella con la carta velina Asciugarlo con aria pressurizzata priva di olio per
19. Agilent 8453 A Sistema di spettroscopia per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore egege Agilent Technologies Avvisi Agilent Technologies Inc 2002 2003 Nessuna parte di questo manuale pu essere riprodotta in alcun formato o con alcun mezzo inclusa l archiviazione e la scansione elettroniche o la traduzione in una lingua straniera senza previo consenso scritto di Agilent Technologies Inc secondo le disposizioni di legge sul diritto d autore degli Stati Uniti internazionali e locali appli cabili Codice del manuale G1115 94021 Edizione 10 2003 Stampato in Germania Agilent Technologies Deutschland GmbH Hewlett Packard Strasse 8 76377 Waldbronn Microsoft un marchio registrato di Microsoft Corporation negli Stati Uniti Revisione software Questo manuale contiene informazioni relative al software ChemStation Agilent versioni A 10 xx dove xx indica un numero compreso fra 00 e 99 e si riferisce a modifiche di lievi entit del software che non influiscono in aleun modo sull accuratezza tecnica del presente volume Garanzia Le informazioni contenute in questo documento sono fornite allo stato cor rente e sono soggette a modifiche senza preavviso nelle edizioni future Agilent non rilascia alcuna garanzia esplicita o implicita relativamente al presente manuale e alle informazioni in esso contenute Salvo il caso di dolo o colpa grave Agilent non sar responsabile di er
20. Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica 18 Elementi dell interfaccia utente 19 Struttura del software 23 Attivit del modo Standard 25 Elaborazione dei dati nel modo Standard 29 Installazione e avvio 35 Riassunto dell installazione del sistema generale Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 36 Generale 36 Spettrofotometro 36 PC 37 Avvio di una sessione di misurazione 38 Pratiche di misurazione corrette 39 Considerazioni generali 40 Disegno dello spettrofotometro 40 Esecuzione delle misurazioni 40 Materiale della cella campione 4 Specifiche ottiche delle celle 41 Celle dotate di aperture 42 Celle a flusso 44 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Sommario Manipolazione e conservazione delle celle 44 Solventi 46 Preparazione del campione 48 Campioni fotosensibili 49 Miscelazione e controllo della temperatura 49 Lista di controllo per ottenere i migliori risultati 50 Inserimento di una cella 53 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 55 Avvio della prima sessione di misurazione 56 Avvio del software per radiazioni UV visibili 58 Misurazione del fattore di assorbimento della caffeina a 273 nm 59 Salvataggio dei parametri come metodo 62 Recupero e stampa dei dati 64 Salvataggio e recupero dei dati 67 Salvataggio dei campioni 67 Salvataggio di uno spettro selezionato 69 Recupe
21. The Diode Array Advantages Instrumental Specifications Accessories Making Measurements Quantitative Analysis Multicomponent Quantification Kinetics Enzyme Kinetics Thermal Denaturation Derivative Spectroscopy Solving Analytical Problems X Print Cancel Inoltre vengono illustrate le soluzioni di vari problemi dell analisi per radiazioni UV visibili In quella sede possibile trovare suggerimenti su argomenti come Aumento della sensibilit o Determinazione della purezza Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 97 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Risorse per ulteriori informazioni sulla spettroscopia per radiazioni UV visibili Esempi pi specifici comprendenti i dati sono disponibili nella sezione Standard Mode Examples della guida Gli esempi possono essere utilizzati per migliorare il funzionamento del software Agilent ChemStation per uno scopo specifico Help Topics Basic Operation Installation Basic Operation w Standard Mode u Calibration and Quantification of a Single Component Checking the Purity of a Sample by a Ratio Calculation Confirming the Identity of a Sample by Peak Comparison and Correcting for Background Absorbance Using an Internal Reference to Improve Reproducibility Using an Internal Reference to Improve the Sensitivity of a Q 2 Using Derivative to Emphasize D
22. a misurazione di riferimento Abbassare la leva del contenitore della cella 8 Premere il pulsante Sample posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Sample sul pannello strumento per avviare la misurazione 9 Viene visualizzato lo spettro del campione di caffeina Sono stati individuati due picchi su cui annotata la relativa lunghezza d onda Sotto il grafico dello spettro la Sample Result Table mostra la lunghezza d onda dei picchi individuati e i valori del fattore di assorbimento misurati 78 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Ricerca del fattore di assorbimento massimo della caffeina XX Overlaid Sample Spectra Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 79 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Inserimento della lunghezza del percorso della cella 80 Le celle impiegate per le misurazioni sono corredate dai parametri del sistema di campionamento Nei calcoli quantitativi questi parametri vengono usati per calcolare i risultati Data la possibilit di scegliere diverse lunghezze di percorso della cella necessario inserire il valore corretto del percorso Di solito questo dato viene fornito dal fabbricante delle celle In caso di manipolazione manuale delle celle la lunghezza del perc
23. ada al tungsteno per le radiazioni visibili e le onde corte infrarosso vicino Short Wave Near InfraRed SWNIR Le radiazioni emesse dal filamento della lampada al tungsteno vengono messe a fuoco sull apertura di scarica della lampada al deuterio grazie al particolare disegno ad accesso posteriore della lampada che permette la combinazione ottica di entrambe le fonti luminose e la loro condivisione di un asse comune con la lente origine La lente forma cos un unico fascio di luce collimata che attraverso l otturatore il filtro di correzione della luce parassita e il campione raggiunge una seconda lente e la fenditura dello spettrografo Nello spettrografo la luce viene dispersa sulla matrice di diodi da un reticolo olografico Ci assicura l accesso simultaneo ai dati relativi a tutte le lunghezze d onda Il risultato un aumento netto della velocit di acquisizione degli spettri luminosi 10 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Otturatore filtro luce parassita Lampada al tungsteno Fenditura Lente sorgente Reticolo Lente sorgente Matrice fotodiodi Figura 1 Sistema ottico dello spettrofotometro e Lampade La sorgente delle radiazioni luminose nella gamma dell ultravioletto una lampada al deuterio con un apertura trasparente In seguito alla scarica di plasma nel deuterio a bassa pressione la lampada emette radiazioni luminose
24. ali 48 display 22 distanza connettore 16 E elaborazione 29 spettri 30 standard 32 elemento attivo 21 equazione 25 31 equazione impostabile dall utente 28 esecuzione delle misurazioni 40 esempi 98 estinzione coefficiente 34 etere etilico 47 etilacetato 47 F fascio collimato 10 fascio luminoso 41 44 fascio singolo apparecchio a 40 fattore di assorbimento 26 elevato 57 fattore di assorbimento variazioni rapide 49 fenditura 10 13 fenditura larghezza 12 filtro di correzione della luce parassita 10 11 filtro di esclusione 49 filtro ottico 49 finestra 22 grafico 22 sample results table 30 tabella 22 finestra di dialogo method options amp information 63 parametri lunghezza d onda fissa 60 finestra di dialogo di impostazione 20 finestra principale dell applicazione 23 fixed wavelength 25 26 59 formazione di bolle 48 formiato di metile 47 fotodegradazione 49 funzionamento livelli 24 funzionamento verifica 94 102 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore G gamma delle lunghezze d onda utili dei solventi 46 glicerolo 47 GPIB connettore 17 GPIO connettore 16 gruppo di parametri 25 guida fondamenti della spettroscopia per radiazioni UV visibili 97 identit 28 indicatore 14 indirizzo IP 36 37 38 56 Installation Qualification IO 59 installazione 36 interfaccia utente elementi 19 intervallo
25. ando si modifica la cella di misurazione o il suo orientamento rispetto alla posizione di misurazione e quando si usa un solvente diverso o anche un diverso lotto dello stesso solvente e quando trascorso troppo tempo tra la misurazione di riferimento e la misurazione del campione e dato che le condizioni temporali dipendono dalla velocit di invecchiamento delle lampade e da possibili variazioni delle condizioni ambientali generalmente non dovrebbe essere trascorsa pi di mezz ora dall ultima misurazione di riferimento Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 99 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Frequenza della misurazione di campione di riferimento blank 100 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Indice A accesso alle lampade 17 acetone 47 acetonitrile 47 acido acetico 47 acido solforico 47 acqua 47 acqua per HPLC 48 acqua per UV 48 acquisizione data 30 ora 30 Agilent ChemStation anteprima di stampa 73 campioni 72 caricamento 58 dimensioni anteprima 75 display stampante 75 famiglia 23 finestra del grafico 69 metodo 62 modo 24 pannello di analisi 59 76 password 58 sessione 23 sessione di misurazione 56 sessione offline 58 sessione online 57 58 workstation 33 agitazione 48 alcool isopropilico 47 alcool n butilico 47 ali
26. are la leva del contenitore della cella 4 Premere il pulsante Standard posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Standard sul pannello strumenti per avviare la misurazione 90 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Analisi quantitativa mediante calibrazione con standard Standard Information Standard 1 5 Inserire i dati sullo standard nella finestra Standard Information e fare clic su OK 6 Il software Agilent ChemStation calibra e visualizza automaticamente i risultati della calibrazione Dopo una calibrazione riuscita la curva di calibrazione del pannello di attivit diventa verde Ci indica che il metodo pronto per l analisi Quantification Setup Per passare dalla visualizzazione corrente a quella dei campioni o degli standard si possono usare i pulsanti Samples e Standards del pannello di attivit A questo punto anche possibile salvare il metodo per un uso futuro Per maggiori informazioni vedere Salvataggio dei parametri come metodo a pagina 62 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 91 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Analisi 92 1 Ricordare l orientamento della cella nel contenitore Sollevare la leva e liberare la cella estra
27. arte frontale 13 parte posteriore 16 spettrografo 12 fenditura 10 lente 10 spettroscopia in derivata 97 spettroscopia per radiazioni UV visibili fondamenti 97 sportello per l accesso alle lampade 17 stampante 37 38 configurata 73 104 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore standard 28 32 87 Z corrente 32 esterno 94 numero di 33 numero minimo necessario 33 standard pulsante 15 stato 38 stato indicatore 14 stop pulsante 15 strumento aspetto 10 descrizione 13 disegno 10 gruppi elettronici 10 gruppi meccanici 10 riscaldamento 57 strumento sessione 23 superfici ottiche 44 sviluppo di un metodo di analisi 23 T temperatura controllo della 48 test di flusso 82 tetracloruro di carbonio 47 toluene 47 trasmittanza 26 trimetilpentano 2 2 4 trimetilpentano 47 tungsteno lampada 10 tutorial principi fondamentali 97 spettroscopia in derivata 97 zona attiva 21 V valori erratici 34 visualizzazione 26 calibrazione 87 campioni 61 78 risultati 87 92 standard 87 volume 28 vuoto 40 50 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Indice 105 Indice 106 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore www agilent com In questo libro Per imparare rapidamente a usare il nuovo sistema di spettroscopia Agilent 8453 per
28. azione un modo per prevenire l insorgere di questo tipo di problema In una cella non rimescolata a volte possibile osservare una fotodegradazione locale delle sostanze da analizzare sensibili Dato che il volume effettivo del campione che si trova sul tragitto della luce molto ridotto rimescolando il campione si riduce il tempo in cui una molecola della sostanza da analizzare si trova sul tragitto della luce Ci riduce al minimo la fotodegradazione e aumenta l omogeneit Risultati simili si possono ottenere usando una cella a flusso con un flusso continuo Lista di controllo per ottenere i migliori risultati Cella v Cella di quarzo o vetro v Celle dotate di aperture con i lati neri v Celle dotate di aperture di dimensioni pari o superiori a 3 mm v Assenza di ditate o di altri contaminanti dalle finestre delle celle Y Uso di celle a flusso invece che di celle standard provviste di aperture Misurazioni Y Soluzione presente nella cella priva di particelle fluttuanti Y Soluzione nella cella e pareti della cella prive di bolle Y Soluzione nella cella miscelata in modo omogeneo v Materiale di riferimento misurato sullo stesso solvente del materiale da analizzare Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Pratiche di misurazione corrette 3 v La misurazione a vuoto mostra una linea di base piatta le Figura 9 e Figura 10 a pagina 52 mostrano rispettivamente una linea di
29. ce come tipo di dati e regolare il display dello spettro a una gamma di lunghezze d onda compresa tra 190 e 400 nm nella sezione Display spectrum Fare clic su OK per fissare i parametri Spectrum Peaks Parameters rPeak Yalley find X Find and annotate up to Find and annotate up to eo peaks I valleys Prompt for sample information Data type Display spectrum From 190 Absorbance RA 5 Riempire di acqua distillata la cella di quarzo con percorso di 1 cm Sollevare la leva posta a sinistra del contenitore Sistemare la cella nel contenitore e assicurarsi che le finestre trasparenti siano rivolte verso le parti anteriore e posteriore dello spettrofotometro Abbassare la leva per fissare la cella nel contenitore 6 Premere il pulsante Blank posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Blank sul pannello strumenti del PC per avviare la misurazione Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 77 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Sampling 7 Ricordare l orientamento della cella nel contenitore Sollevare la leva e liberare la cella estrarla e lavarla tre volte con circa 1 ml del campione di caffeina Poi riempire la cella con circa 3 ml del campione di caffeina Verificare che le finestre della cella siano pulite e riposizionare la cella con lo stesso orientamento che aveva nell
30. celle manipolazione 46 cicloesano 47 ciclopentano 47 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 101 Indice cloroformio 47 collegamento rete 9 comando 20 compartimento del campione 12 compartimento del campione aperto 40 concentrazione 33 concentrazione intervallo 28 connettore a distanza 16 CAN 17 GPIB 17 GPIO 16 RS232 16 sistema di trasporto multicella 16 conoscenza elaborazione di Agilent ChemStation 29 contenitore dotato di termostato 50 Contenitore singolo standard 53 contesto attuale 20 correzione luce parassita 10 11 correzione di fondo 26 28 correzione luce parassita 10 11 D dati 29 accesso 30 31 archiviazione 67 campione 28 32 cancellazione 72 cancellazione degli standard 72 cancellazione dei valori matematici 72 caricamento 67 estensione file 68 fattore di assorbimento 87 finestra di selezione file 71 formato 67 informazioni sul file 71 memorizzazione 67 memorizzazione locale 67 nome file 68 non elaborati 29 recupero 67 71 rimozione 72 salvataggio 67 salvataggio di dati selezionati 69 save samples as 67 sostituzione 68 trasferimento in rete 67 valutazione 31 derivate 26 descrizione strumento 13 determinazione della purezza 97 deuterio lampada 10 dimetilformammide 47 dimetilsolfossido 47 diodi gruppo 13 diodi gruppo di 33 disolfuro di carbonio 47 dispersioni colloid
31. comprese tra 190 e 800 nm circa La sorgente luminosa delle radiazioni visibili e delle onde corte infrarosso vicino SWNIR una lampada al tungsteno a basso rumore che emette radiazioni comprese tra 370 nm e 1100 nm e Lente sorgente La lente riceve la luce dalle due lampade e la collima Il fascio luminoso collimato attraversa il campione posto nell apposito compartimento e Otturatore L otturatore viene azionato elettromeccanicamente Quando aperto permette alla luce di attraversare il campione per effettuare le misurazioni Tra una misurazione e l altra l otturatore si chiude limitando l esposizione del campione alla luce Se la velocit di misurazione molto elevata possibile regolare l otturatore in modo che resti aperto software Agilent ChemStation oppure esso rimane aperto automaticamente software del controllore palmare e Filtro di correzione della luce parassita Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 11 1 12 Introduzione al sistema In una sequenza di misurazione standard gli spettri dell intensit luminosa di riferimento e poi del campione vengono misurati prima senza il filtro di correzione della luce parassita sul percorso del fascio luminoso poi con il filtro Senza il filtro lo spettro dell intensit viene misurato nell intera gamma di lunghezze d onda comprese tra 190 e 1100 nm Il filtro della luce parassita un filtro di esclusione con
32. del fondo come calcoli interni di riferimento o calcolo della linea di caduta a tre punti Questi dati vengono conservati nel contenitore Lunghezza d onda usata Ad esempio nell attivit Fixed Wavelength la visualizzazione di questi dati in forma tabellare disponibile nella finestra Sample Results Table Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Risultati Un ulteriore passo avanti la valutazione dei dati a cui si accede Calculation Name Equation WL1 WL6 Wt Y Unit Caffeine Woo fg Weight Yolume Use Weight Wi Volume Y A Unit Ad esempio nell attivit Ratio Equation i dati di Lunghezza d onda usata vengono elaborati attraverso la valutazione dell equazione specificata Questa ulteriore operazione produce valori calcolati che vengono immessi nel contenitore Risultati I risultati sono disponibili nella Sample Results Table Sample Result Table Ioj x Show Sample Info Last Spectrum 5 Analyze Name Dilut Factor Caffeinelmg L Abs lt 273nm gt 1 Caffeine 1 00000 0 26527 0 53053 Riassunto L elaborazione generale dei dati di base suddivisa in tre fasi 1 Elaborazione degli spettri 2 Accesso ai dati 3 Valutazione dei dati Queste fasi vengono sempre condotte nell ordine sopra indicato nello stesso modo per tutti gli spettri del contenitore Dati non elaborati I risultati ottenuti vengono inser
33. di assorbimento e gli spettri Le lampade impiegano circa 15 minuti per raggiungere condizioni di stabilit Per ottenere migliori risultati non eseguire misurazioni prima che questo lasso di tempo sia trascorso 38 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Agilent 8453 Sistema di spettroscopia per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 3 Pratiche di misurazione corrette Considerazioni generali 40 Inserimento di una cella 53 In questo capitolo vengono trattati i seguenti argomenti e Esecuzione delle misurazioni e Selezione dei materiali specifiche ottiche e tipo di celle e Manipolazione e conservazione delle celle e Lista di controllo per ottenere i massimi risultati e Scelta dei solventi e Preparazione dei campioni e Uso dei filtri e Agitazione e controllo della temperatura del campione e Inserimento delle celle nell apposito contenitore Hg Agilent Technologies 39 3 Pratiche di misurazione corrette Considerazioni generali 40 I risultati delle misurazioni possono essere influenzati da molti fattori In questa sezione vengono esaminati brevemente i pi importanti Disegno dello spettrofotometro Il compartimento del campione dello spettrofotometro Agilent 8453 aperto A differenza degli spettrofotometri convenzionali l Agilent 8453 non subisce alterazioni a causa della luce parassita ambientale La mancanza di coperchio facilita l accesso alla
34. di campionamento 12 intrappolamento di bolle 44 J Jet Direct 36 K kit per test 28 L lamiera sportello 17 lampade 11 accesso attraverso lo sportello 17 al deuterio 10 al tungsteno 10 LAN 36 larghezza della fenditura 12 larghezza nominale della fenditura per lo spettro 12 lavoro di routine 62 ente 10 ente sorgente 10 11 eva di sicurezza 17 inea di caduta a tre punti 26 30 inearit scarsa 42 ivelli di funzionamento 23 ivello di awio 24 ivello di gestione 24 58 uce ambientale 13 uce parassita 13 40 unghezza d onda 30 unghezza d onda esclusa 49 unghezza d onda usata 30 unghezza percorso setup 80 unghezze d onda riproducibilit 34 M massimo 25 massimo fattore di assorbimento 76 materiale particolato 48 matrice fotodiodi 13 menu 20 messaggi linea dei 38 metanolo 47 meta xilene 47 metodo 25 29 32 34 62 anteprima di stampa 66 calibrato 34 87 caricamento 64 corrente 65 informazioni 65 load method 64 memorizzazione 62 modificato 64 nome 62 options amp information 63 parametri 62 parametro 29 rapporto 64 recupero 64 save method as 62 Indice stampa 64 66 ultimo utilizzato 58 minimo 25 MIO presa 17 misurazione dati standard 91 dati sul campione 92 pulsante blank 56 pulsante sample 57 92 riferimento 56 rumore 57 standard 90 misurazione pulsanti 15 misurazioni massima precisione 44 mod
35. do alla linea di caduta Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica Spectrum Peaks Spectium Peaks_____7 Setup Attraverso l attivit Spectrum Peaks si pu prendere in esame il fattore di assorbimento minimo e massimo In questo caso l interesse riguarda soprattutto la scala delle lunghezze d onda tuttavia si ottengono anche i valori del fattore di assorbimento Ratio Equation AO S i i Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 27 1 1 28 Introduzione al sistema L attivit Ratio Equation viene usata per impostare un equazione in base ai risultati delle misurazioni e ai dati forniti dal campione L equazione pu essere impostata usando i dati del campione a un numero di lunghezze d onda fino a sei e i dati di peso e volume immessi con i campioni misurati Ad esempio attraverso un equazione possibile calcolare e visualizzare automaticamente i risultati di un analisi basata su kit per test chimici Un altra applicazione consiste verificare l identit e la purezza di un campione attraverso il rapporto tra i valori dei dati ottenuti Quantification Task s Fed 7 fi L attivit Quantification permette di effettuare l analisi di un singolo componente in base a quattro tipi
36. e pu utilizzare proprie regolazioni ci viene segnalato sia sulla barra degli strumenti che sui rapporti stampati Modi di Agilent ChemStation I modi di Agilent ChemStation dipendono dall applicazione Ciascuno ha un menu pannelli funzioni e un gruppo di schermate specifici Il software generico per spettroscopia per radiazioni UV visibili costituisce la piattaforma per tutti i modi di funzionamento articolato in modo Standard modo Execute Advanced Method Metodo di esecuzione avanzato e modo Verification and Diagnostics Verifica e diagnostica Mode Standard Standard Advanced Kinetics Thermal Denaturation Dissolution Testing Multibath Dissolution Testing Combined Report Color Calculations Verification and Diagnostics In base alle necessit sono disponibili diversi modi per il funzionamento avanzato Advanced per condurre prove di dissoluzione Dissolution Testing per condurre prove di dissoluzione a bagni multipli Multibath Dissolution Testing per la valutazione di rapporti combinati Combined Reports per effettuare misurazioni di cinetica Kinetics per studi sulla denaturazione termica Thermal Denaturation e per calcoli dei colori Color Calculations Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Nel corso di una sessione di Agilent ChemStation possibile passare da uno all altro di questi modi Durante il passaggio verran
37. enti La UV Visible ChemStation Online Spectrum Peaks____ setun Risultati in forma tabellare Spettri Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 19 1 Introduzione al sistema Barra dei menu File Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help La tradizionale barra dei menu posta nella parte superiore della schermata di Agilent ChemStation permette di controllare tutte le operazioni Selezionando un elemento della barra viene visualizzato un elenco di comandi e sottomenu Le operazioni vengono eseguite selezionando un comando facendo clic con il mouse o premendo il tasto ENTER Barra degli strumenti La barra degli strumenti sotto la barra dei menu contiene pulsanti associati a simboli e icone che consentono di accedere direttamente a operazioni di base come la stampa dei rapporti sui risultati il caricamento dei metodi e il salvataggio dei metodi e dei dati Pannelli laterali A sinistra si trovano il pannello di analisi e il pannello relativo allo strumento I pannelli non hanno posizione e dimensioni fisse ma dipendenti dalla risoluzione del monitor La risoluzione minima 600 x 800 pixel Pannello di analisi Il pannello di analisi indica schematicamente il contesto in cui si sta operando Inoltre il pulsante di impostazione Setup permette di accedere alla finestra di dialogo relativa all attivit 20 Sistema d
38. er maggiori dettagli sull inserimento della cella vedere Inserimento di una cella a pagina 53 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 57 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Avvio del software per radiazioni UV visibili 58 La sezione illustra l avvio di una sessione Agilent ChemStation sul PC possibile avviare una sessione online per eseguire delle misurazioni oppure una sessione offline per ottimizzare i parametri di analisi di un metodo calcolare i risultati o stampare i rapporti Sul PC possibile avviare una sola sessione online ma varie sessioni offline in parallelo Ci permette di ottimizzare le regolazioni del metodo prescelto effettuando un confronto diretto tra gruppi identici di dati 1 Accendere il PC il monitor e la stampante 2 Caricare il sistema operativo del PC 3 Avviare la sessione Agilent ChemStation selezionando Instrument 1 online per effettuare una sessione di misurazione o Instrument 1 offline per ottimizzare il metodo o valutare i dati 4 Inserire il proprio nome per caricare la propria sessione Agilent ChemStation Se il livello di gestione protetto da una password occorre inserire la password corretta Il sistema visualizzer l ultimo modo e metodo utilizzati Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 p
39. er radiazioni UV visibili 4 Irazione zione Misurazione del fattore di assorbimento della caffeina a 273 nm Questa sezione illustra la misurazione del campione di caffeina accluso alla confezione dello spettrofotometro Questa misurazione viene usata anche per la procedura di Installation Qualification IQ dello spettrofotometro Agilent 8453 1 Verificare di trovarsi nel modo Standard Il modo indicato sulla barra degli strumenti della sessione di Agilent ChemStation olx 845x UY Visible System 1 Offline Thomas Klink File Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help Moto M I o E a 2 Selezionare l attivit Fixed Wavelength nella finestra del pannello di analisi Task Fixed Wavelengths Fixed Wayelenaths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification 3 Fare clic su Setup nel pannello di analisi per aprire la finestra di dialogo di regolazione dei parametri Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 59 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Misurazione del fattore di assorbimento della caffeina a 273 nm Fired Wavelengths setup 4 Digitare la lunghezza d onda desiderata nella sezione Wavelengths della finestra di dialogo Fixed Wavelength s Parameters Nella sezione di visualizzazione dello spettro Display spectrum regolare la visualizzazione dello spettro su una gamma di lunghezze d onda co
40. ere lo spettrofotometro assicurarsi sul PC che sia funzionante il Server CAG Bootp o che l amministratore della rete abbia assegnato un indirizzo IP allo spettrofotometro Per maggiori dettagli vedere il capitolo Comunicazione LAN Installazione Collegamento e configurazione del manuale Installing Your UV visible Spectroscopy System 36 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Installazione e avvio 2 PC v Verificare che tutti i componenti del PC siano collegati a una sorgente di alimentazione v Verificare che sia installato il softwrare generico di spettroscopia per radiazioni UV visibili Y Sul PC deve essere configurata una stampante Regolare le dimensioni della carta ad esempio Lettera USA A4 Regolare l orientamento su Verticale v Sul PC deve essere installato e configurato il protocollo TCP IP v Lo spettrofotometro deve essere configurato con un indirizzo IP Y Se lo spettrofotometro stato collegato direttamente al PC assicurarsi che l applicazione Server CAG Bootp sia installata e lanciata automaticamente all avvio del PC Se lo spettrofotometro viene collegato attraverso una LAN assicurarsi che l amministratore della rete abbia assegnato un indirizzo IP allo spettrofotometro Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 37 2 Installazione e avvio Avvio di una sessione di misurazione In caso di collegamento in rete del
41. erfaccia LAN Connettore alimentazione Due connettori CAN Figura 3 Parte posteriore dello spettrofotometro Il connettore per trasporto multicella serve per collegare il cavo del sistema di trasporto Il connettore GPIO General Purpose Input Output ingresso uscita generale permette di controllare il sistema di aspirazione e il sistema di campionamento automatico o altri accessori a seconda del software utilizzato Il connettore a distanza serve per collegare altri spettrofotometri analitici Agilent Technologies al fine di comandare funzioni comuni quali lo spegnimento Il connettore RS232C serve per controllare tramite un collegamento RS232 lo spettrofotometro da un computer utilizzando un software appropriato funzione non ancora disponibile Il connettore deve essere opportunamente impostato attraverso il modulo di interruttori di configurazione posti accanto al connettore GPIB Il software richiede i driver adatti a supportare questo tipo di comunicazione che non ancora disponibile Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 La porta RS232C funge da interfaccia per la stampante per collegare attraverso un cavo parallelo seriale la stampante al sistema di spettroscopia Agilent 8453E per radiazioni UV visibili e Il canale CAN di destra serve per collegare allo spettrofotometro il control
42. ete amministratore 36 37 collegamento 38 locale 56 reticolo 10 13 ricalcolo 23 riferimento 38 riferimento interno 26 30 risultati 31 precisi 57 risultati precisione dei 40 risultato 33 RS232C connettore 16 rumore della soluzione 48 S sample pulsante 15 sample result table 61 69 78 scambiatore di celle 84 scarica di plasma 11 self test 94 awio 95 condizioni operative 95 risultati 96 valori passati 96 sensibilit 42 server bootp 56 Server CAG Bootp 36 38 sessione solo analisi dei dati 23 strumento controllo 23 sgasato 48 simbolo 20 sistema di aspirazione 44 82 parametro 82 test di flusso 82 sistema di aspirazione o campionatore 48 sistema di spettroscopia 9 sistema di trasporto multicella 84 7 celle 86 8 celle 84 connettore 16 sistema generico Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 56 sistema operativo 38 sistema ottico 10 software generico 9 18 soluto convezione 48 soluzione 50 soluzioni 97 aumento della sensibilit 97 determinazione della purezza 97 soluzioni viscose 49 solvente 40 56 solvente adeguatezza 46 solventi 46 solventi pi usati 46 solventi volatili 48 sorgente delle radiazioni 10 sorgente di alimentazione 37 sostanze da analizzare 40 sostanze fotosensibili 49 specifiche ottiche delle celle 41 spettri elaborazione 31 spettro 25 spettro acquisizione 28 spettro dati non elaborati 34 spettrofotometro 33 36 p
43. gati o lasciati depositare Altrimenti lo spettro complessivo di attenuazione della trasmittanza dovuto alla dispersione e o alla riflessione luminosa nasconder i dati della sostanza da analizzare Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Pratiche di misurazione corrette 3 Campioni fotosensibili Alcune sostanze sono altamente fotosensibili Se esposte alla luce si degradano o vanno incontro a reazioni chimiche Ci pu essere rilevato facilmente a causa della riduzione del fattore di assorbimento del campione nel tempo Uso di filtri Le radiazioni UV con maggiore energia e minore lunghezza d onda degradano pi facilmente i campioni fotosensibili In caso di problemi si possono bloccare selettivamente alcune porzioni dello spettro UV con un filtro di esclusione degli UV Per lo spettrofotometro disponibile un filtro ottico a ruota contenente tre filtri di esclusione La lunghezza d onda di esclusione del filtro prescelto dovrebbe essere abbastanza bassa da non eliminare dati importanti sullo spettro ma abbastanza elevata da bloccare le radiazioni luminose che potrebbero degradare il campione Se si usa un filtro con il campione occorre usare lo stesso filtro anche per la misurazione a vuoto Spegnimento della lampada a D Le radiazioni con lunghezza d onda breve che provocano la fotodegradazione provengono dalla lampada a Ds Per le applicazioni riguardanti misurazioni al di
44. he indica la lunghezza d onda che interessa Sotto lo spettro visualizzata la Sample Result Table che mostra un valore del fattore di assorbimento di 273 nm Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 61 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Salvataggio dei parametri come metodo Questa sezione illustra il salvataggio delle regolazioni per una sessione futura di Agilent ChemStation Basta caricare il metodo per programmare Agilent ChemStation a ripetere la misurazione Una libreria di metodi facilita il lavoro di routine in laboratorio Supponiamo che le regolazioni attuali definiscano il metodo di analisi di un campione di caffeina Per ripetere l analisi si possono conservare in permanenza su disco tutti i parametri fissati Ci permette di caricare il metodo sul sistema o anche di trasferirlo a un altro utente che possieda un sistema Agilent ChemStation 1 Selezionare Save Method As nel menu File o fare clic su l icona indicata 845x UY Yisible System 1 Online TK HW EN Edit Method Measure Instrument Math Vie NA Load gt i Save Import Export Selected Spectrum s New Method Load Method Save Method As Set Method Password Print gt Print To File gt Print Preview Printer Setup Egit ChemStation 2 Viene visualizzata la finestra di dialogo Save Method As Digitare il nome del met
45. i Manuale dell operatore 47 3 48 Pratiche di misurazione corrette Quando si usano solventi volatili come acetone o cloruro di metilene assicurarsi che la cella del campione sia dotato di tappo L evaporazione di un solvente pu modificare la concentrazione del soluto o provocare rumore della soluzione a causa delle correnti di convezione del soluto Entrambi questi fenomeni influenzano la precisione dei risultati delle misurazioni Quando si usano solventi volatili sono consigliabili anche l agitazione della soluzione e il controllo della temperatura Quando come solvente si usa acqua si raccomanda di impiegare acqua per UV o HPLC per ridurre il valore del fattore di assorbimento indesiderato dovuto alle impurit dell acqua Se si usa il sistema di aspirazione o il campionatore l acqua dovrebbe essere sgasata per evitare la formazione di bolle nella cella a flusso soprattutto se l acqua proviene da una fonte sotto pressione Preparazione del campione La cella del campione dovrebbe essere lavata per tre cinque volte con il solvente che sar usato per la misurazione poi riempita di solvente puro Capovolgere la cella su un mucchietto di carta assorbente aiuta a eliminare l eventuale solvente residuo Questo trattamento contribuisce a ridurre al minimo la contaminazione provocata da precedenti esperimenti I campioni contenenti dispersioni colloidali polvere o altro materiale particolato dovrebbero essere filtrati centrifu
46. i caffeina IQ e come campione caffeina diluita con acqua distillata 1 1 Per la calibrazione si usano i dati del fattore di assorbimento a 273 nm Impostazione 1 Verificare di trovarsi nel modo Standard Il modo indicato sulla barra degli strumenti della sessione di Agilent ChemStation 845x UY Yisible System 1 Offline Thomas Klink olx Fie Edit Method Measure Instrument Math View Mode Config Help Reti Resco z 2 Selezionare l attivit Quantification della finestra del pannello di analisi Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 87 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Task Quantification M Fixed Wavelengths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification 3 Viene visualizzato un nuovo pannello di attivit e si apre automaticamente la finestra di dialogo Quantification Parameters Task Vs 7 fe Se ci si trova gi in Quantification fare clic su Setup sul pannello di analisi per aprire la finestra di dialogo dei parametri 4 Impostare la lunghezza d onda di analisi su 273 nm Use wavelength digitare Caffeina sotto Analyte name fissare Calibration curve type su Linear selezionare Concentration e mg l sotto Unit Selezionare Prompt for standard information e Prompt for sample information Selezionare Absorbance come Data type e fissare Display spectrum From 190 nm su 340 nm 88 Sistema di spettroscopia Ag
47. i spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica Fixed Wavelengths z Fixed Wayelenaths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification Pannello dello strumento Il pannello dello strumento si trova sotto il pannello di analisi Visualizza e controlla i dispositivi di campionamento e lo spettrofotometro Contiene elementi attivi che servono ad esempio per accendere o spegnere le lampade o avviare una pompa peristaltica Le zone attive sono riconoscibili per la comparsa del puntatore quando il mouse viene spostato su di esse Quando si fa clic con il mouse su una zona attiva viene visualizzato un breve menu con diverse possibilit di scelta oppure viene semplicemente eseguita un operazione Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 21 1 22 Introduzione al sistema Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica Inoltre possibile scegliere un sistema di campionamento nell elenco di quelli disponibili I relativi parametri possono essere regolati mediante il pulsante Setup Display 4 Overlaid Sample Spectra Transmittance Nella zona a destra dei pannelli laterali viene visualizzato un aspetto dell attivit in corso La visualizzazione comprende una o pi fi
48. ifferences between Spectra Menus Execute Advanced Method Mode E e9 9 EEE L9 98 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Frequenza della misurazione di campione di riferimento blank I dati acquisiti dallo spettrofotometro attraverso la misurazione non devono dipendere dallo strumento Per assicurare tale indipendenza occorre eseguire una misurazione di riferimento Tutte le misurazioni consecutive effettuate si riferiscono all ultimo riferimento misurato Nel software Agilent ChemStation la misurazione di riferimento viene combinata con una misurazione di base La linea di base visualizzata fornisce informazioni sulla qualit del campione di riferimento corrente Nel modo Absorbance i dati dovrebbero essere vicini a 0 AU e nel modo Transmission al 100 Generalmente le misurazioni di riferimento di campioni disciolti vengono effettuate su celle riempite con il solvente utilizzato Inoltre in questo caso i dati di riferimento sono influenzati dalle propriet di assorbimento della cella e del solvente Nelle gamme di lunghezza d onda di assorbimento del solvente o della cella lo spettro di base ha un rumore elevato In queste zone non ci si possono aspettare dati attendibili sul campione Quindi necessario effettuare nuove misurazioni di riferimento nei seguenti casi e qu
49. ilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Analisi quantitativa mediante calibrazione con standard Quantification Parameters 5 Fare clic su OK per fissare i parametri Adesso tutto pronto per avviare le misurazioni NOTA RICHEOR Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 89 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Calibrazione 1 Riempire di acqua distillata la cella di quarzo con percorso di 1 cm Sollevare la leva posta a sinistra del contenitore Sistemare la cella nel contenitore e verificare che le finestre trasparenti siano rivolte verso la parte anteriore e posteriore dello spettrofotometro Abbassare la leva per fissare la cella nel contenitore 2 Premere il pulsante Blank posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Blank sul pannello strumenti del PC per avviare la misurazione Sampling Manual x f Standard Sample 3 Ricordare l orientamento della cella nel contenitore Sollevare la leva e liberare la cella estrarla e lavarla tre volte con circa 1 ml del campione di caffeina Poi riempire la cella con circa 3 ml del campione di caffeina Verificare che le finestre della cella siano pulite e riposizionare la cella con lo stesso orientamento che aveva nella misurazione di riferimento Abbass
50. istema di spettroscopia comprende uno spettrofotometro Agilent 8453 e un software generico Agilent ChemStation per la spettroscopia per radiazioni UV visibili funzionante su un PC in cui installato un sistema operativo Microsoft supportato I due componenti sono collegati in rete Il collegamento molto flessibile possibile collegare direttamente lo spettrofotometro e il PC o integrare il sistema in una rete locale con accesso dal PC allo spettrofotometro Le funzioni sono suddivise tra i due apparecchi nel modo seguente lo spettrofotometro acquisisce i dati del fattore di assorbimento e li fornisce al software applicativo del PC che provvede a elaborarli La visualizzazione la valutazione e la conservazione a lungo termine dei dati avvengono nel PC sotto controllo completo del software LE Agilent Technologies 9 1 Introduzione al sistema Spettrofotometro Agilent 8453 Panoramica La sezione fornisce una panoramica del sistema ottico e dell aspetto dei pannelli frontale e posteriore dello spettrofotometro Vengono anche illustrati l aspetto esterno e il disegno dello spettrofotometro compresi i gruppi meccanici ed elettronici interni Panoramica del sistema ottico Sistema ottico Il sistema ottico dello spettrofotometro illustrato nella Figura 1 La sorgente delle radiazioni rappresentata dalla combinazione di una lampada a scarica al deuterio per la gamma delle lunghezze d onda dell ultravioletto UV e da una lamp
51. iti nel contenitore Risultati Il contenuto precedente dei contenitori Spettri elaborati Lunghezza d onda usata e Risultati viene cancellato Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 31 1 32 Introduzione al sistema Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica Elaborazione con uso di standard Per la quarta attivit oltre ai dati dei campioni vengono usati anche degli standard Ci richiede un estensione del concetto sopra esposto alla gestione degli standard Vengono predisposti due gruppi indipendenti di contenitori uno per gli standard l altro per i campioni Anche tutti i contenitori per l elaborazione sono raddoppiati Come per la sola elaborazione dei campioni tutte le fasi della valutazione vengono condotte in parallelo sia sui campioni che sugli standard Campioni Standard Elaborazione spettri Accesso ai dati Valutazione dei dati Calibrazione La valutazione mediante quantificazione una calibrazione con l uso di standard I coefficienti vengono calcolati in base alle regolazioni del metodo e agli standard presenti nella memoria di Agilent ChemStation Ci significa che i risultati diventano funzione di un gruppo di standard misurati e delle concentrazioni specificate degli standard Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 S
52. l rapporto la stampante deve essere configurata correttamente e online Se la stampante non online si pu visualizzare sullo schermo l anteprima di stampa del rapporto 66 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Salvataggio e recupero dei dati Questa sezione illustra il modo per salvare e recuperare i risultati delle misurazioni I dati possono essere usati come documentazione per sviluppare successivamente il metodo o per effettuare scambi con altre Agilent ChemStation Il software Agilent ChemStation pu conservare e recuperare i dati in un formato protetto con checksum binario estensione sd std Tutti gli spettri presenti appartenenti ai campioni o agli standard possono essere salvati memorizzandoli in modo permanente su disco Il salvataggio e il caricamento dei dati pu avvenire sia su drive locali che in rete Inoltre possibile selezionare e memorizzare anche un solo spettro Salvataggio dei campioni 1 Selezionare Save Samples As nel menu File o fare clic sull icona della barra degli strumenti 845x UY Visible System 1 Offline TK lg Edit Method Measure Instrument Math Yiew Mod I Load ve Standards As Import Selected Spectra As Export Selected Spectrum s 2 Selezionare un file di dati gi presente nella finestra File name della finest
53. la lunghezza del percorso della cella a flusso in cm e fare clic su OK Setup Sipper Path Length f cm 3 Fare clic su di nuovo Setup e aprire la finestra di dialogo Sipper Parameter facendo clic su Parameter I parametri da inserire possono essere determinati attraverso un test di flusso Flow Test del modo Verification and Diagnostics 82 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Sipper Parameter Pump s Pump Direction CW Wait Time E s Sample Return 0 z Wash Time fo s Air Segment fo s cea 4 Fare clic su OK nella finestra di dialogo Sipper Parameter e poi su OK nella finestra di dialogo Sipper per fissare i parametri ANO Ogni misurazione avviata facendo clic su uno dei pulsanti di misurazione del pannello pera strumenti o premendo i pulsanti dello spettrofotometro utilizza il sistema di aspirazione per introdurre il campione L introduzione con il sistema di aspirazione viene usata anche nella sequenza automatica Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 83 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Uso del sistema di trasporto multicella Il sistema di trasporto multicella consente di sistemare automaticamente fino a 8 celle in posizione di misurazione Per ogni posizione si possono
54. lo lo spettrofotometro si accende Il pulsante rimane premuto e quando l apparecchio acceso caratterizzato da una spia verde illuminata Quando il pulsante di accensione non premuto la spia verde spenta e l apparecchio spento Sul pannello frontale dello spettrofotometro presente un indicatore di stato dotato di spie luminose di diversi colori che indicano lo stato dell apparecchio e Verde lo spettrofotometro pronto per effettuare la misurazione e Verde lampeggiante lo spettrofotometro sta effettuando una misurazione e Giallo lo spettrofotometro non ancora pronto ad esempio una delle lampade si sta accendendo o entrambe le lampade sono spente 14 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Rosso condizione di errore lo spettrofotometro non ha superato uno dei self test condotti all accensione oppure si verificato un errore durante un operazione In tal caso il software operativo visualizza un messaggio dettagliato di errore Possibili soluzioni vengono fornite nella guida online e nel Capitolo 3 Diagnostica e risoluzione dei problemi del Manuale di assistenza e Rosso lampeggiante condizione di errore del processore dello spettrofotometro In questo caso non presente la comunicazione con il computer quindi non verr visualizzato alcun messaggio di errore Maggiori informazioni per la risoluzione dei problemi
55. lo spettrofotometro importante che l apparecchio sia riconosciuto dal software Ci richiede l assegnazione allo spettrofotometro di un indirizzo IP al momento dell accensione Tale assegnazione viene effettuata dall applicazione Server CAG Bootp che funziona sul PC con un collegamento diretto allo spettrofotometro o in una LAN da un applicazione del server sulla LAN Quindi importante che una di queste applicazioni sia installata e funzionante prima che lo spettrofotometro venga acceso v Accendere il PC e caricare il sistema operativo Se al sistema collegata una stampante accenderla v Assicurarsi che il Server CAG Bootp funzioni o sia caricato nella LAN v Accendere lo spettrofotometro e attendere che la spia dell indicatore diventi verde Questo processo che comprende il self test dell apparecchio richiede circa un minuto Per maggiori dettagli sulla sequenza di avvio vedere il capitolo Installazione e avvio nel manuale Installing Your UV visible Spectroscopy System v Lanciare la sessione di misurazione premendo il pulsante Avvio del sistema operativo e selezionare Programmi HP UV Visible ChemStations spectrophotometer 1 online spettrofotometro 1 online v Quando si spegne la spia blu busy occupato nella linea dei messaggi in basso nel sistema il sistema pronto per l uso v La prima misurazione da effettuare quella di riferimento Dopo questa messa a punto il sistema pronto per misurare il fattore
56. lore palmare del sistema di spettroscopia Agilent 8453E per radiazioni UV visibili e Il connettore GPIB serve a collegare lo spettrofotometro a un computer Il modulo di interruttori di configurazione a 8 bit posto accanto al connettore determina l indirizzo GPIB dello spettrofotometro Gli interruttori sono gi predisposti in base a un indirizzo di default riconosciuto dal software operativo Agilent Quando il controllore palmare del sistema di spettroscopia Agilent 8453E per radiazioni UV visibili collegato allo spettrofotometro la porta GPIB non viene usata Tuttavia l interruttore di configurazione a 8 bit della porta deve essere impostato per la comunicazione GPIB e La presa MIO riservata a una scheda di interfaccia LAN e La presa ausiliaria riservata a un uso futuro e La presa di alimentazione non possiede un selettore di voltaggio perch l alimentatore pu gestire una vasta gamma di valori di voltaggio per maggiori informazioni consultare il Capitolo 1 Specifiche del Manuale di assistenza Non ci sono fusibili accessibili dall esterno nell alimentatore sono presenti fusibili elettronici automatici La leva di sicurezza della presa di ingresso dell alimentazione impedisce che il coperchio dello spettrofotometro venga tolto quando l apparecchio sotto tensione Lato dello spettrofotometro Sul lato destro dello spettrofotometro si trova uno sportello per la sostituzione delle lampade Dietro lo sportello di plastica
57. mentazione interruttore 14 presa ingresso 17 analisi 62 92 analisi quantitativa campioni 87 sistema pronto per l analisi 91 analisi impostazione calibration 88 concentration unit 88 data type 88 display 88 prompt for sample information 88 wavelength 88 apertura trasparente 11 aperture 49 applicazione specifica 23 attivit analisi quantitativa 87 fixed wavelength 25 26 59 orientamento 26 quantification 25 28 quantificazione 87 ratio equation 25 28 31 spectrum peaks 25 27 attivit corrente 22 attivit di analisi 25 aumento della sensibilit 97 avvallamento ricerca 77 avvertenza no results present 74 barra degli strumenti 20 Beer legge 87 benzene 47 blank pulsante 15 busy occupato 38 C caffeina 59 calcolo 33 risultati 80 calibrazione 28 32 87 90 coefficienti 32 curva 28 campionamento dispositivo di 21 campionamento sistema 80 manuale 80 sistema di aspirazione 82 campione 40 51 compartimento 12 campioni liquidi 40 CAN connettore 17 caricamento 38 carta dimensioni 37 orientamento 37 carta velina per la pulizia di lenti 44 cella lunghezza percorso 80 82 84 cella a flusso 44 cella campione 40 48 cella del campione con tappo 48 celle a cuneo 41 celle a flusso 53 celle campione di plastica 41 celle campione di quarzo 41 celle di vetro 41 celle dotate di aperture o provette 42 celle raccomandate 43 celle standard 53
58. mprese tra 190 e 400 nm Fare clic su OK per fissare i parametri Fixed Wavelength s Parameters 5 Riempire di acqua distillata la cella di quarzo con percorso di 1 cm Sollevare la leva posta a sinistra del contenitore Sistemare la cella nel contenitore e assicurarsi che le finestre trasparenti siano rivolte verso le parti anteriore e posteriore dello spettrofotometro Spingere in gi la leva per fissare la cella nel contenitore 60 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 6 Premere il pulsante Blank posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Blank sul pannello strumenti del PC per avviare la misurazione Sampling 7 Ricordare l orientamento della cella nel contenitore Sollevare la leva e liberare la cella estrarla e lavarla tre volte con circa 1 ml del campione di caffeina Poi riempire la cella con circa 3 ml del campione di caffeina Verificare che le finestre della cella siano pulite e riposizionare la cella con lo stesso orientamento che aveva nella misurazione di riferimento Abbassare la leva del contenitore della cella 8 Premere il pulsante Sample posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Sample sul pannello strumento per avviare la misurazione 9 Viene visualizzato lo spettro del campione di caffeina insieme a una linea verticale c
59. nestre distinte in cui i dati sono visualizzati generalmente sotto forma di grafico o di tabella Possono essere visualizzati un grafico degli spettri del campione misurato e una tabella con i loro valori calcolati Di solito le finestre di visualizzazione vengono gestite automaticamente in base all attivit che viene eseguita ma possono essere anche selezionate mediante i comandi del menu di visualizzazione Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Introduzione al sistema 1 Struttura del software Data la complessit di funzionamento dell apparecchio il software suddiviso in specifiche applicazioni chiamate modi Esistono poi vari livelli di funzionamento e di supporto per le sessioni di valutazione dei dati che non vengono controllate dallo spettrofotometro Sessioni di Agilent ChemStation Il software Agilent ChemStation fa parte della famiglia di software di controllo per apparecchiature strumentali Agilent ChemStation Un unica installazione del software Agilent ChemStation caricata su un PC pu controllare fino a quattro strumenti diversi per radiazioni UV visibili Ognuno degli strumenti ha tuttavia una propria sessione Instrument 1 Instrument 2 Installation online online Qualification DOO Instrument 1 Instrument 2 UV Vis offline offline Configuration Editor All avvio di una sessione nella barra del titolo della finestra dell applicazione principale ne viene
60. no conservati tutti i dati non elaborati Ci permette di esaminare i dati mettendo a fuoco vari aspetti La maggioranza dei modi permette di definire l attivit di analisi attraverso un gruppo di parametri e se necessario di dati metodo Il metodo pu essere poi salvato sul disco fisso ci permette di ripetere l attivit di analisi in condizioni predefinite semplicemente caricando il metodo e inserendo nell apparecchio i campioni Attivit del modo Standard Il software Agilent ChemStation offre anche la possibilit di concentrare il proprio lavoro su un determinato aspetto dell analisi ma per adattare un modo a una determinata applicazione occorre modificare molti parametri Per risolvere questo problema di complessit il modo standard orientato maggiormente sulle attivit Il modo Standard del softwrare generico di spettroscopia per radiazioni UV visibili gi predisposto per le attivit pi frequenti condotte in un laboratorio di analisi nel campo della spettroscopia per radiazioni UV visibili Sono disponibili quattro attivit e Fixed Wavelength e Spectrum Peaks e Ratio Equation e Quantification L attivit prescelta viene selezionata e attivata attraverso la finestra di selezione del pannello analitico Task Fixed Wavelengths Fixed Wavelenaths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 25 1 26
61. nt ChemStation a seconda della stampante configurata al momento Nella finestra di anteprima possibile verificare pagina per pagina tutti i tipi di rapporti disponibili possibile anche controllare il numero di pagine generate e il loro aspetto Inoltre si pu stampare il rapporto visualizzato Anteprima di stampa di un rapporto sui risultati L anteprima di stampa funziona in modo simile per tutti i tipi di rapporti disponibili L esempio fornito sotto mostra come visualizzare in anteprima un rapporto sui risultati delle misurazioni 1 Selezionare Print Preview Results nel menu File Zam 845x UV Visible System 1 Offline TK Fg Edit Method Measure Instrument Math Miew W Load Save Import Export Selected Spectrum s New Method Load Method Save Method As Set Method Password Print Print To File Print Preview Current View Printer Setup Selected Window Egit ChemStation Method 1 Results F Automation Method 2 j 3 Eatomaton Fesuls Print Preview Results Report Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 73 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Anteprima di stampa dei rapporti NOTA Per poter stampare un rapporto occorre avere prima impostato correttamente tutti i parametri e disporre dei dati della valutazione Se non sono presenti i dati sulla riga dei messaggi pu comparire il me
62. o 23 advanced 24 color calculations 24 combined reports 24 dissolution testing 24 kinetics 24 metodo di esecuzione avanzato 24 multibath dissolution testing 24 passaggio da uno all altro 25 standard 24 59 76 87 thermal denaturation 24 ultimo utilizzato 58 verifiche e diagnostica 24 94 modulo di agitazione 50 mouse cursore 21 n esano 47 nome operatore 30 0 offline 23 olografico reticolo 10 13 omogeneit 50 online 23 operazione 20 operazione sugli spettri 30 ottimizzazione 34 otturatore 10 11 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 103 Indice P pannello dello strumento 21 pannello di analisi 20 94 pannello laterale 20 parallelismo 41 parametri finestra di dialogo 76 parte frontale dello spettrofotometro 13 parte posteriore dello spettrofotometro 16 passivazione di celle nuove 44 PC 38 peso 28 picco ricerca 77 pipetta 46 piridina 47 plastica sportello 17 polvere 48 pompa peristaltica 82 posizione attiva 21 precisione della fotometria scarsa 42 presa ausiliaria 17 prese MIO e schede ausiliarie 17 protocollo TCP IP 37 pulizia delle celle 44 pulsanti 15 blank 15 sample 15 standard 15 stop 15 puntatore simbolo 21 purezza 28 Q quantification 25 87 radiazioni sorgente 10 rapporto 25 risultati 73 rapporto segnale rumore 49 reazioni fotochimiche 49 regolazioni 62 r
63. odo nel campo File name ad esempio Caffeina Fare clic su OK per salvare il metodo 62 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Salvataggio dei parametri come metodo Save Method As atend i Bor gt HPCHEM 1 E gt methods Method M Si c HARDDISK NOTA Se si generano molti metodi si pu usare la finestra Options amp Infos del menu Method per aggiungere un testo a scopo di documentazione e per semplificare l accesso al metodo Viene visualizzata la finestra di dialogo Method Options amp Information Nella sezione Method Information si pu inserire un breve testo descrittivo che verr visualizzato ogni volta che si selezioner il metodo Method Options amp Information Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 63 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Recupero e stampa dei dati Recupero e stampa dei dati Questa sezione illustra il modo per accedere ai diversi metodi e stampare il rapporto su un metodo 1 Selezionare Load Method nel menu File o fare clic su l icona indicata della barra degli strumenti 47845x UY Yisible System 1 Online TK File za La Load Method Dn NOTA Se il metodo attualmente in uso stato modificato verr visualizzata una finest
64. oftware generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica E Calibration Table Show Standard Info Show Coefficients __ I coefficienti vengono quindi usati per calcolare i valori di concentrazione dei campioni presenti in memoria Vengono condotte le stesse fasi di elaborazione sui dati del campione e su quelli dello standard ottenendo quindi risultati della massima precisione Vantaggi La combinazione della qualit elevata dello spettrofotometro a gruppo di diodi e della potente elaborazione dei dati operata dal software Agilent ChemStation fornisce numerosi vantaggi rispetto ai sistemi tradizionali di spettrofotometria ne descriviamo brevemente sotto alcuni e Numero praticamente illimitato di standard Grazie alla basa teorica del processo di analisi dei dati possibile misurare gli standard prima o dopo i campioni e oltre al numero minimo di standard necessari insieme alla calibrazione possibile utilizzare il numero desiderato di standard Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 33 1 34 Introduzione al sistema Facile ottimizzazione La disponibilit di tutti i dati non elaborati riguardanti sia i campioni che gli standard consente di ottimizzare con facilit le regolazioni del metodo prescelto scegliendo una diversa lunghezza d onda di calibrazione e procedendo a una nuova calibrazione del sistema Inoltre possibile
65. oni UV visibili Manuale dell operatore In questo libro Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Per imparare rapidamente a usare il nuovo sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili vengono illustrati passo per passo procedure ed esempi delle principali operazioni e attivit Questa Guida di avvio rapido non intende sostituire i seguenti manuali pi dettagliati riguardanti l installazione Installing Your UV visible Spectroscopy System e l uso del software Understanding Your UV visible Spectroscopy System n il 8453 Service Manual Introduzione al sistema Questo capitolo fornisce una panoramica dell apparecchio e illustra le basi teoriche del funzionamento del software ChemStation Installazione e avvio Questo capitolo illustra a grandi linee l installazione del sistema e l avvio di una sessione di misurazione Pratiche di misurazione corrette Questo capitolo illustra l esecuzione di procedure di misurazione corrette Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Questo capitolo illustra passo per passo alcuni esempi delle principali misurazioni e delle attivit correlate Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Sommario Introduzione al sistema 9 Spettrofotometro Agilent 8453 Panoramica 10 Panoramica del sistema ottico 10 Descrizione dello spettrofotometro 13
66. orso viene fissata nel modo seguente 1 Fare clic su Setup sul pannello strumenti Sampling 2 Inserire la lunghezza del percorso in cm in Setup Manual Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Inserimento della lunghezza del percorso della cella Setup Manual 3 Fare clic su OK per fissare il valore della lunghezza del percorso inserito Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 81 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Controllo del sistema di aspirazione Il sistema di aspirazione trasferisce il campione da misurare in una cella a flusso attraverso una pompa peristaltica Per controllare il sistema di aspirazione con il software Agilent ChemStation necessario regolare il sistema di campionamento per l uso di un sistema di aspirazione Inoltre a causa della lunghezza dei tubi dello spazio morto della cella a flusso e della velocit della pompa occorre regolare i parametri del sistema di aspirazione Per maggiori dettagli consultare il manuale Installing and Operating Your Sipper System 1 Selezionare Sipper nella finestra del pannello strumento Sampling D Multicell 7 cell Multicell 8 cell Autosampler XY Autosampler Gilson 2214222 2 Fare clic su Setup sul pannello strumenti Inserire
67. per radiazioni UV visibili 36 Avvio di una sessione di misurazione 38 Le informazioni riportate in questo capitolo non sostituiscono quelle incluse nel manuale Installing Your UV visible Spectroscopy System Rappresentano solo una breve ricapitolazione delle fasi salienti dell installazione e dell avvio del sistema de Agilent Technologies 35 2 Installazione e avvio Riassunto dell installazione del sistema generale Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Generale Una descrizione dettagliata del sistema generale Agilent 8453 per radiazioni UV visibili viene fornita nel manuale Installing Your UV visible Spectroscopy System Qui di seguito vengono illustrati i principali punti dell installazione Spettrofotometro Y Verificare che la scheda JetDirect sia installata nello spettrofotometro v Verificare che lo spettrofotometro sia collegato direttamente al PC attraverso un cavo LAN ritorto o al LAN attraverso un collegamento diretto AVVERTENZA Non collegare l adattatore LAN del PC all interfaccia CAN dello spettrofotometro Agilent 8453 l adattatore pu subire gravi danni perch il voltaggio dell interfaccia CAN 12 V superiore a quello dell adattatore 5 V v Verificare che lo spettrofotometro sia collegato a una presa di corrente ATTENZIONE Alimentare sempre lo strumento attraverso una presa di corrente dotata di collegamento di messa a terra Usare sempre un cavo di alimentazione adatto v Prima di accend
68. petta oppure si possono utilizzare celle a flusso Se si utilizzano pipette Pasteur in vetro assicurarsi di non toccare o graffiare con la pipetta le finestre ottiche della cella Solventi 46 La scelta dei solventi dovrebbe basarsi principalmente sulle caratteristiche di assorbanza di un determinato solvente nelle lunghezze d onda specifiche sulla sua adeguatezza come solvente della sostanza da analizzare e sulle condizioni della misurazione Nella Tabella 1 sono elencati i solventi pi comuni e il limite inferiore della loro gamma di lunghezze d onda utili Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Pratiche di misurazione corrette 3 Tabella1 Limite inferiore di trasmissione UV di alcuni solventi comuni Limite inferiore Solvente 180 195 nm Acido solforico 96 Acqua Acetonitrile 200 210 nm Ciclopentano n esano Glicerolo 2 2 4 Trimetilpentano Metanolo 210 220 nm Alcool n butilico Alcool isopropilico Cicloesano Etere etilico 245 260 nm Cloroformio Etilacetato Formiato di metile 265 275 nm Tetracloruro di carbonio Dimetilsolfossido Dimetilformammide Acido acetico 280 290 nm Benzene Toluene meta xilene Oltre 300 nm Piridina Acetone Disolfuro di carbonio ATTENZIONE Molti dei solventi della Tabella 1 sono pericolosi Prima di usarli occorre conoscerne a fondo le propriet Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibil
69. ra di dialogo che chieder se salvare o ignorare le modifiche Save Method 64 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Recupero e dnra da stampa del 2 Viene visualizzata la finestra di dialogo Load Method Le informazioni selezionate sono visualizzate nella sezione File Information Load Method x File Name Directories CAFFEINE M c hpchem 1X methods EN E hpchem E 1 gt methods List Files of Type Drives Method M c HARDDISK 7 File Information c hpchem 1 methods caffeine m METHOD Method Type Standard Fixed WaveLength Created by TK LastUpdate Date 18 10 99 Time 14 52 29 Comment My first Caffeine method absorbance at 274 nm 3 Se si desidera caricare il metodo fare clic su OK Le modifiche di un parametro del metodo corrente sono segnalate nel campo relativo della barra degli strumenti Ci provoca la visualizzazione della finestra di dialogo sopra riportata Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 65 4 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Recupero e stampa dei dati 4 Per stampare un metodo selezionare Print Method nel menu File 845x UY Visible System 1 Online TK File Butaniauon FIESults NOTA Per poter stampare i
70. ra di dialogo Save Spectra As o digitare un nome di file valido nella finestra File name Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 67 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Salvataggio e recupero dei dati Save Spectra As Cattenesi_ ADVEXAM2 SD ADVEXAM3 SD ADVEXAMA4 SD ADVEXAM5 SD ADVEXAM7 SD ADVEXAMG SD BENZENE SD CHROM SD Spectra SD STD c HARDDISK x NOTA Un nome file valido formato da otto caratteri alfanumerici e dall estensione sd o std Di solito l estensione std viene usata solo per gli standard Se esiste gi un file con tale nome viene visualizzato un messaggio che chiede se sostituirlo con il file nuovo o interrompere l operazione Save Spectra As 3 Fare clic su OK per avviare l operazione 68 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Salvataggio e recupero dei dati Salvataggio di uno spettro selezionato 1 Selezionare lo spettro sotto forma di grafico nella finestra EX Overlaid Sample Spectra 2 Selezionare Save Selected Spectra As nel menu File 845x UY Visible System 1 Offline TK File NOTA Se non si seleziona la finestra Overlaid Sample Spectra o la finestra Sample Results Table pu comparire l avvertenza Select activate a window
71. re visualizzato un messaggio di avvertimento Lamp on time too short 4 I risultati del self test vengono indicati come passed riuscito o failed fallito Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 95 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Verifica del corretto funzionamento del sistema Agilent 8453 A 8453 Instrument Self Test Results I risultati del self test possono essere memorizzati nello spettrofotometro La loro memorizzazione nello spettrofotometro consente di verificare il funzionamento dell apparecchio nel tempo possibile generare grafici contenenti i diversi valori del self test nel tempo 96 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Risorse per ulteriori informazioni sulla spettroscopia per radiazioni UV visibili I principi di base della spettroscopia per radiazioni UV visibili sono illustrati nella guida Le informazioni contenute sotto Tutorial in Basics of UV Visible Spectroscopy riguardano i principi di base e anche i dettagli della spettroscopia in derivata Help Topics Basic Operation I 2fx Contents Index Find Click a topic and then click Display Or click another tab such as Index Q0 Tutorial a ible Spectroscopy Basic Principles Instrumentation
72. rla e lavarla per tre volte con circa 1 ml del campione di caffeina diluizione 1 1 con acqua distillata Poi riempire la cella con circa 3 ml del campione di caffeina Verificare che le finestre della cella siano pulite e riposizionare la cella con lo stesso orientamento che aveva nella misurazione dello standard Abbassare la leva del contenitore della cella Premere il pulsante Sample posto sulla parte anteriore dello spettrofotometro o fare clic su Sample sul pannello strumento per avviare la misurazione Sample Information Name Dilution Factor 1 Solvent Comment fa dilution of standard solution 3 Inserire i dati sul campione nella finestra di dialogo Sample Information e fare clic su OK La visualizzazione passa ai campioni e i risultati dell analisi quantitativa saranno visualizzati in Sample Result Table Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Analisi quantitativa mediante calibrazione con standard 1 Sample 1 00000 4 99900 0 26521 NOTA Per maggiori informazioni sul salvataggio dei dati per un uso futuro o a scopo di documentazione vedere Salvataggio e recupero dei dati a pagina 67 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 93 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili
73. ro degli spettri 71 Cancellazione degli spettri presenti 72 Anteprima di stampa dei rapporti 73 Ricerca del fattore di assorbimento massimo della caffeina 76 Inserimento della lunghezza del percorso della cella 80 Controllo del sistema di aspirazione 82 Uso del sistema di trasporto multicella 84 Analisi quantitativa mediante calibrazione con standard 87 Impostazione 87 Calibrazione 90 Analisi 92 6Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Sommario Verifica del corretto funzionamento del sistema Agilent 8453 94 Self test del sistema Agilent 8453 94 Risorse per ulteriori informazioni sulla spettroscopia per radiazioni UV visibili 97 Frequenza della misurazione di campione di riferimento blank 99 Indice 101 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 7 Sommario 8Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Agilent 8453 Sistema di spettroscopia per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 1 Introduzione al sistema Spettrofotometro Agilent 8453 Panoramica 10 Software generico Agilent ChemStation per spettroscopia per radiazioni UV visibili Panoramica 18 L utilizzo del sistema risulta molto pi facile quando se ne conoscono le basi teoriche I presupposti teorici dell acquisizione della valutazione e della gestione dei dati aiutano a utilizzare meglio il sistema Il s
74. rollo stampati su un chip semiconduttore Per una gamma di lunghezza d onda compresa tra 190 e 1100 nm l intervallo nominale di campionamento 0 9 nm Descrizione dello spettrofotometro Lo spettrofotometro molto facile da usare Dispone di un indicatore orizzontale di accensione un indicatore di stato e alcuni pulsanti Tutti i collegamenti elettrici vengono effettuati nella parte posteriore dell apparecchio Parte frontale Nella Figura 2 viene illustrata la parte frontale dello spettrofotometro Si noti che il compartimento del campione aperto Infatti a differenza degli apparecchi convenzionali lo spettrofotometro Agilent 8453 non subisce l influenza della luce parassita ambientale La mancanza di coperchio facilita l accesso alla zona del campione per la manipolazione della provetta e per il collegamento dei tubi a una cella a flusso o a un contenitore dotato di termostato Alla consegna sullo spettrofotometro montato un contenitore Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 13 1 Introduzione al sistema singolo standard I contenitori standard e quello accessori possono essere rimossi e sostituiti in pochi secondi senza utensili o con l uso di semplici utensili Indicatore Pulsanti Pulsante orizzontale di accensione con spia verde Figura 2 Aspetto frontale dello spettrofotometro Il pulsante orizzontale di accensione si trova in basso a sinistra Premendo
75. rori o danni diretti o indiretti relativi alla fornitura o all uso di questo documento o delle informa zioni in esso contenute In caso di separato accordo scritto fra Agilent e l utente con diverse condizioni di garanzia relativamente al contenuto di questo documento in conflitto con le condizioni qui riportate prevar ranno le condizioni dell accordo sepa rato Licenze sulla tecnologia I componenti hardware e o software descritti in questo documento vengono for niti con licenza e possono essere utilizzati o copiati solo in conformit ai termini di tale licenza Indicazioni di sicurezza AVVERTENZA L indicazione AVVERTENZA segnala un rischio Richiama l attenzione su una procedura ope rativa o analoga operazione che se non eseguita correttamente o non rispettata pu provocare danni al prodotto o la perdita di dati impor tanti Non eseguite mai alcuna operazione ignorando l AVVERTENZA fatelo solo dopo aver compreso e applicato comple tamente le indicazioni di Agilent ATTENZIONE L indicazione ATTENZIONE segnala un rischio serio Richiama l attenzione su una pro cedura operativa o analoga ope razione che se non eseguita correttamente o non rispettata pu provocare lesioni personali o mortali Non eseguite mai alcuna operazione ignorando l indica zione ATTENZIONE fatelo solo dopo aver compreso e applicato completamente le indicazioni di Agilent Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazi
76. sopra di 400 nm la lampada a D pu essere spenta L intensit luminosa della lampada a tungsteno sufficiente per ottenere un adeguato rapporto segnale rumore nell intervallo di lunghezze d onda 400 1100 nm Quando si usano celle con aperture piccole occorre verificare il rapporto segnale rumore effettuando le misurazioni del campione alle condizioni specificate dall applicazione Miscelazione e controllo della temperatura L omogeneit della soluzione pu rappresentare un problema soprattutto per le soluzioni viscose In alcuni casi a causa dei gradienti indotti dalla convezione variazioni rapide del fattore di assorbimento possono fornire dati non riproducibili Tali variazioni possono essere rilevate spettroscopicamente effettuando misurazioni con tempi di integrazione brevi Per ridurre al minimo gli effetti della convezione mantenere il campione alla stessa temperatura del Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 49 3 50 Pratiche di misurazione corrette contenitore della cella o dell ambiente Problemi di questo tipo possono essere ridotti al minimo anche usando un contenitore dotato di termostato e o un modulo di agitazione Un effetto simile si pu osservare in caso di miscelazione incompleta della soluzione Ci vale specialmente nei casi in cui la densit o la miscibilit relativa del solvente e della sostanza da analizzare sono molto diverse Anche qui la miscel
77. spettrofotometro e il pulsante Blank attivo 6 La prima attivit da compiere una misurazione di riferimento In genere si sistema la cella contenente il solvente da usare con i campioni in posizione di misurazione e si esegue una misurazione di riferimento Per avviarla fare clic sul pulsante Blank sul pannello strumento o premere il pulsante Blank dello spettrofotometro 56 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 Si tratta di una misurazione di riferimento combinata con la misurazione di uno spettro di base Lo spettro di base fornisce ulteriori indizi sul fattore di assorbimento delle finestre della cella e del solvente Le zone con rumore elevato indicano indirettamente un fattore di assorbimento elevato Per ottenere misurazioni di alta precisione attendere che lo spettrofotometro e le lampade abbiano raggiunto l equilibrio termico Il tempo occorrente dipende dalle condizioni ambientali Lo spettrofotometro dovrebbe essere pronto dopo 45 minuti 7 Poisi procede alla misurazione del campione Per ottenere risultati pi precisi usare la stessa cella con lo stesso orientamento rispetto al fascio di misurazione Lavare la cella per circa tre volte con la soluzione campione e avviare la misurazione facendo clic sul pulsante Sample del pannello strumento o premendo il pulsante Sample sullo spettrofotometro P
78. ssaggio No results present No results present 2 Il rapporto generato sar visualizzato nella finestra di anteprima Fixed Wavelength Report Method file lt untitled gt Information Default Method Data File i Ci HPCHEM 15 DATA ADVEZAM2 5D Created 02 06 1992 11 18 43 Overlaid Spectra Sample 1 Sample 2 Sample 3 09 08 Pa 07 z 06 8085 i Fj 04 2 03 poi q 02 04 0 Name ba lt 41l4nm gt Name Aba lt 414nm gt 1 Sample 1 0 62494 3 Sample 3 0 10637 2 Sample 2 0 21158 Report generated by TK SIONALUre Le 74 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 La finestra permette di visualizzare il rapporto pagina per pagina Se una pagina ha dimensioni superiori a quelle della finestra di anteprima si possono usare le barre di scorrimento per visualizzarla Inoltre si possono scegliere diverse dimensioni di visualizzazione dell anteprima Nell apposita finestra di selezione ne sono disponibili tre In base alla risoluzione del display scegliere la pi adatta alle proprie necessit Nella finestra dell anteprima di stampa sono disponibili le seguenti funzioni e I pulsanti Prev e Next permettono di sfogliare le pagine del rapporto e Un riquadro consente di andare direttamente alla pagina desiderata Il pulsante Print invia il rapporto alla stampante indica
79. ta nell angolo in basso a sinistra della finestra di anteprima di stampa HP LaserJet 5L PCL on LPT1 A4 210 x 297 mm Portrait e Il pulsante Close chiude la finestra di anteprima di stampa e cancella il rapporto visualizzato Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 75 4 usn del sistema di e Agilent 8453 dea fara UV visibili Rice fattore di assorbimento n imo della Ricerca del fattore di assorbimento massimo della caffeina La sezione spiega come trovare il massimo fattore di assorbimento del campione IQ di caffeina 1 Verificare di trovarsi nel modo Standard Il modo indicato sulla barra degli strumenti della sessione di Agilent ChemStation 845x UY Visible System 1 Offline Thomas Klink File Edit Method Measure Instrument Math Yiew Mode olx Config Help Moti M N oe Gi r 2 Selezionare l attivit Spectrum Peaks nella finestra del pannello di analisi Task Spectrum Peaks M Fixed Wavelengths Spectrum Peaks Ratio E quation Quantification 3 Premere il pulsante Setup del pannello di analisi per aprire la finestra di regolazione dei parametri Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 76 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili 4 4 Digitare 2 come numero di picchi da trovare e deselezionare l opzione relativa agli avvallamenti Specificare absorban
80. tate di aperture o microcelle Le celle hanno una larghezza ridotta per ridurre il loro volume e la parte neutra della cella deve essere annerita per evitare la trasmissione e la riflessione indesiderata del fascio luminoso da parte delle pareti laterali Se le pareti laterali non sono annerite la fotometria avr una scarsa precisione e se si misurano concentrazioni diverse una scarsa linearit Lo svantaggio dell uso di celle dotate di aperture e di microcelle che parte del fascio luminoso viene bloccata Non tutta la luce attraversa il campione e ci pu provocare una certa perdita di sensibilit Vedere la Figura 5 per le celle raccomandate e la Figura 6 per le celle sconsigliate con lo spettrofotometro Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Pratiche di misurazione corrette 3 gt nas PN LA gt Celle di quarzo Celle di quarzo con aperture nere Figura 5 Celle raccomandate A i ua e usate con un trasportatore multicelle le celle di quarzo con aperture nere minori di Maua gt gt p piniticaN QUArzo con ab 2 mm possono dare luogo a misurazioni con scarsa riproducibilit gt LN Celle di quarzo con aperture trasparenti celle fluorescenti celle di plastica Figura 6 Celle da non usare con l apparecchio Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 4
81. te infrarosso vicino si possono usare anche celle di vetro di buona qualit Sono disponibili anche celle campione di plastica monouso per misurazioni comprese nell intervallo 400 1100 nm Tuttavia data la loro qualit variabile generalmente se ne sconsiglia l uso Specifiche ottiche delle celle La precisione dei valori forniti da uno spettrofotometro a diodi dipende molto dalle deviazioni spaziali del fascio luminoso che effettua l analisi Le celle con facce opposte non parallele celle a cuneo provocano una deviazione del fascio luminoso vedere Figura 4 Quindi le pareti opposte della cella colpite dal fascio luminoso devono essere il pi possibile parallele Tale parallelismo viene misurato in termini di angolo esistente tra le due pareti opposte della cella Si raccomanda di usare celle con un tragitto di 10 mm e con un angolo inferiore a 0 1 gradi di un arco Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 41 3 Pratiche di misurazione corrette Pareti cella parallele Pareti cella non parallele Ingresso fascio luminoso Uscita fascio luminoso Ingresso fascio luminoso F ni Uscita fascio luminoso Figura 4 Deviazione del fascio luminoso dello spettrofotometro a causa di pareti non parallele della cella Celle dotate di aperture 42 Per applicazioni su campioni di volume ridotto si usano celle do
82. usare celle diverse La lunghezza del percorso pu essere specificata individualmente per ogni cella Per maggiori dettagli sul sistema di trasporto multicella consultare il manuale nstalling and Operating Your Multicell Transport 1 Selezionare Multicell 8 cell nella finestra di selezione del pannello strumenti Sampling Hulticell 7 cell Multicell 8 cell Autosampler XY Autosampler Gilson 2217222 2 Fare clic su Setup sul pannello strumenti Inserire la lunghezza del percorso di tutte le celle usate in cm e fare clic su OK 84 Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Setup Multicell Transport Cell Path Length TTN 3 Per portare in posizione di misurazione una cella per la misurazione successiva fare clic su la cella sul pannello strumenti o selezionare Multicell Transport Position nel menu Spectrophotometer per aprire la finestra di dialogo Multicell transport Control In Multicell Transport Control premere uno dei pulsanti di posizione per spostare il sistema di trasporto multicella Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 4 85 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Uso del sistema di trasporto multicella NOTA Multicell Transport Control cell 8 cell i dl2 ia J a Hone
83. vengono fornite dalla guida online e dal Capitolo 3 Diagnostica e risoluzione dei problemi del Manuale di assistenza I quattro pulsanti di misurazione del pannello frontale regolano l esecuzione delle seguenti attivit con l invio al computer dei dati ottenuti e BLANK lo spettrofotometro esegue la misurazione a vuoto che verr utilizzata per tutte le successive misurazioni condotte sui campioni finch non sar effettuata una nuova misurazione a vuoto Dopo la misurazione a vuoto sul PC viene tracciato e visualizzato lo spettro di base e SAMPLE lo spettrofotometro esegue una misurazione sul campione o avvia una serie di misurazioni a seconda dei parametri fissati nel software e STANDARD lo spettrofotometro esegue la misurazione di uno standard Nel software operativo devono essere introdotti altri dati come la concentrazione e cos via e STOP lo spettrofotometro e o il software interrompono l attivit in corso tornando allo stato iniziale Sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Manuale dell operatore 15 1 Introduzione al sistema Connettore a distanza Connettore per sistema fesso o di trasporto multicella Connettore GP 10 Connettore RS 232 16 Parte posteriore Tutti i collegamenti vengono effettuati nella parte posteriore dello spettrofotometro vedere Figura 3 Connettore GPIB e interruttori Kol Presa MIO per int
84. zza del percorso della cella 80 Controllo del sistema di aspirazione 82 Uso del sistema di trasporto multicella 84 Analisi quantitativa mediante calibrazione con standard 87 Verifica del corretto funzionamento del sistema Agilent 8453 94 Risorse per ulteriori informazioni sulla spettroscopia per radiazioni UV visibili 97 Frequenza della misurazione di campione di riferimento blank 99 Fg Agilent Technologies 55 4 Uso del sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili Avvio della prima sessione di misurazione 1 Verificare che il sistema di spettroscopia Agilent 8453 per radiazioni UV visibili sia stato installato correttamente Per maggiori dettagli sull installazione consultare il manuale Installing Your UV visible Spectroscopy System 2 Accendere il PC il monitor e la stampante Caricare il sistema operativo del PC Sulla barra di attivit del sistema verificare che il server Bootp funzioni o assicurarsi che l amministratore della rete abbia integrato lo spettrofotometro Agilent 8453 nella rete locale Astart 4 E LE CAG Bootp Server 4 Accendere lo spettrofotometro Agilent 8453 Ora un server BootP assegna l indirizzo IP configurato allo spettrofotometro Nell installazione standard questa attivit viene eseguita dal server CAG Bootp 5 Avviare la sessione di misurazione selezionando Instrument 1 online nel menu Il pannello strumento Instrument Panel mostra lo stato dello

Spettrofotometro Agilent 8453

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