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Dako Autostainer
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1. 20 Lavaggio con tampone Rinse Buffer ana neoane aa aaa 20 Lavaggio con acqua Rinse Water 20 Sostituzione del ciclo di lavaggio standard Standard Rinse Replacement 20 Lotto substrato Substrate Batch iccr lait 20 Stuistamento Sith cec eat i a eat part z 0 Ca Cata Lo I aa 20 Creazione e modifica di un modello di protocollo Protocol Template 21 Eliminazione di un modello di protocollo Protocol Template 21 Uso di un nuovo modello di protocollo Protocol Template senza salvare 22 Uso di un modello di protocollo salvato Protocol Template 22 Uso di un modello di protocollo salvato Protocol Template per un programma Auto specifico AUTO PrOGEARII secta Aaaa atit aa nai ia lana na 22 Selezione del volume di distribuzione del reagente per tutte le fasi di un protocollo Selecting Reagent Dispense Volume for All Steps in a Protocol 23 Selezione del volume distribuito del reagente per una fase specifica di un protocollo Selecting Reagent Dispense Volume for a Specific Step in a Protocol 23 Manuale Dako Autostainer vii Programmazione di un ciclo di colorazione eee 25 Definizione dei reagenti di rilevazione Defining Detection Reagents 25 Definizione degli anticorpi primari Defining
2. Salvare su disco Scegliere il pulsante Yes s immettere un nome di modello e fare clic su OK Scegliere il pulsante No Non per usare il modello senza salvare le modifiche Il volume distribuito selezionato viene visualizzato nell intestazione della griglia sulla Programming Grid griglia di programmazione Manuale Dako Autostainer 23 24 Manuale Dako Autostainer Sezione 6 Programmazione di un ciclo di colorazione L Autostainer pu processare fino a un massimo di 48 vetrini per microscopio per ciclo di colorazione Ogni vetrino pu essere colorato usando un protocollo delineato indipendentemente Dopo aver immesso le informazioni relative al vetrino e dopo aver selezionato il modello di protocollo ad ogni vetrino vengono assegnati reagenti specifici Questo viene effettuato dalla Programming Grid griglia di programmazione Questa sezione descrive la programmazione di reagenti specifici per un ciclo di colorazione Ogni fila rappresenta un vetrino con le rispettive informazioni Reagenti disponibili per la fase evidenziata Programming Grid Slides File Edit lists Auto Neg Ctl Pos CHl o ol Saison COP ori onen ERA SN W Manual Step m e lerre edit slide none ALK 1 MxH NP027 AlphaSMACt MxH NP025 Bcl 2 MxH NP030 CD117 Ckit RxH NP039 CD15 MxH NP003 CD20 MxH NP004 Wai CD3 MxH NP050 CD30 MxH NP012 Program Sf Protocol Template Next V4 0 0 IHC 10 27 0
3. Aggiunta anticorpi primari Adding Primary Antibodies Un anticorpo primario pu essere aggiunto all elenco reagenti con un corrispondente reagente di pretrattamento Ci facilita la selezione automatica del pretrattamento quando un anticorpo primario venga selezionato dalla Programming Grid griglia di programmazione 1 Seguire gli stessi punti della sezione Aggiunta reagenti di rilevazione Nota Per aggiungere un controllo negativo compatibile usare esattamente lo stesso nome del controllo positivo aggiungendo il prefisso _NC all inizio del nome del reagente Se l anticorpo primario una fase effettuata al di fuori dell Autostainer es incubazione notturna o se richiede il riscaldamento verificare la casella di controllo Manual Step fase manuale premendo la BARRA SPAZIATRICE Immettere il codice di compatibilit compatibility code corretto e premere INVIO L assegnazione di informazioni sulla compatibilit facoltativa vedere Controllo compatibilit alla fine di questa sezione Selezionare il pretrattamento pretreatment dalla casella usando le frecce SU e GI oppure digitare un nuovo nome pretrattamento e premere INVIO Nota Se Manual Step fase manuale selezionato il tempo d incubazione sar 0 Non modificare questo tempo Modifica ed eliminazione di liste reagenti Editing and Deleting Reagent Lists 1 Dalla Programming Grid griglia di programmazione sele
4. Secondary Reagent es anticorpi secondari biotinilati o legame Reagente terziario Tertiary Reagent es streptavidina marcata con enzima o marcatore Polimero marcato Labeled Polymer es usato nei sistemi di visualizzazione EnVision Lotto substrato Substrate Batch Substrato Substrate Ausiliario Auxiliary es controcolorazione Manuale Dako Autostainer 19 Elementi addizionali del protocollo Additional Protocol Elements Lavaggio con tampone Rinse Buffer Questa fase consiste in un ciclo di lavaggio in tampone e di soffio d aria e va programmata tra le fasi del modello di protocollo Ogni lavaggio con tampone viene raffigurato sulla griglia di programmazione come una gocciolina blu con un icona gocciolina in ogni fila programmata L icona del tampone appare sulla stampa della Programming Grid griglia di programmazione come una gocciolina piena Lavaggio con acqua Rinse Water Questa fase consiste in un ciclo di lavaggio con acqua e di soffio d aria Ogni lavaggio con acqua viene raffigurato sulla griglia di programmazione come una gocciolina bianca con un icona gocciolina in ogni fila programmata L icona dell acqua appare sulla stampa della Programming Grid griglia di programmazione come una gocciolina bianca Sostituzione del ciclo di lavaggio standard Standard Rinse Replacement Il ciclo di lavaggio standard pu essere sostituito da una fase di solo soffio d aria il reagente viene soffiato via d
5. Selezione di una nuova zona di distribuzione del reagente per tutti i vetrini Selecting a new reagent dispense location for all slides 33 Gesuonedel agenti tc pentirai ri tata ina A ic te 35 Aggiunta reagenti di rilevazione Adding Detection Reagents Secondario Secondary Terziario Tertiary Substrato Substrate ecc 35 Aggiunta anticorpi primari Adding Primary ANtibodieSs eee 36 Modifica ed eliminazione di liste reagenti Editing and Deleting Reagent Lists 36 Aggiornamento del numero di lotto del reagente e della data di scadenza Updating a Reagent Lot Number and Expiration Date nenea 36 Controllo compatibilit Compatibility CHeCkK ii 37 Caricamento del reagenti alari 39 Schermata Mappa disposizione reagenti Reagent Layout Map Screen 39 Avviso di Reagente mancante Missing Reagent NOtice 40 Ca camentodei Veli pa i sie it i etc ac Bila nada aria e int 41 Caric vetrini Load Slides soarce a ae aa s eat at ai ad 41 Inizio ciclo di colorazione sie tit a n iar n a a a a Ri ia tac 43 Preparazione del sistema per un ciclo di colorazione Preparing the System for a SIANO RU cae aria c aa ae Sa aaa d dd na et ao aaa Daia Ea gii alia 43 INIZIO rapido anita aa Aa a Re ar ana 43 Schermata Diario del ciclo Run Log Screen 44 Spegnimento del
6. Primary Antibodies 26 Assegnazione dei reagenti per il controllo positivo e negativo Assigning Positive and Negative Control Reagents uii ot o a aa il a a ta 27 Aggiunta di reagenti per il controllo positivo e negativo Adding Positive and Negative Control Reageni s caine ceea ara ina a aia ala ca n ei aa at li ati 27 Controlli negativi Negative Controls m cnc ae ennonneee a aaaaaaeae aaa 27 Definizione di lavaggi specifici Defining Specific Rinses ee nenea 28 Programmazione Auto Auto Programming 29 Eliminazione di un elemento di programmazione Auto Deleting an Auto Program agenti facolta ira anna aspirina lia aiuto 29 Uso di un elemento di programmazione Auto Using an Auto Programming Item 30 Copiarincolla Copy Paste a ata iii intai a da pat e tao ada Ei ama ae 30 Modifica di una fase del protocollo Editing a Protocol Step 31 Opzioni di stampa Printing Options e sea cca cc poesia sa aa i a pa p a 31 Etichette vetrini Slide Labels i 31 Etichette reagenti Reagent Labels iii 32 Rapporli s r lalui elio 32 Visualizzazione dei vetrini programmati Viewing Programmed Slides 33 Assegnazione delle zone di distribuzione del reagente Assigning Reagent Dispense Locations scite lirici ali a ae Bt la o ba Da 33 Stampa di una Mappa disposizione vetrini Slide Layout Map 33
7. contratto d assistenza Non spostare il sistema Autostainer all interno della propria struttura senza essersi rivolti prima al rappresentante locale Dako per ricevere importanti informazioni che potrebbero riguardare la validit della garanzia A Prima di utilizzare nell Autostainer soluzioni o reagenti di altri produttori rivolgersi al rappresentante locale Dako Alcuni solventi acidi e altre soluzioni possono danneggiare le componenti interne dell Autostainer e compromettere le prestazioni dell apparecchio e la validit della garanzia Prima di iniziare un ciclo con il sistema rimuovere il tappo dalle fiale di reagente Prima di iniziare un ciclo con il sistema mettere i raccoglitori portavetrini nella posizione inferiore Prima di iniziare un ciclo mettere i raccoglitori per le fiale nel loro alloggiamento Non usare la barra di scorrimento per selezionare i reagenti dalle liste corrispondenti nell impostazione di cicli successivi mentre l Autostainer in funzione L uso della barra di scorrimento durante il funzionamento causa una pausa temporanea del Autostainer Non usare i simboli per programmare i reagenti o i protocolli potrebbero risultarne errori di esecuzione Non eseguire pi di un applicazione software durante il funzionamento compreso lettore CD e salvaschermi Non installare componenti software o hardware di altri produttori ci potrebbe bloccare l Autostainer e invalidare la garanzia Non stampa
8. essere gli stessi Eliminazione di un elemento di programmazione Auto Deleting an Auto Programming Item 1 Selezionare Auto dalla barra di men della Programming Grid griglia di programmazione 2 Selezionare Setup imposta dal men Auto La parola Auto si trasforma in Setup imposta 3 Selezionare ogni riquadro attivato sulla Programming Grid griglia di programmazione per visualizzare la finestra Save Auto Program salva programma Auto 4 Fare clic sull Auto Program da eliminare 5 Fare clic sul pulsante Delete Program elimina programma Manuale Dako Autostainer 29 6 Fare clic sul pulsante Yes si per eliminare il programma Uso di un elemento di programmazione Auto Using an Auto Programming Item 1 2 3 Selezionare Auto dalla barra di men della Programming Grid griglia di programmazione Selezionare Program programma dal men Auto Selezionare un riquadro nella fila in cui Auto Program va inserito Un elenco visualizza i file salvati di Auto Program che possono essere assegnati per questo vetrino Selezionare il nome di file desiderato per Auto Program per inserire il programma Se l Auto Program non contiene alcun anticorpo primario un messaggio avverte Assegnare a tutti i vetrini seguenti Assign to all following slides Fare clic su Yes s per assegnare l Auto Program a tutti i vetrini non programmati Fare clic su No Non per assegnare l Auto Program solo a ques
9. il recipiente con la quantit necessaria di liquido Quindi effettuare il priming della pompa Tubature piegate o ristrette Raddrizzare le tubature ed effettuare il priming della pompa Manuale Dako Autostainer 45 Problema Possibile causa Risoluzione Il tampone o l acqua deionizzata un priming Cont non scorrono via durante un ciclo o Il tubo non connesso con la presa d alimentazione Controllare i tubi e verificarne la corretta connessione I filtri della presa sono intasati ed ostacolano il flusso Controllare i filtri d immissione all estremit dei tubi nel contenitore e pulirli se necessario Dako raccomanda l uso di un completo tubo cappuccio S3472 per impedire che oggetti estranei penetrino nei contenitori ostruendo il filtro Tubi non completamente inseriti nel contenitore Assicurarsi che i tubi per il tampone e per l acqua deionizzata siano inseriti completamente nei contenitori adeguati Pompa tampone acqua deionizzata difettosa Rivolgersi a un rappresentante Dako Tutti i rifiuti confluiscono in un unico contenitore Switch smistamento non programmato nel Protocol Template modello di protocollo Programmare uno Switch smistamento nel Protocol Template modello di protocollo Tubo dei rifiuti non inserito nel contenitore rifiuti adeguato Verificare che tutti i tubi per i rifiut
10. stampa definiti dall utente per la Programming Grid griglia programmazione e per gli IHC Reports rapporti IHC Initialize Institution Information Name DakoCytomation Inc Address Department Lab Slide Labels Contact Phone Ext Serial Number DC3400 6120 03 AI Instrument ID Options Reagent Labels Staff Information Default reagent volume 100 microliters 150 microliters 200 microliters 400 microliters vi Default Doctor 600 microliters Users Drop zone Doctors Tissue Information Cleaning Schedule Slides Cleaning 150 Tissues OK Cancel Print Help VA 0 0 IHC 10 27 03 4 24PM Joe Smith DakoCytomation Inc DC3400 6120 03 Inizializzazione stampa etichette Label Printing Initialization pulsanti Slide Labels etichette vetrini e Reagent Labels etichette reagenti vengono visualizzati sulla schermata Initialize inizializza e sono usati per l accesso alle schermate Design Label crea etichetta per configurare ed aggiustare la stampa delle etichette di vetrini e di reagenti Etichette vetrini Slide Labels Il pulsante Slide Labels etichette vetrini viene visualizzato sulla schermata Initialize inizializza ed usato per l accesso alle schermate Design Slide Label crea etichetta vetrino per configurare e regolare la stampa delle etichette dei vetrini Le etichette dei vetrini vengono stampate mediante il pulsante Print stampa sulla P
11. un icona di fiori per indicare il passaggio da rifiuti pericolosi a rifiuti non pericolosi Nota La fase di smistamento deve essere preceduta da una fase di lavaggio nel modello di protocollo La prima fase di smistamento in ogni modello di protocollo uno smistamento verso rifiuti pericolosi 20 Manuale Dako Autostainer Creazione e modifica di un modello di protocollo Protocol Template Nota nomi dei modelli possono contenere fino a otto caratteri alfanumerici senza simboli o spazi vuoti 1 Scegliere il pulsante Protocol Template modello di protocollo sulla Programming Grid griglia di programmazione Appare la schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo con il modello di protocollo predefinito visualizzato nella colonna Protocol Outline profilo del protocollo Scegliere il pulsante New Template nuovo modello Il modello di protocollo predefinito viene sostituito dalla prima fase predefinita tampone di lavaggio del nuovo modello Nota Se nella schermata Options opzioni viene selezionato No Pre rinse senza pre lavaggio il primo tampone di lavaggio non viene visualizzato vedere Inizializza Sezione 3 Creare il nuovo modello di protocollo dall elenco Protocol Elements elementi del protocollo Fare clic su un reagente dell elenco l elemento viene copiato nell elenco Protocol Outline profilo del protocollo e gli viene attribuito un numero progressivo Nota Se sulla scher
12. un vetrino specifico Questo metodo elimina un vetrino alla volta 1 Sulla Programming Grid griglia di programmazione fare clic con il tasto sinistro sul numero di vetrino sulla fila che localizza il vetrino Una finestra di dialogo chiede se si voglia eliminare il vetrino selezionato 2 Scegliere il pulsante Yes s per eliminare il vetrino selezionato dal programma attuale Nota Se le etichette del vetrino sono state stampate i nomi dei reagenti sono sostituite da riquadri vuoti nella fila dei vetrini eliminati Cambio di posizione dei vetrini sulla Programming Grid griglia di programmazione 1 Sulla Programming Grid griglia di programmazione fare clic con il tasto destro sul numero di vetrino sulla fila che localizza il vetrino 2 Spostare il puntatore del mouse nella posizione in cui si desidera inserire il vetrino e fare clic con il tasto sinistro L informazione del vetrino ora inserita nella nuova posizione Manuale Dako Autostainer 17 18 Manuale Dako Autostainer Sezione 5 Creazione di un protocollo modelli di protocollo Protocol templates consentono di immettere la serie di fasi richieste per la colorazione di un vetrino e di salvare il protocollo per l uso futuro Un basso livello di sicurezza non permette la creazione o la modifica dei modelli di protocollo Protocol Template Design Current Master Reagent Yolume Protocol Outline Rinse Buffer End Enz Block Rinse Buffer Pre
13. visualizzato Apparecchio non acceso Instrument Not On quando si inizia un ciclo L Autostainer non collegato alla presa di corrente Verificare la connessione elettrica e controllare che il limitatore di sovratensione sia inserito e acceso L Autostainer non risponde quando si inizia un priming della pompa o un ciclo LED in alto spento Messaggio visualizzato Apparecchio non acceso Instrument Not On quando si inizia un ciclo Il cavo di connessione tra Autostainer e computer non inserito adeguatamente Arrestare il sistema e spegnerlo Staccare e riconnettere il cavo tra Autostainer e computer Si prega di agire con cautela Durante quest operazione i pin possono piegarsi causando danni all apparecchio L Autostainer si interrompe improvvisamente durante un ciclo L Autostainer si arrester frequentemente durante il ciclo Ci dovuto ai tempi d incubazione impostati Controllare il diario del ciclo run log Non richiesta alcuna azione L Autostainer riprender il movimento Controllare la schermata Run Log diario del ciclo Il tampone o l acqua deionizzata non scorrono via durante un ciclo o un priming L Autostainer non stato sottoposto a priming corretto Priming pompa possibile che la pompa debba essere attivata pi volte Tampone o acqua deionizzata in quantit insufficiente nell apposito recipiente Riempire
14. volume minimo di reagente in ogni fiala come specificato nella Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti Tampone e Controllare il volume minimo per il tampone indicato nella Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti pi l eventuale volume addizionale elencato per portare a termine un ciclo ritardato Acqua e Controllare il volume minimo per l acqua indicato nella Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti Contenitori rifiuti e Controllare che abbiano lo spazio sufficiente per ospitare il volume di tampone e di acqua usati durante il ciclo di colorazione Inizio rapido Accendere il computer Fare doppio clic sull icona dell Autostainer Immettere User Name nome utente e password quindi premere INVIO Scegliere il pulsante Program Programma sul men principale Selezionare Slides vetrini dalla barra di men Per immettere informazioni riguardanti uno specifico vetrino vedere la Sezione 4 PS Manuale Dako Autostainer 43 5 Immettere il conteggio dei vetrini per il ciclo di colorazione e fare clic su OK Nota Tralasciare i punti sei e sette se si usa il modello predefinito 6 Scegliere il pulsante Protocol Template modello di protocollo e selezionare un modello di protocollo per il ciclo 7 Scegliere il pulsante Use Template usa modello Apparir la Programming Grid griglia di programmazione con il protocollo selezionato 8 Selezionare il volume e le bande di distribuzione desider
15. 3 4 28PM Joe Smith gt DakoCytomation Inc Definizione dei reagenti di rilevazione Defining Detection Reagents Prima di poter programmare reagenti specifici per i vetrini bisogna immettere le informazioni relative ai vetrini e selezionare un modello di protocollo come descritto nelle Sezioni 4 e 5 Viene visualizzata la Programming Grid griglia di programmazione che elenca i vetrini identificati durante l immissione della conta o delle informazioni dei vetrini Viene evidenziato il primo campo programmabile e viene visualizzato un elenco di reagenti disponibili per la fase 1 Selezionare un reagente usando i tasti freccia SU e GI ed inserire il reagente premendo INVIO Un messaggio chiede Assegnare ai seguenti vetrini non programmati Assign to the following unprogrammed slides Manuale Dako Autostainer 25 2 Scegliere Yes si per assegnare il reagente selezionato ai vetrini rimanenti nella griglia viene evidenziata la fase programmabile successiva Scegliendo No Non il reagente sar assegnato solo alla fase evidenziata 3 Dopo aver programmato tutti i reagenti fare clic sul pulsante Next avanti A questo punto il sistema esplora la griglia in cerca di lavaggi mancanti Se manca un lavaggio tra due reagenti un messaggio chiede se si desidera continuare 4 Scegliere Yes s e se il programma nuovo una finestra di dialogo chiede Salvare il programma su disco Save program on di
16. Dako Autostainer Italian Handbook Manuale Dako Autostainer Manuale Dako Autostainer Manuale Dako Autostainer Dako Autostainer Manual Numero documento 0000636 Revisione A Luglio 2006 Manuale Dako Autostainer Copyright 2006 Dako Inc Tutti i diritti riservati Questo documento non pu essere copiato per intero o in parte n riprodotto sotto alcuna forma senza l espressa autorizzazione scritta di Dako Inc Si tenga presente che secondo la legge sul diritto d autore per copia s intende anche la traduzione in un altra lingua Risorse dell utente Per informazioni aggiornate sui prodotti e sui servizi Dako si prega di visitare il sito internet all indirizzo http www dako com Procedimento per l installazione Il personale Dako si occuper dell istallazione iniziale e delle impostazioni di partenza di tutte le componenti del sistema Procedimento per spostare il sistema Rivolgersi al Servizio Tecnico Dako prima di spostare il sistema Contenuto Questo manuale contiene le informazioni di base sull uso e sul funzionamento di Autostainer Si presume che l utente abbia gi conseguito una certa formazione di base con l apparecchio Per le informazioni non contenute nel presente manuale si prega di rivolgersi al nostro Servizio Tecnico o di consultare la Guida dell utente di Autostainer Questo manuale non contiene le istruzioni per l installazione e per l aggiornamento delle compo
17. Delete Template elimina modello Un messaggio chiede se si voglia eliminare il modello di protocollo selezionato Scegliere il pulsante Yes si Manuale Dako Autostainer 21 Nota Quando il modello predefinito viene eliminato va selezionato un nuovo modello dalla finestra Get Template cerca modello e salvato come modello predefinito Uso di un nuovo modello di protocollo Protocol Template senza salvare 1 Dopo aver creato o modificato un modello di protocollo fare clic sul pulsante Use Template usa modello sulla schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo Una finestra di dialogo chiede Salvare su disco Save on disk now 2 Scegliere No Non apparir la Programming Grid griglia di programmazione con il nuovo modello nella riga d intestazione Nota Se un ciclo di colorazione gi stato programmato e il nuovo modello di protocollo omette le fasi precedentemente programmate viene visualizzato un messaggio d avviso in cui riportato che le fasi programmate saranno tralasciate quando si applica il nuovo modello di protocollo Uso di un modello di protocollo salvato Protocol Template 1 Scegliere il pulsante Protocol Template modello di protocollo sulla Programming Grid griglia di programmazione 2 Scegliere il pulsante Get Template cerca modello selezionare il modello dall elenco e fare clic su OK 3 Fare clic sul pulsante Use Template usa modello Apparir la Prog
18. Immettere il codice di compatibilit corretto vedere Controllo compatibilit Sezione 7 5 Selezionare UNC o UNC plus nel campo Neg Ctl Type tipo di controllo negativo per assegnare un Universal Negative Control controllo negativo universale Uso dello strumento Controllo negativo Negative Control Tool Per inserire un Universal Negative control controllo negativo universale fare clic sul pulsante Neg Ctl controllo negativo nella Programming Grid griglia di programmazione Nota Lo strumento Neg Ctl controllo negativo seleziona uno dei quattro Universal Negative Controls controlli negativi universali a seconda della compatibilit e del tipo di controllo negativo definito per l anticorpo primario Se l anticorpo primario non ha definita alcuna compatibilit n alcun tipo di controllo negativo appare un messaggio di errore che comunica l assenza del reagente di controllo negativo compatibile Nota Se non si desidera usare la funzione sopra descritta si pu continuare la programmazione come al solito Questa funzione non attiva quando si usa Auto Program programma Auto Definizione di lavaggi specifici Defining Specific Rinses Dopo ogni reagente programmato eccetto che per Protein Block blocco Proteine dove viene aggiunta una fase di soffio d aria viene aggiunto un lavaggio quando assegnato come descritto sopra Il tipo di lavaggio viene selezionato nella schermata Protocol Template veder
19. Risoluzione Controllare la stampa Load Slide carica vetrini e verificare il corretto posizionamento vetrini sono stati caricati con il campione biologico rivolto verso il basso Orientare adeguatamente i vetrini Errore di programmazione Controllare la Programming Grid griglia di programmazione per assicurarsi che il ciclo di colorazione sia stato programmato correttamente Assenza di colorazione Cont vetrini si asciugano Accertarsi che sia programmato un adeguato volume di distribuzione necessario per i tempi d incubazione desiderati Assicurarsi dell assenza di condizioni ambientali che favoriscano l asciugatura dei vetrini cio luce solare diretta riscaldamento aria condizionata aspirazioni ecc Il testo dell etichetta non lungo il margine sinistro dell etichetta e risulta tagliato La stampante Seymour deve essere reimpostata Per reimpostare la stampante di etichette Seymour spegnere la stampante Tenere premuto il pulsante verde di avanzamento etichette in alto sulla stampante Riaccendere la stampante tenendo premuto il pulsante verde e continuando a tenerlo premuto per tre secondi Le etichette si portano in avanti e la stampante pronta per stampare Rilasciare il pulsante di avanzamento Per far avanzare un etichetta premere e rilasciare di nuovo il pulsante di avanzamento Eseguire una prova di stampa Compare un errore durante
20. SU e GI della tastiera e premere INVIO Nota Per rendere un pretrattamento una fase manuale fare clic con il tasto destro su di un pretrattamento Viene visualizzato l elenco dei pretrattamenti disponibili Selezionare dall elenco il pretrattamento desiderato 3 Alla fine dell elenco degli anticorpi primari vengono elencati i controlli negativi universali ed i controlli negativi compatibili assegnati precedentemente e salvati a questi controlli negativi si pu accedere con la tastiera premendo il tasto MAIUSCOLA e digitando _ Una volta selezionato il controllo negativo corretto premere INVIO e sulla Programming Grid griglia di programmazione compariranno il reagente negativo ed il pretrattamento selezionati 4 Scegliere il pulsante Next avanti il sistema esplora la griglia in cerca di lavaggi mancanti Se manca un lavaggio tra due reagenti un messaggio chiede se si desidera continuare 5 Scegliere Yes s e se il programma nuovo una finestra di dialogo chiede Salvare il programma su disco Save program on disk Altrimenti compare la schermata Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Scegliere No Non per ritornare alla Programming Grid griglia di programmazione e il lavaggio mancante apparir nella griglia 26 Manuale Dako Autostainer Assegnazione dei reagenti per il controllo positivo e negativo Assigning Positive and Negative Control Reagents reagenti per il controllo positivo
21. al vetrino senza applicazione di tampone facendo clic con il tasto destro sull icona della gocciolina nella griglia di programmazione L icona della gocciolina viene sostituita da un vortice bianco Lotto substrato Substrate Batch Questa fase suddivide il ciclo di colorazione in due operazioni distinte La prima comprende tutte le fasi precedenti all applicazione del substrato mentre la seconda raggruppa tutte le fasi che iniziano con l applicazione del substrato Questa funzione permette di usare substrati instabili che necessitano di essere preparati immediatamente prima dell applicazione L Autostainer si arresta dopo che le fasi della prima operazione senza substrato sono concluse Un segnale acustico avverte che va caricato il substrato e lo schermo ne visualizza la destinazione di solito in posizione D8 del raccoglitore per reagenti a Nota La fase del lotto substrato pu essere usata solo quando inserita in un modello di protocollo Protocol Template Smistamento Switch Questa fase programma lo smistamento dei rifiuti da un contenitore all altro per separare i rifiuti pericolosi da quelli non pericolosi La fase Switch viene visualizzata sulla Programming Grid griglia di programmazione con l icona del teschio in ogni fila programmata La fase Switch pu essere usata pi volte in ogni Protocol Template modello di protocollo Quando si programmano fasi di smistamento successive l icona del teschio si alterna ad
22. aratteri rappresentano il numero del modello es 2642 Schermata opzioni The Options Screen Il pulsante Options opzioni viene visualizzato sulla schermata Initialize inizializza La schermata Options opzioni permette di selezionare opzioni di formato per la Programming Grid griglia di programmazione e per il IHC Report oltre ad opzioni per il lavaggio rinsing e per le mappe disposizione vetrini slide layout maps Griglia programmazione formato Format Program Grid Questa funzione permette di scegliere opzioni di formato per la Programming Grid griglia di programmazione Gli elementi selezionati vengono visualizzati sulla schermata Slide Info info vetrini e sulla Programming Grid griglia di programmazione Manuale Dako Autostainer 11 Nota Selezionando l elemento Comment commento si crea una colonna per l immissione dei dati sulla stampa della Programming Grid griglia di programmazione Questa colonna non viene visualizzata sulla schermata Programming Grid griglia di programmazione Rapporto IHC IHC Report Le opzioni di stampa per il IHC Report comprendono e Un ID vetrino slide ID pagina stampa ogni Slide ID ID vetrino su una pagina separata Un caso case pagina stampa un case caso per pagina Senza interruzione pagina No page break stampa in continuo tutti i vetrini per un ciclo Opzioni personalizzate Custom Options Questa funzione permette di scegliere opzioni di lavaggio e di soff
23. are il numero dei vetrini e fare clic su OK Nota Se tutte le file sono programmate il vetrino deve essere eliminato dalla Programming Grid griglia di programmazione vedere Eliminazione di uno specifico vetrino pi avanti in questa sezione Eliminazione delle informazioni identificative di vetrino Deleting Slide ID Information Uso del pulsante Slide Info info vetrini Deleting Slide Identification Eliminazione identificazione vetrino elimina tutti i vetrini associati con l identificativo vetrino selezionato Deleting a Case Number Eliminazione di un numero di caso elimina tutti i vetrini associati con il caso d identificazione vetrino selezionato Deleting a Block ID Eliminazione di un ID di blocco elimina tutti gli ID di blocco associati con il numero di caso selezionato 1 Scegliere il pulsante Slide Info info vetrini sulla Programming Grid griglia di programmazione 2 Premere il tasto FRECCIA GI quando l identificazione del vetrino desiderato evidenziata nel campo Slide ID ID vetrino e premere INVIO Il cursore si sposta nel campo Case caso n Se necessario selezionare altri criteri 3 Scegliere il pulsante Delete elimina Una finestra di dialogo chiede se si voglia eliminare l identificativo del vetrino selezionato 4 Scegliere il pulsante Yes s Scegliere il pulsante Finish Entry fine immissione per salvare le modifiche 16 Manuale Dako Autostainer Eliminazione di
24. ati per tutti i vetrini oppure per singoli vetrini 9 Assegnare a tutti i vetrini gli anticorpi ed i reagenti specifici quindi scegliere il pulsante Next avanti Compare la schermata Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Program Slides vetrini programmati 10 Scegliere il pulsante Next avanti sulla Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti 11 Caricare i reagenti usando la Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti Controllare il volume dell acqua e del tampone accertarsi che vi sia posto sufficiente per i rifiuti 12 Scegliere il pulsante Next avanti Compare la schermata Slide Layout Map Load Slides disposizione vetrini carica vetrini 13 Caricare i vetrini usando la schermata Slide Layout Map Load Slides disposizione vetrini carica vetrini 14 Fare clic sul pulsante Next avanti 15 Appare la schermata Set Start Time imposta tempo d inizio Il sistema calcola la durata del ciclo e la quantit di tampone e di acqua deionizzata occorrente per portare a termine il ciclo 16 Scegliere il pulsante Prime Pump Water priming pompa acqua e fare clic su OK 17 Scegliere il pulsante Prime Pump Buffer priming pompa tampone 18 Impostare i livelli di reagente a Check Volumes verifica volumi o Do Not Check Volumes senza verifica volumi 19 Scegliere il pulsante Start Run Inizio del ciclo Schermata Diario del ciclo Run Log Screen Durante un ciclo di colorazio
25. azione incubation time del reagente possono essere modificati 3 Aggiungere un nuovo reagente immettendo le informazioni appropriate 4 Scegliere il pulsante OK Il nuovo reagente viene aggiunto solo per il ciclo attuale di colorazione non all elenco di reagenti disponibili per questa fase Nota Non usare i simboli nella modifica di informazioni dei reagenti potrebbero risultarne errori di esecuzione Opzioni di stampa Printing Options Autostainer permette di stampare le etichette dei vetrini e dei reagenti cos come anche dei rapporti contenenti informazioni sui programmi sui cicli e sui reagenti conservati Etichette vetrini Slide Labels 1 Scegliere il pulsante Print stampa in basso sulla schermata Programming Grid griglia di programmazione La schermata Which Report quale rapporto visualizza sette opzioni 2 Scegliere il pulsante Slide Labels etichette vetrini Manuale Dako Autostainer 31 3 Per stampare tutte le etichette vetrini per il programma scegliere il pulsante All Labels tutte le etichette Il formato delle etichette vetrini viene determinato tramite la schermata Design Slide Label crea etichetta vetrino alla quale si accede dalla schermata Initialize vedere Inizializza Sezione 3 Per stampare un ambito di etichette digitare l ambito con un trattino fra il numero iniziale e quello finale es 5 12 Per stampare etichette singole digitare i numeri delle etichette separati da virgo
26. bia la necessaria esperienza con anticorpi reagenti e metodi impiegati deve essere il responsabile per l interpretazione del preparato sottoposto a colorazione La colorazione va effettuata in un laboratorio qualificato ed autorizzato sotto la direzione di un patologo responsabile dell esame dei vetrini colorati e che garantisca l adeguatezza dei controlli positivi e negativi reagenti possono mostrare reazioni inattese nei tessuti non precedentemente sottoposti a test A causa della variabilit dell espressione antigenica nelle neoplasie o in altri tessuti patologici la possibilit di reazioni inattese nei gruppi di tessuti sottoposti a test non pu essere esclusa del tutto Rivolgersi al rappresentante locale Dako con la 2 Manuale Dako Autostainer documentazione delle reazioni inattese tessuti di soggetti infettati con virus dell epatite B e contenenti il relativo antigene di superficie HbsAg possono esibire una colorazione non specifica con la perossidasi di rafano Smaltimento corretto di questo prodotto conformemente alla direttiva 2002 96 CE sullo smaltimento delle apparecchiature elettriche ed elettroniche applicabile nell Unione Europea e nelle altre nazioni europee dotate di sistemi di raccolta differenziata Contattare un rappresentante Dako per lo smaltimento IEEE dell apparecchiatura alla fine della sua vita utile Non mischiare questo prodotto con altri rifiuti commerciali per lo smaltimento Manua
27. e Creazione di un protocollo Sezione 5 Il tipo di lavaggio pu essere anche cambiato dalla Programming Grid griglia di programmazione Fare clic su un riquadro attivato in una colonna lavaggio Fare di nuovo clic per cambiare il lavaggio in una selezione diversa rinse buffer lavaggio con tampone rinse DI water lavaggio con acqua deionizzata blow soffio d aria o none nessun elemento Nota lavaggi che precedono uno smistamento switch non possono essere cambiati dalla Programming Grid griglia di programmazione Il lavaggio alla fine di un ciclo non pu essere cambiato in una fase di soffio d aria 28 Manuale Dako Autostainer Programmazione Auto Auto Programming Auto Programming programmazione Auto una funzione che rende piu efficiente la programmazione dei vetrini Questa funzione usata per salvare tutto o parte di un protocollo per l uso in future programmazioni Un Auto Program pu consistere in una o pi file di programmazione La sicurezza di livello basso non permette di creare n di salvare Auto Programs 1 Immettere le informazioni riguardanti i vetrini e selezionare un modello di protocollo Va programmato almeno un vetrino tramite Slide Count conta vetrini o mediante la schermata Slide Information informazioni vetrini Fare clic su OK o sul pulsante Finish Entry fine immissione 2 Compilare le colonne della Programming Grid griglia di programmazione con i reagenti s
28. e reagente 1 2 e Reagent Name 2 2 nome reagente 2 2 sono usati insieme su righe adiacenti per dividere un nome di reagente troppo lungo in 2 righe separate Reagent Name 1 2 conterr la prima met del nome reagente mentre Reagent Name 2 2 ne conterr la seconda La lunghezza di ogni riga viene impostata usando lo strumento Length lunghezza Scegliere l opzione desiderata per ogni campo Nota Le informazioni statiche quali il nome dell istituto possono essere immesse nel campo Quest informazione riportata su tutte le etichette Per immettere informazioni statiche evidenziare il testo nel campo desiderato e digitare il testo nella casella di testo Premere ENTER INVIO Scegliere il numero di caratteri per ogni riga 10 12 14 o 16 selezionando un numero dall elenco Length lunghezza selezionando 10 caratteri verr visualizzato il testo in grassetto Regolazione etichetta Label Adjustment 1 Per controllare la posizione del testo sull etichetta del vetrino o del reagente scegliere il pulsante Adjust Label regola etichetta dalle schermate Design Slide Label crea etichetta vetrino o Design Reagent Label crea etichetta reagente 2 Scegliere il pulsante Test Print prova di stampa La stampante etichette crea un etichetta Manuale Dako Autostainer Nota La stampante esegue automaticamente la regolazione orizzontale Se il testo non inizia lungo il margine sinistro dell etichetta possibile che la stam
29. e e non possono essere incollate in aree che non siano attualmente evidenziate Selezionare Paste incolla sulla barra di men per disattivare la funzione Copy copia Manuale Dako Autostainer Modifica di una fase del protocollo Editing a Protocol Step Il software di Autostainer offre sulla Programming Grid griglia di programmazione diversi metodi per modificare i reagenti in un determinato ciclo di colorazione Modifica di un reagente di una fase 1 Fare clic sulla fase del reagente che si desidera modificare 2 Selezionare dall elenco il reagente desiderato Viene visualizzato il nuovo reagente per la fase Sostituzione di un reagente con la fase skip senza aggiunta di reagente al vetrino 1 Fare clic sulla fase del reagente che si desidera modificare 2 Selezionare la parola None nessun elemento Modifica di un reagente in una fase di colorazione solo per un ciclo 1 Per modificare un reagente in una fase di colorazione o per usare un reagente non elencato nell elenco reagenti fare clic sulla fase appropriata 2 Selezionare Edit Slide modifica vetrino dall elenco reagenti La finestra Edit Individual Slide Reagent modifica reagente individuale del vetrino visualizza le informazioni associate al reagente Nota Lotto Lot e data date non possono essere qui modificati ed appaiono in grigio Il nome lungo long name il nome corto short name la compatibilit compatibility ed il tempo d incub
30. e fino a 33 caratteri alfanumerici Nel campo Long Name nome lungo del reagente non possibile usare simboli Immettere il nome abbreviato del reagente nel campo Short Name nome corto e premere INVIO Il nome abbreviato non pu contenere pi di 10 caratteri alfanumerici e deve essere unico per distinguere ogni reagente dagli altri Nel nome abbreviato del reagente non possibile usare simboli Il cursore si sposta nel campo Compatibility compatibilit Immettere il codice di compatibilit corretto e premere INVIO L assegnazione di informazioni sulla compatibilit facoltativa vedere Controllo compatibilit alla fine di questa sezione Immettere il numero di lotto del reagente e premere INVIO Il numero di lotto non pu contenere pi di 8 caratteri alfanumerici Le informazioni sul numero di lotto sono facoltative Immettere la data di scadenza del reagente e premere INVIO La data di scadenza del reagente facoltativa Usare il formato MM AA Nota Tutte le date di scadenza sono limitate ad un massimo di 10 anni dalla data di registrazione Immettere il tempo d incubazione del reagente e premere INVIO Seguire i punti 3 8 fino a quando tutti i reagenti non siano stati aggiunti Nota In condizioni di funzionamento appropriate richiesto un tempo minimo d incubazione di due minuti Scegliere il pulsante OK per aggiungere nuovi reagenti alla Reagent List liste reagenti Manuale Dako Autostainer 35
31. e ha lo scopo di minimizzare gli errori di programmazione risultanti dall assegnazione di reagenti incompatibili quali streptavidina marcata con fosfatasi alcalina e substrato DAB ad un protocollo vetrini Questa funzione presenta due livelli di verifica La prima verifica per la compatibilit della reattivit della specie dell anticorpo primario e del reagente secondario La seconda indirizza le regole di compatibilit dettate dall enzima usato nel sistema di rilevazione La seguente tabella riassume le regole ed i codici di compatibilit assegnati ad ogni tipo di reagente Ogni reagente della lista categorie di reagenti reagent categories o Protocol Element elemento di protocollo pu essere programmato con un codice o con una combinazione di codici di compatibilit appropriati Ad esempio un reagente legante che reagisce con anticorpi di topo e di coniglio pu essere marcato con il codice di compatibilit AB Il software verifica che queste regole di compatibilit non siano violate durante la programmazione di un ciclo di colorazione Se viene assegnato un reagente incompatibile ad un riquadro della programming grid griglia di programmazione un messaggio visualizzer i due reagenti incompatibili Reattivit di specie Tipo reagente Descrizione Codice Elemento di compatibilit protocollo Primary Antibody Anticorpi primari monoclonali prodotti nel A anticorpo primario topo es anti umani di topo Pri
32. e negativo possono essere aggiunti automaticamente per ogni anticorpo primario aggiunto alla Programming Grid griglia di programmazione controlli vengono aggiunti come nuovi vetrini e contengono i reagenti compatibili per la rilevazione del campione biologico saggiato Aggiunta di reagenti per il controllo positivo e negativo Adding Positive and Negative Control Reagents 1 Immettere le informazioni riguardanti i vetrini Slide Information e selezionare un modello di protocollo Va programmato almeno un vetrino tramite Slide Count conta vetrini o mediante la schermata Slide Information informazioni vetrini Fare clic su OK o sul pulsante Finish Entry fine immissione 2 Compilare le colonne della Programming Grid griglia di programmazione con i reagenti specifici per ogni vetrino Dopo aver applicato l anticorpo primario sulla barra di men vengono visualizzati i pulsanti Neg Ctl controllo negativo e Pos Ctl controllo positivo Continuare immettendo i reagenti di rilevazione 3 Per inserire un controllo positivo compatibile fare clic sul pulsante Pos Ctl controllo positivo Sar aggiunto un vetrino alla Programming Grid griglia di programmazione con reagenti compatibili con l ultimo vetrino programmato Nella colonna del numero di vetrino appare PC reagente di controllo positivo Controlli negativi Negative Controls Per i controlli negativi sono a disposizione due opzioni Controlli negativi unici per ogn
33. etrini The Slide Info Button Il pulsante Slide Info info vetrini consente l immissione di informazioni specifiche relative ai singoli vetrini campi visualizzati vengono determinati durante l inizializzazione 1 Scegliere il pulsante Program programma sulla schermata Main Menu men principale 2 Scegliere il pulsante Slide Info info vetrini sulla Programming Grid griglia di programmazione ed immettere le informazioni relative ai vetrini Manuale Dako Autostainer 15 Nota E richiesta almeno un immissione per proseguire da un campo al successivo Ogni campo richiede almeno un carattere Prima di spostarsi al campo successivo digitare l informazione specificata o premere la BARRA SPAZIATRICE Il campo Slide case Vetrino caso richiede l immissione del numero effettivo dei vetrini 3 Scegliere il pulsante Finish Entry fine immissione o premere INVIO quando il pulsante Finish Entry fine immissione evidenziato per portare a termine il processo d immissione identificativa del vetrino A questo punto appare la Programming Grid griglia di programmazione Eliminazione vetrini Deleting Slides Eliminazione dei vetrini con la funzione Vetrini Slides Function Usando l opzione Slides vetrini sulla barra di men per la programmazione di un ciclo di colorazione possibile eliminare un vetrino se c almeno una fila completamente vuota non programmata Selezionare l elemento del men Slides vetrini regol
34. ezionare il rombo in rilievo accanto al volume appropriato e fare clic su OK Il volume selezionato sar applicato a tutte le fasi del modello di protocollo 3 Fare clic sul pulsante Use Template usa modello Un messaggio chieder Salvare su disco Save on Disk now Scegliere il pulsante Yes s immettere un nome di modello e fare clic su OK Scegliere il pulsante No Non per usare il modello senza salvare le modifiche Il volume distribuito selezionato viene visualizzato nell intestazione della griglia sulla Programming Grid griglia di programmazione Selezione del volume distribuito del reagente per una fase specifica di un protocollo Selecting Reagent Dispense Volume for a Specific Step in a Protocol 1 Selezionare una fase di modello di protocollo nell elenco Protocol Outline profilo del protocollo per assegnare un nuovo volume distribuito del reagente 2 Scegliere il pulsante Reagent Volume volume reagente nell angolo in alto a destra della schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo Apparir una finestra di dialogo con i vari volumi distribuiti nella fase di reagente prescelta 3 Selezionare il volume distribuito prescelto facendo clic sul rombo in rilievo accanto al volume appropriato e scegliendo OK Il volume selezionato sar applicato alla fase specifica del Protocol Template modello di protocollo 4 Fare clic sul pulsante Use Template usa modello Un messaggio chieder
35. grammati Show Only Programmed Slides Quest opzione visualizza solo i vetrini programmati sulla Slide Layout Map mappa disposizione vetrini 12 Manuale Dako Autostainer Volume del reagente Reagent Volume e Banda distribuzione predefiniti Drop Zone Default Dalla schermata Initialize inizializza possibile impostare il volume predefinito di reagente facendo clic sul rombo in rilievo accanto al volume appropriato Selezionare la banda di distribuzione del reagente facendo clic sull area desiderata del vetrino raffigurato Mantenendo premuto il tasto CTRL e facendo clic sulle aree di distribuzione possibile selezionare bande multiple di distribuzione Pulizia Clean La schermata Clean pulizia permette di iniziare un ciclo di pulizia Questa schermata fornisce un rapporto di stato sul numero di vetrini processati dall ultimo ciclo di pulizia e sul numero totale dei cicli Inoltre la schermata crea un diario di pulizia Si raccomanda di eseguire un ciclo di pulizia dopo che 150 vetrini sono stati processati o dopo una settimana a seconda di cosa si verifichi prima Una volta che l apparecchio abbia processato 150 vetrini un messaggio avverte l utente di procedere alla pulizia dell apparecchio stesso Il software consente di processare fino a 200 vetrini tra un ciclo di pulizia e l altro per consentire una maggiore flessibilit del flusso di lavoro Se sono stati processati pi di 200 vetrini il pulsante Program p
36. i mantenere premuto il tasto CTRL e contemporaneamente fare clic sulle zone di distribuzione prescelte Fare clic sul volume di distribuzione Un messaggio visualizza i possibili volumi di distribuzione Selezionare il rombo in rilievo accanto al volume di distribuzione prescelto Scegliere il pulsante OK oppure premere INVIO Lo Slide Dispense Tool strumento distribuzione vetrino permette di effettuare queste modifiche per un vetrino specifico Lo strumento pulsante Slide Dispense Tool strumento distribuzione vetrino funziona in modo identico allo strumento All Slides tutti i vetrini tranne che l utente non sia in grado di manipolare la banda di distribuzione e la quantit di applicazione di reagente solo al vetrino selezionato Manuale Dako Autostainer Sezione 7 Gestione dei reagenti Usando i comandi del men Edit Lists modifica elenchi sulla Programming Grid griglia di programmazione possibile creare e modificare gli elenchi dei reagenti Aggiunta reagenti di rilevazione Adding Detection Reagents Secondario Secondary Terziario Tertiary Substrato Substrate ecc 1 2 3 Dalla Programming Grid griglia di programmazione selezionare Edit Lists modifica elenchi dalla barra di men Selezionare la categoria di reagenti dall elenco Immettere il nome completo del reagente che si desidera aggiungere all elenco attuale e premere INVIO Per i reagenti di rilevazione il software consente di immetter
37. i anticorpi naturali Si possono osservare risultati falsamente positivi dovuti a legame non immunologico dei reagenti sulle sezioni tessutali In alcuni casi l applicazione di un reagente bloccante alternativo prima dell incubazione con l anticorpo primario pu essere utile per ridurre la colorazione di fondo Si raccomanda l uso del reagente bloccante Dako Protein Block Serum Free codice n X0909 Reazioni negative inattese nelle neoplasie poco differenziate possono esser dovute a perdita o a marcata diminuzione dell espressione antigenica o a mutazioni nonsense nel gene o nei geni che codificano per l antigene Una colorazione positiva inattesa nei tumori pu essere dovuta all espressione di un antigene non espresso normalmente in cellule normali morfologicamente simili oppure alla persistenza o all acquisizione di un antigene in una neoplasia che sviluppa caratteristiche morfologiche ed immunoistochimiche associate ad un altra linea cellulare differenziazione divergente La classificazione istopatologica delle neoplasie non una scienza esatta e alcuni dati presenti in letteratura possono essere di controversa validit L interpretazione clinica di ogni colorazione positiva o della sua assenza va accompagnata da studi morfologici e istologici usando i controlli appropriati Le valutazioni vanno effettuate alla luce della storia clinica del paziente e delle altre metodiche diagnostiche adoperate Un patologo qualificato che ab
38. i anticorpo primario Controlli negativi universali che usano un controllo negativo generico per tutti gli anticorpi di un certo tipo L Autostainer usa due tipi differenti di controllo negativo serie N topo e coniglio e serie NP topo e coniglio Il pulsante Neg Ctil controllo negativo assegna automaticamente il controllo negativo universale appropriato ad esempio UNC per gli anticorpi della serie N e UNC per gli anticorpi della serie NP La serie NP usata con kit di elevata sensibilit quali EnVision e LSAB Dako Universal Negative Controls UNC controlli negativi universali sono disponibili per gli anticorpi pronti per l uso Se si sceglie l opzione Universal Negative Control tutti i controlli negativi compatibili designati con NC cio NCVimentin sull elenco degli anticorpi primari vanno eliminati dall elenco dei reagenti Nota In caso si necessiti assistenza per l eliminazione dei controlli negativi compatibili si prega di rivolgersi al proprio rappresentante Dako Manuale Dako Autostainer 27 Assegnazione di tipo di controllo negativo agli anticorpi Assigning Negative Control Type to Antibodies 1 Dalla Programming Grid griglia di programmazione selezionare Edit Lists modifica elenchi dalla barra di menu 2 Selezionare la categoria Primary Antibody anticorpo primario dall elenco dei reagenti 3 Selezionare un anticorpo precedentemente definito o aggiungere un nuovo anticorpo all elenco 4
39. i conducano al contenitore adeguato Pompa rifiuti difettosa Rivolgersi a un rappresentante Dako I rifiuti si riversano nella vaschetta Filtro della vaschetta intasato Pulire il filtro quando l apparecchio non in funzione Mediante uno spazzolino e dell acqua rimuovere il materiale che causa l ostruzione La sonda reagente non distribuisce Reagente in quantit Quando il sistema rileva una il reagente insufficiente nella fiala quantit di reagente insufficiente per portare a termine la fase attuale si ha un minuto di tempo per aggiungere reagente trascorso il quale alcuni vetrini potrebbero essere tralasciati Sonda reagente intasata Rivolgersi a un rappresentante Dako Presenza di bolle d aria Espellere le bolle sulla superficie del reagente nella fiala 46 Manuale Dako Autostainer Problema La sonda reagente non distribuisce il reagente Cont Possibile causa La valvola gialla a tre vie sulla siringa stata spostata Risoluzione Verificare che la posizione OFF della valvola sia rivolta verso il basso La valvola deve essere configurata a To La struttura con la testina a Z urta contro i raccoglitori durante il priming o durante il ciclo Il braccio non allineato Interrompere il ciclo in emergenza e riavviarlo Rimuovere le fasi gi eseguite Ricontrollare la Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti perch questa
40. i dalla Programming Grid griglia di programmazione mediante Slides vetrini sulla barra di men per una programmazione rapida del numero totale dei vetrini oppure mediante il pulsante Slide Info info vetrini per immettere informazioni identificative specifiche sul vetrino Aggiunta di vetrini Adding Slides L opzione Slides vetrini accelera la programmazione riducendo la quantit di informazioni richieste per programmare un ciclo di colorazione 1 Selezionare Slides vetrini sulla barra di men Questa funzione usata per aggirare la schermata Slide Information informazioni vetrini nella programmazione di un ciclo di colorazione 2 Immettere il numero di vetrini desiderato nella casella di testo o usare la barra di scorrimento per selezionare il numero di vetrini desiderato e fare clic su OK Nota Una volta che un ciclo stato impostato usando questa funzione le informazioni su slide vetrino tissue tessuto o doctor medico non possono essere aggiunte al ciclo Slide Identification identificazione vetrino Case numero caso Block ID ID blocco Tissue o Doctor Name nome medico non saranno associati visualizzati nella Programming Grid griglia di programmazione quando viene usata la funzione Slides vetrini Se viene selezionato il pulsante Slide Info info vetrini invece che la schermata Slide Information informazioni vetrini appare la casella di testo Slide Count conta vetrini Pulsante Info v
41. ine numerico da sinistra a destra in conformit allo stampato della schermata Slide Layout Map Load Slides disposizione vetrini carica vetrini Manuale Dako Autostainer 41 3 Una volta caricati tutti i vetrini nella loro corretta posizione e posizionati adeguatamente i raccoglitori sui rispettivi perni versare delicatamente la soluzione tampone sui vetrini per evitare che le sezioni si asciughino Per ottenere un risultato ottimale versare il tampone sull etichetta del vetrino invece che direttamente sul campione biologico Il tampone scorrer sul campione senza spostarlo Nota Quando i vetrini sono stati caricati rimettere il raccoglitore in posizione orizzontale 42 Manuale Dako Autostainer Sezione 10 Inizio ciclo di colorazione Preparazione del sistema per un ciclo di colorazione Preparing the System for a Staining Run Dopo aver caricato i vetrini con il campione biologico e le fiale contenenti il reagente seguire la seguente lista di controllo Vetrini e Deparaffinatie reidratati immergere in tampone contenente lo 0 05 di Tween 20 usando un contenitore a spruzzo per evitare che i vetrini si asciughino mentre si caricano altri vetrini e Posizionamento sicuro nel raccoglitore Raccoglitori e Posizionamento sicuro nell Autostainer Reagenti e A temperatura ambiente e Posizionati appropriatamente all interno del raccoglitore e Controllare che non vi siano bolle d aria e Controllare la presenza del
42. iner calcola il tempo richiesto per il ciclo di colorazione la quantit richiesta di tampone di lavaggio o di acqua deionizzata ed il posizionamento pi conveniente per le fiale di reagente Schermata Mappa disposizione reagenti Reagent Layout Map Screen La Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti documenta le posizioni dei reagenti nel loro raccoglitore compreso il volume di riempimento necessario per portare a termine il ciclo di colorazione La mappa pu visualizzare al massimo 32 fiale di reagenti per raccoglitore Le abbreviazioni dei reagenti vengono visualizzate nelle posizioni alfanumeriche appropriate del raccoglitore Ogni posizione di reagente codificata da un colore corrispondente ai colori dei reagenti Dako e ai colori della Programming Grid griglia di programmazione Se sono richieste pi di 32 fiale di reagente diventa disponibile un pulsante Second Rack secondo raccoglitore Reagent Layout Map 1 7 Liters of buffer 1 2 Liters of deionized water Load Reagente Reagent List Back to Grid Slide Map Print 3 1 0 IHC 10 24 03 10 02 AM Joe Smith DakoCytomation Inc DC3400 6120 03 1 Scegliere il pulsante Next avanti nella Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Program Slides vetrini programmati un messaggio chiede Salvare il programma su disco Save program on disk 2 Scegliendo No Non apparir la Reagent Layout Map mappa disposizio
43. io d aria e di modificare la Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Per attivare un opzione fare clic sulla casella di controllo corrispondente Lavaggio ad acqua per inizio ritardato Delayed Start Water Rinse Per un inizio ritardato possibile eseguire dei lavaggi a vuoto con acqua o con soluzione tampone Se quest opzione non selezionata verr impiegata una soluzione tampone per il lavaggio a vuoto Nota Quest opzione non pu essere selezionata quando selezionata l opzione No Pre Rinse senza pre lavaggio Aggiungi lavaggio alle fasi del protocollo Add Rinse to Protocol Steps Quando si crea un nuovo modello protocollo pu essere aggiunto automaticamente un lavaggio alla fine di ogni fase Scegliere l opzione Add Rinse to Protocol Steps Aggiungi lavaggio alle fasi del protocollo per aggiungere automaticamente lavaggi con soluzione tamponata Se quest opzione non selezionata la fase di lavaggio deve essere aggiunta manualmente Senza pre lavaggio No Pre Rinse Quando si crea un nuovo modello protocollo la fase di pre lavaggio predefinita pu essere rimossa Se quest opzione non selezionata il modello protocollo comprender una fase di lavaggio con soluzione tampone Soffio d aria a tempo flessibile Flex time Blow Quest opzione permette all Autostainer di eseguire quando sia richiesto un soffio d aria invece che un lavaggio senza interrompere altre funzioni Mostra solo vetrini pro
44. l Autostainer Shutting Down the Autostainer 44 Manutenzione e risoluzione dei problemi eee ana 45 Risoluzione dei problemi 45 Caratteristiche del sistema crrrotila lori arl tt ba Ata da aaa 53 Caratteristiche di hardware Hardware Specifications 53 Caratteristiche software Software SpecificationS 53 Contigurazione Standard ail Ba ba N fi eta Da tt as 55 viii Manuale Dako Autostainer Sezione 1 Avvertenze precauzioni e limitazioni A Tenere chiuso il coperchio durante il funzionamento Prestare attenzione durante il funzionamento il braccio meccanico pu muoversi inaspettatamente Non ostacolare in alcun modo il movimento del braccio meccanico dell Autostainer S A 9 Non versare liquidi nella vaschetta dell Autostainer Il sistema non in grado di drenare grandi volumi di liquidi versati ad alta velocit reagenti pericolosi non utilizzati vanno eliminati secondo le disposizioni locali statali e federali Indossare un adeguato equipaggiamento protettivo personale per evitare il contatto diretto A Non adoperare sostanze candeggianti nell Autostainer Queste ultime possono reagire con altri prodotti chimici provocando la formazione di esalazioni tossiche A Non tentare di riparare l Autostainer senza aver ricevuto specifiche istruzioni da un tecnico autorizzato Dako ci potrebbe invalidare la garanzia o il
45. la stampa Etichette o nastro esauriti Sostituendo il nastro nella stampante questa riprender a funzionare 48 Manuale Dako Autostainer Problema Possibile causa Selezionata porta COM non corretta Risoluzione Selezionare la porta COM corretta dalla schermata Slide Label Design crea etichetta del vetrino vedere la sezione Inizializzazione Selezionata stampante non corretta Selezionare la stampante corretta dalla schermata Slide Label Design crea etichetta del vetrino vedere la sezione Inizializzazione Il numero del vetrino non elencato sull etichetta L etichetta non centrata correttamente Se necessario ristampare l etichetta ed applicarla 1 2 cm dal bordo superiore e 1 8 cm dal bordo laterale del vetrino Le funzioni del computer si bloccano durante un ciclo mentre l Autostainer lo sta ancora eseguendo Errore di Windows Lasciare che l Autostainer termini il ciclo Riavviare il sistema prima del ciclo successivo L utente non in grado di accedere a molte funzioni della sezione Inizializza del programma L utente stato impostato come utente Non Authorized non autorizzato Rivolgersi a un rappresentante Dako Errori di eccezione illegali o fatali Errore di Windows Arrestare il sistema e spegne il limitatore di sovratensione Attendere 30 secondi e poi riaccendere il sistema Se il problema persis
46. le es 1 14 22 Entrambi i formati possono essere usati per stampare una combinazione di un ambito di etichette e di etichette singole es 5 12 14 22 Non usare spazi fra le cifre Etichette reagenti Reagent Labels Stampa di etichette reagenti di un ciclo programmato 1 Programmare o recuperare un ciclo precedentemente salvato sulla Programming Grid griglia di programmazione e scegliere il pulsante Print stampa Appare la schermata Which Report quale rapporto fare clic sul pulsante Reagent Labels etichette reagenti Per stampare tutte le etichette reagenti scegliere il pulsante Print All stampa tutte Per stampare specifici reagenti fare clic sui reagenti desiderati e scegliere il pulsante OK Stampa di etichette reagenti non associate ad un programma specifico 1 N Scegliere il pulsante Print stampa sulla Programming Grid griglia di programmazione Appare la schermata Which Report quale rapporto fare clic sul pulsante Reagent Labels etichette reagenti 3 Appare la schermata Print Reagent Labels stampa etichette reagenti 4 Scegliere il pulsante Other Reagents altri reagenti 5 Per stampare tutte le etichette reagenti scegliere il pulsante Print All stampa tutte 6 Per stampare specifici reagenti fare clic sui reagenti desiderati e scegliere il pulsante OK Rapporti Rapporto Stampa la Programming Grid griglia di programmazione comprese Program tutte le informazioni vetrini i
47. le Dako Autostainer 3 Manuale Dako Autostainer Sezione 2 Generalit sul sistema Autostainer un sistema di processazione automatica dei vetrini compatibile con i reagenti comunemente disponibili in commercio per la colorazione di sezioni tissutali incluse in paraffina e congelate di citocentrifuga di strisci cellulari e di aspirati con ago sottile Il sistema stato realizzato per automatizzare le procedure di colorazione manuale impiegate di routine in immunoistochimica e in citochimica consentendo il trasferimento di protocolli consolidati dal banco all Autostainer La flessibile programmazione permette un numero illimitato di protocolli comprendenti fino a 35 fasi incluse le fasi di lavaggio e di soffio d aria tra le incubazioni dei reagenti e 64 reagenti differenti Un ciclo di colorazione in grado di processare da 1 a 48 vetrini da microscopio singoli vetrini possono essere programmati per ricevere reagenti diversi di volume specificato durante ogni singola fase del protocollo di colorazione e i liquidi di rifiuto vengono raccolti in apposite taniche pericolosi e non pericolosi riducendo cos i costi di smaltimento Autostainer stato realizzato per gestire una variet di dati L apparecchio in grado di creare un rapporto dei dati relativi al paziente al reagente ed all operazione in tempo reale pu gestire l uso del reagente e programmare la manutenzione dell apparecchio stesso Manuale Dako Autos
48. mary Antibody Anticorpi primari policlonali prodotti nel B anticorpo primario coniglio es anti umani di coniglio Secondary Reagent Reagenti secondari anticorpi compatibili A reagente secondario con anticorpi monoclonali prodotti nel topo es IgG biotinilate antimurine Secondary Reagent Reagenti secondari anticorpi che B reagente secondario reagiscono con anticorpi policlonali prodotti nel coniglio es IgG biotinilate anti coniglio Secondary Reagent Reagenti secondari anticorpi che AB reagente secondario reagiscono sia con anticorpi monoclonali sia con quelli policlonali prodotti rispettivamente nel topo o nel coniglio Manuale Dako Autostainer 37 Compatibilit enzima del sistema Tipo reagente Descrizione Codice Elemento di compatibilit protocollo Endogenous Enzyme enzima endogeno Blocco compatibile con la HRP Endogenous Enzyme enzima endogeno Blocco compatibile con la AP Tertiary Reagent reagente terziario Streptavidina marcata con la HRP Tertiary Reagent reagente terziario Streptavidina marcata con la AP Substrate substrato Substrati compatibili con la HRP es DAB AEC lt X lt X lt X Substrate substrato Substrati compatibili con la AP es Fast Red New Fuchsin 38 Manuale Dako Autostainer Sezione 8 Caricamento dei reagenti Dopo aver concluso la programmazione l Autosta
49. mata Options opzioni viene selezionato Add Rinse to Protocol Steps aggiungi lavaggio alle fasi di protocollo i lavaggi vengono aggiunti automaticamente dopo ogni fase tranne che dopo una fase substrato Per eliminare una fase selezionarla nell elenco Protocol Outline profilo del protocollo Il nome viene delineato Scegliere il pulsante Delete Step elimina fase Ulteriori fasi possono essere inserite nel Protocol Outline profilo del protocollo evidenziando una fase e facendo clic sulla fase desiderata da Protocol Elements elementi del protocollo La fase selezionata viene inserita al di sopra dell area evidenziata nel Protocol Outline profilo del protocollo Nota L Autostainer pu ospitare modelli di protocollo contenenti fino a 35 fasi comprese le fasi di lavaggio tra le incubazioni di reagenti I modelli di protocollo possono essere usati salvando o non salvando le modifiche Per salvare un nuovo modello scegliere il pulsante Save salva sulla schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo La finestra Save Template salva modello appare con il cursore nella casella File Name nome del file Eliminazione di un modello di protocollo Protocol Template Scegliere il pulsante Protocol Template modello di protocollo sulla Programming Grid griglia di programmazione Scegliere il pulsante Get Template cerca modello e fare clic sul nome del file del modello desiderato Fare clic sul pulsante
50. mi distribuzione reagente 100 150 200 400 e 600 uL Capacit volumetrica sonda reagente 100 uL minimo 1200 uL massimo Controllo computer Dako si riserva la facolt di cambiare in qualsiasi momento le caratteristiche di controllo computer Le caratteristiche del computer possono subire delle variazioni Schermo 15 a colori Stampante A colori a getto d inchiostro Limitatore di 120 VCA 15 Amp 50 60 Hz sovratensione Caratteristiche software Software Specifications Sistema Windows 98 XP o equivalente operativo Logica Destinata a calcolare la sequenza pi veloce per portare a termine un operativa ciclo di colorazione Logica Selezione flessibile delle fasi comprese quelle di lavaggio Massimo protocollo 35 fasi di protocollo comprese quelle di lavaggio Lavaggio a Una soluzione tampone viene applicata ai vetrini durante un ciclo di vuoto colorazione allo scopo di mantenere i vetrini umidi quando non si stanno svolgendo delle reazioni Impostazioni Lavare con tampone 30 minuti prima dell avvio di ogni ciclo quando predefinite di viene selezionato un avvio ritardato lavaggio Lavare con tampone ogni 30 minuti durante un ciclo di colorazione Lavare con acqua ogni 60 minuti dopo completamento di un ciclo Le impostazioni predefinite per il tempo e per la quantit di tampone distribuita possono essere modificate su richiesta da un rappresentante di Dako Te
51. mpo Il tempo minimo raccomandato due minuti d incubazione Manuale Dako Autostainer 53 54 Manuale Dako Autostainer Sezione 13 Configurazione standard Superficie Assicurarsi che l apparecchio poggi su di una superficie stabile e piana in grado di reggere il peso del sistema circa 110 kg Misure Dimensioni minime dell area di lavoro 2 0 m L x 0 8 m P x 1 0 m H Condizioni L area di lavoro deve avere una temperatura ambiente di 18 C 26 C ambientali non deve essere esposta alla luce solare diretta n a ventilazione aspirazione Sorgente Dako raccomanda di utilizzare una sorgente elettrica separata allo elettrica scopo di evitare interferenze con altri apparecchi o sistemi Struttura di testa Z Retro Meccanismo Stazione lavaggio asse X sonda reagente Sinistra Destra Raccoglitore reagenti b Raccoglitore reagenti a Vaschetta Meccanismo Lato frontale sotto ai raccoglitori vetrini asse Y Raccoglitore vetrini Impugnatura raccoglitore vetrini Vetrino Manuale Dako Autostainer 55
52. ne la schermata Run Log diario del ciclo viene aggiornata ad ogni fase eseguita e Il pulsante New Program nuovo programma viene usato per programmare un nuovo ciclo quando il ciclo attuale ancora in corso e Il pulsante Review Program visualizza programma viene usato per ritornare alla Programming Grid griglia di programmazione per visualizzare il ciclo in corso e pulsante Emergency Stop arresto d emergenza pu essere usato per interrompere un ciclo in qualsiasi momento Spegnimento dell Autostainer Shutting Down the Autostainer 1 Scegliere il pulsante Sign Off uscita sul Main Menu men principale 2 Un messaggio comunica Interrompere l uso di Autostainer Quit using Autostainer Scegliere il pulsante Yes s 3 Arrestare il computer 44 Manuale Dako Autostainer Sezione 11 Manutenzione e risoluzione dei problemi L Autostainer va pulito dopo che 150 vetrini sono stati processati o dopo una settimana a seconda di cosa si verifichi prima L apparecchio registra il numero dei cicli di colorazione effettuati e visualizza un messaggio per la manutenzione su cui compare il numero di vetrini processati dall ultimo ciclo di pulizia Nota Per ulteriori informazioni sulla manutenzione si prega di rivolgersi al proprio rappresentante Dako Risoluzione dei problemi Problema Possibile causa Risoluzione L Autostainer non si accende LED verde in alto spento Messaggio
53. ne reagenti Manuale Dako Autostainer 39 3 Caricare le fiale di reagente secondo la mappa Il volume di reagente visualizzato comprende un volume morto di almeno 200 pL 4 Assicurarsi che nelle fiale sia presente una quantit di reagente sufficiente a portare a termine il ciclo programmato e che il raccoglitore sia correttamente posizionato 5 Controllare che le fiale di reagente non contengano bolle d aria nello strato superiore della soluzione Espellere le bolle d aria eventualmente presenti Avviso di Reagente mancante Missing Reagent Notice L Autostainer visualizza un prompt quando viene rilevato un volume di reagente insufficiente possibile mettere il sistema in pausa ed aggiungere ulteriore reagente alla fiala specificata Se non disponibile un volume sufficiente di un reagente e non si risponde al prompt l Autostainer continua il ciclo e fornisce sul diario del ciclo Run Log una lista dei vetrini tralasciati o parzialmente processati Per programmare il sistema a verificare i volumi sufficienti all inizio del ciclo selezionare l opzione Check Volumes verifica volumi della schermata Set Start Time imposta ora d inizio vedere Inizio ciclo di colorazione Sezione 9 40 Manuale Dako Autostainer Sezione 9 Caricamento dei vetrini Dopo aver concluso la programmazione ed il caricamento dei reagenti si pu procedere al caricamento dei vetrini sui rispettivi raccoglitori Stampare la sche
54. nenti hardware Responsabilit Questo manuale non sostituisce la formazione pratica dell utente fornita da Dako Inc n le istruzioni di livello pi avanzato Per l assistenza in caso di problemi di funzionamento dell apparecchio rivolgersi immediatamente al Servizio Tecnico Dako L istallazione di componenti hardware o software su Autostainer va effettuata solo ad opera del personale qualificato del Servizio Esterno Dako Utilizzare i seguenti recapiti U S A Altri Paesi Dako Inc Dako Denmark A S 6392 Via Real Produktionsvej 42 Carpinteria CA 93013 USA DK 2600 Glostrup Denmark Tel 805 566 6655 Tel 45 4485 9500 Fax 805 566 6688 Fax 45 4485 9595 Servizio tecnico 800 424 0021 Servizio clienti 800 235 5763 Manuale Dako Autostainer vi Manuale Dako Autostainer Indice Avvertenze precauzioni e limitazioni ii 1 Generalit sul sistema ocelli neri 5 Generalit s lsoftware rara toa nta IO ua aia atu al 7 Schermata di accesso Sign In Screen nenea enma nana m ma aaa 7 Men principale Main Meniu a ee Bea tat e i Dat i ata i rd a 8 inizializz Ini ialize isi nat i aaa d a e ca e ia d 9 Inizializzazione stampa etichette Label Printing Initialization n 9 Porta di comunicazione Communication Port 11 Selezione stampante Printer Selection i 11 Schermata opzioni The Options Screen unea aaa 11 Griglia programmazione formato F
55. ntestazioni del protocollo reagenti specifici Grid informazioni sul istituto utente data di stampa numero di identificativi vetrino numero di caso e numero di serie dell Autostainer Rapporto Raggruppa tutti i vetrini secondo il numero di caso e include i numeri di IHC vetrino le informazioni sull anticorpo primario il nome e il tempo d incubazione di tutti i reagenti usati Rapporto Stampa tutte le fasi eseguite nel corso del ciclo Run Log diario ciclo 32 Manuale Dako Autostainer 1 Scegliere il pulsante Print stampa sulla Programming Grid griglia di programmazione 2 Scegliere il pulsante Program Grid griglia del programma IHC o Run Log diario ciclo Visualizzazione dei vetrini programmati Viewing Programmed Slides Quando la programmazione dei reagenti terminata appare la prima Slide Layout Map mappa disposizione vetrini La schermata Slide Layout Map mappa disposizione vetrini rappresenta tutti e 48 i vetrini visti dal lato frontale dell Autostainer Su questa schermata possono essere cambiati il volume distribuito e le bande di distribuzione di ogni vetrino La zona di distribuzione del reagente viene visualizzata da un evidenziatura in giallo Assegnazione delle zone di distribuzione del reagente Assigning Reagent Dispense Locations L area non smerigliata di ogni vetrino viene suddivisa in tre sezioni orizzontali uguali o zone di distribuzione Ogni vetrino
56. ormat Program Grid 11 Rapporto IHC IHC Report eee aaa 12 Opzioni personalizzate Custom Options reer reesreesrrerrresreeenreee een 12 Volume del reagente Reagent Volume e Banda distribuzione predefiniti Drop Zone Deldulli bite ati oi eli ha nd 13 Pulizia Clean slip i a Da al i 13 Uscita Sign Off e Aiuto Help aeree Bea aa oi Bi aa a aac 13 Gestione reagenti Reagent TrackinQ neon aaa eee sana aaa 13 Priming pompa Prime Pump Graal aa luai al aa ana aaa 13 Griglia di programmazione Programming Grid Generalit nn 14 Immissione delle informazioni sui vetrini ui 15 Aggiunta di vetrini Adding Slides i 15 Pulsante Info vetrini The Slide Info Button i 15 Eliminazione vetrini Deleting SIideS i 16 Eliminazione dei vetrini con la funzione Vetrini Slides Function 16 Eliminazione delle informazioni identificative di vetrino Deleting Slide ID Information Uso del pulsante Slide Info info VEtrini ii 16 Cambio di posizione dei vetrini sulla Programming Grid griglia di programmazione 17 Creazione di un protocollo aa aa ae 19 Elementi standard del protocollo Standard Protocol Elements 19 Elementi addizionali del protocollo Additional Protocol Elements
57. pante debba esser reimpostata Spegnere la stampante Tenere premuto il pulsante verde di avanzamento etichette in alto sulla stampante e accendere di nuovo la stampante Quando il LED inizia a lampeggiare in rosso rilasciare il pulsante di avanzamento etichette e premere due volte il pulsante velocemente Le etichette si portano in avanti e la stampante pronta per stampare Rilasciare il pulsante di avanzamento Per far avanzare un etichetta premere e rilasciare di nuovo il pulsante di avanzamento Eseguire una prova di stampa Porta di comunicazione Communication Port La porta di comunicazione della stampante viene assegnata usando la casella Port porta sulla schermata Design Slide Label crea etichetta vetrino Il numero visualizzato nella casella deve corrispondere alla porta seriale di comunicazione cui connessa la stampante es 1 per A e 2 per B Selezione stampante Printer Selection Per selezionare il tipo corretto di stampante Seymour sulla schermata Design Slide Label crea etichetta vetrino scorrere l elenco stampanti mediante le frecce della tastiera o la barra di scorrimento Nota Selezionando una stampante non corretta comparir sullo schermo un messaggio di errore quando le etichette dei vetrini o dei reagenti vengono stampate Per trovare il numero del modello della vostra Seymour Slide Label Printer stampante di etichette Seymour cercare sul coperchio della stampante es TPL2642 Gli ultimi quattro c
58. pecifici eccetto l anticorpo primario per uno dei vetrini programmati Nota Cos si crea un Auto Program solo per i reagenti di rilevazione Per creare un Auto Program per un protocollo che include l anticorpo primario immettere l anticorpo primario e i reagenti di rilevazione specifici nelle colonne della griglia di programmazione 3 Selezionare Auto dalla barra di men della Programming Grid griglia di programmazione 4 Selezionare Setup imposta dal men Auto Auto si trasforma in Setup imposta sulla barra di men 5 Selezionare una o pi file di riquadri programmati facendo clic sulla prima fila Fare clic e trascinare verso le file addizionali selezionate Tutte le file selezionate sono evidenziate Rilasciare il pulsante del mouse ed apparir la finestra Save Auto Program salva programma Auto 6 Immettere un nome di file per il protocollo salvato Il nome di file di Auto Program pu contenere fino a otto caratteri alfanumerici senza simboli o spazi vuoti Scegliere il pulsante OK 7 Selezionare Setup imposta dalla barra di men Setup imposta si trasforma in Auto e termina la funzione Auto Program Nota Per usare un Auto Program gi salvato il modello che si sta programmando deve contenere gli stessi elementi di protocollo elencati nello stesso ordine dell Auto Program salvato Per trovare il modello di protocollo corretto usare la funzione Auto file volumi distribuiti non devono necessariamente
59. pu causare l assegnazione delle fiale a nuovi posti La testina di soffio lavaggio Rivolgersi a un piegata rappresentante Dako La sonda e la testina di Il braccio andato fuori Interrompere il ciclo e lavaggio soffio non vanno alle calibrazione salvare il diario del ciclo localizzazioni corrette Riprogrammare il ciclo ed eliminare dalla schermata Protocol Design le fasi gi completate Riavviare il ciclo Punta della sonda piegata Verificare che tutti i tappi delle fiale di reagente siano stati rimossi e che i raccoglitori siano saldamente bloccati nella loro posizione Rivolgersi a un rappresentante Dako Assenza di colorazione Reagente in quantit insufficiente nella fiala Quando il sistema rileva una quantit di reagente insufficiente per portare a termine la fase attuale si ha un minuto di tempo per aggiungere reagente trascorso il quale alcuni vetrini potrebbero essere tralasciati Le fiale con i reagenti non sono state caricate in posizione corretta nei raccoglitori Controllare la Reagent Map e verificare la posizione corretta Controllare su Run Log diario ciclo la presenza del messaggio vetrini tralasciati Impossibile localizzare il reagente Unable to Locate Reagent Manuale Dako Autostainer 47 Problema Assenza di colorazione Cont Possibile causa vetrini non sono stati caricati in posizione corretta
60. pu avere una o tre zone di distribuzione il volume massimo distribuito per ogni vetrino non pu superare gli 800 uL La zona di distribuzione predefinita viene programmata durante l inizializzazione Modifiche del volume di distribuzione o della zona di distribuzione di un vetrino nella Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Program Slides vetrini programmati cambier il colore del testo del vetrino da nero a rosso nella Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Stampa di una Mappa disposizione vetrini Slide Layout Map La Slide Layout Map mappa disposizione vetrini fornisce una nota del volume di distribuzione del reagente e della zona di distribuzione Questa utile per accertarsi che i vetrini siano caricati correttamente 1 Scegliere il pulsante Next avanti sulla Reagent Layout Map mappa disposizione reagenti vedere Sezione 8 2 Scegliere il pulsante Print stampa Selezione di una nuova zona di distribuzione del reagente per tutti i vetrini Selecting a new reagent dispense location for all slides 1 Selezionare lo strumento All Slides tutti i vetrini nell angolo in alto a sinistra della Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Program Slides vetrini programmati 2 Per selezionare una nuova zona di distribuzione fare clic sulla zona prescelta del vetrino Manuale Dako Autostainer 33 NOS 34 Per assegnare pi di una zona di distribuzione sullo strumento All Slides tutti i vetrin
61. ramming Grid griglia di programmazione con il modello di protocollo selezionato visualizzato nell intestazione della griglia Uso di un modello di protocollo salvato Protocol Template per un programma Auto specifico Auto Program Programmazione Auto una funzione che rende pi efficiente la programmazione dei vetrini vedere Programmazione di un ciclo di colorazione Sezione 6 1 Scegliere il pulsante Protocol Template modello di protocollo sulla Programming Grid griglia di programmazione 2 Scegliere il pulsante Get Template cerca modello 3 Selezionare la casella di controllo Auto File file Auto 4 Scegliere l Auto Program programma Auto desiderato facendo clic su di esso e scegliendo OK 5 Fare clic sul pulsante Use Template usa modello sulla schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo Apparir la Programming Grid griglia di programmazione con il modello di protocollo selezionato visualizzato nell intestazione della griglia 22 Manuale Dako Autostainer Selezione del volume di distribuzione del reagente per tutte le fasi di un protocollo Selecting Reagent Dispense Volume for All Steps in a Protocol 1 Scegliere il pulsante Reagent Volume volume reagente nell angolo in alto a destra della schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo Apparir una finestra di dialogo con i vari volumi di distribuzione nella fase di reagente prescelta 2 Sel
62. re le etichette per i vetrini mentre l Autostainer in funzione Manuale Dako Autostainer 1 L immunoistochimica un processo diagnostico a pi passi multi step che richiede una formazione specifica nella selezione appropriata di reagenti selezione dei tessuti fissazione processazione preparazione dei vetrini IHC e interpretazione dei risultati della colorazione La colorazione tissutale dipende dal trattamento e dalla processazione cui viene sottoposto il tessuto prima della colorazione La fissazione il congelamento lo scongelamento il lavaggio l asciugatura il riscaldamento e la sezione condotti in modo non corretto o la contaminazione con altri tessuti o fluidi possono produrre artefatti intrappolamento trapping anticorpale o risultati falsamente negativi Risultati incompatibili possono essere dovuti a modifiche dei metodi di fissazione e di inclusione o ad irregolarit intrinseche al tessuto Una colorazione a contrasto eccessiva o incompleta pu compromettere la validit dei risultati L uso di fissativi vecchi o non tamponati oppure l esposizione dei tessuti a fonti di calore eccessivo oltre i 60 C durante la processazione pu provocare una diminuzione della sensibilit della colorazione sieri normali non immuni provenienti dalla stessa fonte animale degli antisieri secondari usati nelle fasi di bloccaggio possono causare risultati falsamente negativi o falsamente positivi a causa di autoanticorpi o d
63. rmata Slide Layout Map Load Slides mappa disposizione vetrini carica vetrini scegliendo il pulsante Print stampa in alto sulla schermata stessa Questa mappa offre una guida al caricamento dei vetrini e pu essere salvata come parte della nota sulla colorazione Nota Immergere i vetrini in una soluzione tampone contenente lo 0 05 di Tween 20 per almeno cinque minuti prima di caricare l Autostainer Slide Layout Map All slides Maximum n Load Slides pri 2 20 3 20 200 5 200 6 200 123456 123456 123456 129456 123456 654321 54921 729159 789159 789159 Next Back to Grid Print Help V3 1 0 IHC 10 24 03 10 03 AM Joe Smith DakoCytomation Inc DC3400 6120 03 Carica vetrini Load Slides L Autostainer ha quattro raccoglitori per i vetrini ognuno dei quali pu contenere fino a dodici vetrini raccoglitori 1 4 hanno rispettivamente le posizioni vetrini 1 12 13 24 25 36 e 37 48 Il primo raccoglitore localizzato vicino al bordo anteriore dell apparecchio Il secondo il terzo ed il quarto si trovano dietro al primo 1 Caricare vetrini nel raccoglitore inserendo l estremit del vetrino con l etichetta con il campione biologico rivolto verso l alto in una clip Il raccoglitore pu essere posizionato angolarmente in modo da facilitare il caricamento dei vetrini 2 Caricare i vetrini nel raccoglitore in ord
64. rogramma scompare ed il sistema non consente ulteriori processazioni fino all avvenuta esecuzione del ciclo di lavaggio Uscita Sign Off e Aiuto Help Sign Off uscita permette di uscire dal programma e Help aiuto visualizza informazioni riguardanti le caratteristiche del Main Menu men principale Gestione reagenti Reagent Tracking La schermata Reagent Tracking gestione reagenti permette di monitorare il volume totale di ogni reagente usato dall apparecchio e di creare rapporti su tutti i reagenti o solo su alcuni di essi Priming pompa Prime Pump La schermata Prime Pump priming pompa usata per irrigare le tubature d immissione con soluzione tampone o con acqua deionizzata senza iniziare un ciclo reale Irrigando di frequente le tubature dell apparecchio si mantiene il buon funzionamento di Autostainer Dako raccomanda di effettuare il priming delle pompe una volta la settimana Manuale Dako Autostainer 13 Griglia di programmazione Programming Grid Generalit La Programming Grid griglia di programmazione la schermata principale per definire informazioni sui vetrini sugli anticorpi primari sui reagenti e sui protocolli di colorazione Griglia programmazione Le righe rappresentano i singoli vetrini compresi la completa identificazione e tutti i reagenti applicati La griglia pu ospitare 48 vetrini per ciclo di colorazione Versione Data Ora Nome utente Nome Numero software sicurezza ele
65. rogramming Grid griglia di programmazione Non stampare le etichette mentre l Autostainer in funzione 1 Scegliere il pulsante Slide Labels etichette vetrini Nota Se Slide ID ID vetrino Doctor medico o Tissue tessuto sono selezionati per stampare l etichetta questi elementi vanno selezionati mediante il pulsante Manuale Dako Autostainer 9 Options opzioni sulla schermata Initialize inizializza Se questi elementi della Programming Grid griglia di programmazione non vengono selezionati usando il pulsante Options opzioni sulla schermata Initialize inizializza questi campi non saranno presenti sulla schermata Slide Information informazioni vetrini Scegliere l opzione desiderata per ogni campo Nota Le informazioni statiche quali il nome dell istituto possono essere immesse nel campo Quest informazione riportata su tutte le etichette Per immettere informazioni statiche evidenziare il testo nel campo desiderato e digitare il testo nella casella di testo Premere ENTER INVIO Scegliere il numero di caratteri per ogni riga 10 12 14 o 16 selezionando un numero dall elenco Length lunghezza selezionando 10 caratteri verr visualizzato il testo in grassetto Etichette reagente Reagent Labels Attraverso la schermata Initialize inizializza si accede al pulsante Reagent Labels etichette reagente 1 Scegliere il pulsante Reagent Labels etichette reagente Reagent Name 1 2 nom
66. scheda Settings impostazioni Nella casella Colors colori verificare che sia visualizzato High Color 16 bit In caso contrario selezionare quest elemento e salvare le modifiche La stampante non La stampante pu Premere brevemente e rilasciare il pulsante sul lato risponde al essere in modalit frontale della stampante comando di di avanzamento stampa manuale 50 Manuale Dako Autostainer Problema Possibile causa Risoluzione La stampante non Il cavo parallelo di Staccare e riconnettere il cavo parallelo tra risponde al connessione tra stampante e computer comando di stampante e stampa Cont computer non inserito adeguatamente Il cavo parallelo Provare il cavo su di un altro sistema che funzioni difettoso sicuramente oppure sostituire il cavo parallelo Manuale Dako Autostainer 51 52 Manuale Dako Autostainer Sezione 12 Caratteristiche del sistema Caratteristiche di hardware Hardware Specifications Dako Autostainer Dimensioni 1 02 m L x 0 69m P x 0 61m H Peso 140 Ib 63 5 kg Requisiti elettrici 120 V 110 120 V 210 60 Hz 2 Hz 220 V_ 220 240 V 10 50 Hz 2 Hz Temperatura normale funzione 18 C 26 C Capacit raccoglitore vetrini 1 12 vetrini Capacit vetrini totale 1 48 vetrini Capacit reagente 64 reagenti differenti 15 mL fiala reagente Volu
67. sk Altrimenti compare la schermata Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Selezionare Back to Grid torna alla griglia per ritornare alla Programming Grid griglia di programmazione e il lavaggio mancante apparir nella griglia Definizione degli anticorpi primari Defining Primary Antibodies Ogni reagente anticorpo primario viene programmato individualmente ed apparir sulla Programming Grid griglia di programmazione assieme al suo pretrattamento programmato vedere Gestione dei reagenti Sezione 7 Gli anticorpi primari e o i pretrattamenti possono essere fasi manuali e vengono registrati sulla Programming Grid griglia di programmazione e sugli stampati Se un reagente una fase manuale es incubazione notturna smascheramento del bersaglio ecc viene eseguita prima che i vetrini vengano caricati Nota Un pretrattamento dell anticorpo primario appare automaticamente con l anticorpo primario solo se il modello di protocollo contiene un elemento del protocollo di pretrattamento vedere Creazione di un protocollo Sezione 5 1 Immettere le informazioni riguardanti i vetrini selezionare un modello di protocollo ed aggiungere i reagenti di rilevazione necessari Quando viene evidenziato il primo anticorpo primario Primary Antibody programmabile viene visualizzato un elenco di Primary Antibodies anticorpi primari disponibili 2 Selezionare dall elenco l anticorpo desiderato usando i tasti freccia
68. tainer 5 Manuale Dako Autostainer Sezione 3 Generalit sul software Schermata di accesso Sign In Screen Lo schermata Sign In accesso appare facendo doppio clic sull icona di Autostainer sul desktop Dopo convalida del nome e della password appare il Main Menu men principale WELCOME TO THE DAKOautostainer UNIVERSAL STAINING SYSTEM IHC SOFTWARE Please enter your name Please enter your password EXIT Copyright 1995 2003 Norman Rhett Al rights reserved Manuale Dako Autostainer 7 Menu principale Main Menu pulsanti del Main Menu menu principale permettono l accesso alle altre schermate di Autostainer Nota Change Password cambia password sostituisce il pulsante Initialize inizializza per gli utenti con accesso a sicurezza medio bassa Main Menu 8 Manuale Dako Autostainer Inizializza Initialize La schermata Initialize inizializza usata per stabilire ed aggiornare informazioni predefinite per il sistema Queste comprendono le informazioni dell istituto il numero di serie di Autostainer i nomi degli utenti i medici che richiedono i test IHC una biblioteca di tessuti che possono essere usati durante la colorazione il volume predefinito e la banda per la distribuzione del reagente il numero di vetrini consentito tra i cicli di pulizia di routine Da questa schermata possibile anche configurare il formato delle etichette dei vetrini e dei reagenti i formati di
69. te rivolgersi a un rappresentante Dako Messaggi EWP DWP sul Run Log diario del ciclo Attivare pompa rifiuti disattivare pompa rifiuti I rifiuti non vengono pompati fuori dal sistema entro l arco di tempo atteso Se i rifiuti vengono ancora separati rivolgersi al Servizio tecnico Dako per ulteriori informazioni sulla pulizia Se i rifiuti non vengono pi separati rivolgersi a Dako per l assistenza Manuale Dako Autostainer 49 Problema Possibile causa Risoluzione Messaggi EWL PFR sul Run Log diario del ciclo Rimozione dei rifiuti difettosa sonda non si ritira Rivolgersi a un rappresentante Dako Il computer si accende ma viene visualizzato Safe Mode modalit protetta su tutti e quattro gli angoli della schermata Il computer stato arrestato impropriamente Arrestare il computer usando il pulsante Start avvio di Windows situato nell angolo in basso a sinistra della schermata e selezionando Shut Down arresta Questo pulsante potrebbe essere nascosto per cui bisogna spostare il puntatore del mouse in basso sulla schermata per farlo riapparire Arrestare il computer usando sempre questo metodo Eseguire Scan Disk attraverso Esplora risorse Accessori Strumenti di sistema Scan Disk Per l assistenza rivolgersi a un rappresentante Dako Il monitor appare Installata utilit Muovere il mouse Apparir la schermata attuale vuo
70. to LED salvaschermo Rimuovere il salvaschermo perch questo potrebbe alimentazione interferire con il funzionamento di Autostainer verde Il monitor appare Il cavo di Staccare e riconnettere il cavo tra schermo e vuoto LED connessione tra computer alimentazione schermo e arancione computer non inserito adeguatamente Le parole che Il controllo di Regolare il controllo di luminosit appaiono sullo luminosit non schermo sono impostato offuscate correttamente L immagine sul Windows stato Arrestare il computer usando il pulsante Start desktop appare avviato in Safe avvio di Windows situato nell angolo in basso a granulosa ed i colori non sono verosimili Mode modalit protetta sinistra della schermata e selezionando Shut Down arresta Questo pulsante potrebbe essere nascosto per cui bisogna spostare il puntatore del mouse in basso sulla schermata per farlo riapparire Arrestare il computer usando sempre questo metodo Eseguire Scan Disk attraverso Esplora risorse Accessori Strumenti di sistema Scan Disk Per l assistenza rivolgersi a un rappresentante Dako La profondit del colore regolata troppo bassa Sul desktop di Windows fare clic con il tasto destro del mouse su di un punto qualsiasi libero da icone apparir un men a discesa Selezionare Properties propriet Apparir la finestra Windows Display Properties propriet visualizzazione Windows Selezionare la
71. to vetrino Nota Skip tralascia il primo elemento nell elenco di Auto Program Selezionare quest opzione se si vuole lasciare un vetrino senza programmazione Selezionare Program Programma Fare clic sul pulsante Next avanti A questo punto il sistema esplora la griglia in cerca di lavaggi mancanti Se manca un lavaggio tra due reagenti un messaggio chiede se si desidera continuare Scegliere Yes si e se il programma nuovo una finestra di dialogo chiede Salvare il programma su disco Save program on disk Altrimenti compare la schermata Slide Layout Map mappa disposizione vetrini Selezionare No Non per ritornare alla Programming Grid griglia di programmazione e il lavaggio mancante apparir nella griglia Copia Incolla Copy Paste 30 La funzione Copy Paste copia incolla copia i reagenti da un vetrino all altro durante la programmazione dei vetrini Selezionare Copy copia dalla barra di men della Programming Grid griglia di programmazione La parola Copy copia si trasforma in Select seleziona Usare il puntatore del mouse per selezionare le fasi da copiare facendo clic e trascinando attraverso i riquadri desiderati Una volta che i riquadri o le file sono evidenziati la parola Select seleziona si trasformer in Paste incolla Fare clic nell area in cui si desidera inserire la selezione copiata Nota Le file copiate possono essere incollate solo sotto la stessa intestazion
72. treatment Rinse Buffer Protocol Elements Rinse Buffer Rinse Water End Enz Block Protein Block lt Click this side to add finsert a step to this side gt Primary Antibody Pretreatment Protein Block Secondary Reagent Tertiary Reagent Labelled Polymer Substrate Batch Substrate Auxiliary Swtch Save Use Template Click this side to gt select insert point or reagent volume or to delete a step Delete Step New Template Get Template Primary Antibody Rinse Buffer Labelled Polymer Rinse Buffer Auxiliary Rinse Buffer Secondary Reagent Rinse Buffer Tertiary Reagent Rinse Buffer Swtch Substrate Cancel Help VA4 0 0 IHC 10 27 03 4 23PM Joe Smith DakoCytomation Inc DC3400 6120 03 Elementi standard del protocollo Standard Protocol Elements Gli elementi del protocollo sono categorie di reagenti usati per creare il profilo del protocollo nella schermata Protocol Template Design Disegno modelli del protocollo reagenti possono essere aggiunti eliminati e modificati scegliendo le categorie di elementi del protocollo dall elemento del men Edit Lists modifica elenchi sulla Programming Grid griglia di programmazione Blocco enzimi endogeni Endogenous Enzyme Block Blocco proteine Protein Block Anticorpo primario Primary Antibody Pretrattamento Pretreatment Reagente secondario
73. vata istituto serie 14 Barra di men Slides vetrini immettere il numero dei vetrini per un ciclo File informazioni generali quali aprire salvare e stampare cicli di vetrini Edit lists modifica elenchi stabilisce elenchi di reagenti per la programmazione di un protocollo di colorazione Copy copia e Auto elementi usati durante la programmazione Intestazione griglia Elenca le fasi e dispensa i volumi del modello di protocollo selezionato per il ciclo di colorazione corrente Ogni colonna rappresenta una fase del modello di protocollo Programming Grid Pulsanti di comando Slide Info informazioni vetrini immette o modifica informazioni individuali sui vetrini Protocol Template modello di protocollo seleziona o crea un modello da applicare al ciclo di colorazione corrente Next avanti visualizza la mappa Protocol Template Nest Print Exit disposizione vetrini V4 0 0 IHC 10 27 03 4 21PM_ Joe Smith DakoCytomation Inc schermata Program Slides Print stampa stampa etichette dei vetrini e dei reagenti griglia principale rapporto IHC elenco reagenti o diario ciclo Exit esci riconduce al menu principale senza salvare Help aiuto informazioni sulle caratteristiche della griglia sicurezza media sicurezza bassa Manuale Dako Autostainer Sezione 4 Immissione delle informazioni sui vetrini vetrini possono essere programmat
74. zionare Edit Lists modifica elenchi dalla barra di men Selezionare la categoria di reagenti dall elenco Modificare i campi evidenziando le informazioni e digitando sopra di esse Quando si cambia il nome del reagente il software salva la modifica come un nuovo reagente Per eliminare fare clic sul pulsante Delete elimina Scegliere il pulsante OK Aggiornamento del numero di lotto del reagente e della data di scadenza Updating a Reagent Lot Number and Expiration Date 1 2 36 Dalla Programming Grid griglia di programmazione selezionare Edit Lists modifica elenchi dalla barra di men Selezionare la reagent category categoria dei reagenti dall elenco e scegliere uno specifico reagente Evidenziare il numero di lotto attuale visualizzato nella casella lot lotto Digitare il nuovo numero di lotto apparir il pulsante Change modifica Manuale Dako Autostainer 4 Evidenziare la date data visualizzata nella casella ed immettere la nuova data di scadenza 5 Fare clic sul pulsante Change modifica tutti i campi vengono cancellati 6 Scegliere il pulsante OK e una finestra di dialogo chiede Salvare le modifiche su disco Save changes on disk 7 Scegliere Yes s per salvare il numero di lotto e la data di scadenza nuovi Scegliere il pulsante No Non e il reagente non sar modificato Controllo compatibilit Compatibility Check compreso un controllo della compatibilit ch
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