Hoefer SE600/SE660
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1. Finnish Jos tata varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehk isty varusteille saattaa olla avuton Tama valine suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen laboratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan kaytt jannitteeseen Kiert kaikki kaytt jannitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautukseen eik j hdytysnestel hteeseen e piii miss vesipaine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumeneminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet quipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par l quipement pourrait tre diminu e Cet instrumen2. Lo stand di colata di gel contiene panini assemblati in posizione verticale per la fusione gel I piedini regolabili livellare il caster Una guarnizione stratificato sul fondo di ogni culla guarnizioni colata la parte inferiore del sandwich quando viene serrato nel supporto Cams Cams sono usati due volte prima per fissare il sandwich assemblato nello stand casting e in secondo luogo per attaccare il panino alla camera tampone superiore Guarnizioni di gomma Ci sono due insiemi di due guarnizioni Le guarnizioni solide laminati inseriscono nel fondo della colata e stanno per realizzare la tenuta colata del gel Le guarnizioni fessurate collocato sotto la camera di transito superiore e formare la tenuta tra le camere superiori e inferiori Le creste sulla guarnizione superiore allineare la scanalatura guarnizione per mantenere aperto un canale tra la parte superiore del gel e il buffer nella camera superiore Distanziali Distanziatori determinare lo spessore del gel e sono disponibili in tre spessori 0 75 1 0 e 1 5 mm e due larghezze 1 e 2 cm Possono essere ordinati separatamente Spacer Mate allineamento template Ouesto modello allinea distanziatori durante il montaggio a sandwich Combs Combs sono disponibili in dimensioni che formano 10 12 15 20 o 28 pozzetti Preparativa pettini comprendono uno o due pozzetti di riferimento oltre ad un pozzo preparativa La maggior parte pettini sono disponibili i
3. Nota guando girando gli eccentrici pi facile mantenere l equilibrio caster se si attiva sia verso il centro della ruota Fig 5 Caster componenti e la configurazione guarnizione lato schiuma verso il basso Posizionare la guarnizione lamellare nel supporto di fusione vedi Fig 5 con il lato di schiuma verso il basso Posizionare il gruppo pinza nella culla casting vite laterale rivolto verso l esterno Per 24 cm piastre posizionare il sandwich in modo che il morsetto pi in alto Inserire una camma nel foro su ciascun lato del vassoio fusione con la cresta breve termine verso l alto Sigillare la panino gel contro la guarnizione colata ruotando entrambe le camme di guanto necessario di solito 90 a 150 fino a 180 La camma preme le piastre gi nella guarnizione e per sigillare la parte inferiore del sandwich La tenuta conclusa quando il bordo del vetro appare pi scura e quasi trasparente contro la guarnizione Non ruotare la camma oltre questo punto lastra di vetro distanziatore buraco circa morsetto Y D buraco circa culle di fusione 2 buraco circa piedini di livella camma mento 4 installare cresta finiscono buraco circa e pll e pl2 Gel di acrilammide o Preparare la soluzione di monomero e versare il gel Preparare la quantita richiesta di soluzione di monomero Disaerare e aggiungere l iniziatore e catali
4. kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla d r vattnet trycket r unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer over det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten e pvi Italiano R English R French R E German R E Spanish La Swedish R Rifiuti di apparecchiature elettriche ed elettroniche RAEE Auesto simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalit di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante This symbol indicates that the waste of electrical and electronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs a guipement lectrique et lectr
5. ben miscelati Il calore eccessivo Particolato nel campione Circulate ext refrigerante Diminuire l impostazione corrente o tensione Prechill il buffer Eseguire il gel in cella Centrifuga o filtro di esempio prima di caricare per rimuovere particelle Sovraccarico Carica quantit inferiore di campione degradazione Corrente di disper sione intorno gel Aggiungere inibitore della proteasi come PMSF Controllare eventuali perdite tutti i piatti e distanziali devono essere allineati e privo di grassi e di crepe Se utilizzato la diga del buffer deve essere sicuro Campione o preparaz ione del reagente Se il pH richiesta di una soluzione superato non back titolare Scartare e preparare tampone fresco Ricette Verifica concentrazioni gel e tampone di diluizione Per esempio non utilizzare Tris HCI invece di tampone Tris per serbatoio Laemmli Diminuisce la concentrazione di sale di campioni Qualit del reagente Smaltire soluzioni di acrilammide anziani e utilizzare solo stock di altissima qualit Utilizzare solo urea appena deionizzata Impostazioni di tensione o corrente Per aumentare o diminuire la velocit di migrazione regolare la tensione o corrente del 25 50 e p28 problema Bands sono inclinate o distorte possibile causa Gel preparazione incompleta e di polimerizzazione rimedio Degas l impilamento gel soluzione ed evitare bolle d aria
6. e tradizionalmente utilizzato con un sistema tampone discontinuo modo che la velocit di migrazione elettroforetica rimane invariato per tutta la corsa In queste condizioni di tensione aumenta man mano che i proventi di esecuzione Un valore minore di corrente raccomandata per una maggiore risoluzione Il livello ottimale di corrente deve essere determinato empiricamente i principali fattori che devono essere equilibrato includere la concentrazione di gel e la velocit di migrazione e il riscaldamento Joule risultante e distorsione banda Tabella 2 liste di partenza punto linee guida e le regolazioni per lo spessore del gel il numero di gel e la velocit di migrazione Corrente Attuali agisce sul totale sezione trasversale di tutti i gel perch i gel sono collegate in parallelo al circuito elettrico Cos l impostazione corrente per un gel deve essere moltiplicato per il numero di gel della stessa sezione run simultaneamente Per un gel 1 5 millimetri di spessore si consiglia l impostazione corrente di avviamento di 25 mA Due da 1 5 mm gel 50 mA Nota raffreddamento pu essere richiesto di controllare il riscaldamento Joule Tensione La tensione di partenza per un gel 1 5 millimetri lastra collegato ad un alimentatore impostato a 25 mA solitamente da 80 a 90 V usando il SE600 discontinuo con un sistema tampone Laemmli per SDS gel La tensione finale tipicamente 250 400 V a seconda della lunghezza del
7. il grafico a circa 1 C Se la temperatura desiderata di 23 C per impostare il bagno 23 1 22 C Se la temperatura desiderata 4 C per impostare il bagno 4 1 3 C Fig 9 Buffer livelli da camera Volumi approssimative richiesto SE600 4 5 liters SE660 7 0 liters e Bassa tensione corre e Sistemi che utilizzano lo stesso tampone in entrambe le camere superiori e inferiori Superiori e inferiori livelli di buffer camera sono uguali Volumi approssimative richiesto SE600 4 0 liters SE660 6 0 liters e alta tensione corre e focalizzazione isoelettrica e sistemi che utilizzano tamponi differenti nelle camere superiori ed inferiori Il livello del buffer deve coprire la maggior parte del sandwich gel per consentire la dissipazione di calore ma deve consentire almeno 2 cm di distanza sotto la camera tampone superiore camera IL l superiore livello del buffer camera inferiore livello del buffer Montare il gruppo superiore camera di compensazione nella camera tampone inferiore Utilizzare una mano ferma per evitare di disturbare i campioni Afferrare il montaggio nello stand di colata dalla camera tampone superiore e con attenzione abbassare nella camera inferiore o Controllare l installazione e controllare i livelli di buffer Buffer di camera su
8. il sandwich in luogo contemporaneamente ruotando una camma in senso orario e l altra in senso antiorario di 180 Nota Non forzare le camme Se si incontra una resistenza insolita smontare e controllare I allineamento pinza e vetro nella parte superiore del sandwich Allineare e reinstallare Nota Se l opzione di raffreddamento viene utilizzato frequentemente conveniente collegare i connettori QuickFit al tubo Le valvole di questi raccordi evitare la fuoriuscita del refrigerante o Use a pipette to carefully fill each slot above the sample wells with buffer to minimize disturbing the samples Then pour 100 ml of buffer into the chamber directing the buffer stream toward the side wall Check that no buffer leaks around the gasket Buffer di camera inferiore Mettere una barra magnetica di spin nella camera tampone inferiore LBC e posizionare l unit su un agitatore magnetico Riempire la camera inferiore con un massimo di 4 litri di buffer a Abbassare lo scambiatore di calore nella camera inferiore di montare le porte nelle tacche del cerchio Lo scambiatore di calore deve essere in vigore per tutte le corse perch I elettrodo inferiore integrato nello scambiatore di calore Se non necessario il raffreddamento passare al punto 3 Opzionale Collegare lo scambiatore di calore ad un circolatore termostatica Diapositive fascette guattro in totale su ogni estremita di due lunghezze d
9. verticale di base 1 SE660 Comprende 3 serie di lastre di vetro quattro da 16 cm e quattro da 8 cm assiemi clamp 6 camme gel a doppia fusione stand con base di livellamento e di livello diga di buffer Spacer Mate modello di allineamento e Wedge Wonder strumento di piastra di separazione Ordine 2 pettini e 2 set di distanziali 24 cm separatamente SE660 doppia unit rinfrescata verticale completa 1 SE660 15 1 5 Comprende unita di base piu due di 15 e pettini e 2 distanziali 1 5 mm di spessore Parti di ricambio WonderWedge piastra gel strumento di separazione 1 SE1514 Scanalati in gomma guarnizioni in silicone per camera tampone superiore 2 SE6008B Laminati in gomma guarnizioni in silicone per la colata di supporto 2 SE6009 Buffer diga 1 SE6032 Buffer di camera superiore per SE600 SE660 1 SE6054 Coperchio con alta tensione conduce per SE600 SE660 1 SE6056 Ad alta tensione di sicurezza set di piombo 1 SE6056 HV Buffer di camera inferiore per SE600 1 SE6150 Scambiatore di calore per SE600 SE660 1 SE6160 e p34 prodotto quantita codice Buffer di camera inferiore per SE660 1 SE6650 Fissaggi per scambiatore di calore assembly elettrodo inferiore 4 SE6060 6 Spinotto a banana oro con 2 rondelle 1 SE6067 Tubo di vetro con 2 occhielli 1 SE6160 5 per scambiatore di calore assemblaggio di elettrodo inferiore Livella 1 SER11 Gel Seal 1 4 oz tubo 1 SE6070 coperc
10. volte l altezza del campione nel pozzo Qualit del reagente Smaltire le soluzioni obsolete di acrilammide e usare solo il pi alto grado di acrilammide Preparazione del campione Durante la preparazione dei campioni evitare di utilizzare soluzioni con elevate concentrazioni saline e p29 problema possibile causa Fascia bassa Condizioni di risoluzione funzionamento rimedio Iniziare elettroforesi appena il campione viene caricato per impedire specie a basso peso molecolare da diffondere Effettuare la separazione in una posizione pi bassa corrente o tensione per ridurre riscaldamento Joule Qualit del reagente Utilizzare solo i reagenti di altissima qualita Poor impilamento Utilizzare solo gel che erano recentemente preparato Aggiungere un gel di impilamento o aumentare l altezza del gel di impilamento Preparare la Risoluzione gel superficie prima risciacquo con stacking gel monomero prima di ver sare il gel di impilamento per garantire la continuita tra i gel Controllare i valori di pH delle risoluzione e stacking gel soluzioni Non titolare di ritorno buffer Gel polimerizzazione incompleta Lasciare gel per polimerizzare completamente Preparazione del campione e p30 Conservare campione sul ghiaccio prima che sia denaturato Dializzare o desalificare del campione I campioni di calore in tampone campione SDS per non piu di 1 2 min a 100 C per migliorare la dissoci
11. E6119 2 75 1 00 16 2 2 SE6119 2 1 0 1 50 16 2 2 SE6119 2 1 5 0 75 24 2 2 SE6619 2 75 1 00 24 2 2 SE6619 2 1 0 1 50 24 2 2 SE6619 2 1 5 Companion prodotti Hoefer SE100 Mate lavaggio della piastra e di unit di memorizzazione 1 SE100 Connettori AuickFit femmina 3 8 2 QF3 8 Connettori QuickFit di sesso maschile 3 8 2 QFX3 8 e p39 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Numero verde 1 800 227 4750 Telefono 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer un marchio registrato di Hoefer Inc Coomassie un marchio di ICI plc 2012 Hoefer Inc Tutti i diritti riservati Stampato negli Stati Uniti Hoefer
12. ar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desconecta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Recalentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhandah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaboratorium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godkande eller levererade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som r CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng V nder sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar bort kraften blyen f re flytta s
13. azione delle subunita Conservare sul ghiaccio dopo il riscaldamento Regolare il volume del campione o la concentrazione Aggiungere piu mercaptoetanolo o ditiotreitolo controllare trattamento del campione Aggiungere inibitori della proteasi PMSF come se necessaria per prevenire la degradazione proteolitica di campione Aumentare glicerolo o saccarosio per aumentare la densita del campione Conservare i campioni devono essere congelati in aliquote per evitare cicli ripetuti di congelamento scongelamento Conservare a 40 a 80 C Bibliografia Generale Gallagher S R and Smith J A Electrophoretic separation of proteins In Current Protocols in Molecular Biology Ausubel E A eds OSC 10 2 1 10 2 21 1991 Hames B D and Rickwood D Gel Electrophoresis of Proteins A Practical Approach Second edition City IRL Press 1990 Sambrook J and Russell D W Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor NY 2001 Sasse J and Gallagher S R Staining proteins in gels Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A et al eds OSC 10 6 1 10 6 8 1991 SDS Polyacrylamide Gel Electropboresis and Isoelectric Focusing Handbook 80 6013 88 Hoefer Inc 2001 Non denaturante gel sistemi Reisfeld R A et al Acidic buffer system for resolution of cationic proteins Nature 195 281 1962 McLellan T Electrophoresis buffers for pol
14. corse successive Proteine di membrana di calore a 60 C per 20 minuti Conservare campione inutilizzato a 4 C o Underlay il campione nei pozzetti utilizzando una punta fine microsiringa o gel loading punta della pipetta Tabella 2 Volume di campione per le misure standard pettine volume del campione ul per 1 mm di profondita numero spessore pettine mm di pozzi 0 75 1 0 15 10 6 2 8 3 12 4 12 5 8 7 7 11 5 15 4 3 5 7 8 6 20 3 1 4 1 6 2 28 2 1 2 7 4 1 1 1 ref prep 4 90 6 121 9 183 1 2 ref prep 4 85 6 112 9 171 e p17 Fig 7 Collegamento panini gel nella camera tampone superiore Se le perdite di assemblaggio necessario per un lavandino e parzialmente rilasciare le camme per consentire buffer di defluire nella camera superiore Smontare controllare l allineamento di tutti i componenti a sandwich e regolare se necessario A Togliere camme dai fori inferiori a camme Posizionare la camera superiore sui panini e quindi inserire le camme nei fori superiori a camme cresta breve termine verso il basso B La posizione finale camma non mostrato deve essere verticale in modo che il gruppo si inserisce nella camera tampone inferiore e pl8 Assemblaggio finale Buffer di camera superiore o Sciacquare entrambe le camere del buffer con acqua e acqua distillata accuratamente prima di ogni utilizzo Nota Prima di usare la prima volta smontare I
15. di impilamento In un sistema tampone discontinuo la zona in cui ciascuna specie molecolare migra acuito dal gel di impilamento quindi il campione non deve essere cos concentrato Preparare i pozzetti Togliere il pettine delicatamente cullandolo un lato all altro e poi sollevando verso I alto per evitare di danneggiare le pareti del pozzo Sciacquare accuratamente ciascun pozzetto con acqua distillata per rimuovere acrilammide non polimerizzato e quindi scaricare invertendo il panino gel o caster Riempire ogni pozzetto con tampone di elettroforesi Wen Y Nota Una volta che i campioni nei pozzetti fare attenzione a non urtare i panini in modo che i campioni non vengono sversati o mescolato Preparare il campione Aumentare la densit del liquido campione con il 10 glicerolo o saccarosio Aggiungi un colorante di monitoraggio come il rosso fenolo blu di bromofenolo o pironina Y Per gel SDS proteici 2X tampone di utilizzare un trattamento per denaturare entrambi i campioni secco e liquido in una provetta Per soluzioni proteiche liquide aggiungere un volume uguale di 2X tampone Per asciugare campioni proteici aggiungere volumi uguali di 2X tampone campione e ad elevata purezza per ottenere la concentrazione desiderata Riscaldare il tubo in acqua bollente per 90 secondi poi lasciare raffreddare a temperatura ambiente Campioni trattati possono essere conservati a 40 a 80 C per le
16. di vetro e distanziali con una soluzione diluita di un detergente laboratorio come RBS 35 quindi risciacquare abbondantemente con rubinetto e acqua distillata Lastre di vetro possono anche essere trattati con soluzioni di acido ma non memorizzato in di pulizia Sostituzione di un tubo scambiatore di calore di vetro o Rimuovere il tubo contemporaneamente torsione e scorrere verso il basso per quanto possibile fino a quando l estremit superiore libera della guarnizione superiore Guidare con attenzione il tubo in modo che canceller l assemblea quindi sollevare il tubo dalla guarnizione inferiore a Ingrassare leggermente la parte esterna di entrambe le estremita del tubo nuovo con grasso al silicone Twist e slitta un estremit del tubo nella guarnizione inferiore Poi scivolare l altra estremit della guarnizione superiore spingendo delicatamente con una leggera torsione fino all arresto Controllare che la guarnizione non pizzicato Risoluzione dei problemi problema possibile causa Gel a sandwich Componenti sporchi o mentre le perdite di danneggiati fusione rimedio Piatti Distanziali e con la guarnizione deve essere completa mente pulita Lavare se necessario Sostituire lastre scheggiate soprattutto se scheggiato vicino ai distanziali Controllare la guarnizione caster per i tagli o screpolature e sostituirli se necessario Mis allineati parti Verificare l allinea
17. e pl3 Fig 6 Versando un gradiente di gel Una punta di pipetta pu essere usato al posto di una cannula se la soluzione di gel viene consegnato ad una velocit che mantiene un flusso continuo sulla superficie del vetro Nota gel gradiente versato nel Caster SE615 e SE675 Gel multipla vengono introdotti attraverso il fondo Nota Auando si versa un esponenziale gel gradiente la posizione di un pistone o tappo di chiusura sopra il liguido nella camera di miscelazione per contenere il volume costante e pl4 Gradiente di gel Gel gradiente sia lineari che esponenziale pu essere versato in dual gel caster Si consiglia di utilizzare uno Hoefer SG Maker Gradient Series Gel gradiente vengono versati dall alto della ruota con una cannula se si utilizza il fornito dual gel caster o dal basso se si utilizza un multiplo Caster Gel Hoefer vedi istruzioni che accompagnano la caster Un gel di impilamento viene poi versato sul gradiente di gel o 0 0 0 O O Versando un gel gradiente lineare o Montare sandwich es nei dual gel ruote come descritto a pagina 9 a Impostare il percorso di soluzione di monomero di flusso Eseguire un pezzo di tubo in vinile trasparente attraverso una pompa peristaltica Collegare un estremita del tubo alla porta di uscita gradiente maker e l altra estremit ad una cannula 20 cm La od della cannula deve essere inferiore allo spessore distan
18. er Hoefer Wedge Gel strumento piastra di separazione per separare piatti Sollevare con cautela la lastra di vetro con il gel in allegato Maneggiare il gel con cura per evitare di danneggiarla Capovolgere la piastra e il gel posizione bassa sul vassoio colorazione Pry un angolo del gel lontano dal vetro e farla cadere nel cassetto oppure se il gel spesso sufficiente per gestire sollevarlo e metterlo nel cassetto Per evitare schizzi aggiungere la colorazione o la soluzione fissativa al vassoio dopo che il gel viene trasferito Pulire l unit come descritto nella sezione successiva e p25 e Non sterilizzare in autoclave o riscaldare qualsiasi parte superiore a 45 C e Non usare solventi organici soluzioni di pulizia abrasivi forti o acidi o basi forti per pulire le camere e Non immergere la guarnizione laminato Nota Se il tubo vecchio incrinata o rotta proteggere la tua mano con guanti spessi un pezzo di stoffa o tovaglioli di carta prima di rimuovere il tubo e p26 Cura e manutenzione Pulizia Immediatamente dopo ogni utilizzo lavare le camere di buffer superiore e inferiore con acqua e poi sciacquare abbondantemente con acqua distillata Maneggiare la camera superiore del buffer con cura per evitare di danneggiare la spina a banana Pulire le guarnizioni con un detergente neutro e risciacquare con acqua distillata Lasciare asciugare all aria Pulire lastre
19. g in immobilized pH gradients principle methodology and some applications J Biochem Biophys Methods 6 317 339 1982 Gorg A et al The current state of two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients Electrophoresis 9 531 546 1988 G rg A Two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients current state Biochem Soc Trans 21 130 132 1993 Bjellqvist B et al Micropreparative two dimensional electrophoresis allowing the separation of samples containing milligram amounts of proteins Electrophoresis 14 1375 1378 1993 Blomberg A et al Interlaboratory reproducibility of yeast protein patterns analyzed by immobilized pH gradient two dimensional gel electrophoresis Electrophoresis 16 1935 1945 1995 e p33 Informazioni per l ordine prodotto quantit codice per 18 x 16 cm gel SE600 doppia unit rinfrescata verticale di base 1 SE600 Comprende 3 serie di lastre di vetro quattro assemblee clamp 16 cm 6 camme gel a doppia fusione stand con base di livellamento e di livello diga di buffer Spacer Mate modello di allineamento e Wedge Wonder strumento di piastra di separazione Ordine 2 pettini e 2 set di distanziali 16 cm separatamente SE600 doppia unit rinfrescata verticale completa 1 SE600 15 1 5 Comprende unit di base pi due di 15 e pettini e 2 distanziali 1 5 mm di spessore per 18 x 24 cm gel SE660 doppia unit rinfrescata
20. gel Vedi Tabella 3 e p23 Attenzione Dopo il monitoraggio iniziale non lasciare incustodito l apparecchio per pi di 1 h prima di verificare l andamento delle bande e il livello del buffer e p24 Tempo Una corsa completo quando il colorante inseguimento raggiunge il fondo del gel In un 16 cm gel SE600 di 1 5 mm di spessore Laemmli SDS gel eseguito a 25 mA gel senza raffreddamento di solito richiede 5 ore Gel richiedono tempi pi lunghi in proporzione di pi le separazioni a 24 cm di gel SE660 richiedono 8 ore Parametri per elettroforesi DNA acrilammide gel Gel di DNA che di solito funzionano ad una regolazione di tensione costante e poich i sistemi tampone sono continui entrambe le letture di corrente e tensione rimangono costanti per tutta la corsa Condizioni di funzionamento sono espressi in unit di V cm Pubblicato condizioni di funzionamento variano ampiamente ma tensioni nell intervallo da 1 a 3 V cm sono comuni per corse notte Nel SE600 abbiamo eseguito gel fino a 12 5 V cm Raffreddamento necessario a questo livello di tensione Registrare ogni corsa Mantenere un record della corrente o della tensione impostazione il numero e lo spessore di gel sistemi tampone e le letture iniziale e finale di corrente o di tensione per ogni ciclo in modo che i risultati possono essere confrontati Risultati incoerenti per lo stesso sistema e le impostazioni di indicare potenziali
21. hio di sicurezza con cavi SE6056 tampone camera superiore SE6054 scambiatore di calore SE6160 modello riordinare A SE600 SE6150 SE660 SE6650 e p35 prodotto quantita codice Gel rotelle Per 1 o 2 gel Gel Caster doppio basic 2 gels 18 cm wide ab SE6015 Include 2 guarnizioni in bianco per 1 0 2 gel Quello incluso in ogni unit SE600 Fino a 4 gel Gel Caster Kit 4 gels 18 x 16 cm 1 SE675 Comprende 8 lastre di vetro 3 salvaspazio piatti 5 fogli di riempimento 100 fogli di carta cera Spacer Mate modello allineamento e sui tappi Ordine pettini e distanziali separatamente Per un massimo di 10 gel Multipla Gel Caster Kit 10 gels 18 x 16 cm 1 SE615 Include 20 lastre di vetro salvaspazio piastra 5 fogli di riempimento 100 fogli di carta oleata dima di allineamento Spacer Mate e tappi di carico Ordine pettini e distanziali separatamente e p36 prodotto guantit codice Morsetto e camme Morsetto e Camme Kit quattro morsetti 16 cm e 8 camme nere 1 SE6003UK Viti di ricambio per pinze 12 SE6003U 2 Cammes nero per pinze con fori a camme SE6005L Bloccare assemblee 16 cm SE6003U Bloccare assemblee 8 cm 2 SE6403U Lastre di vetro 18 x 16 cm Lastre di vetro 2 SE6102 Lastre di vetro fluorescenza a basso SE6102LF Lastre di vetro panino divisore club con intaglio SE6102D 18 x 24 cm Lastre di vetro 2 SE6602 Lastre di vetro panino d
22. i 10 12 millimetri id Tubatura di vinile o silicone Attaccare un estremita di ciascun tratto di tubazione ad una porta scambiatore di calore Fissare le estremita libere di ciascun tratto di tubazione per porte bagno i circolatori uno per l ingresso e altra alla presa Fissare i collegamenti con le fascette Utilizzare il grafico Fig 8 a pagina 20 di stimare un punto di partenza per l impostazione della temperatura circolatore bagno Regolare come necessario per variabili quali la temperatura variazioni di potenza e bagno efficienza circolatore Se il controllo accurato della temperatura un fattore critico misurare la temperatura e regolare se necessario Opzionale Prechill il buffer e pl9 Fig 8 Approssimativo bagno circolatore impostazione della temperatura Impostare la temperatura del bagno circolatore impostazione inferiore alla temperatura di funzionamento desiderato per l importo indicato sul grafico Questo dovrebbe essere controllato in tre punti e p20 0 1 gt 2 3 5 2 N E 4 o 2 E E 5 E 6 7 0 10 20 30 40 50 60 alimentazione impostazione W Esempio Esegui parametri 200 V 0 05 A 50 mA 1 Calcolare W se il vostro alimentatore non visualizza alimentazione direttamente W VxA 10 W 200 V x 0 05 A 2 Interpolare il numero di gradi di sottrarre dalla temperatura di funzionamento desiderato 10 W interseca
23. i utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce oznakowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organicznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informac es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protecc o fornecida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que CE marcou ou segura
24. i che tutti gli elementi arrivato Se una parte manca rivolgersi all ufficio vendite locale Controllare tutti i componenti per i danni che possono essersi verificati mentre l unit era in transito Se una parte risulta danneggiata contattate immediatamente Essere sicuri di mantenere tutto il materiale di imballaggio per richieste di risarcimento danni o per utilizzare qualora risultasse necessario restituire l unit Buffer di camera inferiore La camera tampone inferiore trasparente che consente il monitoraggio visivo della elettroforesi La camera chimicamente resistente ai comuni buffer elettroforetici ma non ai solventi organici o acidi forti o alcali Temperature superiori a 45 C pu causare la camera a deformarsi Buffer di camera superiore La camera tampone superiore chimicamente resistente ai buffer elettroforesi comuni ma non ai solventi organici o acidi forti o alcali L elettrodo superiore catodo corre lungo il crinale centro e termina alla banana La camera superiore richiede 0 5 0 8 litri di riempimento del buffer non superiore alla sommit delle costole di plastica Scambiatore di calore Lo scambiatore di calore deve essere installato per ogni uso perch ospita Pelettrodo inferiore anodo che corre lungo la parte inferiore del telaio Se collegato ad un bagno circolatore lo scambiatore di calore regola la temperatura del tampone nella camera inferiore Refrigerante passa attraver
25. i di livellamento Allentare tutte le viti di serraggio e fare spazio per il panino facendo scorrere le piastre di pressione verso le viti a Costruire panini gel Per ogni panino scegliere due perfettamente pulite lastre di vetro unchipped e due distanziali Lay una piastra su una superficie piana porre le Spacer Mate modello allineamento sulla piastra lato largo nella parte superiore della piastra inserire un distanziatore lungo ogni bordo e porre la seconda piastra di vetro Fig 3 Numero richiesto di morsetti morsetto dimensioni 8 cm 16 cm SE600 2 SE660 2 2 o o o o o o o o o jo o o o o OJ e o o O o o o o o o o o o o ol 16 cm 24 cm SE600 SE660 Fig 4 Club sandwich di assemblaggio Fascette laterali ospiter due distanziali fino a 1 5 mm di spessore lastre di vetro ai lati esterni del sandwich centro della distanziali lastra con intaglio Nota Non utilizzare grasso al silicone o vaselina per sigillare il panino Queste sostanze sono difficili da rimuovere ed infine causare artefatti e plo Fissare il panino con morsetti Inserire un morsetto alla volta lungo i lati a sandwich Serrare una vite su ogni morsetto impostare il panino in posizione verticale su una superficie piana e allentare la vite per allineare lo stack Fare molta attenzione ad allineare per garantire la tenuta Serrare tutte le viti Rimuovere il distanziale Mate Pa
26. ioni frazionamento acido nucleico e la separazione seconda dimensione di elettroforesi 2 D Prima dimensione di separazione di 2 D elettroforesi delle proteine deve essere eseguita su gel di pH immobilizzati gradiente Le strisce concentrati sono facilmente trasferiti al gel di seconda dimensione lastra per la separazione dimensioni Tutte le lastre di gel sono 18 cm di larghezza Tabella 1 a pagina 9 liste di entrambi i modelli e la corrispondente lunghezza piastra di gel 16 o 24 cm Fino a quattro gel pu essere eseguito in una volta se i panini sono appaiati in club sandwich Lo scambiatore di calore permette di controllo della temperatura del buffer nella camera inferiore e pl Specificazioni Gel dimensioni piastra SE600 18 x 16 cm Lx A SE660 18 x 24 cm Gel taglia SE600 14 o 16 x 16 cm 16 cm con distanziali da 1 cm di larghezza 14 cm con distanziali 2 cm di larghezza Gel taglia SE660 14 o 16 x 24 cm 16 cm con distanziali da 1 cm di larghezza 14 cm con distanziali 2 cm di larghezza Max potenza 50 W Max tensione di 1000 V Max amperaggio di 500 mA Max temperatura 45 C Condizioni operative ambientali Uso interno 4 40 C Umidit fino a 80 Altitudine fino a 2000 m Categoria di installazione Il Grado di inquinamento Il Dimensioni L x A x P SE600 32 x 29x 14 cm SE660 32 x 37 x 14 cm Certificazioni di prodotto EN 61010 1 UL 61010A 1 CSA C22 2 1010 1 Certificazio
27. ird f r den Innenlaborgebrauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann f r das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produktes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem AnschlieBen der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen f hrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers Athylens durch den W rmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hImittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instrumentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen Uber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die berhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en m te ikke spesifisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrumen
28. ivisore club con intaglio SE6602D scegliere il distanziale e la lunghezza appropriata piastra per l unit morsetto universale SE6003U caster di base SE6015 camma e p37 Pettine numero spessore larghezza di pozzi mm mm quantita codice 10 0 75 8 3 SE511 10 75 10 1 00 8 3 SE511 10 1 0 10 1 50 8 3 SE511 10 1 5 12 0 75 7 6 SE511 12 75 12 1 00 7 6 SE511 12 1 0 12 1 50 7 6 SE511 12 1 5 15 0 75 5 7 SE511 15 75 15 1 00 5 7 SE511 15 1 0 15 1 50 5 7 SE511 15 1 5 20 0 75 4 1 SE511 20 75 20 1 00 4 1 SE511 20 1 0 20 1 50 4 1 SE511 20 1 5 28 0 75 27 SE511 28 75 28 1 00 ZL SE511 28 1 0 28 1 50 2 7 SE511 28 1 5 Comb profondit di 15 mm tutti gli altri 25 mm Preparativa pettini Questi pettini sono 25 mm di profondit regolabile a 10 o 15 mm numero di pozzi spessore larghezza mm prep ref mm prep ref quantit codice 1 1 0 75 121 6 1 SE511 R 75 1 1 1 00 121 6 1 SE511 R 1 0 1 1 1 50 121 6 1 SE511 R 1 5 1 2 0 75 113 6 1 SE511 DR 75 1 2 1 00 113 6 1 SE511 DR 1 0 1 2 1 50 113 6 1 SE511 DR 1 5 Schienale regolabile pettine 1 SE511 BKA Necessario per convertire qualsiasi da 25 mm pettine in profondit per 10 o 15 mm di profondit e p38 Distanziali spessore mm lunghezza cm larghezza cm quantita codice 1 00 16 1 2 SE6118 2 1 0 1 50 16 1 2 SE6118 2 1 5 0 75 16 2 2 S
29. kilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk oplosningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske opl sningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden O pii Driver ikke med stadpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifications Overheding vil forarsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleenglycol door de hitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmiddelen in deel van het instr
30. mento piastra e distanziale riallineare se necessario Over bloccaggio Esempio di pozzi bolle d aria danneggiati o irregolari Ruotare camma soltanto per quanto necessario per creare una tenuta di solito 90 150 ma fino a 180 Su ogni distanziale applicare un leggero strato di composto Seal Gel verso il basso angolo esterno solo Non usare grasso al silicone Eliminare le bolle d aria prima di inserire pettini Far scor rere pettine in soluzione ad angolo Se pettine deve essere rimosso aggiungere la soluzione di monomero pi prima di reinserire il pettine Polimerizzazione incompleta o ritardata Lasciare gel di acrilammide da impostare per un minimo dilh Detriti in pozzi Sciacquare gel non polimerizzato con il tampone del campione rimozione Comb Gel polimerizzazi Prodotti chimici one incompleta Togliere il pettine con una leggera angolazione e molto lenta mente per evitare di danneggiare il gel Gel di agarosio Abbassare il pettine non superiore a 1 cm in gel Utilizzare solo le scorte recenti di altissima qualit reagenti Se il persolfato di ammonio secco non scricchiolano quando vengono aggiunti all acqua sostituire con il brodo fresco Aumentare TEMED o concentrazione APS o entrambi pH Soluzioni con valori di pH estremi in particolare acido non pu polimerizzare Ossigeno Rimuovere ossigeno dall ambiente gel Degas la soluzione di monomero 5 10 min prima di versa
31. merciale o qualsiasi miscela a base di alcool o danni irreparabili allo scambiatore di calore risultera Non collegare lo scambiatore di calore ad un rubinetto di acqua o qualsiasi altra fonte in cui la pressione dell acqua regolamentata Nota Tutte le unit della serie SE600 utilizza 18 cm di larghezza piatti Lo spessore gel determina la sezione trasversale e attuale requisito per la costante piste attuali La lunghezza della piastra determina il tempo di esecuzione Tabella 3 sistema tampone Laemmli punto di partenza le linee guida Gel di spessore 1 5 mm Corrente per gel 25 mA corrente costante Avvio di tensione 80 90 V tensione finale 220 250 V Gel pi spessi o pi sottili richiedono proporzionalmente pi o meno corrente Per esempio un gel 0 75 mm che la met dello spessore di un gel 1 5 mm richiede met molta corrente o 12 5 mA La corrente deve essere moltiplicata per il numero di gel Ad esempio se due panini sono installati i quattro gel richiedono quattro volte tanto corrente La corrente pu essere aumentato per velocizzare le piste se raffreddamento attivo viene utilizzato e pu essere diminuita per lenti piste notte A 25 mA per gel La separazione del campione Parametri elettroforesi per gel di poliacrilammide discontinui I gel possono essere eseguiti sia in costante impostazioni correnti o tensione costante Una modalit corrente costante
32. n tutti e tre spessori 0 75 1 0 e 1 5 mm Possono essere ordinati separatamente Tutti i pettini preparativa e il 10 12 15 e 20 oltre i pozzi di forma pettini che sono il 25 mm di profondita I 28 pozzi pettine e forme che sono solo 15 mm di profondita in modo che i pozzi non collassano quando il pettine viene rimosso II volume del campione detenuta da ogni pozzetto dipende dallo spessore gel ben profondita e il numero di pozzetti per pettine Tabella 2 elenca i volumi dei campioni di ogni bene per tutti i pettini Wonder Gel Wedge strumento piastra di separazione Questo strumento e utilizzato per smontare panini gel e per controllare pettine distanziatore e spessori Istruzioni per l uso Gel procedure di fusione e l elettroforesi seguire Assemblea di entrambi i modelli identica Sono incluse istruzioni per gel di poliacrilammide utilizzata con sistemi tampone continuo o discontinuo e gel gradiente Vedi pagina 31 per la Bibliografia Preparare il panino gel Lastre di vetro distanziali e set di clamp sono dimensionati in modo che il sandwich assemblato pu essere facilmente allineato per creare la tenuta necessaria prima di lanciare il gel e poi eseguirlo Per ottenere risultati ottimali fare particolare attenzione ad allineare tutte le componenti in fase di montaggio panini La tabella 1 riassume gel fusione opzioni SE600 Sia gel prefabbricati e auto getto gel pu essere usato Per gel pi a
33. nca registrada por um nacionalmente reconhecido testando laborat rio A tampa de seguranca deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranca Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instrumento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Superaquecer causar agress o irrepar vel a unidade pv Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no especificado por Hoefer Inc la protecci n proporcionado por el equipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conect
34. ne CE Questa dichiarazione di conformit valida solo per lo strumento quando e utilizzato in ambienti di laboratorio e utilizzati cos come forniti dal Hoefer Inc salvo alterazioni descritte nel manuale d uso e e collegato ad altri marcati CE strumenti o prodotti raccomandati o approvati da Hoefer Inc Fig 1 Componenti principali della serie SE600 vedi Fig 5 per i componenti caster Inclusi ma non mostrato e Seal composto Gel 1 4 oz e Spacer Mate allineamento template e lastre di vetro 6 Wonder Wedge piastra strumento di separazione e diga Buffer Unita completa comprende anche distanziali 4 e pettini 2 Necessario ma non inclusi e Agitatore magnetico e Alimentazione con un rating minimo di 300 V 100 mA costante A o V Optional Circolatore bagno Nota La sezione di ordinazione elenca tutti gli accessori e parti di ricambio color coded cavi 2 coperchio di sicurezza tampone camera superiore con elettrodo superiore Scambiatore di calore con elettrodo inferiore buffer di camera inferiore Nota Prima di usare la prima volta smontare l unit e lavare con una soluzione diluita di un detergente laboratorio e risciacquare abbondantemente prima con acqua e poi con acqua distillata Apertura della confezione e Inventory Scartare tutti i pacchetti con attenzione e comparare i contenuti con la packing list assicurandos
35. nini lunghi richiedono due assemblee morsetto su ogni lato Durante il montaggio 24 cm panini allineare ogni estremita separatamente Cio allineare una estremita dita stringere le viti ruotare il panino 180 e allineare l altra estremit In ogni caso consentire la pinza di scivolare e allineare perfettamente con la parte superiore o inferiore bordo delle lastre di vetro Panino a pi strati A 16 o 24 cm di lunghezza con intaglio setto centrale da ordinare separatamente coppie di due panini di raddoppiare il numero di gel che possono essere espressi ed eseguire Assemblare un sandwich nello stesso modo come un sandwich regolare tranne prima di posizionare la lastra di vetro superiore fissare la piastra di separazione e una seconda serie di distanziali sulla pila Posizionare la tacca in modo che sar in cima dei gel essenziale che i distanziatori e le piastre allineare perfettamente per creare una tenuta Per piastre 24 cm di lunghezza posizionare il morsetto 8 centimetri lungo il lato nella parte inferiore del sandwich pi lontana dalla tacca o Rimuovere il sandwich e ispezionare il fondo per assicurarsi che i bordi siano allineati filo al fine di garantire una buona tenuta Regolare se necessario Opzionale applicare un leggero strato di composto Seal Gel solo sulle superfici in basso creati dai distanziatori e piastre se i vostri panini continuano a perdere dopo vari tentativi di allineamento E y
36. onique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Hausm ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem autorisierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Este simbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrustningar inte far avyttras som osorterat hushallsavfall och m ste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information ang ende avyttring av utrustningen e pvii Gel elettroforesi unit funzionale e Descrizione Le Hoefer SE600 serie verticale lastra unita elettroforesi su gel sono destinate elettroforesi proteine e acidi nucleici sotto comunemente usato denaturazione e non condizioni denaturanti Fino a 28 campioni possono essere confrontati su un gel singola lastra Le applicazioni includono proteine separaz
37. ore e disinserisce i piombi di potere prima di togliere il coperchio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cos equipaggiato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refrigerante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causer il danno irreparabile all unit Dule it Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskytnut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid musi b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50
38. periore UBC L elettrodo lungo il crinale della camera superiore deve essere sommerso a circa 1 cm Questo livello richiede 450 600 ml di tampone appena sufficiente a coprire le costole camera superiore ma non abbastanza per contattare la spina a banana Non superare la linea di riempimento MAX UBC Buffer di camera inferiore LBC livello tampone inferiore dipende dalle condizioni di funzionamento e il sistema tampone come descritto in Fig 9 Mettere il coperchio di sicurezza sull unit Collegare i cavi colorati ai jack di un alimentatore approvato Collegare il cavo rosso nel jack di uscita rosso e il filo nero nel jack di uscita nero Nella maggior parte dei sistemi testa rosso che collegato all elettrodo di fondo l anodo e il cavo nero collegato con l elettrodo superiore il catodo gt e p21 e p22 Note di montaggio importanti e EF Esegue il livello del buffer nella camera tampone inferiore non deve mai raggiungere la camera superiore del buffer mantenere almeno 2 cm di spazio Non riempire la camera superiore o inferiore al di sopra dei livelli raccomandati illustrati in Fig 8 Rimuovere tampone in contatto con gli elettrodi posti tampone Versare lentamente e lontano dalle fessure nella camera tampone superiore per evitare di disturbare i campioni Utilizzare acqua solo o 50 50 di acqua glicole etilenico come refrigerante Non utilizzare mai un antigelo com
39. problemi come perdite attuali le concentrazioni di buffer non corretto concentrazioni di sali o la qualit chimica incoerente Verificare i progressi band dopo 5 min e di nuovo dopo 1 h con un occhio sul tasso di migrazione del colorante inseguimento La pista completa quando il colorante inseguimento raggiunge il fondo del gel Vedere il livello del buffer e se necessario alimentarlo come richiesto per mantenere l elettrodo superiore sommerso Un piccolo volume di tampone pu fuoriuscire oltre una piastra intaccate o guarnizione o tampone pu passare attraverso il gel Nota utilizzare solo gli strumenti flessibili di plastica per evitare scheggiature indiscreti le lastre di vetro Dopo elettroforesi Una volta che il colorante inseguimento raggiunge il fondo del gel spegnere l alimentazione scollegare i cavi e rimuovere il coperchio di sicurezza utilizzando leva dito tra il coperchio e la parte superiore dello scambiatore di calore Sollevare verso I alto per evitare di piegare i connettori a banana a Se il liguido refrigerante circola fermare il flusso e scollegare i raccordi o tubi Estrarre il gruppo superiore camera buffer Versare il buffer in un lavandino Installare il gruppo nel gel caster duale e guindi rilasciare i panini girando e la rimozione delle camme o Svitare le pinze dai panini e rimuovere Delicatamente allentare e poi scivolare via entrambi i distanziali Utilizzare il Wond
40. re e quindi sovrapporre la superficie del gel con acqua satura di n butanolo Temperatura Regolare la temperatura della soluzione gel ad un minimo di 20 C specialmente per basse gel sulla T e p27 problema Superiori tampone camera perdite Potenza supplyde tects perdita di corrente Curve fronte del colorante fino ndr sorride ai bordi Proteine striature in verticale Insolitamente lenta o veloce run possibile causa Mis allineati parti rimedio Verificare che le lastre di vetro distanziali e morsetti sono allineati e si adattano perfettamente alla guarnizione camera superiore Controllare che entrambe le guarnizioni sono centrati e che le creste di posizionamento che si inseriscano nelle scanalature Componenti sporchi o danneggiati Percorso elettrico a terra al di fuori terra Non uniforme dis tribuzione del calore Controllare che la guarnizione non sia danneggiato o pizzicato Sostituire se necessario Controllare che la camera di compensazione superiore non deformato da una precedente esposizione a calore eccessivo Aggiungi pi grasso al silicone per sigillare passacavi scambiatori di calore Controllare eventuali perdite o rotture nello scambiatore di calore Sostituire anelli di tenuta usurate Riempire la camera tampone inferiore al livello appropriato per la corsa bordi Vedi Fig 8 pagina 20 Utilizzare agitatore magnetico e mescolare bar per mante nere buffer di
41. re la soluzione overlay da una siringa di vetro dotato di 22 gauge Applicare la soluzione in prossimita del distanziatore ad un lato del sandwich e consentono di fluire attraverso la superficie nudo o Lasciare i gel per polimerizzare per un minimo di 1 h Dopo la polimerizzazione versare overlay e sciacguare la superficie del gel pi volte con acgua distillata e p15 Ween 8 Nota con blu Coomassie possibile rilevare 1 pg di proteina in una singola banda Con le macchie d argento pi sensibili possibile rilevare un minimo di 10 ng di proteina e p16 Preparare la soluzione di impilamento gel monomero versare il gel di impilamento e introdurre un pettine con una leggera angolazione nel sandwich facendo attenzione a non intrappolare l aria sotto i denti Lasciare un minimo di 1 h per polimerizzare il gel per Preparazione del campione e Loading Il campione pu essere caricati o mentre il sandwich in caster o dopo la camera di transito viene fissata Quando si caricano campioni mentre utilizzando piastre divisorie i campioni devono essere caricate senza la camera tampone superiore in posizione La quantit di campione caricato dipende dallo spessore del gel la sensibilit del metodo di rilevamento utilizzato e la quantit di campione previsto in ciascuna banda In un sistema tampone continuo il campione deve essere relativamente concentrato poich non viene utilizzato gel
42. seconda dimensione Wen Y Sovrapposizione ciascun gel con un sottile strato di acqua butanolo saturo acqua o tampone gel diluito per evitare l esposizione all ossigeno gel Lentamente fornire la soluzione overlay da una siringa di vetro dotato di 22 gauge Applicare la soluzione in prossimita del distanziatore ad un lato del sandwich e consentono di fluire attraverso la superficie nudo Lasciare il gel per polimerizzare per un minimo di 1 h Stacking preparazione gel Versare il gel di impilamento mentre il sandwich ancora in casier gel Impilabile gel risoluzione ottimale guando versato poco prima elettroforesi o Rimuovere la mascherina sciacguando la superficie del gel pi volte con acqua distillata Invertire il caster per drenare Per assicurare un contatto perfetto tra il risolvere e il gel di impilamento rimuovere i residui di liguido tamponando un angolo con un laboratorio wipe Calcolare il volume di gel di impilamento monomero soluzione Preparare la sovrapposizione gel soluzione di monomero che disaerare e aggiungere catalizzatore e promotore Versare il gel di impilamento sul gel risoluzione con una pipetta Pasteur monouso o ad un livello di circa 2 mm dalla cima della piastra o Introdurre un pettine con una leggera angolazione nel sandwich facendo attenzione a non intrappolare l aria sotto i denti Lasciare un minimo di 1 h per polimerizzare il gel per
43. sional Gel Electrophoresis Using the O Farrell System Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A et al eds OSC pp 10 4 1 10 4 13 1992 Anderson N G Anderson N L and Tollaksen S L Proteins of human urine I Concentration and analysis by two dimensional electrophoresis Clin Chem Jul 25 7 1199 2210 1979 Anderson Leigh and Anderson Norman G High resolution two dimensional electrophoresis of human plasma proteins Proc Natl Acad Sci USA 74 5421 5425 1977 Anderson L Two Dimensional Electrophoresis Operation of the ISO DALT System Second Edition Large Scale Biology Press 1991 Bravo R Schafer R Willecke K MacDonald Bravo H Fey S J and Celis J E More than one third of the discernible mouse polypeptides are not expressed in a Chinese hamster mouse embryo fibroblast hybrid that retains all mouse chromosomes Proc Natl Acad Sci USA Apr 79 7 2281 2285 1982 Hurkman W J and Tanaka C K Solubilization of Plant Membrane Proteins for Analysis by Two Dimensional Gel Electrophoresis Plant Physiology 81 802 806 1986 Mets L J and Bogorad L Two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis an improved method for ribosomal proteins Anal Biochem Jan 57 1 200 210 1974 O Farrell P H High resolution two dimensional electrophoresis of proteins J Biol Chem May 25 250 10 4007 4021 1975 Bjellgvist B et al Isoelectric focusin
44. so i tubi di vetro che sono fissati con gommine in silicone in gomma Le porte di collegamento dello scambiatore di calore sono 13 mm di diametro esterno Lo scambiatore di calore viene valutato a un massimo di 0 8 atmosfere sopra ambiente 12 psig Collegare solo a fonti refrigeranti con pressione regolata Non collegare al rubinetto dell acqua Coperchio di sicurezza La banana sullo scambiatore di calore si collega al cavo rosso e il tappo sulla camera tampone superiore collega in testa nera Di 4 mm avvolto color coded spina cavi in colorate prese nella sezione di alimentazione Inserire perni di blocco prima di abbassare le connessioni degli elettrodi a connettori a banana Installare sempre il coperchio di sicurezza prima dell uso Lastre di vetro Tutte le piastre sono di 18 cm di larghezza ma ogni modello ospita un determinato piatto Il SE600 prende 16 cm di piatti e SE660 prende 24 cm piatti Tre serie di lastre di vetro sono inclusi in ciascuna unit Piastre divisori intagliati ordinare separatamente coppia due panini gel per formare un sandwich club in modo che fino a quattro gel pu essere eseguito in una sola volta Morsetti Due pinze a 16 cm vengono utilizzati per garantire gualsiasi panino lunghezza Un ulteriore coppia di pinze a 8 cm sono necessari per assicurare 24 cm panini Il bar di pressione morsetto regolata con viti distribuisce la pressione in modo uniforme Casting supporto
45. sotto i denti del pettine Interfaccia irrego lare tra stacking e l esecuzione di gel Sovrapporre il gel esecuzione con acqua satura butanolo comincia prima della polimerizzazione per evitare la formazione di una superficie irregolare gel Preparazione del campione Campione Stained raccoglie Vicino alla parte anteriore del buffer Gel concentration Degradation Dializzare o desalificare del campione Le molecole non sono sufficientemente limitata dalle dimensioni del gel risoluzione dei pori aumentare la T Le proteine possono essere degradata da proteasi endo gene utilizzare gli inibitori delle proteasi durante la fase di isolamento Vicino alla parte superiore del gel quando il fronte di buffer ha raggiunto il fondo Gel concentration Precipitation La dimensione dei pori gel troppo piccola diminuire il T del o sovrapposizione gel risolvere La proteina precipitata Riscaldare il campione ad una temperatura inferiore 70 C o meno per 1 2 min A sia superiore e inferiore del gel Monitoraggio colorante non affi nare in una zona concentrata nel gel di impilamento Gel concentration Poor impilamento L intervallo di peso molecolare del campione richiede un gradiente di concentrazione di acrilamide per risolvere l intera gamma di dimensioni proteiche Versare un gel pi alto impilamento Per ottenere risultati ottimali permettono un impilamento gel altezza di 2 5
46. t est con u pour l usage de laboratoire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entretenir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationalement reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre a sa place avant connecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par I exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l lexchanger de chaleur a un robinet d eau ou a la source d agent de refroidissement o la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organigue dans n importe guelle partie de instrument Les dissolvants organigues causeront des dommages irr parables a l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications technigues La surchauffe causera des dommages irr parables a l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument w
47. tet er utformet for innend rs laboratoriumbruk bare Bare tilbehar og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium O piv Sikkerheten lokket m veere p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjalemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organiske losemiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overoppheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprzet jest wykorzystywany w spos b nie okreslone przez Hoefer Inc do ochrony przewidzianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarczone przez Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacj
48. uale utente Italiano Hoefer SE600 SE660 Doppio standard raffreddati elettroforesi su gel Unita mu SE600 IM Italian Rev C0 06 12 H O e fe r Contenuto RAEE EE vii Gel elettroforesi unit funzionale e Descrizione 1 SPECIFICAZIONI cicala 2 Apertura della confezione e Inventory 4 Istruzioni per PUSO re 8 Preparare il panino gel 8 Gel di acrilamide risin iaasa 12 Gradiente di gel ala 14 Preparazione del campione e Loading 16 Assemblaggio finale 18 La separazione del campione eens 23 Cura e MANUTENZIONE 26 Risoluzione dei problemi aaa sa aaas 27 Biblos EE 31 Informazioni per I ordine erii 34 O pi Informazioni Importanti Italiano Se quest apparecchiatura usata in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di laboratorio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente riconosciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentat
49. ument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not specified by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating maintaining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so eguipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa
50. unita e lavare con una soluzione diluita di un detergente laboratorio e risciacquare abbondantemente prima con acqua e poi con acqua distillata Pulire via qualsiasi gel aderente I esterno dei panini gel e Se si esegue un solo gel Bloccare il secondo superiore slot di camera di compensazione con l installazione della diga acrilico tampone incluso con l unit Montare i morsetti sulla diga avendo cura di allineare le estremit del morsetto e bordi diga Installare i gel fittizio le viti si affacciano nella culla secondo nel gel caster duale Fissare il panino gel alla camera tampone superiore Girare la camera superiore del buffer a testa in gi e mettere una guarnizione ad incastro a sandwich entrambi i recessi porta Sia la fessura nella guarnizione e la scanalatura nella rientranza devono allinearsi Entrambe le guarnizioni asolati deve essere utilizzato anche se si esegue un solo panino gel Grooves lungo ogni slot aiutare a mantenere la guarnizione al suo posto Inoltre una piccola quantit di Seal gel pu essere applicato a ciascuna estremit della guarnizione prima di installare per contribuire a tenere la guarnizione contro la camera tampone superiore Rilasciare i panini dal caster rimuovendo tutte le camme fondo se presente Abbassare la camera superiore del buffer sui panini gel nello stand casting Installare l camme crinale verso il basso nei fori di buffer camera a camme Bloccare
51. uto cast kit possono essere ordinati separatamente 1 SE615 multipla Caster Kit Gel pu contenere fino a 10 panini e il SE675 Kit Gel Caster pu contenere fino a quattro panini Vedere il manuale di accompagnamento caster gel per le istruzioni complete SE660 I 24 cm di gel necessari per la SE660 deve essere auto cast Il Gel Caster Dual incluso detiene due panini gel bordi a sandwich sia superiore e inferiore deve essere allineato con le creste di guida del morsetto bar di pressione Fig 2 Insieme a sandwich lastre di vetro Controllare i nick Utilizzare solo le piastre unchipped per evitare perdite Suggerimento Usare la base di colata per tenere il panino durante l allineamento Rimuovere la guarnizione lamellare dalla culla e invece di impostare il panino in posizione verticale su una superficie piana messo in culla casting Tabella 1 Opzioni di fusione Gel modello numero gel formato gel disponibili di gel delle lastre cm e ruote SE600 1 4 18 x 16 Doppio Gel Caster Kit Gel Caster Multiplo Kit Gel Caster Gel disponibili in commercio SE660 1 4 18 x 24 Gel Caster doppio Due piastre di divisione accessori intagliati sono tenuti a eseguire 2 gel extra SLancia fino a 4 gel Lancia fino a 10 gel Costruire il panino gel e inserirlo caster o Preparare il caster e morsetti Posizionare la livella a bolla nel centro caster e regolare i piedin
52. voda ethylenglykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vybavena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifikacemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specificeret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan m ske svaekkes Dette instrument er designet for indend rs laboratoriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan m ske bruges for drive funktionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en str mforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedl get m v re p plads far forbinding stramforsyningsblyet til en stromforsyning Drejer alle stromforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen kolemiddel
53. yacrylamide gels at various pH values Anal Biochem 126 94 1982 Hedrick J L and Smith A J Size and charge isomer separation and estimation of molecular weights of proteins by discontinuous gel electrophoresis Arch Biochem Biopbys 126 155 1968 Denaturazione sistemi gel Laemmli U K Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T Nature 227 680 685 1970 Matsudaira P T and Burgess D R SDS microslab linear gradient polyacrylamide gel electrophoresis Anal Biochem 87 386 396 1978 Schreier M H Erni B and Staehelin T Initiation of mammalian protein synthesis I Purification and characterization of seven initiation factors J Mol Biol Nov 116 4 727 753 1977 e p31 e p32 Shapiro A L and Maizel J V Jr Molecular weight estimation of polypeptides by SDS polyacrylamide gel electrophoresis further data concerning resolving power and general considerations Anal Biochem Jun 29 3 505 514 1969 Schaegger H and Von Jagow G Tricine sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa Anal Biochem 166 368 379 1987 Weber K and Osborn M The reliability of molecular weight determinators by dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis J Biol Chem 224 4406 4412 1969 Elettroforesi bidimensionale Adams L D and Gallagher S R Two Dimen
54. ziatore Posizionare la cannula in modo che poggia sul fondo della met panino tra i distanziatori Opzionale Regolare la percentuale superiore soluzione acrilammide al 15 w v di saccarosio o 25 v v glicerolo per migliorare la stratificazione Preparare la soluzione di monomero Calcolare il volume di soluzione di monomero necessario Dividete il volume totale a met e preparare guesto volume di entrambi i superiore e inferiore percentuale di acrilammide soluzioni o Versare la soluzione luce nella camera di serbatoio la camera pi distante dalla presa Aprire il rubinetto tra le camere abbastanza a lungo per spostare l aria e quindi chiudere Versare la soluzione pesante nella camera di miscelazione e inserire una barra di agitazione in questa camera Porre a gradiente su un agitatore magnetico e iniziare agitazione ad una velocit che mescola bene ma non introdurre bolle nella soluzione Mescolare il gradiente e pompare la soluzione nel panino Mentre la soluzione viene agitazione iniziare a pompare dalla camera di miscelazione e aprire il rubinetto alla camera serbatoio Sollevare la cannula quanto liquido entra il panino mantenendo la punta alla superficie del gel Preparare altri gel come richiesto Sovrapposizione ciascun gel con un sottile strato di acqua butanolo saturo acqua o tampone gel diluito per evitare l esposizione all ossigeno gel Lentamente forni
55. zzatore appena prima di versare il gel Pipettare la soluzione in un angolo del sandwich facendo attenzione a non introdurre eventuali bolle d aria Vedi sotto per il livello della soluzione appropriata a seconda dell applicazione No stacking gel sistema continuo Riempire soluzione appena sotto il bordo superiore della piastra superiore Se le bolle sono in trappola rimuovere con una pipetta o una siringa Introdurre un pettine con una leggera angolazione in ogni sandwich facendo attenzione a non intrappolare bolle d aria sotto i denti Panino a pi strati Pipettare la soluzione in entrambi i panini riempiendo ciascuna allo stesso livello sotto il bordo dentellato Stacking gel Riempire soluzione di 3 4 cm sotto la parte supe riore della lastra di vetro Questa altezza permette 1 cm di gel di impilamento al di sotto del pozzetti Versare il gel e applicare un overlay vedi punto 2 Dopo che il gel impostato la preparazione del gel di impilamento come descritto di seguito 2 D elettroforesi proteine del sistema discontinuo Riempire soluzione di monomero di circa 1 cm sotto la parte superiore della lastra di vetro per consen tire 4 5 mm per la striscia IPG o gel tubo e una guarnizione agarosio Un gel di impilamento richie dono spazio extra Sigillare la striscia IPG o gel tubo in posizione con agarosio sciolto in tampone di corsa Fare attenzione a non intrappolare eventuali bolle d aria tra il gel prima e
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