Sezione 3
Contents
1. Rimuovere il tavolino del microscopio svitando le tre _ portaobiettivi nella parte superiore della base del viti a brugola esagonali Allentare la brugola di fis microscopio Figura 3 2 saggio del portaobiettivi sul lato destro e successivame sfilare il portaobiettivi stesso con movimento a slitta Inserire il compensatore CRi LC nello slot apposito dal lato destro del microscopio Notare che la slitta va inserita con il logo CRI sulla superficie superiore La slitta verra bloccata in posi Rimuovere le quattro viti a brugola di fissaggio della zione corretta copertura in plastica sotto il portaobiettivi e rimuoverla Rimettere le quattro viti nei propri alloggiamenti e riav vitarle Estrarre anche la slitta in plastica posizionata sotto la copertura appena rimossa Per 1 sistemi dotati di epi fluorescenza rimuovere anche questa Inserire il compensatore CRi LC nel binario a coda di rondine ed allinearlo cosiche le sue estremita siano ad eguale distanza dagli estremi del binario Fermare d tutto con le quattro viti disposte agli angoli del supporto di montaggio Quando installato correttamente il cavo del compensato re LC disposto sul lato sinistro del microscopio Figura 3 1 Riposizionare il portaobiettivi e stringere la vite di fermo Riposizionare il tavolino e rifissare le viti Figura 3 2 Installazione del compensatore LC nel N microscopio Nikon TE2000 La slitta rossa nel riquadro indica la po2. semplifica enormente il processo delle immagini in Page 7 r _ o m_m__cuo eee ee CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com birifrangenza permettendo analisi quantitative dell im magine intera indipendentemente dall orientamento del campione Tale informazione puo essere usata per una miglior comprensione dei cambiamenti biologici del fuso e di altre strutture all interno dell ovocita Visualizzare il fuso Gli ovociti sono bloccati in metafase II MII in cui un denso mazzo di filamenti forma il fuso meiotico F1g 1 3 Il fuso fondamentale per l allineamento e la separazione del cromosomi lungo la piastra metafasi ca cosiche avvenga una corretta divisione delle coppie di cromosomi durante lo sviluppo dell uovo Anomalie nella sua integrita possono causare una mancata o ano rmale fertilizzazione morte dell embrione o aborti spontanei con relative conseguenze L architettura dei filamenti e delle loro connessioni dinamica e puo essere usata per capire 1 cambiamenti nella biologia del l ovocita 27 vitro EH anche una struttura fragile per cui le tecniche di visualizzazione del fuso possono rivelarsi efficaci sia nel controllo di un corretto sviluppo sia per minimizzare 1 danni all ovocita durante la ICSI In IVF i piu pratici osservano la morfologia per predir Figura 1 3 Ovocita d
3. nella finestra immagine Si Zoom Out zoom out su un immagine selezio nata sia in live che su Immagini acquisite Cliccare sul l immagine per rimpiccolirla Il fattore di zoom sara indi cato nella finestra immagine Pan muove le immagini dopo che lo zoom stato applicato alle immagini live o acquisite T Annotazioni creare un messaggio di testo sull immagine Cliccare sul punto dell immagine dove dovrebbe apparire la nota Inserire il testo nella finestra di pop up e premere OK Le annotazioni sono salvate automaticamente J GALLERIA La galleria contiene tutte le immagini acquisite nella sessione L immagine selezionata verra evidenziata con un riquadro verde Le informazioni dell immagine selezionata appariranno nel Display Info Scorrere le immagini della galleria usando le frecce ai due estremi Per aprire un immagine fare doppio click sulla stessa nella galleria Ultra Software Plug In Tools Time lapse imaging calibrazioni e misure misure di angoli visualizzazioni in pseudo colore mappature vettoriale e misure di area sono disponibili nel pacchetto Ultra Per eventuale up grade contattare il vostro rappresentante CRI CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com Page 17 www cri inc com Computer Setup Sezione 3 Setup e 7 Se state installando 1l sistema su un computer esistente n stal
4. zatore in rosso La freccia indica la direzione verso cui muovere il pomello per posizionare l ottica CRi La foto fornisce un altra visualizzazione di come l ottica CRi viene inserita sul corpo del condensatore Condensatore Hoffman Modulation Contrast I condensatori di Hoffman a parte il classico HMC comprendono il Nikon LWD e ELWD per Diaphot 200 e 300 oppure per TE300 o 200 oppure per r _ _ _ _ _ rr rmMilii li rlrzluo dWlieaaaG a CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Nikon TE2000 Olympus IX 71 contrasto di rilievo Leica S 40 modulation contrast Riferirsi al vostro parti colare set up per le istruzioni d installazione Condensatori Nikon LWD e ELWD I condensatori Nikon LWD e ELWD per il contrasto di hoffman sul Diaphot 200 o 300 o TE200 o 300 utilizzano lo stesso polarizzatore a slitta usato sulla serie EP ad eccezione dell anello addizionale per il fissaggio sul corpo della lente condensatrice Riferirsi alle istruzioni d installazione a Pagina 22 Serie HMC EP Nikon TE2000 Hoffman Modulation Condenser Il polarizzatore CRI inserito sopra il condensatore a torretta del Nikon TE2000 riferimento Fig 3 8 Il polarizzatore filettato in modo da avvitarsi alla filettatura del microscopio Avvitare il polarizzatore sul condensatore ed inserire nel percorso la sli
5. 47 um x 4 83 um 8 bit Ogni sistema Oosight contiene una camera digitale e 1 2 formato un compensatore ottico a cristalli liquidi LC un filtro Binning circolare polarizzante interferenziale CP IF alimentato e ROI re cavo USB CD ROM di installazione software e un vetrino di riferimento La sezione seguente espone in Specifiche della Cooled CCD dettaglio questi componenti incluse le varie configura 1392x1040 pixels zioni supportate da CRi Prego far riferimento alla sola 6 47 um x 4 83 um 12 bit configurazione di interesse identificata al momento del 2 3 formato l ordine e Binning e ROI Camera CCD Alimentatore La camera CCD interfaccia ta UB2 compatibile passo C e puo operare come camera digitale standard per tutte le esigenze di microscopia E disponibile anche una ver sione raffreddata a 12 bit con piu grande formato ottico che risulta utile per osservazione di immagini a bassa fluore scenza Ogni sistema equipaggiato con un trasformatore universale da 110 220V E fornito anche un kit di adattamento per le diverse prese elettriche Inserire il cavo specifico per il vostro paese nel retro del trasfor matore Il trasformatore va con nesso alla rete elettrica Il cavo va poi connesso al retro della CCD camera power Il retro della camera contiene la porta per connettere il cavo Cavo USB del compensatore ottico LC optic 1l cavo USB USB e il cavo del trasformatore di ali
6. Le istruzioni relative all inserimento del polarizzatore CRI sono divise per tipo di microscopio Condensatori Nikon Diaphot o TE 200 o 300 Riferirsi alla Figura 3 9 per visualizzare quindi rimuovere l ottica o il portalente situato nella relativa slot del microscopio Nikon TE300 localizzata sulla colonna dell illuminatore adiacente al portafiltri Sostituire l ottica col polarizzatore CRi CP IF assicuran dosi che il logo CRI sia leggibile dall alto in basso come mostrato in Figura 3 9 Figura 3 9 Installazione del polarizzatore CRi nel Nikon TE300 Nota che il logo CRi deve apparire con lo stesso orientamento mostrato in foto Page 23 sales cri inc com www cri inc com CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Olympus IX Series Non Hoffman Condensers Refer to Figure 3 10 for a visual reference Flip open one of the swing arm filter holders from the illumination pillar Snap the CRi CP IF optic into position Be sure that the CRi logo reads from top to bottom and that the mirror side of the optic is facing towards the illumination source Figure 3 10 Installing the CRi CP IF optic onto an Olympus IX microscope The top shiny surface of the CRi optic should face towards the illumination source such that the CRi logo reads from top to bottom when the optic is in place Zeiss Axiovert 200 Non Hoffman Condensers Remove the circular polarizer and filter from the CRi housing by unscrewing the op
7. P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com
8. RI vitalita futura L uso del sistema per monitorare questi parametri della zona puo aiutare sia ad identificare le possibilita di sviluppo sia a far meglio capire come la struttura affetta dalle metodiche in vitro Applicazioni Il sistema Oosight fornisce un Immagine real time facile utilizzo del software su base Windows ed un design versatile per una semplice integrazione nei protocolli esistenti per IVF ed applicazioni di nuclear transfer Il sistema usato di routine per le seguenti applicazioni ICSI Si puo usare il sistema Oosight per guidare la microiniezione e per monitorare la vitalita dell ovocita La presenza e disposizione del fuso al momento della ICSI stato messo in relazione allo sviluppo futuro Nuclear Transfer Si puo usare il sistema ad alto contrasto e non invasivo per guidare una rimozione facile e sicura del fuso dall ovocita e nello stesso tempo minimizzare l estrazio ne di DNA citoplasmatico Congelamento ovociti Il fuso sensibile alla tempe ratura e suscettibili a danni durante la manipolazione e il congelamento Si puo usare il sistema Oosight per monito rare l effetto dei cambiamenti di temperatura in diversi protocolli di congelamento di ovociti e selezionare gli ovo citi vitali dopo congelamento Misura della Zona Pellucida La struttura della zona multistrato correlata al potenziale di sviluppo dell embrio ne Le ricerche hanno evidenziato una relazione fra la densit
9. Settaggio dell Hardware Sballaggio dell Hardware Appena ricevuto l hardware Oosight sballarlo e confro Nikon Diaphot 200 300 TE200 300 Pag 19 ntare il contenuto con la lista componenti inclusa nei Nikon TE2000 Pag 19 documenti di spedizione 8 Olympus IX Pag 20 Accertarsi che tutti 1 componenti siano stati ricevuti e che non sussistano danni dovuti alla spedizione Zeiss Axiovert 200 Pag 20 Leica DM IRB Pag 21 Mantenere le superfici ottiche esposte pulite e libere da polvere p Appunto Per pulire le ottiche si raccomanda l uso di alcol isopropilico al 70 isopropyl o una soluzione indicata da una ditta di microscopia Non usare tessuti che possano graffiare le superfici ottiche Usare invece crta da lenti Dopo pulito raccomandato l uso di aria compressa per rimuo vere ogni residuo di fibra lasciato sulle lenti dalla carta ottica Page 18 rr EE I i ifiiililiilia s lffGG6ee 5 es85 5 ririeri ic eoecedWZ CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Nikon Diaphot 200 o 300 o TE200 o 300 Nikon TE2000 Questa sezione illustra l installazione del compensatore Questa sezione illustra come installare il compensatore LC sui microscopi Nikon Diaphot 200 e 300 e LC sul microscopio Nikon TE2000 TE200 e 300 i l l l l Rimuovere la slitta di protezione in plastica sotto il
10. cosiche l illuminazione sia uniformemente filtrata dal condensatore stesso Questo processo di ottimizzazione dell illuminazione conosciuto come Illuminazione Koehler I vantaggi dell illuminazione Koehler sono 1 seguenti e Illuminazione uniforme e Immagini chiare alto contrasto e Minimo tempo di esposizione La tecnologia del PolScope incluso il nuovo Oosight richiede piu luce possibile per permettere un accurato e veloce processamento dell immagine Seguire le istru zioni qui sotto per settare il proprio microscopio per una corretta illuminazione Koehler STEP 1 Selezionare un obiettivo a basso ingran dimento 4x o 10x Centrare e fuochettare il campione nel campo visivo Si raccomanda di usare il vetrino di riferimento fornito col sistema per un piu accurato setup STEP 2 Agire sul potenziometro per aggiustare l il Illuminazione ad un livello confortevole Step 2 ae Aggiustare lt gt l intensita di illuminazione Y E STEP 3 Inserire l obiettivo che sara usato per osservare il campione Si raccomanda di usare l obiettivo 20x o 40x Riaggiustare intensita e fuoco VA Nota Per un risultato ottimale puo essere utile ripetere gli steps da4 a 7 usando la visione a video live del sistema Oosight una volta aperto 1l software Page 26 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 STEP 4 Chi
11. cri inc com or contact our Technical Support department at 781 935 9099 Contact CRi via e mail at techsupport cri inc com Office hours are 8 00 a m to 6 00 p m Eastern Standard Daylight Time Monday through Friday Warranty CRi warrants its Oosight systems for a period of one 1 year from date of shipment against defects in material and or workmanship provided its installation application and maintenance are within specifications Normal wearing parts are excluded This warranty covers only items manufactured by CRi CRi will correct by repair or replacement at its option and its expense any proved defects in items of its manufacture subject to above provided immediate written notice of such defects is given A valid Return Materials Authorization RMA must Page 34 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 be obtained by contacting CRi before items may be returned to the factory Repair or replacement will be provided F O B Freight On Board at CR1 s factory The total financial obligation of CRi under this warranty does not exceed the purchase price of the items of its manufacture as set forth on normal pricing schedules We will not assume any expense or liability for repairs made by others without our prior written consent This warranty is void and CRi will be free from all obligations hereunder if the items of its ma
12. laz lO n e accertarsi che sia il PC che il monitor rispettino le specifiche minime richieste dal sistema riferimento a pag 13 Computer Specification Tu sezione seguente illustra come settare l hardware Se stato acquistato il computer col sistema seguire le ed il software di Oosight Le maggiori informazioni istruzioni per l inizializzazione del computer come indi includono il settaggio dell hardware sul vostro microsco cato nel manuale del computer Il software Oosight pio l installazione del software Oosight software ela sara gia preinstallato prima partenza del software incluso l ottimizzazione del microscopio e delle ottiche Prima di accendere il computer accertarsi che sia selezionata l alimentazione corretta per il vostro paese ZA Nota I seguenti passaggi presumono una buona conoscenza del vostro microscopio e del sistema operativo Microsoft Windows Installazione delle ottiche CRI Installazione del compensatore CRi Liquid Crystal LC Potrebbe risultare utile consultare 11 manuale utente del vostro microscopio e tutta la documentazione Rimuovere il coperchio di protezione del compensatore disponibile su Windows LC e controllare se esiste sporco graffi o Impronte digitali Per eventuale pulizia attenersi all appunto indicato in calce Ogni compensatore LC indicato per una specifica confi gurazione di microscopio Si prega di consultare la sezione relativa al vostro microscopio come sotto indicato
13. o AMD CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Accessori non inclusi col sistema Gli accessori richiesti per il sistema sono un adattatore passo C 1x per connettere la camera al microscopio un tavolino riscaldato per assicurare la stabilita termica entro un grado centigrado e capsule col fondo in vetro Il sistema non lavora con capsule in plastica poiche la plastica risulta birifrangente ZA Nota E essenziale un rigoroso controllo termico per mantenere l integrita del fuso e 1l buon sviluppo dell embrione La temperatura ottimale per gli ovociti umani di 37 C Page 13 Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Guida di riferimento del Software Il software Oosight puo essere installato usando 1l CD fornito col sistema Dopo l installazione aprire il programma Oosight usando l icona sul desktop o cliccando su Start Programs CRi Oosight Le funzioni del Software saranno descritte in questa sezione Una videata con indicazioni evidenziate vedi sotto alutera ad identificare i comandi e le funzioni relative dell interfaccia utente Far riferimento alla sezione Setup ed Installazione del manuale per una guida piu comprensiva delle operazioni iniziali A Oosight Image0000 100 Sequence 0 Exposure 53 39 ms Taken 2005 Sep 21 18 27 41 Notes m image notes spindle appears normal c OK LC optics OK Ep 55 ms
14. piena apparira nella finestra Studio Assicurarsi che lo STUDIO stia mostrando il formato 1x1 come selezionato dal riquadro singolo sotto la finestra STUDIO l l 15 Mettere a fuoco sull ovocita finche il fuso sara visibile Per agevolare la messa a fuoco usare 9 SE SETTINGS SETUP dalla barra l opzione zoom sulla barra dei tool e clickare del men sul fuso nell immagine live Quindi aggiustare il fuoco definitivamente 10 Selezionare l azimut dell angolo di offset dalla lista drop down Per ER Olympus impos 16 Selezionare SNAP OOSIGHT per acquisire un tare 135 l Per tutti gli altri selezionare 90 Una immagine L immagine acquisita apparira nella volta inserito non occorre ripetere questo step finestra Studio ed in GALLERY L immagine viene salvata autoamticamente A 11 Selezionare SETTINGS SETUP OPTICAL STATES dalla barra menu Premere OK per continuare Il compensatore LC iniziera il ciclo per trovare il settaggio ottimale e quindi acquisi ra un immagine del background Riferirsi a pag 15 per indicazione su quando ripetere questo step 12 Entrare nel nome immagine Un numero sequen ziale verra assegnato all immagine Si raccomanda di nominare l immagine col nome o numero del Analisi delle immagini paziente o del campione oo i Il sistema Oosight include le funzioni zoom panning sa i l annotazioni e note Le funzioni zoom panning e an 13 Posizionare la capsula campione sul tavolino e notazioni hanno accesso t
15. struttura di gestione dati che ga i a i l ultima esposizione acquisita e l operazione corrente permette di acquisire automaticamente un immagine in una sessione definita dall operatore H STUDIO La finestra studio mostra l immagine attiva e il live Una volta aperto il software per la prima volta si puo a piena risoluzione Per passare l immagine live allo entrare nella funzione User e Session studio occorre fare doppio click sulla finestra Live Video L User name viene specificato dall operatore Ogni La finestra studio visualizza immagini a 1x1 2x2 e utilizzatore del sistema Duo avere un unico user name 3 3 La Session puo definire un particolare ciclo caso serie di campioni o tempo Per modificare User Usare le icone rappresentative sotto il pannello studio o Session selezionare il tasto Update Image Name per identificare il set up 1x1 2x2 e 3x3 dovrebbe essere inserito prima di salvare l uimmagine vedi sotto Ogni immagine viene automaticamente abbinata ad un numero sequenziale e salvata in maniera definita nelle L EH EH finestre user e session Le immagini sono salvate come file pli Per salvare La barra sotto il pannello studio serve ad aggiustare l immagine come TIFF selezionare File Export dal il ritardo mostrato per immagini Oosight e Live Oosight menu quindi selezionare la directory di esportazione oppure il brightness per l immagine video La scala per e premere OK il ritardo delle immagini puo essere cam
16. this Agreement CRi hereby grants to you a restricted sales cri inc com www cri inc com non exclusive non transferable non assignable non sublicensable and revocable license to use for your internal purposes only the executable code version of the Software and the accompanying documentation in hard copy or electronic format CRi RESERVES ALL RIGHTS NOT EXPRESSLY GRANTED BY THIS AGREEMENT 2 Specific Restrictions You may use the Software only on a single computer at a time You may not use the Software on more than one computer or computer terminal at the same time nor allow access to the Software from one computer to another over a network the Internet or by any other means You may make only one 1 copy of the Software solely for backup purposes You may not decompile reverse engineer disassemble alter modify translate adapt decipher or determine the source code or create derivative works of the Software 3 Ownership of Software CRi and or its suppliers own all right title and interest including all copyrights in and to the Software The Software contains confidential information and trade secrets of CRi You i acknowledge and agree not to contest CRI s rights in the Software 11 agree not to disclose to anyone or allow anyone access to the Software and 111 agree not to disclose any confidential information of CRi regarding the Software or that is otherwise disclosed to you in connection with th
17. C si connette al Compensator optic connettore indicato LC Optic mostrato in figura il cavo USB al connettore indicato USB 2 e l alimen tazione all uscita Power ind pending LC a Pat 5 521 705 6 879 7 Serial No 80357 Cavo USB 2 Connettere il cavo USB 2 dalla camera ad una porta USB libera sul computer A Attenzione I sistema lavora solo con porte USB Qualsiasi computer fabbricato prima di maggio 2001 non possiede questo protocollo USB Controllare le specifiche del vostro PC per assicu rarsi che sia dotato di porta USB 2 Alimentatore L alimentatore va settato con le specifiche elet del paese di destinazione Identificare le proprie spe cifiche elettriche e settare lo switch nel retro del trasformatore Se non possibile settare il proprio voltaggio locale munirsi di un adattatore intermedio Connettere l alimentatore alla rete elettrica a muro Attaccare l altro estremo del cavo al retro della camera nell apposita porta Cavo del compensatore LC Attaccare il connettore multi pin del cavo LC sul retro della camera Se il cavo troppo corto si prega di contattare CRi per richiedere un cavo di prolunga Page 25 sales cri inc com www cri inc com Settaggio del microscopio Illuminazione Koehler AI fine di ottenere l intensita d illuminazione massima e la migliore qualita d immagine necessario fare una corretta centrature del condensatore in maniera ottimale
18. Eeer 24 Isili CPC 24 E RT 0 ae AE E O OOA ee ee eee 25 EE EE 26 LN Ee A EE a 26 Rinor one oe KEE ee 26 PozZ ommen oon E R NEE 27 Jastalli 0n eebe 27 Operazioni Sul sistema COSINE aaa 27 PUPE AAC CU IO e E cile ZI EE Een e gezser snes ce geases race ce ceca nese nasal EE E quays urerecaeyesqce O A 28 RS Ee E e EE e TE navi 29 border 29 cda a CO DC OI RR RR EEA 30 COMIC iii 31 Appendice A SPO Ci CC nisi iininia ti ROSEN EASES EENES 32 KEE HELIOS iaia Ant 32 OLO RR REA 33 Appendice B Importanti EE 33 SO ini 33 r Ee lara 33 Desin Change eet 34 PRC POC OIC RE a I ac eclseceseosra dice ccnetingscesevdsinsciendienadoiersdanesorsideu swine veaneus one io ewsbaa stars besos et iesue ri oewiebrvbaasuinesiareetenias 34 ASSISTED ZA All UNIizzaiore arcani 34 CEI FRA OR 34 CE CSA 6 EI ENKE IT 34 LIZA GRISO snai 34 Page 6 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Sezione 1 Introduzione Tag sezione fornisce unintroduzione alla teoria ed ai metodi che permettono al sistema CR1 s Oosight di generare Immagini ad alto contrasto utili sia in Laboratori clinici che di ricerca Breve introduzione all immagine di Oosight Birifrangenza Materiali fisici o biologici sono spesso trasparenti o translucidi Essi hanno pochi o punti dettagli quando vengono retroilluminati con luce bianca Comunque qu
19. ME Page 35 sales cri inc com www cri inc com INACCURATE INPUT WORK DELAYS BUSINESS INTERRUPTION OR ANY OTHER COMMERCIAL DAMAGESORLOSSES WHETHERINANACTION IN CONTRACT TORT INCLUDING NEGLIGENCE AND STRICT LIABILITY OR OTHERWISE AND EVEN IF CRi HAS BEEN ADVISED OF THE POSSIBILITY OF SUCH DAMAGES AND REGARDLESS OF WHETHER ANY REMEDY FAILS OF ITS ESSENTIAL PURPOSE 9 U S Government End Users The Software qualifies as commercial computer software for purposes of the Federal Acquisition Regulations FAR 52 227 19 and the Department of Defense Supplement to the FAR DFARS 52 227 7013 Ifthe Software is acquired by a civilian government agency it is furnished with only the minimum Restricted Rights provided by FAR 52 227 19 If the Software is acquired by a military agency itis furnished with only the minimum Restricted Rights provided by DFARS 52 227 7013 0 1D 11 10 Miscellaneous This Agreement contains the entire agreement of the parties with respect to the subject matter hereof and supersedes any proposal or prior agreement written or oral and any other communications between the parties relating to the subject matter hereof No modification or waiver of any provision of this Agreement shall be effective unless in writing and signed by the parties No delay or failure on the part of any party in exercising any right under this Agreement shall impair any such right or any remedy of such party nor shall i
20. Oosight Imaging System Manuale d uso Versione 1 0 Position spindle Enucleate Assess egg for ICSI without using quality harmful stains or UV Per maggiori informazioni contattare Cambridge Research amp Instrumentation Inc CR1 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Phone 1 800 383 7924 Toll Free US only or 1 781 935 9099 International Fax 1 781 935 3388 Email techsupport cri inc com url www cri inc com Oosight and LC PolScope are trademarks of Cambridge Research amp Instrumentation Inc Other trademarks and trade names may be used in this document to refer to either the entities claiming the marks and names or their products Page 2 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Oosight Imaging System Page 3 rT _ _ _rr_ ___W o EW e lil iZ G amp Flil il i e ERE CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Page 4 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Sommario Ree TE E 7 Breve introduzione al sistema Oosi ghi rana 7 Ee TE i VEC E E E E A E desea vocdtenmuvebedanarelesaessoegen race A EAT 7 A
21. P IF optic onto a Leica DM IRB microscope Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Installazione della CCD Camera La CRi CCD Camera connessa alla porta C del vostro microscopio come mostrato in Figura 3 13 Inserire un adattatore passo C 1x alla camera Se non si in possesso di un passo C 1x contattare il vostro rappresentante loca le di microscopi Procedere a connettere la camera ed il passo C all uscita del microscopio Fissare la vite sulla porta del microscopio per fissare in posizione la camera Assicurarsi che 11 logo Oosight appaia sulla faccia supe riore della camera 1x C MOUNT ADAPTER Not supplied with system Set screw Figura 3 13 Camera Oosight installata sulla porta C di un microscopio L assemblaggio mostra la camera CCD l adattatore passo C 1x ed il microscopio Stringere la vite di fissaggio per assicurare la camera in posizione Settaggio delle connessioni Ci sono tre cavi parti del sistema incluso il cavo connesso al compensatore LC il cavo USB2 e quello connesso al trasformatore Cavi di connesione alla camera Connettere tutti e tre 1 cavi al retro della camera come illustrato in Figura 3 14 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 Figura 3 14 Inserire mg ilcavo CRi nel retro della camera Il cavo del compe nsatore L
22. Page 14 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com A BARRA MENU Seguire le funzioni standard di Windows per File Edit View Settings e Help File funzione standard di Windows come Open Close Save Save As e Exit Open aprira un file proprietario CRi con estensione pli Per ap rire files TIFF selezionare l opzione Import Una funzione di import permette di esportare immagini in formato TIFF Il sistema salva automaticamente le immagini in formato pli Le opzioni Save e Save As sono per salvare semplicemente immagini che erano state aperte da una direttori esterna Edit include Undo per tornare all ultima modifica o annotazione Delete per rimuovere completamente un immagine dalla galleria Copy per copiare un immagine sulla clipboard e Preferences Prefere nce permette di definire il formato immagine piena o meta risoluzione lo stato dell LC per l intensita dell immagine la frequenza live piu adatta e una selezione per caricare automaticamente l ultimo utilizzatore definito e relativa sessione View include le funzioni zoom in e out accessibili anche sulla barra ed una finestra di informazioni associate all immagine es esposizione ora della ripresa background usato etc Settings definisce l azimut dell angolo di deviazione per ogni microscopio Nikon Leica e Zeiss hanno un angolo
23. SU Al A 7 abe ld ZONA LTE 8 PPO NG ANON seca RR RR RR ecient ve ons E E TO 9 CGudaall ETA ALC amp SOLOW AEC eege 10 Cada an Ee e ite 10 Cibona 10 AMICI RO eseceeppseracarqussavaanieeachieenrdyaseqanasanesacs 10 CORONA AE AI naar 1 EER e E E E E N E E E E N NERES 11 ee Ee ee E 12 DCO ino e A A E E E 13 RIO AR A 14 Descrizione delle funzioni base del SOLAR crinali ernia aa ateigemetiee 15 Pira MONU e n 15 EV E EE 15 FORD ee EE e RA A A A 15 IST GO poi 15 DIRMI 16 RIS ve deel EE 16 i E 16 SUd i pini 16 ek 17 tette ITA 17 Kee tee PISTE eenegen 17 USE VA ee 18 DEMARIO EIA DOSI E 18 ei Ee E 18 COMPUTO ir a O EE E 18 lastallozione CIC e un E E 18 Jhstallazione del compensator E aiar 18 Nikon Diaphot 200 or 300 or TE200 or TE300 eege 19 Akon DL EE 19 Ben EN 20 e iaia ono 20 Ree RE i AO NANI AIN IRINA I 21 Page 5 EE CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Installazione del Polarizzatore circolare rei eee ieri cere iena 21 HMC Condensatore iii 22 E ARR AE 22 ll 2 Condensatori Hoffman Modulation Contrast aria 23 Nikon Diaphoto TES00 LWD e ELW ili 23 Nikon OOO LW Dor EL XD 25 Een CR er RER E 23 Lio 23 Standard Non Holinan EE EE 23 Nikon Diaphot 200 or 300 ot TE200 or TE300 eege 23 Oma TA TO e E E jssydacvsiaeon quero gid ua tadztaomncoua tae 24 ZIO nen 24
24. a dello strato interno e le possibilita di sviluppo Ora come mai in passato possibile misurare in maniera non invasiva lo spessore la densita e l orientamento della zona usando gli avanzati tools presenti nel sistema Oosight Ultra Page 9 SExy ee CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com 7 are also two status LED lights including one for Sezione 2 G U ida Hardwa re the camera power LED A and the other for the LC compensator optic LED B LED A will illuminate e Softwa re green when the camera is receiving power from the transformer and computer LED B will blink green upon startup to signify initialization and during any sequence TL sezione seguente contiene una descrizione del involving the changing of optical states It will remain componenti che costituiscono 1l sistema Oosight sia illuminated when there is positive communication to hardware che software Uno schema figurativo aiuta the LC compensator optic When either LED is red or ad identificare ogni componente Una volta ricevuto not illuminated altogether there is a problem with the l hardware Oosight spacchettare i componenti e conf connection reference the FAQ Troubleshooting section rontare il contenuto alla Packing List inclusa nei conte of this manual nitori di spedizione Specifiche della Standard CCD Guida Hardware e 1392x1040 pixels e e 6
25. biata dalla finestra Edit Preferences Per accedere alla directory user session in Windows 0 0 4 9 5 0 Explorer andare su C Oosight Data eS fl F DISPLAY INFORMAZIONI E SETTAGGI Le note sull immagine 1 settaggi e le informazioni sono estratte in formato tabella y Appunto Se il vostro campione ha un ritardo In Image Notes il nome dell immagine utilizzatore inferiore al range selezionato visualizzato sulla bar sessione numero sequenziale ora di ripresa sono ra default Snm incrementare il ritardo massimo registrate automaticamente con l immagine e qui nella finestra Edit Preferences visualizzate E possibile associare note ad una im Se Il vostro campione ha un ritardo basso scorrere magine particolare disponendo il cursore sul box di la barra verso sinistra finche viene raggiunto un P P S testo e scrivere il messaggio contrasto piu adatto Il messaggio sara salvato automaticamente quando nselezionata una nuova immagine Selezionare Display Settings per visualizzare Page 16 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com I BARRA STRUMENTI DI Selezione Freccia seleziona la normale funzione del mouse punta e clicca CI Zoom In zoom in su un immagine selezionata sia in live che su immagini acquisite Cliccare sul Immagine per ingrandirla Il fattore di zoom sara indicato
26. deo Setup e Acquisizione Avvenuta l installazione selezionare CONTROL PANEL dal menu START del tuo desktop 1 Aprire il software Oosight dall icona sul desktop Selezionare DISPLAY e poi SETTINGS Impostare la risoluzione video a 1280x1024 ed il colore a 24 o 32 bit 2 Appena avviato il sistema propone di definire un User name e la Session Per User rac comandabile di inserire il proprio nome definire il nome della Sessione come nome paziente caso o campione 3 Posizionare una capsula di controllo o il vetrino di riferimanto sul microscopio Vedere la Sezione 3 come istruzioni per il settaggio ottimale del vostro microscopio 4 Inserire le ottiche CRi nel percorso ottico e rimuo vere ogni altra ottica che interferisca 5 Settare l intensita della lampada ad un livello alto ma ancora confortevole 6 Selezionare l uscita giusta per la camera 7 Posizionare il campione in modo che non appaia Page 27 mr _r_oeo _ _ rere e5e 7 uouo _ou0U0dJ e e We Si I l ooooesaeee E W6 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com nessun oggetto nella finestra LIVE VIDEO 14 Selezionare LIVE OOSIGHT dal menu LIVE VIDEO 8 Perallargare la finestra LIVE VIDEO a piena risoluzione fare doppio click sull immagine L immagine a risoluzione
27. di deviazione di 90 gradi B LIVE VIDEO La videata live video include la finestra live e le varie opzioni a menu incluso il video standard Live Video il paragone fra due metodi ottici e Live Oo sight Selezionare il modo preferito cliccando su il crchio appropriato sulle opzioni elencate Il sistema ha due metodi per rimuovere background dall immagine live ed acquisire immagini col mag gior rapporto segnale rumore Il primo la correzi one del background identificata con Item D Background Exposure Adjust e il secondo un ricalcolo del background che esclude ancora d fondo intorno al campione L area per il calcolo del background definita con un riquadro rosso nella finestra live Questo quadro non puo essere essere spostato Posizionare quindi il campione sul tavolino del microscopio cosiche non sia all interno del riquadro Il video stream della finestra video appare a meta risoluzione es 2x2 binning Per andare a piena risoluzione cliccare due volte sull immagine live Successivamente un live stream apparira nella finestra Studio H Per vedere a piena risoluzione assicurarsi di aver selezionato la finestra 1x1 box nel pannello comandi C ACQUIRE BW Acquisisce una imma D Bee ERO A ORE UTO EXPOSE Olympus PAB gedo dirkserGieHo stato del compensa riziBro ARE ALP ASS Tarte RRA nelfita dell immagine non rimediabile attraverso un resettaggio del background Premere il tasto Background p
28. e of the microscope base Slide the CRi LC Compensator Optic module into the analyzer slot Please note that the optics should be inserted with CRI logo face up The optic will lock into position when inserted properly Figure 3 4 Installing the LC Compensator Optic onto a Zeiss Axiovert 200 microscope Red box on microscope denotes position for compensator sales cri inc com www cri inc com Leica DM IRB This section explains how to install the CRi LC Compensator and housing onto the Leica DM IRB microscope Remove the filter wheel or cover plate on the left hand side of the base of the Leica microscope as shown in Figure 3 5a Insert the CRI housing into this slot as shown in Figure 3 5b Make sure to slide the housing along the dovetail rails Insert the CRi LC optic into the open slot Figure 3 5c NOTE The CRi logo should be face up Figure 3 5 Installing the LC Compensator Optic onto a Leica DM IRB microscope Red box on microscope denotes position for compensator A Removal of filter housing from the microscope B Replaced by CRi housing and C Insert LC Compensator Optic with CRi logo face up CRi 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 Installing the CRi Circular Polarizer Interference Filter Remove the protective tape from the CRi Circular Polarizer Interference Filter CP IF optic and check for dust debris or finger
29. er acquisire una 1m thagine nuova del background Il background sara acquisito automaticamente dopo aver settato la configurazione ottica Un nuovo background va preso quando a la qualita del live o dell immagine acquisita appare rumorosa o sgranata oppure b il sistema stesso suggerisce di riacquisire il background Nel contem Help identificare la versione software utile come l ga Li po si resettera il livello di esposizione riferimento durante 1 contatti con CRI per una possibile assistenza tecnica Page 15 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com I livelli di esposizione sono settati automaticamente 1 pixels saturati 1 livelli di grigio e nella versione quando una immagine live selezionata Una nuova Ultra la rappresentazione vettoriale ed in pseudo esposizione occorre quando a si cambia obiettivo con colore la stessa modalita live o b quando la finestra live troppo scura o troppo chiara Se troopo scura accertar si di aver acceso l illuminazione e selezionato corret tamente l uscita corrispondente alla videocamera Image Info fornisce dettagli sia sui settaggi della camera che sul background associato all immagine G BARRA DEI TASK E ORGANIZZATORE DATI La barra dei task identifica lo stato di comunicazione della camera e del compensatore LC l esposizione live Oosight ha un unica
30. esti stessi campioni quando sono disposti fra due polarizzatori incrociati rendono visibili la loro struttura Tali strutture possiedono una proprieta cosidetta birifrangenza l Per illustrare la birifrangenza occorre un semplice esperimento che utilizza due fogli di materiale polariz zante ed un pezzo di comune cellophane nel mezzo La luce passa attraverso la regione coperta nastro come se ci fosse un foro ritagliato nel fondo nero dei polarizzatori incrociati Cellophane Tape Molecular Alignment bg eg Polarizer B Axis of polarization Polarizer A Axis of polarization Figure 1 1 Due pezzi di materiale polarizzante con nel mezzo un nastro di cellophane Quando gli assi di polarizzazione sono orientati a 90 viene trasmessa pochissima luce Comunque l area coperat dal cellophane lascia passare piu luce a causa della proprieta birifrangente del materiale Il cellophane modellato in fogli durante la sua realizzazione e le sue molecole vengono allineate in una direzione creando due distinti indici di rifrazione I campioni il cui indice di rifrazione non lo stesso in tutte le direzioni come il cellophane o il fuso sono detti otticamente anisotropi Quando la luce passa attraverso le aree di un campione anisotropo lo stato della luce polarizzata viene cambiato La proprieta che produce questo effetto detta birifrangenza La birifringenza pu specificatamente una proprieta intrin
31. gere e capire il presente manuale PRIMA di operare sul sistema Oosight Leggere il manuale in anticipo rende piu facile e sicuro l uso del sistema Seguendo le procedure consigliate di mantenimento si assicura una performance ottimale anche dopo anni di utilizzo Come ogni altro strumento scientifico esistono alcune Importanti considerazioni sulla sicurezza Queste sono elencate ed evidenziate nel testo sottostante Page 33 sales cri inc com www cri inc com Design Change Disclaimer Due to design changes and product improvements information in this manual including software screens is subject to change without notice Cambridge Research amp Instrumentation Inc herein after called CR reserves the right to change product design at any time without notice to any one which may subsequently affect the contents of this manual CRi will make every reasonable effort to ensure that this User s Manual is up to date and corresponds with the shipped Oosight Imaging System Reproduction Disclaimer Neither this manual nor any part of it may be reproduced photocopied or electronically transmitted unless it is for the use of the Oosight system end user without the advance written permission of CRI User Operation Assistance Should you experience any difficulty when setting up operating or maintaining your Oosight Imaging System please contact your CRI representative Feel free to visit our website at http www
32. i correttive Problema Error Message Descrizione Azione correttiva Hardware LED A sul retro della camera CCD rosso o non illuminato anche se il computer risulta acceso Hardware LED B sul retro della camera CCD rosso o non illuminato anche se il computer risulta acceso Hardware La connessione USB2 persa Software Una volta aperto il software non appare l immagine live Software Il sistema non completa il setup dello stato dell ottica Software Nella modalita Oosight Video l immagine appare bianca Software Il background dell immagine non nero Controllare le connessioni tra camera e computer ed assicurarsi che l alimentatore sia acceso ed 11 LED illuminato di verde Se non lo potrebbero esistere problemi nelle connessioni elettriche alla rete Controllare le connessioni tra compensatore LC e la camera e la connessione USB tra camera e computer Disconnettere 11 cavo USB e riconnetterlo ad una diversa porta USB Se non si risolve il problema provare a reinstallare 1 drivers USB contenuti nel CD ROM di installazione Provare a chiudere e riavviare il software Se non si risolve 11 problema ricontrollare tutti 1 cavi di connes sione alla camera e riprovare Controllare il setup del microscopio e possibili ele menti ottici d interferenza interposti come polarizza tori filtri prismi o plastica nei contenitori Assicura rsi che le ottiche CRI siano inserite nel percorso e col corretto orien
33. i topo con fuso meiotico a 90 rispet to al globulo polare Immagine fornita da D Keefe WIHRI Providence RI TRAE Ed MI Spindle re la vitalita dell embrione piu adatto per l impianto L abilita di controllare la salute di un ovocita umano con questi metodi comunque limitativa Di recente stato trovato che la presenza del fuso la sua morfolo gia disposizione e posizione durante la ICSI sono cor relate con lo sviluppo e possono essere usate nell aiuto della valutazione della qualita dell uovo Page 8 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 I metodi convenzionali ad alta risoluzione per osservare il fuso come l immunoistochimica o la microscopia elet tronica sono limitati a campioni fissati Benche essi risultino utili nella ricerca non sono applicabili alla cli nica I metodi di miglioramento del contrasto compatibili con la pratica clinica ed in uso nel settore IVF come il DIC il contrasto di fase o il contrasto Hoffman fornis cono un contrasto utile a visualizzare certe strutture del ovocita ma non forniscono ua sufficiente risoluzione dell immagine del fuso applicable Inou 1953 fu il primo ad usare la microscopia a luce polarizzata non invasiva per osservare il fuso meiotico e mitotico facendo uso delle proprieta birifrangenti dei microtubuli I microtubuli visto che sono costituiti da molecole
34. ichiedere un adeguato supporto tecnico dal service CRi Q Posso usare la camera dell Oosight con altri tipi di sistemi Domande ou frequenti FAQs A Si si puo usare questa camera col software Chronus ed il sistema laser Saturn della Research Instruments Abbiamo compilato una lista di domande e risposte che possono indirizzarvi alla soluzione di alcuni quesiti co muni che possono sorgere operando col sistema Oosight Q Posso vedere il fuso mentre effettuo la 2 ee ero micromanipolazione A Si posso vedere il fuso attraverso gli oculari del microscopio e nella finestra live Oosight Video sul monitor del PC 1 requisiti minimi richiesti Q Posso usare capsule Petri in plastica oppure col sistema laser Zilo della Hamilton Thorne A Si ma si consiglia di assicurarsi che questo rispetti A No La plastica birifrangente e quindi interfe i LA risce col sistema Q Quali benefici posso ottenere attraverso la visio ne del fuso A Ce ne sono molti I maggiori sono 1 seguenti e La presenza di un fuso intatto puo essere usata come indice di salute dell ovocita e Una migrazione significativa del fuso dal globulo polare es gt 90 indice di una compromessa condizione dell ovocita che analizzo Q Perche non posso vedere il fuso in tutti gli ovociti A La maggioranza delle volte la ragione della mancata visione nella non completa maturazione dell ovocita nella necessita di ruotare l ovoci
35. icros copia a luce polarizzata standard come mezzo pratico per visualizzare e valutare il fuso in campo clinico Il sistema Oosight supera queste limitazioni permettendo la visualizzazione e misura di strutture birifrangenti con basso ritardo in base all orientamento sales cri inc com www cri inc com Il sistema permette una chiara visualizzazione del fuso in maniera indipendente rispetto alla posizione del fuso stesso Quindi una localizzazione veloce analisi e mi sure del fuso ed altre strutture n sono ora possibili an che in un contesto clinico Visualizzazione della Zona Pellucida La zona pellucida composta di tre strati di glicoprote ine Figura 1 4 Gli strati interno ed esterno sono bi rifrangenti e quindi sono visualizzabili ed analizzabili con il sistema Oosight La costruzione di questa strut tura multilaminare gioca un ruolo vitale nella fertiliz zazione e nello sviluppo normale dell ovocita e del futuro embrione Recenti ricerche hanno suggerito che irregolarita nella misura del ritardo dell orientamento o dello spessore dei diversi strati possono predire la La LAYER 3 VA LAYER 2 y Figura 1 4 Ovocita umano con indicati i 3 distinti strati glico proteici della zona pellucida La linea verde ed il grafico mostrano la linea di ritardo delle tre zone Nota che l alto ritardo dello strato 1 indica una disposizione piu densa ed organizzata delle glicoproteine D Keefe WIHRI Providence
36. is Agreement 4 Transfer Restrictions The Software is licensed only to you The Software may not be transferred to anyone without the prior written consent of CRi The terms and conditions of this Agreement shall bind any CRi authorized transferee of the Software You may not transfer assign rent lease lend sell grant a security interest in sublicense or otherwise dispose of the Software on a temporary or permanent basis except for a CRi authorized transfer as stated above di Termination The license granted in Section 1 above is effective until terminated This Agreement is conditioned upon your continued compliance with the terms and conditions hereof and will terminate automatically without notice from CRI if you fail to comply with any term or condition of the Agreement Furthermore CRi may terminate this Agreement at any time upon thirty 30 days notice Upon termination CRi 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 of this Agreement you shall immediately destroy all copies of the Software including all accompanying documentation and any other confidential and proprietary information you have received during or in connection with this Agreement 6 Limited Warranty CRi warrants that the media on which the Software is provided will be free from defects in materials and faulty workmanship under normal use for a period of ninety 90 days from
37. izione Sezio n e 4 a O pe razio ni S U BF o posizione campo chiaro dato che il polarizzatore o CRi occupera un foro della torretta Rimuovere la S Istema Oos o ht superfice in plastica dal fondo in vetro delle capsule Petri TL seguente sezioni riassunta in uno sheet separa Ottica CRi to e fornito direttamente col sistema Oosight Questa guida all uso veloce potra essere usata come un Inserire il polarizzatore CRi ed il compensatore LC in conveniente manuale di riferimento Esso fornisce istru posizione Noterete che l inserimento delle ottiche CRi zioni concise su come acquisire ed analizzare velocemente nel percorso ottico ridurra significativamente l intensita le immagini Comunque non va inteso come sostituto luminosa allo stesso modo di quando inserito un qual di questo stesso manuale piu dettagliato e completo siasi polarizzatore nel percorso Aumentare l illumina Per il setup iniziale raccomandato caldamente di seguire zione fino ad un livello confortevole le istruzioni sottoindicate Aumentare quindi l intensita della lampada del vostro microscopio ad un livello confortevole VA Nota Ruiferirsi alla Sezione 2 Guida di Installazione del softwar igh Set Installazione del software Oosight Riferimento del software di questo manuale per Inserire il CD di installazione fornito insieme al sistema capire le caratteristiche ed 1 comandi Seguire il ciclo di installazione che apparira nelle fines tre a vi
38. mentazione power Il cavo USB ha due diversi connettori alle estremita marcati nella foto con A e B Status LEDs Page 10 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Il connettore A va sulla porta USB del computer mentre il connettore B va sul retro della camera CCD Software di Installazione CD ROM Il CD ROM di installazione contiene la versione corrente del software Oosight Caricalo inserendo il CD nel drive del CD ROM del com puter Segui le indicazioni Oosight Imaging System Version 1 0 Two reference sample slides are included with the system The samples are birefringent fibers Use these slides to setup the microscope and to practice using the system Compensatore Ottico LC Il compensatore ottico LC contenuto in una slitta di alluminio anodizzato con un cavo connesso La slitta viene normalmente inserita nella posizione dell analiz zatore del microscopio Il cavo connesso alla camera Il compensatore LC cambia lo stato della polarizzazione tramite 1 comandi software Questi cambiamenti dello stato di polarizzazione in aggiunta a particolari algoritmi brevettati sono 1 responsabili dell elevato contrasto delle immagini del sistema Oosight ZA Nota Le ottiche fornite col sistema sono specifiche per ogni microscopio Assicurarsi di quale modello stat
39. mpatibilita Accessori non forniti col sistema e Capsule con fondo in vetro Willco Wells WPI Mat tech e Tavolini o camere termostatate In vetro Tokai Hit In metallo con foro centrale Research Insruments o rivenditore locale e Raccomandate per un ottima qualita d immagine Obiettivi strain free Inclusi obiettivi DIC o Plan con alta apertura numerica NA e condensatore ad alta NA Evitare le ottiche per contrasto di fase CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 Appendice B Importanti Note Sommario istruzioni LEGGERE QUESTO MANUALE D ISTRUZIONE PRIMA DI USARE IL SISTEMA OOSIGHT e Si prega dedicare particolare attenzione ai seguenti punti non sottoporre 1 componenti a luce intensa da fonte laser lampada arco o lampada HG e Notare che alcuni cavi e adattatori forniti col sistema hanno particolari specifiche Usare cavi non dedicati per connettere 1 componenti forniti da CRi puo cau sare danni al sistema stesso Cio comporta anche la sospensione della garanzia Per assistenza sul sistema Oosight contattare il vostro distributore autorizzato riferimenti a page 31 oppure il servizio clienti CRi ai numeri Telephone US Toll Free 1 800 383 7924 Telephone Worldwide 1 781 935 9099 Facsimile Worldwide 1 781 935 3388 E mail techsupport cri inc com Sicurezza e pericoli IMPORTANTE E importante leg
40. nufacture have been misused reprocessed or reused repaired or modified without our written consent CRi assumes no liability for damages or injuries resulting from the misuse misapplication or unauthorized repair or modification of its equipment We assume no liability to users of our equipment or to any other person or persons for special or consequential damages of any kind and from any cause arising out of or in any way connected with the use of the equipment All watranty and post warranty service is nontransferable from the original shipping address to another without the prior written consent of CR1 CE and UL Testing and Certification The Oosight system has been tested by an independent CE testing facility and bears the appropriate CE mark Servicing should be performed by CRi authorized and trained personnel only CRi Software End User License Agreement The following is an agreement the Agreement between youand Cambridge Research amp Instrumentation Inc 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 CR for software known as Oosight and its accompanying documentation collectively the Software By installing and or using the Software you agree to the following terms and conditions If you do not agree to all of the terms and conditions in this Agreement you may not install or use the Software l Single Use License The Software is licensed to you and not sold Subject to the terms and conditions of
41. o ordinato e far riferimenti agli specifici componenti indicati in questa sezione Far riferimento alla sezione Setup ed Installazione di questo manuale per la descrizione di come inse rire le ottiche nel tuo microscopio CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA per completare l installazione Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 The model of LC compensator optic 1s specific to your particular microscope model as shown below Leica DM IRB Nikon Diaphot 200 o 300 o TE200 o 300 Nikon TE2000 Olympus IX Series Zeiss Axiovert 200 Page 11 sales cri inc com www cri inc com Polarizzatore circolare Filtro interferenziale Il polarizzatore circolare ed il filtro interferenziale sono contenuti in un unica slitta di alluminio anodizzato Questa inserita tra la sorgente di luce ed il portacampione Questa ottica crea una luce monocromatica polarizzata circolarmente essenziale per le corrette operazioni del sitema Oosight Come il compensatore LC il polariz zatore circolare specifico per ogni microscopio ed ogni particolare condensatore come sotto mostrato La lista suddivisa fra microscopi con HMC hoffman modulation contrast by Modulation Optics Inc hoffman modulation contrast diverso da HMC e con densatori non hoffman Far riferimento alla sezione Setup ed Installazione di questo manuale per la descrizione di come inse rire le ottiche nel
42. ordinate influenzano lo stato della luce polariz zata anisotropicamente Come descritto nella precedente sezione strutture cellulari anisotrope come la tubulina actina miosina e collagene contengono due assi ortogo nali con indice di rifrazione lungo un asse diverso dal l altro asse La misura del cambiamento di fase della luce polarizzata al passaggio attraverso 1 due assi puo essere usata per determinare la birifrangenza la quale puo essere allora relazionata alla magnitudine ritardo in nanometri ed all orientamento azimut in gradi In metafase II quindi la composizione della struttura del fuso che provato essere birifrangente puo essere cos misurata Le osservazioni del fuso usando 1 sistemi tradizionali a luce polarizzata sono ostacolate da limitazioni nella sensibilita e dall orientamento del fuso relativamente alla direzione di polarizzazione dell illuminazione Il ritardo del fuso tipicamente al di sotto del limite rilevabile dalla maggior parte dei microscopi convenzio nali a luce polarizzata Inoltre poiche 1 sistemi standard sono dipendenti dall orientamento la posizione del fuso influenzera drammaticamente il contrasto ottenuto Anche l orientamento dell asse lento influenzera la misu ra del ritardo del campione Per quantificare corretta mente il ritardo del fuso le ottiche convenzionali devono essere manualmente allineate per coincidere con l orien tamento del fuso Tali limitazioni escludono la m
43. prints For cleaning instructions reference the Tip on Page 18 Each CRi CP IF is built to fit your specific microscope condenser configuration Please proceed to the section identified by your microscope condenser model as listed below HMC Hoffman Modulation Contrast Condensers EP Series Page 22 G Series Page 22 Hoffman Modulation Contrast Condensers Nikon LWD and ELWD Page 23 Nikon TE2000 Page 23 Olympus IX 71 Relief Contrast Page 23 Leica DM IRB Page 23 Standard Non Hoffman Condensers Nikon Diaphot or TE 200 or 300 Page 23 Olympus X Series Page 24 Zeiss Axiovert 200 Page 24 Leica DM IRB Page 24 Page 21 sales cri inc com www cri inc com Condensatori HMC I condensatori Hoffman Modulation Contrast prodotti dalla Modulation Optics Inc sono specificatamente marcati con la sigla HMC Non confondere con altri contrasti di hoffman o contrasti di rilievo Esistono due distinti modelli di condensatori HMC rispettivamente la serie EP e la serie G Si prega far riferimento alle istruzioni relative al vostro modello particolare Serie HMC EP Questa sezione illustra come installare 11 polarizzatore CRI nel condensatore HMC serie EP Inserire la slitta del polarizzatore CRi sulla lente del condensatore HMC allargando l anello di fissaggio sul corpo della lente del condensatore Stringere la vite a brugola usando l apposita chiave fornita col sistema per assicurare il supporto in po sizione come mo
44. ramite barra strumenti Vedere mettere a fuoco a video nella finestra LIVE pag 17 per una descrizione piu dettagliata Per aggiungere VIDEO Assicurarsi che il campione non Sia delle note ad un immagine selezionare IMAGE NOTES posizionato nel riquadro rosso in basso a sinistra dJa menu DISPLAY INFO AND SETTINGS Le note della finestra LIVE VIDEO inserite saranno salvate automaticamente con l immagine La versione Ultra del software espande le performance del pacchetto standard includendo vari tools per analizzare e misurare distanze dati sul ritardo e l orientamento Questi dati possono essere visualizzati attraverso pseudo colori vettori aree d interesse e punti d interesse La versione Ultra include anche un opzione video time lapse per cattura di sequenze in formato digitale Per l up grade alla versione Ultra si prega contattare 11 vostro rappresentante CRI Page 28 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com DIC o campo chiaro Per analisi morfologica del fuso Secti on ch Do ma nd e amp occorrono obiettivi strain free con elevata apertura quesiti ricorrenti numerica Q Posso usare una camera diversa A No La camera totalmente integrata con l elet La sezione seguente contiene una lista delle doman tronica ed il software del sistema de piu frequentemente richieste coi relativi dettagli per r
45. seca di un campione che contiene molecole ordinate Normalmente un materiale birifrangente ha due assi ottici ortogonali gli assi lento e veloce con indice di rifrazione lungo l asse lento maggiore di quello dell asse veloce La luce polarizzata parallelamente all asse lento passa il campione a velocita piu lenta rispetto alla luce polarizzata Figure 1 2 Schema di un fuso che mostra rispettivamente la struttura degli assi lento e veloce Questa rappresentazione e solo una cruda rappresentazione delle proprieta birifrangenti del fuso Ogni fibra dei microtubuli del fuso possiede birifrangenza tale che l asse lento risulta lungo la lunghezza della fibra ed il lento lungo la larghezza parallela all asse veloce Come risultato queste due compo nenti della luce che erano in fase all ingresso del campione sono ora sfasate alla loro uscita La misura di questo cambia mento di fase in nanometri puo essere usata per determinare la birifrangenza ed a sua volta usata per analizzare la magni tudine e l orientamento delle molecole del campione La birifrangenza fornisce un opportunita unica per analizzare la struttura di un campione come il fuso senza doverlo trattare con coloranti o marcatori fluorescenti Comunque 1 metodi convenzionali per analizzare la distribuzione spaziale della birifrangenza con la luce polarizzata tradizio nale risultano complicati e laboriosi Il sistema Oosight sviluppando la tecnologia del Polscopio
46. sizione corretta del compensatore ye MII feet see Figura 3 1 Installazione del compensatore LC nel microscopio Nikon TE300 Il compensatore LC evidenziato in rosso Page 19 r _ _m__il lhsSsSsS s WNi o eeG G i l wrii 55GGG WW WF a J HW CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Olympus IX Series This section explains how to install the CRi LC Compensator on the Olympus IX microscope Unscrew and remove the plastic dust slider located in the nosepiece of the microscope Slide the CRi LC Compensator into the slot the optic will lock into position when inserted properly Tighten the holding screw to fasten it into place Figure 3 3 Please note that the optics should be inserted with the CRi logo on the top surface or face up Figure 3 3 Installing the LC Compensator Optic onto an Olympus IX microscope Red box on microscope denotes position for compensator Page 20 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 Zeiss Axiovert 200 This section explains how to install the CRi LC Compensator onto the Zeiss Axiovert 200 microscope Refer to Figure 3 4 for a visual reference Remove the plastic dust slider located below the nosepiece of the microscope along the upper sid
47. stato dal piano del globulo polare Se cio stato fatto e la qualita dell immagine appare buona allora il vostro ovocita non presenta un fuso birifrangente Altro Non possibile trovare il fuso Contatto CRi o il rappresentante locale Se non possibile risolvere un problema si prega contattare il vostro rappresentante locale CRi a queste e mail Page 31 r _ _ ewyESSFECi SJ J l I bWW Y p bpWYWWW W G I IN EIEEGilllClf file IKXI I EH H CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Appendice A Specifiche tecniche Le specifiche del sistema incluse quelle della camera quelle ottiche ed elettriche sono elencate nella lista sottostante CR ES RER E T Commac OOOO san E Verne ir e Cremo O PC compatible Penttum class CPU con a EE sin Windows XP Pro Compatibilita Microscopi Il sistema compatibile coi seguenti microscopi rovesciati dotati di uscita per videocamera Leica DM IRB e DM IRE Nikon DiaphotTM 200 300 TE 300 Nikon TE 2000 Olympus X Series Zeiss Ax1overtTM 200 Page 32 a A ES a CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Se il vostro microscopio non rientra nella lista si prega contattare CRi per la co
48. strato nel disegno sotto Figura 3 6 Posizionare l asse del polarizzatore in modo che sia rivolto verso il retro del microscopio ed il logo Oosight sia visibile sul fronte Muovere in avanti il pomellino del polarizzatore e fissarlo per bloccare l ottica in posizione Figura 3 6 Installazione del polarizzatore CRi CP IF sul condensatore HMC EP4 Il disegno mostra la posizione della brugola Usare l apposita chiave per fissare la slitta sul condensatore La foto mostra il polarizzatore CP IF assemblato sul condensatore HMC Page 22 Serie HMC G Il condensatore serie HMC G piu grande della serie EP e viene marcato con la sigla G Come per il modello EP l anello del polarizzatore viene infilato intorno al corpo della lente del condensatore serie G Figura 3 7 Inserire il polarizzatore sulla lente del condensatore HMC aprendo l anello sotto la lente e richiudendolo sulla lente stessa Assicurarsi che l ottica CRi copra interamente la base del condensatore Stringere la vite a brugola nel retro del polarizzatore per posizionarlo correttamente come mostrato in Figura 3 6 Posizionare l asse del polarizzatore in modo che sia rivolto verso il retro del microscopio ed 1l logo rivolto verso il davanti Muovere in avanti il pomellino del polarizzatore e fissarlo per bloccare l ottica in posizione Figura 3 7 Installazione del polarizzatore sul condensatore serie HMC G La figura indica il polariz
49. t be construed to be a waiver of any continuing breach or default under this Agreement In the event any provision of this Agreement is held to be unenforceable the remaining provisions of this Agreement will remain in full force and effect This Agreement shall be governed by the laws of the State of New York without regard to principles of conflicts of laws Any disputes relating hereto shall be adjudicated only in the state or federal courts in New York County New York State and you hereby consent to the exclusive jurisdiction of those courts This Agreement shall not be governed by the United Nations Convention on Contracts for the International Sale of Goods the application of which is expressly excluded You may not assign or otherwise transfer this Agreement or any of your rights or obligations therein without the prior written consent of CRi You may not use the Software Page 36 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 for any unlawful purpose nor export or re export the Software except as authorized by law ll Modules covered by LGPL license This software is distributed with Boost support DLL libraries covered by the Boost license They have not been modified by CRi and all rights are reserved by the copyright holder Also this software includes the Icon Factory dll library module which uses the Ximian icons These icons were authored by No
50. ta o nel mancato controllo del tavolino nel mantenere la temperatura ottimale I tavolino termostatati in vetro tendono a mantenere la e La morfologia del fuso stata correlata con alcu ne anomalie cromosomiche come le aneuploidie e LaICSI con il fuso disposto ad ore 6 fornisce un minor numero di embrioni fragmentati e Il fuso un buon indicatore dei fattori estrinseci ottimali come la temperatura ed il pH zazione del fuso stesso Q Posso usare il sistema Oosight su qualsiasi microscopio A Il sistema puo essere inserito su la maggior parte dedi microscopi da ricerca inclusi Nikon Diaphot 200 300 TE200 300 TE2000 Leica DMIRB Zeiss Axiovert 200 e Olympus IX serie Comunque non possibile trasferire il vostro sistema da un modello di microscopio ad uno diverso Q Occorrono obiettivi o condensatori particolari A Non per visualizzare il fuso Si puo usare sia Hoffman CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com migliore stabilita termica Un foro troppo grande nel tavolino termostatato metallico es gt 25mm puo causare un effetto di perdita termica ed indurre una depolimeriz Page 29 www cri inc com Guida alla soluzione dei problemi Questa sessione contiene una lista di problemi che identifica la maggior parte dei malfunzionamenti o messaggi d errore con le relative descrizioni e le possibili azion
51. tamento Assicurarsi che il campione non sia nel riquadro ros so in basso alla finestra live della schermata LIVE VIDEO Riacquisire l immagine del background assicurando si che non appaia il campione nella finestra LIVE Software La qualita dell immagine scarsa Riacquisire 11 background e l immagine Sofware Appare dello sporco nell immagine live che non sparisce o s1 sposta muovendo la mia capsula Software Il software bloccato e non possibile tornare ad una funzione attiva Software Il software ha rilevato un problema e si chiuso autonomamente Page 30 CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 Rimuovere la camera dall adattatore e pulire la super fice della lente del passo C Riferirsi alla nota di pag 18 del manuale per la pulizia accurata delle superfici ottiche Premere Ctrl Alt Delete sulla tastiera ed aprire Task Manager Applications poi selezionare Oosight e quindi End Task Ok Riavviare il software Se il problema persiste contattare CRI Inviare il messaggio d errore a techsupport cri inc com e trovato al momento del problema nella diretto ri C Oosight Data sales cri inc com www cri inc com Problema Error Message Descrizione Azione correttiva Assicurarsi che la temperatura del media sia 37 C e che l ovocita sia stato ruotato nella finestra LIVE in modo di assicurarsi che il fuso non sia spo
52. the date of delivery Your exclusive remedy under this Section 6 shall be at CRI s option a refund of the price paid for the Software or replacement of the media on which the Software was provided so long as that media has been returned to CRI under a CRi issued return authorization CRi shall have no responsibility to replace media damaged by accident abuse or misapplication 7 No Other Warranties EXCEPT FOR THE LIMITED WARRANTY STATED IMMEDIATELY ABOVE THE SOFTWARE IS PROVIDED AS IS WITHOUT WARRANTY OF ANY KIND AND CRi EXPRESSLY DISCLAIMS ANY AND ALL IMPLIED WARRANTIES INCLUDING WITHOUT LIMITATION ANY WARRANTY OF MERCHANTABILITY FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE OR NON INFRINGEMENT OF THIRD PARTY RIGHTS CRi DOES NOT REPRESENT OR WARRANT THAT THE RESULTS OR THE USE OF THE SOFTWARE WILL BE CORRECT ACCURATE OR RELIABLE OR THAT THE SOFTWARE WILL OPERATE UNINTERRUPTED OR ERROR FREE OR THAT DEFECTS IN THE SOFTWARE WILL BE CORRECTED YOU ASSUME ALL RISK ASSOCIATED WITH THE USE RESULTS AND PERFORMANCE OF THE SOFTWARE 8 Limitation of Liability IN NO EVENT SHALL CRI ITS AFFILIATES OR SUPPLIERS OR THEIR RESPECTIVE EMPLOYEES OFFICERS OR AGENTS BE LIABLE FOR ANY DAMAGES ARISING OUT OF THE USE OR INABILITY TO USE THE SOFTWARE INCLUDING WITHOUT LIMITATION INCIDENTAL SPECIAL CONSEQUENTIAL PUNITIVE EXEMPLARY INDIRECT OR DIRECT DAMAGES INCLUDING WITHOUT LIMITATION DAMAGES FOR LOSS OF PROFITS LOSS OF DATA RE RUN TI
53. tic Be sure to maintain the orientation of the optics such that the circular polarizer is inserted top side up as an inverted circular polarizer will prevent the system from working properly Snap the circular polarizer into the middle plastic filter holder as shown in Figure 3 11 Proceed to then snap the interference filter into the top filter holder The arrow on the filter housing should face downward in the direction of the sample stage It 1s recommended to use gloves or surround the optic with lens paper as you insert it into the filter holders to avoid getting fingerprints on the face of the optics To clean the optic reference the helpful hint on Page 18 Page 24 I bei Filter Circular Polarizer Figure 3 11 Installing the CRi CP IF optic onto a Zeiss Axiovert 200 microscope The circular polarizer should be placed into the middle filter holder and the interference filter into the top filter holder as shown Be careful to insert optics face up An inverted optic will prevent the system from working properly A Warning The CP IF for Olympus systems may look identical to that for Zeiss systems but the circular polarizer is not the same They are not interchangeable Leica DM IRB Non Hoffman Condensers Place the CRi CP IF filter ring in the microscope swing arm which is located above the turret condenser as shown in Figure 3 12 Be sure that the CRI logo is face up Figure 3 12 Installing the CRi C
54. tta usando l apposito pomello Figura 3 8 Installazione del polarizzatore CRi sul consensatore del Nikon TE2000 Il quadrato rosso evidenzia la zona di inserzione del polarizzatore CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 Olympus IX 71 Relief Contrast Condenser Olympus has released a new version of hoffman modulation contrast named Relief Contrast The CRi CP IF fits into an open 50 mm position within the condenser turret Above the condenser turret there are two fasteners holding a metal cap to the turret wheel Unscrew the two fasteners and pull off the metal cap Move the turret to an open 50 mm position and snap the CRi CP IF into place It may be necessary to recess the metal set springs in order to lock the optic into place If an open position cannot be easily reached it might be necessary to remove the entire condenser assembly from the scope Before inserting the CRi optic be certain that the CRi logo is face up Leica S40 Condenser The CRi CP IF slider assembly for the Leica S40 condenser is identical to that for the HMC G Series condensers Refer to installation instructions outlined on Page 22 under HMC G Series Condensatori Standard Non Hoffman I polarizzatori CRI sono fatti per inserirsi in tutti 1 tipi di condensatori non hoffman modulation contrast indicati sotto come condensatori Non Modulation Contrast
55. tuo microscopio HMC Condensatore EP Series G Series Hoffman Modulation Contrast Condensatore Nikon LWD e ELWD Page 12 Nikon TE2000 Olympus IX 71 Leica S 40 Standard Non Hoffman Condensatore Leica DM IRB Nikon TE300 Olympus IX Series e Zeiss Axiovert 200 EEN CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com Workstation Computer Il computer fornito con il sistema un accessorio opzionale e puo essere sia un desktop con monitor LCD sia un notebook Il modello esatto puo differire dalla foto Le specifiche minime del computer per assicurare un corretto funzionamente del sistema Oosight sono indicate nella tabella sottostante Processore Memoria Intel Pentium 4 o Pentium 4 compatibile M mobile processor for laptops 2 GHz o maggiore 1 GB Display Hard Disk 1024 x 1280 pixel resolution 24 32 bit color 80 GB raccomandata high speed per accesso veloce es 7800 rpm o similare Mouse CD DVD Mouse a due o tre tasti Read write unita CD ROM raccomandato masterizzatore DVD Sistema Operativo Richiesta interfaccia USB 2 con almeno due porte disponibili Windows XP o XP Pro Service Pack 2 o successivo English version A Attenzione Il sistema Oosight potrebbe non funzionare con processori Intel Celeron
56. udere il diaframma del condensatore sulla colonna illuminatore cosiche 1 lati del diafram ma formino un poligono regolare incluso nel vostro campo di visione Step 4 Campo di Visione Diaframma condensatore STEP 5 Aggiustare l altezza del condensatore usando la grossa manopola nera sul supporto condensatore fino a che 1 contorni del diaframma sono a fuoco Manopola di aggiustamento del conden satore sul Nikon TE300 STEP 6 Centrare il diaframma nel campo visivo usando 1 due pomelli metallici sul supporto del condensatore Step 6 Campo visivo Diaframma condensatore STEP 7 Aprire il diaframma del condensatore finche 1 contorni spariscono dal campo visivo Step 7 Campo visivo Diaframma condensatore Rimozioni di ottiche d interferenza Il sistema Oosight non lavora quando sono inseriti nel percorso ottico altri polarizzatori filtri o prismi Si prega rimuovere tutte le ottiche che possono interferire SI consiglia di controllare la colonna illuminazione il condensatore obiettivi e portafiltri prima di procedere Se si possiede un sistema ottico DIC il prisma dovrebbe trovarsi alla base dell obiettivo Rimuoverlo prima di procedere Per il setup Hoffman rimuovere il polarizzatore sales cri inc com www cri inc com posizionato fra la colonna illuminazione ed 11 conden o i n n satore Posizionare il vostro condensatore in pos
57. vell and are bound by the LGPL license Source code for this module is available upon request to CRI at the address below Should you have any question concerning this Agreement you may contact CRi by writing to CRI Inc 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 You may also call 1 800 383 7924 in the US or 1 781 935 9099 elsewhere sales cri inc com www cri inc com Page 37 EE CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com For more information contact CRi or your local authorized CRI distributor Cambridge Research amp Instrumentation Inc CRi 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 techsupport cri inc com Oosight and LC PolScope are trademarks of Cambridge Research amp Instrumentation Inc Other trademarks and trade names may be used in this document to refer to either the entities claiming the marks and names or their products __ _ _ oM Q i H 55i iiii f fif i W CGWeeWi ilSeE W lfU a CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924 P 1 781 935 9099 F 1 781 935 3388 sales cri inc com www cri inc com r _ _ ___ oiuuiiii i gt 5v 5 i i iEiffifi ee ee ee CRI 35 B Cabot Road Woburn MA 01801 USA Toll Free US 1 800 383 7924
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