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1. Rapport D pistage DRVVT Rapport Confirmation DRVVT gt 2 0 Taux lev de LA Rapport D pistage DRVVT Rapport Confirmation DRVVT 1 5 2 0 Taux mod r de LA Rapport D pistage DRVVT Rapport Confirmation DRVVT 1 2 1 5 Taux faible de LA D pistage DRVVT Confirmation DRVVT Patient pur Patient Patient pur Patient Normal Normal Normal Normal Normal Normal Normal Anormal Anormal Normal Normal Pr sence de LA Anormal Normal Anormal Normal D ficit en un facteur Anormal Anormal Anormal Normal LA D ficit fact Anormal Anormal Anormal Anormal Autre inhibiteur VALEURS DE REFERENCE Les valeurs de r f rence peuvent varier d un laboratoire l autre suivant les techniques et les syst mes utilis s C est pour cette raison qu il appartient chaque laboratoire de d terminer sa propre plage normale lage normale de r f rence moyenne 3 carts types d termin e chez Helena BioSciences avec le test de confirmation DRVVT est de 32 4 6 0 secondes soit 26 4 38 4 secondes LIMITES ll est possible que le plasma patient donne des r sultats anormaux lorsque le plasma est est pur et que le temps de coagulation ne soit pas corrig lors de l analyse du plasma m lang dans les situations suivantes h parine gt 1 U ml anticoagulants oraux Veiller ce que les plaquettes r siduelles soient enlev es du plasma par filtrage ou par cent2. Normal Normal Normal Normal Normal Normal Normal Abnormal Abnormal Normal Normal LA Present Abnormal Normal Abnormal Normal Factor Deficient Abnormal Abnormal Abnormal Normal LA Factor Def Abnormal Abnormal Abnormal Abnormal Other Inhibitor REFERENCE VALUES Reference values can vary between laboratories depending on the techniques and systems in use For this reason each laboratory should establish it s own normal range The normal reference range mean 3sd s determined at Helena BioSciences for the DRVVT Confirm test was 32 4 6 0 seconds range 26 4 38 4 seconds LIMITATIONS Plasma from patients with the following may give abnormal results when the plasma is tested neat and these samples may not correct in mixing studies heparin gt 1U ml oral anticoagulants Care must be taken to remove residual platelets from plasma by filtration or centrifugation as platelet derived phospholipid can interfere with the test QUALITY CONTROL Each laboratory should establish a quality control program Normal and abnormal control plasmas should be tested prior to each batch of patient samples to ensure satisfactory instrument and operator performance lf controls do not perform as expected patient results should be considered invalid Helena BioSciences supply the following controls available for use with this product REF 5486 DRVVT Positive Control 1 x 1ml PERFORMANCE CHARACTERISTICS The following performance characteristi
3. DRVVT Best tigungs Quotient gt 2 0 Starker LA DRVVT Screening Quotient DRVVT Best tigungs Quotient 1 5 2 0 M ig hoher LA DRVVT Screening Quotient DRVVT Best tigungs Quotient 1 2 1 5 Schwacher LA DRVVT Screening DRVVT Best tigung Patient Patient Patient Patient unverd nnt Normal unverd nnt Normal Normal Normal Normal Normal Normal Abnormal Abnormal Normal Normal LA vorhanden Abnormal Normal Abnormal Normal Faktormangel Abnormal Abnormal Abnormal Normal LA Faktormangel Abnormal Abnormal Abnormal Abnormal Anderer Hemmfaktor REFERENZWERTE Referenzwerte k nnen je nach Technik und verwendetem System von Labor zu Labor unterschiedlich sein Aus diesem Grund solte jedes Labor seinen eigenen Normalwertbereich erstellen Der normale von Helena BioSciences f r den DRVVT Best tigungstest bestimmte Referenzbereich Mittelwert 3 s lag bei 32 4 6 0 Sekunden Bereich 26 4 38 4 Sekunden EINSCHRANKUNGEN Plasma von Patienten mit dem Folgenden kann abnormale Ergebnisse hervorrufen wenn das Plasma unverd nnt verwendet wird Diese Proben k nne im Mischtest nicht korrigiert werden Heparin gt 1 U ml orale Antikoagulantien Besondere Sorgfalt ist darauf zu verwenden dass die restlichen Thrombozyten durch Filtration oder Zentrifugation entfernt werden da die in ihnen enthaltenen Phospholipide den Test beeintr chtigen k nnen QUALITATSKONTROLLE Jedes Labor m
4. Jedes Fl schchen mit 1ml destilliertem entionisiertem Wasser rekonstituieren 10 Minuten stehen lassen und vor Gebrauch gut mischen nicht sch tteln 2 Weitere Kit Komponenten Jedes Kit enth lt eine Gebrauchsanweisung FAGERUNG UND STABILIT T DRVVT Best tigungs Reagenz Unge ffnete Fl schchen sind unter den auf Verpackung oder Fl schchen angegebenen Lagerbedingungen bis zum aufgedruckten Verfallsdatum stabil Rekonstituierte Fl schchen sind bei 15 30 C 24 Stunden bei 2 6 C 5 Tage oder bei 20 C 2 Wochen stabil AC 4 Pos 38 37 C 24hrs Das Reagenz sollte in Plastikr hrchen eingefroren und vor Gebrauch bei 37 C aufgetaut werden NICHT MITGELIEFERTES ABER BENOTIGTES MATERIAL REF 5484 DRVVT Screening Kit 10 x 2ml REF 5499 Normales Plasma z B Norm Trol 1 3ml REF 5186 Normales Plasma z B Norm Trol 1 10 x 1ml PROBENENTNAHME UND VORBEREITUNG Nur Plastik oder Silikonglas verwenden Blut 9 Teile sollte in 3 2 oder 3 8 Natriumcitrat als Antikoagulanz 1 Teil entnommen werden 15 Minuten bei 2000xg 3000xg zentrifugieren und Plasma abpipettieren Restliche Thrombozyten sollten durch Filtration durch ein 0 22mm Einwegfilter oder erneutes Zentrifugieren entfernt werden Plasma bei 2 6 C lagern Plasma sollte innerhalb von 2 Stunden verarbeitet oder tief gefroren bei 20 C f r 2 Wochen oder 70 C f r einen Monat gelagert werden Vor dem Testen schnell bei 37 C auftauen Nicht l nger als 5 Minuten bei
5. STEP BY STEP PROCEDURE 1 Automated Methods AC 4 x130 samples Refer to the appropriate AC 4 Operators Manual for detailed instructions START METHOD MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma stis Coag vol 75uL DP pos 36 CP Vol 0uL INCUB MATH CLEAN 0 BUFFER BUF R1 0s lin Vol 0pL Vol 0pL RUNTIME SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2 240s 2 S CORR 0 Vol 0uL Vol 75uL Pos 38 DRVVT Confirm 2 Manual Method al Pre warm sufficient reconstituted reagent to 37 C b Pipette 0 2ml of patient or control plasma into a reaction tube Incubate at 37 C for 2 minutes Add 0 2ml of pre warmed DRVVT Confirm Reagent and start a timer Measure the clot formation time to the nearest 0 1 seconds Calculate the ratio zog Patient DRVVT Confirm Clot Time Norm Trol 1 DRVVT Confirm Clot Time 3 Automated Methods The DRVVT Confirm test may be performed on most automated instruments The instrument should be programmed to deliver equal volumes of plasma and reagent and both sample and reagent should be pre warmed to 37 C for at least 2 minutes prior to mixing Reagent tubing and reservoirs should be thoroughly rinsed and cleaned prior to performing other clotting or chromogenic tests Refer to the appropriate Operators Manual for specific detailed instructions INTERPRETATION OF RESULTS Results are best expressed as a ratio relative to the clot times obtained on Norm Trol 1 Both DRVVT Screen and DRVVT Confirm results c
6. Anomalo Anomalo Anomalo Normale LA Carente di fattori Anomalo Anomalo Anomalo Anomalo Altro inibitore VALORI DI RIFERIMENTO I valori di riferimento possono variare da un laboratorio all altro in funzione delle tecniche e dei sistemi in uso Per tale motivo ciascun laboratorio dovr elaborare un proprio range normale ll range di riferimento normale media 3 DS determinato da Helena BioSciences per il test DRVVT Confirm pari a 32 4 6 0 secondi range di 26 4 38 4 secondi LIMITAZIONI ll plasma proveniente da pazienti e contenente gli elementi indicati di seguito pu fornire risultati anomali quando viene testato non diluito e questi campioni potrebbero non correggersi negli studi di miscelazione eparina gt 1U ml anticoagulanti orali Prestare attenzione a rimuovere le piastrine residue dal plasma mediante filtrazione o centrifugazione in quanto i fosfolipidi derivanti dalle piastrine possono interferire con il test CONTROLLO QUALITA Ogni laboratorio deve definire un programma di controllo qualit plasmi di controllo normali e anomali devono essere testati prima di ogni lotto di campioni di pazienti per garantire un livello prestazionale soddisfacente sia per quanto riguarda lo strumento che per l operatore Qualora i controlli non funzionassero come previsto i risultati relativi ai pazienti dovranno essere considerati non validi Helena BioSciences mette a disposizione i segue
7. Reagente DRVVT Confirm I flaconi non aperti sono stabili fino alla data di scadenza indicata se conservati nelle condizioni riportate sul flacone o sull etichetta del kit flaconi ricostituiti sono stabili per 24 ore a 15 30 C 5 giorni a 2 6 C o 2 settimane a 20 C AC 4 Pos 38 37 C 24hrs ll reagente deve essere congelato in provette di prova in plastica e decongelato a 37 C prima dell uso MATERIALI NECESSARI MA NON IN DOTAZIONE REF 5484 Kit DRVVT Screen 10 x 2ml REF 5499 Plasma normale ad es Norm Trol 1 10 x 3ml REF 5186 Plasma normale ad es Norm Trol 1 10 x 1ml RACCOLTA E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI Nel corso dell intera procedura necessario utilizzare plastica o vetro siliconizzato II sangue 9 parti deve essere raccolto in sodio citrato al 3 2 o al 3 8 come anticoagulante 1 parte Separare il plasma in seguito a centrifugazione a 2000xg 3000xg per 15 minuti Le piastrine residue devono essere rimosse per filtrazione mediante un filtro monouso da 0 22mm oppure per ricentrifugazione ll plasma deve essere conservato a 2 6 C test devono essere completati entro 2 ore dalla raccolta dei campioni in alternativa il plasma pu essere conservato congelato a 20 C per 2 settimane o a 70 C per un mese Decongelare rapidamente a 37 C prima di eseguire i test Non conservare a 37 C per oltre 5 minuti PROCEDURA 1 Metodi automatici AC4 x130 campioni Fare riferimento al manuale utente dello AC 4 ap
8. 37 C belassen SCHRITT F R SCHRITT METHODE 1 Automatisierte Methoden AC 4 x130 Proben Siehe Bedienungsanleitung des verwendeten Ger ts f r eine genaue Anleitung START METHOD MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma 11s Coag vol 75pL DP pos 36 CP Vol 0uL INCUB MATH CLEAN 0 BUFFER BUF Hi 0s lin Vol 0uL Vol 0uL RUNTIME SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2 240s 2 S CORR 0 Vol 0uL Vol 75uL Pos 38 DRVVT Confirm Manuelle Methode Ausreichend rekonstituiertes Reagenz auf 37 C vorw rmen 0 2ml Patienten oder Kontrollplasma in ein R hrchen pipettieren Bei 37 C 2 Minuten inkubieren c 0 2ml vorgew rmtes DRVVT Best tigungs Reagenz zuf gen und Stoppuhr starten d Die Zeit bis zur Gerinnselbildung bis auf 0 1 Sekunden genau stoppen e Quotienten errechnen TAN DRVVT Best tigungs Gerinnungszeit des Patienten Norm Trol 1 DRVVT Best tigungs Gerinnungszeit 3 Automatisierte Methoden Der DRVVT Best tigungstest kann an den meisten Gerinnungsautomaten durchgef hrt werden Das Ger t sollte so programmiert werden dass es gleiche Volumina von Plasma und Reagenz abgibt Probe wie Reagenz sollte vor dem Mischen f r mindestens 2 Minuten auf 37 C vorgew rmt sein Reagenzr hrchen und Beh lter sollten gr ndlich ausgesp lt und gereinigt sein bevor andere Gerinnungs oder chromogene Tests durchgef hrt werden Siehe Bedienungsanleitung des verwendeten Ger ts f r genaue Anleitung AU
9. Good Science DRVVT Confirm Reagent Instructions for use REF 5485 10 x 1ml R actif de confirmation DRVVT Fiche technique DRVVT Best tigungs Reagenz Anleitung Reagente DRVVT Confirm Istruzioni per Puso Reactivo DRVVT Confirm Instrucciones de uso Helena Biosciences Europe Queensway South Team Valley Trading Estate Gateshead Tyne and Wear NE11 0SD Tel 44 0 191 482 8440 Fax 44 0 191 482 8442 Email infoOhelena biosciences com www helena biosciences com C HL 2 0722P 2008 06 5
10. INTENDED PURPOSE Lupus Anticoagulants LA s are antibodies of the IgG and IgM type which are directed against a variety of anionic phospholipids The presence of LA s in plasma is increasingly associated with a variety of haemostatic problems such as recurrent foetal loss thrombocytopaenia unexplained thrombosis and neurological disorders LA s prolong phospholipid dependant in vitro clotting assays such as the APTT The Helena BioSciences DRVVT Confirm kit is intended for the qualitative confirmation of Lupus Anticoagulants LA s in human plasma The reagent is designed to be used in conjunction with the DRVVT Screen test REF 5484 to discriminate between L As factor deficiencies Il V or X or other inhibitors If the clot time of the patient samples with the DRVVT Screen procedure are greater than 3 standard deviations above the mean of the normal range and are not corrected by mixing studies a lupus anticoagulant may be present Under these circumstances samples should be re tested using the DRVVT Confirm Reagent The increased concentration of phospholipid is designed to neutralise LA s WARNINGS AND PRECAUTIONS The reagents contained in this kit are for in vitro diagnostic use only DO NOT INGEST Wear gloves when handling all kit components Refer to the product safety data sheets for risk and safety phrases and disposal information COMPOSITION DRVVT Confirm Reagent 10 x 1ml Each vial contains a proprietary mixture of Russell
11. Norm Trol 1 10 x 3ml REF 5186 Plasma normal por ejemplo Norm Trol 1 10 x 1ml RECOGIDA Y PREPARACION DE MUESTRAS Debe usarse siempre pl stico o vidrio siliconizado Debe recogerse sangre 9 partes en el anticoagulante citrato s dico al 3 2 o al 3 8 1 parte Se separa el plasma despu s de la centrifugaci n a 2000xg 3000xg durante 15 minutos Deben eliminarse las plaquetas residuales ya sea filtr ndolas por un filtro desechable de 0 22mm o centrifug ndolas de nuevo El plasma debe conservase a 2 6 C Las pruebas deber an terminarse en 2 horas desde la recogida de las muestras o el plasma puede conservarse congelado a 20 C durante 2 semanas o a 70 C durante un mes Descongelar r pidamente a 37 C antes de realizar la prueba No conservar a 37 C durante m s de 5 minutos PROCEDIMIENTO PASO A PASO 1 M todos automatizados AC 4 x130 muestras Cons ltese el Manual del Operador del AC 4 adecuado para instrucciones detalladas START METHOD MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma 11s Coag vol 75uL DP pos 36 CP Vol 0uL INCUB MATH CLEAN 0 BUFFER BUF R1 0s lin Vol 0uL Vol 0uL RUNTIME SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2 240s 2 S CORR 0 Vol 0pL Vol 75uL Pos 38 DRVVT Confirm 2 M todo manual a Precalentar suficiente reactivo reconstituido a 37 C b Pipetear 0 2ml de plasma del paciente o plasma control en un tubo de reacci n Incubar a 37 C durante 2 minutos c A adir 0 2ml de rea
12. SWERTUNG DER ERGEBNISSE Ergebnisse werden am besten als Quotient zu den mit Norm Trol 1 gewonnenen Gerinnungszeiten angegeben Sowohl die Ergebnisse des DRVVT Screening als auch der DRVVT Best tigung k nnen auf diese Weise normalisiert werden und so Effekte von Ger teschwankungen und Unterschiede der Reagenzienchargen ausgleichen Ergebnisse der Mischteste k nnen genauso behandelt werden Hat die Patientenprobe mit dem Verdacht auf LA durch DRVVT Screening Test bei der DRVVT Best tigung eine Gerinnungszeit von unter 3 s unter dem Mittelwert des Normalbereichs f r dieses Kit so weist das stark auf LA hin Mischtests w rden in diesem Fall auch normale Gerinnungszeiten ergeben Proben mit einer abnormalen Gerinnungszeit im DRVVT Screening und in der DRVVT Best tigung die beide durch Mischtests normalisiert wurden haben sehr wahrscheinlich einen Faktormangel ll V oder X Proben mit abnormaler Gerinnungszeit im DRVVT Screening und in der DRVVT Best tigung wo nur die DRVVT Best tigung in Mischtests normalisiert wurde weist auf LA und einem Faktormangel hin Proben mit einer abnormalen Gerinnungszeit im DRVVT Screening und in der DRVVT Best tigung die beide nicht durch Mischtests normalisiert wurden weisen auf andere Hemmfaktoren hin Die Ergebnisse von DRVVT Screening und DRVVT Best tigungs Tests k nnen ausgedr ckt als normalisierter Quotient auch die H he der anwesenden LA anzeigen DRVVT Screening Quotient
13. VT Confirm se espressi sotto forma di rapporto normalizzato possono essere utilizzati anche per indicare il livello di LA presente Rapporto DRVVT Screen Rapporto DRVVT Confirm gt 2 0 LA forte Rapporto DRVVT Screen Rapporto DRVVT Confirm 1 5 2 0 LA modesto Rapporto DRVVT Screen Rapporto DRVVT Confirm 1 2 1 5 LA debole USO PREVISTO Los anticoagulantes l picos Anticoagulants AL son anticuerpos del tipo IgG e IgM que van dirigidos contra varios fosfol pidos ani nicos La presencia de AL en el plasma se asocia cada vez m s con diversos problemas hemost ticos como la p rdida recurrente del embarazo trombocitopenia trombosis inexplicada y des rdenes neurol gicos Los AL prolongan las valoraciones de coagulaci n in vitro dependientes de fosfol pidos como por ejemplo TTPA El kit DRVVT Confirm de Helena BioSciences tiene por objeto confirmar cualitativamente la presencia de anticoagulantes l dicos AL en el plasma humano El reactivo est concebido para utilizarse junto con el test DRVVT Screen REF 5484 para distinguir entre AL deficiencias de factores Il V o X u otros inhibidores Si el tiempo de coagulaci n de las muestras del paciente con el procedimiento DRVVT Screen supera m s de 3 desviaciones est ndar por encima del intervalo normal y no se corrige mediante estudios de mezcla es posible que exista anticoagulante l pico En estas circunstancias deben volver a realiza
14. an be normalised in this way reducing the effect of instrument variability and reagent batch differences Results of the mixing tests can be treated in the same way If patient samples with suspected LA by DRVVT screen testing have a DRVVT Confirm clot time less than 3sd s from the mean normal clot time for this kit LA is strongly indicated Mixing studies would also give normal clot times in this situation Samples with an abnormal DRVVT Screen clot time and abnormal DRVVT Confirm clot time which are both normalised by mixing studies are most likely factor deficient Il V or X Samples with abnormal DRVVT Screen clot time and abnormal DRVVT Contfirm dot time in which only the DRVVT Confirm clot time is normalised in mixing studies suggests LA plus factor deficiency Samples with abnormal DRVVT Screen clot time and abnormal DRVVT Contfirm dot time which are not corrected by mixing studies indicate other inhibitors which are not corrected by mixing studies indicate other inhibitors The results of DRVVT Screen and DRVVT Confirm testing when expressed as the normalised ratio can also be used to indicate the level of LA present DRVVT Screen Ratio DRVVT Confirm Ratio gt 2 0 Strong LA DRVVT Screen Ratio DRVVT Confirm Ratio 1 5 2 0 Moderate LA DRVVT Screen Ratio DRVVT Confirm Ratio 1 2 1 5 Weak LA DRVWVT Screen DRVVT Confirm Patient Neat Patient Patient Neat Patient
15. cs have been determined by Helena BioSciences or their representatives as a guideline Each laboratory should establish it s own performance data Within run and between run CV s are expected to be lt 5 BIBLIOGRAPHY 1 National Committee for the National Laboratory NCCLS Standards Collection transport and preparation of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Document H21 A2 vol 11 No 23 1991 UTILISATION Les anticoagulants lupiques LA sont des anticorps d isotype IgG ou IgM qui sont dirig s contre divers phospholipides anioniques La pr sence de LA dans le plasma est de plus en plus associ e divers troubles h mostatiques comme des fausses couches r p t es une hrombocytop nie une thrombose inexpliqu e et des troubles neurologiques Les LA de le temps de coagulation des tests in vitro d pendant des phospholipides comme e f Le kit de confirmation DRVVT Helena BioSciences est utilis pour la confirmation qualitative des anticoagulants lupiques LA dans le plasma humain Le r actif utilis conjointement avec le test de d pistage DRVVT REF 5484 sert faire a diff rence entre la pr sence de LA et l existence de d ficits en facteurs de coagulation Il V ou X ou d autres inhibiteurs Si le temps de coagulation de l chantillon patient d termin par le protocole D pistage DRVVT est sup rieur la moyenne de la plage normale de plus de 3 carts types et qu il n est pa
16. ctifs Il est possible de traiter les r sultats des tests de plasma m lang de la m me fa on Si un chantillon patient dont la pr sence de LA est suspect e suite au test de d pistage DRVVT donne un temps de coagulation avec le r actif de confirmation DRVVT se situant dans la plage normale temps de coagulation moyen 3 carts types la pr sence de LA est fort probable L analyse du plasma m lang doit aussi donner un temps de coagulation normal dans cette situation Les chantillons pr sentant un temps de coagulation anormal avec le r actif de d pistage DRVVT et avec celui de confirmation DRVVT et normal avec le plasma m lang ont probablement un d ficit en un facteur Il V ou X Si_un chantillon donne un temps de coagulation anormal avec le r actif de d pistage DRVVT et avec celui de confirmation DRVVT et normal avec le plasma m lang uniquement avec r actif de confirmation DRVVT cela sugg re une pr sence de LA plus un d ficit en un facteur Si un chantillon donne un temps de coagulation anormal avec le r actif de d pis age DRVVT et avec celui de confirmation DRVVT et que ce temps de coagulation n est pas corrig dans le plasma m lang cela indique la pr sence d autres inhibiteurs qui ne sont pas corrig s par le m lange Les r sultats des tests de d pistage et de confirmation DRVVT lorsqu ils sont exprim s sous la forme d un rapport normalis peuvent aussi servir indiquer le taux de LA pr sents
17. ctivo DRVVT Confirm precalentado y poner en marcha un cron metro d Medir el tiempo de formaci n del co gulo procurando afinar en la d cima de segundo m s pr xima e Calcular la relaci n Tiempo de coagulaci n de DRVVT Confirm Tiempo de coagulaci n de DRVVT Confirm de Norm Trol 1 3 M todos automatizados La prueba DRVVT Confirm puede realizarse en la mayor a de los instrumentos automatizados Debe programarse el instrumento para obtener el mismo volumen de plasma y de reactivo Debe precalentarse tanto la muestra como el reactivo a 37 C durante al menos 2 minutos antes de mezclarlos Deben enjuagarse y limpiarse bien los recipientes y tubos de reactivo antes de realizar cualquier otra prueba crom gena o de coagulaci n Consultar el Manual del Operador adecuado para obtener instrucciones detalladas INTERPRETACI N DE RESULTADOS Se expresan mejor los resultados estableciendo una relaci n con los tiempos de coagulaci n obtenidos en Norm Trol 1 Se pueden normalizar de este modo tanto los resultados DRVVT Screen y DRVVT Confirm reduciendo as el efecto de la variabilidad del instrumento y las diferencias entre lotes de reactivos Los resultados de las pruebas de mezcla se pueden tratar del mismo modo Si las muestras de paciente con sospecha de AL por pruebas de DRVVT screen tienen un tiempo de coagulaci n de DRVVT Contfirm inferior a 3 desviaciones est ndar del tiempo medio de coagulaci n normal para este kit s
18. e indica claramente la presencia de AL Estudios de mezcla tambi n proporcionar an tiempos de coagulaci n normales en esta situaci n Es muy probable que las muestras con un tiempo de coagulaci n DRVVT Screen anormal y tiempo de coagulaci n DRVVT Confirm anormal normalizados ambos mediante estudios de mezcla sean deficitarias en factores Il V o X Las muestras con tiempo de coagulaci n DRVVT Screen anormal y tiempo de coagulaci n DRVVT Confirm anormal en las que s lo se ha normalizado el tiempo de coagulaci n DRVVT Confirm mediante estudios de mezcla sugieren AL m s una deficiencia en factores Las muestras con tiempo de coagulaci n DRVVT Screen anormal y tiempo de coagulaci n DRVVT Confirm anormal que no se han normalizado mediante estudios de mezcla indican otros inhibidores Los resultados de las pruebas DRVVT Screen y DRVVT Confirm si se expresan como relaci n normalizada se pueden utilizar tambi n para indicar el nivel de AL presentes Relaci n DRVVT Screen Relaci n DRVVT Confirm gt 2 0 AL fuerte Relaci n DRVVT Screen Relaci n DRVVT Confirm 1 5 2 0 AL moderado Relaci n DRVVT Screen Relaci n DRVVT Confirm 1 2 1 5 AL d bil DRVVT Screen DRVVT Confirm Paziente Paziente Paziente Paziente Non diluito Normale Non diluito Normale Normale Normale Normale Normale Normale Anomalo Anomalo Normale Normale LA presente Anomalo Normale Anomalo Normale Carente di fattori
19. liche Thrombose und neurologische Erkrankungen in Verbindung LA verl ngert in vitro Phospholipid abh ngige Gerinnungstests wie die aPTT Das Helena BioSciences DRVVT Best tigungs Kit ist f r die qualitative Best tigung von Lupus Antikoagulantien LA im humanen Plasma bestimmt Das Reagenz ist so konzipiert dass es in Verbindung mit dem DRVVT Screening Test REF 5484 zwischen LA Faktormangel Il V oder X oder anderen Hemmfaktoren unterscheidet Ist die Gerinnungszeit von Patientenproben mit dem DRVVT Screening Test h her als 3 Standardabweichungen ber dem Mittelwert des Normalbereichs und die nicht durch verschiedene Untersuchungen zu korrigieren ist kann ein Lupus Antikoagulant anwesend sein Die Proben sollten unter diesen Umst nden mit dem DRVVT Best tigungs Reagenz noch mal getestet werden Die erh hte Konzentration von Phospholipid ist so gestaltet dass sie LA neutralisiert WARNHINWEISE UND VORSICHTSMASSNAHMEN Die Reagenzien dieses Kits sind nur zur in vitro Diagnostik bestimmt NICHT EINNEHMEN Beim Umgang mit den Kit Komponenten ist das Tragen von Handschuhen erforderlich Siehe die Sicherheitsdatenbl tter mit Gefahrenhinweisen und Sicherheitsvorschl gen sowie Informationen zur Entsorgung INHALT DRVVT Best tigungs Reagenz 10 x 1ml Jedes Fl schchen enth lt ein gesetzlich gesch tztes Gemisch von Russell s Viper Venom zusammen mit Calciumchlorid und konzentriertes Phospholipid lyophilisiert Vorbereitung
20. nti controlli utilizzabili con questo prodotto REF 5486 Controllo positivo DRVVT 1 x 1ml CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI Le caratteristiche prestazionali sotto riportate sono state determinate da Helena BioSciences o dai propri rappresentanti a titolo di linee guida Ciascun laboratorio dovr pertanto elaborare i propri dati prestazionali CV entro la serie e tra le serie si prevedono lt 5 BIBLIOGRAFIA 1 National Committee for the National Laboratory NCCLS Standards Collection transport and preparation of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Document H21 A2 vol 11 No 23 1991 DRVVT Screen DRVVT Confirm Paciente Paciente Paciente Paciente sin diluir Normal sin diluir Normal Normal Normal Normal Normal Normal Anormal Anormal Normal Normal Existe AL Anormal Normal Anormal Normal Deficitario en factores Anormal Anormal Anormal Normal AL Def en factores Anormal Anormal Anormal Anormal Otro inhibidor VALORES DE REFERENCIA Los valores de referencia pueden variar entre los laboratorios dependiendo de las t cnicas y sistemas usados Por esta raz n cada laboratorio debe establecer su propio intervalo normal El intervalo normal de referencia media 3 desviaciones est ndar establecido en Helena BioSciences para la prueba DRVVT Confirm fue 32 4 6 0 segundos intervalo 26 4 38 4 segundos LIMITACIONES El plasma de pacientes que presente lo siguiente p
21. onstitu 37 C b Pipeter 0 2ml de plasma patient ou contr le dans un tube essai Incuber 2 minutes 37 C c Ajouter 0 2ml de r actif de confirmation DRVVT pr chauff et d marrer un chronom tre d Relever le temps de formation du caillot en arrondissant au dixi me de seconde e Calculer le rapport Temps de coagulation patient avec le r actif de confirmation DRVVT Temps de coagulation du Norm Trol 1 avec le r actif de confirmation DRVVT 3 M thodes automatis es Le test de confirmation DRVVT peut tre r alis sur la plupart des instruments automatis s L instrument doit tre programm pour d livrer des volumes gaux de plasma et de r actif et il doit pr chauffer l chantillon et le r actif 37 C pendant au moins 2 minutes avant de proc der au m lange Les tuyaux et les r servoirs utilis s pour le r actif doivent tre int gralement rinc s et nettoy s avant de r aliser d autres tests chromog niques ou de coagulation Se conformer au manuel d utilisation correspondant pour avoir des instructions d taill es ce sujet INTERPRETATION DES RESULTATS Les r sultats sont exprim s en un rapport d pendant du temps de coagulation obtenu avec le plasma normal NormTrol 1 Il est ainsi possible de normaliser les r sultats obtenus avec les r actifs D pistage DRVVT et Confirmation DRVVT ce qui r duit les effets de la variabilit de l instrument et des diff rences entre les lots de r a
22. propriato per conoscere le istruzioni dettagliate START METHOD MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma 11s Coag vol 75uL DP pos 36 CP Vol 0uL INCUB MATH CLEAN 0 BUFFER BUF RT 0s lin Vol 0uL Vol 0uL RUNTIME SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2 240s 2 S CORR 0 Vol 0uL Vol 75uL Pos 38 DRVVT Confirm 2 Metodo manuale a Preriscaldare a 37 C una quantit sufficiente di reagente ricostituito b Pipettare 0 2ml di plasma del paziente o di controllo in una provetta di reazione Incubare a 37 C per 2 minuti c Aggiungere 0 2ml di reagente DRVVT Confirm preriscaldato ed azionare un timer Rilevare il tempo di formazione del coagulo con un approssimazione di 0 1 secondi Calcolare il rapporto Tempo di coagulazione DRVVT Confirm paziente Tempo di coagulazione DRVVT Confirm Norm Tro sa pr 3 Metodi automatici ll test DRVVT Confirm pu essere eseguito sulla maggior parte degli strumenti automatici Lo strumento deve essere programmato in modo tale da erogare volumi equivalenti di plasma e di reagente sia il plasma che il reagente devono essere preriscaldati a 37 C per almeno 2 minuti prima della miscelazione tubi e i reservoir utilizzati per il reagente devono essere lavati a fondo e puliti prima di eseguire altri test cromogenici o di coagulazione Fare riferimento al manuale utente dello strumento appropriato per conoscere le istruzioni dettagliate INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI risultati vengono espre
23. ritugatign tant donn que les phospholipides provenant de celles ci peuvent interf rer avec le test CONTROLE QUALITE Chaque laboratoire doit tablir un programme de contr le qualit Les plasmas de contr le normaux et anormaux doivent tre test s avant chaque lot d chantillons patients afin de s assurer que l instrument et l op rateur offrent des performances satisfaisantes Si les contr les ne donnent pas les r sultats pr vus les r sultats du patient doivent tre consid r s comme non valables Helena BioSciences distribue les contr les suivants utiliser avec ce produit REF 5486 Contr le positif DRVVT 1 x 1ml PERFORMANCES Helena BioSciences ou ses repr sentants ont d termin titre indicatif les caract ristiques de performance suivantes Chaque laboratoire doit tablir ses propres donn es de performance Les CV intra analyse et inter analyse sont pr vus lt 5 BIBLIOGRAPHIE 1 National Committee for the National Laboratory NCCLS Standards Collection transport and preparation of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Document H21 A2 vol 11 n 23 1991 ANWENDUNGSBEREICH Lupus Antikoagulantien LA sind Antik rper vom IgG und IgM Typ die sich gegen eine Anzahl von anionischen Phospholipiden richtet Die Anwesenheit von LA im Plasma steht verst rkt mit einer Reihe von h mostatischen Problemen wie rezidivierende Aborte Thrombozytopenie unerkl r
24. rse las pruebas sobre las muestras utilizando el reactivo DRVVT Confirm El objeto de una concentraci n mayor de fosfol pidos es neutralizar los AL ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Los reactivos contenidos en este kit son s lo para uso diagn stico NO SE DEBEN INGERIR Usar guantes para manejar todos los componentes del kit Consultar la hoja con los datos de seguridad del producto acerca de los riesgos de los componentes avisos de seguridad y consejos para su eliminaci n COMPOSICI N Reactivo DRVVT Confirm 10 x 1ml Cada vial contiene una mezcla patentada de veneno de v bora de Russell co liofilizado con cloruro c lcico y fosfol pidos concentrados Preparaci n Reconstituir cada vial con 1ml de agua destilada o desionizada Dejar reposar durante 10 minutos y mezclar bien antes de usar no agitar 2 Otros componentes del kit Cada kit contiene instrucciones de uso ACMACENAMIENTO Y PER ODO DE VALIDEZ Reagente DRVVT Confirm Los viales no abiertos son estables hasta la fecha de caducidad indicada cuando se conservan en las condiciones indicadas en el vial o en la etiqueta del kit Los viales reconstituidos permanecen estables 24 horas a 15 30 C 5 d as a 2 6 C 2 semanas a 20 C AC 4 Pos 38 37 C 24hrs Debe congelarse el reactivo en tubos de prueba de pl stico y descongelarse a 37 C antes de usarse ART CULOS NECESARIOS NO SUMINISTRADOS REF 5484 Kit DRVVT Screen 10 x 2ml REF 5499 Plasma normal por ejemplo
25. s Viper Venom co lyophilised with calcium chloride and concentrated phospholipid Preparation Reconstitute each vial with 1ml of distilled deionised water Allow to stand for 10 minutes and mix well before use Do not shake 2 Other kit components Each kit contains Instructions For Use FORAGE AND SHELF LIFE DRVVT Confirm Reagent Unopened vials are stable until the given expiry date when stored under conditions indicated on the vial or kit label Reconstituted vials are stable for 24 hours at 15 30 C 5 days at 2 6 C or 2 weeks at 20 C AC 4 Pos 38 37 C 24hrs The reagent should be frozen in plastic test tubes and thawed at 37 C before use ITEMS REQUIRED BUT NOT PROVIDED REF 5484 DRVVT Screen Kit 10x2ml REF 5499 Normal Plasma e g Norm Trol 1 10x3ml REF 5186 Normal Plasma e g Norm Trol 1 10x1ml SAMPLE COLLECTION AND PREPARATION Plastic or siliconised glass should be used throughout Blood 9 parts should be collected into 3 2 or 3 8 sodium citrate anticoagulant 1 part Separate plasma after cetrifugation at 2000xg 3000xg for 15 minutes Residual platelets should be removed by either filtration through a 0 22mm disposable filter or re centrifugation Plasma should be kept at 2 6 C Testing should be completed within 2 hours of sample collection or plasma can be stored frozen at 20 C for 2 weeks or 70 C for one month Thaw quickly at 37 C prior to testing Do not keep at 37 C for more than 5 minutes
26. s corrig dans le test du plasma m lang il est possible que des anticoagulants upiques soient pr sents Dans ce cas il est n cessaire de tester nouveau l chantillon aide du r actif de confirmation DRVVT La concentration lev e en phospholipides a pour objectif de neutraliser les LA PRECAUTIONS S Les r actifs du kit sont usage diagnostic in vitro uniquement NE PAS INGERER Porter des gants pour la manipulation de tous les composants Se reporter aux fiches de s curit des composants du kit pour la manipulation et l limination COMPOSITION R actif de confirmation DRVVT 10 x 1ml Chaque flacon contient un m lange exclusif de venin de vip re Russell co lyophilis avec du chlorure de calcium et des phospholipides concentr s Pr paration Reconstituer chaque flacon en ajoutant 1ml d eau distill e ou Ee Laisser reposer 10 minutes et bien m langer avant utilisation ne pas agiter 2 Autres composants du kit Chaque kit contient une fiche technique PLOCKAGE ET CONSERVATION DRVVT Confirm Reagent Les flacons non ouverts sont stables jusqu la date de p remption indiqu e s ils sont conserv s dans les conditions indiqu es sur l tiquette du kit ou du flacon Une fois reconstitu s les flacons sont stables 24 heures entre 15 30 C 5 jours entre 2 6 C ou 2 semaines 20 C AC 4 Pos 38 37 C 24hrs Le r actif doit tre congel dans des tubes essai en plastique et d congel 37 C avant u
27. ssi in modo ottimale sotto forma di rapporto relativo ai tempi di coagulazione ottenuti con Norm Trol 1 Entrambi i risultati delle procedure DRVVT Screen e DRVVT Confirm possono essere normalizzati in questo modo riducendo l effetto della variabilit dello strumento e le differenze tra lotti di reagenti risultati dei test di miscelazione possono essere trattati allo stesso modo Se i campioni dei pazienti con sospetto LA individuato mediante il test DRVVT Screen presentano un tempo di coagulazione DRVVT Confirm inferiore a 3 DS rispetto al tempo di coagulazione normale medio relativo a questo kit vi sono segni evidenti della presenza di LA In questa situazione anche gli studi di miscelazione fornirebbero tempi di coagulazione normali campioni con tempo di coagulazione DRVVT Screen anomalo e tempo di coagulazione DRVVT Confirm anomalo che vengono entrambi normalizzati da studi di miscelazione sono molto probabilmente carenti di fattori Il V o X campioni con tempo di coagulazione DRVVT Screen anomalo e tempo di coagulazione DRVVT Confirm anomalo in cui soltanto il tempo di coagulazione DRVVT Confirm viene normalizzato in studi di miscelazione suggeriscono la presenza di LA e di una carenza di fattori campioni con tempo di coagulazione DRVVT Screen anomalo e tempo di coagulazione DRVVT Confirm anomalo che non vengono corretti da studi di miscelazione indicano la presenza di altri inibitori risultati dei test DRVVT Screen e DRV
28. tativa dei lupus anticoagulanti LA nel plasma umano Il reagente stato studiato per essere utilizzato in combinazione con il test DRVVT Screen REF 5484 per discriminare tra LA carenze di fattori Il V o X o altri inibitori Se il tempo di coagulazione dei campioni dei pazienti ottenuto con la procedura DRVVT Screen superiore a 3 deviazioni standard oltre la media del range normale e non viene corretto con studi di miscelazione pu essere presente un lupus anticoagulante In tali SE i campioni devono essere testati nuovamente utilizzando il reagente DRVVT onfirm La maggiore concentrazione di fosfolipidi destinata a neutralizzare gli LA AVVERTENZE E PRECAUZIONI reagenti contenuti in questo kit sono destinati esclusivamente alla diagnostica in vitro NON INGERIRE Indossare guanti protettivi durante l uso dei componenti del kit Per le indicazioni relative ai rischi e alla sicurezza e le informazioni sullo smaltimento fare riferimento alle schede tecniche dei prodotti COMPOSIZIONE Reagente DRVVT Confirm 10 x 1ml Ogni flacone contiene una miscela esclusiva di veleno di vipera di Russell coliofilizzato con calcio cloruro e fosfolipidi concentrati Preparazione Ricostituire ogni flacone con 1ml di acqua distillata deionizzata Lasciare riposare per 10 minuti e miscelare accuratamente prima delluso non scuotere 2 Altri componenti del kit Ogni kit contiene un foglio procedurale CONSERVAZIONE E STABILIT
29. tilisation MATERIELS NECESSAIRES NON FOURNIS REF 5484 Kit de d pistage DRVVT 10 x 1ml REF 5499 Plasma normal par ex Norm Trol 1 10 x 3ml REF 5186 Plasma normal par ex Norm Trol 1 10 x 1ml PRELEVEMENTS DES ECHANTILLONS Utiliser tout au long du pr l vement du plastique ou du verre silicon M langer 9 volumes de sang et 1 volume de citrate de sodium 3 2 ou 3 8 S parer le plasma apr s centrifugation 2000xg 3000xg pendant 15 minutes Les plaquettes r siduelles doivent tre limin es soit par filtrage avec un filtre jetable de 0 22mm soit par une centrifugation suppl mentaire Conserver le plasma entre 2 6 C L analyse doit tre termin e dans les 2 heures suivant le pr l vement de l chantillon sinon il est possible de congeler le plasma 2 semaines 20 C ou un mois 70 C D congeler rapidement 37 C avant de r aliser l analyse Ne pas laisser 37 C plus de 5 minutes METHODOLOGIE 1 M thodes automatis es AC 4 x130 chantillons Se conformer au manuel d utilisation de AC 4 correspondant pour avoir des instructions d taill es START METHOD MIX 0 PATIENT Pat Def Plasma 11s Coag vol 75uL DP pos 36 CP Vol 0uL INCUB MATH CLEAN 0 BUFFER BUF R1 0s lin Vol 0uL Vol 0uL RUNTIME SENS T CORR 0 CLEAR CLR R2 2408 2 S CORR 0 Vol 0uL Vol 75uL Pos 38 DRVVT Confirm 2 M thode manuelle al Pr chauffer une quantit suffisante de r actif rec
30. uede dar resultados anormales cuando el plasma se pruebe sin diluir y estas muestras no se pueden corregir mediante estudios de mezcla heparina gt 1 U ml anticoagulantes orales Hay que tener cuidado de no eliminar plaquetas residuales del plasma al filtrar o centrifugar ya que los fosfol pidos derivados de las plaquetas pueden interferir en la prueba CONTROL DE CALIDAD Cada laboratorio debe establecer un programa de control de calidad Los plasmas de control normales y anormales deben estudiarse antes de cada lote de muestras del paciente para asegurar un funcionamiento adecuado del instrumento y el operador Si los controles no se realizan como se esperaba los resultados del paciente deben considerarse inv lidos Helena BioSciences suministra los siguientes controles disponibles para usar con este producto REF 5486 Control positivo DRVVT 1 x 1ml CARACTER STICAS FUNCIONALES Las siguientes caracter sticas de rendimiento han sido determinadas por Helena BioSciences o sus representantes como gu a Cada laboratorio debe establecer sus propios datos de rendimiento Se espera que los CV dentro de cada prueba y entre pruebas sean lt 5 BIBLIOGRAF A 1 National Committee for the National Laboratory NCCLS Standards Collection transport and preparation of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Document H21 A2 vol 11 No 23 1991 helena Biosciences Europe Partners in
31. uss f r eine eigene Qualit tskontrolle sorgen Vor jeder Testreihe mit Patientenproben m ssen normale und pathologische Kontrollplasmen getestet werden um eine zufrieden stellende Ger teleistung und Bedienung zu gew hrleisten Liegen die Kontrollen au erhalb des Normbereichs sind die Patientenergebnisse nicht zu verwenden In Verbindung mit diesem Produkt bietet Helena BioSciences folgende f r diesen Test geeignete Kontrollen an REF 5486 DRVVT Positiv Kontrolle 1 x 1ml LEISTUNGSEIGENSCHAFTEN Folgende Leistungseigenschaften sind von Helena BioSciences selbst oder in ihrem Auftrag als Richtlinie bestimmt worden Jede Labor muss seine eigenen Werte ermitteln Erwartete VKs innerhalb der Tests und zwischen den Tests sind lt 5 LITERATUR 1 National Committee for the National Laboratory NCCLS Standards Collection transport and preparation of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Document H21 A2 vol 11 No 23 1991 PRINCIPIO I lupus anticoagulanti LA sono anticorpi di tipo IgG e IgM che sono diretti contro vari fosfolipidi anionici La presenza di LA nel plasma sempre pi associata ad una vasta serie di problemi emostatici quali aborti ricorrenti trombocitopenia trombosi inspiegate e disordini neurologici Gli LA prolungano i test di coagulazione fosfolipidi dipendenti in vitro come l APTT Il kit DRVVT Confirm di Helena BioSciences stato formulato per la conferma quali
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