QUANTA Flash® ENA7 - annar diagnóstica
Contents
1. Medical Technology Promedt Consulting GmBH Altenhofstrasse 80 D 66386 St Ingbert Alemania Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621255ESP Octubre 2012 Revision 12. 50 determinaciones a Part culas paramagn ticas recubiertas de ENA7 conservadas antes del primer uso b Tamp n del ensayo de color rosa que contiene soluci n salina tamponada con Tris Tween 20 estabilizantes de prote nas y conservantes C IgG trazadora anticuerpos anti IgG humana marcados con isoluminol que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservante Tamp n de resuspensi n 2 un vial que contiene tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 El tamp n del ensayo contiene una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California Se utiliza azida s dica como conservante La azida s dica es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida s dica puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados Los derrames de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones 2 3 4 Este producto est destinado a uso diagn stico In Vitro Este ensa
3. C intervalo de confianza Precision y reproducibilidad La precisi n del ensayo QUANTA Flash ENA7 se ha evaluado analizando 8 pacientes seg n el documento EP5 A2 del CLSI la tabla siguiente resume los datos obtenidos Intraanal tico Interdiario Interanal tico Total Media CV Muestra N CU DE DE CV DE CV DE CV Pt 1 80 7 9 0 3 3 2 0 3 3 8 0 0 0 0 0 4 4 9 Pt2 80 19 1 0 4 2 2 1 2 6 3 0 5 2 6 1 4 7 1 Pt3 80 19 8 0 4 1 8 0 7 3 3 0 3 1 5 0 8 4 1 Pt4 80 30 1 1 2 4 1 1 4 4 8 0 7 2 2 2 0 6 7 Pt5 80 42 9 1 1 2 6 1 3 3 1 0 0 0 0 1 7 4 0 Pt6 80 100 1 3 2 4 3 2 9 3 7 0 0 0 0 4 3 5 7 Pt7 80 207 0 5 1 2 5 5 3 2 6 3 9 1 9 8 4 4 0 Pt8 80 386 8 11 9 3 1 10 8 2 8 7 4 1 9 17 7 4 6 L mites de detecci n e intervalo notificable El l mite inferior de detecci n de este ensayo de acuerdo con el documento EP17 A del CLSI es de 733 URL El l mite superior de detecci n aproximado es de 840 000 URL El intervalo notificable va de 3 6 CU a 429 4 CU QUANTA Flash ENA7 701256 Calibradores Para uso diagn stico In Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto Los calibradores del QUANTA Flash ENA7 est n destinados a utilizarse con el inmunoan lisis quimioluminiscente CIA QUANTA Flash ENA7 en el instrumento BIO FLASH Cada calibrador establece un punto de referencia para la curva de traba
4. Comparaci n de m todos ELISA ENA6 Porcentaje de concordancia N 921 Positivo Negativo intervalo de confianza 95 Positivo Conc pos 90 7 86 5 93 9 Negativo Conc neg 95 3 93 4 96 8 Total Conc total 94 0 92 3 95 5 10 LES 1 MAI 1 enfermedad del tejido conjuntivo no diferenciada 2 artritis reumatoide 6 cirrosis biliar primaria 1 enfermedad inflamatoria intestinal 7 personas sanas y 3 con otras enfermedades 8 LES 2 ES 1 artritis reumatoide 2 cirrosis biliar primaria 1 enfermedad inflamatoria intestinal 6 personas sanas y 4 con otras enfermedades CIA QUANTA Flash ENA7 Sensibilidad y especificidad cl nicas En el estudio de validaci n cl nica se incluyeron 132 pacientes con artritis reumatoide AR 252 con lupus eritematoso sist mico LES 50 con enfermedad inflamatoria intestinal 64 con esclerosis sist mica ES 52 con cirrosis biliar primaria y 141 con otras enfermedades Tambi n se incluyeron muestras procedentes de 196 donantes de sangre normales La sensibilidad y especificidad cl nicas para el LES y la ES se calcularon por comparaci n con los individuos sanos Los resultados de este an lisis son los siguientes Cohorte Sensibilidad IC del 95 Especificidad IC del 95 Esclerosis sist mica n 64 54 7 41 7 67 2 94 9 90 8 97 5 Lupus eritematoso sist mico n 252 62 3 56 7 67 8 94 9 90 8 97 5 I
5. Lot 3 Cada grupo de control incluye una hoja de datos espec fica del lote Introduzca la informaci n de esta hoja de datos en el software Dicha informaci n debe comprender el n mero de lote la caducidad la dosis objetivo y la DE objetivo Si es necesario haga clic en el bot n Add Assay En la ventana que se abrir debe estar marcada la casilla Show All Assays Seleccione el ensayo ENA7 de la lista y haga clic en Add Haga clic en Save Realice este proceso para ambos controles Se recomienda analizar los controles del QUANTA Flash ENA7 una vez cada d a en que se utilice el ensayo aunque los usuarios tambi n deben tener en cuenta los requisitos de la legislaci n nacional y local Cada control debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del control y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delante a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en el carrusel de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del control e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por qui
6. QUANTA Flash ENA7 701258 Reactivos Para uso diagn stico In Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto El QUANTA Flash ENA7 es un inmunoan lisis quimioluminiscente CIA para la detecci n cualitativa de autoanticuerpos contra los antigenos Sm RNP Ro60 SS A Ro52 TRIM21 SS B La Scl 70 topoisomerasa l y Jo 1 en suero humano con el instrumento BIO FLASH La presencia de dichos anticuerpos junto con datos clinicos y otras pruebas de laboratorio puede servir de ayuda en el diagn stico del lupus eritematoso sist mico LES la esclerosis sist mica ES la miositis autoinmunitaria MAI y el s ndrome de Sjogren SdS Resumen y explicaci n de la prueba Dado que los anticuerpos antinucleares ANA se encuentran en una gran variedad de enfermedades del tejido conjuntivo permiten realizar ensayos de detecci n sensibles Aunque el an lisis de ANA es una excelente prueba de detecci n del LES un resultado negativo descarta pr cticamente la existencia de LES activo no se trata en absoluto de una prueba espec fica Los anticuerpos contra el ant geno antinuclear extra ble ENA pueden aportar informaci n diagn stica y pron stica al evaluar a pacientes con posibles enfermedades del tejido conjuntivo como LES ES SdS y MAI Siete de los autoanticuerpos m s tiles y m s com nmente analizados para el ENA reaccionan con los ant genos Sm RNP Ro60 Ro52 SS B Scl 70 y Jo 1 El
7. a puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Todo el material de origen humano usado en la preparaci n de los controles para este producto se ha analizado y ha arrojado resultados negativos con respecto a la presencia de anticuerpos frente al VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los controles del QUANTA Flash ENA7 deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso 4 Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados Los derrames de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones 1 Este producto est destinado a uso diagn stico In Vitro Los controles del QUANTA Flash ENA7 deben utilizarse con el ensayo QUANTA Flash ENA7 No transfiera los reactivos de los controles a tubos secundarios El instrumento utiliza los c digos de barras de los tubos para identificar al control Cada tubo de control una vez abierto es v lido para 15 usos y puede permanecer como m ximo 10 mi
8. analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH 1 Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Para obtener m s informaci n o solucionar problemas relativos a este ensayo p ngase en contacto con el servicio t cnico de INOVA Diagnostics Inc en la direcci n o n mero de tel fono indicados al final de estas instrucciones de uso Para vaciar el recipiente de residuos s lidos abra el caj n de residuos Retire el recipiente de residuos s lidos y elimine de forma adecuada las cubetas usadas Vuelva a colocar el recipiente de residuos s lidos en su lugar cierre el caj n de residuos y haga clic en Yes en la ventana Empty Waste Drawer Para sustituir los iniciadores haga clic en el bot n Bulks Inventory F9 de la parte superior derecha a En la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Triggers situado a la izquierda Se abrir la ventana Add Triggers Remove old bottles b Abra el caj n de residuos del instrumento BIO FLASH y extr igalo Deposite todas las cubetas en el caj n de residuos secos Haga clic en Yes en la ventana Empty Waste Drawer Retire los frascos del iniciador de sus soportes y haga clic en el bot n Next Desenrosque los frascos viejos del iniciador de sus tapones y sustit yalos por nuevos iniciadores Realice la operaci n frasco a frasco y
9. dica como conservante La azida s dica es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida s dica puede reaccionar con el plomo o el cobre de las tuber as y formar azidas met licas potencialmente explosivas Si utiliza pilas de lavado para eliminar reactivos aclare con abundante cantidad de agua para evitar la formaci n de azidas met licas 3 Todo el material de origen humano usado en la preparaci n de los controles para este producto se ha analizado y ha arrojado resultados negativos con respecto a la presencia de anticuerpos frente al VIH el HBsAg y el VHC seg n m todos aprobados por la FDA Sin embargo ning n m todo de an lisis puede ofrecer plenas garant as de la ausencia del VIH el VHB el VHC u otros agentes infecciosos Por ello los calibradores del QUANTA Flash ENA7 deben manipularse como si se tratara de material potencialmente infeccioso Utilice un equipo de protecci n personal adecuado cuando trabaje con los reactivos suministrados Los derrames de reactivos deben limpiarse inmediatamente Cumpla todas las normas estatales y locales sobre protecci n del medio ambiente cuando elimine residuos Precauciones 1 Este producto est destinado a uso diagn stico In Vitro Los calibradores del QUANTA Flash ENA7 deben utilizarse con el ensayo QUANTA Flash ENA7 No transfiera los reactivos de los calibradores a tubos secundarios El instrumento ut
10. el carrusel de muestras del instrumento 4 Cuando todos los materiales necesarios est n cargados en el instrumento el icono de inicio pasara a estar disponible en color verde en la parte superior de la pantalla Pulse el Start F4 de inicio para comenzar la sesi n de an lisis Control de calidad Los controles del QUANTA Flash ENA7 vendidos por separado n mero de producto de INOVA 701257 contienen los controles positivos y negativos para ENA7 Consulte el apartado QUANTA Flash ENA7 Controles 701157 de este documento para obtener instrucciones de uso detalladas sobre c mo introducir el valor de la unidad y la desviaci n est ndar de cada control y c mo analizar los controles Se recomienda analizar los controles una vez cada d a en que se utilice el ensayo aunque los usuarios tambi n deben tener en cuenta los requisitos de la legislaci n nacional y local C lculo de los resultados Se crea una curva maestra de seis puntos en INOVA para cada nuevo lote de QUANTA Flash ENA7 Esta curva log stica de cuatro par metros se codifica mediante el c digo de barras de cada cartucho de reactivos Una vez calibrado un cartucho de reactivos se utilizar una curva de trabajo espec fica del instrumento para convertir las URL a CU La reactividad del anticuerpo frente a ENA7 puede entonces clasificarse seg n la tabla siguiente Reactividad CU Negativa lt 20 Positiva 220 La reactividad expresada en CU est directamente relacionada c
11. ibido un tratamiento por calor o que contengan part culas visibles Muestras que conten an hasta 10 mg dL de bilirrubina 200 mg dL de hemoglobina 1 000 224 mg dL de triglic ridos colesterol o 500 Ul mL de factor reumatoide IgM no presentaron interferencias con el ensayo QUANTA Flash ENA7 Tras la recogida el suero debe separarse del co gulo El documento H18 A4 del CLSI recomienda las siguientes condiciones de almacenamiento de muestras 1 No guarde las muestras a temperatura ambiente durante m s de 8 horas 2 Si el an lisis no se efect a en un plazo de 8 horas refrigere las muestras a una temperatura de 2a8C 3 Si el an lisis no va a realizarse en un plazo de 48 horas o si debe preparar las muestras para enviarlas cong lelas a una temperatura de 20 C o inferior Las muestras congeladas deben mezclarse bien despu s de descongelarse y antes del an lisis Procedimiento Materiales suministrados 1 Cartucho de reactivos QUANTA Flash ENA7 1 Tamp n de resuspensi n 2 1 Pipeta de transferencia Materiales adicionales necesarios no suministrados Instrumento BIO FLASH con ordenador para manejarlo L quido de lavado del sistema BIO FLASH n mero de componente 3000 8205 Iniciadores BIO FLASH n mero de componente 3000 8204 Cubetas BIO FLASH n mero de componente 3000 8206 Calibradores del QUANTA Flash ENA7 n mero de componente 701256 Controles del QUANTA Flash ENA7 n mero de componente 701257 Uso del
12. iliza los c digos de barras de los tubos para ajustar los calibradores al tipo de an lisis adecuado Una vez abiertos los tubos los calibradores pueden utilizarse durante un m ximo de 8 horas o 4 calibraciones transcurrido este tiempo los reactivos deben desecharse Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los restos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Limpie siempre el instrumento siguiendo las recomendaciones indicadas en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 2 Guarde los calibradores no abiertos entre 2 y 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los calibradores abiertos deben desecharse al cabo de 8 horas Procedimiento 1 Cada nuevo lote de cartuchos de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre Cada calibrador debe mezclarse suavemente antes de utilizarlo para garantizar su homogeneidad Evite la formaci n de espuma ya que las burbujas pueden interferir en la detecci n del nivel de l quido de los instrumentos Destape los dos tubos del calibrador y col quelos en una gradilla de muestras con los c digos de barras orientados hacia delan
13. irar la pipeta del tubo y desecharla 4 Retire el adhesivo de la parte superior del cartucho de reactivos para descubrir los otros tres orificios 5 Coloque el cartucho de reactivos en cualquier ranura abierta del carrusel de reactivos del instrumento BIO FLASH Una vez colocado el cartucho en del carrusel de reactivos el instrumento realiza mezclas peri dicas adicionales de las part culas Calibraci n del ensayo 1 Cada nuevo lote de cartuchos de reactivos debe calibrarse antes del primer uso El software no permitir usar un lote nuevo hasta que se calibre 2 Consulte el apartado QUANTA Flash ENA7 Calibradores 701256 de este documento para obtener instrucciones de uso detalladas sobre c mo calibrar el cartucho de reactivos 3 Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos calibrado estar listo para usar Programaci n y an lisis de las muestras 1 Pulse el bot n Worklist de la parte superior de la pantalla y seleccione la pesta a Racks de la parte inferior 2 Seleccione la gradilla de muestras que se utilizar marc ndola en la pantalla o escaneando su c digo de barras con el lector manual Escanee o escriba el nombre de la muestra seleccione el tipo de muestra y el tipo de recipiente tubo copa y a continuaci n seleccione ENA7 en el panel del ensayo Repita estos pasos para todas las muestras 3 Cargue las muestras en las posiciones seleccionadas de la gradilla de muestras y coloque esta en
14. jo utilizada en la determinaci n de los valores en unidades de quimioluminiscencia CU para la medici n de ENA7 en suero Resumen y principios del procedimiento El CIA QUANTA Flash ENA7 utiliza una curva maestra predefinida espec fica de cada lote que se guarda en el c digo de barras del cartucho de reactivos Los calibradores del QUANTA Flash ENA7 est n dise ados para generar una curva de trabajo espec fica para el instrumento a partir de los par metros de la curva maestra con un punto de decisi n basado en las caracter sticas de rendimiento y en la evaluaci n cl nica del CIA QUANTA Flash ENA7 Los calibradores se analizan en varios instrumentos con diversos lotes de reactivos antes de efectuar la asignaci n de valores Reactivos 1 Calibrador 1 del QUANTA Flash ENA7 Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 7 mL de reactivo prediluido listo para usar Los calibradores contienen anticuerpos humanos contra ENA7 en tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes 2 Calibrador 2 del QUANTA Flash ENA7 Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 7 mL de reactivo prediluido listo para usar Los calibradores contienen anticuerpos humanos contra ENA7 en tamp n estabilizantes de prote nas y conservantes Advertencias 1 Los calibradores contienen una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 Se utiliza azida s
15. kit del CIA QUANTA Flash ENA7 permite detectar selectiva y simult neamente en las muestras de pacientes en un solo pocillo autoanticuerpos para Sm RNP Ro60 Ro52 SS B Scl 70 y Jo 1 Las muestras negativas para esta sensible prueba de cribaje pueden considerarse negativas para Sm RNP Ro60 Ro52 SS B Scl 70 y Jo 1 Las muestras positivas deber n volver a analizarse mediante otros ensayos espec ficos para ENA como el CIA o el ELISA a fin de confirmar la positividad establecer la especificidad para los anticuerpos y si se desea cuantificar los niveles del anticuerpo espec fico Se han utilizado varios m todos incluidas la doble difusi n de Ouchterlony y la aglutinaci n pasiva para detectar anticuerpos contra Sm RNP SS A SS B Scl 70 y Jo 1 Tambi n se han desarrollado ensayos ELISA con utilidad cl nica para detectar dichos anticuerpos Principios del procedimiento Se recubren part culas paramagn ticas con Ro60 Scl 70 Jo 1 Ro52 y SS B La recombinantes y Sm y RNP nativos y se guardan en el cartucho de reactivos en unas condiciones que mantienen el ant geno en su estado reactivo Cuando el cartucho del ensayo est preparado para el primer uso se a ade una soluci n tamp n al tubo que contiene las part culas y estas se mezclan con el tamp n A continuaci n se coloca el cartucho de reactivos en el instrumento BlO FLASH Mediante el instrumento se prediluye una muestra de suero del paciente con l quido de lavado de
16. l sistema a adido a una cubeta desechable de pl stico Se combinan y se mezclan en una segunda cubeta peque as cantidades de suero diluido del paciente las part culas de ENA7 y el tamp n del ensayo Esta cubeta se incuba a 37 C y despu s se magnetizan las part culas y se lavan varias veces A continuaci n se a aden anticuerpos conjugados con isoluminol a la cubeta y se incuba a 37 C De nuevo las part culas se magnetizan y se lavan repetidamente El conjugado de isoluminol produce una reacci n luminiscente cuando se a aden a la cubeta los reactivos iniciadores La luz generada por la reacci n se mide como unidades relativas de luz URL mediante el sistema ptico del BIO FLASH El n mero de URL es proporcional a la cantidad de conjugado de isoluminol ligado que a su vez es proporcional a la cantidad de anticuerpos anti ENA unidos al ENA7 de las part culas El ensayo QUANTA Flash ENA7 utiliza una curva maestra predefinida espec fica para cada lote que se carga en el instrumento mediante el c digo de barras del cartucho de reactivos A partir de los resultados obtenidos mediante el an lisis de dos calibradores se genera una curva de trabajo espec fica para el instrumento que el software utiliza para calcular las unidades de quimioluminiscencia CU bas ndose en el valor en URL obtenido para cada paciente Reactivos 1 2 El cartucho de reactivos del QUANTA Flash ENA7 contiene los siguientes reactivos para
17. l QUANTA Flash ENA7 est n destinados a utilizarse con el inmunoan lisis quimioluminiscente CIA QUANTA Flash ENA7 en el instrumento BIO FLASH Resumen y principios del procedimiento Los controles del QUANTA Flash ENA7 est n constituidos por un control negativo y un control positivo Cada uno de ellos contiene una cantidad diferente de anticuerpos contra ENA7 El control negativo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles muy bajos de anticuerpos El control positivo est dise ado para evaluar la precisi n y la exactitud del ensayo a niveles de anticuerpos de moderados a altos Reactivos 1 Control negativo del QUANTA Flash ENA7 Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 5 mL de reactivo listo para usar Los calibradores contienen anticuerpos humanos contra ENA7 en tamp n estabilizantes y conservantes 2 Control positivo del QUANTA Flash ENA7 Dos tubos con etiqueta de c digo de barras que contienen 0 5 mL de reactivo listo para usar Los calibradores contienen anticuerpos humanos contra ENA7 en tamp n estabilizantes y conservantes Advertencias 1 Los controles contienen una sustancia qu mica cloranfenicol al 0 02 que est clasificada como cancer gena por el Estado de California 2 Se utiliza azida s dica como conservante La azida s dica es una sustancia venenosa y puede resultar t xica si se ingiere o si se absorbe a trav s de la piel o los ojos La azida s dic
18. mioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH Trazabilidad No est disponible ning n suero de referencia internacional para los anticuerpos anti ENA7 que permita estandarizar los ensayos con estos anticuerpos En su lugar se ha analizado el suero de referencia de los Centers for Disease Control and Prevention para anticuerpos anti ENA y las concentraciones determinadas se describen a continuaci n N m IS Valor en CU Descripci n 152073 gt 429 4 ANA por fluorescencia patr n moteado anti SS B La 152074 gt 429 4 ANA por fluorescencia patr n moteado 152075 gt 429 4 Anti U1 RNP RNP nuclear 152076 gt 429 4 Anti Sm 152105 412 Anti SS A Ro 152135 366 5 Anti Scl 70 ADN topoisomerasa l 152187 349 3 Anti Jo1 histidil ARTt sintetasa Limitaciones Estos controles est n dise ados para 15 usos La etiqueta de cada tubo de control posee una fila de 15 casillas que pueden marcarse para controlar el n mero de usos El tiempo m ximo durante el cual los tubos de control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles destapados que permanezcan en el instrumento durante m s tiempo deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de control para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos Bibliograf a 1 Mahler M Fritzler MJ Epitope specificity and significance in sy
19. ncluyan la informaci n siguiente Los siguientes resultados se han obtenido mediante el inmunoensayo por quimioluminiscencia QUANTA Flash ENA7 de INOVA Es posible que los valores obtenidos con m todos de ensayo de otros fabricantes no sean intercambiables con dichos resultados La magnitud de los niveles de anticuerpos obtenidos no siempre puede correlacionarse con una valoraci n umbral Limitaciones del procedimiento 1 No todos los pacientes con LES ES o MAI son positivos para anticuerpos anti ENA7 Los resultados de este an lisis deben utilizarse junto con datos cl nicos y otras pruebas serol gicas Si la resuspensi n de las part culas recubiertas de ENA7 no se efect a de un modo adecuado pueden obtenerse resultados inferiores en comparaci n con los an lisis con una resuspensi n adecuada 4 Las caracter sticas de funcionamiento de este ensayo no se han establecido para matrices de muestras distintas del suero Valores esperados Para establecer los valores esperados se han analizado sueros de 196 donantes de sangre aparentemente sanos La media fue 9 1 CU y el intervalo de confianza del 95 se calcul como 5 7 12 5 CU Comparaci n de m todos con un instrumento destinado al mismo fin Las muestras usadas en la comparaci n de m todos incluyeron 921 muestras procedentes de los estudios de validaci n cl nica Dichas muestras se analizaron mediante el QUANTA Flash ENA 7 y un ELISA destinado al mismo fin
20. nutos en el instrumento en cada uso Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los restos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Limpie siempre el instrumento siguiendo las recomendaciones indicadas en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los controles no abiertos entre 2 y 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los controles abiertos son v lidos para 15 usos y pueden permanecer como m ximo 10 minutos en el instrumento en cada uso El tiempo m ximo durante el cual los tubos de control pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 2 5 horas o 10 minutos por uso Los controles que permanezcan destapados en el instrumento durante m s de 2 5 horas en total deben desecharse Si se utiliza el mismo tubo de control para m s de 15 usos y o durante m s de 2 5 horas en total pueden producirse resultados err neos Para conseguir una estabilidad ptima retire los controles del sistema inmediatamente despu s de tomar las muestras y almac nelos tapados a una temperatura de 2 a 8 C en el vial original Procedimiento Para crear nuevos materiales de control de calidad para el ensayo ENA7 1 Antes de u
21. on la valoraci n de autoanticuerpos en la muestra del paciente Los aumentos y disminuciones de las concentraciones de anticuerpos en los pacientes se reflejar n en un correspondiente aumento o disminuci n de la CU que es proporcional a la cantidad de anticuerpo El intervalo de medici n anal tica IMA del ensayo va de 3 6 CU a 429 4 CU Si el resultado de un paciente es inferior a 3 6 CU el sistema BIO FLASH indicar lt 3 6 CU Dado que es un valor inferior a 20 CU se considera un resultado negativo Si el resultado de un paciente es superior a 429 4 CU el sistema BIO FLASH indicar gt 429 4 CU Este valor se considera un resultado positivo El software BIO FLASH dispone de una opci n denominada Auto Rerun Si esta opci n est seleccionada el instrumento volver a analizar autom ticamente cualquier muestra que presente un resultado superior a 429 4 CU diluy ndola otra vez seg n un factor de 20 y calcular la CU real a partir de este factor de diluci n adicional Interpretaci n de los resultados El ensayo QUANTA Flash permite detectar peque as diferencias en las poblaciones de pacientes Se aconseja que cada laboratorio verifique el intervalo de referencia indicado por el fabricante y si lo desea establezca su propio intervalo normal a partir de sus propios controles y su poblaci n de pacientes de acuerdo con sus procedimientos particulares Es recomendable que los resultados comunicados por el laboratorio i
22. ote de cartuchos de reactivos Trazabilidad No est disponible ning n suero de referencia internacional para los anticuerpos anti ENA7 que permita estandarizar los ensayos con estos anticuerpos En su lugar se ha analizado el suero de referencia de los Centers for Disease Control and Prevention para anticuerpos anti ENA y las concentraciones determinadas se describen a continuaci n N m IS Valor en CU Descripci n 152073 gt 429 4 ANA por fluorescencia patr n moteado anti SS B La 152074 gt 429 4 ANA por fluorescencia patr n moteado 152075 gt 429 4 Anti U1 RNP RNP nuclear 152076 gt 429 4 Anti Sm 152105 412 Anti SS A Ro 152135 366 5 Anti Scl 70 ADN topoisomerasa l 152187 349 3 Anti Jo1 histidil ARTt sintetasa Limitaciones Estos calibradores est n dise ados para realizar 4 calibraciones El tiempo m ximo durante el cual los tubos del calibrador pueden permanecer destapados una vez cargados en el instrumento es de 8 horas Si los calibradores permanecen destapados en el instrumento durante m s de 8 horas deben desecharse Si se utilizan los mismos tubos de calibrador para m s de 4 calibraciones y o durante m s de 8 horas es posible que la calibraci n del ensayo sea incorrecta lo que producir resultados err neos QUANTA Flash ENA7 701257 Controles Para uso diagn stico In Vitro SOLO PARA EXPORTACION NO COMERCIALIZABLE EN ESTADOS UNIDOS Uso previsto Los controles de
23. respete el c digo de color de los tapones blanco blanco rojo rojo c Siga las instrucciones de la ventana que se abrir Add Triggers Add Trigger 2 bottle Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 2 en el soporte de color blanco Haga clic en Next d Siga las instrucciones de la ventana Add Triggers Add Trigger 1 bottle Una vez aceptado el c digo de barras coloque el iniciador 1 en el soporte de color rojo Haga clic en Finish Vuelva a colocar el caj n de residuos en su lugar y ci rrelo Para sustituir el recipiente de l quido de lavado del sistema haga clic en el bot n Bulks Inventory F9 en la esquina superior derecha En la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Sys Rinse En la ventana que se abrir Add System Rinse Remove bottles haga clic en Next Siga las instrucciones de la ventana que aparecer Add System Rinse Add bottle Una vez aceptado el c digo de barras haga clic en Finish si es necesario Para vaciar el recipiente de residuos l quidos en la pantalla Inventory Bulks haga clic en el bot n Fluid Waste Extraiga el residuo l quido y elim nelo Haga clic en Next Una vez sustituido el frasco vac o haga clic en Finish M todo Preparaci n del cartucho de reactivos La primera vez que se utilice el cartucho de reactivos deben perforarse los sellos de almacenamiento de los tubos de reactivos y las part culas recubiertas de ENA7 deben mezclarse con el
24. stemic autoimmune diseases Ann N Y Acad Sci 2010 1183 267 287 Copple SS Sawitzke AD Wilson AM Tebo AE Hill HR et al Enzyme linked immunosorbent assay screening then indirect immunofluorescence confirmation of antinuclear antibodies a statistical analysis Am J Clin Pathol 2011 135 678 684 Fritzler MJ The antinuclear antibody test last or lasting gasp Arthritis Rheum 2011 63 19 22 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories Centers for Disease Control National Institute of Health 2009 Fifth Edition S mbolos utilizados rm E gt a EIE ty O ONTROL ONTR Dispositivo m dico para diagn stico In Vitro Consulte las instrucciones de uso L mites de temperatura No reutilizar Riesgos biol gicos C digo del lote N mero de cat logo Fecha de caducidad Fabricante Representante autorizado Contenido suficiente para lt n gt an lisis Control positivo Control negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Caja de cart n reciclable Mantener en esta posici n QUANTA Flash es una marca comercial registrada de INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH es una marca comercial registrada de Biokit SA O 2012 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos de Am rica Servicio t cnico solo para EEUU y Canad 877 829 4745 Servicio t cnico fuera de EEUU 1 858 805 7950 support inovadx com Representante autorizado en la UE
25. tamp n de resuspensi n Nota No utilice el cartucho de reactivos si observa signos de que est da ado 1 Coloque el cartucho de reactivos sobre una superficie s lida Con una mano sostenga el cartucho de reactivos en su lugar Con la otra mano agarre con fuerza la pesta a roja de la parte posterior del cartucho de reactivos y tire de ella completamente 2 Pulse las dos pesta as laterales del tap n de perforaci n parte gris y aplique presi n a la parte superior del cartucho de reactivos hasta que descienda y alcance un tope Las pesta as deber an quedar ocultas 3 Vuelva a suspender los reactivos del kit a Destape el vial del tamp n de resuspensi n y recoja l quido con la pipeta de transferencia suministrada Se utilizar todo el contenido del vial b Presione suavemente el lateral estrecho del cartucho de reactivos para deslizar la tapa del cartucho a la posici n abierta y mant ngala as Transfiera analiticamente todo el contenido del vial al tubo de reactivo de part culas a trav s del orificio nico de la parte superior del cartucho de reactivos C Mezcle el contenido del tubo de reactivo de part culas aspirando y dispensando el l quido al menos 30 veces Si se observan masas visibles de part culas contin e mezclando la soluci n 30 veces m s Si las micropart culas no se resuspenden NO UTILICE EL CARTUCHO d Aseg rese de dispensar todo el l quido antes de ret
26. te a trav s de las aberturas de la gradilla Coloque la gradilla de muestras en el carrusel de muestras del instrumento BIO FLASH y cierre la puerta El instrumento leer los c digos de barras de los tubos del calibrador e identificar el cartucho de reactivos adecuado Consulte el manual del operador suministrado con el sistema BIO FLASH para obtener instrucciones de funcionamiento detalladas sobre el analizador por quimioluminiscencia BIO FLASH y el software BIO FLASH El instrumento analizar cada calibrador por triplicado Una vez analizados los calibradores el software solicitar la validaci n de la calibraci n En la pantalla Instrument Summary haga clic en el bot n de flecha Choose more options Ctrl M W Seleccione Calibration Ctrl F3 En la ventana de calibraci n marque el ensayo deseado y haga clic en Details En la ventana Calibration Details que se abrir seleccione la calibraci n que acaba de efectuar La curva maestra se visualizar como una l nea discontinua y la nueva curva de trabajo como una l nea continua Si los resultados de la calibraci n son v lidos en la parte inferior izquierda de la pantalla aparecer un bot n de validaci n Haga clic en el bot n Validate Calibration Una vez validada la calibraci n el lote de cartuchos de reactivos calibrado estar listo para usar Se recomienda analizar los controles del QUANTA Flash ENA7 vendidos por separado n mero de producto 701257 tras calibrar un l
27. tilizar los controles QUANTA Flash ENA7 por primera vez en el instrumento introduzca en el software el nombre el lote la caducidad el valor o dosis y la DE objetivo 2 En la pantalla Instrument Summary haga clic en el bot n de flecha Choose more options Ctrl M vw Seleccione QC Ctrl F2 Haga clic en el bot n New QC Material 3 Cada grupo de control incluye una hoja de datos espec fica del lote En primer lugar introduzca en el software el nombre el n mero de lote y la caducidad que figuran en esta hoja de datos A continuaci n haga clic en el bot n Add Assay En la ventana que se abrir debe estar marcada la casilla Show All Assays Seleccione el ensayo ENA7 de la lista y haga clic en A adir Por ltimo introduzca la dosis objetivo y la DE objetivo Haga clic en Save Realice este proceso para ambos controles Para crear un nuevo lote para los materiales de control de calidad existentes 1 Antes de utilizar un nuevo lote de controles del QUANTA Flash ENA7 por primera vez introduzca en el software el lote la caducidad el valor o dosis y la DE objetivo 2 En la pantalla Instrument Summary haga clic en el bot n de flecha Choose more options Ctrl M w Seleccione QC Ctrl F2 Marque el ensayo ENA7 en la columna de la izquierda A continuaci n seleccione el material de control apropiado a la derecha ENA7N para el control negativo o bien ENA7P para el control positivo Haga clic en el bot n New QC
28. yo solo debe utilizarse con el instrumento BIO FLASH Se recomienda seguir estrictamente el protocolo de resuspensi n indicado Una vez abierto el cartucho de reactivos debe almacenarse en el carrusel de reactivos del instrumento La colocaci n del cartucho de reactivos en el instrumento por primera vez debe realizarse con todo cuidado para no derramar los reactivos Puede producirse contaminaci n qu mica de los reactivos como consecuencia de un lavado o aclarado inadecuados del instrumento Los restos de sustancias qu micas habituales en los laboratorios como formol lej a etanol o detergente pueden interferir en el an lisis Limpie siempre el instrumento siguiendo las recomendaciones indicadas en el manual del operador del BIO FLASH Condiciones de almacenamiento 1 Guarde los cartuchos de reactivos no abiertos y el tamp n de resuspension entre 2 y 8 C No los congele Los reactivos permanecen estables hasta la fecha de caducidad si se almacenan y manipulan como est indicado Los cartuchos de reactivos abiertos deben guardarse cargados en el instrumento y permanecen estables durante 36 d as tras lo cual deben desecharse El software BIO FLASH supervisa las fechas de caducidad de los cartuchos cargados as como las de los lotes de cartuchos de reactivos Recogida de muestras Este procedimiento debe realizarse con una muestra de suero No deben utilizarse muestras que est n contaminadas con microorganismos que hayan rec
Download Pdf Manuals
Related Search