PRUEBA DE COOMBS Autores Dr. Adalberto Ballester Santovenia
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1. dicas Hospital Hermanos Ameijeiras e Es responsabilidad de aseguramiento de la calidad velar por el cumplimiento de lo establecido en este documento mediante inspecciones y auditorias Condiciones de seguridad e Use bata sanitaria y guantes de cirujano Equipamiento locales materiales y reactivos Centr fuga para tubos de mesa Neveras de conservaci n de sangre 4 62C Aglutinoscopio Tubos de ensayo de13x100 Gradillas para tubos de ensayo Jeringuillas de 10 o 20 mL Agujas 20 o 21 Torundas Ligaduras Aplicadores de madera Anticoagulante EDTA o heparina Alcohol al 70 o hibitane alcoh lico Suero de Coombs poliespec fico Suero de Coombs monoespec fico anti IgG y anti C3d Soluci n salina Operaciones preliminares e Prepare el rea de trabajo con el material y reactivos que van a ser utilizados e Tome muestra de sangre del paciente compuesta de un tubo anticoagulado con EDTA o heparina y un tubo seco debidamente identificado y que no exceda las 72 horas de extra da Procedimiento e Coombs directo gt Lave tres veces los hemat es del paciente con soluci n salina fisiol gica gt Haga una suspensi n de hemat es lavados al 2 5 V v VvV A ada en un tubo debidamente rotulado dos gotas de la suspensi n A ada dos gotas de Suero de Coombs poliespec fico Centrifugue un minuto a 1000 rpm Manual de Pr cticas M dicas Hospital Hermanos Ameijeiras 3 gt Lea desprendiendo suavem2. Manual de Pr cticas M dicas Hospital Hermanos Ameijeiras PRUEBA DE COOMBS Autores Dr Adalberto Ballester Santovenia Dr Jes s Diego de la Campa Lic Mayra P rez P rez Servicio Banco de Sangre OBJETIVOS Determinar la existencia de gl bulos rojos recubiertos con inmunoglobulinas y o complemento n vivo en particular IgG y C3d Coombs directo Determinar la presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor Coombs indirecto Determinar la compatibilidad entre la sangre del donante y el receptor a transfundir Coombs cruzado DESARROLLO Alcance El Coombs directo se realiza a pacientes en los primeros momentos de una reacci n hemol tica y en el diagn stico de anemias hemol ticas auto inmunes hem lisis inducidas por drogas y enfermedad hemol tica del reci n nacido EI Coombs indirecto se realiza a pacientes politransftundidos embarazadas mult paras El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes politransfundidos pacientes con antecedentes de reacci n post transfusional hemol tica y a mult paras para escoger sangre compatible Responsabilidades Es responsabilidad de la Direcci n del Banco garantizar los recursos indispensables para la realizaci n de ste procedimiento Es responsabilidad del Jefe de Departamento implantar esta GP Es responsabilidad del t cnico el cumplimiento de lo establecido en el presente documento Manual de Pr cticas M
3. ente el bot n sobre la l mpara aglutinoscopio e Coombs indirecto y cruzado gt gt gt Centrifugue la muestra de sangre 10 min a 3 000 rpm para obtener el suero y dec ntelo en un tubo debidamente identificado Prepare una suspensi n al 2 5 con la mezcla de hemat es O y en el caso del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre a transfundir para preparar la suspensi n En un tubo debidamente rotulado a ada dos gotas del suero y dos gotas de la suspensi n y mezcle bien Prepare un tubo control rotulado C control positivo y a ada en l dos gotas de la suspensi n de hemat es O y dos de suero hemoclasificador anti D y mezcle bien Incube ambos tubos en un Ba o de Mar a a 372C por 30 minutos Lave tres veces con soluci n salina escurriendo totalmente el sobrenadante del ltimo lavado A ada dos gotas de suero de Coombs poliespec fico a cada tubo Centrifugue 1minuto a 1000 rpm Lea desprendiendo suavemente el bot n en la l mpara aglutinoscopio Interpretaci n de los resultados e Si en la prueba de Coombs directo observa aglutinaci n esto indica presencia de anticuerpos y o complemento unidos a los hemat es n vivo repita nuevamente el procedimiento pero utilizando los reactivos monoespec ficos anti IgG y anti C3d Patrones de reacci n Reactivos monoespec ficos 1 2 3 4 Manual de Pr cticas M dicas Hospital Hermanos Ameijeiras 4 e Si en la prueba de Coombs indirecto se observa ag
4. lutinaci n significa que estamos en presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor por lo que debe proceder al estudio e identificaci n de l o los anticuerpos adquiridos e Si en la prueba de Coombs cruzado se observa aglutinaci n indica que estamos en presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor por lo que las unidades de sangre estudiadas que presenten este resultado no deben ser transfundidas al paciente en estudio Controles e El jefe t cnico controlar que en todos los casos se trabaje con muestra extra da con no m s de 72 horas para lo que mantendr la nevera donde se almacenan las mismas libre de muestras vencidas e El jefe t cnico controlar que no ocurra en ning n caso omisi n alguna de los pasos descritos anteriormente e El t cnico que realiza el proceder debe verificar que el tubo control que se monta en paralelo muestre aglutinaci n lo cual garantiza que el reactivo de Coombs empleado mantiene su actividad biol gica Bibliograf a 1 American Association of Blood Bank Manual T cnico 13 ed Buenos Aires Edigraf 2001 2 Regulaci n 1 99 Especificaciones de calidad para la sangre humana obtenida por donaci n CECMED 3 Procederes de Banco de Sangre Ministerio de Salud P blica Grupo Nacional de Hematolog a y Banco de Sangre 1989 4 Est ndares de Trabajo para Bancos de Sangre Segunda Edici n Noviembre de1999 0PS OMS 5 Caribbean Regional Standards f
5. or Blood Banks and Transfusion Services First Edition 2001 Caribbean Epidemiology Centre CAREC
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