RTS-1 RTS-1C - Manual de funcionamiento
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1. 75 u otros agentes de limpieza recomendados para la limpieza del equipo de laboratorio se pueden utilizar para la limpieza y descontaminaci n de la unidad Limpie las gotitas de l quidos y la posible suciedad del rotor del dispositivo despu s de finalizar la fermentaci n 10 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 8 10 9 Calibraci n del dispositivo para el mantenimiento Nota Utilice solo esta calibraci n si el sistema de medici n no funciona correctamente Encienda el dispositivo Introduzca un tubo de centr fuga de 50 ml con 10 ml de H2O en el dispositivo Defina el par metro de volumen en 10 ml Al usar el panel de control o el panel de control de la unidad del software defina las RPM en 2 000 Pulse el bot n Run Stop Mantenga pulsado el bot n Select hasta que el comando CC aparezca y parpadee en la pantalla Pulse el bot n A y el n mero 0 00 aparecer y parpadear en la pantalla Espere 15 segundos y pulse el bot n V Ahora el dispositivo est calibrado y realizar una medici n de verificaci n 21 11 11 3 Garant a y reclamaciones El fabricante garantiza el cumplimiento de la unidad con los requisitos de las Especificaciones siempre que el cliente siga las instrucciones de funcionamiento almacenamiento y transporte La vida til garantizada de la unidad desde la fecha de entrega al cliente es de 24 meses P ngase en contacto con su distribuidor2. Comparaci n de la temperatura del bloque t rmico y la temperatura real en el tubo dependiendo de la intensidad de rotaci n Los datos del punto final se recopilaron 1 h 30 min despu s del inicio del proceso de calentamiento desde la temperatura ambiente 15 T2 550 OD Crecimiento celular dependiendo de la intensidad de rotaci n Es sabido que la ventilaci n afecta al crecimiento y a la tasa de crecimiento de los microorganismos aer bicos La frecuencia de giro inverso afecta a la tasa de ox geno que se absorbe en el biorreactor Los resultados obtenidos indican que la tasa m xima de divisi n celular se detecta a una frecuencia de 1 giro inverso por segundo 1 s a una velocidad de 2 000 rpm El aumento de pausa entre los giros inversos reduce la tasa de crecimiento celular alcanzando el 50 del valor m ximo cuando la frecuencia del RS es de 30 s consulte la Ilus 5 y la Ilus 6 OD over ime o prer s 10 20 3 0 0 50 60 FO 39 90 100 110 120 130 140 15 0 y Hours aa ss llus 5 Influencia de la frecuencia de giro inverso en la cin tica de crecimiento ADO A 850 nm At tr nte l tiempo de fermentaci n horas 7 2 1 Leyenda del experimento llus 5 El registrador de crecimiento celular en 16 tiempo real RTS 1 se utiliz con un LED de 850 nm el volumen del medio LB en tubo de tipo Falcon de 50 ml es aproximadamente 15 ml la frecuencia de giro inverso es 1 2 4 8 16
3. 2 5 tiempo entre giros inversos llus 2 8 y volumen de funcionamiento llus 2 11 Los valores reales de la temperatura y la velocidad se muestran en la pantalla llus 2 6 e ilus 2 7 Nota Despu s del encendido la unidad inicia el calentamiento y mantiene la temperatura independientemente de las dem s operaciones Pulse la tecla Run Stop llus 2 9 para iniciar y detener el funcionamiento Pulse la tecla Run Stop llus 2 9 para detener el funcionamiento Precauci n La parada de funcionamiento no detendr el proceso de calentamiento Para detener el proceso de calentamiento debe reducirla manualmente hasta que aparezca la indicaci n off llus 2 5 Despu s de terminar la calibraci n coloque la unidad en OFF utilizando el interruptor de alimentaci n llus 1 3 Desconecte la unidad de la fuente de alimentaci n externa del circuito el ctrico llus 1 1 11 6 M todos aprobados para el cultivo de microorganismos Somos completamente conscientes de que el mundo de los microorga nismos es infinito y de que cada cepa necesita su propia optimizaci n del creci miento Los nuevos m todos para el cultivo de microorganismos que utilizan la tecnolog a RTS 1 ir n en aumento sin lugar a dudas e informaremos a nuestros clientes sobre ello Aqu se muestran 3 m todos aprobados que se desarrollaron en el laboratorio de aplicaciones de Biosan 6 1 6 2 6 3 12 Anaerobio facultativo E
4. MD Medical Biological Research 8 Technologies RTS 1 RTS 1C Registrador de crecimiento celular en tiempo real Manual de funcionamiento para la versi n Certificado V 1AW Contenidos A T E IO et 10 11 12 Precauciones de seguridad Informaci n general C mo empezar Calibraci n Funcionamiento M todos aprobados para el cultivo de microorganismos Recomendaciones para crear ajustes personales para el cultivo de microorganismos Puntos que se deben tener en cuenta 7 1 Valores espec ficos de distribuci n de temperatura psicr filos mes filos term filos 7 2 Crecimiento celular en funci n de la intensidad de rotaci n 7 3 Ventilaci n y tipos de tubos recomendados 7 4 Crecimiento celular dependiendo de la frecuencia de medici n aerobios anaerobios 7 4 Tama o de part culas y coeficientes de calibraci n 600 nm 850 nm 7 5 Intervalo lineal de mediciones DO como una funci n de volumen medio Especificaciones Mantenimiento Calibraci n del dispositivo para el mantenimiento Garant a y reclamaciones Declaraci n de conformidad 1 Precauciones de seguridad Significado de los siguientes s mbolos A Precauci n Aseg rese de haber le do y comprendido este manual antes de utilizar el equipo Preste especial atenci n a las secciones mascadas con este s mbolo SEGURIDAD GENERAL Utilice este producto solo seg n se indica en el manual de funcionamiento proporc
5. local para verificar la disponibilidad de la garant a ampliada Si el cliente descubre alg n defecto de fabricaci n se debe cubrir certificar y enviar una reclamaci n de incumplimiento del equipo a la direcci n del distribuidor local Visite la secci n de soporte t cnico de la p gina www biosan lv para obtener el formulario de reclamaci n La siguiente informaci n ser necesaria en caso de que se necesite en servicio de garant a o de postgarant a Complete la siguiente tabla y gu rdela para futuras referencias Registrador de crecimiento celular en tiempo real Modelo Refrigeraci n de RTS 1 RTS 1C N mero de serie Fecha de venta 22 12 Declaraci n de conformidad 23 Biosan SIA Ratsupites 7 build 2 Riga LV 1067 Letonia Tel fono 371 67860693 371 67426137 Fax 371 67428101 http www biosan lv Versi n 1 01 Agosto de 2014
6. ANTE EL FUNCIONAMIENTO No ponga la unidad en funcionamiento en entornos con mezclas de productos qu micos explosivos o agresivos P ngase en contacto con el fabricante para obtener informaci n sobre el posible funcionamiento de la unidad en ambientes espec ficos No ponga la unidad en funcionamiento si est defectuosa o se ha instalado incorrectamente No se debe utilizar fuera de las salas de laboratorio No toque la unidad para comprobar la temperatura Utilice un term metro Limpie siempre y descontamine el rotor despu s del funcionamiento SEGURIDAD BIOL GICA Es responsabilidad del usuario llevar a cabo una descontaminaci n adecuada si se derraman o se introducen materiales peligrosos en el equipo 2 Informaci n general El registrador de crecimiento celular en tiempo real es un dispositivo que se puede utilizar como un incubador con medici n de densidad ptica en tiempo real El control de temperatura permite utilizar el RTS 1 RTS 1C como un incubador por ejemplo para cultivar c lulas Debido a la innovadora tecnolog a de mezclado giro inverso de la muestra sobre su propio eje es posible realizar mediciones de DO sin interferencias con la sonda El software desarrollado para el registro la visualizaci n y el an lisis de datos permite el funcionamiento en tiempo real El modelo RTS 1C est equipado con una unidad de refrigeraci n que permite la refrigeraci n de las muestras a 4 C y la programaci n
7. agado instale el software siguiendo el procedimiento de instalaci n que se describe en el manual correspondiente Caracter sticas del recipiente del biorreactor Tubos de tipo Falcon Se necesitan tubos de tipo biorreactor 50 TPP TubeSpin para utilizar el kit con aperturas Volumen de trabajo de 10 ml Forma c nica 5 aperturas A B C D E de diferentes tama os del tap n de rosca sobre el filtro de gas recubierto en PTFE est ril y permeable Las aperturas se pueden sellar y por tanto se puede ajustar el cambio seg n sea necesario El cambio de gas est ril est garantizado mediante una membrana de filtro de 0 22 um Incluso con una densidad celular alta el suministro de ox geno a trav s las aperturas es suficiente El tubo se adapta a un rotor de centr fuga est ndar de 50 ml 4 Calibraci n El dispositivo se calibra previamente en la f brica para el funcionamiento con tubos de tipo Falcon de 50 ml a un intervalo de temperatura de 15 C a 70 C 4 C a 70 C para RTS 1C y guarda los datos de calibraci n cuando se desactiva Para verificar la conformidad de la calibraci n siga los siguientes procedimientos cojauntubo de tipo Falcon de 50 ml a ada10 40 1 ml de agua destilada cierre bien la tapa del Falcon introduzca el Falcon en la toma llus 1 4 defina el par metro de volumen de agua destilada en la pantalla Ilus 2 11 pulse la tecla Run Stop llus 2 9 el disp
8. de la temperatura mediante el software El registrador de crecimiento celular en tiempo real es aplicable en Biolog a molecular Biolog a celular Biotecnolog a Bioqu mica Qu mica Microbiolog a Caracter sticas Mezclado innovador debido al giro inverso del tubo con la muestra alrededor de su eje Gracias a la innovadora tecnolog a de mezclado es posible medir la densidad ptica y la dispersi n de la luz de la muestra en tiempo real sin interferencias de la sonda manteniendo la esterilidad del proceso El cambio de par metros como la temperatura las revoluciones por minuto y el per odo de giro en una direcci n junto con la posibilidad de creaci n de algoritmos de experimento incluida la programaci n de perfiles de temperatura la programaci n de perfiles intensidad de mezclado el control de la densidad ptica etc permiten tanto el rendimiento de la dif cil secuencia de algoritmos del proceso de fermentaci n como alcanzar resultados repetibles y coherentes Posibilidades del software Seguimiento remoto y control del proceso de fermentaci n Registro en tiempo real de los procesos de agregaci n desagregaci n de la suspensi n de part culas o cin tica del crecimiento celular Gr ficos de usuario incluidos gr ficos en 3D Pausa Guardar y cargar datos de resultados Informes de hojas de c lculo en PDF y Excel Conexi n simult nea de hasta 10 unidades que permite por un lado investigar la infl
9. ecomendaciones para crear ajustes personales para el cultivo de microorganismos Puntos que se deben tener en cuenta 7 1 Valores espec ficos de distribuci n de temperatura psicr filos mes filos term filos Las temperaturas de crecimiento ptimo de microorganismos se dividen en tres grupos principales consulte la llus 3 llus 3 Paneles de temperatura y zonas de crecimiento ptimo de procariotas y su clasificaci n l Psicr filo 1 2 facultativos II Mes filos 111 Term filos 3 termotolerantes 4 facultativos 5 obligados 6 extrem filos La l nea gruesa representa la temperatura de crecimiento ptima 7 1 1 Para los psicr filos el dispositivo se debe instalar en una c mara frigor fica A pesar del dispositivo de refrigeraci n activa la muestra se calienta por la parte superior abierta del tubo de tipo Falcon Adem s se debe tener en cuenta que la temperatura real del reactor siempre ser diferente de la temperatura real de la muestra debido a su rotaci n a bajas temperaturas por debajo de los 10 C y ser superior 14 7 1 2 Para los microorganismos mesof licos el dispositivo se puede localizar a temperatura ambiente 7 1 3 Para los microorganismos termof licos consulte la llus 4 en la que se puede observar la comparaci n de la temperatura del bloque t rmico y la temperatura real en el tubo dependiendo de la intensidad de rotaci n Real T C inside the tube llus 4
10. ectamente El coeficiente de la tasa de conversi n de densidad ptica DO A 850 nm a DO A 600 nm es igual a 2 2 Ejemplo de c lculo para convertir una DO de 3 5 A 850 nm a DO A 600 nm simplemente multiplique el resultado por 2 2 cuyo resultado ser una DO de 7 7 A 600 nm Intervalo lineal de medici n de DO como una funci n de volumen medio Ilus 7 Volume influence on RTS 1 OD measurement linearity RTS 1 OD 600nm 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 OD standards 600nm 9 10mi e 20mi 9 30m llus 7 Influencia del volumen del medio de caldo en el intervalo lineal de medici n de 18 DO ADO A 850nm At frente al tiempo de fermentaci n horas Seg n se puede observar en la llus 7 el dispositivo registra una densidad ptica de la muestra en el intervalo lineal de hasta 15 DO A 600 nm a un volumen de 10 ml 8 DO A 600 nm a 20 ml y 6 DO A 600 nm a 30 ml 8 Especificaciones La unidad est dise ada para el funcionamiento en c maras frigor ficas a una temperatura ambiente desde 4 C a 40 C sin condensaci n y una humedad relativa m xima del 80 para temperaturas de hasta 31 C que disminuye linealmente a un 50 de humedad relativa a 40 C Especificaciones de medici n Fuente de iluminaci n RTS 1 RTS 1C LED Longitud de onda A nm 850 15 8 1 Intervalo de medici n DO 0 10 00 0 18 Medici n en tiempo real mi
11. ionado La unidad no se debe utilizar si se ha ca do o da ado Despu s del transporte o el almacenamiento mantenga la unidad a temperatura ambiente durante 2 horas antes de conectarla al circuito el ctrico Utilice solo m todos de limpieza y descontaminaci n recomendados por el fabricante No realice modificaciones en el dise o de la unidad SEGURIDAD EL CTRICA No enchufe la unidad a una toma de corriente sin conexi n a tierra ni tampoco utilice un cable de prolongaci n sin conexi n a tierra Conecte el dispositivo nicamente a una fuente de alimentaci n con el voltaje correspondiente al que aparece en la etiqueta del n mero de serie Utilice solo la unidad de fuente de alimentaci n externa proporcionada con este producto Aseg rese de que se puede acceder con facilidad al interruptor y a la unidad de fuente de alimentaci n externa durante el uso Desconecte la unidad del circuito el ctrico antes de moverla Apague la unidad desactivando el interruptor de alimentaci n y desconectando la unidad de fuente de alimentaci n externa de la toma de alimentaci n Si entra l quido en la unidad descon ctela de la unidad de la fuente de alimentaci n externa y haga que la revise un t cnico de mantenimiento y reparaci n No ponga la unidad en funcionamiento en instalaciones en las que se pueda formar condensaci n Las condiciones de funcionamiento de la unidad se definen en la secci n de Especificaciones DUR
12. n medici n 1 60 Resoluci n de ajuste de tiempo min 1 Especificaciones de la temperatura RTS 1 RTS 1C Intervalo de ajuste C De 25 a 70 De 24 a 70 Punto de intervalo de control inferior 5 por encima de la 15 por debajo de la 8 2 O temperatura ambiente temperatura ambiente Punto de intervalo de control h 70 superior C Ajuste de resoluci n C 0 1 Estabilidad C 0 1 Especificaciones generales RTS 1 RTS 1C Volumen de muestra ml 5 30 Intervalo de velocidad rpm 250 2 000 Resoluci n de ajuste de velocidad 1 rem Pantalla LCD 8 3 Dimensiones generales An x L x 130 x 212 x 200 Al mm Peso kg 1 7 2 2 4 CC 12V Voltaje consumo de energ a 3 3 A740W 5 A 60 W Fuente de alimentaci n externa Entrada de CA de 100 240 V 50 60 Hz Salida CC de 12 V Biosan se compromete a realizar un programa continuo de mejora y se reserva el derecho a modificar el dise o y las especificaciones del equipo sin proporcionar avisos adicionales Precisi n de 10 19 9 1 9 2 9 3 9 4 20 Mantenimiento Si la unidad necesita mantenimiento desconecte la unidad de la red el ctrica y p ngase en contacto con Biosan o con su representante local de Biosan Todas las operaciones de reparaci n y mantenimiento las debe realizar solamente el personal cualificado y especialmente formado El etanol est ndar
13. ositivo iniciar el ciclo de mediciones de DO aumentando la velocidad a 2 000 rpm el ciclo de mediciones debe finalizar tras 15 20 segundos y el valor de DO debe aparecer en la pantalla si el valor de DO es igual a 0 DO 0 05 el dispositivo corresponde con los valores de f brica de calibraci n previa y es adecuado para el uso 10 5 Funcionamiento Recomendaciones durante el funcionamiento 5 1 5 2 5 3 5 4 5 5 5 6 5 7 5 8 5 9 5 10 Retire el tubo de tipo Falcon de la toma de tubos antes de conectar o desconectar la fuente de alimentaci n externa durante el funcionamiento Se recomienda iniciar el funcionamiento aproximadamente 15 minutos despu s de activar el dispositivo el tiempo necesario para la estabilizaci n en el modo de funcionamiento Conecte la unidad de la fuente de alimentaci n externa al circuito el ctrico Ilus 1 1 Encienda la unidad utilizando el interruptor de alimentaci n situado en el panel trasero llus 1 3 Introduzca el tubo en la toma llus 1 4 Pulse la tecla Select llus 2 1 para escoger el par metro que desea cambiar el par metro activo parpadea Utilice las teclas A y Y Ilus 2 2 para definir el valor necesario si la tecla se pulsa durante m s de 2 segundos el par metro deber cambiar m s r pido Es posible definir el tiempo entre las mediciones de densidad ptica llus 2 3 velocidad de giro Ilus 2 4 temperatura Ilus
14. scherichia Coli 2 000 rpm velocidad de giro del recipiente 1s frecuencia de giro inverso RSF 37 C temperatura de la toma 15 ml volumen de muestra en el recipiente de muestras 10 min pero no menos Frecuencia de medici n MF Anaerobio termof lico Thermophilus sp 2 000 rpm 1 s RSF 70 C temperatura real del tubo inferior a 5 C 15 ml 10 min MF Tasa de evaporaci n a 70 C 5 ml 24 h ajuste el par metro de volumen de forma adecuada para que el sistema de medici n funcione correctamente Anaerobio aerotolerante L acidophilus 0 rpm 0 s RSF 37 O 30 ml 10 min MF Recomendamos utilizar la programaci n predefinida de perfiles y ciclos de Sin mezclado med DO para la distribuci n homog nea de la suspensi n celular del tubo del biorreactor antes de la medici n 6 4 6 5 Actualmente se est n realizando estudios para comprender mejor las ventajas de la tecnolog a del giro inverso RS para cultivar diferentes tipos de microorganismos como bacterias del cido l ctico y levadura El usuario final puede ponerse en contacto con el fabricante para aconsejar O sugerir que se realicen pruebas sobre el cultivo en una cepa O microorganismo necesario P ngase en contacto con el departamento de ID de Biosan a trav s de los siguientes correos electr nicos scienceObiosan lv igor biosan lv Igor Bankovsky biotecn logo asesor en materia de aplicaciones 13 7 R
15. uencia de los diferentes factores f sicos y qu micos en el proceso de fermentaci n y por otro investigar la interdependencia de dichos factores en experimentos de matriz 3 1 3 2 C mo empezar Desempaquetado Retire con cuidado los materiales del paquete y gu rdelos para un futuro env o y almacenamiento de la unidad Examine con atenci n si se ha producido alg n da o en la unidad durante el transporte La garant a no cubre los da os producidos durante el transporte Kit completo El kit de la unidad incluye RTS 1 registrador de crecimiento celular en tiempo real o RTS 1C registrador de crecimiento celular en tiempo real con refrigeraci n1 unidad TP rad 1 unidad Recipientes de 50 ml del biorreactor TPP TubeSpin 20 unidades Cable de datoS cia tia 1 unidad Unidad de disco USB con archivos de instalaci n del software y manual de instalaci n oooonicicinnnnnccnnnccnnnccnerannnccnnnranancccnnrnracccn 1 unidad Fuente de alimentaci n externa 1 unidad Manual de funcionamiento certificado oooonoccccnnicacinancccnnnannnonannnos 1 copia 4 AA AA RTS 1 Real Time Cell Growth Logger biofan llus 1 Panel trasero llus 2 Panel de control 2 3 3 Configuraci n coloque la unidad en una superficie de trabajo horizontal plana conecte la unidad de fuente de alimentaci n externa a la toma llus 1 1 en el lateral trasero de la unidad encienda el ordenador si se ha ap
16. y 30 s la frecuencia de medici n MF es aproximadamente 10 min la velocidad de rotaci n del reactor es 2 000 rpm la temperatura es 37 C y el di metro de los poros del filtro para ventilaci n es 0 25 um Growth rate 0 014 0 013 E 20 s 0 012 Mas 0 011 His 0 01 E S 0 009 Moss lt 0 008 2 0 007 0 008 0 005 0 004 0 003 0 002 0 001 SS 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 Hours 7 3 Ventilaci n y tipos de tubos recomendados Para los microorganismos aer bicos se recomienda el uso de tubos proporcionados por nosotros biorreactor TPP TubeSpin6O de 50ml pero para los anaerobios aerotolerantes como Lactobacillus acidophilus es necesario utilizar tubos de muestra con tapas selladas sin membrana Para obtener resultados ptimos al cultivar anaerobios aerotolerantes se necesita sellar el tap n de rosca del tubo del biorreactor TPP TubeSpin6 de 50 ml con cinta El usuario tambi n puede utilizar tubos de centr fuga est ndar de 50 ml de tipo Falcon teniendo en cuenta que el tubo ha de ser transparente como el del biorreactor TPP TubeSpin6 17 7 4 7 5 Tama o de part culas y coeficientes de calibraci n 600 nm 850 nm La calibraci n del instrumento est dise ada para un microorganismo con un tama o espec fico de 0 4 0 8 x 1 3 um y un volumen celular de 0 6 0 7 um aproximadamente En caso de superar el tama o permisible el sistema de medici n no funcionar corr
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