NEFA-HR(2)
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1. aplicaciones in vitro S lo personal profesional especializado puede usar este test Rigen las prescripciones y leyes nacionales y regionales respectivas No debe usarse in vivo ni en humanos ni en animales Los reactivos deben usarse exclusivamente para el procedimiento aqu descrito No se puede garantizar eficacia alguna si se usan los reactivos en otros procedimientos o para otros fines Para el manejo del aparato tenga en cuenta el manual de instrucciones del fabricante Los reactivos deben conservarse seg n las condiciones indicadas No use los reactivos una vez transcurrida la fecha de caducidad indicada en el envase iNo use reactivos congelados err neamente Los reactivos congelados pueden obtener resultados incorrectos No se recomienda conservar los reactivos ya reconstituidos Tras abrir el envase ci rrelo bien y gu rdelo a la temperatura indicada Use los recipientes y otros materiales s lo para el objeto descrito del test Los frascos se han cerrado al vac o Quite las tapas lentamente evitando la p rdida de liofilizado Si se analiza en el mismo proceso NEFA colesterol y o triglic ridos situar la t cnica NEFA en primer lugar Los enzimas colesterol esterasa y lipoprotein lipasa usados en la determinaci n de colesterol y triglic ridos se adhieren a la cubeta y pueden influir en los resultados de NEFA Use el est ndar NEFA para la calibraci n Este an lisis no debe const2. manejo y especificaci n del analizador Es indispensable que el usuario haga una validaci n pr ctica del test analizando un n mero suficiente de sueros de pacientes de apropiados controles Fabricado por Reactivos Contenido y condiciones de conservaci n R1 Set Ria Reactivo colorimetrico A Conservar a 2 10 C R1 Soluci n A R2 Set R2a Reactivo colorimetrico B Conservar a 2 10 C R2 Soluci n B Componentes R1 Set R a tras su reconstituci n Reactivo ACS 0 53 U ml colorim trico A CoA 0 31 mmol l ATP 4 3 mmol l 4 AA 1 5 mmol l AOD 2 6 U ml Acida s dica 0 055 como R1 a a Reactivo colormetrico liofilizado ___ 0 8 ___________ R1 Soluci n A Tamp n fosfato pH 7 0 50 mmol l Acida s dica 0 05 R2 Set R2a tras su reconstituci n Reactivo ACOD 12 U ml colorim tricoB_______ POD idos 14 U ml 2 R2 Soluci n B MEHA 2 4 mmol l Preparaci n de los reactivos R 1 Mezclar bien el contenido de un frasco del reactivo colorim trico A R1a con la soluci n A R1 Conservar la soluci n de uso a 2 10 C y usarla antes que transcurran 10 d as de su preparaci n R 2 Mezclar bien el contenido de un frasco del reactivo colorim trico B R2a con la soluci n B R2 Conservar la soluci n de uso a 2 10 C y usarla antes que transcurran 3 semanas de su preparaci n Obtenci n y conservaci n de las muestras Utilizar muestras s ricas en el an lisis Se recomienda realizar el an lisis inmediatamente de
3. HP 434 91795 0108 DI ES NEFA HR 2 M todo ACS ACOD ILea atentamente estas instrucciones Para el an lisis cuantitativo de los cidos Grasos Libres NEFA en Suero Uso previsto El kit Wako NEFA HR 2 es un test colorim trico enzim tico para el an lisis cuantitativo in vitro de los cidos grasos libres NEFA en el suero Resumen y explicaci n del test En el suero los cidos grasos libres unidos a la alb mina NEFA son un proveedor importante de energ a para el tejido perif rico La concentraci n de NEFA en el suero est equilibrada entre la absorci n del h gado y del tejido perif rico y su liberaci n por el tejido adiposo El contenido de NEFA se reduce por los esfuerzos f sicos pero se eleva en las dietas enfriamientos situaciones de p nico o estr s y en los fumadores Subidas y bajadas de estos valores se observan tambi n en diabetes y en enfermedades hep ticas o endocrinas Inicialmente NEFA se determinaba con un m todo de extracci n dif cil de realizar al usar disolventes org nicos Por esta raz n en la rutina se una el m todo enzim tico con acil CoA oxidasa ACOD debido a la excelente especificidad y su precisa ejecuci n NEFA HR 2 es un kit de reactivos para analizar los cidos grasos libres bas ndose en la reacci n enzim tica con 3 metil N etil N 2hidroxietilo anilina MEHA que presenta una absorci n violeta colorim trica consigui ndose unos precisos resultados con aus
4. a con la edad sexo alimentaci n y pa s wl Wako Chemicals GmbH Fuggerstrafe 12 D 41468 Neuss Telephon e 49 2131 311 0 Facsimile 49 2131 311 100 URL www wako chemicals de ES 0108 D1 NEFA HR 2 M todo ACS ACOD ILea atentamente estas instrucciones Para el an lisis cuantitativo de los cidos Grasos Libres NEFA en Suero Datos caracter sticos del test 1 Exactitud Los resultados de los controles s ricos admite una variabilidad en sus resultados del 15 de la concentraci n indicada por su fabricante 2 Sensibilidad a La absorci n del agua destilada no debe superar las 0 140 UAbs b Siel est ndar usado es cido oleico 1 mEo l la variabilidad ser de 0 100 a 0 380 UAbs 3 Precisi n El CV no debe superar el 1 5 si se analiza 5 m s veces una muestra en el mismo procesamiento 4 L mites de linearidad 0 01 4 00 mEq l NEFA siguiendo los procedimientos est ndar Correlaci n Coeficiente de correlaci n r 0 997 n 50 Valor de regresi n y 1 013 x 0 043 Wako NEFA HR 2 M todo ACS ACOD mEq Wako NEFA C M todo ACS ACOD mEg l Interferencias a La bilirrubina puede originar una ligera reducci n de los valores b No existe influencia importante ni por el cido asc rbico ni por la hem lisis c En concentraciones normales no existen interferencias debidas al citrato oxalato EDTA o fluoruro s dico Avisos y medidas de precauci n S lo para
5. encia de interferencias debidas al cido asc rbico o a la bilirrubina Principio del test Los cidos grasos no esterificados NEFA de la muestra por la acci n de la sintetasa de acil CoA ACS se transforman en acil CoA AMP y cido fosf rico PPi bajo la modulaci n del coenzima A CoA y la adenosina 5 trifosfato sal dis dica ATP Por la acci n de la acil CoA oxidasa ACOD la acil CoA se transforma en 2 3 trans enoil CoA y per xido de hidr geno y posteriormente en presencia de la peroxidasa POD y por la acci n conjunta de la 3 metil N etil N hidroxietilo anilina MEHA y la 4 aminoantipirina 4 AA se obtiene un complejo crom tico azul violeta por acoplamientos oxidativos Leyendo la absorci n azul violeta se puede determinar la concentraci n de NEFA Reacci n ACS RCOOH ATP CoA J ACOD 3 2 3 trans enoil CoA H202 acil CoA AMP Ppi acil CoA O2 CH HC NH 3 CH Y 2 5 2H 0 E ANS Cu t N Hc NT No NC H OH 3 3 H C mE ae BI OU A a pr gt NA POD E complejo crom tico violeta OH 3HO Indicios f sicos y qu micos de inestabilidad Son indicios de inestabilidad del reactivo la presencia de precipitaciones o la obtenci n de resultados de los controles fuera del margen indicado por el fabricante Aparatos El reactivo est previsto para su uso en cualquier analizador autom tico existente en el mercado Revisar el manual del fabricante para una descripci n del
6. ente o malestar acudir a un m dico si fuera posible ense arle esta etiqueta S 60 Este producto y su envase tienen que eliminarse como desperdicios peligrosos S 61 Evite la liberaci n del producto al medio ambiente Busque las instrucciones especiales consulte la Hoja de Datos de Seguridad Control de la calidad Se recomienda un programa de control de calidad para todos los laboratorios cl nicos isabel Rogiers V Stability of the long chain non esterified fatty acid pattern in plasma and blood during different storage conditions Clin Chim Acta 84 49 54 1978 2 Krebs M et al Prevention of in Vitro Lipolysis by Tetrahydrolipstatin Clin Chem 46 7 950 954 2000 3 Aufenanger J and Kattermann R Klinisch chemische Me gr e Freie Fetts uren FFS S 319 320 in Greiling Grefiner Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie 3 edition Schattauer 1995 Informaci n para el pedido Referencia Producto Presentaci n 434 91795 NEFA HR 2 R1 Set a 4 para 50 ml 4 x 50 mil 4 para 25 ml 4x 25 ml 2x 10 ml 436 91995 NEFA HR 2 R2 Set 270 7700 77000 NEFA Standard CAL wl Wako Chemicals GmbH Fuggerstra e 12 D 41468 Neuss Telephon e 49 2131 311 0 Facsimile 49 2131 311 100 URL www wako chemicals de ES 0108 D1
7. ituir la nica prueba que permita establecer un diagn stico cl nico El reactivo no debe entrar en contacto con la boca los ojos ni la piel Lavar con abundante agua la piel o los ojos si han entrado en contacto con el reactivo Precauci n No se corte con la tapa de aluminio al quitarla En cuanto a la eliminaci n de los reactivos hay que tener en cuenta las normativas regionales y nacionales La soluci n contiene 3 mg l ferricianuro pot sico 1 mg l como cian geno Todos los materiales que entren en contacto con las muestras deben considerarse potencialmente infecciosos El tratamiento de estos materiales debe efectuarse en concordancia con las reglas de una buena pr ctica de laboratorio y seg n las normativas nacionales e internacionales en vigor La acida s dica puede formar mezclas explosivas con cobre o plomo Aunque los reactivos contienen s lo cantidades m nimas de acida s dica se deben enjuagar los desag es con abundante agua al eliminar los reactivos Este kit R1 contiene compuestos clasificados conforme a la Directiva 1999 45 CE Fabricado por Clasificaci n de peligrosidad x Xn Nocivo para la salud Frases R R 22 Nocivo para la salud al tragar el producto R 52 53 Da ino para organismos marinos en aguas puede tener efectos perjudiciales a largo plazo Frases S S 28 Al entrar en contacto con la piel lavar inmediatamente con abundante agua S 45 En caso de accid
8. spu s de haber obtenido la muestras de sangre ya que enzimas como la lipoprotein lipasa y fosfolipasa hidrolizan las grasas form ndose cidos grasos Congelar los sueros en caso de retardar su an lisis Estabilidad en suero no congelado 2 d as a 4 0 La heparina estimula la lipoprotein lipasa aum ntandose la tasa de cidos grasos libres en personas con terapia con heparina La sangre de estos pacientes s lo puede analizarse tras un tratamiento previo Procedimiento standard Temperatura 37 C Hitachi9737 Valor de la muestra vac a y Lectura 0 3 7 5 min Longitud de onda principal 546 nm secundaria 660 nm 2 PUNTOS FIN M Muestra 7 pl A R1 300 pl R2 150 yl Calibrador Wako NEFA Standard suministrable aparte C lculo de la concentraci n de NEFA La concentraci n de NEFA se determina mediante una curva de calibraci n Uso en varios analizadores autom ticos Programe los par metros siguiendo las instrucciones de uso del fabricante del aparato Bajo pedido pueden suministrarse aplicaciones para ciertos analizadores autom ticos Resultados Los resultados finales se calculan autom ticamente mEq Utilizar siempre la misma unidad para el calibrador Valores de referencia Hombres 0 1 0 60 mmol l 2 8 16 9 mg dl Mujeres 0 1 0 45 mmol l 2 8 12 7 mg dl Se recomienda que cada laboratorio determine sus propios valores de referencia al ser una determinaci n intr nsecamente relacionad
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