AmLyte 13 - Piccolo Xpress
Contents
1. Cefalotina 400 43 dism Dopamina 15 46 dism L dopa 5 13 dism Metotrexato 0 5 16 dism Nitrofuranto na 20 18 dism Creatinina cido asc rbico 20 11 dism Dopamina 19 80 dism L dopa 5 71 dism Epinefrina 1 45 dism Glutationa 30 13 dism Glucosa Oxaloacetato 132 11 dism Piruvato 44 13 dism Potasio Penicilina G 100 17 aum Sulfadiazina 150 12 dism Sodio Cefalotina 400 12 aum Metotrexato 0 5 11 aum Penicilina G 100 10 aum Alanina aminotransferasa ALT cido asc rbico 20 11 aum Oxaloacetato 132 843 aum Bilirrubina total TBIL Dopamina 19 55 dism L dopa 5 17 dism A d t Ki gi R PEE cy P ee Dism disminuci n en la concentraci n del analito especificado Aum aumento en la concentraci n del analito especificado P gina 12 de 21 11 Valores esperados Se usaron muestras de un total de 193 adultos varones y mujeres analizadas en el analizador quimico sanguineo de Piccolo para determinar los intervalos de referencia para ALT alb mina amilasa calcio creatinina glucosa bilirrubina total y BUN Se usaron muestras de un total de 186 adultos varones y mujeres para determinar el intervalo de referencia de la AST Las muestras de 125 a 150 varones y mujeres adultos se analizaron en el analizador qu mico sangu neo de Piccolo y las muestras de 69 varones y mujeres adultos en el analizador qu mico Xpress de Piccolo para CRP para determinar los intervalos de referencia Los rango2. PN N mero de parte N mero de cat logo Dispositivo diagn stico in vitro ul Fabricante Y X n mero de dispositivos de prueba en el equipo sn En serie y Limitaci n de temperaturas A Precaucion Pagina 18 de 21 14 Bibliografia 1 2 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Tonhazy NE NG White WW Umbreit A rapid method for the estimation of the glutamic aspartic transaminase in tissues and its application to radiation sickness Arch Biochem 1950 28 36 42 Reitman S Frankel S A colorimetric method for the determination of serum glutamic oxalacetic and glutamic pyruvic transaminases Am J Clin Pathol 1957 28 56 63 Murray RL Alanine aminotransferase In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2naed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 895 898 Wr blewski F LaDue JS Serum glutamic pyruvic transminase in cardiac and hepatic disease Proc Soc Exp Biol Med 1956 91 569 571 Bergmeyer HU Horder M IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes Part 3 IFCC method for alanine aminotransferase J Clin Chem Clin Biochem 1980 18 521 534 Howe PE The use of sodium sulfate as the globulin precipitant in the determination of proteins in blood J Biol Chem 1921 49 93 107 Howe PE The determination of proteins in blood
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4. Al igual que con cualquier procedimiento diagn stico de prueba hay que considerar todos los procedimientos de prueba restantes incluido el estado cl nico del paciente antes del diagn stico final P gina 1 de 21 3 Principio del procedimiento Alanina aminotransferasa ALT La alanina aminotransferasa ALT ha sido medida mediante tres m todos Dos de estos m todos la t cnica de acoplamiento colorim trico por dinitrofenilhidracina y la prueba enzim tica fluorescente se usan muy raramente La t cnica m s com n para la determinaci n de las concentraciones de ALT en suero es un m todo enzim tico basado en el trabajo de Wr blewski y LaDue La Federaci n Internacional de Qu mica Cl nica IFCC ha propuesto como m todo recomendado un procedimiento Wroblewski y LaDue modificado El m todo desarrollado para ser usado con los analizadores de Piccolo es una modificaci n del procedimiento recomendado por la IFCC En esta reacci n la ALT cataliza la transferencia de un grupo amino de la L alanina al a cetoglutarato para formar L glutamato y piruvato La lactato deshidrogenasa cataliza la conversi n de piruvato a lactato Al mismo tiempo la NADH se oxida a NAD como se observa en el esquema de la siguiente reacci n ALT L Alanina a cetoglutarato L Glutamato piruvato LDH Piruvato NADH H _ Lactato NAD El ndice de cambio de la diferencia de absorban
5. cnica de Karmen Bergmeyer de acoplamiento de malato deshidrogenasa MDH y nicotinamida dinucle tido reducida NADH en la detecci n de AST en suero Se agrega lactato deshidrogenasa LDH a la reacci n para reducir la interferencia causada por el piruvato end geno La AST cataliza la reacci n de L aspartato y a cetoglutarato en oxaloacetato y L glutamato El oxaloacetato se convierte en malato y NADH se oxida a NAD por el catalizador MDH AST L aspartato a cetoglutarato Oxaloacetato L glutamato MDH Oxaloacetato NADH Malato NAD El cambio en el ndice de absorbancia a 340 nm 405 nm debido a la conversi n de NADH a NAD es directamente proporcional a la cantidad de AST contenida en la muestra Calcio CA Los primeros m todos que se usaron para analizar el calcio consist an en precipitar el calcio con un exceso de aniones Los m todos de precipitaci n son trabajosos y con frecuencia imprecisos El m todo de referencia para el calcio es la espectroscopia de absorci n at mica sin embargo este m todo no es apropiado para el uso rutinario Los m todos espectrofotom tricos que usan o cresolftale na complexona o arsenazo III como indicadores metalocr micos son los m s com nmente utilizados El arsenazo III tiene alta afinidad por el calcio y no depende de la temperatura como la CPC 24 25 26 El calcio en la muestra del paciente se liga con el arsenazo H
6. mara de la muestra Debido al flujo irregular puede analizarse una cantidad inadecuada de muestra y los resultados obtenidos pueden quedar fuera de los valores de referencia La muestra puede volverse a analizar con un nuevo disco reactivo Interferencia Se probaron sustancias como factores de interferencia con los analitos Se prepararon mezclas de suero humano La concentraci n a la cual se prob cada obst culo potencial se bas en los niveles de prueba en CLSI EP7 A Efectos de las sustancias end genas e Los factores de interferencia fisiol gicos hem lisis ictericia y lipidemia provocan cambios en las concentraciones analizadas de algunos analitos Los ndices de la muestra son impresos en la base de cada tarjeta de resultados para informar al usuario sobre los niveles de factores de interferencia presentes en cada muestra e Fl sistema qu mico Xpress de Piccolo suprime cualquier resultado que sea afectado por m s del 10 de interferencia por hem lisis lipidemia o ictericia En lugar del resultado la cinta en rollo tendr impreso HEM LIP o ICT respectivamente e Para el m todo CRP los niveles de sustancias end genas que disparan las supresiones de HEM LIP o ICT son de 750 mg dL para hemoglobina 750 mg dL para lipidemia y 35 mg dL para bilirrubina e La prueba de potasio en el sistema Piccolo es una prueba de acoplamiento de piruvato quinasa PK lactatodeshidrogenasa LDH Por consigueinte en ca
7. Enfermedades paratiroideas seas y renales cr nicas tetania Prote na C reactiva CRP Infecci n da o tisular y trastornos inflamatorios Creatina quinasa Infarto de miocardio distrofia muscular progresiva dermatomiositis rabdomiolisis debida a ingesti n de f rmacos hiperosmolalidad enfermedad autoinmune delirium tremens convulsiones s ndrome de Crush hipotiroidismo cirug a ejercicio f sico severo inyecci n intramuscular inactividad f sica reducci n en la masa muscular Creatinina Enfermedad renal y control de di lisis renal Glucosa Alteraciones del metabolismo de carbohidratos incluida la diabetes mellitus e hipoglucemia del adulto y juvenil Potasio Enfermedad glomerular o tubular renal insuficiencia adrenocortical cetoacidosis diab tica tratamiento excesivo con potasio endovenoso sepsis panhipopituitarismo hem lisis in vitro hiperaldosteronismo malnutrici n hiperinsulinismo alcalosis metab lica y p rdida gastrointestinal Sodio Deshidrataci n diabetes ins pida p rdida de l quidos gastrointestinales hipot nicos intoxicaci n por sal disminuci n selectiva de la sensaci n de sed p rdidas cut neas quemaduras sudoraci n hiperaldosteronismo alteraciones del SNC hiponatremia por diluci n por depleci n y por delirio y s ndrome de secreci n inadecuada de HAD Bilirrubina total Trastornos hep ticos entre ellos hepatitis y obstrucci n de la ves cula biliar ictericia
8. of blood specimens tentative standard CLSI Document H18 A2 Wayne PA CLSI 1999 Overfield CV et al Glycolysis a re evaluation of the effect on blood glucose Clin Chim Acta 1972 39 35 40 Rehak NN Chiang BT Storage of whole blood effect of temperature on the measured concentration of analytes in serum Clin Chem 1988 34 2111 4 Sherwin JE Obernolte R Bilirubin In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2naed Kaplan LA Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 1009 1015 Henry RJ Cannon DC Winkelman JW Clinical Chemistry Principles and Technics 2naed New York Harper and Row 1974 417 421 1058 1059 Macy E Hayes T Tracy R Variability in the measurement of c reactive protein in healthy subjects implications for reference interval and epidemiological applications Clin Chem 1997 43 52 58 Clinical and Laboratory Standards Institute Interference testing in clinical chemistry proposed guideline CLSI Document EP7 A Wayne PA CLSI 2002 Young DS Effects of drugs on clinical laboratory tests 3rd ed Washington DC AACC Press 1990 Clinical and Laboratory Standards Institute How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory approved guidelines 2naed CLSI Document C28 A3 Wayne PA CLSI 2008 Clinical and Laboratory Standards Institute Evaluation of precision performance of clinical chemistry devices approved guideline CLSI Document EP5 A Wayne PA
9. qu mico Xpress de Piccolo Tabla 5 L mites din micos de Piccolo Analito Unidades comunes Unidades SI Alanina aminotransferasa ALT 5 2000 UN 5 2000 UN Alb mina ALB 1 6 5 g dL 10 65 g L Amilasa AMY 5 4000 U L 5 4000 U L Aspartato aminotransferasa AST 5 2000 U L 5 2000 U I Calcio 4 0 16 0 mg dL 1 0 4 0 mmol L Prote na C reactiva 5 0 200 0 mg l 5 0 200 0 mg l Creatina quinasa 5 5 000 U l 5 5 000 U l Creatinina 0 2 20 mg dl 18 1768 umol l Glucosa 10 700 mg dl 0 6 38 9 mmol l Potasio 1 5 8 5 mmol l 1 5 8 5 mmol l Sodio 110 170 mmol l 110 170 mmol l Bilirrubina total TBIL 0 1 30 mg dL 1 7 513 umol L Nitr geno ureico sangu neo BUN 2 180 mg dl 0 7 64 3 mmol l Si la concentraci n del analito es superior al intervalo de medici n intervalo din mico pero inferior al intervalo del sistema en la cinta de datos en rollo impresa se indicar n un signo gt en el l mite superior y un asterisco detr s del n mero por ejemplo GLU gt 700 U l Si es inferior al intervalo din mico se imprimir lt con un asterisco por ejemplo GLU lt 10 U L P gina 13 de 21 Para valores que tengan un valor enormemente m s alto que el intervalo de medici n intervalo del sistema se imprimir en lugar del resultado Cada vez que aparezca en la cinta de datos en rollo recoja una muestra nueva y realice de nuevo la prueba Si los resultados de la segunda muestra se vuelven a suprimir p ngase en contac
10. sangre entera se analizaron con el analizador qu mico sangu neo Piccolo en los centros de campo y las muestras s ricas se analizaron con el analizador qu mico sangu neo Piccolo y mediante m todos de comparaci n En algunos casos se usaron muestras muy y poco enriquecidas para cubrir el rango din mico Para CRP se P gina 16 de 21 analizaron muestras de plasma tratado con heparina litio en el analizador quimico Xpress de Piccolo y con un m todo de comparaci n Las muestras se han elegido para que cumplan los valores de distribuci n en la gu a CLSI EP9 A2 En la tabla 7 se muestran las estad sticas de correlaci n representativas Tabla 7 Correlaci n del analizador qu mico sangu neo de Piccolo o el analizador qu mico Xpress de Piccolo para CRP con m todos de comparaci n Coeficiente de Rango de M todo de correlaci n Pendiente Intercepci n VER N muestra comparaci n Alanina 0 981 0 905 1 3 3 21 86 10 174 Paramax aminotransferasa U I 0 985 0 946 2 5 2 84 67 10 174 Technicon Alb mina g dL 0 854 1 001 0 3 0 22 261 1 1 5 3 Paramax 0 896 0 877 0 1 0 21 100 1 5 5 0 Beckman Amilasa U L 0 979 0 692 4 7 3 11 99 11 92 Paramax 0 963 1 065 4 1 3 47 80 19 118 Technicon Aspartato aminotransferasa 0 93 0 87 5 3 2 76 159 13 111 Paramax UN 1 0 0 97 3 0 1 9 46 13 252 DAX Calcio mg dL 0 991 0 990 0 4 0 17 25 5 2 11 9 Paramax 0 673 0 742 1 8 0 22 81 8 1 9 9 Beckman Proteina C reactiva mg l 0 998 0 990 0 4
11. secci n Obtenci n de muestras del manual del operador del analizador qu mico Xpress de Piccolo se describen las t cnicas para la obtenci n de las muestras e Fl tama o m nimo de muestra requerido es 100 ul de sangre entera tratada con heparina litio plasma tratado con heparina litio suero o material de control La c mara de muestra del disco reactivo puede contener hasta 120 uL de muestra e Las muestras de sangre entera obtenidas por venopunci n deben ser homogeneizadas antes de transferir una muestra al disco reactivo Invierta suavemente el tubo de recolecci n varias veces antes de transferir la muestra No agite el tubo para obtenci n de muestras esto puede causar hem lisis e Las muestras de sangre entera deben obtenerse por venopunci n no de la sangre capilar e La hem lisis puede provocar resultados err neamente elevados en las pruebas de potasio Este problema puede pasar desapercibido cuando se analiza sangre entera la liberaci n de potasio de apenas 0 5 de los eritrocitos puede provocar aumentos en el nivel s rico del potasio de 0 5 mmol l Adem s incluso las muestras no hemolizadas que no se procesan con prontitud pueden tener mayores niveles de potasio debido a la filtraci n de potasio intracelular e Las muestras de sangre entera obtenidas por venopunci n se deben analizar dentro de los 60 minutos posteriores a la extracci n Las concentraciones de glucosa se ven afectadas por el tiempo transcurr
12. true creatinine concentration in serum and urine J Clin Chem Clin Biochem 1980 18 385 394 Moss GA et al Kinetic enzymatic method for determining serum creatinine Clin Chem 1975 21 1422 1426 Jaynes PK et al An enzymatic reaction rate assay for serum creatinine with a centrifugal analyzer Clin Chem 1982 28 114 117 Fossati P et al Enzymatic creatinine assay a new colorimetric method based on hydrogen peroxide measurement Clin Chem 1983 29 1494 1496 Whelton A et al Nitrogen metabolites and renal function In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 2na Ed Burtis CA and Ashwood ER Eds Philadelphia W B Saunders Company 1994 1513 1575 Folin O et al A system of blood analysis J Biol Chem 1919 38 81 110 Somogyi M A reagent for the copper iodometric determination of very small amounts of sugar J Biol Chem 1937 117 771 776 Nelson N et al A photometric adaption of the Somogyi method for the determination of glucose J Biol 1944 153 375 380 Kaplan LA Glucose In Clinical Chemistry Theory Analysis and Correlation 2nd ed Kaplan LA AJ Pesce AJ eds St Louis The C V Mosby Company 1989 850 856 Berry MN et al Enzymatic determination of potassium in serum Clin Chem 1989 35 817 820 Van Pelt J Enzymatic determination of sodium potassium and chloride in serum compared with determination by flame photometry coulometry and ion selective electrodes Clin Chem 1994 40 846 847 Hubl W e
13. 0 1 U 0 2 U 0 2 U 26 ug 0 3 U 60 ug 29 ug 0 1 U 60 ug 22 ug 0 2 ug 1U 23 ug 0 001 U 0 4 ug 0 01 U 1U 58 ug 145 ug 420 ug 20 ug 28 ug 101 ug 0 05 U 19 ug 0 005 U e El envase del diluyente del disco reactivo se abre autom ticamente cuando se cierra el caj n del analizador No puede reutilizarse un disco con un envase de diluyente abierto Aseg rese de que la muestra o la prueba est colocada en el disco antes de cerrar el caj n e Los discos de reactivo usados contienen l quidos del cuerpo humano Siga las buenas pr cticas de seguridad en el laboratorio cuando manipule y deseche los discos usados Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo para obtener instrucciones sobre la limpieza de derrames que presentan riesgo biol gico e Los discos reactivos son de pl stico y pueden romperse o estallar si se caen Nunca use un disco que se haya ca do ya que puede esparcir material biol gico peligroso en el interior del analizador e El reactivo en soporte s lido puede contener sustancias cidas o c usticas El usuario no entra en contacto con el reactivo en soporte s lido si sigue los procedimientos recomendados En el caso de que se manipule el reactivo en soporte s lido P gina 7 de 21 por ejemplo limpieza tras caerse y romperse un disco de reactivo se debe evitar la ingestion el contacto con la piel y la inhalaci n del mismo Instrucciones para la manipulaci n de los
14. 1 3 7 108 0 1 88 1 7 134 21 2 0 526 7 7 1 5 1 1 0 14 12 5 Total 145 4 62 3 2 8 6 0 25 2 9 11 8 0 40 3 4 8 3 0 81 9 8 8 1 0 51 6 3 8 8 0 54 6 2 34 5 1 09 3 2 105 5 2 30 2 2 33 0 2 12 6 4 108 0 3 14 2 9 134 2 7 2 0 526 7 1 1 5 1 1 0 14 13 1 P gina 15 de 21 Analito Tama o de la muestra Intraserial Total Control 2 Media 5 2 5 2 DE 0 23 0 27 VR 4 4 5 2 Glucosa mg dl N 80 Control 1 Media 66 66 DE 0 76 1 03 VR 1 1 1 6 Control 2 Media 278 278 DE 2 47 3 84 VR 0 9 1 4 Potasio mmol l N 120 Control 1 Media 6 12 6 12 DE 0 32 0 32 VR 5 2 5 7 Control 2 Media 4 10 4 10 DE 0 24 0 26 VR 5 9 6 3 Sodio mmol l N 80 Control 1 Media 143 5 143 5 DE 2 28 2 28 VR 1 6 1 6 Control 2 Media 120 0 120 0 DE 2 13 2 13 VR 1 8 1 8 Bilirrubina total mg dL N 80 Nivel de referencia 1 Media 0 8 0 8 DE 0 06 0 07 VR 8 0 9 3 Nivel de referencia 2 Media 3 2 3 2 DE 0 09 0 15 VR 1 7 2 8 Nitr geno ureico N 80 sangu neo mg dl Control 1 Media 19 19 DE 0 35 0 40 VR 1 9 2 1 Control 2 Media 65 65 DE 1 06 1 18 VR 1 6 1 8 Correlaci n Se obtuvieron y analizaron muestras de sangre entera y suero anticoagulados con heparina litio en el analizador qu mico sangu neo Piccolo y con m todos de comparaci n para cloro creatina quinasa creatinina glucosa potasio sodio di xido de carbono total y nitr geno ureico Las muestras de
15. 3 43 5 12 Centers for Disease Control CDC Alpha amylase methodology survey I Atlanta US Public Health Service Nov 1975 Somogyi M Modifications of two methods for the assay of amylase Clin Chem 1960 6 23 35 Gillard BK Markman HC Feig SA Direct spectro photometric determination of amylase activity in saliva with p nitrophenyl maltoside as substrate Clin Chem 1977 23 2279 2282 Wallenfels K et al The enzymic synthesis by transglucosylation of a homologous series of glycosidically substituted malto oligosaccharides and their use as amylase substrates Carbohydrate Res 1978 61 359 368 Karmen A A note on the spectrophotometric assay of glutamic oxalacetic transaminase in human blood serum J Clin Invest 1955 34 131 133 Bergmeyer HU et al Provisional recommendations on IFCC methods for the measurement of catalytic concentrations of enzymes Part 2 IFCC method for aspartate aminotransferase Clin Chem 1977 23 887 899 Bergmeyer HU Herder M Moss DW Provisional recommendations on IFCC methods for the measurement of catalytic concentrations of enzymes Part 2 Revised IFCC method for aspartate aminotransferase Clin Chem 1978 24 720 721 Kramer B Tisdall FF A simple technique for the determination of calcium and magnesium in small amounts of serum J Biol Chem 1921 47 475 481 Clark EP Collips JB A study of the Tisdall method for the determination of blood serum calcium with suggested modification J Biol
16. 4 6 113 5 4 198 6 Beckman Creatina quinasa U l 0 967 1 194 25 9 05 47 6 813 Cobas Fara Creatinina mg dl 0 993 0 926 0 0 0 15 260 0 4 14 7 Paramax 0 987 0 866 0 1 0 16 107 0 4 7 5 Beckman Glucosa mg dl 0 987 1 009 2 8 3 89 251 72 422 Paramax 0 997 0 943 1 2 4 69 91 56 646 Beckman Potasio mmol l 0 969 0 863 0 6 0 14 58 2 0 6 8 Radidmetro KNA 2 Sodio mmol l 0 937 0 782 27 7 3 79 113 116 154 Radi metro KNA 2 Bilirrubina total mg dL 0 974 0 901 0 0 0 07 250 0 2 3 7 Paramax 0 980 1 113 0 4 0 09 91 0 1 6 4 Beckman Nitr geno ureico sangu neo 0 964 0 923 0 5 1 08 251 6 52 Paramax mg dl 0 983 0 946 0 0 0 66 92 6 38 Beckman Tabla 8 Correlaci n de tipos de muestras para CRP Para el m todo de prueba CRP el an lisis de regresi n de Deming para el tipo de muestra dio los resultados siguientes con n 21 Eje Y Eje X R Pendiente Intercepci n Plasma tratado con heparina litio Sangre entera tratada con heparina litio 1 000 0 995 0 2 Suero Sangre entera tratada con heparina litio 0 999 1 005 0 5 Suero Plasma tratado con heparina litio 0 999 1 010 0 3 Para CRP no se observaron diferencias significativas entre la sangre entera tratada con heparina litio el plasma tratado con heparina litio y el suero P gina 17 de 21 13 Simbolos ws Usar antes del LOT C digo de lote BH Consultar las instrucciones de uso O No volver a usar Secuencia de fabricaci n Representante autorizado en la Comunidad Europea
17. CLSI 1999 Clinical and Laboratory Standards Institute Quality management for unit use testing proposed guideline CLSI Document EP18 A Wayne PA CLSI 2002 Clinical and Laboratory Standards Institute Method comparison and bias estimation using patient samples approved guideline CLSI Document EP9 A2 Wayne PA CLSL 2002 2014 Abaxis Inc Todos los derechos reservados Piccolo y Piccolo Xpress son marcas registradas de Abaxis Inc Las dem s marcas comerciales y marcas de servicio son propiedad de sus respectivos titulares P gina 21 de 21
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19. I para formar un complejo calcio tinte Ca arsenazo II Complejo Ca arsenazo III Se monitorea la reacci n de punto funal a 405 nm 467 nm y 600 nm La cantidad de calcio total en la muestra es proporcional a la absorbancia Prote na C reactiva CRP Las pruebas originales para cuantificar la CRP se realizaron principalmente con fines de investigaci n y bas ndose en la metodolog a ELISA M s recientemente se han utilizado m todos inmunonefelom tricos mejorados con l tex No obstante esto requiere un nefel metro para medir la dispersi n de la luz Se han dise ado varias pruebas inmunoturbidim tricas e inmunoluminom tricas automatizadas que se pueden llevar a cabo con analizadores qu micos cl nicos convencionales El m todo utilizado por Abaxis es un inmunoensayo turbidim trico de aglutinaci n con l tex La muestra se mezcla con una suspensi n de anticuerpos monoclonales de CRP antihumanos de rat n fijada al l tex La CRP en la muestra se une a las part culas de l tex anticuerpo y se aglutina creando turbidez La dispersi n de la luz de la turbidez se utiliza como medida de CRP La turbidez se mide como un cambio en la absorbancia a 630 nm Este cambio en la absorbancia es directamente proporcional a la actividad de la CRP en la muestra Part culas de l tex anti CRP CRP gt Part culas de l tex anti CRP CRP aglutinadas Creatina quinasa CK La creatina quinas
20. Piccolo AmLyte 13 CE Para uso diagn stico in vitro y uso profesional solamente Servicio y asistencia t cnica al cliente 800 822 2947 Para solicitar el servicio de asistencia al cliente los clientes residentes fuera de EE UU deben ponerse en contacto con su representante local de Abaxis Julio de 2014 N de referencia 400 7205 Rev A 1 Indicaciones El Piccolo AmLyte 13 usado con el analizador qu mico Xpress de Piccolo est dise ado para ser usado para la determinaci n cuantitativa in vitro de alanina aminotransferasa ALT alb mina amilasa aspartato aminotransferasa AST calcio prote na c reactiva CRP creatina quinasa creatinina glucosa potasio sodio bilirrubina total y nitr geno ureico BUN en sangre entera tratada con heparina litio plasma tratado con heparina litio o suero en un mbito de laboratorio cl nico o una ubicaci n point of care El m todo Abaxis CRP no est ideado para la medici n de CRP de alta sensibilidad 2 Resumen y explicaci n de las pruebas El Piccolo AmLyte 13 y el analizador qu mico Xpress constituyen un sistema diagn stico in vitro que ayuda al m dico en el diagn stico de las siguientes enfermedades Alanina aminotransferasa ALT Enfermedades hep ticas incluidas hepatitis viral y cirrosis Alb mina Enfermedades hep ticas y renales Amilasa Pancreatitis Aspartato aminotransferasa AST Hepatopat as incluidas hepatitis e ictericia viral shock Calcio
21. a cataliza la fosforilaci n reversible de la creatina por la adenosina trifosfato ATP La reacci n de fosforilaci n se favorece por las condiciones alcalinas ptimo a pH 9 0 y la reacci n de desfosforilaci n es favorecida por las condiciones cidas 6ptimo a pH 6 5 a 37 C Los primeros m todos de medici n de la CK se basaron en la reacci n anter grada con creatina fosfato y adenosina difosfato ADP como los productos La sensibilidad de estas pruebas se demostr que era baja debido a problemas con interferencias El procedimiento de elecci n utiliza la reacci n inversa juntamente con una reacci n que produce NADPH que se relaciona de manera directa con los niveles de CK 98 El procedimiento de medici n CK usado por Abaxis es una versi n modificada del m todo de la Federaci n Internacional de Qu mica Cl nica International Federation of Clinical Chemistry IFCC Las modificaciones principales son la fracci n de volumen de la muestra el amortiguador y la temperatura Se agreg n acetilo ciste na NAC para reactivar la CK Se us magnesio como factor para la CK y la hexoquinasa Se agreg EDTA como estabilizador NAC y para la eliminaci n de varios cationes como el calcio y el hierro que inhiben a la CK Tambi n se agregaron P P di adenosina 5 penta fosfato y P gina 3 de 21 adenosina monofosfato AMP para inhibir la adenilato quinasa otra enzima de m sculo esquel tico y eritrocitos
22. al disco reactivo 8 Procedimiento Materiales suministrados e Un Piccolo AmLyte 13 PN 400 1041 una caja de discos PN 400 0041 Materiales necesarios pero no suministrados e Analizador qu mico Xpress de Piccolo e Con cada analizador qu mico Xpress de Piccolo se suministran pipetas de transferencia de muestras volumen fijo de aproximadamente 100 ul y puntas y pueden solicitarse repuestos a Abaxis e Reactivos de control disponibles comercialmente recomendados por Abaxis p ngase en contacto con el Servicio T cnico de Abaxis para solicitar materiales de control homologados y valores de referencia e Cron metro Par metros de prueba El analizador qu mico Xpress de Piccolo opera a temperaturas ambientes entre 15 C y 32 C 59 90 F El tiempo de an lisis para cada Piccolo AmLyte 13 es inferior a 14 minutos El analizador mantiene el disco reactivo a una temperatura de 37 C 98 6 F durante el intervalo de medici n Procedimiento de prueba La recolecci n completa de la muestra y los procedimientos paso por paso se detallan en el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo Calibraci n El analizador qu mico Xpress de Piccolo es calibrado por el fabricante antes de ser enviado El c digo de barras impreso en el anillo del c digo de barras proporciona al analizador los datos de calibraci n espec ficos del disco Ver el Manual del operador del analizador qu mico Xpress de Piccolo Control de calida
23. as t cnicas que usan la creatinina iminohidrolasa Creatina amidinohidrolasa Creatinina HO Creatina Creatina amidinohidrolasa Creatina HO gt Sarcosina Urea Sarcosina oxidasa Sarcosina HO 0 _____ y Glicina formaldeh do H202 Peroxidasa H 0 TBHBA 4 AAP Colorante rojo de quinoneimina H O Se utilizan dos cubetas para determinar la concentraci n de creatinina en la muestra La creatina end gena se mide en la cubeta de referencia que es restada de la creatina end gena combinada y la creatina formada a partir de las reacciones enzim ticas en la cubeta de prueba Una vez eliminada la creatina end gena de los c lculos la concentraci n de creatinina es proporcional a la intensidad del color rojo producido El criterio de valoraci n del fin de la reacci n se mide como la diferencia en la absorbancia entre 550 nm y 600 nm eGFR calculada La creatinina s rica se mide de forma rutinaria como indicador de la funci n renal Debido a que la edad el sexo y la raza influyen en las concentraciones de creatinina no es posible detectar la nefropat a cr nica NC tan solo mediante la creatinina s rica As pues el National Kidney Disease Education Program Programa Nacional de Educaci n sobre la Nefropat a recomienda encarecidamente que los laboratorios informen de forma rutinaria de la tasa de filtraci n glomerular estimada eGFR cuando se mida la creatinina s rica en
24. cia entre 340 nm y 405 nm se debe a la conversi n de NADH en NAD y es directamente proporcional a la cantidad de ALT en la muestra Alb mina ALB Los primeros m todos usados para medir la alb mina incluyen t cnicas de fraccionamiento y el contenido en tript fano de elobulinas Estos m todos son de realizaci n complicada y carecen de alta especificidad Hay dos t cnicas inmunoqu micas consideradas m todos de referencia pero son caras y llevan mucho tiempo Los m todos usados m s frecuentemente para medir la alb mina consisten en t cnicas de fijaci n de tinte El verde de bromocresol BCG es el tinte m s com nmente usado entre los m todos de fijaci n de tinte pero puede sobreestimar la concentraci n de alb mina especialmente en el extremo inferior del intervalo normal La p rpura de bromocresol BCP es el m s espec fico de los tintes utilizados Cuando se liga con la alb mina la p rpura de bromocresol BCP cambia de color de amarillo a azul La absorbancia m xima cambia con el cambio de color Surfactantes BCP alb mina gt Complejo BCP alb mina pH cido La alb mina ligada es proporcional a la concentraci n de alb mina en la muestra Es una reacci n de punto final que se mide en t rminos de la diferencia de absorbancia entre 600 nm y 550 nm Amilasa AMY Se han desarrollado alrededor de 200 pruebas diferentes para medir la amilasa La mayor a de los proc
25. cia entre la medici n inicial y final de la absorbancia Nitr geno ureico sangu neo BUN La urea puede ser medida tanto directa como indirectamente La reaci n de diacetil monoxima el nico m todo directo para medir la urea se utiliza con frecuencia pero emplea reactivos peligrosos Los m todos indirectos miden amon aco creado a partir de la urea el uso de la enzima ureasa aument la especificidad de estas pruebas El amon aco es cuantificado por una variedad de m todos incluida la nesslerizaci n valoraci n cida la t cnica de Berthelot y reacciones enzim ticas acopladas Sin embargo los procedimientos de Berthelot catalizados son err ticos cuando se mide el amon aco Las reacciones de enzimas acopladas son r pidas tienen una elevada especificidad por el amon aco y son usadas con frecuencia Una de estas reacciones fue propuesta como un posible m todo de referencia En la reacci n de acoplamiento de enzimas la ureasa hidroliza la urea en amon aco y di xido de carbono Al combinarse el amon aco con a cetoglutarato y nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADH la enzima glutamato deshidrogenasa GLDH oxida la NADH en NAD Ureasa Urea HO gt 2NH CO GLDH NH a Oxoglutarato NADH gt L Glutamato HO NAD El ndice de cambio de la diferencia de absorbancia entre 340 nm y 405 nm se debe a la conversi n de NADH en NAD y es directamente propor
26. cional a la cantidad de urea en la muestra 4 Principios de la operaci n Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo para obtener informaci n sobre los principios y limitaciones del procedimiento 5 Descripci n de los reactivos Reactivos Cada PiccoloAmL yte 13 contiene soportes s lidos reactivos espec ficos para pruebas secas descritos a continuaci n Se incluye un reactivo de referencia de muestra seco compuesto de amortiguador surfactantes excipientes y estabilizantes en cada disco para usar en el c lculo de las concentraciones de alanina aminotransferasa ALT alb mina ALB amilasa AMY aspartato aminotransferasa AST calcio CA prote na c reactiva CRP creatina quinasa CK glucosa GLU potasio K sodio NA y nitr geno ureico sangu neao BUN En el disco se incluye una muestra de referencia dedicada para calcular la concentraci n de creatinina CRE y bilirrubina total TBIL Cada disco contiene un diluyente que consta de surfactantes y estabilizantes Tabla 1 Reactivos Componente Cantidad Disco 2 4 6 Tribomo 3 cido hidroxibenzoico TBHBA 188 ug 2 cloro 4 nitrofenil a D maltotriosida CNPG3 52 5 ug 4 7 13 16 21 Pentaoxa 1 10 diazabiciclo 8 8 5 trisocosano Kryptofix 221 84 ug 4 Aminoantipirina clorhidrato 13 ug Adenosina 5 difosfato 38 ug Adenosina 5 monofosfato 33 ug Adenosina 5 trifosfato 11 ug Amilasa 0 0357 U L tex recubierto de CRP antihumano
27. ctive protein methods implications for clinical and epidemiological applications Part 2 Clin Chem 2001 47 418 425 Kuby SA Noda L and Lardy HA Adenosinetriphosphate creatine transphosphorylase J Biol Chem 1954 209 191 201 Tanzer MI And Gilvarg C Creatine and creatine kinase measurement J Biol Chem 1959 234 3201 3204 Nuttall FQ And Wedin DS A simple rapid colorimetric method for determination of creatine kinase activity J Lab Clin Med 1966 68 324 332 Oliver IT A spectrophotometric method for the determination of creatine phosphokinase and myokinase Biochem J 1955 61 116 122 Rosalki SB An improved procedure or serum creatine phosphokinase determination J Lab Clin Med 1967 69 696 705 Szasz G Gruber W and Bernt E Creatine kinase in serum I Determination of optimum reaction conditions Clin Chem 1976 22 650 656 Expert Panel On Enzymes Committee Of Standards IFCC 1979 Approval Recommendations Of IFCC Methods For The Measurement Of Catalytic Concentrations Of Enzymes Part 1 General Considerations Clin Chim Acta IFCC Sections 98 163 174 Committee On Enzymes Of The Scandinavian Society For Clinical Chemistry And Clinical Physiology 1976 Recommended Method For The Determination Of Creatine Kinase In Blood Scand J Clin Lab Invest 36 711 723 Knoll VE et al Spezifische kreatininbetimmung im serum Z Klin Chem Klin Biochem 1970 8 582 587 Haeckel R et al Simplified determinations of the
28. d Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo para obtener informaci n m s detallada sobre la realizaci n registro interpretaci n y extrapolaci n de los resultados de control 9 Resultados El analizador qu mico Xpress de Piccolo calcula autom ticamente e imprime las concentraciones de analitos en la muestra Los detalles de los c lculos del criterio de valoraci n y velocidad de la reacci n se encuentran en el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo En el Manual del usuario se detalla tambi n la interpretaci n de los resultados los cuales se imprimen en cintas de resultados en rollo disponibles en Abaxis La parte posterior de las cintas de resultados en rollos es adhesiva para facilitar su colocaci n en los archivos del paciente 10 Limitaciones del procedimiento Las limitaciones generales del procedimiento se detallan en el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo e FEl nico anticoagulante recomendado para uso con el sistema qu mico Xpress de Piccolo es heparina litio Abaxis realiz estudios demostrando que el EDTA fluoruro oxalato y cualquier anticoagulante que contenga iones de amon aco interferir con por lo menos un reactivo contenido en el Piccolo AmLyte 13 e Las muestras con hematocritos que superan el 62 65 del volumen concentrado de eritrocitos una fracci n de volumen de 0 62 0 65 pueden dar resultados falsos Las muestras con un hematoc
29. difosfato ADP La glucosa 6 fosfato deshidrogenasa G 6 PDH cataliza la reacci n de G 6 P en 6 fosfogluconato y la reducci n de nicotinamida adenina dinucle tido NAD a NADH Hexoquinasa Glucosa ATP _ _ G 6 P ADP G 6 PDH G 6 P NAD _ 6 fosfogluconato NADH H Potasio K Se han desarrollado m todos espectrofotom tricos que permiten la medici n de la concentraci n del potasio con instrumentaci n est ndar de qu mica cl nica El m todo enzim tico Abaxis se basa en la activaci n de la piruvato quinasa con potasio y muestra una linealidad excelente y una susceptibilidad despreciable a las sustancias end genas gt La interferencia de los iones sodio y amonio se reduce al m nimo al a adir Kryptofix y glutamina sintetasa respectivamente En la reacci n de acoplamiento de enzimas la piruvatoquinasa PK desfosforila al fosfoenolpiruvato PEP para formar piruvato La lactatodeshidrogenasa LDH cataliza la conversi n de piruvato a lactato Al mismo tiempo NADH se oxida a NAD El rango de cambio en la diferencia de absorbancia entre 340 y 405 nm se debe a la conversi n de NADH en NAD y es directamente proporcional a la cantidad de potasio en la muestra K PK ADP PEP _ Piruvato ATP LDH Piruvato NADH H gt _Lactato NAD Sodio NA Se han desarrollado m t
30. edimientos utilizan una soluci n de polisac ridos tamponada pero emplean distintas t cnicas de detecci n Los m todos viscosim tricos carecen de precisi n y exactitud mientras que los m todos turbidim tricos y yodom tricos son dif ciles de normalizar Los m todos sacarog nicos y cromol ticos se utilizan com nmente La t cnica cl sica para medir la amilasa es un m todo sacarog nico pero es dif cil y lleva mucho tiempo Recientemente se han desarrollado m todos cromol ticos que utilizan p nitrofenil glucdsidos como sustratos Estos ensayos tienen mayor especificidad para la amilasa pancre tica que para la amilasa salival y se monitorean f cilmente El el m todo Piccolo el sustrato 2 cloro p nitrofenil a D maltotriosida CNPG3 reacciona con una a amilasa en la muestra del paciente liberando 2 cloro p nitrofenol CNP La liberaci n de CNP crea un cambio de color a Amilasa CNPG3 _ _ CNP D Maltotriosida La reacci n se mide bicrom ticamente a 405 nm y 500 nm El cambio de absorbancia debido a la formaci n de CNP es directamente proporcional a la actividad de la a amilasa en la muestra P gina 2 de 21 Aspartato aminotransferasa AST La prueba de la aspartato aminotransferasa AST se basa en el m todo de velocidad de Karmen de acuerdo con la modificaci n de Bergmeyer El m todo de referencia actual de la Federaci n Internacional de Qu mica Cl nica IFCC utiliza la t
31. ido desde que el paciente ingiri alimentos y el tipo de muestra obtenida de l Para determinar los resultados de glucosa con precisi n deben obtenerse muestras de un paciente que haya ayunado por lo menos durante 12 horas Las concentraciones de glucosa disminuyen aproximadamente 5 12 mg dl por hora en muestras no centrifugadas almacenadas a temperatura ambiente e Larefrigeraci n de muestras de sangre entera puede provocar cambios significativos en las concentraciones de aspartato aminotransferasa creatinina y glucosa La muestra puede separarse en plasma y suero as como almacenarse en tubos de ensayo con tapa a 2 8 C 36 46 F si no se analiza en un plazo de 60 minutos e Para las muestras de sangre o plasma use s lo tubos de recolecci n de muestras tratados con heparina litio tap n verde Para las muestras de suero use tubos para obtenci n de muestras sin aditivo tap n rojo o tubos separadores de suero tap n rojo o rojo negro e Los resultados de la bilirrubina total pueden sufrir efectos adversos de la fotodegradaci n Las muestras de sangre entera que no se usan inmediatamente deben guardarse en la oscuridad durante no m s de 60 minutos Si no se puede P gina 8 de 21 analizar la muestra dentro de ese per odo debe separarse en plasma o suero y guardarse en una probeta tapada en la oscuridad a bajas temperaturas e Comience la prueba en los 10 minutos siguientes a la transferencia de la muestra
32. los pacientes mayores de 18 a os La comunicaci n de forma rutinaria de la eGFR junto con todas las determinaciones de creatinina s rica permite a los laboratorios ayudar a identificar a los individuos con funci n renal reducida y contribuye a facilitar la detecci n de la NC Los valores calculados de la eGFR lt 60 mL min generalmente est n asociados con un mayor riesgo de resultados adversos de la NC Piccolo calcula la eGFR usando la edad el sexo y la raza del paciente El m todo de Piccolo para la creatinina es comparable con el m todo de referencia para la creatinina IDMS de forma que se puede utilizar la siguiente forma de la ecuaci n MDRD para el c lculo de la eGFR P gina 4 de 21 GFR mL min 1 73 m7 175 x Sa 1 x edad x 0 742 si es mujer x 1 212 si es afroamericano Glucosa GLU Las primeras mediciones de la concentraci n de glucosa fueron realizadas mediante m todos de reducci n del cobre como Folin Wu y Somogyi Nelson La falta de especificidad en las t cnicas de reducci n del cobre llev al desarrollo de procedimientos cuantitativos con las enzimas hexoquinasa y glucosa oxidasa La prueba de la glucosa incorporada en el AmLyte 13 ES a a versi n modificada del m todo de la hexoquinasa que se propuso como la base para el m todo de referencia de la glucosa La reacci n de glucosa con adenosina trifosfato ATP catalizada por hexoquinasa HK resulta en glucosa 6 fosfato G 6 P y adenosina
33. nefrina 1 Eritromicina 10 Glutationa 30 Hidroclorotiazida 7 5 Ibuprofeno 50 Isoniacida 4 Cetoprofen 50 L dopa 5 Lidocaina 1 Lactato de litio 84 Meticilina 100 Metotrexato 0 5 Metronidazol 5 Nafcilina 1 Nitrofurantoina 20 Oxacilina 1 Oxaloacetato 132 Penicilina G 100 Fenito na 5 5 Difenilhidantoina 3 Prolina 4 Rifampina 0 5 Acido salic lico 50 Sulfadiazina 150 Sulfanilamida 50 Teofilina 20 Tabla 3 Las siguientes sustancias mostraron un desvio superior al 10 en el resultado para una muestra en limites normales Concentraci n que de interferencia produce una interferencia observado superior al 10 Alanina aminotransferasa ALT cido asc rbico 20 11 aum Oxaloacetato 132 843 aum Alb mina ALB Acetoacetato 102 18 dism Ampicilina 30 12 dism Cafeina 10 14 dism Cloruro de calcio 20 17 dism Cefalotina Keflin 400 13 aum Ibuprofeno 50 28 aum Pagina 11 de 21 Tabla 3 Las siguientes sustancias mostraron un desvio superior al 10 en el resultado para una muestra en limites normales continuaci n Concentraci n que de interferencia produce una interferencia observado superior al 10 Cetoglutarato 5 11 dism Nitrofuranto na 20 13 dism Prolina 4 12 aum Sulfalazina 10 14 dism Sulfanilamida 50 12 dism Teofilina 20 11 dism Prote na C reactiva Glutationa 30 13 dism Isoniacida 4 16 dism L dopa 5 28 dism Oxaloacetato 132 57 dism Creatina quinasa
34. odos colorim tricos y enzim ticos que permiten la medici n de la concentraci n de sodio mediante instrumentaci n qu mica cl nica est ndar 957 En la reacci n enzim tica de Abaxis la B galactosidasa es activada por el sodio presente en la muestra La enzima activada cataliza la reacci n de o nitrofenilo B D galactopiranosida ONPG a o nitrofenol y galactosa Na ONPG gt gt O Nitrofeno Galactosa P Galactosidasa Bilirrubina total TBIL T picamente los niveles de bilirrubina total se han medido con pruebas que emplean cido sulfan lico diazotado Se ha desarrollado un m todo m s nuevo y m s espec fico usando la enzima bilirrubina oxidasa Adem s de usar el m todo m s espec fico para la prueba de bilirrubina total en los analizadores Piccolo se minimiza la fotodegradaci n del analito porque se puede realizar la prueba inmediatamente despu s de obtener la muestra En el procedimiento enzim tico la bilirrubina se oxida por la bilirrubina oxidasa en biliverdina Bilirrubina oxidasa Bilirrubina O _ _ Biliverdina H O P gina 5 de 21 La bilirrubina se cuantifica como la diferencia de absorbancia entre 467 nm y 550 nm La absorbancia inicial de esta reacci n de punto final se determina a partir del blanco en cubeta y la absorbancia final se obtiene de la cubeta de prueba de bilirrubina La cantidad de bilirrubina en la muestra es proporcional a la diferen
35. of bilirubin oxidase Clin Chem 1986 32 329 332 Fales FW Urea in serum direct diacetyl monoxime method In Selected Methods of Clinical Chemistry vol 9 Faulkner WR Meites S eds Washington DC American Association for Clinical Chemistry 1982 365 373 Van Slyke et al A permanent preparation of urease and its use in the determination of urea J Biol Chem 1914 19 211 228 Fawcett JK et al A rapid and Precise method for the determination of urea J Clin Pathol 1960 13 156 159 Chaney et al Urea and ammonia determinations Clin Chem 1962 8 130 132 Talke H et al Enzymatische Harnstoffbestimmung in Blut and Serum im optischen Test nach Warburg Klin Wochensch 1965 43 174 175 Hallett et al Reduced nicotinamide adenine dinucleotide coupled reaction for emergency blood urea estimation Clin Chim Acta 1971 35 33 37 Patton et al Spectrophotometric and kinetics investigation of the Berthelot reaction for the determination of ammonia Anal Chem 1977 49 464 469 Sampson EJ et al A coupled enzyme equilibrium method for the measuring urea in serum optimization and evaluation of the AACC study group on Urea Candidate reference method Clin Chem 1980 26 816 826 Scott M G Electrolytes and Blood Gases In Tietz Textbook of Clinical Chemistry 3raed Burtis CA Ashwood ER eds Philadelphia WB Saunders Company 1999 1058 1059 Clinical and Laboratory Standards Institute Procedures for the handling and processing
36. que reacciona con los sustratos utilizados para medir la CK La creatina quinasa cataliza la formaci n de creatina y ATP a partir de creatina fosfato y ADP a pH 6 7 Con hexoquinasa como catalizador ATP reacciona con D glucosa para formar ADP y d glucosa 6 fosfato G 6 P que reacciona con nicotinamida adenina dinucle tido fosfato NADP en presencia de glucosa 6 fosfato deshidrogenasa G 6 PDH para producir G 6 P y NADPH CK Creatina fosfato ADP Creatina ATP M g Hexoquinasa ATP D glucoa ADP G 6 P G 6 PDH G 6 P NADP _ 6 fosfogluconato NADPH H La formaci n de NADPH se mide como cambio en la absorbancia a 340 nm en relaci n con 405 nm Este cambio en la absorbancia es directamente proporcional a la actividad de la creatina quinasa en la muestra Creatinina CRE El m todo Jaffe presentado en 1886 sigue siendo el m todo usado con mayor frecuencia para la determinaci n de los niveles de creatinina en la sangre El m todo de referencia actual combina el uso de tierra de fuller floridina con la t cnica de Jaffe para aumentar la especificidad de la reacci n Se desarrollaron m todos enzim ticos que son m s espec ficos para la creatinina que las distintas modificaciones de la t cnica de Jaffe Los m todos que utilizan la enzima creatinina amidohidrolasa eliminan los problemas de la interferencia del i n amon aco que se encuentra en l
37. rat n 268 8 ug CRP antihumano cabra 0 5 ug Ascorbato oxidasa Cucurbita ssp 0 3 U Acetato de calcio 25 2 ug cido c trico sal tris dica 567 ug P gina 6 de 21 Tabla 1 Reactivos continuaci n Componente Creatina amidinohidrolasa Actinobacillus spp Creatina fosfato Creatinina amidohidrolasa Pseudomonas spp Etilenglicol bis B aminoetil ter N N N N cido tetra ac tico EGTA cido etilendiaminotetraac tico EDTA Glucosa Glucosa 6 fosfato deshidrogenasa G6PDH levadura Glutamato deshidrogenasa Glutamina sintetasa Hexoquinasa levadura Imidazol Lactato deshidrogenasa coraz n de pollo Acetato de magnesio Sulfato de magnesio Malato deshidrogenasa coraz n porcino N Acetil ciste na o Nitrofenil B D galactopiranosida ONPG P1 P5di adenosina 5 pentafosfato Peroxidasa r bano Fosfoeno piruvato Fosfoenolpiruvato carboxilasa Ferrocianuro de potasio Piruvato quinasa Sarcosina oxidasa microorganismos Colato de sodio Laurilsulfato s dico BSA con bloqueo de sulfhidrilos B Nicotinamida adenina dinucle tido NAD B Nicotinamida adenina dinucle tido reducida NADH B Nicotinamida adenina dinucle tido fosfato NADP Ureasa haba blanca Acido a cetoglut rico B Galactosidasa Amortiguadores surfactantes excipientes y conservantes Advertencias y precauciones e Para uso diagn stico in vitro Cantidad Disco 3U 122 ug 1U 4 ug 191 1 ug 58 ug 0 1 U
38. reactivos Los discos de reactivo pueden usarse inmediatamente despu s de retirarse del refrigerador sin calentarlos previamente No permita que los discos sellados en sus bolsas de aluminio permanezcan a temperatura ambiente m s de 48 horas antes del uso Abra la bolsa de aluminio sellada retire el disco y use de acuerdo con las instrucciones del Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo Deseche los discos no usados transcurridos 20 minutos de la apertura de la bolsa Almacenamiento Almacene los discos de reactivo en sus bolsas selladas a 2 8 C 36 46 F No exponga los discos abiertos o sin abrir a la luz solar directa o a temperaturas superiores a los 32 C 90 F Los discos de reactivo pueden ser usados hasta la fecha de caducidad indicada en el paquete La fecha de caducidad tambi n aparece codificada en el c digo de barras impreso en el anillo del c digo de barras Si los reactivos han caducado aparecer un mensaje de error en la pantalla del analizador qu mico Xpress de Piccolo Indicaciones de inestabilidad deterioro del disco reactivo Una bolsa rasgada o rota puede permitir que la humedad llegue al disco sin usar y afecte de manera negativa la eficacia del reactivo No use discos de bolsas da adas 6 Instrumento Consulte el Manual del usuario del analizador qu mico Xpress de Piccolo para recibir informaci n completa sobre el uso del analizador 7 Obtenci n y preparaci n de las muestras En la
39. rito elevado pueden ser analizadas como hemolizadas Estas muestras pueden ser centrifugadas para obtener plasma y luego realizar la prueba con un nuevo disco reactivo e La CRP es una prote na de fase aguda y se eleva de forma no especifica en respuesta a la inflamaci n La variaci n intraindividual de la prote na c reactiva es significativa 30 a 60 y debe tomarse en cuenta al interpretar valores Puede P gina 9 de 21 ser necesario realizar mediciones en serie para estimar la media real de la protefna c reactiva en cualquier individuo concreto e Los anticuerpos HAMA anticuerpos antirrat n humanos hasta 115 ng mL no causan interferencia Las muestras de pacientes que han recibido preparados de anticuerpos monoclonales de rat n para diagn stico o terapia pueden contener HAMA e El factor reumatoide hasta una concentraci n de 644 U mL no causa interferencia e Fn este ensayo no se observ un efecto prozona hook effect a concentraciones de CRP de hasta 1 000 mg L e Todo resultado para una prueba particular que supere los valores del an lisis deber analizarse por otro m todo de prueba homologada o ser enviado a un laboratorio de referencia No diluya la muestra ni vuelva a analizarla en el analizador qu mico Xpress de Piccolo Advertencia Pruebas exhaustivas del sistema qu mico Xpress de Piccolo han demostrado que en casos muy raros la muestra aplicada al disco reactivo podr a no fluir con facilidad a la c
40. s de electrolitos fueron calculados sobre la base del 95 del intervalo de referencia de los valores combinados totales obtenidos de los sujetos de referencia y el rango de la CRP se bas en la transferabilidad demostrada de los intervalos de referencia para el Beckman Estos intervalos son proporcionados solamente como gu a Se recomienda que su consultorio o instituci n establezca los rangos normales para su poblaci n de pacientes en particular Tabla 4 Intervalos de referencia de Piccolo Analito Unidades comunes Unidades SI Alanina aminotransferasa ALT 10 47 UN 10 47 UN Alb mina ALB 3 3 5 5 g dL 33 55 g L Amilasa AMY 14 97 U L 14 97 U L Aspartato aminotransferasa AST 11 38 U L 11 38 U L Calcio CA 8 0 10 3 mg dL 2 00 2 58 mmol L Prote na C reactiva lt 7 5 mg l lt 7 5 mg l Creatina quinasa mujer 30 190 U L 30 190 UA Creatina quinasa var n 39 380 U I 39 380 U I Creatinina 0 6 1 2 mg dl 53 106 umol l Glucosa 73 118 mg dl 4 1 6 6 mmol l Potasio 3 6 5 1 mmol l 3 6 5 1 mmol l Sodio 128 145 mmol l 128 145 mmol l Bilirrubina total TBIL 0 2 1 6 mg dL 3 4 27 4 umol L Nitr geno ureico sangu neo BUN 7 22 mg dl 2 5 7 9 mmol l 12 Caracter sticas de eficacia Linealidad La qu mica para cada analito es lineal a lo largo del intervalo din mico enumerado a continuaci n cuando el analizador qu mico Xpress de Piccolo se opera de acuerdo con el procedimiento recomendado consulte el manual del usuario del analizador
41. s de los estudios de precisi n se muestran en la Tabla 6 Tabla 6 Precisi n Analito Tama o de la muestra Intraserial Total Alanina aminotransferasa U I N 80 Nivel de referencia 1 Media 21 21 DE 2 76 2 79 VR 13 4 13 5 Nivel de referencia 2 Media 52 52 DE 2 70 3 25 VR 52 6 2 Alb mina g dL N 80 Nivel de referencia 1 Media 5 6 5 6 DE 0 09 0 11 VR 1 7 2 1 Nivel de referencia 2 Media 3 7 3 7 DE 0 07 0 11 VR 2 0 2 9 Amilasa U L N 80 Nivel de referencia 1 Media 46 46 DE 2 40 2 63 VR 5 2 5 7 Nivel de referencia 2 Media 300 300 DE 11 15 11 50 VR 3 7 3 8 Aspartato aminotransferasa U I N 80 Nivel de referencia 1 Media 47 47 DE 0 98 1 84 VR 2 1 3 9 Pagina 14 de 21 Analito Nivel de referencia 2 Media DE VR Calcio mg dL Nivel de referencia 1 Media DE VR Nivel de referencia 1 Media DE VR Prote na C reactiva mg l Suero 1 Media DE VR Suero 2 Media DE VR Suero 3 Media DE VR Prote na C reactiva mg l Plasma 1 Media DE VR Plasma 2 Media DE VR Control 1 Media DE VR Control 2 Media DE VR Creatina quinasa U l Control 1 Media DE VR Control 2 Media DE VR Creatinina mg dL Control 1 Media DE VR Tama o de la muestra N 120 N 80 Intraserial 145 1 83 1 3 8 6 0 21 2 4 11 8 0 39 3 3 8 3 0 70 8 4 8 1 0 49 6 1 8 8 0 54 6 2 34 5 1 04 3 0 105 5 2 06 1 9 33 0 1 2
42. sos de trauma muscular extremo o niveles muy elevados de creatina quinasa CK el sistema Piccolo puede recuperar un valor de potasio K falsamente elevado En tales casos ser necesario confirmar los resultados de potasio inesperadamente elevados utilizando otra metodolog a e P ngase en contacto con el Servicio T cnico de Abaxis para obtener informaci n acerca de los niveles m ximos de sustancias end genas Efectos de las sustancias ex genas y terap uticas Se seleccionaron treinta y cinco sustancias ex genas y terap uticas como interferentes potenciales para los m todos de prueba de Abaxis sobre la base de las recomendaciones de Young Se define a la interferencia significativa como un desv o superior al 10 en el resultado para una muestra en l mites normales Las mezclas de suero humano fueron enriquecidas con concentraciones conocidas de los f rmacos o qu micos y luego analizadas Consulte la Tabla 2 para ver una lista de las sustancias ex gena y terap uticas evaluadas Consulte la TABLA 3 para ver una lista de los analitos donde se observ interferencia P gina 10 de 21 Tabla 2 Sustancias ex genas y terap uticas evaluadas Concentraci n m xima probada Interferente potencial mg dL a menos que se indique lo contrario Paracetamol 100 Acetoacetato 102 cido acetilsalic lico 50 Ampicilina 30 cido asc rbico 3 Cafe na 10 Cefalotina Keflin 400 Cloranfenicol 100 Cimetidina 16 Dopamina 13 Epi
43. t al Enzymatic determination of sodium potassium and chloride in abnormal hemolyzed icteric lipemic paraprteinemic or uremic serum samples compared with indirect determination with ion selective electrodes Clin Chem 1994 40 1528 1531 Helgerson RC et al Host guest Complexation 50 Potassium and sodium ion selective chromogenic ionophores J Amer Chem Soc 1989 111 6339 6350 Kumar A et al Chromogenic ionophere based methods for spectrophotometric assay of sodium and potassium in serum and plasma Clin Chem 1988 34 1709 1712 Berry MN et al Enzymatic determination of sodium in serum Clin Chem 1988 34 2295 2298 Malloy HT Evelyn KA The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter J Biol Chem 1937 119 481 490 Meites S Bilirubin direct reacting and total modified Malloy Evelyn method In Selected Methods of Clinical Chemistry vol 9 Faulkner WR Meites S eds Washington DC American Association for Clinical Chemistry 1982 119 124 58 P gina 20 de 21 14 Bibliograf a continuaci n 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 Murao S Tanaka N A new enzyme bilirubin oxidase produced by Myrothecium verrucaria MT 1 Agric Biol Chem 1981 45 2383 2384 Osaki S Anderson S Enzymatic determination of bilirubin Clin Chem 1984 30 971 Abstract Perry B et al of total bilirubin by use
44. to con el Servicio T cnico de Abaxis Sensibilidad l mites de detecci n El l mite inferior del intervalo informable din mico para cada analito es alanina aminotransferasa 5 U l alb mina 1 g dL 10 g L amilasa 5 U L aspartato aminotransferasa 5 U l calcio 4 0 mg dL 1 0 mmol L prote na c reactiva 5 0 mg L creatina quinasa 5 U l creatinina 0 2 mg dl 18 umol 1 glucosa 10 mg dl 0 6 mmol l potasio 1 5 mmol l sodio 110 mmol l bilirrubina total 0 1 mg dL 1 7 umol L y nitr geno ureico sangu neo 2 0 mg dl 0 7 mmol l Precisi n Se condujeron estudios de precisi n de acuerdo con las recomendaciones CLSI EP5 A g con modificaciones sobre la base de CLSI EP18 A para dispositivos usados en unidad Los resultados para la precisi n intraserial y total se determinaron mediante dos niveles de materiales de referencia disponibles comercialmente Los estudios utilizaron m ltiples instrumentos Se utilizaron dos lotes de discos reactivos para los electrolitos y uno para la prote na c reactiva Las pruebas de creatina quinasa creatinina glucosa sodio y nitr geno ureico fueron realizadas en un centro las de potasio se realizaron en dos centros a lo largo de 20 d as la prueba de prote na c reactiva suero 1 control 1 y control 2 se realizaron en dos centros a lo largo de cinco d as Los sueros 2 y 3 y los plasmas 1 y 2 de prote na C reactiva se analizaron en un solo centro durante un per odo de cinco d as Los resultado
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