hierro color líquido
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1. m nima concentraci n de hierro que se puede determinar cuantitativamente con preci si n y exactitud aceptables con el m todo de Fer color AA l quida es de 4 ug dl PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Para las instrucciones de programaci n debe consultarse el Manual del Usuario del analizador en uso Para la calibraci n debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab de acuer do alos requerimientos del analizador PRESENTACION 120 ml 1 x 100 ml Reactivo A 1 x 20 ml Reactivo B C d 1492360 120 ml 2 x 50 ml Reactivo A 2x 10 ml Reactivo B C d 1009285 120 ml 2 x 50 ml Reactivo A 2 x 10 ml Reactivo B C d 1009336 BIBLIOGRAFIA 1 C S H Am J Clin Path 56 4 543 545 1971 Young D S Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests AACC Press 5th ed 2000 Burtis C A Ashwood E R Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry 5 edici n 2001 Imbert Bismut et al Clin Chem 47 11 2059 2061 2001 Tietz N W Rinker A D Morrison S R Clin Chem 40 4 546 551 1994 Artiss J D et al Clin Biochem 14 6 311 315 1981 Smith F E Clin Biochem 17 306 310 1984 NTP National Toxicology Program Departmen of Health and Human Service Report of Carcinogens 2005 CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute ex NCCLS Protocols EP15 A 2001 EP6 A 2003 EP17 A 2004 SIMBOLOS Los siguientes s mbolos se utilizan en todos los ki2. C LINEA LIQUIDA Fer color AA M todo colorim trico directo para la determinaci n de hierro en suero o plasma SIGNIFICACION CLINICA El hierro se distribuye en el organismo de diferentes mane ras incluyendo hemoglobina hierro tisular y mioglobina El transporte de hierro de un rgano a otro se realiza mediante una prote na transportadora llamada apotransferrina El com plejo que forma con el hierro se conoce como transferrina La ferritina localizada en casi todas las c lulas del cuerpo constituye una reserva de hierro disponible para la formaci n de la hemoglobina y otras prote nas que contienen el grupo hemo La absorci n de hierro ocurre principalmente en el duo deno Tanto la ferritina como la transferrina est n presentes en las c lulas de la mucosa intestinal y juntas regulan la absorci n de hierro Los mayores des rdenes del metabolismo de hierro se rela cionan con su deficiencia o exceso sin embargo se han ob servado alteraciones en muchas otras enfermedades inclu yendo anemia enfermedades cardiovasculares hepatitis cr nica enfermedades renales e infecciones La anemia por p rdida de hierro representa uno de los trastor nos org nicos m s frecuentes especialmente en ni os mu jeres j venes embarazadas y ancianos Tambi n las lceras g stricas o duodenales y carcinomas de est mago constitu yen causas de anemia ferrop nica Por el contrario el exceso de hierro se asocia con otr
3. c ridos no interfieren has ta 1000 mg dl utilizando t cnica autom tica y 250 mg dl con t cnica manual Si bien hem lisis ligeras no interfieren con este m todo el 861272500 02 P g l de 6 International Committee for Standardization in Hematology ICSH recomienda el uso de suero libre de hem lisis Referirse a la bibliograf a de Young para los efectos de las drogas en el presente m todo d Estabilidad e instrucciones de almacenamiento el suero o plasma heparinizado pueden conservarse una sema na en refrigerador 2 10 C o hasta un a o a 20 C MATERIAL REQUERIDO no provisto Espectrofot metro o analizador autom tico Micropipetas y pipetas para medir los vol menes indicados Tubos o cubetas espectrofotom tricas Cron metro CONDICIONES DE REACCION Longitud de onda 600 nm Temperatura de reacci n temperatura ambiente lt 25 C Tiempo de reacci n 5 minutos Volumen de muestra 200 ul Volumen total de reacci n 1 4 ml PROCEDIMIENTO En tres tubos marcados B Blanco de Reactivos S Stan dard y D Desconocido colocar B D Agua bidestilada 200 ul Standard Muestra 200 ul Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml Mezclar Leer la absorbancia del tubo D Blanco de Suero BS en espectrofot metro a 600 nm llevando a cero el apa rato con agua Luego agregar Reactivo B 200 ul 200 ul 200 ul Mezclar inmediatamente Volver a leer cada tubo a los 5 minutos llevando el aparato a ce
4. ctivo A contiene tiourea Estudios experimentales rea lizados con esta droga en animales han evidenciado un posi ble efecto carcinog nico Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de an lisis cl nicos Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos A y B son estables en refrigerador 2 10C hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja Standard es estable a temperatura ambiente lt 25 C hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y o Stan dard indican contaminaciones ocasionales agua material de vidrio etc Un aumento en el valor de los Blancos indicar una contami naci n con hierro MUESTRA Suero o plasma heparinizado a Recolecci n el paciente debe estar en ayunas y las ex tracciones deben practicarse siempre a la misma hora prefe rentemente de ma ana ya que las fluctuaciones fisiol gicas son significativas durante el d a b Aditivos en caso de utilizar plasma como muestra debe usarse heparina como anticoagulante c Sustancias interferentes conocidas no se observan in terferencias por hemoglobina hasta 300 mg dl bilirrubina con jugada hasta 12 mg dl bilirrubina no conjugada hasta 35 mg dl y heparina hasta 50 Ul ml Los trigli
5. naciones del agua y los reactivos con hie rro El Blanco de Reactivos procesado de acuerdo al Ma nual de Instrucciones no debe ser superior a 0 05 D O debiendo ser adem s despreciable la contribuci n del agua en dicho Blanco Para ello se recomienda el uso de agua de calidad comprobada El Reactivo A puede adquirir un leve color amarillo con el transcurso del tiempo que no afecta su reactividad Limpieza del material todo el material de laboratorio em pleado debe estar libre de hierro para ello debe ser sumer gido durante al menos durante 6 horas en HCI 10 elimi nando la acidez mediante numerosos lavados con agua li bre de hierro Todo el material debe ser empleado exclusiva mente para la determinaci n de hierro PERFORMANCE a Reproducibilidad procesando de acuerdo al documento EP15 A del CLSI ex NCCLS se obtuvo lo siguiente Precisi n intraensayo n 20 Nivel D S C V 61 84 ug dl 0 87 ug dl 1 40 116 89 ug dl 0 46 ug dl 0 39 236 31 ug dl 0 72 ug dl 0 31 Precisi n total n 20 Nivel D S C V 61 82 ug dl 0 88 ug dl 1 42 116 89 ug dl 1 30 ug dl 1 11 236 31 ug dl 2 83 ug dl 1 20 861272500 02 P g 2 de 6 b Linealidad la reacci n es lineal hasta 1500 ug dl en au toanalizadores y hasta 1000 ug dl en t cnica manual c L mite de detecci n la m nima concentraci n de hierro detectable utilizando el m todo de Fer color AA l quida es de 1 ug dl d L mite de cuantificaci n la
6. os des rdenes como hemosiderosis hemocromatosis y anemia si derobl stica Las t cnicas fotom tricas para la determinaci n de hierro en suero se basan en la formaci n de un complejo con un cro m geno entre los cuales ferrozina y batofenantrolina han sido ampliamente usados El presente m todo emplea ferene un agente quelante adi cional con el objetivo de aumentar la sensibilidad del ensayo colorim trico Este compuesto presenta una elevada absorti vidad molar es m s sensible que ferrozina y facilita la detec ci n de hierro FUNDAMENTOS DEL METODO El hierro se libera del complejo de transferrina en medio cido y se reduce a Fe Il con cido asc rbico Seguidamente re acciona con el reactivo de color ferene dando un complejo color azul que se mide a 600 nm La absorbancia obtenida es directamente proporcional a la concentraci n de hierro REACTIVOS PROVISTOS A Reactivo A soluci n de cido c trico 200 mM cido asc r bico 34 mM tiourea 100 mM y tensioactivo B Reactivo B soluci n estabilizada de ferene gt 3 mM S Standard soluci n de ones hierro Ill equivalente a 100 ug dl No provisto en todas las presentaciones REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab Agua desionizada INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos listos para usar PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagn stico in vitro Evitar la ingesti n y el contacto con los ojos El Rea
7. ro con agua ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL Los tubos deben ser le dos entre 5 y 30 minutos luego de completados los pasos del procedimiento CALCULO DE LOS RESULTADOS Corregir las lecturas de S y D rest ndoles los Blancos co rrespondientes S B S corregida D B BS D corregida Fe ug dl D corregida x f 100 ug dl Standard donde f S corregida Si se emplea Calibrador A plus consultar los valores asig nados debido a que son lote espec fico En este caso la lectura del calibrador deber corregirse restando el blanco correspondiente METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Standatrol S E 2 niveles con concentraciones conocidas de hierro con cada determinaci n VALORES TEORICOS Hombres 65 a 175 ug dl 11 6 31 3 umol l Mujeres 50 a 170 ug dl 9 30 4 umol VALORES DE REFERENCIA En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos con edades oscilando entre los 18 y 51 a os se hall un rango de 55 a 175 ug dl con los siguientes promedios Hombres 114 6 ug dl 20 5 umol l Mujeres 103 3 ug dl 18 5 umol l Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI Hierro ug dl x 0 179 Hierro umol l LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Valores de Blanco aceptables son necesarios para prevenir posibles contami
8. ts de reac tivos para diagn stico de Wiener lab tos por la Directiva Europea 98 79 CE de productos sanitarios para el diagn stico in vitro Este producto cumple con los requerimientos previs Representante autorizado en la Comunidad Europea Uso diagn stico in vitro Contenido suficiente para lt n gt ensayos Fecha de caducidad L mite de temperatura conservar a No congelar Riesgo biol gico Volumen despu s de la reconstituci n Cont Contenido N mero de lote Elaborado por Nocivo Corrosivo Ca stico Irritante Consultar instrucciones de uso IN TSA F V Calibrador ponro Control Control Positivo Control Negativo po m T N mero de cat logo ul Wiener Laboratorios S A C Riobamba 2944 2000 Rosario Argentina a http Awww wiener lab com ar W i e nN e r a b Dir T c Viviana E C tola nm Bioqu mica Producto Autorizado A N M A T PM 1102 27 2000 Rosario Argentina 861272500 02 P g 3 de 6
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