Monoclonal Mouse
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1. Uso previsto Sin nimos del ant geno Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento 117273 001 C FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD99 MIC2 Gene Product Ewing s Sarcoma Marker Clon 12E7 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo 1S057 Para uso en diagn stico in vitro Se prev el uso de FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD99 M C2 Gene Product Ewing s Sarcoma Marker Clon 12E7 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo es til para identificar glioblastomas y ependimomas del CNS y determinados tumores de c lulas de los islotes del p ncreas particularmente el Sarcoma de Ewing ES y los tumores neuroectodermales perif ricos primitivos pPNET La interpretaci n cl nica de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un pat logo calificado dentro del contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas p30 32 CD99 El gen MIC2 es un gen pseudoautosomal localizado en los brazos cortos de los cromosomas X e Y Los productos del gen son glicoprote nas de peso molecular similar designadas como p30 y p32 3 5 Las prote nas codificadas por el gen M C2 son sensibles a neuraminidasa y2. proteasa En los hematies el gen MIC2 est regulado por el gen XG unido a X lo que genera un polimorfismo cuantitativo en los niveles del producto del gen M C2 6 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n y 9 Limitaciones generales El anticuerpo monoclonal de rat n listo para usar se suministra en forma l quida en una soluci n tamp n que contiene prote na estabilizante y 0 015 de mol L NaNs Clon 12E7 Isotipo lgG1 kappa C lulas T de leucemia linfoc tica aguda 1 El anticuerpo reconoce los productos del gen MIC2 y se ha mostrado que tiene una reactividad similar o id ntica a la de los anticuerpos monoclonales HBA 71 y RFB 1 2 5 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida de sodio NaNz un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumula
3. ciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto de origen biol gico deber n aplicarse los procedimientos de manipulaci n adecuados 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n que no se utilice deber desecharse de acuerdo con las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 C No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario deber comprobar dichas condiciones No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n analizarse de manera simult nea con las muestras del paciente En caso de observarse una coloraci n inesperada que no puede ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospeche un problema con el anticuerpo comun quese con la asistencia t cnica de Dako 307130ES_001 p 1 3 Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de resultados 117273 001 El anticuerpo se puede utilizar para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadame
4. dako com PT0020 Rev C Edici n 09 07 117273 001 307130ES_001 p 3 3
5. e preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que los resultados del protocolo ajustado sigan siendo v lidos confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n en hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de catalogo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deberan realizarse de manera simultanea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El control positivo de tejido debe incluir timocitos corticales y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15750 El patr n de tinci n celular es membranoso Tejidos normales Los productos del gen MIC2 se expresan en la membrana celular de algunos linfocitos m dula sea ganglios linf ticos y bazo timocitos corticales c lulas granulosas del ovario la mayor a de c lulas de los islo
6. ndo un medio de montaje permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de Dako Silanized Slides n de cat logo S3003 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus usando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTU3 volumen de aplicaci n 300 uL Autoprogram sin contratinci n CD99 o Autoprogram con contratinci n CD99H El paso Auxiliar debe configurarse como tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso Auxiliar debe configurarse como ninguno De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo d
7. nte 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER Se consiguen resultados ptimos al tratar los tejidos previamente con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 K8014 Cortes desparafinados Se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Siga el procedimiento de tratamiento previo indicado en el prospecto para EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 K8014 Se deben aplicar los siguientes par metros para PT Link temperatura de precalentamiento 65 C temperatura y tiempo de recuperaci n del ep topo 97 C durante 20 1 minutos enfriar a 65 C Enjuagar los cortes con EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 diluido a temperatura ambiente Cortes incluidos en parafina Como m todo alternativo de preparaci n de una muestra tanto el desparafinado como la recuperaci n del ep topo se pueden realizar en el PT Link con un procedimiento modificado Ver instrucciones en la Gu a del usuario de PT Link Despu s de finalizado el procedimiento de tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usa
8. specific marker for Ewing s sarcoma and peripheral primitive neuroectodermal tumors Cancer 1991 67 1886 6 Fellinger EJ et al Immunohistochemical analysis of Ewing s Sarcoma cell surface antigen p30 32 J Pathol 1991 139 317 7 Rettig WJ et al Ewing s Sarcoma new approaches to histogenesis and molecular plasticity Lab Invest 1992 66 133 8 Fellinger EJ et al Comparison of cell surface HBA71 p30 32 neuron specific enolase and vimentin in the immunohistochemical analysis of Ewing s Sarcoma of bone Amer J Surg Pathol 1992 16 8 746 9 Baker RJ et al Inhibin and CD99 MIC2 expression in uterine stromal neoplasms with sex cord like elements Hum Pathol 1999 30 671 679 10 Gordon MD et al CD99 keratin and vimentin staining of sex cord stromal tumors normal ovary and testis Mod Pathol 1998 11 769 773 mic2 Amer 4 Limite de temperatura itari iaan stico in vi REF Numero de catalogo IVD Producto sanitario para diagn stico in vitro atal Ec REP Dako North America Inc Dako Denmark A S 6392 Via Real Produktionsvej 42 Fabricant ve atal ios C digo de lote Contenido suficiente para lt n gt ensayos Carpinteria California 93013 USA DK 2600 Glostrup Denmark Tel 805 566 6655 Tel 45 4485 9500 Fecha de caducidad BA Consulte las instrucciones de uso Representante autorizado en la Comunidad Europea Fax 805 566 6688 Fax 45 4485 9595 Technical Support 800 424 0021 Customer Service 800 235 5763 www
9. tes de Langerhans c lulas ependimales del sistema nervioso central c lulas de Sertoli de los test culos y en algunos casos c lulas endoteliales de los vasos sangu neos 5 Tejidos anormales Un estudio de 70 tumores diferentes ha mostrado que entre los tejidos neopl sicos s lo los glioblastomas y ependimomas del CNS y ciertos tumores de c lulas de los islotes del p ncreas reaccionaron positivamente 6 Los productos del gen M C2 se expresan con m s fuerza en la membrana celular del sarcoma de Ewing ES tumores neuroectodermales perif ricos primitivos pPNET en neoplasias estromales uterinas y en tumores estromales de los cordones sexuales En consecuencia la demostraci n de los productos del gen permite diferenciar estos tumores de otros tumores de c lulas redondas de la infancia y la adolescencia 3 5 10 307130ES_001 p 2 3 Referencias 1 Levy R et al A human thymus leukemia antigen defined by hybridoma monoclonal antibodies PNAS USA bibliograficas 1979 76 6552 2 Latron F et al Immunochemical characterization of the human blood cell membrane glycoprotein recognized by the monoclonal antibodies 12E7 Biochem J 1987 247 757 3 Fellinger EJ et al Biochemical and genetic characterization of the HBA71 Ewing s sarcoma cell surface antigen Cancer Res 1991 51 336 4 Goodfellow PN and Tippett P A human quantitative polymorphism related to the Xg blood groups Nature 1981 289 404 5 Ambros IM et al MIC2 is a
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