Effect of water quality in mosquito breeding sites on the
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1. Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 373 RESULTADOS Las caracter sticas f sico qu micas del agua utilizada en los ensayos obtenida de los ambientes donde se desarrollan cul cidos de importancia sanitaria se mencionan en el Cuadro 1 El porcentaje m s elevado de mortalidad en las larvas fue 99 53 0 13 media DE a las 48 horas de iniciado el ensayo en agua de lluvia mientras que el porcentaje menor fue 70 2 1 25 correspondiente a agua de floreros Fig 1 El primer componente en el an lisis de componentes principales explic el 66 de la variabilidad total del modelo el segundo el 20 y el tercer el 13 Cuadro 2 Las varia bles con un alto grado de correlaci n con el primer componente principal CP1 fueron pH conductividad dureza alcalinidad magnesio sodio bicarbonatos cloruros sulfatos fluoru ros ars nico y amonio Este CP1 separ las aguas de lluvia y de r o con bajos contenidos de las variables citadas anteriormente de las aguas de floreros y de zanja con altos conte nidos de las mismas Las variables con alto grado de correlaci n con el segundo compo nente principal CP2 fueron turbiedad color potasio y nitritos El CP2 indic que valores altos de turbiedad color y potasio y bajos de nitritos correspondieron a agua de floreros Valores bajos de turbiedad color y potasio y altos en nitritos correspondieron a agua de2. caracter sticas fisico qu micas sobre la infec tividad de las zoosporas de L chapmanii fue investigado en este estudio Los cuatro tipos de agua evaluados correspondieron a criaderos donde se desarrollan cul cidos importantes desde el punto de vista sanitario en el mundo y en amplias reas de la Argentina Estas especies CE2 CES 0 64 0 52 0 11 0 03 0 95 0 19 0 78 0 36 0 18 0 56 0 09 0 07 0 12 0 76 0 25 0 13 0 15 0 19 0 87 0 49 0 09 0 07 0 07 0 26 0 02 0 20 0 00 0 00 0 70 0 21 0 21 0 68 0 25 0 16 0 18 0 03 son A aegypti Culex pipiens L y O albifas ciatus Las larvas de Aedes aegypti el mosqui to vector de dengue en Am rica se desarrollan en recipientes artificiales tales como cubiertas de autom viles que acumulan agua de lluvia floreros en cementerios y otros recipientes artificiales Culex pipiens el mosquito de los domicilios habita frecuentemente ambientes urbanos criando en recipientes similares a los mencionados para A aegypti y en zanjas de desag e con elevados niveles de materia org nica y en ocasiones productos de uso domici liario o industrial como lavandina detergente y jab n Ochlerotatus albifasciatus conocido como el mosquito de las inundaciones es una especie que produce molestias a los habitantes y animales dom sticos en la Argentina y es 376 Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 6 00 Tur
3. Buenos Aires para cuantificar sus par metros f sicos qu micos y biol gicos Los restantes tres litros fueron filtrados a trav s de papel de filtro Watman N 5 y utilizados para realizar los ensayos de patogenicidad y tole rancia de las zoosporas de L chapmanii a los distintos tipos de agua Para estos ensayos se utilizaron recipientes pl sticos de 46 cm de superficie y 200 ml de capacidad en los cuales se colocaron 150 ml de uno de los cuatro tipos de ambientes muestrea dos 25 larvas sanas de 4 aegypti de IV estadio y 2 8 x 10 zoosporas ml de L chapmanii Los recipientes fueron mantenidos a 25 C y fotoperiodo de 12 12 h luz oscuridad en una incubadora Se utilizaron tres recipientes y un control tratado de igual forma que el resto pero sin la incorporaci n del in culo f ngico para cada tipo de agua Tres repeticiones del ensayo fueron llevados a cabo en distintas fechas N 48 La mortalidad larval fue registrada a las 48 horas de iniciado el ensayo An lisis estad stico Se aplic un an lisis de Componentes Principales Johnson y Wichern 1992 en el cual las variables ori ginales fueron las propiedades qu micas del agua y las observaciones las muestras de agua de cuatro procedencias diferentes lluvia zanja r o y floreros Para eliminar el sesgo de Interpretaciones causadas por diferentes escalas de medici n se estandarizaron los datos seg n donde x es la variable j sima X es la media
4. C y 12 12 L O La mortalidad larval fue registrada a las 48 horas Se utilizaron tres recipientes y un control por tratamiento con tres repeticiones realizadas en distintos d as Se observaron diferencias altamente significativas entre la mortalidad larval en aguas de floreros del cemen terio 70 2 aguas de lluvias 99 53 y del r o de La Plata 95 No hubo diferencias significativas entre la mortalidad larval en agua de zanja lluvia y r o Leptolegnia chapmanii result exitoso en los cuatro tipos de aguas eva luados produciendo elevados niveles de mortalidad larval Palabras clave Leptolegnia chapmanii Aedes aegypti larvas caracter sticas f sico qu micas del agua mortalidad larval control biol gico REFERENCIAS Adl M G B Alastair G B Simpson M A Farmer R A Andersen D R Andersen J R Barta S S Bowser G Brugerolle R A Fensome S Frederico T Y James S Karpov P Kugrens J Krug C E Lane L A Lewis J Lodge D H Lynn D G Mann R M Mccourt L Mendoza O Moestrup S E Mozley Standridge T A Nerad C A Shearer A V Smirnov EW Spiegel amp M F Taylor 2005 The new higher level classification of Eukaryotes with emphasis on the taxonomy of protists J Eukaryot Microbiol 52 399 451 Calisher C H T P Monath C J Mitchell M S Sabattini C B Cropp J Kerschner A R Hunt amp J S Lazuick 1985 Arbovirus investigations in Argentina 1997 1980 II Identification and
5. r o y de zanja El tercer componente principal CP3 se correlacion con los valores de calcio Otras variables se correlacionaron con valores CUADRO 1 An lisis fisico qu mico del agua de ambientes de criadero de mosquitos TABLE 1 Physical and chemical characteristics of water from mosquito breeding sites Par metros SE Unidades Agua de lluvia Agua de r o Agua de zanja Agua de floreros pH 7 8 7 2 7 9 7 8 U de pH Conductividad 247 236 1021 552 umhos cm Turbiedad 4 8 lt 3 lt 3 7 8 NTU Color 11 2 6 8 6 4 10 7 U de color CO Pt Dureza 53 86 128 116 mg de CaCo l Alcalinidad total 90 104 485 253 mg de CaCoy l Calcio 12 26 32 32 mg l Magnesio 5 5 12 9 mg l Sodio 28 13 199 33 mg l Potasio 12 10 14 85 mg Carbonatos No contiene No contiene No contiene No contiene mg Bicarbonatos 109 127 591 309 mg Cloruros 25 14 57 28 mg l Sulfatos 6 4 16 7 mg l Nitratos lt 0 5 lt 0 5 lt 0 5 lt 0 5 mg l Nitritos 0 007 0 124 0 188 0 014 mg l Fluoruros 0 59 0 31 0 70 0 47 mg l Ars nico lt 0 003 lt 0 003 0 007 lt 0 003 mg l Amonio 1 1 0 8 6 1 3 3 mg l 374 Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 CUADRO 2 Autovalores en el An lisis de componentes principales y su contribuci n a la variaci n total del modelo TABLE 2 Eigenvalues in the Principal Components Analysis and its contribution to overall variation of the model Autovalor N Valor 1 11 25 2 3 48 3 2 27 100 90 mor
6. Efecto de la calidad del agua de criaderos de mosquitos Diptera Culicidae sobre la patogenicidad e infectividad de las zoosporas del hongo Leptolegnia chapmanii Straminipila Peronosporomycetes Sebastian A Pelizza Claudia C L pez Lastra Arnaldo Maci 3 Vilma Bisaro amp Juan J Garc a 1 Centro de estudios parasitol gicos y de vectores CEPAVE CCT CONICET LA PLATA UNLP Calle 2 N 584 1900 La Plata Buenos Aires Argentina fax 54 0221 4232327 tel 54 0221 4233471 pelizza cepave edu ar 2 C tedra de Estad stica Facultad de Agronom a Universidad Nacional de Rosario Argentina 3 Comisi n de investigaciones cient ficas de la provincia de Buenos Aires CIC Recibido 01 V 2008 Corregido 20 X 2008 Aceptado 18 XI 2008 Abstract Effect of water quality in mosquito breeding sites on the pathogenicity and infectivity of zoo spores from the fungus Leptolegnia chapmanii Straminipila Peronosporomycetes The fungus Leptolegnia chapmanii is highly pathogenic to mosquito larvae in Argentina We studied if physical and chemical charac teristics of the water from mosquito breeding sites affect pathogenicity and the infectivity of zoospores of L chapmanii Water samples were taken from pools filled by rains urban ditches with domestic waste water pools filled by overflow from Rio de la Plata and flower vases from the Cemetery of La Plata city Sub samples of water were analyzed for physical and chemical ch
7. aracteristics while other sub samples were used for labora tory bioassays Containers with 150 ml of water samples 25 Aedes aegypti larvae and 2 8 x 10 zoospores of L chapmanii were incubated under controlled environment and larval mortality was recorded after 48 h There were highly significant differences among mortalities in water from cemetery vases 70 2 rain pools water 99 5 and pools with water from Rio de la Plata 95 There were no significant differences among larval mortalities in water from ditches rain pools and Rio de la Plata pools Leptolegnia chapmanii was successful as a biological control agent in all kinds of tested water qualities producing high larval mortality Rev Biol Trop 57 1 2 371 380 Epub 2009 June 30 Key words Leptolegnia chapmanii Aedes aegypti larvae water physical chemical characteristics larvae mortality biological control En el Neotr pico y particularmente en Argentina la informaci n sobre hongos pat genos de cul cidos es escasa y fragmentaria Garc a y L pez 1989 L pez y Garc a 1997 S1 bien existe un gran n mero de hongos acu ticos par sitos y pat genos de plantas y ani males s lo la especie Lagenidium giganteum Couch ha sido ampliamente estudiada durante el transcurso de las dos ltimas d cadas y en la actualidad se la considera un importante agente de control biol gico de larvas de mosquitos Umphlett y Huang 1972 OMS 1979 Lacey y Lacey 1990 Sch
8. biedad Potasio Color 3 00 Ph Agua de florefos Fluoruros Magnesio Eici Al ii Agua de lluvia A monio x Nitratos loruros I 0 004 ce Sulfatos Sodio e ici Agua de zanja Agua de rio 3 00 Nitritos 6 00 r T r 1 6 00 3 00 0 00 3 00 6 00 CP1 Fig 2 Los dos primeros componentes principales resultantes del an lisis de distintos tipos de aguas y sus propiedades Agua de zanja Agua de lluvia Agua de r o Agua de floreros Fig 3 Dendrograma de distancias eucl deas entre las muestras de agua de floreros de cementerio zanjas de desag e domi ciliario charcas con agua procedente del r o de la Plata y charcas con agua de lluvia basado en el m todo de ligamiento promedio vector de algunas arbovirosis Calisher et al 1985 Los adultos emergen de 6 a 16 d as en promedio despu s de la inundaci n de los ambientes deprimidos donde las hembras colo caron los huevos Campos y Sy 2003 El agua que provoca la inundaci n de los ambientes de O albifasciatus proviene generalmente de Ilu vias intensas o prolongadas o de los desbordes Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 de arroyos en el rea platense cuando el R o de La Plata incrementa sensiblemente su nivel generalmente por acci n del viento intenso de direcci n sudeste El aislamiento nativo de L chapmanii tuvo un comportamiento exitoso en los cuatro tipos de agua evaluados produciendo elevad
9. characterization of viruses isolated including new subtypes of Western and Venezuelan Equine Encephalites Viruses and four new Bunyaviruses Las Maloyas Resistencia Barranqueras and Antequera Am J Trop Med Hyg 34 956 965 378 Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 Campos R E 8 V E Sy 2003 Mortality in immatures of the floodwater mosquito Ochlerotatus albifasciatus Diptera Culicidae and effects of parasitism by Strelkovimermis spiculatus Nematoda Mermithidae in Buenos Aires Province Argentina Mem Inst Oswaldo Cruz 98 199 208 Christensen J B J L Fetter Lasko R K Washino R C Husband amp E E Kaufman 1977 A preliminary field study employing Lagenidium giganteum a fungus as a posible biological control agent against the pasture mosquito Aedes nigromaculis Proc Calif Mosq Vector Control Assoc 45 105 Dick M W M C Vick J G Gibbings T A Hedderson amp C C Lopez Lastra 1999 18 S rDNA for spe cies of Leptolegnia and other Peronosporomycetes Justification forthe subclass taxa Saprolegniomycetidae and Peronosporomycetidae and division of the Saprolegniaceae sensu lato into the families Leptolegniaceae and Saprolegniaceae Mycol Res 103 1119 1125 Fetter Lasko J L amp R K Washino 1978 Patterns of exper imental infection of mosquito larvae by Lagenidium giganteum J Am Mosq Control Assoc 46 90 Fukuda T D R Willis am
10. ct Sci 4 1 24 an aquatic fungal parasite of mosquitoes three years after field introduction Proc Calif Mosq Control Seymour R L 1977 The systematic significance of patho Assoc 44 52 genicity of fungi for animals and plants p 111 134 In J D Briggs ed Biological Regulation Zattau W C amp T Mc Innis 1987 Life cycle and mode of Vectors U S DHEW Publication No NIH of infection of Leptolegnia chapmanii Oomycetes 77 1180 National Institute of Health Washington parasitizing Aedes aegypti J Invertebr Pathol 50 DC Estados Unidos 134 145 380 Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009
11. de la variable j sima en la muestra y S es el desv o de la variable j sima en la muestra Se utilizaron s lo las propiedades m tricas de las observaciones S lo los autovalores gt 1 fueron retenidos para los an lisis de Componentes Principales En el an lisis se trabaj con la matriz de correlaciones por lo tanto para medir la asociaci n entre las variables origina les X y los CP Y se utiliz el coeficiente de correlaci n entre ambos dada por eya V5 donde ey eS el coeficiente del autovector estan darizado gt es el autovalor j simo y S es la varianza de la variable k sima Para analizar relaciones conjuntas entre observaciones y variables tipos de aguas y propiedades qu mi cas respectivamente se construyeron gr ficos biplots Gabriel 1971 a partir del an lisis de Componentes Principales sobre la matriz de correlaciones y un dendrograma utilizando el m todo de agrupamiento de encadenamien to promedio average linkage y calculando la distancia eucl dea como distancia entre conglomerados El an lisis de Componentes Principales se realiz usando InfoStat versi n 2007 InfoStat 2001 Para establecer la incidencia de las propie dades qu micas del agua en la mortalidad lar val se realiz un an lisis de la variancia bajo la hip tesis de nulidad de que la mortalidad larval no difiri entre los cuatro tipos de agua segui do de un test a posteriori de Duncan p lt 0 05 r Y X
12. ical control agent Lagenidium giganteum Couch 1935 Organizaci n Mundial de la Salud Division of Vector Biology and Control Ginebra Suiza Pelizza S A C C L pez Lastra J J Becnel V Bisaro amp J J Garc a 2007a Biotic and abiotic factors affecting Leptolegnia chapmanii infection in Aedes aegypti J Am Mosq Control Assoc 23 177 181 Pelizza S A C C Lopez Lastra J J Becnel V Bisaro amp J J Garcia 2007b Effects of temparature Ph and salinity on the infection of Leptolegnia chapmanii Seymour Peronosporomycetes in mosquito larvae J Invertebr Pathol 96 133 137 Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 379 Pelizza S A C C L pez Lastra J J Becnel R A Humber Seymour R L 1984 Leptolegnia chapmanii an Oomycetes amp J J Garc a 2008 Further research on the pro pathogen of mosquito larvae Mycologia 76 113 120 duction longevity and infectivity of the zoospores of Leptolegnia chapmanii Seymour Oomycota Umphlett C J amp C S Huang 1972 Experimental infection Peronosporomycetes J Invertebr Pathol 98 314 of mosquito larvae by a species of the aquatic fungus 319 Lagenidium J Invertbr Pathol 20 326 331 Scholte E J B G Knols R A Samson amp W Takken 2004 Washino R K J Fetter C K Fukushima amp K Gonot Entomopathogenic fungi for mosquito control A 1976 The establishment of Lagenidium giganteum review J Inse
13. olte et al 2004 Kerwin 2007 Otro importante hongo entomopat geno de esta clase es Leptolegnia chapmanii Seymour Seymour 1977 el cual ha sido aislado de larvas de varias especies de culicidos Muchos autores han coincidido en adjudicar a L chap manii caracteristicas que le dan potencialidad 1 Los autores reconocen que actualmente todos los taxa pertenecientes a los Oomycetes hongos acu ticos inferiores estan actualmente ubicados dentro del reino Chromista Straminipila Adl et al 2005 y han sido excluidas del grupo de los verdaderos hongos No obstante debido a que L chapmanii ha sido considerado hist ricamente un hongo hasta hace pocos a os en el presente trabajo se lo considera como tal para los fines pr cticos Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 371 para actuar como agente de control biol gico Mc Innis y Zattau 1982 Seymour 1984 Lord y Fukuda 1988 Fukuda et al 1997 como la alta mortalidad generada en organismos blanco y la especificidad de hospedadores entre otras El ciclo de vida de L chapmanii comien za con la liberaci n de zoosporas m viles fase asexual las cuales se unen por qui miotactismo a la cut cula larval se enquistan y por mediaci n de factores mec nicos y enzim ticos penetra el cuerpo de la larva crece r pidamente en su interior invadiendo los distintos rganos y tejidos y ocasiona su muerte Posteriormente L cha
14. os nive les de mortalidad larval independientemente 377 del tipo y caracter sticas del agua evaluadas Las diferencias observadas en la mortalidad larval por L chapmanii entre los cuatro tipos de agua evaluados resultaron poco conspicuas si se comparan con la mortalidad producida por L giganteum inoculado en lagunas expe rimentales que infect casi exclusivamente larvas mantenidas con agua clara y libre de materia org nica en el tratamiento control Lagenidium giganteum infect entre el 27 y 100 de las larvas de Culex quinquefasciatus Say desarroll ndose en agua con bajos nive les de contaminaci n y materia org nica mien tras que no registraron infecciones en agua con niveles moderados a altos de contaminaci n y materia org nica Jaronski y Axtell 1982 Algunas caracter sticas de aguas contaminadas como los niveles bajos de ox geno disuelto pH extremo y gran n mero de otros microor ganismos presentes en el agua hacen que la infectividad y efectividad de las zoosporas de L giganteum sea escasa o nula Lord y Roberts 1985 Tambi n la temperatura elevada del agua y los altos niveles de contaminaci n org nica pueden limitar la infecci n de mosquitos por L giganteum Fetter Lasko y Washino 1978 Hallmon et al 2000 Kerwin 2007 Sin embargo L giganteum actu con efectividad como control de larvas de Anopheles nigroma culis Ludlow en pasturas y de Culex tarsalis Coquillet en campos de arroz Washino e
15. p D R Barnard 1997 Parasites of the asian tiger mosquito and other container inhabit ing mosquitoes Diptera Culicidae in Northcentral Florida J Med Entomol 84 226 233 Gabriel K R 1971 The biplot graphic display of matrices with application to principal component analysis Biometrika 58 453 467 Garcia J J amp C C L pez 1989 Infecciones por microspo ridios y hongos en Culex dolosus Lynch Arribalzaga 1981 Diptera Culicidae en Argentina y Uruguay Neotropica 35 9 14 Hallmon C F E T Schreider amp M A Bloomquist 2000 Field trials of three concentrations of Laginex as biological larvicide compared to Vectobac 12 AS as a biocontrol agent for Culex quinquefasciatus J Am Mosq Control Assoc 16 5 8 InfoStat 2001 Manual del usuario version 1 Universidad Nacional de C rdoba Cordoba Argentina Jaronski S T amp R C Axtell 1982 Effects of organic water pollution on the infectivity of the fungus Lagenidium giganteum Oomycetes Lagenidiales for the larvae of Culex quinquefasciatus Diptera Culicidae Field and laboratory evaluation J Med Entomol 19 255 262 Johnson R A amp D W Wichern 1992 Applied Multivariate Statistical Analysis 3ra ed Prentice Hall Int Englewood Cliffs New Jersey Estados Unidos Kerwin J L 2007 Oomycetes Lagenidium giganteum p 50 58 In T G Floore ed Biorational Control of Mosquitoes J Am Mosq Control Assoc 23 Bull No 7 Lace
16. pmanii emerge del cad ver para generar m s zoosporas las cuales pueden infectar nuevas larvas En la fase sexual del ciclo se producen estructuras de resistencia oosporas que pueden perma necer inactivas en el ambiente cuando las con diciones se vuelven desfavorables pudiendo germinar y originar nuevas zoosporas infec tivas cuando las condiciones del entorno son favorables Zattau y Mc Innis 1987 L pez Lastra et al 1999 registraron la presencia de L chapmanii parasitando lar vas de Ochlerotatus albifasciatus Macquart en los alrededores de la ciudad de La Plata Buenos Aires Argentina constituyendo este hallazgo el cuarto aislamiento en el mundo y el primero en el Neotr pico de este pat ge no La distribuci n mundial conocida de esta especie se reduce a localidades de Carolina del Sur Florida y Ohio en Estados Unidos Mc Innis y Zattau 1982 Seymour 1984 Lord y Fukuda 1988 Fukuda et al 1997 Dick et al 1999 determinaron que los aislamientos de L chapmanii de Florida Estados Unidos y de la Argentina constituyen un grupo monofi l tico bas ndose en secuencias de nucle tidos del 18 S ADNr Este aislamiento nativo de L chapmanii ARSEF 5499 CEP 010 present un amplio espectro de hospedadores cul cidos susceptibles resultando no patog nico para la mayor a de los invertebrados no blanco y los vertebrados acu ticos evaluados en el laboratorio L pez et al 2004 como as tam bi n qued demos
17. s de cul cidos sobre la viabilidad de chapmanii es desconocida Complementando la investigaci n sobre el aislamiento nativo de L chapmanii se realiz un estudio en condiciones de laboratorio con el objetivo de determinar si las caracter sticas f sico qu micas del agua de los ambientes donde se desarrollan algunos de los cul cidos de mayor importancia sanitaria afectan la patogenicidad e infectividad de las zoosporas de L chapmanii MATERIALES Y METODOS Se tomaron muestras de agua de ambientes de cria de larvas de culicidos en los alrededores de la ciudad de La Plata Los ambientes exami nados fueron 1 charco temporario inundado 372 Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 por lluvias en adelante agua de lluvia 2 zanja de desagiie pluvial y domiciliario en el casco urbano de la ciudad en adelante agua de zanja 3 desbordes de agua del R o de La Plata que inundan ambientes temporarios en la Reserva Provincial de Punta Lara Ensenada Provincia de Buenos Aires en adelante agua de r o y 4 agua de recipientes artificiales flo reros de cemento del Cementerio Municipal de La Plata en adelante agua de floreros En cada ambiente se tomaron muestras de cuatro litros en recipientes pl sticos Un litro de agua proveniente de cada ambiente fue analiza do en un laboratorio especializado acreditado por la Secretaria de Pol tica Ambiental de la Provincia de
18. sto de los tipos de agua en la mayor a de los casos El an lisis de varianza evidenci diferen cias altamente significativas F 5 74 3 32 g 1 p 0 0029 entre las medias de mortalidad larval producida a las 48 horas en cada tipo de agua Se observaron diferencias significativas p 0 05 entre el porcentaje de mortalidad producido en agua de floreros con la de r o y la de lluvia no presentando diferencias Rev Biol Trop Int J Trop Biol ISSN 0034 7744 Vol 57 1 2 371 380 March June 2009 375 CUADRO 3 Coeficientes de correlaci n entre las variables en el an lisis de agua de floreros lluvia r o y zanja y los componentes principales 1 2 y 3 CP1 CP2 y CP3 TABLE 3 Correlation coefficients among variables for water analysis from vases rain river and ditches and Principal Components 1 2 and 3 CP1 CP2 and CP3 Variables CRI pH 0 57 Conductividad 0 99 Turbiedad 0 23 Color 0 52 Dureza 0 81 Alcalinidad 0 99 Calcio 0 64 Magnesio 0 96 Sodio 0 97 Potasio 0 003 Bicarbonato 0 99 Cloruros 0 96 Sulfatos 0 98 Nitratos 0 00 Nitritos 0 68 Fluoruros 0 70 Arsenico 0 96 Amonio 0 98 significativas entre stos dos ltimos tipos de aguas p gt 0 05 Con respecto al agua de zanja el porcentaje de mortalidad presenta un valor intermedio entre la producida en el agua de florero con la de r o y lluvia DISCUSI N El efecto de la calidad del agua de los cria deros de mosquitos medida por medio de sus
19. t al 1976 Christensen et al 1977 Los resultados de este estudio permiten concluir que el aislamiento neotropical de L chapmanii fue patog nico y virulento dentro de una amplia escala de contenido de materia org nica y de contaminantes del agua La mortalidad larval generada por zoosporas de L chapmanii se vio poco afectada por las condiciones locales del agua en ambientes naturales y artificiales donde cr an los cul cidos Consecuentemente ello posibilitar a su aplicaci n a campo en una gran variedad de criaderos AGRADECIMIENTOS Este estudio fue parcialmente financia do por la Agencia Nacional de Promoci n Cient fica y T cnica PICT 11118 02 CICPBA CONICET y Universidad Nacional de La Plata La Plata Argentina RESUMEN Leptolegnia chapmanii es un potente pat geno de larvas de mosquitos El objetivo del trabajo fue determinar si las caracter sticas f sico qu micas del agua de criaderos de cul cidos de importancia sanitaria a nivel mundial afec tan la patogenicidad e infectividad de las zoosporas de L chapmanii Se tomaron muestras de cuatro tipos de agua en Argentina de lluvia de zanja del R o de La Plata y de floreros del cementerio local A una parte del agua se le realizaron estudios fisicos quimicos y otra parte fue utilizada en ensayos Se coloc 150 ml de cada muestra en recipientes pl sticos con 25 larvas sanas de Aedes aegypti y 2 8 x 10 zoosporas de L chapmanii Fueron incubadas a 25
20. talidad larval Proporci n de la variaci n total ab 80 5 70 60 50 40 30 20 10 0 T T Proporci n acumulada 0 66 0 87 1 00 Floreros Zanja R o Lluvia Tipos de agua Fig 1 Promedio DE de la mortalidad de larvas de Aedes aegypti por Leptolegnia chapmanii en agua procedente de cuatro ambientes de desarrollo de cul cidos floreros de cementerio zanjas de desag e domiciliario charcas con agua del r o de la Plata y charcas con agua de lluvia Letras distintas indican diferencias significativas determinadas por el test de Duncan p 0 05 altos con el CP3 aunque en estos casos las correlaciones siempre fueron menores que con CP1 o CP2 El CP3 mostr que valores altos de calcio se asociaron a agua de r o floreros y zanja Cuadro 3 y Fig 2 El dendrograma Fig 3 obtenido por medio del an lisis de conglo merados confirm el an lisis descriptivo de CP En l se observ que el agua de r o y de lluvia fueron similares en cuanto a sus propie dades qu micas y conforman un n cleo El agua de floreros posey propiedades comunes con las anteriores y el agua de zanja se separ de las anteriores por su disimilitud En resumen de acuerdo a las propiedades qu micas de las muestras de agua analizadas el agua de lluvia y de r o resultaron similares excepto por el contenido del calcio El agua de lluvia y de r o difirieron del agua de florero y de zanja esta ltima con valores opuestos al re
21. trado en pruebas de labora torio la amplia tolerancia de las zoosporas del aislamiento nativo a una serie de factores bi ticos y abi ticos Pelizza et al 2007a 2007b Investigaciones adicionales fueron llevadas a cabo para determinar la producci n supervi vencia e infectividad de las zoosporas de este aislamiento de L chapmanii para entender los par metros que regulan la presencia de epi zootias en condiciones naturales Pelizza et al 2008 Estos trabajos se realizaron utilizando como hospedador al mosquito del dengue Aedes aegypti L Los estudios de virulencia y patogenicidad en entomopat genos no se limitan al nivel espec fico sino que adquieren relevancia las diferencias que presentan los aislamientos de un pat geno ya sea a partir de hospedadores localidades o ambientes distin tos Hasta el presente la informaci n relativa a este nuevo aislamiento de L chapmanii se reduce a su hallazgo L pez et al 1999 sus relaciones filogen ticas y evolutivas con otros miembros del mismo g nero o grupo superior Dick et al 1999 y un estudio sobre el espectro de hospedadores susceptibles y el efecto sobre la fauna asociada a los criaderos de cul cidos L pez et al 2004 El aislamiento nativo de L chapmanii tole r una amplia gama de temperatura pH y sali nidad en condiciones controladas Pelizza et al 2007b En condiciones de campo la influencia de las variables f sico qu micas del agua de los criadero
22. y L A amp C M Lacey 1990 The medical impor tance of riceland mosquitoes and their control using alternatives to chemical insecticides J Am Mosq Control Assoc 2 1 93 Lopez C C amp J J Garcia 1997 Presencia del hongo Coelomomyces ilensis var indus como pat geno de larvas de mosquitos Diptera Culicidae en la Rep blica Argentina Rev Iberoam Micol 14 69 71 L pez C C M M Steciow amp J J Garc a 1999 Registro m s austral del hongo Leptolegnia chapmanii Oomycetes Saprolegniales como pat geno de lar vas de mosquitos D ptera Culicidae Rev Iberoam Micol 16 143 145 L pez C C A C Scorsetti G A Marti amp J J Garc a 2004 Host range and specifity of an Argentinean isolate of the aquatic fungus Leptolegnia chapmanii Oomycetes Saprolegniales a pathogen of mosquito larvae Diptera Culicidae Mycopathologia 158 311 315 Lord J amp T Fukuda 1988 An ultrastructural study of Culex quinquefasciatus larvae by Leptolegnia chap manii Oomycetes Saprolegniales Mycopathologia 104 67 74 Lord J C amp D W Roberts 1985 Solute effects on Lagenidium Giganteum zoospores motility and bioas say reproducibility J Invertebr Pathol 46 160 165 Mc Innis T Jr amp W C Zattau 1982 Experimental infec tion of mosquitoes larvae by a species of the aquatic fungus Leptolegnia J Invertebr Pathol 39 98 104 Organizaci n Mundial de la Salud 1979 Data sheet on the biolog
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