Hoefer HE99X
Contents
1. Una norma com n es un compendio Hind III del fago lambda lo que da ocho fragmentos que var an en tama o de 0 1 a 23 pares kb Para una buena resoluci n correr 45 minutos a 10 cm de largo 1 en gel de agarosa en gel TBE 0 5X a 150 V Tabla 1 Las concentraciones de agarosa para separar fragmentos de ADN de varios tama os alcance efectivo de la resoluci n agarose de los fragmentos de ADN lineal kb 0 5 1 0 30 0 7 0 8 12 1 0 0 5 10 1 2 0 4 7 1 5 0 2 3 Current Protocols in Molecular Biology p 2 5 2 1993 o p13 Nota Para ver un ejemplo de la electroforesis del ARN se refieren a Molecular Cloning A Laboratory Manual by J Sambrook and D W Russell Atenci n El bromuro de etidio es un mut geno conocido Siempre use guantes al manipular Atenci n Use gafas de seguridad UV y proteger la piel cuando se utiliza cualquier fuente de luz UV Nota El bromuro de etidio frena la migraci n del ADN en un 15 Nota Reducir al m nimo el tiempo de tinci n para evitar peque os fragmentos de cido nucleico de fuera de difusi n del gel e pl4 ARN de movilidad ARN tambi n puede separarse sobre la base de su tama o Para evitar anomal as debido a la estruc tura secundaria el ARN se desnaturaliz ya sea antes o durante la electroforesis Por ejemplo fragmentos de ARN desnaturalizado previamente con glioxal y dimetilsulf xido se pueden separar en geles de agarosa neutros o A2. laboratorio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente riconosciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e O piv disinserisce i piombi di potere prima di togliere il coperchio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cosi equipaggiato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refrigerante dove la pressione di acqua amp sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causer il danno irreparabile all unit Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en mate ikke spesifisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrumentet er utformet for innend rs laboratoriumbruk bare Bare tilbeh r og deler godkjente eller forsy
3. r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann f r das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produktes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem AnschlieBen der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen fiihrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers thylens durch den W rmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder Kiihlmittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instrumentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen Ober angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die Uberhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Informazioni Importanti Italian Se quest apparecchiatura usata in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di
4. tensi n ajuste HE99XRK 1 nivelaci n del pie peines v ase la lista de los tama os HE91 BK peineta con 2 tornillos e p17 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Llamada gratuita 1 800 227 4750 Tel fono 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support amp hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer es una marca registrada de Hoefer Inc O 2012 Hoefer Inc Todos los derechos reservados Impreso en el USA Hoefer
5. almohadilla comprimiendo lo suficiente para permitir que el extremo opuesto de la bandeja de ejecuci n para soltar completamente en la bandeja de moldeo flecha B antes de sellar contra la almohadilla de espuma Nota Las ranuras en la bandeja ejecuta crear crestas en ambos extremos del gel para evitar que se deslice o flotando Si estas crestas no son deseables ya sea cinta sobre los surcos antes de fundici n o recortar bordes con una esp tula despu s de la carrera e p4 Prepare la bandeja de fundici n y se vierte el gel 0 Instalar una almohadilla de espuma en cada extremo de la bandeja de moldeo Utilizar un peine como una gu a de colocaci n de manera que la almohadilla se adhiere 1 mm de la parte inferior de la bandeja Coloque el peine en la parte inferior de la bandeja orientado de modo que se ajuste completamente a trav s de la bandeja a lo largo del lado que es de 16 cm de ancho Despegue el adhesivo sobre la almohadilla de espuma alinear la almohadilla en la parte de peine el adhesivo a la pared interior de la bandeja y deslice el peine contra la pared Pulse la almohadilla de espuma en su lugar y repetir con segunda almohadilla en la pared opuesta a la primera almohadilla codificados por colores puntos 2 en los mangos orientar la bandeja que se ejecuta en la plataforma de ejecuci n La peineta se adapta a cualquier conjunto de las franjas horar ias el conjunto de peineta se muestra
6. bort kraften blyen f re flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla d r vattnet trycket r unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten o pvi Espa ol 134 English R French R German R Italian 134 Swedish R EEE Residuos de Aparatos El ctricos y Electr nicos RAEE Este s mbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo This symbol indicates that the waste of electrical and electro nic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs a l quipement lectrique et lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res
7. en la Fig 3 est orientado a encajar en esta ranura UVT bandeja de gel running 15 x 20 cm almohadillas de espuma 2 de fundici n 15 x 20cm gel de la bandeja mn O Fig 3 Reunidos peine peineta E pe tt tornillos La bandeja de asiento gue corre entre las almohadi llas de espuma en la bandeja de moldeo mediante la colocaci n de un extremo de la bandeja contra la almohadilla de espuma comprimiendo ligeramente a continuaci n asentando el otro extremo de la bandeja contra la almohadilla de espuma opuesto Ver flechas A y B en la figura 2 La bandeja de funcionamiento deben establecer a ras contra la parte inferior de la bandeja de moldeo Coloque el conjunto de la bandeja de fundici n en una superficie de nivelaci n y nivel utilizando el nivel de alcohol en la bandeja se ejecuta como una gula Comprobar que el conjunto de peine dejae z1 mm de espacio entre la parte inferior peine y la bandeja de funcionamiento Retire el nivel y el conjunto de peine Preparar los panales o Alinee las dos ranuras del peine con los tornillos flojos de la peineta Ajuste los tornillos hasta que el peine se limitaba a apoyar e Coloque el conjunto de peine en un conjunto de ranu ras en la bandeja de funcionamiento asentado en la bandeja de colada Ajustar el peine de manera que la parte inferior de los dientes sone 1 mm desde la bandeja de funcionamiento Apriete los tornillos
8. la tapa de la seguridad e Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Recalentar causar da o irreparable a la unidad Dule it Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskytnut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku e zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid musi b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethylenglykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vyba
9. non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obte nir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Haus mu ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem auto risierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparecchia ture elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalit di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrust ningar inte f r avyttras som osorterat hush llsavfall och m ste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information ang ende avyttring av utrustningen O pvii Fig 1 Horizontal componentes submarinos de la unidad principal Gel equipos de fundici n peines peine y la espalda se pueden pedir por separado la figura 2 ilustra un kit de fundici n y la secci n de pedidos tabula todos los tama os de peine y accesorios Descanse los pulgares a ambos mensajes
10. schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not specified by Hoefer Inc the protection provided by the eguipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating maintaining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa Finnish Jos t t varusteita k ytet n ta
11. O ual del usuario Espa ol Hoefer HE99X Unidad de electroforesis submarina mu HE99X IM Spanish Rev LO 07 12 H O e fe r Tabla de contenidos Informaci n Importante sssri aiaia ii Residuos de Aparatos El ctricos y Electr nicos RAEE scores vil La electroforesis submarina Funci n Unidad y la descripci n ooocccccnncccnnonacccnnnnanccnnnnannns 1 Desembalaje s s sss0 ade bege dr betan bend er rn da nr 2 Especificaciones ssiri eg OKA w 2 Manual de Instrucciones ccccccccnnnnnnnnnaniccnnninnnononono 3 Cuidado y mantenimiento ra 8 Soluci n de pDroblemas enn rer era nr 9 Notas tampones y los volimenesS 11 10 Ee Me 15 Orden In el LEET 16 Informaci n Importante Espa ol Si este equipo es utilizado en una manera no especificado por Hoefer Inc la protecci n proporcionado por el equipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desconecta los plomos del poder antes de quitar
12. RN puede ser fraccionada en geles de agarosa que contienen hidr xido de metilmercurio o formaldeh do RNA de muestras por lo general requieren carreras largas o tampones que se consumen f cilmente por lo que requieren la circulaci n El Hoefer SUB20C y SUB25C unidades hori zontales se recomiendan para esta aplicaci n en lugar de la HE33 ADN detecci n ADN puede ser detectada por la fluorescencia de bromuro de etidio consolidado o por autorradio graf a de ADN marcado radiactivamente El bromuro de etidio 0 5 ug ml se puede a adir a la ejecuci n de tamp n para controlar el progreso de la muestra debido a la fluores cencia del colorante en virtud de una l mpara UV revela ubicaci n banda Para comprobar el progreso apague la fuente de alimentaci n y retire la tapa de la unidad de agarosa Mantenga un port til l mpara UV cerca de la bandeja en funcionamiento Vuelva a colocar la tapa y encienda la alimentaci n de nuevo para reanu dar la electroforesis Alternativamente despu s de la electroforesis el gel mancha en una soluci n de bromuro de etidio 0 5 pg ml H20 durante 15 a 60 minutos y luego ver o fotografiar la muestra sobre un transiluminador UV Para fotografiar el gel ya sea colocar la bandeja que se ejecuta en la superficie transiluminador o deslice el gel sobre la superficie de exposici n m xima La bandeja de ejecuci n es del 95 transparente a 302 nm de luz y un 40 trans parente a la l
13. Tris base FW 121 1 0 40 M 48 4 g cido ac tico 99 5 0 20 M 11 4 ml EDTA soluci n 0 5 M pH 8 0 soluci n 4 0 01 M 20 0 ml H20 desionizada a 1000 0 ml Revuelva No ajustar el pH Diluir a 1X antes de su uso para producir 40 mM Tris base 20 mM de cido ac tico y 1 mM EDTA 3 Soluci n EDTA cido etilendiaminotetraac tico 0 5 M pH 8 0 100 ml Na2EDTA 2H20 FW 372 2 0 5M 18 6 g H20 desionizada a 70 0 ml NaOH 10 M a pH 8 0 5 0 ml H20 desionizada a 100 0 ml Sambrook J and Russell D W 2001 Molecular Cloning A Labora tory Manual A1 17 Current Protocols in Molecular Biology 1993 A 2 1 o pll o pl2 Ejemplo de tamp n de carga Tamp n de carga 5X 25 Ficoll 400 0 25 azul bromofenol 10 ml H20 desionizada to 7 0 ml Ficoll 400 2 55 Azul bromofenol FW 691 9 25 0 mg H20 desionizada to 10 0 ml A adir 1 volumen de tamp n de carga a 4 volimenes de muestra Tamp n de carga aumenta la densidad de la soluci n Nota 1 Sacarosa o glicerol puede ser utilizado en lugar de Ficoll 400 Nota 2 Xylene cyanol 0 25 que migra mas lentamente que el azul de bromofenol se puede a adir como un marcador adicional si se desea La concentraci n de agarosa determina la posici n de las bandas de colorante relativos a un polinucle tido Colorantes de rastreo puede ser omitida para eliminar oscureci endo y arrastrando efectos causados por comigraci n con peque as cidos nucleico
14. akowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organicznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informac es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protecc o fornecida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que CE marcou ou seguranca registrada por um nacionalmente reconhecido testando laborat rio A tampa de se
15. bos a fin de seguir el progreso de la separaci n En la terminaci n de la elec troforesis el gel puede ser te ido y fotografiado transferido blot o se seca por autorradiograf a Lanzar el gel Preparar las soluciones Se prepara alrededor de 1 3 litros de tamp n de Hasta 100 ml de tamp n es requerido para el gel y 1 2 litros de la camara de amortiguaci n Consulte la pagina 10 para las recetas de los tres utilizados tampones electrofor ticos de funcionamiento e bandeja de tama o cm agarose ml 15x10 45 15x15 68 15x20 90 Atenci n El bromuro de etidio es un mut geno conocido Siempre use guantes al manipular Preparar el tamp n de carga de la muestra Consulte la p gina 12 para una receta y la capacidad de tabu lar el volumen para cada tama o de peine Preparar agarosa soluci n s Disolver agarosa en tamp n de ejecuci n el calor de acuerdo con las instrucciones que acompa an a la agarosa y permitir que la soluci n se enfr e a 50 C antes de verter en la bandeja de funcionamiento Opcional A adir 0 5 ug ml de bromuro de etidio a la soluci n de gel con el fin de facilitar la observaci n del progreso de separaci n durante la electroforesis Fig 2 Gel Kit de calidad Ejecuci n de instalaci n bandeja Enfoque la almohadilla de espuma con un extremo de la bandeja en funcionamiento flecha A y luego presiona suavemente el borde de la bandeja contra la
16. cionamiento de electroforesis de ADN se enumeran a continuaci n La capa cidad tamp n de TBE y tanto TPE suele ser sufi ciente para que la circulaci n de amortiguaci n no es necesario La circulaci n puede ser nece saria durante los recorridos de m s de 3 horas o cuando se usa el tamp n TAE 1 10X Tris borato EDTA TBE existencia de una reserva 0 89 M Tris 0 89 M de cido b rico 20 mM EDTA pH 8 2 1000 ml Tris base FW 121 1 0 89 M 108 0 g cido b rico FW 61 8 0 89 M 55 0 g EDTA soluci n 0 5 M pH 8 0 soluci n 4 0 02M 40 0 ml H20 desionizada a 1000 0 ml Revuelva No ajustar el pH Antes de utilizar la dilu ci n ya sea a 0 5X para producir 45 mM Tris base 45 mM de cido b rico y 1 mM EDTA Esta diluci n se utiliza a menudo porque la corriente se mantiene baja lo que resulta en menos calor 0 1X para producir 89 mM Tris base 89 mM de cido b rico y 2 mM de EDTA 2 10X Tris fosfato EDTA TPE acciones buffera 0 89 M Tris 0 89 M de cido fosf rico 20 mM EDTA pH 8 1 1000 ml Tris base FW 121 1 0 89 M 108 0 g cido fosf rico 85 0 23 M 15 5 ml EDTA soluci n 0 02 M 40 0 ml 0 5 M pH 8 0 soluci n 4 H20 desionizada a 1000 0 ml Revuelva No ajustar el pH Diluir a 1X para producir 89 mM Tris base 23 mM de cido fosf rico y 2 mM de EDTA 3 10X Tris acetato EDTA TAE de valores 0 4 M Tris 0 2 M de cido ac tico 10 mM EDTA pH 8 4 1000 ml
17. de alta tensi n ajuste 1 SE6056 HV Mylar cinta de sellado 1 rollo 66 mm 1 SE1510 Juntas de sellado de espuma 4 HE98X Pies de nivelaci n 4 HE99XRK 1 Productos complementarios MacroVue UV 20 Transilluminator 115 V 1 UV20 115V MacroVue UV 20 Transilluminator 230 V 1 UV20 230V HE99X gel kits de fundici n Cada tama o incluye una bandeja de colada de gel una bandeja de UVT en marcha y 4 juntas de estanqueidad de espuma 15 x 10cm 1 HE97X 10 15 x 15cm 1 HE97X 15 15 x 20cm 1 HE97X 20 HE99X gel bandejas de fundici n 15 x 10cm 1 HE95X 10 15x 15cm 1 HE95X 15 15 x 20cm 1 HE95X 20 HE99X gel running bandejas 15 x 10 cm 1 HE92X 10 15x 15cm 1 HE92X 15 15 x 20cm 1 HE92X 20 e p16 Peines espesor de peine ancho del pozo n mero de pozos mm mm c digo 1 2 1 5 113 10 HE91A P 1 5 1 2 3 0 113 10 HE91A P 3 0 10 1 5 9 7 HE91A 10 1 5 10 3 0 9 7 HE91A 10 3 0 15 1 0 7 1 HE91A 15 1 0 15 1 5 sch HE91A 15 1 5 15 30 7 1 HE91A 15 3 0 20 1 0 4 7 HE91A 20 1 0 20 1 5 4 7 HE91A 20 1 5 20 3 0 4 7 HE91A 20 3 0 30 1 0 3 0 HE91A 30 1 0 Preparativo peines forma dos pozos marcador una a cada lado de la preparativa bien El primer valor de cada columna se refiere a la preparaci n as la segunda a la referencia bien HE90X buffer de la camara R IN HE96X la tapa con los cables de alimentaci n D li 2 SER11 nivel de burbuja SE6056 HV cables de alta
18. e los da os que puedan haber ocurrido mientras la unidad estaba en tr nsito Si alguna parte est da ada p ngase en contacto de inmediato al transportista Aseg rese de guar dar todo el material de embalaje para las recla maciones por da os o para reenvasado en caso de ser necesario devolver la unidad Especificaciones Max voltaje 200V Max potencia 20W Max corriente 100 mA Max temp de funcion 45 Max buffer volume 1 2 liters Gel de tama o 15 cm x 10 cm de ancho 15 o 20 de largo Las condiciones ambientales de funcionamiento Uso en interior 4 40 C Humedad hasta 80 Altitud hasta 2000 m Categor a de instalaci n II Grado de contaminaci n 2 Dimensiones A x L xP 18 2 x 36 x 14cm incluye los mensajes de los electrodos Peso 0 82 kg base tapa lleva s lo Certificaciones producto EN61010 1 UL61010A 1 CSA 022 2 1010 1 CE Certified Antes de empezar 1 Lave todos los componentes con una soluci n diluida de detergente de laboratorio y enjuagar bien 2 Nivel de la unidad colocando el nivel de alcohol en la plataforma de ejecuci n y el ajuste de las patas niveladoras Volumen 3 mm espesor geles Manual de instrucciones Los geles de agarosa se tire la primera en el kit de colada de gel y las muestras se cargan en los pocillos y se separaron electrofor ticamente El bromuro de etidio colorante fluorescente se puede a adir a la memoria intermedia de gel o electroforesis o am
19. e rayos UV Nota Consulte los tampones los vol menes y la secci n de notas para obtener informaci n adicional y las directrices en la p gina 10 Consulte la p gina 12 para obtener una receta de la muestra de tamp n de carga y los vol menes de diversos tama os y peine en geles de diferentes grosores Importante Si se ejecuta dos conjuntos de muestras en un gel controlar la ejecuci n de cerca y detener la electroforesis cuando el colorante marcador se aproxima a los pocillos en el centro Preparaci n para la electroforesis o Opcional Para controlar el progreso de separaci n o bien a adir 0 5 ug ml concentraci n final De bromuro de etidio para el funcionamiento de amor tiguaci n ahora o a adir 50 ug ml concentraci n final Bromuro de etidio a la muestra de amortigua ci n Para visualizar el progreso apague la fuente de alimentaci n retire el conjunto de la tapa y mantener una l mpara UV port til cerca del gel Nota La adici n de bromuro de etidio para el funcio namiento de amortiguaci n o de la muestra disminuye la migraci n ligeramente Detecci n por este m todo no es tan sensible como por tinci n despu s de la carrera de electroforesis Vea la secci n de detecci n de ADN para m s detalles p gina 14 e Llenar la camara con el tamp n hasta que el gel se sumerge 1 mm Cargar las muestras Afiadir la muestra a 1 5 del volumen del tamp n de carga de la mue
20. el gel se convierte de manera que la forma y no se distorsione Disminuye el nivel de tamp n a 1 mm por encima de la parte superior del gel con el fin de reducir el gradiente de tempera tura en el gel Resoluci n de la banda pobre A adir Ficoll glicerol sacarosa o al tamp n de carga de la muestra para asegurar que la muestra se hunde hasta el fondo del pozo Ficoll es el agente recomendado Aseg rese de que la muestra se disuelve completamente Reducir la concentraci n de la muestra Reducir el volumen de la muestra Reducir tensi n a 5 V cm Aseg rese de que el suelo as es por lo menos 1 mm de espesor para evitar que se filtre a trav s de muestras de la parte inferior Reducir la concentraci n de sal de la muestra Ver la actividad enzim tica la muestra puede requerir m s tiempo de digesti n o un tamp n de restricci n diferente Preparar la muestra fresca si usted sospecha que la contaminaci n con nucleasas Elija de agarosa con un valor end smosis baja Las almohadillas de espuma despega No presione la bandeja de correr en su lugar Instale como se describe en la p gina 4 e p9 Importante No ajustar el pH de estos tampones una vez que se prepar de acuerdo con la receta p10 Notas tampones y los vol menes Ejecuci n de tampones para el ADN en geles de agarosa Las recetas para los tres m s com nmente utili zados tampones fun
21. guran a deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguran a Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado e Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instrumento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade Nao opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Superaquecer causar agress o irrepar vel a unidade Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhandah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaboratorium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller levererade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som r CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng V nder sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar
22. ig antifreeze eller noget organisk opl sningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske opl sningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden Driver ikke med stodpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifications Overheding vil for rsage uboelig skade til enheden o pii Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleenglycol door de hitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmiddelen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare
23. int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entretenir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationalement reconnu essayant le laboratoire e Le couvercle de s curit doit tre a sa place avant connecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur un robinet d eau ou a la source d agent de refroidissement ou la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de l instrument Les dissolvants organiques causeront des dommages irr parables l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irr parables a l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird f r den Innenlaborgebrauch nur daf
24. nas steres alcoholes 30 o cidos concentrados m s del 25 La unidad es resistente a todos los tampones de electroforesis comunes pero se recomienda una limpieza a fondo con un detergente suave despu s de cada uso Enjuague con agua desti lada y dejar secar al aire Para eliminar la contaminaci n DNasa y RNasa llenar la unidad con el per xido de hidr geno al 3 H202 en remojo durante 10 minutos luego enjuague bien con tratada con DEPC agua esterilizada desionizada Sambrook and Russell et al 1 7 82 Soluci n de problemas problema soluci n Muestra as deformada Deje que el gel para establecer un m nimo de 1 hora y aseg rese de que est a temperatura ambiente antes de retirar el peine Retirar el peine en un ngulo ligero y muy lentamente para evitar que el gel se rompa Tenga cuidado de no da ar el bien con la pipeta durante la carga de la muestra objetivo para el centro del pozo y no perfore la parte inferior con la punta de la pipeta Las muestras no se est ejecutando a lo largo de una trayectoria recta Si el panal est deformado reemplace Si la bandeja de ejecuci n es deformado reemplace Enfriar la agarosa a 50 C para evitar la bandeja de alabeo Circulate amortiguar si se agota al detener la carrera y pipe teando el buffer de una c mara a la otra Haga doble patr n de bandas Aseg rese de que el peine se mantiene vertical despu s de que
25. nte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent pr ver laboratorium Sikkerheten lokket m v re p plass f r forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kj lemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk l semiddel inn i noe del av instrumentet Organiske l semiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overoppheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprz t jest wykorzystywany w spos b nie okre lone przez Hoefer Inc do ochrony przewidzianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarczone przez Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce ozn
26. para fijar el peine Para ejecutar el doble de muchas muestras en los 15 y 20 cm de bandejas preparar dos conjuntos de peine y colocar uno cerca del extremo del c todo indicado por el punto negro y uno en el centro e p Los pasos finales de fundici n o Verter la soluci n de agarosa enfri a 50 C en la bandeja de funcionamiento asentado en la bandeja de colada Oriente el conjunto de peine de manera que est en el extremo opuesto de la bandeja de la direcci n de la migraci n t picamente en el c todo final que se caracteriza por un punto negro en el mango Instale el conjunto de peine en las ranuras e Permita un minimo de 30 minutos para que el gel para establecer a continuaci n retire el peine con cuidado levantar y parcialmente incline ligeramente el peine en un extremo y poco a poco de retirarse del gel Tirando del peine hacia arriba crea un vac o en los pozos que puede levantar el gel de la bandeja Levante la bandeja de funcionamiento de la bandeja de moldeo y transferirlo con el gel a la unidad hori zontal Oriente Corriendo plataforma para que la muestra correr al rojo Es decir colocar los pocillos de muestra en el c todo final que est indicado por un punto negro Una muesca en cada lado de la bandeja ejecuta centra la bandeja sobre la plataforma de ejecuci n Atenci n Use gafas de seguridad UV y proteger la piel cuando se utiliza una l mpara d
27. que sobresale a trav s de cada extremo de la tapa mien tras levanta las dos leng etas en la tapa para la eliminaci n de la tapa f cil La electroforesis submarina Funci n Unidad y la descripci n El Hoefer unidad HE99X electrofor ticamente separa fragmentos de cidos nucleicos en un gel submarino El gel se tire la primera en una m quina de colada de gel que est disponible en tres longitudes Una vez que los conjuntos de gel la bandeja de funcionamiento se transfiere a la plataforma de la unidad de electroforesis y el gel se sumerge en tamp n de ejecuci n Codificados por colores los cables conectan los electrodos en la base de la unidad a la fuente de alimentaci n electrodo de poste 2 es burbuja gt plataforma buffer de la c mara patas niveladoras 4 Esta declaraci n de conformidad es v lida solamente cuando el instrumento es la siguiente utilizarse en lugares de laboratorio usado como liberado de Hoefer Inc a excepci n de las alteraciones descritas en el manual del usuario y conectado a otros instrumentos de marcado CE o productos recomendados o aprobados por Hoefer Inc Desembalaje Quite el envoltorio de los paquetes cuidadosa mente y comparar el contenido con la lista de empaque asegur ndose de que todos los elemen tos llegaron Si falta alguna pieza comun quese con su oficina local de ventas Inspeccione todos los componentes d
28. s Tabla 3 Especificaciones de peine y vol menes de pozos volume de la muestra por n mero de n mero espesor ancho del profundidad c digo peine de pozos mm pozo mm de 1 mm pl HE91A P 1 5 1 2 113 10 15 171 14 5 HE91A P 3 0 1 2 113 10 3 0 342 29 0 HE91A 10 1 5 10 9 7 1 5 14 5 HE91A 10 3 0 10 9 7 3 0 30 0 HE91A 15 1 0 15 4 1 1 0 7 1 HE91A 15 1 5 15 1 1 1 5 10 6 HE91A 15 3 0 15 1 1 3 0 21 3 HE91A 20 1 0 20 4 7 1 0 4 7 HE91A 20 1 5 20 4 7 15 Tl HE91A 20 3 0 20 4 1 3 0 14 2 HE91A 30 1 0 30 3 0 1 0 3 0 La preparativa peines forma dos pozos de referencia para los est ndares MW una a cada lado de la preparativa bien El primer n mero es el volumen de la muestra mm en el pozo de preparaci n y el segundo es el volumen mm en el pozo de referencia Gel de agarosa notas electroforesis Electroforesis en gel de agarosa se puede utilizar para separar fragmentos de ADN tan peque as como 0 1 kb o menos Los geles de poliacrila mida se utilizan generalmente para los fragmen tos m s peque os que 1 kb La movilidad del ADN Sugerida concentraci n de agarosa para separar fragmentos de diferentes tama os se dan en la Tabla 1 a continuaci n Otros factores que afectan a los resultados de separaci n incluyen el funcionamiento de amortiguaci n ajuste de tensi n temperatura conformaci n y la presencia de bromuro de etidio Agarosas especiales est n disponibles que pueden ampliar la gama de la resoluci n
29. stra Mezclar cada muestra y la carga en un pozo con una pipeta de micro teniendo cuidado de evitar la perforaci n de la parte inferior o bien atrapar burbujas o Colocar la tapa en la unidad de manera que el catodo cable negro est en el extremo m s cercano a las muestras Muestras de cidos nucleicos migran hacia el nodo Conecte los cables codificados por colores rojo con rojo y negro con negro a una fuente de alimentaci n aprobada Ajuste la tensi n y temporizador si est disponible Los geles de agarosa se ejecutan normal mente a una tensi n constante bajo un gradiente de voltaje en el intervalo de 2 5 V cm La distancia entre los electrodos es de 26 cm por lo que un ajuste de 130 V en los resultados de un gradiente de 5 V cm o p7 e p8 Despu s de la electroforesis o ilmportante Siempre apague la fuente de alimentaci n y desconecte los cables antes de retirar la tapa e Si no bromuro de etidio se a adi al gel o de la mues tra antes de la carrera te ir el gel de ahora en una soluci n de 0 5 a 1 0 ug ml de bromuro de etidio en agua o tamp n Limpieza de la unidad como se describe en la secci n siguiente Cuidado y mantenimiento Limpieza e Nunca autoclave o calentar cualquier compo nente por encima de 45 C e Nunca use limpiadores abrasivos e No exponga la unidad a las soluciones o vapores de hidrocarburos arom ticos o halo genados ceto
30. uz de 254 nm Ver la muestra a la luz ultravioleta de 366 nm o menor intensidad 302 nm de luz UV para reducir photonicking Para reducir la fluorescencia de fondo de bromuro de etidio no unido el gel puede ser destained por remojo durante 5 minutos en 0 01 m MgCl o durante 1 hora en 0 001 M MgSO4 Decolorante hace que sea m s f cil de detectar peque as cantidades menos de 10 ng de ADN Sambrook secci n 6 15 Transferir Antes de la transferencia recortar los rebordes en ambos extremos del gel para asegurar un contacto incluso en gel con la membrana Bibliograf a Ausubel et al eds Current Protocols in Molecular Biology Greene Publishing and Wiley Interscience New York 1993 Sambrook J and Russell D W Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press 2001 e p15 Orden informaci n producto cantidad c digo HE99X horizontal de agarosa Unidad de Submarinos completa 1 HE99X 15 1 5 Incluye la unidad b sica 15 x 20 cm kit de gel de fundici n uno de 1 5 mm de espesor de 15 y de nuevo peine y peine HE99X horizontal de agarosa Unidad de Submarinos b sica 1 HE99X Incluye nivel de burbuja Gel de su pedido del kit de fundici n peine y peine de nuevo por separado Accesorios y repuestos Buffer conjunto de la c mara Unica 1 HE9OX Nuevo peine para peinar HE99X con 2 tornillos 1 HE91 BK Tapa con cables de alimentaci n 1 HE96X Cables
31. vassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehk isty varusteille saattaa olla avuton T m v line suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain e Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote e Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen laboratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan k ytt j nnitteeseen e Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautukseen eik j hdytysnestel hteeseen miss vesipaine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja o piii enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumeneminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet quipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par l quipement pourrait tre diminu e Cet instrument est con u pour l usage de laboratoire
32. vena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifikacemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specificeret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan m ske sv kkes Dette instrument er designet for indend rs laboratoriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan m ske bruges for drive funktionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en str mforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt pr ve laboratorium Sikkerhedl get m v re p plads f r forbinding str mforsyningsblyet til en str mforsyning Drejer alle str mforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet f r fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen k lemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldr
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