Monoclonal Mouse
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1. Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied 118550 001 Va KO CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Smooth Muscle Myosin Heavy Chain Clone SMMS 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus Code 15066 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Smooth Muscle Myosin Heavy Chain Clone SMMS 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of breast myoepithelial cells Myoepithelial cells are generally present in breast hyperplasia and ductal carcinoma in situ and absent in invasive breast carcinoma 1 5 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Smooth muscle myosin heavy chain SM MHC is a cytoplasmic structural protein which is a major component of the contractile apparatus in smooth muscle cells Expression of smooth muscle myosin is developmentally regulated appearing early in smooth muscle development and is specific for smooth muscle development 1 2 Two isoforms of smooth muscle myosin2. Il a t montr que des couches de cellules myo pith liales de n oplasmes b nins tels que des l sions scl rosantes complexes et des papillomes pr sentent une coloration positive alors qu aucune coloration myo pith liale na t observ e dans les carcinomes papillaires intrakystiques L expression de la myosine a t d montr e dans les cellules myo pith liales la p riph rie des canaux et des acini impliqu s d un carcinome canalaire in situ Aucune cellule myo pith liale n tait pr sente dans le carcinome invasif du sein et le marquage tait limit aux cellules stromales qui ne coloraient qu une petite proportion des tumeurs test es 5 Il a galement t signal que l anticorps marque le myo pith lium n oplasique d ad nomes pl iomorphes de la glande salivaire 7 Code Nr IS066 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Smooth Muscle Myosin Heavy Chain Clone SMMS 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten Ger ten bestimmt Dieser Antik rper unterst tzt die Identifizierung von Myoepithelzellen in der Brust Myoepithelzellen sind im allgemeinen bei Brusthyperplasie und Duktalkarzinomen in situ vorhanden fehlen jedoch bei invasiven Brustkarzinomen 1 5 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen er
3. 135 7 Savera AT et al Immunolocalization of smooth muscle specific proteins SMSPs in pleomorphic adenomas US Canad Acad Pathol Abstr 1996 104 603 Catalogue number d Temperature limitation In vitro diagnostic medical device R f rence du catalogue Limites de temp rature Dispositif m dical de diagnostic in vitro ml Bestellnummer Zulassiger Temperaturbereich In vitro Diagnostikum LEC REP Dako North America Inc Dako Denmark A S Manufacturer Batch code Contains sufficient for lt N gt tests i i 6392 Via Real Produktionsvej 42 oul Fabricant Code du lot Z Contenu suffisant pour lt n gt tests Carpinteria California 93013 USA DK 2600 Glostrup Denmark Inhalt ausreichend f r n Ans tze Hersteller Chargenbezeichnung Use by Consult instructions for use Authorized representative in the European Community 7 Utiliser jusque BA Consulter les instructions d utilisation EC REP Repr sentant Autoris dans la Communaut Europ enne Tel 805 566 6655 Tel 45 4485 9500 Fax 805 566 6688 Fax 45 4485 9595 Technical Support 800 424 0021 Gebrauch isung beacht Autorisierter Reprasentant in der EU ebrauchsanweisung beachten utorisierter Reprasentant in der Customer Service 800 235 5763 ae rere Verwendbar bis PT0020 Rev C Edition 04 08 118550 001 307693EFG_001 p 6 6
4. arables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se reporter au Manuel de l op rateur sp cifique l appareil Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l appareil Dako Autostainer utilis contacter l assistance technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr levement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un ing nieur d application un sp cialiste de l assistance technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la reprogrammation du protocole V rifier que les performances du protocole modifi sont toujours valides en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit la section Caract ristiques de performance 307693EFG_001 p 3 6 Interpretation de la coloration Caract ristiques de performance Deutsch Zweckbestimmung Zusammenfassung und Erklarung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen 118550 001 Il est recommand d effectuer une contre coloration a Il hematoxyline a l aide du produit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus ref K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des con
5. durchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dies gewahrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte bei Raumtemperatur durchfuhren Nahere Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch fur das jeweilige Gerat entnehmen Wenn die Protokolle auf dem verwendeten Autostainer Gerat nicht verfugbar sind wenden Sie sich an den technischen Kundendienst von Dako Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Als positive Kontrollen sollten Uterus und Appendix verwendet werden und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen R
6. eaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellul re F rbemuster ist zytoplasmatisch 307693EFG_001 p 5 6 Leistungsmerkmale Normale Gewebe In der Aorta von Erwachsenen werden Zellen der Tunica media und die Mehrzahl der glatten Muskelzellen in der subendothelialen Intima markiert 1 Sowohl im Uterus als auch im Appendix weisen die glatte Wandmuskulatur und die Gef e eine zytoplasmatische F rbung auf Myoepithelzellen in G ngen und Azini von routinem ig aufbereitetem normalem Brustgewebe wies ebenfalls eine positive F rbung mit dem Antik rper auf 6 Periazin re und periduktale Myoepithelzellen aus routinem ig fixierten Speicheldr sen f rbten sich mit dem Antik rper positiv wohingegen duktale Zellen nicht reaktiv waren 7 Pathologische Gewebe Der Antik rper markiert nachweislich die intakten Myoepithelzellschichten bei benignen und in situ malignen Brustl sionen Myoepithelzellschichten in benignen Neoplasmen wie z B komplexen sklerosierenden L sionen und Papillomen wiesen eine positive F rbung auf wohingegen in intrazystischen papill ren Karzinomen keine Myoepithel Immunf rbung zu erkennen war Eine Expression von Myosin wurde in Myoepithelzellen an der Peripherie betroffener G nge und Azini in duktalem Karzinom in situ nachgewiesen Myoepithelzellen waren in invasiven Brustkarzinomen nicht vorhanden u
7. g nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Die schwere Kette des Myosins des glatten Muskels SM MHC ist ein zytoplasmatisches Strukturprotein das einen Hauptbestandteil des kontraktilen Apparates in glatten Muskelzellen darstellt Die Expression von Myosin des glatten Muskels wird entwicklungsabh ngig reguliert sie beginnt in der fr hen Phase der Entwicklung der glatten Muskulatur und ist f r die Entwicklung der glatten Muskulatur spezifisch 1 2 Es wurden zwei Isoformen der schweren Kette des Myosins des glatten Muskels identifiziert die als MHC 1 and MHC 2 bezeichnet wurden 3 4 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako bzw den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Clone SMMS 1 1 Isotyp IgG1 Kappa Rohextrakt aus menschlichem Uterus 1 Beim Western Blot von Media Extrakten menschlicher Aorta reagiert der Antik rper sowohl mit de
8. heavy chain have been identified designated MHC 1 and MHC 2 3 4 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone SMMS 1 1 Isotype IgG1 kappa Crude human uterus extract 1 In Western blotting of human aortic media extracts the antibody reacts with both MHC 1 205 kDa and MHC 2 200 kDa isoforms 1 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN3 a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 C Do not use after expiration date s
9. ien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date limite de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patients Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de t
10. issu doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec un d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire Pour obtenir des r sultats optimaux pr traiter les tissus l aide du produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution 3 in 1 High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 K8014 Coupes d paraffin es Il est recommand de pr traiter les coupes de tissus fix s au formol et inclus en paraffine qui ont t d paraffin es l aide de l appareil PT Link de Dako r f PT100 PT101 Pour plus de d tails se reporter au Guide d utilisation du PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice du produit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 K8014 Les param tres suivants doivent tre utilis s pour le PT Link temp rature de pr chauffage 65 C temp rature et dur e du d masquage d pitope 97 C pendant 20 1 minutes refroidissement jusqu 65 C Retirer le portoir lames Autostainer contenant les lames de la cuve du PT Link et plonger imm diatement les lames dans un r cipient une cuve par ex station de rin age du PT Link r f PT109 contenant du tampon de lavage EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 dilu temp rature ambiante Laisser les lames dans le tampon de lavage pendant 1 5 minutes Coupes incluses en paraffi
11. nd die Markierung beschr nkte sich auf Stromazellen die nur bei einem kleinen Teil der getesteten Tumore eine F rbung aufwiesen 5 Berichten zufolge markiert der Antik rper auch das neoplastische Myoepithel pleomorpher Adenome der Speicheldr se 7 References 1 Frid MG Shekhonin B Koteliansky VE Glukhova MA Phenotypic changes of human smooth muscle cells Bibliographie during development Late expression of heavy caldesmon and calponin Dev Biol 1992 153 185 93 Literaturangaben 2 Glukhova MA Frid MG Koteliansky VE Developmental changes in expression of contractile and cytoskeletal proteins in human aortic smooth muscle J Biol Chem 1990 265 22 13042 6 3 Borrione AC Zanellato AMC Scabbaoueco G Pauletto P Sartore S Myosin heavy chain isoforms in adult and developing rabbit vascular smooth muscle Eur J Biochem 1989 183 413 7 4 Sartore S De Marzo N Borrione AC Zanellato AMC Saggin L Fabbri L Schiffino S Myosin heavy chain isoforms in human smooth muscle Eur J Biochem 1989 179 79 5 Lazard D Sastre X Frid MG Glukhova MA Thiery J Koteliansky VE Expression of smooth muscle specific proteins in myoepithelium and stromal myofibroblasts of normal and malignant human breast tissue Proc Natl Acad Sci USA 1993 90 999 1003 6 Wang NP et al Monoclonal antibodies MAbs to novel myoepithelium associated proteins can distinguish between benign and malignant lesions of the breast US Canad Acad Pathol Abstr 1996 26
12. ne Comme pr paration alternative des chantillons le d paraffinage et le d masquage d pitope peuvent tre r alis s dans l appareil PT Link en utilisant une proc dure modifi e Consulter le Guide d utilisation du PT Link pour obtenir des instructions Une fois que la proc dure de coloration est termin e les coupes doivent tre d shydrat es claircies et mont es l aide d un milieu de montage permanent Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames Dako Silanized Slides r f S3003 Le syst me de visualisation recommand est le syst me EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont pr programm s dans le logiciel des appareils Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 uL Programme automatique SMM sans contre coloration ou SMMH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comp
13. nntem auf Zimmertemperatur gebrachtem EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 eintauchen Die Objekttrager fur 1 5 Minuten im Waschpuffer belassen Paraffineingebettete Schnitte Alternativ k nnen Entparaffinierung und Epitopdemaskierung im PT Link unter Verwendung eines modifizierten Verfahrens durchgef hrt werden Weitere Informationen finden Sie im PT Link Benutzerhandbuch Nach Abschluss des F rbeverfahrens m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und unter Verwendung eines permanenten Fixiermittels auf die Objekttr ger aufgebracht werden Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von Dako Silanized Slides Code Nr S3003 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software von Autostainer Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 ul Anwendungsvolumen oder FLEXRTU3 300 ul Anwendungsvolumen Autoprogramm SMM ohne Gegenfarbung oder SMMH mit Gegenfarbung Bei Farbedurchlaufen mit h chstens 10 Objekttragern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden Fur F rbe
14. ormes de la cha ne lourde de la myosine du muscle lisse ont t identifi es d sign es MHC 1 et MHC 2 3 4 Se reporter aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales 307693EFG_001 p 2 6 R actifs fournis Immunog ne Sp cificit Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 118550 001 Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone SMMS 1 1 Isotype IgG kappa Extrait brut d uterus humain 1 Lors de Western Blots effectu s sur des extraits de m dia aortique humaine l anticorps pr sente une r action avec les deux isoformes MHC 1 205 kDa et MHC 2 200 kDa 1 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN un produit chimique hautement toxique sous sa forme pure Aux concentrations du produit b
15. ortion of the tumors tested 5 The antibody was also reported to label neoplastic myoepithelium of pleomorphic adenomas of the salivary gland 7 Ref 15066 Pour utilisation diagnostique in vitro L anticorps FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Smooth Muscle Myosin Heavy Chain Clone SMMS 1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destine a amp tre utilise en immunohistochimie avec les appareils Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps est utile pour l identification des cellules myo pith liales mammaires Des cellules myoepitheliales sont en g n ral pr sentes dans l hyperplasie du sein et le carcinome canalaire in situ mais absentes dans le carcinome invasif du sein 1 5 L interpretation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi La cha ne lourde de la myosine du muscle lisse SM MHC pour Smooth Muscle Myosin Heavy Chain est une prot ine structurale cytoplasmique qui est un composant principal de l appareil contractile dans les cellules du muscle lisse L expression de la myosine du muscle lisse est r gul e d un point de vue developpemental apparaissant pr cocement lors du d veloppement du muscle lisse et elle est sp cifique au d veloppement du muscle lisse 1 2 Deux isof
16. r Isoform MHC 1 205 kDa als auch mit der Isoform MHC 2 200 kDa 1 1 F r Fachpersonal 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen ne 307693EFG_001 p 4 6 Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Farbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der Farbung 118550 001 Bei 2 8 C aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Flaschchen aufgedruckten Verfallsdatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien nicht entsprechend den angegebenen Bedingungen aufbewahrt mussen die Bedingungen vom Anwender gepruft werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen fur eine eventuelle Produktinstabilitat Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten Farbung kommt die sich nicht durch Un
17. rack with slides from the PT Link tank and immediately dip slides into a jar tank e g PT Link Rinse Station Code PT109 containing diluted room temperature EnVision FLEX Wash Buffer 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 Leave slides in Wash Buffer for 1 5 minutes 307693EFG_001 p 1 6 Staining procedure including materials required but not supplied Staining interpretation Performance characteristics Fran ais Utilisation pr vue R sum et explication 118550 001 Paraffin embedded sections As alternative specimen preparation both deparaffinization and epitope retrieval can be performed in the PT Link using a modified procedure See the PT Link User Guide for instructions After the staining procedure has been completed the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of Dako Silanized Slides Code 3003 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense vol
18. splay reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 The cellular staining pattern is cytoplasmic Normal tissues In the adult aorta cells of the tunica media and a majority of the smooth muscle cells in the subendothelial intima are labeled 1 In both uterus and appendix the smooth muscle of wall and vessels exhibit cytoplasmic staining Myoepithelial cells in ducts and acini of routinely processed normal breast also demonstrates positivity with the antibody 6 Periacinar and periductal myoepithelial cells of routinely fixed salivary gland stain positively with the antibody whereas ductal cells were found to be unreactive 7 Abnormal tissues The antibody has been shown to label the intact myoepithelial cell layers present in benign and in situ malignant breast lesions Myoepithelial cell layers in benign neoplasms such as complex sclerosing lesions and papillomas have been shown to stain positively whereas no myoepithelial immunostaining was observed in intracystic papillary carcinomas Myosin expression was demonstrated in myoepithelial cells at the periphery of involved ducts and acini in ductal carcinoma in situ Myoepithelial cells were not present in invasive breast carcinoma and labeling was restricted to stromal cells which stained only in a small prop
19. tamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution 3 in 1 High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 K8014 The following parameters should be used for PT Link Pre heat temperature 65 C epitope retrieval temperature and time 97 C for 20 1 minutes cool down to 65 C Remove Autostainer slide
20. terschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verstandigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um Starke geschnitten werden Es ist eine Vorbehandlung mit hitzeinduzierter Epitopdemaskierung HIER Verfahren erforderlich Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution 3 in 1 High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 erzielt werden Entparaffinierte Schnitte Die Vorbehandlung entparaffinierter formalinfixierter paraffineingebetteter Gewebeschnitte sollte mit dem System Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 erfolgen Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage fur EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 10x Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 K8014 durchf hren Fur das PT Link System sollten die folgenden Parameter verwendet werden Vorwarmtemperatur 65 C Temperatur und Zeit fur Epitopdemaskierung 97 C fur 20 1 Minuten auf 65 C abkuhlen Das Autostainer Objekttragergestell mit den Objekttragern aus dem PT Link Behalter herausnehmen und die Objekttrager sofort in einen Behalter z B PT Link Rinse Station Code Nr PT109 mit verd
21. tr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons de patients Le tissu de contr le positif doit comprendre l ut rus et l appendice et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action semblables ceux d crits pour ces tissus la section Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le r actif de contr le n gatif recommand est le produit FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus ref 1S750 Le schema de coloration cellulaire est cytoplasmique Tissus sains Dans l aorte adulte les cellules de la m dia et une majorit des cellules du muscle lisse de l intima sous endotheliale sont marqu es 1 Dans l uterus et l appendice le muscle lisse de la paroi et des vaisseaux presente une coloration cytoplasmique Les cellules myo pith liales des canaux et acini de sein sain trait de la mani re habituelle ont galement pr sent une coloration positive avec l anticorps 6 Les cellules myoepith liales p ri acinaires et p ri canalaires de glande salivaire fix e de la mani re habituelle ont pr sent une coloration positive avec l anticorps alors que les cellules canalaires n ont pr sent aucune r action 7 Tissus tumoraux Il a t montr que l anticorps marque les couches de cellules myoepitheliales intactes pr sentes dans des l sions du sein b nignes et malignes in situ
22. ume Autoprogram SMM without counterstaining or SMMH with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include uterus and appendix and the cells structures should di
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