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Comparaison de la qualité de la semence de taureaux collectés à l

1. Race Nom exp rimentation N National Date de Nombre de Motilit moyenne naissance sauts apr s cong lation Brun des Alpes AJUVAL 50 3 9 4806031422 11 09 05 Brun des Alpes ALLIEN 49 3 1205195019 9 11 05 Prim Holstein TAM BOR testage 1203176161 12 09 02 Prim Holstein TAQUIN DB 32 3 5 3141072715 16 06 02 Prim Holstein UVILO MTY testage 1203157367 4 06 03 Tableau 4 Caract ristiques des 5 taureaux de race allaitante du GROUPE 2 Collectes r alis es avant Race Nom exp rimentation N National Date de Nombre de Motilit moyenne naissance sauts apres cong lation Blond d Aquitaine ANIS 12 3 9 1010775089 1 12 05 Blond d Aquitaine SAUPIQUET testage 6464123029 21 05 01 Blond d Aquitaine SAXO 64 3 6 4639791303 16 09 01 Blond d Aquitaine ULOT testage 1203055354 9 02 03 Blond d Aquitaine UXUE 12 3 3 6464150780 14 02 03 Les taureaux de l exp rimentation comme les taureaux en production taient log s dans des boxes individuels de 22 m paill s tous les jours avec 10 kg de paille Le d fumage tait r alis toutes les trois semaines Les taureaux ont t nourris avec une ration base de foin volont 15 kg en moyenne distribu matin et soir et de concentr s 2 5 kg en moyenne de fabrication Groupe Occitan 2 Collecte de semence Les dix taureaux ont t r partis en nombre gal n 5 en deux groupes le GROUPE 1 corr
2. F0 A Electro jaculateur bed 3000 a Vagin artificiel 2 2500 E 2000 E 5 1500 So 5 2 1000 Q O O Anis Saupiquet Saxo Ulot Uxue Ajuval Allien TamBor Taquin Uvilo Taureaux collect s Figure 15 Distribution individuelle des concentrations des jaculats collect s par lectro jaculateur et par vagin artificiel La concentration des jaculats collect s par vagin artificiel a t significativement sup rieure celle des jaculats collect s par lectro jaculateur 718 millions en moyenne par lectro jaculateur et 1800 millions par vagin artificiel p lt 0 001 Les jaculats du taureau Ulot ont pr sent des concentrations en spermatozo des tr s proches quelle que soit la technique de collecte utilis e entre 1500 et 2100 millions de spermatozo des par millilitre de sperme Un effet s quence est galement observ p 0 016 Cet effet s quence est confondu avec l effet race les taureaux de race laiti re ayant effectu la s quence E V lectro jaculateur puis vagin artificiel alors que les taureaux de race allaitante ont effectu la s quence V E vagin artificiel puis lectro jaculateur Lors des collectes l lectro jaculateur les jaculats des taureaux de race Blond d Aquitaine ont pr sent des concentrations en spermatozo des significativement sup rieures aux jaculats des taureaux de race Brun des Alpes et Prim Holstein 67
3. La figure 16 pr sente la distribution par race des concentrations moyennes des jaculats collect s a l lectro jaculateur et au vagin artificiel a Blond d Aquitaine 2500 o Brun des Alpes 5 Prim Holstein D g 5 2000 Se SE SE 1500 G 9 5 2 1000 4 S S C o O c 500 2 0 d Electro jaculateur Vagin artificiel Figure 16 Repr sentation par race des concentrations moyennes des jaculats collect s par lectro jaculateur et vagin artificiel moyenne cart type Sur le graphique on constate que les moyennes des concentrations des jaculats collect s au vagin artificiel sont tr s proches pour les trois races de taureaux tudi s En ce qui concerne les collectes r alis es l lectro jaculateur la race Blond d Aquitaine pr sente une moyenne de concentrations nettement sup rieure celle des taureaux Bruns et Prim Holstein 68 La figure 17 repr sente l volution des concentrations moyennes en spermatozo des des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel au cours des quatre semaines d exp rimentation Electro jaculateur s Vagin artificiel gt E Le 4 Oo en millions de spermatozo des semaine 1 semaine 2 semaine 3 semaine 4 Figure 17 Evolution des concentrations moyennes en spermatozo des des jaculats colle
4. d anomalies mineures 4 7 5 9 4 8 4 9 Non de 0 100 0 22 0 16 Significatif d anomalies majeures 2 7 1 7 23 3 1 Non de 0 100 1 7 7 0 14 Significatif Motilit apr s 2 9 1 4 1 8 1 cong lation 0 5 0 3 5 p 0 002 de 0 a5 65 1 Etude des effets de la m thode de collecte sur les param tres de la semence avant cong lation a Volume La figure 14 pr sente les volumes des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel A Electro jaculateur 14 Vagin artificiel Volume en mL Anis Saupiquet Saxo Ulot Uxue Ajuval Allien Tam Bor Taquin Uvilo Taureaux collect s Figure 14 Distribution individuelle des volumes des jaculats collect s par lectro jaculateur et par vagin artificiel La m thode de collecte n a pas eu d effet significatif sur le volume des jaculats collect s 6 3 mL de moyenne par lectro jaculateur 6 mL par vagin artificiel Test de Schalm Les notes obtenues au test de Schalm ont t significativement sup rieures pour les jaculats collect s l lectro jaculateur par rapport aux jaculats collect s au vagin artificiel note moyenne de 1 7 l lectro jaculateur et de 0 05 au vagin artificiel 66 a Concentration en spermatozo des La figure 15 pr sente les concentrations des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel
5. Les pourcentages d chec et de non aptitude la cong lation ont t respectivement de 12 5 et 6 3 pour les taureaux de race Blond d Aquitaine alors qu ils ont t respectivement de 25 et 12 5 33 3 et 16 6 pour les taureaux de race Brun des Alpes et Prim Holstein L analyse statistique montre un effet de la s quence sur la concentration des spermatozo des confondu avec l effet race Les moyennes des concentrations des jaculats collect s au vagin artificiel sont tr s proches pour les trois races de taureaux tudi s En revanche en ce qui concerne les collectes r alis es l lectro jaculateur la race Blond d Aquitaine pr sente une moyenne de concentrations sup rieure celle des taureaux Bruns et Prim Holstein Les taureaux de race Blond d Aquitaine ont donc sembl mieux r agir la technique de collecte l lectro jaculateur que les taureaux de race Brun et Prim Holstein Les 99 de r ussite de collecte obtenus par Lacroix 1988 dans le cadre de 311 contr les de fertilit en ferme ont t r alis s partir de taureaux de race Charolais presque exclusivement l exception de deux Limousins et d un Blond d Aquitaine L effet de la race des taureaux dans la r ponse la technique de collecte l lectro jaculateur a t observ dans d autres tudes Chenoweth et al 1978 ont tudi les r actions de taureaux de races Brahman Africander Hereford et celles
6. Les animaux jeunes ou de petit gabarit pr sentent une faible r sistance interne la diffusion des influx lectriques appliqu s dans le rectum ce qui entra ne chez eux une stimulation plus importante de nerfs qui passent proximit de la zone stimul e L affaissement total a concern 4 des taureaux Aucune s quelle n est apparue suite la technique d lectro jaculation L inconfort provoqu par les stimulations lectriques appliqu es dans le rectum pose un probl me d thique par rapport l utilisation de l lectro jaculateur dans un souci de 83 pr servation du bien tre animal Diff rentes techniques visant a valuer et diminuer l inconfort du taureau lors de l lectro jaculation ont t essay es elles sont d v lopp es dans la deuxi me partie de la discussion 3 Pr sence d une rection Dans notre tude 82 5 des tentatives de collecte l lectro jaculateur ont entra n une rection des taureaux Lacroix 1988 obtient des fr quences d rection de 92 chez les adultes et de seulement 70 chez les animaux de moins de deux ans L absence d rection lors de l lectro jaculation induit une baisse de la qualit de la semence collect e la semence qui coule le long du fourreau se souille davantage et se refroidit ce qui pourra t expliquer la d gradation de la qualit du sperme et la diminution des notes de motilit Palmer et al 2005 4 Effet race
7. cr nialement la prostate Les premi res lectrodes quipant les sondes rectales taient des lectrodes circulaires utilis es par Laplaud et Cassou en 1945 Les lectrodes longitudinales ont t cr es en 1954 Les essais comparatifs entre les deux types d lectrodes sont en faveur des lectrodes longitudinales qui permettent d obtenir de meilleurs r sultats de collecte Ball et Furman 1972 L int r t des lectrodes fix es sur la main est de permettre l utilisateur de palper les organes pelviens prostate glandes v siculaires et de stimuler une zone pr cise et limit e Les contractions musculaires non souhait es sont ainsi fortement diminu es chez le taureau Easley 1970 Cependant des risques de blessures li es soit l lectricit soit la chute de 30 l animal sont craindre pour l op rateur C est pourquoi les lectrodes sur sonde rectale sont les plus utilis es actuellement Un des mod les vendus aux Etats Unis et utilis en Europe est l Electrojac 3 lectrodes longitudinales font saillie sur la sonde repr sent e sur la figure 6 pour permettre le contact avec la muqueuse rectale Figure 6 Repr sentation sch matique de la sonde Electrojac D apr s Cuisenier 1996 Les param tres de stimulation Les appareils lectriques actuels permettent de faire varier la fr quence la tension et l intensit lectrique Des programmes de stimulation sont enr
8. es a l lectro jaculateur qui n ont permis d obtenir que du liquide spermatique concentration nulle en spermatozo des ont t consid r s comme des checs de collecte Dans les tudes cit es pr c demment cette information n est pas pr cis e les collectes de liquide spermatique seul ont pu tre prises en compte ce qui pourrait expliquer les diff rences de pourcentage de r ussite la collecte 79 La technique de collecte l lectro jaculateur a donc pr sent dans le cadre de notre tude des aptitudes de collecte comparables celles du vagin artificiel en ferme De plus l utilisation de l lectro jaculateur pr sente un avantage non n gligeable par rapport au vagin artificiel le temps pass r aliser la collecte Dans le cadre de l exp rimentation Coopelso un temps de 1 heure et trente minutes environ tait n cessaire pour collecter 5 taureaux l lectro jaculateur La collecte d un taureau en ferme au vagin artificiel peut durer plus d une heure car elle est d pendante de la stimulation du taureau et de sa capacit sauter La collecte de taureaux en ferme semble plus facile et rapide l lectro jaculateur cette m thode a t elle une influence sur la qualit des jaculats collect s 2 Qualit du sperme Les volumes des jaculats collect s l lectro jaculateur n ont pas t significativement diff rents des volumes des jaculats collect s au vag
9. off les taureaux en production et les taureaux en arr t de production dans l attente des r sultats de testage les taureaux dits en lay off sont des taureaux mis en repos sexuel apr s avoir constitu une r serve g n tique de 3000 4000 doses par animal L influence de l alimentation sur la qualit ou la quantit de la semence des taureaux reproducteurs est peu document e On consid re que les besoins de production repr sentent 5 10 des besoins d entretien Des apports journaliers de 10 UFL et de 1000 g de PDIN et PDIE couvrent largement les besoins des animaux Enjalbert 1998 Les d ficits nerg tiques se traduisent chez le jeune par un retard la pubert et une baisse de la production et de la qualit de la semence produite Chez l adulte la sous alimentation comme la suralimentation entra nent surtout une baisse de la libido Les carences en min raux et vitamines sont exceptionnelles chez les taureaux d ins mination Le zinc le cuivre et la vitamine A jouent un r le important pour la fonction de reproduction Le s l nium est important surtout pour son r le dans la contraction musculaire Hurley et Doane 1989 2 La salle de monte G rard et Khirredine 2002 La qualit bact riologique de la semence r colt e d pend des conditions de collecte de la propret du taureau mais aussi de la propret de la salle de monte Son entretien r gulier est r alis apr s chaque s ance de collect
10. sent une rection dans 82 5 des collectes a l lectro jaculateur L incapacit de cette m thode provoquer une rection syst matique est probl matique car elle ne permet pas l observation de la verge examen indispensable pour valuer la fonction reproductrice d un taureau elle entra ne en outre une exposition plus importante du sperme lair et au froid l origine d une d gradation plus rapide 2 Utilisation d un vagin artificiel interne Le vagin artificiel interne fix dans le vagin d une vache boute en train est une m thode de collecte qui a t test e lors d valuations de la fonction reproductrice des taureaux et compar e une r colte de semence par lectro jaculateur Barth et al 2003 50 70 des taureaux en production ont pu tre r colt s au vagin artificiel interne contre 100 lors des collectes l lectro jaculateur En d finitive la technique de massage des ampoules d f rentielles pr sente trop de limites ou d inconv nients pour remplacer l lectro jaculation et reste donc anecdotique En revanche l utilisation du vagin artificiel interne est int ressante mais n a pas encore fait l objet de d veloppement en France 89 CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES L lectrogjaculateur a permis de collecter moins d jaculats et de moins bonne qualit que ceux obtenus lors des collectes au vagin artificiel en raison d une efficacit de co
11. t am lior car le nombre de stimulations n cessaires la collecte d un jaculat ont t diminu es Palmer et al 2003 La centrifugation ou dialyse des jaculats de taureaux collect s par lectro jaculateur a te envisag e Tibary et al 1990 Cette technique de concentration utilis e couramment en andrologie humaine permet de concentrer l jaculat avant de le congeler dans des conditions optimales Ainsi la motilit apr s cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur a t augment e Par la suite deux groupes de vaches ont t ins min s en suivant le m me protocole l un partir de paillettes r alis es partir d jaculats collect s l lectro jaculateur et dialys s l autre partir de paillettes du commerce Les taux de fertilit obtenus par les deux groupes de vache n ont pas t significativement diff rents la dialyse n a donc pas alt r la capacit de reproduction des spermatozo des Cependant l auteur a constat qu au del d un certain volume de plasma s minal dans l jaculat la r sistance la cong lation des jaculats collect s par lectro jaculateur tait diminu e de fa on irr versible 3 Techniques alternatives la collecte a l lectro jaculateur 1 Massage transrectal La qualit de la semence collect e par massage transrectal a t compar e celle collect e par lectro jaculateur Palmer et al 2004
12. 289 DOOLEY M P PINEDA M H MAURER R R et al Evidence of retrograde flow of spermatozoa into the urinary blader of bulls during electro jaculation Theriogenology Ville d dition 1986 26 1 101 109 DUMONT P Appr ciation de la fonction sexuelle du taureau reproducteur Le Point V t rinaire 1997a 28 185 1617 1628 DYCE K M SACK W O WENSING C J G Textbook of veterinary Anatomy Philadelphia W B Saunders Company 1987 p 184 DYCE K M SACK W O WENSING C J G Textbook of veterinary Anatomy Philadelphia W B Saunders Company 1987 p 660 EASLEY G T A hand electrode for the electroejaculation of bulls Bovine Practitionner 1970 5 12 13 16 ENJALBERT F Alimentation et reproduction chez le taureau Bulletin des GTV 1998 5 21 25 ETSON J C WALDNER C L BARTH A D Evaluation of a segmented rectal probe and caudal epidural anesthesia for electroejaculation of bulls Canadian Veterinary Journal 2004 45 3 235 240 FALK A J WALDNER C L COTTER B S Effects of epidural lidocaine anesthesia on bulls during electroejaculation Canadian Veterinary Journal 2001 42 2 116 120 FOSTER J ALMQUIST J O MARTIG R C Reproductive capacity of beef bulls Changes in sexual behavior and semen characteristics among successive ejaculations Journal of Animal Science 1970 30 2 245 52 95 GARNER D L Artificial
13. Etson et al 2005 Ces r sultats difficiles interpr ter sont en partie expliqu s par le fait qu il est difficile de quantifier la douleur et le stress chez les bovins le simple fait de contraindre l animal rester bloqu dans un travail fait augmenter de fa on significative les marqueurs de stress utilis s 2 Comment am liorer la qualit de la semence lors d une collecte l lectro jaculateur Lors d une collecte au vagin artificiel pendant la pr paration sexuelle des taureaux la post hypophyse lib re de l ocytocine Cette hormone est l origine des contractions des muscles lisses qui entourent la queue de l pididyme et les canaux d f rents Ces contractions vont permettre le transport des spermatozo des de la queue de l pididyme vers les canaux d f rents et eventuellement vers la partie pelvienne de l ur tre Senger 2003 L injection d ocytocine 50 UI par voie intramusculaire ou intraveineuse 10 minutes avant la collecte par lectro jaculateur a t envisag e par plusieurs auteurs Abreu et al 1991 Berndtson et al 1988 Palmer et al 2003 Elle a permis d augmenter de fa on significative la concentration des l jaculats collect s l lectro jaculateur Abreu et al 1991 Berndtson et al 1988 Palmer et al 2003 sans alt rer la qualit de la semence Berndtson et al 1988 En outre le confort du taureau lors de 87 l lectro jaculation a
14. art riel Setchell B P 1991 L rection et l jaculation sont sous le contr le du syst me nerveux Le chapitre suivant d crit comment ces ph nom nes physiologiques peuvent tre provoqu s artificiellement par lectrostimulation dans le cadre de l lectro jaculation 21 3 Electrostimulation de l rection et de l jaculation principe de l lectro jaculation La Figure 5 repr sente de fa on sch matique le syst me nerveux qui innerve l appareil g nital du taureau Le principe de l lectro jaculation est de faire passer un courant de fa on diffuse dans la sph re g nitale de mani re provoquer l excitation des diff rents centres nerveux responsables de l rection et de l jaculation ces derniers tant situ s dans la moelle pini re lombaire et sacr e not s respectivement Centre 2 et Centre 1 sur la figure 5 Un g n rateur produit de l lectricit qui est transmise par l interm diaire d lectrodes l animal Les lectrodes rectales sont les plus couramment utilis es aujourd hui car elles permettent dans une certaine mesure de mieux contr ler le site de la stimulation La stimulation de nerfs qui passent proximit de la zone stimul e par exemple le nerf sciatique peut provoquer des contractions musculaires non souhait es Stievenart 1997 ee a 5 ys S TI T 4 CENTRE1 LEGENDE A nerf rectal caudal B nerf pe
15. bien cette m thode de collecte En deux mois de production il a r alis 14 collectes l lectro jaculateur soit environ 10000 doses avec des valeurs moyennes de qualit de semence apr s cong lation satisfaisantes note de mobilit 3 4 pourcentage de spermatozo des vivants 57 9 note globale 4 1 Donn es Coopelso 2007 En d finitive il semble donc qu il y ait un facteur individuel important pour la r ussite des collectes l lectro jaculateur B LES COLLECTES A L ELECTROEJACULATEUR 1 Technique de collecte La moyenne des cycles n cessaires la collecte d un jaculat est de 1 4 ce qui signifie qu un jaculat sur deux n a pu tre collect qu au deuxi me cycle Le nombre moyen de pulsations n cessaires la collecte est de 20 4 avec des variations individuelles importantes Lacroix 1988 a r alis dans le cadre de contr le de fertilit en ferme 149 collectes de taureaux avec le m me mat riel que celui dont nous disposions dans notre tude Un deuxi me pr l vement tait r alis 10 minutes apr s le premier lorsque le r sultat de la premi re analyse tait insuffisant motilit massale lt 3 Environ 70 des taureaux ont d r aliser un deuxi me cycle de stimulations l lectro jaculateur avant de donner un chantillon de sperme de qualit satisfaisante Le m me auteur sur 61 collectes de taureaux a not quel moment du cycle de stimulations lectrique
16. canadianveterinarians net CHENOWETH P J Clinical Reproductive Anatomy and Physiology of the bull In ROBERT S YOUNGQUIST WALTER R THREFALL Curent Therapy in large animal theriogenology second edition Saunders Elsevier 2007 p 217 CHENOWETH P J OSBORNE H G Breed differences in the response of youngs bulls to electroejaculation Australian Veterinary Journal 1978 54 333 337 CONTANTINESCA G Et I Clinical dissection guide for large animals Horse and Large Ruminants 2 me dition Iowa Iowa State Press 2004 p 321 CUISENIER C Contribution a l tude de l importance de l examen du sperme dans le contr le d aptitude la reproduction des taureaux de monte naturelle Th Med vet Alfort 1996 n 53 CZIBA J C MONTELLA A Biologie de la reproduction humaine Montpellier 1993 Sauramps M dical DACHEUX F et J L La Reproduction chez les mammif res et l homme INRA Editions Ellipses Paris 2001 DACHEUX F et J L L pididyme et les glandes annexes In THIBAULT C et LEVASSEUR M C La Reproduction chez les mammif res et l homme nouvelle dition Paris INRA Editions ellipses 2001 290 315 94 DADOUNE J P et DEMOULIN A Structure et fonctions du testicule In THIBAULT C et LEVASSEUR M C La Reproduction chez les mammif res et l homme nouvelle dition Paris INRA Editions ellipses 2001 256
17. collecte l lectro jaculateur est r alis e facilement et ne semble pas tre douloureuse Cependant lorsque des niveaux de stimulation lev s sont utilis s certains taureaux particuli rement les plus jeunes meuglent manifestent des contractions musculaires involontaires ou chutent Mosure et al 1998 Etson et al 2004 Dans notre tude lors de la premi re collecte l lectro jaculateur de la phase d entra nement les deux taureaux de la race Brun des Alpes Ajuval et Allien ont chut lors de la mont e en intensit des stimulations lectriques Par la suite au cours des quatre semaines d exp rimentation aucun taureau n a chut ou meugl Cependant au fur et mesure des collectes l lectro jaculateur les taurelliers de Coopelso ont constat une certaine r ticence des taureaux rentrer dans le travail o avaient lieu les collectes l lectro jaculateur A partir de la deuxi me semaine d exp rimentation le taureau Anis trop craintif pour tre amen dans la cage de contention a t pr lev dans la salle d attente de la salle de monte Toutefois ces constatations sont relativement subjectives car aucun param tre d valuation de stress n a t mesur dans notre tude A partir de l observation de 122 taureaux collect s en ferme Lacroix 1988 a constat un affaissement partiel chez 25 des animaux de moins de deux ans et seulement 2 des animaux de plus de deux ans
18. de collecte et de non aptitude la cong lation Tableau 8 R partition par race des pourcentages d checs de collecte et de non aptitude la cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel METHODE DE BLOND BRUN DES PRIM COLLECTE D AQUITAINE ALPES HOLSTEIN d checs de Electro jaculateur 12 5 25 33 3 collecte Vagin artificiel 0 0 0 de non aptitude Electro jaculateur 6 25 12 5 16 6 a la cong lation Vagin artificiel 0 0 0 On constate que les pourcentage d chec et de non aptitude a la cong lation sont de seulement 12 5 et 6 25 pour les taureaux de race Blond d Aquitaine alors qu ils sont respectivement de 25 et 12 5 33 3 et 16 6 pour les taureaux de race Brun des Alpes et Prim Holstein 62 2 Caract ristiques des collectes r alis es a l lectro jaculateur Le tableau 9 pr sente les param tres individuels de collecte l lectro jaculateur des 10 taureaux de l exp rimentation Tableau 9 Param tres individuels de collecte l lectro jaculateur Taureau Fr quence Moyenne des Moyenne Fr quence Fr quence des race des checs pulsations du nombre des opacifications de de collecte n cessaires la de cycles rections semence collecte d un n cessaires observ es observ s jaculat la collecte Allien 0 4 15 1 5 4 4 2 4 Brun Aj
19. de notre tude l effet de la m thode de collecte sur la diff rence de note de motilit avant et apr s cong lation n est pas significatif m me si la baisse de motilit apr s cong lation appara t plus importante pour les jaculats collect s l lectro jaculateur Cette moindre r sistance la cong lation peut s expliquer par les plus faibles concentrations en spermatozo des lors des collectes l lectro jaculateur l apport de dilueur n cessaire la protection des spermatozo des lors de la cong lation est moindre chaque paillette contenant 25 millions de spermatozo des ce qui peut expliquer une moins bonne protection des spermatozo des lors de la cong lation 67 5 des collectes au vagin artificiel et seulement 17 5 des collectes r alis es l lectro jaculateur ont permis la r alisation de paillettes de qualit suffisante ce r sultat ne va pas en faveur de l utilisation de l lectro jaculateur pour la r alisation de paillettes pour la monte priv e Cependant la collecte l lectro jaculateur n est pas incompatible avec la r alisation et la cong lation de paillettes A titre d exemple le taureau Prim Holstein Tizac qui devait tre mis en production en octobre 2007 avait t collect au vagin artificiel pour r aliser ses doses de testage mais a refus le saut lors de son entr e en production 81 L lectro jaculation a t utilis e et l animal supporte
20. du sperme par massage transrectal Les taureaux calmes et dociles en repos sexuel sont de bons candidats pour tre collect s par massage transrectal L examinateur introduit sa main dans le rectum et apr s l examen des glandes accessoires il commence appliquer un mouvement longitudinal d avant en arri re sur les ampoules du conduit d f rent la prostate et p riodiquement l ur tre Le fait de stimuler en plus les glandes v siculaires n apporte pas de meilleurs r sultats Le massage est effectu jusqu ce qu un chantillon de semence ait pu tre collect mais si rien n est collect au bout de 2 3 minutes la collecte sera s rement un chec Les inconv nients principaux de la technique sont l irritation de la muqueuse rectale la faible fr quence des rections observ es et la difficult masser des taureaux peu dociles De plus la technique est assez laborieuse Albert et al 2007 40 E ACTIVITE DE COLLECTE DE SEMENCE EN FRANCE En France deux mille taureaux reproducteurs destin s la production de paillettes d ins mination sont situ s dans les centres de collecte de semence environ cent mille taureaux destin s la monte naturelle sont pr sents dans les levages 1 Pr sentation de l activit des centres d ins mination 1 Entretien des taureaux G rard et Khirredine 2002 Les centres de production de semence h bergent trois types de taureaux les taureaux en lay
21. dullaires et font intervenir de nombreux interneurones Houdeau et al 2001 24 Deux centres m dullaires responsables du d clenchement et du maintien de l rection ont t identifi s chez l homme Ils correspondent topographiquement aux centres de l mission et de l jaculation Czyba et Montella 1993 les my lom res S2 S3 et S4 centre principal parasympathique dit vasodilatateur et m canique intervient lors de l jaculation les my lom res L1 et L2 centre accessoire orthosympathique dit vasoconstricteur et excr toire intervenant dans l mission Le message sensitif qui parvient la moelle est distribu par des relais vers les centres nerveux supraspinaux L activation r flexe des eff rences g nitales au niveau de la moelle est ainsi modul e par des informations suppl mentaires en provenance du thalamus de l hypothalamus et du tronc c r bral Les fibres aff rentes mettent galement des collat rales qui se projettent directement dans les ganglions autonomes situ s la p riph rie des organes Les cons quences fonctionnelles de ces connexions ne sont pas connues mais permettraient d assurer un premier niveau d int gration du message sensitif Houdeau et al 2001 2 Voies eff rentes figure 4 Chaque voie eff rente se compose de deux neurones en s rie les neurones pr et post ganglionnaires L innervation sympathique a pour point de d part les segments m dullaires
22. et 2005 Dans la premi re tude 2004 la r colte de sperme par massage transrectal des ampoules du conduit d f rent a permis de recueillir des chantillons de semence pour 97 des 288 tentatives de collecte effectu es sur des taureaux adultes et habitu s tre r colt s par cette m thode Les chantillons obtenus par massage transrectal ont pr sent des param tres de motilit et de pourcentage de spermatozo des vivants significativement inf rieurs ceux obtenus par lectro jaculateur L auteur expliquait ce r sultat par le fait que la plupart des taureaux pr lev s par massage transrectal n ont pas pr sent d rection lors de la collecte et ont jacul l int rieur du fourreau La semence qui coule le long du fourreau se refroidit d o une diminution de la qualit du sperme Dans la seconde tude 2005 la comparaison lectro jaculation et massage transrectal a t r alis e sur des taureaux de race allaitante non entra n s tre collect s par massage transrectal La semence a pu tre r colt e par massage transrectal chez 80 des taureaux aucun effet de l ge la race de l animal et de l op rateur n a t observ L lectro 88 jaculation a permis de collecter 100 des animaux et de mani re plus rapide que le massage transrectal Seulement 15 des jeunes taureaux ont pr sent une rection lors du massage transrectal alors que les taureaux de notre tude ont pr
23. lation et la note de motilit apr s cong lation tudi e pour le taureau i l int rieur de la s quence j au cours de la p riode k u est effet moyen g n ral Ak est l effet p riode 1 4 semaines Bj est l effet s quence V E ou E V Ai Bj est l interaction entre la p riode et la s quence Ck est l effet collecte V ou E Di Bj est l effet taureau 10 taureaux nich dans l effet s quence Eijk est le terme d erreur du mod le 60 B RESULTATS 1 Obtention d un jaculat et aptitude la cong lation Le tableau 7 d crit les nombre et pourcentages d jaculats collect s et congel s en fonction de la technique de collecte de sperme vagin artificiel ou lectro jaculateur Tableau 7 Nombre d jaculats collect s et congel s en fonction de la technique de collecte vagin artificiel ou lectro jaculateur Nombre de Nombre Nombre d checs de non M thode de collecte tentatives de d jaculats d jaculats de collecte aptitude a la collecte collect s congel s cong lation Vagin artificiel 40 40 36 0 10 Electro jaculateur 40 33 22 17 5 33 3 Les collectes r alis es l lectro jaculateur qui n ont permis d obtenir que du liquide spermatique concentration nulle en spermatozo des ont t consid r es comme des checs de collecte Seuls les jaculats de qualit suffisante motilit de masse gt 30 et motilit individ
24. le taureau des concentrations lev es en sodium potassium calcium et magn sium sont observ es Le pH alcalin des s cr tions des glandes v siculaires est du une concentration importante en bicarbonates Knobil et al 1988 La prostate s cr te un liquide riche en l ment min raux zinc principalement puis calcium magn sium et potassium Les s cr tions prostatiques contiennent de nombreuses prot ines dont la plupart pr sentent une activit prot asique Le pH du liquide prostatique est acide il contient de l acide citrique et une prot ine sp cifique la spermine qui intervient dans les m canismes de d fense immunitaire La prostate est galement source de v sicules lipidiques qui peuvent transf rer des lipides par fusion membranaire avec les spermatozo des Dacheux 2001 Le principal composant de la s cr tion des glandes bulbo ur trales est la sialomucine qui est responsable de la g lification de la semence apr s son mission Les s cr tions des glandes bulbo ur trales permettent de lubrifier le p nis et le vagin mais surtout de prot ger l ur tre 20 p nien des constituants d l t res ions acides et bases contenus dans les s cr tions prostatiques et les glandes v siculaires Elles contiendraient aussi des ph romones jouant un r le dans l attraction des femelles Knobil et al 1988 Les spermatozo des pr sents dans le liquide s minal entra nent la formation de nouveaux m tabolit
25. milliards Pourcentage de spermatozo des motiles 40 80 Pourcentage de spermatozo des anormaux 6 5 9 5 Diff rents facteurs affectant le spermogramme ont t mis en vidence Lors d une collecte au vagin artificiel la pr paration sexuelle des taureaux fausses montes attente passive derri re le boute en train augmente de fa on significative la quantit de spermatozo des produits Almquist et Hale 1956 Au cours d jaculations successives la concentration en spermatozo des diminue de fa on significative alors que la motilit massale et le volume de l jaculat restent stables Foster et al 1967 Des variations interindividuelles de qualit de la semence collect e pour plusieurs taureaux appartenant la m me race sont observ es Foster et al 1967 L on et al 1991 Un effet de la m thode de collecte est observ sur des jaculats r colt s l lectro jaculateur qui pr sentent un volume plus important et une plus faible concentration en spermatozo des que ceux pr lev s au vagin artificiel alors que la motilit massale et la quantit de spermatozo des produits ne sont pas significativement diff rents Foster et al 1967 44 4 Dilution de la semence G rard et Khirredine 2002 Apr s mesure de la concentration en spermatozo des de l jaculat la quantit de dilueur a apporter l jaculat et le nombre de doses qui peuvent tre produites sont alors calcul e
26. peu de volume mais s allonge par effacement d une forte inflexion sigmoide Les glandes annexes ou glandes sexuelles accessoires pr sentent chez les mammif res de grandes variations anatomiques et physiologiques Chez le taureau les trois glandes sont les glandes v siculaires ou v sicules s minales la prostate et les glandes bulbo ur trales La vessie et les glandes annexes sont repr sent es sur la Figure 3 La palpation transrectale chez le taureau permet d examiner ces glandes accessoires Le muscle ur tral est souvent la premi re structure palp e Il pr sente une structure tubulaire ferme et se contracte sous la palpation La partie conglom r e de la prostate est palp e transversalement elle appara t comme une bande lisse qui entoure l extr mit cr niale de l ur tre Cr nio lat ralement la prostate les glandes v siculaires sont ais ment palpables par voie transrectale Elles pr sentent une structure lobulaire de 8 15 centim tres de long de 3 5 centim tres de large pour 1 2 centim tres d paisseur Des v sicules s minales normales sont uniformes en taille lobul es mobiles et turgescentes L largissement du conduit d f rent proximit de la jonction avec l ur tre constitue les ampoules du conduit d f rent Les ampoules du conduit d f rent ne sont pas tr s distinctes la palpation mais peuvent tre rep r es par un mouvement lat ral des doigts Elles mesurent 12
27. testicule est entour d une capsule fibreuse l albugin e et est cloisonn par des septums en lobules voir figure 2 Chaque lobule contient 1 4 tubes s minif res l int rieur desquels a lieu la spermatogen se La structure du tube s minif re comprend un pith lium s minal compos des cellules de Sertoli et des cellules germinales ainsi qu un tissu de soutien la lamina propria form e de fibres de collag ne et de couches de cellules myo des Barone 1990 Au cours de la spermatogen se les cellules germinales migrent de mani re centrip te vers la lumi re des tubules o ils sont relargu s Le liquide contenu dans la lumi re assure le transport des spermatozo des Les spermatozo des form s dans les tubes s minif res passent dans des structures tubulaires les tubes droits puis le rete testis avant de rejoindre les canaux eff rents et l pididyme Dadoune 2001 Les testicules sont irrigu s par l art re testiculaire issue de l aorte abdominale qui se divise en branches terminales situ es l int rieur de l albugin e et des cloisons interlobulaires Les veines testiculaires sont regroup es autour de l art re testiculaire pour constituer le plexus pampiniforme qui permet le refroidissement du sang art riel Les testicules sont innerv s par des rameaux sensitifs et moteurs qui accompagnent l art re testiculaire Dadoune 2001 L gende tunique albugin e mediastinum
28. tre animal 11 REVUE BIBLIOGRAPHIQUE A ANATOMIE DE L APPAREIL GENITAL DU TAUREAU L appareil g nital du taureau repr sent sur la figure 1 peut se d composer en trois grandes parties les testicules les voies spermatiques incluant l pididyme et le canal d f rent les voies uro g nitales incluant l ur tre les glandes annexes et le p nis glande v siculaire corps de la prostate limite de la cavit pelvienne m ur tral glandes ampoule du conduit d f rent bulbo ur trales rectum uret re 2 See N a v testiculaires TN 4 canaux d f rents anneau inguinal m ischio ur tral m bulbospongieux plancher de la tendon pr pubien cavit pelvienne p nis m cr master m r tracteur du p nis courbure sigmo de du p nis t te de l pididyme gland du p nis _ corps de l pididyme testicule lame interne du pr puce queue de l pididyme processus ur tral Figure 1 Appareil g nital du taureau D apr s Constantinesca 2004 13 1 Les testicules Les testicules sont des organes pairs ils assurent une double fonction une fonction exocrine avec la production de spermatozo des ou spermatogen se et une fonction endocrine avec la production des hormones m les Ils sont log s avec l pididyme dans la tunique vaginale et le scrotum Chez le taureau la descente des testicules dans les enveloppes testiculaires s effe
29. vagin artificiel cece ecceseceseeesseeeteeeteeeaees 38 3 La r colte du sperme par massage transrectal ssiisssicccsvssndsnedsiasnsavisavevisscsuesediviaedssieeays 40 E ACTIVITE DE COLLECTE DE SEMENCE EN FRANCE sis essns 41 1 Pr sentation de l activit des centres d INS MMINAUON nn a bassupenus 41 ts Entretien a LS LEA LE PT A R E N aE 41 2 Lasalle de ONE name non annee mon 41 Bxamen CHINOIS QUES den ec do en dns 42 4 Dil ton dela SEMENCE serieren gucasansaemseavawieiha sane secasatddencoanasacasiadnasotiesanenne 45 5 Mise en paillettes et cong lation de la semence sci creviserosannsenvsnvedasinvivisestvesedevnessenss 45 2 La Collects de taureaux en Te ttle aici xa sscascicurssundeasimaenteneanedennsaunacheneumesnssshdavnmaenteons 47 PARTIEEXPERIMENTA LE cette acces cen do cance naiai a kaiii edian 49 A MATERIELS ET METHODES wazssisisdcsaunobasasssendestaich oe isexossisesbvusd daaseebutesssenlectacttuaieat 51 SR die ni ends lle ni eee ee Si 2 Coll te de SEUNG TG Ca lt cancinsncdanaenshetiassunnducatednanstawesdaanlgsandnndianndseansiaddasadsansiebauaddasaessaderes 52 3 La collecte l lectro jac ulateut sinissitcnnwcdustvscscnestavuctussnteaudcaavsvaulssaveiedaniedieraanctinadse 54 t Description du Mat riel sesser he E E E 54 2 D roulement de OO ae en a a 54 4 La collecte ny DU dl 57 5525 conisagcansnnsasparaieninaeea ana mn a 57 5 Examen d sperme priro oan E E E E i 57 6 Examen de la semence ap
30. 10 Classification des anomalies morphologiques majeures et mineures des spermatozo des du taureau en fonction de leur impact sur la fertilit 43 Figure 11 Photographie de la sonde Pl CHOaC D ananas 54 Figure 12 lt Photographie d la Case de Contenti este ennemis 35 Fig re 13 lt Vagin aies ne 57 Figure 14 Distribution individuelle des volumes des jaculats collect s par lectro jaculateur etpar vagin artiicie a e E ee 66 Figure 15 Distribution individuelle des concentrations des jaculats collect s par lectro jaculateur et par vagin artificiel soos ssaiicousssasincuncavactudssusnosssassctendnnuntunstaaeelasiadddeddvanssnetass 67 Figure 16 Repr sentation par race des concentrations moyennes des 68 jaculats collect s par lectro jaculateur et vagin artificiel nissan 68 Figure 17 Evolution des concentrations moyennes en spermatozo des des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel au cours des quatre semaines d exp rimentation 69 Figure 18 Distribution individuelle des notes de motilit de masse des jaculats collect s par l ctro jacu l t ur et yagin artificiel ososan nreo NEEE oe On 70 Figure 19 Distribution individuelle des notes de motilit individuelle avant cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel cece ceceseceteceteeeeeeeeeeees 70 Figure 20 Distribution individuell
31. 15 centim tres de long pour un diam tre d une quinzaine de millim tres Albert et al 2007 Les fibres nerveuses aff rentes et sensitives des glandes annexes du m le sont relativement mal connues Des terminaisons libres nerveuses se situent dans le tissu sous pith lial et donnent des informations sensitives de douleur pression et temp rature Knobil et al 1988 Ces fibres sont stimul es lors du massage des glandes annexes chez le taureau 17 L gende vessie ligament lat ral de la vessie m so interd f rentiel canal d f rent uret re ampoule du canal d f rent v sicule s minale prostate AN Da FPF ON partie intra pelvienne de l ur tre et sphincter ur tral 10 glande bulbo ur trale 11 muscle bulbo caverneux Figure 3 Vessie et glandes annexes chez le taureau D apr s Popesko 1972 18 B LA PRODUCTION DU SPERME Le sperme est un produit de s cr tion labor au cours de la progression des spermatozoides dans les diff rentes parties du tractus g nital Il comprend les spermatozo des et le plasma s minal 1 La spermatogen se Dadoune et al 2001 La spermatogen se correspond a un processus de diff renciation cellulaire qui aboutit a la production des spermatozo des partir des spermatogonies souches Elle commence la pubert La production des spermatozo des est continue au cours de la vie de l animal et n cessite la prolif ratio
32. 1e as QB 1 r P ECOLE NATIONALE VETERINAIRE ANNEE 2008 THESE 2008 TOU 3 4 TOULOUSE COMPARAISON DE LA QUALITE DE LA SEMENCE DE TAUREAUX COLLECTES A L ELECTRO EJACULATEUR OU AU VAGIN ARTIFICIEL THESE pour obtenir le grade de DOCTEUR VETERINAIRE DIPLOME D ETAT pr sent e et soutenue publiquement en 2008 devant l Universit Paul Sabatier de Toulouse par Fabrice Benoit Guillaume RIGAL N le 15 f vrier 1983 OLEMPS Aveyron Directeur de th se Madame le Docteur Nicole HAGEN PICARD JURY PRESIDENT M Jean PARINAUD Professeur a l Universit Paul Sabatier de TOULOUSE ASSESSEURS Mme Nicole HAGEN PICARD Professeur l Ecole Nationale V t rinaire de TOULOUSE M Fran ois SCHELCHER Professeur l Ecole Nationale V t rinaire de TOULOUSE MEMBRE INVITE M Brahim KHIRREDINE Docteur V t rinaire COOPELSO A notre pr sidence de th se Monsieur le Professeur Jean PARINAUD Professeur des Universit s Praticien Hospitalier Biologie du d veloppement et de la reproduction Qui nous a fait l honneur d accepter la pr sidence de notre jury de th se Hommages respectueux A notre jury de th se Madame le Docteur Nicole HAGEN PICARD Maitre de conf rence de l Ecole Nationale V t rinaire de Toulouse Pathologie de la reproduction Qui nous a propos ce sujet de th se et a accept la direction de notre travail Sinc re reconnaissance Monsieur le Professeur Fr
33. ATEUR nues 86 1 Comment diminuer l inconfort du taureau lors de l lectro jaculation 86 2 Comment am liorer la qualit de la semence lors d une collecte a DPCP A WM cau once nee ei aies 87 3 Techniques alternatives la collecte l lectro jaculateur 88 CONCLUSIONS ET PERSPECTIVES nan Rene hear 90 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES nina ose esragenenn ne sante chsteenetienest 92 TABLE DES FIGURES Fipore I Appart g nital d Cate Absecon ennemies 13 Figure 2 Sch ma d une section longitudinale du testicule et de 15 PP TIAN TING aerar a dd a ee 15 Figure 3 Vessie et glandes annexes chez le aurea vec csscasuccsnascsncuaseaivargatedeeasvactaahestaceacnivaasants 18 Figure 4 Organisation extrins que de l innervation eff rente et aff rente de l appareil g nital ch un mammifere SSSR SUAS maniing aaa a a E Ea e ETENE 26 Figure 5 Repr sentation sch matique du syst me nerveux innervant l appareil g nital chez le aer n a E a siunnnaiayaraedsagaieemapaveionipaenesaa 28 Figure 6 Repr sentation sch matique de la sonde Electrojac 0 0 ce eeeeseceseeneeeeeeneeeneeerees 31 Figure 7 Cycle de stimulations produites par l Electrojac 5 nsesssessesseessessessressesrssesses 32 Pacis 2 Matenel de Collecte ne nn aaa ES 34 Figure 9 Repr sentation sch matique du vagin artificiel fs 0csseceshacsasisasccosesdsdeantanseencevsassexss 37 Figure
34. Dadoune et al 2001 19 2 La production du plasma s minal Les principales fonctions du plasma s minal sont hydrodynamique et nerg tique Celui ci tant essentiellement constitu d eau il doit permettre le d placement et la survie des spermatozo des dans le tractus g nital de la femelle apr s l jaculation Knobil et al 1988 Les s cr tions des glandes annexes constituent la majeure partie de la fraction liquide de l jaculat de 50 a 95 du volume total du plasma s minal suivant les esp ces La contribution de chacune des glandes varie beaucoup en fonction des esp ces et de nombreuses fonctions physiologiques des composants du plasma s minal des mammif res restent m connues Dacheux 2001 Les v sicules s minales sont les principales glandes annexes l origine de la s cr tion de fructose principal substrat nerg tique des spermatozoides Les concentrations en fructose sont particuli rement lev es dans le plasma s minal du taureau et du b lier La synth se de fructose comme beaucoup d autres produits de s cr tion des glandes accessoires est troitement r gul e par les hormones androg nes Les glandes v siculaires produisent galement de l inositol et de l acide citrique en quantit importante L acide citrique comme d autres acides organiques pr sents dans le plasma s minal est aussi un substrat nerg tique des spermatozo des le r le de l inositol est m connu Chez
35. E de paillettes conserv es 40 tentatives de collecte m thode de collecte Vagin Electro artificiel jaculateur Nombre de paillettes congel es tentative de collecte 25 millions de spermatozoides paillette et 100 144 cong lation des paillettes si note de motilit globale avant cong lation gt 2 Nombre de paillettes conserv es tentative de collecte conservation des paillettes si ue Li motilit individuelle z 40 Nombre d jaculats ayant permis la r alisation 27 7 730 paillettes ont pu tre conserv es pour chaque tentative de collecte au vagin artificiel contre 105 paillettes pour chaque tentative de collecte l lectro jaculateur A partir de 40 tentatives de collecte par m thode 27 jaculats collect s au vagin artificiel soit 67 5 des collectes au vagin artificiel et seulement 7 jaculats collect s l lectro jaculateur soit seulement 17 5 des collectes r alis es l lectro jaculateur ont permis la r alisation de paillettes 41 DISCUSSION Dans le cadre de notre tude les collectes l lectro jaculateur ont permis d obtenir de la semence de bonne qualit seulement dans 17 5 des cas contre 67 5 au vagin artificiel Un facteur individuel important a t mis en vidence lors des collectes l lectro jaculateur A EFFETS DE LA METHODE DE COLLECTE 1 Echec de collecte Toutes les tentatives de collecte au vagin artif
36. E TAUREAUX COLLECTES A L7ELECTROEJACULATEUR OU AU VAGIN ARTIFICIEL RESUME L OBJECTIF DE L ETUDE EST DE COMPARER LA QUALITE DE LA SEMENCE COLLECTEE A L7ELECTROEJACULATEUR A CELLE COLLECTEE AU VAGIN ARTIFICIEL 10 TAUREAUX DE COOPELSO CENTRE DINSEMINATION ONT ETE COLLECTES ALTERNATIVEMENT AVEC L UNE ET L AUTRE METHODE DEUX FOIS PAR SEMAINE PENDANT SIX SEMAINES DES EJACULATS ONT ETE OBTENUS POUR 100 DES COLLECTES AU VAGIN ARTIFICIEL ET POUR 82 5 DES COLLECTES A L ELECTROEJACULATEUR LA CONCENTRATION EN SPERMATOZOIDES LA MOTILITE AVANT ET APRES CONGELATION ONT ETE SIGNIFICATIVEMENT SUPERIEURES LORS D UNE COLLECTE AU VAGIN ARTIFICIEL PAR RAPPORT A UNE COLLECTE A L ELECTROEJACULATEUR SEULEMENT 17 5 DES EJACULATS RECOLTES A L ELECTROEJACULATEUR CONTRE 67 5 PAR LE VAGIN ARTIFICIEL ONT PU ETRE CONSERVES APRES CONGELATION MOTS CLES TAUREAU COLLECTE DU SPERME VAGIN ARTIFICIEL ELECTROEJACULATEUR PARAMETRES SEMINOLOGIQUES ENGLISH TITLE COMPARISON OF BULL SEMEN QUALITY COLLECTED BY ELECTROEJACULATION OR BY ARTIFICIAL VAGINA ABSTRACT THE OBJECT OF THE STUDY IS TO COMPARE SEMEN QUALITY COLLECTED BY ELECTROEJACULATION OR BY ARTIFICIAL VAGINA 10 BULLS FROM COOPELSO INSEMINATION CENTER WERE COLLECTED TWICE A WEEK OVER SIX WEEKS USING ALTERNATIVELY EACH OF THE TWO METHODS EJACULATES WERE OBTAINED FOR 100 OF COLLECTES BY ARTIFICIAL VAGINA AND FOR 82 5 OF COLLECTES BY ELECTROEJACULATOR CONCENTRATION IN SPERMATOZOA MOTILITY B
37. EFORE AND AFTER FREEZING WERE SIGNIFICATIVELY HIGHER IN ARTIFICIAL VAGINA COLLECTES THAN IN ELECTROEJACULATION COLLECTES ONLY 17 5 OF EJACULATES COLLECTED BY ELECTROEJACULATOR COULD BE KEPT AFTER FREEZING FOR 67 5 BY ARTIFICIAL VAGINA KEYWORDS BULL SEMEN COLLECTION ARTIFICIAL VAGINA ELECTROEJACULATOR SEMEN CHARACTERISTICS 99
38. Insemination In PERRY T Reproduction in domestic animals 4 dition San Diego Academic Press INC 1991 251 250 GERARD O KHIRREDINE B Production de semence bovine Didacticiel de Maitrise de la reproduction des bovins 2002 73 p GETTY R Bull in Atlas for Apllied Veterinary Anatomy Ames Iowa State University Press 1964 p 162 HOCHEREAU M T et al Dur e de la spermatog n se chez le taureau tude par autoradiographie testiculaire 5 Int Congr Anim Reprod Artif Insem 1964 3 541 HOUDEAU E PRUD HOMME M J RAMPIN O et al Innervation de l appareil g nital organisation anatomique nature et fonctions In THIBAULT C et LEVASSEUR M C La Reproduction chez les mammif res et l homme nouvelle dition Paris INRA Editions ellipses 2001 425 456 HOVELL G J R ARDRAN G M ESSENHIGHT D M SMITH J C Radiological observations on electrically induced ejaculation in the ram J Repro Fert 1969 20 383 388 HURLEY W L DOANE R M Recent developments in the roles of vitamins and minerals in reproduction Journal of Animal Science 1989 72 784 804 IDEAL INSTRUMENTS Subsidiary of NEOGEN CORPORATION L lectro jaculateur Electrojac 5 Manuel de l op rateur 2002 9 p KNOBIL E NEILL J The Physiology of Reproduction Raven Press 1988 793 814 LACROIX C Le pr l vement de sperme par lectro jaculation ch
39. RMAN J W Electroejaculation of the bull Bovine Practitionner 1972 7 46 48 BALL L FURMAN J W Electroejaculation of bulls using pulse waves of variable frequency and length Journal of Animal Science 1975 40 4 665 670 BARONE R Anatomie compar e des mammif res domestiques Tome 4 Splanchnologie II Paris Vigot 1990 501p BARTH A D ARTEAGA A A BRITO L F C Use of internal artificial vaginas for breeding soundness evaluation in range bulls an alternative for electroejaculation allowing observation of sex drive and mating ability Animal Reproduction Science 2004 84 315 325 BERNDTSON WE IGBOELI G Spermatogenesis sperm output and seminal quality of Holstein bulls electroejaculated after administration of oxytocin Journal of Reproduction and Fertility 1988 March 82 2 467 475 BLOCKEY M B Using the serving capacity test to get the most out of beef bulls Perth Proc Aust Soc Anim Prod 1980 13 50 53 93 BLOM E Ultrastrukturen af nogle karateristiske spermiedefekter og forslag til et nyt klassificerings system for tyrens spermiogram Nord Vet Med 1973 25 383 391 BRINDLEY G S Electroejaculation its technique neurological implications and uses J Neuro Psy 1981 44 9 18 CANADIAN VETERINARY MEDICAL ASSOCIATION Page consult e le 6 novembre 2007 Electroejaculation of bulls en ligne Adresse URL http
40. Se Raed A pa oe py oer on ES o o o 1 Z aupiquet Saxo Ulot Uxue Ajuval Allien TamBor Taquin Uvilo Taureaux collect s Figure 20 Distribution individuelle des notes de motilit globale avant cong lation des jaculats collect s par lectro jaculateur et vagin artificiel La note de motilit de masse motilit individuelle et motilit globale avant cong lation des jaculats collect s par vagin artificiel ont t significativement sup rieures a celle des jaculats collect s par lectro jaculateur respectivement p lt 0 001 p 0 005 p lt 0 001 71 La figure 21 pr sente la distribution par race des notes moyennes de motilit globale avant cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel a Blond d Aquitaine o Brun des Alpes 6 o Prim Holstein Motilit globale avant cong lation not e de 0 5 Electro jaculateur Vagin artificiel Figure 21 R partition par race des notes moyennes de motilit globale avant cong lation des jaculats collect s a l lectro jaculateur et au vagin artificiel moyenne cart type Pour les taureaux de race Blond d Aquitaine la note de motilit globale avant cong lation a t peu modifi e par la m thode de collecte Pour les taureaux de race Brun des Alpes et Prim Holstein la motilit des jaculats collect s l lectro
41. TION ET L EJACULATION La fonction sexuelle m le se d compose en deux parties l rection et l jaculation L rection est d finie par la rigidit du p nis Le processus jaculatoire est la succession de deux v nements distincts l mission et l jaculation proprement dite La physiologie de l rection et de l jaculation a t d crite chez l homme mais les r flexes de base intervenant dans la neurophysiologie sont identiques chez tous les mammif res La s quence et la dur e des r flexes pr sentent des variations en fonction des esp ces Les connaissances actuelles concernent surtout la mise en vidence de neurotransmetteurs dans le tissu rectile et des effets de substances pharmacologiques mimant l action de ces neurotransmetteurs Setchell 1991 1 M canismes de l rection et de l jaculation Les m canismes permettant d expliquer l rection sont une dilatation des art res du p nis associ e une diminution du d bit veineux l ensemble tant l origine d une augmentation de la quantit de sang qui arrive dans les corps caverneux et spongieux du p nis La contraction des muscles bulbo et ischio caverneux pr sents autour du bulbe du p nis participerait aussi l rection en comprimant la base du p nis et en compl tant le blocage du retour veineux Ce m canisme permet d expliquer l rection chez les animaux dot s d un p nis de type vasculaire homme tal
42. a saillie de la vache ainsi quip e le vagin artificiel est retir et la semence est r cup r e pour tre analys e Les inconv nients principaux sont le co t lev li l utilisation de femelles boute en train la transmission possible de maladies v n riennes et surtout l incapacit collecter certains taureaux pourtant aptes reproduire mais qui vont refuser le saut le jour de la collecte L efficacit du vagin artificiel interne a t test e lors d valuations de la fonction reproductrice des taureaux et compar e une r colte de semence par lectro jaculateur Barth et al 2003 50 70 des taureaux en production ont pu tre r colt s au vagin artificiel interne alors que la semence est obtenue syst matiquement lors des collectes l lectro jaculateur L avantage principal est que le vagin artificiel interne permet d observer la capacit saillir des taureaux en m me temps qu il permet d obtenir un chantillon de semence de l animal Des tudes ont montr que lors d valuations classiques de l aptitude la reproduction des taureaux c est dire bas es sur l utilisation d un lectro jaculateur un taureau sur 5 est d clar satisfaisant alors qu il est en r alit incapable de saillir Blockey 1980 L autre avantage est la s curit de l op rateur lors de la collecte par rapport une collecte avec un vagin artificiel classique 39 3 La r colte
43. an ois SCHELCHER Professeur de l Ecole Nationale V t rinaire de Toulouse Pathologie m dicale du B tail et des Animaux de Basse cour Qui a aimablement accept de faire partie de notre jury de th se Sinc res remerciements Remerciements A Brahim Khirredine Docteur V t rinaire responsable du centre de collecte de Coopelso l origine du projet de th se pour sa disponibilit et sa gentillesse A la taurellerie Coopelso les taurelliers et la technicienne du laboratoire A Nicole Hagen Picard pour sa disponibilit et son aide tr s pr cieuse A Patricia Ronsin pour l aide apport e la r alisation des lames A Faouzi Lyazhri pour l aide apport e la r alisation de la partie statistique A mes parents pour leur soutien constant au cours de ces longues ann es d tudes A mes fr res ma famille Aux bons moments pass s avec tous mes camarades v t rinaires la bonne Raoule la Marie Cuisse Pascal Foufoune le bon viel Duquerroux la Joute la Balouke le bon vieux Fischer et les autres Au Roucanel et ses habitants avec par ordre alphab tique Bacchus Biow Bousquat Caro Cuissot Francinette Gessie Jack Ludo Mateuch et Petite Burge Aux anciens Laroquois Ana s J r my et Marie C cile INTRODUC HON Ra ee eee ina sed tell eo satin 9 REVUE BIBLIOGRSPATIQUES Sn rh E E 12 A ANATOMIE DE L APPAREIL GENITAL DU TAUREAU ce eceeseeees 13 D ES PS CUE
44. ants du plasma s minal du taureau 22 Tableau 3 Caract ristiques des 5 taureaux de race laiti re du GROUPE 1 51 Tableau 4 Caract ristiques des 5 taureaux de race allaitante du GROUPE 2 51 Tableau 5 Plan exp rimental altern sur une p riode de 6 semaines des collectes de sperme des taureaux l Electro jaculateur et au Vagin Artificial lt ccciacccscsssecasaasaescdssausaqnsesninasscasaseants 33 Tableau 6 Classification des anomalies morphologiques des spermatozo des 006 59 Tableau 7 Nombre d jaculats collect s et congel s en fonction de la technique de collecte vaginartificiel OW lectro jac late r Lui a eini Mon EEEE 6l Tableau 8 R partition par race des pourcentages d checs de collecte et de non aptitude a la cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel 0 0 ee 62 Tableau 9 Param tres individuels de collecte l lectro jaculateur 63 Tableau 10 Param tres s minologiques obtenus par les 40 collectes au vagin artificiel et les 33 collectes l lectro jaculateu lt xc acckesstacscasnrsdancesnctistonad ecussscnsiucesnasen inna daassnadesaunlegeusdaatiens 65 Tableau 11 Nombre de paillettes produites partir des jaculats collect s au vagin 77 ari ficieleta l lectro jac late T nn nd nimes miennes 77 INTRODUCTION La collecte du sperme est une phase capita
45. au qui d clenche ou inhibe l rection suivant le centre m dullaire atteint Cziba et Montella 1993 Les voies aff rentes aux centres m dullaires de l mission et de l jaculation sont les m mes voies somatiques et neuro v g tatives qui interviennent dans l rection La Figure 4 repr sente l organisation extrins que de l innervation aff rente et eff rente de l appareil g nital chez le m le CE re Se Fee bi s Shorackpee chains euelingue gaspa digos paraventeinals ganglion prenne nerf polvien yi tee Pie pime pnia raaoile gymero je sacr e Figure 4 Organisation extrins que de l innervation eff rente noir et aff rente gris de l appareil g nital chez un mammif re de sexe m le D apr s Houdeau et al 2001 NC nerf caverneux NDp nerf dorsal du p nis NSI nerf spermatique inf rieur NSS nerf spermatique sup rieur 26 4 Physiologie nerveuse de l rection et de l jaculation Lorsque le p nis est au repos un tonus sympathique contracte les art rioles terminales du p nis et les cellules musculaires des corps spongieux et caverneux Le muscle r tracteur du p nis est contract il maintient les corps caverneux dans le fourreau Une stimulation sexuelle peut avoir deux origines une stimulation de l appareil g nital int gr e par la mo lle pini re une stimulation g n r e par la vue les odeurs et int gr e au niveau du sy
46. aux non entra n s la collecte au vagin artificiel Mais le sperme collect l lectro jaculateur est il de qualit suffisante pour r sister la cong lation et permettre la r alisation de paillettes Peu d tudes ont compar la qualit s minologique du sperme collect l lectro jaculateur ou au vagin artificiel L on et Coll 1991 et Parvanov 2000 L objectif de notre tude est de comparer la qualit biologique de la semence collect e au vagin artificiel celle collect e l lectro jaculateur sur des taureaux d ins mination artificielle de diff rentes races fran aises les param tres s minologiques ont t valu s avant et apr s cong lation Ces donn es sur la collecte l lectro jaculateur en particulier l obtention et la qualit des jaculats collect s permettront d envisager ou non son utilisation dans le cadre de la monte priv e Avant de d velopper cette tude exp rimentale nous pr senterons des donn es bibliographiques concernant l anatomie g nitale du taureau la physiologie de la production du sperme les techniques de r colte de la semence et la fabrication des paillettes par les centres d ins mination 10 La partie exp rimentale est pr sent e selon un plan classique les mat riels m thodes sont d crits et les r sultats sont pr sent s et discut s En particulier l utilisation de cette technique est envisag e par rapport au bien
47. ce G rard et Khirredine 2002 La mise en paillettes est automatis e et r alis e dans les 4 heures qui suivent le m lange dilueur semence dans une vitrine r frig r e Sur chaque paillette la l gislation impose de faire figurer le nom du taureau son num ro national son statut IBR le num ro d enregistrement du centre de collecte la date de collecte 45 le code du taureau constitu du code du centre d ins mination du code race et du num ro d identification Juste avant la cong lation les paillettes sont dispos es sur des grilles m talliques appel es racks Les laboratoires utilisent des cong lateurs programmables dans lesquels sont pr enregistr s les param tres de cong lation Une cong lation dure environ 15 minutes Deux paillettes prises au hasard sont utilis es pour le contr le de qualit apr s d cong lation Elles sont d congel es dans un bain marie 37 C Une goutte de semence provenant de chaque dose est ensuite mont e entre lame et lamelle afin de r aliser un examen direct au microscope au grossissement 200 Le pourcentage de spermatozo des fl chants doit tre sup rieur 40 Lorsque les deux paillettes sont conformes aux crit res de d cision l jaculat est stock et est distribu aux ins minateurs Les techniciens des centres de production de production de semence ainsi que les v t rinaires sont galement amen s r aliser des collectes de taureaux
48. ct s l lectro jaculateur et au vagin artificiel au cours des quatre semaines d exp rimentation On constate que les concentrations moyennes des jaculats collect s ont tendance augmenter au cours des semaines d exp rimentation pour les deux m thodes de collecte 69 a Motilit avant cong lation Les figure 18 19 et 20 pr sentent les notes de motilit de masse motilit individuelle et motilit globale synth se des notes de motilit de masse et individuelle des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel Electro jaculateur E Vagin artificiel Notes de motilit de masse de 0 Anis Saupiquet Saxo Ulot Uxue Ajuval Allien Tam Bor Taquin Taureaux collect s Figure 18 Distribution individuelle des notes de motilit de masse des jaculats collect s par lectro jaculateur et vagin artificiel A Electro jaculateur a Vagin artificiel Note de motilit individuelle de 0 a 100 Anis Saupiquet Saxo Ulot Uxue Ajuval Allien Tam Bor Taquin Uvilo Figure 19 Distribution individuelle des notes de motilit individuelle avant cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel 70 AElectro jaculateur a Vagin artificiel 5 gt m Ww 5 go 4 25 D h TE 26 5 O 2 eT a
49. ctue avant la naissance vers 3 4 mois de gestation Chenoweth 1997 Le testicule est pendulaire axe vertical et p se approximativement 500 grammes vers deux ans Il mesure alors en moyenne 11 15 cm de haut sur 7 9 cm de large et 7 9 cm d paisseur pour une circonf rence scrotale de 35 cm Setchell 1991 Des diff rences individuelles importantes de taille des testicules existent chez le taureau elles sont corr l es a la production de spermatozoides C est pourquoi la mesure de la circonf rence scrotale des taureaux est une partie importante de l valuation de leur fertilit des valeurs minimales existent en fonction de l ge et de la race Wenkoff 1988 Tableau 1 Valeurs minimales recommand es pour la circonf rence scrotale du taureau en fonction de l ge et de la race Wenkoff 1988 Race Age Simmental Angus Charolais Hereford et Limousin et Blond en mois et Maine Anjou Shorthorn d Aquitaine 12 14 33 32 31 30 15 20 35 34 33 32 21 30 36 35 34 33 30 37 36 35 34 Lorsque l op rateur a pris les pr cautions de s curit n cessaires il peut manipuler le testicule l int rieur du scrotum Un testicule normal a une consistance homog ne et ne pr sente pas d adh rences avec le scrotum La palpation peut permettre de d tecter la pr sence d anomalies telles que des abc s tumeurs h matocoeles calcifications Albert 2007 14 Chaque
50. ctum du taureau provoque d abord la stimulation des glandes annexes et l excr tion de liquide s minal avant de d clencher l jaculation L op rateur doit donc attendre que ce liquide spermatique devienne laiteux avant de d buter la collecte ceci afin d obtenir un sperme le plus concentr possible Lacroix 1988 Albert et al 2007 a oe pps tt LDS eosin oe Figure 8 Mat riel de collecte D apr s Cuisenier 1996 34 3 Int r ts et limites de la collecte l lectro jaculateur Les int r ts de la technique de collecte l lectro jaculateur sont les suivants Facilit de r colte La plupart des lectro jaculateurs sont dot s d un mode de fonctionnement automatique d utilisation facile Le mat riel n cessaire est facilement transportable en g n ral contenu dans une mallette Observation de la verge Quand l rection a lieu elle permet un examen attentif de la verge ce qui est plus difficile avec un vagin artificiel Possibilit de collecter les taureaux qui ne sont pas capables de donner le coup de rein concomitant de l jaculation et n cessaire la collecte au vagin artificiel Certains taureaux peuvent se montrer r calcitrants la collecte au vagin artificiel pour des raisons variables pathologies de l appareil locomoteur stress provoqu par la pr sence humaine manque de docilit faible libido Les limites de la collecte l lectro ja
51. culateur sont les suivantes Qualit de la semence Les effets de la technique de collecte l lectro jaculateur sur les param tres de la qualit de la semence des taureaux sont d crits et discut s dans la partie exp rimentale de la th se Des tudes ant rieures ont montr que la collecte l lectro jaculateur entra nait une plus grande dilution de l jaculat et une diminution de la qualit de la semence par rapport une collecte l lectro jaculateur Foster et al 1967 L on et al 1991 Parvanov et al 2000 Inconfort ou douleur du taureau lors des stimulations lectriques La stimulation lectrique diffuse appliqu e dans le rectum provoque l excitation de diff rents nerfs en particulier le nerf sciatique ce qui entra ne des contractions musculaires involontaires de l animal Certains taureaux en particulier les animaux de moins de deux ans manifestent un inconfort important lors de l application des stimulations ils meuglent se crispent et certains tombent Etson et al 2004 35 2 La r colte du sperme au vagin artificiel Dans les centres de production de semence le sperme des taureaux est le plus souvent collect au vagin artificiel L obtention d une semence de qualit avec cette technique n cessite une bonne pr paration des taureaux pr alablement la collecte 1 La pr paration des taureaux dans les centres de collecte G rard et Khirredine 2002 Avan
52. de l h matim tre qui est recouverte d une lamelle Le comptage est r alis au microscope au grossissement 1000 Les anomalies morphologiques figure 10 ne sont pas recherch es en routine l analyse est effectu e apr s coloration et comptage au microscope ou l aide d analyseurs automatiques S ya F R n er Lange me ges MT phares NE Saas pars sega ee ne qe et eee eee eee AE GS PERS Figure 10 Classification des anomalies morphologiques majeures et mineures des spermatozo des du taureau en fonction de leur impact sur la fertilit D apr s Blom 1973 43 Examen de la semence apr s dilution du sperme au 20 dans du diluant conserv 37 C La motilit individuelle est mesur e au microscope au grossissement 200 entre lame et lamelle elle correspond a la proportion de spermatozoides avec un mouvement rectiligne qui traversent le champ du microscope Les spermatozoides bougeant sur place tournant en petits cercles ou se d pla ant en arri re du fait d une queue repli e ne sont pas consid r s comme mobiles Pour indication les valeurs moyennes observ es dans les centres d ins mination Fran ais chez un taureau adulte Prim Holstein pr lev deux fois par semaine sont G rard et Khirredine 2002 Volume de l jaculat 5 8 ml Concentration 0 8 2 milliards de spermatozo des par ml Nombre de spermatozo des par jaculat 5 15
53. de taureaux de races crois es 84 Brahman crois Africander crois Shorthorn crois au cours d lectro jaculations r alis es avec une sonde anneaux circulaires Les r actions des taureaux taient class es en l g res moyennes et s v res Un effet race a t d montr les taureaux de la race Africander et les taureaux crois s Africander ont pr sent un nombre de r actions s v res et un nombre d checs lors des collectes l lectro jaculateur significativement plus lev s que les autres races En g n ral les taureaux de race laiti re ont une plus forte libido que les taureaux de race allaitante lesquels doivent recevoir une pr paration sexuelle rigoureuse avant la collecte au vagin artificiel Senger 2003 La faible libido des taureaux allaitants peut rendre les collectes au vagin artificiel fastidieuses dans le cadre de la monte en ferme car l op rateur doit attendre le saut du taureau parfois pendant plus d une heure et il est difficile dans ces condition de maintenir le vagin artificiel une temp rature optimale entre 42 et 45 C G rard et Khirredine 2002 Pour ces races allaitantes la collecte l lectro jaculateur pourra t constituer une alternative int ressante 85 C AMELIORATION DE LA TECHNIQUE DE COLLECTE A L ELECTROEJACULATEUR 1 Comment diminuer l inconfort du taureau lors de l lectro jaculation La collecte de semence par lectro jaculat
54. e il permet d viter la contamination de la semence par d ventuelles souillures Diff rents syst mes de sols r sine sable copeaux de bois tapis en 41 caoutchouc antid rapants etc sont utilis s pour assurer le confort des taureaux lors de la monte mais tous doivent faire l objet d un entretien et d un nettoyage r guliers La salle de monte est quip e d une zone de s curit pour le personnel et de stalles d attente o sont plac s les taureaux avant leur collecte 3 Examen s minologique L jaculat est caract ris par diff rents param tres s minologiques qui constituent le spermogramme G rard et Khirredine 2002 Examen du sperme L examen s minologique de l jaculat comprend un examen macroscopique et un examen microscopique Il permet d valuer si la semence r colt e sera de qualit suffisante pour tre conserv e Le volume en ml est valu par lecture directe sur un tube de collecte gradu Les aspects de l jaculat tels que la couleur la viscosit sont analys s par simple observation de l jaculat dans le tube de collecte un sperme normal est de couleur blanch tre blanc jaun tre et de consistance laiteuse lactocr meuse Cette observation permet le plus souvent la d tection d anomalies comme la pr sence de sang ou de pus par exemple L valuation de la motilit massale est effectu e partir de sperme pur dans les dix minutes qui suive
55. e au vagin artificiel permet d appr cier l aptitude la saillie du taureau qui est fonction de la libido du taureau et de ses capacit s sauter et introduire le p nis dans le vagin rection et intromission Les limites de la collecte au vagin artificiel sont les suivantes La principale limite est l incapacit collecter les taureaux qui refusent de donner le coup de rein concomitant de l jaculation et n cessaire la collecte au vagin artificiel certains taureaux peuvent se montrer r calcitrants la collecte au vagin artificiel pour des raisons variables pathologies de l appareil locomoteur stress provoqu par la pr sence humaine manque de docilit faible libido Les taureaux des centres de production de semence sont entra n s et habitu s tre collect s au vagin artificiel Les taureaux en ferme ne sont pas habitu s la monte en main C est 38 pourquoi la collecte au vagin artificiel en ferme ne peut se faire que sur des taureaux suffisamment dociles Elle n cessite galement la pr sence de vaches en chaleur au moment de la collecte ce qui entra ne la contention et la manipulation d animaux suppl mentaires Une alternative la m thode de collecte classique au vagin artificiel est l utilisation d un vagin artificiel interne Le dispositif est constitu d un cylindre de caoutchouc ins r et fix dans le vagin d une vache en chaleur le jour de la collecte Apr s l
56. e des notes de motilit globale avant cong lation des jaculats collect s par lectro jaculateur et vagin artificiel 71 Figure 21 R partition par race des notes moyennes de motilit globale avant cong lation 72 des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel 72 Figure 22 Evolution des notes moyennes de motilit des jaculats collect s eee 73 l lectro jaculateur et au vagin artificiel au cours des quatre semaines d exp rimentation 73 Figure 23 Repr sentation graphique des notes moyennes de motilit obtenues avant 75 et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit sup rieure 2 avant 75 congelati OM arree a EAE E EE EEE es 75 Figure 24 Repr sentation graphique des notes moyennes de motilit obtenues 75 avant et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit strictement 75 sup rieure 3 et inf rieure ou gale 4 avant COMP CATON sees n dcsssesiuacissnavccsessicesseaivesmasnondens 75 Figure 25 Repr sentation graphique des moyennes des notes de motilit obtenues avant et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit sup rieure 4 avant cong lation 76 TABLE DES TABLEAUX Tableau 1 Valeurs minimales recommand es pour la circonf rence scrotale du taureau en PORCINE PAGS CE de A TAGS A rene aient 14 Tableau 2 Concentration des diff rents constitu
57. e des notes moyennes de motilit obtenues avant et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit strictement sup rieure 3 et inf rieure ou gale a 4 avant cong lation moyenne cart type 75 E Avant cong lation classe d jaculats motilit gt 4 Apr s cong lation Motilit globale not e de 0 5 Electro jaculateur Vagin artificiel Figure 25 Repr sentation graphique des moyennes des notes de motilit obtenues avant et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit sup rieure 4 avant cong lation moyenne cart type La diminution de motilit des jaculats au cours de la cong lation n est pas significativement plus lev e lorsque la collecte a t r alis e l lectro jaculateur par rapport une collecte au vagin artificiel Toutefois l inspection visuelle des figures 23 24 et 25 montre que la diminution de motilit apr s cong lation est plus grande pour les jaculats qui ont t collect s l lectro jaculateur en particulier pour les jaculats de motilit sup rieure 3 avant cong lation 76 Le tableau 11 pr sente le nombre de paillettes qui auraient pu tre pr par es et conserv es ramen au nombre de tentatives de collecte pour chaque m thode Tableau 11 Nombre de paillettes produites a partir des jaculats collect s au vagin artificiel et l lectro jaculateur METHODE DE COLLECT
58. e et tait plac en position accroupie ou genoux sur le c t droit du taureau L entonnoir et le tube de collecte taient sortis de l tuve 44 C lorsque le taureau tait pr t tre collect Un capuchon isolant et opaque tait plac sur le tube de collecte pour viter la baisse de temp rature du sperme L op rateur s est efforc r colter la fraction spermatique de l jaculat c est dire partir du moment o le liquide spermatique prenait une couleur blanc laiteux Pour chaque lectro jaculation les r actions des taureaux et leur comportement ont t not s le nombre de cycles d impulsions lectriques n cessaires pour r colter le taureau la pr sence ou non d une jaculation mise en vidence par l observation d un changement de couleur du liquide spermatique ce dernier devient blanc laiteux le palier auquel l animal jacule l op rateur bloquant alors la mont e en intensit la pr sence ou non d une rection au moment de la r colte les manifestations de douleur telles que meuglements r actions vives contractions musculaires importantes les chutes ventuelles 56 4 Lacollecte au vagin artificiel Un m me op rateur a r alis l ensemble des collectes au vagin artificiel selon les proc dures en vigueur dans les centres d ins mination cf Revue bibliographique Chaque taureau collect au vagin artificiel figure 13 a t pr par en r ali
59. egistr s dans les appareils r cents Param tres lectriques La tension en g n ral une tension de 20 volts est utilis e quelle que soit l esp ce animale La tension maximale utilisable est fonction des r actions de l animal La tension n cessaire l obtention d une jaculation varie en fonction des individus en raison de diff rences de r sistance de l interface tissu lectrodes L utilisation d une forte tension augmente les risques de contractions musculaires de br lures de la muqueuse et d lectrocution 31 L utilisation d un faible voltage permet de diminuer ces risques mais en contre partie le temps et le nombre de stimulations n cessaires sont plus importants L intensit elle est li e la forme et la surface de l lectrode utilis e La r sistance interne correspond la r sistance de tout ce qui se trouve entre les lectrodes rectales et les nerfs Elle varie avec l humidit l humidit diminue la r sistance et avec l encombrement du rectum la pr sence de f ces augmente la r sistance et peut tre la source d checs C est pourquoi le rectum du taureau doit tre pr alablement vid de son contenu et un gel lubrifiant doit tre appliqu sur la sonde pour faciliter son introduction et permettre un meilleur contact entre les tissus et les lectrodes Mod le de stimulation Les lectro jaculateurs actuels fonctionnent selon deux modes automat
60. en ferme 46 2 La collecte de taureaux en ferme La collecte de taureaux en ferme peut tre r alis e pour deux raisons contr le de la qualit du sperme du taureau et r alisation de paillettes partir de taureaux de monte priv e Le contr le de la qualit du sperme du taureau peut tre r alis pour diff rentes raisons achat d un taureau reproducteur souscription un contrat d assurance v rification de la qualit sanitaire de la semence v rification de la fonction sexuelle d un taureau avant la saison de reproduction inf condit de troupeau L examen de la semence du taureau ne constitue qu une partie de l valuation de son aptitude la reproduction L aptitude la saillie est fonction de la libido du taureau et de ses capacit s sauter et introduire le p nis dans le vagin rection et intromission Les collectes l lectro jaculateur r alis es en ferme visent surtout contr ler l aptitude la reproduction du taureau Cuisenier 1996 Lacroix 1988 L importance de cette activit en France n est pas quantifi e La plupart des centres de collecte de semence proposent leurs adh rents la possibilit de collecter leurs taureaux en ferme La collecte de semence dans le cadre de la monte priv e est soumise certaines obligations r glementaires Chaque taureau doit tre pr lev sur l exploitation et la semence produite ne pourra tre utilis e que p
61. es lectrodes lat rales L lectro jaculateur a t utilis en mode automatique avec ce mode d utilisation le circuit d livre une s rie de 32 impulsions lectriques d intensit croissante du premier au vingt quatri me cycle Chaque impulsion dure 2 secondes et est s par e par 2 s de pause Les 32 impulsions progressent automatiquement et il est possible d enchainer directement un deuxi me cycle la suite du premier si l appareil n est pas arr t Les cycles peuvent tre interrompus soit en arr tant l appareil soit en bloquant la mont e en intensit des cycles pendant un temps d termin Les cycles d intensit croissante peuvent ensuite tre repris partir du niveau d intensit pr c dent Cette modification de mont e en intensit des cycles est r alis e lorsque l animal est suffisamment stimul et que l intensit n cessaire l jaculation est atteinte ou lors de r action adverse de l animal Figure 11 Photographie de la sonde Electrojac 2 D roulement de la collecte 54 Les animaux sont amen s dans la cage de contention figure 12 dans laquelle ils sont attach s par la t te Utilis e pour effectuer le parage des onglons la cage de contention est situ e dans un des b timents o sont h berg s les taureaux du centre Elle est adapt e la contention des taureaux Son quipement permet le blocage de l animal l avant et de larges acc s lat raux faci
62. es comme l acide lactique produit par la glycolyse ana robie du fructose Cependant de nombreux composants pr sents dans le liquide s minal ne semblent pas jouer de r le particulier comme l acide citrique l inositol les ions zinc et de nombreuses prot inases et enzymes hydrolytiques Ils contribuent cependant rendre le liquide s minal iso osmotique avec le plasma sanguin Les concentrations des diff rents constituants du plasma s minal du taureau sont pr sent es dans le Tableau 2 21 Tableau 2 Concentration des diff rents constituants du plasma s minal du taureau D apr s Setchell et al 1988 Plasma s minal Composition chez le taureau Volume ml 2 10 Concentration en spermatozoides 10 ml 300 2 Sodium mmol ml 65 161 Potassium mmol ml 13 97 Calcium mmol ml 6 15 Magnesium mmol ml 3 3 Chlorures mmol ml 42 110 Phosphates mmol ml 2 8 Bicarbonates mmol ml 7 Fructose mmol ml 17 56 Sorbitol mmol ml 0 6 7 5 Inositol mmol ml 1 3 2 6 Acide Lactique mmol ml 2 2 5 6 Acide Pyruvique mmol ml 0 6 Acide Citrique mmol ml 18 52 Acide Glutamique mmol ml 1 8 Glycerophosphocholine mmol ml 4 18 Ascorbic acid mmol ml 0 3 Glycerophosphoinositol mmol ml 1 4 Spermine mmol ml 0 1 Creatine mmol ml 0 9 Arginine mmol ml 0 2 Ergothion ine mmol ml Trace Prot ines mg ml 55 22 C L EREC
63. es g nitaux internes Le massage des glandes v siculaires et ampoules du conduit d f rent stimule l animal et entra ne la s cr tion du fluide s minal Les poils du toupillon peuvent tre coup s ras et l extr mit du fourreau nettoy e l eau sans antiseptique spermicide pour viter une souillure du sperme notamment lors d jaculation l int rieur du fourreau Lacroix 1988 Stimulation La r colte de sperme a l lectro jaculateur n cessite 2 voire trois personnes La position de la sonde dans le rectum est importante en raison des localisations des centres nerveux Ainsi suivant le degr d enfoncement la sonde pourra ou non provoquer l rection Lacroix 1988 Une personne maintient la sonde dans le rectum pour viter qu elle ne soit expuls e par les contractions du taureau Lorsque l rection est absente un op rateur peut ventuellement provoquer l ext riorisation du p nis en appuyant sur l inflexion sigmoide R colte La r colte est effectu e par un op rateur plac c t du taureau en position accroupie ou genoux Un support rigide prolong d une barre rigide permet de disposer un entonnoir avec un tube son extr mit pour la r colte du sperme Le syst me peut tre am lior par l ajout d une poche remplie d eau chaude autour de l entonnoir permettant le maintien du sperme 37 C figure 8 39 La stimulation lectrique appliqu e dans le re
64. espondant aux taureaux de race laiti re et le GROUPE 2 correspondant aux taureaux de race allaitante Ils ont r alis une p riode d entra nement d une dur e de deux semaines pendant laquelle ils ont t alternativement pr lev s deux fois au vagin artificiel et deux fois l lectro jaculateur L objectif des deux premi res semaines d entra nement tait d entra ner les taureaux la collecte l lectro jaculateur et de stabiliser leur production de semence certains taureaux n ayant pas t collect s depuis plusieurs mois Les donn es recueillies au cours de ces deux semaines n ont pas t prises en compte dans l analyse des r sultats Le dernier jour de la collecte d entra nement les dix taureaux ont t lav s et les poils au niveau de l extr mit du fourreau ont t ras s Par la suite chaque taureau a t pr lev successivement avec chacune des deux m thodes de collecte lectro jaculation et vagin artificiel selon un plan exp rimental altern GROUPE 1 lectro jaculateur puis vagin artificiel GROUPE 2 vagin artificiel puis lectro jaculateur et ceci pendant quatre semaines soit au total quatre fois l lectro jaculateur et quatre fois au vagin artificiel Chaque taureau a t pr lev deux fois par semaine avec deux ou trois jours de repos entre chaque collecte voir calendrier 52 Tableau 5 Plan exp rimental altern sur une p riode de 6 semai
65. ez le taureau charolais Rec Med Vet 1988 164 6 7 519 525 LEON H PORRAS AA GALINA CS amp NAVARRO FIERRO R Effect of the collection method on semen characteristics of zebu and european type cattle in the tropics Theriogenology 1991 36 349 355 96 MARTIN I C A The principles and practice of electro jaculation of mammals Symposium of the Zoological Society of London 1978 43 127 152 MOSURE W L MEYER R A GUDMUNSON J Et al Evaluation of possible methods to reduce pain associated with electroejaculation in bulls Canadian Veterinary Journal 1998 39 8 504 506 OHL DA Electroejaculation Urologic Clinics of North America 1993 20 181 188 PALMER C W BRITO L F C ARTEAGA A A et al Comparison of electroejaculation and transrectal massage for semen collection in range and yearling feedlot beef bulls Animal Reproduction Science 2005 87 25 31 PALMER C W Welfare aspects of theriogenology Investigating alternatives to electroejaculation of bulls Theriogenology 2005 64 469 479 PALMER C W AMUNDSON S D BRITO L F C Use of oxytocin and cloprostenol to facilitate semen collection by electroejaculation or transrectal massage in bulls Animal Reproduction Science 2004 80 213 223 PARVANOV P Study on the effect of method of bull semen collection upon several qualitative parameters of fresh and after thawing semen Bulgar
66. ian Journal of agricultural Science 2000 6 2 233 237 POPESKO P Atlas d anatomie topographique des animaux domestiques Volume 3 Louvain Vander 1972 p 56 QUINT D Rationalisation de la conduite th rapeutique lors d affection du tractus g nital du taureau Etude de la diffusion de mol cules antibiotiques dans le sperme Th Med vet Toulouse 2004 TOU 3 4013 97 SENGER P L Pathways to pregnancy and parturition second revised edition Eastgate Blvd Current Conceptions Inc 2003 258 SETCHELL BP Male Reproductive Organs and semen In CUPPS PT Reproduction in Domestic Animals 4 me dition San Diego Academic Press 1991 221 249 SETCHELL B P Male reproductive organs and semen In PERRY T Reproduction in domestic animals 4 dition San Diego Academic Press INC 1991 251 278 STIEVENART M L lectro jaculation chez les mammif res Revue bibliographique Th Med vet Lyon 1997 n 6609 WELSH T J JOHNSON BH Influence of electroejaculation on peripheral blood concentrations of corticosteroids progesterone LH and testosterone in bulls Arch Androl 1981 Nov 7 3 245 250 WENKOFF MS Evaluation of Bulls for Breeding Soundness 2 me dition Ottawa Canadian Veterinary Medical Association 1988 6 9 98 Toulouse 2008 NOM RIGAL Pr nom FABRICE TITRE COMPARAISON DE LA QUALITE DE LA SEMENCE D
67. iciel ont permis la collecte d un jaculat Ce r sultat s explique par le fait que les taureaux utilis s dans l exp rimentation avaient d j t collect s au vagin artificiel et taient entra n s cette m thode de collecte Lacroix en 1988 relevait un taux d chec de 20 lors de collectes au vagin artificiel pratiqu es dans le cadre de contr les de fertilit en ferme Ce m me taux de 20 a t obtenu par Coopelso dans le cadre de la monte priv e Dans notre exp rimentation les taureaux ont t entra n s la collecte l lectro jaculateur pendant les deux semaines qui ont pr c d les semaines exp rimentales 82 5 des tentatives de collecte l lectro jaculateur ont permis la collecte d un jaculat Ce chiffre est nettement inf rieur aux r sultats de collecte obtenus dans d autres tudes Dans le cadre de contr les de fertilit r alis s en ferme c est dire partir de taureaux non entra n s l lectro jaculateur Lacroix 1988 est parvenu collecter le sperme de 308 taureaux sur 311 race Charolais soit un pourcentage d efficacit de collecte de 99 D autres auteurs Barth et al 2003 Palmer et al 2004 ont obtenu un pourcentage d efficacit de collecte de sperme de 100 dans le cadre d examens de la fonction reproductrice de taureaux de race allaitante Charollais Angus et Hereford Dans le cadre de notre exp rimentation Coopelso les collectes r alis
68. ile d interpr ter les jaculats de mauvaise qualit un r sultat de mauvaise qualit ne permet pas de conclure d finitivement la tentative de pr l vement doit donc tre renouvel e L utilisation d ocytocine pourrait tre envisag e car elle permettrait d am liorer les r sultats de collectes En ce qui concerne la question du bien tre animal si l utilisation de l lectro jaculateur est encore accept e en Europe la r alisation d une anesth sie pidurale pr alablement la collecte et l application de stimulations lectriques adapt es aux r actions de l animal permettraient de diminuer son inconfort pendant la collecte 91 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ABREU J J LEITE R C et al Effect of oxytocin treatment and massage of the cauda epididymitis in association with electroejaculation on ejaculate volume and sperm concentration of bull semen In 9 Congresso Brasileiro de Reproducao Animal Belo Horizonte Brazil 22 26 de Junho 1991 2 1991 421 ALBERT et al Evaluation of potential breeding soundness of the bull In ROBERT S YOUNGQUIST WALTER R THREFALL Curent Therapy in large animal theriogenology second edition Saunders Elsevier 2007 230 233 ALMQUIST J O HALE E B An approach to the measurement of sexual behavior and semen production of dairy bulls Proc Third Intern Congr Anim Reprod Cambridge 1956 Plenary paper p 50 BALL L FU
69. in artificiel Dans d autres tudes Foster et al 1970 L on et al 1991 Parvanov et al 2000 le volume des jaculats est significativement augment lors des collectes l lectro jaculateur par rapport ceux collect s au vagin artificiel D apr s ces auteurs la stimulation lectrique des glandes annexes lors de l lectro jaculation fait augmenter le volume des s cr tions pr spermatiques Dans le cadre de notre tude l op rateur s est efforc de r colter la fraction spermatique de l jaculat ce qui pourrait expliquer que les volumes de collecte l lectro jaculateur n aient pas t significativement sup rieurs de ceux collect s au vagin artificiel Le score du Test de Schalm a t significativement sup rieur lors des collectes l lectro jaculateur comparativement au vagin artificiel Ce r sultat peut s expliquer en partie par une plus grande contamination de l jaculat lors des collectes l lectro jaculateur notamment lorsque le taureau jacule l int rieur du fourreau environ 1 fois sur 5 dans notre exp rimentation La concentration des jaculats collect s au vagin artificiel a t nettement sup rieure celle des jaculats collect s l lectro jaculateur Ce r sultat est similaire ceux d crits dans d autres tudes Foster et al 1970 L on et al 1991 Parvanov et al 2000 Lors de l lectro jaculation la s cr tion importante de liquide s m
70. inal est l origine d un volume de collecte augment d o une plus grande dilution des spermatozo des Dans notre tude les notes de motilit motilit de masse et motilit individuelle avant cong lation ont t significativement sup rieures lors des collectes au vagin artificiel par 80 rapport a celles obtenues par lectro stimulation Dans d autres tudes L on et al 1991 Parvanov et al 2000 les param tres de motilit avant cong lation n ont pas t significativement diff rents entre les deux m thodes de collecte alors que la motilit est diminu e apr s cong lation 3 Cong lation de la semence L aptitude la cong lation seuls les jaculats de qualit suffisante ont t congel s motilit de masse gt 30 motilit individuelle gt 2 a t meilleure pour les jaculats collect s au vagin artificiel par rapport ceux collect s l lectro jaculateur 90 vs 66 7 La motilit apr s cong lation a t significativement sup rieure lorsque les jaculats ont t collect s au vagin artificiel par rapport aux collectes l lectro jaculateur Ce r sultat est similaire ceux d crits dans d autres tudes Foster et al 1970 L on et al 1991 Parvanov et al 2000 Peut on parler pour autant de moindre r sistance la cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur par rapport ceux collect s au vagin artificiel Dans le cadre
71. ion est utilis e couramment pour valuer les capacit s reproductrices des taureaux au Canada et aux USA Pour la majorit des taureaux la collecte est r alis e facilement et ne semble pas tre douloureuse Cependant lorsque des niveaux de stimulation lev s sont utilis s certains taureaux notamment les plus jeunes meuglent pr sentent des contractions musculaires involontaires ou chutent A partir des tudes relatives au bien tre animal du taureau lors de l lectro jaculation l Association Canadienne de M decine V t rinaire Canadian Veterinary Medical Association 2007 a mis un jugement propos de l utilisation de l lectro jaculateur dans le cadre de contr les de collecte de semence Cette technique de collecte est consid r e acceptable dans le cadre des valuations de la fertilit des taureaux de monte naturelle car les techniques de collecte alternative popos es ne sont pas aussi performantes que la collecte l lectro jaculateur Il est conseill aux op rateurs d tre le plus mesur possible dans l application des stimulations lectriques pemettant l obtention de l jaculation En m decine humaine l lectro jaculation est utilis e chez les parapl giques qui souhaitent avoir des enfants Sans anesth sie les r actions ressenties chez les hommes qui ont conserv une sensibilit dans la r gion pelvienne sont douloureuses Aussi pour ces patients une anesth sie g n rale ou
72. ique ou manuel Certains poss dent un commutateur permettant de choisir l un ou l autre mode de fonctionnement Le mod le que nous avons utilis dans notre tude Electrojac5 permet de travailler suivant les deux modes Le mode automatique est conseill par le fabricant il permet d appliquer des stimulations similaires aux taureaux c est celui qui a t utilis pour l exp rimentation Chaque cycle se compose de 32 stimulations voltage croissant de la 1 la 24 impulsion passage de 6 a 21 volts et 4 voltage constant de la 24 a la 32 impulsion 21 volts Chaque stimulation dure 2 secondes est suivie par deux secondes de repos site enna ha Se utenti ite mt FERRER i Figure 7 Cycle de stimulations produites par l Electrojac 5 D apr s Lacroix 1988 32 2 D roulement de la collecte de sperme l lectro jaculateur chez le taureau Contention La contention physique de l animal est r alis e l aide d une cage de contention Une sangle pectorale peut tre utilis e pour emp cher l animal de s affaisser lors des stimulations lectriques L utilisation d une sangle abdominale est proscrite par certains auteurs Lacroix 1988 car elle constitue une g ne l coulement des liquides spermatiques et peut provoquer une contusion de la verge en turgescence Pr paration du taureau La palpation transrectale permet de v rifier l int grit des organ
73. jaculateur est diminu e comparativement la motilit des jaculats collect s au vagin artificiel 72 La figure 22 repr sente l volution des notes moyennes de motilit des jaculats collect s a l lectro jaculateur et au vagin artificiel au cours des quatre semaines d exp rimentation Electro jaculateur s Vagin artificiel 5 o D o gt E 2 semaine 1 semaine 2 semaine 3 semaine 4 Figure 22 Evolution des notes moyennes de motilit des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel au cours des quatre semaines d exp rimentation On constate que les notes moyennes de motilit des jaculats collect s ont tendance rester stables au cours des semaines d exp rimentation et ceci pour les deux m thodes de collecte Pourcentage de vivants et pourcentage d anomalies La m thode de collecte n a pas eu d effet significatif sur le pourcentage de spermatozo des vivants et le pourcentage d anomalies qu elles soient majeures ou mineures 73 2 Effets de la m thode de collecte sur les param tres de la semence apr s cong lation A Electro jaculateur 5 0 a Vagin artificiel ie O 5 oo 40 aa 23 SS 30 eee E On Br Te ge Sea Oo 5 8 o OO 20 RER D ay o 5 O z o 10 Anis Saupiquet Saxo Ulot Uxue Ajuval Allien TamBor Taquin Uvilo Taureaux collect s Figu
74. l anus participe galement l expulsion du sperme Les diff rentes parties du tractus g nital m le ne se contractent pas simultan ment mais de fa on successive Setchell 1991 2 R le jou par le syst me nerveux Le syst me nerveux est l origine du m canisme de l rection Ainsi l rection est impossible chez les hommes atteints de certaines l sions de la moelle et peut tre d clench e par une stimulation locale de nerfs Garner 1991 L innervation de l appareil g nital chez les mammif res est assur e par le syst me nerveux autonome Il est compos de fibres nerveuses eff rentes permettant une commande motrice visc rale et de fibres nerveuses aff rentes transmettant l information sensitive vers le syst me nerveux central Ces fibres font partie d un r seau complexe de nerfs et de ganglions les plexus reliant l appareil g nital la moelle spinale ou au bulbe rachidien Houdeau 2001 1 Contr le m dullaire de l rection et de l jaculation La motricit des voies g nitales le d bit vasculaire et les s cr tions proc dent en partie de r flexes impliquant des connexions complexes entre les fibres nerveuses eff rentes et aff rentes Ces connexions se r alisent dans la moelle spinale site majeur de l int gration de l information sensitive d origine g nitale Les contacts entre les fibres nerveuses aff rentes et eff rentes se r alisent sur plusieurs segments m
75. la d cong lation les paillettes conserv es 196 C ont t plong es directement dans un bain marie 37 5 C pendant 30 secondes 59 7 Analyse de variance L analyse statistique a t r alis e l aide du logiciel Systat version 10 Les variables discontinues motilit de masse motilit individuelle motilit globale avant cong lation motilit apr s cong lation note au Test De Schalm ont t transform es avant l analyse statistique avec la formule logarithme d cimal Les effets de la m thode de collecte sur les param tres de qualit de la semence ont t tudi s avec le mod le d analyse de variance suivant Yijk p Ak Bj Ck Ak Bj Di Bj Eijk O Yijk est le param tre de qualit de semence tudi pour le taureau i l int rieur de la s quence j au cours de la p riode k u est l effet moyen g n ral Ak est l effet p riode 1 4 semaines Bj est l effet s quence V E ou E V Ai Bj est l interaction entre la p riode et la s quence Ck est l effet collecte V ou E Di Bj est l effet taureau 10 taureaux nich dans l effet s quence Eijk est le terme d erreur du mod le L effet de la m thode de collecte sur la r sistance la cong lation des jaculats a t tudi avec le mod le d analyse de variance suivant Rijk p Ak Bj Ck Ak Bj Di Bj Eijk O Rijk est la diff rence entre la note de motilit avant cong
76. le en centre d ins mination En effet sa r alisation conditionne en grande partie la qualit biologique et bact riologique de la semence du taureau Dans les taurelleries fran aises dont le centre de collecte de Midatest bas Coopelso dans le Tarn le sperme des taureaux d ins mination est classiquement collect au vagin artificiel Cette m thode n cessite un entra nement des taureaux Une autre technique de r colte du sperme l lectro jaculation est utilis e de fa on plus ponctuelle Elle constitue une alternative int ressante la m thode de collecte du sperme au vagin artificiel notamment lorsque les taureaux ne sont pas capables de donner le coup de rein concomitant l jaculation Le v t rinaire responsable du centre de collecte de Coopelso Brahim Khirredine r alise environ 50 collectes par an dans le cadre de la monte priv e destin es la r alisation de paillettes La technique de collecte utilis e est essentiellement le vagin artificiel Cependant environ 20 des tentatives de collecte sont infructueuses En effet les taureaux peuvent se montrer r calcitrants la collecte pour des raisons variables pathologies de l appareil locomoteur stress provoqu par la pr sence humaine manque de docilit faible libido ou absence de vache en chaleur C est pourquoi l lectro jaculateur peut appara tre comme une technique plus adapt e pour obtenir un pr l vement de sperme sur des taure
77. leur pression lubrification et de recueillir rapidement un jaculat total et non souill Dumont 1997 Le mat riel est constitu d un cylindre de caoutchouc rigide manchon ext rieur d une trentaine de centim tres de long et d un diam tre int rieur de 5 cm Il est doubl l int rieur d une capote amovible et gonflable manchon int rieur galement en caoutchouc La paroi qui le constitue est donc double et peut tre remplie d eau ou d air l aide d une valve ext rieure Lors du pr l vement le vagin est prolong d un c ne en silicone 25 cm de long l extr mit duquel est fix le tube de collecte Ce dernier est prot g des chocs m caniques thermiques et de la lumi re par un manchon opaque et isolant L ensemble du vagin lorsqu il est pr t tre utilis est lui m me isol thermiquement Apr s utilisation l ensemble du vagin est enti rement d mont pour tre lav s ch et d sinfect G rard et Khirredine 2002 A oor ee z E 4 PT OAR ene f H H f j i f f g 2 2 tR RTN REARS Sete con febo grmied Figure 9 Repr sentation sch matique du vagin artificiel D apr s Quint 2004 31 3 Technique de collecte de sperme au vagin artificiel Avant chaque utilisation les vagins sont maintenus dans une tuve a une temp rature de 45 C L eau pr sente dans la paroi du vagin permet de maintenir u
78. litent la collecte L animal est seulement maintenu par la t te il n y a pas de sangles permettant une sustentation abdominale ce qui apporterait une s curit suppl mentaire en cas de chute Il faut noter que le taureau Anis trop craintif pour tre amen jusque dans la cage a t pr lev dans la salle d attente de la salle de monte partir de la deuxi me semaine d exp rimentation Les autres taureaux n ont pas pr sent de difficult s particuli res pour rentrer dans la cage 2 ee mm Figure 12 Photographie de la cage de contention 55 Le m me op rateur a r alis l ensemble des collectes l lectro jaculateur Pr alablement l lectro jaculation l op rateur a r alis une vidange du rectum du taureau et un massage de ses glandes annexes en particulier les v sicules s minales et les ampoules du conduit d f rent pendant une dur e de deux minutes environ La sonde a t introduite dans le rectum du taureau apr s lubrification Un animalier a veill ce que le taureau n expulse pas la sonde de son rectum en la maintenant par son extr mit Un deuxi me animalier g rait le bo tier de contr le et se tenait pr t intervenir suivant les instructions de l op rateur soit pour bloquer la mont e en intensit des cycles de stimulation soit pour arr ter le syst me en cas de probl me chute ou r actions trop importantes du taureau L op rateur avait en charge la collect
79. llecte plus faible de param tres de qualit du sperme inf rieurs concentration en spermatozo des param tres de motilit avant et apr s cong lation Ces r sultats ne sont pas en faveur d une utilisation de l lectro jaculateur pour la collecte de semence destin e la r alisation de paillettes pour la monte priv e Dans les centres d ins mination artificielle o la plupart des taureaux sont collect s r guli rement au vagin artificiel l utilisation de l lectro jaculateur doit rester ponctuelle et limit e aux animaux incapables de sauter et qui supportent bien cette m thode de collecte les taureaux de plus grand gabarit notamment La collecte au vagin artificiel qui n cessite une stimulation sexuelle pr alable permet d obtenir un jaculat avec un comportement sexuel physiologiquement proche du coit Cette m thode reste la plus adapt e pour obtenir du sperme de bonne qualit L inconv nient majeur de cette m thode dans le cadre de la monte priv e est que la collecte ne pourra s effectuer qu en pr sence d une femelle en chaleur et si le taureau est docile suffisamment stimul et capable de sauter En l absence de d veloppement actuel du vagin artificiel interne la technique de collecte l lectro jaculateur constitue donc encore une m thode de collecte de choix pour les contr les de fertilit en ferme Nos r sultats de collecte l lectro jaculateur montrent qu il est diffic
80. lvien C nerf honteux D plexus pelvien E nerf glut al caudal F nerf sciatique H nerf hypogastrique 1 moelle spinale J plexus m sent rique caudal CENTRE 1 L2 L1 vasoconstricteur et excr toire CENTRE 2 S2 S3 S4 vasodilatateur et m canique Figure 5 Repr sentation sch matique du syst me nerveux innervant l appareil g nital chez le taureau D apr s Getty 1964 et Dyce et al 1987 28 La relation entre le lieu de la stimulation et les effets provoqu s a t tudi e Easley 1970 lapplication de stimuli au dessus et caudalement par rapport au corps de la prostate provoque l rection la stimulation de la zone situ e cr nialement par rapport la prostate correspondant aux ampoules d f rentielles et une partie des glandes v siculaires entra ne l mission du sperme dans l ur tre Ces r sultats exp rimentaux confirment bien la pr sence de deux centres nerveux et leur implication dans la physiologie de l rection et de l jaculation Lors d exp riences d lectro jaculation chez le b lier Hovell et al 1969 la reproduction des v nements s quentiels de l jaculation naturelle a t mise en vidence contraction des ampoules du conduit d f rent et envoi du sperme dans l ur tre mission expulsion du sperme travers le sphincter externe gr ce la contraction des parois de l ur tre et des muscles environnants jaculation prop
81. n des spermatogonies souches par mitose L entr e des spermatogonies souches dans le processus de spermatogen se ou cycle s minal se fait intervalles r guliers de 13 5 jours chez le taureau La m iose est l tape de brassage g n tique permettant la formation de cellules haplo des les spermatides partir des spermatogonies diploides La spermiogen se est l tape de diff renciation cytoplasmique qui permet la formation de cellules mobiles les spermatozo des partir de cellules rondes et immobiles les spermatides Cette tape correspond de nombreux remaniements cytoplasmiques et la condensation de la chromatine La dur e de la spermatogen se est d environ 54 jours chez le taureau La dur e moyenne de transit dans l pididyme est de 8 jours Hochereau et al 1964 Cela signifie que les spermatozo des que l on retrouve dans un jaculat ont t fabriqu s dans les testicules lors de la spermatogen se deux mois plus t t environ C est pourquoi ce d lai doit tre pris en compte pour mesurer l effet de diff rents facteurs sur la spermatogen se et la fonction testiculaire L efficacit de la production journali re de spermatozo des est exprim e par le nombre de spermatozo des produits par jour et par gramme de testicule Elle est en moyenne de 12 millions jour gramme chez le taureau Chez la plupart des mammif res elle atteint 20 28 millions et elle est de 6 millions chez un homme de 20 ans
82. nce collect e au vagin artificiel celle collect e a l lectro jaculateur sur des taureaux d ins mination artificielle de diff rentes races fran aises dans le cadre d une coop rative d levage et d ins mination artificielle Coopelso Les param tres s minologiques ont t valu s avant et apr s cong lation Les pr l vements des taureaux ont t r alis s dans le centre de collecte de Midatest bas Coopelso dans le Tarn pendant la p riode d octobre et de novembre 2007 Ces donn es sur la collecte l lectro jaculateur en particulier l obtention et la qualit des jaculats collect s permettront d envisager ou non son utilisation dans le cadre de la monte priv e 50 A MATERIELS ET METHODES 1 Animaux Dix taureaux d ins mination artificielle ayant d ja t collect s au vagin artificiel ont t inclus dans l essai Les taureaux Tam Bor Uvilo Saupiquet Ulot n avaient t pr lev s que pour la r alisation des doses de testage Une dizaine de sauts avaient ainsi t r alis s pour la production d environ 3000 paillettes Les 6 autres taureaux avaient t en production et devaient tre r form s pour des raisons g n tiques Les tableaux 3 et 4 pr sentent les caract ristiques des taureaux inclus dans l tude Tableau 3 Caract ristiques des 5 taureaux de race laiti re du GROUPE 1 Collectes r alis es avant
83. ne certaine pression et une temp rature du vagin d environ 42 C lors de la collecte Si la temp rature de l eau est trop lev e l organe copulateur peut tre l s et le taureau peut refuser la collecte Les vagins sont sortis de l tuve au dernier moment lorsque le pr leveur estime que le taureau est suffisamment pr par La capote interne du vagin artificiel est plus ou moins gonfl e en fonction des habitudes du taureau L int rieur du vagin est lubrifi avec de la vaseline ou un gel gyn cologique Le taurellier laisse alors le taureau monter sur le boute en train Le pr leveur s accole au taureau 1l d vie son p nis en rection dans le vagin artificiel en le saisissant travers le fourreau Ce simple contact suffit en g n ral d clencher le saut et l jaculation qui ne durent que quelques secondes L op rateur retourne ensuite le vagin artificiel et le sperme s coule dans le tube collecteur Dumont 1997 et G rard et Khirredine 2002 Les int r ts de la collecte au vagin artificiel sont les suivants Qualit de la semence La collecte au vagin artificiel donne un jaculat naturel induit par une libido n cessaire et suffisante et produit par un comportement physiologiquement proche du co t C est pourquoi elle permet d obtenir le meilleur sperme possible un moment donn Observation de la capacit saillir du taureau Dans le cadre d un contr le de fertilit la collect
84. nes des collectes de sperme des taureaux a l Electro jaculateur E et au Vagin Artificiel VA P riode Lundi Mardi Mercredi Jeudi Vendredi Semaine Groupe 1 E Repos Groupe 1 VA Repos Repos d entra nement 1 Groupe 2 VA Groupe 2 E Semaine Groupe 1 VA Repos Groupe 1 E Repos Repos d entra nement 2 Groupe 2 E Groupe 2 VA Semaine Repos Groupe 1 VA Repos Repos Groupe 1 E exp rimentale 1 Groupe 2 E Groupe 2 VA Semaine Repos Groupe 1 VA Repos Repos Groupe 1 E exp rimentale 2 Groupe 2 E Groupe 2 VA Semaine Repos Groupe 1 VA Repos Repos Groupe 1 E exp rimentale 3 Groupe 2 E Groupe 2 VA Semaine Repos Groupe 1 VA Repos Repos Groupe 1 E exp rimentale 4 Groupe 2 E Groupe 2 VA 53 3 La collecte l lectro jaculateur 1 Description du mat riel L lectro jaculateur est un Electrojac5 Figure 10 distribu par IDEAL INSTRUMENTS filiale de la soci t NEOGEN La batterie qui quipe l lectro jaculateur d livre 12V La sonde rectale est de forme ogivale constitu e de r sine synth tique dans laquelle sont inclus les composants lectroniques Le corps de la sonde p se 1 7 kg et mesure 40 cm de long pour un diam tre de 6 cm il permet un contact troit avec la muqueuse rectale La sonde comporte trois lectrodes de cuivre longitudinales la diff rence de potentiel s tablit entre l lectrode centrale et chacune d
85. nt la r colte Le mat riel n cessaire se compose d une lame pr alablement chauff e 37 C et d un microscope platine chauffante L op rateur d pose une goutte de sperme 6uL 5 mm de diam tre la surface d une lame Au grossissement 100 l intensit des vagues provoqu es par le d placement des spermatozo des est valu e L paisseur de l anneau form par les spermatozo des en p riph rie d une goutte est galement appr ci e La motilit massale est not e de 0 5 note 0 absence de mouvement des spermatozo des note 1 l ger mouvement perceptible pas de vague note 2 vagues peu nombreuses 42 note 3 vagues nombreuses note 4 vagues rapides et intenses note 5 tourbillons tr s rapides Un sperme dont la motilit massale est inf rieure ou gale 3 est g n ralement limin La concentration en spermatozo des est mesur e en milliards de spermatozo des par millilitre l aide d un spectrophotom tre talonn Cet appareil mesure la densit optique du sperme dilu 40uL de sperme dans 960uL de s rum physiologique il est r gl sur une longueur d onde de 535 nm La mesure de la concentration peut aussi tre r alis e par comptage des spermatozo des par h matim tre en utilisant une lame de Mac Master ou une cellule de Malassez Le sperme est d abord dilu 100 ou 200 fois l aide d une solution de NaCI 3 Une goutte de sperme dilu est d pos e dans la chambre
86. oies uro g nitales Barone 1990 La partie uro g nitale inclut l ur tre les glandes annexes et le p nis L ur tre constitue la partie terminale des voies conduisant le sperme lors de l jaculation Long de 100 120 cm il comprend une partie pelvienne et une partie p nienne Le p nis du taureau est de type fibro lastique les corps caverneux sont pauvres en tissus rectiles et pourvus d une albugin e tr s paisse Il est long de 80 100 cm et son calibre moyen est de 3 4 cm Il s avance tr s loin sous le ventre et le pr puce et atteint le voisinage imm diat de l ombilic Le p nis est constitu d une partie moyenne ou corps et de deux extr mit s l une fixe ou racine et l autre libre constitu e par le gland Le corps est une longe tige cylindro de plus ou moins aplatie chez le taureau La racine est forte et paisse Elle se subdivise en deux branches lat rales les piliers du p nis entre lesquels est log le bulbe du p nis Le corps spongieux du gland est tr s peu d velopp Ce dernier pr sente une forme tr s asym trique 1l est incurv en crochet vers la gauche et l ostium externe de l ur tre est port par un processus ur tral Les nerfs moteurs du p nis proviennent essentiellement de ramifications du nerf honteux L innervation autonome vient du plexus pelvien et suit le trajet des vaisseaux Lors de 16 l rection le p nis du taureau de type fibro lastique augmente
87. omalies de la pi ce interm diaire et anomalies de la t te Tableau 5 L tude du pourcentage de morts et du pourcentage d anomalies a pu tre r alis e sur 33 jaculats collect s au vagin artificiel 7 lames non lisibles et 25 jaculats collect s l lectro jaculateur 8 lames non lisibles 58 Tableau 6 Classification des anomalies morphologiques des spermatozoides Flagelle repli ANOMALIES DU Flagelle rudimentaire ou cass FLAGELLE Flagelle enroul Gouttelette cytoplasmique distale ANOMALIES DE LA Pi ce interm diaire d doubl e PIECE INTERMEDIAIRE D formations de la pi ce interm diaire Gouttelette cytoplasmique proximale T te piriforme ANOMALIES DE LA T te repli e TETE T te d capit e T te ronde 6 Examen de la semence apr s cong lation Une vingtaine de paillettes ont t r alis es partir de chaque jaculat collect selon les proc dures en vigueur Coopelso cf Revue Bibliographique A l issue de la phase de cong lation deux paillettes ont t d congel es afin de contr ler le pourcentage de spermatozo des vivants apr s cong lation qui correspond la motilit individuelle apr s cong lation Cette note de motilit exprim e en pourcentage a t transform e en une note de motilit globale apr s cong lation not e de 0 5 afin de la comparer avec la note globale de motilit avant cong lation Lors de
88. on chien mais est sensiblement diff rent chez le taureau pr sentant un p nis de type fibro lastique Setchell 1991 L rection chez le taureau n accroit que faiblement le diam tre et la longueur du p nis Elle est permise par l effacement de l inflexion sigmo de par rel chement des muscles r tracteurs du p nis Apr s l excitation sexuelle la r traction du p nis est rapide et brusque sous l effet conjoint de deux ph nom mes la contraction des muscles r tracteurs et l action passive de faisceaux de fibres lastiques situ es dans les concavit s de l inflexion sigmo de Barone 1990 L mission correspond la propulsion des spermatozo des vers le canal jaculateur et l accumulation des produits de la s cr tion des glandes sexuelles dans l ur tre proximal Elle est provoqu e par la contraction s quentielle de la queue de l pididyme et du canal d f rent 23 la contraction des v sicules s minales et de la prostate le col v sical de la vessie tant alors ferm L jaculation correspond l expulsion puissante et saccad e du contenu de l ur tre proximal sous l effet de la contraction rythmique des muscles stri s p rin aux combin e celle des muscles lisses de l ur tre et du tractus g nital Houdeau et al 2001 Les contractions sont de type tonique non p ristaltiques les contractions des muscles autour du bulbe du p nis et du muscle r tracteur de
89. our ins miner les vaches de l exploitation Les leveurs sollicitent ce service dans le but de faire produire des doses pour une future utilisation en JA sur le cheptel taureau en copropri t ou avant sa vente Apr s avoir r alis un stock de paillettes l leveur peut choisir de se s parer de son taureau tout en conservant sa g n tique ce qui lui permet de supprimer les co ts d entretien d un taureau Le v t rinaire responsable du centre de collecte de Coopelso r alise environ 50 collectes par an dans le cadre de la monte priv e destin es la r alisation de paillettes La technique utilis e est essentiellement le vagin artificiel Elle n cessite la pr sence de vaches en chaleur le jour de la collecte et des moyens de contention adapt s 47 La technique peut prendre plusieurs heures car il faut que le taureau soit d cid a sauter et il est difficile dans ces conditions de conserver le vagin artificiel 4 une temp rature la plus adapt e possible environ 42 C Certains checs sont observ s environ 20 des tentatives de collecte sont infructueuses En effet les taureaux peuvent se montrer r calcitrants a la collecte pour des raisons variables pathologies de l appareil locomoteur stress provoqu par la pr sence humaine manque de docilit faible libido ou absence de vaches en chaleur 48 PARTIE EXPERIMENTALE L objectif de notre tude est de comparer la qualit biologique de la seme
90. r s cong lation sa sasiesivescaecucasarsnedeswwnbiscsaarsiesdaedicnnstboisainss 59 7 Analyse Ge variance en nes 60 Be RESULTATS opaniraa Na EEN AEE TEISESE EENES Et 61 1 Obtention d un jaculat et aptitude la cong lation sos soesssnranersesesasse 61 2 Caract ristiques des collectes r alis es l lectro jaculateur 63 3 Etude des param tres s minologiques des jaculats collect s l electro jaculateur et AAC ACUTE vind A ninideuleshnsendaadncsabeSannisuteundelstaubachiecenoctns 64 1 Etude des effets de la m thode de collecte sur les param tres de la semence avant COS AUD ed eR MEER eR a en eae de 66 2 Effets de la m thode de collecte sur les param tres de la semence apr s cong lation suntan NU sundae en tente Mad pans at ne nan aa nn 74 A R sistance la CONS ALON vss seeccialssistcaciuscpcandaabnstinunsixnssiussendusstamuiiuitiucelonmaimusaseiniess 75 DISCUSSION sante E N T 78 A EFFETS DE LA METHODE DE COLLECTE sessesesssssersssseresssereesssseesseseesssseee 79 LI Echec de COST nn ee AET A E EE tenait 79 2 Qualit USER menant ane int menus 80 3 Cong lation d la S M NCR ss immense metier 81 B LES COLLECTES A L ELECTROEJACULATEUR santrnso uen 82 l Technique de collecte cas ns nn reins antennes dents 82 2 Jnconfort AS AA NI ne mr nome den 83 3y Pr sence d une T on on R natennnes 84 Sa ct 84 C AMELIORATION DE LA TECHNIQUE DE COLLECTE A I ELECTROEJACUL
91. rato a a Du aa AOE 14 2 Les VOIES spermat US era E che dite 16 3 LES VOIES DO OCIA ES ca cuca cusasnteeanepaiaza ie craie nord 16 B LA PRODUCTION DU SPERME nn muni dense usine 19 1 d SERRES dans E OAE ENEE TE E RE TE 19 2 Laproduction du plasma S RIE ina 20 C L RECTION ET L TACULA TION mine nsc 23 1 M canismes de lcrection et de l RMeNlatOn sinus 23 2 R le jou par le syst me NerveuX sseesesseseessssessesstsesststtsessestrstssessesstseesessesesse 24 1 Contr le m dullaire de l rection et de P jaculation cvissssccivsscissevsisacoucesstecssvosoisaes 24 2 Voles ELC He ING cass nome ESS ra sonata anime EARTE EIEEE dus 25 OS cave as EE EE gases emer eens tose 26 4 Physiologie nerveuse de erection et de l jaculation as scsssscisssssineissscetastsvasaasivsaznnssg 27 3 Electrostimulation de l rection et de l jaculation principe de l lectro jaculation ET SMa E E T ean aieelnanmnatnasane 28 D METHODES DE RECOLTE DU SPERME eue 30 1 La collecte l lectro jaculateUr ennuis at passerelles 30 l Fonctionnement d l le tro j c lat t sristi aas 30 2 D roulement de la collecte de sperme a l lectro jaculateur chez le taureau 33 3 Int r ts et limites de la collecte l l ctro laure 35 2 L r colted sp rme au vagin ACL ssh inin rn aeei 36 1 La pr paration des taureaux dans les centres de collecte 36 2a Matene id mani ne 37 3 Technique de collecte de sperme au
92. re 23 Distribution individuelle des notes de mobilit apr s cong lation des jaculats collect s par lectro jaculateur et vagin artificiel La figure 23 repr sente les notes de motilit apr s cong lation des jaculats collect s l lectro jaculateur et au vagin artificiel La mobilit apr s cong lation des jaculats collect s par vagin artificiel a t significativement sup rieure celle des jaculats collect s par lectro jaculateur 46 8 de moyenne par vagin artificiel et 31 1 par lectro jaculateur p 0 002 74 4 R sistance a la cong lation Les figures 24 25 et 26 repr sentent les notes moyennes de motilit obtenues avant et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit avant cong lation respectivement sup rieure 2 comprise entre 3 et 4 ou sup rieure 4 m Avant cong lation jaculats de motilit gt 2 6 o Apr s cong lation Motilit globale not e de 0 5 Electro jaculateur Vagin artificiel Figure 23 Repr sentation graphique des notes moyennes de motilit obtenues avant et apr s cong lation pour les jaculats ayant une motilit sup rieure 2 avant cong lation moyenne cart type E Avant cong lation classe d jaculats 3 lt motilit lt 4 Apr s cong lation Motilit globale not e de 0 5 Electro jaculateur Vagin artificiel Figure 24 Repr sentation graphiqu
93. rement dite Cette m thode a donc t utilis e chez diff rentes esp ces de mammif res pour r colter le sperme 29 D METHODES DE RECOLTE DU SPERME 1 Lacollecte l lectro jaculateur Stievenart 1991 L lectro jaculation permet de provoquer l jaculation par une stimulation lectrique Un g n rateur produit de l lectricit qui est transmise par l interm diaire d lectrodes l animal L interface tissu lectrodes r sistance interne joue un r le non n gligeable car la stimulation lectrique doit parvenir jusqu aux nerfs pour provoquer l rection et l jaculation 1 Fonctionnement de l lectro jaculateur Le g n rateur Le d veloppement de la technique d lectro jaculation a abouti la mise au point d appareillages compacts et robustes quip s de transistors et circuits int gr s pour tendre la gamme des stimulations possibles Les appareils fonctionnent le plus souvent a partir de batteries de faible voltage Martin 1978 et Brindley 1981 Les lectrodes Les lectrodes utilis es aujourd hui pour l lectro jaculation sont rectales afin de limiter la stimulation des tissus environnants Elles sont introduites dans le rectum pr alablement vid des f c s Elles sont soit fix es la main de l op rateur soit fix es une sonde rectale Elles doivent tre en contact avec le plancher du rectum dans la r gion des glandes v siculaires
94. s Le nombre de spermatozo des par paillette est de 20 millions pour un volume de 0 225 mL Le dilueur doit tre port une temp rature de 35 C avant d tre ajout la semence Il permet d apporter aux spermatozo des les l ments nutritifs et protecteurs permettant leur survie apr s cong lation Il contient un substrat nerg tique n cessaire au maintien du m tabolisme des spermatozo des fructose glucose ou lactose et doit maintenir une pression osmotique et un quilibre lectrolytique physiologiques Le dilueur doit aussi avoir un bon pouvoir tampon afin de limiter les variations de pH n fastes la survie des spermatozo des La cryopr servation et la cong lation des spermatozo des sont assur es par la pr sence de l cithines prot ines et lipoprot ines du jaune d uf ou du lait l ajout de glyc rol permet d viter la formation de cristaux de glace qui l sent les membranes cellulaires La l gislation europ enne impose l ajout de substances antibiotiques au dilueur pour garantir la qualit bact riologique de la semence En pratique les dilueurs sont aujourd hui des produits pr ts l emploi L ensemble dilueur spermatozo des est maintenu 4 C pendant une heure apr s m lange pour r frig rer la semence 3 heures d quilibration suppl mentaires sont ensuite n cessaires pour permettre les changes entre le dilueur et les cellules 5 Mise en paillettes et cong lation de la semen
95. s la phase spermatique tait mise sur 34 taureaux de 1 an 60 ont jacul partir d s la 6 impulsion 40 d entre eux partir de la 16 sur 27 taureaux de 2 ans et plus la moiti a jacul partir de la 6 impulsion l autre moiti partir de la 16 Le nombre moyen de stimulations n cessaires la collecte a donc t inf rieur celui de notre tude La r alisation quasi n cessaire de deux cycles de stimulations en mode automatique et la variation des r ponses des taureaux face aux stimulations conduit s int resser une utilisation de l lectro jaculateur en mode manuel pour s adapter au mieux aux variations individuelles de r ponse des taureaux aux stimulations lectriques 82 Martin et al 1988 ont utilis l lecro jaculateur en mode manuel en faisant varier la dur e des phases de stimulation et celle des phases de repos Certains taureaux ont besoin de p riodes de repos de courte dur e pour conserver l rection au cours des stimulations d autres n cessitent des stimulations lectriques plus prolong es de 2 3 secondes La conclusion de l tude est d utiliser un programme qui permet de s adapter le plus possible aux r actions des taureaux en appliquant les stimulations de fa on tr s progressive en particulier lorsque le taureau est soumis pour la premi re fois ce type de collecte 2 Inconfort des taureaux Pour la majorit des taureaux la
96. sant deux fausses montes i ae n BH LEP PIPITR Figure 13 Vagin artificiel 5 Examen du sperme Le volume en ml a t valu par lecture directe sur le tube de collecte gradu La concentration en milliards de spermatozo des ml a t mesur e a l aide d un spectrophotom tre talonn Cet appareil mesure la densit optique du sperme dilu 40uL de sperme dans 960uL de serum physiologique Les valuations de la motilit massale et de la motilit individuelle ont t r alis es selon les proc dures en vigueur utilis es Coopelso cf examen s minologique Les deux notes de motilit ont t transform es en une note de motilit globale avant cong lation not e de 0 3 Un Test de Schalm a t r alis sur chaque jaculat Il permet la mise en vidence de la pr sence de leucocytes dans le sperme signe d une inflammation de l appareil g nital Son principe repose sur la r action de ADN des cellules avec le Teepol alors que ADN condens des spermatozo des ne r agit pas avec ce r actif a7 ImL de teepol Leucocytest est m lang 0 5mL de sperme pur dans une coupelle Apr s 15 secondes d agitation la fluidit du liquide obtenu est not e de 0 a 4 selon la grille d interpr tation suivante 0 n gatif le r actif est fluide de couleur violette 1 Schalm 1 pr sence de grumeaux fugaces m lange fluide 2 Schalm 2 pr sence de gr
97. st me nerveux central Elles entra nent toutes les deux l activit du syst me parasympathique lequel entra ne la relaxation des parois des art res dans le p nis la relaxation des cellules musculaires des corps rectiles n cessaires l augmentation de d bit sanguin dans le p nis De plus fait important chez le taureau la stimulation sexuelle entra ne aussi le rel chement du muscle r tracteur du p nis n cessaire son ext riorisation La contraction des muscles lisses de l pididyme des canaux d f rents et des glandes accessoires intervient en r ponse la stimulation du nerf hypogastrique L arr t de l rection correspond la chute de l activit parasympathique et la reprise de l activit sympathique Houdeau et al 2001 Les neurom diateurs intervenant lors de l rection ne se limitent pas aux syst mes adr nergiques et cholinergiques faisant respectivement intervenir l adr naline et l ac tylcholine Un autre type de neuro transmetteur intervenant dans le m canisme de l rection du p nis a t mis en vidence il s agit du VIP Vasoactive Intestinal Polypeptide En clinique humaine le VIP ou citrate de sild nafil est utilis pour traiter les patients atteints de troubles rectiles Nom d pos Viagra Sa lib ration lors de l excitation parasympathique provoque une chute de la r sistance vasculaire des parois des art res du p nis provoquant l augmentation du d bit
98. t chaque collecte les taureaux sont amen s dans la salle de monte et attach s dans les stalles d attente o ils peuvent voir la collecte de sperme des autres taureaux Lors de la pr paration passive la libido des taureaux est stimul e par voyeurisme et par le conditionnement la reconnaissance des bruits des odeurs propres la salle de monte La pr paration active consiste promener le taureau et l amener au contact des boutes en train Les boutes en train sont des taureaux limin s de la production pour des raisons g n tiques et qui sont gard s en raison de leur robustesse et de leur docilit les vaches tant interdites des centres de production de semence pour des raisons sanitaires et de s curit Lorsque le taureau pr sente des signes d excitation rection flehmen le taurellier lui fait effectuer plusieurs fausses montes Elles consistent laisser le taureau monter sur le boute en train sans lui laisser le temps de donner le coup de rein concomitant de l jaculation Les taureaux r alisent en moyenne deux fausses montes avant d tre r colt s au vagin artificiel mais leur nombre varie en fonction du centre de production de semence et du taureau La connaissance de chaque animal de ses habitudes permet d effectuer une bonne pr paration 36 2 Mat riel Le principe du vagin artificiel est de reproduire l ensemble des sensations pr sent es par les voies g nitales femelles lors du coit cha
99. thoraco lombaires puis se prolonge dans les ganglions de la cha ne paravert brale le plexus coeliaque et le plexus pelvien A partir de ces relais les neurones post ganglionnaires du syst me sympathique courent dans les nerfs pelviens et ou honteux pour atteindre l appareil g nital Houdeau et al 2001 L innervation parasympathique a pour point de d part les segments sacr s Les neurones pr ganglionnaires empruntent les nerfs pelviens pour faire relais avec les neurones post ganglionnaires dans le plexus pelvien Le plexus pelvien constitue donc un carrefour essentiel pour l innervation eff rente de l appareil g nital Le plexus pelvien est situ proximit du rectum et de la prostate et les multiples ganglions qu il comporte ganglions pelviens constituent les relais des fibres parasympathiques Barone 1990 Ces derni res se distribuent ensuite au rectum la vessie la prostate l ur tre et ses formations annexes Certaines gagnent les formations rectiles du p nis en accompagnant les diverses branches de l art re honteuse interne 25 3 Voies aff rentes figure 4 L innervation sensitive donc aff rente des organes g nitaux internes est assur e par les nerfs pelviens et hypogastriques La sensibilit des organes g nitaux externes est transmise par les fibres aff rentes des nerfs honteux pelviens et hypogastriques Houdeau et al 2001 D autres voies aff rentes proviennent du cerve
100. tubes s minif res tubes droits rete testis canal eff rent conduit pididymaire ON DOO A WN t te de l pididyme 9 corps de l pididyme 10 queue de l pididyme 11 plexus pampiniforme Figure 2 Sch ma d une section longitudinale du testicule et de l pididyme D apr s Dyce et al 1987 15 2 Les voies spermatiques Barone 1990 et Dacheux 2001 A leur sortie du testicule les spermatozoides ne sont pas matures ils ne sont ni mobiles ni f condants La diff renciation des spermatozoides appel e maturation s effectue dans le conduit pididymaire L pididyme phagocyte les spermatozo des d g n r s r absorbe le liquide testiculaire s cr te des substances jouant un r le dans la maturation des spermatozo des et permet leur vacuation dans le conduit d f rent L pididyme est constitu de trois parties la t te le corps et la queue La t te couvre le testicule cr nio dorsalement La continuit de la t te de l pididyme avec le testicule est assur e par les conduits eff rents Le corps de l pididyme longe le testicule m dialement et la queue rejoint le conduit d f rent Les trois parties de l pididyme sont palpables plus ou moins saillantes en fonction des individus et de consistance homog ne La musculeuse de l pididyme chasse les spermatozo des dans le conduit d f rent pendant la phase pr liminaire de l jaculation 3 Les v
101. u 8 pr sente les param tres s minologiques moyens cart type suivants avant cong lation volume test de Schalm concentration en spermatozo des motilit de masse motilit individuelle motilit globale avant cong lation pourcentage de morts pourcentage d anomalies mineures et majeures apr s cong lation motilit apr s cong lation 64 Tableau 10 Param tres s minologiques moyenne Ecart type tendue obtenus par les 40 collectes au vagin artificiel et les 33 collectes a l lectro jaculateur Moyenne Ecart type Note minimale Note maximale Effet de la PARAMETRES Vagin artificiel Electro m th ded 40 collectes 37 jaculateur collecte jaculats 33 collectes 23 ANOVA congel s jaculats congel s Volume 6 3 2 2 6 3 5 Non en mL CRE 1 13 9 Significatif Test de Schalm 0 05 0 3 LIELS de 0 4 0 2 0 4 p lt 0 05 Concentration 1800 460 718 580 en millions de 766 2930 0 2062 p lt 0 001 spermatozoides Motilit de masse 3 7 0 8 25 L3 de 0 5 1 5 0 4 p lt 0 001 Motilit individuelle 66 11 7 48 6 25 2 de 0 100 20 80 0 70 p 0 005 Motilit globale avant 4 5 1 5 32 1 7 cong lation 1 5 0 5 p lt 0 001 de 0 5 de morts 40 20 S2 2 328 Non de 0 100 13 100 3 100 Significatif d anomalies 7 3 6 4 6 9 5 6 Non de 0 100 1 28 1 18 Significatif
102. uelle gt 2 correspondant une note de motilit globale avant cong lation sup rieure 2 ont t congel s Toutes les tentatives de collectes r alis es au vagin artificiel ont permis la r colte d un jaculat soit 40 jaculats au total et un pourcentage d chec de collecte nul 36 jaculats pr sentant des param tres s minologiques de qualit suffisante ont pu tre congel s soit un pourcentage de non aptitude la cong lation de 10 Les 40 tentatives de collecte par lectro jaculateur ont permis la r colte de 33 jaculats soit un pourcentage d chec de collecte de 17 5 22 jaculats pr sentant des param tres s minologiques de qualit suffisante ont pu tre congel s soit un pourcentage de non aptitude la cong lation de 33 3 61 L analyse de variance avec mesures r p t es mod le logit du nombre d jaculats collect s et congel s par les deux m thodes de collecte montre un effet significatif de la m thode de collecte le nombre d jaculats collect s au vagin artificiel est significativement sup rieur au nombre d jaculats collect s par lectro jaculateur p 0 018 le nombre d jaculats qui ont pu tre congel s est significativement sup rieur lorsque la collecte a t effectu e au vagin artificiel par rapport une collecte l lectro jaculateur p 0 003 Le tableau 8 pr sente la r partition par race des pourcentages d checs
103. umeaux nets persistants m lange encore fluide 3 Schalm 3 pr sence de gros grumeaux m lange visqueux consistance du blanc d uf 4 Schalm 4 prise en masse du m lange Le seuil de d tection de la m thode est de 100000 cellules mL de sperme donn es ENVT 5 Evaluation du pourcentage de spermatozo des anormaux et de spermatozo des morts Les lames ont t fix es Coopelso et lues l ENVT par le m me op rateur Dans les minutes qui suivent la collecte de la semence une goutte de sperme est d pos e sur une lame deux gouttes d osine sont m lang es la goutte de semence pendant 30 secondes trois gouttes de nigrosine sont ajout es l ensemble A l aide d une lame rod e un talement est r alis sur une lame d graiss e avant de la s cher rapidement l air Le comptage des spermatozo des morts et des anomalies s effectue au microscope contraste de phase ou sous immersion au grossissement X 1000 Dans le cadre de l exp rimentation la concentration des jaculats tant tr s variable un comptage de 200 spermatozo des a t r alis lorsqu il tait possible de compter au grossissement X1000 au microscope un minimum de 10 spermatozo des par champ Lorsque moins de 5 spermatozo des par champ taient pr sents le comptage a t effectu sur 100 spermatozo des Les anomalies morphologiques ont t class es en fonction de leur localisation anomalies du flagelle an
104. une pidurale sont r alis es Ohl 1993 Ainsi dans un souci du bien tre animal diff rentes techniques visant diminuer l inconfort ou la douleur du taureau lors de l lectro jaculation ont t exp riment es Etson et al 2005 Falk et al 2001 Mosure et al 1998 Welsh et al 1981 La cortisol mie la progest ron mie les meuglements sont des marqueurs utilis s pour valuer l inconfort des taureaux lors de l lectro jaculation Le cortisol et la progest rone sont deux marqueurs biologiques de stress le meuglement est une manifestation caract ristique de douleur chez les bovins 86 Falk et al 2001 ont montr que l utilisation d une anesth sie pidurale avant l lectro jaculation r duisait de fa on significative la progest ron mie 5 et 20 minutes apr s l lectro jaculation Cependant dans d autres tudes Etson et al 2005 la r alisation d une anesth sie par voie pidurale pr alablement l lectro jaculation n a pas r duit significativement les marqueurs de stress utilis s cortisol mie progest ron mie fr quence cardiaque notes subjectives de douleur L utilisation d une sonde aux lectrodes segment es avec des segments pouvant tre activ s s par ment afin de r duire la stimulation des tissus environnants a t envisag e Cependant elle n apporte pas de meilleurs r sultats en terme d efficacit et de douleur qu une lectrode conventionnelle
105. uval 2 4 30 2 4 4 0 4 Brun Tam Bor 1 4 26 2 3 4 3 4 Prim Taquin DB 1 4 28 1 33 4 4 3 4 Prim UviloMTY 1 4 29 2 4 4 0 4 Prim Anis 0 4 22 1 1 4 3 4 Blond Saupiquet 0 4 17 1 4 4 4 4 Blond Saxo 2 4 26 1 5 1 4 2 4 Blond Ulot 0 4 21 1 4 4 4 4 Blond Uxue 0 4 13 75 il 4 4 4 4 Blond Moyenne 17 5 20 4 1 4 82 5 62 5 globale Sur les 40 tentatives de collecte l lectro jaculateur 7 jaculats n ont pas t collect s soit un pourcentage d chec de 17 5 Le nombre moyen de pulsations n cessaires la collecte est de 20 4 avec des diff rences tr s importantes entre taureaux par exemple le taureau Uxue a jacul une moyenne de 13 75 impulsions lectriques alors que le taureau Ajuval a jacul une moyenne de 30 impulsions lectriques 63 Le nombre moyen de cycles n cessaires pour collecter un taureau est de 1 4 ce qui signifie qu un jaculat sur 2 n a pu tre collect qu la suite d un deuxi me cycle 82 5 des taureaux ont pr sent une rection lors des collectes l lectro jaculateur Les opacifications de semence n ont t observ s que dans 62 5 des jaculats collect s 3 taureaux Anis Saxo Tam Bor n ont pr sent une rection qu une seule fois sur les quatre tentatives de collecte 3 Etude des param tres s minologiques des jaculats collect s l electro jaculateur et au vagin artificiel Le tablea

Comparaison de la qualité de la semence de taureaux collectés à l

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