(Dako Autostainer/Autostainer Plus) Code IS606
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1. 9 FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Desmin Clone D33 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS606 ENGLISH Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 115224 002 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Desmin Clone D33 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels smooth and striated muscle cells as well as mesothelial cells and is useful for the identification of rhabdomyosarcomas 1 2 leiomyomas 3 4 and mesotheliomas 5 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Desmin belongs to the class III of intermediate filaments constituting part of the cytoskeleton and is the characteristic intermediate filament of all three types of muscle cells skeletal cardiac and smooth muscle Desmin is a 53 kDa protein encoded by nine exons of a gene located at 2q35 Desmin forms a cytoskeletal network across the muscle fibre bordering at2. cytosquelette et c est le filament interm diaire caract ristique de trois types de cellules musculaires muscle squelettique cardiaque et lisse La desmine est une prot ine de 53 kDa cod e par neuf exons d un g ne situ sur le chromosome 2q35 La desmine forme un r seau cytosquelettique dans les fibres musculaires bordant la membrane plasmatique et nucl aire et se situe plus particuli rement dans la r gion subplasmalemmale et la bande Z 6 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone D33 Isotype IgG kappa Desmine purifi e issue de muscle humain Dans les analyses par Western Blot de pr parations cytosquelettiques de cellules MCF 7 SCC 4 et RT 112 ainsi que d epiderme cutan de cultures primaires de cellules de carcinome r nal de l iomyome de c ur de f tus et d extrait brut de mati re blanche de cerveau humain l anticorps marque uniquement
3. the plasma and nuclear membrane and is particularly localized to the subplasmalemmal region and the Z band 6 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone D33 Isotype IgG1 kappa Desmin purified from human muscle In Western blotting of cytoskeletal preparations of MCF 7 cells SCC 4 cells RT 112 cells skin epidermis primary culture of renal carcinoma cells leiomyoma fetal heart and crude extract from human white matter of brain the antibody labels only a 53 kDa band in the leiomyoma and fetal heart preparations proving the reactivity with desmin and demonstrating the absence of reactivity with other types of intermediate filaments tested 7 As demonstrated by immunohistochemistry on formalin fixed paraffin embedded tissue sections the antibody cross reacts with the desmin equivalent protein in mouse and rat 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium
4. une bande d environ 53 kDa dans le l iomyome et les pr parations de c ur de f tus ce qui prouve la r activit la desmine et d montre l absence de r activit aux autres types de filaments interm diaires test s 7 Comme le d montre l analyse immunohistochimique de tissus fix s au formol et inclus en paraffine l anticorps pr sente une r action crois e la prot ine homologue de la desmine chez la souris et le rat 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosives Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent
5. 2 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrixprotokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTUS3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram Desmin ohne Gegenf rbung oder DesminH mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedur
6. Prim rkultur der Nierenkarzinomzellen Leiomyom f talem Herz sowie Rohextrakt aus menschlicher wei er Hirnsubstanz markierte der Antik rper ausschlie lich die 53 kD Bande der Leiomyom und der f talen Herzpr parate was die Reaktivit t mit Desmin und das Fehlen einer Reaktivit t mit anderen Typen untersuchter Intermedi rfilamente best tigt 7 Durch immunhistochemische Untersuchungen an formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitten wurde eine Kreuzreaktivit t dieses Antik rpers mit dem desmin quivalenten Protein von Maus oder Ratte nachgewiesen 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schch en aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen v
7. ation de la coloration Caracteristiques de performance DEUTSCH Zweckbestimmung Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifit t Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 115224 002 l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela confirme des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation desire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autosta
8. azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date sta mped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded section
9. chl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnenmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVisionTM FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe muss Dickdarmzellen enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistun
10. e d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont preprogrammees dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram Desmin sans contre coloration ou DesminH avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames IS606 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Interpret
11. es cas de rhabdomyosarcome humain l anticorps a marqu 4 tumeurs sur 4 1 Dans l oesophage humain l anticorps a marqu 35 leiomyomes sur 35 1 l iomyosarcomes sur 3 et 3 tumeurs stromales sur 17 3 Par ailleurs l anticorps a marqu 33 l iomyomes de l ut rus forte activit cellulaire sur 33 4 De m me 8 m soth liomes malins diffus de la pl vre ont t marqu s par l anticorps 5 Dans des polypes vaginaux et endocervicaux une coloration de fond des cellules stromales et des cellules stromales atypiques a t obtenue avec l anticorps dans la zone sous pith liale 8 L anticorps na marqu aucun cas parmi les 10 cas de neuroblastome de lymphome de tumeur de Wilms de tumeur neuro ectodermique primitive et de r tinoblastome 2 ni aucun cas parmi les 4 cas de carcinome du poumon petites cellules les 3 cas de sarcome d Ewing 1 et les 6 cas de nodules stromaux de l endometre 4 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Desmin Clone D33 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert glatte und gestreifte Muskelzellen und Mesothelzellen und eignet sich zur Erkennung von Rhabdomyosarkomen 1 2 Leiomyomen 3 4 und Mesotheliomen 5 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnung
12. gsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen ein zytoplasmatisches F rbemuster auf Die F rbung kann ein fibrill res Aussehen annehmen 7 Gesundes Gewebe Der Antik rper markiert vaskul re glatte Muskelzellen und glatte Muskelzellen der Speiser hre 3 Bei 8 von 10 Tests an fixierten Geweben markierte der Antik rper Mesothelzellen 5 Mit Ausnahme von Zellen muskul rer Herkunft testen gesundes Knochenmark Niere Brust Prostata Gehirn graue Substanz Jejunum Schilddr se Lunge Dickdarm Magen Ureter und Mandelgewebe negativ 1 Die glatten Muskelzellen der Tunica muscularis im Darm zeigen eine m ige bis starke F rbereaktion die glatten Muskelzellen in den kleinen Gef en der Lamina propria dagegen nur eine schwache bis m ige F rbeintensit t Pathologisches Gewebe Von den Rhabdomyosarkomen des Menschen markierte der Antik rper 4 von 4 Tumoren 1 Bei der menschlichen Speiser hre markierte der Antik rper 35 von 35 Leiomyomen 1 von 3 Leiomyosarkomen und 3 von 17 Stromatumoren 3 Zudem markierte der Antik rper 33 von 33 hoch zellul ren Leiomyomen der Geb rmutter 4 Au erdem wurden vom Antik rper 8 von 16 malignen diffusen Mesotheliomen der Pleura markiert 5 Bei vaginalen und endozervikalen menschlichen Polypen markierte der Anti
13. iner Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre le c lon et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique La coloration peut pr senter un aspect fibrillaire 7 Tissus sains L anticorps marque les cellules du muscle lisse vasculaire et sophagien 3 Dans 8 tissus fix s sur 10 l anticorps marque les cellules m soth liales 5 l exception des cellules d origine musculaire les tissus sains de la moelle osseuse du rein du sein de la prostate du cerveau mati re grise du j junum de la glande thyro de du poumon du c lon de l estomac de l ur tre et de l amygdale sont n gatifs 1 Les cellules du muscle lisse de la tunica muscularis du c lon pr sentent une coloration mod r e forte tandis que l intensit de coloration des cellules du muscle lisse qui tapissent la lamina propria est faible mod r e Tissus tumoraux Dans l
14. k rper innerhalb der subepithelialen Zone sowohl Hintergrund Stromazellen als auch atypische Stromazellen 8 In jeweils 10 F llen erbrachte der Antik rper keine Markierung eines Neuroblastoms Lymphoms Wilms Tumors primitiven neuroektodermalen Tumors und Retinoblastoms 2 Ebensowenig wurde in 4 F llen des kleinzelligen Bronchialkarzinoms 3 F llen des Ewing Sarkoms 1 und 6 F llen endometrialer Stromakn tchen 4 eine Markierung erhalten 4 References References Literatur 1 Chang TK Li CY Smithson WA Immunocytochemical study of small round cell tumors in routinely processed specimens Arch Pathol Lab Med 1989 113 1343 8 2 Pollock L Rampling D Greenwald SE Malone M Desmin expression in rhabdomyosarcoma influence of the desmin clone and immunohistochemical method J Clin Pathol 1995 48 535 8 3 Miettinen M Sarlomo Rikala M Sobin LH Lasota J Esophageal stromal tumors A clinicopathologic immunohistochemical and molecular genetic study of 17 cases and comparison with esophageal leiomyomas and leiomyosarcomas Am J Surg Pathol 2000 24 211 22 gt Oliva E Young RH Clement PB Bhan AK Scully RE Cellular benign mesenchymal tumors of the uterus A comparative morphologic and immunohistochemical analysis of 33 highly cellular leiomyomas and six endometrial stromal nodules two frequently confused tumors Am J Surg Pathol 1995 19 757 68 D NDN Hurlimann J Desmin and neural marker expression in mesothelial cel
15. ls and mesotheliomas Hum Pathol 1994 25 753 7 Goebel HH Warlo IAP Progress in desmin related myopathies review J Child Neurol 2000 15 565 72 Van Muijen GNP Ruiter DJ Warnaar SO Coexpression of intermediate filament polypeptides in human fetal and adult tissues Lab Invest 1987 57 359 69 Pitt MA Roberts ISD Agbamu DA Eyden BP The nature of atypical multinucleated stromal cells a study of 37 cases from different sites Histopathol 1993 23 137 45 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole 115224 002 Catalogue number Reference catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif medical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature limitation Use by Limites de temp rature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS606 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17
16. mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 115224 002 aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include colon and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Cells labeled by the antibody display cytoplasmic staining The staining may show a fibrillar aspect 7 Normal tissues The antibody labels vascular smooth muscle cells and esophageal smooth muscle cells 3 In 8 10 fixed tissues the antibody labeled mesothelial cells 5 Except for cells of muscle origin normal bone marrow kidney breast prostate gland brain gray matter jejunum thyroid gland lung colon stomach ureter and tonsil are negative 1 The smooth muscle cells in the tunica muscularis in colon show a moderate to strong staining reaction whereas smooth muscle cells in the small vessels in the lamina propria show a weak to moderate staining intensity Abnormal tissues Of human rhabdomyosarcomas the antibody labeled 4 4 tumors 1 In the human esophagus the antibody labeled 35 35 leiomyomas 1 3 leiomyosarcomas and 3 17 stromal
17. om Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden IS606 EFG MNI 2009 1
18. s Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram Desmin without counterstaining or DesminH with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs wi
19. sgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Desmin geh rt zur Klasse Ill der Intermedi rfilamente die einen Teil des Zytoskeletts bilden und ist das typische Intermedi rfilament aller drei Muskelzellarten Skelettmuskulatur Herzmuskel und glatte Muskulatur Desmin ist ein 53 kDa schweres Protein das von neun Exonen eines Gens mit der Lokalisierung an 2435 kodiert wird Desmin bildet ein Zellger st Netzwerk quer ber die Muskelfaser an der Grenze zu Plasma und Kernmembran und ist haupts chlich an der subplasmalemmalen Region und am Z Band lokalisiert 6 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon D33 Isotyp I9G1 Kappa Gereinigtes Desmin aus menschlichem Muskelgewebe Im Western Blotting von Zellger stpr paraten aus MCF 7 Zellen SCC 4 Zellen RT 112 Zellen Epidermis
20. th lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non IS606 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics FRAN AIS Utilisation pr vue R sum et explication R actifs fournis Immunogene Specificite Precautions Conservation Preparation des chantillons y compris le
21. tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L epaisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pretraitement avec d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVisionT FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aid
22. tumors 3 In addition the antibody labeled 33 33 highly cellular leiomyomas of the uterus 4 Also 8 16 malignant diffuse mesotheliomas of the pleura were labeled by the antibody 5 In human vaginal and endocervical polyps the antibody labeled both background stromal cells and the atypical stromal cells within the subepithelial zone 8 The antibody showed no labeling in 10 cases each of neuroblastoma lymphoma Wilms tumor primitive neuroectodermal tumor and retinoblastoma 2 nor did it label 4 cases of small cell carcinoma of lung 3 cases of Ewing s sarcoma 1 and 6 cases of endometrial stromal nodules 4 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Desmin clone D33 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque les cellules du muscle lisse et stri ainsi que les cellules m soth liales et facilite l identification des rhabdomyosarcomes 1 2 des l iomyomes 3 4 et des m soth liomes 5 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi La desmine appartient la classe Ill des filaments interm diaires qui constituent le
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