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        FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Neuron-Specific
         Contents
1.    9    FLEX    Monoclonal Mouse    Anti Human    CE    Neuron Specific Enolase  Clone BBS NC VI H14    Ready to Use     Dako Autostainer Autostainer Plus     Code IS612    ENGLISH    Intended use    Synonyms for antigen    Summary  and explanation    Reagent provided    Immunogen    Specificity    Precautions    Storage    Specimen preparation  including materials  required but not supplied    Staining procedure  including materials  required but not supplied     115239 002     For in vitro diagnostic use     FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Neuron Specific Enolase  Clone BBS NC VI H14  Ready to Use   Dako Autostainer Autostainer Plus   is  intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments  This antibody labels both normal and  neoplastic cells of neuronal and neuroendocrine origin  1   and although neuron specific enolase  NSE  is not an exclusive neuronal marker  it  may be used for the identification of peripheral nerves  neural and neuroendocrine tumors  such as neuroblastomas  retinoblastomas   desmoplastic malignant melanoma and small cell lung cancer  2  3   The clinical interpretation of any staining or its absence should be  complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and  other diagnostic tests by a qualified pathologist     y enolase and 14 3 2 protein  4      Enolases  2 phospho D glycerate hydrolase  are glycolytic homo 
2.  50x   R  f  K8010 K8004   Remarque   apr  s coloration  les coupes doivent   tre  d  shydrat  es  lav  es et mont  es    l   aide d   un milieu de montage permanent    Coupes d  paraffin  es   le pr  traitement des coupes tissulaires d  paraffin  es  fix  es au formol et incluses en paraffine  est recommand       l aide du Dako PT Link  en suivant la m  me proc  dure que pour les coupes incluses en paraffine  Apr  s coloration  un montage aqueux ou  permanent des lames est recommand      Les coupes de tissus ne doivent pas s  cher lors du traitement ni lors de la proc  dure de coloration immunohistochimique suivante  Pour une    meilleure adh  rence des coupes de tissus sur les lames de verre  il est recommand   d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides  Ref   K8020      IS612 EFG MNI 2009 12 04 p  2 4    Dako Denmark A S   Produktionsvej 42   DK 2600 Glostrup   Denmark   Tel   45 44 85 95 00   Fax  45 44 85 9595   CVR No  33 21 13 17    Proc  dure de coloration  y compris le mat  riel  requis mais non fourni    Interpr  tation de la  coloration    Caract  ristiques de  performance    DEUTSCH    Zweckbestimmung    Synonyme f  r  das Antigen    Zusammenfassung  und Erkl  rung    Geliefertes Reagenz    Immunogen    Spezifitat    Vorsichtsma  nahmen    Lagerung     115239 002     Le systeme de visualisation recommand   est le EnVision    FLEX  High pH   Dako Autostainer Autostainer Plus   Ref  K8010   Les   tapes de  coloration et d   incubation sont preprogrammees dans l
3.  Nr  K8010 K8004  erzielt werden     Paraffineingebettete Schnitte  Die Vorbehandlung der  formalinfixierten   paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1   Probenvorbereitungsverfahren f  r Dako PT Link wird empfohlen  Vorbehandlung gem     der Beschreibung in der Packungsbeilage f  r  EnVision   FLEX Target Retrieval Solution  High pH  50x   Code Nr  K8010 K8004  durchf  hren  Hinweis  Nach dem F  rben m  ssen die  Schnitte dehydriert  gekl  rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr  ger aufgebracht werden     Entparaffinierte Schnitte  Eine Vorbehandlung der entparaffinierten  formalinfixierten  paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link  nach demselben Verfahren  wie f  r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben  wird empfohlen  Die Objekttr  ger nach dem F  rben mit  einem w  ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken     Die Gewebeschnitte d  rfen w  hrend der Behandlung oder des anschlie  enden immunhistochemischen F  rbeverfahrens nicht austrocknen   Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr  gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides  Code Nr  K8020   empfohlen     Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision    FLEX  High pH  Dako Autostainer Autostainer Plus   Code Nr  K8010   Die  F  rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger  te mit den folgenden Protokollen  vorprogrammiert     Matrix Protokoll  FLEXRTU2  200 uL Abgabevolumen  oder FLEXRT
4.  The antibody labeled tumors derived from or containing neurons  ganglion cells and peripheral nerves  However  also non   neuronal derived tumors  as meningiomas  medulloblastomas  astrocytomas  glioblastomas  oligoastrocytomas  oligodendrogliomas  pituitary  adenomas  schwannomas  ependymomas  meningosarcomas  gliosarcomas and metastases of different origin     i e  melanomas  small  cell  carcinomas of lung  and undifferentiated carcinomas may be labeled specifically  1  4   In addition  the antibody labeled germ cell tumors  i e   testicular carcinomas in situ  seminomas and embryonal carcinomas  3      Pour utilisation diagnostique in vitro     FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Neuron Specific Enolase  Clone BBS NC VI H14  Ready to Use   Dako Autostainer Autostainer Plus   est destine a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus  L   anticorps marque les cellules  normales et n  oplasiques d origine neuronale et neuroendocrine  1   et bien que l   Enolase neurone sp  cifique  NSE  ne soit pas un marqueur  neuronal exclusif  elle peut   tre utilis  e pour l   identification des nerfs p  riph  riques  des tumeurs neurales et neuroendocrines  des  neuroblastomes  des r  tinoblastomes  du m  lanome malin desmoplastique ainsi que du cancer des poumons    petites cellules  2 3    L interpr  tation clinique de toute coloration ou son absence doit   tre compl  t  e par des   tudes morphologiques en utilisant des contr  les  appropr
5.  indiqu  e sur le flacon  Si les r  actifs sont conserv  s dans des  conditions autres que celles indiqu  es  celles ci doivent   tre valid  es par l utilisateur  Il n   y a aucun signe   vident indiquant l instabilit   de ce  produit  Par cons  quent  des contr  les positifs et n  gatifs doivent   tre test  s en m  me temps que les   chantillons de patient  Si une coloration  inattendue est observ  e  qui ne peut   tre expliqu  e par un changement des proc  dures du laboratoire  et en cas de suspicion d   un probleme  li      l   anticorps  contacter l assistance technique de Dako     L   anticorps peut   tre utilis   pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix  s au formol  L   epaisseur des coupes  d   chantillons de tissu doit   tre d environ 4 um     Un pretraitement avec d  masquage d     pitope induit par la chaleur  HIER  est n  cessaire avec le Dako PT Link  R  f  PT100 PT101   Pour plus  de d  tails  se r  f  rer au Guide d utilisation du PT Link  Des r  sultats optimaux sont obtenus en pr  traitant les tissus    l   aide de la EnVisionT   FLEX Target Retrieval Solution  High pH  50x   R  f  K8010 K8004      Coupes incluses en paraffine   le pr  traitement des coupes tissulaires fix  es au formol et incluses en paraffine est recommand      l aide de la  proc  dure de pr  paration d   chantillon 3 en un pour le Dako PT Link  Suivre la proc  dure de pr  traitement indiqu  e dans la notice de la  EnVision    FLEX Target Retrieval Solution  High pH 
6.  or heterodimeric isoenzymes  which catalyse the interconversion of 2   phosphoglycerate and phosphoenolpyruvate  Three subunits      46 kDa   B  44 kDa  and y  46 kDa   constitute the building blocks of the  enolase molecules  and five forms  aa  BB  yy  a   and ay  of the enzyme have been identified  5   The enolases are divided in three main  groups according to their localization  non neuronal enolase  NNE or a   muscle specific enolase  MSE or B   and neuron specific enolase   NSE or y   3     Refer to Dako   s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for  1  Principle  of Procedure  2  Materials Required  Not Supplied  3  Storage  4  Specimen Preparation  5  Staining Procedure  6  Quality Control   7  Troubleshooting  8  Interpretation of Staining  9  General Limitations     Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide   Clone  BBS NC VI H14  1   Isotype  IgG1  kappa     yy enolase purified from human brain by a dissociation reassociation method in a chromatofocusing column  1      In Western blotting of reduced  SDS denatured purified human yy enolase  aa enolase  and extract of human muscle containing B   enolase   the antibody labels solely the y enolase subunit  1     As demonstrated by immunohistochemistry on formalin fixed  paraffin embedded tissue sections  the antibody cross reacts with the NSE   equivalent
7.  please refer to the  PT Link User Guide  Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision    FLEX Target Retrieval Solution  High pH  50x   Code  K8010 K8004     Paraffin embedded sections  Pre treatment of formalin fixed  paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen  preparation procedure for Dako PT Link  Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision    FLEX Target  Retrieval Solution  High pH  50x   Code K8010 K8004   Note  After staining the sections must be dehydrated  cleared and mounted using  permanent mounting medium     Deparaffinized sections  Pre treatment of deparaffinized formalin fixed  paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT  Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections  After staining the slides should be mounted using  aqueous or permanent mounting medium     The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure  For greater  adherence of tissue sections to glass slides  the use of FLEX IHC Microscope Slides  Code K8020  is recommended     The recommended visualization system is EnVision    FLEX  High pH   Dako Autostainer Autostainer Plus   Code K8010   The staining steps  and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments  using the following protocols     Template protocol  FLEXRTU2  200 uL di
8.  protein in pig  1      1  For professional users    2  This product contains sodium azide  NaN    a chemical highly toxic in pure form  At product concentrations  though not classified as  hazardous  sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides  Upon disposal  flush with  large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing    3  As with any product derived from biological sources  proper handling procedures should be used    4  Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin    5  Unused solution should be disposed of according to local  State and Federal regulations     Store at 2 8     Do not use after expiration date sta mped on vial  If reagents are stored under any conditions other than those specified  the  conditions must be verified by the user  There are no obvious signs to indicate instability of this product  Therefore  positive and negative  controls should be run simultaneously with patient specimens  If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in  laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected  contact Dako Technical Support     The antibody can be used for labeling formalin fixed  paraffin embedded tissue sections  Tissue specimens should be cut into sections of  approximately 4 um    Pre treatment with heat induced epitope retrieval  HIER  is required using Dako PT Link  Code PT100 PT101   For details 
9.  zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden  Das positive  Kontrollgewebe muss Dickdarmzellen enthalten  und die Zellen Strukturen m  ssen in allen positiven Proben die f  r dieses Gewebe unter     Leistungsmerkmale    beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen  Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control  Mouse    Dako Autostainer Autostainer Plus   Code Nr  IS750      Mit diesem Antik  rper markierte Zellen weisen ein zytoplasmatisches und nukle  res F  rbemuster auf  Bei Neuronen tritt sowohl im Zytoplasma  als auch bei den Forts  tzen eine Markierung ein     Gesundes Gewebe  Der Antik  rper markiert Neuronen in der menschlichen Gro  hirnrinde und Hirnstammkernen  1   Au  erdem markiert der  Antik  rper Ganglienzellen im menschlichen Magen Darm Trakt und myelinisierte und unmyelinisierte Nervenfasern  1   Bei normalen adulten  Hoden weist der Antik  rper eine schwache Immunf  rbung der Spermatogonien auf  3   Im Darm zeigen die Ganglionzellen des Plexus  Auerbach eine m    ige bis starke zytoplasmatische und nukle  re F  rbereaktion  w  hrend die isolierten Axone in der Muscularis externa eine  schwache bis m    ige zytoplasmatische F  rbereaktion aufweisen     Pathologisches Gewebe  Der Antik  rper markiert Tumore  die Neuronen  Ganglienzellen oder peripheren Nerven entstammen oder diese  enthalten  Es k  nnen aber auch nicht neuronale Tumore  wie z B  Meningiome  Medulloblastome  Astrozytome  Glioblastome   Oli
10. U3  300 uL Abgabevolumen   Autoprogram  NSE  ohne Gegenf  rbung  oder NSEH  mit Gegenf  rbung     Bei F  rbedurchl  ufen mit h  chstens 10 Objekttr  gern sollte der    Zusatz    Schritt auf    Puffersp  lgang    eingestellt werden  F  r F  rbedurchl  ufe  mit mehr als 10 Objekttr  gern den    Zusatz    Schritt auf    Keine    einstellen  Dieses gew  hrleistet vergleichbare Waschzeiten     Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef  hrt werden  N  here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f  r das jeweilige  Ger  t entnehmen  Wenn die F  rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger  t nicht verf  gbar sind  bitte den Technischen  Kundendienst von Dako verst  ndigen     Optimale Bedingungen k  nnen je nach Probe und Pr  parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt  werden  Falls der beurteilende Pathologe eine andere F  rbungsintensit  t w  nscht  kann ein Anwendungsspezialist oder  Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen  Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert  werden  indem gew  hrleistet wird  dass das F  rbemuster mit dem unter    Leistungsmerkmale    beschriebenen F  rbemuster identisch ist     Die Gegenf  rbung in H  matoxylin sollte mit EnVision    FLEX Hematoxylin   Dako Autostainer Autostainer Plus   Code Nr  K8018  ausgef  hrt  werden  Empfohlen wird ein nichtw  ssriges  permanentes Fixiermittel     Positiv  und Negativkontrollen sollten
11. atalogue    Bestellnummer    In vitro diagnostic medical device    Dispositif medical de diagnostic in vitro  In vitro Diagnostikum    Consult instructions for use  Voir les instructions d   utilisation  Gebrauchsanweisung beachten    Temperature limitation Use by  Limites de temperature Utiliser avant    Zul  ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis    Manufacturer  Fabricant    Contains sufficient for  lt n gt  tests  Contenu suffisant pour  lt n gt  tests  Inhalt ausreichend f  r  lt n gt  Tests Hersteller  Batch code   Numero de lot    Chargenbezeichnung       IS612 EFG MNI 2009 12 04 p  4 4    Dako Denmark A S   Produktionsvej 42   DK 2600 Glostrup   Denmark   Tel   45 44 85 95 00   Fax  45 44 85 9595   CVR No  33 21 13 17    
12. ce        I est recommand   d effectuer une contre coloration    l   aide de Envision    FLEX Hematoxylin   Dako Autostainer Autostainer Plus    R  f  K8018   L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand  e     Des contr  les positifs et n  gatifs doivent   tre r  alis  s en m  me temps et avec le m  me protocole que les   chantillons du patient  Le contr  le  de tissu positif doit comprendre le c  lon et les cellules structures doivent pr  senter des sch  mas de r  action tels que d  crits pour ces tissus  dans les    Caract  ristiques de performance    pour tous les   chantillons positifs  Le contr  le n  gatif recommand   est le FLEX Negative  Control  Mouse   Dako Autostainer Autostainer Plus   R  f  IS750      Les cellules marqu  es par l   anticorps pr  sentent une coloration cytoplasmique et nucl  aire  Dans les neurones  un marquage est pr  sent dans  le cytoplasme et les prolongements     Tissus sains   L   anticorps marque les neurones dans le cortex c  r  bral humain et les noyaux du tronc c  r  bral  1   De plus  l   anticorps marque  les cellules ganglionnaires du tractus gastro intestinal humain et les fibres nerveuses my  linis  es et amy  liniques  1   Dans les testicules  adultes sains  l   anticorps entra  ne une coloration faible des spermatogonies  3   Dans le c  lon  les cellules ganglionnaires et le plexus  d   Auerbach pr  sentent une coloration cytoplasmique et nucl  aire mod  r  e    forte  tandis que la coloration cytoplasm
13. e logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus     l   aide des protocoles  suivants      Protocole mod  le   FLEXRTU2  volume de distribution de 200 uL  ou FLEXRTUS3  volume de distribution de 300 uL   Autoprogram   NSE  sans contre coloration  ou NSEH  avec contre coloration      L   tape Auxiliary doit   tre r  gl  e sur    rinse buffer    lors des cycles de coloration avec  lt 10 lames  Pour les cycles de coloration de  gt 10 lames   l   tape Auxiliary doit   tre r  gl  e sur    none     Cela garantit des temps de lavage comparables     Toutes les   tapes d   incubation doivent   tre effectu  es    temp  rature ambiante  Pour plus de d  tails  se r  f  rer au Manuel de l op  rateur  sp  cifique    l instrument  If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument  please contact Dako Technical Services     Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr  l  vement et des m  thodes de pr  paration  et doivent   tre d  termin  es par chaque  laboratoire individuellement  Si le pathologiste qui r  alise l   valuation d  sire une intensit   de coloration diff  rente  un sp  cialiste  d   application sp amp cialiste du service technique de Dako peut   tre contact   pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole   V  rifier que l ex  cution du protocole modifi   est toujours valide en v  rifiant que le sch  ma de coloration est identique au sch  ma de coloration  d  crit dans les    Caract  ristiques de performan
14. esmoplastischen malignen Melanomen sowie kleinzelligem Lungenkrebs  2  3   Die klinische Auswertung  einer eventuell eintretenden F  rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem    en Kontrollen erg  nzt werden und von einem  qualifizierten Pathologen unter Ber  cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden     y Enolase und 14 3 2 Protein  4      Enolasen  2 Phospho D Glycerathydrolase  sind glykolytische homo  oder heterodimere Isoenzyme  die die wechselseitige Umwandlung von  2 Phosphoglycerat und Phosphoenolpyruvat katalysieren  Drei Untereinheiten namens   a  46 kDa   B  44 kDa  und y  46 kDa  bilden die  Bausteine der Enolasemolek  le  und f  nf Formen  oa  BB  yy  a   und ay  des Enzyms wurden bisher identifiziert  5   Die Enolasen werden in  Abh  ngigkeit von ihrer Lokalisierung in drei Hauptgruppen eingeteilt  nicht neuronale Enolase  NNE oder a   muskelspezifische Enolase  MSE  oder     und neuronenspezifische Enolase  NSE oder y   3     Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F  rbung von Dako oder den Anweisungen des  Detektionssystems f  r IHC Verfahren entnehmen  1  Verfahrensprinzip  2  Erforderliche  aber nicht mitgelieferte Materialien  3  Aufbewahrung   4  Vorbereitung der Probe  5  F  rbeverfahren  6  Qualit  tskontrolle  7  Fehlersuche und  behebung  8  Auswertung der F  rbung  9  Allgemeine  Beschr  nkungen     Gebrauchsfertiger  monoklonaler Maus Antik  rpe
15. goastrozytome  Oligodendrogliome  Hypophysenadenome  Schwannome  Ependymome  Meningosarkome  Gliosarkome und Metastasen  unterschiedlichen Ursprungs  wie z B  Melanome  kleinzellige Lungenkarzinome und undifferenzierte Karzinome  spezifisch markiert werden   1  4   Au  erdem markiert der Antik  rper Keimzellentumore  also Hoden Oberfl  chenkarzinome  Seminome und embryonale Karzinome  3      References  References  Literatur    1  Soler Federsppiel BS  Cras P  Gheuens J  Andries D  Lowenthal A  Human yy enolase  two site immuno radiometric assay with a single monoclonal antibody  J  Neurochem 1987  48 22 8    2  Anstey A  Cerio R  Ramnarain N  Orchard G  Smith N  Jones EW  Desmoplastic malignant melanoma  An immunocytochemical study of 25 cases  Am J Dermatopathol  1994  16 14 22    3  Kang J L  Meyts ER  Skakkeb  k NE  Immunoreactive neuron specific enolase  NSE  is expressed in testicular carcinoma in situ  J Pathol 1996  178 161 5    4  Cras P  Martin JJ  Gheuens J  y enolase and glial fibrillary acidic protein in nervous system tumors  An immunohistochemical study using specific monoclonal antibodies   Acta Neuropathol 1988  75 377 84    5  Shimizu A  Suzuki F  Kato K  Characterization of aa  BB  yy and ay human enolase isoenzymes  and preparation of hybrid enolases  av  By and a    from homodimeric    forms  Biochim Biophys Acta 1983  748 278 84     Explanation of symbols  Explication des symboles  Erl  uterung der Symbole     115239 002     Catalogue number  Reference c
16. hch en aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden  Werden die Reagenzien  unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt  m  ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden  Es gibt keine  offensichtlichen Anzeichen f  r eine eventuelle Produktinstabilit  t  Positiv  und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die  Patientenproben getestet werden  Falls es zu einer unerwarteten F  rbung kommt  die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren  erkl  ren l  sst und auf ein Problem mit dem Antik  rper hindeutet  ist der technische Kundendienst von Dako zu verst  ndigen     IS612 EFG MNI 2009 12 04 p  3 4    Dako Denmark A S   Produktionsvej 42   DK 2600 Glostrup   Denmark   Tel   45 44 85 95 00   Fax  45 44 85 9595   CVR No  33 21 13 17    Vorbereitung der Probe  und erforderliche  aber  nicht mitgelieferte    Materialien    F  rbeverfahren  und erforderliche  aber  nicht mitgelieferte    Materialien    Auswertung der F  rbung    Leistungsmerkmale    Der Antik  rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten  Gewebeproben sollten in Schnitte  von ca  4 um St  rke geschnitten werden     Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung  HIER  mit Dako PT Link  Code Nr  PT100 PT101  ist erforderlich  Weitere  Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch  Optimale Ergebnisse k  nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision    FLEX  Target Retrieval Solution  High pH  50x   Code
17. i  s et doit   tre   valu  e en fonction des ant  c  dents cliniques du patient et d   autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi       y enolase et prot  ine 14 3 2  4      Les   nolases  2 phospho D glyc  rate hydrolases  sont des isoenzymes glycolytiques homo  ou h  t  ro  dim  riques qui catalysent  l   interconversion du phosphoglyc  rate et du phospho  nolpyruvate  Trois sous unites      46 kDa   B  44 kDa  et y  46 kDa   constituent des  composantes des mol  cules d   enolases et  cinq formes de l   enzyme  aa  BB  yy  a   et ay  ont   t   identifi  es  5   Les   nolases sont divis  es en  trois groupes principaux en fonction de leur localisation      eEnolase non neuronale  NNE ou a   l     nolase muscle sp  cifique  MSE ou B   et  l   nolase neurone sp  cifique  NSE ou y   3      Se r  f  rer aux Instructions g  n  rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d  tection relatives aux  proc  dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants   1  Principe de proc  dure  2  Mat  riels requis mais non fournis   3  Conservation  4  Pr  paration des   chantillons  5  Proc  dure de coloration  6  Contr  le qualit    7  D  pannage  8  Interpr  tation de la  coloration  9  Limites g  n  rales     Anticorps monoclonal de souris pr  t    l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot  ine stabilisante et 0 015 mol L  d   azide de sodium     Clone   BBS NC VI H14  1   Isotype   IgG1  kappa   y
18. ique des axones isol  s de  la couche musculaire externe est faible    mod  r  e     Tissus tumoraux   L   anticorps marque les tumeurs d  riv  es de  ou contenant des neurones  des cellules ganglionnaires et des nerfs  p  riph  riques  Cependant  des tumeurs non neuronales  telles que les meningiomes  les m  dulloblastomes  les astrocytomes  les  glioblastomes  les oligoastrocytomes  les oligodendrogliomes  les ad  nomes hypophysaires  les schwannomes  les   pendymomes  les  m  ningosarcomes  les gliosarcomes et les m  tastases de diff  rentes origines  par exemple les m  lanomes  les carcinomes pulmonaires     petites cellules  et les carcinomes indiff  renci  s  peuvent   tre marqu  s sp  cifiquement  1 4   De plus  l   anticorps marque les tumeurs des  cellules germinales  par exemple les carcinomes in situ testiculaires  les seminomes et les carcinomes embryonnaires  3      Zur In vitro Diagnostik     FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Neuron Specific Enolase  Clone BBS NC VI H14  Ready to Use   Dako Autostainer Autostainer Plus  ist  zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger  ten bestimmt  Dieser Antik  rper markiert  sowohl gesunde als auch neoplastische Zellen neuronalen und neuroendokrinen Ursprungs  1   und obwohl neuronenspezifische Enolase   NSE  kein exklusiver neuronaler Marker ist  eignet er sich zur Identifizierung von peripheren Nerven  neuralen und neuroendokrinen Tumoren   Neuroblastomen  Retinoblastomen  d
19. r in fl  ssiger Form in einem Puffer  der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid  enth  lt     Klon  BBS NC VI H14  1   Isotyp  I9G1  Kappa     Aus dem menschlichen Gehirn mittels Dissoziation und anschlie  ender Reassoziation in einer Chromatofocusing S  ule gereinigte yy Enolase     1      Beim Western Blotting von reduzierter  SDS denaturierter gereinigter menschlicher yy Enolase  aax Enolase und menschlichem Muskelextrakt  mit B   Enolase markiert der Antik  rper ausschlie  lich die y Enolase Untereinheit  1      Durch immunhistochemische Untersuchungen an formalinfixierten  paraffineingebetteten Gewebeschnitten wurde eine Kreuzreaktivit  t dieses  Antik  rpers mit dem NSE   quivalenten Protein vom Schwein nachgewiesen  1      1  Nur f  r Fachpersonal bestimmt    2  Dieses Produkt enth  lt Natriumazid  NaN    eine in reiner Form   u  erst giftige Chemikalie  Natriumazid kann auch in als ungef  hrlich  eingestuften Konzentrationen mit Blei  und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden  Nach der Entsorgung stets mit viel  Wasser nachsp  len  um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen    3  Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m  ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden    4  Geeignete Schutzkleidung tragen  um Augen  und Hautkontakt zu vermeiden    5  Nicht verwendete L  sung ist entsprechend   rtlichen  bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen     Bei 2 8    aufbewahren  Nach Ablauf des auf dem Fl  sc
20. spense volume  or FLEXRTUS3  300 uL dispense volume   Autoprogram NSE  without counterstaining  or NSEH  with counterstaining     The Auxiliary step should be set to    rinse buffer    in staining runs with  lt 10 slides  For staining runs with  gt 10 slides the Auxiliary step should be  set to    none     This ascertains comparable wash times     All incubation steps should be performed at room temperature  For details  please refer to the Operator   s Manual for the dedicated instrument   If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument  please contact Dako Technical Services     Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods  and should be determined by each individual laboratory  If the    IS612 EFG MNI 2009 12 04 p  1 4    Dako Denmark A S   Produktionsvej 42   DK 2600 Glostrup   Denmark   Tel   45 44 85 95 00   Fax  45 44 85 9595   CVR No  33 21 13 17    Staining interpretation    Performance  characteristics    FRAN  AIS    Utilisation pr  vue    Synonymes de l   antig  ne    R  sum    et explication    R  actifs fournis    Immunog  ne    Sp  cificit      Pr  cautions    Conservation    Pr  paration des    chantillons   y compris le mat  riel  requis mais non fourni     115239 002     evaluating pathologist should desire a different staining intensity  a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted  for information on re programming of the protocol  Verify that the performance of the adju
21. sted protocol is still valid by evaluating that the  staining pattern is identical to the staining pattern described in    Performance characteristics        Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision    FLEX Hematoxylin   Dako Autostainer Autostainer Plus   Code K8018    Non aqueous  permanent mounting medium is recommended     Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens  The positive control tissue should  include colon and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in    Performance characteristics    in all positive  specimens  The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control  Mouse   Dako Autostainer Autostainer Plus   Code IS750      Cells labeled by the antibody display cytoplasmic and nuclear staining  In neurons  labeling occurs in both cytoplasm and processes     Normal tissues  The antibody labels neurons in human cerebral cortex and brainstem nuclei  1   Additionally  the antibody labels ganglion cells  in the human gastrointestinal tract and myelinated and unmyelinated nerve fibers  1   In normal adult testis  the antibody displays weak  immunostaining of the spermatogonia  3   In colon  the ganglion cells of the Auerbach s plexus show a moderate to strong cytoplasmic and  nuclear staining reaction  whereas the isolated axons in the muscularis externa show a weak to moderate cytoplasmic staining reaction     Abnormal tissues 
22. y   nolase purifi  e    partir de cerveau humain par une m  thode de dissociation r  association par chromatofocusing sur colonne  1      Lors d   un Western blot de yy   nolase  et aa Enolase r  duites  purifi  es et d  natur  es au SDS et d   un extrait de muscle humain contenant de la  BB   nolase  seule la sous unit   y   nolase est marqu  e par l   anticorps  1      Comme le d  montre l analyse immunohistochimique de tissus fix  s au formol et inclus en paraffine  l   anticorps pr  sente une r  action crois  e  avec la prot  ine homologue de la NSE chez le porc  1      1  Pour utilisateurs professionnels    2  Ce produit contient de l   azide de sodium  NaN    produit chimique hautement toxique dans sa forme pure  Aux concentrations du produit   bien que non class   comme dangereux  l   azide de sodium peut r  agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations  d   azides m  talliques hautement explosives  Lors de l   limination  rincer abondamment    l eau pour   viter toute accumulation d   azide  m  tallique dans les canalisations    3  Comme avec tout produit d origine biologique  des proc  dures de manipulation appropri  es doivent   tre respect  es    4  Porter un v  tement de protection appropri   pour   viter le contact avec les yeux et la peau    5  Les solutions non utilis  es doivent   tre   limin  es conform  ment aux r  glementations locales et nationales     Conserver entre 2 et 8   C  Ne pas utiliser apr  s la date de p  remption
    
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