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ChemStation Agilent - Agilent Technologies

1. a gt lt EN gt KE avec N nombre de tranches d aires A valeur de la tranche d aire index e par i d intervalle de temps entre les tranches d aires adjacentes to temps de la premi re tranche d aire N gt somme de l index de d but 1 l index final N pour les i 1 observations discr tes N X 5 4 i 1 246 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 N Y 5 i DA i l Moments statistiques inclinaison et exc s Les moments statistiques sont calcul s pour d crire d une autre mani re les formes de pics asym triques Le nombre de moments de pic est infini mais seuls les cinq premiers sont utilis s en relation avec des pics chromatographiques Ils sont appel s 0 Moment 1 Moment 47 Moment Le Moment 0 repr sente l aire du pic Le Moment 1 est le temps de r tention moyen ou temps de r tention mesur au centre de gravit du pic Il est diff rent du temps de r tention chromatographique mesur au maximum du pic sauf si le pic est sym trique Le Moment 2 est la variance du pic qui est une mesure de l talement lat ral C est la somme des contributions la variance g n r e par les diff rentes parties du syst me instrument Le Moment 3 d crit la sym trie verticale ou inclinaison Il mesure l loignement de la forme du pic par rapport l talon Gaussien L inclinaison donn e en plus dans le ra
2. Quantification 33 Analyse des donn es Rapport standard 33 Analyses des donn es Rapport sp cifique 34 Utilitaires et compatibilit s 37 Personnalisation 38 Automatisation 39 Bonnes pratiques de laboratoire BPL 40 Contr le des instruments 44 La mise en r seau 44 Documentation 45 La structure des r pertoires ChemStation 47 che Agilent Technologies 17 1 Caract ristiques des ChemStations Description g n rale Les syst mes ChemStations pour CPG CPL CPL MSD et A N sont des syst mes de contr le d instrument d acquisition des donn es et d valuation de donn es pour e Chromatographes en phase gazeuse Agilent 6890N 6890Plus et 6890A e les appareils de chromatographie en phase gazeuse Agilent 6850 s rie II et Agilent 6890 e Chromatographe en phase gazeuse s rie 5890 II e les syst mes CPL et les modules S rie Agilent 1100 e le couplage CPL MSD S rie Agilent 1100 e les chromatographes en phase liquide S rie 1090 e D tecteurs 1046 FLD et 1049 ECD e Syst me d lectrophor se capillaire Agilent EC e Syst me Agilent EC SM et e les interfaces Analogiques Num riques bi voie Agilent 35900E Le logiciel peut fonctionner sur des PC compatibles IBM dans les environnements d exploitation Microsoft Windows 2000 et Microsoft Windows XP Professionnel Le logiciel est vendu sous la forme d une ChemStation de base un seul instrument dans cinq versions Ces cinq versions poss den
3. 2 e Abandon de pic ou e R initialisation imm diate de la ligne de base e Vall e de pic d tect e et compteur de pente montante sup rieur ou gal 2 ou e Sigma de pente descendante sup rieur deux fois le sigma de fin de pic ou e R initialisation imm diate de la ligne de base ou e R initialisation de ligne de base la vall e suivante et vall e de pic d tect e Le crit re de pente descendante n est plus respect Le crit re de pente descendante est respect nouveau e Vall e de pic d tect e et compteur de pente montante sup rieur ou gal 2 ou Compteur de pente descendante gal z ro ou e Sigma de pente descendante sup rieur au sigma de fin de pic ou e R initialisation imm diate de la ligne de base ou e R initialisation de la ligne de base la vall e suivante Le compteur de pente montante est sup rieur ou gal 2 Le compteur de pente montante est inf rieur ou gal 1 D but du pic Dans le Tableau 8 la largeur du pic attendu d termine quelles valeurs de pente et de courbure de filtre sont compar es au seuil Par exemple quand la largeur de pic attendue est faible ce sont les nombres du filtre 1 qui sont ajout s l accumulateur de pente montante Si la largeur de pic attendue augmente ce sont les nombres du filtre 2 et finalement ceux du filtre 3 qui sont utilis s Comprendre votre ChemStation Agilent 93 4 94 Int gration Quand la valeur de l accumula
4. Exemple Le tableau de s quence ci dessous illustre une m thode d talonnage un seul point appel e SimpReg Il est tronqu pour simplifier l exemple Tableau 18 Tableau de s quence pour SIMPREG 1 1 SimpReg 1 Etalonnage 1 Moyenne Moyenne 3 2 1 SimpReg 1 Etalonnage 1 Remplacer Remplacer 3 2 SimpReg 1 4 3 SimpReg 1 5 4 SimpReg 1 6 5 SimpReg 1 7 6 SimpReg 1 198 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Il existe deux entr es pour le niveau d talonnage unique e La premi re ligne d talonnage concerne le m me point mais calcule la moyenne des param tres d talonnage La valeur de l intervalle entr sp cifie que le r talonnage est effectu tous les trois chantillons e La deuxi me entr e remplace tous les param tres de r talonnage c est dire qu un r talonnage complet est effectu Elle ne comporte pas d intervalle de r talonnage Tableau de s quence Le tableau des s quences contient sept lignes La premi re ligne sp cifie l chantillon de r talonnage cyclique La deuxi me sp cifie le r talonnage explicite qui n est effectu qu une fois au d but de la s quence La troisi me la septi me ligne sp cifient les chantillons analyser L ordre des entr es dans le tableau de s quence est tr s important Toutes les entr es de flacons de r talonnage cyclique sp cifiant un talonnage cyclique doivent appara tre avant les e
5. V rification du syst me 12 Les composants de test de v rification suivants sont disponibles Electronique num rique d tecteur barrette de diodes S rie Agilent 1100 seulement Un chromatogramme test est stock dans le d tecteur barrette de diodes Il est envoy la ChemStation apr s tre pass par les m mes tapes de pr traitement que les donn es brutes normales provenant des photodiodes Les donn es r sultantes sont compar es aux donn es de r sultat d origine stock es dans la ChemStation pour ce chromatogramme test En cas de discordance le test choue Ce test permet de s assurer que l lectronique du d tecteur barrette de diodes qui effectue le pr traitement des donn es fonctionne toujours correctement Comme un programme de test stock est utilis la lampe ou la barrette de diodes ne font pas partie de ce test Elles peuvent tre v rifi es avec la Fonction de test du d tecteur barrette de diodes page 268 Int gration des pics Le fichier de donn es est int gr nouveau par la m thode originale Les r sultats sont compar s aux r sultats d int gration d origine stock s dans le registre de v rification S ils ne correspondent pas le test choue Quantification des compos s Les compos s dans le fichier de donn es sont nouveau quantifi s Les r sultats sont compar s aux r sultats de quantification d origine stock s dans le registre de v rificatio
6. e imprimer les r sultats de quantification originaux et e g n rer le rapport original partir de la m thode et des signaux d origine 266 Comprendre votre ChemStation Agilent V rification du syst me 12 Vous pouvez utiliser la fonction GLP review Examen du GLP pour montrer que les donn es chromatographiques sont originales prouver la qualit de l analyse partir des donn es de performance de l instrument et d montrer l authenticit de l interpr tation des donn es Par exemple vous pouvez e recharger et r imprimer la partie d analyse des donn es de la m thode utilis e au moment de l analyse de l chantillon pour prouver que l valuation des donn es pr sent e comme r sultat de l analyse n a t en rien modifi e et e examiner sans recalculer les r sultats d int gration et de quantification pour prouver l authenticit du rapport Comprendre votre ChemStation Agilent 267 12 V rification du syst me Fonction de test du d tecteur barrette de diodes Les tests du d tecteur peuvent constituer une tape dans la validation de routine d un instrument d analyse dans un laboratoire accr dit Le test du d tecteur barrette de diodes DAD value les performances de celui ci Quand vous s lectionnez le test DAD dans le menu Instrument pour CPL3D et EC seulement il v rifie l intensit et l talonnage de longueur d onde de l instrument Quand vous appuyez sur Sa
7. la capacit d int grer au moins 1000 pics par chromatogramme lectroph rogramme d finitions de param tres d int gration permettant de r gler ou de modifier les param tres de l int grateur de base pour le rejet d aire le rejet de hauteur la largeur de pic et la sensibilit de pente des param tres de contr le de la ligne de base tels que forcer la ligne de base maintenir la ligne de base ligne de base sur toutes les vall es ligne de base la vall e suivante premi re ligne de base vers l arri re partir de la fin du pic courant Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 e contr le de la sommation d aires e reconnaissance de pic n gatif e traitement de l int gration tangentielle y compris des commandes de d finition de pic de solvant e possibilit de d finir des tables d v nements de calculs d int gration tangentielle sur front ou tra n e individuellement pour tous les signaux chromatographiques lectroph rographique e possibilit de param tres de correction de ligne de base sans relation au signal e des commandes de contr le de l int grateur d finissant des gammes de temps de r tention migration pour l exploitation de l int grateur e allocation de l paulement de pic par l utilisation d une d riv e seconde ou degr de calculs de courbure et e chantillonnage am lior de points de donn es non quidistants pour de meilleures performances
8. Formats de fichiers du rapport 227 Rapports r sum s de s quence 229 G n ralit s 229 Pour tablir un rapport r sum de s quence 229 che Agilent Technologies 217 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Qu est ce qu un rapport Un rapport peut comprendre des informations quantitatives et qualitatives sur l chantillon que vous analysez Le rapport peut se pr senter sous la forme d une copie papier d un affichage l cran ou d un fichier lectronique Il peut contenir des d tails sur les pics d tect s pendant l analyse et les trac s des signaux acquis 218 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 10 Rapports de r sultats Il existe deux types de rapports e un rapport non talonn qui ne corrige pas la r ponse du d tecteur et e un rapport talonn montrant les r sultats corrig s pour tenir compte de la diff rence dans la r ponse du d tecteur aux divers compos s de l chantillon Rapports non talonn s Les rapports non talonn s incluent les rapports Aire et Hauteur Ces rapports sont surtout utilis s dans la pr paration des rapports talonn s Ils peuvent constituer un rapport final utile si les quantit s des compos s d sir s doivent pr senter une unit d aire ou une r ponse hauteur si les compos s d int r t sont similaires Rapports talonn s Les rapports talonn
9. comme 3 fois l cart type de la r gression lin aire divis par la racine carr du nombre de points en pourcentage utilis s dans la r gression Ces valeurs sont utilis es pour attribuer des valeurs appropri es au rejet de hauteur et la sensibilit de pente pour l int gration L algorithme attribue ensuite une valeur temporaire la largeur de pic en fonction de la longueur du chromatogramme le plus souvent 0 5 en CPL et 0 3 0 2 en CPG La valeur initiale de rejet d aire est d finie z ro et une int gration d essai est effectu e L essai est r p t plusieurs fois si n cessaire en modifiant les param tres chaque fois jusqu ce qu au moins 5 pics soient d tect s ou qu une int gration soit effectu e avec un rejet de hauteur initiale de 0 L int gration d essai se termine si les conditions ci dessous ne sont pas atteintes apr s 10 essais Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Les r sultats de l int gration sont examin s et la largeur de pic ajust e en fonction des largeurs des pics d tect s ce qui d cale le calcul vers les pics initiaux La sym trie des pics d tect s est utilis e pour n inclure que les pics dont la sym trie est comprise entre 0 8 et 1 3 pour le calcul de largeur de pic S il n est pas possible de d tecter suffisamment de pics sym triques cette limite est tendue minSymmetry 1 5 et maxSymmetry 1 5 La ligne de base entre les pics est ensuite
10. dans l algorithme de suivi la pente est la d riv e premi re et la courbure la seconde d riv e L enveloppe de ligne de base peut tre vue comme un c ne dont la pointe se situe au point de donn es en cours Les niveaux d acceptation sup rieure et inf rieure du c ne sont e pente montante courbure d calage de ligne de base doit tre inf rieur au niveau de seuil e pente montante courbure d calage de ligne de base doit tre plus positive c est dire moins n gative que le niveau de seuil Au fur et mesure de l acceptation de nouveaux points de donn es le c ne avance jusqu l apparition d une rupture Pour tre accept comme point de ligne de base un point de donn es doit r pondre aux conditions suivantes e il doit se trouver l int rieur de l enveloppe de ligne de base d finie Comprendre votre ChemStation Agilent 81 4 82 Int gration e la courbure de la ligne de base au point de donn e d termin e par les filtres de d rivation doit tre inf rieure une valeur critique d termin e par le r glage de sensibilit de pente en cours Le point de ligne de base initial tabli au d but de l analyse est ensuite r vis continuellement une fr quence d termin e par la largeur du pic pour la moyenne mobile des points de donn es inclus dans l enveloppe de la ligne de base sur une p riode d termin e par la largeur du pic L int grateur suit
11. effectu es ind pendamment de tout autre crit re type d chantillon chantillons de contr le d abord puis les chantillons d talonnage enfin les chantillons normaux ensuite par ordre chronologique l int rieur de chaque cat gorie m thode si plus d une m thode a t utilis e pour acqu rir les donn es d analyse ensuite par indice chronologique d analyse l int rieur de chaque m thode e les chantillons les chantillons d talonnage et les chantillons de contr le peuvent appara tre dans la table ou demeurer cach s Chaque analyse s lectionn e occupe une ligne dans la table de lots Vous pouvez annuler l affichage d une analyse dans la table de lots en changeant son type d chantillon en Removed enlev Comprendre votre ChemStation Agilent 211 9 212 La revue des lots Table des compos s Les r sultats des compos s apparaissent dans une table de compos s pr configur e par l op rateur son contenu est fonction du type d chantillons de la table de lots e la liste des compos s comprend tous ceux trouv s par la m thode charg e pour la revue de lot e siles analyses d talons sont les seules appara tre dans la table de lots chantillons et chantillons de contr le tant cach s la table des compos s affiche des colonnes suppl mentaires pour les informations concernant l talonnage quantit attendue erreurs relative et absolue e si seules les analys
12. la proc dure ISTD la proc dure ESTD utilise des facteurs de r ponse absolus Ces derniers sont obtenus partir d un talonnage puis stock s Dans les analyses d chantillons suivantes les quantit s de compos sont calcul es en appliquant ces facteurs de r ponse aux quantit s d chantillon mesur es Ce type de calcul suppose une pr caution il faut que la taille de l chantillon soit reproductible d une analyse l autre car aucun talon dans l chantillon ne permet de corriger les carts dans l injection ou la pr paration de l chantillon Lors de la pr paration d un ESTD le calcul de la quantit d un compos particulier dans un chantillon inconnu s effectue en deux tapes 1 On calcule une quation pour la courbe passant par les points d talonnage pour ce compos en utilisant le type d ajustement sp cifi dans la bo te de dialogue Calibration Settings ou Calibration Curve 2 On calcule la quantit de compos dans l inconnu en utilisant l quation d crite ci apr s Cette quantit peut figurer dans le rapport ou peut tre utilis e dans les calculs suppl mentaires demand s par les valeurs Multiplicateur Facteur de dilution ou Quantit d chantillon avant de figurer dans le rapport Si le rapport ESTD est s lectionn l quation servant calculer la quantit absolue du compos x est la suivante Absolute Amt ofx Response RF M D avec R ponse
13. 64 192 points de donn es Troisi me deuxi me Trois fois Comprendre votre ChemStation Agilent 91 4 92 Int gration L algorithme de reconnaissance du pic L int grateur identifie le d but du pic avec un point de ligne de base d termin par l algorithme de reconnaissance de pic L algorithme de reconnaissance de pic compare en premier les sorties des filtres de reconnaissance de pic la valeur de seuil de la sensibilit de pente initiale pour augmenter ou diminuer l accumulateur de pente montante L int grateur d clare le point auquel la valeur de l accumulateur de pente montante est gt 15 comme point indiquant le d but d un pic L algorithme de reconnaissance de pic est pr sent sur la Figure 8 t5 Pente montante a t4 t11 t10 Pente descendante 8 p Extraction du pic t6 p Enregistrement du m pic Figure 8 Reconnaissance d un pic D marrage t2 tl Ligne de base F Comprendre votre ChemStation Agilent tl t2 t3 t4 t5 t6 t7 t8 t9 t10 t11 Int gration 4 Les crit res sont les suivants Le compteur de pente montante est sup rieur ou gal 1 Le compte de pente montante est gal z ro Le compteur de pente montante est sup rieur ou gal 2 e Sommet de pic d tect et demi largeur de pic d tect e ou e Sommet de pic d tect et compteur de pente descendante sup rieur ou gal
14. Outre une vue d ensemble d tat le diagramme permet d acc der rapidement des bo tes de dialogue permettant de d finir des param tres pour chaque composant du syst me Pour plus d informations sur le diagramme du syst me voir la partie Instrument du syst me d aide en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent 73 3 Acquisition des donn es Informations d tat 74 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 4 Int gration Qu est ce que l int gration 77 Que fait l int gration 77 Les algorithmes d int gration de la ChemStation 78 Possibilit s d int gration 78 Description g n rale 80 D finition de la ligne de base initiale 81 Suivi de la ligne de base 81 Attribution de la ligne de base 82 Identification des points cardinaux d un pic 84 Terminologie 85 Points cardinaux 85 Pic de solvant 85 Epaulements avant arri re 86 Pente 86 Principe de fonctionnement 87 Identification d un pic 88 Largeur du pic 88 Filtres de reconnaissance de pic 89 Regroupement de tranches d int gration 90 L algorithme de reconnaissance du pic 92 Calculs non Gaussiens 95 Attribution de la ligne de base 97 Construction de la ligne de base par d faut 97 Le d but de la ligne de base 98 Graduations 98 La fin de la ligne de base 98 P n tration de la ligne de base 99 Advanced Baseline Tracking Suivi volu de la ligne de base 100 ire Agilent Techn
15. cart type pour le coefficient de variation ou pour l intervalle de confiance pour chacun de ces param tres Si les valeurs d passent les limites que vous avez fix es le rapport contient des indicateurs destin s attirer votre attention Vous pouvez prendre en compte la qualit des donn es analytiques en enregistrant les conditions r elles qui pr valaient au moment des mesures Le journal de la ChemStation enregistre les conditions des instruments avant et apr s une analyse Cette information est stock e avec des donn es et rapport e avec les donn es d chantillon Les courbes de performance des instruments sont enregistr es pendant toute l analyse en tant que signaux et stock es dans le fichier de donn es Si l instrument le permet ces enregistrements superpos s sur le chromatogramme peuvent tre rappel s la demande par exemple lors d un audit Le bruit et la d rive de la ligne de base peuvent tre mesur s automatiquement Un minimum d tectable peut tre calcul partir d une hauteur de pic pour chaque compos talonn dans la m thode Finalement il est possible d inclure dans chaque rapport imprim les l ments suivants configuration d instrument num ros de s rie des instruments identification des colonnes le capillaire et vos propres commentaires Les r sultats de performances tendues ne sont calcul s que pour les compos s talonn s dans la m thode ce qui assure la caract r
16. configur e facile utiliser Chaque vue est constitu e d un ensemble d l ments standard comprenant des menus et des barres d outils La barre d outils standard permet d acc der rapidement aux informations de sp cifications courantes du syst me telles que les m thodes et les s quences La vue Contr le de m thode et d analyse comporte en plus une barre d tat du syst me une zone d informations d chantillons elle peut tre configur e pour des analyses simples ou automatis es et un sch ma de diagramme d interface d instruments pour des configurations CPG CE et CPL Le sch ma de diagramme d interface d instruments utilise des points chauds hot spots pour donner un acc s rapide aux param tres de l instrument et un panorama graphique anim de l tat de chaque analyse pendant son d roulement Pour conomiser de la m moire et d autres ressources Windows vous pouvez d sactiver le sch ma de diagramme d instruments s il n est pas n cessaire Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 La vue Analyse de donn es tend la barre d outils standard aux modes d analyse de donn es sp cifiques comprenant l int gration l talonnage le rapport l annotation la comparaison de signaux et des modes sp cialis s suppl mentaires si les modules correspondants sont install s Chacun de ces modes d analyse de donn es s par est support par un jeu d outils sp cifique au mod
17. d rive Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Le style de rapport Extended Performance ajoute des trac s de chaque pic individuel montrant les temps de d but et de fin du pic la demi largeur et la ligne de base Ce style contient les param tres suivants en plus de ceux des rapports Performance standard e aire hauteur et quantit e inclinaison exc s e facteur de tra ne usp e intervalle de temps entre les points de donn es et nombre de points de donn es sur le pic e moments statistiques MO M4 e largeur du pic mi hauteur calcul e r elle cinq sigma tangente et tra ne et e plateau colonne et plateaux m tre calcul s par la largeur du pic mi hauteur par les m thodes cinq sigma tangente et statistique Les utilisateurs peuvent d finir leurs propres plages d valuation de bruit et les limites acceptables pour ces crit res de performances Les valeurs qui se situent hors des limites acceptables utilisateurs sont indiqu es sur le rapport Pour des informations compl mentaires sur les calculs d ad quation du syst me reportez vous au Chapitre 11 Evaluation de l ad quation du syst me Rapports r sum s de s quences Les rapports r sum s de s quences sont produits la fin d une suite d analyses automatis es Leur gamme d application va d un bref r sum d chantillons analys s une analyse de r p tabilit ou de tendance
18. e l valuation des donn es du couplage CPL MSD r f rence produit G2730BA apporte la fois l valuation des donn es du d tecteur barrette de diodes l valuation des donn es de spectres de masse et les fonctionnalit s d valuation de donn es de la ChemStation de base Comprendre votre ChemStation Agilent 21 1 Caract ristiques des ChemStations Mat riel ChemStation Le mat riel ChemStation est d crit de mani re d taill e dans le chapitre Comment installer votre ChemStation 22 Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 A propos du logiciel ChemStation Syst me d exploitation La ChemStation n cessite le syst me d exploitation Microsoft Windows 2000 Professionnel avec Service Pack 4 ou Windows XP Professionnel SP2 La fonction tableaux de la ChemStation est support e par MicroSoft Excel M thodes et s quences La m thode analytique d crit enti rement la fa on dont s effectue une s paration particuli re Elle contient tous les param tres pour le contr le d instrument l acquisition et l valuation de donn es y compris l int gration la quantification et le rapport Le syst me peut tre pr par de mani re acqu rir par diff rentes m thodes des donn es provenant de plusieurs chantillons Le fichier contr lant ce type d op ration est appel une s quence et il contient les informations individuelles d chantillon les r f rences au
19. et sous la ligne de base r initialis e attribu e aux pics tangentiels T Il arrive qu un pic de solvant s l ve trop lentement pour tre reconnu ou que l on rencontre en cours d analyse un groupe de pics qui vous semble devoir tre trait comme un pic de solvant avec ensemble de pics port s Il s agit g n ralement d un groupe de pics mal r solus dont le premier est beaucoup plus grand que les autres Le simple traitement par projection verticale exag rerait les autres pics parce qu ils se trouvent en r alit sur la tra ne du premier En for ant la reconnaissance du premier pic en tant que solvant le reste du groupe est limin de la tra ne les pics n gatifs au dessous de la ligne de base ont une aire positive comme le montre la Figure 26 la page 113 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Aire de la zone totale Aire sous la ligne de base Aire corrig e de la ligne de base Figure 26 Mesure d aire pour des pics n gatifs Unit s et facteurs de conversion Ext rieurement les donn es contiennent un ensemble de points de donn es qui peuvent tre issues d un chantillonnage ou d une int gration Dans le cas des donn es int gr es chaque point de donn es correspond une aire exprim e sous la forme Height x Time Pour les donn es chantillonn es chaque point de donn es correspond une hauteur Donc pour les donn es int gr es la hauteur est une entit calcul e
20. grateur identifie un point d inflexion tels que les points a et b de la Figure 10 e Ilexiste un paulement avant potentiel quand un second point d inflexion est d tect avant le sommet du pic Si un paulement est confirm le d but de l paulement est d fini au point de courbure positive maximale avant le point d inflexion e La d tection d un second point d inflexion avant la fin du pic ou la vall e indique la possibilit d un paulement arri re Si un paulement est confirm le d but de cet paulement est d fini au point cible partir du point de d part sur la courbe Le temps de r tention migration est d termin partir du point de courbure n gative maximum de l paulement Avec un v nement d int gration pro grammi l int grateur peut aussi calculer les aires d paulement comme des pics normaux avec des lignes descendantes aux points d inflexion du pic d paulement L aire de l paulement est soustraite du pic principal Les paulements du pic peuvent tre trait s comme des pics normaux l aide d un v nement chronoprogramm de l int grateur Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Attribution de la ligne de base Apr s la fin d un groupe de pics et d tection de la ligne de base l int grateur demande l algorithme d attribution de ligne de base d attribuer la ligne de base par essais et erreurs Il utilise des corrections d a
21. normalis talon externe d talon externe talon interne et d talon interne calcul s sur l aire ou la hauteur du pic Les talonnages peuvent tre multipoints et incluent plusieurs d finitions d talons internes Les historiques d talonnage sont automatiquement enregistr s et peuvent tre utilis s pour pond rer les calculs de r talonnage Pour des informations compl mentaires sur l talonnage et la quantification voir le Chapitre 7 Etalonnage Analyse des donn es Rapport standard Il est possible de s lectionner sur l cran de sp cification de rapport un jeu standard de styles de rapport d finissable par l utilisateur pour les rapports d chantillon Chaque type de rapport standard contient des groupes d informations standard et une suite de groupes d informations facultatives Pour plus d informations sur les styles de rapport voir le Chapitre 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 33 1 34 Caract ristiques des ChemStations Analyses des donn es Rapport sp cifique La ChemStation peut fournir un jeu de rapports plus sp cialis s pour les applications qui le n cessitent Ce sont des statistiques sur la qualit de s paration des rapports incluant des analyses de tendance entre des chantillons et des dessins de rapports d finis par l utilisateur Rapports d ad quation du syst me L
22. obtenue par division de l aire par le temps coul depuis le point de donn es pr c dent Pour les donn es chantillonn es laire est calcul e par multiplication des donn es par le temps coul depuis le point de donn es pr c dent Le calcul d int gration utilise les deux types d entit s Les unit s utilis es par l int grateur sont counts X milliseconds pour l aire et counts pour la hauteur Ceci permet d assurer une base commune pour les troncatures d entiers ventuellement n cessaires Les mesures de temps d aire et de hauteur sont signal es en unit s physiques r elles quelles que soient leurs m thodes de mesure de calcul et d enregistrement dans le logiciel Comprendre votre ChemStation Agilent 113 4 int gration Ev nements d int gration L int grateur propose un certain nombre d v nements initiaux et programm s De nombreux v nements sont constitu s par des paires actif on inactif off de d but start fin stop Ev nements initiaux Initial e Largeur du pic Pente Seuil Hauteur de rejet Rejet d aire Epaulement d tection 114 La largeur initiale de pic d finit la largeur de pic interne pour l int grateur au d but de l analyse La valeur de largeur du pic initiale est utilis e pour mettre l chelle l accumulateur qui d tecte la pente montante la pente descendante et la tra ne du pic L int grateur met jour la largeur du pic si n ces
23. par suite d une erreur ou au terme de toutes les analyses La table de s quence ou liste d analyses effectuer est construite dans une interface utilisateur comparable celle d un tableur permettant de sp cifier les num ros de flacons et noms d chantillons les m thodes d analyse des param tres de quantification d chantillon notamment quantit d chantillon un facteur de multiplication et de dilution une sp cification d talonnage des param tres d change de donn es LIMSID et le nombre de r p tition des injections Selon les instruments et modules configur s d autres champs peuvent tre accessibles par exemple si un syst me Agilent CPL 1100 comporte un collecteur de fractions la colonne Fract Start d but de fraction appara t dans la table de s quence La pr sentation de la table de s quence est modifiable par l utilisateur L utilisateur peut passer d une cellule individuelle l autre du tableau et copier couper ou coller des cellules des rang es des suites de rang es afin de construire des s quences de mani re efficace et rapide Les chantillons peuvent tre identifi s dans le tableau de s quence comme inconnus types d chantillons d talonnage ou de contr le Le type d chantillon d termine tout traitement d valuation sp cial des donn es de l chantillon e les chantillons inconnus sont valu s et rapport s d apr s la sp cification de m thode e
24. tention relative USP ASTM S lectivit Alpha 251 D finitions pour la reproductibilit 253 R solution USP ASTM R 251 Moyenne de l chantillon M 253 Echantillon Ecart type S 254 Coefficient de variation RSD USP 254 cart type de la moyenne SM 254 Confiance CI 255 Coefficient de r gression 257 che Agilent Technologies 233 11 234 Evaluation de l ad quation du syst me Analyse de r gression 256 Acc s aux nombres internes enregistr s en double pr cision 258 Ecart type S 257 Il est fortement conseill d valuer la performance d une part de l instrument analytique avant de l utiliser pour l analyse d chantillons et d autre part de la m thode analytique avant de g n raliser son utilisation Il est galement conseill de v rifier la performance des syst mes d analyse avant et pendant l analyse de routine Le logiciel ChemStation poss de les outils permettant d effectuer automatiquement ces trois types de test Un test d instrument peut inclure la sensibilit du d tecteur la pr cision des temps de r tention migra tion du pic et la pr cision des aires du pic Un test de m thode peut porter sur la pr cision des temps de r tention migration et des quantit s la s lectivit et la robustesse de la m thode par rapport aux carts quotidiens en fonction nement Un test du syst me peut inclure la pr cision des quantit s la r solu tion entre deux pics sp cifiques et la tra
25. x pour un talonnage niveau unique sont les suivantes Response Response Ratio Response xrp Actual Amt of x Response Ratio RF Actual Amount of ISTD M D avec RF est le facteur de r ponse pour le compos x La quantit r elle Qt r elle d ISTD est la valeur introduite dans la bo te de dialogue Calibration Settings ou Sample Info pour l talon interne ajout l chantillon inconnu M est le multiplicateur D est le facteur de dilution Si le type de rapport ISTD est s lectionn l quation suivante est utilis e pour calculer la quantit relative du compos x Relative ie Actual Amount of x 100 Sample Amount Comprendre votre ChemStation Agilent 135 5 Quantification Calcul ISTD des pics non talonn s Il existe deux mani res pour d finir le facteur de r ponse utilis pour calculer la quantit pour les pics non identifi s 1 Utiliser le facteur de r ponse fixe d fini dans la bo te With Rsp Factor de la bo te de dialogue Calibration Settings Vous pouvez choisir de corriger le facteur de r ponse fixe en sp cifiant une correction ISTD Actual Amount of x RF Response Ratio Actual Amount of ISTD M D Response Response Ratio Response srp rRF est le facteur de r ponse d fini dans la bo te de dialogue Calibration Settings Vous pouvez voir d apr s ces formules que les carts dans la r ponse ISTD
26. Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Conventions de noms de fichiers Conventions de noms Les r gles ci dessous permettent ChemStation de cr er et de traiter des noms valides de fichiers et de r pertoires Les caract res ci dessous ne sont pas autoris s dans les noms de fichiers ou de r pertoires lt gt ete L utilisation de ces caract res dans le dossier d installation emp che le d marrage de la copie de retraitement et l utilisation du caract re dans le dossier installation emp che le bon fonctionnement de certains raccourcis Agilent Chemstation B 01 0x Les r gles suivantes s appliquent en plus Tableau 1 Caract res restreints Param tre ChemStation Caract re Noms de fichiers de m thode i et point d cimal ne sont pas autoris s Noms de fichiers de donn es les espaces ne sont pas autoris s pr fixe compteur Sous r pertoires de donn es et point d cimal ne sont pas autoris s sous r pertoires de s quences Les noms de p riph riques r serv s ci dessous ne peuvent pas tre utilis s comme nom de fichier CON PRN AUX NUL COMX o x est un nombre entre 1 et 9 LPT1x o x est un nombre entre 1 et 9 Evitez aussi d utiliser ces noms suivis d une extension par exemple Nul txt Les syst mes d exploitation anglais sont utilis s pour tester les conventions de noms Agilent ne peut rien affirmer c
27. F forc Un pic de solvant affect par une int gration manuelle par exemple une int gration tangentielle est tiquet R solvant recalcul Documentation des v nements d int gration manuelle Les r sultats g n r s apr s application des v nements d int gration manuelle sont enregistr s et un journal d audit des op rations d int gration manuelle est cr Les v nements d int gration manuelle sont indiqu s avec des valeurs absolues de temps de r tention migration et de hauteur ils sont donc sp cifiques du chromatogramme En cons quence le syst me n applique pas automatiquement les v nements d int gration manuelle aux autres chromatogrammes Comprendre votre ChemStation Agilent 121 4 int gration Int gration manuelle 122 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 5 Quantification Qu est ce que la quantification 124 Calculs de quantification 125 Facteurs de correction 126 Facteur de r ponse absolu 126 Multiplicateur 126 Facteur de dilution 126 Quantit d chantillon 127 Proc dures de calculs non talonn s 128 Aire et Hauteur 128 Proc dures de calculs talonn s 129 Calcul ESTD 130 Calcul Norm 132 Calcul ISTD 133 Analyse 1 Etalonnage 134 Analyse 2 Echantillon inconnu 135 Calcul ISTD des pics talonn s 135 Calcul ISTD des pics non talonn s 136 Apg Agilent Technologies 123 5 Quantification
28. La revue des lots Qu est ce que la revue d un lot 210 La configuration d un lot 211 Table d un lot 211 Table des compos s 212 Rapport de lot 212 Interface utilisateur 213 Les fonctions de revue 214 Etalonnage en revue des lots 214 Les rapports de la revue de lot 215 Historique des lots 215 ire Agilent Technologies 209 9 La revue des lots Qu est ce que la revue d un lot 210 La revue d un lot est la possibilit donn e l analyticien de traiter rapidement et facilement dans un premier passage les r sultats d une s quence ou d une s rie d chantillons Ceci lui permettra de gagner du temps surtout lorsqu il lui faudra revoir un grand nombre de r sultats Pendant l ex cution d une s quence un fichier batch avec une extension b est automatiquement cr et plac dans le r pertoire data avec les fichiers de donn es brutes Ce fichier batch contient des pointeurs correspondant aux diff rentes analyses l int rieur de la revue de lot elle m me Au chargement du lot l op rateur ne choisit que la m thode utiliser pour le batch puis s lectionne un un les fichiers de donn es traiter dans le lot On peut v rifier la pr cision de l talonnage les performances de l instrument et les int grations individuelles avant d approuver les r sultats Toute modification sp cifique des param tres d int gration d un chromatogramme peut tre stock e avec les donn es pour la tra ab
29. Qu est ce que la quantification 124 Une fois les pics int gr s et identifi s l tape suivante dans l analyse est la quantification Celle ci utilise l aire ou la hauteur des pics pour d terminer la concentration d un compos dans un chantillon Une analyse quantitative comporte de nombreuses tapes bri vement r sum es ci apr s Conna tre le compos que vous tes en train d analyser Etablir une m thode pour analyser des chantillons contenant ce compos Analyser un ou plusieurs chantillons contenant une ou plusieurs concentrations connues du compos pour obtenir la r ponse qui convient cette concentration Vous pouvez aussi analyser un certain nombre de ces chantillons avec diff rentes concentrations des compos s concern s si votre d tecteur a une r ponse non lin aire Ce processus est appel talonnage multipoints Analyser l chantillon contenant une concentration du compos pour obtenir la r ponse en rapport avec la concentration inconnue Comparer la r ponse de la concentration inconnue celle de la concentration connue pour d terminer la quantit de compos pr sente Pour que la comparaison entre la r ponse de l chantillon inconnu et celle de l chantillon connu soit valide il faut acqu rir et traiter les donn es dans des conditions identiques Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Calculs de quantification Pour d terminer la c
30. Report e S par ment pour g n rer un rapport de pics non talonn s l int rieur d un tableau distinct si vous voulez les classer par temps de r tention migration ou dans des tableaux distincts si vous voulez les classer par signal e S lectionnez la fonction Calibrated Peaks pour g n rer un rapport comportant les pics non talonn s et les pics talonn s e Choisissez Not Report pour supprimer la g n ration d un rapport de pics non talonn s Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 10 Destination du rapport Le rapport peut tre envoy e l cran Le rapport constitu de texte et de graphiques est affich l cran dans la fen tre de pr visualisation des rapports partir de laquelle il peut tre imprim e sur l imprimante Le rapport constitu de texte et de graphiques est imprim sur l imprimante s lectionn e e dans un fichier Le rapport est enregistr dans un fichier Si les donn es sont enregistr es dans un fichier il est possible de les r utiliser avec un autre programme par exemple EXCEL de Microsoft Windows Formats de fichiers du rapport Un rapport peut tre enregistr sous quatre formats diff rents Chaque format a une extension sp cifique Il est possible de s lectionner plus d un format pour un rapport TXT Le texte du rapport est imprim dans un fichier texte ASCII WMF Chaque graphiq
31. analyse de M thode A Cette section d crit l ordre d analyse pour la M thode A qui est la premi re partie de la s quence deux m thodes Tableau 16 Ordre d analyse de M thode A No inj M thode Flacon Op ration 1 M thode A 1 Point d talonnage 1 et rapport M thode A 2 Point d talonnage 2 et rapport 3 M thode A 10 Analyse d chantillon et rapport 4 M thode A 11 Analyse d chantillon et rapport 5 M thode A 1 Point d talonnage 1 et rapport 6 M thode A 2 Point d talonnage 2 et rapport 7 M thode A 12 Analyse d chantillon et rapport 8 M thode A 13 Analyse d chantillon et rapport 9 M thode A 1 Point d talonnage 1 et rapport 10 M thode A 2 Point d talonnage 2 et rapport 11 M thode A 14 Analyse d chantillon et rapport 196 Comprendre votre ChemStation Agilent Ordre d analyse de M thode B Cette section d crit l ordre d analyse pour la M thode B qui est la seconde Automatisation partie de la s quence deux m thodes M thode B pr sente les diff rences suivantes par rapport M thode A e Ilya deux injections par flacon pour le point d talonnage 2 La valeur d intervalle entr est d finie 3 Tableau 17 Ordre d analyse M thode B 8 No inj M thode Flacon Op ration 12 M thode B 3 Point d talonnage 1 et rapport 13 M thode B 5 Point d talonnage 2 et rapport 14 M thode B 5 Point d talonnage 2 et rapport 15 M thode B 20 Analyse d chantillon et rap
32. ation de ces m thodes 57 Modification des m thodes 58 Parties de la m thode modifier 59 Structure du r pertoire des m thodes 60 Que se passe t il lorsqu une m thode est ex cut e 61 Commande ou macro pr analytique 62 Acquisition des donn es 62 Fonctionnement de la m thode 62 Analyse des donn es 63 Analyse personnalis e des donn es 64 Enregistrement des donn es BPL 65 Commande ou macro post analytique 65 Sauvegarde d une copie de la m thode avec les donn es 65 R sum du fonctionnement de la m thode 66 ire Agilent Technologies 51 2 M thodes Qu est ce qu une m thode Une m thode comprend tous les param tres n cessaires pour l acquisition et l analyse des donn es en m me temps que les t ches pr et post analytiques si elles sont n cessaires pour un chantillon donn 52 Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes Parties d une m thode Une m thode est identifi e par un nom contenant un maximum de huit caract res alphanum riques Le nom du fichier est toujours suivi de l extension M pour l identifier comme une m thode Les m thodes sont stock es sous la forme de r pertoires MS DOS contenant les fichiers individuels associ s aux composants de la m thode Chaque m thode comporte quatre composants information de m thode contr le d instrument analyse des donn es et liste de contr le d ex cution Information de m thode Cette section permet de d
33. au moins 10 cycles dans la gamme de temps s lectionn e Comprendre votre ChemStation Agilent 239 11 240 Evaluation de l ad quation du syst me Bruit tr s court terme non inclus dans ASTM E 685 93 Ce terme est introduit pour d crire l amplitude maximale pour tous les carts al atoires du signal du d tecteur de fr quence sup rieure un cycle par 0 1 minute Le bruit tr s court terme est d termin pour une gamme de temps s lectionn e comprise entre 1 et 10 minutes La gamme de temps pour chaque cycle dt est d finie 0 1 minute ce qui donnera au moins 10 cycles dans la gamme de temps s lectionn e D termination du nombre de cycles n Lot t n o t est le temps de cycle et t le temps total sur lequel le bruit est calcul Calcul de bruit pic pic dans chaque cycle La d rive est d abord calcul e en d terminant la r gression lin aire l aide de tous les points de donn es dans la plage de temps voir Analyse de r gression page 256 La ligne de r gression lin aire est ensuite soustraite de tous les points de donn es dans la plage de temps pour donner le signal corrig de la d rive Le bruit de pic pic est ensuite calcul par la formule o N est le bruit de pic pic Imax est le pic d intensit la plus lev e maximale et Imin le pic d intensit la plus basse minimale dans la plage de temps Calcul du bruit ASTM n ZYN i 1 N ASTM
34. concentration d talon interne et les aires ou hauteurs de pics provenant de l analyse le logiciel calcule les concentrations de compos Le compos utilis comme talon interne doit tre semblable aux compos s talonn s tant sur le plan chimique que sur le plan du temps de r tention migration mais il faut pouvoir le distinguer aux niveaux chromatographique Tableau 11 Proc dure ISTD Avantages Inconv nients L cart de taille de l chantillon n est pas Il faut ajouter l talon interne chaque critique chantillon La d rive de l instrument est compens e par l talon interne Les effets des pr parations d chantillon sont minimis s si le comportement chimique de l ISTD et de l inconnu sont similaires Si la proc dure ISTD est utilis e pour des talonnages avec une caract ristique non lin aire il faut veiller ce que les erreurs r sultant du principe de calcul ne g n rent pas des erreurs syst matiques Dans des talonnages multipoints la quantit de compos ISTD doit demeurer constante c est dire la m me pour tous les points si la courbe d talonnage du compos est non lin aire Dans l analyse d talon interne la quantit du compos concern est rapport e la quantit du compos d talon interne par le rapport des r ponses des deux pics Comprendre votre ChemStation Agilent 133 5 Quantification Dans un talonnage ISTD deux analyses le calcul du
35. conserver une bonne s lectivit Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 L int grateur ne peut continuer augmenter ind finiment la largeur des pics En effet au del d une certaine largeur les filtres de reconnaissance des pics ne pourraient plus voir les pics Pour outrepasser cette limitation l int grateur regroupe les points de donn es ce qui revient r duire la largeur du pic en conservant la m me aire Lors du regroupement de donn es les points sont regroup s par deux puissance facteur de regroupement c est dire sans regroupement 1x regroup s une fois 2x regroup s deux fois 4x etc Le regroupement se base sur la fr quence d chantillonnage des donn es et la largeur de pic L int grateur utilise ces param tres pour d finir le facteur de regroupement et donner le nombre de points de donn es appropri voir Tableau 7 Le regroupement s effectue par puissance de deux en fonction de la largeur de pic attendue ou reconnue L algorithme de regroupement est r sum dans le Tableau 7 Tableau 7 Crit res de regroupement Largeur de pic attendue Filtre s utilis s Regroupement effectu 0 10 points de donn es Premier Aucun 8 16 points de donn es Deuxi me Aucun 12 24 points de donn es Troisi me Aucun 16 32 points de donn es Deuxi me Une fois 24 48 points de donn es Troisi me Une fois 32 96 points de donn es Troisi me deuxi me Deux fois
36. courbe d talonnage ajustements 162 d finition 154 description 154 forcer partir de z ro origine 162 multipoint 158 pond ration des points d talonnage 162 types 157 un seul point 157 courbe d talonnage un seul point s quences cycliques 193 courbe d talonnage multipoint 158 un seul point 157 crit res d approximation 104 D d but de pic 84 d finitions des tests de lin arit 253 d finitions pour la reproductibilit 250 delta 190 d rive r ponse 200 d riv e 81 89 destination rapport 227 d tection d paulement 114 d termination du bruit 237 239 d termination du bruit ASTM 239 distribution t 255 document utilisateur 45 documentation 45 271 Indice E cart type de la moyenne 254 d finition 257 chantillon 254 relatif 254 chantillon talonnage 152 159 inconnu 156 prioritaire 178 quantit 127 chantillon prioritaire 178 en ligne moniteurs 70 enregistrement des donn es BLP 65 paulement 86 95 erreurs s quence 181 ESTD calcul 130 proc dure 130 rapport 220 221 talon externe 130 interne 133 r talonnage avec flacons multiples 205 talon externe 130 talon interne 133 talonnage 152 Round Robin 205 ajustements de la courbe 162 compos 152 courbe 154 cyclique 193 cyclique multipoint 194 chantillon 152 159 explicite 192 fonctionnement de la s quence d limit e 202 fr quen
37. d chantillon correspondant chaque pic Etalonnage et r talonnage D finit les param tres de traitement des donn es affectant l talonnage et sa fr quence Rapport D finit le format du rapport imprim apr s une analyse Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Liste de contr le d ex cution D finit quelles parties de la m thode sont concern es par l ex cution de celle ci Vous pouvez utiliser la liste de contr le d ex cution pour e acqu rir stocker et traiter les donn es servant produire un rapport e n ex cuter qu une partie de la m thode e acqu rir et stocker des donn es sans les analyser e r analyser les fichiers de donn es existants e utiliser vos propres macros pour l analyse de donn es traitement pr et post analytique et e enregistrer les r sultats d une analyse dans un registre pour les BPL Comprendre votre ChemStation Agilent 55 2 M thodes Etat des methodes Une m thode peut pr senter deux tats M thode stock e C est une m thode stock e sur le disque de l ordinateur Les m thodes stock es ont un nom comportant huit caract res alphanum riques maximum avec l extension M M thode en cours Lorsqu une m thode stock e est rappel e partir du disque elle devient la m thode en cours Il y a toujours une m thode en cours en m moire Lorsque la ChemStation est d marr e pour la premi re fois la m thode par d
38. de dialogue Recalibration Settings Weigh 100 Weigh Response Fe MeasResponse Response 1 ou poids poids de mise jour de r ponse d fini dans Recalibration Settings MeasResponse r ponse mesur e Remplacer Remplacer Les nouvelles valeurs de r ponse remplacent les anciennes M thodes de r talonnage Le logiciel ChemStation permet de r talonner de deux mani res Vous pouvez r talonner interactivement ou automatiquement pendant une s quence d analyses automatis es Dans le r talonnage interactif vous effectuez directement le processus de r talonnage en utilisant le logiciel ChemStation apr s avoir inject un ou plusieurs chantillons talonnage Dans le Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 r talonnage avec une s quence vous sp cifiez quand le r talonnage a lieu mais c est le logiciel d automatisation qui l effectue Pour plus d informations voir R talonnage automatique page 187 Pour plus d informations sur la mani re d effectuer le r talonnage en utilisant le logiciel voir la partie Comment faire pour du syst me d aide R talonnage des pics non identifi s Il existe trois mani res de r talonner les pics non identifi s Pas de r talonnage Si un pic dans le tableau d talonnage ne peut pas tre identifi dans les r sultats d int gration l talonnage est interrompu Si cela se pr
39. de la m thode la gamme des flacons le nombre d injections par flacon et si vous le sp cifiez la quantit d chantillon la quantit ISTD le multiplicateur et la dilution Le syst me entre ensuite l information pour chaque flacon de la gamme dans le tableau de s quence Utilisation du bouton Append Line Pour ajouter une nouvelle ligne vierge la fin du tableau de s quence s lectionnez le bouton Append Line Comprendre votre ChemStation Agilent 177 8 Automatisation Travailler avec des s quences L acc s et la cr ation des s quences s effectuent partir du menu Sequence Vous pouvez cr er et enregistrer des s quences de la m me mani re que des m thodes L enregistrement d une s quence entra ne la cr ation d un fichier avec une extension S Pour modifier ou utiliser nouveau la s quence vous pouvez y acc der en utilisant la rubrique Load Sequence du menu Sequence Echantillons prioritaires Il est possible de suspendre une s quence en cours d s que la m thode en cours est termin e Cela pour permettre l analyse d un chantillon prioritaire par la m me m thode ou par une autre La s quence peut ensuite tre relanc e et elle continue alors avec l chantillon sur lequel elle a t suspendue Pour effectuer une s quence avec des chantillons de contr le Vous pouvez sp cifier des chantillons de contr le dans le champ Sample Type du tableau de s quence La m th
40. de pic mise jour de diff rentes fa ons selon la configuration d instrument Pour les configurations CPL CE le calcul de largeur de pic par d faut utilise un calcul composite 0 3 x Right inflection point Left inflection point 0 7 x Area Height Pour les configurations CPG le calcul de largeur de pic par d faut utilise aire hauteur Ce calcul ne surestime pas la largeur quand des pics sont fusionn s au dessus du point de mi hauteur Dans certains types d analyse par exemple les analyses CPG isotherme et CPL isocratique les pics peuvent s largir notablement au cours de l analyse Pour compenser cela l int grateur met jour automatiquement la largeur du pic au fur et mesure que les pics s largissent pendant une analyse Il le fait automatiquement sauf si la mise jour a t d sactiv e ou si la largeur de pic a t d finie une valeur particuli re par un v nement chronoprogramm La mise jour de la largeur du pic est pond r e de la mani re suivante 0 75 x existing peak width 0 25 x width of current peak Si un v nement d int gration programm d sactive ou d finit la largeur du pic une valeur particuli re l ajustement automatique de la largeur du pic est d sactiv Regroupement de tranches d int gration Le regroupement est le moyen utilis par l int grateur pour conserver les pics largis dans la plage efficace des filtres de reconnaissance de pics et
41. est la r ponse du pic x Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 RF est le facteur de r ponse du compos x calcul ainsi Amount RF X Response M est le multiplicateur D est le facteur de dilution R ponse RF x R ponse x Le multiplicateur et le facteur de dilution sont lus dans la bo te de dialogue Calibration Settings ou Sample Information Quantit x Quantit Si le rapport ESTD est s lectionn et si la quantit d chantillon est autre que z ro la quantit relative d un compos x est calcul e ainsi Absolute Amt of x 100 Sample Amount Relative Amt of x avec Quantit absolue de x est calcul e comme ci dessus dans le calcul ESTD Quantit chantillon est obtenue partir de la bo te Sample Information ou partir de la bo te de dialogue Calibration Settings pour des analyses uniques Si la quantit d chantillon est de z ro le ESTD est calcul Comprendre votre ChemStation Agilent 131 5 Quantification Calcul Norm 132 Dans la m thode de normalisation des facteurs de r ponse sont appliqu s aux aires ou hauteurs des pics pour compenser les changements de sensibilit du d tecteur pour les diff rents compos s d chantillon Le rapport Norm est calcul de la m me mani re qu un rapport ESTD mais avec une tape suppl mentaire pour calculer les quantit s relatives plut t qu absolues des com
42. et r vise p riodiquement la ligne de base pour compenser sa d rive jusqu la d tection d un front montant de pic Attribution de la ligne de base L int grateur attribue la ligne de base chromatographiques lectroph rogra phique pendant l analyse une fr quence d finie par la valeur de largeur de pic Quand l int grateur a chantillonn un certain nombre de points de don n es il r initialise la ligne de base du point de ligne de base initial au point de ligne de base en cours L int grateur reprend le suivi de la ligne de base sur les points de donn es suivants d finis et r initialise nouveau la ligne de base Ce processus continue jusqu ce que l int grateur identifie le d but d un pic Point de donn es temps de d but point en cours Laiu T T Toi Largeur du pic attendue tion de la e A a r initialisa ligne de base Figure 4 Ligne de base Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Au d but de l analyse ce r glage de ligne de base est utilis comme ligne de base initiale Si la valeur n est pas d finie c est le premier point de donn es qui est utilis Ce point de donn es est ensuite r vis p riodiquement selon la formule suivante Les aires sont additionn es sur un temps T largeur de pic attendue Ce temps ne peut jamais tre inf rieur l intervalle entre les points de donn es La proc dure se poursuit tant que la condition sur la l
43. et la fin du pic sont d termin s e Les lignes de base sont d finies sous chaque pic pour d terminer la hauteur et l aire du pic final e Les r sultats d int gration sont plac s dans une liste des r sultats d int gration Identification et quantification des pics e En utilisant les temps de r tention migration et les qualificateurs de pic facultatifs le logiciel identifie les pics en les associant aux composants connus d finis dans le tableau d talonnage e En utilisant les hauteurs ou les aires de pics le logiciel calcule la quantit de chaque composant d tect en utilisant les param tres d talonnage sp cifi s dans le tableau d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent 63 2 64 M thodes Recherche en biblioth que de spectres ChemStations pour syst mes CPL 3D EC EC SM et CPL SM seulement Pour tous les pics disposant de spectres UV une recherche automatis e dans une biblioth que de spectres pr d finie peut tre conduite pour identifier les composants de l chantillon d apr s leurs spectres UV Voir le manuel Comprendre votre module de traitement de spectre pour plus d informations V rification de la puret des pics ChemStations pour syst mes CPL 3D EC EC SM et CPL SM seulement Pour un pic disposant de spectres UV vous pouvez calculer un facteur de puret et le stocker dans un registre La puret du pic peut tre d termin e automatiquement la fin de chaqu
44. ex cution comprend les parties de la m thode qui seront ex cut es Comprendre votre ChemStation Agilent 59 2 M thodes Structure du r pertoire des m thodes Une m thode est constitu e d un groupe de fichiers stock s dans un r pertoire des m thodes Le sous r pertoire methods contient tous les sous r pertoires des m thodes ayant l extension M Les fichiers de m thode avec l extension MTH contiennent des jeux de param tres et sont au format ASCII Le fichier INFO MTH contient les param tres de contr le de m thode Les fichiers de m thode contenant les param tres d instruments ont le nom du module d analyse associ Par exemple Tableau 4 Fichiers d exemples de m thodes LC1090 MTH Contient la m thode d acquisition 1090 GC5890 MTH Contient la m thode d acquisition 5890 HPCE1 MTH Contient la m thode d acquisition pour l lectrophor se capillaire DAD1 MTH Contient la m thode d acquisition pour le HP 1090 FLD1 MTH Contient la m thode d acquisition pour le d tecteur fluorescence HP1046 ECD1 MTH Contient la m thode d acquisition pour le d tecteur lectrochimique HP1049 ADC1 MTH Contient la m thode d acquisition Agilent 35900 Si deux instruments identiques sont configur s les fichiers de m thode s appellent ADC1 MTH ADC2 MTH DAMETHOD REG Pour l valuation des donn es LALS1 REG Contient les param tres de l chantillonneur automatique Agilent s rie 1100 Les fichier
45. examin e pour optimiser les valeurs pr c dentes de rejet de hauteur et de sensibilit de pente Le rejet d aire est d fini 90 de l aire minimale du pic le plus sym trique d tect pendant l int gration d essais Le chromatogramme est r int gr avec ces valeurs finales des param tres d int gration les r sultats de l int gration sont alors enregistr s Param tres d auto int gration Les param tres ci dessous sont d finis par la fonction d auto int gration e Sensibilit de pente initiale e Hauteur initiale e Largeur initiale du pic e Rejet d aire initiale Comprendre votre ChemStation Agilent 119 4 int gration Int gration manuelle Description g n rale Trac de ligne de base Negative Peaks Pics n gatifs Tangent skim Int gration tangentielle Split Peak Pic d doubl Delete Peak s Supprimer le s pic s 120 Ce type d int gration permet d int grer certains pics ou groupes de pics Sauf pour la valeur initiale de rejet d aire les v nements d int gration du logiciel sont ignor s dans la plage indiqu e d int gration manuelle Si un ou plusieurs des pics r sultant de l int gration manuelle se trouvent en dessous du seuil de rejet d aire ils sont ignor s Les v nements d int gration manuelle utilisent des valeurs de temps absolues Ils ne s ajustent pas pour tenir compte de la d rive du signal L int gration manuelle vous permet de d
46. faut fournie par Agilent Technologies est toujours charg e dans le cadre du processus de d marrage Par exemple ce peut tre l une des m thodes suivantes e DEF_GC M pour un instrument CPG ou e DEF _CE M pour un instrument EC Une copie de la m thode par d faut est plac e en m moire et devient la m thode en cours Vous pouvez ce stade charger une m thode diff rente qui deviendra la m thode en cours 56 Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Cr ation de ces m thodes ATTENTION Cr er une nouvelle m thode consiste toujours modifier la m thode en cours puis l enregistrer sous un nouveau nom Important la m thode en cours n est modifi e sur le disque qu au moment de l enregistrement Vous pouvez cr er une m thode de plusieurs mani res Vous pouvez cr er une m thode pour effectuer une ou toutes les parties d une analyse Par exemple vous pouvez d abord cr er une m thode limit e l acquisition des donn es Ensuite lorsque vous serez pr t analyser les donn es et g n rer un rapport de recherche en biblioth ques vous pourrez modifier la m thode pour effectuer ces t ches de traitement des donn es Ne supprimez pas la m thode par d faut DEF_LC M ou DEF GC M En effet ces fichiers de m thode servent de mod les pour cr er des nouvelles m thodes Comprendre votre ChemStation Agilent 57 2 M thodes Modification des m thodes Vous pouvez modifier
47. graphique d taill e des param tres s lectionnables par l utilisateur entre diff rents chantillons analys s par la m me m thode Les rapports sont construits l aide de neuf cat gories d informations facultatives e une page d en t te qui peut tre d finie par l utilisateur e la configuration d instrument y compris les num ros de versions et les sp cifications de colonnes analytiques ou capillaires pour les syst mes CPL ou EC e la liste des chantillons planifi s pour l analyse la s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 35 1 36 Caract ristiques des ChemStations e le journal imprim indiquant ce qui a t analys et documentant les tapes d acquisition et de traitement des donn es ainsi que les v nements inattendus ventuels e une sortie imprim e des m thodes analytiques e des rapports d chantillons individuels e des statistiques sur les talons et e des statistiques sur les chantillons inconnus e une page de r sum qui peut tre un r sum par chantillon une ligne d information par analyse ou un r sum par compos avec un bref tableau r sum du compos en plus du r sum d chantillon Pour plus d informations sur les rapports r sum s de s quences voir le syst me en ligne et Rapports r sum s de s quence page 229 Rapports personnalis s La ChemStation poss de une vue de conception de rapports personnalis s pour les utilisa
48. incluent le num ro du pic le temps de r tention migration le nom du compos la quantit la description du signal la vraie largeur du pic mi hauteur la sym trie K l efficacit plateaux et la r solution pour chaque pic Le calcul de pic mi hauteur n est pas le m me que la formule de largeur de pic plus complexe utilis e par l int grateur Les valeurs d efficacit et de r solution sont bas es sur cette largeur du pic calcul e L en t te du rapport est constitu de toutes les informations pertinentes pour la m thode y compris l instrument la colonne le capillaire l chantillon et les param tres d acquisition Le signal est galement trac e Performance Noise Combine le style de rapport Performance avec les calculs de bruit pour les gammes de bruit d finies dans la bo te de dialogue Edit Noise Range du menu System Suitability En plus du bruit donn comme six fois l cart type pic pic et bruit ASTM la d rive et les variations moyen terme sont aussi d termin es e Performance Extended Produit un rapport tendu avec tous les param tres provenant des calculs de performance des pics et des trac s individuels de chaque pic Les trac s incluent la ligne de base les tangentes et les largeurs de pic des hauteurs d finies Ce type de rapport n inclut que des pics talonn s 224 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStatio
49. la largeur du pic si n cessaire pendant l analyse pour optimiser l int gration Choix de la largeur de pic Choisissez la valeur qui fournit juste assez de filtrage pour emp cher que le bruit ne soit interpr t comme des pics sans d former l information du signal e Pour choisir une largeur du pic initiale appropri e pour un pic int ressant unique utilisez l tendue temporelle de pic comme base de r f rence e Pour choisir une largeur de pic initiale appropri e lorsqu il y a plusieurs pics int ressants d finissez la largeur de pic initiale une valeur gale ou inf rieure la largeur du pic le plus troit pour obtenir une s lectivit de pic optimale Si la largeur du pic initiale s lectionn e est trop basse le bruit risque d tre interpr t comme des pics Si des pics larges et troits sont m lang s vous pouvez d cider d utiliser des v nements programm s l ex cution pour ajuster la largeur de certains pics Parfois les pics peuvent s largir de fa on importante au fur et mesure de l analyse par exemple pour des analyses en CPG isotherme ou CPL isocratique Pour compenser cela l int grateur met jour automatiquement la largeur de pic au fur et mesure que les pics s largissent pendant une analyse sauf si celle ci est d sactiv e ou d finie avec un v nement programm La mise jour de la largeur de pic est pond r e de la mani re suivante 0 75 x existing peak wid
50. la ligne de base Il permet de d cider si deux pics qui ne pr sentent pas de s paration de ligne de base sont s par s par une projection ou une ligne de base de vall e L int grateur calcule le rapport entre la hauteur corrig e de la ligne de base du pic le plus petit et la hauteur corrig e de la ligne de base de la vall e Quand le rapport pic vall e est inf rieur la valeur indiqu e par l utilisateur c est une projection qui est utilis e sinon une ligne de base est trac e partir de la Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 ligne de base au d but du premier pic jusqu la vall e puis depuis la vall e jusqu la ligne de base la fin du deuxi me pic comparez la Figure 13 avec la Figure 14 H1 H2 Hv Figure 14 Rapport pic vall e Le rapport pic vall e est calcul par les quations suivantes H1 gt H2 Peak valley ratio H2 Hv et H1 lt H2 Peak valley ratio H1 Hv La Figure 15 montre comment la valeur du rapport pic vall e indiqu e par l utilisateur modifie les lignes de base 18 529 18 529 19 060 19 060 Rapport pic vall e inf rieur la Rapport pic vall e sup rieur la valeur indiqu e par l utilisateur valeur indiqu e par l utilisateur Figure 15 Effet du rapport pic vall e sur les lignes de base Comprendre votre ChemStation Agilent 101 4 int gration Int gration tangentielle L int gration tangentielle est une forme de construction d
51. les chantillons d talonnage servent r talonner le composant de quantification des m thodes comme d crit ci apr s et e les chantillons de contr le sont valu s par rapport aux limites pour chaque composant d fini dans la m thode Si les r sultats se situent hors de la gamme de param tres sp cifi e l ex cution de la s quence est arr t e Comprendre votre ChemStation Agilent 39 1 40 Caract ristiques des ChemStations Il est possible de d finir des r talonnages simples cycliques et d limit s Un r talonnage est simple lorsqu il se produit chaque fois qu un chantillon d talonnage est d fini dans la s quence Les r talonnages cycliques se produisent des intervalles d finis pendant les analyses d une suite d inconnues En utilisant la d limitation pour une s rie d chantillons de compos s inconnus deux jeux d talonnage sont analys s Les rapports quantitatifs des chantillons de compos s inconnus sont alors calcul s avec un tableau d talonnage moyen interm diaire entre les deux jeux La fonctionnalit de s quence partielle permet aux utilisateurs de voir l ordre d ex cution de la s quence et aussi de s lectionner des entr es d chantillon individuelles r ex cuter ou r valuer Lorsqu ils r valuent des donn es d j acquises les utilisateurs peuvent sp cifier si le retraitement utilise les donn es de quantification d chantillon original
52. les analyses d chantillons inconnus Les deux s lections comprennent les styles de mod le Standard Statistic et Extended Statistic Extended Statistics imprime les tendances statistiques des analyses sous forme de graphes tandis que Standard Statistics n imprime que du texte Les s lections que vous faites dans la bo te de dialogue Items and Limits for Extended Statistics ne sont utilis es que lorsque vous choisissez la ou les option s Extended Statistics dans la bo te de dialogue Sequence Summary Parameters Si vous choisissez la ou les option s Standard Statistic dans la bo te de dialogue Sequence Summary Parameters les statistiques suivantes sont rapport es e les temps de r tention migration e aire e hauteur e quantit e largeur de pic selon le style de rapport voir Styles de rapports la page 223 et sym trie Le calcul statistique ne fait pas la distinction entre les diff rents points d talonnage dans une s quence qui utilise les m thodes talonnage multipoints Cela signifie que les l ments d pendant de la concentration Aire Hauteur Quantit voir la bo te de dialogue Items and Limits for Extended Statistics sont tous pris ensemble quel que soit le point d talonnage Les valeurs statistiques pour les analyses d talonnage ne sont par cons quent pas utiles pour des m thodes talonnage multipoints dans les s quences Comprendre votre ChemStation A
53. o N4sry est le bruit calcul par la m thode ASTM Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 Il n y a pas de d termination de bruit ASTM si la gamme de temps s lectionn e se situe au dessous d une minute Selon la gamme si la gamme de temps s lectionn e est sup rieure ou gale une minute le bruit est d termin en utilisant l une des m thodes ASTM pr c demment d crites Un minimum de sept points de donn es par cycle intervient dans le calcul Les cycles dans la d termination de bruit automatis e pr sentent un chevauchement de 10 Calcul de rapport signal sur bruit Pour le calcul de rapport signal sur bruit la ChemStation utilise six fois l cart type sd de la r gression lin aire de la d rive pour calculer le bruit La plage la plus proche du pic est s lectionn e parmi les plages sp cifi es dans les param tres d quation du syst me Le rapport signal sur bruit est calcul par la formule Height of the peak Signal to Noise i g Noise of closest range Le rapport signal sur bruit est calcul pour chaque pic du signal Si la ChemStation ne trouve pas de valeur de bruit le rapport signal sur bruit appara t dans le rapport sous forme D rive et variation moyen terme La d rive est donn e comme la pente de la r gression lin aire voir la Figure 40 et la variation moyen terme d termin e comme le bruit de pic pic des valeur
54. p troli re o les m mes compos s sont analys s depuis des ann es et les facteurs de r ponse des diff rents compos s et d tecteurs parfaitement connus Vous cr ez manuellement le tableau d talonnage en entrant les pics et leur facteur de r ponse dans le tableau d talonnage puis en r talonnant la m thode l aide d un talon qui contient au moins un pic de r f rence et en choisissant le Delta pour la mise jour R talonnage avec addition des pics Quand un r talonnage est r alis les gammes des temps de r tention migra tion dans le tableau d addition des pics de la m thode seront remises jour avant le r talonnage Le r talonnage des additions de pics est effectu de cette mani re pour assurer que le delta soit incorpor dans les calculs de temps Options de r talonnage Vous disposez de plusieurs m thodes pour mettre jour les r ponses avec les nouvelles donn es d talonnage dans le tableau d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent 167 7 168 Etalonnage Average Moyenne La moyenne de toutes les sessions d talonnage est calcul e par la formule suivante n Response MeasResponse R esponse 1 o n nombre d talonnages pr c dents MeasResponse r ponse mesur e Floating Average Moyenne flottante Une moyenne pond r e est calcul e pour toutes les sessions d talonnage Le poids mis jour est d fini dans la bo te
55. pour multiplier le r sultat pour chaque compos Il peut servir convertir des unit s en quantit s sp cifiques Facteur de dilution Le facteur de dilution est un nombre par lequel tous les r sultats calcul s sont multipli s avant d imprimer le rapport Vous pouvez ainsi changer l chelle des r sultats ou corriger pour tenir compte de changements dans la composition de l chantillon pendant le travail de pr analyse Vous pouvez aussi utiliser le facteur de dilution chaque fois qu un facteur constant est n cessaire Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Quantit d chantillon Si les calculs ESTD ou ISTD sont s lectionn s les rapports ESTD et ISTD donnent des valeurs relatives plut t que des valeurs absolues autrement dit la quantit de chaque compos est exprim e en pourcentage de la quantit de l chantillon La quantit d chantillon est utilis e dans les rapports ESTD et ISTD pour convertir la quantit absolue de chaque compos analys en quantit relative en divisant par la valeur sp cifi e Comprendre votre ChemStation Agilent 127 5 Quantification Proc dures de calculs non talonnes Les proc dures de calculs non talonn s ne demandent pas de tableau d talonnage Aire et Hauteur La proc dure de calcul Aire donne l aire de chaque pic dans l analyse en pourcentage de l aire totale de tous les pics inclus Aire ne n cessite pas d talonnage pr alab
56. r elles telles que mDO Volts degr s ou bars Chacune des fen tres peut montrer en superposition plusieurs signaux chromatographiques lectroph rographique ou param tres d instrument tels que la pression Les param tres par d faut de l affichage peuvent tre ajust s et sont m moris s par le syst me de telle sorte que les utilisateurs puissent d finir leurs param tres pr f r s comme valeurs par d faut de l instrument La fen tre poss de une fonction zoom et il est possible d utiliser le curseur pour afficher tout moment la r ponse un signal sp cifique Comprendre votre ChemStation Agilent 29 1 30 Caract ristiques des ChemStations Pendant une analyse la fonctionnalit compl te de la ChemStation peut tre utilis e au moyen de la copie offline Une commande instantan e snapshot est disponible pour les utilisateurs qui souhaitent commencer traiter des donn es avant la fin de l analyse La disposition des fen tres d informations sur les signaux et les tats y compris les composants du sch ma de diagramme d interface est enregistr e automatiquement Pour des informations compl mentaires sur l acquisition des donn es voir le Chapitre 3 Acquisition des donn es et consulter l aide en ligne du syst me Analyse des donn es Affichage La vue Analyse des donn es largit le champ d action de la barre d outils standard avec des fonctions d analyse des donn es group
57. rapport de quantit corrig e d un compos particulier dans un chantillon inconnu s effectue en deux tapes Analyse 1 Etalonnage 1 Les points sont construits en calculant un rapport de quantit et un rapport de r ponse pour chaque niveau d un pic particulier dans le tableau d talonnage Le rapport de quantit est la quantit du compos divis e par la quantit de l talon interne ce niveau Le rapport de r ponse est l aire du compos divis e par l aire ou la hauteur de l talon interne ce niveau 2 Une quation pour la courbe passant par les points d talonnage est calcul e en utilisant le type d ajustement de courbe sp cifi dans la bo te de dialogue Calibration Settings ou Calibration Curve RF Z Amount Ratio Response Ratio Rapport de r ponse Rapport de quantit Figure 28 Rapport de quantit 134 Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Analyse 2 Echantillon inconnu 1 Dans l chantillon inconnu la r ponse du compos est divis e par la r ponse de l talon interne pour donner un rapport de r ponse pour l inconnu 2 Un rapport de quantit pour l inconnu est calcul en utilisant l quation d ajustement de courbe d termin e dans l tape 2 ci dessus et la quantit r elle de l ISTD dans l chantillon Calcul ISTD des pics talonn s Les quations utilis es pour calculer la quantit r elle d un compos talonn
58. re dont elles interagissent avec l information stock e avec la m thode voir l aide en ligne 176 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Cr ation des s quences Utilisez le tableau de s quence pour sp cifier les chantillons m thodes et flacons analyser dans la s quence Le tableau de s quence donne la liste de tous les chantillons pr sents dans la s quence dans l ordre dans lequel ils seront analys s et il contient les informations de flacon de m thode et d talonnage n cessaires pour chaque chantillon Utilisation de l diteur de table de s quence Pour modifier l apparence et le contenu de la table de s quence vous pouvez ouvrir l diteur en cliquant sur le symbole de liste en bas droite de la table L diteur de table de s quence s ouvre et permet de sp cifier l affichage ou non de certaines colonnes dans la table De plus vous pouvez modifier les largeurs de colonnes pour chaque colonne de la table Selon les logiciels install s d autres champs de colonnes peuvent tre ajout s par exemple le champ Target Mass Masse cible si un CPL SM est install le champ Study Etude pour l installation d un module suppl mentaire ChemStore Utilisation du bouton Insert Vial Range Si de nombreux chantillons utilisent la m me m thode vous pouvez les entrer rapidement dans le tableau de s quence gr ce la fonction Insert Vial Range Celle ci copie le nom
59. sont utilis s pour corriger la quantification du compos inconnu 2 Utiliser un pic talonn Cette m thode garantit l utilisation du m me facteur de r ponse pour la quantification de tous les pics Le facteur de r ponse du compos s lectionn et des pics non talonn s est corrig chaque r talonnage Si le facteur de r ponse des pics talonn s change le facteur de r ponse pour les pics non identifi s change aussi de la m me quantit Si un tableau d talonnage est d j tabli vous pouvez s lectionner un compos provenant de la combo box Using Compound dans la bo te de dialogue Calibration Settings Les quations utilis es pour calculer la quantit r elle d un pic x non talonn se trouvent ci dessus 136 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 6 Identification des pics Qu est ce que l identification des pics 138 R gles de correspondance des pics 139 Types d identification des pics 140 Temps de r tention migration absolu 140 Temps de r tention migration corrig 140 Qualificateurs des pics 145 Limites de quantit 140 Temps de r tention migration absolu 141 Temps de r tention migration corrig s 143 Pics de r f rence uniques 143 Pics de r f rence multiples 144 Qualificateurs des pics 145 La corr lation de signal 146 V rification du qualificateur 146 Calcul du rapport de qualification 147 Le processus d identifica
60. temps Comprendre votre ChemStation Agilent 269 12 V rification du syst me Fonction de test du d tecteur barrette de diodes 270 Comprendre votre ChemStation Agilent Indice A B blanc bonnes pratiques de laboratoire 40 analyse 184 absolu C facteur de r ponse 126 temps de r tention 140 141 Fe 130 acquisition des donn es 29 stal f 129 d finition 68 QE ISTD 133 aide en ligne 45 aire de pic 111 non talonn 128 Norm 132 iro0 i aee quantification 125 calcul a sym trie des pics 242 rapport calcul de rapport signal sur bruit 241 ajustements calcul du pourcentage 128 calculs non talonn s 128 ChemStation description g n rale 18 personnalisation 38 CI 255 codes de s paration des pics 109 compos 152 confiance 249 255 configuration 23 construction de ligne de base 97 contr le des instruments 44 mise en r seau 44 courbe ajustements 162 talonnage 154 courbe 162 non lin aires 160 analyse justesse 168 analyse de r gression 256 analyses des donn es int gration 31 personnalis e 64 quantification 33 rapport sp cifique 34 rapport standard 33 approximation de front de pic 107 arr t s quence 178 attribution de ligne de base 82 97 automatique fermeture 186 recherche dans les biblioth ques 64 r talonnage 187 revue des lots 212 automatisation 39 171 d finition 173 Comprendre votre ChemStation Agilent
61. thode A Lignes de s quence 8 et 9 dans M thode B e Cinq entr es pour les chantillons Lignes de s quence 3 7 dans M thode A Lignes de s quence 10 14 dans M thode B Les talonnages sont sp cifi s intervalles r guliers par l entr e Recalibration Interval dans le tableau de r talonnage de s quence e M thode A r talonnera tous les deux chantillons e M thode B r talonnera tous les trois chantillons Le tableau de s quence ci dessous est tronqu pour simplifier l exemple Tableau 15 Tableau de s quence pour la M thode A et la M thode B Nom Nom Inj Type Point M J M J Ligne Flacon chantil m thode Flacon chantillon talon RF RT Intervalle 1 1 M thode A 1 Etalonnage 1 Moyenne Pasdem j 2 2 2 M thode A 1 Etalonnage 2 Moyenne Pasdem j 2 3 10 M thode A 1 4 11 M thode A 1 5 12 M thode A 1 6 13 M thode A 1 194 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 15 Tableau de s quence pour la M thode A et la M thode B suite Nom Nom Inj Ligne Flacon chantil m thode Flacon Type Point M J M J chantillon talon RF RT Intervalle 7 14 M thode A 1 8 3 M thodeB 1 9 5 M thode B 2 10 20 M thode B 1 11 21 M thode B 1 12 22 M thode B 1 13 23 M thode B 1 14 24 M thodeB 1 Etalonnage 1 Moyenne Pasdem j 3 Etalonnage 2 Moyenne Pasdem j 3 Comprendre votre ChemStation Agilent 195 8 Automatisation Ordre d
62. tol rance de qualification minimale est calcul e partir de l quation suivante gt 4 4 minimum qualifier tolerance T x 100 qxi o q est le rapport de qualification mesur au niveau 1 Comprendre votre ChemStation Agilent 147 Identification des pics Le processus d identification 148 Lors de la tentative d identification des pics le logiciel traite trois fois les donn es d int gration Trouver les pics de r f rence Au premier passage les pics de r f rence sont identifi s Le logiciel examine les temps de r tention migration des pics provenant d une analyse pour trouver des correspondances dans les fen tres de r tention migration des pics de r f rence dans le tableau d talonnage Un pic provenant de l analyse est identifi comme un pic de r f rence dans le tableau d talonnage si le temps de r tention migration du pic d analyse se situe dans la fen tre construite pour le pic du tableau d talonnage Si plus d un pic est trouv dans une fen tre celui qui a la plus grande aire ou hauteur suivie d une correspondance de qualificateur de signal positif si tablie est choisi comme pic de r f rence Une fois chaque pic de r f rence trouv la diff rence entre son temps de r tention migration et celle qui figure dans le tableau d talonnage est utilis e pour ajuster les temps de r tention migration pr vus de tous les autres pics dans le tableau d talonnage Trouve
63. une m thode existante en utilisant la rubrique Edit Entire Method du menu de m thode Apr s tre pass par toutes les bo tes de dialogue de m thode vous pouvez enfin enregistrer la m thode Ce processus est illustr ci dessous Figure 2 M thode sur disque Charger la m thode La m thode est charg e en m moire et devient la m thode en cours S lectionner Edit Entire Method partir du menu Method Modifier la m thode Enregistrer la m thode As Enregistrer sous le nouveau nom Enregistrer sous le m me nom Cr e la nouvelle m thode Remplace la m thode sur disque m thode Figure 2 Modification des m thodes 58 Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Parties de la m thode modifier Chaque m thode est constitu e de quatre composants qui peuvent tre modifi s s par ment Certaines des sous sections suivantes font r f rence des bo tes de dialogue sp cifiques et certaines sont des descriptions g n rales L Information de m thode comprend un texte d crivant la m thode Le Contr le d instrument d pend de la configuration et peut comprendre par exemple les param tres du four les param tres d injecteur et les param tres de d tecteur L Analyse des donn es comprend les d tails des signaux les param tres d int gration les param tres de quantification les param tres d talonnage et les param tres de rapport La Liste de contr le du moment d
64. 14 357 14 144 Figure 18 Segment de droite tangent Comprendre votre ChemStation Agilent 103 4 int gration Approximations standards Le calcul appropri est choisi en fonction de l application par d faut la m thode choisie est une combinaison de calculs exponentiels et de segments de droite permettant d obtenir la meilleure adaptation Le passage du calcul exponentiel au calcul lin aire est effectu de mani re viter toute discontinuit importante de hauteur ou d aire e Quand le signal est nettement au dessus de la ligne de base le calcul d ajustement de la tra ne est exponentiel e Quand le signal se situe dans l enveloppe de la ligne de base le calcul d ajustement de la tra ne est une ligne droite Les calculs de combinaison sont signal s comme int gration exponentielle ou tangentielle Crit res d approximation Deux crit res d terminent l utilisation d une ligne d approximation pour calculer l aire d un pic fils luant sur la tra ne d un pic parent e rapport hauteur tra ne e rapport hauteur vall e Ces crit res ne sont pas utilis s si un v nement programm est actif pour une exponentielle ou si le pic parent est lui m me un pic fils Le code de s paration entre le pic parent et le pic fils doit tre du type vall e 104 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Rapport hauteur tra ne C est le rapport de la hauteur corrig e de la ligne de base du p
65. 200 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation Pour obtenir un r sultat quantitatif pr cis pour l injection deux l chantillon il faut faire une interpolation entre les deux chantillons d talonnage voir la Figure 39 Ce processus est appel d limitation D rive d instrument Temps a nn J Li PRE JA Etalonnage 1 Echantillon Etalonnage 2 Figure 39 D limitation Dans une s quence talonn e cyclique avec d limitation le tableau d talonnage utilis pour calculer les r sultats quantitatifs inconnus est g n r en calculant la moyenne des r sultats de l talonnage en cours avec 8 ceux de l talonnage pr c dent Ce nouveau tableau d talonnage donne une repr sentation plus exacte de la r ponse de l instrument au moment du passage de l chantillon Comprendre votre ChemStation Agilent 201 8 Automatisation Fonctionnement de la s quence d limit e e Les premiers flacons d talonnage sont analys s e Les flacons d chantillon sont analys s e Les flacons d talonnage suivants sont analys s e Le tableau d talonnage est produit en rempla ant les facteurs de r ponse existants par les nouveaux et en calculant la moyenne des analyses d talonnage suivantes dans un nouveau tableau d talonnage e Les fichiers de donn es de flacon d chantillon sont valu s et les rapports g n r s e La s quence revien
66. 8 Parties de la m thode modifier 59 Structure du r pertoire des m thodes 60 Que se passe t il lorsqu une m thode est ex cut e 61 Fonctionnement de la m thode 62 Commande ou macro pr analytique 62 Acquisition des donn es 62 Analyse des donn es 63 Analyse personnalis e des donn es 64 Enregistrement des donn es BPL 65 Commande ou macro post analytique 65 Sauvegarde d une copie de la m thode avec les donn es 65 R sum du fonctionnement de la m thode 66 Comprendre votre ChemStation Agilent 3 Acquisition des donn es 67 Qu est ce que l acquisition des donn es 68 Fichiers de donn es 69 Moniteurs en ligne 70 Moniteur de signaux en ligne 70 Moniteur de spectres en ligne 70 Logbook 71 Informations d tat 72 Etat de la ChemStation 72 Barre d tat 72 Diagramme du syst me 73 4 int gration 75 Qu est ce que l int gration 77 Que fait l int gration 77 Les algorithmes d int gration de la ChemStation 78 Possibilit s d int gration 78 Description g n rale 80 D finition de la ligne de base initiale 81 Suivi de la ligne de base 81 Attribution de la ligne de base 82 Identification des points cardinaux d un pic 84 Terminologie 85 Points cardinaux 85 Pic de solvant 85 Epaulements avant arri re 86 Pente 86 Principe de fonctionnement 87 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Sommaire Identification d un pic 88 Largeur du pic 88 Filtres de reconnaissance de pic 89 Regroupem
67. CHEM32 1 TEMP CALIB TXT Donn es de r gression lin aire e Ordonn e l origine Y Intercept param tre de la courbe CurveParml e Pente param tre CurveParm2 e Coefficient de corr lation Entrez sur la ligne de commande DUMPTABLE _DAMETHOD PEAK C CHEM32 1 TEMP REGRESS TXT 260 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 12 V rification du syst me V rification du syst me 262 Vues de v rification et de diagnostic 265 Le registre GLPsave 266 Fonction de test du d tecteur barrette de diodes 268 Fonction Review DAD Test 268 ire Agilent Technologies 261 12 V rification du syst me V rification du syst me 262 La v rification du syst me joue un r le important dans l utilisation en routine d un instrument d analyse dans un laboratoire accr dit Les fonctions de v rification BPL de la ChemStation permettent de s assurer que l instrument ou l un de ses composants fonctionne parfaitement ou fonctionnait parfaitement au moment d une analyse particuli re La fonction Verification de la ChemStation permet de v rifier le bon fonctionnement de votre logiciel ChemStation Pour cela vous pouvez retraiter des fichiers de donn es d apr s des m thodes sp cifiques et comparer les r sultats un talon pr d fini La v rification est particuli rement importante pour d montr
68. ChemStation Agilent DEEE _ Comprendre votre ChemStation Agilent Des Agilent Technologies Avertissements Agilent Technologies Inc 2004 2005 Conform ment aux lois nationales et internationales relatives la propri t intellectuelle toute reproduction totale ou partielle de ce manuel sous quelque forme que ce soit par quelque moyen que ce soit voie lectronique ou traduction est interdite sans le consentement crit pr alable de la soci t Agilent Technologies Inc Microsoft est une marque d pos e de Microsoft Corporation aux Etats Unis R f rence du manuel G2070 93121 Edition 05 05 Imprim en Germany Agilent Technologies Hewlett Packard Strasse 8 76337 Waldbronn Germany R vision du logiciel Ce guide correspond aux r visions B 01 xx du logiciel ChemStation Agilent CPL o xx d signe les r visions mineures du logiciel sans influence sur l exactitude technique de ce guide Garantie Les informations contenues dans ce document sont fournies en l tat et pourront faire l objet de modifications sans pr avis dans les ditions ult rieures Dans les limites de la l gislation en vigueur Agilent exclut en outre toute garantie expresse ou implicite quant ce manuel et aux informations contenues dans ce dernier notamment mais sans s y restreindre toute garantie marchande et aptitude un but particulier En aucun cas Agilent ne peut tre tenu responsabl
69. L LANGUAGE BACKUP LC ec CE HELPENU DRIVERS LANGUAGE L 800 TEMP 1 DATA DEMO METHODS SEQUENCE VERIFY SPECLIBS Figure 1 Structure des r pertoires ChemStation Comprendre votre ChemStation Agilent 47 1 Caract ristiques des ChemStations Les sous r pertoires ChemStation sont les suivants Tableau 3 Sous r pertoires ChemStation R pertoire Sommaire CHEM32 REPSTYLE CORE PICTURES LANGUAGE 1024 and 800 SYS HELPENU LANGUAGE BACKUP DRIVERS 1 Ce r pertoire comprend les programmes destin s configurer et d marrer le logiciel ChemStation Il doit faire partie de la variable PATH chemin Ce r pertoire est ajout automatiquement par le programme d installation sauf si vous fournissez une autre solution Utilis pour des mod les de rapports d finis en utilisant le concepteur de rapports Utilis pour les composants centraux du logiciel partag s par toutes les configurations d instruments chromatographiques lectroph rographique C est le r pertoire de travail de la ChemStation Contient les graphiques n cessaires la ChemStation Utilis pour le code sp cifique au langage de cette partie du logiciel Contient les fichiers d initialisation pour l interface utilisateur graphique Ne pas modifier Comprend des composants g n riques partag s par toutes les configurations d instruments chromatographiques lectroph rographique che
70. Quadratique e Cubique e Moyenne R ponse Quantit Ajustement non lin aire Dans certains cas la r ponse du d tecteur aux changements dans la concentration d chantillon n est pas lin aire Pour ces types d analyses une m thode d talonnage par r gression lin aire ne convient pas et il faut utiliser un calcul talonnage multipoints Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Traitement de l origine Il existe quatre m thodes pour traiter l origine lorsque la courbe de r ponse est trac e e ignorer l origine e inclure l origine e forcer l origine ou e relier l origine Pour forcer l inclusion de l origine dans les points constitutifs de la courbe d talonnage le syst me utilise les points sym triques par rapport l origine ler quadrant vers 3 me quadrant Puisque les points sont sym triques par rapport l origine ce proc d garantit que la courbe d talonnage calcul e passe par l origine Voir la Figure 36 R ponse 1000 Courbe d talonnage Fa 500 F 100 ji ji J 1 5 10 ra di p Quantit ng pl LA 6 Pi Z Figure 36 Obliger le calcul inclure l origine Comprendre votre ChemStation Agilent 161 7 Etalonnage Pour des informations compl mentaires sur les ajustements de courbe d talonnage et le traitement de l origine voir le fichier online help aide en ligne Pond ration des points d talonnage Lorsque vous ta
71. ResSTD cart type r siduel ReSP talonn ei r ponse talonn e pour le point i ReSPalcul ei 7 r ponse calcul e pour le point i n nombre de points d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent 155 7 Etalonnage Echantillons inconnus 156 Ce sont des chantillons contenant une quantit inconnue du compos quantifier Pour conna tre la quantit de compos pr sente dans l chantillon inconnu vous devez e cr er une courbe d talonnage pour le compos e injecter une aliquote de votre chantillon inconnu et ex cuter l analyse de la m me mani re que pour l chantillon d talonnage e partir du signal d terminer la r ponse c est dire l aire ou la hauteur du pic par rapport la quantit inconnue du compos et e utiliser la courbe d talonnage pour calculer la quantit du compos dans l chantillon inconnu Par exemple si l aire d un pic d un chantillon inconnu est 500 vous pouvez d terminer que la quantit du compos correspondant dans l chantillon inconnu est 5 ng ul en utilisant la courbe d talonnage de la Figure 32 R ponse Figure 32 R ponse 1000 R ponse d inconnu Aire 500 500 a 5 10 Temps min Quantit d inconnu 5ng yl 5 10 Quantit ng pl Signal provenant d un chantillon inconnu et courbe d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Types d talonnage La Chem
72. Station propose deux types d talonnages un seul point et multipoints Etalonnage un seul point La courbe d talonnage pr sent e dans la Figure 33 contient un point c est dire un niveau Pour cette courbe la r ponse du d tecteur est suppos e tre lin aire sur la gamme op rationnelle des concentrations pour les chantillons concern s Le facteur de r ponse pour un pic de compos donn est fourni par l inverse de la pente de la ligne de la courbe d talonnage passant par le point et l origine L un des inconv nients de l talonnage un seul point est que la r ponse du d tecteur la concentration d chantillon est suppos e tre lin aire et passer par l origine Cela n est pas toujours vrai et peut conduire des r sultats inexacts R ponse 1000 Courbe d talonnage 10 Concentration ng yl Figure 33 Courbe d talonnage un seul point Comprendre votre ChemStation Agilent 157 7 158 Etalonnage Pour obtenir des r sultats quantitatifs exacts une courbe d talonnage doit avoir au moins deux points Ces points doivent d limiter les quantit s que l on s attend trouver dans les chantillons inconnus R ponse 1000 Courbe d talonnage 100 J 10 Concentration ng pl Figure 34 Courbe d talonnage deux points Par exemple si vous voulez quantifier un compos et s il est pr vu que les chantillons inconnus soient de 1 10 n
73. Un composant peut tre d tect avec plus d un signal Bien que la d tection multisignal s applique toutes les formes de chromatographie utilisant des d tecteurs multiples ou des d tecteurs capables de produire des signaux multiples elle est g n ralement utilis e dans la chromatographie en phase liquide avec des d tecteurs longueurs d onde multiples ou barrette de diodes De tels d tecteurs sont normalement pr par s de telle sorte que la longueur d onde la plus proche de la plus grande absorbance aire soit utilis e pour d finir le pic principal dans le tableau d talonnage Dans la Figure 30 il s agit de Les deux autres longueurs d onde acquises en tant que signaux peuvent tre utilis es comme qualificateurs des pics Dans la Figure 30 il s agit de s et g Longueur d onde du pic principal R ponse Longueur d onde R du pic de qualification R2 Rs z A3 Longueur d onde Figure 30 Qualificateurs de pics Les pics d un compos pr sentent un rapport de r ponse constant sur diff rentes longueurs d onde Comprendre votre ChemStation Agilent 145 146 Identification des pics La r ponse du pic de qualification correspond un certain pourcentage de la r ponse du pic principal Les limites d terminant la gamme acceptable pour la r ponse pr vue peuvent tre d finies dans le tableau d talonnage lorsque l option Identification Details est choisie Si le r
74. ableau de s quence 188 Types de s quences 191 S quences d talonnage explicites 192 S quences d talonnage cycliques un seul point 193 S quences d talonnage cycliques multipoints 194 Ordre d analyse de M thode A 196 Ordre d analyse de M thode B 197 Etalonnages explicites et cycliques r unis 198 Exemple 198 Ordre d analyse SimpReg 199 S quences d talonnage cyclique avec d limitation 200 Exemple 200 Fonctionnement de la s quence d limit e 202 Exemple 202 12 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire S quences de r talonnage cycliques avec plusieurs flacons contenant un talon dilu dans les m mes proportions 205 S quence de r talonnages cycliques avec utilisation de flacon d talonnage en essai circulaire Round Robin 205 R talonnages cycliques chaque talonnage utilisant un flacon diff rent 207 S quence d limit e utilisant des flacons diff rents pour ouvrir et fermer la d limitation 207 9 La revue deslots 209 Qu est ce que la revue d un lot 210 La configuration d un lot 211 Table d un lot 211 Table des compos s 212 Rapport de lot 212 Interface utilisateur 213 Les fonctions de revue 214 Etalonnage en revue des lots 214 Les rapports de la revue de lot 215 Historique des lots 215 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 217 Qu est ce qu un rapport 218 Rapports de r sultats 219 Rapports non talonn s 219 Rapports talonn
75. abolique passant par les points de donn es les plus hauts Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 IC Calculs non Gaussiens Pics fusionn s La fusion des pics appara t quand un pic commence avant que la fin du pr c dent ait t d tect e La Figure 9 illustre comment l int grateur g re les pics fusionn s Point de vall e Figure 9 Pics fusionn s L int grateur g re les pics fusionn s de la mani re suivante 1 il cumule l aire du premier pic jusqu au point de vall e 2 au point de vall e la sommation d aires partir du premier pic s arr te et la sommation pour le second pic commence 3 quand l int grateur trouve la fin du second pic la sommation d aires s arr te Ce processus peut tre vu comme une s paration des pics fusionn s par une ligne perpendiculaire partant du point de vall e entre les deux pics Epaulements Les paulements sont des pics non r solus sur le front ou sur la tra ne d un pic plus grand Il n y a pas de vraie vall e dans le sens d une pente n gative suivie d une pente positive Un pic peut avoir un nombre quelconque d paulements avant et ou arri re Comprendre votre ChemStation Agilent 95 4 Int gration 15 550 a 15 410 b 15 690 Figure 10 Epaulements de pic Les paulements sont d tect s partir de la courbure du pic mesur e par la d riv e seconde Quand la courbure passe par z ro l int
76. ants inconnus Comprendre votre ChemStation Agilent 139 Identification des pics Types d identification des pics 140 Il existe diff rentes techniques pour comparer les pics d chantillon ceux qui se trouvent dans le tableau d talonnage du logiciel ChemStation Temps de r tention migration absolu Le temps de r tention migration pour ce pic d chantillon est compar au temps pr vu sp cifi pour chaque composant dans le tableau d talonnage Temps de r tention migration corrig Les temps de r tention migration pr vus pour les pics de composant sont corrig s en utilisant les temps de r tention migration r els d un ou plusieurs pics de r f rence et la correspondance s effectue en utilisant ces temps de r tention migration corrig s relatifs Le ou les pics de r f rence doivent tre sp cifi s dans le tableau d talonnage Qualificateurs des pics Outre l identification des pics par le temps de r tention migration vous pouvez utiliser des qualificateurs de pics pour obtenir un r sultat plus pr cis Si plus d un pic survient dans une fen tre de temps de r tention migration les qualificateurs devront tre utilis s pour identifier le composant corrig Limites de quantit Les limites de quantit d finies dans la bo te de dialogue Compound Details sont utilis es pour qualifier l identification du pic Si la quantit du composant identifi se situe l int rieur des limites d
77. apport entre le qualificateur de pic principal et le qualificateur de pic par exemple g se situe dans des limites acceptables alors l identit du compos peut tre confirm e La corr lation de signal La corr lation de signal signifie que deux pics mesur s dans des signaux de d tecteurs diff rents l int rieur d une fen tre de temps d termin e sont affect s au m me compos La fen tre de corr lation de signal peut tre contr l e par le param tre SignalCorrWin dans le tableau QuantParm du registre DaMethod La corr lation de signal est d sactiv e lorsque la d finition de la fen tre de correlation de signal est de 0 0 minute voir le Guide de Macro Programmation pour un compl ment d information Lorsque la corr lation de signal n est pas active les pics luant au m me temps de r tention migration dans des signaux de d tecteur diff rents sont trait s comme des compos s diff rents Les donn es de la fen tre par d faut de corr lation de signal pour la CPL CE CE MS et CPL SM est de 0 03 minute et 0 0 minute pour les donn es CPG V rification du qualificateur Si la corr lation de signal est activ e la v rification du qualificateur est active par d faut pour tous les types de fichiers de donn es Elle peut tre d sactiv e en d finissant le drapeau UseQualifiers dans le tableau des param tres de Quantification de la m thode voir le guide de macro programmation pour des informations c
78. aract ristiques des ChemStations Personnalisation Le puissant jeu de commandes permet de personnaliser la ChemStation Il est possible de grouper ces commandes un tel groupe constitue une macro permettant d ex cuter automatiquement une fonction donn e Les utilisateurs qui crivent des macros peuvent d finir leurs propres variables inclure des structures conditionnelles ou en boucle effectuer des entr es sorties physiques y compris le traitement des fichiers et interaction utilisateur imbriquer leurs macros et planifier et changer des donn es avec d autres applications MS DOS ou Microsoft Windows Pour de plus amples informations sur la personnalisation r f rez vous au Guide de Macro Programmation disponible dans l aide en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Automatisation La ChemStation peut ex cuter des s quences multim thodes Il est possible de d finir le jeu de param tres de s quence de mani re utiliser des fichiers g n r s automatiquement ou des fichiers num rot s s quentiellement avec un pr fixe de quinze caract res maximum d fini par l utilisateur Ce dernier peut choisir d ex cuter des analyses compl tes ou des s quences limit es au retraitement des donn es et il peut aussi s lectionner une fermeture sp cifique parmi une s rie de commandes de fermeture ou d finir une macro de fermeture qui s ex cute lorsque la s quence se termine
79. ase 81 100 suivi de ligne de base sans p n tration 99 syst me tat 72 fermeture 186 messages 71 T table de lot 211 configuration 211 rapport standard 213 type d chantillon enlev 211 table de sommation des pics 226 table des compos s 211 tableau d talonnage 138 d finition 153 tableau de s quence r talonnage 188 temps de d but 80 temps de fin 80 temps de r tention absolu 140 141 corrig 140 143 mise jour 188 r talonnage 169 temps de r tention corrig 140 143 temps de r tention du compos non retenu 245 temps de r tention fen tres 142 temps mort 245 V v rification 262 sous r pertoire 49 v rification de la puret des pics 64 v rification du syst me 262 volume mort 245 Comprendre votre ChemStation Agilent 275 Indice 276 Comprendre votre ChemStation Agilent www agilent com Contenu du manuel Ce manuel d crit les diff rents concepts utilis s par la ChemStation Agilent Son but est d tendre votre compr hension sur la fa on dont fonctionne la ChemStation Pour plus d informations sur l utilisation de la ChemStation consultez le syst me d aide ou la carte Prise en main livr s avec les manuels Agilent Technologies 2004 2005 Imprim en Germany 05 05 G2070 93121 Agilent Technologies
80. atique ou pr fixe compteur est utilis pour cr er le nom des fichiers de donn es Si la colonne Datafile contient du texte celui ci est utilis comme nom des fichiers de donn es pour la session Si plus d une injection par flacon est sp cifi e sur une ligne avec un nom de fichier de donn es manuel la ChemStation tronque automatiquement des caract res la fin du nom entr par l utilisateur et ajoute le num ro d injection Cela emp che de r utiliser le m me nom de fichier de donn es pour des injections multiples Utilisation d un pr fixe compteur pour nommer les fichiers de donn es Si vous utilisez le Pr fixe Compteur pour nommer les fichiers de donn es la ChemStation g n re un nom pour chaque analyse Pour un instrument qui supporte l analyse de signaux doubles tel que le CPG la ChemStation g n rera un nom pour chaque signal La configuration de s quence autorise les noms de fichiers longs pour le pr fixe compteur Le nom de fichier de donn es d fini par le pr fixe compteur peut avoir jusqu quinze caract res plus l extension d soit au total dix sept caract res 184 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Les r gles ci dessous s appliquent au champ pr fixe compteur e le compteur lui m me peut avoir au maximum 6 caract res e si un pr fixe fournit moins de neuf caract res pour le pr fixe le compteur est tendu automatiquement 6 chiffres e le nom donn dans le comp
81. auteur 114 116 r pertoire m thode 60 structure 47 replace remplacer 189 r ponse 124 156 d rive 200 d tecteur 157 ratio 146 r ponse du d tecteur 157 159 219 r siduel cart type 155 relatif 155 r solution 251 r sultats quantitatifs 221 r sultats rapports 219 r tention relative 251 revue des lots 210 automatique 212 historique 214 interface utilisateur 212 manuelle 214 Comprendre votre ChemStation Agilent run time checklist bo te de dialogue 55 59 61 acquisition des donn es 62 analyses des donn es 63 commande post analytique 65 commande pr analytique 62 enregistrement des donn es BLP 65 macro post analytique 65 macro pr analytique 62 sauvegarde d une copie de la m thode 65 S sensibilit de pente 114 s quence analyse blanc 184 arr t 178 cr ation 177 178 d finition 174 d limit e 200 enregistrement 178 erreurs 181 talonnage 189 talonnage cyclique 193 194 talonnage explicite 192 fichier journal 181 flacons d chantillon 183 interruption 178 modification 178 nom de fichier 183 param tres de r talonnage 188 pause 179 r talonnage 188 s quence 200 sous r pertoire 49 tableau 176 s quences d talonnage 192 signal analogique 68 d tails 54 moniteur 70 num rique 68 signal analogique 68 signal num rique 68 Indice sommet 80 sommet du pic 84 94 style rapport 223 suivi de la ligne de b
82. avec des fichiers de donn es CPL DAD reconstruits partir des spectres DAD Comprendre votre ChemStation Agilent 79 4 Int gration Description g n rale 80 Pour int grer un chromatogramme lectroph rogramme avec l int grateur 1 d finit la ligne de base initiale 2 suit et met jour continuellement la ligne de base 3 identifie le temps de d but pour un pic et marque ce point avec une graduation verticale 4 d termine l emplacement du sommet de chaque pic et imprime le temps de r tention migration 5 identifie le temps de fin pour un pic et marque ce point avec une graduation verticale 6 construit une ligne de base et 7 calcule l aire la hauteur et la largeur pour chaque pic Ce processus est contr l par des v nements d int gration Les v nements les plus importants sont initial slope sensitivity seuil de pente initiale et height reject rejet de hauteur Vous pouvez d finir des valeurs initiales pour ces v nements et pour d autres Les valeurs initiales prennent effet au d but du chromatogramme De plus la fonction d int gration automatique fournit un ensemble d v nements initiaux que vous pouvez optimiser ult rieurement Dans la plupart des cas les v nements initiaux donnent de bons r sultats d int gration sur la totalit du chromatogramme mais parfois vous souhaiterez mieux contr ler la progression d une int gration Le logiciel permet de contr ler le mode d
83. blissez votre courbe d talonnage par d faut vous pouvez sp cifier le poids ou importance relatif des divers points d talonnage utilis s pour g n rer la courbe Les options de pond ration suivantes peuvent tre s lectionn es Poids Description Egal Tous les points d talonnage ont un poids gal dans la courbe Dosage lin aire Un point d talonnage avec la quantit x a la pond ration 1 x normalis e la Amnt plus petite quantit de telle sorte que le facteur de pond ration le plus grand soit 1 La normalisation est obtenue en multipliant le poids par la plus petite quantit Par exemple le poids d un point d talonnage avec la quantit x est 1 x X a avec a la quantit la plus petite de compos talon utilis e pour la pr paration des m langes d talonnage Si l origine est incluse elle re oit la moyenne des pond rations des autres points d talonnage R ponse lin aire Un point d talonnage avec la r ponse y a la pond ration 1 y normalis e la Resp plus petite r ponse de telle sorte que le facteur de pond ration le plus grand soit 1 La normalisation est obtenue en multipliant le poids par la plus petite quantit Par exemple le poids d un point d talonnage avec la r ponse y vaut 1 y xb avec b r ponse du compos talon utilis en quantit la plus petite pour la pr paration des m langes d talonnage Si l origine est incluse elle re oit la moyenne des pond rations
84. bo te contenant seulement l information sp cifi e pour la table de lots La ligne de boutons de l interface minimale ne contient plus ceux concernant la table de lots et la table de compos s Comprendre votre ChemStation Agilent 213 9 La revue des lots Les fonctions de revue 214 Les fichiers de donn es peuvent tre affich s de deux fa ons e manuellement en s lectionnant chaque analyse partir de la table e automatiquement avec un intervalle pr d fini entre chaque fichier de donn es Pendant l affichage automatique seuls les types d chantillons pr sents dans la table sont pr sent s les analyses sont affich es dans le m me ordre que dans la table La revue automatique peut tre arr t e temporairement reprise ou arr t e Les fonctions standard de la ChemStation sont disponibles avec la revue de lot Ceci comprend l talonnage la manipulation manuelle des chromatogrammes par exemple le lissage ou l int gration manuelle Toutes les modifications apport es un fichier de donn es peuvent tre not es et enregistr es avec le fichier lot Les chromatogrammes d j pass s en revue sont annot s l aide d un ast risque dans la table de lots Vous pouvez aussi ne supprimer que les modifications effectu es sur le chromatogramme en cours ou toutes les modifications apport es sur la totalit des chromatogrammes du lot Quand une analyse est charg e les options de traitement choisies sont ex
85. ce Param tres de r talonnage dans le tableau de s quence Le facteur de r ponse et les temps de r tention migration peuvent tre mis jour de plusieurs mani res Le niveau d talonnage la mise jour du facteur de r ponse et la mise jour des temps de r tention migration sont des instructions utilis es dans l analyse de donn es lors du r talonnage du tableau d talonnage Quand Calibration est entr dans la colonne SampleType du tableau d chantillon les colonnes suivantes deviennent actives et peuvent tre modifi es e Point talon e Update RT e Update RF e Intervalle Les valeurs que l on peut entrer dans chacune de ces colonnes sont pr sent es dans le Tableau 14 Tableau 14 Param tres de r talonnage dans le tableau de s quence CAL Level Update RT Update RF Intervalle N niveau tableau Pas de m j Pas de m j N intervalle r talonnage d talonnage 1 999 cyclique 1 999 Moyenne Moyenne Vierge Remplacer Remplacer 188 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 14 suite Param tres de r talonnage dans le tableau de s quence CAL Level Update RT Update RF Intervalle D limiter Delta Le Tableau 14 pr sente les colonnes qui contiennent les param tres de r talonnage et les valeurs accept es dans le tableau de s quence No Update Pas de mise jour Ne change pas le facteur de r ponse ou le temps de r tention mi
86. ce 190 gammes 160 272 multipoint 158 niveau 152 param tres 136 point 152 s quence 189 talonnages multipoints 133 talons multiples 202 tat fen tre 73 instrument 73 tat standby 186 v nements chrono programm s 117 v nements d int gration 80 114 extrapolation 160 201 F facteur de dilution 126 131 facteur de normalisation 133 facteur de r ponse absolu 126 mise jour 188 facteur de tra ne 248 facteur de tra ne USP 248 facteurs de correction 126 fen tre de r f rence 142 fen tre de temps r tention migration 141 fermeture automatique 186 macro 186 syst me 186 fichier m thode 60 fichier de m thode param tres de l instrument 60 fichier journal s quence 181 fichiers de donn es 211 filtre reconnaissance de pic 89 fin du pic 84 fonction apr s s quence 186 formats de fichiers rapport de lot 214 r sultats de rapports 227 formules d finitions des tests de performances 246 d finitions g n rales 245 formules de v rification de performance du syst me analyse de r gression 256 coefficient de r gression 257 carttype 250 257 facteur de capacit 248 facteur de tra ne USP 248 largeur du pic 248 moyenne 250 nombre de plateaux 249 r solution 251 r tention relative 251 RSD 254 temps de r tention 245 temps mort 245 volume mort 245 G gammes talonnage 160 g n ralit s sur le logiciel configurati
87. contiennent les r sultats tabulaires Si les r sultats sont tri s par temps de r tention migration un seul fichier est requis pour le tableau complet par exemple REPORTOI CSV Si les r sultats sont tri s par signal un tableau s par est requis pour chaque signal Dans ce cas les fichiers sont nomm s de Report0O1 CSV ReportNN CSV o NN est le num ro du signal Le rapport est export dans un tableau au format XLS Excel de Microsoft En g n ral les donn es n cessitent un traitement suppl mentaire Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 10 Rapports r sum s de s quence G n ralit s La ChemStation peut imprimer divers rapports standard pour des analyses d chantillon individuel Le rapport r sum de s quence est une m thode suppl mentaire de cr ation de rapport qui vous permet de calculer et de rapporter des param tres sur plusieurs analyses diff rentes Par exemple il est utile de tester la stabilit de l instrument ou la fiabilit d une nouvelle m thode Un rapport r sum de s quence peut inclure e une page de titre e la configuration de l instrument y compris ses num ros de version et les d tails de la colonne le capillaire analytique utilis e e la liste du tableau de s quence qui d crit ce que la s quence automatis e des analyses aurait d faire e les descriptions du journal sur ce que les s quence
88. cs non identifi s ils sont classifi s comme inconnus La ChemStation tente de grouper les pics inconnus appartenant au m me compos Si un pic a t d tect dans plus d un signal les pics avec le m me temps de r tention migration dans chaque signal sont group s en un seul compos Les pics inconnus figurent dans le rapport si cette option a t choisie dans la bo te de dialogue Calibration Settings Comprendre votre ChemStation Agilent 149 6 Identification des pics Le processus d identification 150 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 7 Etalonnage Terminologie 152 Tableau d talonnage 153 Courbe d talonnage 154 Echantillons inconnus 156 Types d talonnage 157 Etalonnage un seul point 157 Etalonnage multipoints 158 Gammes d talonnages 160 Ajustements de la courbe d talonnage 160 Traitement de l origine 161 Etalonnage de groupe 164 Addition des pics 165 Re talonnage 166 Qu est ce que le r talonnage 166 Pourquoi r talonner 166 R talonnage manuel 167 R talonnage avec addition des pics 167 Options de r talonnage 167 M thodes de r talonnage 168 R talonnage des pics non identifi s 169 che Agilent Technologies 151 7 Etalonnage Terminologie Etalonnage Compos Niveau d talonnage Point d talonnage Echantillon d talonnage 152 L talonnage est le processus qui consi
89. culier s affichent avec un maximum de 10 chiffres significatifs Si un calcul de validation externe manuel est n cessaire il est recommand que tous les chiffres significatifs internes soient utilis s pour les calculs externes En raison des erreurs d arrondi suppl mentaires l utilisation des chiffres affich s et ou arrondis pour effectuer des calculs externes peut conduire des r sultats diff rents de ceux de la ChemStation Le paragraphe suivant indique comment acc der la totalit des chiffres significatifs internes n cessaires pour les calculs manuels externes Dans tous les cas il est n cessaire d ouvrir un fichier de donn es et de sortir le rapport ad quat avant d ex cuter les commandes indiqu es ci apr s Toutes les commandes sont saisies sur la ligne de commande de la ChemStation rendue accessible partir de la vue menu Les informations contenues dans le fichier C CHEM32 TEMP TXT peuvent tre examin es au moyen d un diteur de texte comme p ex NOTEPAD le bloc notes Windows Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 Donn es des pics bruts Temps de r tention Aire Hauteur Largeur int grateur Sym trie Temps de d but de pic Temps de fin de pic Entrez sur la ligne de commande DUMPTABLE CHROMREG INTRESULTS C CHEM32 1 TEMP INTRES TXT Donn es des pics trait s Temps de r tention mesur Temps de r t
90. cut es si l analyse a d j t trait e et les options enregistr es c est l analyse recalcul e qui est charg e C est un processus plus rapide que de devoir charger une analyse non trait e il n est plus n cessaire d effectuer un traitement pr alable Etalonnage en revue des lots L talonnage en revue des lots est ind pendant des param tres de r talonnage d une table de s quence La premi re tape d un talonnage de lot remplace toujours les entr es de r ponse et de temps de r tention dans la table d talonnage Pour les talons suivants les valeurs de r ponse et de temps de r tention sont moyenn es Comprendre votre ChemStation Agilent La revue des lots 9 Les rapports de la revue de lot La Table d un lot page 211 configurable par l utilisateur peut tre envoy e directement sur l imprimante affich e l cran ou envoy e dans un fichier avec un pr fixe choisi par l utilisateur dans un des formats suivants e fichier texte ASCII avec l extension TXT Data Interchange Format DIF avec l extension DIF e Comma Separated Values CSV valeurs s par es par des virgules avec l extension CSV e Microsoft Excel avec l extension XLS Les options de rapport donnent aussi la possibilit de trier les chantillons par Run Index indice chronologique d analyse Sample Type type d chantillon ou Method par m thode ind pendamment de l ordre de tri de la table de lots Les
91. de 65 macro 65 pr analytique commande 62 macro 62 pr cision format des nombres 258 Q qualificateurs 145 quantification calculs 125 d finition 124 proc dure ESTD 130 proc dure ISTD 133 274 rapport aire 221 d finition 218 destination 227 ESTD 220 221 talonn 219 formats de fichiers 227 hauteur 221 non talonn 219 Norm 221 personnalis e 36 r sum de s quence 35 style 223 tableaux 37 rapport d ad quation du syst me extended performance 35 rapport de performance 34 style Performance and Noise 34 rapport de lot formats de sortie 214 rapport hauteur tra ne 105 rapport hauteur vall e 105 rapport pic vall e 100 rapport r sum de s quence 35 229 analysis reports 230 configuration 230 header 230 journal 230 m thodes 230 r sum summary 232 sp cification de sortie 232 statistics 231 tableau de s quence 230 rapports performance du syst me 34 rapports d ad quation du syst me 34 rapports de r sultats 219 rapports tableaux 37 recherche dans les biblioth ques 64 reconnaissance de pic 92 filtre 89 r talonnage 168 automatique 187 average moyenne 189 complet 169 d finition 168 intervalle 190 partiel 169 pics non identifi s 169 pourquoi 168 temps de r tention 169 r talonnage cyclique 205 r talonnage partiel 169 r gression coefficient de r gression 257 regroupement 90 rejet d aire 114 rejet de h
92. de de l analyse le r talonnage est n cessaire Par exemple supposons que vous ayez cr un tableau d talonnage pour le compos caf ine que vous utilisez chaque fois que vous devez quantifier des chantillons contenant de la caf ine A un moment donn vous devrez remplacer la colonne ou le capillaire M me si la colonne le capillaire est remplac e par exactement un e autre du m me type elle il ne se comportera pas exactement comme la e pr c dent e lorsque vous avez cr le tableau d talonnage pour la caf ine Par cons quent pour pr server la coh rence vous devez r talonner les points dans le tableau d talonnage avant d utiliser la nouvelle colonne le capillaire pour analyser des chantillons contenant des quantit s inconnues de caf ine Ce faisant vous quantifiez des chantillons analys s dans les m mes conditions Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 R talonnage manuel Vous pouvez entrer manuellement les param tres d talonnage des pics et normaliser le tableau d talonnage l aide du bouton d option Manual Setup dans la bo te de dialogue New Calibration Table Habituellement une nouvelle m thode d talonnage est cr e en injectant un m lange talon cr ant la table et en entrant les quantit s de tous les pics talonn s pour obtenir les facteurs de r ponse Cette approche est insuffisante dans le cas de certaines applications comme celles de l industrie
93. des autres points d talonnage Quadratique Un point d talonnage avec la quantit x a la pond ration 1 x2 normalis e la Quantit quantit la plus petite de telle sorte que le facteur de pond ration le plus grand soit 1 La normalisation est obtenue en multipliant le poids par la plus petite quantit Par exemple le poids d un point d talonnage avec la quantit x est 1 x X a avec a la quantit la plus petite de compos talon utilis e pour la pr paration des m langes d talonnage 162 Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Poids Description Quadratique Un point d talonnage avec la r ponse y a la pond ration 1 y normalis e la R ponse r ponse la plus petite de telle sorte que le facteur de pond ration le plus grand soit 1 La normalisation est obtenue en multipliant le poids par la plus petite quantit Par exemple le poids d un point d talonnage avec la r ponse y vaut 1 y xXb avec b r ponse du compos talon utilis en quantit la plus petite pour la pr paration des m langes d talonnage Nbre Un point d talonnage est pond r d apr s le nombre de r talonnages du d talonnages point Aucune normalisation n est effectu e La pond ration quadratique des points s utilise par exemple lorsque les points d talonnage sont dispers s Ce proc d garantit que les points d talonnage les plus proches de l origine qui peuvent normalement tre mesur s plus p
94. des suivantes e automatique e manuelle ou e pr fixe compteur Dans chaque cas vous devez indiquer le sous r pertoire dans lequel les fichiers de donn es seront stock s voir Param tres de s quence page 175 Pour nommer des fichiers de donn es automatiques pendant une s quence Flacons d chantillon Par exemple 017 0103 D avec e Les trois premiers chiffres correspondent au num ro du flacon Par exemple 017 e Le quatri me chiffre en chromatographie liquide et lectrophor se capillaire est un tiret de s paration Dans un chromatographe en phase gazeuse ce sera F pour avant front ou B pour arri re back e Les cinqui me et sixi me chiffres correspondent la ligne de s quence qui d finit la m thode utilis e Par exemple 01 pour la premi re ligne de s quence e Les septi me et huiti me chiffres correspondent au num ro d injection pour ce flacon par la m thode Par exemple 03 pour la troisi me injection Comprendre votre ChemStation Agilent 183 8 Automatisation Analyses blanc Par exemple NV 0499 D avec e NV signifie pas de flacon no vial e est un tiret de s paration 0499 est la 99 analyse blanc de la ligne de s quence 4 Pour entrer des noms de fichiers de donn es manuellement L une des colonnes du tableau de s quence s appelle Datafile Quand elle ne contient rien le sch ma de d nomination des fichiers de donn es sp cifi autom
95. donn e U D tection de limite inf rieure de plage 0 D tection de limite sup rieure de plage Comprendre votre ChemStation Agilent 109 4 int gration Caract re 4 Le quatri me caract re d crit le type du pic Le pic est un pic de solvant Le pic est n gatif Le pic est une sommation d aires Pic calcul par int gration tangentielle approximation standard x 1 Z 0 Pic calcul par int gration tangentielle approximation exponentielle ancien mode E Pic calcul par int gration tangentielle approximation exponentielle nouveau mode m Pic d fini par une ligne de base manuelle n Pic n gatif d fini par une ligne de base manuelle t Pic int gration tangentielle d fini par une ligne de base manuelle R Lepic est un pic de solvant recalcul f Pic d fini par une tangente d d paulement de front Pic d fini par une tangente d paulement de tra ne Pic d fini par une projection verticale d paulement de front Pic d fini par une projection verticale d paulement de tra ne cCc n S Pic non attribu 110 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Mesure de l aire du pic La derni re tape dans l int gration du pic consiste d terminer son aire finale Les aires de pic sont calcul es partir du contenu du fichier de points cardinaux Les points cardinaux sont ceux choisis par l int grateur pour d finir et quantifier un pic voir Identificati
96. e La vue Concepteur de rapports permet l utilisateur de d finir graphiquement la disposition d un style de rapport sp cifique par la m thode des objets graphiques Elle utilise aussi un ensemble de barres d outils sp cifique cette t che Acquisition des donn es Le statut de l instrument est supervis et mis jour en permanence sur l affichage parall lement au temps d ex cution coul de l analyse et ce aussi bien quand le logiciel est visible dans une fen tre que lorsqu il est repr sent par une ic ne Les transactions survenant pendant l analyse y compris les erreurs ventuelles et les conditions de l instrument au d but et la fin de l analyse sont enregistr es dans le journal du syst me dont un extrait est stock avec chaque fichier de donn es Les conditions de l instrument telles que le d bit la temp rature la pression et la composition du solvant pour les chromatographes en phase liquide peuvent tre enregistr es et stock es avec chaque fichier de donn es Ces param tres peuvent tre affich s et trac s pour t moigner de la qualit de chaque analyse La nature exacte des param tres enregistr s d pend d une part de la technique et d autre part des possibilit s de l instrument configur Une ou plusieurs fen tres d affichage peuvent tre utilis es pour superviser en temps r el les donn es acquises par l instrument Les donn es sont affich es en unit s de mesure
97. e e les temps de r tention migration dans le tableau d talonnage pour les pics talonn s qui ne sont pas des pics de r f rence e la fen tre de temps de r tention migration sp cifi e pour ces pics normaux pas de r f rence non reference et e la pr sence d ventuels pics de qualification suppl mentaires dans les rapports corrects 138 Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 R gles de correspondance des pics Les r gles suivantes s appliquent au processus de correspondance des pics si un pic d chantillon se situe dans la fen tre de correspondance d un pic de composant provenant du tableau d talonnage il re oit les attributs de ce composant si plus d un pic d chantillon se situent dans la fen tre de correspondance le pic le plus proche du temps de r tention migration pr vu est identifi comme ce composant si un pic correspond une r f rence ou un talon interne le pic le plus grand dans la fen tre est identifi comme tant celui de ce composant si des qualificateurs de pics sont aussi utilis s le rapport du pic est utilis conjointement la fen tre de correspondance des pics pour identifier le pic du composant si le pic est un pic qualificateur le pic mesur le plus proche du pic principal du compos est identifi et si un pic d chantillon ne se situe dans aucune fen tre de correspondance des pics il figure dans la liste des compos
98. e Les temps de r tention migration pr vus de tous les autres pics dans le tableau d talonnage sont corrig s proportionnellement au rapport entre le temps de r tention migration pr vu et le temps de r tention migration r el du pic de r f rence Comprendre votre ChemStation Agilent 143 144 Identification des pics Pics de r f rence multiples La correction des temps de r tention migration avec un pic de r f rence unique est bas e sur le postulat que l cart du temps de r tention migration r el par rapport aux temps de r tention migration pr vus change de mani re uniforme et lin aire pendant le d roulement de l analyse Or pendant une longue analyse il est fr quent que les temps de r tention migration changent de mani re non uniforme Dans de tels cas il vaut mieux utiliser des pics de r f rence multiples espac s certains intervalles pendant l analyse Le signal est ainsi divis en zones s par es A l int rieur de chaque zone l cart entre les temps de r tention migration est suppos changer de mani re lin aire mais la vitesse de changement est d termin e s par ment pour chaque zone L algorithme de correction du temps peut chouer si les temps de r tention de pics de r f rence multiples sont trop proches les uns des autres et ne sont pas distribu s sur la totalit du temps d analyse Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Qualificateurs des pics
99. e consultez le Chapitre 4 Int gration section Largeur du pic la page 88 Filtres de reconnaissance de pic L int grateur comporte trois filtres de reconnaissance de pic qu il utilise pour reconna tre les pics en d tectant des variations de la pente et de la courbure dans un ensemble de points de donn es contigus Ces filtres contiennent la d riv e premi re pour mesurer la pente et la d riv e seconde pour mesurer la courbure des points de donn es analys s par l int grateur Les filtres de reconnaissance sont Filtre 1 Pente courbure de deux trois points de donn es contigus Filtre 2 Pente de quatre points de donn es contigus et courbure de trois points de donn es non contigus Filtre3 Pente de huit points de donn es contigus et courbure de trois points de donn es non contigus Comprendre votre ChemStation Agilent 89 4 Int gration Le filtre r el utilis est d termin par le r glage de largeur du pic Par exemple au d but d une analyse le filtre 1 peut tre utilis Si la largeur de pic augmente pendant l analyse le filtre passe au filtre 2 puis au filtre 3 Pour que les filtres de reconnaissance soient performants la largeur du pic doit tre r gl e proche de la largeur des pics chromatographiques lectroph rographique r els Pendant l analyse l int grateur met jour la largeur de pic si n cessaire pour optimiser l int gration L int grateur calcule la largeur
100. e analyse dans le cadre de la m thode lorsque la case Check Purity est coch e lors de la sp cification d une recherche en biblioth que automatis e ou qu un style de rapport appropri est s lectionn Voir le manuel Comprendre votre module de traitement de spectre pour plus d informations Rapport imprim Un rapport contenant les identit s et les quantit s de composants d tect s dans l analyse est g n r Analyse personnalis e des donn es Vous permet d ex cuter vos propres macros personnalis es pour valuer vos donn es analytiques Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Enregistrement des donn es BPL Enregistre le registre binaire GLPSave Reg en m me temps que la m thode d analyse des donn es dans le sous r pertoire du fichier de donn es par d faut Cette fonction est destin e prouver l originalit des donn es et la qualit de l analyse individuelle Le fichier binaire GLPSave Reg contient dans un fichier d enregistrement non modifiable prot g les informations suivantes e points d finis pour l instrument peut tre examin sous forme graphique e signaux chromatographique ou lectroph rographique e r sultats de l int gration e r sultats de la quantification e m thode d analyse des donn es et e journal Ces donn es ne sont enregistr es que si la fonction Save GLP Data est activ e en cochant la case dans la liste de contr le Vous pouvez e
101. e des ventuelles erreurs contenues dans ce document ni des dommages directs ou indirects pouvant d couler des informations contenues dans ce document de la fourniture de l usage ou de la qualit de ce document Si Agilent et l utilisateur ont souscrit un contrat crit distinct dont les conditions de garantie relatives au produit couvert par ce document entrent en conflit avec les pr sentes conditions les conditions de garantie du contrat distinct se substituent aux conditions stipul es dans le pr sent document Licences technologiques Le mat riel et le logiciel d crits dans ce document sont prot g s par un accord de licence et leur utilisation ou reproduction sont soumises aux termes et conditions de ladite licence Limitation des droits L utilisation du logiciel dans le cadre d un contrat principal ou de sous traitance avec le Gouvernement am ricain est soumise la r glementation f d rale des Etats Unis r gissant les logiciels informatiques com merciaux DFAR 252 227 7014 juin 1995 ou les produits commerciaux FAR 2 101 a ou les logiciels informatiques sous licences FAR 52 227 19 juin 1987 ou toute r gle mentation ou clause de contrat quivalente L utilisation la duplication ou la publication de ce logiciel est soumise aux termes de la licence commerciale standard d livr e par Agilent Technologies Conform ment la directive FAR 52 227 19 c 1 2 juin 1987 les droits d utilisation acco
102. e et il peut comprendre des sections sur la localisation des pannes les enregistrements syst me et des conseils pour la maintenance du syst me Utilisation du logiciel L utilisateur dispose de deux autres cat gories d informations en ligne La ChemStation poss de une aide en ligne contextuelle et index e de style Windows Elle explique en d tail chaque cran et la signification des param tres de cet cran Les explications d taill es sont compl t es par des graphiques si n cessaire et peuvent tre copi es sur le presse papiers Windows pour tre int gr es dans la propre documentation de l utilisateur ou pour impression La partie Comment faire pour How To de l aide en ligne inclut aussi des listes de contr le des t ches chromatographiques complexes et courantes pour aider les utilisateurs occasionnels installer le syst me correctement Ces listes de contr le sont reli es directement l aide en ligne d taill e Comprendre votre ChemStation Agilent 45 1 Caract ristiques des ChemStations Compr hension des principes Le manuel Comprendre votre ChemStation explique les principes de fonctionnement du logiciel et les algorithmes utilis s dans les manipulations des donn es Personnalisation Si des utilisateurs avertis souhaitent personnaliser le fonctionnement de la ChemStation ou y int grer des fonctions suppl mentaires ils le peuvent en crivant des macros Le manuel de r f rence l men
103. e la hauteur argeur mi hauteur vraie ou 2 35 sigma Voyez la Figure 44 pour plus de d tails Facteur de capacit USP Rapport de capacit ASTM k ne Tr TG To avec TR temps de r tention du pic min To temps mort void time min Facteur de tra ne USP USP t 2 Wso mr avec t distance en min entre le d but du pic TR mesur 5 de sa hauteur voir la Figure 44 page 249 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 W5 0 largeur de pic 5 de sa hauteur min Ligne de base Figure 44 Param tres de mesures des performances Nombre de plateaux th oriques par colonne USP ASTM n M thode tangente USP ASTM T 2 n 16 Wg avec W largeur de base min voir Figure 44 Comprendre votre ChemStation Agilent 249 11 Evaluation de l ad quation du syst me M thode mi largeur ASTM T2 n 5 54 50 avec W5o largeur de pic mi hauteur min voir Figure 44 m thode 5 sigma T 2 n 25 2 W44 avec W4 4 largeur de pic 4 4 de sa hauteur min M thode des variances _ M M2 avec Mx x i me moment statistique voir aussi Moments statistiques page 246 Nombre de plateaux th oriques par m tre N 1 m N 100 x avec n nombre de plateaux th oriques 1 longueur de la colonne cm 250 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quat
104. e ligne de base pour les pics d tect s sur le front ou la tra ne d un autre pic Quand l int gration tangentielle est activ e quatre mod les permettent de calculer les aires des pics correspondants e adaptation de courbe exponentielle e nouvelle approximation exponentielle e segment de droite tangent e combinaison d exponentielles et de segments de droite pour une meilleure adaptation tangente standard Pic parent 14 357 Pics fils Projections Courbe destination exponentielle Ligne de base du pic parent Figure 16 Approximation exponentielle nouveau mode 102 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Adaptation de courbe exponentielle Ce mod le d int gration trace une courbe l aide d une quation exponentielle passant par le d but et la fin du pic fils la hauteur du d but du pic fils est corrig e de la pente du pic parent La courbe passe sous chaque pic fils suivant le pic parent l aire sous la courbe d approximation est soustraite des pics fils et ajout e au pic parent voir Figure 17 14296 14 357 14 144 Figure 17 Approximation exponentielle Segment de droite tangent Ce mod le d approximation trace un segment de droite du d but la fin d un pic fils La hauteur du d but du pic fils est corrig e de la pente du pic parent L aire sous le segment de droite est soustraite du pic fils et ajout e au pic parent voir Figure 18 14 296
105. e pr cision 258 Pour des raisons de validation il peut tre n cessaire de recalculer manuelle ment certains r sultats de la ChemStation par exemple des courbes d talon nage des coefficients de corr lation un nombre de plateaux th oriques etc Il devient alors n cessaire de tenir compte du format interne des nombres de ChemStation Pour tous les nombres enregistr s par la ChemStation le format interne de type C DOUBLE est utilis Cela signifie que 14 chiffres significatifs sont enregistr s pour chaque nombre L impl mentation de ce type de donn es est conforme l impl mentation de Microsoft de la norme IEEE pour les nombres de type C ainsi qu aux r gles associ es voir les documents Microsoft Q42980 Q 145889 et Q 125056 Etant donn le nombre non limit de param tres qui peuvent tre utilis s pour le calcul d une table d talonnage il n est pas possible de calculer exactement l erreur qui r sulte des arrondis et de leur accumulation Des tests pouss s conduits sur les diff rents types de courbe d talonnage ont cependant montr qu une pr cision de 10 chiffres significatifs peut tre garantie En consid rant que les aires les hauteurs et les temps de r tention font g n ralement preuve d une r p tabilit de 3 chiffres significatifs une pr cision de 10 chiffres sur le r sultat est suffisante C est la raison pour laquelle les tables en g n ral et les tables d talonnage en parti
106. e quantit l identification du pic est indiqu e dans le rapport Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Temps de r tention migration absolu La fen tre de temps de r tention migration est utilis e dans le processus de correspondance des pics Cette fen tre est centr e sur le temps de r tention migration pour un pic pr vu Tout pic d chantillon qui se situe dans cette fen tre peut tre consid r comme candidat pour l identification du composant La Figure 29 montre une fen tre de temps de r tention migration pour le pic 2 situ entre 1 809 et 2 631 minutes dans laquelle le temps de r tention migration pr vu est de 2 22 minutes Il existe deux possibilit s pour le pic 2 l une 1 85 minutes et l autre 2 33 minutes Si le pic pr vu n est pas un pic de r f rence le pic le plus proche du temps de r tention migration pr vu de 2 22 minutes est s lectionn Si le pic pr vu correspond une r f rence ou un talon interne le pic le plus grand dans la fen tre est s lectionn Dans les deux cas la ChemStation s lectionne le pic 2 33 minutes Si les deux pics taient de m me taille le plus proche du centre de la fen tre serait choisi Pici Pic2 Pic3 Pic4 raw 1 809 2 631 Fen tre pour le pic 2 Figure 29 Fen tres de temps de r tention migration Comprendre votre ChemStation Agilent 141 142 Identification des pics Trois types de fen tre int
107. e r talonnage 166 Pourquoi r talonner 166 R talonnage manuel 167 R talonnage avec addition des pics Options de r talonnage 167 M thodes de r talonnage 168 R talonnage des pics non identifi s 8 Automatisation 171 Qu est ce que l automatisation 173 Qu est ce qu une s quence 174 Param tres de s quence 175 Tableau de s quence 176 Cr ation des s quences 177 Sommaire 160 167 169 Utilisation de l diteur de table de s quence 177 Utilisation du bouton Insert Vial Range 177 Utilisation du bouton Append Line Travailler avec des s quences 178 Echantillons prioritaires 178 177 Pour effectuer une s quence avec des chantillons de contr le 178 Pour arr ter une s quence 178 Comprendre votre ChemStation Agilent 11 Sommaire Pour interrompre une s quence 178 Pour suspendre une s quence 179 Pour ex cuter partiellement une s quence 179 Fichier journal de s quence 181 Que se passe t il lorsqu une s quence est ex cut e 182 Pour nommer des fichiers de donn es dans une s quence 183 Pour nommer des fichiers de donn es automatiques pendant une s quence 183 Pour entrer des noms de fichiers de donn es manuellement 184 Fonctionnement apr s s quence 186 Not Ready Timeout CPL et EC seulement 186 Wait Time CPL et EC seulement 186 R talonnage automatique 187 Pour sp cifier des r talonnages 188 Param tres de r talonnage dans le t
108. ection Partie du fichier quand Save GLP Data est sp cifi La m thode peut tre stock e avec les fichiers r sultats Auquel cas le r pertoire des m thodes est stock en tant que sous r pertoire dans le r pertoire des fichiers des donn es Comprendre votre ChemStation Agilent 3 Acquisition des donn es Moniteurs en ligne Il existe deux types de moniteurs en ligne le moniteur de signaux en ligne et le moniteur de spectres en ligne Moniteur de signaux en ligne Le moniteur de signaux en ligne vous permet de superviser plusieurs signaux et si l instrument associ le permet le trac de performances de l instrument dans la m me fen tre Vous pouvez facilement s lectionner les signaux que vous souhaitez visualiser et ajuster les axes de temps et d absorbance Pour les d tecteurs qui supportent cette fonction un bouton Balance est disponible Vous pouvez afficher la r ponse de signal absolu dans la ligne de message en d pla ant le curseur en forme de viseur dans l affichage Moniteur de spectres en ligne Le moniteur de spectres en ligne n est disponible que pour les ChemStations qui supportent l valuation spectrale Il montre l absorbance en tant que fonction de la longueur d onde Vous pouvez ajuster la fois la gamme de longueurs d onde affich e et l chelle d absorbance 70 Comprendre votre ChemStation Agilent Acquisition des donn es 3 Logbook Le journal affiche les message
109. ent aux normes de qualit ISO 9001 Elle est document e avec les protocoles de revalidation sur site dans le classeur de validation Agilent ChemStation pour CPL Sp cification et utilisation des m thodes e M thodes globales la sp cification d instrument et d analyse de donn es compl te est stock e en un endroit Les m thodes incluent des sp cifications de gammes de compos s individuels permettant de v rifier que les r sultats de quantification ne se situent pas hors de la gamme talonn e e Le journal d historique des changements de m thode permet aux utilisateurs d une m thode valid e d enregistrer automatiquement comment et quand une m thode a t chang e Les utilisateurs peuvent ajouter un motif en commentaire au journal d historique des changements Ce dernier est automatiquement stock avec la m thode dans un format binaire Pour emp cher tout acc s non autoris aux enregistrements il est prot g par le sch ma d acc s utilisateur d crit ci apr s Ce journal peut tre visualis et imprim e Il est possible d attribuer des limites compos par compos dans chaque m thode pour un certain nombre de param tres de performances chromatographiques lectroph rographique et de performances syst me comme d crit dans la section sur la quantification d analyse des donn es Les r sultats qui exc dent ces plages de param tres servent contr ler l ex cution des s quences automatis es co
110. ent de tranches d int gration 90 L algorithme de reconnaissance du pic 92 Calculs non Gaussiens 95 Attribution de la ligne de base 97 Construction de la ligne de base par d faut 97 Le d but de la ligne de base 98 Graduations 98 La fin de la ligne de base 98 P n tration de la ligne de base 99 Advanced Baseline Tracking Suivi volu de la ligne de base 100 Int gration tangentielle 102 Pics non attribu s 108 Codes de s paration des pics 109 Caract res 1et2 109 Caract re 3 109 Caract re 4 110 Mesure de l aire du pic 111 D termination de l aire 112 Unit s et facteurs de conversion 113 Ev nements d int gration 114 Ev nements initiaux 114 Largeur du pic 115 Rejet de hauteur et de largeur de pic 116 Optimisation de l int gration 116 Ev nements chronoprogramm s 117 8 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Auto int gration 118 Description g n rale 118 Principes de fonctionnement 118 Param tres d auto int gration 119 Int gration manuelle 120 Description g n rale 120 Codes de s paration de pics pour les pics int gr s manuellement 121 Documentation des v nements d int gration manuelle 121 5 Quantification 123 Qu est ce que la quantification 124 Calculs de quantification 125 Facteurs de correction 126 Facteur de r ponse absolu 126 Multiplicateur 126 Facteur de dilution 126 Quantit d chantillon 127 Proc dures de calculs non talonn s 128 Aire et Hauteur 128 Proc du
111. ent du syst me Le kit de v rification de la ChemStation qui fait partie du logiciel standard v rifie automatiquement l installation et le fonctionnement corrects des l ments d valuation de donn es du logiciel en comparant les r sultats du test des valeurs connues pr enregistr es Le kit permet aux utilisateurs de d finir leurs propres fichiers de donn es et de m thodes pour conduire le test Tra abilit originalit et qualit des donn es Le journal d ex cution fournit un journal des transactions de tout le syst me Il enregistre galement tout v nement inhabituel tels que des erreurs ou des changements effectu s pendant une analyse ainsi que les conditions de l instrument avant et apr s chaque analyse Une copie de l extrait pertinent du journal est enregistr e avec chaque fichier de donn es Les conditions r elles de l instrument telles que la pression le d bit et la temp rature utilis es pendant chaque analyse sont galement enregistr es si l instrument configur le permet Ces donn es peuvent ensuite tre affich es graphiquement avec le chromatogramme lectroph rogramme pour montrer les conditions r elles de l instrument pendant cette analyse particuli re elles peuvent aussi tre incluses dans le rapport Les m thodes sauvegard es avec le fichier de donn es enregistrent la m thode utilis e au moment de l analyse et permettent la reconstruction compl te des donn es rapp
112. ention attendu Aire Hauteur Largeur int grateur Sym trie Largeur mi hauteur mi hauteur de pic Performance amp Performance tendue Extended Facteur de tra ne Performance amp Performance tendue S lectivit Performance amp Performance tendue K Performance tendue Largeur de pic aux tangentes Performance tendue Inclinaison Performance tendue Nombre de plateaux th oriques mi hauteur Performance amp Performance tendue Extended Nombre de plateaux th oriques tangentes Performance tendue Nombre de plateaux th oriques 5 Sigma Performance tendue Nombre de plateaux th oriques statistiques Performance tendue Comprendre votre ChemStation Agilent 259 11 Evaluation de l ad quation du syst me e R solution mi hauteur Performance amp Performance tendue e R solution tangentes Performance tendue e R solution 5 Sigma Performance tendue e R solution statistiques Performance tendue Entrez sur la ligne de commande DUMPTABLE CHROMRES PEAK C CHEM32 1 TEMP PEAK TXT Donn es des compos s trait s e Quantit calcul e Entrez sur la ligne de commande DUMPTABLE CHROMRES COMPOUND C CHEM32 1 TEMP COMPOUND TXT Donn es des tables d talonnage e Num ro de niveau Level Quantit e Aire e Hauteur Entrez sur la ligne de commande DUMPTABLE _DAMETHOD CALPOINT C
113. enveloppe de la ligne de base et que la courbure de la ligne de base d passe une certaine valeur d finie par le param tre de seuil de l int grateur Si cette condition persiste l int grateur reconna t le front montant d un pic le pic est alors trait D but 1 Pente et courbure dans la limite suivre la ligne de base 2 Pente et courbure au dessus de la limite possibilit d un pic 3 La pente reste au dessus de la limite pic reconnu point cardinal d fini 4 La courbure devient n gative point d inflexion avant Sommet 5 La pente passe par z ro et devient n gative sommet du pic point cardinal d fini 6 La courbure devient positive point d inflexion arri re Fin 7 Pente et courbure dans la limite la fin du pic est proche 8 La pente et la courbure restent dans la limite fin du pic point cardinal d fini 9 L int grateur revient en mode suivi de la ligne de base 84 Comprendre votre ChemStation Agilent Terminologie Int gration 4 Points cardinaux sommet du pic point d inflexion point d inflexion point de ligne de base de base coordonn e coorconnee Veruoale horizontale de point de point hauteur temps coul point de ligne Figure 5 Points cardinaux Les points cardinaux sont ceux choisis par l int grateur pour d finir et quantifier un pic Les points de ligne de base les points de vall e le sommet du pic et les points d inflexion sont d s
114. er l int grit de l int gration et des r sultats de quantification Vous pouvez utiliser le test de v rification standard ou d finir vos propres tests en utilisant diff rents fichiers de m thodes et de donn es Le test de v rification est un fichier prot g qui ne peut tre ni modifi ni supprim La rubrique V rification dans la vue d analyse des donn es vous permet de choisir l une des options suivantes e ex cution d un test de v rification dans la base de donn es e d finition d un nouveau test de v rification et son adjonction la base de donn es et e suppression d un test de v rification de la base de donn es La section Comment faire pour du syst me d aide en ligne d crit l ex cution de ces t ches Lorsque vous effectuez un test de v rification de la ChemStation vous pouvez effectuer le test en totalit ou s lectionner une combinaison de ses l ments Les r sultats du test sont enregistr s en format binaire dans le sous r pertoire c chem32 1 Verify conjointement aux fichiers de m thodes et de donn es Le sous r pertoire Verify se trouve au m me niveau que les sous r pertoires de s quence de m thodes et de donn es Les r sultats du test peuvent tre imprim s ou enregistr s dans un fichier Les r sultats du test y compris un r sultat de test de v rification combin e sont consid r s concluants ou non concluants Comprendre votre ChemStation Agilent
115. ertoire o sont stock es les donn es de la s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 181 Automatisation Que se passe t il lorsqu une s quence est ex cut e 182 e S il fonctionne avec un chantillonneur automatique le logiciel ChemStation trouve d abord l chantillon dans le passeur automatique d chantillons d apr s le num ro entr dans la colonne vial L instrument est charg avec les param tres de m thode e La macro pr analytique est ex cut e e L chantillon est ensuite inject dans l instrument manuellement ou automatiquement e Les donn es de m thode sont valu es Int gration quantification y compris toute macro sp cifi e par l utilisateur e La macro post analytique est ex cut e e Pendant tout le processus la ChemStation suit la progression de la s quence en temps r el et produit un fichier journal de s quences Etat de la ChemStation _ Injection Macro post analytique Evaluation des donn es Injection et analyse par l instrument Macro pr analytique M thode de chargement Fichier ferm des donn es brutes S quence de d but gt Niveaux de statut Figure 38 Etat de la s quence Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Pour nommer des fichiers de donn es dans une s quence L attribution de noms des fichiers de donn es dans une s quence peut se faire par les m tho
116. erviennent dans la localisation des pics e les fen tres de pic de r f rence qui ne s appliquent qu aux pics de r f rence e les fen tres de pic normaux pas de r f rence qui s appliquent tous les autres pics talonn s et e les fen tres avec valeurs sp cifiques pour des composants individuels d finis dans la bo te de dialogue Compound Details Les valeurs par d faut pour ces fen tres sont introduites dans la bo te de dialogue Calibration Settings La largeur d un c t quelconque du temps de r tention migration qui d finit la fen tre de correspondance des pics est la somme des fen tres absolues et de pourcentage Une fen tre de 5 signifie que le pic doit avoir un temps de r tention migration de 2 5 que le temps de r tention migration talonn pour ce pic Par exemple un pic avec un temps de r tention migration de 2 00 dans l analyse d talonnage doit appara tre entre 1 95 et 2 05 minutes dans les analyses suivantes Par exemple une fen tre absolue de 0 20 minutes et une fen tre relative de 10 donnent une fen tre de temps de r tention migration se situant entre 1 80 et 2 20 minutes 1 80 min 2 00 min 0 10 min 0 20 min 2 0 10 min 10 de 2 00 min 2 20 min 200 min 0 10 min 0 20 min 2 0 10 min 10 de 2 00 min Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Temps de r tention migration corrig s Etablir la correspondance entre des p
117. es de contr le sont affich es dans la table de lots chantillons et chantillons d talonnage tant cach s la table des compos s affiche des colonnes suppl mentaires pour toutes les limites de contr le d finies Pour les colonnes contenant des informations sp cifiques concernant les compos s il vous est possible d inclure les noms des compos s dans l en t te en ajoutant s la sp cification de colonne Rapport de lot Le rapport de lot comprend deux tables qui sont g n ralement analogues la table de lots et la table des compos s ces tables sont configurables par l op rateur Pour les colonnes contenant des informations sp cifiques concernant les compos s il vous est possible d inclure les noms des compos s dans l en t te en ajoutant s la sp cification de colonne Les en t tes multilignes sont permises il suffit d ins rer le caract re au point o vous voulez aller la ligne Comprendre votre ChemStation Agilent La revue des lots 9 Interface utilisateur Pour la revue par lot on dispose de deux interfaces utilisateur e l interface standard comprend une ligne de boutons ces boutons refl tent la plupart des l ments du menu Batch ainsi que d autres r serv s la table de lots et la table de compos s e une interface minimale comprenant la m me ligne de boutons que ci dessus mais dans laquelle la table de lots et la table de compos s sont remplac es par une
118. es fichiers de sequence dans ces r pertoires ont une extension S Comprend les fichiers de donn es les m thodes et les r sultats du traitement des donn es stock es dans les fichiers d enregistrement REG Ces fichiers ex cutent la proc dure de v rification d crite dans l aide en ligne de la ChemStation Un jeu de fichiers de donn es de m thodes et de registres est utilis pour chaque test de v rification Le sous r pertoire TEMP comprend les fichiers de travail temporaires et les fichiers journal Par exemple pour l instrument 1 le journal en ligne s appelle INSTR1 LOG et le journal hors ligne s appelle INSTR1 2 L0G Code sp cifique au gestionnaire d instrument tel que des fichiers INI Ces r pertoires ne sont pr sents que si un instrument de ce type est install Comprend des biblioth ques spectrales ChemStations pour syst mes CPL syst mes de couplage CPL MS et syst mes d lectrophor se capillaire EC seuls Comprendre votre ChemStation Agilent 49 1 50 Caract ristiques des ChemStations La structure des r pertoires ChemStation Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 2 M thodes Qu est ce qu une m thode 52 Parties d une m thode 53 Information de m thode 53 Contr le d instrument 53 Analyse des donn es 54 Liste de contr le d ex cution 55 Etat des m thodes 56 M thode stock e 56 M thode en cours 56 Cr
119. es ou de nouvelles donn es entr es dans le tableau d chantillon de la s quence Les s quences peuvent tre suspendues pour ex cuter des chantillons prioritaires ne n cessitant qu une seule injection par une autre m thode puis relanc es sans perturber l automatisation Il est possible d ajouter des chantillons au tableau de s quence pendant que la s quence s ex cute Les tableaux de s quence et de s quence partielle peuvent tous deux tre imprim s Pour des informations compl mentaires sur les s quences voir le Chapitre 8 Automatisation et consulter l aide en ligne du syst me Bonnes pratiques de laboratoire BPL La ChemStation est conforme aux normes de conception et de d veloppement internationales et poss de des fonctions qui aident les utilisateurs travailler dans un environnement r gul Ces fonctions se situent dans le domaine de la sp cification de m thode compl te et de la v rification de l ad quation des m thodes l usage pr vu de la v rification du fonctionnement du syst me et de la garantie de la tra abilit de l originalit et de la qualit des donn es Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Processus de d veloppement Le certificat de validation joint tout envoi de logiciel documente le d veloppement ainsi que les tapes de test du cycle de d veloppement La proc dure de d veloppement est enregistr e conform m
120. es par t che y compris l int gration l talonnage le rapport l annotation et les outils de comparaison de signaux Les principales op rations graphiques suivantes sont possibles e affichages mono signal ou multi signal s lectionnables au moment du chargement du chromatogramme lectroph rogramme e superpositions overlays de chromatogrammes lectroph rogramme provenant de diff rents chantillons e soustraction d un chromatogramme lectroph rogramme d un autre e alignements vertical et horizontal graphiques des signaux pour aider la comparaison visuelle e inversion ou duplication miroir des signaux pour aider la comparaison visuelle e zoom et fonctions de d filement graphique e ajustement des attributs d affichage y compris la s lection des graduations des lignes de base des axes des temps de r tention migration et des noms de compos s l utilisateur peut aussi s lectionner la position pour le RT et les libell s de compos s ajuster la taille et l orientation de l affichage s lectionner l affichage en mode superposition ou s par et s lectionner les facteurs d chelle Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 e l affichage du chromatogramme lectroph rogramme peut inclure des superpositions graphiques des param tres de l instrument selon la possibilit de l instrument configur e des annotations d finies par l utilisateu
121. es rapports d ad quation du syst me permettent aux utilisateurs de fournir des param tres de performances du syst me pour des analyses individuelles Ces rapports existent en trois variantes ou styles Le style Standard Performance contient des param tres pour les m thodes non talonn es et notamment e temps de r tention migration e le facteur de capacit K e l aire des pics e la hauteur des pics e la sym trie e largeur de pic r elle mi hauteur e efficacit en nombre de plateaux th oriques e r solution et e s lectivit Pour des m thodes talonn es le nom et la quantit du compos remplacent les colonnes aire du pic hauteur et s lectivit L en t te du rapport inclut l en t te et le bas de page standard le bloc d informations d chantillon les param tres de colonnes analytiques et facultativement un trac du chromatogramme lectroph rogramme Le style de rapport Performance and Noise ajoute aux donn es provenant du style de rapport Performance une valuation du bruit du signal dans un maximum de sept gammes d valuation d finies par l utilisateur Les param tres de bruit sont rapport s sous la forme de rapports signal bruit pour chaque pic ou compos talonn et d un tableau de bruit pour chaque signal Chaque tableau de bruit inclut le bruit calcul par six fois l cart type les m thodes pic pic et ASTM ainsi que la variation moyen terme et la
122. es s quences Evaluation de l ad quation du syst me V rification du syst me Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Caract ristiques des ChemStations 17 Description g n rale 18 Modules d instrument additionnels 19 Modules additionnels d valuation des donn es 20 Modules d di s l valuation de donn es 21 Mat riel ChemStation 22 A propos du logiciel ChemStation 23 Syst me d exploitation 23 M thodes et s quences 23 Configuration du syst me 23 Mod le de donn es 24 Conventions de noms de fichiers 25 Interface utilisateur du logiciel 28 Acquisition des donn es 29 Analyse des donn es Affichage 30 Analyse des donn es Int gration 31 Possibilit s d int gration 31 Analyse des donn es Quantification 33 Analyse des donn es Rapport standard 33 Analyses des donn es Rapport sp cifique 34 Utilitaires et compatibilit s 37 Personnalisation 38 Automatisation 39 Bonnes pratiques de laboratoire BPL 40 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Contr le des instruments 44 La mise en r seau 44 Documentation 45 La structure des r pertoires ChemStation 47 M thodes 51 Qu est ce qu une m thode 52 Parties d une m thode 53 Information de m thode 53 Contr le d instrument 53 Analyse des donn es 54 Liste de contr le d ex cution 55 Etat des m thodes 56 M thode stock e 56 M thode en cours 56 Cr ation de ces m thodes 57 Modification des m thodes 5
123. et de la distribution normale gaussienne sont identiques En cons quence au del de 30 chantillons la distribution normale peut tre utilis e en lieu et place de la distribution de Student il devient extr mement difficile de calculer la distribution t pour un grand nombre d chantillons la distribution normale est une excellente approximation intervalle de confiance de 95 pour 6 chantillons 1 a 0 95 Comprendre votre ChemStation Agilent 255 11 Evaluation de l ad quation du syst me N 6 la valeur correcte de t doit tre prise dans la table de distribution t pour 5 N 1 degr s de libert et pour la valeura 2 tant gal 0 025 Cela donnerait pour CI la formule de calcul suivante CI 2571 Su Analyse de r gression Soit N nombre d observations discr tes X variable ind pendante i observation Y variable d pendante i observation Fonction lin aire Yx 4 bX Coefficients N N N N 1 2 CRR gt gt gt X DAY X i 1 i l i l i 1 N N N 1 d gt XY gt Xr XY X i 1 i 1 i l avec 256 Comprendre votre ChemStation Agilent Coefficient de r gression i 1 i l AA r avec Ecart type S 2 5 Y a bX S N 2 Comprendre votre ChemStation Agilent w S XY S x 3 r Evaluation de l ad quation du syst me 11 257 11 Evaluation de l ad quation du syst me Acc s aux nombres internes enregistr s en doubl
124. eur tat de l instrument 73 signal 70 multiples pics de r f rences 144 multiplicateur 126 131 multipoint talonnage 158 s quences cycliques 194 no update pas de mise jour 189 nom fichier de s quence 183 nombre de plateaux 249 Comprendre votre ChemStation Agilent Indice non lin aires ajustements de la courbe 160 Norm calcul 132 rapport 132 221 not ready timeout 186 0 origine connecter 162 forcer 162 ignorer 162 inclure 162 traitement 162 P pause s quence 179 p n tration de la ligne de base 99 pente 86 performance du syst me limites 235 statistiques 234 performances d finitions des tests 246 personnalisation 38 analyses des donn es 64 personnalis e rapports 36 pic fen tres des temps de r tention 142 hauteur 128 identification 63 138 processus d identification 148 puret de pic 64 qualificateurs 139 140 145 quantification 63 124 r gles de correspondance 139 r ponse 146 sym trie 242 temps de r tention 143 273 Indice pics de r f rence uniques 143 pics de r f rences multiples 144 trouver 148 unique 143 utilisation 143 pics de solvant 85 112 pics fusionn s 95 pics n gatifs 83 pics non attribu s 108 pics non identifi s classification 148 r talonnage 169 poids gal 162 lin aire 162 points d talonnage 162 quadratique 162 points cardinaux 84 85 post analytique comman
125. ez le rapport sur l imprimante du syst me Print individual reports for each run active aussi l impression de rapports d chantillon apr s chaque analyse Ces rapports viendront s ajouter ceux sp cifi s pour le rapport r sum des s quences produits la fin de la s quence globale Vous pouvez sp cifier une nouvelle destination pour ces rapports dans la bo te de Sequence Output ou bien utiliser la destination sp cifi e dans les m thodes individuelles 232 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 11 Evaluation de l ad quation du syst me D termination du bruit 237 Calcul de bruit avec six fois l cart type 237 Calcul de bruit par la formule de pic pic 238 Calcul de bruit par la m thode ASTM 239 Calcul de rapport signal sur bruit 241 Calcul de la sym trie des pics 242 D rive et variation moyen terme 241 Formules et calculs de v rification de performance du syst me 244 D finitions g n rales 245 D finitions des tests de performances 246 Volume mort 245 Temps de r tention du composant non retenu t m min 245 Moments statistiques 246 Largeur de pic vraie Wx min 248 Moments statistiques inclinaison et exc s 247 Facteur de capacit USP Rapport de capacit ASTM k 248 Facteur de tra ne USP USP t 248 Nombre de plateaux th oriques par colonne USP ASTM n 249 Nombre de plateaux th oriques par m tre N 1 m 250 R
126. fications de colonnes le capillaire analytiques Sequence Table S lectionnez Sequence table pour inclure dans le rapport une liste des chantillons les param tres de quantification et les noms de m thodes Cette liste correspond ce que le syst me aurait d analyser Logbook S lectionnez Logbook pour obtenir la liste des analyses effectu es par le syst me y compris les conditions d instrument et les ventuels v nements inhabituels survenus pendant l analyse des chantillons M thodes S lectionnez Methods pour obtenir la liste de toutes les m thodes analytiques utilis es dans la s rie des analyses automatis es Analysis Reports S lectionnez Analysis pour obtenir les rapports d analyse individuels d apr s le style de rapport d fini pour la m thode Les rapports analytiques individuels peuvent s imprimer apr s chaque analyse d apr s le style de rapport sp cifi pour la m thode en question en plus des sections du rapport sp cifi es dans le rapport r sum des s quences Voir la Sp cification de sortie la page 232 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 10 Statistics for Calibrated and Sample Runs En s lectionnant Statistics cal runs vous obtiendrez les analyses de tendances statistiques pour les chantillons d talonnage En s lectionnant Statistics vous produirez les analyses de tendances statistiques pour
127. finir les informations d crivant la m thode Contr le d instrument D finit les param tres de contr le de l instrument ou ses composants Dans le cas d un instrument CPL des param tres tels que la composition de phase mobile le d bit le volume d injection la longueur d onde du d tecteur etc contr lent la pompe l injecteur et le d tecteur Avec un instrument CPG des param tres tels que la temp rature d entr e la pression d entr e le r glage du d bit de colonne remplie etc contr lent l instrument Comprendre votre ChemStation Agilent 53 2 54 M thodes Analyse des donn es D finit les param tres de contr le du traitement des donn es D tails des signaux D finit les signaux et leurs propri t s utiliser pour l valuation des donn es Ev nements d int gration D finit les v nements fonction du temps chronoprogramm s qui se produiront des temps de r tention migration sp cifiques sur un chromatogramme lectroph rogramme Ces v nements modifient la fa on dont l int gration est effectu e Identification des pics D finit les param tres de traitement des donn es associ s l identification des pics dans le chromatogramme lectroph rogramme Quantification des pics D finit les param tres de traitement des donn es qui affectent les calculs de quantification et qui d terminent la quantit ou la concentration du composant
128. finir les points de d but et de fin du pic puis d inclure les aires recalcul es dans les modules de quantification et de rapport Les pics int gr s manuellement sont signal s dans les rapports par le code de s paration de pics M L int gration manuelle offre les fonctions suivantes Sp cifie quand les lignes de base doivent tre trac es pour un pic ou un ensemble de pics Vous pouvez aussi sp cifier si les pics dans la plage donn e doivent tre automatiquement s par s tous les points de vall e Sp cifie quand il faut traiter toutes les aires au dessous de la ligne de base en tant que pics n gatifs Vous pouvez aussi sp cifier si les pics dans la plage donn e doivent tre automatiquement s par s tous les points de vall e Calcule les aires de pics soustraites d un pic principal par l int gration tangentielle L aire du pic soumis l int gration tangentielle est soustraite de l aire du pic principal Sp cifie un point o il faut diviser un pic par une ligne verticale Supprime un ou plusieurs pics des r sultats d int gration Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Codes de s paration de pics pour les pics int gr s manuellement Les pics int gr s manuellement sont tiquet s dans les rapports d int gration par le code de pic MM Sil existe un pic avant le pic int gr manuellement et que la fin de ce pic soit modifi e par l int gration manuelle il re oit le code
129. g ul une courbe d talonnage doit avoir au moins deux points comme illustr dans la Figure 34 Limites de quantit La ChemStation vous permet de d finir les gammes de quantification valides en termes de quantit s absolues pour chaque compos Etalonnage multipoints L talonnage multipoints peut tre utilis lorsqu on peut supposer qu un compos a une r ponse non lin aire ou pour confirmer la lin arit de la gamme d talonnage Chaque point d talonnage correspond un chantillon d talonnage avec une concentration particuli re Les chantillons d talonnage doivent tre pr par s de telle sorte que la concentration de chaque compos varie sur toute la gamme des concentrations pr vues dans les chantillons inconnus Ainsi il est possible de permettre un changement dans la r ponse du d tecteur avec la concentration et de calculer les facteurs de r ponse en cons quence Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Cette courbe d talonnage a trois points et a un ajustement lin aire passant par l origine La m thode de l ajustement lin aire passant par l origine est similaire l talonnage par la m thode un seul point La r ponse du d tecteur la concentration est suppos e tre lin aire La diff rence entre les deux types d talonnage est que avec l ajustement lin aire la pente de la r ponse du d tecteur peut tre d termin e par un meilleur ajustement passan
130. gilent 231 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Summary La s lection Summary imprime une vue d ensemble des s ries d chantillons analys es et des m thodes utilis es Si le choix Summary accompagne d autres s lections Sequence Summary les num ros de pages faisant r f rence aux autres parties du rapport sequence summary sont inclus Il existe deux styles Summary Le Sample Summary pr sente sous forme de tableau les d tails des analyses d chantillon effectu es dans la s quence avec certaines informations d chantillon telles que le nom de l chantillon le nom du fichier de donn es le num ro de la m thode et du flacon Le Compound Summary pr sente sous forme de tableau les analyses d chantillon avec les r sultats de quantification de base pour chaque compos talonn ou chaque pic selon la m thode Sp cification de sortie Dans la bo te de dialogue Sequence output vous pouvez aussi d finir o doit s imprimer le rapport r sum des s quences En s lectionnant Report to file et en entrant un nom de fichier vous envoyez le rapport dans le fichier sp cifi Par d faut les donn es sont enregistr es dans le fichier GLPrprt txt Dans les syst mes CPG avec double injection les donn es sont enregistr es dans GLPrptF txt injecteur avant F pour Front et GLPrptB txt injecteur arri re B pour Back En s lectionnant Report to printer vous imprim
131. gration Replace Remplacer Remplace les temps de r tention migration pr c dents et la r ponse aires ou hauteurs par ceux de l analyse en cours seulement La r ponse ne change pas pour tout pic non trouv dans cette analyse de r talonnage Average Moyenne Etablit les temps de r tention migration pr c dents et les r ponses aires ou hauteurs pour chaque pic en se basant sur l analyse d talonnage originale et tous les r talonnages depuis lors Si un pic manque dans l un des r talonnages la r ponse du pic n en souffrira pas Bracket d limiteur Les chantillons sont d limit s par des talonnages pr et post chantillon L valuation se fait lorsque le dernier chantillon d talonnage de la limite de fermeture a t analys Les donn es d talonnage existantes sont remplac es par le r sultat de l analyse d talonnage de la limite d ouverture La moyenne d talonnage est calcul e ensuite entre la limite d ouverture et la limite de fermeture Comprendre votre ChemStation Agilent 189 8 190 Automatisation Intervalle L intervalle de r talonnage d termine la fr quence d un talonnage pendant une s quence La fr quence d talonnage correspond au nombre d injections d chantillon effectu es avant que ne se d roule le prochain jeu d injections d talonnage Au d but de l analyse un talonnage est effectu et les r sultats facteurs de r ponse sont i
132. i vement ci apr s Les m thodes de calcul pour chaque type de rapport sont donn es dans le Chapitre 5 Quantification Aire fournit le rapport le plus simple et ne requiert aucune donn e d talonnage puisqu il n y a pas de correction pour la diff rence de r ponse du d tecteur aux compos s de l chantillon Le rapport Aire est particuli rement utile dans le d veloppement d un tableau d talonnage destin aux autres options du rapport Il convient aux analyses dans lesquelles la diff rence de r ponse du d tecteur aux diff rents compos s n est pas significative Hauteur donne un rapport similaire au rapport Aire cela pr s que la hauteur du pic et non l aire du pic est utilis e pour les calculs Norm donne un rapport dans lequel chaque compos est rapport en pourcentage de tous les compos s pr sents Les pics sont corrig s pour la r ponse du d tecteur avant le calcul du pourcentage de chacun ESTD produit un rapport de la quantit r elle de chaque substance dans l unit de votre choix Les quantit s sont calcul es en utilisant un tableau d talonnage tabli pr c demment L utilisation d un talon externe requiert que le volume inject du m lange d talonnage soit connu Comprendre votre ChemStation Agilent 221 10 222 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent ESTD produit un rapport de la quantit relative de chaque substance en pourcentage de
133. ic parent Hp sur la Figure 19 la hauteur corrig e de la ligne de base du pic fils Hc sur la Figure 19 Ce rapport doit tre sup rieur la valeur indiqu e pour que le pic fils soit int gr Hp v Hc Figure 19 Crit res d int gration Vous pouvez d sactiver l estimation exponentielle dans toute l analyse en d finissant la valeur du rapport hauteur tra ne une valeur tr s lev e ou z ro Rapport hauteur vall e C est le rapport de la hauteur du pic fils au dessus de la ligne de base Hc sur la Figure 19 la hauteur de la vall e au dessus de la ligne de base Hv sur la Figure 19 Ce rapport doit tre inf rieur la valeur indiqu e pour que le pic fils soit int gr Calcul d adaptation de courbe exponentielle pour les estimations L quation ci dessous permet de calculer une approximation exponentielle voir Figure 20 Hb Hoxexp Bx Tr To AXTr C o Hb hauteur de l estimation exponentielle au temps Tr Ho hauteur au dessus de la ligne de base du d but de l approximation exponentielle B facteur de d croissance de la fonction exponentielle Comprendre votre ChemStation Agilent 105 4 int gration To temps correspondant au d but de l approximation exponentielle A pente de la ligne de base du pic parent C ordonn e l origine de la ligne de base du pic parent 13 934 14 296 14 357 14 144 Figure 20 Valeurs utilis es pour ca
134. ics par les temps de r tention migration absolus est peut tre simple mais pas toujours fiable En effet les temps de r tention migration individuels peuvent varier l g rement par suite d un petit changement de conditions ou de technique De ce fait certains pics peuvent sortir des fen tres de correspondance et seront donc non identifi s Pour prendre en compte les in vitables fluctuations intervenant dans les temps de r tention migration absolus l une des techniques consiste exprimer les temps de r tention migration des composants par rapport un ou plusieurs pics de r f rence Les pics de r f rence sont identifi s dans le tableau d d talonnage par comme une entr e dans la colonne r f rence La technique de correspondance relative utilise le ou les pic s de r f rence pour modifier emplacement des fen tres de correspondance afin de compenser les glissements dans les temps de r tention migration des pics d chantillon Si aucun pic de r f rence n est d fini dans la m thode ou si la ChemStation ne peut identifier au moins un pic de r f rence pendant l analyse le logiciel utilise les temps de r tention migration absolus pour l identification Pics de r f rence uniques Une fen tre de temps de r tention migration pour le pic de r f rence est cr e aux alentours de son temps de r tention migration Le plus grand pic se situant dans cette fen tre est consid r comme le pic de r f renc
135. ign s comme points cardinaux et enregistr s Chaque point cardinal est caract ris par une coordonn e horizontale de temps coul une coordonn e verticale de hauteur partir de la ligne de base et d autres param tres par exemple le type de pic les codes de s paration les valeurs de d but et de fin de pic potentiel ainsi que les hauteurs aires et pentes correspondantes utilis s par l int grateur pour calculer les aires des pics Pic de solvant Le pic de solvant est g n ralement tr s grand mais ne joue aucun r le sur le plan analytique et n est pas int gr habituellement Cependant lorsque de petits pics int ressants analytiquement parlant sont lu s tout pr s du pic de solvant par exemple pendant la tra n e du pic de solvant des conditions d int gration particuli re peuvent tre d finies pour calculer une aire qui tient compte de la tra n e du pic de solvant Comprendre votre ChemStation Agilent 85 4 int gration Epaulements avant arri re Les paulements apparaissent quand deux pics sont si proches qu il n existe plus de vall e entre eux ils ne sont donc pas r solus Les paulements peuvent appara tre sur le front montant avant du pic ou sur le front descendant tra ne du pic Lors de la d tection d paulement il est possible de les int grer par int gration tangentielle ou projection sur la ligne de base Pente La pente d un pic refl te le changement de la concentrati
136. igne de base existe La pente et la courbure sont aussi calcul es Si la pente et la courbure sont toutes deux inf rieures au seuil deux aires somm es sont ajout es et compar es avec la ligne de base pr c dente Si la nouvelle valeur est inf rieure la ligne de base pr c dente cette nouvelle valeur remplace imm diatement la pr c dente Si la nouvelle valeur est sup rieure la pr c dente elle est enregistr e comme valeur possible de nouvelle ligne de base et confirm e si une ou plusieurs valeurs sont conformes aux crit res de pente et de platitude de la courbure Cette derni re limitation n est pas prise en compte si les pics n gatifs sont autoris s Pendant le suivi de la ligne de base un contr le doit aussi tre effectu pour examiner les solvants mont e rapide Ceux ci peuvent tre trop rapides pour la d tection de front montant Au moment o la pente montante est confirm e le crit re de solvant peut ne plus tre valide A la premi re occurrence le premier point de donn es est sur la ligne de base Il est remplac par la moyenne sur 2 T si le signal est sur la ligne de base La ligne de base est ensuite r initialis e chaque p riode T voir Figure 4 la page 82 Comprendre votre ChemStation Agilent 83 4 int gration Identification des points cardinaux d un pic L int grateur d termine qu un pic pourrait tre en cours lorsque les points de ligne de base potentiels se situent hors de l
137. ilit Cet environnement interactif fournit galement un acc s total toutes les autres possibilit s de traitement des donn es comme la puret des pics la recherche en biblioth que etc La revue d un lot utilise les m mes registres d analyse de donn es ChromReg et ChromRes que le traitement standard des donn es et ne doit de ce fait pas tre utilis en m me temps qu une session de retraitement en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent La revue des lots 9 La configuration d un lot Un lot est une s rie de fichiers de donn es choisis par l op rateur et devant tre trait s par une m thode d finie par lui Tous les fichiers de donn es d un lot sont trait s par la m me m thode Les diff rentes tapes de l talonnage d un lot sont mises en oeuvre chaque fois qu un chantillon est charg elles peuvent tre choisies int gration identification quantification gestion des rapports Toutes les analyses d talonnage utilis es dans la revue d un lot sont destin es ne produire qu une seule table d talonnage en calculant la moyenne des facteurs de r ponse cette derni re sera utilis e pour la quantification Table d un lot Les analyses sont plac es dans une table de lots configur e par l utilisateur le nombre et le contenu des colonnes de la table peuvent tre sp cifi s e les analyses peuvent tre tri es par indice chronologique d analyse ordre dans lequel les analyses ont t
138. imeout dans les Sequence Parameters est le laps de temps pendant lequel le syst me attendra que l instrument soit pr t apr s cette dur e le syst me s arr tera Wait Time CPL et EC seulement Sequence Parameters vous permet de sp cifier un temps d attente qui intervient apr s le chargement d une m thode et avant la premi re injection avec celle ci Ceci peut tre utile pour permettre un r quilibrage de la colonne le capillaire lorsque de nouvelles conditions d analyse sont utilis es Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Re talonnage automatique L talonnage se fait souvent apr s un changement des conditions de fonctionnement par exemple apr s le changement d une colonne ou d un capillaire Le r talonnage automatique s effectue g n ralement au d but d une s quence d analyses ou intervalles r guliers pendant une s quence dans le cadre d un programme charg de compenser des facteurs affectant la performance analytique Le r talonnage de s quence automatique peut tre sp cifi de deux mani res e s quences d talonnage explicites ou e s quences d talonnage cycliques Comprendre votre ChemStation Agilent 187 8 Automatisation Pour sp cifier des r talonnages Les param tres de r talonnage pour la s quence sont entr s directement dans le tableau de s quence Ils d finissent comment la m thode est r talonn e pendant une s quen
139. int gration en vous permettant de programmer de nouveaux v nements d int gration des temps appropri s sur le chromatogramme Pour plus d informations voir Ev nements d int gration la page 114 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 D finition de la ligne de base initiale Les conditions de la ligne de base d pendent de l application et du mat riel utilis pour le d tecteur l int grateur utilise donc des param tres provenant de la m thode comme du fichier de donn es pour optimiser la ligne de base Pour que l int grateur puisse int grer des pics celui ci doit tablir un point de ligne de base Au d but de l analyse l int grateur d finit un niveau de ligne de base initiale en prenant le premier point de donn es comme ligne de base provisoire Il essaie ensuite de red finir ce point de ligne de base initial en se basant sur la moyenne du signal d entr e S il n obtient pas un point de ligne de base initial red fini il garde le premier point de donn es comme point de ligne de base initiale potentiel Suivi de la ligne de base L int grateur chantillonne les donn es num riques une fr quence d termin e par la largeur de pic initiale ou par la largeur de pic calcul e au fur et mesure de l analyse Il consid re chaque point de donn es comme un point de ligne de base potentiel L int grateur d termine une enveloppe de ligne de base partir de sa pente
140. ion 8 Qu est ce que l automatisation L automatisation est l analyse de plus d une injection sans intervention de l op rateur La partie s quence du logiciel ChemStation vous permet d automatiser l acquisition l valuation des donn es et la g n ration des rapports Comprendre votre ChemStation Agilent 173 Automatisation Qu est ce qu une s quence 174 Une s quence est une suite d instructions destin es automatiser l analyse des chantillons Vous pouvez utiliser une s quence pour injecter automatiquement chaque chantillon acqu rir et analyser les donn es d apr s la m thode que vous avez sp cifi e pour cet chantillon Chaque flacon d chantillon dans une s quence peut tre analys avec une m thode analytique diff rente et donc utiliser diff rentes combinaisons de conditions chromatographiques lectroph rogra phique et de param tres d valuation Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Param tres de s quence La bo te de dialogue Sequence Parameters contient des informations communes tous les flacons d chantillon dans une s quence Utilisez la pour e entrer des informations concernant le r pertoire de donn es et le nom de l op rateur Le nom de l op rateur introduit dans la bo te de dialogue access level appara t et e sp cifier la mani re d effectuer le traitement de s quence en choisissant des param tres Part of Methods t
141. ion du syst me 11 R tention relative USP ASTM S lectivit Alpha Appartenant aux pics a et b TR du pic a lt TR du pic b k b alpha gt 1 7 a alpha avec K facteur de capacit pour le pic x R solution USP ASTM R Relatif aux pics a et b TR du pic a lt TR du pic b TR en min M thode tangente USP ASTM p ro Tro Wre WB a m thode 5 sigma Re 25 Tri Tra Waac Waa a m thode mi hauteur g 2352 Tr Tro Wsocb Wso a Comprendre votre ChemStation Agilent 251 11 Evaluation de l ad quation du syst me m thode statistique _ Mlo Mla Ws Ws a avec Mlo temps de r tention moyen du pic x 1er moment statistique min WB x largeur de base du pic x min Wa44 largeur 4 4 de la hauteur du pic x min Woo largeur 50 de la hauteur du pic x min Ws x largeur d riv e des moments statistiques M2 pour le pic x voir aussi Moments statistiques page 246 min 252 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 D finitions pour la reproductibilite Pour l examen statistique des donn es analytiques en termes de reproductibilit on consid re la s quence comme un petit chantillonnage al atoire pris parmi l infinit des possibilit s de r sultats exp rimentaux Pour obtenir des r sultats complets il serait n cessaire d ex cuter les calculs sur un nombre infini d chantillons e
142. iques par m tre N 1 m 250 R tention relative USP ASTM S lectivit Alpha 251 R solution USP ASTM R 251 D finitions pour la reproductibilit 253 Moyenne de l chantillon M 253 Echantillon Ecart type S 254 Coefficient de variation RSD USP 254 cart type de la moyenne Sy 254 Confiance CI 255 Analyse de r gression 256 Coefficient de r gression 257 Ecart type S 257 Acc s aux nombres internes enregistr s en double pr cision 258 12 V rification du syst me 261 V rification du syst me 262 Vues de v rification et de diagnostic 265 Le registre GLPsave 266 Fonction de test du d tecteur barrette de diodes 268 Fonction Review DAD Test 268 Indice 271 Comprendre votre ChemStation Agilent 15 Sommaire 16 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 1 Caract ristiques des ChemStations Description g n rale 18 Modules d instrument additionnels 19 Modules additionnels d valuation des donn es 20 Modules d di s l valuation de donn es 21 Mat riel ChemStation 22 A propos du logiciel ChemStation 23 Syst me d exploitation 23 M thodes et s quences 23 Configuration du syst me 23 Mod le de donn es 24 Conventions de noms de fichiers 25 Interface utilisateur du logiciel 28 Acquisition des donn es 29 Analyse des donn es Affichage 30 Analyse des donn es Int gration 31 Possibilit s d int gration 31 Analyse des donn es
143. ire trap zo dale et des hauteurs proportionnelles afin de normaliser et de maintenir la ligne de base la plus basse possible Les entr es dans l algorithme d allocation de la ligne de base incluent galement des param tres provenant des fichiers de m thodes et de donn es identifiant le d tecteur et l application que l int grateur utilise pour optimiser ses calculs Construction de la ligne de base par d faut Dans les cas les plus simples l int grateur construit la ligne de base comme une suite de segments de droite entre e le d but de la ligne de base e les graduations e la fin du pic Graduations Ligne de base Figure 11 Construction de la ligne de base par d faut Comprendre votre ChemStation Agilent 97 4 int gration Le d but de la ligne de base Si aucune ligne de base n est d tect e au d but de l analyse le d but de la ligne de base est d fini d une des mani res suivantes e du d but de l analyse au premier point de ligne de base si le point de d but de l analyse est plus bas que le premier point de la ligne de base e du d but de l analyse au premier point de vall e si le point de d but de l analyse est plus bas que la premi re vall e e du d but de l analyse au premier point de vall e si la premi re vall e p n tre une ligne imaginaire trac e du d but de l analyse la premi re ligne de base e du d but de l analyse une ligne de base horizo
144. isation par les temps de r tention migration et les noms de compos s Comprendre votre ChemStation Agilent 235 11 Evaluation de l ad quation du syst me Un rapport type de test de performance syst me contient les r sultats de performances suivants e les d tails sur l instrument e les d tails sur la colonne le capillaire e la m thode analytique e les informations sur l chantillon e les informations sur l acquisition e la description du signal et la d termination du bruit de la ligne de base et e le signal libell avec des temps de r tention migration ou des noms de compos s En outre les informations suivantes sont g n r es pour chaque compos talonn dans le chromatogramme e les temps de r tention migration k e la sym trie e la largeur du pic e le num ro de plateau e la r solution e le rapport signal bruit et e le nom du compos 236 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 D termination du bruit Le bruit peut tre d termin partir des valeurs de point de donn es provenant d une gamme de temps s lectionn e pour un signal Il est trait de trois mani res diff rentes e quivalent six fois l cart type sd standard deviation de la r gression lin aire de la d rive e comme de pic pic d rive corrig e et e comme d termin par la m thode ASTM ASTM E 685 93 Le bruit peut tre ca
145. iteur de texte GLP Detail Comprend l en t te les informations d chantillon les conditions d instrument le journal le signal les r sultats quantitatifs et les courbes d talonnage L en t te est stock dans un fichier appel RPTHEAD TXT dans le r pertoire des m thodes Pour inclure un texte sp cifique la m thode vous pouvez changer l en t te l aide d un diteur de texte Comprendre votre ChemStation Agilent 223 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent e Full comprend l en t te les informations sur l chantillon les conditions instrumentales le journal les signaux et les r sultats quantitatifs L en t te est stock dans un fichier appel RPTHEAD TXT dans le r pertoire des m thodes Pour inclure un texte sp cifique la m thode vous pouvez changer l en t te l aide d un diteur de texte e Performance Produit un rapport d apr s les limites sp cifi es dans la bo te de dialogue Edit Performance Limits du menu System Suitability Pour les m thodes non talonn es les param tres du rapport incluent le num ro du pic le temps de r tention migration l aire et la hauteur du pic la description du signal la vraie largeur du pic mi hauteur voir galement Largeur de pic vraie Wx min la page 248 la sym trie K l efficacit plateaux et la r solution pour chaque pic Pour les m thodes talonn es les param tres du rapport
146. l chantillon inject Les quantit s sont calcul es en utilisant un tableau d talonnage tabli pr c demment L utilisation d un talon externe requiert que le volume inject du m lange d talonnage soit connu ISTD produit un rapport de la quantit r elle de chaque substance Les quantit s sont calcul es en utilisant une courbe d talonnage tablie pr c demment L utilisation d un talon interne dans l chantillon et dans le m lange d talonnage dispense de conna tre et de contr ler le volume d chantillon inject Cette technique corrige galement tout cart ventuel de performance de l instrument entre les analyses ISTD tablit un rapport de la quantit relative de chaque compos exprim en pourcentage de l chantillon inject L utilisation d un talon interne dans l chantillon et dans le m lange d talonnage dispense de conna tre et de contr ler le volume d chantillon inject Cette technique corrige galement tout cart ventuel de performance de l instrument entre les analyses Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 10 Styles de rapports Les styles de rapports suivants sont disponibles Pour ajouter un signal l un des styles de rapport il vous suffit de cocher la case appropri e dans la bo te de dialogue Specify Report None Aucun texte n appara tra sur le rapport Le chromatogramme y figurera
147. l chantillonnage ou cart type N 1 L cart type Sy de la moyenne M est d termin par S 254 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 Un exemple nous permettra de mieux illustrer notre propos Tandis que le temps de r tention d un certain compos peut pendant une m me s quence varier l g rement autour de la moyenne calcul e pour cette s quence les donn es provenant d une autre s quence pourraient en diff rer notablement par exemple suite un changement de temp rature ambiante une d gradation de la colonne etc pour d terminer cet cart l cart type de la moyenne Sy peut tre calcul selon la formule pr c dente Confiance CI L intervalle de confiance est calcul pour appr cier la qualit de l estimation d une moyenne lorsqu on l applique toute une population et non pas seulement un chantillonnage Le 100 1 intervalle de confiance relatif pour l ensemble de la population est donn par CI Hu 23N 1 Sy avec f 2 N 1 pourcentage de la table de distribution t avec une probabilit d erreur de Q Pour les statistiques tendues du rapport r capitulatif de s quence l intervalle de confiance de 95 peut tre utilis amp 0 05 La distribution t ou distribution de Student doit tre utilis e pour un petit nombre d chantillons Pour un grand nombre d chantillons les r sultats de la distribution t
148. lacons d talonnage appropri il est m me possible de s assurer que chaque flacon d talonnage ne sera utilis qu une seule fois Ceci correspond une demande importante dans les cas o un flacon d talonnage neuf est requis pour chaque talonnage parce que par exemple l analyte s vapore une fois le septum perc ou commence se d grader apr s qu il ait t en contact avec l aiguille en acier La section suivante d crit comment la table de s quence de la ChemStation doit tre d finie pour r pondre ces exigences D terminez en fonction de l utilisation du produit d talonnage pour la totalit de la s quence le nombre total de flacons d talonnage n cessaires pour chaque niveau D finissez une ligne de r talonnage cyclique pour chaque flacon d talonnage Les lignes d finies pour le m me niveau d talonnage doivent tre contigu s dans la s quence et les positions de flacons d finies doivent galement tre contigu s Choisissez un intervalle de r talonnage identique pour toutes les lignes d talonnage Par exemple si vous d sirez que votre s quence effectue un nouveau r talonnage chaque fois que 6 chantillons ont t inject s r glez l intervalle de r talonnage sur 6 Comprendre votre ChemStation Agilent 205 8 Automatisation Tableau 21 S quence de r talonnages cycliques comportant 3 flacons d finis pour chaque niveau Flacon Nom de Type Nom de la No l chantill
149. lcul pour jusqu sept plages du signal les plages sont sp cifi es dans le cadre des r glages d quation du syst me dans les param tres de rapport Calcul de bruit avec six fois l cart type linear regression slope drift time Figure 40 Bruit quivalent six fois l cart type Comprendre votre ChemStation Agilent 237 11 Evaluation de l ad quation du syst me La r gression lin aire est effectu e l aide de tous les points de donn es dans la plage de temps sp cifi e voir Analyse de r gression page 256 Le bruit est donn par la formule N 6x Std o N est le bruit calcul avec six fois l cart type et Std est l cart type de la r gression lin aire de tous les points de donn es dans la plage de temps Calcul de bruit par la formule de pic pic noise max peak minus min peak time Figure 41 Bruit pic maximum pic minimum distance La d rive est d abord calcul e en d terminant la r gression lin aire l aide de tous les points de donn es dans la plage de temps voir Analyse de r gression page 256 La ligne de r gression lin aire est ensuite soustraite de tous les points de donn es dans la plage de temps pour donner le signal corrig de la d rive Le bruit de pic pic est ensuite calcul par la formule o N est le bruit de pic pic Imay est le pic d intensit la plus lev e maximale et Imin le pic d inte
150. lculer une approximation exponentielle Le mod le exponentiel est adapt sur la partie de la tra ne du pic parent situ e imm diatement avant le premier pic fils La Figure 21 montre la courbe corrig e d un pic fils apr s int gration tangentielle Courbe de pic fils corrig Figure 21 Pic fils corrig de la tra ne 106 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Approximation de front de pic Comme pour les pics fils sur la tra ne d un pic parent une int gration sp ciale est n cessaire pour certains pics situ s sur le front ou la pente montante d un pic voir Figure 22 Figure 22 Approximation de front de pic L approximation de front de pic est trait e de la m me fa on que l approximation de tra ne par les m mes mod les d approximation Les crit res d approximation sont e rapport hauteur front e rapport hauteur vall e Le rapport hauteur vall e a la m me valeur pour l approximation de front de pic que pour l approximation de tra ne voir Rapport hauteur vall e la page 105 le rapport hauteur front est calcul comme le rapport hauteur tra ne voir Rapport hauteur tra ne la page 105 mais peut avoir une valeur diff rente Comprendre votre ChemStation Agilent 107 4 int gration Pics non attribu s Pour certaines constructions de ligne de base il y a des aires de faible valeur au dessus de la ligne de base et en dessous du signal qui
151. le de rapport personnalis cr par vous dans la liste des styles de rapports disponibles dans la vue Report Layout de la ChemStation Tous les types de rapport sauf le rapport de performance donnent la liste des largeurs de pics calcul es par l int grateur l aide d une formule plus complexe pour conna tre le d tail du calcul de la largeur des pics consultez la section Largeur du pic la page 88 Comprendre votre ChemStation Agilent 225 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Autres param tres de style de rapport 226 Table de sommation des pics Le tableau d addition des pics est fourni pour certaines applications dans les industries p troli re et pharmaceutique et peut tre mieux utilis avec les possibilit s suivantes e Sommation des aires des pics dans une gamme sp cifi e par l utilisateur Sommation des aires d une gamme de pics calcul s avec le m me multiplicateur e Sommation des aires de tous les pics portant le m me nom Lorsque le rapport est g n r la ChemStation utilise la table de sommation des pics pour produire un rapport de sommation des pics imprim d apr s le calcul du rapport standard sauf le Norm qui est remplac par le rapport de sommation des pics Format de rapport pour les pics non talonn s Pour modifier le format de rapport pour les pics non talonn s choisissez l une des options suivantes dans la bo te de dialogue Specify
152. le et ne d pend pas de la quantit d chantillon inject e dans les limites du d tecteur Aucun facteur de r ponse n est utilis Si tous les compos s r pondent de mani re gale dans le d tecteur et sont lu s Aire donne une approximation valable des quantit s relatives de compos s Aire est utilis chaque fois que des r sultats qualitatifs sont int ressants et pour produire des informations destin es cr er le tableau d talonnage qui servira d autres proc dures d talonnage La proc dure de calcul Hauteur donne la hauteur de chaque pic dans l analyse en pourcentage de la hauteur totale de tous les pics pr sents 128 Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Proc dures de calculs talonn s Les proc dures de calcul Etalon externe ESTD Normalisation et Etalon interne ISTD n cessitent toutes des facteurs de r ponse et par cons quent utilisent un tableau d talonnage Ce dernier sp cifie la conversion des r ponses en unit s de votre choix par la proc dure que vous s lectionnez Comprendre votre ChemStation Agilent 129 5 Quantification Calcul ESTD 130 La proc dure ESTD est la proc dure de quantification de base dans laquelle les chantillons d talonnage et les chantillons inconnus sont analys s dans les m mes conditions Les r sultats des deux types d chantillons sont compar s afin de calculer la quantit dans l inconnu Contrairement
153. le sommet de chaque pic c est dire le temps de r tention migration e construit une ligne de base et e calcule l aire la hauteur et la largeur pour chaque pic Ce processus est contr l par des param tres appel s v nements d int gration Comprendre votre ChemStation Agilent 77 4 Int gration Les algorithmes d int gration de la ChemStation 78 L algorithme d int gration de la ChemStation est la deuxi me version d une nouvelle g n ration qui vise plus de robustesse de fiabilit et de simplicit d utilisation Possibilit s d int gration Les algorithmes d int gration comprennent les possibilit s principales suivantes une possibilit d auto int gration utilis e pour tablir les param tres d int gration initiaux la capacit de d finir des tables d v nements d int gration individuelles pour chaque signal chromatographique lectroph rographique si l on utilise des signaux multiples ou plus d un d tecteur la d finition interactive des v nements d int gration permettant l utilisateur de s lectionner graphiquement des temps d v nement l int gration graphique manuelle ou lastique de chromatogramme lectroph rogramme n cessitant une interpr tation humaine ces v nements peuvent aussi tre enregistr s dans la m thode et utilis s dans le cadre de l exploitation automatis e l affichage et l impression des r sultats d int gration et
154. m32 sys doit faire partie de votre variable PATH Par d faut les programmes d installation l ajoutent Utilis pour la version anglais am ricain des fichiers d aide pour la partie centrale du logiciel Utilis pour les autres parties du logiciel sp cifiques au langage Utilis pour des copies de sauvegarde des anciens fichiers pendant l installation Comprend les gestionnaires d instruments configur s Utilis pour l instrument configur de 1 4 Comprend cinq sous r pertoires suppl mentaires DATA METHODS SEQUENCE VERIFY et TEMP 48 Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Tableau 3 Sous r pertoires ChemStation suite R pertoire DATA METHODS SEQUENCE VERIFY TEMP LC GC SPECLIBS Sommaire Comprend tous les r pertoires de r sultats de vos analyses Il peut contenir d autres sous r pertoires si vous structurez le disque avec des sous r pertoires pendant votre travail en les d finissant l aide de la bo te de dialogue Sample Information ou Sequence Parameters Les r pertoires de r sultats sont identifi s par un nom avec une extension D Pour plus d informations sur la structure des fichiers de donn es voir Fichiers de donn es page 69 Contient tous les r pertoires de m thodes d extension M Pour plus de d tails sur le contenu voir Structure du r pertoire des m thodes page 60 Comprend les tableaux de s quence L
155. mStation utilise les formules suivantes Les r sultats sont fournis en utilisant les styles de rapport Performance Performance Noise and Performance Extended Lorsque ASTM ou USP est sp cifi pour une d finition donn e la d finition est conforme celles qui ont t donn es dans la r f rence correspondante Toutefois les symboles utilis s ici peuvent tre diff rents de ceux utilis s dans la r f rence Les deux r f rences utilis es dans ce contexte sont les suivantes e ASTM Section E 682 93 Annual Book of ASTM Standards Vol 14 01 e USP The United States Pharmacopeia XX Revision pp 943 946 244 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 D finitions g n rales Volume mort V d rl f 4 avec d diam tre de la colonne cm T constante rapport circonf rence diam tre d un cercle 1 longueur de la colonne cm f fraction du volume de la colonne qui n est pas pris par la phase stationnaire mais disponible pour la phase mobile valeur par d faut pour f 0 68 pour Hypersil Temps de r tention du composant non retenu t m min Appel aussi temps mort ou void time T V F avec F d bit du CPL ml min Comprendre votre ChemStation Agilent 245 11 Evaluation de l ad quation du syst me D finitions des tests de performances Moments statistiques MO d X X M1 l A me x 1 94 M4 Il gt SR ER FN
156. ment la m me quantit de l talon interne est ajout e aux chantillons d talonnage et l chantillon inconnu La r ponse de chaque compos concern est divis e par la r ponse de l talon interne pour donner un rapport de r ponse Les courbes d talonnage sont une repr sentation graphique de ce rapport de r ponse par rapport au rapport de quantit et cette information est utilis e dans le calcul des r sultats rapport s Ainsi les erreurs involontaires dans le volume d injection ou de l gers changements intervenant dans le syst me chromatographique lectroph rographique qui affectent tous les compos s de la m me mani re sont limin s Le rapport ISTD donne les r sultats avec les unit s de votre choix Rapport Control Charts Le rapport Control Charts recherche parmi les r sultats de plusieurs analyses un r sultat unique correspondant un compos talonn sp cifique La fonction Control Chart doit tre install e quand la ChemStation est d j op rationnelle Le r sultat recherch est export dans une feuille de travail Microsoft Excel apr s chaque analyse Le rapport est ensuite imprim en format Excel 220 Comprendre votre ChemStation Agilent Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent 10 Resultats quantitatifs Le type de rapport est identifi par le nom de la m thode de calcul utilis e pour le pr parer par exemple un rapport ISTD Chaque type est d crit br
157. mer des fichiers de donn es dans une s quence 183 Pour nommer des fichiers de donn es automatiques pendant une s quence 183 Pour entrer des noms de fichiers de donn es manuellement 184 Fonctionnement apr s s quence 186 Not Ready Timeout CPL et EC seulement 186 Wait Time CPL et EC seulement 186 R talonnage automatique 187 Pour sp cifier des r talonnages 188 Param tres de r talonnage dans le tableau de s quence 188 Types de s quences 191 S quences d talonnage explicites 192 S quences d talonnage cycliques un seul point 193 che Agilent Technologies 171 8 172 Automatisation S quences d talonnage cycliques multipoints 194 Ordre d analyse de M thode A 196 Ordre d analyse de M thode B 197 Etalonnages explicites et cycliques r unis 198 Exemple 198 Ordre d analyse SimpReg 199 S quences d talonnage cyclique avec d limitation 200 Exemple 200 Fonctionnement de la s quence d limit e 202 Exemple 202 S quences de r talonnage cycliques avec plusieurs flacons contenant un talon dilu dans les m mes proportions 205 S quence de r talonnages cycliques avec utilisation de flacon d talonnage en essai circulaire Round Robin 205 R talonnages cycliques chaque talonnage utilisant un flacon diff rent 207 S quence d limit e utilisant des flacons diff rents pour ouvrir et fermer la d limitation 207 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisat
158. mme d crit dans la section Automatisation Ils figurent sur le rapport d analyse appropri e Les rapports de performances ou d ad quation du syst me voir la section sur les rapports ci dessus fournissent une analyse d taill e de la qualit de s paration La ChemStation peut tre configur e pour un acc s limit deux niveaux un niveau op rateur et un niveau administrateur Le niveau administrateur peut tre prot g par mot de passe et permet d acc der l ensemble des fonctionnalit s de la ChemStation Le niveau op rateur limite l utilisateur une fonctionnalit cl et l ex cution des m thodes analytiques d finies Ce niveau est destin des laboratoires de routine il emp che les utilisateurs de modifier et de cr er de nouvelles m thodes Comprendre votre ChemStation Agilent 41 1 42 Caract ristiques des ChemStations Robustesse des m thodes Rapports r sum s de s quences voir Analyses des donn es Rapport sp cifique page 34 permet de tester la robustesse des m thodes Les rapports au format tendu pour des crit res s lectionn s par l utilisateur sont pr sent s sous la forme de graphes de tendances et permettent de d terminer les limites de fonctionnement r alistes Ces limites peuvent ensuite tre int gr es dans la m thode pour garantir par l analyse d chantillons de contr le que la m thode fonctionne dans les limites des sp cifications Fonctionnem
159. n Partial Sequence GC6890 1 x Select the parts of the sequence to run Spacebar toggles selection Sel Run Vial Method Data File Seq Tb Calib RF RT Sample Name SIMPREG C1F03001 03 LOTAV AV Calibration A a SIMPREG C1F03002 203 LOLA AV Calibration A SIMPREG C2F03001 03 2 02 4V 8V Calibration SIMPREG 002F0301 03 Samplet SIMPREG C1F04001 04 LOTAV AV Calibration A SIMPREG C1F04002 04 LOTAV AV Calibration A SIMPREG C2F04001 04 2 02 4V 4V Calibration A SIMPREG 003F0401 04 Sample 2 ICEN SIMPREG C1F05001 F 05 01_ 1 01 AV AV Calibration A C jio 1 SIMPREG C1F05002 F 05 02_ 1 01 AV AV Calibration A C 11 1 SIMPREG C2F05001 F 05 01_ 2 02 AV AV Calibration A Ehe de SIMPREG 004F0501 F 05 01 Sample3 SIMPREG C1F06001 06 LOLAVAV Calibration 4 SIMPREG C1F06002 06 LOTAV AY Calibration A SIMPREG C2F06001 06 Z0ZAVAV Calibration A SIMPREG C2F06001 Control SIMPREG C1F07001 LOTAVAV Calibration A a Figure 37 Bo te de dialogue Partial Sequence 180 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Fichier journal de s quence Un fichier journal de s quences indiquant ce qui s est produit pendant l ex cution de la s quence est g n r Il sert signaler les erreurs survenues si la s quence est ex cut e sans intervention de l op rateur ou de nuit Le nom du fichier journal a toujours l extension log Ce fichier se trouve dans le r p
160. n S ils ne correspondent pas le test choue Impression du rapport Le rapport d origine est imprim nouveau La page suivante montre un exemple de test de v rification pass avec succ s Comprendre votre ChemStation Agilent 263 12 V rification du syst me Tested Configuration Component Revision ChemStation for LC 3D ChemStation B 01 01 Microsoft Windows Processor CoProcessor Microsoft Windows XP Processor Architecture Intel yes ChemStation Verification Test Details Test Name C CHEM32 1 VERIFY DEFAULT VAL Data File C CHEM32 1 VERIFY DEFAULT VAL VERIFY D Method C CHEM32 1 VERIFY DEFAULT VAL VERIFY M Original Datafile VERIFY D Original Acquisition Method VERIFY M Original Operator Hewlett Packard Original Injection Date 4 16 93 11 56 07 AM Original Sample Name Isocratic Std Signals Tested Signal 1 DADI A Sig 254 4 Ref 450 80 of VERIFY D ChemStation Verification Test Results Test Module Selected For Test Test Result Digital electronics test No N A Integration test yes Pass Quantification test yes Pass Print Analytical Report No N A ChemStation Verification Test Overall Results Pass 264 Comprendre votre ChemStation Agilent V rification du syst me 12 Vues de v rification et de diagnostic Si les instruments le permettent par exemple les modules de la s rie Agilent 1100 pour CPL la ChemStatio
161. n es resanayse brutes ferm M thode d ex cution d marr e via le menu ChemStation Figure 3 Ex cution d une m thode Commande ou macro pr analytique Si une commande ou une macro pr analytique est sp cifi e elle s ex cute avant le d marrage de l analyse Cette partie sert surtout pour la personnalisation du syst me en fonction d autres modules logiciels Acquisition des donn es e Tous les param tres sont r gl s sur les conditions initiales sp cifi es dans la m thode en cours e Si sp cifi le programme d injection est ex cut et une injection a lieu partir du flacon actuellement d fini 62 Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 L affichage du moniteur montre la progression de l analyse y compris les informations chromatographiques lectroph rographique et les donn es spectrales ventuelles e Les donn es sont acquises et stock es dans un fichier de donn es Analyse des donn es Une fois le stoptime temps avant arr t coul l analyse est termin e et toutes les donn es brutes sont stock es sur le disque dur de l ordinateur La partie analyse des donn es du logiciel d marre apr s le stockage de toutes les donn es brutes Int gration e Les objets chromatogramme lectroph rogramme dans le signal sont int gr s comme sp cifi dans la bo te de dialogue Integration Events e Le d but du pic son sommet le temps de r tention migration
162. n Agilent 10 En plus des param tres imprim s pour le style de rapport Performance d autres param tres de performance des pics Peak Performance Parameters sont d termin s le temps de r tention du pic de d but et de fin l inclinaison l exc s la largeur de pic le facteur de tra ne USP l intervalle de temps entre les points de donn es le nombre de points de donn es les moments statistiques les plateaux les plateaux par m tre la s lectivit et la r solution de chaque pic sont imprim s La largeur de pic les nombres de plateaux absolu et relatif la s lectivit et la r solution sont calcul es l aide de la largeur mi hauteur vraie du 5 sigma et des m thodes d int grations tangentielles et de tra ne pour en savoir plus consultez le paragraphe D finitions des tests de performances la page 246 L en t te du rapport comprend toutes les informations pertinentes pour la m thode telles que l instrument la colonne le capillaire l chantillon et les param tres d acquisition et un trac du signal Pour une liste compl te des algorithmes de param tres de performance des pics voir D finitions des tests de performances la page 246 Les styles de rapports spectraux Short Spectrum Detail Spectrum Performance Library Search sont d crits dans Comprendre votre module d analyse spectrale Ajout d un rapport personnalis aux styles de rapports Vous pouvez ajouter un mod
163. n comprend deux autres vues qui permettent d effectuer des t ches de v rification et de diagnostic des instruments Pour plus d informations voir le syst me d aide en ligne et le manuel V rification des Performances Comprendre votre ChemStation Agilent 265 12 V rification du syst me Le registre GLPsave Le registre GLPsave est enregistr la fin de chaque analyse quand il est s lectionn dans la liste de contr le d ex cution Il contient les informations suivantes e signaux e journal e table des r sultats d int gration e table des r sultats de quantification e donn es de performances des instruments et e m thode d analyse des donn es Ce registre est un enregistrement prot g complet g n r au moment de l analyse Vous pouvez le rappeler tout moment par la suite comme preuve de vos m thodes analytiques L option GLPsave Register dans la vue Data Analysis vous permet d examiner tout moment le fichier du registre GLPsave Ce fichier est prot g par un total de contr le et cod en binaire pour emp cher tout changement Dans la bo te de dialogue utilis e pour s lectionner le registre GLPsave pour l examiner vous pouvez choisir entre les options d examen suivantes e charger la m thode d origine e charger les signaux d origine e charger les donn es de performance de l instrument e imprimer la m thode originale e imprimer les r sultats d int gration originaux
164. n inclut une fonction de tableau de contr le Une fois la fonction tableaux du logiciel ChemStation install e et s lectionn e l utilisateur peut rechercher automatiquement un param tre s lectionn d un compos chaque fois qu une m thode est ex cut e Ces param tres sont notamment la concentration le facteur de r ponse le temps de r tention migration et l aire Pour plus d informations sur ces rapports personnalis s et les tableaux consulter l aide en ligne du syst me Utilitaires et compatibilit s G n ralit s La ChemStation peut importer et exporter des fichiers de donn es dans le format ANDI Analytical Data Interchange et dans le format chromatographique de la Analytical Instrument Association AIA version 1 0 copyright 1992 L importation des donn es est support e au niveau Un de conformit informations d chantillons et donn es de signaux et l exportation de donn es au niveau Deux de conformit informations d chantillons donn es de signaux et r sultats d int gration La ChemStation inclut des commandes et des fonctions compatibles avec le standard DDE Dynamic Data Exchange de la plate forme Microsoft Windows en tant que client DDE et serveur DDE Les commandes incluses dans le jeu permettent d tablir et de terminer des connexions de transf rer des informations dans les deux directions et d ex cuter des fonctions distance Comprendre votre ChemStation Agilent 37 1 38 C
165. nd robin d crit dans l exemple pr c dent ne soit pas appliqu Par exemple si la s quence porte sur 80 flacons d chantillon avec un talonnage tous les 10 chantillons la table des s quences doit comporter 80 10 1 9 lignes d talonnage pour chaque niveau Comme dans l exemple pr c dent les lignes d talonnage doivent tre des lignes de s quences adjacentes faisant r f rence des positions de flacons adjacentes S quence d limit e utilisant des flacons diff rents pour ouvrir et fermer la d limitation La m me fonctionnalit est disponible pour les s quences d limit es En d finissant la gamme de flacons appropri e pour les flacons d talonnage une s quence d limit e encadr e peut tre d finie de telle mani re que les diff rents flacons d talonnage soient utilis s pour ouvrir et fermer les d limitations encadrements Dans ce cas aussi les lignes d talonnage de la s quence doivent tre adjacentes tout comme les positions des flacons d talonnage Que vous utilisiez ou non les flacons d talonnage de d limitation utilis s en mode circulaire ou pour une injection unique ne d pend que du nombre total de flacons d chantillonnage pour chaque niveau et le nombre d talonnages requis par la s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 207 8 Automatisation L exemple suivant d finit 3 injections d chantillon d limit es par talonnage Les d limiteurs d ouverture et de fe
166. ne des pics Les laboratoires qui doivent se conformer aux e bonnes pratiques de laboratoire BPL e bonnes pratiques de fabrication BPF et Bonnes pratiques de fabrication courantes BPFc et e bonnes pratiques de laboratoire automatis es BPLA Les laboratoires sont invit s effectuer ces tests et documenter les r sultats de mani re d taill e Les laboratoires de contr le de qualit par exemple pour se conformer la certification ISO 9000 devront d montrer que leurs instruments sont en tat de fonctionnement normal La ChemStation recueille les r sultats de plusieurs analyses et les value statistiquement dans le rapport r sum des s quences Les tests sont document s dans un format g n ralement accept par les organismes officiels et les auditeurs ind pendants Les statistiques portent sur e temps de r tention migration de pics e l aire des pics e la quantit Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 e la hauteur des pics e la largeur des pics mi hauteur e la sym trie des pics e la tra ne des pics e le facteur de capacit k e les num ros des plateaux e la r solution entre les pics e la s lectivit par rapport au pic pr c dent e l inclinaison et e l exc s La valeur moyenne l cart type le coefficient de variation et l intervalle de confiance sont calcul s Vous pouvez d finir des limites pour l
167. ne font partie d aucun pic identifi Ces aires ne sont normalement ni mesur es ni int gr es dans les rapports Si l option unassigned peaks Pics non attribu s est activ e ces aires sont mesur es et mentionn es dans le rapport comme tant des pics non attribu s Le temps de r tention migration pour ces aires est le point milieu entre le d but et la fin de l aire comme indiqu sur la Figure 23 la page 108 0 482 0 832 0 581 Figure 23 Pics non attribu s 108 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Codes de s paration des pics Dans les rapports chaque pic se voit attribuer un code deux trois ou quatre caract res d crivant le mode de trac de la ligne de base Caract res 1 et 2 Le premier caract re indique la ligne de base du d but du pic le deuxi me caract re d crit la ligne de base la fin du pic Le pic a commenc ou s est arr t sur la ligne de base Le pic a commenc ou s est arr t par une ligne verticale de vall e Le pic a commenc ou s est arr t pendant la p n tration de la ligne de base Le pic a commenc ou s est arr t sur une ligne de base horizontale forc e Le pic a commenc ou s est arr t sur un point forc Le pic a t int gr manuellement c n z T lt w Le pic n tait pas attribu D autres indicateurs peuvent tre ajout s en ordre de priorit Caract re 3 D Pic d form A Int gration aban
168. no report Print Calibration Table 013 0301 d Report for Sample Run No 12 014 0301 d Report for Sample Run No 13 ci 03005 d 1 R Report for Calibration Run No 14 ci 03006 d 1 A Report for Calibration Run No 15 c2 03005 d4 2 R Report for Calibration Run No 16 c2 03006 d 2 A Report for Calibration Run No 17 Where A average R Remplacer 204 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 S quences de r talonnage cycliques avec plusieurs flacons contenant un talon dilu dans les m mes proportions S quence de r talonnages cycliques avec utilisation de flacon d talonnage en essai circulaire Round Robin Lorsque vous lancez une s quence tendue comportant des r talonnages cycliques ce qui signifie la r alisation d un r talonnage automatique apr s un nombre d fini d injections d chantillon le risque de vider le contenu du flacon d talonnage pendant l ex cution de la s quence existe Le tableau des s quences de la ChemStation vous donne la possibilit d utiliser une s rie de flacons contenant un talon dilu dans les m mes proportions en un cycle d injections en boucle round robin Gr ce cette possibilit vous pouvez d finir des s quences importantes avec des r talonnages automatiques intervalles pr d finis et utilisant plusieurs flacons d talonnage pour chaque niveau et chaque flacon d talonnage sera utilis dans la m me mesure En d finissant un nombre de f
169. nsionn es pour afficher jusqu 18 caract res Tous les journaux ChemStation affichent les messages syst me sous forme d velopp e et les cha nes d informations sont imprim es sur plusieurs lignes Certains rapports par exemple les rapports de s quences peuvent tronquer les noms de fichiers pour faire tenir toutes les informations n cessaires sur le mod le de rapport Comprendre votre ChemStation Agilent 21 1 28 Caract ristiques des ChemStations Interface utilisateur du logiciel L interface utilisateur de la ChemStation est constitu e de vues groupant les fonctionnalit s logicielles d apr s des t ches analytiques types Toutes les configurations du logiciel comportent les trois vues standard suivantes e la vue Contr le de m thode et d analyse pour contr ler et acqu rir des donn es partir de l instrument e la vue Analyse de donn es pour l analyse et la r valuation de donn es qui ont t acquises e la vue Concepteur de rapports pour concevoir des pr sentations de rapports sp cifiques Vous acc derez des vues suppl mentaires si des modules d valuation de donn es suppl mentaires ont t command s ou dans le cas de certaines configurations d instruments qui supportent des diagnostics d instruments et des proc dures de v rification Si vous le souhaitez il est possible d installer la vue ChemStation Companion elle permet d analyser des chantillons partir d une table pr
170. nsit la plus basse minimale dans la plage de temps 238 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 Calcul de bruit par la m thode ASTM Figure 42 Bruit d termin par la m thode ASTM La d termination du bruit ASTM ASTM E 685 93 est bas e sur la pratique standard mise en oeuvre pour tester les d tecteurs photom triques longueurs d onde variables utilis s en chromatographie en phase liquide et d finie par l American Society for Testing and Materials Trois types diff rents de bruit bas s sur la taille de la gamme de temps peuvent tre distingu s La d termination du bruit est bas e sur la mesure de pic pic dans des gammes de temps d finies Temps de cycle t Bruit long terme amplitude maximum pour tous les carts al atoires du signal du d tecteur des fr quences entre 6 et 60 cycles par heure Le bruit long terme est d termin lorsque la gamme de temps s lectionn e d passe une heure La gamme de temps pour chaque cycle dt est d finie 10 minutes ce qui donnera au moins six cycles dans la gamme de temps s lectionn e Bruit courtterme amplitude maximum pour tous les carts al atoires du signal du d tecteur de fr quence sup rieure un cycle par minute Le bruit court terme est d termin pour une gamme de temps s lectionn e comprise entre 10 et 60 minutes La gamme de temps pour chaque cycle dt est d finie une minute ce qui donnera
171. nt l int gration la largeur du pic est calcul e partir de l aire et de la hauteur du pic Width Area Height ou si les points d inflexion sont disponibles partir de la largeur entre les points d inflexion 1 3 tu Figure 7 Calcul des largeurs de pics 88 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Sur la Figure 7 laire totale A est la somme des aires al a2 a3 et a4 Fs est la pente avant au point d inflexion Rs est la pente arri re au point d inflexion Si l un ou l autre point d inflexion est introuvable la largeur de pic est d finie par Width Adjusted area Adjusted height Le param tre de largeur de pic g re la capacit de l int grateur distinguer les pics du bruit de la ligne de base Pour de bonnes performances la largeur du pic doit tre fix e proche de la largeur des pics chromatographiques lectro ph rographique r els La largeur du pic peut tre chang e de trois mani res e avant l analyse vous pouvez sp cifier la largeur initiale du pic e pendant l analyse l int grateur met automatiquement jour la largeur du pic de mani re maintenir une bonne correspondance avec les filtres de reconnaissance du pic e pendant l analyse vous pouvez r initialiser ou modifier la largeur de pic par un v nement chronoprogramm Pour consulter les d finitions de largeurs de pics utilis es par les calculs d ad quation du syst m
172. ntale prolong e depuis le premier point de la ligne de base Graduations Les graduations identifient le d but et la fin d un pic Leurs positions sont d termin es par les temps de d but du pic et de fin du pic enregistr s dans la table des pics La fin de la ligne de base Le dernier point valid de la ligne de base sert d signer la fin de la ligne de base Quand l analyse ne se termine pas sur la ligne de base la fin de la ligne de base est calcul e partir du dernier point de ligne de base valide jusqu la d rive connue de la ligne de base Si un pic se termine sur une vall e apparente mais que le pic suivant se trouve en dessous de la valeur de rejet d aire d finie la ligne de base est projet e partir du d but du pic jusqu au vrai point de ligne de base suivant Si un pic d bute de mani re similaire la m me r gle s applique 98 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 P n tration de la ligne de base Une p n tration est d finie par une descente du signal en dessous de la ligne de base construite point a sur la Figure 12 En cas de p n tration de la ligne de base cette partie de ligne de base est g n ralement reconstruite comme pour le point b de la Figure 12 O O b Figure 12 P n tration de la ligne de base Les options de suivi de la ligne de base suivantes permettent de supprimer les p n trations de la ligne de base Classical Baseline Tracking no pene
173. ntr es d chantillon ou de toute entr e de r talonnage explicite pour la m thode Ordre d analyse SimpReg Cette section d crit l ordre d analyse pour la m thode SimpReg Tableau 19 Ordre d analyse SimpReg Ligne s q No inj M thode Flacon Op ration 2 1 SimpReg 1 Etalonnage simple 1 2 SimpReg 1 Etalonnage normal 3 SimpReg 2 Analyse d chantillon 3 4 SimpReg 3 Analyse d chantillon 4 5 SimpReg 4 Analyse d chantillon 5 6 SimpReg 1 Etalonnage normal 6 7 SimpReg 5 Analyse d chantillon 7 8 SimpReg 6 Analyse d chantillon Comprendre votre ChemStation Agilent 199 8 Automatisation S quences d talonnage cyclique avec d limitation Pour repr senter plus exactement la r ponse de l instrument au moment o les chantillons ont t analys s ce type de s quence r alise une interpolation entre les talonnages sur un ou plusieurs chantillons inconnus En utilisant la d limitation de s quence vous pouvez r duire les effets de la d rive de r ponse de l instrument sur le processus d talonnage Exemple Soit la situation suivante e La r ponse d instrument d rive e Trois injections du m me m lange de deux composants sont sp cifi es e Deux injections sont sp cifi es en tant qu chantillons d talonnage et une en tant qu chantillon e Le premier et le troisi me sont des chantillons d talonnage e La seconde injection est un chantillon voir la Figure 39 page 201
174. ntroduits dans le tableau d talonnage Ces r sultats sont ensuite utilis s dans les calculs quantitatifs Une fois le nombre d injections sp cifi effectu un autre talonnage a lieu et les r sultats sont introduits dans le tableau d talonnage o ils remplacent par crasement les r sultats de l analyse d talonnage pr c dente Delta Le calcul delta vous permet de comparer les facteurs de r ponse obtenus au cours d une analyse avec les facteurs de r ponse entr s manuellement dans une table d talonnage Le facteur delta est ensuite appliqu tous les pics talonn s de la table Vous pouvez sp cifier plusieurs talons internes et utiliser leurs facteurs de r ponse mesur s pour calculer de nouveaux facteurs de r ponse pour les autres pics Vous sp cifiez quel talon interne est utilis pour le calcul delta pour chaque pic dans la table d talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Types de s quences Voici quelques types de e s quences d talonnage explicites e s quences d talonnage explicites un seul point e s quences d talonnage cycliques multipoints e s quences d talonnage explicites et cycliques r unis dans une s quence et e s quences d talonnage cycliques avec d limitation Comprendre votre ChemStation Agilent 191 8 Automatisation S quences d talonnage explicites Ce type de s quence r talonne selon les intervalles d fini
175. o Run particuliers Par exemple vous pouvez choisir e d ex cuter la liste de contr le d ex cution run time checklist e de ne faire que des acquisitions ou e de ne faire que le retraitement Dans ce cas vous avez deux possibilit s utiliser les donn es d chantillon d finies lors de l analyse initiale de l chantillon ou cocher la case Use Sequence Table pour pouvoir utiliser des donn es d chantillon mises jour en entrant de nouvelles donn es dans le tableau de s quence e sp cifier ce qui se passe lorsque la s quence est termin e en utilisant les param tres et e sp cifier si les codes barres doivent tre utilis s dans la s quence et comment g rer une discordance de codes barres en supposant le syst me dot de ce type de lecteur Comprendre votre ChemStation Agilent 175 8 Automatisation Tableau de sequence Le tableau de s quence d termine quelles m thodes sont utilis es pour analyser les flacons d chantillon et leur ordre d analyse Il contient aussi des informations sur chaque chantillon y compris le nom et les param tres de quantification La bo te du groupe d injection est affich e pour les instruments qui supportent le double chantillonnage CPG En s lectionnant Front ou Back vous affichez les lignes dans le tableau de s quence et le statut actuellement en vigueur pour cet injecteur Pour obtenir une description des colonnes de ce tableau et de la mani
176. ode utilis e pour analyser l chantillon de contr le doit contenir un tableau d talonnage avec sp cification des limites de l chantillon de contr le pour l un des compos s Si ces limites sont d pass es la s quence s arr te et un message s inscrit dans le journal Si vous utilisez l un des styles de rapports ChemStation les limites de l chantillon de contr le sont aussi imprim s sur les rapports produits pour ces analyses Pour plus d informations sur la mani re de d finir une s quence avec des chantillons de contr le voir la section Comment faire pour du syst me d aide en ligne Pour arr ter une s quence L analyse en cours sera termin e avant que la s quence ne s arr te si vous appuyez sur Stop Une fois arr t e une s quence ne peut plus jamais tre relanc e Pour interrompre une s quence La fonction d interruption abort met imm diatement fin une s quence en cours 178 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Pour suspendre une s quence Pendant une suspension pause de s quence il n est pas possible de changer le nom du fichier de tableau de s quence ni celui du fichier de donn es Dans le tableau de s quence vous ne pouvez changer que les lignes de s quence non encore ex cut es ou changer le num ro du flacon dans la ligne de s quence en cours Vous pouvez ajouter supprimer et changer des lignes de s quence pour des analyses futures Il pe
177. oduit dans une s quence celle ci est galement interrompu R talonnage partiel Cette fonction permet de ne r talonner que les pics identifi s Si des pics manquent l talonnage n est pas interrompu mais l absence des pics est signal e dans le rapport R talonnage des temps de r tention migration Cette fonction permet le r talonnage du temps de r tention migration de tous les pics identifi s et non identifi s Cela s effectue en utilisant les temps de r tention migration des pics identifi s Il n y a pas de mise jour des facteurs de r ponse pour les pics non identifi s Comprendre votre ChemStation Agilent 169 7 170 Etalonnage Re talonnage Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 8 Automatisation Qu est ce que l automatisation 173 Qu est ce qu une s quence 174 Param tres de s quence 175 Tableau de s quence 176 Cr ation des s quences 177 Utilisation du bouton Insert Vial Range 177 Utilisation du bouton Append Line 177 Travailler avec des s quences 178 Echantillons prioritaires 178 Pour effectuer une s quence avec des chantillons de contr le 178 Pour arr ter une s quence 178 Pour interrompre une s quence 178 Pour suspendre une s quence 179 Pour ex cuter partiellement une s quence 179 Fichier journal de s quence 181 Que se passe t il lorsqu une s quence est ex cut e 182 Pour nom
178. ologies 75 4 76 Int gration Int gration tangentielle 102 Pics non attribu s 108 Codes de s paration des pics 109 Caract res 1 et2 109 Caract re 3 109 Caract re 4 110 Mesure de l aire du pic 111 D termination de l aire 112 Unit s et facteurs de conversion 113 Ev nements d int gration 114 Ev nements initiaux 114 Largeur du pic 115 Rejet de hauteur et de largeur de pic 116 Optimisation de l int gration 116 Ev nements chronoprogramm s 117 Auto int gration 118 Description g n rale 118 Principes de fonctionnement 118 Param tres d auto int gration 119 Description g n rale 120 Int gration manuelle 120 Codes de s paration de pics pour les pics int gr s manuellement 121 Documentation des v nements d int gration manuelle 121 Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Qu est ce que l int gration L int gration localise les pics dans un signal et calcule leur taille C est une tape n cessaire pour e la quantification e les calculs de puret des pics pour les ChemStations pour CPL 3D CE CE MS et les syst mes de couplage CPL MS seuls ainsi que e la recherche en biblioth que spectrale ChemStations pour CPL 3D CE CE MS et les syst mes de couplage CPL MS seuls Que fait l int gration Lorsqu un signal est int gr le logiciel e identifie un temps de d but et de fin pour chaque pic et marque ces points avec des graduations verticales e trouve
179. ompl mentaires La v rification du qualificateur est galement d sactiv e lorsque la corr lation de signal est neutralis e Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Calcul du rapport de qualification Lorsque la v rification des qualificateurs est activ e pour un compos le rapport de la taille du qualificateur et la taille du pic principal est v rifi e par rapport aux limites talonn es La taille peut correspondre soit la hauteur soit l aire en fonction des param tres de calcul de base dans le rapport sp cifi Specify Report Les pics de qualification peuvent tre talonn s de la m me mani re que les compos s cibles L utilisateur n a pas besoin de sp cifier le rapport attendu Le rapport attendu est calcul de fa on automatique QualRespRatio R ponse du qualificateur R ponse du pic principal tous deux mesur s au temps de r tention du compos Le param tre QualTolerance d finit la gamme acceptable pour le rapport de qualification par exemple 20 La tol rance peut tre d finie dans l interface utilisateur du tableau d talonnage Identification Details et correspond un pourcentage absolu Par exemple pourcentage absolu Gamme acceptable 50 20 30 70 Pour les talonnages plusieurs niveaux la ChemStation calcule une tol rance de qualification minimale partir des rapports de qualification mesur s chaque niveau d talonnage La
180. on d chantillon m thode N d inj Niveau Maj RT Maj RF Intervalle 1 Etalonnag 1a Etalonnag M thode A 1 1 Moyenne Moyenne 6 2 Etalonnag 1b Etalonnag M thode A 1 1 Moyenne Moyenne 6 3 Etalonnag 1c Etalonnag M thode A 1 1 Moyenne Moyenne 6 5 Etalonnag 2a Etalonnag M thode A 1 2 Moyenne Moyenne 6 6 Etalonnag 2b Etalonnag M thode A 1 2 Moyenne Moyenne 6 7 Etalonnag 2c Etalonnag M thode A 1 2 Moyenne Moyenne 6 10 Echantillon 10 Echantillon M thode A 6 11 Echantillon 11 Echantillon M thode A 6 12 Echantillon 12 Echantillon M thode A 6 13 Echantillon 13 Echantillon M thode A 6 14 Echantillon 14 Echantillon M thode A 6 L ordre de passage est e Flacon 1 Etalonn la e Flacon 5 Etalonn 2a e 6 injections du flacon 10 Echantillon 10 e Flacon 2 Etalonn 1b e Flacon 6 Etalonn 2b e 6 injections du flacon 11 Echantillon 11 e Flacon 3 Etalonn 1c e Flacon 7 Etalonn 2c e 6 injections du flacon 12 Echantillon 12 e Flacon 1 Etalonn la 206 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 e Flacon 5 Etalonn 2a e 6 injections du flacon 13 Echantillon 13 e Flacon 2 Etalonn 1b e Flacon 6 Etalonn 2b e etc Re talonnages cycliques chaque talonnage utilisant un flacon diff rent Pour tre s r que chaque flacon d talonnage ne sera inject qu une fois la s quence doit d finir un nombre suffisant de flacons d talonnage diff rents de fa on ce que l ordre d injection en boucle rou
181. on des points cardinaux d un pic la page 84 Ce sont les points de ligne de base les points de vall e le sommet du pic les points mi hauteur du pic Les points cardinaux ont une coordonn e horizontale de temps coul une coordonn e verticale de hauteur partir de la ligne de base l aire et d autres param tres que l int grateur utilise pour calculer les aires du pic Figure 24 Mesure d aire pour des pics de ligne de base ligne de base Dans le cas d un pic simple isol l aire du pic est d termin e par l aire cumul e au dessus de la ligne de base entre le d but et la fin du pic identifi e par des graduations Comprendre votre ChemStation Agilent 111 4 112 D termination de l aire L aire que l int grateur calcule pendant l int gration est d termin e de la mani re suivante e pour des pics de ligne de base ligne de base BB l aire est au dessus de la ligne de base entre les graduations comme sur la Figure 24 la page 111 e pour les pics de vall e vall e VV l aire au dessus de la ligne de base est d coup e au niveau des graduations selon des lignes verticales comme sur la Figure 25 Figure 25 Mesure d aire pour des pics de vall e vall e e pour les pics tangentiels T l aire est au dessus de la ligne de base r initialis e pour les pics de solvant S l aire est au dessus du prolongement horizontal du dernier point de ligne de base trouv
182. on du compos en fonction du temps elle sert d terminer le point de d part du pic son sommet et sa fin 86 Comprendre votre ChemStation Agilent Enregistrement des pics dans la table de pics Figure 6 Principe de fonctionnement Param tres initiaux D finition de la ligne de base initiale Initialisati Suivi et r initialisa tion de la ligne Ev nemen chronopro ts gramm s de base Y D but de l ensemble de pics Suivi de la ligne de base m Identification des coordonn es des pics D tection de la ligne de base y Fin de l ensemble de pics D tection d ensemble de pics Construction de lignes de base de pics y D tection des tangentes y Calcul des statisti ma Comprendre votre ChemStation Agilent ques de pics Evaluation de l ensemble de pics Diagramme de fonctionnement de l int grateur Int gration 4 87 4 int gration Identification d un pic L int grateur utilise diff rents outils pour reconna tre et caract riser un pic e la largeur du pic e les filtres de reconnaissance du pic e le regroupement de tranches d int gration bunching e l algorithme de reconnaissance du pic e l algorithme de sommet du pic et e des calculs non gaussiens par exemple de tra n e fusion de pics Largeur du pic Penda
183. on du syst me 23 m thodes et s quences 23 mod le de donn es 24 syst me d exploitation 23 GLPSave Reg 65 enregistrement avec la m thode 65 graduations 77 H hauteur calcul 128 rapport 221 Comprendre votre ChemStation Agilent identification des pics d finition 138 types 140 inclinaison 247 instrument tat 73 r ponse extrapolation 200 int gration 63 graduations 77 tableau des r sultats 63 int gration automatique 118 int gration manuelle 120 int gration tangentielle 102 interruption s quence 178 intervalle r talonnage 190 ISTD calcul 133 proc dure 133 rapport 220 trouver les pics 148 J journal 71 justesse analyse 168 L argeur du pic 83 88 115 116 la hauteur x 248 tangente 248 argeur initiale de pic 114 igne de base initiale 80 81 imites de contr le 211 imites de quantit 140 158 ot configuration 211 rapport 212 table des compos s 211 M macro fermeture 186 manuels 45 messages d erreur 71 messages d v nement 71 m thode attente 186 cr ation 57 d finition 52 tat 73 fonctionnement 62 GLPSave Reg 65 information 53 int gration 63 modification 58 modifier 57 parties 53 recherche dans les biblioth ques 64 r pertoire 60 r sum du fonctionnement 66 v rification de la puret des pics 64 mise jour facteur de r ponse 188 temps de r tention 188 moments statistiques 247 monit
184. on sp cifique au client garantit un environnement ad quat pour des techniques diff rentes et des utilisateurs individuels tandis que l installation centralis e du logiciel vite de devoir g rer de nombreuses copies de la m me installation ChemStation dans un environnement de travail Contr le des instruments en r seau Le logiciel ChemStation assure la commande d instruments et l acquisition de donn es par le r seau local pour les appareils CPG Agilent 6890 module de commande A N Agilent 35900E et les CPL Agilent s rie 1100 Vous pouvez facilement commander et surveiller vos instruments en les branchant au r seau local qui h berge le PC ChemStation Il est ainsi possible que le PC de la ChemStation ne se trouve pas au m me endroit que les instruments qu il contr le Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Documentation Le jeu de documentation contient des sections sp cifiques sur e l installation et l apprentissage du logiciel ChemStation e son utilisation e son principe de fonctionnement et e sa personnalisation Installation et apprentissage Chaque produit logiciel ChemStation est accompagn d un manuel d installation contenant les d tails suivants mat riel PC et logiciel n cessaires installation de l interface de l instrument installation de la ChemStation et qualification de l installation Le manuel d installation est sp cifique la configuration achet
185. oncentration de chaque compos pr sent dans un m lange la ChemStation propose les proc dures de calcul suivantes e Pourcentage e Normalisation Etalon externe ESTD ESTD e Etalon interne ISTD e ISTD Les calculs utilis s pour d terminer la concentration d un compos dans un chantillon inconnu d pendent du type de quantification Chaque proc dure de calcul utilise laire ou la hauteur des pics pour le calcul et produit un type de rapport diff rent Comprendre votre ChemStation Agilent 125 5 Quantification Facteurs de correction 126 Les calculs de quantification utilisent quatre facteurs de correction le facteur de r ponse absolu le multiplicateur le facteur de dilution et la quantit d chantillon Dans les proc dures d talonnage ces facteurs servent com penser les carts de r ponse du d tecteur diff rents compos s d chantillon concentrations dilutions d chantillon quantit s d chantillon et pour con vertir les unit s Facteur de r ponse absolu Le facteur de r ponse absolu pour un compos correspond la quantit du compos divis e par l aire ou la hauteur mesur e du pic du compos dans l analyse d un m lange talon Le facteur de r ponse absolu utilis par chaque proc dure de calcul talonn e corrige la r ponse du d tecteur des compos s individuels Multiplicateur Le multiplicateur est utilis dans chaque formule de calcul
186. oncernant la prise en charge des syst mes d exploitation autres qu anglais et de leurs caract res sp ciaux Comprendre votre ChemStation Agilent 25 Caract ristiques des ChemStations Longueur maximale des noms de fichiers et de sous r pertoires ChemStation Les sp cifications de noms de fichiers et de sous r pertoires pour ChemStation Agilent sont mentionn es ci dessous Tableau 2 Longueur maximale des noms de fichiers et de sous r pertoires ChemStation Fichier sous r pertoire chemin Longueur Ajout Auto Exemple de saisie maximale Longueur Nom de fichier 38 D Demodad d Nom de fichier utilisant un 15 D longname000001 d pr fixe compteur M thode 40 M def_Ic m S quence S def _Ic s Hypers quence HYP def_Ic hyp Biblioth ques UVL demodad uvl Mod les de rapports personnalis s FRP areapct frp Sous r pertoire de fichiers de donn es 40 demo dans les informations d exemple Sous r pertoire de s quences de 40 demo donn es dans les param tres de s quence Chemin de donn es 100 100 c chem32 1 data Chemin de m thode c chem32 1 methods Chemin de s quence c chem32 1 sequence Chemin d hypers quence c chem32 1 hyper Chemin de biblioth que c chem32 speclib Rapport personnalis c chem32 repstyle Chemin de mod le Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Les barres d outils qui affichent les noms de fichiers de donn es s quences m thodes ont t redime
187. ort es ult rieurement Au terme de toutes les tapes analytiques la m thode est enregistr e Tous les rapports comportent des tampons horodateurs et une num rotation de page particuli re style de pagination page x of y L utilisateur peut choisir le niveau de d tail de chaque rapport allant de rapports r sum s simples jusqu des d tails complets sur le syst me voir la section de rapport ci dessus Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Les fichiers d enregistrement BPL Save sp cifi s dans le cadre de la configuration de la m thode enregistrent toutes les donn es d origine y compris les informations d chantillon la m thode d analyse des donn es les signaux chromatographiques lectroph rographique les conditions d instrument les r sultats d int gration et de quantification les donn es de rapport et le journal d ex cution dans un fichier binaire prot g par un total de contr le C est un format binaire non modifiable qui garantit l originalit des r sultats Ce fichier inclut un sch ma de version qui indique si des donn es ont t retrait es Les types d chantillons de contr le peuvent tre d finis dans le tableau de s quence et utilis s pour comparer automatiquement les performances de l instrument par rapport aux r sultats de l chantillon de contr le de qualit quand l instrument fonctionne sans surveillance Les r sultats qui se situen
188. port Analyse personnalis e des donn es Ex cution de vos macros Sauvegarde des donn es BPL Sauvegarde de l enregistrement binaire GLPSave Reg Commande ou macro post analytique Ex cution d une t che apr s l analyse Par exemple g n ration d un rapport personnalis Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 3 Acquisition des donn es Qu est ce que l acquisition des donn es 68 Fichiers de donn es 69 Moniteurs en ligne 70 Moniteur de signaux en ligne 70 Moniteur de spectres en ligne 70 Logbook 71 Informations d tat 72 Etat de la ChemStation 72 Barre d tat 72 Diagramme du syst me 73 ire Agilent Technologies 67 3 Acquisition des donn es Qu est ce que l acquisition des donn es Pendant l acquisition des donn es tous les signaux analogiques acquis par l instrument analytique sont convertis en signaux num riques par le d tecteur Le signal num rique est transmis lectroniquement la ChemStation et stock dans le fichier de donn es de signaux Comprendre votre ChemStation Agilent Fichiers de donn es Acquisition des donn es 3 Un fichier de donn es est constitu d un groupe de fichiers stock s dans le r pertoire DATA en tant que sous r pertoire avec un nom de fichier de donn es et une extension D Un nom de fichier d fini manuellement peut avoir jusqu 40 caract res y compris l extension Cha
189. port 16 M thode B 21 Analyse d chantillon et rapport 17 M thode B 22 Analyse d chantillon et rapport 18 M thode B 3 Point d talonnage 1 et rapport 19 M thode B 5 Point d talonnage 2 et rapport 20 M thode B 5 Point d talonnage 2 et rapport 21 M thode B 23 Analyse d chantillon et rapport 22 M thode B 24 Analyse d chantillon et rapport Notez que les r sultats pr sent s dans le Tableaux 16 page 196 et le Tableau 17 peuvent tre obtenus en utilisant Partial Sequence pour obtenir un aper u de l ordre d analyse apr s avoir tabli le Sequence Table tableau des s quences Comprendre votre ChemStation Agilent 197 8 Automatisation Etalonnages explicites et cycliques r unis Ce type de s quence r unit dans la m me s quence des talonnages explicites et cycliques Vous pouvez ainsi r talonner compl tement la m thode au d but d une s quence r talonnage explicite puis mettre jour l talonnage r talonnage cyclique durant la s quence Deux lignes d talonnage doivent tre sp cifi es pour chaque niveau d talonnage du tableau de s quence Une ligne correspond l entr e de r talonnage explicite et l autre l entr e de r talonnage cyclique e Le tableau de s quence doit comporter des entr es pour chaque ligne d talonnage et tous les flacons de r talonnage cyclique doivent appara tre avant les entr es de r talonnage explicite et d chantillon
190. pos s Le rapport Norm pr sente le m me inconv nient que les rapports Aire et Hauteur Tout changement affectant l aire totale du pic affectera le calcul de concentration de chaque pic individuel Il ne faut utiliser le rapport de normalisation que si tous les compos s concern s font l objet d une lution et int gration L exclusion de certains pics d un rapport de normalisation changera les r sultats rapport s dans l chantillon L quation utilis e pour calculer le Norm d un compos x est la suivante Response RF 100 M D gt Response RF Norm of x avec R ponse est l aire ou hauteur du pic x RF est le facteur de r ponse gt Response RF est le total de tous les produits RESPONSE RF pour tous les pics y compris le pic x M est le multiplicateur D est le facteur de dilution Le multiplicateur et le facteur de dilution sont lus dans la bo te de dialogue Calibration Settings ou Sample Information Comprendre votre ChemStation Agilent Quantification 5 Calcul ISTD La proc dure ISTD limine les inconv nients de la m thode ESTD en utilisant un compos ajout en quantit connue pour servir de facteur de normalisation Ce compos l talon interne est ajout aux chantillons d talonnage et aux chantillons inconnus Le logiciel prend les facteurs de r ponse appropri s tir s d un talonnage pr c dent stock dans la m thode En utilisant la
191. pport Performance amp Extended est sa forme sans dimension Un pic sym trique a une inclinaison de z ro Les tra nes de pics ont une inclinaison positive et leur Moment 1 est sup rieur au temps de r tention Les pics sur la pente montante ont une inclinaison n gative et leur Moment 1 est inf rieur au temps de r tention Le Moment 4 ou exc s est une mesure de la compression ou de l tirement du pic le long d un axe vertical et la fa on dont il se compare un talon Gaussien pour lequel le Moment 4 est z ro Il est possible de le visualiser en rapprochant ou en cartant les c t s d un pic Gaussien tout en maintenant une aire constante Si le pic est comprim ou cras vers le bas en comparaison son exc s est n gatif S il est plus grand son exc s est positif De m me l exc s est donn dans le rapport Performance amp Extended dans sa forme sans dimension Comprendre votre ChemStation Agilent 247 11 248 Evaluation de l ad quation du syst me Largeur de pic vraie W min W width of peak at height x of total height Cas sp ciaux We Largeur de base 4 sigma obtenus par intersection de la ligne de base avec les tangentes aux points d inflexion largeur de pics aux tangentes Voir galement Figure 44 page 249 Waa largeur 4 4 de la hauteur argeur 5 sigma Ws 0 largeur 5 de la hauteur largeur de pic avec tra ne utilis e pour le facteur de tra ne USP W50 0 largeur 50 d
192. prendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Tableau d talonnage Le tableau d talonnage sp cifie les conversions des aires ou hauteurs de pics en unit s de votre choix d apr s la proc dure de calcul s lectionn e Le tableau d talonnage contient une liste des temps de r tention migration provenant d une analyse d talonnage Ces temps sont compar s ceux des pics provenant d une analyse d chantillon S il y a correspondance le pic de l chantillon est suppos repr senter le m me compos que celui qui figure dans la table d talonnage Voir le Chapitre 6 Identification des pics Durant une analyse ou pendant la g n ration d un rapport les quantit s entr es pour chaque pic sont utilis es pour calculer les quantit s pour la proc dure de calcul s lectionn e pour le rapport Le type et la quantit d informations n cessaires pour cr er un tableau d talonnage varient selon le type de proc dure de calcul d sir e Pour cr er un tableau d talonnage les informations suivantes sont n cessaires e le temps de r tention migration pour chaque pic de compos du m lange talon et e la quantit de chaque compos utilis e dans le m lange talon exprim e en unit s homog nes Comprendre votre ChemStation Agilent 153 7 Etalonnage Courbe d talonnage 154 Une courbe d talonnage est la repr sentation graphique des donn es de quantit et de r ponse pour un compo
193. priorit s de tri sont d finies dans la Table d un lot page 211 Historique des lots La revue de lot conserve un enregistrement de toutes les actions effectu es sur le lot en cours Toute action de modification sur le lot par exemple sur le chromatogramme affich sur le type d chantillon le chargement et l enregistrement du lot ajoute une ligne l historique du lot avec la date et l heure le nom de l op rateur ainsi que la description de l v nement Vous pouvez aussi ajouter votre propre commentaire l historique du lot Les entr es existantes dans l historique ne peuvent pas tre dit es et on ne peut acc der la liste de l historique que par la rubrique de menu Batch History Comprendre votre ChemStation Agilent 215 9 La revue des lots Les rapports de la revue de lot 216 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Qu est ce qu un rapport 218 Rapports de r sultats 219 Rapports non talonn s 219 Rapports talonn s 219 Rapport d talon externe 220 Rapport d talon interne 220 Rapport Control Charts 220 R sultats quantitatifs 221 Styles de rapports 223 Ajout d un rapport personnalis aux styles de rapports 225 Autres param tres de style de rapport 226 Table de sommation des pics 226 Format de rapport pour les pics non talonn s 226 Destination du rapport 227
194. que fichier pr sent dans le r pertoire ob it une convention de nom Tableau 5 Fichiers de donn es Nom CH UV REPORTTXT SAMPLE MAC RUN LOG LCDIAG REG ACORES REG GLPSAVE REG Description Fichiers de donn es de signaux chromatographiques lectroph rographique Le nom du fichier comprend le type du module ou du d tecteur le num ro du module et l identification du signal ou du canal Ex ADC1A CH o ADC est le type du module 1 le num ro du module A l identificateur du signal et CH l extension chromatographique Fichiers de donn es spectrales UV Le nom du fichier comprend le type de d tecteur et le num ro d unit seulement avec les d tecteurs barrette de diodes et fluorescence Fichiers de donn es de rapport pour les fichiers de donn es de signaux quivalents Le nom du fichier comprend le type de d tecteur le num ro du module et l identification du signal ou du canal par exemple ADCIATXT Macro d information d chantillon Entr es du journal g n r es pendant une analyse Le journal garde l enregistrement de l analyse Il re oit tous les messages d erreur ainsi que les changements de statut importants survenus sur la ChemStation Pour CPL seulement Contient les courbes d instrument gradients temp rature pression etc le volume d injection et les descriptions des solvants Contient des informations de colonnes Pour la CPG il contient aussi le volume d inj
195. r cis ment obtiennent une pond ration sup rieure aux points d talonnage plus loign s de l origine qui peuvent tre diss min s Vous devez baser votre d cision c est dire quel type de pond ration de points d talonnage utiliser sur les exigences de votre m thode Comprendre votre ChemStation Agilent 163 7 Etalonnage Etalonnage de groupe Vous pouvez appliquer l talonnage de groupe dans le cas de compos s dont les concentrations individuelles ne sont pas connues mais dont la somme des concentrations pour un groupe de compos s est connue Exemple les isom res Des groupes de compos s complets sont talonn s Les formules suivantes sont utilis es Etalonnage Conc ip RF Response RF Response A B avec Conc 4p est la concentration du groupe de compos s constitu des compos s A et B R ponse est l aire ou hauteur du compos A RF est le facteur de r ponse Pour les compos s l int rieur d un groupe de compos s nous supposons des facteurs de r ponse gaux RF RF Par cons quent la concentration d un compos dans un groupe de compos s est calcul e de la mani re suivante Concyg Resp Conca Resp Respg 164 Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Addition des pics Le tableau d addition des pics est fourni pour certaines applications dans les industries p troli re et pharmaceutique et peut tre mieux utili
196. r les pics ISTD Au second passage les ventuels pics talons internes d finis sont identifi s S ils n ont pas d j t identifi s en tant que ISTD ils peuvent l tre en tant que pics de r f rence Les pics ISTD sont identifi s par les fen tres de temps de r tention migration des pics et par les qualificateurs de pics Si plus d un pic est trouv dans une m me fen tre ISTD le plus grand d entre eux est choisi Comprendre votre ChemStation Agilent Identification des pics 6 Trouver les pics talonn s restants Au troisi me passage tous les pics restants figurant dans le tableau d talonnage sont identifi s Les pics autres que ceux de r f rence dans le tableau d talonnage sont compar s aux pics d analyse restants en utilisant leur fen tre RT A chaque pic talonn correspond un temps de r tention migration propre dans le tableau d talonnage Cette valeur est ajust e pour l analyse particu li re d apr s la pr identification des pics de r f rence La fen tre de temps de r tention migration du pic talonn est ajust e d apr s le temps de r ten tion migration corrig du pic talonn Si plus d un pic est trouv dans la m me fen tre le pic avec un temps de r tention migration le plus proche du temps de r tention migration pr vu et qui r pond aussi aux sp cifications de qualificateur facultatives est choisi Classification des pics non identifi s S il reste des pi
197. r peuvent tre ajout es interactive ment l affichage avec s lection de police taille rotation du texte et cou leur une fois d finies les annotations peuvent tre d plac es modifi es ou supprim es e copie de l affichage sur le presse papiers Windows en format m tafichier et bitmap Une fonction pick mode lecture directe pour afficher les valeurs des points de donn es individuels en unit s du d tecteur et e export des points num ris s de temps intensit vers le presse papiers Windows Analyse des donn es Int gration L algorithme d int gration de la ChemStation est la deuxi me version d une nouvelle g n ration qui vise plus de robustesse de fiabilit et de simplicit d utilisation Possibilit s d int gration Presque tous les crans prennent en compte l autorisation des noms de fichiers longs Les barres d outils qui affichent les noms de fichiers de donn es s quences m thodes ont t redimensionn es pour afficher jusqu 18 caract res Les algorithmes d int gration comprennent les possibilit s principales suivantes e une possibilit d auto int gration utilis e pour tablir les param tres d int gration initiaux e la capacit de d finir des tables d v nements d int gration individuelles pour chaque signal chromatographique lectroph rographique si l on utilise des signaux multiples ou plus d un d tecteur Comprendre votre ChemStation Agilen
198. rd s aux d par tements et agences rattach s au Gouverne ment am ricain sont limit s aux termes de la pr sente limitation des droits Les droits d utilisation accord s au Gouvernement am ricain dans le cadre des donn es tech niques sont limit s conform ment aux directives FAR 52 227 14 juin 1987 ou DFAR 252 227 7015 b 2 novembre 1995 Mentions de s curit ATTENTION Une mention ATTENTION signale un danger Si la proc dure le pro c d ou les consignes ne sont pas ex cut s correctement le produit risque d tre endommag ou les donn es d tre perdues En pr sence d une mention ATTENTION vous devez continuer votre op ra tion uniquement si vous avez tota lement assimil et respect les conditions mentionn es AVERTISSEMENT Une mention AVERTISSEMENT signale un danger Si la proc dure le proc d ou les consignes ne sont pas ex cut s correctement les per sonnes risquent de s exposer des l sions graves En pr sence d une mention AVERTISSEMENT vous devez continuer votre op ration uni quement si vous avez totalement assimil et respect les conditions mentionn es Comprendre votre ChemStation Agilent Dans ce guide Ce guide d crit les diff rents concepts de la ChemStation Agilent Son but est d tendre votre compr hension sur la fa on dont fonctionne la ChemStation 1 Caract ristiques des ChemStations Ce chapitre d crit les principaux l ments et fonc
199. res de calculs talonn s 129 Calcul ESTD 130 Calcul Norm 132 Calcul ISTD 133 Analyse 1 Etalonnage 134 Analyse 2 Echantillon inconnu 135 Calcul ISTD des pics talonn s 135 Calcul ISTD des pics non talonn s 136 Comprendre votre ChemStation Agilent 9 Sommaire Identification des pics 137 Qu est ce que l identification des pics 138 R gles de correspondance des pics 139 Types d identification des pics 140 Temps de r tention migration absolu 140 Temps de r tention migration corrig 140 Qualificateurs des pics 140 Limites de quantit 140 Temps de r tention migration absolu 141 Temps de r tention migration corrig s 143 Pics de r f rence uniques 143 Pics de r f rence multiples 144 Qualificateurs des pics 145 La corr lation de signal 146 V rification du qualificateur 146 Calcul du rapport de qualification 147 Le processus d identification 148 Trouver les pics de r f rence 148 Trouver les pics ISTD 148 Trouver les pics talonn s restants 149 Classification des pics non identifi s 149 Etalonnage 151 Terminologie 152 Tableau d talonnage 153 Courbe d talonnage 154 Echantillons inconnus 156 Comprendre votre ChemStation Agilent Types d talonnage 157 Etalonnage un seul point 157 Etalonnage multipoints 158 Gammes d talonnages 160 Ajustements de la courbe d talonnage Traitement de l origine 161 Etalonnage de groupe 164 Addition des pics 165 Re talonnage 166 Qu est ce que l
200. rmeture utilisent chacun un flacon d talonnage diff rent Il est n cessaire de r talonner apr s chaque injection d chantillon L intervalle de r talonnage doit donc tre de 1 Pour chaque niveau le nombre de lignes d talonnage correspond au nombre d chantillons plus un Tableau 22 Flacons diff rents pour d limiteurs d ouverture et de fermeture Flacon Nom de Type Nom de la No l chantillon d chantillon m thode N d inj Niveau Maj RT Maj RF Intervalle 1 Etalonnag 1a Etalonnag M thode A 1 1 Encadrement Encadrement 1 2 Etalonnag 1b Etalonnag M thode A 1 1 Encadrement Encadrement 1 3 Etalonnag 1c Etalonnag M thode A 1 1 Encadrement Encadrement 1 4 Etalonn 1d Etalonnag M thode A 1 1 Encadrement Encadrement 1 10 Echantillon 10 Echantillon M thode A 1 11 Echantillon 11 Echantillon M thode A 1 12 Echantillon 12 Echantillon M thode A 1 L ordre de passage pour cette s quence est e Flacon 1 Etalonn la limite inf rieure de l encadrement 1 e Flacon 10 Echantillon 10 e Flacon 2 Etalonn 1b limite sup rieure de l encadrement 1 et limite inf rieure de l encadrement 2 e Flacon 11 Echantillon 11 e Flacon 3 Etalonn 1c limite sup rieure de l encadrement 2 et limite inf rieure de l encadrement 3 e Flacon 12 Echantillon 12 e Flacon 4 Etalonn 1d limite sup rieure de l encadrement 3 208 Comprendre votre ChemStation Agilent ChemStation Agilent Comprendre votre ChemStation Agilent 9
201. s obtenues partir d un ou de plusieurs chantillons d talonnage Normalement une aliquote de l chantillon d talonnage est inject e un signal obtenu et la r ponse d termin e en calculant l aire ou la hauteur du pic comme dans la Figure 31 R ponse R ponse 1000 F i J J 5 10 10 Temps min Quantit ng pl Figure 31 Echantillon d talonnage 10 ng yl signal et courbe d talonnage Un coefficient de corr lation est affich avec la courbe d talonnage Le coefficient de corr lation est la racine carr e du coefficient de r gression C est une mesure de l ajustement de la courbe d talonnage entre les points de donn es Le coefficient a une pr cision de trois d cimales dans la plage suivante 0 000 1 000 avec 0 000 pas d ajustement 1 000 ajustement parfait Comprendre votre ChemStation Agilent Etalonnage 7 Pour chaque niveau d talonnage le r siduel relatif est affich Il est calcul par la formule suivante Response calibrated RESPONSE calculated FOR a E Response jcutated avec relRES r siduel relatif en pourcentage La r ponse calcul e repr sente le point sur la courbe d talonnage L cart type r siduel imprim si l option Print calibration table est s lectionn e et sur certains types de rapports est calcul l aide de la formule suivante n 2 2 RESP calibrareai J ResSP satcutlatedi i ResSTD n 2 avec
202. s avec les possibilit s suivantes Sommation des aires des pics dans une gamme sp cifi e par l utilisateur 1 e Sommation des aires d une gamme de pics calcul s avec le m me multiplicateur e Sommation des aires de tous les pics portant le m me nom Le tableau d addition des pics est similaire mais distinct de la table d talonnage standard Comme le tableau d talonnage le tableau d addition des pics fait partie de la m thode en cours Pour une analyse vous devez cr er le tableau d talonnage avant de cr er le tableau d addition des pics Comprendre votre ChemStation Agilent 165 7 Etalonnage Re talonnage 166 Qu est ce que le r talonnage Le r talonnage est le processus qui sert mettre jour un point sur une courbe d talonnage Lorsque vous r talonnez vous analysez un autre chantillon contenant les m mes compos s d talonnage que l original et plus important la m me quantit de ces compos s Lorsque vous analysez l chantillon d talonnage vous obtenez des facteurs de r ponse et des temps de r tention migration mis jour Vous pouvez aussi choisir d obtenir la moyenne des facteurs de r ponse sur plusieurs analyses d talonnage afin que les facteurs de r ponse soient pond r s de mani re gale Pourquoi r talonner La plupart des talonnages ont une dur e de vie limit e en raison des changements de chromatographie Pour maintenir l exactitu
203. s 219 Rapport d talon externe 220 Rapport d talon interne 220 Rapport Control Charts 220 R sultats quantitatifs 221 Comprendre votre ChemStation Agilent 13 Sommaire 11 Styles de rapports 223 Ajout d un rapport personnalis aux styles de rapports 225 Autres param tres de style de rapport 226 Table de sommation des pics 226 Format de rapport pour les pics non talonn s 226 Destination du rapport 227 Formats de fichiers du rapport 227 Rapports r sum s de s quence 229 G n ralit s 229 Pour tablir un rapport r sum de s quence 229 Evaluation de l ad quation du syst me 233 D termination du bruit 237 Calcul de bruit avec six fois l cart type 237 Calcul de bruit par la formule de pic pic 238 Calcul de bruit par la m thode ASTM 239 Calcul de rapport signal sur bruit 241 D rive et variation moyen terme 241 Calcul de la sym trie des pics 242 Formules et calculs de v rification de performance du syst me 244 D finitions g n rales 245 Volume mort 245 Temps de r tention du composant non retenu t m min 245 D finitions des tests de performances 246 Moments statistiques 246 Moments statistiques inclinaison et exc s 247 Largeur de pic vraie W min 248 Facteur de capacit USP Rapport de capacit ASTM k 248 Facteur de tra ne USP USP t 248 Nombre de plateaux th oriques par colonne USP ASTM n 249 Comprendre votre ChemStation Agilent Sommaire Nombre de plateaux th or
204. s corrigent la diff rence de r ponse du d tecteur aux diff rents compos s Un ou plusieurs chantillons d talonnage contenant des quantit s connues des compos s doivent tre analys s dans les m mes conditions que celles de l chantillon inconnu Les donn es d int gration provenant de cet ou ces chantillon s d talonnage sont utilis es pour pr parer un tableau d talonnage Il s agit d une liste des temps de r tention migration des quantit s et des r ponses utilis e dans la g n ration du rapport Les rapports talonn s sont bas s sur deux proc dures d talonnage appel es talon externe et talon interne Comprendre votre ChemStation Agilent 219 10 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Rapport d talon externe Le rapport ESTD donne les r sultats avec les unit s de votre choix ou avec chaque compos en pourcentage de tous les compos s pr sents La proc dure d talon externe exige que le volume relatif inject des chantillons d talonnage et des chantillons inconnus soit connu exactement La fiabilit du rapport d talon externe est limit e par la reproductibilit de l injection et de tous les autres facteurs susceptibles de changer d un chantillon un autre Rapport d talon interne Les limites de la proc dure d talon externe peuvent tre ignor es en utilisant l approche de l talon interne Une quantit connue exactement pas forc
205. s de m thode pour les autres modules Agilent s rie 1100 suivent la m me convention Ixxx1 reg o xxx est l acronyme du module 60 Comprendre votre ChemStation Agilent M thodes 2 Que se passe t il lorsqu une m thode est ex cut e La bo te de dialogue Run Time Checklist sp cifie les parties de la m thode ex cuter lorsqu une analyse est d marr e La liste comprend huit parties e commande ou macro pr analytique e acquisition des donn es e analyse des donn es standard e m thode d analyse pour le second signal CPG seulement e analyse des donn es personnalis e e enregistrement des donn es BPL e commande ou macro post analytique et e sauvegarde de la copie de la m thode avec les donn es Lorsqu une m thode est d marr e les parties sp cifi es de la m thode d finie dans la bo te de dialogue Run Time Checklist sont ex cut es Comprendre votre ChemStation Agilent 61 2 M thodes Fonctionnement de la m thode La Figure 3 donne une vue d ensemble de l tat de la ChemStation pendant le fonctionnement de la m thode dans laquelle toutes les parties de la Run Time Checklist liste de contr le du moment d ex cution sont s lectionn es Etat de la ChemStation Injection Macro post analytique DE nn Evaluation des donn es f 2 D Injection et analyse 3 par l instrument __________ L 3 Macro pr analytique Fichier des Pr wyse Aoo don
206. s g n r s par le syst me analytique Ces messages peuvent tre des messages d erreur des messages syst me ou des messages provenant d un module Ces v nements sont enregistr s dans le journal que celui ci soit affich ou non Pour obtenir un compl ment d information sur un v nement pr sent dans le journal double cliquez sur la ligne appropri e pour afficher un texte d aide descriptif Comprendre votre ChemStation Agilent 71 3 Acquisition des donn es Informations d tat 72 Etat de la ChemStation La fen tre ChemStation Status montre un tat r sum du logiciel ChemStation Lorsqu une analyse unique est en cours d ex cution e la premi re ligne de la fen tre ChemStation Status affiche Run in Progress e la seconde ligne affiche l tat de la m thode en cours et e le nom du fichier de donn es brutes appara t sur la troisi me ligne avec le temps d ex cution r el en minutes dans le cas d un instrument CPG les fichiers pour les injecteurs avant et arri re sont galement affich s Les fen tres Instrument Status donnent des informations sur l tat des modules d instruments et de d tecteurs Elles indiquent l tat des composants individuels et les conditions en cours le cas ch ant par exemple pression gradient et donn es de d bit Barre d tat L interface graphique utilisateur du syst me ChemStation comprend des barres d outils et une barre d tat dans la v
207. s m dianes dans les cycles de bruit ASTM voir la Figure 42 page 239 Comprendre votre ChemStation Agilent 241 11 Evaluation de l ad quation du syst me Calcul de la sym trie des pics La ChemStation ne d termine pas le rapport d asym trie d un pic g n ralement obtenu en comparant les mi hauteurs du pic 10 de la hauteur du pic ou 5 comme recommand par la FDA La sym trie du pic est calcul e comme un pseudo moment par l int grateur l aide des quations de moment suivantes ai mi a r 15H 2 aa m 0 5H 1 5H 2 a3 0 5H 1 5H a4 m a 4 A3 L5H r m m Peak symmetry m My Si aucun point d inflexion n est trouv ou si un seul point d inflexion est rapport la sym trie du pic est calcul e de la mani re suivante a a Peak symmetry az a4 242 Comprendre votre ChemStation Agilent Evaluation de l ad quation du syst me 11 end of peak baseline time start of peak Figure 43 Calcul du facteur de sym trie du pic avec a aire de la tranche ti temps de la tranche H hauteur du point d inflexion avant H hauteur du point d inflexion arri re H hauteur au sommet Comprendre votre ChemStation Agilent 243 11 Evaluation de l ad quation du syst me Formules et calculs de v rification de performance du syst me Pour obtenir les r sultats pour les divers tests d ad quation du syst me la Che
208. s mixtes Modules d instrument additionnels Les modules d instrument additionnels sont le module de contr le d instrument et d acquisition des donn es CPG suppl mentaire r f rence produit G2071BA le module de contr le d instrument et d acquisition des donn es CPL suppl mentaire r f rence produit G2171BA le module additionnel de contr le d instrument et d acquisition de donn es CPL r f rence produit G2172BA le module de contr le d instrument CPL MSD d acquisition de donn es et le module de mise niveau pour l valuation de donn es r f rence produit G2715BA et le module d acquisition des donn es analogiques suppl mentaire r f rence produit G2073BA Comprendre votre ChemStation Agilent 19 1 20 Caract ristiques des ChemStations Modules additionnels d valuation des donn es Les possibilit s de traitement de donn es des ChemStations peuvent aussi tre tendues par l acquisition de modules additionnels de traitement de donn es pour des applications sp cialis es e un module additionnel d valuation spectrale d tecteur barrette de diodes DAD r f rence produit G2180BA e un module additionnel de base de donn es d organisation et de r sultats d chantillons ChemStore r f rence produit G2181BA et e un module d valuation de donn es de d convolution et de bioanalyses CPL MSD r f rence produit G2720BA ne peut tre utilis qu avec une ChemStation de co
209. s ont fait en r alit et les ventuels v nements inattendus survenus pendant la s quence e les listes des m thodes e les rapports individuels de chaque chantillon e les statistiques sur les analyses bas es sur les crit res s lectionn s Les statistiques ne sont calcul es que pour les compos s talonn s et e un sommaire avec des num ros de pages faisant r f rence aux sections d taill es du rapport Pour tablir un rapport r sum de s quence Lors de l tablissement d un rapport r sum des s quences en cochant les cases appropri es et le cas ch ant en s lectionnant un style de rapport dans template vous pouvez s lectionner toute combinaison des neuf cat gories suivantes que vous voulez voir figurer dans le rapport Chaque mod le template sp cifie le contenu et la pr sentation de cette section particuli re du rapport r sum de s quence complet Comprendre votre ChemStation Agilent 229 10 230 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Vous pouvez choisir l un des styles de rapport r sum de s quence suivants One Page Header Le mod le GLP bonnes pratiques de laboratoire imprime GLP en grandes lettres comme page de titre pour le rapport suivant Il comporte galement la date et un emplacement pour une signature Configuration S lectionnez Configuration si vous voulez inclure dans le rapport la configuration de l instrument et les sp ci
210. s sp cifi s dans le tableau de s quence Pour des s quences d talonnage explicites les chantillons d talonnage sont introduits dans la s quence sans aucune valeur d intervalle entr dans le tableau de s quence Un r talonnage est effectu une fois pour chaque entr e d chantillon d talonnage pr sent dans le tableau de s quence 192 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 S quences d talonnage cycliques un seul point Ce type de s quence utilise le m me flacon c est dire l chantillon d talonnage intervalles r guliers dans la s quence La valeur de l intervalle entr dans le tableau de s quence d termine comment est fait le r talonnage Par exemple une valeur d intervalle de 2 proc dera un r talonnage tous les deux flacons d chantillon dans la s quence Comprendre votre ChemStation Agilent 193 Automatisation S quences d talonnage cycliques multipoints Ce type de s quence utilise diff rents chantillons d talonnage pour r talonner une m thode talonn e multipoints L exemple suivant d crit une s quence deux m thodes A et B pour analyser deux groupes d chantillons Les deux m thodes sont des m thodes d talonnage multipoints qui se r talonneront automatiquement intervalles d finis Pour chaque m thode le tableau de s quence comporte trois entr es e Deux points d talonnage Lignes de s quence 1 et 2 dans M
211. saire pendant l analyse pour optimiser l int gration Vous pouvez indiquer la largeur de pic en unit s de temps c est la largeur mi hauteur du premier pic attendu en excluant le pic de solvant Le seuil ou sensibilit de pente est un r glage de sensibilit de d tection de pic Il est modifiable sur une chelle lin aire Le rejet d aire d termine le rejet de pics en fonction de leur hauteur finale Les pics de hauteur inf rieure la hauteur minimale ne sont pas inclus dans les calculs Le rejet d aire d finit le rejet des pics en fonction de leur aire finale Tous les pics dont les aires sont inf rieures l aire minimale ne seront pas rapport s Quand la d tection d paulement est activ e l int grateur d tecte les paulements en utilisant la courbure du pic donn e par la d riv e seconde Quand la courbure atteint z ro l int grateur identifie ce point d inflexion comme un paulement possible Si l int grateur identifie un autre point d inflexion avant le sommet du pic un paulement a t d tect Comprendre votre ChemStation Agilent Int gration 4 Largeur du pic La valeur de largeur du pic contr le la s lectivit de l int grateur pour distinguer les pics du bruit de la ligne de base Pour obtenir de bonnes performances d finissez la largeur de pic proche de la largeur mi hauteur des pics chromatographiques lectroph rographique r els L int grateur met jour
212. seulement si l option Add Chromatogram Output est s lectionn e Short Comprend des r sultats quantitatifs sous forme de texte de tous les signaux int gr s tablis dans la bo te de dialogue Signal Details CPL seulement ou la bo te de dialogue Signal CPG seulement La largeur de pic dans le rapport abr g est calcul e par la formule plus complexe utilis e par l int grateur PW 0 3 PRight IPLeft 0 7 Area Height o IPRight et IPLeft sont les points d inflexion Detail Comprend l en t te les r sultats quantitatifs et les courbes d talonnage L en t te est stock dans un fichier appel RPTHEAD TXT dans le r pertoire des m thodes Pour inclure un texte sp cifique la m thode vous pouvez changer l en t te l aide d un diteur de texte Header Short Comprend l en t te du fichier et les r sultats quantitatifs sous forme de texte L en t te est stock dans un fichier appel RPTHEAD TXT dans le r pertoire des m thodes Pour inclure un texte sp cifique la m thode vous pouvez changer l en t te l aide d un diteur de texte GLP Short Comprend l en t te les informations d chantillon les conditions d instrument le journal le signal et les r sultats quantitatifs L en t te est stock dans un fichier appel RPTHEAD TXT dans le r pertoire des m thodes Pour inclure un texte sp cifique la m thode vous pouvez changer l en t te l aide d un d
213. souvent utile de changer les valeurs des seuils largeur de pic rejet de hauteur et rejet d aire pour personnaliser l int gration La Figure 27 montre comment ces param tres influencent l int gration de cinq pics dans un signal MR Rs Hauteur de rejet Ligne de base Largeur du pic Figure 27 Utilisation d v nements initiaux Comprendre votre ChemStation Agilent Le pic 1 Le pic 2 Le pic 3 Le pic 4 Le pic 5 Le pic 6 Le pic 7 Int gration 4 Un pic n est int gr que quand les quatre crit res sur les param tres d int gration sont conformes En utilisant la largeur de pic pour le pic 3 le rejet d aire et le seuil pr sent s sur la Figure 27 seuls les pics 1 3 5 et 7 sont int gr s est int gr car les quatre v nements d int gration sont conformes est rejet parce que l aire se situe au dessous de la valeur de rejet d aire d finie est int gr car les quatre v nements d int gration sont conformes n est pas int gr parce que la hauteur du pic est au dessous du rejet de hauteur est rejet parce que l aire se situe au dessous de la valeur de rejet d aire d finie n est pas int gr le filtrage et le regroupement rendent ce pic invisible est int gr Tableau 10 Valeurs de rejet de hauteur et d aire Param tre d int gration Le pic 1 Lepic2 Lepic3 Lepic4 Lepic5 Lepic7 Hauteur de rejet Dessus Dessus Dessus Dessous Dessus Dessus Rejet d aire Dess
214. ssibilit de param tres de correction de ligne de base sans relation au signal des commandes de contr le de l int grateur d finissant des gammes de temps de r tention migration pour l exploitation de l int grateur allocation de l paulement de pic par l utilisation d une d riv e seconde ou degr de calculs de courbure chantillonnage am lior de points de donn es non quidistants pour de meilleures performances avec des fichiers de donn es CPL DAD reconstruits partir des spectres DAD et L algorithme d int gration est d crit plus en d tail dans le Chapitre 4 Int gration Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Analyse des donn es Quantification Le mode d talonnage de la vue Analyse des donn es de la ChemStation permet d afficher simultan ment e le ou les signaux talonn s avec l indication de la fen tre des temps de r tention migration du compos en cours e le tableau d talonnage dont l affichage peut tre configur partir d une s lection compl te de param tres d talonnage et e la courbe d talonnage pour le compos en cours d talonnage Toutes les fen tres du mode d talonnage sont li es de telle sorte que les changements dans l une d elles se r percutent sur toutes les autres Ce mode permet la s lection graphique et les modifications des donn es d talonnage La quantification est bas e sur des
215. ste d terminer les facteurs de r ponse utilis s pour calculer les concentrations absolues de compos en injectant des chantillons d talonnage pr par s sp cialement Le tableau d talonnage sert aussi l identification Voir le Chapitre 6 Identification des pics Un compos chimique peut tre constitu de plusieurs pics dans un talonnage signaux multiples en principe un par signal Dans un talonnage un seul signal un compos fait r f rence un pic Un niveau d talonnage est constitu des points d talonnage pour une concentration d chantillon d talonnage Dans un talonnage multisignaux les points d talonnage peuvent tre distribu s sur plusieurs signaux Un point d talonnage fait r f rence un rapport quantit r ponse pour un pic pr sent sur la courbe d talonnage Un chantillon d talonnage aussi appel talon ou m lange talon est un chantillon contenant une quantit connue du compos quantifier Dans le logiciel l chantillon d talonnage est consid r comme une injection effectu e partir du flacon de l chantillon d talonnage Vous pouvez acheter les chantillons d talonnage chez les fournisseurs de produits chimiques ou les pr parer en utilisant une quantit tr s pr cise du compos pur La quantit du compos dans l chantillon d talonnage est g n ralement exprim e en tant que concentration par exemple en unit s ng ul Com
216. t l tape 2 s il reste d autres flacons analyser Exemple Cette section d crit un exemple de d limitation de s quence constitu d une m thode appel e Brack M La m thode Brack M est une m thode d talon interne deux niveaux utilisant l talonnage cyclique Tableau de s quence Le tableau de s quence de Brack M ci apr s est tronqu pour simplifier l exemple Il comprend sept lignes Les deux premi res lignes d finissent les conditions de r talonnage pour chaque point Les lignes restantes d finissent les chantillons analyser Plus pr cis ment le tableau de s quence de la m thode Brack M a e Une entr e Bracket dans la colonne Update Response Factor qui sp cifie la d limitation des chantillons avec des chantillons d talonnage e Une entr e Replace dans la colonne Update Retention Migration Times qui sp cifie un remplacement des temps de r tention migration e Une valeur de l intervalle entr de 3 dans la colonne Recalib Interval qui sp cifie le r talonnage tous les trois chantillons 202 Comprendre votre ChemStation Agilent Automatisation 8 Tableau 20 Tableau de s quence pour BRACK M 1 1 BRACK M Etalonnage 1 D limiter Remplacer 3 2 2 BRACK M Etalonnage 2 D limiter Remplacer 3 3 10 BRACK M 4 11 BRACK M 5 12 BRACK M 6 13 BRACK M 7 14 BRACK M Comprendre votre ChemStation Agilent 203 8 Automatisation Ordre d analyse de s quence d limi
217. t e Run Method Vial Inj DataFrile Lvl Upd Upd Operation No Name No No Name No RE Ret 1 Brack M J 1 ci 03001 d 1 R R Report for Calibration Run No 1 2 Brack M 1 2 ci 03002 d 1 A R Report for Calibration Run No 2 3 Brack M 2 1 c2 03001 d 2 R R Report for Calibration Run No 3 4 Brack M 2 2 c2 03002 d4 2 A R Report for Calibration Run No 4 Print Calibration Table 5 Brack M 10 1 010 0301 d Sample Analysis no report 6 Brack M 11 1 011 0301 d Sample Analysis no report 7 Brack M 12 4 012 0301 d Sample Analysis no report 8 Brack M ig 1 ci 03003 d 1 A R Calibration Analysis no report 9 Brack M 1 2 ci 03004 d 1 A R Calibration Analysis no report 10 Brack M 2 1 c2 03003 d4 2 A R Calibration Analysis no report 11 Brack M 2 2 c2 03004 d4 2 A R Calibration Analysis no report Print Calibration Table 010 0301 d Report for Sample Run No 5 011 0301 d Report for Sample Run No 6 012 0301 d Report for Sample Run No 7 ci 03003 d 1 R Report for Calibration Run No 8 ci 03004 d 1 A Report for Calibration Run No 9 c2 03003 d4 2 R Report for Calibration Run No 10 c2 03004 d 2 A Report for Calibration Run No 11 12 Brack M 13 I 013 0301 d Sample Analysis no report 13 Brack M 14 1 014 0301 d Sample Analysis no report 14 Brack M T 1 ci 03005 d4 1 A R Calibration Analysis no report 15 Brack M T 2 ci 03006 d 1 A R Calibration Analysis no report 16 Brack M 2 I c2 03005 d 2 A R Calibration Analysis no report 17 Brack M 2 2 c2 03006 d 2 A R Calibration Analysis
218. t hors de la gamme acceptable sp cifi e par l utilisateur provoqueront l arr t de l ex cution automatique de l instrument Comprendre votre ChemStation Agilent 43 1 Caract ristiques des ChemStations Contr le des instruments 44 Il est possible d tendre la capacit des ChemStations en mati re de contr le des instruments par l achat de modules d instruments suppl mentaires pour permettre des configurations comportant plusieurs instruments et des techniques mixtes Pour plus de d tails ce sujet voir le s manuel s fourni s avec les modules ChemStation suppl mentaires La mise en r seau Le logiciel ChemStation a t test avec et est support par les produits logiciels de r seau LanManager Microsoft Windows 2000 et Microsoft Windows XP Professionnel bas s sur les sp cifications IEEE 802 3 CSMA CD Il devrait tre compatible avec tout logiciel de r seau lui m me compatible avec les pratiques de programmation recommand es des environnements d exploitation Microsoft Windows Ces produits permettent la ChemStation de partager des unit s physiques telles que des traceurs et des imprimantes avec les ordinateurs d autres laboratoires ainsi que de partager des informations telles que des fichiers de donn es et des m thodes Client Serveur Le logiciel ChemStation peut tre install sur un serveur de r seau appropri et transf r sur les PC clients selon les besoins Chaque configurati
219. t 31 1 32 Caract ristiques des ChemStations la d finition interactive des v nements d int gration permettant l utilisateur de s lectionner graphiquement des temps d v nement l int gration graphique manuelle ou lastique de chromatogrammes lectroph rogramme n cessitant une interpr tation humaine ces v nements peuvent aussi tre enregistr s dans la m thode et utilis s dans le cadre de l exploitation automatis e l affichage et l impression des r sultats d int gration et la capacit d int grer au moins 1000 pics par chromatogramme lectroph rogramme d finitions de param tres d int gration permettant de r gler ou de modifier les param tres de l int grateur de base pour le rejet d aire le rejet de hauteur la largeur de pic et la sensibilit de pente des param tres de contr le de la ligne de base tels que forcer la ligne de base maintenir la ligne de base ligne de base sur toutes les vall es ligne de base la vall e suivante premi re ligne de base vers l arri re partir de la fin du pic courant contr le de la sommation d aires reconnaissance de pic n gatif traitement de l int gration tangentielle y compris des commandes de d finition de pic de solvant et possibilit de d finir des tables d v nements de calculs d int gration tangentielle sur front ou tra n e individuellement pour tous les signaux chromatographiques lectroph rographique po
220. t chacune les fonctions d acquisition des donn es de contr le d instrument d analyse de donn es int gration quantification et rapport d automatisation et de personnalisation pour un instrument d analyse Un instrument est d fini comme fonctionnant sur une base de temps unique mais il peut collecter simultan ment des donn es provenant de diff rents d tecteurs Les cinq versions sont les suivantes e la ChemStation mono instrument pour les syst mes de chromatographie en phase gazeuse CPG r f rence produit G2070BA e la ChemStation mono instrument pour les syst mes de chromatographie en phase liquide CPL r f rence produit G2170BA Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 la ChemStation mono instrument pour les syst mes d lectrophor se capillaire EC r f rence produit G1601A et la ChemStation mono instrument pour les syst mes de couplage de chromatographie en phase liquide d tecteur de masse CPL MSD r f rence produit G2710BA et la ChemStation analogique num rique A N mono instrument pour l acquisition des donn es analogiques avec contr le d v nement externe r f rence produit G2072BA Les possibilit s de contr le d instrument du logiciel de la ChemStation peuvent tre largies par l acquisition de modules instruments suppl mentaires d acquisition de donn es et de contr le pour permettre des configurations plusieurs instruments et technique
221. t par un certain nombre de points un pour chaque niveau R ponse 1000F Courbe d talonnage 500 F 100 1 5 10 Quantit ng pl Figure 35 Courbe d talonnage multipoints avec trois points Le tableau d talonnage correspondant qui contient l information utilis e pour g n rer cette courbe pourrait ressembler celui du Tableau 12 Tableau 12 Tableau d talonnage Point Quantit ng ul R ponse comptages d aire 1 1 100 2 5 500 3 10 1000 Dans cet exemple les chantillons d talonnage utilis s pour g n rer les trois points ont t identifi s en tant que 1 2 et 3 Comprendre votre ChemStation Agilent 159 7 160 Etalonnage Gammes d talonnages Chaque talonnage multipoints est valide sur la gamme des concentrations utilis es dans les chantillons d talonnage L extrapolation d une courbe d talonnage particuli rement si elle est non lin aire est au mieux une approximation La gamme d talonnage valide pour chaque compos peut tre d finie dans la bo te de dialogue Compound Details Chaque entr e pour ce compos peut tre exprim e en tant que limites inf rieure et sup rieure Si ces limites sont d pass es le rapport est annot Ajustements de la courbe d talonnage Il existe divers calculs d ajustement de courbe utiliser avec l talonnage multipoints e Lin aire point point e Lin aire e Journal e Puissance e Exposant e
222. t sur une dur e infinie Au sens strict du terme les donn es statistiques ne s appliquent qu une population compl te et d finitive de donn es Il en r sulte que la condition n cessaire pour pratiquer un traitement statistique valable est que l chantillon soit repr sentatif de l ensemble des donn es Moyenne de l chantillon M La valeur moyenne M d un chantillon al atoire constitu de N mesures est calcul e partir du nombre limit N de valeurs discr tes observ es X index es en ordre cons cutif i selon la formule avec N nombre d observations discr tes X valeur des observations discr tes index e par i Comprendre votre ChemStation Agilent 253 11 Evaluation de l ad quation du syst me Echantillon Ecart type S Consid rons un chantillonnage al atoire de taille N L cart type S de l chantillon valu avec un nombre fini d chantillons pris parmi une grande population de donn es est d termin par N X Mm i N 1 L cart type S de l chantillonnage diff re de l cart type de toute la population de donn es par les points suivants e la valeur moyenne est utilis e la place de la moyenne r elle des chantillons et e on divise par N 1 au lieu de N Coefficient de variation RSD USP Le coefficient de variation est d fini comme S RSD 100 S 07 cart type de la moyenne Sm Soient M la moyenne de l chantillonnage et S l cart type de
223. taire Guide de macro programmation disponible dans l aide en ligne comprend un jeu tendu d exemples fonctionnels assortis d une description compl te des types de donn es internes et des structures Le fichier d aide des commandes atteint directement partir du menu Help de la ChemStation ou de la bo te de dialogue Show Command constitue la r f rence des fonctions pour le programmeur Il explique la syntaxe et les param tres avec des exemples de macros illustrant l utilisation de nombreuses commandes Comme ils travaillent en ligne les utilisateurs peuvent parfaitement copier les exemples et la syntaxe des commandes directement dans leurs propres fichiers source macro 46 Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 La structure des r pertoires ChemStation L exemple suivant montre la structure des r pertoires de la ChemStation Elle comprend des r pertoires g n riques partag s par tous les instruments configur s et des r pertoires sp cifiques aux instruments Le programme d installation du logiciel cr e un sous r pertoire dans le r pertoire ChemStation par d faut CHEM32 pour chaque instrument configur avec le num ro de l instrument Les donn es m thodes et s quences correspondant cet instrument sont enregistr es par d faut dans ce sous r pertoire CHEM32 REPSTYLE core PICTURES LANGUAGE HELPENU 1024 L s00 LANGUAGE we HELPENU
224. teur de pente montante est gt 15 l algorithme reconna t la possibilit de d but d un pic Tableau 8 Valeurs incr mentales de l accumulateur de pente montante Filtre de d riv e 1 3 Filtre 1 Filtre 2 Filtre 3 Sorties en fonction du seuil de sensibilit de pente Pente gt Seuil 8 5 3 Courbure gt Seuil 0 2 1 Pente lt Seuil 8 5 3 Pente gt Seuil 4 2 1 Courbure lt Seuil 0 2 1 Fin du pic Dans le Tableau 9 la largeur du pic attendu d termine quelles valeurs de pente et de courbure de filtre sont compar es au seuil Par exemple quand la largeur de pic attendue est faible les nombres du filtre 1 sont ajout s l accumulateur de pente descendante Si la largeur de pic attendue augmente ce sont les nombres du filtre 2 et finalement ceux du filtre 3 qui sont utilis s Quand la valeur de l accumulateur de pente descendante est gt 15 algorithme reconna t la possibilit de fin d un pic Tableau 9 Valeurs incr mentales pour l accumulateur de pente descendante Filtre de d riv e 1 3 Filtre 1 Filtre 2 Filtre 3 Sorties en fonction du seuil de sensibilit de pente Pente gt Seuil 8 5 3 Courbure gt Seuil 0 2 1 Pente lt Seuil 11 7 4 Pente gt Seuil 28 18 11 Courbure lt Seuil 0 2 1 L algorithme de sommet du pic Le sommet du pic est reconnu comme le point le plus lev du chromatogramme par construction d une adaptation par
225. teur est le num ro de d part de l incr mentation Tableau 13 Prefix Pr fixe Compteur r sultats dans le nom de fichier long 000001 long000001 longname 000001 longname000001 testwithalongna 1 testwithalongna1 Comprendre votre ChemStation Agilent 185 Automatisation Fonctionnement apr s s quence 186 Vous pouvez sp cifier ce qui se passe apr s la fin d une s quence pendant l ex cution normale ou quand la ChemStation rencontre une erreur pendant l ex cution de la s quence Pour une ex cution CPL en cochant la case Cmd Macro des param tres de s quence vous avez les choix suivants e Mettre le syst me en tat STANDBY avec la pompe et la lampe inactives off Mettre le syst me en tat LAMPOFF avec toutes les lampes inactives off CPL et EC seulement Mettre le syst me en tat PUMPOFF avec toutes les pompes inactives off CPL et EC seulement ou e Utiliser une macro SHUTDOWN par d faut ou modifier SHUTDOWN MAC pour d terminer le fonctionnement sp cifique Par exemple vous pouvez vouloir mettre le syst me hors tension une fois votre s quence termin e La macro shutdown peut aussi servir mettre votre d bit z ro ou le r duire lentement Dans les Sequence Parameters vous pouvez sp cifier toute macro personnalis e utiliser en incluant son nom dans le champ Post Sequence Cmd Macro et en cochant la case Not Ready Timeout CPL et EC seulement Le Not Ready T
226. teurs qui souhaitent d finir le contenu exact de leurs propres rapports L utilisateur d finit graphiquement le contenu d un cadre pouvant inclure des informations g n rales d chantillon ainsi que des informations de r sultat d int gration de signaux et d analyse quantitative L utilisateur peut d finir des l ments individuels tels que du texte des tableaux et des graphiques les organiser en sections et ajuster graphiquement la position la taille et l orientation relative de chaque l ment d fini Chacune des sections peut tre ajout e supprim e r agenc e et imbriqu e L utilisateur peut d finir des en t tes et des bas de page qui appara tront sur chaque page des tampons horodateurs pour la num rotation des rapports et des pages dans le format page x de y L information incluse dans le rapport peut tre tout param tre de la ChemStation ou d fini par l utilisateur Une fois labor le rapport peut tre associ une m thode particuli re il devient alors le format de rapport par d faut pour ce type particulier d analyse Les rapports personnalis s peuvent tre visualis s l cran imprim s et lus dans un fichier Les rapports consultables l cran comprennent des graphiques Pour plus d informations sur la mise en page des rapports voir le syst me d aide en ligne Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Rapports tableaux Le logiciel ChemStatio
227. th 0 25 x width of current peak Si un v nement d int gration programm d sactive ou d finit la largeur du pic une valeur particuli re l ajustement automatique de la largeur du pic est d sactiv Comprendre votre ChemStation Agilent 115 4 116 Rejet de hauteur et de largeur de pic La largeur de pic et le rejet de hauteur jouent tous deux un grand r le dans le processus d int gration En changeant leurs valeurs vous obtiendrez des r sultats diff rents e Augmentez le rejet de hauteur et la largeur de pic lorsque des composants relativement dominants doivent tre d tect s et quantifi s dans un environnement tr s bruyant Une largeur de pic accrue augmente le filtrage du bruit et un rejet de hauteur accru permet d ignorer le bruit al atoire e Diminuez le rejet de hauteur et la largeur de pic pour d tecter et quantifier des composants traces ceux dont les hauteurs approchent celles du bruit lui m me En diminuant la largeur de pic vous diminuez le filtrage des signaux tandis qu en diminuant le rejet de hauteur vous vous assurez que les petits pics ne seront pas rejet s pour cause de hauteur insuffisante Quand une analyse contient des pics de largeurs diff rentes d finissez la largeur de pic en fonction des pics les plus troits et r duisez le rejet de hauteur pour viter que les pics les plus larges soient ignor s cause de leur hauteur r duite Optimisation de l int gration Il est
228. tion 148 Trouver les pics de r f rence 148 Trouver les pics ISTD 148 Trouver les pics talonn s restants 149 Classification des pics non identifi s 149 che Agilent Technologies 137 6 Identification des pics Qu est ce que l identification des pics L identification des pics consiste identifier les composants d un chantillon inconnu en se basant sur leurs caract ristiques chromatographiques lectro ph rographique d termin es par l analyse d un talon bien d fini Si la m thode analytique n cessite une identification il est obligatoire d identi fier ces composants Les caract ristiques de signal de chaque composant con cern sont stock es dans le tableau d talonnage de la m thode L identification consiste comparer chaque pic du signal avec ceux du tableau d talonnage Le tableau d talonnage contient les temps de r tention pr vus pour les composants concern s Si un pic correspond au temps de r tention migration d un pic pr sent dans le tableau d talonnage il re oit les attributs de ce composant par exemple le nom et le facteur de r ponse Les pics qui ne correspondent aucun de ceux du tableau d talonnage sont r pertori s comme inconnus Le processus est contr l par e le temps de r tention migration du tableau d talonnage pour les pics d sign s comme pics de r f rence e les fen tres de temps de r tention migration sp cifi es pour les pics de r f renc
229. tions de la ChemStation 2 M thodes Ce chapitre d crit les notions de m thode et explique comment travailler avec ces m thodes 3 Acquisition des donn es Ce chapitre d crit les notions d acquisition de donn es de fichier de donn es de journal et autres 4 int gration Ce chapitre d crit les notions d int gration par les algorithmes de l int grateur de la ChemStation 5 Quantification Ce chapitre d crit l algorithme de l int grateur standard l int gration et l int gration manuelle 6 Identification des pics Ce chapitre d crit l int grateur am lior Il explique comment int grer des pics dans des cas r els et comment utiliser l int grateur am lior Comprendre votre ChemStation Agilent 3 10 11 12 Etalonnage Ce chapitre d crit les notions d identification de pic Automatisation Ce chapitre d crit la m thode de quantification utilis e par la ChemStation Il fournit des d tails sur les calculs area et height d talon externe ESTD les calculs de norm d talon interne ISTD et de quantification des pics non identifi s La revue des lots Ce chapitre d crit l talonnage dans la ChemStation Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent Ce chapitre d crit les notions d automatisation Il explique comment travailler avec des s quences dans la ChemStation ce qui se passe l ex cution d une s quence et comment personnaliser d
230. tration Suivi classique de la ligne de base sans p n tration Quand cette option est s lectionn e une recherche de p n tration de la ligne de base est effectu e sur chaque groupe de pics Si des p n trations sont d tect es les points de d but et ou de fin du pic sont d cal s jusqu liminer toutes les p n trations comparez les lignes de base des Figure 13 et Figure 12 Comprendre votre ChemStation Agilent 99 4 100 Int gration Standard baseline tracking Suivi Baseline tracking no standard de ligne de base penetration Suivi de ligne de base sans p n tration Figure 13 Suivi standard de ligne de base et suivi de ligne de base sans p n tration Le suivi de ligne de base sans p n tration n est pas disponible pour les pics de solvant accompagn s de leurs pics fils et paulements Advanced Baseline Tracking Suivi volu de la ligne de base Dans le mode de suivi volu de la ligne de base l int grateur tente d optimiser les emplacements de d but et de fin de pics il red finit la ligne de base pour un groupe de pics et supprime les p n trations des lignes de base voir P n tration de la ligne de base la page 99 Dans beaucoup de cas le mode de suivi volu de la ligne de base donne une ligne de base plus stable moins d pendante du seuil de pente Peak Valley Ratio Rapport pic vall e Ce param tre utilisateur est un l ment du mode de suivi volu de
231. ue Method and Run Control Contr le de m thode et d analyse de la ChemStation La barre d tat contient un champ d tat du syst me et des informations sur la m thode et la s quence actuellement charg e Si elles ont t modifi es apr s le chargement elles sont marqu es d un triangle rouge Pour un module S rie Agilent 1100 pour CLHP un symbole EMF maintenance pr dictive jaune rappelle l utilisateur que les limites d utilisation d finies pour les consommables par exemple la lampe ont t d pass es Comprendre votre ChemStation Agilent Acquisition des donn es 3 Diagramme du syst me Si les instruments d analyse configur s le permettent par exemple pour les modules S rie Agilent 1100 pour CLHP ou le CPG S rie Agilent 6890 vous pouvez afficher le diagramme de votre syst me ChemStation Vous pouvez ainsi visualiser d un coup d il l tat du syst me S lectionnez la rubrique System Diagram dans le menu View de la vue Method and Run Control pour activer le diagramme C est une repr sentation graphique de votre syst me ChemStation Chaque composant est repr sent par une ic ne L tat en cours est affich avec le codage de couleurs d crit ci dessous Tableau 6 Codage couleur du sch ma du syst me Couleur Etat gris inactif ou teint jaune non pr t vert pr t bleu ex cution rouge erreur Vous pouvez en outre afficher les listes des valeurs de param tres r elles
232. ue du rapport signal ou courbe d talonnage est enregistr dans un m tafichier Microsoft Windows WMF Un rapport peut comporter plusieurs WMF Le format du fichier g n r est conforme au format m tafichier standard Microsoft tel que d fini dans la documentation de d veloppement de logiciel sous Windows Ces fichiers sont compatibles avec le format Aldus Placeable Metafile APM utilis par de nombreux logiciels propri taires Comprendre votre ChemStation Agilent 227 10 228 Utilisation des rapports g n r s par la ChemStation Agilent DIF CSV XLS Les donn es de rapport tabulaire sont enregistr es en Data Interchange Format DIF Ce format est accept par les principaux tableurs tels que Microsoft Windows EXCEL Ind pendamment du style de rapport s lectionn seule l information contenue dans le style de rapport Short sera enregistr e Le rapport est au format Comma Separated Values CSV valeurs s par es par des virgules Il s agit d un format tr s simple pour des donn es tabulaires accept par de nombreux tableurs et bases de donn es Ind pendamment du style de rapport s lectionn seule l information contenue dans le style de rapport Short sera enregistr e Il peut y avoir plusieurs fichiers DIF et CSV pour un m me rapport Pour chaque bloc du rapport le premier fichier par exemple REPORTOO CSV contient les informations d en t te du rapport Les fichiers suivants
233. uplage CPL MSD Il est possible de configurer jusqu quatre instruments chromatographiques sur chaque ChemStation Si des instruments quip s de d tecteurs spectroscopiques d tecteurs barrette de diodes pour chromatographie en phase liquide ou lectrophor se capillaire sont configur s le nombre de d tecteurs barrette de diodes support s sur une ChemStation est limit deux et le nombre d instruments support s est limit trois Lorsque la ChemStation du couplage CPL MSD est utilis e pour contr ler le module CPL MSD de la s rie Agilent 1100 ventuellement un CPL de la S rie Agilent 1100 ou un CPL 1090 S rie II le PC ne peut g rer aucun autre instrument Comprendre votre ChemStation Agilent Caract ristiques des ChemStations 1 Modules d di s l valuation de donn es Il existe galement trois produits d di s l valuation de donn es sur lesquels on peut ne pas configurer d instruments Ils sont destin s l valuation de donn es dans un environnement de bureau e la ChemStation destin e l valuation de donn es r f rence produit G2090BA a les m mes capacit s d valuation de donn es que les ChemStations de base e la ChemStation destin e l valuation de donn es CPL 3D r f rence produit G2190BA dot e des capacit s d valuation de donn es de la ChemStation et d valuation des donn es spectrales du d tecteur barrette de diodes et e la ChemStation destin
234. us Dessous Dessus Dessous Dessous Dessus Pic int gr Oui Non Oui Non Non Oui Ev nements chronoprogramm s Vous pouvez utiliser des v nements chronoprogramm s pour personnaliser la construction de la ligne de base du signal lorsque la construction par d faut ne convient pas Ces v nements peuvent tre utiles pour l addition des aires de pics et pour corriger des aberrations de la ligne de base court et long terme Pour plus d informations sur les v nements d int gration voir Ev nements d int gration la page 114 Comprendre votre ChemStation Agilent 117 4 Int gration Auto int gration 118 Description g n rale La fonction d auto int gration est un point de d part pour la d finition d v nements initiaux C est en particulier utile lors de la mise en place d une m thode nouvelle Vous pouvez commencer par une table d v nements d int gration par d faut ne contenant aucun v nement programm vous pourrez ensuite optimiser les param tres propos s par la fonction d auto int gration pour utilisation g n rale Principes de fonctionnement La fonction d auto int gration lit les donn es du chromatogramme et calcule les valeurs optimales des param tres d int gration initiaux pour chaque signal de l objet chromatogramme L alsorithme examine 1 au d but et la fin du chromatogramme pour d terminer le bruit et la pente de cette partie Le bruit est calcul
235. ut par exemple tre n cessaire de modifier une s quence active pour ajouter un nouveau lot d chantillons Vous pouvez modifier la s quence afin que ces flacons soient les prochains chantillons que la ChemStation traitera apr s ceux qui se trouvent dans la ligne de s quence en cours d analyse Pour ex cuter partiellement une s quence Un tableau de s quence d j cr peut tre partiellement ex cut en s lection nant Partial Sequence dans le menu Sequence La bo te de dialogue Partial Sequence dans laquelle vous pouvez s lectionner des chantillons individu els du tableau pour les analyser s affiche Chaque ligne de cette bo te de dialogue pr sente une analyse unique Pour chaque analyse le flacon la m thode le fichier de donn es et le nom de l chantillon sont indiqu s En outre des informations cod es sur le tableau de s quence et d ventuels chantillons d talonnage figurent dans les colonnes Seq Tbl et Calib RF RT Voir l aide en ligne pour une explication de ces codes Vous pouvez obtenir une impression d une s quence partielle en s lectionnant le bouton Print La bo te de dialogue Partial Sequence est obtenue lorsque la m thode SimpReg et le tableau de s quence montr s plus loin dans le Tableaux 18 page 198 et le Tableaux 19 page 199 sont en cours Les chantillons 1 2 4 5 et 8 sont marqu s pour traitement Comprendre votre ChemStation Agilent 179 8 Automatisatio
236. ve les r sultats du test sont automatiquement enregistr s dans la base de donn es DADTest un fichier registre appel DADTest Reg situ dans le r pertoire par d faut de l instrument Fonction Review DAD Test La fonction Review DAD Test dans le menu View de l analyse des donn es vous permet d examiner le fichier DADTest Reg tout moment Ce fichier est prot g par un total de contr le et cod en binaire pour emp cher tout changement Vous pouvez s lectionner l un des l ments suivants du test DAD pour examen Show Holmium Spectra Trace tous les spectres holmium list s dans la table d examen du test DAD Le spectre actif est marqu Show Intensity Spectra Trace tous les spectres d intensit list s dans la table d examen du test DAD Le spectre actif est marqu 268 Comprendre votre ChemStation Agilent V rification du syst me 12 Save as New Database Si vous changez la lampe de votre d tecteur barrette de diodes vous pouvez r initialiser le DADTest en supprimant tout r sultat de test ind sirable de la table puis en utilisant la fonction Save As New Database Show Selected Spectra N affiche que les spectres que vous avez s lectionn s dans la table Show Intensity Graph Vous pouvez tracer un graphe d intensit pour donner une indication de la long vit de la lampe de votre d tecteur barrette de diodes Le graphe donne une fonction d intensit maximum de lampe par rapport au
237. x m thodes appropri es et les sp cifications de r talonnage automatique Pour des informations compl mentaires sur les m thodes et les s quences voir le Chapitre 8 Automatisation et consulter l aide en ligne du syst me Configuration du syst me La configuration du syst me d instrument s effectue l aide du programme Editeur de configuration Il vous permet de sp cifier la nature de vos instruments leurs adresses GPIB ou LAN les r pertoires pour vos donn es les s quences et m thodes ainsi que les couleurs des crans du logiciel de ChemStation Pour plus d informations r f rez vous aux manuels des modules suppl mentaires ChemStation Comprendre votre ChemStation Agilent 23 1 Caract ristiques des ChemStations Mod le de donn es Le logiciel ChemStation est con u autour d un mod le de donn es bas sur une structure de m moire appel e registre Les registres sont des structures polyvalentes capables de contenir des donn es analytiques la fois des informations deux dimensions par exemple temps intensit et des donn es trois dimensions par exemple temps intensit longueur d onde La ChemStation fournit des commandes et des fonctions permettant de construire d tendre d extraire et si cela ne modifie pas les donn es primaires de modifier des registres Pour tout compl ment d information r f rez vous au Guide de macro programmation disponible dans l aide en ligne 24
238. xaminer mais pas modifier les donn es BLP GLP dans le menu d analyse des donn es de la ChemStation Commande ou macro post analytique Si une commande ou une macro post analytique est sp cifi e elle est ex cut e apr s l valuation des donn es Par exemple copie des donn es sur un disque pour des raisons de sauvegarde Sauvegarde d une copie de la m thode avec les donn es Cette op ration est effectu e apr s l acquisition des donn es et seulement si Data Acquisition est activ e dans la Run Time Checklist Elle copie la m thode en cours dans le r pertoire des donn es Comprendre votre ChemStation Agilent 65 2 M thodes R sum du fonctionnement de la m thode La liste suivante montre comment se d roule le fonctionnement de la m thode lorsque toutes les parties de la Run Time Checklist sont s lectionn es 1 Commande ou macro pr analytique Effectue une t che avant que l analyse ne soit d marr e Acquisition des donn es Ex cution du programme d injecteur Injection de l chantillon Acquisition des donn es brutes Stockage des donn es Sauvegarde d une copie de la m thode avec les donn es Analyse des donn es traitement de donn es Chargement du fichier de donn es Int gration du fichier de donn es Identification et quantification de pic Recherche en biblioth que de spectres si disponible Test de la puret des pics si disponible Impression du rap

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